(57)【要約】【課題】本明細書においてアルツハイマー型の認知機能障害の治療（例えば発生の遅延）に使用される低用量ピオグリタゾンを含む製剤が提供される。【解決手段】アルツハイマー型の認知機能障害を治療するのに使用される低用量ピオグリタゾンを含む組成物。【選択図】図１
2020176142.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルツハイマー型の認知機能障害を治療するための０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンを含む組成物。
【請求項２】
前記治療がアルツハイマー型の認知機能障害の発生を遅延させることを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記治療が今後５年〜７年以内にアルツハイマー型の認知機能障害を発症するリスクが増大しているヒト被験体においてアルツハイマー型の認知機能障害の発生を遅延させることを含み、該リスクは該被験体の年齢及びｒｓ１０５２４５２３遺伝子型に基づくものである、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記ピオグリタゾンが単位剤形で投与される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記単位剤形が０．５ｍｇ〜６ｍｇのピオグリタゾンを含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
認知低下の治療のための０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンを含む組成物。
【請求項７】
ピオグリタゾンを含む、アルツハイマー型の認知機能障害の治療のための組成物であって、それを必要とするヒト被験体に０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンが投与されるように用いられる、組成物。
【請求項８】
前記治療がアルツハイマー型の認知機能障害の発生を遅延させることを含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記被験体が今後５年〜７年以内にアルツハイマー型の認知機能障害を発症するリスクが増大しており、該リスクは該被験体の年齢及びｒｓ１０５２４５２３遺伝子型に基づくものである、請求項７又は８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記被験体が今後５年〜７年以内にアルツハイマー型の認知機能障害を発症するリスクが増大しており、該リスクは該被験体の年齢に基づくものである、請求項７又は８に記載の組成物。
【請求項１１】
前記被験体が少なくとも５０歳である、請求項７〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記被験体が少なくとも５５歳である、請求項７〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記被験体が少なくとも６０歳である、請求項７〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記被験体が少なくとも６２歳である、請求項７〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記被験体がコーカサス人の被験体である、請求項７〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記被験体が非コーカサス人の被験体である、請求項７〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記被験体がε２／ε２又はε２／ε３のＡＰＯＥ２遺伝子型を有しない、請求項７〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記投与が１日１回である、請求項７〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記遅延がエピソード記憶機能障害の発生の遅延を含む、請求項８〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
ピオグリタゾンを含む、認知低下の治療のための組成物であって、それを必要とするヒト被験体に０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンが投与されるように用いられる、組成物。
【請求項２１】
（ｉ）被験体が６２歳またはそれより大きく、かつＬ、Ｌ又はＬ、ＶＬ遺伝子型を示し、
（ｉｉ）被験体が７４歳またはそれより大きく、かつＳ、Ｌ遺伝子型を示し、
（ｉｉｉ）被験体が７６歳またはそれより大きく、かつＳ、ＶＬ遺伝子型を示し、（ｉｖ）被験体が７７歳またはそれより大きく、かつＳ、Ｓ遺伝子型を示し、
前記遺伝子型はＴＯＭＭ４０遺伝子のｒｓ１０５２４５２３のそれぞれの対立遺伝子におけるポリＴ残基の長さに基づき、
（ａ）Ｓは短鎖のポリＴ長（１９個未満のＴ残基）、
（ｂ）Ｌは長鎖のポリＴ長（１９個〜２９個の残基）、及び
（ｃ）ＶＬは超長鎖のポリＴ長（３０個以上の残基）
である、請求項３に記載の組成物。
【請求項２２】
前記被験体がε２／ε２又はε２／ε３のＡＰＯＥ２遺伝子型を有しない、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記被験体が正常な認知力を有する、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２４】
ピオグリタゾンを含む、アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体においてアルツハイマー病の発生を遅延させるための組成物であって、
ａ．ＴＯＭＭ４０遺伝子の少なくとも１つの遺伝的変異体の存在が確定され、該遺伝的変異体がｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子であり、該少なくとも１つの遺伝的変異体の存在がアルツハイマー病を発症するリスクを示すことと、
ｂ．０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンが前記被験体に投与され、それにより該被験体においてアルツハイマー病の発生を遅延させるように用いられる、
組成物。
【請求項２５】
ピオグリタゾンを含む、アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体において軽度の認知機能障害の発生を遅延させるための組成物であって、
ａ．ＴＯＭＭ４０遺伝子の少なくとも１つの遺伝的変異体の存在が確定され、該遺伝的変異体がｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子であり、該少なくとも１つの遺伝的変異体の存在がアルツハイマー病を発症するリスクを示すことと、
ｂ．０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンが前記被験体に投与され、それにより該被験体において軽度の認知機能障害の発生を遅延させるように用いられる、
組成物。
【請求項２６】
ピオグリタゾンを含む、アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体において軽度の健忘性認知機能障害の発生を遅延させるための組成物であって、
ａ．ＴＯＭＭ４０遺伝子の少なくとも１つの遺伝的変異体の存在が確定され、該遺伝的変異体がｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子であり、該少なくとも１つの遺伝的変異体の存在がアルツハイマー病を発症するリスクを示すことと、
ｂ．０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンが前記被験体に投与され、それにより該被験体において軽度の健忘性認知機能障害の発生を遅延させるように用いられる、
組成物。
【請求項２７】
ピオグリタゾンを含む、アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体において発症前アルツハイマー病の発生を遅延させるための組成物であって、
ａ．ＴＯＭＭ４０遺伝子の少なくとも１つの遺伝的変異体の存在が確定され、該遺伝的変異体がｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子であり、該少なくとも１つの遺伝的変異体の存在がアルツハイマー病を発症するリスクを示すことと、
ｂ．０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンが前記被験体に投与され、それにより該被験体において発症前アルツハイマー病の発生を遅延させるように用いられる、
組成物。
【請求項２８】
ピオグリタゾンを含む、アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体において前駆アルツハイマー病の発生を遅延させるための組成物であって、
ａ．ＴＯＭＭ４０遺伝子の少なくとも１つの遺伝的変異体の存在が確定され、該遺伝的変異体がｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子であり、該少なくとも１つの遺伝的変異体の存在がアルツハイマー病を発症するリスクを示すことと、
ｂ．０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンが前記被験体に投与され、それにより該被験体において前駆アルツハイマー病の発生を遅延させるように用いられる、
組成物。
【請求項２９】
ピオグリタゾンを含む、アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体においてアルツハイマー病と関連する生理的変化の発生を遅延させるための組成物であって、
ａ．ＴＯＭＭ４０遺伝子の少なくとも１つの遺伝的変異体の存在が確定され、該遺伝的変異体がｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子であり、該少なくとも１つの遺伝的変異体の存在がアルツハイマー病を発症するリスクを示すことと、
ｂ．０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンが前記被験体に投与され、それにより該被験体においてアルツハイマー病と関連する生理的変化の発生を遅延させるように用いられる、
組成物。
【請求項３０】
ピオグリタゾンが１日当たり０．５ｍｇ〜９ｍｇの投与量で投与される、請求項２４〜２９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３１】
ピオグリタゾンが０．１５μｇ・ｈ／ｍＬ〜３．６μｇ・ｈ／ｍＬのＡＵＣを与える投与量で投与される、請求項２４〜２９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３２】
前記投与工程がピオグリタゾンを毎日の治療計画に従って前記被験体に投与することを含む、請求項２４〜２９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３３】
前記投与工程がピオグリタゾンを医薬配合物として前記被験体に投与することを含む、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記医薬配合物が錠剤、カプセル剤、カプレット、液剤、半固体、又は固体である、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
前記錠剤が口腔内崩壊錠である、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記被験体が正常な認知力を有する、請求項２４〜２９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３７】
前記被験体が長鎖（Ｌ，１９個〜２９個のＴ残基）のＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子の１つのコピーを有する、請求項２４〜２９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３８】
前記被験体が長鎖（Ｌ，１９個〜２９個のＴ残基）のＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子の２つのコピーを有する、請求項２４〜２９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３９】
前記被験体が対照被験体と比較してアルツハイマー病を発症するリスクが増大している、請求項２４〜２９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４０】
前記対照被験体が、１９ヌクレオチド長未満のポリＴリピートを含むＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子の少なくとも１つのコピーを保有する、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
前記対照被験体が、１９ヌクレオチド長以上のポリＴリピートを含むＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子のコピーを有しない、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４２】
前記単位剤形が０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンを含む、請求項７又は２０に記載の組成物。
【請求項４３】
前記単位剤形が０．５ｍｇ〜６ｍｇのピオグリタゾンを含む、請求項７又は２０に記載の組成物。
【請求項４４】
ピオグリタゾンを含む、アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体においてアルツハイマー病を治療するための組成物であって、
ａ．ＴＯＭＭ４０遺伝子の少なくとも１つの遺伝的変異体の存在が確定され、該遺伝的変異体がｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子であり、該少なくとも１つの遺伝的変異体の存在がアルツハイマー病を発症するリスクを示すことと、
ｂ．０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンが前記被験体に投与され、それにより該被験体においてアルツハイマー病の発生を遅延させるように用いられる、
組成物。
【請求項４５】
（ｉ）被験体が６２歳またはそれより大きく、かつＬ、Ｌ又はＬ、ＶＬ遺伝子型を示し、
（ｉｉ）被験体が７４歳またはそれより大きく、かつＳ、Ｌ遺伝子型を示し、
（ｉｉｉ）被験体が７６歳またはそれより大きく、かつＳ、ＶＬ遺伝子型を示し、（
ｉｖ）被験体が７７歳またはそれより大きく、かつＳ、Ｓ遺伝子型を示し、
前記遺伝子型はＴＯＭＭ４０遺伝子のｒｓ１０５２４５２３のそれぞれの対立遺伝子におけるポリＴ残基の長さに基づき、
（ａ）Ｓは短鎖のポリＴ長（１９個未満のＴ残基）、
（ｂ）Ｌは長鎖のポリＴ長（１９個〜２９個の残基）、及び
（ｃ）ＶＬは超長鎖のポリＴ長（３０個以上の残基）
である、請求項１、７、又は２０に記載の組成物。
【請求項４６】
ピオグリタゾンは、ピオグリタゾンの薬学的に許容される塩を含む請求項１〜４５のいずれかに記載の組成物。
【請求項４７】
ピオグリタゾンは、ピオグリタゾンの薬学的に許容される塩からなる請求項１〜４５のいずれかに記載の組成物。
【請求項４８】
ピオグリタゾンは、ピオグリタゾン塩酸塩を含む請求項４６または４７に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はアルツハイマー病を発症するリスクがある被験体を治療するための方法及び製剤に関する。
【０００２】
［関連出願］
本出願は、２０１１年１月１０日に出願された米国仮特許出願第６１／４３１，３７０号の利益を米国特許法第１１９条（ｅ）項に基づき主張するものである。
【背景技術】
【０００３】
アルツハイマー病は神経変性疾患であり、認知症の最も一般的な原因である。この疾患は正常な老化に比べて加速した、記憶、思考能力及び行動の緩やかではあるが進行的な低下として現れる（非特許文献１）。最終的には、患者は親しい人物を認識することも又は最も簡単な作業を行うこともできなくなる。アルツハイマー病は現在、米国において６番目に多い死因である。
【０００４】
この疾患には２つの主要型が存在する。家族性アルツハイマー病は通常、３つの遺伝子（ＡＰＰ、ＰＳＥＮ１又はＰＳＥＮ２）のうちの１つにおける優性突然変異によって引き起こされる。この型の疾患は中年期に発生する稀ではあるが壊滅的な疾病である。この疾患の第２のはるかに多く見られる型は散発性又は遅発性アルツハイマー病（以下、「アルツハイマー病」又は「ＡＤ」）である。アルツハイマー病の発生は通常６２歳以降に起こる。
【０００５】
世界の人口及び人間の寿命が増大するにつれて、世界中でアルツハイマー病に冒される人の数も増大する。アルツハイマー病が症例の最大で８０％を占める認知症の世界的な推定コストは２０１０年で６０４０億米ドルであり、これは米国のＧＤＰの１％を上回るものであった（非特許文献２）。米国におけるアルツハイマー患者の介護コストは２０１０年の１億７２００万米ドルから２０５０年には１兆７００億米ドルに増大すると予測される（非特許文献３）。
【０００６】
現在、この疾患の治療に対して認可されている幾つかの薬は或る程度の症状の緩和をもたらすが、この緩和は通常比較的短い期間のものであり、この治療法は疾患の進行の経過を変えるものではない（非特許文献３）。疾患の発生を遅延させる、疾患の進行速度を低減させる、又はその両方をもたらすことができる治療法が早急に必要とされている。これらの目的のいずれかを達成することができる治療法によって、疾患に罹る個体数が低減するか、又はより進行した消耗期の疾患に罹る個体数が低減する（非特許文献４）。２０１５年に画期的な治療法が利用可能になることにより、アルツハイマー病の発生が５年遅延されれば、２０５０年にこの病態に罹ると予測される１３５０万人のアメリカ人のうちの４３％がこの疾患に罹ることなく、また進行性の疾患に罹る人が少なくなることが推定される。
【０００７】
アルツハイマー病の主要な危険因子は年齢であり、該疾患の有病率は年齢とともに増大する（６５歳超の個体のおよそ１０％及び８５歳超の個体のおよそ５０％）。該疾患の発生率は６５歳から５年ごとに倍増し、６５歳超の人１０００００人当たり毎年約１２７５症例が新たに診断される（非特許文献５）。男女ともアルツハイマー病に冒されるが、女性はおそらくは寿命がより長いために、一般的に症例全体のより大きな割合を占める（およそ６０％対４０％）。アルツハイマー病を患う人は診断を受けた後、平均しておよそ３年〜９年生存する傾向にある。
【０００８】
これまでにＡＰＯＥのε４対立遺伝子はアルツハイマー病を発症するリスクの増大と関連があるとされてきた（非特許文献６、非特許文献７、Roses et al.に対する特許文献１及び特許文献２）。その関連性はコピー数に依存するものである（非特許文献８）。換言すると、２つのＡＰＯＥ４対立遺伝子の保因者は、１つだけのＡＰＯＥ４対立遺伝子の保因者よりもより早い年齢で遅発性アルツハイマー病（ＬＯＡＤ）を発症しやすい（非特許文献９）。
【０００９】
ただし、ＡＰＯＥ４対立遺伝子は遅発性アルツハイマー病の遺伝的リスクのおおよそ５０％を占めているにすぎない。一説には、ＡＰＯＥ４は、隣接する連鎖不均衡における何らかの代理マーカーとして働くものにすぎない。代替的には、ミトコンドリア毒性におけるＡＰＯＥ４の機構的役割の近年の発見を考慮すると、ＡＰＯＥ４の負の影響は隣接してコードされ得る別の遺伝子産物によって抑止され得るか又は悪化し得る（非特許文献１０）。
【００１０】
アルツハイマー病の症状は、主に記憶機能障害、言語機能不全、及び視空間能力を含む認知障害を特徴としており、職業問題及び社会問題（例えば日常生活動作）にまで及び得る機能障害；並びにうつ病、不安症、攻撃性（aggression）及び精神病を含む行動上の症状が疾患の重症度の進行として現れることもある。
【００１１】
現在、アルツハイマー病の明確な診断には、ＡＤと一致する認知障害の臨床所見と、ＡＤと一致する脳病変の死体解剖による特定と、が必要とされている。「ＡＤ認知症」という用語は、アルツハイマー病の病態生理によるものである認知症を説明するのに用いられる。「確診的（probable）アルツハイマー病」という用語は、被験体がアルツハイマー病の臨床的特徴を示す場合で、かつ認知症の他の可能性のある生物学的な原因（例えばパーキンソン病又は脳卒中）が排除される場合に生存中に用いられる。
【００１２】
現在、確診的アルツハイマー病と診断するのに多様な当該技術分野で許容される方法が存在する。通常、これらの方法は組み合わせて使用される。これらの方法には、個人の日常活動を行う能力の決定と、行動及び人格の変化の特定と、が含まれる。ＡＤ型の認知症は通常、健忘症状（記憶障害）、又は言語機能、視空間機能若しくは実行機能の障害によっても特徴付けられる。認知能／機能障害は、全体的な認知（例えば改良型ミニメンタルステート検査（３ＭＳ−Ｅ））、並びに視覚的記憶及び言語的記憶（例えばそれぞれ、簡易視空間記憶検査（改訂版）（ＢＶＭＴ−Ｒ）及びホプキンス言語学習検査（改訂版）（ＨＶＬＴ−Ｒ））、言語（例えば生成発話流暢性検査（ＧＶＦＴ））並びに実行機能及び注意力（例えばデジットスパン検査（ＤＳＴ））等の特定領域を評価するのに有効な機器を含むが、これらに限定されない当該技術分野で許容される方法によって確定することができる。ＡＤによる認知症は潜行性の発生及び認知能力の悪化歴によっても定義される。
【００１３】
「確診的アルツハイマー病」の基準は最近になって加齢性アルツハイマー関連ワークグループの国立研究所（a National Institute of Aging-Alzheimer's Association workgroup）によって更新された（非特許文献１１）。このワークグループによって、初めにアルツハイマー病認知症の中心的臨床的特徴を示す人にとって、該疾患と関連するバイオマーカーの痕跡が診断の確実性を高め得ることが提言された。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】米国特許第６，０２７，８９６号
【特許文献２】米国特許第５，７１６，８２８号
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】Reitz et al. 2011 Nat Rev Neurol 7: 137-152
【非特許文献２】Wimo and Prince 2010 World Alzheimer Report 2010: The Global     Economic Impact of Dementia 1-93
【非特許文献３】Alzheimer's Association. "Changing the Trajectory of Alzheim    er's Disease: A National Imperative (2010)"
【非特許文献４】Brookmeyer et al. 2007 Alzheimers Dement 3: 186-191
【非特許文献５】Querfurth et al., 2010 NEJM 362:4
【非特許文献６】Pericak-Vance et al. 1991 Am J Hum Genet 48: 1034-1050
【非特許文献７】Martin et al. 2000 Am J Hum Genet 67: 383-394
【非特許文献８】Yoshizawa et al. 1994 Ann Neurol 36: 656-659
【非特許文献９】Corder et al. 1993 Science 261, 921-3
【非特許文献１０】Chang et al. 2005 Proc Natl Acad Sci U S A 102: 18694-18699
【非特許文献１１】McKhann et al. 2011 Alzheimers Dement 7: 263-269
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
米国単独でアルツハイマー病を患う人が４５０万を超えること（この数は集団が高齢化するにつれて成長し続ける）、アルツハイマー病を発症した際のアルツハイマー病の厳しく過酷な変性及び衰弱性質、並びにアルツハイマー病を患う人の介護にかかる高いコストを考慮すると、アルツハイマー病の発生を遅延させることができる効果的な薬物療法が実際に緊急で必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
軽度の認知機能障害（例えばアルツハイマー型の認知機能障害）を治療するのに有用である、低用量ピオグリタゾンを含む組成物が本明細書において提供される。幾つかの実施の形態では、治療は軽度の認知機能障害の発生の遅延を含む。幾つかの実施の形態では、治療は認知力が正常な被験体における軽度の認知機能障害の発生の遅延を含む。幾つかの実施の形態では、遅延はエピソード記憶機能障害の発生の遅延を含む。
【００１８】
