(57)【要約】【課題】ＧＬＰ−１の分泌をより促進することのできる、また、ＧＩＰの上昇をより抑制することのできる経口組成物、方法及び製剤の提供。【解決手段】（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び５ｇ以上の（Ｃ）脂質を略同時に摂取させる方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び５ｇ以上の（Ｃ）脂質を略同時に摂取させる方法（ヒトに対する医療行為を除く）。
【請求項２】
（Ａ）クロロゲン酸類を９０ｍｇ以上の量で摂取させる請求項１記載の方法。
【請求項３】
（Ｃ）脂質が、直鎖又は分岐鎖の炭素数２〜２２の飽和脂肪酸又は不飽和脂肪酸で構成される単純脂質である請求項１又は２記載の方法。
【請求項４】
（Ｃ）リパーゼ阻害剤が、カテキン類、難消化性デキストリン、ウーロン茶重合ポリフェノール及びグロビン蛋白分解物から選ばれる１種又は２種以上である請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
カテキン類を１００ｍｇ以上の量で摂取させる請求項４記載の方法。
【請求項６】
（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び（Ｃ）脂質を含む経口組成物であって、組成物中の（Ｃ）脂質量が５ｇ以上である経口組成物。
【請求項７】
（Ａ）クロロゲン酸類を９０ｍｇ以上含む請求項６記載の経口組成物。
【請求項８】
（Ｃ）脂質が、直鎖又は分岐鎖の炭素数２〜２２の飽和脂肪酸又は不飽和脂肪酸で構成される単純脂質である請求項６又は７記載の経口組成物。
【請求項９】
（Ｃ）リパーゼ阻害剤が、カテキン類、難消化性デキストリン、ウーロン茶重合ポリフェノール及びグロビン蛋白分解物から選ばれる１種又は２種以上である請求項６〜８のいずれか１項記載の経口組成物。
【請求項１０】
カテキン類を１００ｍｇ以上含む請求項９記載の経口組成物。
【請求項１１】
（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び（Ｃ）脂質を有効成分とするＧＬＰ−１分泌促進剤。
【請求項１２】
（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び（Ｃ）脂質を有効成分とするＧＩＰ上昇抑制剤。
【請求項１３】
（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び（Ｃ）脂質を有効成分とする血糖改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＧＬＰ−１の分泌促進作用及びＧＩＰの上昇抑制作用を発揮する素材に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病とは、インスリン作用不足によって慢性的な高血糖状態を主徴とする代謝疾患群のことである。人間の活動のエネルギー源であるブドウ糖は、本来であれば血液中で一定の濃度範囲に保たれるように、膵β細胞で生成・分泌されるインスリンによって調節されている。２型糖尿病は、インスリン分泌低下やインスリン抵抗性をきたす素因を含む複数の遺伝因子に、過食（とくに高脂肪食）、運動不足、肥満、ストレスなどの環境因子及び加齢が加わり発症する（非特許文献１）。
【０００３】
近年、特に２型糖尿病を対象に、インクレチン（Intestine Secretion Insulin）を標的とした糖尿病治療薬の開発が進められている。インクレチンは栄養素の摂取に伴って消化管から分泌され、膵β細胞に作用してインスリン分泌を促進するホルモンの総称である。２つの消化管ホルモン、ＧＬＰ−１（glucagon-like peptide-1）とＧＩＰ（glucose-dependent insulinotropic polypeptide）がインクレチン作用を担うホルモンとして知られている。ＧＬＰ−１は主に小腸下部や結腸に存在するＬ細胞から、ＧＩＰは小腸上部の十二指腸に多く存在するＫ細胞から分泌される。
【０００４】
