(57)【要約】      （修正有）【課題】安全性が高く、原料が容易に入手可能であり、優れた抗菌活性を有する、植物由来の新規な抗菌剤の提供。前記抗菌剤を用いた効果的な抗菌方法の提供。【解決手段】栗皮抽出物を有効成分として含む抗菌剤。前記抗菌剤を含む化粧料。前記栗皮抽出物は、黄色ブドウ球菌に対する抗菌活性を有し、栗皮を、水及び親水性溶媒からなる群から選ばれる少なくとも１種を含む抽出溶媒中にて抽出して得られる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
栗皮抽出物を有効成分として含む、抗菌剤。
【請求項２】
前記栗皮抽出物は、栗皮を、水および親水性溶媒からなる群から選ばれる少なくとも１種を含む抽出溶媒中にて抽出して得られる、請求項１に記載の抗菌剤。
【請求項３】
黄色ブドウ球菌に対する抗菌活性を有する、請求項１または２に記載の抗菌剤。
【請求項４】
請求項１から３までのいずれかに記載の抗菌剤を含む、化粧料。
【請求項５】
抗菌剤を用いた抗菌方法であって、
抗菌すべき対象物に、栗皮抽出物を有効成分として含む抗菌剤を添加する、
抗菌方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌剤、化粧料、および抗菌方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
製品に混入した微生物が原因となって発生する該製品の腐敗や変質等を防止するため、抗菌剤が広く用いられている。
【０００３】
従来汎用されている抗菌剤の代表的なものとしては、フェノキシエタノール、安息香酸（塩）、サリチル酸（塩）、ソルビン酸（塩）、デヒドロ酢酸（塩）、プロピオン酸（塩）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、クレゾール、クロロブタノール、チモール、パラオキシ安息香酸エステル、フェノール、ベンジルアルコール、パラクロルメタクレゾール、ヘキサクロロフェン、ジフェニルオルトフェニルフェノール、チアベンダゾールなどが挙げられる。
【０００４】
しかしながら、例えば、化粧品、医薬品、食品等の分野においては、製品が生体に直接に接触したり、製品が生体に摂取されたりするため、生体の安全性を確保できる抗菌剤が求められている。上述した従来汎用されている抗菌剤の多くは、本質的に皮膚や全身性のアレルギーを引き起こすアレルゲンであり、使用者の体質によってはアレルギーや接触皮膚炎を発症する可能性がある。また、上述した従来汎用されている抗菌剤のほとんどは合成品であり、反応性の高い刺激物質が不純物として残存している可能性もある。
【０００５】
そこで、最近、生体の安全性を確保できる抗菌剤として、植物由来の抗菌剤がいくつか報告されている（例えば、特許文献１〜４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００５−３３６１０９号公報
【特許文献２】特開２００６−２６５１１８号公報
【特許文献３】特開２００８−２６６１４８号公報
【特許文献４】特開２０１７−０７１５８７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本出願人は、植物由来の抗菌剤について、安全性が高く、原料が容易に入手可能であり、優れた抗菌活性を有するものがないか、検討を重ねた。その結果、栗皮抽出物が優れた抗菌活性を有することを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００８】
本発明の課題は、安全性が高く、原料が容易に入手可能であり、優れた抗菌活性を有する、植物由来の新規な抗菌剤を提供することにある。本発明の課題は、また、そのような抗菌剤を用いた効果的な抗菌方法を提供することにある。本発明の課題は、また、そのような抗菌剤を含む化粧料を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の抗菌剤は、栗皮抽出物を有効成分として含む。
【００１０】
一つの実施形態においては、上記栗皮抽出物は、栗皮を、水および親水性溶媒からなる群から選ばれる少なくとも１種を含む抽出溶媒中にて抽出して得られる。
【００１１】
一つの実施形態においては、本発明の抗菌剤は、黄色ブドウ球菌に対する抗菌活性を有する。
【００１２】
本発明の化粧料は、本発明の抗菌剤を含む。
【００１３】