幾つかの実施の形態では、治療は今後５年〜７年以内に認知機能障害を発症するリスクが増大したヒト被験体における軽度の認知機能障害の発生の遅延を含み、該リスクは該被験体の年齢に基づくものであるか、又は該被験体の年齢及びＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３遺伝子型に基づくものである。
【００１９】
幾つかの実施の形態では、低用量ピオグリタゾンが例えば０．５ｍｇ、１ｍｇ、１．５ｍｇ又は２ｍｇ〜６ｍｇ、８ｍｇ、１０ｍｇ又は１２ｍｇのピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩を含む単位剤形で投与される。
【００２０】
軽度の認知機能障害（例えばアルツハイマー型の認知機能障害）の治療のための医薬配合物の製造における低用量ピオグリタゾンの使用も提供される。幾つかの実施の形態では、医薬配合物は錠剤である。幾つかの実施の形態では、医薬配合物はカプセルである。幾つかの実施の形態では、医薬配合物はカプレットである。幾つかの実施の形態では、医薬配合物は液体である。幾つかの実施の形態では、医薬配合物は固体又は半固体である。
【００２１】
認知低下の治療に使用される低用量ピオグリタゾンを含む組成物も提供される。
【００２２】
軽度の認知機能障害（例えばアルツハイマー型の認知機能障害）の治療を、それを必要とするヒト被験体において行う方法であって、被験体に低用量ピオグリタゾンを投与することを含む、方法が更に提供される。幾つかの実施の形態では、治療は軽度の認知機能障害の発生の遅延を含む。幾つかの実施の形態では、治療は認知力が正常な被験体における軽度の認知機能障害の発生の遅延を含む。幾つかの実施の形態では、遅延はエピソード記憶機能障害の発生の遅延を含む。
【００２３】
幾つかの実施の形態では、被験体は今後５年〜７年以内にアルツハイマー型の認知機能障害を発症するリスクが増大しており、該リスクは該被験体の年齢に基づくものであるか、又は該被験体の年齢及びｒｓ１０５２４５２３（’５２３）遺伝子型に基づくものである。
【００２４】
幾つかの実施の形態では、被験体は少なくとも５０歳、５５歳、６０歳、６２歳、６８歳又は７０歳である。
【００２５】
幾つかの実施の形態では、被験体はコーカサス人の被験体である。幾つかの実施の形態では、被験体は非コーカサス人の被験体である。
【００２６】
幾つかの実施の形態では、被験体は１つ又は２つのＡＰＯＥ２対立遺伝子を有しない。
【００２７】
幾つかの実施の形態では、低用量ピオグリタゾンが例えば０．５ｍｇ、１ｍｇ、１．５ｍｇ又は２ｍｇ〜６ｍｇ、８ｍｇ、１０ｍｇ又は１２ｍｇのピオグリタゾンを含む単位剤形で投与される。幾つかの実施の形態では、投与は１日１回である。
【００２８】
幾つかの実施の形態では、ピオグリタゾンは、約０．１５μｇ・ｈ／ｍＬ〜約３．６μｇ・ｈ／ｍＬのＡＵＣを与えるものとして準備されるか又は約０．１５μｇ・ｈ／ｍＬ〜約３．６μｇ・ｈ／ｍＬのＡＵＣを与える投与量で投与される。幾つかの実施の形態では、ピオグリタゾンは、０．１２μｇ・ｈ／ｍＬ〜４．５μｇ・ｈ／ｍＬのＡＵＣを与えるものとして準備されるか又は０．１２μｇ・ｈ／ｍＬ〜４．５μｇ・ｈ／ｍＬのＡＵＣを与える投与量で投与される。幾つかの実施の形態では、ピオグリタゾンは、０．１２μｇ・ｈ／ｍＬ〜３．４μｇ・ｈ／ｍＬのＡＵＣを与えるものとして準備されるか又は０．１２μｇ・ｈ／ｍＬ〜３．４μｇ・ｈ／ｍＬのＡＵＣを与える投与量で投与される。
【００２９】
認知低下の治療を、それを必要とするヒト被験体において行う方法であって、該被験体に低用量ピオグリタゾンを投与することを含む、方法も提供される。
【００３０】
所定の年齢又は年齢範囲のヒト被験体においてアルツハイマー型の認知機能障害を発症するリスクの増大を確定する方法であって、  
前記被験体の生体サンプルから該被験体の’５２３遺伝子型を検出し、’５２３のそれぞれの対立遺伝子を、
（ａ）短鎖（Ｓ、１９個未満のＴ残基）、
（ｂ）長鎖（Ｌ、１９個〜２９個の残基）、又は、
（ｃ）超長鎖（ＶＬ、３０個以上の残基）、
に割り当てることと、
’５２３遺伝子型から、前記被験体が所定の年齢又は年齢範囲でアルツハイマー型の認
知機能障害を発症するリスクが増大しているか否かを確定し、ここでは、
（１）約６２歳超で、かつＬ、Ｌ又はＬ、ＶＬがリスクの増大を示し、
（２）約６２歳超で、かつＶＬ、ＶＬがリスクの増大を示さず、
（３）約７４歳超で、かつＳ、Ｌがリスクの増大を示し、
（４）約７７歳超で、かつＳ、Ｓがリスクの増大を示し、
（５）約７６歳超で、かつＳ、ＶＬがリスクの増大を示す、
ことと、
を含む、方法も更に提供される。
【００３１】
幾つかの実施の形態では、前記確定が、前記被験体の生体サンプルから、該被験体のＡＰＯＥ遺伝子型を検出することを更に含み、ここで該遺伝子型におけるＡＰＯＥ２対立遺伝子の存在は該被験体のリスクが増大していないことを示す。
【００３２】
アルツハイマー型の認知機能障害の治療のために低用量ピオグリタゾンをヒト被験体に投与すべきか否かを確定する方法であって、
前記被験体の生体サンプルから、該被験体の’５２３遺伝子型を検出し、それぞれの対
立遺伝子を、
（ａ）短鎖（Ｓ、１９個未満のＴ残基）、
（ｂ）長鎖（Ｌ、１９個〜２９個の残基）、又は、
（ｃ）超長鎖（ＶＬ、３０個以上の残基）、
に割り当てることと、
前記ヒト被験体の’５２３遺伝子型と年齢とからアルツハイマー型の認知機能障害の治
療のために低用量ピオグリタゾンを該被験体に投与すべきか否かを確定し、ここでは、
（１）約６２歳超で、かつＬ、Ｌ又はＬ、ＶＬが要治療を示し、
（２）約６２歳超で、かつＶＬ、ＶＬが要治療を示さず、
（３）約７４歳超で、かつＳ、Ｌが要治療を示し、
（４）約７７歳超で、かつＳ、Ｓが要治療を示し、
（５）約７６歳超で、かつＳ、ＶＬが要治療を示す、
ことと、
を含む、方法も提供される。
【００３３】
幾つかの実施の形態では、前記確定が、前記被験体の生体サンプルから、該被験体のＡＰＯＥ遺伝子型を検出することを更に含み、ここで該遺伝子型におけるＡＰＯＥ２対立遺伝子の存在は要治療を示さない。
【００３４】
上記の方法又は組成物のいずれかの幾つかの実施の形態では、被験体は正常な認知力を有する。
【００３５】
アルツハイマー病の発生を遅延させる方法であって、（ａ）アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体においてＴＯＭＭ４０遺伝子の変異体を検出することと、（ｂ）アルツハイマー病の発生を遅延させるために、有効な低用量ピオグリタゾン又はピオグリタゾン塩を含有する製剤を、ＴＯＭＭ４０変異体によって検出されたリスク被験体に投与することと、を含む、方法が更に提供される。例えば、本発明は、（ａ）アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体において長いポリＴ対立遺伝子（１９個を超えるチミジン残基）等のＴＯＭＭ４０遺伝子の変異体を検出することと、（ｂ）アルツハイマー病の発生を遅延させるために、有効量の低用量ピオグリタゾン又はピオグリタゾン塩の製剤を、例えば正常な認識段階にあるとされる、ＴＯＭＭ４０遺伝子の長いポリＴ対立遺伝子変異体によって検出されたリスク被験体に投与することと、を想定する。
【００３６】
アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体において軽度の認知機能障害段階、軽度の健忘性認知機能障害段階、発症前アルツハイマー病段階及び／又は前駆アルツハイマー病段階等といったアルツハイマー病へと進行する１つ又は複数の段階の発生を遅延させる方法であって、（ａ）アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体において長いポリＴ対立遺伝子（１９個を超えるチミジン残基）等のＴＯＭＭ４０遺伝子の変異体を検出することと、（ｂ）リスク被験体においてアルツハイマー病の発生を遅延させるために、任意の認知機能障害又は他の段階を含む、アルツハイマー病ヘと進行する段階のうちの１つ又は複数の発生を遅延させるために、有効量の低用量ピオグリタゾン又はピオグリタゾン塩を含有する製剤を、ＴＯＭＭ４０変異体が検出されたリスク被験体に投与することと、を含む、方法も提供される。本発明のこの方法によれば、リスク被験体は、ＴＯＭＭ４０変異体の検出及び／又は治療時点では、正常な認識段階に又はアルツハイマー病ヘと進行する段階のいずれか１つにあるとされることが理解される。
【００３７】
上記の要約は本発明の開示された各実施形態又はあらゆる実施態様を説明するような意図はない。下記の記載は実施形態をより具体的に例示するものである。本出願を通して幾つかの箇所で、例を挙げることによって指示が与えられているが、これらの例は様々な組み合わせで用いることができる。いかなる場合であっても、列挙されるものは代表群としての役割を果すものにすぎず、排他的なものとしては解釈されない。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】ビヒクル対照と比べた複数用量のＰＩＯでのラットの脳のｆＭＲＩ画像を示す図である。上パネルはベースライン時の群平均化したｆＭＲＩシグナルを示し、下パネルは治療７日目の群平均化したｆＭＲＩシグナルを示す。この分析によって、０．０４ｍｇ／ｋｇ／日ほどの低い用量のピオグリタゾンＨＣｌがラットの脳の深部の皮質下構造において代謝の変化を誘導させることが示されている。
【図２】ＴＯＭＭ４０  ５２３遺伝子型のそれぞれについてのアルツハイマー型の認知機能障害の発生年齢のグラフを示す図である。Ｙ軸は認知機能障害のない残存割合を示し、Ｘ軸は年齢を表す。データはＤｕｋｅ  Ｂｒｙａｎ  ＡＤＲＣコホートＮ＝４３８人の被験体（１０６人は認知機能障害と診断され、３３２人は認知力が正常であると診断された）から得られたものである。各遺伝子型のＮ：Ｌ、Ｌ：２３；Ｌ、ＶＬ：５４；Ｓ、Ｌ：７２；Ｓ、Ｓ：１００；Ｓ、ＶＬ：１３８；ＶＬ、ＶＬ：５１。
【図３】Ｓ、Ｌの５２３遺伝子型を保有する個体に対するアルツハイマー型の認知機能障害の発生年齢を示す曲線を示す図である。Ｙ軸は認知機能障害のない残存割合を示し、Ｘは年齢を表す。曲線は７４歳から始まる急勾配（垂線）を示す。試験に参加しているＳ、Ｌの５２３遺伝子型を保有する７４歳以上の個体は今後５年の間に認知機能障害を発症するリスクが高い。データはＤｕｋｅ  Ｂｒｙａｎ  ＡＤＲＣコホートＮ＝７２人の被験体（２３人は認知機能障害と診断され、４９人は認知力が正常であると診断された）から得られたものである。
【図４】Ｌ、Ｌの５２３遺伝子型に対するアルツハイマー型の認知機能障害の発生年齢を示す曲線を示す図である。Ｙ軸はＣＩのない残存割合を示し、Ｘ軸は年齢を表す。データはＤｕｋｅ  Ｂｒｙａｎ  ＡＤＲＣコホートＮ＝２３人の被験体（１１人はＣＩと診断され、１２人は認知力が正常であると診断された）から得られたものである。
【図５】Ｌ、ＶＬの５２３遺伝子型に対するアルツハイマー型の認知機能障害の発生年齢を示す曲線を示す図である。Ｙ軸はＣＩのない残存割合を示し、Ｘ軸は年齢を表す。データはＤｕｋｅ  Ｂｒｙａｎ  ＡＤＲＣコホートＮ＝５４人の被験体（２４人はＣＩと診断され、３０人は認知力が正常であると診断された）から得られたものである。
【図６】Ｓ、Ｌの５２３遺伝子型に対するアルツハイマー型の認知機能障害の発生年齢を示す曲線を示す図である。Ｙ軸はＣＩのない残存割合を示し、Ｘ軸は年齢を表す。データはＤｕｋｅ  Ｂｒｙａｎ  ＡＤＲＣコホートＮ＝７２人の被験体（２３人はＣＩと診断され、４９人は認知力が正常であると診断された）から得られたものである。
【図７】Ｓ、Ｓの５２３遺伝子型に対するアルツハイマー型の認知機能障害の発生年齢を示す曲線を示す図である。Ｙ軸はＣＩのない残存割合を示し、Ｘ軸は年齢を表す。データはＤｕｋｅ  Ｂｒｙａｎ  ＡＤＲＣコホートＮ＝１００人の被験体（２０人はＣＩと診断され、８０人は認知力が正常であると診断された）から得られたものである。
【図８】Ｓ、ＶＬの５２３遺伝子型に対するアルツハイマー型の認知機能障害の発生年齢を示す曲線を示す図である。Ｙ軸はＣＩのない残存割合を示し、Ｘ軸は年齢を表す。データはＤｕｋｅ  Ｂｒｙａｎ  ＡＤＲＣコホートＮ＝１３８人の被験体（２２人はＣＩと診断され、１１６人は認知力が正常であると診断された）から得られたものである。
【図９】ＶＬ、ＶＬの５２３遺伝子型に対するアルツハイマー型の認知機能障害の発生年齢を示す曲線を示す図である。Ｙ軸はＣＩのない残存割合を示し、Ｘ軸は年齢を表す。データはＤｕｋｅ  Ｂｒｙａｎ  ＡＤＲＣコホートＮ＝５１人の被験体（６人はＣＩと診断され、４５人は認知力が正常であると診断された）から得られたものである。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
本発明のより完全な理解及びその付随する利点の多くを説明し提示するために、新規の方法及び組成物に関して以下の詳細な説明及び実施例が与えられる。
【００４０】
一態様では、本発明は、治療を必要とするヒト患者においてアルツハイマー病の発生を遅延させる又はそうでなければアルツハイマー病を治療するために、治療を必要とするヒト患者等の被験体に投与される、低用量ピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩と薬学的に許容されるビヒクルとを含む医薬組成物、すなわち製剤に関する。本発明は多くの様々な形態で具体化され得るが、幾つかの具体的な実施形態が本明細書中で述べられており、本開示は本発明の原理を例示するものとみなされるにすぎず、本発明を記載又は説明される実施形態に限定する意図はないことが理解される。
【００４１】
Ｉ．  定義
本明細書及び添付の特許請求の範囲に使用される場合、数量を特定していないもの（the 単数形態"a", "an", 及び"the"）は、文脈上他に明確に示されていない限り区別なく用いられ、複数の対象も含み、それぞれの意味範囲内にあることが意図される。さらに、本明細書で使用される場合、「及び／又は」は列挙される項目のうちの１つ又は複数のあらゆる可能な組合せ、及び選択的に解釈される場合には組合せの喪失（「又は（若しくは）（or）」）を表すとともに包含する。
【００４２】
本明細書で使用される場合、「少なくとも１つ」は、列挙される要素のうちの「１つ又は複数」を意味するものとして意図される。
【００４３】
単数形は複数形を包含するものとして意図され、他にはっきりと述べられていない限り、本明細書において必要に応じて同様に区別なく用いられ、それぞれの意味範囲内にある。
【００４４】
他で言及されている場合を除き、大文字で記載されている用語及び大文字で記載されていない用語は全てそれぞれの意味範囲内にある。
【００４５】
他に示されていない限り、本明細書及び特許請求の範囲に用いられる量、比率、成分の数値特性、反応条件等を表す数値は全て、どのような場合であっても「約」という用語によって修飾することができることが想定されることが理解される。
【００４６】
本明細書中の部、百分率、比率等は全て、他に示されていない限り重量基準である。
【００４７】
本明細書で使用される場合、「生物学的同等性（bioequivalence）」又は「生物学的に同等な（bioequivalent）」は、薬学的に同等な低用量ピオグリタゾン配合物又は製剤を指し、同じモル投与量又は量での投与後のそれらのバイオアベイラビリティ（吸収速度及び吸収の程度）は、安全性及び有効性に関するそれらの治療効果が本質的に同じになるような程度に似ている。換言すると、「生物学的同等性」又は「生物学的に同等な」は、ピオグリタゾンを類似の条件下で同じモル用量で投与した際に、ピオグリタゾンがピオグリタゾン作用部位においてこのような配合物から利用可能となる速度及び程度、例えばピオグリタゾンをこのような配合物から放出することができる速度、並びにピオグリタゾンがアルツハイマー病に影響を与える作用部位で吸収される及び／又は利用可能となることができる速度において顕著な相違が無いことを意味する。換言すると、同じモル用量での（同じ調剤形態の）２つのピオグリタゾン医薬品のバイオアベイラビリティの類似度が高く、これらの２つのピオグリタゾン医薬品は、治療効果、若しくは有害反応、又はその両方において臨床的に関連する相違を生じる可能性は低い。「生物学的同等性」、並びに「薬学的同等性（pharmaceutical equivalence）」及び「治療的同等性（therapeutic equivalence）」という用語は更に、（ａ）米国食品医薬品局（ＦＤＡ）、（ｂ）連邦規則集（「Ｃ．Ｆ．Ｒ．」）、タイトル２１、（ｃ）カナダ保健省、（ｄ）欧州医薬品庁（ＥＭＥＡ）、及び／又は（ｅ）日本国厚生省によって規定される及び／又は用いられるように本明細書で用いられる。このため、本発明は本発明の他の低用量ピオグリタゾン配合物又は製剤に対して生物学的に同等であり得る低用量ピオグリタゾン配合物又は製剤を想定することが理解される。例として、第１の低用量ピオグリタゾン配合物又は製剤の少なくとも１つの薬物動態パラメータ、例えばＣｍａｘ、Ｔｍａｘ、ＡＵＣ等の測定結果が、第２の低用量ピオグリタゾン配合物又は製剤に関する同じ薬物動態パラメータの測定結果と比較して、約±２５％以下しか変動しない場合に、本発明に従って、第１の低用量ピオグリタゾン配合物又は製剤は第２の低用量ピオグリタゾン配合物又は製剤と生物学的に同等である。
【００４８】
本明細書で使用される場合、「バイオアベイラビリティ」又は「生物学的に利用可能な（bioavailable）」は概して、体循環へのピオグリタゾンの吸収の速度及び程度、より具体的にはピオグリタゾンが作用部位で利用可能となる、又は製剤から吸収され作用部位で利用可能となる速度及び程度を反映することを意図した速度又は測定結果を意味する。換言すると、一例として、本発明の有効性成分含量がより低い配合物からのピオグリタゾンの吸収の程度及び速度は、体循環におけるピオグリタゾンの時間−濃度曲線に反映されるものである。
【００４９】
更なる例として、バイオアベイラビリティは、体循環に到達し、作用部位で利用可能となる治療的に活性のある薬物の程度の測定結果である。バイオアベイラビリティは文字Ｆとして表される。
【００５０】
絶対バイオアベイラビリティに関して、絶対バイオアベイラビリティは、非静脈内投与後の（すなわち経口投与、直腸投与、経皮投与、皮下投与後の）体循環における活性薬物のバイオアベイラビリティ（曲線下面積、すなわちＡＵＣとして推定される）を、静脈内投与後の同じ薬物のバイオアベイラビリティと比較したものである。絶対バイオアベイラビリティは、非静脈内投与によって吸収された薬物を同じ薬物の対応する静脈内投与と比較した分数値である。この比較は、異なる用量が用いられる場合、用量で正規化しなければならず、結果としてＡＵＣはそれぞれ、対応する投与用量を除算することにより補正される。
【００５１】
薬物の絶対バイオアベイラビリティを決定するためには、薬物動態学的研究を行い、静脈内投与（ＩＶ）及び非静脈内投与の両方の後での薬物に関する血漿薬物濃度対時間プロットを作成する必要がある。絶対バイオアベイラビリティは、用量で補正した非静脈内投与の曲線下面積（ＡＵＣ）を静脈内投与のＡＵＣで除算したものである。例えば、経口経路（ｐｏ）で投与した薬物に関するＦを計算するための式を以下に与える。
【数１】
2020176142.tif 000003
【００５２】
したがって、静脈内経路により与えられる薬物は１という絶対バイオアベイラビリティ（Ｆ＝１）を有するが、他の経路により与えられる薬物は通常、１未満の絶対バイオアベイラビリティを有する。
【００５３】
相対バイオアベイラビリティに関して、相対バイオアベイラビリティは、或る特定の薬物のバイオアベイラビリティ（曲線下面積、すなわちＡＵＣとして推定される）を、同じ薬物の別の配合物、通常確立された標準と比較して、又は別の経路を介した投与により測定したものである。標準が静脈内投与した薬物からなる場合、これは絶対バイオアベイラビリティとして知られる。
【数２】
2020176142.tif 000004
【００５４】
本明細書で使用される場合、「薬学的同等性」又は「薬学的に同等な」という用語は、同じ剤形において同量のピオグリタゾンを含有するが、同じ投与経路に対して同じ不活性成分を含有している必要はなく、同一性、強度、品質、及び薬効を含む純度、並びに、必要に応じて、含量均一性及び／又は安定性の同じ又は同程度の公定（compendial）標準又は他の適用可能な標準を満たす、本発明の低用量ピオグリタゾン配合物又は製剤を指す。このため本発明は、本発明に従って使用される他の低用量ピオグリタゾン配合物又は製剤と薬学的に同等であり得る低用量ピオグリタゾン配合物又は製剤を想定することが理解される。
【００５５】
本明細書で使用される場合、「治療的同等性」又は「治療的に同等な」という用語は、（ａ）本発明に従ってアルツハイマー病の発生を遅延させるためにピオグリタゾン製剤を利用した場合に同じ臨床効果及び安全性プロファイルを生じるとともに、（ｂ）薬学的同等物である、例えば同じ剤形でピオグリタゾンを含有し、同じ投与経路を有し、かつ同じピオグリタゾン強度を有する、それらの低用量ピオグリタゾン配合物又は製剤を意味する。換言すると、治療的同等性は、本発明の有効性成分含量がより低いピオグリタゾン配合物の化学的同等物（すなわち同じ個体に同じ投与計画で投与した場合に同じ剤形において同量のピオグリタゾンを含有するもの）が本質的に同じ有効性及び毒性を与えることを意味する。
【００５６】
本明細書で使用される「アルツハイマー病（"Alzheimer's disease", "Alzheimer disease"）」すなわち「ＡＤ」は、認知機能が経時的に徐々に損なわれる疾患であり、軽度の認知機能障害（ＭＣＩ）を示す症候性の前認知症期と、社会的機能又は職業機能が著しく損なわれる認知症期と、を含む。Albert et al. 2011 Alzheimer's & Dementia 7: 270-279、非特許文献１１を参照されたい。
【００５７】
多くのバイオマーカーがアルツハイマー病と一致することが報告されているが、米国食品医薬品局によってアルツハイマー病の診断又は予後診断に有用な又は適格なバイオマーカーとして認識されているものはない。臨床的観点から、アルツハイマー病の診断において常に存在し必要とされる顕著な特徴は認知機能障害である。
【００５８】
認知機能障害の兆候としては、言語、記憶（例えばエピソード記憶）、知覚、情動行動又は人格、認知技能（例えば計算、抽象的思考、判断）等の精神機能が困難になることが挙げられ得るが、これらに限定されない。確定は患者により、患者をよく知る情報提供者により、患者を観察している専門医により、又はそれらの組合せにより得ることができる。
【００５９】
「軽度の認知機能障害」すなわち「ＭＣＩ」は、１つ又は複数の認知領域において人の年齢又は知識を考慮して予期されるものよりも大きな認知能の低下を指す。認知領域としては、記憶、実行機能（例えば問題の解決、計画又は論理的思考）、注意力（例えば単純な分割的注意力）、視空間能力、及び言語（例えば呼称、流暢性、表現豊かな発話（expressive speech）、理解力）が挙げられる。ＭＣＩの症状は正しい単語又は名称を特定することが困難になること、新たな人を紹介された場合に名前を記憶することが困難になること、社会環境又は労働環境において作業を行うことが著しく困難になること、直前に読んだ内容を忘れること、重要な対象物を見失う又は置き間違えること、計画又は組織化によるトラブルの増大、新たな技能を習得するのが困難になること、集中力の欠如、及び不安の増大を含み得る。軽度の認知機能障害は、症状がＭＣＩの現在許容されている基準を満たすのに十分であるが、症状が認知症診断基準を満たさない疾患期である。しかしながら、ＭＣＩの人は機能的に無傷で独立したままであり得る。正式な標準化された認知検査を実施すると、ＭＣＩの人は概して、それらの同等者に対する年齢及び知識で調整した平均未満の１〜１．５という標準偏差スコアである。全てのＭＣＩが認知症に、またアルツハイマー病に至るわけではないことを留意されたい。
【００６０】
本明細書で使用される「アルツハイマー型の認知機能障害」すなわち「ＣＩＡＴ」は、アルツハイマーが原因であると考えられる特徴と一致する認知機能障害を指し、このためＭＣＩのサブセットであるとみなすことができる。「アルツハイマー型の認知機能障害」、「アルツハイマー病による軽度の認知機能障害（ＡＤによるＭＣＩ）」又は「軽度の健忘性認知機能障害（ａＭＣＩ）」という呼称は、アルツハイマー病の症候性の前認知症期を指す。ＣＩＡＴ、又はＡＤによるＭＣＩは、神経心理検査の使用及び個体の認知機能の臨床医による評価に従って確定される。通常、エピソード記憶はＡＤヘと進行するＭＣＩ（ａＭＣＩ）の人において損なわれる。しかしながら、同様にアルツハイマー病ヘと進行する、不定型のＭＣＩ、すなわち非健忘性の（with nonamnestic presentation）ＭＣＩが存在する。認知機能の進行的低下は、人がＡＤによるＭＣＩを患っているという更なる証拠を与える。
【００６１】
多くの神経心理学的評価、特にＡＤによるＭＣＩ又は数年以内にＡＤヘと進行する可能性があるＭＣＩの患者を診断するのに有用である、エピソード記憶（すなわち新たな情報を学習し保持する能力）を検査する神経心理学的評価が存在する。単語リスト学習検査等のエピソード記憶の検査は、即時想起及び／又は遅延想起を評価することができる。さらに、神経変性疾患（例えばパーキンソニズム）、微細梗塞を含む血管事象、うつ病、外傷性疾患、精神共存症等の認知機能障害に対する代替的な病因は除外されるべきである。多くのバイオマーカーが研究における使用に提案されており、更にＡＤと一致する病変の存在を確認することによりＡＤによるＭＣＩの臨床診断を支持する上で、又は所望に応じて疾患の進行をモニタリングするのに有用であり得る。例えば、Albert et al. 2011 Alzheimer's & Dementia 7: 270-279を参照されたい。
【００６２】
