(57)【要約】【課題】  エストラジオール産生促進用医薬組成物及び食品組成物の提供。【解決手段】  本発明は５−アセチル−１ベンジルピロリジン−２−オンを有効成分として含有してなるエストラジオール産生促進用医薬組成物及びエストラジオール産生促進用食品組成物に関する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オンを有効成分として含有してなるエストラジオール産生促進用医薬組成物。
【請求項２】
５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オンを有効成分として含有してなるエストラジオール産生促進用食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エストラジオール（Estradiol）産生促進用の医薬組成物及び食品組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明に係る医薬組成物及び食品組成物の有効成分たる５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オン（５-Acetyl-１-benzylpyrrolidin-２-one）は、ピロリジンの５位に位置する炭素にアセチル基がついており、１位に位置する窒素にベンジル基がついており、２位に位置する炭素に酸素の二重結合がついている化合物である。
【０００３】
従来、下記非特許文献１に示すように、この５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オンが合成化合物の一例として示唆されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】DESKUS、外2名、「SYNTHESIS OF 5S-(1-OXOALKYL AND ARYL)-2-PYRROLIDINONE DERIVATIVES」、SYNTHETIC COMMUNICATIONS、アメリカ合衆国、Marcel Dekker,Inc.、1998年5月、第28巻、第9号、p.1649-1659
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、上記非特許文献１においては、５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オンの存在が示唆されているにすぎず、具体的な属性については何らの開示も示唆もなされていない。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、鋭意研究の結果、エストラジオールの産生を促進する作用を５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オンが有していることを見出し、本発明を完成するに至ったものである。
【０００７】
すなわち、本発明は、５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オンを有効成分として含有してなるエストラジオール産生促進用医薬組成物またはエストラジオール産生促進用食品組成物に関する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明のエストラジオール産生促進用医薬組成物及び食品組成物は、エストラジオールの不足による更年期障害（気分の落ち込み、イライラなどの心理的症状、のぼせ・ほてり、冷え、不眠、汗をかきやすい、息切れ・動悸、頭痛、めまい、吐き気、疲れやすい、肩こり、腰痛、手足の痛みなどの身体的症状）、不妊、骨粗しょう症、肌や髪の乾燥、コレステロール値上昇、高脂血症、動脈硬化等の予防、治療又は改善に貢献することができる。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明は、５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オンを有効成分として含有する、エストラジオールの不足による更年期障害、不妊、骨粗しょう症、肌や髪の乾燥、コレステロール値上昇、高脂血症、動脈硬化等の予防及び／又は治療のためのエストラジオール産生促進用医薬組成物に関する。
【００１０】
５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オンは、ピロリジンの５位に位置する炭素にアセチル基がついており、１位に位置する窒素にベンジル基がついており、２位に位置する炭素に酸素の二重結合がついている化合物であり、構造式は下記化１のとおりである。また、分子式はＣ１３Ｈ１５ＮＯ２である。
【００１１】
【化１】
2020066611.tif 000002
【００１２】
エストラジオールは、既述の如く、エストロゲンの一種であり、他のエストロゲンたるエストロン、エストリオールに比して、最も含有比率が高く、最も活性が高いことが知られている。そして、エストラジオールが基準値よりも不足すると、更年期障害、不妊、骨粗しょう症、肌や髪の乾燥、コレステロール値上昇、高脂血症、動脈硬化等の状態となることが知られており、本発明に係る医薬組成物はこれらの状態の予防及び／又は治療に貢献する。
【００１３】
本発明に係る医薬組成物は、医薬品又は医薬部外品として使用することができ、各種の形態とすることができる。これら医薬品又は医薬部外品は、例えば、散剤、丸剤、錠剤（例えば、コーティング錠、糖衣錠、チュワブル錠等）、カプセル剤（例えば、硬若しくは軟ゼラチンカプセル剤等）、顆粒剤、内服液剤（例えば、乳濁剤、懸濁剤、シロップ等）等の経口投与に適した剤形とすることができる。
【００１４】
その他、例えば、坐剤等の直腸内投与に適した剤形、例えば、注射剤、輸液等の血管内投与、筋肉内投与、皮下又は皮肉投与等に適した剤形、例えば軟膏、クリーム剤、ゲル剤、又は液剤（点眼液、洗眼液等を含む。）等の局部的又は経皮的投与に適した剤形、すなわち非経口的投与に適した剤形とすることもできるが、好ましくは経口投与である。
【００１５】
本発明の医薬組成物を錠剤、顆粒剤，カプセル剤、チュワブル錠の形態で用いる場合には、打錠加工助剤、顆粒加工助剤、カプセル加工助剤等をはじめとして既知の担体が用いられ得る。
【００１６】