本発明の抗菌方法は、抗菌剤を用いた抗菌方法であって、抗菌すべき対象物に、栗皮抽出物を有効成分として含む抗菌剤を添加する。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、安全性が高く、原料が容易に入手可能であり、優れた抗菌活性を有する、植物由来の新規な抗菌剤を提供することができる。また、そのような抗菌剤を用いた効果的な抗菌方法を提供することができる。また、そのような抗菌剤を含む化粧料を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本明細書中で「質量」との表現がある場合は、従来一般に重さの単位として慣用されている「重量」と読み替えてもよく、逆に、本明細書中で「重量」との表現がある場合は、重さを示すＳＩ系単位として慣用されている「質量」と読み替えてもよい。
【００１６】
以下において記載する本発明の個々の好ましい形態を２つ以上組み合わせたものも、また、本発明の好ましい形態である。
【００１７】
≪１．本発明の抗菌剤および本発明の抗菌方法≫
本発明の抗菌剤は、栗皮抽出物を有効成分として含む。
【００１８】
本発明の抗菌剤は抗菌性能を有する剤である。抗菌性能とは、代表的には、殺菌（微生物を殺す）、静菌（微生物の繁殖を抑える）、滅菌、消毒、制菌、除菌、防腐、防カビ等の性能を有することをいい、対象となる微生物は、代表的には、細菌、真菌である。
【００１９】
細菌としては、代表的には、大腸菌、緑膿菌、サルモネラ菌、モラクセラ菌、レジオネラ菌等のグラム陰性菌；黄色ブドウ球菌、クロストリジウム属細菌等のグラム陽性菌；などが挙げられる。真菌としては、代表的には、カンジダ菌、ロドトルラ、パン酵母等の酵母類；赤カビ、黒カビ等のカビ類；などが挙げられる。
【００２０】
本発明の抗菌剤は、特に、黄色ブドウ球菌に対する抗菌活性を有する。
【００２１】
有効成分とは、目的とする機能が発揮される程度に栗皮抽出物を含むことを意味する。すなわち、本発明の抗菌剤は、栗皮抽出物を、本発明の効果を発揮できるような量で含む。このような栗皮抽出物の量は、本発明の抗菌剤の使用目的、使用形態、剤型など、様々な因子によって、任意の適切な量が採用される。代表的には、本発明の抗菌剤中の栗皮抽出物の含有割合は、好ましくは０．００１質量％〜１００質量％であり、より好ましくは０．００３質量％〜７５質量％であり、さらに好ましくは０．００５質量％〜５０質量％であり、特に好ましくは０．００７質量％〜２５質量％であり、最も好ましくは０．０１質量％〜１０質量％である。本発明の抗菌剤中の栗皮抽出物の含有割合が少なすぎると抗菌性が十分に発現できないおそれがあり、本発明の抗菌剤中の栗皮抽出物の含有割合が多すぎると栗皮由来の着色成分が最終製剤に影響を与えるおそれがある。
【００２２】
栗皮抽出物の原料である栗の品種は、本発明の効果を損なわない範囲で、任意の適切な栗の品種を選択し得る。このような栗の品種としては、例えば、日本栗、欧州栗、中国栗、アメリカ栗などが挙げられる。
【００２３】
栗皮抽出物の原料である栗の大きさは、本発明の効果を損なわない範囲で、任意の適切な栗の大きさを選択し得る。
【００２４】
栗皮抽出物の原料である栗は、加熱、焼成、凍結、乾燥等の各種処理を適宜施したものであってもよい。
【００２５】
一般に、栗のイガを取り除いた種実は、果肉、それを包む栗の渋皮、最外皮の栗の鬼皮とからなる。本発明の抗菌剤は、栗皮（渋皮および鬼皮からなる群から選ばれる少なくとも1種）から抽出した抽出物を使用する。
【００２６】
栗皮抽出物は、本発明の効果を損なわない範囲で、任意の適切な方法によって得ることができる。好ましくは、栗皮抽出物は、栗皮を、水および親水性溶媒からなる群から選ばれる少なくとも１種を含む抽出溶媒中にて抽出して得られる。
【００２７】
栗皮抽出物を得る方法において、栗皮としては、好ましくは、栗皮を清浄水にて洗浄、乾燥した後に、粉末化したものを採用する。
【００２８】
栗皮抽出物を得る方法において、水は、例えば、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水、精製水、熱水、イオン交換水、各種水溶液（例えば、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水など）などが挙げられる。
【００２９】
水は、１種のみであってもよいし、２種以上であってもよい。
【００３０】