本発明に従うと、認知機能障害は、全体的な認知（例えば改良型ミニメンタルステート検査（３ＭＳ−Ｅ））、並びに視覚的記憶及び言語的記憶（例えばそれぞれ、簡易視空間記憶検査（改訂版）（ＢＶＭＴ−Ｒ）及びホプキンス言語学習検査（改訂版）（ＨＶＬＴ−Ｒ））、言語（例えば生成発話流暢性検査（ＧＶＦＴ））並びに実行機能及び注意力（例えばデジットスパン検査（ＤＳＴ））等の特定領域の評価を含むが、これらに限定されない認知評価の任意の当該技術分野で許容される方法によって確定することができる。
【００６３】
生理学的変化は検出されても又は検出されなくてもよい。「生理学的変化」は、例えば機能的連結性の変化、脳萎縮、脳におけるシナプス活動の低減、脳におけるアミロイド蓄積の増大、脳におけるミトコンドリア機能の低減又はミトコンドリア機能不全の増大、脳における神経原線維濃縮体のニューロン形成、及びアルツハイマー病の任意の他の症状に対応する変化のうちの少なくとも１つの発生を意味する。アルツハイマー病の指標となり得る生理学的変化としては、脳における代謝低下、機能的連結性の変化、脳及び／又はＣＳＦにおけるβアミロイドの増大、並びにＣＳＦにおけるタウタンパク質及びリン酸化タウタンパク質が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６４】
本明細書で使用される場合、「発生」は、本明細書で規定されるように、アルツハイマー病又はＣＩＡＴのようなアルツハイマー認知症ヘと進行する疾患期の診断と関連する、又はそれと一致する臨床症状が被験体に現れることを意味する。
【００６５】
本明細書で使用される場合、アルツハイマー病と一致する疾患期の発生又は進行の「遅延」は、第１の時点からアルツハイマー型の認知機能障害のようなアルツハイマー病と一致する疾患期の発生又は悪化までの時間の増大を意味する。例えば、アルツハイマー病の発生の遅延は、アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体における本明細書で規定されるアルツハイマー病の発生が、認知力が正常な被験体がアルツハイマー病を発症するリスクが高いと確定された後にその自然状態の時間枠で起こるものから、少なくとも６ヶ月、１年、１．５年、２年、２．５年、３年、３．５年、４年、４．５年、５年、５．５年、６年、６．５年、７年、７．５年若しくは８年、又はそれ以上、好ましくは３年〜８年、より好ましくは５年遅延されることを意味する。更なる例としては、アルツハイマー病ヘと進行し得る認知機能障害の進行の遅延又は認知症の進行の遅延は、認知低下速度がその自然状態の時間枠に比べて遅くなることを意味する。これらの確定は適切な統計分析を用いることによって行われる。
【００６６】
「第１の時点」は、例えば本明細書で教示される低用量ピオグリタゾン治療の開始を含む。
【００６７】
幾つかの実施形態では、アルツハイマー病と一致する認知機能障害の発生の遅延は、例えば本明細書に記載される認知評価のいずれかを行うことによって、又はアルツハイマー型の認知機能障害に許容される診断基準を満たすことによって確定することができる。認知能力の評価に加えて、所望に応じて、例えば磁気共鳴画像診断（ＭＲＩ）又は脳領域間の機能的連結性の変化の測定によって測定される脳萎縮の速度、脳代謝若しくはニューロン活動の評価、脳におけるアミロイド蓄積、ＢＯＬＤ−ｆＭＲＩシグナルによって測定される脳生理機能、脳におけるミトコンドリア機能、脳におけるミトコンドリア増殖、病的ニューロン、脳における神経原線維濃縮体、ＣＳＦにおけるアミロイド、並びにＣＳＦにおけるタウタンパク質及びリン酸化タウタンパク質等を含む、アルツハイマー病の病変と一致する他のバイオマーカーの変化を測定することもできる。
【００６８】
本明細書で使用される「診断」又は「予後診断」は、共通のヌクレオチド配列、症状、兆候、家族歴若しくは患者の健康状態の検討と関連する他のデータを共有する複数の個体の比較、又は被験体、例えば軽度の認知機能障害（ＭＣＩ）（例えばアルツハイマー型の認知機能障害）の被験体の病気（affliction）の確認に基づき、所与の疾患、障害、又は病態に関する最も可能性のある転帰、時間枠、及び／又は特定の治療に対する応答を予見するための情報（例えば他の分子検査による遺伝情報又はデータ、生体サンプル、兆候及び症状、身体的検査所見、認知能力の結果による生物学的又は化学的な情報等）の使用を指す。
【００６９】
本明細書で使用される「生体サンプル」は、例えば核酸、タンパク質を含有する材料、又は対象となる他の生物学的な若しくは化学的な材料を指す。ＤＮＡ等の核酸を含有する生体サンプルとしては、毛髪、皮膚、口腔粘液採取綿棒（cheek swab）、及び血液、血清、血漿、唾液、リンパ液、精液、膣粘液、糞便、尿、髄液のような生体液等が挙げられる。このようなサンプルからのＤＮＡの単離は当業者にとって既知のものである。
【００７０】
幾つかの実施形態による「被験体」は、遺伝子型（複数の場合もある）又はハプロタイプ（複数の場合もある）が決定され、個体の病態（すなわち疾患状態又は障害状態）及び／又は候補薬物若しくは治療に対する応答とともに記録される個体である。
【００７１】
本明細書で使用される「被験体」は、ヒト被験体であるのが好ましいが、必ずしもそれには限定されない。被験体は男性であっても又は女性であってもよく、コーカサス人、アフリカ系アメリカ人、アフリカ人、アジア人、ヒスパニック、インディアン等を含むが、それらに限定されないいずれの人種又は民族性であってもよい。被験体は生まれたばかりの新生児（newborn）、生後２８日未満の新生児（neonate）、幼児、小児、青年、成人、及び高齢者を含むいずれの年齢であってもよい。本明細書で使用される被験体は、本発明の方法に従って治療することができる、又は獣医薬若しくは医薬品の開発目的でスクリーニングすることができる、動物、特にイヌ、ネコ、ウシ、ヤギ、ウマ、ヒツジ、ブタ、齧歯動物（例えばラット及びマウス）、ウサギ、霊長類（非ヒト霊長類を含む）等の哺乳動物も含み得る。被験体は、本発明の一部の実施形態によれば、ヒト患者、すなわちそうでなければアルツハイマー病の発生を遅延させるために治療的治療を必要とする患者を含む。
【００７２】
本明細書で使用される「遺伝子」は、プロモータ、エキソン、イントロン、及び発現を制御する他の非翻訳領域を含む、ＲＮＡ産物の生合成の調節のための情報を含有するＤＮＡ断片を意味する。
【００７３】
本明細書で使用される「遺伝的危険因子」は、病態、疾患、又は障害に対する感受性の増大と関連する遺伝子マーカーを意味する。遺伝的危険因子は、対象となる選択される薬物又は治療に対する特定の応答と関連する遺伝子マーカーでもあり得る。本明細書で使用される「と関連する」は、偶然により予測されるものよりも高頻度で２つ以上の特性が同時に生じることを意味する。「と関連する」は例えば、ＨＬＡと呼ばれる白血球の表面上の特徴を伴う（ＨＬＡはヒト白血球抗原を表す）。特定のＨＬＡ型、ＨＬＡ型Ｂ−２７は、剛直性脊椎炎を含む多くの疾患のリスクの増大と関連する。剛直性脊椎炎は、一般集団よりもＨＬＡ  Ｂ−２７を有する人で８７倍起こりやすい。
【００７４】
「予後」マーカーは、病態又は疾患の発生の推定年齢、病態又は疾患の進行の経路及び／又は速度の予測等が挙げられるが、それらに限定されない病態又は疾患の推定される経路の予測に使用することができる。予後マーカーは、遺伝子型及び／又は被験体の年齢を含む他の変項を含み得る。
【００７５】
遺伝的危険因子により「病態を発症するリスクが増大した」被験体は、病態に罹りやすい、病態に対する遺伝的感受性を有する、及び／又は遺伝的危険因子が存在しない被験体よりも病態を発症する可能性が高い被験体である。「リスクが増大した」被験体は、より低い年齢で疾患を発症しやすい被験体でもあり得る。
【００７６】
本明細書で使用される場合、「アルツハイマー病を発症するリスクがある」被験体は、年齢、ｒｓ１０５２４５２３遺伝子型、ＡＰＯＥ遺伝子型等のうちの１つ又は複数に基づき、アルツハイマー病を発症する可能性が高い個体を含む。
【００７７】
本明細書で使用される「多型」は、ゲノムのＤＮＡにおいて特定の遺伝子座に２つ以上の異なるヌクレオチド配列が存在することを指す。多型は遺伝的マーカーとして働くことができ、遺伝的変異体と称することもできる。多型はヌクレオチドの置換、挿入、欠失及びマイクロサテライトを含み、遺伝子発現又はタンパク質機能において検出可能な相違をもたらすものとされるが、そうである必要はない。多型部位は、ヌクレオチド配列が集団における少なくとも１つの個体で参照配列と異なる、遺伝子座内のヌクレオチド位置である。
【００７８】
本明細書で使用される「欠失／挿入多型」すなわち「ＤＩＰ」は、１つのバージョンの配列におけるもう１つのバージョンに対する１つ又は複数のヌクレオチドの挿入である。どちらの対立遺伝子がマイナー対立遺伝子であるかが既知である場合、「欠失」という用語は、マイナー対立遺伝子が１つ又は複数のヌクレオチドの欠失を有する場合に用いられ、「挿入」という用語は、マイナー対立遺伝子が更なる１つ又は複数のヌクレオチドを有する場合に用いられる。「欠失／挿入多型」という用語は、複数の形態又は長さが存在し、どれがマイナー対立遺伝子か明らかでない場合にも用いられる。例えば、本明細書で記載されるポリＴ多型に関して、複数の長さの多型が観察される。
【００７９】
本明細書で使用される「ハプロタイプ」は、個体において少なくとも１本の染色体で生じる遺伝的変異体又は変異体の組合せを指す。ハプロタイプは多くの場合、複数の隣接した多型遺伝子座を含む。本明細書で使用されるハプロタイプの全ての部分が、染色体又は半数体ＤＮＡ分子の同じコピーで生じる。反証がなければ、ハプロタイプは減数分裂中に同時に伝達される可能性がある複数の遺伝子座の組合せを指すものと推定される。ヒトはそれぞれ、２人の親由来の相同染色体において遺伝によって受け継がれる配列からなる、任意の所与の遺伝子座に対して一対のハプロタイプを保有する。これらのハプロタイプは、所与の遺伝子座に対して同一の遺伝的変異体であっても又は２つの異なる遺伝的変異体であってもよい。ハプロタイピングは、個体において１つ又は複数のハプロタイプを決定するプロセスである。ハプロタイピングは、家系図、分子技法及び／又は統計的推論の使用を含み得る。
【００８０】
本明細書で使用される「変異体」又は「遺伝的変異体」は、集団に見られるハプロタイプの特異的なアイソフォームを指し、この特異的な形態は、遺伝子における対象となる領域内の少なくとも１つ、多くの場合２つ以上の変異体部位又はヌクレオチドが同じハプロタイプの他の形態のものとは異なる。遺伝子の異なる対立遺伝子間で異なるこれらの変異体部位での配列は、「遺伝子配列変異体」、「対立遺伝子」又は「変異体」と呼ばれる。「代替形態」という用語は、遺伝子配列内に少なくとも１つ、多くの場合２つ以上の変異体部位を有することで他の対立遺伝子と識別することができる対立遺伝子を指す。「変異体」は、単一ヌクレオチド多型（ＳＮＰ）と欠失／挿入多型（ＤＩＰ）とを有するアイソフォームを含む。変異体の存在に対する言及は、遺伝子において任意の変異が存在することではなく、特定の変異体、すなわち特定の多型部位における特定のヌクレオチドを意味するものである。
【００８１】
本明細書で使用される「アイソフォーム」は、その特定の配列及び／又は構造で他の形態と識別される、遺伝子、ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ又はそれによってコードされるタンパク質の特定の形態を意味する。例えば、アポリポタンパク質ＥのＡｐｏＥ  ４アイソフォームは、ＡｐｏＥ  ２アイソフォーム又はＡｐｏＥ  ３アイソフォームとは対照的なものである。
【００８２】
「遺伝子型」という用語は本発明に関しては、特定の部位（複数の場合もある）で核酸配列に存在する特定のヌクレオチド（複数の場合もある）によって規定することができる、遺伝子の特定の対立遺伝子形態を指す。「遺伝子型」は更に、１つ又は複数の多型遺伝子座に存在する一対の対立遺伝子を示すことができる。ヒト等の二倍体生物に関しては、２つのハプロタイプが遺伝子型を構成する。ジェノタイピングは、例えば核酸増幅、ＤＮＡシークエンシング、抗体結合、又は他の化学分析（例えば長さを決定するためのもの）によって個体の遺伝子型を決定する任意のプロセスである。得られる遺伝子型が位相分け不能（unphased）であることもあり、これは見出された配列が一方の親の染色体又はもう一方の親の染色体に由来するものであるかが分からないことを意味する。
【００８３】
本明細書で使用される「治療する（Treat）」、「治療すること（treating）」又は「治療（treatment）」は、疾患に罹患した又は疾患を発症するリスクがある患者に利益を与える任意のタイプの手段を指し、これには患者の病態（例えば１つ又は複数の症状）の改善、疾患の発生又は進行の遅延等が含まれる。「治療」は、任意の薬物、製剤、方法、手順、生活様式の変化、又は被験体の特定の健康面の変化に影響を与えるために導入される（すなわち特定の疾患、障害、又は病態を対象とする）他の調整を含み得る。
【００８４】
本明細書で使用される「薬物」又は「薬物物質」は、（ａ）アルツハイマー病の発生又は進行を遅延させるために被験体に投与するのに適した、化学物質若しくは生体物質、又は化学物質及び／又は生体物質の組合せ等の活性成分を指す。本発明によれば、「薬物」又は「薬物物質」は、ピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩である。
【００８５】
本明細書で使用される「製剤」という用語は、「薬（medicine）」、「薬剤（medicament）」、「治療的介入（therapeutic intervention）」又は「医薬品」という用語と同義である。製剤は本発明の方法に従って使用するのに政府機関から承認を受けているのが最も好ましい。製剤は、本発明に従って低用量ピオグリタゾンを含有する。
【００８６】
「疾患」、「障害」及び「病態」は、当該技術分野で一般的に認識されるものであり、異常及び／又は望ましくないと一般的に認識された個体又は患者における兆候及び／又は症状の存在を指す。「疾患」又は「病態」は、病理変化に基づき診断するとともに、分類することができる。「疾患」又は「病態」は、Harrison's Principles of Internal Medicine, 1997、又はRobbins Pathologic Basis of Disease, 1998のような標準的なテキストに挙げられた疾患タイプから選択され得る。
【００８７】
本明細書で使用される「ミトコンドリア機能不全」は、細胞（単数又は複数）内のミトコンドリアの任意の有害な異常状態を意味する。ＡＤ及びＡＤへと進行する段階がミトコンドリア機能不全と関連することが現在当該技術分野において知られている。このミトコンドリア機能不全は、ＡＴＰ産生を損なうこと、カルシウムの恒常性を破壊すること、及び酸化ストレスを増大させることによって細胞損傷及び細胞死を引き起こす。さらに、ミトコンドリア損傷は、シトクロムｃ及び他のアポトーシス促進因子の細胞質への放出をもたらすことによって、アポトーシス細胞死を引き起こし得る（レビューに関して、Wallace 1999 Science 283: 1482-1488、Schapira 2006 The Lancet 368: 70-82を参照されたい）。本明細書に見られる具体例に関するものであり、理論に束縛されることを望むものではないが、ＡｐｏＥ  ３アイソフォーム及びＡｐｏＥ  ４アイソフォームは、ＴＯＭＭ４０との相互作用によりミトコンドリア機能不全をもたらすと仮定される。一部のＴＯＭＭ４０変異体は、ミトコンドリア低下を促進するためにＡｐｏＥ  ３アイソフォームと相乗的に作用し得る。加えて幾つかの実施形態では、ＡｐｏＥ  ２アイソフォームは、ミトコ
ンドリア機能不全を防ぐものであると考えられる。
【００８８】
本明細書で使用される場合、「短鎖」ＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子は、１９個未満のチミジン（Ｔ）残基を有し、「長鎖」ＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子は、１９個以上のＴ残基を有する。幾つかの実施形態では、長鎖対立遺伝子は、一定期間内での（例えば５〜７年の期間にわたる）遅発性アルツハイマー病の発生リスクがより高いことを示唆し得る。
【００８９】
ＴＯＭＭ４０遺伝子におけるイントロンのポリＴ帯（tract）であるｒｓ１０５２４５２３（「５２３」）対立遺伝子は、長さ（すなわちＴ残基の数）に関して多様性が高く、サイズの変動は遅発性ＡＤの発生年齢分布と関連する。各個体で行われる、５２３ポリＴの２つのコピー（それぞれの染色体で１つ）のそれぞれでのＴ残基の数の測定は、５２３遺伝子型を含むものであり、サンガーシークエンシング又は電気泳動分析等の標準的な手順によって評価することができる。
【００９０】
各５２３ポリＴの分類指定は、ホモポリマーの長さに従って割り当てられる：短鎖（Ｓ、ホモポリマーの長さが１９個未満のＴ残基）、長鎖（Ｌ、長さが１９個以上であるが、３０個未満のＴ残基）、及び超長鎖（ＶＬ、長さが３０個以上のＴ残基）。このため、分類指定を用いると、６つの異なる５２３遺伝子型の可能性がある：（Ｓ、Ｓ）、（ＶＬ、ＶＬ）、（Ｓ、Ｌ）、（ＶＬ、Ｌ）、（Ｓ、ＶＬ）、（Ｌ、Ｌ）。Rosesに対する米国特許出願公開第２０１１／０１６６１８５号も参照されたい。この出願は引用することにより本明細書の一部をなすものとする。
【００９１】
ＡＰＯＥ遺伝子型は、ＡＤの発生年齢に関して既に確立された危険因子である。ＡＰＯＥε４対立遺伝子は、５２３長鎖（Ｌ）対立遺伝子と強く連結し、したがって５２３  Ｌ、Ｌ遺伝子型を有する個体は通常（例えばコーカサス人の９８％）、ＡＰＯＥ  ε４／ε４遺伝子型を保有する。しかしながら、５２３短鎖（Ｓ）及び５２３超長鎖（ＶＬ）対立遺伝子は、ＡＰＯＥ  ε２対立遺伝子又はＡＰＯＥ  ε３対立遺伝子のいずれかに連結することができる。ＡＰＯＥ  ε２対立遺伝子は、ＡＰＯＥ  ε３対立遺伝子を保有する人に比べてより遅いＡＤ発生年齢（ＡＰＯＥ  ε２／ε３個体はＡＰＯＥ  ε３／ε３個体と比較すると５〜８年遅い）と関連する。したがって幾つかの実施形態では、ＡＰＯＥは、ＡＰＯＥ  ε２対立遺伝子を保有する全ての人を適当な年齢範囲で低リスク群に割り当てるための確定に含まれ得る。５２３遺伝子型は、ＡＰＯＥ  （ε／３／ε３）遺伝子型及びＡＰＯＥ  （ε３／ε４）遺伝子型においてＡＰＯＥ  ε３対立遺伝子を保有する個体に対して認知機能障害の発生年齢に関するより高い分解能を与える。
【００９２】
幾つかの実施形態では、長鎖ＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子の２つのコピーを有する被験体は、長鎖ＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子の１つのコピー、又は短鎖ＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子の２つのコピーを有する被験体と比較して、ＡＤを発症するリスクが大きい。幾つかの実施形態では、長鎖ＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子の１つのコピーを有する被験体は、短鎖ＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子の２つのコピーを有する被験体と比較して、ＡＤを発症するリスクが大きい。ＴＯＭＭ４０遺伝子型に基づくＡＤを発症するリスク又はその段階若しくは症状の発生の確定は、年齢等の他の危険因子に従って行うべきであり、更に幾つかの実施形態ではＡＰＯＥ状況を含んでいてもよい。幾つかの実施形態では、超長鎖ＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子の２つのコピーを有する、６２歳を超える認知力が正常な被験体は、長鎖ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子の１つ又は２つのコピーを有する被験体に比べて、ＡＤを発症するリスクが低減している。
【００９３】
ＴＯＭＭ４０の遺伝的変異体の検出は、国際公開第２０１０／０１９５５０号又は米国特許出願公開第２０１１／０１６６１８５号に記載されるとおりに行うことができる。これらはそれぞれ引用することによりその全体が本明細書の一部をなすものとする。
【００９４】
本明細書で使用される場合、「アルツハイマー病を発症するリスクがある被験体」は、アルツハイマー病に罹りやすい、アルツハイマー病に対する遺伝的感受性を有する、及び／又は遺伝的危険因子が存在しない被験体よりも所定の年齢でアルツハイマー病を発症する可能性が高い被験体を意味する。
【００９５】
本明細書で使用される場合、「リスクの増大」は、（例えば脳萎縮、脳におけるシナプス活動の低減、脳におけるアミロイド蓄積の増大、脳におけるミトコンドリア機能の低減、脳におけるミトコンドリア増殖の低減、病的ニューロン、脳における神経原線維濃縮体の形成、ＣＳＦにおけるアミロイド、並びにＣＳＦにおけるタウタンパク質及び／又はリン酸化タウタンパク質のうちのいずれか１つの分析によって）、或る時点、例えば本明細書に記載の幾つかの実施形態によれば治療の開始、又はアルツハイマー病に対する素因若しくはアルツハイマー病の症状の確定時点から短期間、例えば５年〜７年以内にＡＤを発症する可能性が高いことを意味する。
【００９６】
「リスクの増大」は、個体が対照被験体よりも若い年齢でＡＤを発症する可能性が高いこと、すなわち幾つかの実施の形態によれば、長鎖ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子の少なくとも１つのコピーを有する個体が長鎖ｒｓ１０５２４５２３対立遺伝子のコピーを有しない個体よりも若い年齢でＡＤを発症するリスクが大きいことも意味し得る。
【００９７】
被験体がＡＤを発症するリスクが増大しているとみなされる年齢は、１つ又は複数の因子（例えばＴＯＭＭ４０  ５２３遺伝子型）を年齢に対してグラフで示し、リスク変化が年齢の変化に最も大きく関係する時点を求めることによって、確定することができる（図２を参照されたい）。この時点は「おおよその（about）」特定の年齢とすることができ、おおよそは、年齢がその時点から０．５年、１年、２年、３年、４年又は５年変動し得ることを意味し、この変動は、例えば更なるデータ受信の際のグラフの更なる最適化又はより高度なデータ分解に起因するものであり得る。
【００９８】
本発明に従って有用な「投与」方法は、例えば経口経路、鼻腔内経路、直腸経路、吸入経路、局所経路での摂取、又は静脈内注射、皮下注射、筋肉内注射、腹腔内注射、頭蓋内注射及び脊髄注射等の注射による投与を含むが、それらに限定されない。更なる投与方法は、本明細書中の以下の「投与量及び投与」という表題の項で与えられる。
【００９９】
本明細書で使用される場合、「アルツハイマー病の患者又は被験体を診断すること（diagnosing）又は特定すること（identifying）」は、本明細書で規定されるように、個体がアルツハイマー病又はアルツハイマー病ヘと進行する段階に罹患しているか否かを確定するプロセスを指す。アルツハイマー病の診断は、例えば、国立神経疾患・伝達障害・脳卒中研究所−アルツハイマー疾患・関連疾病協会（National Institute of Neurologicaland Communicative Disorders and Stroke-Alzheimer's Disease and Related Disorders Association）の基準に基づくものであり得る。
【０１００】
「低用量ピオグリタゾン」は、０．５ｍｇ、０．７５ｍｇ、１ｍｇ、１．２５ｍｇ、１．５ｍｇ、１．７５ｍｇ、２ｍｇ、２．２５ｍｇ、２．５ｍｇ、２．７５ｍｇ、３ｍｇ、３．２５ｍｇ、３．５ｍｇ、３．７５ｍｇ、４ｍｇ、４．２５ｍｇ、４．５ｍｇ、４．７５ｍｇ、５ｍｇ、５．２５ｍｇ、５．５ｍｇ、５．７５ｍｇ、６ｍｇ、６．２５ｍｇ、６．５ｍｇ、６．７５ｍｇ、７ｍｇ、７．２５ｍｇ、７．５ｍｇ、７．７５ｍｇ、８ｍｇ、８．２５ｍｇ、８．５ｍｇ、８．７５ｍｇ、９ｍｇ、９．２５ｍｇ、９．５ｍｇ、９．７５ｍｇ、１０ｍｇ、１０．２５ｍｇ、１０．５ｍｇ、１０．７５ｍｇ、１１ｍｇ、１１．２５ｍｇ、１１．５ｍｇ、１１．７５ｍｇ又は１２ｍｇ等の０．５ｍｇ〜１２ｍｇの範囲の量のピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩を指す。代替的には、本発明の幾つかの実施形態では、低用量ピオグリタゾンは、被験体において約０．１５μｇ・ｈ／ｍＬ〜約３．６μｇ・ｈ／ｍＬの範囲（±２５％）のピオグリタゾンＡＵＣをもたらす低用量のピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩を意味する。例えば、低用量ピオグリタゾンＡＵＣは、０．１２μｇ・ｈ／ｍＬ、０．３７μｇ・ｈ／ｍＬ又は１．１２μｇ・ｈ／ｍＬ〜３．４μｇ・ｈ／ｍＬ又は４．５μｇ・ｈ／ｍＬの範囲内であり得る。
【０１０１】
本明細書で使用される場合、「対照被験体」は、アルツハイマー病の診断を受けていない、及び／又はアルツハイマー病と関連する任意の検出可能な症状を示さない被験体を意味する。「対照被験体」は、本明細書で規定されるように、アルツハイマー病を発症するリスクのない被験体も意味する。
【０１０２】
本明細書で使用される場合、「アルツハイマー病を発症するリスクのない被験体」は、例えばＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３遺伝子型を有さず、年齢及びＡＰＯＥ状況等の可能性のある他の因子とともに、被験体が一般集団又はその層別部分よりもＡＤ又はその段階若しくは症状を発症する可能性が高くないことを示す、被験体を意味する。
