(57)【要約】  【課題】白斑や白髪を予防又は改善することができる物質を提供する。  【解決手段】エタノールアミン系の抗ヒスタミン薬又は抗コリン薬、オキシブプロカイン又はその塩、ベタキソロール又はその塩及びベクロメタゾンプロピオン酸エステルよりなる群から選ばれる１種以上の薬剤を有効成分とする白斑又は白髪の予防又は改善剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
エタノールアミン系の抗ヒスタミン薬又は抗コリン薬、オキシブプロカイン又はその塩、ベタキソロール又はその塩及びベクロメタゾンプロピオン酸エステルよりなる群から選ばれる１種以上の薬剤を有効成分とする白斑又は白髪の予防又は改善剤。
【請求項２】
エタノールアミン系の抗ヒスタミン薬又は抗コリン薬が、ジフェンヒドラミン又はその塩、ドキシラミン又はその塩、カルビノキサミン又はその塩、シクロペントラート又はその塩、及びオルフェナドリン又はその塩から選ばれる１種以上である請求項１記載の白斑又は白髪の予防又は改善剤。
【請求項３】
薬剤が、ジフェンヒドラミン塩酸塩、シクロペントラート塩酸塩、オキシブプロカイン塩酸塩、ベタキソロール塩酸塩及びベクロメタゾンプロピオン酸エステルから選ばれる１種以上である請求項１又は２記載の白斑又は白髪の予防又は改善剤。
【請求項４】
前記白斑が化学物質誘導性白斑である、請求項１〜３のいずれか１項記載の白斑又は白髪の予防又は改善剤。
【請求項５】
前記化学物質がロドデンドロール又はモノベンゾンである、請求項４記載の白斑又は白髪の予防又は改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、白斑又は白髪の予防又は改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
白斑は、メラノサイトが減少又は消失することによって、皮膚が脱色する疾患である。白斑をもたらす因子としては、免疫異常、酸化ストレス、化学物質などがある。白斑を誘導する化学物質としては、白斑患者の皮膚の色むら軽減に使用されているモノベンゾンの他、ロドデンドロール（ロドデノール）が知られている。一方で、これらの因子が白斑におけるメラノサイトの減少又は消失を引き起こす詳しい機序は明らかにされていない。
【０００３】
従来、白斑の治療には、副腎皮質ステロイド外用薬が最も汎用されており、その他、活性型ビタミンＤ３外用薬、タクロリムス軟膏等の薬物や、紫外線療法が使用されている。ロドデンドロール誘導性の白斑に対しても同様の治療が試みられているが、その効果については、例えばステロイド外用薬を処方された患者のうち効果があったのは４割程度であったことが報告されており、十分とは言い難い。特許文献１には、オスモライト又はそれらの前駆体及び誘導体の群からの１種もしくはそれ以上の化合物を含む活性成分が、老化皮膚の恒常性逸脱を非常に特別に改良し、水に対する表皮障壁を維持するために絶えず再生されなければならない脂質及び蛋白質の皮膚自身による代謝を刺激すること、該活性成分の局所適用により白斑を含む様々な皮膚症状を処置及び予防できることが記載されている。しかし、当該活性成分に実際それらの生理効果があることは、特許文献１では報告されていない。
【０００４】
一方、特許文献２〜３には、ラノスタン型トリテルペノイド誘導体又は植物抽出物が、メラノサイトのアポトーシスを抑制し、白斑や白髪の予防又は改善に使用できることが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特表２００４−５３６８３８号公報
【特許文献２】特開２００５−０６８０６１号公報
【特許文献３】特開２００２−０８０３８２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、白斑や白髪を予防又は改善することができる物質を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、医薬品として使用されている物質の中に、ロドデンドロール又はモノベンゾンにより引き起こされるメラノサイトの細胞生存率の低下を抑制し、メラノサイトの減少によりもたらされる白斑や白髪を予防又は改善できる化合物があることを見出した。
【０００８】