栗皮抽出物を得る方法において、親水性溶媒は、例えば、メタノール、エタノール、プロピレンアルコール、イソプロピルアルコール、イソブタノール、ｎ−ヘキサノール、メチルアミルアルコール、２−エチルブタノール、ｎ−オクチルアルコール等のアルコール類；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン類；グリセリン、エチレングリコール、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコール、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル、トリエチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ヘキシレングリコール等の多価アルコール類；これらの誘導体；などが挙げられる。親水性溶媒としては、好ましくは、エタノールである。
【００３１】
親水性溶媒は、１種のみであってもよいし、２種以上であってもよい。
【００３２】
使用した抽出溶媒は、回収・リサイクルすることにより、原料費の低減を行うことができる。
【００３３】
抽出溶媒は、栗皮の乾燥重量に対して、本発明の効果を損なわない範囲で、任意の適切な量を用いればよい。代表的には、１倍〜１００倍である。抽出溶媒の量が少なすぎると抽出効率が悪くなるおそれがあり、抽出溶媒の量が多すぎると過剰量の溶媒が必要となり、また希薄溶液からの濃縮が必要となるため、コストが高くなるおそれがある。
【００３４】
抽出する方法としては、本発明の効果を損なわない範囲で、任意の適切な抽出方法を採用し得る。このような抽出方法としては、例えば、室温ないし還流加熱下で任意の装置を用いて抽出することができる。具体的には、抽出溶媒を満たした処理槽に粉末化した栗皮を投入し、時々攪拌し、可溶性成分を溶出する。その後、ろ過して抽出残渣を除き、得られた抽出液を濃縮、乾燥することにより、有効成分を含有する抽出物を得ることができる。抽出は、常圧下、加圧下、減圧下のいずれか、もしくはこれらを組み合わせて行ってもよい。
【００３５】
抽出時間および抽出温度は、本発明の効果を損なわない範囲で、任意の適切な時間を採用し得る。このような抽出時間および抽出温度としては、例えば、抽出溶媒として水を用いた場合、通常、２０℃〜１００℃で３０分〜２０時間である。抽出溶媒としてエタノールを用いた場合、通常、２０℃〜８０℃で３０分〜２０時間である。抽出回数は単回でもよく、収率を上げるために複数回であってもよい。
【００３６】
抽出によって得られる抽出液の濃縮は、常法によって行えばよく、例えば、抽出液が少量の場合はエバポレーターを、大量の場合は医薬品製造等に用いられる大型の温浴釜等を用いて行うことができる。また、抽出液の乾燥を行う場合は、常法により行えばよく、例えば凍結乾燥等により行うことができる。
【００３７】
得られる栗皮抽出物は、抽出溶媒が安全性の高いものであれば、そのままで本発明の抗菌剤として用いることができる。また、必要に応じて、脱臭、脱色、活性向上等を目的として、常法により精製することもできる。このような精製方法としては、例えば、各種クロマトグラフィー、イオン交換、膜分離等の分離精製等が挙げられる。
【００３８】
このようにして得られた栗皮抽出物は、そのままでも本発明の抗菌剤として利用可能であるが、必要に応じて、他の活性物質、成形助剤、増量剤、賦形剤、結合剤などの添加剤と共に、常法に従って、液状剤、粉末剤、錠剤又はマイクロカプセル等の任意の剤形とすることができる。
【００３９】
本発明の抗菌剤は、本発明の効果を損なわない範囲で、任意の適切な他の抗菌性物質を含んでいてもよい。
【００４０】
このような抗菌性物質としては、例えば、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン等のヒドロキシ安息香酸およびその塩若しくはそのエステル；サリチル酸；安息香酸ナトリウム；フェノキシエタノール；１，２−ペンタンジオール、１，２−ヘキサンジオール等の１，２−ジオール；メチルクロロイソチアゾリノン、メチルイソチアゾリノン等のイソチアゾリンオン誘導体；イミダゾリニウムウレア；デヒドロ酢酸およびその塩；フェノール類；トリクロサン等のハロゲン化ビスフェノール類、酸アミド類、四級アンモニウム塩類；トリクロロカルバニド、ジンクピリチオン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ソルビン酸、クロルヘキシジン、グルコン酸クロルヘキシジン、ハロカルバン、ヘキサクロロフェン、ヒノキチオール；フェノール、イソプロピルフェノール、クレゾール、チモール、パラクロロフェノール、フェニルフェノール、フェニルフェノールナトリウム等のその他フェノール類；フェニルエチルアルコール、感光素類、抗菌性ゼオライト、銀イオン；などが挙げられる。
