(57)【要約】【課題】  分析物検出のためのコード化されたマイクロキャリアを提供すること【解決手段】マルチプレックスアッセイにおいて、分析物検出のためのコード化されたマイクロキャリアが本願明細書において提供されるところのものである。マイクロキャリアは、識別のためのアナログコードでコード化され、分析物検出のための捕捉剤を含有するところのものである。本願明細書において開示されているコード化されたマイクロキャリアの作製方法もまた提供されるところのものである。【選択図】図４Ｂ
2020202874.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願に対する相互参照
本願は、２０１５年６月１１日に提出された米国仮出願第６２／１７４，４０１号の優先権の利益を主張し、その全体は本明細書に参考として援用される。
【０００２】
分野
マルチプレックスアッセイにおける分析物検出のためのコード化されたマイクロキャリア、ならびに同一のマイクロキャリアを作製および使用する方法およびそれに関するキットが、本明細書において提供される。マイクロキャリアは、識別のためのアナログコードでコード化されており、そして分析物を捕捉するための捕捉剤を含有する。
【背景技術】
【０００３】
免疫学的および分子診断アッセイは、研究および臨床分野の両方において決定的な役割を果たす。しばしば、研究もしくは臨床の意思決定を促進するための有意義な結果、または結果の鳥瞰図を得るための複数の標的のパネルに関するアッセイを実施することが必要である。ゲノミクスおよびプロテオミクスの時代において、これは特に本当であり、ここでは、豊富な遺伝子マーカーおよび／またはバイオマーカーは、特定の疾患状態に影響を及ぼすか、またはその前兆となると考えられている。理論的には、複数標的のアッセイは、それぞれの標的を異なる反応容器において並行して別々に、または連続して試験することによって達成され得る（すなわち、複数のシングルプレックス（ｓｉｎｇｌｅｐｌｅｘｉｎｇ））。しかしながら、シングルプレックスストラテジーを取り入れるアッセイはしばしば扱いにくいだけでなく、特に分析されるべき標的の数が多いとき、それらは一般的に大きなサンプル体積もまた必要とする。
【０００４】
マルチプレックスアッセイは、複数の分析物（２つまたはそれより多い）を単一のアッセイで同時に測定する。マルチプレックスアッセイは、一般的にハイスループットスクリーニング環境において使用され、そこでは、多くの検体が一度に分析され得る。マルチプレックスアッセイの特質およびそのようなアッセイが薬物発見から臨床的診断に対する機能的なゲノミクスまでの範囲の分野において強力な手段になった理由は、多くの分析物を同時に分析し、多くの検体を並行して分析する能力である。シングルプレックスと対照的に、同一の反応容器内で全ての標的を組み合わせることによって、１サンプル当たり１つの反応容器を扱うだけであることにより、アッセイはより一層扱いにくさが少なくなり、より一層実施しやすくなる。したがって、必要とされる試験サンプルは、体積が劇的に減少され得、サンプル（例えば、腫瘍組織、脳脊髄液、または骨髄）を大量に回収することが困難および／または侵襲性である場合、それは特に重要である。同様に重要なことは、試薬費用は減少され得、アッセイスループットが劇的に増加されるという事実である。
【０００５】
複雑な巨大分子サンプルの多くのアッセイは、２つの工程から構成される。第一の工程において、標的巨大分子を特異的に捕捉できる試薬が、固相表面に付着される。これらの固定された分子は、（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡを基にしたアッセイにおける）ハイブリダイゼーションまたは（イムノアッセイにおける）抗原抗体相互作用などの種々の方法によって、複雑なサンプルからの標的巨大分子を捕捉するために使用され得る。第二の工程において、検出分子は、捕捉分子および標的の複合体と共にインキュベートされ、そして結合し、蛍光または他の電磁的シグナルなどのシグナルを放射する。標的の量は、次いでそれらのシグナルの強度によって定量される。
【０００６】
マルチプレックスアッセイは、それぞれ異なる標的巨大分子に特異的な複数の捕捉剤を
利用することによって実行され得る。チップベースアレイ（ｃｈｉｐ−ｂａｓｅｄ  ａｒｒａｙ）マルチプレックスアッセイにおいて、それぞれのタイプの捕捉剤は、チップ上の所定の位置に付着される。複雑なサンプル中の多重標的の量は、捕捉剤のタイプと対応するそれぞれの位置における検出分子のシグナルを測定することによって決定される。サスペンションアレイマルチプレックスアッセイにおいて、マイクロ粒子またはマイクロキャリアはアッセイ溶液に懸濁される。これらのマイクロ粒子またはマイクロキャリアは、埋め込まれ、プリントされ、またはそうでなければマイクロ粒子／マイクロキャリアの１つまたはそれより多い要素によって生成され得る識別要素を含有する。それぞれのタイプの捕捉剤は、同一のＩＤを伴う粒子に固定され、特定のＩＤを伴う粒子の表面上の検出分子から放射されるシグナルは対応する標的の量を反映する。
【０００７】
サスペンションアレイマルチプレックスアッセイに関して存在するシステムは、分解能が限定される。いくつかのマルチプレックスシステムは、標準的な半導体製造技術を使用して平坦なマイクロビーズ上に印刷されたデジタルバーコードを使用する。しかしながら、特定の数のディジットによって生成され得る識別子の数は、限定される。固有の識別子の数を増加させることは、バーコードのディジット数の増加を必要とし、したがってすでにとても小さいマイクロビーズ上に印刷するためにより大きな空間を必要とする。別のタイプのマルチプレックスシステムは、固有の蛍光色素でコード化された蛍光ビーズなどの色コーディングを使用する。しかしながら、そのような蛍光システムに利用可能な固有の識別子の数は、励起／放射スペクトルの重複により限定され、識別エラーが、例えば、蛍光色素におけるバッチ間変動から起こり得る。
【０００８】
それゆえ、アナログコード化マルチプレックスシステム、例えば、デジタルバーコードの大きさまたはフルオロフォア分解能などの制限によって抑制されないものについての必要性が存在する。そのようなシステムは、ほとんど無制限の固有の識別子を可能にし、アナログコードの使用による（例えば、重複スペクトルまたはバッチ間蛍光変動からの）認識エラーを最小にする。
【０００９】
本明細書に挙げられた全ての刊行物、特許、および特許出願は、全ての目的のためにその全体が参考として本明細書に援用される。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
概要
この必要性を満たすために、特に、アナログコードでコード化された、分析物を捕捉するための捕捉剤を含有するマイクロキャリアが、本明細書において提供される。これらのマイクロキャリアは、例えば、それぞれのマイクロキャリアが特異的な分析物を捕捉するための捕捉剤および識別のためのアナログコードを含有するマルチプレックスアッセイにおいて使用され得る。そのようなマイクロキャリアの作製および使用方法ならびにそれに関するキットが、さらに提供される。
【００１１】
したがって、一つの局面において、コード化されたマイクロキャリアであって：  （ａ）第一の表面および第二の表面を有する実質的に透明なポリマー層であって、該第一および該第二の表面は互いに平行である、層；  （ｂ）実質的に不透明なポリマー層であって、該実質的に不透明なポリマー層は、該実質的に透明なポリマー層の該第一の表面に貼り付けられており、該実質的に透明なポリマー層の中心部分を囲み、該実質的に不透明なポリマー層はアナログコードを表す二次元形状を含む、層；ならびに（ｃ）分析物を捕捉するための捕捉剤であって、該捕捉剤は該実質的に透明なポリマー層の少なくとも該中心部分において該実質的に透明なポリマー層の該第一の表面および該第二の表面のうちの少なくとも１つに連結されている、捕捉剤を含む、マイクロキャリアが本明細書において提供さ
れる。
【００１２】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、（ｄ）前記実質的に不透明なポリマー層と前記実質的に透明なポリマー層の前記中心部分との間の、該実質的に透明なポリマー層の該中心部分を囲む、磁性の実質的に不透明な層であって、該磁性の実質的に不透明な層は該実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面または前記第二の表面に貼り付けられている、層をさらに含む。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、（ｅ）第一の実質的に透明なポリマー層と整列している第二の実質的に透明なポリマー層であって、該第二の実質的に透明なポリマー層は該第一の実質的に透明なポリマー層の中心部分と整列している中心部分を有し、該第二の実質的に透明なポリマー層は該第一の実質的に透明なポリマー層の第二の表面に貼り付けられており、該第一の実質的に透明なポリマー層の二次元形状を超えて広がっていない、層；および（ｆ）前記実質的に不透明なポリマー層と前記実質的に透明なポリマー層の前記中心部分との間の、該第一の実質的に透明なポリマー層の該中心部分を囲む、磁性の実質的に不透明な層であって、該磁性の実質的に不透明な層は該第一の実質的に透明なポリマー層と該第二の実質的に透明なポリマー層との間に貼り付けられている、層をさらに含む。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、前記実質的に不透明なポリマー層の前記アナログコードを方向付けるための方向インジケーターをさらに含む。いくつかの実施形態において、前記方向インジケーターは前記磁性の実質的に不透明な層の非対称を含む。いくつかの実施形態において、前記磁性の実質的に不透明な層はニッケルを含む。いくつかの実施形態において、前記磁性の実質的に不透明な層は厚さが約５０ｎｍと約１０μｍとの間である。いくつかの実施形態において、前記磁性の実質的に不透明な層は厚さが約０．１μｍである。いくつかの実施形態において、前記実質的に不透明なポリマー層の前記二次元形状が複数の歯を含むギア形状を含み、前記アナログコードは該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の高さ、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の幅、該複数の歯における歯の数、および該複数の歯内の１つまたはそれより多い歯の配置からなる群から選択される１つまたはそれより多い性質によって表される。いくつかの実施形態において、前記複数の歯が約１μｍと約１０μｍとの間の幅である１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、前記複数の歯が約１μｍと約１０μｍとの間の高さである１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、記複数の歯が、約１μｍと約１０μｍとの間の間隔だけ離れている２つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、（ｇ）前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面から突出している１つもしくはそれより多い柱であって、該１つもしくはそれより多い柱は該第一の実質的に透明なポリマーの前記中心部分内にない、柱；および／または（ｈ）該第一の実質的に透明なポリマー層の前記第二の表面もしくは該第一の実質的に透明なポリマー層に貼り付けられていない前記第二の実質的に透明なポリマー層の表面から突出している１つもしく��それより多い柱であって、該１つもしくはそれより多い柱は該第一もしくは該第二の実質的に透明なポリマー層の該中心部分内にない、柱をさらに含む。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは実質的に円板である。いくつかの実施形態において、前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に透明なポリマー層の約５％と約９０％との間の表面領域を占める。いくつかの実施形態において、前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に透明なポリマー層の約２５％の表面領域を占める。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは直径が約２００μｍ未満である。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは直径が約５０μｍである。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは厚さが約５０μｍ未満である。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは厚さが約１０μｍである。いくつかの実施形態において、前記分析物は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、
前記分析物を捕捉するための前記捕捉剤は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、前記第一または前記第二の実質的に透明なポリマー層の実質的に透明なポリマーはエポキシを基にしたポリマーを含む。いくつかの実施形態において、前記エポキシを基にしたポリマーはＳＵ−８である。
【００１３】
別の局面において、コード化されたマイクロキャリアであって：（ａ）第一の表面および第二の表面を有する実質的に不透明なポリマー層であって、該第一の表面および該第二の表面は互いに平行であり、該実質的に不透明なポリマー層の外形はアナログコードを表す二次元形状を含む、層；ならびに（ｂ）分析物を捕捉するための捕捉剤であって、該捕捉剤は該実質的に不透明なポリマー層の少なくとも中心部分において該実質的に不透明なポリマー層の該第一の表面および該第二の表面のうちの少なくとも１つに連結されている、捕捉剤を含む、マイクロキャリアが本明細書において提供される。
【００１４】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、（ｃ）前記実質的に不透明なポリマー層の前記第一の表面および／または前記第二の表面から突出している１つまたはそれより多い柱であって、該１つまたはそれより多い柱は磁性材料を含む、柱をさらに含む。
いくつかの実施形態において、前記１つまたはそれより多い柱は約１μｍと約１０μｍとの間の高さである。いくつかの実施形態において、前記１つまたはそれより多い柱は直径が約１μｍと約１０μｍとの間である。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、（ｄ）前記実質的に不透明なポリマー層の前記第二の表面に貼り付けられている磁性材料を含む磁性層であって、該磁性層は該実質的に不透明なポリマー層の前記中心部分を超えて広がっておらず、前記捕捉剤は該実質的に不透明なポリマー層の少なくとも前記第一の表面に連結されている、磁性層をさらに含む。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、（ｅ）前記第一の実質的に不透明なポリマー層と整列している第二の実質的に不透明なポリマー層であって、該第二の実質的に不透明なポリマー層は前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記第二の表面に貼り付けられており、該第一の実質的に透明なポリマー層の前記外形を超えて広がっておらず、前記磁性層は該第一の実質的に透明なポリマー層と前記第二の実質的に透明なポリマー層との間に貼り付けられている、層をさらに含む。いくつかの実施形態において、前記磁性材料はニッケルを含む。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、前記実質的に不透明なポリマー層の前記アナログコードを方向付けるための方向インジケーターをさらに含む。いくつかの実施形態において、前記方向インジケーターは前記実質的に不透明なポリマー層の前記外形の非対称を含む。いくつかの実施形態において、前記実質的に不透明なポリマー層の前記外形は複数の歯を含む二次元ギア形状を含み、前記アナログコードは、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の高さ、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の幅、該複数の歯における歯の数、および該複数の歯内の１つまたはそれより多い歯の配置からなる群から選択される１つまたはそれより多い性質によって表される。いくつかの実施形態において、前記複数の歯は、約１μｍと約１０μｍとの間の幅である１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、前記複数の歯は、約１μｍと約１０μｍとの間の高さである１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、前記複数の歯が、約１μｍと約１０μｍとの間の間隔だけ離れている２つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは実質的に円板である。いくつかの実施形態において、前記第一の実質的に不透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に不透明なポリマー層の約５％と約９０％との間の表面領域を占める。いくつかの実施形態において、前記第一の実質的に不透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に不透明なポリマー層の約２５％の表面領域を占める。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは直径が約２００μｍ未満である。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは直径が約６０μｍである。いくつかの実施形態において、
前記マイクロキャリアは厚さが約５０μｍ未満である。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは厚さが約１０μｍである。いくつかの実施形態において、前記分析物は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、前記分析物を捕捉するための前記捕捉剤は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、前記実質的に不透明なポリマー層はエポキシを基にしたポリマーを含む。いくつかの実施形態において、前記実質的に不透明なポリマー層はブラックマトリクス用レジストを含む。
【００１５】
別の局面において、コード化されたマイクロキャリアを作製する方法であって：（ａ）実質的に透明なポリマー層を堆積させる工程であって、該実質的に透明なポリマー層は第一の表面および第二の表面を有し、該第一の表面および該第二の表面は互いに平行である、工程；（ｂ）該実質的に透明なポリマー層の該第一の表面上に磁性の実質的に不透明な層を堆積させる工程；（ｃ）該磁性の実質的に不透明な層をエッチングして、該実質的に透明なポリマー層の中心部分上に堆積されている該磁性の実質的に不透明な層の一部を除去する工程；（ｄ）該磁性の実質的に不透明な層上に第二の実質的に透明なポリマー層を堆積させる工程であって、該第二の実質的に透明なポリマー層は第一の表面および該第二の表面を有し、該第一の表面および該第二の表面は互いに平行であり、該第二の表面は該磁性の実質的に不透明な層に貼り付けられており、該第二の実質的に透明なポリマー層は、前記第一の実質的に透明なポリマー層と整列しており、該実質的に透明なポリマー層の該中心部分と整列している中心部分を有する、工程；ならびに（ｅ）該第二の実質的に透明なポリマー層の該第一の表面上に実質的に不透明なポリマー層を堆積させる工程であって、該実質的に不透明なポリマー層は該第一の実質的に透明なポリマー層および該第二の実質的に透明なポリマー層の該中心部分を囲み、該実質的に不透明なポリマー層はアナログコードを表す二次元形状を含む、工程を含む、方法が本明細書において提供される。
【００１６】
いくつかの実施形態において、前記磁性の実質的に不透明な層がウェットエッチングによってエッチングされている。  いくつかの実施形態において、前記磁性の実質的に不透明な層がニッケルを含む。いくつかの実施形態において、前記磁性の実質的に不透明な層は、厚さが約５０ｎｍと約１０μｍとの間である。いくつかの実施形態において、前記磁性の実質的に不透明な層は、厚さが約０．１μｍ未満である。いくつかの実施形態において、前記磁性の実質的に不透明な層は前記実質的に不透明なポリマー層の前記アナログコードを方向付けるための非対称を含む。いくつかの実施形態において、前記実質的に不透明なポリマー層の前記二次元形状がリソグラフィーによって生成される。いくつかの実施形態において、前記実質的に不透明なポリマー層の前記二次元形状は、複数の歯を含むギア形状を含み、前記アナログコードは、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の高さ、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の幅、該複数の歯における歯の数、および該複数の歯内の１つまたはそれより多い歯の配置からなる群から選択される１つまたはそれより多い性質によって表される。いくつかの実施形態において、前記複数の歯は、約１μｍと約１０μｍとの間の幅である１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、前記複数の歯は、約１μｍと約１０μｍとの間の高さである１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、前記複数の歯が、約１μｍと約１０μｍとの間の間隔だけ離れている２つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、方法は、（ｆ）工程（ａ）の前に、基材上に犠牲層を堆積させる工程；（ｇ）リソグラフィーを使用して、該犠牲層に１つまたはそれより多い柱形状の穴を作製する工程；（ｈ）該犠牲層の該１つまたはそれより多い柱形状の穴に第三の実質的に透明なポリマー層を堆積させる工程であって、前記第一の実質的に透明なポリマー層は、工程（
ａ）において、該第三の実質的に透明なポリマー層および該犠牲層の上部に堆積されている、工程；（ｉ）工程（ｅ）の後に、リソグラフィーを使用して、前記実質的に透明なポリマーを含む１つまたはそれより多い柱を、前記第二の実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面上の前記実質的に不透明なポリマー層によって覆われていない部分に堆積させる工程；（ｊ）溶媒中で該犠牲層を溶解する工程；ならびに（ｋ）該基材を除去する工程をさらに含む。いくつかの実施形態において、方法は、（ｆ）工程（ａ）の前に、基材上に犠牲層を堆積させる工程；（ｇ）工程（ａ）の一環として、該犠牲層上に前記実質的に透明なポリマー層を堆積させる工程；（ｈ）工程（ｅ）の後に、溶媒中で該犠牲層を溶解する工程；および（ｉ）該基材を除去する工程をさらに含む。いくつかの実施形態において、前記コード化されたマイクロキャリアは実質的に円板である。いくつかの実施形態において、前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に透明なポリマー層の約５％と約９０％との間の表面領域を占める。いくつかの実施形態において、前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に透明なポリマー層の約２５％の表面領域を占める。いくつかの実施形態において、前記コード化されたマイクロキャリアは直径が約２００μｍ未満である。いくつかの実施形態において、前記コード化されたマイクロキャリアは直径が約５０μｍである。いくつかの実施形態において、前記コード化されたマイクロキャリアは厚さが約５０μｍ未満である。いくつかの実施形態において、前記コード化されたマイクロキャリアは厚さが約１０μｍである。いくつかの実施形態において、方法は、（ｆ）分析物を捕捉するための捕捉剤を、前記第二の実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面および前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記第二の表面のうちの少なくとも１つと、少なくとも前記中心部分において連結する工程をさらに含む。いくつかの実施形態において、前記第一の実質的に透明なポリマー層または前記第二の実質的に透明なポリマー層の前記実質的に透明なポリマーがエポキシドを含み、前記捕捉剤を連結する工程は：（ｉ）該第一の実質的に透明なポリマー層および／または該第二の実質的に透明なポリマー層の該実質的に透明なポリマーを光酸ジェネレータおよび光と反応させ、架橋されたポリマーを生成する工程であって、該光は該光酸ジェネレータを活性化する波長の光である、工程；（ｉｉ）該架橋されたポリマーの該エポキシドをアミンおよびカルボキシルを含む化合物と反応させる工程であって、該化合物の該アミンは該エポキシドと反応し、化合物が連結された、架橋されたポリマーを形成する、工程；ならびに（ｉｉｉ）該化合物が連結された、架橋されたポリマーの該カルボキシルを、該捕捉剤と反応させ、該捕捉剤を、該第二の実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面および該第一の実質的に透明なポリマー層の前記第二の表面のうちの少なくとも１つに、少なくとも前記中心部分において連結する工程を含む。いくつかの実施形態において、前記化合物が連結された、架橋されたポリマーの前記カルボキシルが、前記捕捉剤の第一級アミン���反応する。いくつかの実施形態において、前記第一の実質的に透明なポリマー層および／または前記第二の実質的に透明なポリマー層の前記実質的に透明なポリマーはＳＵ−８を含む。いくつかの実施形態において、前記分析物は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、前記分析物を捕捉するための前記捕捉剤は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される。