すなわち、本発明は、エタノールアミン系の抗ヒスタミン薬又は抗コリン薬、オキシブプロカイン又はその塩、ベタキソロール又はその塩及びベクロメタゾンプロピオン酸エステルよりなる群から選ばれる１種以上の薬剤を有効成分とする白斑又は白髪の予防又は改善剤、に係るものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、化学物質等の白斑をもたらす因子によるメラノサイトの傷害又は死滅を抑制する作用を有し、白斑や白髪の予防又は改善が可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】モノベンゾン存在下でのメラノサイトの細胞生存率に対する試験物質の影響。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明において、エタノールアミン系の抗ヒスタミン薬又は抗コリン薬とは、分子内にエトキシアミノ構造を有する抗ヒスタミン薬又は抗コリン薬を意味し、抗ヒスタミン薬としては、以下に示す、ジフェンヒドラミン（ＣＡＳ：５８−７３−１）、ドキシラミン（ＣＡＳ：４６９−２１−６）、カルビノキサミン（ＣＡＳ：４８６−１６−８）等が挙げられ、抗コリン薬としては、シクロペントラート（ＣＡＳ：５１２−１５−２）、オルフェナドリン（ＣＡＳ：８３−９８−７）等が挙げられる。
【００１２】
【化１】
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【００１３】
これらの抗ヒスタミン薬又は抗コリン薬は、遊離塩基そのままでも良いが、塩酸、クエン酸、コハク酸、サリチル酸、ジフェニルジスルホン酸、酒石酸、タンニン酸、テオクル酸、ラウリル硫酸、硫酸、パモ酸、ヒベンズ酸、マレイン酸等の酸付加塩であっても良い。
ジフェンヒドラミンは、ジフェンヒドラミン塩酸塩、ジフェンヒドラミンクエン酸塩、ジフェンヒドラミンタンニン酸塩、ジフェンヒドラミンテオクル酸塩（ジメンヒドリナート、ＣＡＳ：５２３−８７−５）が好ましく、より好ましくはジフェンヒドラミン塩酸塩、ジメンヒドリナートである。
ドキシラミンはドキシラミンコハク酸塩が好ましく、カルビノキサミンはカルビノキサミンマレイン酸塩が好ましい。
シクロペントラートはシクロペントラート塩酸塩、オルフェナドリンはオルフェナドリンクエン塩酸塩が好ましい。
【００１４】
エタノールアミン系の抗ヒスタミン薬又は抗コリン薬のうち、メラノサイトの細胞生存率低下抑制の点から、好ましくは、ジフェンヒドラミン塩酸塩、シクロペントラート塩酸塩である。
【００１５】
また、オキシブプロカイン（ＣＡＳ：９９−４３−４）は、下記の構造を有し、局所麻酔薬として使用されている薬剤である。オキシブプロカインの塩としては塩酸塩が好ましい。
【００１６】
【化２】
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【００１７】
ベタキソロール（ＣＡＳ：６３６５９−１８−７）は下記の構造を有し、β１遮断薬として使用されている薬剤である。ベタキソロールの塩としては塩酸塩が好ましい。
【００１８】
【化３】
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【００１９】
ベクロメタゾンプロピオン酸エステル（ＣＡＳ：５５３４−０９−８）は下記の構造を有し、抗炎症薬として使用されている薬剤である。
【００２０】
【化４】
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【００２１】
上記薬剤は、いずれも公知化合物であり、周知の方法により製造すること、或いは市販品を購入することにより入手することが可能である。
【００２２】
上述した本発明の薬剤は、後記実施例に示すように、ロドデンドロール又はモノベンゾン存在下でのメラノサイトの細胞生存率の低下を抑制する作用を有する。メラノサイトの生存率が改善されれば、メラノサイトの減少又は消失が抑えられ、ひいては白斑や白髪の発症を予防し又はそれらを改善することができる。
したがって、本発明の薬剤は、白斑又は白髪の予防又は改善剤となり得る。
【００２３】
白斑や白髪におけるメラノサイトの傷害又は死滅は、生体内で生成する活性酸素やラジカル等による酸化ストレスによるメラノサイトの傷害又は死滅であり、該酸化ストレスを誘導する要因としては、化学物質への暴露や紫外線の照射が挙げられる。特に、本発明において、白斑におけるメラノサイトの傷害又は死滅は、化学物質誘導性の傷害又は死滅である。該化学物質としては、例えばロドデンドロールやヒドロキノンのモノベンジルエーテルであるモノベンゾンなどが挙げられる。よって、本発明における白斑の予防又は改善は、ロドデンドロール又はモノベンゾン誘導性の白斑の予防又は改善であり、例えば、ロドデンドロール又はモノベンゾン誘導性の白斑の発生を抑制する、ロドデンドロール又はモノベンゾン誘導性の白斑が生じた皮膚の色を改善する、あるいはロドデンドロール又はモノベンゾンの適用によって生じた白斑や過剰な皮膚の脱色を軽減するものである。
【００２４】