【０１０３】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、正しい医学的判断の範囲内において、被験体、例えば哺乳動物、ヒト及び下等動物を含む動物の組織と接触させる場合に、過度の毒性、炎症（irritation）、アレルギー応答等もなくピオグリタゾンとともに使用するのに適しており、妥当なベネフィットリスク比に相応する、それらの塩を指す。薬学的に許容される塩は当該技術分野で既知である。例えば、S. M. Berge,et al.は、J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977)において薬学的に許容される塩を詳細に説明している。塩は本発明の化合物の最終的な単離及び精製中にｉｎ  ｓｉｔｕで、又は遊離塩基の官能基（function）を好適な有機酸と反応させることによって別々に準備することができる。薬学的に許容される塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸及び過塩素酸等の無機酸を用いて、又は酢酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸若しくはマロン酸等の有機酸を用いて、又はイオン交換等の当該技術分野で用いられる他の方法を使用することによって形成されるアミノ基の塩である非毒性の酸付加塩が挙げられるが、それらに限定されない。他の薬学的に許容される塩としては、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコへプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩等が挙げられるが、それらに限定されない。代表的なアルカリ金属塩又はアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等が挙げられる。更なる薬学的に許容される塩
としては、適切な場合、非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、並びにハライド、ヒドロキシド、カルボキシレート、スルフェート、ホスフェート、ニトレート、１個〜６個の炭素原子を有するアルキル、スルホネート及びアリールスルホネート等の対イオンを用いて形成されるアミンカチオンが挙げられる。
【０１０４】
ＩＩ．  アルツハイマー病
アルツハイマー病の症状
アルツハイマー病の一般症状としては、記憶喪失、やり慣れた作業を実行することが困難になること、言語上の問題、時間及び場所の失見当、判断力の不足又は低下、抽象的思考上の問題、物の置き間違い、気分又は行動の変化、人格の変化、並びに自発性喪失が挙げられるが、それらに限定されない。これらの症状は経時的に徐々に現れ、通常（ただし必ずというわけではない）エピソード記憶の問題から始まり、それから人の正常機能（すなわち日常生活動作）に悪影響を与える他の認知障害が続く。行動／人格の変化は通常、冒された人がより中度及び重度になるにつれて疾患過程のより後期で起こる。これらの特徴的な症状の幾つかの例を以下で説明する。
【０１０５】
記憶喪失
これは、最近学習した情報を忘れることを含むものであり、認知症の最も一般的な初期兆候の１つである。人はより頻繁に忘れるようになり、より最近の情報を想起することができなくなる。これには、時折、名前又は約束を忘れることが含まれる。
【０１０６】
やり慣れた作業を実行することが困難になること
認知症の人は、日常的な作業を計画する又は完了させることが難しくなることが多い。個人によっては、食事を準備すること、電話をかけること又はゲームをすることにかかわる工程を見失うことがある。これには、時折、部屋に入った理由又は言おうとしていたことを忘れることが含まれる。
【０１０７】
言語上の問題
アルツハイマー病の人は、単純な単語を忘れる、又は独特な単語に置き換えることが多く、そのためアルツハイマー病の人の発話又は文書を理解するのが難しくなる。アルツハイマー病の人は、例えば歯ブラシを見つけること、それどころか「自分の口に入れるもの」を捜索することができなくなることがある。これには、時折、名前又は約束を忘れることが含まれる。
【０１０８】
時間及び場所の失見当
アルツハイマー病の人は、近所で道に迷い、自分のいる場所及び目的地への行き方を忘れ、自宅への帰り方が分からなくなることがある。これには、曜日又は行った場所を忘れることが含まれる。一部の患者では、精神錯乱、場合によってはそれに付随する動揺及び行動上の問題が、昼遅く又は夕方早くに「日暮れ時兆候」と称される症状としてより顕在化する。
【０１０９】
判断力の不足又は低下
アルツハイマー病の人は、不適切な服装をするか、温かい日に何枚も着込むか、又は寒い日にほとんど服を着ないことがある。アルツハイマー病の人は、電話を使った販売活動をする人に大量のお金を渡すというように判断力不足を示すことがある。これには、時折、問題のある又は疑わしい決断を下すことが含まれる。
【０１１０】
抽象的思考上の問題
アルツハイマー病の人によっては、数字が何のためのものであるか及びその使用方法を忘れるといったように、複雑な精神的作業を実行することが異常に難しくなることがある。これには、小切手帳の帳尻を合わせるのが困難になることが含まれる。
【０１１１】
物の置き間違い
アルツハイマー病の人は、物を普通ではない場所に、すなわちアイロンを冷蔵庫の中に、腕時計を砂糖瓶に入れることがある。これには、一時的に鍵又は財布を置き間違えることが含まれる。
【０１１２】
気分及び行動の変化
アルツハイマー病の人によっては、明らかな理由もなく平穏時から悲嘆、怒りへの急激な気分変動を示すことがある。これには、時折、悲しくなったり又は塞ぎこんだりすることが含まれる。
【０１１３】
人格の変化
認知症の人の人格が劇的に変化することがある。認知症の人は、極度に混乱し、疑い深くなり、怯え、又は家族に依存するようになることがある。人の人格は年齢とともに幾らかは変化するものである。
【０１１４】
自発性喪失
アルツハイマー病の人は、ＴＶの前で何時間も座るか、普段より多く寝るか、又は日常活動をしたくなくなるというように、非常に消極的になることがある。これには、仕事又は社会的義務に辟易することが含まれる。
【０１１５】
アルツハイマー病の診断及び病期分類
アルツハイマー病の臨床診断は、通常多様な工程（病歴、身体状況及び精神状況の検査、並びに実験室での試験を含む）及びツールを伴うプロセスである。後者に関しては、１９８４年以降、国立神経疾患・脳卒中研究所（National Institute of Neurological Disorders and Stroke）（ＮＩＮＤＳ）／アルツハイマー疾患・関連疾病協会（ＡＤＲＤＡ）によって確立された診断基準が、ＤＳＭ−ＩＶ基準とともに、臨床診察及び臨床研究に用いられる一次標準となっている。両方とも記憶機能不全及び認知機能障害の存在が必要とされるが、ＤＳＭ基準は正常機能に悪影響を与えることが明記されている一方で、ＮＩＮＣＤＳ／ＡＤＲＤＡ基準は悪影響を与えない。両セットの基準の特徴は、患者が死亡するまで特徴的なＡＤ特徴に関する脳病変を評価する方法論が最近まで存在しなかったことから、決定的なＡＤの生前診断とはみなされないことである。そのため、ＮＩＮＣＤＳ／ＡＤＲＤＡ基準は、生前診断を、複数の異なる診断による除外を含む臨床的証拠の強さに応じて、「疑診的」又は「確診的」のいずれかであると考えた。
【０１１６】
最近まで、被験体のアルツハイマー病への悪化は、複数の臨床段階を特徴とするものとしてきた。「段階」という用語は、被験体の能力が正常機能、例えば正常認知状態からアルツハイマー病へとどのように変化するかを説明するために本明細書で一般的に用いられる。段階は一般的指針であり、症状は段階内で及び／又は段階間で大きく変わり得ること、並びに全ての被験体が所定の段階において同じ症状、又はアルツハイマー病への同じ速度での進行を受けるわけではないことに留意されたい。例えば、７段階のフレームワークが、Barry Reisberg, M.D., clinical director of the New York University School of Medicine's Silberstein Aging and Dementia Research Centerによって開発され、これには第１段階：機能障害なし；第２段階：非常に軽度の低下；第３段階：軽度の低下；第４段階：中度の低下；第５段階：中重度の低下；第６段階：重度の低下；及び第７段階：非常に重度の低下が含まれる。臨床研究分野では、ＡＤはミニメンタルステート検査等の心理測定機器によるスコアに基づき、幾らかおおまかに「軽度」、「中度」、又は「重度」と規定されることが多く、ここでは例えば軽度のＡＤは１８〜２６、中度のＡＤは１１〜１７、及び重度のＡＤは１０以下とみなすことができる（３０点評価で、より高いスコアがより大きい認知機能を示す）。
【０１１７】
２００７年には、Dubois et alは、ＡＤ診断に関するＮＩＮＣＤＳ／ＡＤＲＤＡ基準を、疾患過程の分野理解の発展による知識と、脳撮像を含むＡＤの生前バイオマーカーを評価する新たな方法の開発と、を組み込むように改訂することを提案している（Dubois et al. 2007 Lancet Neurol 6: 734-746）。この提案では、対症的な特徴が存在していたとしても、生前診断は依然として「確診的」ＡＤとみなされる一方で、「決定的」ＡＤ診断は、病理組織学的確認又は遺伝学的証拠（染色体１、染色体１４、又は染色体２１上の突然変異）がある場合にのみ確保される。
【０１１８】
２０１１年には、国立老化研究所／アルツハイマー病協会の研究会議（National Institute on Aging/Alzheimer's Association Research Roundtable）を代表するワークグループが、ＮＩＮＣＤＳ／ＡＤＲＤＡ基準、並びにＭＣＩ及びＡＤによるＭＣＩの診断を確立するために提案された基準に対して同様の改訂を提案した（Albert et al. 2011 Alzheimers Dement 7: 270-279、非特許文献１１）。このワークグループは、認知症及びＡＤによる認知症の全ての原因に関する基準を更新した。このワークグループは、確診的ＡＤ認知症と疑診的ＡＤ認知症とＡＤ病態生理学的過程の形跡がある確診的又は疑診的ＡＤ認知症との指定は保持した。初めの２つの指定は、全ての臨床状況における使用を意図するものであるが、最後の指定は、研究目的に適したものであることが決定された。ワークグループによって、アルツハイマー病の進行が連続したものであり、ＭＣＩと認知症との識別は日常活動に多大な支障をきたすか否かの臨床評価であることが確認された。
【０１１９】
「発症前ＡＤ」は、症状が、現在許容されている発症前ＡＤ基準を満たすのに十分である段階を指す（Dubois et al.,（同上）を参照されたい）。一般的に言えば、発症前ＡＤは長期の前症候期であり、その間にＡＤの病態生理学的過程が始まる。被験体がＭＣＩの臨床基準を満たす何年も前から、非常に僅かな認知症状が存在し得る（Sperling et al. 2011 Alzheimers Dement 7: 280-292）。
【０１２０】
「前駆ＡＤ」は、症状が、現在許容されている前駆ＡＤ基準を満たす段階を指す（Dubois et al.（同上）を参照されたい）。本発明によれば、前駆ＡＤは、概してＭＣＩを含むが、認知症は含まない症候性の前認知症段階であり、全てのアルツハイマー病診断基準を満たすほどに重度ではない症状を特徴とする。前駆ＡＤ段階は、本明細書で進行性ＭＣＩ段階とも称される。
【０１２１】
ＩＩＩ．  ピオグリタゾン
ピオグリタゾンは、以下の化学構造を有するチアゾリジンジオン剤である：
【化１】
2020176142.tif 000005
【０１２２】
ピオグリタゾンＨＣｌは、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ（ＰＰＡＲγ）に対する強力なアゴニストである。ＰＰＡＲ受容体は、脂肪組織、骨格筋及び肝臓等の組織に見られる。
【０１２３】
理論に束縛されることを望むものではないが、ＰＰＡＲγアゴニストピオグリタゾンは、発症前段階で見られる代謝活性の低減のようなアルツハイマー病（ＡＤ）にかかわる病理学的機構の少なくとも一部を防ぐか、又はアルツハイマー病（ＡＤ）にかかわる病理学的機構の少なくとも一部を改善すると考えられる。
【０１２４】
ＡＤの臨床症状に対応する病態生理的変化は、最初の認知症状が現れる数年前又は更に数十年前から始まる場合があり、発症前期にわたってゆっくりと進行する。幾つかの実施形態では、本明細書で教示される低用量ピオグリタゾンの投与が、これらの変化を防ぐか、又はこれらの変化を改善することができ、アルツハイマー型の認知機能障害の発生を遅延させる。
【０１２５】
幾つかの実施形態では、ピオグリタゾンは、認知機能障害（例えばアルツハイマー型の認知機能障害）を治療、例えば遅延又は予防するために、ニューロンのミトコンドリア機能を保護若しくは増大させるのに、又はミトコンドリア貯蔵を拡大するのに効果的な量で投与される。幾つかの実施形態では、治療は、重大な病理的損傷が起こる、及び／又は認知機能障害が検出されるか若しくは認知機能障害の診断を受ける前に開始する。
【０１２６】
ミトコンドリア機能不全は、ＡＤで観察される脳の代謝低下に多大な影響を及ぼすと考えられる。脳の代謝活性は、主としてミトコンドリア活性により低減し、健康な老化とともに非病理的な脳萎縮が起こるが（Curiati et al. 2011 Am J Neuroradiol 32: 560-565）、前駆及び症候性の早発性（家族性）ＡＤ、軽度の認知機能障害（ＭＣＩ）、及び遅発性アルツハイマー病では顕著に高い速度で代謝低下及び萎縮が起こる（Reiman et al. 1996 N Engl J Med 334: 752-758、Mosconi et al. 2004 Psychiatry Research: Neuroimaging 130: 141-151、Mosconi et al. 2005 J Neurol Neurosurg Psychiatry 76: 15-23、Mosconi et al. 2006 J Nucl Med 47: 1778-1786、Chetelat et al. 2008 Brain 131: 60-71、Mosconi et al. 2008 Annals of the New York Academy of Sciences 1147: 180-195、Mosconi et al. 2009 Neurology 72: 513-520、Mosconi et al. 2009 Eur J Nucl MedMol Imaging 36: 811-822、Villain et al. 2010 Brain 133: 3301-3314）。ミトコンドリア酵素活性は、認知力が正常な被験体に比べて、ＡＤ患者の剖検海馬、並びに血小板及び線維芽細胞において低減していることも見出されている（Mancuso et al. 2010 Adv Exp Med Biol 685: 34-44）。
【０１２７】
ミトコンドリア機能の摂動が、場合によっては臨床症状の数十年前に起こるＡＤ病因の極めて初期の事象であるという仮説が十分に裏付けられている（Castellani et al. 2002 Journal of Neuroscience Research 70: 357-360、Bubber et al. 2005 Annals of Neurology 57: 695-703、Beal 2007 Mitochondrial Biology: New Perspectives 287: 183-192; discussion 192-186、Liang et al. 2008 Physiological Genomics 33: 240-256、Liang et al. 2008 PNAS 105: 4441-4446、Jack et al. 2009 Brain 132: 1355-1365、Moreira et al. 2010 Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease1802: 2-10、Swerdlow et al. 2010 J Alzheimers Dis 20 Suppl 2: S265-279、Cunnane
et al. 2011 Nutrition 27: 3-20）。ＡＰＯＥε４の保有によりＡＤを発症するリスクが増大した若齢個体の複数の脳領域においてミトコンドリア機能にかかわる遺伝子の発現の変化があり（Conejero-Goldberg et al. 2011 Molecular Psychiatry 16: 836-847）、代謝活性の相対的低減は、疾患の家族歴又は少なくとも１つのＡＰＯＥε４対立遺伝子の保有により遅発性ＡＤを発症するリスクが増大していると確定された認知力が正常の人の脳において死後生化学的に及び生存中撮像技法を用いて測定されている（Small et al. 1995 JAMA 273: 942-947、Reiman et al. 2005 PNAS 102: 8299-8302、Mosconi et al. 2008 Annals of the New York Academy of Sciences 1147: 180-195、Langbaum et al. 2010 Arch Neurol 67: 462-468、Mosconi et al. 2011 Journal of Alzheimer's Disease）。
【０１２８】
ヒトの脳は、任意の他の器官よりも組織１ｇ当たりより多くのエネルギーを消費し、その消費量は身体の総エネルギー消費量のおよそ５分の１を占める。グルコースは脳代謝のための主要燃料であり、細胞のエネルギー生産の大部分がミトコンドリアで起こる。ニューロンのミトコンドリアは、シナプスでの神経伝達物質の放出及び取込みを作動させるために、イオン勾配を維持するために、ミトコンドリア輸送及び軸索輸送を作動させるために、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）を生成する。ミトコンドリアは更に、カルシウムの恒常性及びアポトーシスを調節するが、機能不全に陥ったミトコンドリアは、毒性の活性酸素種のレベルの増大をもたらす（Mattson et al. 2008 Neuron 60: 748-766）。一部の研究によって、ニューロンが、隣接する星状膠細胞においてグルコースの酸化によって生じるラクテートを利用することも示唆されている（Pancani et al. 2011 Cell Calcium 50: 548-558）。ラクテートは最終的に、ニューロンにおいてピルベートへと還元され、その後グルコースと同様に、ＡＴＰを生産するためにミトコンドリアでの酸化的リン酸化経路に送られる。
【０１２９】
幾つかの実施形態では、投与時の脳の代謝活性の変化を測定し、ピオグリタゾンに関する最適な投与量及び／又は投与形態を決定することができる。脳の代謝活性は、機能的磁気共鳴画像診断（ｆＭＲＩ）（最も一般的な実施方法は血中酸素濃度依存的（ＢＯＬＤ）ｆＭＲＩである）、及び［１８Ｆ］−フルオロデオキシグルコース−ポジトロン放出断層撮影診断（ＦＤＧ−ＰＥＴ）を含む、当該技術分野で既知の特別な技法を用いて測定することができる（Jack et al. 2000 Neurology 55: 484-490、Whitwell et al. 2007 Brain 130: 1777-1786）。ＢＯＬＤ  ｆＭＲＩは、デオキシヘモグロビンとオキシヘモグロビンとの比率を測定するものであり、局部の神経活動の僅かな増大によって、脳血管系を介した酸素送達に対する局部的な要求が高まり、この領域でｆＭＲＩシグナルの増大が生じる。このため、ＢＯＬＤは神経活動の間接的であるが、感度の高い評価基準をもたらす。グルコース取込みの定量的評価基準であるグルコースの脳代謝率（ＣＭＲｇｌｕ）は、ＦＤＧ−ＰＥＴを用いて計算することができる。
【０１３０】
Cunnane et al.は、ＭＣＩ及びＡＤのＦＤＧ−ＰＥＴ研究に関する文献の実質部分（substantial body）を再検討することで、全体的なグルコースの脳代謝率（ＣＭＲｇ）が脳萎縮に関する補正後のＡＤ患者においておよそ２０％〜２５％低減すると結論付けた（Cunnane et al.（同上））。ＡＤにおける最も一致したＦＤＧ−ＰＥＴ所見は、ＡＤに最も早くに冒される２つの領域、内嗅皮質及び海馬におけるＣＭＲｇｌｕの低減であり、この低減は疾患が進行するにつれて、後帯状皮質、側頭頭頂野、楔前部及び前頭前皮質ヘと進行する（During et al. 2011 Neurological Sciences 32: 559-569、Filippi and Agosta 2011 Journal of Alzheimers Disease 24: 455-474）。さらに脳グルコース代謝の低減は、ＡＤの診断前の認知低下の極めて初期の段階で、またＭＣＩにおけるＡＤ感受性脳領域において明らかな場合があり、認知力が低下するにつれて代謝低下の程度が悪化する（Caselli et al. 2008 Arch Neurol 65: 1231-1236、Nishi et al. 2010 J Neuroimaging 20: 29-36、Chetelat et al. 2008（同上））。
【０１３１】
長期にわたる研究によって、正常な認知力から健忘性ＭＣＩの臨床的診断へと進行した人に関して、認知力の低下とＡＤに選択的に冒されることが分かっている脳領域での代謝の低減との間に相関関係が存在することが実証された。脳のＡＤ感受性領域での代謝の低下は、この研究の間、安定した認知力を維持した類似群の人では明らかではなかった（Caselli et al. 2008（同上）、Chetelat et al. 2008（同上））。さらに、認知力は正常であるが、ＡＤのリスクがある若齢の成人及び中高年の個体（例えばＡＤの家族歴がある個体、ＡＰＯＥε４の保因者、又は前症候性の早発性（家族性）ＡＤの個体）は、これらの危険因子のない個体に比べてＡＤ病変に対して感受性の脳領域においてグルコース代謝が低減している（Small, et al. 1995（同上）、Reiman et al. 1996（同上）、Reiman et al. 2005（同上）、Mosconi et al. 2006（同上）、Langbaum et al. 2010（同上）、Small et al. 2000 PNAS 97: 6037-6042、Reiman et al. 2004 PNAS 101: 284-289）。このため、ＡＤに冒された脳領域での代謝の低減は、疾患を発症するリスクがある人における最も初期の病態生理的変化及び／又は将来の疾患の指標の１つとすることができ、疾患の進行とも相関があり得る。
【０１３２】
当該技術分野で知られているように、血中酸素濃度依存的（ＢＯＬＤ）コントラストを用いたｆＭＲＩを用いて、作業、例えば認知的作業中のニューロンの活動を可視化し測定するとともに、脳の安静状態の活動を可視化することができ、これには覚醒安静状態では活動するが、作業中に活動を停止する脳領域のネットワークであるデフォルトモードネットワーク（ＤＭＮ）が含まれる（Pihlajamaeki and Sperling 2008 Future Neurology 3: 409-421、Huettel and Larry 2009 Encyclopedia of Neuroscience 273-281）。ニューロンの活動が代謝、並びにグルコース及び酸素に対する局部的な要求を増大させ、これによって脳の活動領域への血流が刺激される。これは、ＢＯＬＤ  ｆＭＲＩによって可視化される血流動態応答（局部的な脳血流と酸素の脳代謝率と脳血液量との積）であるとともに、ニューロンの活動の広く許容される指標であり、エネルギー消費を反映するものである（Pihlajamaeki and Sperling 2008（同上）、Wise and Preston 2010 Drug Discovery Today 15: 973-980、非特許文献１）。
【０１３３】