【００１７】
別の局面において、上記の実施形態のいずれかの方法によって生成されたコード化されたマイクロキャリアが本明細書中に提供される。
【００１８】
別の局面において、コード化されたマイクロキャリアを作製する方法であって：（ａ）基材上に犠牲層を堆積させる工程；（ｂ）該犠牲層上に、外形、第一の表面、および第二
の表面を有する実質的に不透明なポリマー層を堆積させる工程であって、該第一の表面および該第二の表面は互いに平行であり、該第二の表面は該犠牲層に貼り付けられる、工程；（ｃ）リソグラフィーによって、該実質的に不透明なポリマー層の該外形を形成する工程であって、該外形はアナログコードを表す二次元形状に形成される、工程；（ｄ）溶媒中で犠牲ポリマー層を溶解する工程；ならびに（ｅ）該基材を除去する工程を含む、方法が本明細書中に提供される。別の局面において、コード化されたマイクロキャリアを作製する方法であって：（ａ）基材上に犠牲層を堆積させる工程；（ｂ）該犠牲層上に磁性材料を含む磁性層を堆積させる工程；（ｃ）該磁性層上に、外形、第一の表面、および第二の表面を有する実質的に不透明なポリマー層を堆積させる工程であって、該第一の表面および該第二の表面は互いに平行であり、該第二の表面は該磁性層に貼り付けられる、工程；（ｄ）リソグラフィーによって、該実質的に不透明なポリマー層の該外形を形成する工程であって、該外形はアナログコードを表す二次元形状に形成される、工程；（ｅ）溶媒中で犠牲ポリマー層を溶解する工程；ならびに（ｆ）該基材を除去する工程を含む、方法が本明細書中に提供される。
【００１９】
いくつかの実施形態において、方法は、（ｇ）工程（ｂ）の後かつ工程（ｃ）の前に、リソグラフィーによって前記磁性層を形成する工程をさらに含む。いくつかの実施形態において、前記磁性材料はニッケルを含む。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは前記実質的に不透明なポリマー層の前記アナログコードを方向付けるための方向インジケーターを含む。いくつかの実施形態において、前記方向インジケーターは前記実質的に不透明なポリマー層の前記外形の非対称を含む。いくつかの実施形態において、前記実質的に不透明なポリマー層の前記二次元形状は、複数の歯を含むギア形状を含み、前記アナログコードは、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の高さ、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の幅、該複数の歯における歯の数、および該複数の歯内の１つまたはそれより多い歯の配置からなる群から選択される１つまたはそれより多い性質によって表される。いくつかの実施形態において、前記複数の歯が、約１μｍと約１０μｍとの間の幅である１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、前記複数の歯が、約１μｍと約１０μｍとの間の高さである１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、前記複数の歯が、約１μｍと約１０μｍとの間の間隔だけ離れている２つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは実質的に円板である。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは直径が約２００μｍ未満である。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは直径が約６０μｍである。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは厚さが約３０μｍ未満である。いくつかの実施形態において、前記マイクロキャリアは厚さが約１０μｍである。いくつかの実施形態において、方法は、（ｈ）分析物を捕捉するための捕捉剤を、前記実質的に不透明なポリマー層の前記第一の表面および前記第二の表面のうちの少なくとも１つに連結する工程をさらに含む。いくつかの実施形態において、前記実質的に不透明なポリマー層の前記実質的に不透明なポリマーはエポキシドを含み、前記捕捉剤を連結する工程は：（ｉ）該実質的に不透明なポリマー層の該実質的に不透明なポリマーを光酸ジェネレータおよび光と反応させ、架橋されたポリマーを生成する工程であって、該光は該光酸ジェネレータを活性化する波長の光である、工程；ならびに
（ｉｉ）該架橋されたポリマーの該エポキシドを、アミンおよびカルボキシルを含む化合物と反応させる工程であって、該化合物の該アミンは該エポキシドと反応し、化合物が連結された、架橋されたポリマーを形成する、工程；ならびに（ｉｉｉ）該化合物が連結された、架橋されたポリマーの該カルボキシルを該捕捉剤と反応させ、該捕捉剤を、前記第二の実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面および前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記第二の表面のうちの少なくとも１つに、少なくとも前記中心部分において連結する工程を含む。いくつかの実施形態において、前記分析物は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内
小器官および抗体断片からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、前記分析物を捕捉するための前記捕捉剤は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される。
【００２０】
別の局面において、上記実施形態のいずれかの方法によって生成された、コード化されたマイクロキャリアが本明細書中に提供される。
【００２１】
別の局面において、溶液中の２つまたはそれより多い分析物を検出するための方法であって：  （ａ）第一の分析物および第二の分析物を含む溶液を複数のマイクロキャリアと接触させる工程であって、該複数のマイクロキャリアは：（ｉ）該第一の分析物を特異的に捕捉する上記実施形態のいずれか１つの第一のマイクロキャリアであって、該第一のマイクロキャリアは第一のアナログコードでコード化されている、マイクロキャリア；ならびに（ｉｉ）該第二の分析物を特異的に捕捉する上記実施形態のいずれか１つの第二のマイクロキャリアであって、該第二のマイクロキャリアは第二のアナログコードでコード化されており、該第二のアナログコードは該第一のアナログコードと異なる、マイクロキャリア；を少なくとも含む、工程；（ｂ）該第一のアナログコードおよび該第二のアナログコードを、アナログ形状認識を使用して解読し、該第一のマイクロキャリアおよび該第二のマイクロキャリアを識別する工程；ならびに（ｃ）該第一のマイクロキャリアに結合した該第一の分析物の量および該第二のマイクロキャリアに結合した該第二の分析物の量を検出する工程を含む、方法が本明細書中に提供される。
【００２２】
いくつかの実施形態において、工程（ｂ）が工程（ｃ）の前に起こる。いくつかの実施形態において、工程（ｃ）が工程（ｂ）の前に起こる。いくつかの実施形態において、工程（ｂ）が工程（ｃ）と同時に起こる。いくつかの実施形態において、前記第一のアナログコードおよび前記第二のアナログコードを解読する工程が：（ｉ）前記第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアを、該第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアの実質的に透明な部分ならびに／または周囲の溶液に光を通過させることによって照射する工程であって、該光は、該第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアの実質的に不透明な部分を通過し、該第一のマイクロキャリアに対応する第一のアナログコード化光パターンおよび該第二のマイクロキャリアに対応する第二のアナログコード化光パターンを生成できない、工程；（ｉｉ）該第一のアナログコード化光パターンをイメージングし、第一のアナログコード化画像を生成する工程および該第二のアナログコード化光パターンをイメージングし、第二のアナログコード化画像を生成する工程；ならびに（ｉｉｉ）アナログ形状認識を使用して、該第一のアナログコード化画像を該第一のアナログコードと一致させ、該第二のアナログコード化画像を該第二のアナログコードと一致させる工程を含む。いくつかの実施形態において、前記第一のマイクロキャリアに結合した前記第一の分析物の量および前記第二のマイクロキャリアに結合した前記第二の分析物の量を検出する工程は：（ｉ）工程（ａ）の後に、該第一のマイクロキャリアおよび該第二のマイクロキャリアを検出剤とともにインキュベートする工程であって、該検出剤は、該第一のマイクロキャリアによって捕捉された該第一の分析物および該第二のマイクロキャリアによって捕捉された該第二の分析物に結合する、工程；ならびに（ｉｉ）該第一のマイクロキャリアおよび該第二のマイクロキャリアに結合した検出剤の量を測定する工程を含む。いくつかの実施形態において、前記検出剤は蛍光性検出剤であり、前記第一のマイクロキャリアおよび前記第二のマイクロキャリアに結合した検出剤の量は蛍光顕微鏡によって測定される。いくつかの実施形態において、前記検出剤は発光性検出剤であり、前記第一のマイクロキャリアおよび前記第二のマイクロキャリアに結合した検出剤の量は発光顕微鏡によって測定される。いくつかの実施形態において、前記溶液は生物学的サンプルを含む。いくつかの実施形態において、前記生物学的サンプルは、血液、尿、
痰、胆汁、脳脊髄液、皮膚または脂肪組織の間質液、唾液、涙、気管支肺胞洗浄、口腔咽頭分泌物、腸液、経膣部または子宮分泌物および精液からなる群から選択される。
【００２３】
別の局面において、複数のマイクロキャリアを含むキットまたは製造品であって、該複数のマイクロキャリアは：（ａ）第一の分析物を特異的に捕捉する上記実施形態のいずれか１つの第一のマイクロキャリアであって、該第一のマイクロキャリアは第一のアナログコードでコード化されている、マイクロキャリア；ならびに（ｂ）第二の分析物を特異的に捕捉する上記実施形態のいずれかの第二のマイクロキャリアであって、該第二のマイクロキャリアは第二のアナログコードでコード化されており、該第二のアナログコードは該第一のアナログコードと異なる、マイクロキャリア；を少なくとも含む、キットが本明細書中に提供される。
【００２４】
いくつかの実施形態において、キットまたは製造品は、前記第一のマイクロキャリアに結合した前記第一の分析物の量および前記第二のマイクロキャリアに結合した前記第二の分析物の量を検出するための検出剤をさらに含む。いくつかの実施形態において、キットまたは製造品は、前記キットを使用して、前記第一の分析物および前記第二の分析物を検出するための説明書をさらに含む。
【００２５】
本明細書において記載された種々の実施形態の１つ、いくつか、または全ての特性は、本発明の他の実施形態を形成するために組み合わされ得ることは理解されるべきである。本発明のこれらの局面および他の局面は、当業者に対して明らかになる。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１ＡＢ】図１Ａおよび１Ｂは、例示的マイクロキャリアの２つの視図を示す。
【００２７】
【図１ＣＤ】図１Ｃおよび１Ｄは、例示的マイクロキャリアを使用する分析物検出のための例示的アッセイを示す。
【００２８】
【図２】図２Ａおよび２Ｂは、例示的マイクロキャリアの２つの視図を示す。
【００２９】
【図３】図３は、固有のアナログコードを生成するための複数の形状変動点を含有する例示的なアナログコード化スキームを示す。
【００３０】
【図４Ａ】図４Ａは、それぞれが固有のアナログコードを有するマイクロキャリアの３つの例を示す。
【００３１】
【図４Ｂ】図４Ｂは、いくつかの実施形態と一致する、固有のアナログコードを伴うマイクロキャリアの例を示す。
【００３２】
【図５】図５Ａおよび５Ｂは、例示的マイクロキャリアの２つの視図を示す。
【００３３】
【図６ＡＢ】図６Ａおよび６Ｂは、例示的マイクロキャリアの２つの視図を示す。
【００３４】
【図６Ｃ】図６Ｃは、例示的アナログコードの寸法を示す。寸法はμｍ単位に基づく。
【００３５】
【図７】図７は、例示的マイクロキャリアを示す。
【００３６】
【図８Ａ】図８Ａは、方向インジケーターとしての非対称開始位置を含有する例示的マイクロキャリアを示す。
【００３７】
【図８Ｂ】図８Ｂは、固有のアナログコードを生成するための複数の形状変動点を含有する例示的なアナログコード化スキームを示す。
【００３８】
【図９】図９Ａ〜９Ｃは、例示的マイクロキャリアの２つの視図（図９Ａおよび図９Ｂ）に加えて必要に応じた特徴の描写（図９Ｃ）を示す。
【００３９】
【図１０】図１０は、例示的マイクロキャリアを生成する方法を示す。
【００４０】
【図１１Ａ】図１１Ａおよび１１Ｂは、例示的マイクロキャリアを生成する方法を示す。
【図１１Ｂ】図１１Ａおよび１１Ｂは、例示的マイクロキャリアを生成する方法を示す。
【００４１】
【図１２Ａ】図１２Ａ〜１２Ｅは、例示的マイクロキャリアを生成する方法を示す。
【図１２Ｂ】図１２Ａ〜１２Ｅは、例示的マイクロキャリアを生成する方法を示す。
【図１２Ｃ】図１２Ａ〜１２Ｅは、例示的マイクロキャリアを生成する方法を示す。
【図１２Ｄ】図１２Ａ〜１２Ｅは、例示的マイクロキャリアを生成する方法を示す。
【図１２Ｅ】図１２Ａ〜１２Ｅは、例示的マイクロキャリアを生成する方法を示す。
【００４２】
【図１３Ａ】図１３Ａ〜１３Ｃは、例示的マイクロキャリアを生成する方法を示す。
【図１３Ｂ】図１３Ａ〜１３Ｃは、例示的マイクロキャリアを生成する方法を示す。
【図１３Ｃ】図１３Ａ〜１３Ｃは、例示的マイクロキャリアを生成する方法を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
詳細な説明
一局面において、マルチプレックスアッセイにおける分析物検出のためのコード化されたマイクロキャリアが、本明細書において提供される。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、（ａ）第一の表面および第二の表面を有する実質的に透明なポリマー層であって、第一の表面および第二の表面は互いに平行である、層；（ｂ）実質的に不透明なポリマー層であって、そこで、実質的に不透明なポリマー層は実質的に透明なポリマー層の第一の表面に貼り付けられており、そして実質的に透明なポリマー層の中心部分を囲み、そこで、実質的に不透明なポリマー層はアナログコードを表す二次元形状を含む、層；ならびに（ｃ）分析物を捕捉するための捕捉剤であって、そこで、捕捉剤は実質的に透明なポリマー層の少なくとも中心部分において実質的に透明なポリマー層の第一の表面および第二の表面のうちの少なくとも１つに連結されている、捕捉剤を含有する。他の実施形態において、マイクロキャリアは、（ａ）第一の表面および第二の表面を有する実質的に不透明なポリマー層であって、第一の表面および第二の表面は互いに平行であり、実質的に不透明なポリマー層の外形はアナログコードを表す二次元形状を含む、層；ならびに（ｂ）分析物を捕捉するための捕捉剤であって、捕捉剤は実質的に不透明なポリマー層の少なくとも中心部分において実質的に不透明なポリマー層の第一の表面および第二の表面のうちの少なくとも１つに連結されている、捕捉剤を含有する。
【００４４】
別の実施形態において、コード化されたマイクロキャリアを作製する方法が、本明細書において提供される。いくつかの実施形態において、方法は、（ａ）実質的に透明なポリマー層を堆積させる工程であって、実質的に透明なポリマー層は第一の表面および第二の表面を有し、第一の表面および第二の表面は互いに平行である、工程；（ｂ）実質的に透明なポリマー層の第一の表面上に磁性の実質的に不透明な層を堆積させる工程；（ｃ）磁性の実質的に不透明な層をエッチングして、実質的に透明なポリマー層の中心部分上に堆積されている磁性の実質的に不透明な層の一部を除去する工程；（ｄ）磁性の実質的に不透明な層上に第二の実質的に透明なポリマー層を堆積させる工程であって、そこで、第二の実質的に透明なポリマー層は第一の表面および第二の表面を有し、第一の表面および第
二の表面は互いに平行であり、そこで、第二の表面は磁性の実質的に不透明な層に貼り付けられ、そこで、第二の実質的に透明なポリマー層は、第一の実質的に透明なポリマー層と整列し、そして実質的に透明なポリマー層の中心部分と整列している中心部分を有する、工程；ならびに（ｅ）第二の実質的に透明なポリマー層の第一の表面上に実質的に不透明なポリマー層を堆積させる工程であって、そこで、実質的に不透明なポリマー層は第一の実質的に透明なポリマー層および第二の実質的に透明なポリマー層の中心部分を囲み、そこで、実質的に不透明なポリマー層はアナログコードを表す二次元形状を含む、工程を含有する。他の実施形態において、方法は、（ａ）基材上に犠牲層を堆積させる工程；（ｂ）犠牲層上に外形、第一の表面、および第二の表面を有する実質的に不透明なポリマー層を堆積させる工程であって、第一の表面および第二の表面は互いに平行であり、そこで、第二の表面は犠牲層に貼り付けられる、工程；（ｃ）リソグラフィーによって、実質的に不透明なポリマー層の外形を形成する工程であって、外形はアナログコードを表す二次元形状に形成される、工程；（ｄ）溶媒中で犠牲ポリマー層を溶解する工程；ならびに（ｅ）基材を除去する工程を含有する。他の実施形態において、方法は、（ａ）基材上に犠牲層を堆積させる工程；（ｂ）磁性材料を含む磁性層を犠牲層上に堆積させる工程；（ｃ）磁性層上に外形、第一の表面、および第二の表面を有する実質的に不透明なポリマー層を堆積させる工程であって、第一の表面および第二の表面は互いに平行であり、第二の表面は磁性層に貼り付けられる、工程；（ｄ）リソグラフィーによって、実質的に不透明なポリマー層の外形を形成する工程であって、そこで、外形はアナログコードを表す二次元形状に形成される、工程；（ｄ）溶媒中で犠牲層を溶解する工程；ならびに（ｅ）基材を除去する工程を含有する。本明細書において開示される方法によって生成されたコード化されたマイクロキャリアが、さらに本明細書において提供される。
【００４５】
さらに別の局面において、（ａ）第一の分析物および第二の分析物を含む溶液を複数のマイクロキャリアと接触させる工程であって、そこで、複数のマイクロキャリアは：（ｉ）第一の分析物を特異的に捕捉する本開示の第一のマイクロキャリアであって、そこで、第一のマイクロキャリアは第一のアナログコードでコード化されている、マイクロキャリア；および（ｉｉ）第二の分析物を特異的に捕捉する本開示の第二のマイクロキャリアであって、そこで、第二のマイクロキャリアは第二のアナログコードでコード化されており、そこで、第二のアナログコードは第一のアナログコードと異なる、マイクロキャリア；を少なくとも含有する、工程；（ｂ）第一のアナログコードおよび第二のアナログコードを、アナログ形状認識を使用して解読し、第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアを識別する工程；ならびに（ｃ）第一のマイクロキャリアに結合した第一の分析物の量および第二のマイクロキャリアに結合した第二の分析物の量を検出する工程によって溶液中の２つまたはそれより多い分析物を検出するための方法が、本明細書において提供される。
【００４６】
さらに別の局面において、複数のマイクロキャリアを含有するマルチプレックスアッセイを実施するためのキットまたは製品が、本明細書において提供される。複数のマイクロキャリアは、（ａ）第一の分析物を特異的に捕捉する本開示の第一のマイクロキャリアであって、そこで、第一のマイクロキャリアは第一のアナログコードでコード化されている、マイクロキャリア；および（ｂ）第二の分析物を特異的に捕捉する本開示の第二のマイクロキャリアであって、そこで、第二のマイクロキャリアは第二のアナログコードでコード化されおり、そこで、第二のアナログコードは第一のアナログコードと異なる、マイクロキャリアを少なくとも含有する。
【００４７】
Ｉ．  一般技術
本明細書において記載された技術の実行は、別に指示されていない限り、ポリマー技術、微細作製、微小電気機械システム（ＭＥＭＳ）作製、フォトリソグラフィ、微少流体技術、有機化学、生化学、オリゴヌクレオチド合成および改変、バイオコンジュゲート（ｂ
ｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）化学、核酸ハイブリダイゼーション、分子生物学、微生物学、遺伝学、組み換えＤＮＡ、ならびに本分野の技術内の関連分野における慣習的な技術を使用する。その技術は、本明細書において挙げられた参考文献において記載されており、文献内で十分に説明されている。
【００４８】
分子生物学および組み換えＤＮＡ技術に関して、例えば、Ｍａｎｉａｔｉｓ，Ｔ．ｅｔ
ａｌ．（１９８２），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９８７），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９８９），Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  ａｎｄ
Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ；Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（１９８９），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ；Ｉｎｎｉｓ，Ｍ．Ａ．（１９９０），ＰＣＲ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９９２），Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ
Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９９５），Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ
Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ；Ｉｎｎｉｓ，Ｍ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．（１９９５），ＰＣＲ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９９９），Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗｉｌｅｙおよびその年次更新を参照されたい。
【００４９】
ＤＮＡ合成技術および核酸化学に関して、例えば、Ｇａｉｔ，Ｍ．Ｊ．（１９９０），Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ；Ｅｃｋｓｔｅｉｎ，Ｆ．（１９９１），Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｄａｍｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔａｌ．（１９９２），Ｔｈｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ，Ｃｈａｐｍａｎ＆  Ｈａｌｌ；Ｓｈａｂａｒｏｖａ，Ｚ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４），Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ；Ｂｌａｃｋｂｕｒｎ，Ｇ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．（１９９６），Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ；Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．（１９９６），Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓを参照されたい。
【００５０】
微細作製に関して、例えば、Ｃａｍｐｂｅｌｌ，Ｓ．Ａ．（１９９６），Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ
Ｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ；Ｚａｕｔ，Ｐ．Ｖ．（１９９６），Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ  Ｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎ：ａ  Ｐｒ