【００４１】
本発明の抗菌方法は、抗菌剤を用いた抗菌方法であって、抗菌すべき対象物に、栗皮抽出物を有効成分として含む抗菌剤を添加する。すなわち、本発明の抗菌方法は、抗菌すべき対象物に、本発明の抗菌剤を添加することによって、抗菌効果を発現させる。
【００４２】
抗菌すべき対象物としては、通常、一般に抗菌剤が使用され得る対象物であれば、本発明の効果を損なわない範囲で、任意の適切な対象物を採用し得る。
【００４３】
≪２．本発明の抗菌剤に含まれる栗皮抽出物の他の効能≫
本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物は、抗菌活性を発現させる以外にも、多種多様な効能を発現し得る。
【００４４】
＜２−１．チロシナーゼ活性阻害効果＞
本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物は、チロシナーゼ活性阻害効果を発現し得る。チロシナーゼ活性阻害効果とは、代表的には、皮膚表層に存在するメラニン生成細胞（メラノサイト）内において、無色でメラニン前駆体のチロシンやドーパに作用し、黒色色素であるメラニンを生成する反応系を触媒するチロシナーゼ活性を阻害する効果である。メラニンが蓄積して定着すると、肌に生じるシミやソバカスの原因となる。
【００４５】
したがって、本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物を用いて、該栗皮抽出物を有効成分として含むチロシナーゼ活性阻害剤を提供することができる。
【００４６】
有効成分とは、前述と同様、目的とする機能が発揮される程度に栗皮抽出物を含むことを意味する。このような栗皮抽出物の量は、チロシナーゼ活性阻害剤の使用目的、使用形態、剤型など、様々な因子によって、任意の適切な量が採用される。代表的には、チロシナーゼ活性阻害剤中の栗皮抽出物の含有割合は、好ましくは０．００１質量％〜１００質量％であり、より好ましくは０．００３質量％〜７５質量％であり、さらに好ましくは０．００５質量％〜５０質量％であり、特に好ましくは０．００７質量％〜２５質量％であり、最も好ましくは０．０１質量％〜１０質量％である。チロシナーゼ活性阻害剤中の栗皮抽出物の含有割合が少なすぎるとチロシナーゼ活性阻害効果が十分に発現できないおそれがあり、チロシナーゼ活性阻害剤中の栗皮抽出物の含有割合が多すぎると栗皮由来の着色成分が最終製剤に影響を与えるおそれがある。
【００４７】
本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物は、そのままでもチロシナーゼ活性阻害剤として利用可能であるが、必要に応じて、他の活性物質、成形助剤、増量剤、賦形剤、結合剤などの添加剤と共に、常法に従って、液状剤、粉末剤、錠剤又はマイクロカプセル等の任意の剤形とすることができる。
【００４８】
チロシナーゼ活性阻害剤は、本発明の効果を損なわない範囲で、チロシナーゼ活性阻害剤に一般に用い得る任意の適切な他の成分を含んでいてもよい。
【００４９】
＜２−２．抗酸化効果＞
本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物は、抗酸化効果を発現し得る。抗酸化効果とは、代表的には、脂質の酸化を防止したり、鉄や銅等のような金属の酸化促進作用を不活性化させたり、また、通常の酸素分子よりも反応性の高い活性酸素およびこれに伴う過酸化脂質を制御する効果である。
【００５０】
したがって、本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物を用いて、該栗皮抽出物を有効成分として含む抗酸化剤を提供することができる。
【００５１】
有効成分とは、前述と同様、目的とする機能が発揮される程度に栗皮抽出物を含むことを意味する。このような栗皮抽出物の量は、抗酸化剤の使用目的、使用形態、剤型など、様々な因子によって、任意の適切な量が採用される。代表的には、抗酸化剤中の栗皮抽出物の含有割合は、好ましくは０．００１質量％〜１００質量％であり、より好ましくは０．００１質量％〜７５質量％であり、さらに好ましくは０．００１質量％〜５０質量％であり、特に好ましくは０．００１質量％〜２５質量％であり、最も好ましくは０．００１質量％〜１０質量％である。抗酸化剤中の栗皮抽出物の含有割合が少なすぎると抗酸化効果が十分に発現できないおそれがあり、抗酸化剤中の栗皮抽出物の含有割合が多すぎると栗皮由来の着色成分が最終製剤に影響を与えるおそれがある。
【００５２】