ＢＯＬＤ  ｆＭＲＩによって、作業誘発性の脳活動は、ＡＤのリスクのある人において損なわれ、ＡＤが進行するにつれて更に減退することが示されている（Filippi and Agosta 2011（同上））。用いられる作業には、エピソード記憶及び作業記憶を含む、疾患過程の初期に損なわれるより高次の認知機能に関わるものもある。ＢＯＬＤ  ｆＭＲＩシグナルは、海馬を含む内側側頭葉（ＭＴＬ）、及び記憶の符号化（encoding）又は想起に必要とされる連結した神経回路網で最も早く変化する（Pihlajamaeki and Sperling 2008（同上））。さらに神経活動の低減は、ＡＤを発症するリスクが増大した様々な年代の（young and old）認知力が正常な個体のＭＴＬ、特に海馬領域において明らかであり（Pihlajamaeki and Sperling 2008（同上）、Filippi and Agosta 2011（同上）、Wu et al. 2009 J Cell Physiol 220: 58-71、Jones et al. 2011 Neurology 77: 1524-1531）、後内側皮質領域でのＢＯＬＤ  ｆＭＲＩシグナルの程度は、認知力が正常なより老齢の被験体での言語エピソード記憶能力と関連し、被験体が認知機能障害からＡＤ認知症ヘと進行するにつれて低減する（Pihlajamaeki et al. 2010 Alzheimer Disease & Associated Disorders 24: 28-36）。発症前ＡＤ認知症、前駆ＡＤ認知症及びＡＤ認知症での作業誘発性の脳活動の変化に加えて、安静状態の脳のｆＭＲＩ研究及びＦＤＧ−ＰＥＴ研究によって、脳の特定の領域間での機能的連結性が、ＭＣＩ及びＡＤが進行するにつれて徐々に変性することが示されている（Reiman et al. 1996（同上）、Filippi and Agosta 2011 （同上）、Jin et al. 2012 Magnetic Resonance Imaging 30: 48-61）。ＢＯＬＤ−ｆＭＲＩは、ヒトの脳及び他の種、例えばラットの脳での機能的連結性を測定するのに特に有用な方法であることが分かっている。１９９５年と早い段階で、Biswal et al.は、機能的に関係する脳領域において、ｆＭＲＩによって測定される血流及び酸素供給の低周波変動に時間的相関関係があることを認識していた（Biswal et al. 1995 Magn Reson Med 34: 537-541）。これらの時空的に協調された変動は、脳が作業に従事していない場合、すなわち脳が安静状態である場合であっても起こり、自然状態のニューロン活動又はバックグラウンド脳過程を反映していると考えられる（Damoiseaux et al. 2011 Neurobiology of Aging、Yamasaki et al. 2012 Neurology Research International 2012）。ＡＤでは、機能的連結性の変性は、ＤＭＮ及び注意力に関わる系を含む、より高次の認知過程に要求される脳領域又は系の間で認められている（Yamasaki et al. 2012（同上））。特定の脳領域における、例えば後帯状皮質と側頭皮質又は海馬との間での、及び皮質下部領域と視床と多くの皮質領域との間でのＤＭＮでの安静時の連結性の低減が、ＡＤ患者及びＭＣＩ患者で報告されている（Wang et al. 2011 European Journal of Radiology）。これに対して、ＡＤ及びＭＣＩにおいて前頭領域における、またＤＭＮの領域と脳の前頭部との間で、安静状態の機能的連結性の増大が存在する（Wang et al. 2006 NeuroImage 31: 496-504、Zhang et al. 2009 Behav Brain Res 197: 103-108）。
【０１３４】
これまでは、誰が、認知機能障害及び最終的にアルツハイマー認知症へと至ることがある、これらの病態生理的変化を生じる可能性が高いかを予測することは実現不可能であった。ＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３遺伝子型は、年齢及び場合によっては他の因子とともに、どの被験体がアルツハイマー型の認知機能障害を発症するリスクがあるかを確定する予後バイオマーカーとして有用であり、この進行性でかつ破壊的な疾患の初期において治療介入する機会を与える。
【０１３５】
ＰＰＡＲγは、ＡＤの病因にかかわる多くの経路に影響する、リガンドによって活性化される核転写因子である（Landreth et al. 2008 Neurotherapeutics 5: 481-489）。その生物学的作用には、炎症性遺伝子発現の変調とグルコース及び脂質代謝の調節とが含まれ、ＡＤでは両方とも異常となる。更にＰＰＡＲγは、ミトコンドリア機能及びＡＴＰ生産に直接的な効果がある。ＡＤ研究の思想的リーダーは、ミトコンドリア機能不全がＡＤで見られる脳の代謝低下において重大な役割を果たすと考えている。
【０１３６】
ＰＰＡＲγ受容体は、内因性リガンドによって、及びチアゾリジンジオン（ＴＺＤ）群の薬物を含む多くの薬理作用物質によって活性化される。
【０１３７】
ピオグリタゾンは、２型糖尿病の治療のために販売されており（Ａｃｔｏｓ（商標））、組織、特に肝臓、筋肉及び脂肪組織のインスリンの作用に対する感度を増大させることによって、２型糖尿病の特徴であるインスリン抵抗性を治療するものである（Olefsky 2000 The Journal of Clinical Investigation 106: 467-472）。Ｔ２ＤＭ及びインスリン抵抗性は、ＡＤを発症する危険因子であり、ＡＰＯＥε４を保有する糖尿病患者は特にリスクが高い（Irie et al. 2008 Arch Neurol 65: 89-93、Roennemaa et al. 2008 Neurology 71: 1065-1071、Bruehl et al. 2009 Journal of Clinical and Experimental Neuropsychology 32: 487-493）。解剖したＡＤ患者の脳は、インスリン抵抗性又は糖尿病表現型と一致して、対照脳よりもインスリン、インスリン受容体及びＩＲＳ−１  ｍＲＮＡのレベルが著しく低く、ＡＤを３型糖尿病とみなすこともある（Steen et al. 2005 J Alzheimers Dis 7: 63-80）。インスリン受容体はヒト脳全体に見られ、海馬、小脳、及び皮質で特に高い濃度であり、ＰＰＡＲγ及びそのコアクチベーターであるレチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）も、海馬及び皮質を含む脳で発現される（Inestrosa et al. 2005 Experimental Cell Research 304: 91-104、Gofflot et al. 2007 Cell 131: 405-418、Morales-Garcia et al. 2011 GLIA 59: 293-307）。ＰＰＡＲγ受容体は、星状膠細胞及びニューロンで発現され、このタンパク質のレベルは、ＡＤ患者の死後脳溶解液中で約４０％低減す
る。
【０１３８】
ピオグリタゾンは、ニューロンのインスリン抵抗性を改善し（Liu et al. 2010 European Journal of Pharmacology 629: 153-158）、１ｎＭと低い濃度でグルコース枯渇による細胞死を大幅に低減する。これは、おそらくはピオグリタゾンがミトコンドリア含有量の増大及び／又はミトコンドリア構造の変調によって低血糖からの保護を与えるためである。更にこの薬物は、ＮＲＦ１、ＴＦＡＭ１（ミトコンドリア発生に必要とされる転写因子）、及びＵＣＰ−２（ミトコンドリア再構築に必要とされる）の発現を増大する（Miglio et al. 2009 Neurochemistry International 55: 496-504）。
【０１３９】
ピオグリタゾンの有益な効果は、ＡＤのトランスジェニックマウスモデル、並びに神経変性又は脳損傷のマウスモデル及びラットモデルにおいて報告されている。ピオグリタゾンによる治療の際に報告された有益は効果には、ＡＤのトランスジェニックマウスモデルでの脳アミロイドプラーク付着量（burden）の低減、成体動物における脳グルコース利用及び脳血管機能の改善、脳炎症の低減、酸化ストレスの低減、病変関連の記憶及び学習機能障害の改善、並びに神経発生の増大が含まれる（Heneka et al. 2000 Journal of Neuroscience 20: 6862-6867、Yan et al. 2003 Journal of Neuroscience 23: 7504-7509、Heneka et al. 2005 Brain 128: 1442-1453、Pathan et al. 2006 Life Sci 79: 2209-2216、Nicolakakis et al. 2008 Journal of Neuroscience 28: 9287-9296、Kaur et al. 2009 Fundamental & Clinical Pharmacology 23: 557-566、Roberts et al. 2009 Experimental Neurology 216: 459-470、Glatz et al. 2010 Journal of Hypertension 28: 1488-1497、Nicolakakis and Hamel 2011 J Cereb Blood Flow Metab 31: 1354-1370、Morales-Garcia et al. 2011（同上）、Zhang, Xu et al. 2011（同上））。更にピオグリタゾンは、ＡＤ及び軽度の認知機能障害の糖尿病患者の小規模プラセボ対照臨床試験において認知及び高インスリン血症を改善するとともに、局部脳血流を改善した（Hanyu et al. 2009 Journal of the American Geriatrics Society 57: 177-179、Hanyu et al. 2010 J Am Geriatr Soc 58: 1000-1001、Sato et al. 2010 Neurobiology of Aging 32: 1626-1633）。
【０１４０】
販売されている１５ｍｇ、３０ｍｇ及び４５ｍｇ投与量のピオグリタゾンは、２型糖尿病のために投与するのに適したものであり、この疾患の治療に対して安全でかつ有効である。糖尿病レベルの用量のピオグリタゾンは、アルツハイマー病の小規模臨床研究に用いられている（Hanyu et al. 2009 Journal of the American Geriatrics Society 57: 177-179、Hanyu et al. 2010 J Am Geriatr Soc 58: 1000-1001、Sato et al. 2010 Neurobiology of Aging 32: 1626-1633）。加えて、異なるチアゾリジンジオン、すなわちロシグリタゾンを用いたアルツハイマー治療に関する最近の臨床試験において、２型糖尿病の投与量の薬物を使用した（Risner et al. 2006 Pharmacogenomics Journal 6: 246-254、Gold et al. 2010 Dementia and Geriatric Cognitive Disorders 30: 131-146）。
【０１４１】
しかしながら、要求される薬力学的効果及び有効性を、対象の患者集団においてより低い用量で十分に達成することができる場合、薬物への曝露を制限するのが好ましいとされる。このようにして、珍しい又は稀な有害事象の頻度を更に低減し、それにより安全性を改善することができる。
【０１４２】
本明細書で教示されるように、また以下の実施例で提示されるＢＯＬＤ研究結果により実証されるように、ＩＩ型糖尿病の治療に用いられるものよりも大幅に低い投与量（すなわち低用量ピオグリタゾン）が脳代謝の変化をもたらし、このため認知低下（例えばアルツハイマー型の認知機能障害）の発生の遅延を含む、アルツハイマー病の治療に効果的であり得ることが見出されたのは驚くべきことであった。
【０１４３】
Ｖ．  配合物及び投与方式
本発明は、低強度（ＬＳ）配合物、口腔内崩壊錠（ＯＤＴ）配合物、液体配合物、懸濁液配合物、鼻腔配合物、経口即時放出配合物、放出調節配合物、制御放出配合物若しくは徐放配合物、経皮配合物、直腸配合物、局所配合物、又は注射用配合物を含むが、それらに限定されない、本発明の方法に有用な低用量ピオグリタゾンの製剤配合物を数多く提供する。
【０１４４】
（ａ）低強度（ＬＳ）配合物
本発明は、例えば米国特許出願第１２／４５２，５８７号及び米国特許出願公開第２０１０／０１６６８５３号（引用することによりその全体が本明細書の一部をなすものとする）に記載されるような低用量ピオグリタゾンのＬＳ配合物を提供する。本発明のコーティング製剤は、２０℃での水への溶解度が１０ｍｇ／ｍＬ以上であり、かつ２５℃でのｐＫａ１（第１の酸解離定数Ｋａ１の負の常用対数）が５以下である薬学的に許容される有機酸を含むコアと、ピオグリタゾン又はその塩を含むコーティング層と、を含む。
【０１４５】
本発明のコーティング製剤は、コアとコーティング層とを有する単一製剤、又はそれぞれがコアとコーティング層とを有する製剤の集合体とすることができる。加えて、本発明のコーティング製剤は、それぞれがコアとコーティング層とを有する製剤の集合体を必要に応じて添加剤と混合し、その混合物をカプセルに充填することによってカプセルとすることができる。
【０１４６】
さらに、本発明のコーティング製剤は、それぞれがコアとコーティング層とを有する製剤の集合体を添加剤と混合し、その混合物を圧縮成形することによって錠剤又はカプレットとすることができる。
【０１４７】
本発明のコーティング製剤のコアは、２０℃での水への溶解度が１０ｍｇ／ｍＬ以上であり、かつ２５℃でのｐＫａ１が５以下である薬学的に許容される有機酸のみからなり得る。代替的に、本発明のコーティング製剤のコアは、２０℃での水への溶解度が１０ｍｇ／ｍＬ以上であり、かつ２５℃でのｐＫａ１が５以下である薬学的に許容される有機酸と、例えば下記の添加剤等と、の組成物からなり得る。
【０１４８】
本発明のコーティング製剤のコアに含有される有機酸は、２０℃での水への溶解度が１０ｍｇ／ｍＬ以上であり、かつ２５℃でのｐＫａ１が５以下である薬学的に許容される有機酸である。２０℃での水への溶解度は、好ましくは５０ｍｇ／ｍＬ以上、より好ましくは１００ｍｇ／ｍＬ以上である。２０℃での水への溶解度は、２０００ｍｇ／ｍＬ以下であるのが好ましい。２５℃でのｐＫａ１は、好ましくは５以下、より好ましくは４以下である。２５℃でのｐＫａ１は１以上であるのが好ましい。２０℃での水への溶解度が３００ｍｇ／ｍＬ以上であり、かつ２５℃でのｐＫａ１が４以下である有機酸が好ましい。
【０１４９】
有機酸の具体例としては、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸及びアスコルビン酸等のうちの１つ又は複数が挙げられる。有機酸は水和物及び酸性塩のいずれかであってもよい。加えて、有機酸は、結晶性有機酸を含有するコアの機械的強度及び化学安定性が本発明の製剤の生産工程中に低下しないことから、また酸性度を考慮して結晶の形態であるのが好ましい。
【０１５０】
本明細書では、クエン酸にはクエン酸一水和物及び無水クエン酸が含まれる。
【０１５１】
有機酸としては、クエン酸、酒石酸及びリンゴ酸が好ましく、医薬添加剤としては、クエン酸（特に無水クエン酸）がより好ましい。
【０１５２】
有機酸の平均粒径は、一般的には１００μｍ〜１５００μｍ、好ましくは３００μｍ〜８００μｍである。平均粒径は、例えばレーザー回折粒子分布測定機器（例えばＳＹＮＰＡＴＥＣ  ＨＥＬＯＳ−ＲＯＤＯＳ粒子分布測定機器）を用いて測定される。
【０１５３】
コアの平均粒径は本発明のコーティング製剤の種類に応じて異なるが、コアの平均粒径は一般的に１００μｍ〜１５００μｍ、好ましくは３００μｍ〜８００μｍである。
【０１５４】
本発明のコーティング製剤のコアをピオグリタゾン又はその塩を含むコーティング層で覆うことができる。
【０１５５】
本発明のコーティング製剤のコアにおける有機酸の含有量は、有機酸の種類等に応じて異なるが、その含有量は、コーティング製剤１００重量部当たり一般的に２０重量部〜９５重量部、好ましくは４０重量部〜８０重量部である。
【０１５６】
本発明のコーティング製剤に用いられるピオグリタゾン又はその塩に関して、ピオグリタゾンの塩の例としては、無機酸との塩、有機酸との塩、酸性アミノ酸との塩等のような薬理学的に許容される塩が挙げられる。
【０１５７】
無機酸との塩の好ましい例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等との塩が挙げられる。
【０１５８】
有機酸との塩の好ましい例としては、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等との塩が挙げられる。
【０１５９】
酸性アミノ酸との塩の好ましい例としては、アスパラギン酸、グルタミン酸等との塩が挙げられる。
【０１６０】
加えて、ピオグリタゾンは無水物又は水和物のいずれかであってもよく、ピオグリタゾンは同位体（例えば、３Ｈ、１４Ｃ、３５Ｓ、１２５Ｉ）等で更に標識されていてもよい。
【０１６１】
ピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩は、ピオグリタゾン塩酸塩であるのが好ましい。
【０１６２】
ピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩は、当該技術分野で一般的に知られている希釈剤等によって希釈されていてもよい。
【０１６３】
本発明のコーティング製剤では、出発材料として用いられるピオグリタゾン及びその塩のメジアン粒径は０．５μｍ〜５０μｍであるのが好ましい。
【０１６４】
このようなメジアン径を採用することによって、優れた溶解を有するピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩のコーティング製剤を得ることができる。
【０１６５】
上記の好ましいメジアン径は、出発材料として用いられるピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩に適用される。出発材料は、コーティング製剤を生産するプロセス中に微粉化によって得られる微粉化生成物、又は賦形剤（例えば結晶性セルロース）とともに微粉化によって得られる混合微粉化生成物等を含み得る。ピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩のメジアン径は、本発明のコーティング製剤の生産過程又は生産後のコーティング製剤の保存過程中に、ピオグリタゾン又はその塩の凝集によって上記の範囲を超えて変化してもよい。微粉化は、乳鉢、ジェットミル、ハンマーミル、スクリーンミル（Ｐ−３、株式会社昭和化学機械工作所）等のような製剤形成機を用いて行われる。
【０１６６】
本明細書で使用される場合、メジアン径は、重量分布又は数分布に基づき粗粒子と微細粒子とに５０％で分ける粒径を意味する。メジアン径は、例えばレーザー回折粒径分布測定機器（例えば、ＳＹＮＰＡＴＥＣ  ＨＥＬＯＳ−ＲＯＤＯＳ粒子分布測定機器）によって測定することができる。
【０１６７】
上記の所望のメジアン径を有するピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩の分散性は、総量の１０％以下で含まれる０．１μｍ以下の粒子と、総量の１０％以下で含まれる１０００μｍ以上の粒子と、によって規定されるようなものであるのが好ましい。その下限は概して、総量の０．１％以上で含まれる０．１μｍ以下の粒子と、総量の０．１％以上で含まれる１０００μｍ以上の粒子と、によって規定されるようなものである。
【０１６８】
本発明のコーティング製剤におけるピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩の含有量は、コーティング製剤の剤形、用量等に応じて異なるが、その含有量は、コーティング製剤１００重量部当たり一般的に０．０１重量部〜３０重量部、好ましくは０．５重量部〜２５重量部、更に好ましくは０．５重量部〜２０重量部である。
【０１６９】
本発明のコーティング製剤では、ピオグリタゾンと上述の薬学的に許容される有機酸との重量比は、好ましくは１：４〜１：１００、より好ましくは１：４〜１：２０、より好ましくは１：５〜１：１０である。ピオグリタゾンの重量は、ピオグリタゾンの薬学的に許容される塩における当量のピオグリタゾンを意味する。
【０１７０】
本発明のコーティング製剤では、用いられるピオグリタゾン又はその塩を含むコーティング層の量は、コア１００重量部当たり一般的に５重量部〜２０５重量部、好ましくは１０重量部〜１００重量部、より好ましくは２０重量部〜９０重量部である。
【０１７１】
本発明のコーティング製剤は、コーティング層にセルロース又はセルロース誘導体を含有するのが好ましい。これらの中でも、セルロース誘導体が好ましい。
【０１７２】
セルロース誘導体は、セルロース分子の一部が他の原子又は官能基に置換されているセルロースである。セルロース誘導体の例としては、低置換ヒドロキシプロピルセルロース（Ｌ−ＨＰＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート等が挙げられる。これらの中でも、低置換ヒドロキシプロピルセルロースが好ましい。ヒドロキシプロポキシル基含有量が５ｗｔ％〜１６ｗｔ％である低置換ヒドロキシプロピルセルロース等（例えばＬＨ−１１、ＬＨ−２１、ＬＨ−３１、ＬＨ−２２、ＬＨ−３２、ＬＨ−２０、ＬＨ−３０、ＬＨ−３３（商標、信越化学工業株式会社製）等）がより好ましい。
【０１７３】
本発明のコーティング製剤のコーティング層におけるセルロース又はセルロース誘導体の含有量は、コーティング層１００重量部当たり概して０．５重量部〜７０重量部、好ましくは約２重量部〜約５０重量部、より好ましくは約２重量部〜約３０重量部である。
【０１７４】
セルロース又はセルロース誘導体（好ましくはセルロース誘導体）がコーティング層に含まれることから、本発明のコーティング製剤は、骨格としてセルロース又はセルロース誘導体を含むとともに、水性溶媒中で維持されるコーティング層を構成する構築物を有し、その中でピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩が、構築物中の有機酸（溶液）に溶解し、水溶液が与えられる。結果として、本発明のコーティング製剤は、従来の製剤と比較して、投与後にピオグリタゾンの最大血中濃度及びＡＵＣを顕著に増大させ、ＡＵＣにおける個体間の相対標準偏差（ＲＳＤ）を顕著に低減させることができる。
【０１７５】
加えて、本発明のコーティング製剤が、骨格としてセルロース又はセルロース誘導体を含むとともに、水性溶媒中で維持されるコーティング層を構成する構築物を有し、その中でピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩が、構築物中の有機酸（溶液）に溶解し、水溶液が与えられることから、本発明のコーティング製剤は、従来の製剤と比較してバイオアベイラビリティを向上させることができる。具体的には、本発明のコーティング製剤のバイオアベイラビリティは、製剤をイヌに投与する場合には７５％を超える。
【０１７６】
本明細書では、バイオアベイラビリティは、例えば所与の量のピオグリタゾンの非静脈内投与時のＡＵＣを、同量のピオグリタゾンの静脈内投与時のＡＵＣで除算することによって決定することができる。例えば、経口投与する本発明の低用量ピオグリタゾン即時放出製剤のバイオアベイラビリティを計算する場合、式は以下のようなものとすることができる：
バイオアベイラビリティ（％）＝（経口投与のＡＵＣ／静脈内投与のＡＵＣ）×１００
【０１７７】
ピオグリタゾンが構築物中に溶解し、水溶液が与えられる場合、溶液の投与によって達成されるのと同様の効果を得ることができ、最大血中濃度、ＡＵＣ及びバイオアベイラビリティの増大が期待される。
【０１７８】
本明細書中において、本明細書での水性溶媒としては、水、ＫＣｌ−ＨＣｌバッファー（例えばｐＨ２．０のＫＣｌ−ＨＣｌバッファー）、マッキルヴェインバッファー（例えばｐＨ２．２、ｐＨ２．５又はｐＨ３．０のマッキルヴェインバッファー）等が挙げられる。骨格としてセルロース誘導体を含むとともに、水性溶媒中で維持されるコーティング層を構成する構築物は具体的には、例えば構築物が、好ましくはパドル法（５０ｒｐｍ）の条件下でＫＣｌ−ＨＣｌバッファー（ｐＨ２．０、９００ｍＬ）中に、より好ましくはパドル法（５０ｒｐｍ）の条件下でマッキルヴェインバッファー（ｐＨ２．２、９００ｍｌ）中に、更に好ましくはパドル法（５０ｒｐｍ）の条件下でマッキルヴェインバッファー（ｐＨ２．５、９００ｍｌ）中に、特に好ましくはパドル法（５０ｒｐｍ）の条件下でマッキルヴェインバッファー（ｐＨ３．０、９００ｍＬ）中に１０分以上存在することを
意味する。
【０１７９】
本明細書でのパドル法は、特に記載がなければ、第十四改正日本薬局方、一般試験法、溶出試験法  第２法に準拠する測定を意味する。
【０１８０】
本発明のコーティング製剤は、製剤の配合技術分野で従来用いられている添加剤を含有していてもよい。添加剤の例としては、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、着色剤、ｐＨ調節剤、界面活性剤、安定剤、矯味薬、甘味料、香味料、流動促進剤、帯電防止剤、遮光剤、抗酸化剤、還元剤、キレート剤等が挙げられる。これらの添加剤は、製剤の配合技術分野で従来用いられている量で使用される。加えて、これらの添加剤を適当な比率のそれらの２つ以上の種類の混合物で使用してもよい。
【０１８１】
賦形剤の例としては、サッカリド；結晶性セルロース；トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、小麦デンプン、米デンプン、部分アルファ化（partly pregelatinized）デンプン、アルファ化デンプン、多孔質デンプン、デキストリン、カルボキシメチルデンプン等のデンプン；無水リン酸カルシウム、沈降炭酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、粉末セルロース、ゼラチン、軽質無水ケイ酸、合成ケイ酸アルミニウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、硫酸カルシウムが挙げられる。
【０１８２】
サッカリドの例としては、糖、デンプン糖、ラクトース、ハチミツ及び糖アルコールが挙げられる。２種類以上のこれらのサッカリドを適当な比率の混合物で使用してもよい。
【０１８３】
糖の例としては、スクロース、上白糖、グリコシルスクロース（カップリングシュガー（商標））、フラクトオリゴ糖及びパラチノースが挙げられる。
【０１８４】
デンプン糖の例としては、グルコース、マルトース、粉末デンプンシロップ、デンプンシロップ、フルクトース及びトレハロースが挙げられる。
【０１８５】
ラクトースの例としては、ラクトース、異性化ラクトース（ラクツロース）及び水素化ラクトース（ラクチトール）が挙げられる。
【０１８６】
ハチミツの例としては、食用に一般的に用いられる様々な種類のハチミツが挙げられる。
【０１８７】