ａｃｔｉｃａｌ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ，Ｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ；Ｍａｄｏｕ，Ｍ．Ｊ．（１９９７），Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ；Ｒａｉ−Ｃｈｏｕｄｈｕｒｙ，Ｐ．（１９９７）．Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｌｉｔｈｏｇｒａｐｈｙ，Ｍｉｃｒｏｍａｃｈｉｎｉｎｇ，＆  Ｍｉｃｒｏｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎ：Ｍｉｃｒｏｌｉｔｈｏｇｒａｐｈｙを参照されたい。
【００５１】
ＩＩ．  定義
本発明を詳細に記載する前に、本発明は、特定の組成物または生物学的システムに限定されず、当然変動し得ることは理解されるべきである。本明細書において使用される用語は、特定の実施形態を記載することのみを目的とし、限定的であることを意図しないこともまた理解されるべきである。
【００５２】
本明細書において使用される場合、用語「マイクロキャリア」は、捕捉剤が連結され得る物理的な基材を指し得る。本開示のマイクロキャリアは、任意の適切な幾何学的な形または形状をとり得る。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、円盤形状であり得る。典型的には、マイクロキャリアの形または形状は、１０−４〜１０−７ｍのオーダーの少なくとも１つの寸法を含有し得る（したがって、接頭辞は「マイクロ」）。
【００５３】
本明細書において使用された用語「ポリマー」は、繰り返されたモノマーを含む任意の巨大分子構造をいい得る。ポリマーは、（例えば、自然界において見出される）天然ポリマーであっても、または合成ポリマー（例えば、人工ポリマー、例えば、非天然モノマーから構成されるポリマーおよび／もしくは自然界において見出されない構成または組み合わせでポリマー化されているポリマー）であってもよい。
【００５４】
本明細書において使用された用語「実質的に透明な」および「実質的に不透明な」は、（例えば、赤外線、可視、ＵＶなどの特定の波長の）光がポリマー層などの基材を通過できることをいい得る。実質的に透明なポリマーは、透明、半透明および／または光を通す（ｐｒｅｖｉｏｕｓ  ｔｏ  ｌｉｇｈｔ）ものをいい得、他方で、実質的に不透明なポリマーは、光を反射および／または吸収するものをいい得る。材料が実質的に透明であるか、または実質的に不透明であるかは、材料を照射する光の波長および／または強度、ならびに材料を通って移動する光（またはそれらの減少もしくは非存在）を検出する方法に依存し得ることは認識されるべきである。いくつかの実施形態において、実質的に不透明な材料は、例えば、光学顕微鏡（例えば、明視野、暗視野、位相差、微分干渉コントラスト（ＤＩＣ）、ノルマスキー型干渉コントラスト（ＮＩＣ）、ノルマスキー、ホフマンモジュレーションコントラスト（ＨＭＣ）、または蛍光顕微鏡）によってイメージングされる場合の周囲の材料または画像領域と比較したときに、伝導された光の知覚できる減少を引き起こす。いくつかの実施形態において、実質的に透明な材料は、例えば、光学顕微鏡（例えば、明視野、暗視野、位相差、微分干渉コントラスト（ＤＩＣ）、ノルマスキー型干渉コントラスト（ＮＩＣ）、ノルマスキー、ホフマンモジュレーションコントラスト（ＨＭＣ）、または蛍光顕微鏡）によってイメージングされる場合に知覚できる量の伝導された光が材料を通過することを可能にする。
【００５５】
本明細書において使用された用語「アナログコード」は、コード化された情報が、例えば、デジタルコードと対照的に、非量子化および／または非不連続な方法で表される任意のコードをいい得る。例えば、デジタルコードは、限定された値（例えば、０／１タイプの値）のセットに関して離散位置でサンプリングされる一方で、アナログコードは、より大きな範囲の位置で（もしくは連続的な全体として）サンプリングされ得、かつ／またはより広い値のセット（例えば、形状）を含有し得る。いくつかの実施形態において、アナログコードは１またはそれより多いアナログ形状認識技術を使用して読まれ、または解読
され得る。
【００５６】
本明細書において使用された用語「捕捉剤」は、広義な用語であり、目的の分析物を特異的に認識できる任意の化合物または物質を言及するその通常の意味で使用されている。いくつかの実施形態において、特異的な認識は、特異的な結合をいい得る。捕捉剤の非限定的な例は、例えば、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片が挙げられる。
【００５７】
本明細書において使用されている「分析物」は、広義な用語であり、その存在、非存在、または量が決定されるべき物質としてその通常の意味で使用され、例えば、分析され得る生物学的サンプルまたは細胞もしくは細胞集団などのサンプル中の物質または化学成分を指すが、それに限定されない。分析物は、天然起源の結合メンバーが存在する物質、または結合メンバーが調製され得る物質であり得る。分析物の非限定的な例は、例えば、抗体、抗体断片、抗原、（ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、またはＲＮＡアナログ分子などの）ポリヌクレオチド、ポリペプチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、小分子、細胞内小器官、ホルモン、サイトカイン、成長因子、ステロイド、ビタミン、毒素、薬物、および上記物質の代謝物、ならびに細胞、細菌、ウイルス、菌類、藻類、菌類胞子などが挙げられる。
【００５８】
用語「抗体」は、最も広い意味で使用されており、モノクローナル抗体（例えば、免疫グロブリンＦｃ領域を有する全長の抗体）、ポリクローナル抗体、多重特異性（ｍｕｌｔｉｓｐｅｃｉｆｉｃ）抗体（例えば、二重特異性抗体、二特異性抗体および単鎖分子）ならびに抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖ）が挙げられる。
【００５９】
本明細書において使用された場合、「サンプル」は、検出されるべき分子などの材料を含有する組成物をいう。一実施形態において、サンプルは、「生物学的サンプル」（すなわち、生命源（例えば、ヒト、動物、植物、細菌、菌類、原生生物、ウイルス）から得られた任意の材料）である。生物学的サンプルは、固形材料（例えば、組織、細胞ペレットおよび生検）ならびに生物学的流動体（例えば、尿、血液、唾液、リンパ液、涙、汗、前立腺液、精液（ｓｅｍｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄ）、精液（ｓｅｍｅｎ）、胆汁、粘液、羊水および口腔洗浄物（頬の細胞を含有する））を含有する任意の形態であり得る。固形材料は、典型的には、流動体と混合されている。サンプルはまた、水、空気、土壌、または他の任意の環境源などの環境サンプルをいい得る。
【００６０】
本明細書および添付された特許請求の範囲において使用された場合、単数形の「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「１つの（ｔｈｅ）」は、内容が明らかに他を示さない限り、複数の指示物を含有する。したがって、例えば、「分子（ｍｏｌｅｃｕｌｅ）」という言及は、必要に応じて、２つまたはそれより多いかかる分子の組み合わせなどを含有する。
【００６１】
本明細書において使用される場合、用語「約（ａｂｏｕｔ）」は、当業者に容易に知られる、それぞれの値に関する通常の誤差範囲をいう。本明細書における「約」の値またはパラメータへの言及は、その値またはパラメータ自体を対象とする実施形態を含有（および記載）する。
【００６２】
本明細書において記載されている本発明の局面および実施形態は、局面および実施形態を「含むこと」、「からなること」および「本質的にからなること」を含有することが理解される。
【００６３】
ＩＩＩ．  コード化されたマイクロキャリア
分析物検出（例えば、多重分析物検出）に適切なコード化されたマイクロキャリアが、本明細書において提供される。コード化されたマイクロキャリアについての複数の構成が、本明細書において意図され、記載され、そして例示されている。
【００６４】
いくつかの局面において、第一の表面および第二の表面を有する実質的に透明なポリマー層であって、第一の表面および第二の表面は互いに平行である、層；実質的に不透明なポリマー層であって、実質的に不透明なポリマー層は実質的に透明なポリマー層の第一の表面に貼り付けられており、そして実質的に透明なポリマー層の中心部分を囲み、実質的に不透明なポリマー層はアナログコードを表す二次元形状を含む、層；ならびに分析物を捕捉するための捕捉剤であって、捕捉剤は、実質的に透明なポリマー層の少なくとも中心部分において実質的に透明なポリマー層の第一の表面および第二の表面のうちの少なくとも１つに連結されている、捕捉剤を含むコード化されたマイクロキャリアが、本明細書において提供される。したがって、マイクロキャリアは、少なくとも２つの層を含有し、そのうちの１つは実質的に透明であり、他方はアナログコードを表す実質的に不透明な二次元形状である。好都合なことに、これらのマイクロキャリアは、種々の二次元形状を利用し得るが、均一な全体の形態（例えば、実質的に透明なポリマー層の外周の長さ）を依然として維持し、均一性の局面に関して、例えば、全体の寸法、物理的性質、および／または溶液中の挙動が挙げられる。このタイプのマイクロキャリアの例およびその局面は、図１Ａ〜５Ｂにおいて示される。
【００６５】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、実質的に透明なポリマー層の中心部分を囲む、実質的に透明なポリマー層に貼り付けられている磁性の実質的に不透明な層をさらに含有する。いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層は、実質的に不透明なポリマー層と、実質的に透明なポリマー層の中心部分との間にある。
【００６６】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、第一の実質的に透明なポリマー層と整列しており、そして貼り付けられている第二の実質的に透明なポリマー層をさらに含有する。いくつかの実施形態において、第一の実質的に透明なポリマー層および第二の実質的に透明なポリマー層は、それぞれ中心部分を有し、第一の実質的に透明なポリマー層および第二の実質的に透明なポリマー層の両方の中心部分は整列している。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、第一の実質的に透明なポリマー層および第二の実質的に透明なポリマー層の両方の中心部分を囲む磁性の実質的に不透明な層をさらに含有する。いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層は、第一の実質的に透明なポリマー層と、第二の実質的に透明なポリマー層の間に貼り付けられている。いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層は、実質的に不透明なポリマー層と、第一の実質的に透明なポリマー層および第二の実質的に透明なポリマー層の両方の中心部分との間にある。
【００６７】
いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層は、厚さが約５０ｎｍと約１０ｎｍとの間である。いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層の厚さは、およそ以下の厚さ（ｎｍ）：１００００、９５００、９０００、８５００、８０００、７５００、７０００、６５００、６０００、５５００、５０００、４５００、４０００、３５００、３０００、２５００、２０００、１５００、１０００、９５０、９００、８５０、８００、７５０、７００、６５０、６００、５５０、５００、４５０、４００、３５０、３００、２５０、２００、１５０または１００のいずれか未満である。いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層の厚さは、およそ以下の厚さ（ｎｍ）：５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１５００、２０００、２５００、３０００、３５００、４０００、４５００、５０００、５５
００、６０００、６５００、７０００、７５００、８０００、８５００、９０００、または９５００のいずれかより大きい。すなわち、磁性の実質的に不透明な層の厚さは、１００００、９５００、９０００、８５００、８０００、７５００、７０００、６５００、６０００、５５００、５０００、４５００、４０００、３５００、３０００、２５００、２０００、１５００、１０００、９５０、９００、８５０、８００、７５０、７００、６５０、６００、５５０、５００、４５０、４００、３５０、３００、２５０、２００、１５０または１００の上限および、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１５００、２０００、２５００、３０００、３５００、４０００、４５００、５０００、５５００、６０００、６５００、７０００、７５００、８０００、８５００、９０００、または９５００の独立して選択される下限を有し、下限は上限未満である、範囲の厚さ（ｎｍ）のいずれかであり得る。
【００６８】
いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層は、厚さが約０．１μｍである。いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層は、厚さが約５０ｎｍ、約１００ｎｍ、約１５０ｎｍ、約２００ｎｍ、約２５０ｎｍ、約３００ｎｍ、約３５０ｎｍ、約４００ｎｍ、約４５０ｎｍ、約５００ｎｍ、約５５０ｎｍ、約６００ｎｍ、約６５０ｎｍ、約７００ｎｍ、約７５０ｎｍ、約８００ｎｍ、約８５０ｎｍ、約９００ｎｍ、約９５０ｎｍ、約１μｍ、約１．５μｍ、約２μｍ、約２．５μｍ、約３μｍ、約３．５μｍ、約４μｍ、約４．５μｍ、約５μｍ、約５．５μｍ、約６μｍ、約６．５μｍ、約７μｍ、約７．５μｍ、約８μｍ、約８．５μｍ、約９μｍ、約９．５μｍ、または約１０μｍである。いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層の厚さは、約０．０１μｍ、約０．０２μｍ、約０．０３μｍ、約０．０４μｍ、約０．０５μｍ、約０．０６μｍ、約０．０７μｍ、約０．０８μｍ、約０．０９μｍ、約０．１μｍ、約０．１１μｍ、約０．１２μｍ、約０．１３μｍ、約０．１４μｍ、約０．１５μｍ、約０．１６μｍ、約０．１７μｍ、約０．１８μｍ、約０．１９μｍ、約０．２０μｍ、約０．２５μｍ、約０．３０μｍ、約０．３５μｍ、約０．４０μｍ、約０．４５μｍ、または約０．５０μｍである。
【００６９】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、実質的に不透明なポリマー層のアナログコードを方向付けるための方向インジケーターをさらに含有する。イメージング（例えば、本明細書において記載される顕微鏡もしくは他のイメージングの形態）によって、および／または画像認識ソフトウェアによって可視および／または検出可能なマイクロキャリアの任意の特徴は、方向インジケーターとして役立ち得る。方向インジケーターは、均一な方向にアナログコードの画像（すなわち、実質的に不透明なポリマー層の形状）を方向付けるための（例えば、画像認識アルゴリズムのための）参照点として役立ち得る。好都合なことに、アルゴリズムは、特定のアナログコードの画像を、全てのアナログコードを可能なすべての方向で含有するライブラリーと比較せず、同一方向のアナログコードのライブラリーと比較する必要があるだけであるため、これは、画像認識を単純化する。いくつかの実施形態において、方向インジケーターは、実質的に不透明なポリマー層と独立であり得る。例えば、これは、磁性層および／または実質的に透明なポリマー層の一部として形成され得る。他の実施形態において、方向インジケーターは、実質的に不透明なポリマー層の一部として形成され得る。いくつかの実施形態において、方向インジケーターは、（例えば、図２Ａにおいてギャップ２１０によって示されるような）磁性の実質的に不透明な層の非対称を含む。
【００７０】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、マイクロキャリアの表面（例えば、マイクロキャリアの上面および／または下面）から突出している１つまたはそれより多い柱をさらに含有する。本明細書において使用されている場合、「柱」は、マイクロキャリアの表面から突出している任意の幾何学形状をいい得、必ずしも、寸法における何らか
の規則性または何らかの円柱の性質を示すわけではない。例えば、柱の外側表面は、マイクロキャリアの表面と平行であっても、平行でなくてもよい。マイクロキャリアから突出し得る柱形状の例は、長方形の角柱、三角形、ピラミッド型、立方体、円柱、球または半球、円錐などを、それに限定することなく含有する。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、第一の実質的に透明なポリマー層および／または第二の実質的に透明なポリマー層の中心部分内にない。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、第一の実質的に透明なポリマー層および第二の実質的に透明なポリマー層の１つまたはそれより多くの外側に面する表面（例えば、他の層に貼り付けられていない表面）から突出し得る。本明細書内のマイクロキャリアの厚さの任意の記載は、１つまたはそれより多い柱を指定された寸法内に含有しないことは注意されるべきである。すなわち、本明細書において記載されているようなマイクロキャリアの厚さは、それらから突出している任意の必要に応じた柱から独立している。
【００７１】
いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、約１μｍと約１０μｍとの間の高さである。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、約１μｍの高さ、約１．５μｍの高さ、約２μｍの高さ、約２．５μｍの高さ、約３μｍの高さ、約３．５μｍの高さ、約４μｍの高さ、約４．５μｍの高さ、約５μｍの高さ、約５．５μｍの高さ、約６μｍの高さ、約６．５μｍの高さ、約７μｍの高さ、約７．５μｍの高さ、約８μｍの高さ、約８．５μｍの高さ、約９μｍの高さ、約９．５μｍの高さ、または約１０μｍの高さである。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、およそ以下の高さ（μｍ）：１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２、または１．５のいずれか未満である。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、およそ以下の高さ（μｍ）：１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、または９．５のいずれかより大きい。すなわち、１つまたはそれより多い柱は、１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２、または１．５の上限および、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、または９．５の独立して選択される下限を有し、下限は上限未満である、範囲の高さのいずれかであり得る。
【００７２】
いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、形状が円柱であり得る。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、約１μｍと約１０μｍとの間の直径を有する。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、約１μｍ、約１．５μｍ、約２μｍ、約２．５μｍ、約３μｍ、約３．５μｍ、約４μｍ、約４．５μｍ、約５μｍ、約５．５μｍ、約６μｍ、約６．５μｍ、約７μｍ、約７．５μｍ、約８μｍ、約８．５μｍ、約９μｍ、約９．５μｍ、または約１０μｍの直径を有する。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、およそ以下の長さ（μｍ）：１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２、または１．５のいずれか未満の直径を有し得る。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、およそ以下の長さ（μｍ）：１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、または９．５のいずれかより大きい直径を有し得る。すなわち、１つまたはそれより多い柱は、１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２、または１．５の上限および、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、または９．５の独立して選択される下限を有し、下限は上限未満である、範囲の直径のいずれかを有し得る。他の実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、上記直径のいずれかとおおよそ同じ幅を有し得るか、または上記のいずれかの範囲の直径とおおよそ同じ範囲の幅を有し得るが、１つまたはそれより多い柱は、楕円形の円柱、放物線状
の円柱、双曲線の円柱、または本明細書において記載されている、または本分野において公知の他の任意の円柱状形状もしくは多角体の形状をとり得る。
【００７３】
他の局面において、第一の表面および第二の表面を有する実質的に不透明なポリマー層であって、第一の表面および第二の表面は互いに平行であり、実質的に不透明なポリマー層の外形はアナログコードを表す二次元形状を含む、層；ならびに分析物を捕捉するための捕捉剤であって、捕捉剤は実質的に不透明なポリマー層の少なくとも中心部分において、実質的に不透明なポリマー層の第一の表面および第二の表面のうちの少なくとも１つに連結されている、捕捉剤を含むコード化されたマイクロキャリアが、本明細書において提供される。したがって、マイクロキャリアは、マイクロキャリ自体の形状（例えば、外形）：アナログコードを表す二次元形状によってコード化されている。好都合なことに、これらのマイクロキャリアは、効率的かつ高い精度で製造され得、非常に正確な解読および省費用の生産を可能にする。このタイプのマイクロキャリアの例およびその局面は、図６Ａ〜９Ｃにおいて示される。
【００７４】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、実質的に不透明なポリマー層の表面から突出している１つまたはそれより多い柱をさらに含有する。詳細に上記されているように、「柱」は、マイクロキャリアの表面から突出している任意の幾何学形状をいい得、必ずしも柱の寸法における何らかの規則性を示すわけではない。上記の例示的な柱の形状のいずれかが、使用され得る。
【００７５】
いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、約１μｍと約１０μｍとの間の高さである。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、約１μｍの高さ、約１．５μｍの高さ、約２μｍの高さ、約２．５μｍの高さ、約３μｍの高さ、約３．５μｍの高さ、約４μｍの高さ、約４．５μｍの高さ、約５μｍの高さ、約５．５μｍの高さ、約６μｍの高さ、約６．５μｍの高さ、約７μｍの高さ、約７．５μｍの高さ、約８μｍの高さ、約８．５μｍの高さ、約９μｍの高さ、約９．５μｍの高さ、または約１０μｍの高さである。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、およそ以下の高さ（μｍ）：１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２、または１．５のいずれか未満である。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、およそ以下の高さ（μｍ）：１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、または９．５のいずれかより大きい。すなわち、１つまたはそれより多い柱は、１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２、または１．５の上限および、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、または９．５の独立して選択される下限を有し、下限は上限未満である、範囲の高さのいずれかであり得る。
【００７６】
いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、形状が円柱であり得る。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、約１μｍと約１０μｍとの間の直径を有する。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、約１μｍ、約１．５μｍ、約２μｍ、約２．５μｍ、約３μｍ、約３．５μｍ、約４μｍ、約４．５μｍ、約５μｍ、約５．５μｍ、約６μｍ、約６．５μｍ、約７μｍ、約７．５μｍ、約８μｍ、約８．５μｍ、約９μｍ、約９．５μｍ、または約１０μｍの直径を有する。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、およそ以下の長さ（μｍ）：１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２、または１．５のいずれか未満の直径を有し得る。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱はおよそ以下の長さ（μｍ）：１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８
．５、９、または９．５のいずれかより大きい直径を有し得る。すなわち、１つまたはそれより多い柱は、１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２、または１．５の上限および、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、または９．５の独立して選択される下限を有し、下限は上限未満である、範囲の直径のいずれかを有し得る。他の実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、上記直径のいずれかとおおよそ同じ幅を有し得るか、または上記のいずれかの範囲の直径とおおよそ同じ範囲の幅を有し得るが、１つまたはそれより多い柱は、楕円形の円柱、放物線状の円柱、双曲線の円柱、または本明細書において記載されている、または本分野において公知の他の任意の円柱状形状もしくは多角体の形状をとり得る。
【００７７】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、実質的に不透明なポリマー層の表面に貼り付けられている磁性材料を含む磁性層をさらに含有する。いくつかの実施形態において、磁性層は、実質的に不透明なポリマー層の二次元形状を超えて広がっていない。すなわち、実質的に不透明なポリマー層の外形がイメージングされる場合、生じる画像は、磁性層の存在または非存在によって変わらない。いくつかの実施形態において、磁性層は、上記の１つまたはそれより多い柱を含有し得る。すなわち、上記の１つまたはそれより多い柱は、本明細書において記載されている磁性材料で作製され得る。
【００７８】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、実質的に不透明なポリマー層のアナログコードを方向付けるための方向インジケーターをさらに含有する。イメージング（例えば、本明細書において記載されている顕微鏡または他のイメージングの形態）によって、および／または画像認識ソフトウェアによって可視および／または検出可能なマイクロキャリアの任意の特徴は、方向インジケーターとして役立ち得る。方向インジケーターは、均一な方向にアナログコードの画像（すなわち、実質的に不透明なポリマー層の形状）を方向付けるための、例えば、画像認識アルゴリズムのための参照点として役立ち得る。好都合なことに、アルゴリズムは、特定のアナログコードの画像を、全てのアナログコードを可能なすべての方向で含有するライブラリーと比較せず、同一方向のアナログコードのライブラリーと比較する必要があるだけであるため、これは、画像認識を単純化する。いくつかの実施形態において、方向インジケーターは、実質的に不透明なポリマー層の外形の非対称を含む。例えば、方向インジケーターは、マイクロキャリアの外形の可視的な特徴、例えば、非対称（例えば、図８Ａおよび９Ａにおける開始位置８０４および９０４によって示されているような）を含み得る。
【００７９】
本明細書において記載されているマイクロキャリアのいずれも、１つまたはそれより多くの以下に記載されている特徴、要素または性質を含有し得る。さらに、１つまたはそれより多くの以下に記載されている特徴、要素または性質は、例えば、上記のようなマイクロキャリアの実施形態に依存して異なる特質を採用し得る。
【００８０】
いくつかの実施形態において、本開示の実質的に透明なポリマー層は、エポキシを基にしたポリマーを含む。本明細書において記載されている組成物の作製のための適切なエポキシを基にしたポリマーとして、Ｈｅｘｉｏｎ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，ＯＨ）によって提供されているＥＰＯＮ（商標）ファミリーのエポキシ樹脂およびＴｈｅ  Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｍｉｄｌａｎｄ，ＭＩ）によって提供される任意の番号のエポキシ樹脂が挙げられるが、それに限定されない。適切なポリマーの多くの例は、本分野において一般的に公知であり、ＳＵ−８、ＥＰＯＮ  １００２Ｆ、ＥＰＯＮ  １６５／１５４、およびポリ（メチルメタクリレート）／ポリ（アクリル酸）ブロック共重合体（ＰＭＭＡ−コ−ＰＡＡ）を、それに限定することなく含有する。さらなるポリマーについて、例えば、Ｗａｒａｄ，ＩＣ  Ｐａｃｋａｇｉｎｇ：Ｐａｃｋａｇｅ  Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｉ
ｎ  Ｕｌｔｒａ  Ｓｍａｌｌ  ＩＣ  Ｐａｃｋａｇｉｎｇ，ＬＡＰ  ＬＡＭＢＥＲＴ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ（２０１０）；Ｔｈｅ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｐａｃｋａｇｉｎｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ（Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，ｅｄ．），（２０００）；およびＰｅｃｈｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｐａｃｋａｇｉｎｇ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ＣＣＲ  Ｐｒｅｓｓ，１ｓｔ  ｅｄ．，（１９９８）を参照されたい。これらのタイプの材料は、水性環境において膨張しないという利点を有し、これは、マイクロキャリアの集団内で、均一なマイクロキャリアの大きさおよび形状が維持されることを確実にする。いくつかの実施形態において、実質的に透明なポリマーは、フォトレジストポリマーである。いくつかの実施形態において、エポキシを基にしたポリマーは、エポキシを基にした、ネガティブトーン（ｎｅｇａｔｉｖｅ−ｔｏｎｅ）な、近紫外のフォトレジストである。いくつかの実施形態において、エポキシを基にしたポリマーは、ＳＵ−８である。
【００８１】
いくつかの実施形態において、実質的に不透明なポリマーは、１つまたはそれより多い不透明または着色された色素と混合された本明細書において記載されたポリマー（例えば、ＳＵ−８）である。他の実施形態において、実質的に不透明なポリマーは、ブラックマトリクス用レジストである。本分野において公知の任意のブラックマトリクス用レジストが使用され得る；例えば、例示的なブラックマトリクス用レジストおよびそれに関する方法について米国特許番号第８，６１０，８４８号を参照されたい。いくつかの実施形態において、ブラックマトリクス用レジストは、（例えば、ブラックマトリクス用の一部としてＬＣＤのカラーフィルター上にパターニングされているような）黒色顔料で着色されたフォトレジストであり得る。ブラックマトリクス用レジストとして、Ｔｏｐｐａｎ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏ．（Ｔｏｋｙｏ）、Ｔｏｋｙｏ  ＯＨＫＡ  Ｋｏｇｙｏ（Ｋａｗａｓａｋｉ），およびＤａｘｉｎ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｃｏｒｐ．（Ｔａｉｃｈｕｎｇ  Ｃｉｔｙ，Ｔａｉｗａｎ）によって販売されているものが、それに限定することなく挙げられ得る。
【００８２】
いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多いポリマー層の中心部分が、参照され得る。本開示の中心部分は、任意の形状を取り得る。いくつかの実施形態において、中心部分の形状は、対応するポリマー層の形状（例えば、外形）を反映、またはそれに対応し得る。他の実施形態において、中心部分の形状は、対応するポリマー層の形状（例えば、外形）から独立であり得る。例えば、円形のマイクロキャリアの表面の中心部分は、いくつかの実施形態において、円形であり得、他の実施形態において、正方形であり得る。正方形のマイクロキャリアの表面の中心部分は、いくつかの実施形態において、正方形であり得、他の実施形態において、円形であり得る。
【００８３】
いくつかの実施形態において、本開示のポリマー層の中心部分は、ポリマー層の表面領域の約５％、約７％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、または約９０％である。いくつかの実施形態において、本開示のポリマー層の中心部分は、実質的に透明なポリマー層のおよそ以下の割合（％）：９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、または７のいずれか未満である。いくつかの実施形態において、本開示のポリマー層の中心部分は、実質的に透明なポリマー層のおよそ以下の割合（％）：５、７、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、または８５のいずれかより大きい。すなわち、中心部分に含まれているポリマー層の表面領域の割合は、９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、または７の上限および、５、７、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、または８５の独立して選択される下限を有し、下限が上限未満である、パーセン
トの範囲のいずれかであり得る。いくつかの実施形態において、ポリマー層の中心部分は、ポリマー層の表面領域の約２５％を占める。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアの表面の中心部分は、マイクロキャリアの外形部分を引いた全体の表面を含む。
【００８４】
上記のように、本開示のマイクロキャリアは、本願明細書において記載されているような種々の形状をとり得る、磁性層をさらに含み得る。いくつかの実施形態において、磁性層は、実質的に不透明な層であり得る。いくつかの実施形態において、磁性層は、磁性材料を含み得る。本開示の磁性層は、常磁性、強磁性、またはフェリ磁性の性質を有する材料などの任意の適切な磁性材料で作製され得る。磁性材料の例は、鉄、ニッケル、コバルトおよびいくつかの希土類金属（例えば、ガドリニウム、ジスプロシウム、ネオジムなど）、ならびにその合金が挙げられるが、それに限定されない。いくつかの実施形態において、磁性材料は、ニッケル元素ならびにアルニコおよびパーマロイなどの磁性ニッケル合金が挙げられるが、それに限定されないニッケルを含む。本開示のマイクロキャリアにおける磁性層の含有は、例えば、１つまたはそれより多くのマイクロキャリアの洗浄、収集、および他の操作に有用であり得る、磁気分離の促進において好都合であり得る。
【００８５】
上記のように、いくつかの実施形態において、磁性層は、実質的に透明なポリマー層の表面に貼り付けられていてもよいし、実質的に透明なポリマー層の中心部分を囲んでもよい。他の実施形態において、上記のように、磁性層は、１つまたはそれより多い柱を含有し得；すなわち、上記の１つまたはそれより多い柱は、本明細書において記載されている磁性材料で作製され得る。
【００８６】
いくつかの実施形態において、本開示のマイクロキャリアは、二次元形状を構成する実質的に不透明な層でコード化され得る。例えば、上記のように、二次元形状は、マイクロキャリアの実質的に透明な層と対照的である実質的に不透明な層の形状を構成し得、またはそれはマイクロキャリア自体の形状（例えば、外周の長さ）を構成し得る。複数の分解できる、示差的な変化を包含し得る任意の二次元形状が、使用され得る。いくつかの実施形態において、二次元形状は、１つまたはそれより多い直線状の、円形の、楕円形の、長方形の、四辺形の、またはより辺の多い（ｈｉｇｈｅｒ）多角形の性質、要素および／または形状を含む。
【００８７】
いくつかの実施形態において、実質的に不透明なポリマー層の二次元形状は、ギア形状を含む。本明細書において使用されているギア形状は、実質的に球形の、楕円形のまたは円形の本体の外周上に整列している複数の形状（例えば、歯（ｇｅａｒ  ｔｅｅｔｈ））をいい得、そこで、複数の形状のうちの少なくとも２つの形状は空間的に離れている。いくつかの実施形態において、ギア形状は、複数の歯を含む。いくつかの実施形態において、アナログコードは、複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の高さ、複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の幅、複数の歯における歯の数、および複数の歯内の１つまたはそれより多い歯の配置から選択される１つまたはそれより多い性質によって表される。好都合なことに、ギア形状は、可能性のある固有の二次元形状の多くの多様性を生成するために変動され得る、歯の高さ、歯の幅、歯の数および歯の配置を含有する複数の性質を包含する。しかしながら、本開示のギア形状はコード化のために使用されており、他のギアと（例えば、トルクを伝導する機械ギアと）物理的に互いにかみ合うことを必要とされていないために、本開示の歯は、１つのギア形状内または複数のギア形状間のいずれかで、同一または互いにかみ合う形状に関する必要性によって制限されていないことは認識されるべきである。よって、本開示の歯として考慮され得る形状の多様性は、機械ギアより顕著に大きい。
【００８８】
いくつかの実施形態において、複数の歯は、約１μｍと約１０μｍとの間の幅である１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、複数の歯は、約１μｍの
幅、約１．５μｍの幅、約２μｍの幅、約２．５μｍの幅、約３μｍの幅、約３．５μｍの幅、約４μｍの幅、約４．５μｍの幅、約５μｍの幅、約５．５μｍの幅、約６μｍの幅、約６．５μｍの幅、約７μｍの幅、約７．５μｍの幅、約８μｍの幅、約８．５μｍの幅、約９μｍの幅、約９．５μｍの幅または約１０μｍの幅である１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、複数の歯は、およそ以下の幅（μｍ）：１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２または１．５のいずれか未満である１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、複数の歯は、およそ以下の幅（μｍ）：１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９または９．５のいずれかより大きい１つまたはそれより多い歯を含む。すなわち、複数の歯は、１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２または１．５の上限および、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９または９．５の独立して選択される下限を有し、下限が上限未満である範囲のいずれかの幅であり得る１つまたはそれより多い歯を含み得る。
【００８９】
いくつかの実施形態において、複数の歯は、約１μｍと約１０μｍとの間の高さである１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、複数の歯は、約１μｍの高さ、約１．５μｍの高さ、約２μｍの高さ、約２．５μｍの高さ、約３μｍの高さ、約３．５μｍの高さ、約４μｍの高さ、約４．５μｍの高さ、約５μｍの高さ、約５．５μｍの高さ、約６μｍの高さ、約６．５μｍの高さ、約７μｍの高さ、約７．５μｍの高さ、約８μｍの高さ、約８．５μｍの高さ、約９μｍの高さ、約９．５μｍの高さまたは約１０μｍの高さである１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、複数の歯は、およそ以下の高さ（μｍ）：１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２または１．５のいずれか未満である１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、複数の歯は、およそ以下の高さ（μｍ）：１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９または９．５のいずれかより大きい１つまたはそれより多い歯を含む。すなわち、複数の歯は、１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２または１．５の上限および、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９または９．５の独立して選択される下限を有し、下限が上限未満である範囲のいずれかの高さであり得る１つまたはそれより多い歯を含み得る。隣接した外周の区画であって、該区画から歯が伸長する区画が一様でない場合、参照点に依存して、歯は、異なる測定可能な高さを有し得ることは認識されるべきである（例えば、参照点に依存して、４または６．５μｍの高さになり得る、図６Ｃにおける歯６０２を参照されたい）。
【００９０】
いくつかの実施形態において、複数の歯は、約１μｍと約１０μｍとの間の間隔だけ離れている１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、複数の歯は、約１μｍの間隔、約１．５μｍの間隔、約２μｍの間隔、約２．５μｍの間隔、約３μｍの間隔、約３．５μｍの間隔、約４μｍの間隔、約４．５μｍの間隔、約５μｍの間隔、約５．５μｍの間隔、約６μｍの間隔、約６．５μｍの間隔、約７μｍの間隔、約７．５μｍの間隔、約８μｍの間隔、約８．５μｍの間隔、約９μｍの間隔、約９．５μｍの間隔または約１０μｍの間隔だけ離れている１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、複数の歯は、およそ以下の幅の間隔（μｍ）：１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２または１．５のいずれか未満だけ離れている１つまたはそれより多い歯を含む。いくつかの実施形態において、複数の歯は、およそ以下の幅の間隔（μｍ）：１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９
または９．５のいずれかより大きく離れている１つまたはそれより多い歯を含む。すなわち、複数の歯は、１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２または１．５の上限および、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９または９．５の独立して選択される下限を有し、下限が上限未満である範囲のいずれかの幅だけ離れ得る１つまたはそれより多い歯を含み得る。
【００９１】
いくつかの実施形態において、本開示のマイクロキャリアは、実質的に円板である。本明細書において使用された場合、実質的に円形の形状は、形状の外周の全ての点と、形状の幾何学的中心との間でおおよそ同一の距離を有する任意の形状をいい得る。いくつかの実施形態において、幾何学的中心と外周上の所定の点とを結ぶ可能性のある半径のいずれかの間の変動が、長さにおいて１０％またはそれ未満の変動を示す場合、形状は、実質的に円形であると考えられる。本明細書において使用された場合、実質的に円板は、任意の実質的に円形の形状であって、形状の厚さがその直径より顕著に小さい形状をいい得る。例えば、いくつかの実施形態において、実質的に円板の厚さは、その直径の約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満または約５％未満であり得る。ある実施形態において、実質的に円板の厚さは、その直径の約２０％であり得る。その外形がギア形状である本開示のマイクロキャリアはまた、実質的に円板と考えられ得ること：例えば、１つまたは複数の歯を除外したマイクロキャリアの形状は実質的に円板を構成し得ることは、認識されるべきである。
【００９２】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、直径が約２００μｍ未満である。例えば、いくつかの実施形態において、マイクロキャリアの直径は、約２００μｍ未満、約１８０μｍ未満、約１６０μｍ未満、約１４０μｍ未満、約１２０μｍ未満、約１００μｍ未満、約８０μｍ未満、約６０μｍ未満、約４０μｍ未満または約２０μｍ未満である。
【００９３】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアの直径は、約１８０μｍ、約１６０μｍ、約１４０μｍ、約１２０μｍ、約１００μｍ、約９０μｍ、約８０μｍ、約７０μｍ、約６０μｍ、約５０μｍ、約４０μｍ、約３０μｍ、約２０μｍまたは約１０μｍである。ある実施形態において、マイクロキャリアは、直径が約６０μｍである。
【００９４】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアは、厚さが約５０μｍ未満である。例えば、いくつかの実施形態において、マイクロキャリアの厚さは、約７０μｍ未満、約６０μｍ未満、約５０μｍ未満、約４０μｍ未満、約３０μｍ未満、約２５μｍ未満、約２０μｍ未満、約１５μｍ未満、約１０μｍ未満または約５μｍ未満である。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアの厚さは、およそ以下の厚さ（μｍ）：７０、６５、６０、５５、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３または２のいずれか未満である。いくつかの実施形態において、マイクロキャリアの厚さは、およそ以下の厚さ（μｍ）：１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０または６５のいずれかより大きい。すなわち、マイクロキャリアの厚さは、７０、６５、６０、５５、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３または２の上限および１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０または６５の独立して選択される下限を有し、下限が上限未満である、厚さ（μｍ）の範囲のいずれかであり得る。
【００９５】
いくつかの実施形態において、マイクロキャリアの厚さは、約５０μｍ、約４５μｍ、約４０μｍ、約３５μｍ、約３０μｍ、約２５μｍ、約２０μｍ、約１９μｍ、約１８μｍ、約１７μｍ、約１６μｍ、約１５μｍ、約１４μｍ、約１３μｍ、約１２μｍ、約１
１μｍ、約１０μｍ、約９μｍ、約８μｍ、約７μｍ、約６μｍ、約５μｍ、約４μｍ、約３μｍ、約２μｍまたは約１μｍである。ある実施形態において、マイクロキャリアは、厚さが約１０μｍである。
【００９６】
いくつかの局面において、本開示のマイクロキャリアは、捕捉剤を含み得る。いくつかの実施形態において、特定のマイクロキャリア種に関する捕捉剤は、「固有の捕捉剤」であり得、例えば、捕捉剤は特定の識別子（例えば、アナログコード）を有する特定のマイクロキャリア種と結合されている。捕捉剤は、溶液中に存在する（生体分子または化学化合物などの）１つまたはそれより多い分析物に結合できる任意の生体分子または化学化合物であり得る。生体分子捕捉剤の例は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片が挙げられるが、それに限定されない。化学化合物捕捉剤の例は、化学ライブラリーの個々の要素、小分子、または環境毒素（例えば、殺虫剤もしくは重金属）を含有するが、それに限定されない。
【００９７】
いくつかの実施形態において、捕捉剤は、マイクロキャリアの表面（いくつかの実施形態において、マイクロキャリアの表面の少なくとも中心部分内）に連結されている。いくつかの実施形態において、捕捉剤は、マイクロキャリアに化学的に付着され得る。他の実施形態において、捕捉剤は、マイクロキャリアの表面に物理的に吸収され得る。いくつかの実施形態において、捕捉剤とマイクロキャリアの表面との間の付着結合は、共有結合であり得る。他の実施形態において、捕捉剤とマイクロキャリアの表面との間の付着結合は、塩橋もしくは他のイオン結合、１つもしくはそれより多い水素結合、疎水性相互作用、ファンデルワールス力、ロンドン分散力、機械的結合、１つもしくはそれより多いハロゲン結合、金親和性、インタカレーションまたはスタッキングを含有するが、それに限定されない非共有結合であり得る。
【００９８】