本発明の白斑又は白髪の予防又は改善剤は、ヒトを含む動物に摂取又は投与した場合に、白斑又は白髪の予防又は改善効果を発揮する医薬品、医薬部外品、化粧品となり、或いはこれらへ配合するための素材又は製剤となり得る。当該医薬品、医薬部外品、化粧品には、メラノサイトの傷害又は死滅の抑制或いは白斑や白髪の予防又は改善のための他の有効成分、例えばアポトーシス抑制剤、メラニン産生促進剤などが含有されていてもよい。
【００２５】
本発明の薬剤を含む上記医薬品（医薬部外品を含む）の投与形態は任意であり、経口投与及び非経口投与の何れであってもよい。経口投与のための剤型としては、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤のような固形製剤、ならびにエリキシル、シロップ、懸濁液のような液体製剤が挙げられる。非経口投与のための剤型としては、皮膚外用、経皮、経粘膜、経鼻、経腸、注射、坐剤、注射、吸入、貼付等の各製剤が挙げられる。このうち、好適な製剤形態は皮膚外用剤であり、具体的には、軟膏、乳化液、クリーム、乳液、ローション、ジェル、エアゾール等の形態が挙げられる。
【００２６】
本発明の薬剤を含む化粧品の好ましい例としては、顔又はボディ用の洗浄料、頭部（頭髪又は頭皮）用の洗浄料（例えばシャンプー、リンス、コンディショナーなど）、顔、ボディ、又は頭部用の化粧料（例えば、ローション、ゲル、クリーム、パックなど）、メークアップ用化粧料、ヘアカラー又は白髪染め、などが挙げられる。
【００２７】
斯かる医薬品（医薬部外品を含む）や化粧品の各製剤は、本発明の薬剤を、必要に応じて薬学的に又は化粧品に許容される担体、上述した他の有効成分、その他の薬効成分もしくは化粧成分等と組みあわせて、常法に従って製造することができる。当該薬学的に又は化粧料に許容される担体としては、例えば、各種油剤、界面活性剤、ゲル化剤、緩衝剤、防腐剤、酸化防止剤、溶剤、分散剤、キレート剤、増粘剤、紫外線吸収剤、乳化安定剤、ｐＨ調整剤、色素、香料等が挙げられる。当該その他の薬効成分もしくは化粧成分としては、例えば、植物抽出物、殺菌剤、保湿剤、抗炎症剤、抗菌剤、角質溶解剤、清涼剤、抗脂漏剤、洗浄剤、メークアップ成分等が挙げられる。
【００２８】
上記の医薬品（医薬部外品を含む）や化粧品中の本発明の薬剤の含有量は、投与に用いる剤の形態に応じて異なるため一概には言えないが、例えば皮膚外用に用いる剤及び組成物であれば、０．００１質量％以上が好ましく、より好ましくは０．００５質量％以上であり、さらに好ましくは０．０１質量％以上であり、かつ、５０質量％以下が好ましく、より好ましくは２０質量％以下であり、さらに好ましくは１０質量％以下である。あるいは、本発明の皮膚外用剤における薬剤の含有量は、０．００１〜５０質量％が好ましく、より好ましくは０．００５〜２０質量％であり、さらに好ましくは０．０１〜１０質量％である。なお、有効成分が塩の形態である場合、その含有量は、対応する遊離体の含有量に換算するものとする。
【００２９】
本発明の白斑又は白髪の予防又は改善剤を適用する対象としては、メラノサイトのアポトーシス抑制、白斑の予防又は改善、あるいは白髪の予防又は改善を所望するヒト及び非ヒト動物が挙げられる。非ヒト動物としては、非ヒト哺乳動物などが挙げられ、非ヒト哺乳動物としては、例えば、類人猿、その他霊長類、マウス、ラット、ハムスター、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ、およびコンパニオン動物などが挙げられる。
【００３０】
本発明の白斑又は白髪の予防又は改善剤は、治療目的で使用されてもよく、又は非治療目的で使用されてもよい。治療目的での使用の例としては、白斑患者に対する使用が挙げられる。非治療目的での使用の例としては、美容目的での白斑や白髪の予防又は軽減のための使用が挙げられる。
【実施例】
【００３１】
以下、実施例により本発明を具体的に説明する。
実施例１  ロドデンドロールによる細胞生存率低下に対する抑制効果
市販のヒト表皮由来正常メラノサイトを、Ｈｕｍａｎ  Ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ（ＨＭＧＳ；Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を含有するＭＣＤＢ１５３ＨＡＡ培地に２．０×１０5ｃｅｌｌｓ／ｍＬで懸濁し、９６穴カルチャープレートに０．１ｍＬ／ｗｅｌｌで播種した。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で１日間培養したのち、ロドデンドロール（東京化成工業社）及び試験物質を培地に添加した。２４時間後、細胞生存率を評価し、ロドデンドロールによって引き起こされる細胞傷害を、試験物質添加が抑制した程度を計算した。