消化管内への栄養素の流入、刺激を受けて分泌されたインクレチンは、血糖値の上昇とともに膵β細胞からのインスリン分泌を増加させ、膵α細胞からのグルカゴン分泌を抑制し、血糖低下に働く。一方、血糖値が低い状態ではインスリン分泌は減少し、グルカゴン分泌等が増加して血糖値は上昇する。２つのインクレチンのうち、ＧＬＰ−１は膵α細胞からのグルカゴン分泌抑制の作用を有している。また、臨床試験において、ＧＬＰ−１は２型糖尿病患者のインスリン分泌を促す一方で、ＧＩＰはインスリン分泌を促進しないことが示され、ＧＬＰ−１は、２型糖尿病患者の血糖改善に有用であると考えられている。
また、膵臓以外の組織では、ＧＬＰ−１とＧＩＰは異なる生理作用を有している。
ＧＬＰ−１の膵外作用としては、肝・筋での糖取り込み増加、インスリン抵抗性改善、中枢神経系での食欲抑制、消化管における胃排泄遅延等が報告されている（非特許文献２〜４）。これより、ＧＬＰ−１の効果を高めることは血糖調節に有利に働くと同時に肥満の改善につながる可能性が考えられる。
それに対し、ＧＩＰは、脂肪組織における糖質や脂質の取り込み亢進、インスリン感受性低下、胃酸分泌抑制、胃運動抑制等の作用を有することが報告されている（非特許文献３、５）。さらに、ＧＩＰ受容体の欠損マウスは野生型マウスと比較して、エネルギー代謝が亢進することが示されている（非特許文献６）。エネルギー代謝が低下すると、疲労が取れにくくなることも知られている。
そのため、肥満や糖尿病等の改善を目的とすれば、ＧＬＰ−１の作用は増強、ＧＩＰの作用は減弱されることが望ましいと考えられる。
【０００５】
しかしながら、ＧＬＰ−１はポリペプチドであるため、投与しても生体内の酵素、ＤＰＰ−４（dipeptidyl peptidase-4）により不活性化され、半減期は数分と極めて短いためその血中濃度を一定に保つのは非常に困難である。従って、生体内でのＧＬＰ−１濃度を長時間にわたって高めるためには、体外からの投与よりも内因性ＧＬＰ−１の分泌を促進することが望ましい。
これまでの研究では、ＧＬＰ−１の分泌を促進する物質として、パルミチン酸やオレイン酸等の脂肪酸（非特許文献７〜１０）、グルコース（非特許文献１１〜１２）、Ｄ−アルロース（非特許文献１３）、肉加水分解物、ガストリン放出ペプチド、カルバコール、フォルスコリン、イオノマイシン、酢酸ミリスチン酸ホルボール、必須アミノ酸、ロイシン、イソロイシン、スキムミルク、カゼイン、レプチン、ムスカリン性受容体Ｍ１およびＭ２、キラヤ、リゾホスファチジルイノシトール、マジョラム、カワラヨモギ、フェルラ酸、ユッカ、糖セラミド、βカロチン、植物ステロール、ビート、菊花、パプリカ、オレンジ、高麗人参、ビワ茶等が報告されている。
【０００６】
一方、特許出願人は、カテキン類やクロロゲン酸類にＧＬＰ−１の分泌を促進する作用及びＧＩＰ上昇抑制作用があることを見出している（特許文献１、２、非特許文献１４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１５−８３５４８号公報
【特許文献２】特開２０１０−２６０８５６号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】日本糖尿病学会. 糖尿病治療ガイド2018-2019. P.10-11
【非特許文献２】Baggio, Laurie L., and Daniel J. Drucker., Gastroenterology 132.6, 2007, 2131-2157
【非特許文献３】Seino, Yutaka, Mitsuo Fukushima, and Daisuke Yabe., Journal of diabetes investigation 1.1‐2, 2010, 8-23
【非特許文献４】Eur J Pharmacol, 440(2-3), 2002, 269-279
【非特許文献５】Chen, Shu, et al., American Journal of Physiology-Endocrinology and Metabolism 308.5, 2015, E414-E425
【非特許文献６】Miyawaki K et al., Nat Med. 8(7), 2002 Jun, 738-742
【非特許文献７】Li Y, Kokrashvili Z, Mosinger B, Margolskee RF., Am J Physiol Endocrinol Metab. 304(6), 2013, E651-60
【非特許文献８】Hirasawa, Akira, et al., Nature medicine 11.1, 2005, 90