いくつかの局面において、同一の分析物に関する１つより多い（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つまたは１０つ）捕捉剤は、本明細書において記載されているマイクロキャリアとそれぞれ結合され得る。この実施形態において、特定の分析物に関するそれぞれの捕捉剤は、分析物／捕捉剤結合の解離定数によって測定する場合に、異なる親和性で分析物と結合する。したがって、組成物中の複数のマイクロキャリア中に、同一の分析物に結合する捕捉剤を伴うマイクロキャリアの２つまたはそれより多い亜集団が存在し得るが、ここで、それぞれの亜集団と結合されている捕捉剤は異なる親和性で分析物に結合する。いくつかの実施形態において、捕捉剤のいずれかに関する分析物の解離定数は、１０−６Ｍより大きくなく、例えば１０−７Ｍまたは１０−８Ｍである。他の実施形態において、捕捉剤のいずれかに関する分析物の解離定数は、約１０−１０Ｍから約１０−６Ｍまで、約１０−１０Ｍから約１０−７Ｍまで、約１０−１０Ｍから約１０−８Ｍまで、約１０−１０Ｍから約１０−９Ｍまで、約１０−９Ｍから約１０−６Ｍまで、約１０−９Ｍから約１０−７Ｍまで、約１０−９Ｍから約１０−８Ｍまで、約１０−８Ｍから約１０−６Ｍまで、または約１０−８Ｍから約１０−７Ｍまでである。いくつかの実施形態において、任意の２つの捕捉剤に関する分析物の解離定数は、約３ｌｏｇ１０と同程度だけ、例えば、約２．５ｌｏｇ１０、２ｌｏｇ１０、１．５ｌｏｇ１０、または１ｌｏｇ１０と同程度だけ異なる。
【００９９】
いくつかの実施形態において、本開示の分析物は、１つまたはそれより多い分析物の捕捉のためのマイクロキャリアに連結される。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い分析物は、本明細書において記載されている生物学的サンプルなどのサンプルから捕捉され得る。いくつかの実施形態において、分析物として、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、
脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片が挙げられるが、それに限定されない。他の実施形態において、分析物は、化学ライブラリーの個々の要素、小分子、または環境毒素（例えば、殺虫剤もしくは重金属）などの捕捉剤と結合できる化学化合物（例えば、小分子化学化合物）である。
【０１００】
いくつかの局面において、サンプル（例えば、生物学的サンプル）中の分析物は、捕捉剤と結合する際に検出可能なシグナルを放射できるシグナル放射実体で標識され得る。いくつかの実施形態において、シグナル放射実体は、比色を基にしたものであり得る。他の実施形態において、シグナル放射実体は、フィコエリスリン、青色蛍光タンパク質、緑色蛍光タンパク質、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、およびその誘導体が挙げられるが、それに限定されない、蛍光を基にしたものであり得る。他の実施形態において、シグナル放射実体は、３２Ｐ、３３Ｐ、２２Ｎａ、３６Ｃｌ、２Ｈ、３Ｈ、３５Ｓ、および１２３Ｉで標識されている分子が挙げられるが、それに限定されない、放射性同位体を基にしたものであり得る。他の実施形態において、シグナル放射実体は、ルシフェラーゼ（例えば、化学発光を基にしたもの）、西洋わさびペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、およびその誘導体が挙げられるが、それに限定されない、光を基にしたものである。いくつかの実施形態において、サンプル中に存在する生体分子または化学化合物は、マイクロキャリアと接触させる前にシグナル放射実体で標識され得る。他の実施形態において、サンプル中に存在する生体分子または化学化合物は、マイクロキャリアと接触させた後にシグナル放射実体で標識され得る。
【０１０１】
ＩＶ．  コード化されたマイクロキャリアの作製方法
本開示のある局面は、コード化されたマイクロキャリア、例えば、本明細書において記載されているマイクロキャリアの作製方法に関する。コード化されたマイクロキャリアの作製方法は、本明細書、例えば、上記のＩＩＩ節および／または以下の実施例において記載されているマイクロキャリアの特徴または性質の１つまたはそれより多くを含有し得る。
【０１０２】
いくつかの実施形態において、方法は、実質的に透明なポリマー層を堆積させることを含有し、そこで、実質的に透明なポリマー層は第一の表面および第二の表面を有し、第一の表面および第二の表面は互いに平行である。いくつかの実施形態において、互いに平行である第一の表面および第二の表面は、単一層の上面および下面であり得る。本分野において公知の、または本明細書において記載されている任意の適切な実質的に透明なポリマー層が、使用され得る。いくつかの実施形態において、実質的に透明なポリマー層は、スピンコーティングを使用して堆積される。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、実質的に透明なポリマー層は、基材上に堆積され得る。適切な基材は、標準的な半導体および／または微小電気機械システム（ＭＥＭＳ）作製技術において使用されている基材を含有し得る。いくつかの実施形態において、基材は、ガラス、シリコン、石英、プラスチック、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、酸化インジウムスズ（ＩＴＯ）コーティングなどを含み得る。
【０１０４】
いくつかの実施形態において、犠牲層が、基材、例えば上記の基材上に堆積され得る。いくつかの実施形態において、犠牲層は、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）またはＯｍｎｉＣｏａｔ（商標）（ＭｉｃｒｏＣｈｅｍ；Ｎｅｗｔｏｎ，ＭＡ）を限定することなく含有するポリマーで作製され得る。犠牲層は、例えば、生産者の指示にしたがって、適用され、使用され、そして溶解され、または、はがされ得る。
【０１０５】
いくつかの実施形態において、本開示の実質的に透明なポリマー層は、犠牲層上に堆積
される。実質的に透明なポリマー層を使用して平面のマイクロキャリアの表面を生成するために、実質的に透明なポリマー層は、平面の犠牲層上に堆積され得る。マイクロキャリアから突出している１つまたはそれより多い柱を伴うマイクロキャリアの表面を生成するために、犠牲層（例えば、基材上に堆積されたもの）は、例えば、標準的なリソグラフィーのプロセスを使用することによって、１つまたはそれより多い柱形状の穴または何もない領域でパターニングされ得る。いくつかの実施形態において、実質的に透明なポリマー層は、犠牲層および必要に応じた基材上に堆積され得、その結果、層は１つまたはそれより多い柱形状の穴または何もない領域中に堆積される。いくつかの実施形態において、別の実質的に透明なポリマー層は、次いで、犠牲層と、第一の実質的に透明なポリマー層で充填された１つまたはそれより多い柱形状の穴または何もない領域との上に堆積され得る。
【０１０６】
いくつかの実施形態において、本開示の磁性の実質的に不透明な層は、実質的に透明なポリマー層の第一の表面上に堆積される。いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層は、スパッタリングによって堆積される。磁性の実質的に不透明な層は、例えば、本明細書に記載されている磁性材料のいずれかで作製され得る。例えば、いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層は、ニッケル（例えば、ニッケル元素、またはその合金）を含む。
【０１０７】
いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層は、エッチングされ、実質的に透明なポリマー層の中心部分上に堆積されている磁性の実質的に不透明な層の一部を除去し得る。磁性の実質的に不透明な層は、本分野において公知の任意の方法によってエッチングされ得る。例えば、いくつかの実施形態において、磁性の実質的に不透明な層は、慣習的なウェットエッチングによってエッチングされている。磁性の実質的に不透明な層に関する例示的な寸法、形状、および必要に応じた非対称は、上で提供されている。
【０１０８】
いくつかの実施形態において、本開示の第二の実質的に透明なポリマー層は、磁性の実質的に不透明な層上に堆積されている。いくつかの実施形態において、第二の実質的に透明なポリマー層は、互いに平行な、第一の表面および第二の表面（例えば、単一層の上面および下面）を有する。いくつかの実施形態において、第二の表面は、磁性の実質的に不透明な層に貼り付けられておる。いくつかの実施形態において、第二の実質的に透明なポリマー層は、第一の実質的に透明なポリマー層と整列しており、実質的に透明なポリマー層の中心部分と整列している中心部分を有する。実質的に透明なポリマー層の中心部分に関する例示的な寸法は、上で提供されている。
【０１０９】
いくつかの実施形態において、本開示の実質的に不透明なポリマー層は、第二の実質的に透明なポリマー層の第一の表面上に堆積されている。いくつかの実施形態において、実質的に不透明なポリマー層は、第一の実質的に透明なポリマー層および第二の実質的に透明なポリマー層の中心部分を囲む。いくつかの実施形態において、実質的に不透明なポリマー層は、アナログコードを表す二次元形状を含む。本明細書において記載されている、または例示されている二次元形状のいずれか、例えば、本開示のギア形状が、使用され得る。いくつかの実施形態において、実質的に不透明なポリマー層は、第二の実質的に透明なポリマー層上に堆積されており、（例えば、標準的なリソグラフィーのプロセスを使用して）所望の二次元形状にエッチングされる。
【０１１０】
いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い柱は、実質的に透明なポリマー層上、例えば、第二の実質的に透明なポリマー層の第一の表面上の実質的に不透明なポリマー層によって覆われていない部分に堆積され得る。１つまたはそれより多い柱は、例えば、標準的なリソグラフィーのプロセスを使用して、本明細書において記載されているように堆積され得る。
【０１１１】
本開示の必要に応じた犠牲層および／または基材を利用するいくつかの実施形態において、溶媒を使用して、犠牲層が、溶解され、もしくははがされ、かつ／または基材が、除去され得る。（例えば、標準的な半導体またはＭＥＭＳ作製プロセス、例えば、フォトレジスト除去における）作製に有用な種々の溶媒は、本分野において公知である。いくつかの実施形態において、溶媒は、ＤＭＳＯまたは１−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）を基にした溶媒などのフォトレジスト剥離溶媒である。いくつかの実施形態において、溶媒は、ＡＺ（登録商標）３００Ｔ（ＡＺ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ；Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，ＮＪ）などのＡＺ（登録商標）フォトレジスト剥離剤である。
【０１１２】
いくつかの実施形態において、方法は、本開示の犠牲層を本開示の基材上に堆積させることを含有する。犠牲層、基材、および適切な堆積方法は、例えば、上に記載されている。
【０１１３】
いくつかの実施形態において、本開示の実質的に不透明なポリマー層は、犠牲層上に堆積されている。いくつかの実施形態において、実質的に不透明なポリマー層は、互いに平行である、第一の表面および第二の表面（例えば、単一層の上面および下面）を有する。いくつかの実施形態において、第二の表面は、犠牲層に貼り付けられている。
【０１１４】
いくつかの実施形態において、実質的に不透明なポリマー層の外形は、例えば、本明細書において記載されているようなアナログコードを表す二次元形状に形成される。実質的に不透明なポリマー層は、本分野において公知の、または本明細書において記載されている任意の方法によって、例えば、スピンコーティング、ソフトベーキング、ＵＶ曝露、エッチングおよびハードベーキングが挙げられるが、それに限定されない標準的なリソグラフィーのプロセスを使用して、形成される。
【０１１５】
いくつかの実施形態において、例えば、上記のような溶媒を使用して、犠牲層が、溶解され、もしくははがされ得、かつ／または基材が、除去され得る。
【０１１６】
他の実施形態において、本開示の磁性材料を含む磁性層は、犠牲層上に堆積されている。例示的な磁性材料、磁性層の形状／寸法、およびそれに関する堆積方法は、上に提供されている。例えば、いくつかの実施形態において、磁性層は、例えば、柱９０６によって示されているような１つまたはそれより多い柱に形成され得る。他の実施形態において、磁性層は、２つの不透明なポリマー層の間にあり得、例えば、磁性層７０４によって示されるように埋め込まれている。磁性材料は、例えば、本明細書において記載されている磁性材料のいずれを含有してもよい。例えば、いくつかの実施形態において、磁性材料は、ニッケル（ニッケル元素またはその合金）を含む。
【０１１７】
いくつかの実施形態において、本開示の実質的に不透明なポリマー層は、磁性層上に堆積される。いくつかの実施形態において、実質的に不透明なポリマー層は、互いに平行な、第一の表面および第二の表面（例えば、単一層の上面および下面）を有する。いくつかの実施形態において、実質的に不透明なポリマー層の表面（例えば、第二の表面）は、磁性層に貼り付けられている。
【０１１８】
いくつかの実施形態において、実質的に不透明なポリマー層の外形は、例えば、上記のようなアナログコードを表す二次元形状に形成される。
【０１１９】
いくつかの実施形態において、例えば、上記のような溶媒を使用して、犠牲層が、溶解され、もしくははがされ得、かつ／または基材が、除去され得る。
【０１２０】
例示的なマイクロキャリアの形状、寸法および上記方法に適した必要に応じた特徴は、本開示を通して提供されている。
【０１２１】
いくつかの実施形態において、捕捉剤は、本開示のマイクロキャリア、例えば、本明細書において記載されているマイクロキャリアおよび／または本明細書において記載されている方法のいずれかによって生成されたマイクロキャリアに連結され得る。本明細書において記載されている捕捉剤のいずれか、または本明細書において記載されている分析物の捕捉に適している本分野において公知の捕捉剤は、本開示の方法および／またはマイクロキャリアにおいて有用であり得る。
【０１２２】
いくつかの実施形態において、捕捉剤は、本開示のポリマー層、例えば、本明細書において記載されている実質的に透明なポリマー層または実質的に不透明なポリマー層に連結され得る。いくつかの実施形態において、捕捉剤は、ポリマー層の第一の表面または第二の表面の一方または両方に連結され得る。いくつかの実施形態において、捕捉剤は、ポリマー層の少なくとも中心部分（例えば、本明細書において記載されているような中心部分）に連結され得る。いくつかの実施形態において、ポリマーは、エポキシを基にしたポリマーを含むか、そうでなければエポキシド基を含有する。
【０１２３】
いくつかの実施形態において、捕捉剤を連結することは、ポリマーを光酸ジェネレータおよび光と反応させて、架橋されたポリマーを生成することを伴う。いくつかの実施形態において、光は、光酸ジェネレータを活性化する波長の光、例えば、ＵＶまたは近紫外光である。光酸ジェネレータは、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）およびＢＡＳＦ（Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ）から市販されている。本分野において公知の任意の適切な光酸ジェネレータが、使用され得、トリフェニルもしくはトリアリールスルホニウムヘキサフルオロアンチモネート；トリアリールスルホニウムヘキサフルオロホスフェート；トリフェニルスルホニウムペルフルオロ−１−ブタンスルホネート；トリフェニルスルホニウムトリフレート；トリス（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）スルホニウムペルフルオロ−１−ブタンスルホネートもしくはトリフレート；ビス（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）ヨードニウムペルフルオロ−１−ブタンスルホネート、ｐ−トルエンスルホネート、およびトリフレートなどのビス（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）ヨードニウム含有光酸ジェネレータ；Ｂｏｃ−メトキシフェニルジフェニルスルホニウムトリフレート；（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシナフチル）−ジフェニルスルホニウムトリフレート；（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）ジフェニルスルホニウムトリフレート；ジフェニルヨードニウムヘキサフルオロホスフェート、ニトレート、ペルフルオロ−１−ブタンスルホネート、トリフレート、もしくはｐ−トルエンスルホネート；（４−フルオロフェニル）ジフェニルスルホニウムトリフレート；Ｎ−ヒドロキシナフタルイミドトリフレート；Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２，３−ジカルボキシイミドペルフルオロ−１−ブタンスルホネート；（４−ヨードフェニル）ジフェニルスルホニウムトリフレート；（４−メトキシフェニル）ジフェニルスルホニウムトリフレート；２−（４−メトキシスチリル）−４，６−ビス（トリクロロメチル）−１，３，５−トリアジン；（４−メチルフェニル）ジフェニルスルホニウムトリフレート；（４−メチルチオフェニル）メチルフェニルスルホニウムトリフレート；（４−フェノキシフェニル）ジフェニルスルホニウムトリフレート；（４−フェニルチオフェニル）ジフェニルスルホニウムトリフレート；またはｐｒｏｄｕｃｔ−ｆｉｎｄｅｒ．ｂａｓｆ．ｃｏｍ／ｇｒｏｕｐ／ｃｏｒｐｏｒａｔｅ／ｐｒｏｄｕｃｔ−ｆｉｎｄｅｒ／ｄｅ／ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ−ｄｏｃｕｍｅｎｔ：／Ｂｒａｎｄ＋Ｉｒｇａｃｕｒｅ−Ｂｒｏｃｈｕｒｅ−−Ｐｈｏｔｏａｃｉｄ＋Ｇｅｎｅｒａｔｏｒ＋Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ＋Ｇｕｉｄｅ−Ｅｎｇｌｉｓｈ．ｐｄｆにおいて記載されている光酸ジェネレータのいずれかが挙げられるが、それに限定されない。いくつかの実施形態において、光酸ジェネレータは、スルホニウム含有光酸ジェネレータである。
【０１２４】
いくつかの実施形態において、捕捉剤を連結することは、架橋されたポリマーのエポキシドを官能基、例えば、アミン、カルボキシル、チオールなどと反応させることを伴う。あるいは、表面上のエポキシ基は、ヒドロキシル基に酸化され得、それは後に水溶性ポリマー、例えば、ポリ（アクリル酸）のグラフト重合の開始位置として使用される。ポリ（アクリル酸）中のカルボキシル基は、次いで、捕捉剤中のアミノ基またはヒドロキシル基と共有結合を形成するために使用される。
【０１２５】
いくつかの実施形態において、捕捉剤を連結することは、架橋されたポリマーのエポキシドをアミンおよびカルボキシルを含有する化合物と反応させることを伴う。いくつかの実施形態において、化合物のアミンは、エポキシドと反応し、化合物が連結された、架橋されたポリマーを形成する。理論に拘束されることを望むことなく、ポリマーが架橋される前に、捕捉剤はポリマーに連結され得ると考えられるが、しかしながら、これは生じる表面の均一性を減少させ得る。第一級アミンおよびカルボキシル基を伴う任意の化合物が、使用され得る。化合物としては、グリシン、アミノウンデカン酸、アミノカプロン酸、アクリル酸、２−カルボキシエチルアクリル酸、４−ビニル安息香酸、３−アクリルアミド−３−メチル−ｌ−ブタン酸、グリシジルメタクリレートなどが挙げられ得るが、それに限定されない。いくつかの実施形態において、化合物が連結された、架橋されたポリマーのカルボキシルは、捕捉剤のアミン（例えば、第一級アミン）と反応し、捕捉剤を実質的に透明なポリマーに連結する。
【０１２６】
上記の方法に適した種々の捕捉剤および分析物の記載は、本開示を通して、例えば、上記のＩＩＩ節および／または以下の実施例において見出され得る。
【０１２７】
Ｖ．  マルチプレックスアッセイ
本開示のある局面は、コード化されたマイクロキャリア、例えば、本明細書において記載されているマイクロキャリアを使用することによって溶液中の分析物を検出するための方法に関する。本明細書、例えば、上記のＩＩＩ節およびＩＶ節ならびに／または以下の実施例において記載されているマイクロキャリアの特徴または性質のうちの１つまたはそれより多くを含有するコード化されたマイクロキャリアを使用する分析物検出のための方法である。好都合なことに、これらのコード化されたマイクロキャリアは、改善されたマルチプレックスアッセイであって、伝統的なマルチプレックスアッセイと比較して、多数の可能性のある固有のマイクロキャリアおよび減少した認識エラーを伴う、マルチプレックスアッセイにおける分析物検出を可能にする。本明細書において使用されている分析物検出方法は、本分野において公知の、任意の適切なアッセイ容器、例えば、マイクロプレート、ペトリ皿、または任意の数の、他の周知のアッセイ容器内で実施され得る。
【０１２８】
いくつかの実施形態において、溶液中の分析物の検出のための方法は、第一の分析物および第二の分析物を含む溶液を複数のマイクロキャリアと接触させることであって、そこで、複数のマイクロキャリアは、第一の分析物を特異的に捕捉し、第一のアナログコードでコード化されている本開示の第一のマイクロキャリアと、第二の分析物を特異的に捕捉し、第二のアナログコードでコード化されている本開示の第二のマイクロキャリアとを少なくとも含む、接触させること；第一のアナログコードおよび第二のアナログコードを、アナログ形状認識を使用して解読し、第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアを識別すること；ならびに第一のマイクロキャリアに結合した第一の分析物の量および第二のマイクロキャリアに結合した第二の分析物の量を検出することを含む。
【０１２９】
いくつかの実施形態において、方法は、第一の分析物および第二の分析物を含む溶液を複数のマイクロキャリアと接触させることを含有する。いくつかの実施形態において、複数のマイクロキャリアは、（例えば、マイクロキャリアに連結されている、第一の分析物に特異的な捕捉剤を使用して）第一の分析物を特異的に捕捉する本開示の第一のマイクロ
キャリアであって、そこで、第一のマイクロキャリアが第一のアナログコードでコード化されている、第一のマイクロキャリア；および（例えば、マイクロキャリアに連結されており、第二の分析物に特異的な、捕捉剤を使用して）第二の分析物を特異的に捕捉する本開示の第二のマイクロキャリアであって、そこで、第二のマイクロキャリアが第一のアナログコードと異なる第二のアナログコードでコード化されている、第二のマイクロキャリアを含有し得る。いくつかの実施形態において、第一の分析物および第二の分析物は、異なり得る。他の実施形態において、第一の分析物および第二の分析物は、同一であり得、例えば、第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアは、同一の分析物を重複して認識してもよいし（これは、例えば、品質管理の目的のために有用であり得る）、またはそれらは同一の分析物の別の領域を認識してもよい（例えば、同一の抗原の異なるエピトープを認識する抗体）。
【０１３０】
本開示の方法は、任意の適切な溶液中の分析物を検出するために使用され得る。いくつかの実施形態において、溶液は、生物学的サンプルを含む。生物学的サンプルの例としては、血液、尿、痰、胆汁、脳脊髄液、皮膚または脂肪組織の間質液、唾液、涙、気管支肺胞洗浄、口腔咽頭分泌物、腸液、経膣部または子宮分泌物および精液が挙げられるが、それに限定されない。いくつかの実施形態において、生物学的サンプルは、ヒト由来であり得る。他の実施形態において、溶液は、生物学的サンプルでないサンプル、例えば、環境サンプル、研究室で調製されたサンプル（例えば、調製、単離、精製および／または合成された１つまたはそれより多い分析物を含有するサンプル）、固定されたサンプル（例えば、ホルマリン固定パラフィン包埋（またはＦＦＰＥ）サンプル）などを含む。
【０１３１】
いくつかの実施形態において、分析は、多重であり、すなわち、それぞれの溶液（例えば、サンプル）は分析され、その結果シグナル放射実体からのシグナルは、少なくとも２つの目的の分析物、少なくとも３つの目的の分析物、少なくとも４つの目的の分析物、少なくとも５つの目的の分析物、少なくとも１０つの目的の分析物、少なくとも１５つの目的の分析物、少なくとも２０つの目的の分析物、少なくとも２５つの目的の分析物、少なくとも３０つの目的の分析物、少なくとも３５つの目的の分析物、少なくとも４０つの目的の分析物、少なくとも４５つの目的の分析物もしくは少なくとも５０つの目的の分析物、またはそれより多くについて反応検出システムによって検出される。
【０１３２】