本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物は、そのままでも抗酸化剤として利用可能であるが、必要に応じて、他の活性物質、成形助剤、増量剤、賦形剤、結合剤などの添加剤と共に、常法に従って、液状剤、粉末剤、錠剤又はマイクロカプセル等の任意の剤形とすることができる。
【００５３】
抗酸化剤は、本発明の効果を損なわない範囲で、抗酸化剤に一般に用い得る任意の適切な他の成分を含んでいてもよい。
【００５４】
＜２−３．皮膚光沢増加効果＞
本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物は、皮膚光沢増加効果を発現し得る。皮膚光沢増加効果とは、代表的には、皮膚に塗布することによって優れた光沢を発現させる効果であり、化粧品等に有効な効果である。
【００５５】
本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物のうち、特に、エタノールによる抽出物は、非常に高い光沢効果を有し、皮膚の光沢能力が大幅に向上する。
【００５６】
したがって、本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物（特に、エタノールによる抽出物）を用いて、該栗皮抽出物を有効成分として含む皮膚光沢増加剤を提供することができる。
【００５７】
有効成分とは、前述と同様、目的とする機能が発揮される程度に栗皮抽出物を含むことを意味する。このような栗皮抽出物の量は、皮膚光沢増加剤の使用目的、使用形態、剤型など、様々な因子によって、任意の適切な量が採用される。代表的には、皮膚光沢増加剤中の栗皮抽出物の含有割合は、好ましくは０．００１質量％〜１００質量％であり、より好ましくは０．００３質量％〜７５質量％であり、さらに好ましくは０．００５質量％〜５０質量％であり、特に好ましくは０．００７質量％〜２５質量％であり、最も好ましくは０．０１質量％〜１０質量％である。皮膚光沢増加剤中の栗皮抽出物の含有割合が少なすぎると皮膚光沢増加効果が十分に発現できないおそれがあり、皮膚光沢増加剤中の栗皮抽出物の含有割合が多すぎると栗皮由来の着色成分が最終製剤に影響を与えるおそれがある。
【００５８】
本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物は、そのままでも皮膚光沢増加剤として利用可能であるが、必要に応じて、他の活性物質、成形助剤、増量剤、賦形剤、結合剤などの添加剤と共に、常法に従って、液状剤、粉末剤、錠剤又はマイクロカプセル等の任意の剤形とすることができる。
【００５９】
皮膚光沢増加剤は、本発明の効果を損なわない範囲で、化粧品等に一般に用い得る任意の適切な他の成分を含んでいてもよい。
【００６０】
＜２−４．皮膚水分量増加効果＞
本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物は、皮膚水分量増加効果を発現し得る。皮膚水分量増加効果とは、代表的には、皮膚に塗布することによって十分な皮膚水分量の維持を発現させる効果であり、化粧品等に有効な効果である。
【００６１】
本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物のうち、特に、水による抽出物は、非常に高い保湿効果を有しており、皮膚の水分保持能力が大幅に向上する。
【００６２】
したがって、本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物（特に、水による抽出物）を用いて、該栗皮抽出物を有効成分として含む皮膚水分量増加剤を提供することができる。
【００６３】
有効成分とは、前述と同様、目的とする機能が発揮される程度に栗皮抽出物を含むことを意味する。このような栗皮抽出物の量は、皮膚水分量増加剤の使用目的、使用形態、剤型など、様々な因子によって、任意の適切な量が採用される。代表的には、皮膚水分量増加剤中の栗皮抽出物の含有割合は、好ましくは０．００１質量％〜１００質量％であり、より好ましくは０．００３質量％〜７５質量％であり、さらに好ましくは０．００５質量％〜５０質量％であり、特に好ましくは０．００７質量％〜２５質量％であり、最も好ましくは０．０１質量％〜１０質量％である。皮膚水分量増加中の栗皮抽出物の含有割合が少なすぎると皮膚水分量増加効果が十分に発現できないおそれがあり、皮膚水分量増加剤中の栗皮抽出物の含有割合が多すぎると栗皮由来の着色成分が最終製剤に影響を与えるおそれがある。
【００６４】