【非特許文献９】Iakoubov, Roman, et al., Endocrinology 148.3, 2007, 1089-1098
【非特許文献１０】Kaji, Izumi, Shin-ichiro Karaki, and Atsukazu Kuwahara., Digestion 89.1, 2014, 31-36
【非特許文献１１】Ritzel, U., et al., Acta diabetologica 34.1, 1997, 18-21
【非特許文献１２】Kong, Marie-France, et al., Peptides 20.5, 1999, 545-551
【非特許文献１３】Iwasaki, Yusaku, et al., Nature communications 9.1, 2018, 113-129
【非特許文献１４】Jokura, Hiroko, et al., Nutrition research 35.10, 2015, 873-881
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、ＧＬＰ−１の分泌をより促進することのできる、また、ＧＩＰの上昇をより抑制することのできる経口組成物及び方法を提供することに関する。また、本発明は、医薬品、食品等に利用することのできるＧＬＰ−１分泌促進剤及びＧＩＰ上昇抑制剤を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
脂質の摂りすぎは肥満やメタボリックシンドローム、糖尿病、さらに冠動脈性心疾患などのリスクを高めることが示されており、食生活において注意する必要があると考えられている。よって、一般的には脂質を積極的に摂取することで健康に有益な効果が得られるとは考えにくいが、本発明者は、鋭意検討したところ、クロロゲン酸類とカテキン類を組み合わせて経口摂取する際には、更に脂質を併用して摂取することによってＧＬＰ−１分泌がより増加し、また、ＧＩＰ上昇の抑制がより向上することを見出した。このＧＬＰ−１分泌の増加とＧＩＰ上昇抑制の向上には、カテキン類のリパーゼ阻害作用が寄与しているものと推測される。
【００１１】
すなわち、本発明は、以下の１）〜５）に係るものである。
１）（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び５ｇ以上の（Ｃ）脂質を略同時に摂取させる方法（ヒトに対する医療行為を除く）。
２）（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び（Ｃ）脂質を含む経口組成物であって、組成物中の（Ｃ）脂質量が５ｇ以上である経口組成物。
３）（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び（Ｃ）脂質を有効成分とするＧＬＰ−１分泌促進剤。
４）（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び（Ｃ）脂質を有効成分とするＧＩＰ上昇抑制剤。
５）（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び（Ｃ）脂質を有効成分とする血糖改善剤。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、効果的に、ＧＬＰ−１の分泌を促進することができ、また、ＧＩＰの上昇を抑制することができる。従って、このＧＬＰ−１分泌促進等の作用を介して、血糖改善を図ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】試験食摂取後２４０分までの血中ＧＬＰ−１濃度の曲線下面積。
【図２】試験食摂取前後の血中ＧＩＰ濃度推移。
【図３】試験食摂取後の最高血中ＧＩＰ濃度。
【図４】試験食摂取後２５５分までの血中ＧＬＰ−１濃度の曲線下面積。
【図５】試験食摂取後２５５分までの血中ＧＩＰ濃度の曲線下面積。
【図６】試験食摂取後２４０分までの血中ＧＬＰ−１濃度の曲線下面積。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
〔摂取させる方法〕
一実施形態において、本発明は、（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び５ｇ以上の（Ｃ）脂質を略同時に摂取させる方法を提供する。