糖アルコールの例としては、ソルビトール、マンニトール（特にＤ−マンニトール）、マルチトール、水素化グルコースシロップ、キシリトール、還元型パラチノース及びエリスリトールが挙げられる。
【０１８８】
サッカリドは、好ましくは糖アルコール、デンプン糖及びスクロース、より好ましくはマンニトール、トレハロース及びスクロースである。これらの中でも、マンニトール及びトレハロースが好ましい。本発明のコーティング製剤での製剤の色の変化（特に保存条件下での色の変化）を抑える点から、コーティング層はマンニトール又はトレハロースを含有するのが好ましい。
【０１８９】
サッカリドがコーティング製剤に使用される場合、その含有量は、例えばコーティング製剤１００重量部当たり５重量部〜９０重量部、好ましくは５重量部〜４０重量部である。
【０１９０】
特に、本発明のコーティング製剤がマンニトール又はトレハロースを含有する場合、マンニトール又はトレハロースの含有量は、コーティング製剤１００重量部当たり好ましくは５重量部〜４０重量部、より好ましくは５重量部〜３０重量部である。
【０１９１】
結晶性セルロースの例としては、微結晶性セルロースと呼ばれるものを含む、ＣＥＯＬＵＳ  ＫＧ８０１、ＫＧ８０２、ＰＨ１０１、ＰＨ１０２、ＰＨ３０１、ＰＨ３０２、ＰＨ−Ｆ２０、ＲＣ−Ａ５９１  ＮＦ（商標、旭化成ケミカルズ株式会社製）が挙げられる。
【０１９２】
崩壊剤の例としては、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム（カルメロースカルシウム）、カルボキシメチルデンプンナトリウム、カルメロースナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン（好ましくはＫｏｌｌｉｄｏｎ  ＣＬ、ＣＬ−Ｍ、ＣＬ−Ｆ、ＣＬ−ＳＦ（商標、ＢＡＳＦジャパン株式会社）；Ｐｏｌｙｐｌａｓｄｏｎｅ  ＸＬ、ＸＬ−１０、ＩＮＦ−１０（商標、ＩＳＰジャパン株式会社））、低置換ヒドロキシプロピルセルロース（好ましくはＬＨ−１１、ＬＨ−２１、ＬＨ−３１、ＬＨ−２２、ＬＨ−３２、ＬＨ−２０、ＬＨ−３０、ＬＨ−３３（商標、信越化学工業株式会社製）等のヒドロキシプロポキシル基含有量が５ｗｔ％〜１６ｗｔ％である低置換ヒドロキシプロピルセルロース等）、ヒドロキシプロピルデンプン、トウモロコシデンプン及び部分アルファ化デンプンが挙げられる。
【０１９３】
崩壊剤が本発明のコーティング製剤に使用される場合、崩壊剤の含有量は、例えばコーティング製剤１００重量部当たり０．５重量部〜５０重量部、好ましくは１重量部〜２５重量部である。
【０１９４】
結合剤の例としては、ヒドロキシプロピルセルロース（好ましくはＨＰＣ−ＳＳＬ、ＳＬ、Ｌ（商標、日本曹達株式会社））、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポビドン（ポリビニルピロリドン）、アラビアゴム粉末、スクロース、ゼラチン、プルラン、メチルセルロース、結晶性セルロース、低置換ヒドロキシプロピルセルロース（好ましくはＬＨ−１１、ＬＨ−２１、ＬＨ−３１、ＬＨ−２２、ＬＨ−３２、ＬＨ−２０、ＬＨ−３０、ＬＨ−３３（商標、信越化学工業株式会社製）等のヒドロキシプロポキシル基含有量が５ｗｔ％〜１６ｗｔ％である低置換ヒドロキシプロピルセルロース等）、マクロゴール、デキストラン、ポリビニルアルコール及びデンプン糊が挙げられる。これらの中でも、ヒドロキシプロピルセルロースが好ましい。
【０１９５】
結合剤が本発明のコーティング製剤に使用される場合、結合剤の含有量は、例えばコーティング製剤１００重量部当たり０．０１重量部〜５０重量部、好ましくは０．１重量部〜１０重量部である。
【０１９６】
滑沢剤の例としては、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、脂肪酸のスクロースエステル、フマル酸ステアリルナトリウム、ワックス、ＤＬ−ロイシン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、マクロゴール及び軽質無水ケイ酸（例えばＡＥＲＯＳＩＬ）が挙げられる。これらの中でも、ステアリン酸マグネシウムが好ましい。
【０１９７】
着色剤の例としては、食用黄色５号（サンセットイエロー、米国では食用黄色６号と同じものである）、食用赤色２号、食用青色２号等のような食品顔料、食品レーキ顔料、黄色酸化第二鉄（黄色酸化鉄）、三酸化二鉄（赤色酸化鉄）、リボフラビン、リボフラビン有機酸エステル（例えば酪酸リボフラビン）、リン酸リボフラビン、又はそのアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩、フェノールフタレイン、酸化チタン、リコペン、β−カロテンが挙げられる。
【０１９８】
ｐＨ調節剤の例としては、クエン酸塩、リン酸塩、炭酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、酢酸塩及びアミノ酸塩が挙げられる。
【０１９９】
界面活性剤の例としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン（１６０）ポリオキシプロピレン（３０）グリコール、ポリオキシエチレン（１９６）ポリオキシプロピレン（６７）グリコール、ポリオキシエチレン水素化ヒマシ油６０が挙げられる。
【０２００】
安定剤の例としては、アスコルビン酸ナトリウム、トコフェロール、エデト酸五ナトリウム、ニコチンアミド、シクロデキストリン；アルカリ土類金属塩（例えば炭酸カルシウム、水酸化カルシウム、炭酸マグネシウム、水酸化マグネシウム、ケイ酸マグネシウム、アルミン酸マグネシウム）、及びブチルヒドロキシアニソールが挙げられる。
【０２０１】
矯味薬の例としては、アスコルビン酸、（無水）クエン酸、酒石酸及びリンゴ酸が挙げられる。
【０２０２】
甘味料の例としては、アスパルテーム、アセスルファムカリウム、タウマチン、サッカリンナトリウム及びグリチルリチン酸二カリウムが挙げられる。これらの中でも、アスパルテームが好ましい。
【０２０３】
香味料の例としては、メントール、ハッカ油、レモン油及びバニリンが挙げられる。
【０２０４】
流動促進剤の例としては、軽質無水ケイ酸及び水和二酸化ケイ素が挙げられる。本明細書中において、軽質無水ケイ酸は、主構成要素として水和二酸化ケイ素（ＳｉＯ２  ｎＨ２Ｏ）（ｎは整数である）を含有する任意のものであってもよく、その具体例としては、Ｓｙｌｙｓｉａ  ３２０（商標、富士シリシア化学株式会社）、ＡＥＲＯＳＩＬ  ２００（商標、日本アエロジル株式会社）等を使用することができる。
【０２０５】
帯電防止剤の例としては、タルク及び軽質無水ケイ酸が挙げられる。
【０２０６】
遮光剤の例としては酸化チタンが挙げられる。
【０２０７】
抗酸化剤の例としては、ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、トコフェロール、トコフェロールエステル（例えば酢酸トコフェロール）、アスコルビン酸又はそのアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩、リコペン、β−カロテンが挙げられる。
【０２０８】
還元剤の例としては、シスチン及びシステインが挙げられる。
【０２０９】
キレート剤の例としては、ＥＤＴＡ又はそのアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩が挙げられる。
【０２１０】
本発明のコーティング製剤は、コアとピオグリタゾン又はその塩を含むコーティング層との間に形成される中間層を備え得る。このような中間層を用いて、コーティング層中のピオグリタゾン又はその塩に対するコア中の有機酸の悪影響（例えばピオグリタゾンの分解）を防ぐことができ、コーティング製剤の持続性を延ばすことができる。
【０２１１】
本発明のコーティング製剤の剤形は、一般的に固体製剤である。固体製剤の例としては、錠剤、カプレット、カプセル、粉末、顆粒及びトローチが挙げられる。これらの中でも、顆粒、カプセル及び錠剤が好ましい。更にコーティング製剤を含有するゲル等の半固体剤形、及び適当な投与量のピオグリタゾンの溶液を含む液体製剤が本発明に従って使用可
能である。
【０２１２】
固体製剤の形状は特に限定されず、円形、カプレット形、ドーナッツ形、楕円形等のいずれであってもよい。
【０２１３】
固体製剤は、コーティング剤でコーティングされていてもよく、識別のためのマーク及び文字、並びに更に分割のための分割線を備えていてもよい。
【０２１４】
コーティング基剤の例としては、糖衣基剤、水性膜コーティング基剤、腸溶性膜コーティング基剤、持続放出性膜コーティング基剤等が挙げられる。
【０２１５】
糖衣基剤としては、スクロースが使用され、タルク、沈降炭酸カルシウム、ゼラチン、アラビアゴム、プルラン、カルナウバワックス等から選択される１種類又は複数種類を組み合わせて使用してもよい。
【０２１６】
水性膜コーティング基剤の例としては、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース等のようなセルロースポリマー；ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、アミノアルキルメタクリレートコポリマーＥ（Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｅ（商標））、ポリビニルピロリドン等のような合成ポリマー；プルラン等のようなポリサッカリド等が挙げられる。
【０２１７】
腸溶性膜コーティング基剤の例としては、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース、酢酸フタル酸セルロース等のようなセルロースポリマー；メタクリル酸コポリマーＬ（Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ（商標））、メタクリル酸コポリマーＬＤ（Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ−３０Ｄ５５（商標））、メタクリル酸コポリマーＳ（Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ（商標））等のようなアクリル酸ポリマー；セラック等のような自然発生物質等が挙げられる。
【０２１８】
持続放出性膜コーティング基剤の例としては、エチルセルロース、酢酸セルロース等のようなセルロースポリマー；アミノアルキルメタクリレートコポリマーＲＳ（Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳ（商標））、エチルアクリレート−メチルメタクリレートコポリマー懸濁液（Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＮＥ（商標））等のようなアクリル酸ポリマー等が挙げられる。
【０２１９】
２種類以上の上記のコーティング基剤を適当な比率の混合物で使用してもよい。加えて、更にコーティング添加剤をコーティング中に使用してもよい。
【０２２０】
コーティング添加剤の例としては、酸化チタン、タルク、酸化第二鉄等のような遮光剤及び／又は着色剤；ポリエチレングリコール、クエン酸トリエチル、ヒマシ油、ポリソルベート等のような可塑剤等が挙げられる。
【０２２１】
本発明のコーティング製剤は、製剤の配合技術分野における従来方法に従って上記の様々な添加剤を使用することによって生産することができる。
【０２２２】
例えば、本発明のコーティング製剤は、
（１）有機酸を必要に応じて添加剤と混合し、有機酸を含有するコアを得ることと、
（２）有機酸を含有するコアをピオグリタゾン又はその塩及び必要に応じて添加剤でコ
ーティングすることによって、コアの表面上にピオグリタゾン又はその塩を含むコーティ
ング層を形成することと、
（３）必要に応じて得られたコーティング生成物を乾燥するとともに、篩別することと
、
によって生産することができる。
【０２２３】
加えて、本発明のコーティング製剤は、必要に応じて、乾燥及び篩別後のコーティング生成物を添加剤と混合し、圧縮成形するか又は混合物をカプセル内に充填することによっても生産することができる。
【０２２４】
本明細書中において、混合（造粒、乾燥、製粉等を含む）は、例えばＶ形ミキサ、タンブラーミキサ、高速撹拌式グラニュレータ（ＦＭ−ＶＧ−１０；POWREX CORPORATION）、オールラウンドニーダ（株式会社秦鉄工所）、流動床乾燥機／グラニュレータ（ＬＡＢ−１、ＦＤ−３Ｓ、ＦＤ−３ＳＮ；POWREX CORPORATION）、箱型真空乾燥機（株式会社楠木機械製作所）、スクリーンミル（Ｐ−３；株式会社昭和化学機械工作所）、遠心分離式流動床グラニュレータ（ＣＦ−ｍｉｎｉ、ＣＦ−２６０、ＣＦ−３６０；Freund Corporation）、乾式グラニュレータ、噴霧乾式グラニュレータ、回転式流動床グラニュレータ（ＭＰ１０；POWREX CORPORATION）等のような製剤形成機を使用して行われる。
【０２２５】
コーティングには、例えば遠心分離式流動床グラニュレータ（ＣＦ−ｍｉｎｉ、ＣＦ−２６０、ＣＦ−３６０；Freund Corporation）、ローリンググラニュレータ（ＭＰ１０；POWREX CORPORATION)、汎用流動床コーティング機器、ウルスター型コーティング機器等のような製剤生産機が使用され、遠心分離式流動床グラニュレータを使用するのが好ましい。
【０２２６】
圧縮成形は、例えば単発式打錠機（株式会社菊水製作所）、回転式錠剤機（株式会社菊水製作所）、Ａｕｔｏ−ｇｒａｐｈ（株式会社島津製作所）等を用いて一般的に０．３ｋＮ／ｃｍ２〜３５ｋＮ／ｃｍ２の圧力で押し抜くことによって行われる。
【０２２７】
カプセル充填に使用することができるカプセルの例としては、ゼラチンカプセル、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）カプセル、プルランカプセル等（好ましくはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）カプセル）、Ｌｉｃａｐｓ（商標）カプセル、Ｖｃａｐｓ（商標）カプセル、Ｃｏｎｉ−Ｓｎａｐ（商標）カプセル、Ｐｒｅｓｓ−ｆｉｔ（商標）カプセル及びＸｐｒｅｓｓ−ｆｉｔ（商標）カプセルが挙げられる。
【０２２８】
上記の有機酸を含有するコアは、以下の方法又はそれに類似の方法によってコーティングされる：
１）結合剤（好ましくはヒドロキシプロピルセルロース）の溶媒溶液（例えば水、アルコール（例えばメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール）、アセトン及びアセトニトリルから選択される１種類又は複数種類；好ましくは水又はイソプロパノール）（溶液は分散液であってもよい）を噴霧しながら、ピオグリタゾン又はその塩を、必要に応じて添加剤（好ましくは賦形剤（好ましくは結晶性セルロース（除外することができる）、サッカリド（好ましくはマンニトール、トレハロース、スクロース））、崩壊剤（好ましくはＬ−ＨＰＣ））とともに、有機酸を含有するコア上に噴霧することを含む方法；
２）ピオグリタゾン又はその塩と、必要に応じて添加剤（好ましくは賦形剤（好ましくは結晶性セルロース（除外することができる）、サッカリド（好ましくはマンニトール、トレハロース、スクロース））、崩壊剤（好ましくはＬ−ＨＰＣ））と、を含有する結合剤（好ましくはヒドロキシプロピルセルロース）の溶媒溶液（例えば水、アルコール（例えばメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール）、アセトン、アセトニトリルから選択される１種類又は複数種類；好ましくは水又はイソプロパノール）（溶液は分散液であってもよい）を、有機酸を含有するコア上に噴霧することを含む方法；
３）ピオグリタゾン又はその塩を、必要に応じて添加剤（好ましくは賦形剤（好ましくは結晶性セルロース（除外することができる）、サッカリド（好ましくはマンニトール、トレハロース、スクロース））、崩壊剤（好ましくはＬ−ＨＰＣ）、及び結合剤（好ましくはヒドロキシプロピルセルロース））とともに、有機酸を含有するコア上に噴霧することを含む方法、一方で例えばメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール）、アセトン、アセトニトリル；好ましくは水又はイソプロパノール）；又は、
４）結合剤（好ましくはヒドロキシプロピルセルロース）の溶媒溶液（例えば水、アルコール（例えばメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール）、アセトン及びアセトニトリルから選択される１種類又は複数種類；好ましくは水又はイソプロパノール）（溶液は分散液であってもよい）を噴霧しながら、ピオグリタゾン又はその塩を、セルロース又はセルロース誘導体（好ましくはセルロース誘導体（より好ましくはＬ−ＨＰＣ））、及び必要に応じて添加剤（好ましくは賦形剤（好ましくは結晶性セルロース（除外することができる）、サッカリド（好ましくはマンニトール、トレハロース、スクロース）））とともに、有機酸を含有するコア上に噴霧することを含む方法。
【０２２９】
本発明のコーティング製剤のコアは、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸及びアスコルビン酸（好ましくはクエン酸（特に無水クエン酸））から選択される有機酸のうちの少なくとも１種類からなるのが好ましい。
【０２３０】
加えて、本発明のコーティング製剤におけるピオグリタゾン又はその塩を含むコーティング層は、ピオグリタゾン又はその塩（好ましくは塩酸ピオグリタゾン）と、賦形剤（好ましくは結晶性セルロース（除外することができる）、サッカリド（好ましくはマンニトール、トレハロース、スクロース；より好ましくはマンニトール））と、崩壊剤（好ましくはＬ−ＨＰＣ）と、結合剤（好ましくはヒドロキシプロピルセルロース）と、からなるか、又は該コーティング層は、ピオグリタゾン又はその塩（好ましくは塩酸ピオグリタゾン）と、賦形剤（好ましくは結晶性セルロース（除外することができる）、サッカリド（好ましくはマンニトール、トレハロース、スクロース；より好ましくはマンニトール））と、セルロース又はセルロース誘導体（好ましくはセルロース誘導体、より好ましくはＬ−ＨＰＣ）と、結合剤（好ましくはヒドロキシプロピルセルロース）と、からなるコーティング層であるのが好ましい。
【０２３１】
（ｂ）口腔内崩壊錠（ＯＤＴ）配合物
本発明は、活性成分がピオグリタゾン又はその薬学的に許容される塩である口腔内崩壊錠を提供する（例えば米国特許出願公開第２０１０−０２７８３９０号に対応する米国特許出願第１２／８１０，７７９号（引用することによりその全体が本明細書の一部をなすものとする）に記載されるようなものである）。
【０２３２】
本発明の生産方法を用いると、口腔内で迅速に崩壊する口腔内崩壊錠は、包装せずに高温及び／又は多湿条件下であっても硬度の僅かな低減及び錠剤の厚さの僅かな増大しか示さないことから、所望の適当な硬度を有するとともに、貯蔵安定性に優れており、また単純な工程によって容易に生産することができる。加えて、本発明の生産方法を用いると、キャッピング及び押し抜き機の内壁への付着等のような錠剤化中の問題を抑えることができる。
【０２３３】
本明細書で使用される場合、口腔内崩壊錠すなわちＯＤＴは、口腔内で唾液によって迅速に崩壊する錠剤を意味する。
【０２３４】
本発明の口腔内崩壊錠は、（ａ）マンニトール（特にＤ−マンニトール）、ラクトース（特にラクトース水和物）、キシリトール、スクロース、エリスリトール及びグルコースからなる群から選択される１つ又は複数のサッカリド又は糖アルコール（本明細書では構成要素（ａ）とも称される）と、（ｂ）低置換ヒドロキシプロピルセルロース（本明細書では構成要素（ｂ）とも称される）と、を含み得る。
【０２３５】
構成要素（ａ）としては、マンニトール及びラクトースが好ましい。
【０２３６】
構成要素（ａ）の含有量は、製剤の重量の好ましくは５０ｗｔ％〜９５ｗｔ％、より好ましくは７０ｗｔ％〜９０ｗｔ％である。更に構成要素（ａ）は、下記のように水等に任意で溶解することができ、撹拌造粒のための結合溶液として使用することができる。上記の構成要素（ａ）の含有量には、結合溶液として用いられる量も含まれる。結合溶液として使用する場合、その量は、上記の構成要素（ａ）の含有量の好ましくは１０ｗｔ％未満、より好ましくは約２ｗｔ％〜５ｗｔ％である。
【０２３７】
構成要素（ａ）のサッカリド及び糖アルコールの平均粒径は、好ましくは５０μｍ以下、より好ましくは１０μｍ〜２０μｍである。平均粒径が５０μｍを超える場合、崩壊時間は延びる傾向にある。
【０２３８】
上記の構成要素（ａ）のサッカリド及び糖アルコールの平均粒径は、撹拌造粒に供する前の出発材料の初期平均粒径を意味するとともに、粒径が上記の範囲内にあることを意味する。平均粒径は、続く製剤の生産プロセス及び貯蔵中に変化し得る。
【０２３９】
平均粒径が上記の範囲内にある構成要素（ａ）のサッカリド及び糖アルコールは市販されている。代替的に、市販製品を、従来の粒径を調整する方法を用いて粉砕し、その後で使用してもよい。
【０２４０】
一実施形態では、本明細書での平均粒径は、気流式分散機を用いて乾式方法に基づき測定される粒径分布において５０％累積粒径を示す。
【０２４１】
本発明では、低置換ヒドロキシプロピルセルロースは、グレード等については特に制限する必要はなく、市販製品を使用することができる。例えば、ヒドロキシプロポキシル基の含有量が約７．０ｗｔ％〜１２．９ｗｔ％である低置換ヒドロキシプロピルセルロースを使用することができる。
【０２４２】
低置換ヒドロキシプロピルセルロースの含有量は、製剤の重量の好ましくは３ｗｔ％〜２０ｗｔ％、より好ましくは５ｗｔ％〜１５ｗｔ％である。
【０２４３】
本発明の口腔内崩壊錠は、（ｃ）粉末水素化マルトースデンプンシロップ、マルトース、マルチトール、ソルビトール及びトレハロースからなる群から選択される１つ又は複数のサッカリド又は糖アルコール（本明細書では構成要素（ｃ）とも称される）を含有するのが好ましい。構成要素（ｃ）の存在が錠剤の硬度を更に増大させる。
【０２４４】
構成要素（ｃ）としては、粉末水素化マルトースデンプンシロップ及びマルトースが好ましい。
【０２４５】
構成要素（ｃ）の含有量は、製剤の重量の好ましくは０．１ｗｔ％〜５ｗｔ％、より好ましくは０．１ｗｔ％〜１ｗｔ％である。
【０２４６】
本発明の口腔内崩壊錠は、デンプン系崩壊剤（例えばトウモロコシデンプン、ナトリウムカルボキシメチルデンプン、米デンプン、小麦デンプン、アルファ化デンプン、部分アルファ化デンプン等）を実質的に含有しない。
【０２４７】
本明細書中において、本明細書では「実質的に含まない（substantially free of）」は、製剤の貯蔵安定性に悪影響を与える量はないことを意味する。具体的には、デンプン系崩壊剤の含有量は、製剤の重量の好ましくは５ｗｔ％以下、より好ましくは３ｗｔ％以下、更により好ましくは１ｗｔ％以下である。
【０２４８】
本発明の口腔内崩壊錠は、タウマチンを含有するのが好ましい。タウマチンの含有量は、製剤の重量の好ましくは０．１ｗｔ％〜５ｗｔ％、より好ましくは０．１ｗｔ％〜１ｗｔ％である。タウマチンは、活性成分の苦味をマスキングするのに一般的に添加される甘味料である。本発明では、タウマチンの存在が生産中の成形性の向上及び硬度の増大という効果をもたらす。
【０２４９】
上記の構成要素に加えて、本発明の口腔内崩壊錠は、固体製剤に一般的に用いられる添加剤を含有することができる。添加剤は、例えば賦形剤、デンプン系崩壊剤以外の崩壊剤、結合剤、滑沢剤、流動化剤、矯味薬、甘味剤、コーティング剤、着色剤、香味料等である。これらの添加剤の含有量に特に制限はなく、製薬分野で従来用いられている量から適当に選択することができる。構成要素（ａ）及び構成要素（ｂ）を除く添加剤の総量（構成要素（ｃ）が含有される場合は、構成要素（ａ）〜構成要素（ｃ）を除く添加剤の総量）は、製剤の重量の好ましくは５０ｗｔ％以下、より好ましくは２５ｗｔ％以下である。
【０２５０】
本発明の口腔内崩壊錠は、活性成分としてピオグリタゾンを含有する。活性成分の含有量は、臨床用途で用いられる量に基づき適切に決定することができ、その含有量は、製剤の重量の好ましくは５０ｗｔ％以下、より好ましくは２５ｗｔ％以下である。
【０２５１】
本発明の口腔内崩壊錠は、上記の構成要素（ａ）及び構成要素（ｂ）（好ましくは上記の構成要素（ａ）、構成要素（ｂ）及び構成要素（ｃ））を含有する組成物を撹拌造粒法によって造粒する工程と、得られた造粒生成物を圧縮成形する工程と、を含む生産によるものであることを特徴とする。造粒生成物が撹拌造粒によって球形になることから、続く圧縮成形工程での錠剤化の問題（特に押し抜き機の内壁への付着）が本発明において防がれると考えられる。
【０２５２】
本発明の口腔内崩壊錠の生産方法を以下で詳細に説明する。
【０２５３】
１．  造粒工程
上記の構成要素（ａ）及び構成要素（ｂ）（好ましくは上記の構成要素（ａ）、構成要素（ｂ）及び構成要素（ｃ））と任意選択的な活性成分及び／又は任意選択的な添加剤とを混合する。添加剤は、例えば賦形剤（例えばタルク）、デンプン系崩壊剤以外の崩壊剤（例えばクロスポビドン）、甘味剤、着色剤、香味料等である。活性成分を初めに賦形剤（例えばタルク）と混合し、次いで苦味をマスキングする目的等でコーティング剤（例えば水性エチルセルロース分散液、トリアセチン）でコーティングすることができる。
【０２５４】