本発明の抗菌剤に適用される上記記載の栗皮抽出物は、そのままでも皮膚水分量増加剤として利用可能であるが、必要に応じて、他の活性物質、成形助剤、増量剤、賦形剤、結合剤などの添加剤と共に、常法に従って、液状剤、粉末剤、錠剤又はマイクロカプセル等の任意の剤形とすることができる。
【００６５】
皮膚水分量増加剤は、本発明の効果を損なわない範囲で、化粧品等に一般に用い得る任意の適切な他の成分を含んでいてもよい。
【００６６】
≪３．本発明の化粧料≫
本発明の化粧料の一つの実施形態は、本発明の抗菌剤を含む。また、本発明の化粧料の別の実施形態は、本発明の抗菌剤、上記のチロシナーゼ阻害剤、皮膚光沢増加剤、および皮膚水分量増加剤からなる群から選択される少なくとも１種を含む。
【００６７】
本発明の化粧料は、慣用の化粧料基材を適宜配合し、所望の剤型とすることができる。その形態としては、任意の適切な形態を採用し得る。このような形態としては、例えば、ジェル、乳液、クリームなどの形態が挙げられる。
【００６８】
化粧料基材としては、目的とする剤型に合わせて、水、水溶性有機溶媒、油脂、ロウ、高級脂肪酸、高級アルコール、エステル類等の従来公知の化粧料基材が適宜選択される。
【００６９】
本発明の化粧料は、上記の化粧料基材以外に、化粧料で通常使用される任意の成分を添加することができる。このような任意成分の具体例としては、例えば、増粘・ゲル化剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、色素剤、金属封鎖剤、防腐剤、ｐＨ調整剤、香料、ミツロウなどが挙げられる。このような任意成分は、１種のみであってもよいし、２種以上であってもよい。
【００７０】
このような任意成分の配合割合は、その目的に応じて適宜選択して決定することができる。また、他の薬効植物抽出物等を添加してもよい。
【００７１】
本発明の化粧料としては、任意の適切な化粧料として採用し得る。このような化粧料としては、例えば、乳液、石鹸、洗顔料、入浴剤、クリーム、化粧水、オーデコロン、髭剃り用クリーム、髭剃り用ローション、化粧油、日焼け止めローション、おしろいパウダー、ファンデーション、香水、パック、爪クリーム、エナメル、エナメル除去液、眉墨、ほお紅、アイクリーム、アイシャドー、マスカラ、アイライナー、口紅、リップクリーム、シャンプー、リンス、染毛料、分散液、洗浄料などが挙げられる。
【００７２】
本発明の化粧料の製造方法としては、任意の適切な製造方法を採用し得る。このような製造方法としては、例えば、本発明の抗菌剤を配合する工程を含む製造方法、本発明の抗菌剤、上記のチロシナーゼ阻害剤、皮膚光沢増加剤、および皮膚水分量増加剤からなる群から選択される少なくとも１種を配合する工程を含む製造方法などが挙げられる。
【００７３】
本発明の化粧料中の上記栗皮抽出物の含有割合は、好ましくは０．００１質量％〜１００質量％である。
【実施例】
【００７４】
以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。なお、特に断りのない限り、「部」は「質量部」を、「％」は「質量％」を意味する。
【００７５】
〔実施例１〕
煮沸した栗から栗皮を剥皮し、外皮部分（鬼皮および渋皮の混合物）を洗浄後、乾燥し、裁断機で粉砕した。この粉末を１０ｇ取り、フラスコ内で４０ｇの水に入れ、７０℃で４時間加熱抽出した。その後、濾過により残渣と濾液を分け、濾液を噴霧乾燥することにより、０．６５ｇの粉末（１）を得た。この粉末（１）を抗菌剤（１）とした。
【００７６】
〔実施例２〕
抽出溶媒を水ではなく６０％エタノール水溶液に変更したこと以外は実施例１と同様に実施し、０．５５ｇの粉末（２）を得た。この粉末（２）を抗菌剤（２）とした。
【００７７】
＜抗菌試験（最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）試験）＞
実施例１で得られた抗菌剤（１）を含む水溶液（抗菌剤の濃度＝１質量％）、および、実施例２で得られた抗菌剤（２）を含む水溶液（抗菌剤の濃度＝１質量％）のそれぞれをミューラーヒントン培地中で２倍ずつ順次希釈していき、抽出物含有培地の希釈系列（抗菌剤の濃度＝１質量％）を調製した。その後、各抗菌剤を含有する培地をポリスチレン製９６穴プレートに５０μＬずつ添加した。次に、１８時間ミューラーヒントン寒天培地上で生育させた黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、ＮＢＲＣ−１２７３２）のコロニーをバターフィールド緩衝液に懸濁し、１０×１０８個／ｍＬ程度の菌液を調製した。調製した菌液をミューラーヒントン培地中で１０×１０６個／ｍＬ程度まで希釈し、上記で調製した希釈系列に対して５０μＬずつ添加した。３５℃にて２０時間静置後、菌が生育していない培地中の最小の抗菌剤濃度（ｐｐｍ）を最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）として決定した。菌の生育の有無は、目視にて濁度が上昇しているかによって判断した。比較対象として、化粧品用防腐剤としてよく用いられるフェノキシエタノールを用いた。