【００１５】
本明細書において「クロロゲン酸類」とは、３−カフェオイルキナ酸、４−カフェオイルキナ酸及び５−カフェオイルキナ酸のモノカフェオイルキナ酸と、３−フェルロイルキナ酸、４−フェルロイルキナ酸及び５−フェルロイルキナ酸のモノフェルロイルキナ酸を併せての総称である。本発明においては上記６種のうち少なくとも１種を含有すればよい。クロロゲン酸類には、立体異性体が存在し、本発明では、それらの純粋な立体異性体又はそれらの立体異性体の混合物を用いることができる。
本明細書において、（Ａ）クロロゲン酸類の摂取量及び含有量は上記６種の合計量に基づいて定義される。なお、クロロゲン酸類が塩又は水和物である場合、クロロゲン酸類の摂取量及び含有量は、遊離酸であるクロロゲン酸類に換算した値とする。クロロゲン酸類の分析は、例えば、通常知られている測定法のうち測定試料の状況に適した分析法により測定することができる。
【００１６】
（Ａ）クロロゲン酸類は遊離の形態でもよく、塩や水和物の形態でもよい。塩にすることにより水溶性を向上させ、生理学的有効性を増大させることができる。クロロゲン酸類の塩としては、薬学的に許容される塩であればよい。このような塩形成用の塩基物質としては、例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属の水酸化物；水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム等のアルカリ土類金属の水酸化物；水酸化アンモニウム等の無機塩基；アルギニン、リジン、ヒスチジン、オルニチン等の塩基性アミノ酸；モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン等の有機塩基が用いられる。このうち、アルカリ金属又はアルカリ土類金属の水酸化物が好ましい。
【００１７】
（Ａ）クロロゲン酸類は、これを含有する天然物、特に植物から抽出することができ、化学合成により工業的に製造することもできる。本発明では、クロロゲン酸類を含む植物の抽出物を（Ａ）クロロゲン酸類として用いることもできる。例えば、後述するようなコーヒー豆、リンゴ、ヒマワリ種子等の抽出物を（Ａ）クロロゲン酸類として用いることができる。
クロロゲン酸類を含有する植物の例としては、コーヒー豆、キャベツ、レタス、アーチチョーク、トマト、ナス、ジャガイモ、ニンジン、リンゴ、ナシ、プラム、モモ、アプリコット、チェリー、ヒマワリ種子、モロヘイヤ、カンショ、南天の葉、ブルーベリー、小麦等が挙げられる。なかでも、クロロゲン酸類の含有量等の観点から、コーヒー豆が好ましい。コーヒー豆の豆種及び産地は、特に限定されない。
コーヒー豆は、生コーヒー豆でも、焙煎コーヒー豆でもよく、これらを併用することもできる。焙煎コーヒー豆は、クロロゲン酸類の含有量の観点から、浅焙煎コーヒー豆であることが好ましい。浅焙煎コーヒー豆のＬ値は、クロロゲン酸類含量等の観点から、２７以上が好ましく、２９以上がより好ましく、３５以上が更に好ましく、４０以上が更に好ましく、また、風味の観点から、６２未満が好ましく、６０以下がより好ましく、５５以下が更に好ましい。ここで、本明細書において「Ｌ値」とは、黒をＬ値０とし、また白をＬ値１００として、焙煎コーヒー豆の明度を粉砕後に色差計（例えば、スペクトロフォトメーター  ＳＥ２０００、（株）日本電色社製）で測定したものである。
抽出方法及び抽出条件は、適宜選択することができ、例えば、水や熱水、水溶性有機溶媒を用いて、バッチ抽出、ドリップ抽出、カラム抽出等の公知の方法により行うことができる。水溶性有機溶媒としては、例えば、エタノール等の低級アルコールが挙げられる。抽出方法は、例えば、特開昭５８−１３８３４７号公報、特開昭５９−５１７６３号公報、特開昭６２−１１１６７１号公報、特開平５−２３６９１８号公報に記載の方法等を採用することができる。抽出に付されるコーヒー豆は、未粉砕のものでも、粉砕したものでもよい。
抽出後、得られた抽出液は、常圧濃縮、減圧濃縮、膜濃縮等の公知の手段により濃縮してもよく、また、抽出液や濃縮液を精製してもよい。乾燥は、噴霧乾燥、凍結乾燥等の公知の手段により行うことができる。
【００１８】