上記の混合物を撹拌造粒法によって造粒する。撹拌造粒法は、一般的には高速撹拌造粒法とも称される。本明細書中において、（高速）撹拌造粒法は、大きな粒子を形成するために、造粒機の底部に設置された主翼を回転させることによって、結合剤溶液を混合粉末上に滴加又は噴霧させることと、所望の粒径の顆粒を得るために、側壁上のチョッパーによって粒子を粉砕させることと、を含む方法である（２００２年に出版された、佐川良寿著、医薬品製剤技術（Pharmaceutical Product Preparation Technique）、株式会社ＣＭＣ出版、１０８頁）。
【０２５５】
撹拌造粒法による造粒は、いわゆる撹拌グラニュレータ（高速撹拌グラニュレータとも称される）（例えば高速ミキサ、ＬＦＳ−ＧＳ−２Ｊ（深江パウテック株式会社製）；ＶＥＲＴＩＣＡＬ  ＧＲＡＮＵＬＡＴＯＲ（POWREX CORPORATION製）；ニュースピードニーダー（岡田精工株式会社製）等）を使用することによって行うことができる。主翼及びチョッパーの回転速度に特に制限はなく、撹拌造粒で従来用いられている範囲から適当に選択することができる。特に、結合溶液（例えば水、又は必要に応じて他の添加剤をブレンドすることができる）を撹拌グラニュレータ内の上記の混合物に添加し、混合物を造粒させる。タウマチンを本発明で添加する場合、特に制限はなく、タウマチンを結合溶液に添加することができる。
【０２５６】
２．  圧縮成形工程
造粒工程で得られた造粒生成物に、任意選択的な活性成分及び／又は任意選択的な添加剤（例えば流動化剤（例えば軽質無水ケイ酸）、滑沢剤（例えばステアリン酸マグネシウム、フマル酸ステアリルナトリウム、ステアリン酸カルシウム）、香味料）を添加し、混合物をブレンドし、製剤機等によって圧縮成形する。圧縮成形圧（製剤化圧）は、錠剤生産に一般的に用いられる範囲から適切に選択することができる。圧力に特に制限はないが、２００ｋｇ以上であるのが好ましい。
【０２５７】
上記のように生産された本発明の口腔内崩壊錠は、錠剤化の後の面倒な加湿工程及び乾燥工程、並びに外部の滑沢システムの特別な設備がなくても容易に生産することができるにもかかわらず、所望の適当な硬度を有し、口腔内で迅速に崩壊し、優れた貯蔵安定性を示す。
【０２５８】
本発明の口腔内崩壊錠の硬度は、錠剤の直径が６ｍｍ〜７ｍｍ、及び厚さが約３ｍｍである場合に概して約３ｋｇ〜６ｋｇである。本明細書中において、本明細書での錠剤の硬度は、シュロニガー錠剤硬度テスター（Dr. Schleuniger Pharmatron AG）によって測定される値である。
【０２５９】
口腔内での本発明の口腔内崩壊錠の崩壊時間は、製剤の形態、用量等に応じて異なるが、その崩壊時間は、概して６０秒以内、好ましくは３０秒以内である。
【０２６０】
本発明の口腔内崩壊錠は、サイズ及び形態に関しては特に制限はなく、割線を備える分割錠であってもよい。
【０２６１】
本発明の口腔内崩壊錠は水なしで摂取することができる。
【０２６２】
ＶＩ．  使用
本発明の方法は、アルツハイマー病を発症するリスクがある患者においてアルツハイマー病又はアルツハイマー病の発症の指標となる若しくはアルツハイマー病の発症と関連する疾患期若しくは段階の発生を遅延させるのに用いられる。本発明は、アルツハイマー病を発症するリスクがある患者においてアルツハイマー病、その症状、又はアルツハイマー病の発症の指標となる若しくはアルツハイマー病の発症と関連する疾患期若しくは段階の発生を遅延させるために使用することができる医薬品も提供する。
【０２６３】
他に規定のない限り、本明細書で用いられる全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと同様の又は均等の方法及び材料を、本発明の実施又は試験に使用することができるが、好適な方法及び材料を以下に記載する。本明細書で言及される全ての刊行物、特許出願、特許、及び他の参考文献は引用することによりその全体が本明細書の一部をなすものとする。矛盾が生じる場合には、定義を含めて本明細書に従うものとする。
さらに、材料、方法、及び実施例は一例にすぎず、限定を意図するものではない。
【実施例】
【０２６４】
これより本発明を包括的に説明するが、特に指定されていない限り、以下の実施例に関しては、一例として与えられるものであり、本発明を限定する意図はないことが、より容易に理解されるであろう。
【０２６５】
以下の実施例は例示目的のみで与えられるものであり、本発明者らが発明と考えるものの範囲を限定する意図はない。
【０２６６】
実施例１
低用量ピオグリタゾン顆粒１
ピオグリタゾンＨＣｌ（２２８．１ｇ）、マンニトール（ROQUETTE、３３５．８ｇ）及びＬ−ＨＰＣ（ＬＨ−３２、信越化学工業株式会社、１１５．０ｇ）を混合して、粉剤を得る。ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ−ＳＳＬ、日本曹達株式会社、９．２ｇ）を精製水（１９４．６ｇ）に溶解して、結合液を得る。無水クエン酸結晶（Jungbunzlauer、１３８０ｇ）を遠心分離式流動床グラニュレータ（ＣＦ−３６０、Freund Corporation）に入れ、結合液を噴霧しながら粉剤でコーティングする。得られた顆粒を４０℃で１８時間、減圧下で乾燥させ、１６メッシュ及び４２メッシュの篩を使用して、１６メッシュ〜４２メッシュ（口径０．３５５ｍｍ〜１．００ｍｍ）の範囲で顆粒を得る。顆粒（７１９３．６ｇ）をタンブラーミキサ（６０Ｌ容、株式会社昭和化学機械工作所）内においてタルク（松村産業株式会社、３．２ｇ）及び軽質無水ケイ酸（ＡＥＲＯＳＩＬ、日本アエロジル株式会社、３．２ｇ）と混合して、４５０ｍｇ当たり以下の組成を有する塩酸ピオグリタゾン顆粒を得る。
【０２６７】
【表１】
2020176142.tif 000006
【０２６８】
得られた組成物を適当な賦形剤で希釈して、本明細書で挙げられる投与量、例えば０．５ｍｇ、１．５ｍｇ、４．５ｍｇ及び９．０ｍｇのいずれかを含む、所望の投与量を得ることができる。次いで所望の投与量を、カプセル、錠剤又はカプレット等の経口剤形へと配合することができる。
【０２６９】
実施例２
低用量ピオグリタゾン顆粒２
ピオグリタゾンＨＣｌ（９．９０ｇ）、マンニトール（ROQUETTE、１８６．２ｇ）及びＬ−ＨＰＣ（ＬＨ−３２、信越化学工業株式会社、３９．９６ｇ）を混合して、粉剤を得る。ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ−ＳＳＬ、日本曹達株式会社、１２．００ｇ）を精製水（３４０．２ｇ）に溶解して、結合液を得る。無水クエン酸結晶（Jungbunzlauer、４００．０ｇ）を遠心分離式流動床グラニュレータ（ＣＦ−２６０、Freund Corporation）に入れ、結合液を噴霧しながら粉剤でコーティングする。得られた顆粒を４０℃で１８時間、減圧下で乾燥させ、１６メッシュ及び４２メッシュの篩を使用して、１６メッシュ〜４２メッシュ（口径０．３５５ｍｍ〜１．００ｍｍ）の範囲で以下の組成を有する塩酸ピオグリタゾン顆粒を得る。
【０２７０】
【表２】
2020176142.tif 000007
【０２７１】
実施例３
低用量ピオグリタゾンカプセル
実施例２で配合した低用量ピオグリタゾン顆粒２（３９．９６ｇ）を、ガラス瓶内においてタルク（松村産業株式会社、０．０２ｇ）及び軽質無水ケイ酸（ＡＥＲＯＳＩＬ、日本アエロジル株式会社、０．０２ｇ）と混合して、８０ｍｇ当たり以下の組成を有する塩酸ピオグリタゾン顆粒を得る。塩酸ピオグリタゾン顆粒（８０ｍｇ）を４号ヒプロメロースカプセル（クオリカプス株式会社）に充填して、以下の組成を有するカプセルを得る。
【０２７２】
【表３】
2020176142.tif 000008
【０２７３】
実施例３
ピオグリタゾン液体配合物１
ピオグリタゾンの液体配合物は、以下のような材料を用いて調製する。
材料：
クエン酸（Sigma、Ｃ１８５７、ロット０８９Ｋ００５７）
蒸留水（Ｉｃｅ  Ｍｏｕｎｔａｉｎ）
ＨＰＭＣ、ＵＳＰ（Sigma、Ｈ−３７８５、ロット１２２Ｋ０１４９）
ピオグリタゾンＨＣｌ（武田薬品工業株式会社、ロット３４５）
ポリエチレングリコール２００（Sigma、Ｐ３０１５、ロット０９８Ｋ００５６）
ポリソルベート８０、ＮＦ（Spectrum、Ｐ０１３８、ロットＸＶ０８７９）
プロピレングリコール、ＵＳＰ／ＦＣＣ（Fisher、Ｐ３５５、ロット０８０６７６）
スクロース、ＵＳＰ（Sigma、Ｓ３９２９、ロット０８６Ｋ００２２）
Ｓｙｒｕｐ  ＮＦ（Spectrum、ＳＹ１０５、ロットＸＰ０７０３）
【０２７４】
およそ０．０１４９６ｇのピオグリタゾンＨＣｌを５０ｍＬ容のメスシリンダーに移す。０．６９ｇのポリエチレングリコール２００を添加し、混合して、固体を湿らせる。１．５１ｇのプロピレングリコールを添加し、得られた混合物を回転させ、超音波処理して、固体を混合するとともに溶解させる。１．４８ｇのポリソルベート８０を添加し、回転させ混合する。０．５０３７３ｇのクエン酸を添加し、回転させ混合する。一部のクエン酸固体が溶解せずに残留する。およそ１０ｍＬの蒸留水を添加し、回転させ、固体を混合／溶解する。混合物を蒸留水で５０ｍＬに希釈し、約１５ｍｇ／５０ｍＬすなわち０．３ｍｇ／ｍＬのピオグリタゾン濃度を有する液体を配合するために、全ての固体が溶解するように十分に混合する。
【０２７５】
本発明の方法を実施する上で、選択された低用量ピオグリタゾンを、本実施例４のピオグリタゾン液体を用いて被験体に投与することができる。例えば、５ｍＬ又は小さじ一杯分が約１．５ｍｇ用量のピオグリタゾンＨＣｌを送達するものであり、１５ｍＬ又は大さじ一杯分が約４．５ｍｇ用量のピオグリタゾンＨＣｌを送達するものである。大さじ二杯分又は約３０ｍＬの本実施例４のピオグリタゾン液体は、１用量当たり約９ｍｇのピオグリタゾンＨＣｌを送達するものである。
【０２７６】
実施例５
ピオグリタゾン液体配合物２
ピオグリタゾンの液体配合物は、以下のような材料を用いて調製する。
材料：
クエン酸（Sigma、Ｃ１８５７、ロット０８９Ｋ００５７）
蒸留水（Ｉｃｅ  Ｍｏｕｎｔａｉｎ）
ＨＰＭＣ、ＵＳＰ（Sigma、Ｈ−３７８５、ロット１２２Ｋ０１４９）
ピオグリタゾンＨＣｌ（武田薬品工業株式会社、ロット３４５）
ポリエチレングリコール２００（Sigma、Ｐ３０１５、ロット０９８Ｋ００５６）
ポリソルベート８０、ＮＦ（Spectrum、Ｐ０１３８、ロットＸＶ０８７９）
プロピレングリコール、ＵＳＰ／ＦＣＣ（Fisher、Ｐ３５５、ロット０８０６７６）
スクロース、ＵＳＰ（Sigma、Ｓ３９２９、ロット０８６Ｋ００２２）
Ｓｙｒｕｐ  ＮＦ（Spectrum、ＳＹ１０５、ロットＸＰ０７０３）
【０２７７】
およそ０．０１６１３ｇのピオグリタゾンＨＣｌを５０ｍＬ容のメスフラスコに添加する。１．００４３ｇのクエン酸を添加する。およそ２５ｍＬの蒸留水を添加し、得られた混合物を回転させ、超音波処理して、固体を湿らせる。混合物を或る容量、すなわち約５０ｍＬまで蒸留水で希釈し、十分に混合して、次いで全ての固体が溶解するように、１〜２分間超音波処理する。
【０２７８】
本実施例５の液体ピオグリタゾン溶液は、約１６．１３ｍｇ／５０ｍＬすなわち０．３２６ｍｇ／ｍＬのピオグリタゾン濃度を有する。
【０２７９】
本実施例５の液体ピオグリタゾン溶液を用いて本発明の方法を実施する上で、選択された低用量ピオグリタゾンを、被験体に投与することができる。例えば、５ｍＬ又は小さじ一杯分が約１．６３ｍｇ用量のピオグリタゾンＨＣｌを送達するものであり、１５ｍＬ又は大さじ一杯分が約４．８９ｍｇ用量のピオグリタゾンＨＣｌを送達するものである。大さじ二杯分又は約３０ｍＬの本実施例５のピオグリタゾン液体は、１用量当たり約９．７８ｍｇのピオグリタゾンＨＣｌを送達するものである。
【０２８０】
実施例６
ピオグリタゾン懸濁液配合物１
ピオグリタゾンの懸濁液配合物を以下のとおりに調製する。
【０２８１】
ピオグリタゾンＨＣｌ懸濁液Ａの調製：懸濁ビヒクルはＳｙｒｕｐ  ＮＦである（Ｓｙｒｕｐ  ＮＦの濃度は１．３０ｇ／ｍＬである）。
【０２８２】
０．０２５ｇのピオグリタゾンＨＣｌ薬物物質をガラス製の乳鉢及び乳棒に移す。ピオグリタゾンＨＣｌを約４滴の懸濁ビヒクルで湿らせ、約１分間混合／粉砕して、平滑で均一なペーストを形成する。懸濁ビヒクルを、乳鉢及び乳棒内の総重量が約１ｇになるまで添加する。得られた混合物を１分間混合／粉砕する。更に多くの懸濁ビヒクルを、総重量が約８ｇになるまで添加する。得られた混合物を１分間混合する。更に多くの懸濁ビヒクルを、総重量が約４８ｇになるまで添加し、次いで１分間混合する。懸濁ビヒクルを、懸濁液の総重量が１３０．０４ｇになるまで添加し、１分間混合する。乳鉢から混合物を４オンスの試薬瓶に注ぐ。試薬瓶に蓋をし、懸濁液を手で約１分間振盪させる。
【０２８３】
ピオグリタゾンＨＣｌの理論濃度を決定する；
２５．６０ｍｇ／１３０．０４ｇ＝０．１９６９ｍｇ／ｇ（遊離塩基ではなくＨＣｌ塩として）
２５．６０ｍｇ／１００ｍＬ＝０．２５６０ｍｇ／ｍＬ（遊離塩基ではなくＨＣｌ塩として）
【０２８４】
本実施例６の液体ピオグリタゾン懸濁液１を用いて本発明の方法を実施する上で、選択された低用量ピオグリタゾンを被験体に投与することができる。例えば、５ｍＬ又は小さじ一杯分が約１．２８ｍｇ用量のピオグリタゾンＨＣｌを送達するものであり、１５ｍＬ又は大さじ一杯分が約３．８４ｍｇ用量のピオグリタゾンＨＣｌを送達するものである。大さじ二杯分又は約３０ｍＬの本実施例６の液体ピオグリタゾン懸濁液１は、１用量当たり約７．６８ｍｇのピオグリタゾンＨＣｌを送達するものである。
【０２８５】
実施例７
ピオグリタゾン懸濁液配合物２
懸濁ビヒクルＢの調製：０．６％  ＨＰＭＣ＋１０％スクロース
０．６％  ＨＰＭＣ溶液：
１０００ｍＬの蒸留水を２Ｌ容の三角フラスコに移す。水を常に撹拌しながら６０℃に加熱する。６ｇのＨＰＭＣを秤量し、加熱した水に均一に分散させる。混合物の加熱をちょうど沸点に達するまで継続する。混合物を熱から外し、常に撹拌しながら氷浴内に入れる。混合物を清澄化するまで撹拌し、室温へと冷却する。
【０２８６】
懸濁ビヒクル：（１０％スクロースを含む０．６％  ＨＰＭＣ）：
８０ｇのスクロースを１０００ｍＬ容のガラス瓶に添加する。５０ｍＬの蒸留水を添加し、混合物を固体全てが溶解するように振盪することによって混合する。０．６％  ＨＰＭＣ溶液を、総重量が８００ｇになるまで添加する。混合物を振盪させ、固体を溶解する。
【０２８７】
溶液の濃度は１０３．８６ｇ／１００ｍＬである。
【０２８８】
ピオグリタゾンＨＣｌ懸濁液Ｂの調製：懸濁ビヒクルは０．６％  ＨＰＭＣ＋１０％スクロースである
０．０２５ｇのピオグリタゾンＨＣｌ薬物物質を、ガラス製の乳鉢及び乳棒に移す。ピオグリタゾンＨＣｌを約４滴の懸濁ビヒクルで湿らせ、約１分間混合／粉砕して、平滑で均一なペーストを形成する。懸濁ビヒクルを、乳鉢及び乳棒内の総重量が約１ｇになるまで添加する。混合物を１分間混合／粉砕する。更なる懸濁ビヒクルを、総重量が約８ｇになるまで添加し、次いで１分間混合する。更なる懸濁ビヒクルを、総重量が約２０ｇになるまで添加し、次いで１分間混合する。
【０２８９】
更なる懸濁ビヒクルを、総重量が約４０ｇ〜５０ｇになるまで添加し、次いで１分間混合する。懸濁ビヒクルを、懸濁液の総重量が１０３．３１ｇになるまで添加し、１分間混合する。乳鉢から混合物を４オンスの試薬瓶に注ぐ。試薬瓶に蓋をし、懸濁液を手で約１分間振盪させる。
【０２９０】
ピオグリタゾンＨＣｌの理論濃度を決定する；
２６．４４ｍｇ／１０３．３１ｇ＝０．２５５９３ｍｇ／ｇ（遊離塩基ではなくＨＣｌ塩として）
２６．４４ｍｇ／１００ｍＬ＝０．２６４４ｍｇ／ｍＬ（遊離塩基ではなくＨＣｌ塩として）
【０２９１】
本実施例７の液体ピオグリタゾン懸濁液２を用いて本発明の方法を実施する上で、選択された低用量ピオグリタゾンを被験体に投与することができる。例えば、５ｍＬ又は小さじ一杯分が約１．３２２ｍｇ用量のピオグリタゾンＨＣｌを送達するものであり、１５ｍＬ又は大さじ一杯分が約３．９６６ｍｇ用量のピオグリタゾンＨＣｌを送達するものである。大さじ二杯分又は約３０ｍＬの本実施例７の液体ピオグリタゾン懸濁液２は、１用量当たり約７．９３２ｍｇのピオグリタゾンＨＣｌを送達するものである。
【０２９２】
実施例８
これまでは、誰が、認知機能障害及び最終的にアルツハイマー認知症へと至る、本明細書に記載の種類の病態生理的変化を生じる可能性が高いかを予測することはできなかった。ＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３遺伝子型は、年齢及び場合によっては他の因子とともに、どの被験体が今後５年〜７年でアルツハイマー型の認知機能障害を発症するリスクがあるかを決定する予後バイオマーカーを構成し、これによりこの進行性でかつ破壊的な疾患の初期において医学的介入の機会を与える。この介入の臨床的便益は、下記の一般形態の臨床研究において確認することができる。加えて、この性質のプロスペクティブ臨床研究によって、予後バイオマーカーの陽性適中率及び陰性適中率を決定するのに十分なデータが得られる。予後バイオマーカーの陽性適中率及び陰性適中率の把握は、バイオマーカーを臨床診察に導入する前に必要とされる。
【０２９３】
経口研究
ｒｓ１０５２４５２３（５２３）は、ＡＰＯＥ遺伝子型との連鎖不均衡（ＬＤ）で生じるポリＴ長多型であり、ＬＤ領域におけるそれぞれの鎖上のＡＰＯＥ遺伝子型とともに遺伝する。本質的には、ＴＯＭＭ４０の単一イントロン変異体はポリＴ長が異なり、より長い形態の変異体は、より短い形態と比較して発生年齢のおよそ７年の差と関連する。正常な被験体の提示年齢ベースで、今後５年〜７年にわたる認知機能障害及びＡＤの発生の「高リスク」又は「低リスク」を決定する。
【０２９４】
本研究は、アルツハイマー病発生及び臨床的発現に関係する特定の遺伝子型の存在に基づく臨床リスク評価を組み合わせることによって、多様性の大きなコミュニティベースの集団において５年〜７年以内のＡＤ発生のリスクが高い被験体を特定するための新規の遺伝学ベースのモデルを提供する。本研究は、
認知機能障害及びアルツハイマー病の発生年齢を予測するために、具体的には、個別のアルツハイマー病診断検査が、被験体をアルツハイマー病に対する「高リスク」群と「低リスク」群とに分離することができるか否かを確定するために、おそらくはＡＰＯＥ遺伝子型と連動するＴＯＭＭ４０−ＡＰＯＥ  ＬＤ領域におけるＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５２４５２３（５２３）ポリＴ長多型を使用するとともに、
アルツハイマー病関連の認知症症状の発生を遅延させるために、アルツハイマー病のＴＯＭＭ４０−ＡＰＯＥ遺伝子型により確定されるリスクが高い発症前の被験体において、６０ヶ月（５年）間毎日、プラセボと対比して低用量ＰＰＡＲγアゴニストを使用する。
【０２９５】
６２歳〜８７歳の認知力が正常な被験体を、今後５年〜７年以内のＡＤに対する感受性に関して評価し、ＡＤの発生に対するピオグリタゾンの効果に関して試験する。「認知力が正常」の定義付けは、被験体の年齢及び以下に挙げられる評価に対する知識レベルを考慮して、集団平均の１．５標準偏差（ＳＤ）内にあるものとして計算される。このカットオフ値を下回るスコアは、認知力が損なわれているとみなされる。以下の認知評価を用いて、本研究への登録時に、及び本研究にわたって認知機能を評価する。
【０２９６】
認知評価尺度は、アルツハイマー病における初期障害に感受性があるものが選ばれる。これらの評価尺度は、２００４年に実施されたＮＳＡＩＤ療法を用いるアルツハイマー病に関する予防研究であるＡＤＡＰＴ研究（１）に使用される。ミニメンタルステート検査（２ＭＳ−Ｅ）は、女性の健康イニシアチブ（Women's Health Initiative）研究においてＡＤの予防のためのホルモン補充療法（２）に使用される。このため、認知評価には以下のものが含まれる：
改良型ミニメンタルステート検査（３ＭＳ−Ｅ）
簡易視空間記憶検査（改訂版）（ＢＶＭＴ−Ｒ）
ホプキンス言語学習検査（改訂版）（ＨＶＬＴ−Ｒ）
リバーミード行動記憶検査（ＲＢＭＴ）
生成発話流暢性検査（ＧＶＦＴ）
デジットスパン検査（ＤＳＴ）
【０２９７】
本研究への登録は、これらの評価によるスコアのみに基づくものである。本研究への無作為化のために、更に個体に、今後５年〜７年にわたって認知機能障害又はＡＤを発症する「リスクが高い」又は「リスクが低い」としてそれらのリスク状況を評価するために、ＡＰＯＥジェノタイピングと５２３ポリＴリピート長の測定とからなるＤＮＡ検査を行う。以下の設計は研究手順を説明するものである。
【０２９８】
研究設計仮定
エンドポイントは、１）神経心理学的評価によるスコアに基づくベースラインからの認知の評価基準の変化、及び２）ＮＩＮＣＤＳ−ＡＤＲＤＡ基準（国立神経疾患・伝達障害・脳卒中研究所（ＮＩＮＣＤＳ）及びアルツハイマー疾患・関連疾病協会（ＡＤＲＤＡ））に準拠するアルツハイマー病の診断である。これらは、２つの主要なエンドポイント又は複合事象エンドポイントとしてのいずれかで測定する。
【０２９９】
サンプルサイズの計算
サンプルサイズの計算は、上記のエンドポイントに基づく事象データに対する時間の対数順位検定で求められる。「高リスク」群の転換率は、先の予防研究によるデータに基づき５年の経過観察の終了時で２０％であると推定される（３、４）。５％有意水準で９０％検出力によってこの転換率の５０％（すなわち２０％から１０％への）改善を検出するのには、３７４／群というサンプルサイズが必要とされる。５年の期間にわたるプラセボ群及び治療群の両群での２０％の脱落率（drop out rate）がこの計算に組み込まれる。
このサンプルサイズは、多重比較に合わせて調整することはない。
【０３００】
一般集団におけるアルツハイマー病の罹患率に基づき、「低リスク」群の転換率が１０％であるという更なる推定が為される（４）。この群を「高リスク」プラセボ群と比較するのに必要とされるサンプルサイズも、９０％検出力及び５％有意水準で３７４／群である。
【０３０１】
研究設計
診断検査によって、どの患者がアルツハイマー病又は認知機能障害への転換の「リスクが高く」（高リスク）、どの患者が転換の「リスクが低い」（低リスク）かが確定される。調査者らは、診断検査の結果に対して盲検化されており、この盲検を維持するために中央無作為化を用いる。いずれの設計の主な目的は、
診断検査が、「高リスク」被験体と「低リスク」被験体とを判別することができるかを確
定することと、
「高リスク」患者の転換率に対する治療の効果を評価することと、
である。
【０３０２】
これらの研究に採用した被験体は全て、先に定義付けされたように認知力が正常なものである。
【０３０３】
好ましい研究設計
【数３】
2020176142.tif 000009
【０３０４】
本設計では、「高リスク」群のみを無作為化し、プラセボ又は治療に割り振る。これは、例えば被験体１１２２人という総サンプルサイズを用いる単純な設計である。本設計によって、２つの仮説を検証することができる。１つ目の仮説は、プラセボ処理被験体によるデータを比較することによって「高リスク」群と「低リスク」群とを確定する診断能に関するものである。２つ目の仮説は、「高リスク」群（arm）の治療群によるデータとプラセボ群によるデータとを比較することによって、治療が転換率を改善させることができるか否かに関するものである。
【０３０５】
代替設計１
【数４】
2020176142.tif 000010
【０３０６】
本設計では、第４の群を加え、「低リスク」群における治療効果を評価することを可能にする。本設計は、総サンプルサイズを１４９６人の患者まで増大させ得る。
【０３０７】
本設計によって、「低リスク」群が、予測されるよりも高い転換率を有するか否かという有用な情報を得ることができる。しかしながら、「低リスク」群に対するリスク／ベネフィットに関して本設計には潜在的な懸念事項がある。「低リスク」群の被験体は、それらの転換率に対して予測される便益がなく、治療による副作用を被るリスクがある。
【０３０８】
代替設計２
【数５】
2020176142.tif 000011
【０３０９】
本設計は、「低リスク」群を非治療のままにし、観察群とすること以外は、好ましい設計と同じものである。本設計は、本研究の目的を達成することはできるが、多くの潜在的なピットフォール（pitfalls）がある：
非処理群を盲検化することができず、そのため診断検査の結果が盲検化されない；
観察されているが、「治療」を受けていないと感じる被験体が便益のない場合に、「低リスク」群において脱落率が高くなる可能性がある；
類似のもの同士を比較することができず、これは「プラセボ」効果がある場合に問題となり得る（時間事象検査に対しては不可能であるが、認知検査に関しては可能である）。
【０３１０】
サンプルサイズの計算は、５年の終了時での転換率間の１０パーセント点の相違の検出に基づくものである。数を増大させることによって、シグナルをより小さな相違でより早期に検出することが可能になる。「高リスク」群での転換率が５％／年であると推定される場合、３年後にはおよそ１５％の被験体がアルツハイマー病ヘと転換するか、又は認知機能障害を示すとされる。治療がこの率を５０％改善させることができると推定される場合、治療群での予測される転換率は７．５％となる。５％有意水準での９０％検出力での相違を検出するために、１群当たり５５９人の被験体が必要とされ、好ましい設計に対して１６７７人という総サンプルサイズがもたらされる。被験体数のこの増大は、それぞれのＴＯＭＭ４０−ＡＰＯＥハプロタイプと関連する発生年齢曲線の群（family）の研究を可能にする。探索的分析を用いて、Ｃｏｘ比例ハザードの時間事象分析における共変量として年齢を含めることによって年齢の影響を研究し、これによって共変量の研究が可能になる。或る特定の割合の被験体が、スクリーニング時の神経心理学的評価に基づき、軽度の認知機能障害（ＭＣＩ）であるとして確定される。本研究は、神経心理学的評価に基づき、認知力が正常であると確定された被験体のみを採用する。
【０３１１】
【表４】
2020176142.tif 000012
【０３１２】
実施例９
ＢＯＬＤ研究
本発明は、以下の例示的な用量設定分析を提供する。