評価結果は次の３段階を基準とした。
○：１００ｐｐｍ未満
△：１００ｐｐｍ以上１０００ｐｐｍ未満
×：１０００ｐｐｍ以上
結果を表１に示した。
【００７８】
【表１】
2020138935.tif 000002
【００７９】
＜チロシナーゼ活性阻害試験＞
実施例１で得られた粉末（１）および実施例２で得られた粉末（２）のチロシナーゼ活性阻害効果を確認した。
９６穴プレートに０．２Ｍリン酸バッファー（ｐＨ７．０）を１４０μｌ、サンプルを２０μｌ、使用直前に調製した１０ｍＭ  Ｌ−ＤＯＰＡ（和光純薬（株）製）水溶液を２０μｌ加え、１０秒程度振盪して３７℃で１０分間インキュベートした。サンプルは、終濃度０．１％となるように調整した粉末（１）の水溶液または終濃度０．１％となるように調整した粉末（２）の水溶液を用いた。次に、５００μ／ｍｌに調製したチロシナーゼ水溶液（シグマアルドリッチ製）を２０μｌ加え、手早く１０秒程度撹拌し、３７℃で３０分インキュベートしたのち、プレートリーダーで４７０ｎｍの吸光度を測定した。このとき、ブランクコントロール（水）での吸光度の上昇を１００％とし、それと比較してどの程度吸光度の上昇を抑えることができたかを％で表記した。
結果を表２に示した。
【００８０】
【表２】
2020138935.tif 000003
【００８１】
上記の結果から、実施例１、２で得られた栗皮抽出物である粉末（１）、（２）は、高いチロシナーゼ活性阻害効果を発現できることがわかる。
【００８２】
＜抗酸化試験（１）：ラジカル消去能試験＞
実施例１で得られた粉末（１）および実施例２で得られた粉末（２）のそれぞれについて、ＤＰＰＨ（１，１−ｄｉｐｈｅｎｙｌ−２−ｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙｌ）を用いたラジカル消去能の測定を行った。
実施例１で得られた粉末（１）および実施例２で得られた粉末（２）のそれぞれを５０％エタノール水溶液に溶解させて各種濃度のサンプルを調製した。ＤＰＰＨは８００μＭのＤＰＰＨエタノール溶液を調製して用いた。これらを５０μｌずつ９６穴プレート中で混合し、２５℃で２０分間反応させたのち、プレートリーダーで５２０ｎｍの吸光を測定した。コントロールは２００ｍＭのＭＥＳバッファー（ｐＨ６．０）を使用した。ラジカル消去能の評価は、本条件において５０％のラジカルを消去できるのに必要なサンプルの濃度（ＩＣ５０）を測定することで行った。ＩＣ５０の値が小さいほど少ない量で効率的にラジカルを消去することができ、好ましい。
結果を表３に示した。
【００８３】
【表３】
2020138935.tif 000004
【００８４】
上記の結果から、実施例１、２で得られた栗皮抽出物である粉末（１）、（２）は、低濃度でラジカルを効率的に除去でき、例えば、公知の紫外線吸収剤と併用することで、該栗皮抽出物を有効成分として含む紫外線防止化粧料、日焼け止め防止化粧料を提供することができる。
【００８５】
＜抗酸化試験（２）：ＦＲＡＰ試験＞
実施例１で得られた粉末（１）および実施例２で得られた粉末（２）のそれぞれについて、抗酸化能をＦＲＡＰ法によりトロロックス相当量として算出した。
実施例１で得られた粉末（１）および実施例２で得られた粉末（２）のそれぞれの水溶液を純水で希釈して８０ｐｐｍ〜５ｐｐｍの希釈系列を調製した。トロロックス（富士フイルム和光純薬株式会社製）２０．０２ｍｇを１％ＤＭＳＯ水溶液に溶解し、純水で希釈して２００μＭ〜６．３μＭの希釈系列を調製した。
ＯｘｉｓｅｌｅｃｔＴＭ  ＦＲＡＰ  アッセイキット（コスモ・バイオ株式会社製）を用いて抗酸化力の評価を行った。９６穴プレートに、各濃度に調整した抽出物水溶液、トロロックス水溶液を１００μLずつ添加した。アッセイバッファーを純水で５倍希釈し、比色プローブ：塩化鉄溶液：アッセイバッファー＝１：１：８になるように混合し、反応液を作製した。それぞれのウェルに１００μLの反応液を添加混合し、１０秒間水平振盪した。１０分間室温でインキュベートし、ＯＤ５６０を測定した。
（トロロックス相当量の算出方法）