いくつかの実施形態において、方法は、第一のアナログコードおよび第二のアナログコードをアナログ形状認識を使用して解読し、第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアを識別することを含有する。概念的には、この解読は、それぞれのマイクロキャリア（例えば、溶液またはサンプル中）のアナログコードをイメージングすること、それぞれの画像をアナログコードのライブラリーと比較すること、およびそれぞれの画像をライブラリーからの画像と一致させることを伴い得、そうすることで最終的にコードを識別する。本明細書において記載されている場合、必要に応じて、方向インジケーター（例えば、非対称）を含有するマイクロキャリアを使用するとき、解読は、それぞれの画像を回転させ、特定の方向に整列させる（部分的には、例えば、方向インジケーターに基づいて）工程をさらに含有し得る。例えば、方向インジケーターがギャップを含有する場合、画像は、ギャップが前もって決められた位置または方向（例えば、画像の０°の位置）に達するまで回転され得る。
【０１３３】
種々の形状認識ソフトウェア、ツールおよび方法が、本分野において公知である。そのようなＡＰＩおよびツールの例としては、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ（登録商標）  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＦａｃｅＳＤＫ、ＯｐｅｎＢＲ、Ｆａｃｅ  ａｎｄ  Ｓｃｅｎｅ  Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｆｒｏｍ  ＲｅＫｏｇｎｉｔｉｏｎ、Ｂｅｔａｆａｃｅ  ＡＰＩ、および種々のＩｍａｇｅＪのプラグインが挙げられるが、それに限定されない。いくつかの実施形態において、アナログ形状認識としては、画像プロセシング工程、例えば、前景抽出、形
状検出、二値化（例えば、自動または手動の画像二値化）などが挙げられ得るが、それに限定されない。
【０１３４】
本明細書において記載されている方法およびマイクロキャリアは、顕微鏡、プレートリーダーなどが挙げられるが、それに限定されない種々のイメージング装置に適応され得ることは、当業者によって認識される。いくつかの実施形態において、アナログコードを解読することは、第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアの実質的に透明な部分（例えば、実質的に透明なポリマー層）ならびに／または周囲の溶液に光を通すことによって第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアを照射することを含有し得る。次いで、光は、第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアの実質的に不透明な部分（例えば、実質的に不透明なポリマー層）を通らなくてもよいし、またはより低い強度もしくは他の明らかな差を伴って通ってもよく、第一のマイクロキャリアに対応する第一のアナログコード化光パターンおよび第二のマイクロキャリアに対応する第二のアナログコード化光パターンを生成する。
【０１３５】
上記のように、任意のタイプの光学顕微鏡が、本開示の方法のために使用され得、当該光学顕微鏡は、明視野、暗視野、位相差、微分干渉コントラスト（ＤＩＣ）、ノルマスキー型干渉コントラスト（ＮＩＣ）、ノルマスキー、ホフマンモジュレーションコントラスト（ＨＭＣ）、または蛍光顕微鏡のうちの１つまたはそれより多くを、それに限定することなく含有する。ある実施形態において、アナログコードは、明視野顕微鏡を使用することで解読され得、分析物は、蛍光顕微鏡を使用することで検出され得る。
【０１３６】
いくつかの実施形態において、アナログコードを解読することは、第一のアナログコード化光パターンをイメージングし、第一のアナログコード化画像を生成すること、および第二のアナログコード化光パターンをイメージングし、第二のアナログコード化画像を生成することをさらに含有し得る。すなわち、イメージングされた光のパターンは、マイクロキャリアの実質的に透明／実質的に不透明な領域のパターンに対応し得、そうすることでアナログコードの画像を生成する。このイメージングは、画像を捕捉すること、画像を二値化すること、およびアナログコードのより正確な、精密な、または左右されない（ｒｏｂｕｓｔ）イメージングを達成するために所望の他の任意の画像プロセシング工程が挙げられるが、それに限定されない工程を含有し得る。
【０１３７】
いくつかの実施形態において、アナログコードを解読することは、アナログコード認識を使用して、第一のアナログコード化画像を第一のアナログコードと一致させることおよび第二のアナログコード化画像を第二のアナログコードと一致させることをさらに含有し得る。いくつかの実施形態において、画像は、前もって決められた閾値内、例えば、画像と見本のアナログコードの画像との間の偏差およびミスマッチの前もって決められた量を容認する、閾値内で、アナログコード（例えば、それぞれの画像ファイルが固有の二次元形状／アナログコードに対応する画像ファイルのライブラリーからの画像ファイル）と一致させられ得る。そのような閾値は、経験的に決定されてもよいし、当然ながら、アナログコードのために使用された特定のタイプの二次元形状および可能性のある二次元形状のセット間の変動の程度に基づいてもよい。
【０１３８】
いくつかの実施形態において、方法は、第一のマイクロキャリアに結合した第一の分析物の量および第二のマイクロキャリアに結合した第二の分析物の量を検出することを含有する。本分野において公知の、任意の適切な分析物検出技術が、使用され得る。例えば、いくつかの実施形態において、第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアは、１つまたはそれより多い検出剤と共にインキュベートされ得る。いくつかの実施形態において、１つまたはそれより多い検出剤は、第一のマイクロキャリアによって捕捉された第一の分析物および第二のマイクロキャリアによって捕捉された第二の分析物に結合する
。いくつかの実施形態において、方法は、第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアに結合した検出剤の量を測定することをさらに含有する。
【０１３９】
いくつかの実施形態において、溶液（生物学的サンプルなど）中の分析物は、捕捉剤と結合する際に検出可能なシグナルを放射できる検出剤（例えば、シグナル放射実体）で標識され得る。いくつかの実施形態において、検出剤は、比色を基にしたものであり得る。他の実施形態において、検出剤は、フィコエリスリン、青色蛍光タンパク質、緑色蛍光タンパク質、黄色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、およびその誘導体が挙げられるが、それに限定されない蛍光を基にしたものであり得る。他の実施形態において、検出剤は、３２Ｐ、３３Ｐ、２２Ｎａ、３６Ｃｌ、２Ｈ、３Ｈ、３５Ｓ、および１２３Ｉで標識された分子が挙げられるが、それに限定されない放射性同位体を基にしたものであり得る。他の実施形態において、検出剤は、ルシフェラーゼ（例えば、化学発光を基にしたもの）、西洋わさびペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、およびその誘導体が挙げられるが、それに限定されない光を基にしたものである。いくつかの実施形態において、溶液中に存在する生体分子または化学化合物は、マイクロキャリア組成物と接触させる前に検出剤で標識され得る。他の実施形態において、溶液中に存在する生体分子または化学化合物は、マイクロキャリア組成物と接触させた後に検出剤で標識され得る。さらに他の実施形態において、検出剤は、目的の分析物に特異的に結合する分子または巨大分子構造、例えば、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および／または抗体断片に連結され得る。
【０１４０】
いくつかの実施形態において、検出剤は、蛍光性の検出剤であり、第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアに結合した検出剤の量は、蛍光顕微鏡（例えば、蛍光性の顕微鏡またはプレートリーダー）によって測定される。他の実施形態において、検出剤は、発光性の検出剤であり、第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアに結合した検出剤の量は、発光顕微鏡（例えば、発光性の顕微鏡またはプレートリーダー）によって測定される。
【０１４１】
いくつかの実施形態において、それぞれの分析物／捕捉剤は、特異的な検出剤と共に使用され得る。非限定的な例として、検出剤は、分析物に特異的に結合する抗体；または、分析物がリガンド−受容体ペアの同起源のリガンド／受容体である場合、リガンド−受容体ペアのリガンドもしくは受容体に連結された検出剤（例えば、蛍光、発光、酵素、もしくは他の検出剤）であり得る。この技術は、捕捉抗体および検出抗体を含有するサンドウィッチＥＬＩＳＡまたはタンパク質マイクロアレイと概念的に類似する（この場合、この例における薬剤は厳密に抗体に限定されないことは注意されるべきであるが）。別の非限定的な例として、検出剤は、蛍光性の、または他の検出可能な、目的のタンパク質、例えば、標識された目的の分析物に連結されたプローブであり得る。例えば、目的の溶液（例えば、サンプル）において、検出剤を１つまたはそれより多いタンパク質に連結する反応が使用され得、それは、次いで、捕捉剤によって捕捉される（抗原捕捉タイプのタンパク質マイクロアレイと概念的に類似する）。
【０１４２】
他の実施形態において、複数の固有の分析物／捕捉剤が、普遍的な検出剤と共に使用され得る。非限定的な例として、検出剤は、分析物が抗体である場合、抗体のＦｃ領域に結合する薬剤であり得；分析物がポリヌクレオチド、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡである場合、オリゴヌクレオチドに連結された蛍光性の、または他の検出可能なプローブ（例えば、分析物とハイブリダイズする一本鎖オリゴヌクレオチド）であり得る。後者の概要は、マイクロアレイ技術と概念的に類似する。
【０１４３】
いくつかの実施形態において、検出工程は、１つまたはそれより多い洗浄工程、例えば
、混入物を減少させるための洗浄工程、捕捉剤および／またはマイクロキャリアの表面に非特異的に結合した任意の物質を除去するための洗浄工程などを含有し得る。いくつかの実施形態において、本開示の磁性層または磁性材料を含有するマイクロキャリアを洗浄するために磁性分離工程が、使用され得る。他の実施形態において、本分野において公知の他の分離工程が、使用され得る。
【０１４４】
いくつかの実施形態において、解読工程は、検出工程の後に起こり得る。他の実施形態において、解読工程は、検出工程の前に起こり得る。さらに他の実施形態において、解読工程は、検出工程と同時に起こり得る。
【０１４５】
ＶＩ．  キットまたは製品
本開示の複数のマイクロキャリアを含有するキットまたは製品が、本明細書においてさらに提供される。これらのキットまたは製品は、マルチプレックスアッセイ、例えば、本明細書において記載されている例示的なマルチプレックスアッセイの実施において、とりわけ有用であり得る（例えば、上部のＶ節を参照されたい）。
【０１４６】
いくつかの実施形態において、キットまたは製品は、（例えば、マイクロキャリアに連結された、第一の分析物に特異的な捕捉剤を使用して）第一の分析物を特異的に捕捉する本開示の第一のマイクロキャリアであって、そこで、第一のマイクロキャリアは第一のアナログコードでコード化されている、マイクロキャリア；および（例えば、マイクロキャリアに連結された、第二の分析物に特異的な捕捉剤を使用することで）第二の分析物を特異的に捕捉する本開示の第二のマイクロキャリアであって、そこで、第二のマイクロキャリアは第二のアナログコードでコード化されている、マイクロキャリアを含有し得る。いくつかの実施形態において、第一の分析物および第二の分析物は、異なり得る。他の実施形態において、第一の分析物および第二の分析物は、同一であり得、例えば、第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアは、同一の分析物を重複して認識し得、（これは、例えば品質管理の目的のために有用であり得る）、またはそれらは同一の分析物の別の領域を認識し得る（例えば、同一の抗原の異なるエピトープを認識する抗体）。キットまたは製品は、本明細書において記載されているマイクロキャリア（例えば、上記のＩＩＩ節および下部の実施例を参照されたい）または本明細書において記載されている方法を使用して生成されたマイクロキャリア（例えば、上記のＩＶ節および下部の実施例を参照されたい）のいずれかを含有し得る。
【０１４７】
いくつかの実施形態において、キットまたは製品は、第一のマイクロキャリアに結合した第一の分析物の量および第二のマイクロキャリアに結合した第二の分析物の量を検出するための本開示の１つまたはそれより多い検出剤をさらに含有し得る。いくつかの実施形態において、第一の分析物のための検出剤は、第二の分析物のための検出剤と同一であり得る。他の実施形態において、第一の分析物のための検出剤は、第二の分析物のための検出剤と異なり得る
【０１４８】
いくつかの実施形態において、キットまたは製品は、このキットまたは製品を使用して１つまたはそれより多い分析物、例えば、第一の分析物および第二の分析物を検出するための説明書をさらに含有し得る。これらの説明書は、例えば、本明細書において記載されている方法のいずれかにおいてキットまたは製品を使用するためであり得る。
【０１４９】
いくつかの実施形態において、キットまたは製品は、１つまたはそれより多い検出剤（例えば、上記のような）に加えて、任意の説明書あるいは検出剤を１つもしくはそれより多い分析物に連結させるため、または分析物を認識する１つまたはそれより多い大分子に検出剤を連結させるために適切な薬剤をさらに含有し得る。キットまたは製品は、アッセイ（例えば、マルチプレックスアッセイ）においてマイクロキャリアを使用するための任
意の追加の成分であって、プレート（例えば、９６ウェルもしくは他の類似のマイクロプレート）、ディッシュ、スライドガラス、もしくは他の適切なアッセイ容器；非一時的なコンピュータ可読貯蔵媒体（例えば、アナログ形状またはコード認識のためのソフトウェアおよび／または説明書を含有する）；洗浄剤；緩衝液；プレートシーラー；混合容器；希釈剤または貯蔵溶液などを含有するが、それに限定されない、成分をさらに含有し得る。
【実施例】
【０１５０】
実施例
本発明は、以下の実施例を参照することによってより完全に理解される。しかしながら、それらは、本発明の範囲を限定すると解釈されるべきではない。本明細書に記載されている実施例および実施形態は、例示のみを目的とし、それに照らして種々の改変および変更が、当業者に示唆され、本出願の精神および範囲ならびに添付された特許請求の範囲の範囲内に含有されることが、理解される。
【０１５１】
ここで、マルチプレックスアッセイ（例えば、分析物検出）のためのマイクロキャリアおよびそれらの生成方法に、注意を向ける。以下の実施例は、特に、本明細書において記載されている方法、アッセイ、およびキットまたは製品において有用であり得る、分析物検出のためのアナログコード化マイクロキャリアの例示的な実施形態を示す。これらの例示的な実施形態は、決して限定することを意図せず、本明細書において記載される性質および特徴のいくつかを示すために提供されることは、注意されるべきである。
【０１５２】
実施例１：二次元のアナログコードおよび均一な形状を有するコード化されたマイクロキャリア
上記のように、アナログコード化されたマイクロキャリアは、莫大な数の可能性のある固有の識別子および減少した認識エラーにより、マルチプレックスアッセイに非常に好都合である。この実施例は、二次元形状でコード化された種々のタイプのマイクロキャリアを記載し、それは識別のためのアナログコードとして使用し得る。本開示のコード化されたマイクロキャリアは、任意の組み合わせで以下に記載の必要に応じた特徴のいくつかまたは全てを含有し得ることは理解されるべきである。
【０１５３】
図１Ａおよび１Ｂは、例示的なマイクロキャリア１００の２つの視図を示す。マイクロキャリア１００は、直径が約５０μｍかつ厚さが１０μｍの円板である。図１Ａは、円板の円形表面を見る、マイクロキャリア１００の視図を提供し、他方で、図１Ｂは、図１Ａにおいて示される表面と直交するマイクロキャリア１００の側面視図を示す。マイクロキャリア１００の２つの構成要素が示される。第一に、実質的に透明なポリマー層１０２が、マイクロキャリアの本体を提供する。層１０２を、例えば、上記のように、ポリマー、例えば、ＳＵ−８を使用して生成し得る。
【０１５４】
実質的に不透明な層１０４を、層１０２の表面に貼り付ける。図１Ｂにおいて示されるマイクロキャリア１００の断面図は、層１０４の不連続な視図を示す一方で、図１Ａにおいて示される視図は、層１０４が、複数の歯を伴う円形のギアのように形成されていることを示す。これらの歯の形状、数、大きさ、および間隔が二次元形状を構成し、歯のこれらの性質のうちの１つまたはそれより多くを、アナログコード化のための複数の二次元形状を生成するために改変してもよい。好都合なことに、層１０４の歯の外縁は、層１０２の外周内にうまくはまる。これは、種々のアナログコードが、マイクロキャリアの１種についてある固有の識別子をそれぞれ表すことを可能にし、他方でマイクロキャリアの複数種にわたって、均一な全体形状を維持する。別の方法で言うと、複数種の集団内のそれぞれのマイクロキャリア種は、異なる二次元ギア形状（すなわち、アナログコード）を有し得るが、それぞれのマイクロキャリアは、同一の外周を有し、物理的性質（例えば、大き
さ、形状、溶液中の挙動など）のより大きな均一性をもたらす。層１０４を、例えば、上記のように、ポリマー、例えば、色素と混合されたＳＵ−８を使用して、またはブラックマトリクス用レジストを使用して、生成してもよい。
【０１５５】
層１０４は、層１０２の中心部分１０６を囲む。分析物を捕捉するための捕捉剤を、層１０２の一方または両方の表面（すなわち、上面／下面）上で、少なくとも中心部分１０６に連結する。好都合なことに、これは、層１０４に起因する干渉に関するいずれの可能性も伴わずに、中心部分１０６をイメージングすることを可能にする。
【０１５６】
図１Ｃおよび１Ｄは、分析物検出のためのマイクロキャリア１００を使用する例示的なアッセイを示す。図１Ｃは、マイクロキャリア１００が、少なくとも中心部分１０６において、１つまたはそれより多い表面に連結されている捕捉剤１０８を含有し得ることを示す。マイクロキャリア１００を、捕捉剤１０８に捕捉されている分析物１１０を含有する溶液と接触させる。上記のように、種々の捕捉剤を、小分子、核酸およびタンパク質（例えば、抗体）から細胞内小器官、ウイルスおよび細胞までの範囲の異なるタイプの分析物を捕捉するために使用してもよい。図１Ｃは、分析物１１０を捕捉する単一のマイクロキャリア種（すなわち、マイクロキャリア１００）を示すが、マルチプレックスアッセイにおいて複数のマイクロキャリア種が使用されており、それぞれの種は、特定の分析物を認識する特定の捕捉剤を有する。
【０１５７】
図１Ｄは、マイクロキャリア１００を「読む」ための例示的なプロセスを示す。このプロセスは、同時にまたは別々に達成され得る２つの工程を含有する。第一に、捕捉剤１０８による分析物１１０の捕捉を検出する。図１Ｄにおいて示される実施例において、検出剤１１４は、分析物１１０に結合する。マイクロキャリア１００に連結されている捕捉剤によって捕捉されていない分析物を、検出の前に洗い落としてもよく、その結果、マイクロキャリア１００に結合した分析物だけが検出される。検出剤１１４はまた、検出のための試薬も含有する。一例として、検出剤１１４は、フルオロフォアの励起スペクトル内の波長の光１１６によって励起される場合、光１１８（例えば、光子）を放射するフルオロフォアを含有し得る。光１１８を、任意の適切な検出方法、例えば、蛍光顕微鏡、プレートリーダーなどによって検出してもよい。
【０１５８】
さらに、マイクロキャリア１００を、その固有の識別子について読む。図１Ｄにおいて示される実施例において、光１１２を、マイクロキャリア１００を含有する領域を照射するために使用する（いくつかの実施形態において、光１１２は、光１１６および光１１８と異なる波長を有し得る）。光１１２がマイクロキャリア１００を含有する領域を照射する場合、図１Ｄにおいて示されるように、光は実質的に透明なポリマー層１０２を通過するが、実質的に不透明なポリマー層１０４によって妨げられる。これは、例えば、光学顕微鏡によって（例えば、微分干渉コントラスト、つまりＤＩＣ、顕微鏡を使用して）イメージングされ得る光パターンを生成する。この光パターンは、マイクロキャリア１００の二次元形状（すなわち、アナログコード）に基づく。標準的な画像認識技術を、マイクロキャリア１００の画像によって表されているアナログコードを解読するために使用してもよい。
【０１５９】
分析物検出および識別子イメージング工程は、任意の順番で、または同時に起こり得る。好都合なことに、図１Ｄにおいて示される両方の検出工程は、１つのイメージング装置上で達成され得る。一例として、蛍光顕微鏡および光学（例えば、明視野）顕微鏡の両方であり得る顕微鏡を、マイクロキャリア１００に結合した分析物１１０の量を定量するために（例えば、検出剤１１４によって検出されるような）、および層１０２および層１０４によって創出されたアナログコードをイメージングするために使用してもよい。これは、より少ない設備要求でのより効率的なアッセイプロセスを可能にする。
【０１６０】
次に、図２Ａおよび図２Ｂに注意を向けると、別の例示的なマイクロキャリア２００が示される。マイクロキャリア１００のように、マイクロキャリア２００は、実質的に透明なポリマー層２０２および実質的に不透明なポリマー層２０４を含有する。さらに、マイクロキャリア２００は、磁性層２０６を含有する。図２Ａにおいて示されるように、磁性層２０６を、中心部分２０８と実質的に不透明な層２０４との間の輪のように形成してもよい。
【０１６１】
図２Ｂは、磁性層２０６を層２０２内に埋め込んでもよいことを示す。層２０２はまた、１つより多い層を含有し得、その結果、磁性層は２つの実質的に透明なポリマー層の間に挟まれる（例えば、図２Ｂのように）。あるいは、磁性層２０６を、層２０２の表面であって、層２０４と同一の表面に貼り付けてもよく、または磁性層２０６を、層２０２の表面であって、層２０４と反対の表面に貼り付けてもよい。いくつかの実施形態において、磁性層２０６は、ニッケルを含有し得る。
【０１６２】
磁性層２０６は、マイクロキャリア２００に磁性の性質を与え、それは、好都合なことに、多くの適用のために使用し得る。例えば、マイクロキャリア２００を、洗浄工程中に磁気引力によって表面に貼り付けてもよく、マイクロキャリアを失う、またはそうでなければ崩壊させることなく有効な洗浄を可能にする。
【０１６３】
磁性の性質に加えて、層２０６はまた、実質的に不透明でもある。図１Ｄにおいて示されるようにイメージングする場合（例えば、光１１２を使用して）、層２０６は、伝導された光を、一部または全部のいずれかで妨げ、それによって、イメージングに関するパターンを創出する。図２Ａにおいて示されるように、層２０６はまた、非対称であり、本実施例において、ギャップ２１０を含有する。この非対称は、例えば、光１１２を使用して図１Ｄにおいて示されるようにイメージングされ得る方向インジケーターを創出する。好都合なことに、方向インジケーターは、層２０４をイメージングすることによって創出された二次元形状を、より容易なアナログコード認識のために均一な方向に方向付けるために画像認識中に利用され得る。これは、任意の方向でイメージングされるマイクロキャリアを、解読することを可能にする。
【０１６４】
図３は、図１Ａ〜図２Ｂにおいて示されるギア形状を使用した膨大な数の可能な可能性のあるアナログコードを示す。図３は、例示的なコード化スキームを示し、スキームにおいて複数の形状変動点、例えば、例示的なマイクロキャリア３００上の位置３０２、３０４、３０６、３０８、３１０、３１２、３１４、３１６、３１８、３２０、３２２、３２４、３２６および３２８が標識されている。たとえ単純な「充填されているか、または充填されていないか」のスキームを使用する場合であったとしても、２１４個までの固有のコードが、１４つの形状変動点の使用に基づいて可能である。このスキームは、画像認識分析で容易に区別できる二次元形状の製造および生成の両方で便利である。しかしながら、アナログコード化を使用するので、２つより多い可能性（例えば、図３において標識されるようなそれぞれの形状変動点において）を使用する、より複雑なスキームが可能であり、それによって、固有の識別子の数を指数関数的に拡大させる。例えば、複数の歯の形状および／または歯の複数の大きさが可能である。図１Ａ〜３において示されるような二次元ギア形状は、広範囲の固有のアナログコードを容易にする一方で、分析物検出のための大きな中心部分（例えば、中心部分１０６および中心部分２０８）を提供する。
【０１６５】
図４Ａは、図３において示されるコード化スキームの３つの例示的な実施形態：マイクロキャリア４００、マイクロキャリア４０２およびマイクロキャリア４０４を示す。マイクロキャリア４００、マイクロキャリア４０２およびマイクロキャリア４０４の固有のコードは、図３の単純な「充填されているか、または充填されていないか」のスキームを使
用して生成する。図４Ｂは、特に、形状の数（例えば、ＺＮ＿１０における７つの異なる形状と比較して、コードＺＮ＿３における２つの異なる形状）および／または形状の大きさ（例えば、コードＺＮ＿２における大きい、小さい、中間の大きさの形状）に関するコード（ｃｏｄ）の１０の例示的な実施形態を示す。重要なことは、上記のように、より複雑なコード化スキームが、アナログ画像認識を使用して利用可能であり、それによって、可能性のある固有のコードの数をおおいに拡大させる。
【０１６６】