本発明の方法における（Ａ）クロロゲン酸類の摂取量は、ＧＬＰ−１分泌促進の観点、ＧＩＰ上昇抑制の観点から、また、経口投与又は摂取のしやすさから、好ましくは９０ｍｇ以上、より好ましくは１００ｍｇ以上、より好ましくは１５０ｍｇ以上、更に好ましくは２００ｍｇ以上であり、また、好ましくは１０００ｍｇ以下、より好ましくは５００ｍｇ以下である。
【００１９】
本明細書において「リパーゼ阻害剤」は、脂質を分解して脂肪酸を遊離するリパーゼ（膵リパーゼ）の酵素活性を阻害する作用を有するものである。リパーゼは膵液や胃液中に分泌されるが、大部分は膵液中に分泌されている酵素である。膵臓から分泌されるリパーゼ（膵リパーゼ）は、腸管内に分泌されて初めて活性化され、脂質を分解する。通常は、小腸上部において、脂質は膵リパーゼの働きによって脂肪酸とモノグリセリドに分解され、小腸上皮細胞から吸収される。しかしながら、小腸上部にリパーゼ阻害剤が存在すると、この膵リパーゼの酵素活性が阻害されて脂質から脂肪酸への分解が遅延し、脂質の分解が小腸上部から小腸下部に移行すると考えられる。その結果、小腸上部よりも小腸下部において脂肪酸が豊富に存在すると推定される。ＧＩＰは小腸上部Ｋ細胞から脂肪酸による刺激を受けて分泌が亢進されること、またＧＬＰ−１は小腸下部Ｌ細胞より脂肪酸による刺激を受けて分泌が亢進されることから、リパーゼ阻害剤による脂質の分解遅延を介して、小腸上部でのＧＩＰの分泌が抑制され、小腸下部でのＧＬＰ−１の分泌が亢進されると推測される。
（Ｂ）リパーゼ阻害剤は、小腸上部におけるリパーゼの酵素活性を阻害する作用の観点から、カテキン類、難消化性デキストリン、ウーロン茶重合ポリフェノール及びグロビン蛋白分解物から選ばれる１種又は２種以上が好ましく使用され、カテキン類がより好ましく使用される。
【００２０】
本明細書において「カテキン類」とは、カテキン、カテキンガレート、ガロカテキン及びガロカテキンガレートの非エピ体と、エピカテキン、エピカテキンガレート、エピガロカテキン及びエピガロカテキンガレートのエピ体を併せての総称である。本発明においては上記８種のうち少なくとも１種を含有すればよい。ここで、カテキンガレート、ガロカテキンガレート、エピカテキンガレート及びエピガロカテキンガレートはガレート体、カテキン、ガロカテキン、エピカテキン及びエピガロカテキンは非ガレート体と称する。
本明細書において、カテキン類の摂取量及び含有量は上記８種の合計量に基づいて定義される。カテキン類の分析は、通常知られている非重合体カテキン類の分析法のうち測定試料の状況に適した分析法により測定することができる。例えば、液体クロマトグラフィー法で分析することが可能であり、具体的には、後掲の実施例に記載の方法で分析することが可能である。なお、測定の際には装置の検出域に適合させるため、試料を凍結乾燥したり、装置の分離能に適合させるため試料中の夾雑物を除去したりする等、必要に応じて適宜処理を施してもよい。
【００２１】
カテキン類は、カテキン類中のエピ体の割合（［エピ体／カテキン類］×１００、以下、「エピ体率」とも称する）は、ＧＬＰ−１分泌促進の観点、ＧＩＰ上昇抑制の観点から、好ましくは３５〜９５質量％、より好ましくは４５〜９２質量％、更に好ましくは４７〜９０質量％である。
また、カテキン類は、カテキン類中のガレート体の割合（［ガレート体／カテキン類］×１００、以下、「ガレート体率」とも称する）は、ＧＬＰ−１分泌促進の観点、ＧＩＰ上昇抑制の観点から、好ましくは５〜９５質量％、より好ましくは１０〜８５質量％、更に好ましくは２５〜６０質量％、更に好ましくは３５〜５３質量％である。
【００２２】
カテキン類は、これを含有する天然物、特に植物から抽出することができ、化学合成により工業的に製造することもできる。本発明では、カテキン類を含む植物の抽出物をカテキン類として用いることもできる。
植物抽出物は、カテキン類が含まれている限り特に制限はないが、茶葉から抽出した茶抽出物が好ましく使用される。ここで、「茶抽出物」とは、茶葉から水又は親水性有機溶媒を用いて抽出したものであって、濃縮や精製操作が行われていないものをいう。
茶葉としては、Camellia属、例えばC. sinensis var. sinensis（やぶきた種を含む）、C. sinensis var. assamica及びそれらの雑種から選ばれる茶葉（Camellia sinensis）が挙げられる。茶葉は、その加工方法により、不発酵茶、半発酵茶、発酵茶に分類される。不発酵茶としては、例えば、煎茶、深蒸し煎茶、焙じ茶、番茶、玉露、かぶせ茶、碾茶、釜入り茶、茎茶、棒茶、芽茶等の緑茶が挙げられる。半発酵茶としては、例えば、鉄観音、色種、黄金桂、武夷岩茶等の烏龍茶が挙げられる。発酵茶としては、ダージリン、アッサム、スリランカ等の紅茶が挙げられる。