打錠加工助剤としては、グラニュー糖、上白糖、粉糖、還元麦芽糖水飴粉末、乳糖、ブドウ糖、プルラン、エリスリトール、デンプン、デキストリン等あらゆる糖類、結晶セルロース、アラビアガム、おから等の食物繊維類、トウモロコシタンパク、リン酸カルシウム等の食品カルシウム、食品エキス類、食品乾燥粉末類、天然果汁末類、ショ糖脂肪酸エステル等の界面活性剤、粉末油脂類、グリセリン、脂肪酸エステル等の油脂類、又はチュワブル錠に使用する各種甘味料、各種酸味料、各種香料等の味付け素材、コーティング素材としてのシェラック、トウモロコシタンパク、酵母細胞壁、デンプン、還元麦芽糖水飴、シュガーレス糖衣、マルチトール、グリセリン、ソルビトール、ＨＰＭＣ、ＨＰＣ等が例示される。ただし、本発明の効果を損なわない限り、特に制限はない。
【００１７】
また、顆粒加工助剤としても、本発明の効果を損なわない限り、特に制限はないが、グラニュー糖、上白糖、粉糖、還元麦芽糖水飴粉末、乳糖、ブドウ糖、プルラン、エリスリトール、デンプン、デキストリン等あらゆる糖類、結晶セルロース、アラビアガム等の食物繊維類、トウモロコシタンパク、リン酸カルシウム等の食品カルシウム、食品エキス類、食品乾燥粉末類、天然果汁末類等が例示される。
【００１８】
また、カプセル加工助剤としても、本発明の効果を損なわない限り、特に制限はないが、ハードカプセルタイプのカプセルを調製するための、グラニュー糖、上白糖、粉糖、還元麦芽糖水飴粉末、乳糖、ブドウ糖、プルラン、エリスリトール、デンプン、デキストリン等あらゆる糖類、結晶セルロース、アラビアガム等の食物繊維類、トウモロコシタンパク、リン酸カルシウム等の食品カルシウム、食品エキス類、食品乾燥粉末類、天然果汁末類等が、ソフトカプセルタイプのカプセルを調製するための、食品油脂、ミツロウ、グリセリン脂肪酸エステル等の内容物粘度調整剤等が、それぞれ例示される。
【００１９】
錠剤は、通常、打錠機を使用して調製され得るが、錠剤に味付け素材をブレンドしてチュワブル錠にしたり、錠剤表面を、自動コーティング機、噴霧顆粒機、又は手掛けパンを用いてコーティングしたりしてもよい。顆粒剤の成形には、噴霧顆粒機タイプ、練りだし（押し出し）タイプ、又は高速撹拌顆粒機タイプの各種顆粒機が使用され得る。カプセル剤の調製には、カプセル助剤を混合してカプセル充填機（ハードタイプ及びソフトタイプ）が使用され得る。
【００２０】
また、本発明は、５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オンを有効成分として含有してなる、エストラジオールの不足による更年期障害、不妊、骨粗しょう症、肌や髪の乾燥、コレステロール値上昇、高脂血症、動脈硬化等の状態の予防及び／又は改善のためのエストラジオール産生促進用食品組成物に関する。
【００２１】
本発明のエストラジオール産生促進用食品組成物は、食品、飲料又は動物用飼料として、例えば、健康食品、機能性食品、特定保健用食品、美容食品又は栄養補助食品（サプリメント）として使用することができる。これら食品、飲料及び動物用飼料は、例えば、アイスクリーム、ゼリー、あめ、チョコレート、及びチューインガム等の既知の食品形態、お茶及びジュース等の飲料水としての形態であってもよい。また、液剤、粉剤、粒剤、カプセル剤又は錠剤等の形態であってもよい。
【００２２】
本発明に係るエストラジオール産生促進用医薬組成物及びエストラジオール産生促進用食品組成物の摂取量は、特に制限されないが、使用者若しくは患者等の摂取者又は摂取動物の年齢、体重又は症状等や剤形に応じて適宜選択することができる。また、摂取期間は、摂取者又は摂取動物の年齢、症状に応じて任意に定めることができる。
【実施例】
【００２３】
次に、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はその要旨を超えない限り以下の実施例に限定されるものではない。
【００２４】
〈卵巣由来細胞を用いたエストラジオール産生促進試験〉
エストラジオールは、既述のように、卵巣から分泌されるステロイドホルモンであり、その分泌は卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ：Follicle Stimulating Hormone）による刺激に起因することが知られている。本試験では、卵巣由来細胞を用いて、５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オンにエストラジオールの産生促進作用があるかを確認した。
【００２５】
〈卵巣由来細胞〉
ＫＧＮ細胞株（卵巣顆粒膜がん細胞株）
細胞No. RCB1154
理化学研究所バイオリソースセンターより入手。
なお、このＫＧＮ細胞株においては、培地中のエストラジオール前駆体（4-Androsten-11β-ol-3,17-dione）がＦＳＨによる刺激を受けてエストラジオールに変換されることが判明している。
【００２６】
〈試験区〉
・陰性コントロール：無血清培地のみ（4-Androsten-11β-ol-3,17-dione添加）
・陽性コントロール：ＦＳＨ添加（100ng/ml）（4-Androsten-11β-ol-3,17-dione添加）
・５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オン  10μｇ／ｍｌ：（無血清培地に溶解したため無血清培地で希釈調製）
・５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オン  100μｇ／ｍｌ：（無血清培地に溶解したため無血清培地で希釈調製）
【００２７】
〈使用装置〉
マイクロプレートリーダー：Molecular Devices社製  SpectraMax i3
【００２８】
〈方法〉
１）２４ウェル培養プレートにＫＧＮ細胞を播種し、コンフルエントになるまで培養。
２）培養したＫＧＮ細胞を各試験区の培地に交換した。
３）３日後に培養上清を採取し、各ウェルの細胞数を計数した。
４）培養上清についてELISA法を用いてエストラジオールの量を定量した。使用ELISAキットはEstradiol ELISA Kit（Cayman Chemical社製  品番：582251、Lot. 0524875）。
５）有意差の検定はMicrosoft社のExcelを用いてＦ検定を行い、結果に応じてさらにｔ検定を実施した。
【００２９】
〈結果〉
各試験区のエストラジオール産生量は以下の表のとおりとなった。
〈表１〉
2020066611.tif 000003
【００３０】
どの試験区においても大きな細胞数低下などの変化は認められず、細胞への強い毒性は認められなかった。５-アセチル-１-ベンジルピロリジン-２-オン  10μｇ／ｍｌと100μｇ／ｍｌについては、陰性コントロールと比較してＰ＜０．０５の有意水準で有意にエストラジオール産生促進効果が認められ、特に100μｇ／ｍｌでは陽性コントロールに匹敵する促進効果を確認できた。