次に、図５Ａおよび５Ｂに注意を向けると、別の例示的なマイクロキャリア５００が示される。マイクロキャリア２００のように、マイクロキャリア５００は、実質的に透明なポリマー層５０２、実質的に不透明なポリマー層５０４、磁性層５０６および中心部分５０８を含有する。さらに、マイクロキャリア５００は、柱５１０を含有する４つの柱を有し、それは層５０２の表面から伸びる任意の形状の柱であり得る。図５Ａにおいて示されるように、これらの柱は、磁性層５０６と整列して配置してもよく、中心部分５０８における分析物検出、または層５０４の二次元形状（すなわち、アナログコード）を読むことへの任意の可能性のある干渉を予防する。図５Ｂは、これらの柱がマイクロキャリア５００の上面および下面から伸び得ることを示す。柱５１０を、例えば、層５０２と同一な実質的に透明なポリマーを使用して作製してもよい（例示的な生成方法は下に記載される）。好都合なことに、１つまたはそれより多い柱、例えば、柱５１０は、例えば、光学的接触結合を介して、マイクロキャリアが互いに、かつ／または容器（例えば、マルチウェルプレートのウェルの側面）にくっつくことを予防するために使用され得る。
【０１６７】
実施例２：マイクロキャリア形状中にコード化された二次元アナログコードを伴うマイクロキャリア
前の実施例は、アナログコードが透明なポリマー層に貼り付けられている不透明な層によって提供されるマイクロキャリアの複数の例示的な実施形態を示す。例えば、マイクロキャリアの異なる種間のより大きな均一性を可能にすることにおいて、これは好都合である（すなわち、それぞれが、透明なポリマー層によって提供されている同一の外周の形状を有する）。
【０１６８】
しかしながら、他の理由に関して、マイクロキャリア自体の外周をアナログコード化のための二次元形状として使用することは好都合であり得る。例えば、アナログコードがマイクロキャリア自体の形状によって提供されている場合、１つの層のみが必要とされ、それによって、製造プロセスを能率化する。さらに、マイクロキャリアの外周を形成することは、高い精度の製造技術によって達成され得、より正確な画像認識のための高い再現性のある形状を可能にする。
【０１６９】
図６Ａおよび６Ｂは、このタイプの例示的なマイクロキャリア６００を示す。マイクロキャリア６００は、直径が約８０μｍかつ高さが１５μｍのギア形状の円板であり、必要に応じた柱要素（上記のような柱５１０と類似）を含有する。マイクロキャリア６００は、別個の透明なポリマー層および不透明なポリマー層よりむしろ、単一の不透明なポリマー層６０２で作製されている。マイクロキャリア６００を、図１Ｄにおいて示されるようにイメージングしてもよいが、そのアナログコードは、全体のマイクロキャリアの形状（例えば、不透明なポリマー層の外周）に基づいてイメージングする。マイクロキャリア６００の一方または両方の表面を、上記のような捕捉剤の連結のために使用してもよく、かつ中心部分または全体の表面を、使用してもよい。
【０１７０】
図６Ｃは、マイクロキャリア６００の歯６０４の寸法を示す。示されるように、この実施形態において、歯６０４は、４μｍの幅であり、隣接する歯６０６から４μｍだけ離れている。マイクロキャリア６００の二次元形状はアナログコード化されているため、隣接する歯の間の外周の長さは変動し得、複数の歯の形状を可能にする。例えば、歯６０４は
、それぞれ、すぐ左または右に隣接する外周区画と比較して、高さが４μｍまたは６．５μｍ伸びている。
【０１７１】
図７は、このタイプのマイクロキャリアの別の実施形態、マイクロキャリア７００を示す。マイクロキャリア６００のように、マイクロキャリア７００は不透明なポリマー層７０２から作製されている。さらに、マイクロキャリアは、磁性層７０４を含有する。磁性層７０４を、マイクロキャリア７００の一方の表面に貼り付けてもよく、またはマイクロキャリア７００内に埋め込んでもよい（例えば、２つの不透明なポリマー層の間）。磁性層７０４を、例えば、ニッケルを堆積することによって生成してもよい。上記のように、磁性層は、さらなる機能性、例えば、別の表面に磁気によって付着させながらマイクロキャリア７００を洗浄することについての選択肢を可能にする。
【０１７２】
次に、図８Ａに注目すると、別の例示的なマイクロキャリア８００が示される。マイクロキャリア７００のように、マイクロキャリア８００は、不透明なポリマー層８０２（および必要に応じて、磁性層、例えば層７０４）を含有する。さらに、マイクロキャリア８００は、開始位置８０４を含有し、それはマイクロキャリア８００の残りの外周と異なる形状を有する。開始位置８０４を、図２Ａにおいて示されているギャップ２１０への言及において上で記載されているように、画像認識のための方向インジケーターとして使用してもよい。
【０１７３】
図８Ｂは、使用され得るコード化スキームを示す。図８Ｂは、マイクロキャリア８１０を示し、それは、マイクロキャリア８００同様に、不透明なポリマー層８１２および開始位置８１４（ならびに、必要に応じて磁性層、例えば層７０４）を含有する。このスキームにおいて、ギア周囲の可能性のある形状変動点を、例えば、位置８２０、８２２、８２４、８２６、８２８、８３０、８３２、８３４、８３６、８３８、８４０、８４２および８４４において標識している。図８Ｂにおいて示されるように、たとえ２つの可能性のある形状のみが、位置８２０、８２２、８２４、８２６、８２８、８３０、８３２、８３４、８３６、８３８、８４０、８４２および８４４に関して使用され得るとしても、この実施形態は、２１３個までの固有のコードを可能にする。さらに、上記のように、アナログコード化の使用は、外周の周囲の指示した位置のいずれかまたは全てにおいて（例えば、図８Ｂにおいて標識されているようなそれぞれの形状変動点において）２つより多い可能性のある形状の使用を可能にすることによって、この数をおおいに拡大させる。
【０１７４】
図９Ａ〜９Ｃは、マイクロキャリア９００におけるさらに別の可能性のある実施形態を示す。マイクロキャリア８００のように、マイクロキャリア９００は、不透明なポリマー層９０２および開始位置９０４（ならびに、必要に応じて、磁性層、例えば層７０４）を含有するギア形状のマイクロキャリアである。さらに、マイクロキャリア９００は、マイクロキャリア９００の一方または両方の表面に貼り付けられている１つまたはそれより多い柱（例えば、柱９０６）を有し得る。図９Ｂ中の断面図において示されるように、柱９０６は、層９０２の表面から伸びる。好都合なことに、柱９０６は、光学的接触結合の可能性の減少に役立つ（柱５１０への言及において上で記載されているように）。
【０１７５】
図９Ｃは、柱９０６の寸法を示す。この実施例において、柱９０６は、高さが３μｍかつ直径が３μｍの円柱であるが、上記のように、かかる柱は円柱状の形状に決して限定されない。いくつかの実施形態において、柱９０６を、磁性材料、例えば、ニッケルで作製する。これは、柱９０６が、上記のように、マイクロキャリア９００の磁性操作のための磁性要素としてさらに機能することを可能にする。
【０１７６】
実施例３：マイクロキャリア形状中にコード化された二次元アナログコードを伴うマイクロキャリアの生成方法
前の実施例において複数のタイプのマイクロキャリアの例示的な実施形態を記載したため、次にマイクロキャリアを生成する方法に注目を向ける。上記のように、本開示のマイクロキャリアは、所望の形態および／または必要に応じた特徴に依存して、１つ、２つまたはそれより多い構成層で作製してもよい。
【０１７７】
図１０において示されるプロセス１０００は、単一層のマイクロキャリア、例えば、上記実施例２において記載されている層の製造のための例示的なワークフローを示す。ブロック１００２において、犠牲層１００６を、基材１００４上に構築する。いくつかの実施形態において、基材１００４は、ガラス基材であり得る。ブロック１０１０において、層１０１２を、犠牲層１００６上に堆積させる。いくつかの実施形態において、層１０１２は、不透明なポリマー層である。ブロック１０２０において、層１０１２の外周を、リソグラフィーを使用してギア形状（上記のような）に形成して、ギア形状の層１０２２を生成する。ブロック１０３０において、全体の構造（すなわち、層１０２２、犠牲層１００６および基材１００４）を、溶媒中に浸す。この溶媒処理は、犠牲層１００６を溶解し、基材１００４からギア形状の層１０２２を放出し、それによってマイクロキャリア１０３２を生成する。いくつかの実施形態において、マイクロキャリア１０３２を、例えば、捕捉剤を一方または両方の表面に連結することによってさらに改変してもよい。
【０１７８】
上記実施例２において記載されているように、ギア形状のマイクロキャリアは、必要に応じた要素、例えば、磁性成分（例えば、柱および／または磁性層）を含有し得る。図１１Ａおよび１１Ｂにおいて示されるプロセス１１００は、１つまたはそれより多い磁性成分を伴うギア形状のマイクロキャリアの製造のための例示的なワークフローを示す。
【０１７９】
図１１Ａにおいて示されるように、ブロック１１０２において、犠牲層１１０６を、基材１１０４上に構築する。いくつかの実施形態において、基材１１０４は、ガラス基材であり得る。ブロック１１１０において、磁性層１１１２を、犠牲層１１０６上に堆積させる。いくつかの実施形態において、磁性層１１１２は、ニッケルを含有する。ブロック１１２０において、磁性層１１１２を、リソグラフィーによって、形成された磁性層１１２２に形成する。形成された磁性層１１２２は、任意の所望の形状を取り得、例えば、図９Ａにおいて柱９０６で示されるような、１つまたはそれより多い柱に形成してもよい。
【０１８０】
図１１Ｂにおいて示されるように、ブロック１１３０において、実質的に不透明なポリマー層１１３２を、形成された磁性層１１２２および犠牲層１１０６上に堆積させる。ブロック１１４０において、層１１３２の外周を、リソグラフィーによってギア形状の実質的に不透明な層１１４２（例えば、図６Ａ〜９Ａにおいて示されるギア形状のうちの１つ）に形成する。ブロック１１５０において、全体の構造（すなわち、層１１４２、形成された磁性層１１２２、犠牲層１１０６および基材１１０４）を、溶媒中に浸す。この溶媒処理は、犠牲層１１０６を溶解し、基材１１０４からギア形状の層１１４２および形成された磁性層１１２２を放出して、それによってマイクロキャリア１１５２を生成する。いくつかの実施形態において、マイクロキャリア１１５２を、例えば、捕捉剤を一方または両方の表面に連結することによってさらに改変してもよい。
【０１８１】
実施例４：二次元アナログコードおよび均一な形状を伴うコード化されたマイクロキャリアを生成する方法
次に、１つまたはそれより多い実質的に透明なポリマー層および１つまたはそれより多い実質的に不透明なポリマー層を伴うコード化されたマイクロキャリア、例えば、実施例１において記載されているマイクロキャリアを生成する方法に注目を向ける。図１２Ａ〜１２Ｅは、プロセス１２００、実質的に透明なポリマー層、実質的に不透明なポリマー層（当該層の二次元形状がアナログコードを構成する）および１つまたはそれより多い柱を伴うマイクロキャリアの製造のための例示的なワークフローを示す。
【０１８２】
図１２Ａから始めて、ブロック１２０２において、犠牲層１２０６を、基材１２０４上に堆積させる（例えば、スピンコーティングによって）。いくつかの実施形態において、基材１２０４は、ガラス基材であり得る。ブロック１２０８において、マスク１２１０を適用し、犠牲層１２０６をＵＶ光に曝露する。ＵＶ光を、マスク１２１０を介して適用し、ＵＶ光セグメント１２１２およびＵＶ光セグメント１２１４が犠牲層１２０６を通過し、そして犠牲層１２０６を処理することを可能にする。ブロック１２１６において、標準的なリソグラフィーの開発を介する構造の開発の後、犠牲層１２０６を、ＵＶ処理のマスキングの結果として形成された犠牲層１２１８に形成する。
【０１８３】
プロセス１２００はブロック１２２０（図１２Ｂ）において続き、そこで、形成された犠牲層１２１８においてマスキングされた穴を、実質的に透明なポリマーで充填し、柱１２２２および柱１２２４を創出する。ブロック１２２６において、実質的に透明なポリマー層１２２８を、柱１２２２および柱１２２４ならびに形成された犠牲層１２１８上に堆積させる。
【０１８４】
プロセス１２００はブロック１２３０（図１２Ｃ）において続き、そこで、磁性層１２３２を、層１２２８上に堆積させる。いくつかの実施形態において、磁性層１２３２は、ニッケルを含有する。いくつかの実施形態において、磁性層１２３２は、スパッタリングによって堆積させる。ブロック１２３４において、エッチングブロック層を、エッチングブロック１２３６およびエッチングブロック１２３８によって表されているように、磁性層１２３２上に堆積させる。ブロック１２４０において、磁性層１２３２のブロックされていない区画をエッチングし、形成された磁性層１２４２を生成する。いくつかの実施形態において、形成された磁性層１２４２は、層１２２８の中心部分を囲む環状の形状（方向の指標のための必要に応じた非対称を伴う）に形成してもよい（例えば、図２Ａにおける層２０６を参照されたい）。ブロック１２４４において、エッチングブロック層（エッチングブロック１２３６およびエッチングブロック１２３８によって表されているような）を除去する。
【０１８５】
プロセス１２００はブロック１２４６（図１２Ｄ）において続き、そこで、実質的に透明なポリマー層１２４８を、層１２２８および層１２４２上に堆積させる（エッチングブロックによって創出された層１２４２中のいずれの穴も充填する）。ブロック１２５０において、実質的に不透明な層１２５２を、層１２４８の上に堆積させ、リソグラフィーによって形成する。いくつかの実施形態において、層１２５２は、磁性層１２４２を囲む輪における１つまたはそれより多い歯をともなって形成される（例えば、図２Ａの層２０２および層２０６ならびに中心部分２０８との関係において層２０４を参照されたい）。
【０１８６】
プロセス１２００はブロック１２５４（図１２Ｅ）において続き、そこで、柱１２５６および柱１２５８は、リソグラフィーによって層１２４８上に形成する。いくつかの実施形態において、柱１２５６および柱１２５８を、実質的に透明なポリマーで作製する。いくつかの実施形態において、柱は、図５Ａおよび図５Ｂにおいて示されるように置く。ブロック１２６０において、基材１２０４を、同一形状の１つまたはそれより多いマイクロキャリアに切断する（すなわち、説明の平易さのために、ただ１つのマイクロキャリアが図１２Ａ〜１２Ｅにおいて記載されているが、プロセス１２００において、１つより多いマイクロキャリアが基材１２０４上に構築され得る）。また、ブロック１２６０において、全体の構造（すなわち、１２０４、１２１８、１２２２、１２２４、１２２８、１２４２、１２４８、１２５２、１２５６および１２５８を含有する）を、溶媒に浸す。この溶媒処理は、犠牲層１２１８を溶解し、マイクロキャリア１２６２を基材１２０４から放出する。いくつかの実施形態において、マイクロキャリア１２６２を、例えば、捕捉剤を一方または両方の表面に連結することによってさらに改変してもよい。
【０１８７】
図１３Ａ〜１３Ｃは、プロセス１３００、異なるタイプの複数層のマイクロキャリアの生成のための例示的なワークフローを示す。図１３Ａから始めて、ブロック１３０２において、犠牲層１３０６を、基材層１３０４上に堆積させる。いくつかの実施形態において、基材１３０４は、ガラス基材である。ブロック１３０８において、実質的に透明な層１３１０を、犠牲層１３０６上に堆積させる。ブロック１３１２において、磁性層１３１４を、層１３１０上に堆積させる。いくつかの実施形態において、磁性層１３１４は、ニッケルを含有する。
【０１８８】
プロセス１３００はブロック１３１６（図１３Ｂ）において続き、そこで、磁性層１３１４を、形成された磁性層１３１８に画定する。いくつかの実施形態において、形成された磁性層１３１８を、層１３１０の中心部分を囲む環状の形状（方向の指標のための必要に応じた非対称を伴う）に画定する（例えば、図２Ａにおける層２０６を参照されたい）。ブロック１３２０において、実質的に透明な層１３２２を、層１３１８および層１３１０上に堆積させ、形成された層１３１８を画定することによって創出されたいずれの穴も充填する。ブロック１３２４において、実質的に不透明なポリマー層１３２６を、層１３２２上に堆積させる。
【０１８９】
プロセス１３００はブロック１３２８（図１３Ｃ）において続き、そこで、実質的に不透明なポリマー層１３２６を、リソグラフィーによってギア形状の実質的に不透明なポリマー層１３３０に形成する。いくつかの実施形態において、層１３３０を、形成された磁性層１３１８を囲む輪における１つまたはそれより多い歯をともなって形成する（例えば、図２Ａの層２０２および層２０６ならびに中心部分２０８との関係において層２０４を参照されたい）。ブロック１３３２において、全体の構造（すなわち、１３０４、１３０６、１３１０、１３１８、１３２２および１３３０を含有する）を、溶媒中に浸す。この溶媒処理は、犠牲層１３０６を溶解し、マイクロキャリア１３３４を基材１３０４から放出する。いくつかの実施形態において、マイクロキャリア１３３４を、例えば、捕捉剤を一方または両方の表面に連結することによってさらに改変してもよい。
【０１９０】
前記発明は、理解の明確性のために、例示および例によっていくらか詳細に記載されているが、当該記載および例は、発明の範囲を限定すると解釈されるべきではない。本明細書において言及される全ての特許文献および科学文献の開示は、その全体が参照によって明確に援用される。
【０１９１】
本発明の好ましい実施形態によれば、例えば、以下が提供される。
（項１）
コード化されたマイクロキャリアであって：
（ａ）第一の表面および第二の表面を有する実質的に透明なポリマー層であって、
該第一および該第二の表面は互いに平行である、層；
（ｂ）実質的に不透明なポリマー層であって、該実質的に不透明なポリマー層は、該実質的に透明なポリマー層の該第一の表面に貼り付けられており、該実質的に透明なポリマー層の中心部分を囲み、該実質的に不透明なポリマー層はアナログコードを表す二次元形状を含む、層；ならびに
（ｃ）分析物を捕捉するための捕捉剤であって、該捕捉剤は該実質的に透明なポリマー層の少なくとも該中心部分において該実質的に透明なポリマー層の該第一の表面および該第二の表面のうちの少なくとも１つに連結されている、捕捉剤
を含む、マイクロキャリア。
（項２）
（ｄ）前記実質的に不透明なポリマー層と前記実質的に透明なポリマー層の前記中心部分との間の、該実質的に透明なポリマー層の該中心部分を囲む、磁性の実質的に不透明な層であって、該磁性の実質的に不透明な層は該実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面または前記第二の表面に貼り付けられている、層
をさらに含む、上記項１に記載のマイクロキャリア。
（項３）
（ｅ）第一の実質的に透明なポリマー層と整列している第二の実質的に透明なポリマー層であって、該第二の実質的に透明なポリマー層は該第一の実質的に透明なポリマー層の中心部分と整列している中心部分を有し、該第二の実質的に透明なポリマー層は該第一の実質的に透明なポリマー層の第二の表面に貼り付けられており、該第一の実質的に透明なポリマー層の二次元形状を超えて広がっていない、層；および
（ｆ）前記実質的に不透明なポリマー層と前記実質的に透明なポリマー層の前記中心部分との間の、該第一の実質的に透明なポリマー層の該中心部分を囲む、磁性の実質的に不透明な層であって、該磁性の実質的に不透明な層は該第一の実質的に透明なポリマー層と該第二の実質的に透明なポリマー層との間に貼り付けられている、層
をさらに含む、上記項１に記載のマイクロキャリア。
（項４）
前記実質的に不透明なポリマー層の前記アナログコードを方向付けるための方向インジケーターをさらに含む、上記項１〜３のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項５）
前記方向インジケーターは前記磁性の実質的に不透明な層の非対称を含む、上記項４に記載のマイクロキャリア。
（項６）
前記磁性の実質的に不透明な層はニッケルを含む、上記項２〜５のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項７）
前記磁性の実質的に不透明な層は厚さが約５０ｎｍと約１０μｍとの間である、上記項２〜６のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項８）
前記磁性の実質的に不透明な層は厚さが約０．１μｍである、上記項７に記載のマイクロキャリア。
（項９）
前記実質的に不透明なポリマー層の前記二次元形状が複数の歯を含むギア形状を含み、前記アナログコードは該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の高さ、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の幅、該複数の歯における歯の数、および該複数の歯内の１つまたはそれより多い歯の配置からなる群から選択される１つまたはそれより多い性質によって表される、上記項１〜８のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項１０）
前記複数の歯が約１μｍと約１０μｍとの間の幅である１つまたはそれより多い歯を含む、上記項９に記載のマイクロキャリア。
（項１１）
前記複数の歯が約１μｍと約１０μｍとの間の高さである１つまたはそれより多い歯を含む、上記項９または上記項１０に記載のマイクロキャリア。
（項１２）
前記複数の歯が約１μｍと約１０μｍとの間の間隔だけ離れている２つまたはそれより多い歯を含む、上記項９〜１１のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項１３）
（ｇ）前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面から突出している１つもしくはそれより多い柱であって、該１つもしくはそれより多い柱は該第一の実質的に透明なポリマーの前記中心部分内にない、柱；および／または
（ｈ）該第一の実質的に透明なポリマー層の前記第二の表面もしくは該第一の実質的に透明なポリマー層に貼り付けられていない前記第二の実質的に透明なポリマー層の表面から突出している１つもしくはそれより多い柱であって、該１つもしくはそれより多い柱は該第一もしくは該第二の実質的に透明なポリマー層の該中心部分内にない、柱
をさらに含む、上記項１〜１２のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項１４）
前記マイクロキャリアは実質的に円板である、上記項１〜１３のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項１５）
前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に透明なポリマー層の約５％と約９０％との間の表面領域を占める、上記項１〜１４のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項１６）
前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に透明なポリマー層の約２５％の表面領域を占める、上記項１５に記載のマイクロキャリア。
（項１７）
前記マイクロキャリアは直径が約２００μｍ未満である、上記項１〜１５のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項１８）
前記マイクロキャリアは直径が約５０μｍである、上記項１７に記載のマイクロキャリア。
（項１９）
前記マイクロキャリアは厚さが約５０μｍ未満である、上記項１〜１８のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項２０）
前記マイクロキャリアは厚さが約１０μｍである、上記項１９に記載のマイクロキャリア。
（項２１）
前記分析物は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される、上記項１〜２０のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項２２）
前記分析物を捕捉するための前記捕捉剤は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される、上記項１〜２１のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項２３）
前記第一の実質的に透明なポリマー層または前記第二の実質的に透明なポリマー層の実質的に透明なポリマーはエポキシを基にしたポリマーを含む、上記項１〜２２のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項２４）
前記エポキシを基にしたポリマーはＳＵ−８である、上記項２３に記載のマイクロキャリア。
（項２５）
コード化されたマイクロキャリアであって：
（ａ）第一の表面および第二の表面を有する実質的に不透明なポリマー層であって、該第一の表面および該第二の表面は互いに平行であり、該実質的に不透明なポリマー層の外形はアナログコードを表す二次元形状を含む、層；ならびに
（ｂ）分析物を捕捉するための捕捉剤であって、該捕捉剤は該実質的に不透明なポリマー層の少なくとも中心部分において該実質的に不透明なポリマー層の該第一の表面および該第二の表面のうちの少なくとも１つに連結されている、捕捉剤
を含む、マイクロキャリア。
（項２６）
（ｃ）前記実質的に不透明なポリマー層の前記第一の表面および／または前記第二の表面から突出している１つまたはそれより多い柱であって、該１つまたはそれより多い柱は磁性材料を含む、柱
をさらに含む、上記項２５に記載のマイクロキャリア。
（項２７）
前記１つまたはそれより多い柱は約１μｍと約１０μｍとの間の高さである、上記項２６に記載のマイクロキャリア。
（項２８）