ロドデンドロールは培地にて終濃度が１ｍＭとなるように希釈して使用した（約９０％の細胞傷害誘導）。試験物質には以下の化合物を用い、培地にて終濃度が０．０３、および０．１ｍＭとなるように希釈して使用した：ジフェンヒドラミン塩酸塩（Diphenhydramine hydrochloride、シグマアルドリッチ社）、シクロペントラート塩酸塩（Cyclopentolate hydrochloride、シグマアルドリッチ社）、カルビノキサミンマレイン酸塩（Carbinoxamine maleate、シグマアルドリッチ社）、オルフェナドリンクエン酸塩（Orphenadrine citrate、シグマアルドリッチ社）、ドキシラミンコハク酸塩（Doxylamine succinate、シグマアルドリッチ社）、オキシブプロカイン塩酸塩（Benoxinate hydrochloride、シグマアルドリッチ社）、ベタキソロール塩酸塩（Betaxolol hydrochloride、シグマアルドリッチ社）、ベクロメタゾンプロピオン酸エステル（Beclomethasone dipropionate、シグマアルドリッチ社）。
細胞生存率の測定は、ＷＳＴ−８法により行った。すなわち、Ｈｅｐｅｓバッファーで細胞を１回洗浄した後、１０分の１量のＣｅｌｌ  ｃｏｕｎｔ  ｒｅａｇｅｎｔ  ＳＦ（Ｎａｃａｌａｉ  ｔｅｓｑｕｅ社）を混合したＨｅｐｅｓバッファーを０．１ｍL／ｗｅｌｌとなるよう加え、３７℃下で１時間インキュベートした。得られた反応液における吸光度（４５０ｎｍ）をプレートリーダーで測定した。
細胞傷害の抑制程度は、ロドデンドロールのみを添加し試験物質を添加しない時の、無添加に対する細胞生存率の低下を基準とし、その低下に対する回復率として算出した。すなわち、ロドデンドロールによる細胞傷害から完全に回復した場合、１００%の回復率となり、逆に傷害が増強された場合、回復率は負の値となる。結果を表１に示す。
【００３２】
【表１】
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【００３３】
ジフェンヒドラミン塩酸塩（０．０３，０．１ｍＭ）、シクロペントラート塩酸塩（０．０３，０．１ｍＭ）、カルビノキサミンマレイン酸塩（０．０３，０．１ｍＭ）、オルフェナドリンクエン酸塩（０．１ｍＭ）、ドキシラミンコハク酸塩（０．１ｍＭ）、オキシブプロカイン塩酸塩（０．１ｍＭ）、ベタキソロール塩酸塩（０．０３ｍＭ）、ベクロメタゾンプロピオン酸エステル（０．０３，０．１ｍＭ）について、ロドデンドロール添加による細胞生存率の低下に対する回復の効果が明らかに観察された。これらの結果から、ロドデンドロールによるメラノサイトの傷害や減少が試験物質により抑制されたことが示された。
【００３４】
実施例２  モノベンゾン（Monobenzylether of hydroquinone）による細胞生存率低下に対する抑制効果
市販のヒト表皮由来正常メラノサイトを、Ｈｕｍａｎ  Ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ（ＨＭＧＳ；Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を含有するＭＣＤＢ１５３ＨＡＡ培地に２．０×１０5ｃｅｌｌｓ／ｍＬで懸濁し、９６穴カルチャープレートに０．１ｍＬ／ｗｅｌｌで播種した。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で２日間培養したのち、各０．１ｍＭのモノベンゾン（Monobenzylether of hydroquinone, シグマアルドリッチ社) （８５〜９０％の細胞傷害誘導）、及び異なる濃度の試験物質を培地に添加した。２４時間後、細胞生存率を評価し、モノベンゾンによって引き起こされる細胞傷害を、試験物質添加が抑制した程度を計算した（ｎ＝３）。
細胞生存率の評価、および細胞傷害の程度（回復率）の算出は実施例１と同様に行った。結果を図１に示す。
【００３５】
ジフェンヒドラミン塩酸塩（０．０１，０．０３ｍＭ）、シクロペントラート塩酸塩（０．０３，０．１，０．３ｍＭ）、ベタキソロール塩酸塩（０．１ｍＭ）、オキシブプロカイン塩酸塩（０．０１，０．０３，０．１ｍＭ）について、モノベンゾン添加による細胞生存率の低下に対する回復の効果が明らかに観察された。これらの結果から、モノベンゾンによるメラノサイトの傷害や減少が試験物質により抑制されたことが示された。
【図１】
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