【０３１３】
本発明は、異なる低用量のピオグリタゾンに応じた薬力学的変化の測定を提供する。関連する薬力学的評価基準は、血中酸素濃度依存性機能的磁気共鳴画像診断（ＢＯＬＤ  ｆＭＲＩ）によって測定される、ニューロン活動と結び付いた局部的な血中酸素供給の変化である。
【０３１４】
神経保護及びミトコンドリア発生は、チアゾリジンジオンの生理学的効果の１つである。一実施形態では、被験体のピオグリタゾン治療が、脳の活動領域の代謝能を増大させることができる。代謝能のこの変化は、ＢＯＬＤ  ｆＭＲＩを用いて観察可能であり得る。
【０３１５】
ＢＯＬＤ  ｆＭＲＩは、非侵襲性の全脳撮像に広く用いられる技術である。この技法は、ニューロン活動と結び付いた局部的な血中酸素供給の変化を測定するものである。
【０３１６】
ＢＯＬＤ  ｆＭＲＩは、ニューロン活動の結果として生じる、脳でのオキシヘモグロビンとデオキシヘモグロビンとの比率の相対変化を測定するものである。ニューロンが活動を始めると、それに伴い細胞代謝が増大し、これらの代謝要求を満たすように、ニューロン活動が増大した領域への血流が増大する。この血液動態反応の結果が、オキシヘモグロビンとデオキシヘモグロビンとの局部比率の測定可能な変化である。オキシヘモグロビンは反磁性であり、デオキシヘモグロビンは常磁性であり、この磁性の相違がＢＯＬＤ  ｆＭＲＩによって検出される。
【０３１７】
ＢＯＬＤシグナルは、ニューロン活動後の脳血流（ＣＢＦ）、脳血液量（ＣＢＶ）及び酸素消費量の脳代謝率（ＣＭＲＯ２）の複雑でかつ理解が不完全な変化を反映している。様々な種類のＢＯＬＤシグナルを誘起する候補回路要素としては、興奮性ニューロン、混合ニューロン集団、星状膠細胞、及び軸索路又は通過軸索線維が挙げられる（Lee et al., 2010 Nature 465: 788-792、Logothetis 2008 Nature 453: 869-878、Logothetis et al. 2001 Nature 412: 150-1571、Raichle 2010 Cell 14: 180-190に詳細に記載され、それらのそれぞれが引用することによりその全体が本明細書の一部をなすものとする）。
【０３１８】
本研究は、対象となる年齢、例えば６２歳〜８７歳の健常な認知力が正常な高齢の被験体を用いる。ＢＯＬＤ  ｆＭＲＩスキャニングを、高解像度の構造的でかつ機能的な脳撮像に最適化されたスキャナ（例えば最新式のＧＥ  ３  Ｔｅｓｌａスキャナ）を用いて行う。
【０３１９】
一実施形態では、本研究は複数のコホートを用いる二重盲検研究であり、それぞれのコホートは異なるピオグリタゾン用量の投与を受ける。別の実施形態では、本研究は、同じコホートが複数の異なる薬物用量の投与を受ける連続設計である。ピオグリタゾンへの曝露の結果としてニューロン活動の変化を示すのに用いられる薬力学的マーカーは、ＢＯＬＤシグナルの変化、特にアルツハイマー病において損なわれるより高次の認知機能と関連する背外側前頭前皮質及び海馬でのＢＯＬＤシグナルの変化である。
【０３２０】
それぞれの参加者は、少なくとも３つの時点においてＭＲＩスキャニングを受ける：
１．  投与前（それぞれの被験体に関するベースライン又は対照値を得るため）；
２．  薬物の急性曝露の結果を測定するため、１回目の投与を受けた直後（２時間又は
Ｃｍａｘの概算時のいずれか）；及び、
３．  薬物曝露の７日後（ピオグリタゾン血清濃度がそれぞれ定常状態にあり、ミトコ
ンドリア機能に対する薬物の生理学的効果が生じている時点）。
【０３２１】
ピオグリタゾンは７日間、毎日与える。
【０３２２】
４５ｍｇのピオグリタゾン（２型糖尿病の治療用の市販の配合物）が、血清中でおよそ
３ｍＭのＣｍａｘをもたらす（Ghosh et al. 2007 Mol. Pharmacol 71: 1695-1702を参照
されたい）。
【０３２３】
検査用量としては以下が挙げられる：
ａ）０．５ｍｇ用量−血清中でおよそ３３．３ｎＭ及び脳内でおよそ６．７ｎＭ；
ｂ）１．５ｍｇ用量−血清中でおよそ１００ｎＭ及び脳内でおよそ２０ｎＭ；
ｃ）４．５ｍｇ用量−血清中でおよそ３００ｎＭ及び脳内でおよそ５０ｎＭ；
ｄ）９ｍｇ用量−血清中でおよそ６００ｎＭ及び脳内でおよそ１２０ｎＭ。
【０３２４】
磁気共鳴画像診断プロトコルの概要
一般的な参加者スクリーニング手順
参加者に対して、選抜前にスキャニングを不可能にする鉄金属インプラントのスクリーニングを行う。参加者に対して、スキャンセッションの２時間前にはカフェイン、タバコ製品及び運動を控え、スキャンの２０時間前には飲酒及び不必要な薬の服用を控えるように指示する。覚醒剤（stimulant medications）を服用している参加者には、医師の許可がなければ少なくとも２４時間はそれらを服用しないよう求める。２つの呼気サンプルは、アルコールレベルを測定するために入手する。尿サンプルは、５つの薬物代謝産物（精神刺激薬、大麻、アヘン剤及び鎮静剤）に関して検査するために入手する。女性の参加者は尿妊娠検査を行い、参加者がスキャニングを受けるには陰性でなければならない。
【０３２５】
一般的なスキャニングプロトコル
被験体には、ＭＲＩセッションに参加する被験体の快適度を評価するためにＭＲＩシミュレータに入る機会が与えられる。次いで参加者は、心拍数（フォトプレチスモグラフ）及び血圧をモニタリングする機器を装着し、スキャナに入れられる。頭の動きを、枕とテープとの組合せを用いて最小限に抑える。ローカライザスキャン取得後のプロトコルを以下の固定順序で提示する。総スキャン時間はおよそ６０分間である。
【０３２６】
構造的ＭＲＩ．  全体の及び局部的な灰白質及び白質、並びにＣＳＦの評価基準は、高解像度ＭＲＩを用いて回収する。
【０３２７】
技術的詳細：等尺ボクセル（isometric voxels）が１ｍｍのＴ１強調画像を、ファストスポイルドグラジエントリコール（fast spoiled gradient-recall）（ＦＳＰＧＲ）によるアレイ空間感度符号化技法（Array Spatial Sensitivity Encoding Techniques）（ＡＳＳＥＴ）を用いて取得する。画像パラメータは、白質と灰白質とＣＳＦとの間のコントラストに合わせて最適化する（ＴＲ／ＴＥ／フリップ角＝７．４８４ｍｓ／２．９８４ｍｓ／１２度、２５６ｍｍ  ＦＯＶ、１ｍｍスライス、１６６のスライス、２５６×２５６マトリックス、１Ｎｅｘ）。
【０３２８】
潅流ＭＲＩ．  全体の及び局部的な安静時脳血流の評価基準は、パルス式動脈スピン標識化（Pulsed Arterial Spin Labeling）（ＰＡＳＬ）を用いて回収する。
【０３２９】
技術的詳細：標識化を用いた及び標識化を用いないインターリーブ画像を、勾配エコープラナー撮像（ＥＰＩ）シークエンスを用いて取得する。取得パラメータは以下のものからなる：視野（ＦＯＶ）＝２２ｃｍ、マトリックス＝６４×６４、繰り返し時間（ＴＲ）＝３秒、エコー時間（ＴＥ）＝１７ミリ秒、標識時間＝１．６秒、遅延時間＝.８秒、フリップ角＝９０度。安静時潅流スキャニングプロトコルにはおよそ６分間を要し、その間被験体に対して、横臥し、心を空っぽにし、眼を開けて、起きているように指示する。１４のスライス（２ｍｍ間隔で８ｍｍ厚）に対応するデータを、下から上へと順々に連続して取得する。
【０３３０】
機能的ＭＲＩ（ｆＭＲＩ）．  アーカイバル作業／エピソード記憶刺激パラダイムを行い、血中酸素濃度依存性（ＢＯＬＤ）ｆＭＲＩを用いて、神経活動のパターン、特にアルツハイマー病において損なわれるより高次の認知機能と関連する、背外側前頭前皮質及び海馬での神経活動のパターンを測定する。
【０３３１】
技術的詳細：一連の３４のインターリーブ軸機能的スライスは、磁化率アーチファクトを低減するのに逆らせんパルス（inverse-spiral pulse）シークエンスを用いて、全脳範囲（coverage）（ＴＲ／ＴＥ／フリップ＝２０００／３１／６０；ＦＯＶ＝２４０ｍｍ；３．７５×３．７５×３．８ｍｍボクセル；スライス間スキップ＝０）で取得する。高解像度三次元スピンエコーコプラナー構造の画像は、正規化及び被験体の平均化のために、６８のアキシャルスライスで取得する（ＴＲ／ＴＥ／フリップ＝１２．２／５．３／２０、ボクセルサイズ＝１×１×１．９ｍｍ、ＦＯＶ＝２４０ｍｍ、スライス間スキップ＝０）。
【０３３２】
ｆＭＲＩ刺激パラダイム作業記憶；詳細に関しては、Mattay et al., PNAS 2003を参照されたい。エピソード記憶：詳細に関しては、Bookheimer et al. New England Journal of Medicine 2000を参照されたい。
【０３３３】
実施例１０
ラットＢＯＬＤ研究
低用量ピオグリタゾンが血液脳関門を通過し、脳生理学的な変化を誘導する。
【０３３４】
低用量のピオグリタゾンＨＣｌが、脳において機能的な又は分子的な変化を誘発するのに十分な濃度で血液脳関門を通過するか否かを決定した。ＢＯＬＤ  ｆＭＲＩを用いて、全脳にわたる安静状態の機能的連結性の薬物関連の変化を測定した。
【０３３５】
成体の雄ウィスターラット（２７５±２５ｇ）を別々に収容し、１２時間の明期、１２時間の暗期のスケジュールで維持した。食餌及び水は自由に与えた。動物は、実験動物の管理及び使用の指針（Guide for the Care and Use of Laboratory Animals）（National Institutes of Health Publications No. 85-23, Revised 1985）に公開されたガイドラインに準拠して管理した。動物の体重を、−３日目のおよそ２４時間前、研究の３日目及
び６日目に測定した。
【０３３６】
ピオグリタゾンＨＣｌ（ＰＩＯ）を０．５ｍｏｌ／Ｌのクエン酸（ＣＡ）に溶解し、０．３２ｍｇ／１０ｍＬ／ｋｇの濃度でストック溶液を得た。他の投与量は、０．５ｍｏｌ／ＬのＣＡでストック溶液を適当に希釈し、１０ｍＬ／ｋｇの用量体積を得ることにより調製した。対照ラットは、１０ｍＬ／ｋｇのビヒクルの投与を受けた。用量濃度は、供給された状態で（すなわちＨＣｌ塩として）被験体（test article）の体重ベースであり、用量は動物の直近の体重に合わせて調整した。ＰＩＯの溶液による１日の投与は、毎日ほぼ同じ時間の経口強制飼養によるものとした。投与を容易にするために、動物を直前にイソフルランで軽度麻酔にかけた。
【０３３７】
撮像研究に用いられる全ての動物を、先に記載されるように、少なくとも７日間、１５〜９０分間、ＭＲＩ保持装置に入れることによって、ＭＲＩ保持装置に馴化させた（Zhang et al. 2010 J Neurosci Methods 189: 186-196、Liang et al. 2011 J Neurosci 31: 3776-3783）。
【０３３８】
馴化期間の後、動物を平均体重に合わせて適合させた７つの処理群のうちの１群に割り当てた（第１表を参照されたい）。投与は１日１回、毎日ほぼ同じ時間に行った。全ての動物を、ベースライン（研究−３日目）でビヒクル投与のおよそ２．５〜３時間後に撮像した。投与は３日後に開始した（研究１日目）。この日に、全ての動物にそれらの群の割り当てに応じてビヒクル（ＣＡ）又はＰＩＯを投与した。研究２日目に、１つのビヒクル群と０．０８ｍｇ／ｋｇ／日のＰＩＯで治療した１つの群（急性群）とを、投与のおよそ２．５〜３時間後に撮像した。全ての群で、投与は全体で７日間継続した。研究７日目に、全てのラットを、最後の投与のおよそ２．５〜３時間後に撮像した。
【０３３９】
【表５】
2020176142.tif 000013
【０３４０】
ヒトにおける対応する投与量に対する外挿は、それぞれに対する相対ＡＵＣに合わせて調整しながら行った。ヒトでは、７．５ｍｇ用量は、２．８μｇ・ｈ／ｍＬのＡＵＣと関連する。ラットでは、０．５０ｍｇ／ｋｇ／日の用量のＰＩＯ  ＨＣｌは、７．１１μｇ・ｈ／ｍＬのＡＵＣと関連する。これらの計算の結果は第２表に与えられる。
【０３４１】
【表６】
2020176142.tif 000014
【０３４２】
撮像自体を投与のおよそ２．５〜３時間後に行うように、撮像に関係する動物準備行動を開始した。動物は、先に記載されるようにイソフルラン麻酔下において拘束具で位置決めの準備をした（Zhang et al. 2010（同上））。この手順はおよそ１０〜１５分間かけ、それまでに動物を通常完全に覚醒させた。撮像は覚醒動物において実施した。
【０３４３】
全てのＭＲ実験を、ＢｉｏｓｐｅｃＢｒｕｋｅｒコンソール（Bruker, Germany）に適合させ、２０Ｇ／ｃｍの磁場勾配を備える４．７Ｔ／４０ｃｍの水平磁石（Oxford, UK）を用いて実施した。水プロトンスピンを励起するボリュームコイル（volume coil）とＭＲＩシグナルを受け取る表面コイルとからなる二重１Ｈ無線周波数（ＲＦ）コイル構造（Insight NeuroImaging Systems, Worcester, MA）を使用した。ボリュームコイル及び表面コイルは、相互コイル結合を避けるために、能動的に同調及び非同調させた。この二重コイル構造は、より小さなレセプションコイルにより与えられるより高いシグナル対ノイズ比（ＳＮＲ）の利益を保ちながら、ラット脳においてＲＦ伝送に十分なＲＦ磁場均一性を可能にした。
【０３４４】
初めに解剖学的画像を、繰り返し時間（ＴＲ）＝２１２５ｍｓ、ＲＡＲＥファクター＝８、有効エコー時間（ＴＥ）＝５０ｍｓ、マトリックスサイズ＝２５６×２５６、視野（ＦＯＶ）＝３．２×３．２ｃｍ２、スライス数＝１８、スライス厚＝１ｍｍ、ｎ＝８というパラメータでマルチスライスファストスピンエコーシークエンス（ＲＡＲＥ）を用いて取得した。解剖学的画像の形状に基づき、全脳をカバーするマルチスライス勾配エコー画像を、ＴＲ＝１ｓ、フリップ角＝６０□、ＴＥ＝３０ｍｓ、マトリックスサイズ＝６４×６４、ＦＯＶ＝３．２×３．２ｃｍ２、スライス数＝１８、スライス厚＝１ｍｍというパラメータでエコープラナー撮像（ＥＰＩ）を用いて取得した。ラットは、画像取得の間は安静時にした。それぞれのランに対して２００ボリュームを取得し、それぞれのラットに対して９つのランを得た。
【０３４５】
全ｆＭＲＩデータの分析を、医用画像可視化／分析（Medical Image Visualization and Analysis）（ＭＩＶＡ）、統計的パラメトリックマッピング（ＳＰＭ８）ソフトウェア（Wellcome Department of Cognitive Neurology, London, UK）及びＭａｔｌａｂ（TheMathworks Inc., Natick, MA, USA）を用いて実施した。データを最初にモーション補正した（０．２５ｍｍの閾値）。データの更なる前処理は、（ａ）スライススキャン時間補正、（ｂ）動き及び血管作用によるシグナルの僅かな変動を説明するための３Ｄガウシアンフィルタ（１ｍｍ  ＦＷＨＭ）を用いた空間平滑化、並びに（ｃ）ラン間のスキャナドリフトに合わせて調整するためのボクセルワイズの線形トレンド除去及び周波数の高域フィルタリング（時間的経過に対して３サイクル）を含むものであった。次いで、それぞれの動物の構造的データ及び機能的データを、機能的データの群分析を容易にするために、ＭＩＶＡに組み込まれた標準的な定位空間に変換した。
【０３４６】
相関的な機能的連結性分析を用いて、安静状態の機能的連結性を分析した。初めに、それぞれの動物をアラインし、解剖学的画像に基づき完全にセグメント化したラット脳アトラスへと重ね合わせた（co-registered）。重ね合わせ手順によって、画像空間におけるそれぞれのシード関心領域（ＲＯＩ）の座標が得られる。重ね合わせ及びアラインメント後に、シードＲＯＩにおける個々のボクセルに関するｆＭＲＩ時間的経過が、それらの対応する座標に従って得られた。それぞれのシード領域に関する時間的経過は、シードＲＯＩ内の全てのピクセルからの時間的経過を局部的に平均化することにより作製した。全てのＲＯＩ時間的経過は、０．００２Ｈｚ〜０．０８Ｈｚバンドパスフィルタであった。フィルタリング後、ＲＯＩ時間的経過間のピアソン相互相関（ＣＣ）係数を計算し、機能的連結性の強度を定量化するのに使用した。
【０３４７】
全脳にわたる機能的連結性に対するＰＩＯの効果を評価するために、全ラット脳を５７個のＲＯＩに分割した。それぞれのＲＯＩ対の間の機能的連結性の強度を、２つのＲＯＩ時間的経過間の相互相関係数を用いて評価した。総計で５７×５６／２＝１５９６の機能的連結性をそれぞれのｒｓｆＭＲＩランで評価した。この手順をそれぞれのｆＭＲＩセッションの９つのラン全てで繰り返し、次いで対応する連結の連結性強度を、９つのランで平均化した。結果として、１５９６個の連結の連結性強度をそれぞれのｒｓｆＭＲＩスキャンセッションで得た。
【０３４８】
次いで、それぞれの連結（すなわちそれぞれのＲＯＩ対間の連結）に関して、撮像日、投与量及び相互作用という因子による反復測定ＡＮＯＶＡを計算した。統計的有意水準は、Ｐ＜０．００５（非補正）に設定した。
【０３４９】
個々の神経回路に対するＰＩＯの効果を評価するために、シードベースの相関分析を用いた（Zhang et al. 2010（同上））。海馬のＣＡ１をシードＲＯＩとして選択した。シードＲＯＩと機能的に結び付いた脳領域の空間パターンを、ボクセルごとに計算した。初めに、シードＲＯＩの局部的に平均化した時間的経過を参照として得た。次いで、それぞれのボクセルの時間的経過と参照時間的経過との相互相関係数を計算した。相関係数は、このボクセルとシードとの間の機能的連結性強度を表すものであった。シードＲＯＩに関する連結性地図を、それぞれのｆＭＲＩランに関して作製し、次いで９つのランにわたる地図を平均化して、それぞれのスキャンセッションに関する連結性地図を作製した。最後に、合成連結性地図を、プロトコルの同じ日に撮像した同じ群のラットにわたる連結性地図を平均化することによって作製した（Zhang et al. 2010（同上））。
【０３５０】
図１はｆＭＲＩデータの例を示すものであり、最も低用量の経口投与した即時放出型のピオグリタゾンであっても脳の深部の皮質下構造の中心領域において代謝の変化を生じることを実証している。これは、細胞内ミトコンドリア効果と一致するものである。
【０３５１】
結論
１．  ビヒクル対照に比べて、０．０４ｍｇ／ｋｇ／日という低い用量でのＰＩＯ治療がラットの複数の脳領域において変化を誘導するという形跡がある。この結果は、経口投与した低用量ＰＩＯが血液脳関門を通過することを示している。
２．  ０．０８ｍｇ／ｋｇ／日という低い用量のＰＩＯは、治療開始後の最も早い検査時点である２４時間という早い段階で機能的変化を誘導した。
【０３５２】
図１から分かるように、これらのデータの外観に基づき、０．３２ｍｇ／ｋｇ／日の投与量でシグナルが減衰すると考えられる。より低い投与量に比べてこの投与量で実際に効果の減衰が起こっているか否かを確認するために、更なる検査を行うが、これは動物被験体間の固有の生物学的変動性を単純に反映するものではない。
【０３５３】
実施例１１
例示的なリスク決定
ＴＯＭＭ４０  ｒｓ１０５４５２３（５２３）遺伝子型、年齢、及び場合によってはＡＰＯＥ遺伝子型に基づき、今後５年でアルツハイマー型（海馬型とも呼ばれる）の認知機能障害を発症するリスクが高い、認知力が正常な被験体を特定するために、Ｄｕｋｅ  Ｂｒｙａｎ  ＡＤＲＣ  Ｍｅｍｏｒｙ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ａｇｉｎｇ研究による４３８人の予め経過観察した個体コホートの発生年齢データを研究した。
【０３５４】
第３表は、５２３遺伝子型及びＡＰＯＥ遺伝子型及び年齢に基づく例示的なリスク分類を要約したものである。ＶＬ／ＶＬ、ＡＰＯＥ  ε３／ε３被験体のサブセットがアルツハイマー病の発生により５１歳〜５９歳で死亡すると考えられることに留意されたい。これらの被験体は、６２歳を超える認知力が正常なＶＬ／ＶＬ保因者の低リスクサブセットのみを表している第３表では検討されていない。より若齢の「高リスク」ＶＬ／ＶＬ  ＡＰＯＥ  ε３／ε３被験体を含む拡張型リスク分類も企図される。
【０３５５】
【表７】
2020176142.tif 000015
【０３５６】
これらの割り当ての使用例は単純なものである。第３表を用いて、以下のように個体の高リスク群又は低リスク群への割り当てを行う（民族性に関係するものではない）：
１）５２３遺伝子型が（Ｌ、Ｌ）又は（Ｌ、ＶＬ）である個体を高リスク群に割り当て
、
２）５２３遺伝子型が（ＶＬ、ＶＬ）（６２歳超）又はＡＰＯＥ遺伝子型が（ε２／ε
２）又は（ε２／ε３）の個体を低リスク群に割り当て、
３）５２３遺伝子型が（Ｓ、Ｓ）、（Ｓ、ＶＬ）又は（Ｓ、Ｌ）である個体に関しては、個体の現在の年齢を、リスク割り当てを行った表２の年齢と比較する。
【０３５７】
それぞれの５２３遺伝子型に関して、認知機能障害に対応する発生年齢曲線を調べ、曲線の傾きが５年の枠内での認知機能障害を発症するリスクが高いことを示す年齢を特定する。急な曲線部分は、比較的平坦な漸近線の後に続くものであり、認知機能障害の個体の割合の急増が観察される特徴的な時点（年齢）を含む（図２及び図３を参照されたい）。
【０３５８】
図３は、（Ｓ、Ｌ）の５２３遺伝子型に関して、高リスク分類と低リスク分類とを識別するのに用いられる年齢の決定を示すものである。急な曲線部分は、この遺伝子型を有する個体の９０％レベルが認知機能障害を呈しないことに関連する年齢に相当する約７４歳から開始すると特定することができる。そのため７４歳以上の個体は、本研究では高リスク群に割り当ていることができ、７４歳未満の個体は低リスク群に割り当てられる。残りの５２３遺伝子型に関する認知機能障害の例示的な発生年齢曲線は、図４〜図９で与えられ、これらは上記の第２表での割り当てに反映される。
【０３５９】
本明細書で提示されるグラフは、傾きの変化が起こる特定の年齢を表すものと解釈され、これらのグラフは、この方法の一般的教示から逸脱することなく、年齢指定を修正及び／又は最適化するために更なるデータが回収されれば、更新することができることが理解されたい。
【０３６０】
本明細書で引用される特許、特許文献、論文、要旨及び他の刊行物の開示は、それぞれが個々に援用されるように、引用することによりその全体が本明細書の一部をなすものとする。矛盾が生じる場合には、定義を含めて本明細書に従うものとする。本発明に対する様々な修正及び変更は、本発明の範囲及び趣旨から逸脱することなく当業者にとって明らかになるであろう。説明的な実施形態及び実施例は、例示としてのみ与えられ、本発明の範囲を限定する意図はない。本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される。
【図１】
2020176142.tif 000016
【図２】
2020176142.tif 000017
【図３】
2020176142.tif 000018
【図４】
2020176142.tif 000019
【図５】
2020176142.tif 000020
【図６】
2020176142.tif 000021
【図７】
2020176142.tif 000022
【図８】
2020176142.tif 000023
【図９】
2020176142.tif 000024
【手続補正書】
【提出日】令和2年9月2日(2020.9.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルツハイマー型の認知機能障害の治療における使用のための低用量ピオグリタゾンを含む組成物。
【請求項２】
前記治療がアルツハイマー型の認知機能障害の発生の遅延を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記遅延がエピソード記憶機能障害の発生の遅延を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記治療が今後５年〜７年以内にアルツハイマー型の認知機能障害を発症するリスクが増大しているヒト被験体においてアルツハイマー型の認知機能障害の発生を遅延させることを含み、該リスクは該被験体の年齢及びｒｓ１０５２４５２３遺伝子型に基づくものである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記遺伝子型の対立遺伝子が、
（ａ）短鎖（Ｓ、１９個未満のＴ残基）、
（ｂ）長鎖（Ｌ、１９個〜２９個の残基）、又は、
（ｃ）超長鎖（ＶＬ、３０個以上の残基）
を含み、
（１）６２歳超で、かつＬ、Ｌ又はＬ、ＶＬ遺伝子型が投与を示し、
（２）６２歳超で、かつＶＬ、ＶＬ遺伝子型が投与を示さず、
（３）７４歳超で、かつＳ、Ｌ遺伝子型が投与を示し、
（４）７６歳超で、かつＳ、ＶＬ遺伝子型が投与を示し、
（５）７７歳超で、かつＳ、Ｓ遺伝子型が投与を示す、
請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記低用量ピオグリタゾンが単位剤形で投与され、前記単位剤形が０．５ｍｇ〜９ｍｇのピオグリタゾンを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
前記低用量ピオグリタゾンが単位剤形で投与され、前記単位剤形が０．５ｍｇ〜６ｍｇのピオグリタゾンを含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物が、錠剤、カプセル剤、カプレット、液体、半固体、または固体である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記ピオグリタゾンが約０．１５μｇ・ｈ／ｍＬ〜約３．６μｇ・ｈ／ｍＬのＡＵＣを与える投与量で投与される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物が、１日１回の投与のためのものである、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物。