前記１つまたはそれより多い柱は直径が約１μｍと約１０μｍとの間である、上記項２６または上記項２７に記載のマイクロキャリア。
（項２９）
（ｄ）前記実質的に不透明なポリマー層の前記第二の表面に貼り付けられている磁性材料を含む磁性層であって、該磁性層は該実質的に不透明なポリマー層の前記中心部分を超えて広がっておらず、前記捕捉剤は該実質的に不透明なポリマー層の少なくとも前記第一の表面に連結されている、磁性層
をさらに含む、上記項２５〜２８のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項３０）
（ｅ）前記第一の実質的に不透明なポリマー層と整列している第二の実質的に不透明なポリマー層であって、該第二の実質的に不透明なポリマー層は前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記第二の表面に貼り付けられており、該第一の実質的に透明なポリマー層の前記外形を超えて広がっておらず、前記磁性層は該第一の実質的に透明なポリマー層と前記第二の実質的に透明なポリマー層との間に貼り付けられている、層
をさらに含む、上記項２９に記載のマイクロキャリア。
（項３１）
前記磁性材料はニッケルを含む、上記項２６〜３０のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項３２）
前記実質的に不透明なポリマー層の前記アナログコードを方向付けるための方向インジケーターをさらに含む、上記項２５〜３０のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項３３）
前記方向インジケーターは前記実質的に不透明なポリマー層の前記外形の非対称を含む、上記項３２に記載のマイクロキャリア。
（項３４）
前記実質的に不透明なポリマー層の前記外形は複数の歯を含む二次元ギア形状を含み、前記アナログコードは、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の高さ、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の幅、該複数の歯における歯の数、および該複数の歯内の１つまたはそれより多い歯の配置からなる群から選択される１つまたはそれより多い性質によって表される、上記項２５〜３３のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項３５）
前記複数の歯は、約１μｍと約１０μｍとの間の幅である１つまたはそれより多い歯を含む、上記項３４に記載のマイクロキャリア。
（項３６）
前記複数の歯が約１μｍと約１０μｍとの間の高さである１つまたはそれより多い歯を含む、上記項３４または上記項３５に記載のマイクロキャリア。
（項３７）
前記複数の歯が約１μｍと約１０μｍとの間の間隔だけ離れている２つまたはそれより多い歯を含む、上記項３４〜３６のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項３８）
前記マイクロキャリアは実質的に円板である、上記項２５〜３７のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項３９）
前記第一の実質的に不透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に不透明なポリマー層の約５％と約９０％との間の表面領域を占める、上記項２５〜３８のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項４０）
前記第一の実質的に不透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に不透明なポリマー層の約２５％の表面領域を占める、上記項３９に記載のマイクロキャリア。
（項４１）
前記マイクロキャリアは直径が約２００μｍ未満である、上記項２５〜４０のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項４２）
前記マイクロキャリアは直径が約６０μｍである、上記項４１に記載のマイクロキャリア。
（項４３）
前記マイクロキャリアは厚さが約５０μｍ未満である、上記項２５〜４２のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項４４）
前記マイクロキャリアは厚さが約１０μｍである、上記項４３に記載のマイクロキャリア。
（項４５）
前記分析物は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される、上記項２５〜４４のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項４６）
前記分析物を捕捉するための前記捕捉剤は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される、上記項２５〜４５のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項４７）
前記実質的に不透明なポリマー層はエポキシを基にしたポリマーを含む、上記項２５〜４６のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項４８）
前記実質的に不透明なポリマー層はブラックマトリクス用レジストを含む、上記項２５〜４６のいずれか１項に記載のマイクロキャリア。
（項４９）
コード化されたマイクロキャリアを作製する方法であって：
（ａ）実質的に透明なポリマー層を堆積させる工程であって、該実質的に透明なポリマー層は第一の表面および第二の表面を有し、該第一の表面および該第二の表面は互いに平行である、工程；
（ｂ）該実質的に透明なポリマー層の該第一の表面上に磁性の実質的に不透明な層を堆積させる工程；
（ｃ）該磁性の実質的に不透明な層をエッチングして、該実質的に透明なポリマー層の中心部分上に堆積されている該磁性の実質的に不透明な層の一部を除去する工程；
（ｄ）該磁性の実質的に不透明な層上に第二の実質的に透明なポリマー層を堆積させる工程であって、該第二の実質的に透明なポリマー層は第一の表面および該第二の表面を有し、該第一の表面および該第二の表面は互いに平行であり、該第二の表面は該磁性の実質的に不透明な層に貼り付けられており、該第二の実質的に透明なポリマー層は、前記第一の実質的に透明なポリマー層と整列しており、該実質的に透明なポリマー層の該中心部分と整列している中心部分を有する、工程；ならびに
（ｅ）該第二の実質的に透明なポリマー層の該第一の表面上に実質的に不透明なポリマー層を堆積させる工程であって、該実質的に不透明なポリマー層は該第一の実質的に透明なポリマー層および該第二の実質的に透明なポリマー層の該中心部分を囲み、該実質的に不透明なポリマー層はアナログコードを表す二次元形状を含む、工程
を含む、方法。
（項５０）
前記磁性の実質的に不透明な層がウェットエッチングによってエッチングされている、上記項４９に記載の方法。
（項５１）
前記磁性の実質的に不透明な層がニッケルを含む、上記項４９または上記項５０に記載の方法。
（項５２）
前記磁性の実質的に不透明な層は厚さが約５０ｎｍと約１０μｍとの間である、上記項４９〜５１のいずれか１項に記載の方法。
（項５３）
前記磁性の実質的に不透明な層は厚さが約０．１μｍ未満である、上記項５２に記載の方法。
（項５４）
前記磁性の実質的に不透明な層は前記実質的に不透明なポリマー層の前記アナログコードを方向付けるための非対称を含む、上記項４９〜５３のいずれか１項に記載の方法。
（項５５）
前記実質的に不透明なポリマー層の前記二次元形状がリソグラフィーによって生成される、上記項４９〜５４のいずれか１項に記載の方法。
（項５６）
前記実質的に不透明なポリマー層の前記二次元形状は、複数の歯を含むギア形状を含み、前記アナログコードは、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の高さ、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の幅、該複数の歯における歯の数、および該複数の歯内の１つまたはそれより多い歯の配置からなる群から選択される１つまたはそれより多い性質によって表される、上記項４９〜５５のいずれか１項に記載の方法。
（項５７）
前記複数の歯は、約１μｍと約１０μｍとの間の幅である１つまたはそれより多い歯を含む、上記項５６に記載の方法。
（項５８）
前記複数の歯は、約１μｍと約１０μｍとの間の高さである１つまたはそれより多い歯を含む、上記項５６または上記項５７に記載の方法。
（項５９）
前記複数の歯が約１μｍと約１０μｍとの間の間隔だけ離れている２つまたはそれより多い歯を含む、上記項５６〜５８のいずれか１項に記載の方法。
（項６０）
（ｆ）工程（ａ）の前に、基材上に犠牲層を堆積させる工程；
（ｇ）リソグラフィーを使用して、該犠牲層に１つまたはそれより多い柱形状の穴を作製する工程；
（ｈ）該犠牲層の該１つまたはそれより多い柱形状の穴に第三の実質的に透明なポリマー層を堆積させる工程であって、前記第一の実質的に透明なポリマー層は、工程（ａ）において、該第三の実質的に透明なポリマー層および該犠牲層の上部に堆積される、工程；
（ｉ）工程（ｅ）の後に、リソグラフィーを使用して、前記実質的に透明なポリマーを含む１つまたはそれより多い柱を、前記第二の実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面上の前記実質的に不透明なポリマー層によって覆われていない部分に堆積させる工程；
（ｊ）溶媒中で該犠牲層を溶解する工程；ならびに
（ｋ）該基材を除去する工程
をさらに含む、上記項４９〜５９のいずれか１項に記載の方法。
（項６１）
（ｆ）工程（ａ）の前に、基材上に犠牲層を堆積させる工程；
（ｇ）工程（ａ）の一環として、該犠牲層上に前記実質的に透明なポリマー層を堆積させる工程；
（ｈ）工程（ｅ）の後に、溶媒中で該犠牲層を溶解する工程；および
（ｉ）該基材を除去する工程
をさらに含む、上記項４９〜５９のいずれか１項に記載の方法。
（項６２）
前記コード化されたマイクロキャリアは実質的に円板である、上記項４９〜６１のいずれか１項に記載の方法。
（項６３）
前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に透明なポリマー層の約５％と約９０％との間の表面領域を占める、上記項４９〜６２のいずれか１項に記載の方法。
（項６４）
前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記中心部分は該第一の実質的に透明なポリマー層の約２５％の表面領域を占める、上記項６３に記載の方法。
（項６５）
前記コード化されたマイクロキャリアは直径が約２００μｍ未満である、上記項４９〜６４のいずれか１項に記載の方法。
（項６６）
前記コード化されたマイクロキャリアは直径が約５０μｍである、上記項６５に記載の方法。
（項６７）
前記コード化されたマイクロキャリアは厚さが約５０μｍ未満である、上記項４９〜６６のいずれか１項に記載の方法。
（項６８）
前記コード化されたマイクロキャリアは厚さが約１０μｍである、上記項６７に記載の方法。
（項６９）
（ｆ）分析物を捕捉するための捕捉剤を、前記第二の実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面および前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記第二の表面のうちの少なくとも１つと、少なくとも前記中心部分において連結する工程
をさらに含む、上記項４９〜６８のいずれか１項に記載の方法。
（項７０）
前記第一の実質的に透明なポリマー層または前記第二の実質的に透明なポリマー層の前記実質的に透明なポリマーがエポキシドを含み、前記捕捉剤を連結する工程は：
（ｉ）該第一の実質的に透明なポリマー層および／または該第二の実質的に透明なポリマー層の該実質的に透明なポリマーを光酸ジェネレータおよび光と反応させ、架橋されたポリマーを生成する工程であって、該光は該光酸ジェネレータを活性化する波長の光である、工程；
（ｉｉ）該架橋されたポリマーの該エポキシドをアミンおよびカルボキシルを含む化合物と反応させる工程であって、該化合物の該アミンは該エポキシドと反応し、化合物が連結された、架橋されたポリマーを形成する、工程；ならびに
（ｉｉｉ）該化合物が連結された、架橋されたポリマーの該カルボキシルを、該捕捉剤と反応させ、該捕捉剤を、該第二の実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面および該第一の実質的に透明なポリマー層の前記第二の表面のうちの少なくとも１つに、少なくとも前記中心部分において連結する工程
を含む、上記項６９に記載の方法。
（項７１）
前記化合物が連結された、架橋されたポリマーの前記カルボキシルが、前記捕捉剤の第一級アミンと反応する、上記項７０に記載の方法。
（項７２）
前記第一の実質的に透明なポリマー層および／または前記第二の実質的に透明なポリマー層の前記実質的に透明なポリマーはＳＵ−８を含む、上記項７０または上記項７１に記載の方法。
（項７３）
前記分析物は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される、上記項４９〜７２のいずれか１項に記載の方法。
（項７４）
前記分析物を捕捉するための前記捕捉剤は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される、上記項４９〜７３のいずれか１項に記載の方法。
（項７５）
上記項４９〜７４のいずれか１項に記載の方法によって生成されたコード化されたマイクロキャリア。
（項７６）
コード化されたマイクロキャリアを作製する方法であって：
（ａ）基材上に犠牲層を堆積させる工程；
（ｂ）該犠牲層上に、外形、第一の表面、および第二の表面を有する実質的に不透明なポリマー層を堆積させる工程であって、該第一の表面および該第二の表面は互いに平行であり、該第二の表面は該犠牲層に貼り付けられる、工程；
（ｃ）リソグラフィーによって、該実質的に不透明なポリマー層の該外形を形成する工程であって、該外形はアナログコードを表す二次元形状に形成される、工程；
（ｄ）溶媒中で犠牲ポリマー層を溶解する工程；ならびに
（ｅ）該基材を除去する工程
を含む、方法。
（項７７）
コード化されたマイクロキャリアを作製する方法であって：
（ａ）基材上に犠牲層を堆積させる工程；
（ｂ）該犠牲層上に磁性材料を含む磁性層を堆積させる工程；
（ｃ）該磁性層上に、外形、第一の表面、および第二の表面を有する実質的に不透明なポリマー層を堆積させる工程であって、該第一の表面および該第二の表面は互いに平行であり、該第二の表面は該磁性層に貼り付けられる、工程；
（ｄ）リソグラフィーによって、該実質的に不透明なポリマー層の該外形を形成する工程であって、該外形はアナログコードを表す二次元形状に形成される、工程；
（ｅ）溶媒中で犠牲ポリマー層を溶解する工程；ならびに
（ｆ）該基材を除去する工程
を含む、方法。
（項７８）
（ｇ）工程（ｂ）の後かつ工程（ｃ）の前に、リソグラフィーによって前記磁性層を形成する工程
をさらに含む、上記項７７に記載の方法。
（項７９）
前記磁性材料はニッケルを含む、上記項７７または７８に記載の方法。
（項８０）
前記マイクロキャリアは前記実質的に不透明なポリマー層の前記アナログコードを方向付けるための方向インジケーターを含む、上記項７６〜７９のいずれか１項に記載の方法。
（項８１）
前記方向インジケーターは前記実質的に不透明なポリマー層の前記外形の非対称を含む、上記項８０に記載の方法。
（項８２）
前記実質的に不透明なポリマー層の前記二次元形状は、複数の歯を含むギア形状を含み、前記アナログコードは、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の高さ、該複数の歯のうちの１つまたはそれより多い歯の幅、該複数の歯における歯の数、および該複数の歯内の１つまたはそれより多い歯の配置からなる群から選択される１つまたはそれより多い性質によって表される、上記項７６〜８１のいずれか１項に記載の方法。
（項８３）
前記複数の歯が約１μｍと約１０μｍとの間の幅である１つまたはそれより多い歯を含む、上記項８２に記載の方法。
（項８４）
前記複数の歯が約１μｍと約１０μｍとの間の高さである１つまたはそれより多い歯を含む、上記項８２または上記項８３に記載の方法。
（項８５）
前記複数の歯が約１μｍと約１０μｍとの間の間隔だけ離れている２つまたはそれより多い歯を含む、上記項８２〜８４のいずれか１項に記載の方法。
（項８６）
前記マイクロキャリアは実質的に円板である、上記項７６〜８５のいずれか１項に記載の方法。
（項８７）
前記マイクロキャリアは直径が約２００μｍ未満である、上記項８６に記載の方法。
（項８８）
前記マイクロキャリアは直径が約６０μｍである、上記項８７に記載の方法。
（項８９）
前記マイクロキャリアは厚さが約３０μｍ未満である、上記項７６〜８８のいずれか１項に記載の方法。
（項９０）
前記マイクロキャリアは厚さが約１０μｍである、上記項８９に記載の方法。
（項９１）
（ｈ）分析物を捕捉するための捕捉剤を、前記実質的に不透明なポリマー層の前記第一の表面および前記第二の表面のうちの少なくとも１つに連結する工程
をさらに含む、上記項７６〜９０のいずれか１項に記載の方法。
（項９２）
前記実質的に不透明なポリマー層の前記実質的に不透明なポリマーはエポキシドを含み、前記捕捉剤を連結する工程は：
（ｉ）該実質的に不透明なポリマー層の該実質的に不透明なポリマーを光酸ジェネレータおよび光と反応させ、架橋されたポリマーを生成する工程であって、該光は該光酸ジェネレータを活性化する波長の光である、工程；ならびに
（ｉｉ）該架橋されたポリマーの該エポキシドを、アミンおよびカルボキシルを含む化合物と反応させる工程であって、該化合物の該アミンは該エポキシドと反応し、化合物が連結された、架橋されたポリマーを形成する、工程；ならびに
（ｉｉｉ）該化合物が連結された、架橋されたポリマーの該カルボキシルを該捕捉剤と反応させ、該捕捉剤を、前記第二の実質的に透明なポリマー層の前記第一の表面および前記第一の実質的に透明なポリマー層の前記第二の表面のうちの少なくとも１つに、少なくとも前記中心部分において連結する工程
を含む、上記項９１に記載の方法。
（項９３）
前記分析物は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される、上記項９１または上記項９２に記載の方法。
（項９４）
前記分析物を捕捉するための前記捕捉剤は、ＤＮＡ分子、ＤＮＡアナログ分子、ＲＮＡ分子、ＲＮＡアナログ分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、酵素、脂質、リン脂質、糖鎖、多糖、抗原、ウイルス、細胞、抗体、小分子、細菌細胞、細胞内小器官および抗体断片からなる群から選択される、上記項９１〜９３のいずれか１項に記載の方法。
（項９５）
上記項７６〜９４のいずれか１項に記載の方法によって生成された、コード化されたマイクロキャリア。
（項９６）
溶液中の２つまたはそれより多い分析物を検出するための方法であって：
（ａ）第一の分析物および第二の分析物を含む溶液を複数のマイクロキャリアと接触させる工程であって、該複数のマイクロキャリアは：
（ｉ）該第一の分析物を特異的に捕捉する上記項１〜４８、７５および９５のいずれか１項に記載の第一のマイクロキャリアであって、該第一のマイクロキャリアは第一のアナログコードでコード化されている、マイクロキャリア；ならびに
（ｉｉ）該第二の分析物を特異的に捕捉する上記項１〜４８、７５および９５のいずれか１項に記載の第二のマイクロキャリアであって、該第二のマイクロキャリアは第二のアナログコードでコード化されており、該第二のアナログコードは該第一のアナログコードと異なる、マイクロキャリア；
を少なくとも含む、工程；
（ｂ）該第一のアナログコードおよび該第二のアナログコードを、アナログ形状認識を使用して解読し、該第一のマイクロキャリアおよび該第二のマイクロキャリアを識別する工程；ならびに
（ｃ）該第一のマイクロキャリアに結合した該第一の分析物の量および該第二のマイクロキャリアに結合した該第二の分析物の量を検出する工程
を含む、方法。
（項９７）
工程（ｂ）が工程（ｃ）の前に起こる、上記項９６に記載の方法。
（項９８）
工程（ｃ）が工程（ｂ）の前に起こる、上記項９６に記載の方法。
（項９９）
工程（ｂ）が工程（ｃ）と同時に起こる、上記項９６に記載の方法。
（項１００）
前記第一のアナログコードおよび前記第二のアナログコードを解読する工程が：
（ｉ）前記第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアを、該第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアの実質的に透明な部分ならびに／または周囲の溶液に光を通過させることによって照射する工程であって、該光は、該第一のマイクロキャリアおよび第二のマイクロキャリアの実質的に不透明な部分を通過し、該第一のマイクロキャリアに対応する第一のアナログコード化光パターンおよび該第二のマイクロキャリアに対応する第二のアナログコード化光パターンを生成できない、工程；
（ｉｉ）該第一のアナログコード化光パターンをイメージングし、第一のアナログコード化画像を生成する工程および該第二のアナログコード化光パターンをイメージングし、第二のアナログコード化画像を生成する工程；ならびに
（ｉｉｉ）アナログ形状認識を使用して、該第一のアナログコード化画像を該第一のアナログコードと一致させ、該第二のアナログコード化画像を該第二のアナログコードと一致させる工程
を含む、上記項９６〜９９のいずれか１項に記載の方法。
（項１０１）
前記第一のマイクロキャリアに結合した前記第一の分析物の量および前記第二のマイクロキャリアに結合した前記第二の分析物の量を検出する工程は：
（ｉ）工程（ａ）の後に、該第一のマイクロキャリアおよび該第二のマイクロキャリアを検出剤とともにインキュベートする工程であって、該検出剤は、該第一のマイクロキャリアによって捕捉された該第一の分析物および該第二のマイクロキャリアによって捕捉された該第二の分析物に結合する、工程；ならびに
（ｉｉ）該第一のマイクロキャリアおよび該第二のマイクロキャリアに結合した検出剤の量を測定する工程
を含む、上記項９６〜１００のいずれか１項に記載の方法。
（項１０２）
前記検出剤は蛍光性検出剤であり、前記第一のマイクロキャリアおよび前記第二のマイクロキャリアに結合した検出剤の量は蛍光顕微鏡によって測定される、上記項１０１に記載の方法。
（項１０３）
前記検出剤は発光性検出剤であり、前記第一のマイクロキャリアおよび前記第二のマイクロキャリアに結合した検出剤の量は発光顕微鏡によって測定される、上記項１０１に記載の方法。
（項１０４）
前記溶液は生物学的サンプルを含む、上記項９６〜１０３のいずれか１項に記載の方法。
（項１０５）
前記生物学的サンプルは、血液、尿、痰、胆汁、脳脊髄液、皮膚または脂肪組織の間質液、唾液、涙、気管支肺胞洗浄、口腔咽頭分泌物、腸液、経膣部または子宮分泌物および精液からなる群から選択される、上記項１０４に記載に方法。
（項１０６）
複数のマイクロキャリアを含む、マルチプレックスアッセイを実施するためのキットであって、該複数のマイクロキャリアは：
（ａ）第一の分析物を特異的に捕捉する上記項１〜４８、７５および９５のいずれか１項に記載の第一のマイクロキャリアであって、該第一のマイクロキャリアは第一のアナログコードでコード化されている、マイクロキャリア；ならびに
（ｂ）第二の分析物を特異的に捕捉する上記項１〜４８、７５および９５のいずれか１項に記載の第二のマイクロキャリアであって、該第二のマイクロキャリアは第二のアナログコードでコード化されており、該第二のアナログコードは該第一のアナログコードと異なる、マイクロキャリア；
を少なくとも含む、キット。
（項１０７）
前記第一のマイクロキャリアに結合した前記第一の分析物の量および前記第二のマイクロキャリアに結合した前記第二の分析物の量を検出するための検出剤をさらに含む、上記項１０６に記載のキット。
（項１０８）
前記キットを使用して、前記第一の分析物および前記第二の分析物を検出するための説明書をさらに含む、上記項１０６または上記項１０７に記載のキット。
【図１ＡＢ】
2020202874.tif 000003
【図１ＣＤ】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５】
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【図６ＡＢ】
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【図６Ｃ】
2020202874.tif 000011
【図７】
2020202874.tif 000012
【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
2020202874.tif 000015
【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【図１２Ｄ】
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【図１２Ｅ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１３Ｃ】
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【外国語明細書】
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