横軸に各測定物質の量、縦軸に上記ＯＤ５６０をプロットし、それぞれの一次回帰式を求めその直線の傾きを求めた。得られた測定試料での一次回帰直線の傾き（ａ２）をトロロックスでの回帰直線の傾き（ａ１）で除し、抗酸化力を算出した。
抗酸化力（ｎｍｏｌ−ＴＥ/μｇ）＝ａ２／ａ１
＝測定試料の傾き（ＯＤ５６０／（μｇ/ａｓｓａｙ））／トロロックスの傾き（ＯＤ５６０／（ｎｍｏｌ/ａｓｓａｙ））
結果を表４に示した。
【００８６】
【表４】
2020138935.tif 000005
【００８７】
上記の結果から、実施例１、２で得られた栗皮抽出物である粉末（１）、（２）は、高い抗酸化力を持つことがわかる。
【００８８】
＜Ｉｎ  ｖｉｖｏ試験（１）：皮膚光沢測定試験＞
実施例１で得られた粉末（１）および実施例２で得られた粉末（２）のそれぞれについて、１質量％濃度になるように精製水に溶解し、栗皮抽出物水溶液を調製した。
先ず、４５歳の健康な被験者１名について、前腕内側部に２塗布部、１非塗布部を設定した。塗布部および非塗布部の面積は１５ｍｍ×１５ｍｍに設定した。被験者は、温度２１±２℃、相対湿度５０±１０％の環境で１５分間過ごし、被験者の環境調整を行った。その後、グロッシーメーター（グロッシーメーターＧＬ２００（Ｃｏｕｒａｇｅ  ａｎｄ  Ｋｈａｚａｋａ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ社製、ドイツ））による測定を行った。塗布部にのみ毎日朝晩、栗皮抽出物水溶液を２０μＬずつ塗布した。試験開始前と３０日後の塗布部と非塗布部の皮膚の光沢度を各箇所３回ずつ測定した。本測定より得られた光沢度を平均して効果を評価した。
試験開始前の光沢度（Ｔ０）を１００％として、３０日後の各光沢度（＝Ｔ３０）を該Ｔ０値に対する相対値（％）で表すことにより、各光沢度を相対的に評価した。
結果を表５に示した。
【００８９】
【表５】
2020138935.tif 000006
【００９０】
上記の結果から、実施例１の粉末（１）による光沢度上昇効果または実施例２の粉末（２）による光沢度上昇効果は、各栗皮抽出物水溶液を塗布したことによる光沢度の増加分、すなわち、各栗皮抽出物水溶液による皮膚光沢効果を表している。よって、栗皮のエタノール抽出物である実施例２の粉末（２）の水溶液を塗布することにより、３０日後の光沢度量が塗布前に比べて２４％も増加することがわかる。
よって、栗皮のエタノール抽出物である実施例２の粉末（２）は、非常に高い光沢効果を有しており、皮膚の光沢能力が大幅に向上することがわかる。
【００９１】
＜Ｉｎ  ｖｉｖｏ試験（２）：皮膚水分量測定試験＞
実施例１で得られた粉末（１）および実施例２で得られた粉末（２）のそれぞれについて、１質量％濃度になるように精製水に溶解し、栗皮抽出物水溶液を調製した。
先ず、４５歳の健康な被験者１名について、前腕内側部に２塗布部、１非塗布部を設定した。塗布部および非塗布部の面積は１５ｍｍ×１５ｍｍに設定した。被験者は、温度２１±２℃、相対湿度５０±１０％の環境で１５分間過ごし、被験者の環境調整を行った。その後、コルネオメーター（コルネオメーターＣＭ８２５（Ｃｏｕｒａｇｅ  ａｎｄ  Ｋｈａｚａｋａ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ社製、ドイツ））による測定を行った。塗布部にのみ毎日朝晩、栗皮抽出物水溶液を２０μＬずつ塗布した。試験開始前と３０日後の塗布部と非塗布部の皮膚の皮膚水分量を各箇所３回ずつ測定した。本測定より得られた皮膚水分量を平均して効果を評価した。
試験開始前の皮膚水分量（Ｔ０）を１００％として、３０日後の各皮膚水分量（＝Ｔ３０）を該Ｔ０値に対する相対値（％）で表すことにより、各皮膚水分量を相対的に評価した。
結果を表６に示した。
【００９２】
【表６】
2020138935.tif 000007
【００９３】
上記の結果から、実施例１の粉末（１）による皮膚水分量増加効果または実施例２の粉末（２）による皮膚水分量増加効果は、各栗皮抽出物水溶液を塗布したことによる皮膚水分量の増加分、すなわち、各栗皮抽出物水溶液による保湿効果を表している。よって、栗皮の水抽出物である実施例１の粉末（１）の水溶液を塗布することにより、３０日後の皮膚水分量が塗布前に比べて２６％も増加することがわかる。
よって、栗皮の水抽出物である実施例１の粉末（１）は、非常に高い保湿効果を有しており、皮膚の水分保持能力が大幅に向上することがわかる。
【産業上の利用可能性】
【００９４】
本発明の抗菌剤は、化粧品、医薬品、食品等の分野において有用である。