茶葉は、摘採された生茶葉の他、これを乾燥や凍結等させたもの、又はこれらを製茶したものが包含される。生茶葉は、その品種、摘採時期、摘採方法等いずれでもよく、また、茶葉の他、茎を使用してもよい。
抽出方法及び抽出条件は、適宜選択することができ、例えば、水や熱水、水溶性有機溶媒を用いて、撹拌抽出、ニーダー抽出、カラム抽出等の公知の方法により行うことができる。水溶性有機溶媒としては、例えば、エタノール等の低級アルコールが挙げられる。
【００２３】
本発明では、茶抽出物の濃縮物又はそれらの精製物が使用されてもよい。
「茶抽出物の濃縮物」とは、上記茶抽出物から溶媒の少なくとも一部を除去して非重合体カテキン類濃度を高めたものをいう。茶抽出物の濃縮物は、例えば、特開昭５９−２１９３８４号公報、特開平４−２０５８９号公報、特開平５−２６０９０７号公報、特開平５−３０６２７９号公報等に記載の方法により調製することができるが、三井農林（株）の「ポリフェノン」、伊藤園（株）の「テアフラン」、太陽化学（株）の「サンフェノン」等の市販品を使用することもできる。
「茶抽出物の精製物」は、茶抽出物又はその濃縮物を溶剤や吸着剤を用いて精製処理し固形分中の非重合体カテキン類の純度を高めたものをいい、例えば、特開２００４−１４７５０８号公報、特開２００７−２８２５６８号公報、特開２００６−１６０６５６号公報、特開２００８−０７９６０９号公報等に記載の方法により調製することができる。
カテキン類のガレート体率を上記範囲内に調整するために、茶抽出物、その濃縮物又はそれらの精製物等をタンナーゼ処理してもよい。ここで、「タンナーゼ処理」とは、茶抽出物等をタンナーゼ活性を有する酵素と接触させることをいう。なお、タンナーゼ処理における具体的な操作方法は公知の方法を採用することが可能であり、例えば、特開２００４−３２１１０５号公報に記載の方法を挙げることができる。
【００２４】
本発明の方法におけるカテキン類の摂取量は、他のリパーゼ阻害剤との併用によって変動するが、単独でも小腸上部におけるリパーゼの酵素活性を阻害する作用の観点から、好ましくは１００ｍｇ以上、より好ましくは２００ｍｇ以上、更に好ましくは３００ｍｇ以上、更に好ましくは４００ｍｇ以上、更に好ましくは５００ｍｇ以上であり、また、好ましくは１５００ｍｇ以下、より好ましくは１０００ｍｇ以下、更に好ましくは７００ｍｇ以下、更に好ましくは６００ｍｇ以下である。
また、本発明の方法において、（Ｂ）リパーゼ阻害剤としてカテキン類を用いる場合、（Ａ）クロロゲン酸類とカテキン類の摂取比率は、ＧＬＰ−１分泌促進の観点、ＧＩＰ上昇抑制の観点から、その質量比［カテキン類／クロロゲン酸類］で、好ましくは０．５以上、より好ましくは０．６以上、更に好ましくは０．８以上、更に好ましくは１．８以上であり、また、好ましくは４以下、より好ましくは３．８以下、更に好ましくは３．５以下である。
【００２５】
本明細書において「難消化性デキストリン」は、人間の消化酵素により加水分解されずに残るデキストリンである。難消化性デキストリンは、澱粉に微量の塩酸を加えて加熱し、α−アミラーゼ、グルコアミラーゼ等の酵素で処理して得られた食物繊維画分を分取することにより得られる。難消化性デキストリンの原料となる澱粉は、食品分野において使用されているものであれば、その由来は特に限定されないが、例えば、トウモロコシ、馬鈴薯、甘藷、小麦、米、もち米、タピオカ等の植物由来の澱粉等が使用される。なかでも、トウモロコシ由来の澱粉から得られた難消化性デキストリンが所望の効果を得やすい点で好ましい。
難消化性デキストリンのデキストロース当量（ＤＥ）は、小腸上部におけるリパーゼの酵素活性を阻害する作用の観点から、好ましくは１〜３０、より好ましくは５〜２５、更に好ましくは７〜２３、より更に好ましくは８〜２０、より更に好ましくは９〜１５である。デキストロース当量（ＤＥ）は、通常知られている測定法のうち測定試料の状況に適した分析法により測定することができる。
【００２６】
本発明の方法における難消化性デキストリンの摂取量は、他のリパーゼ阻害剤との併用によって変動するが、単独でも小腸上部におけるリパーゼの酵素活性を阻害する作用の観点から、好ましくは２．５〜１０ｇ、より好ましくは３〜８ｇである。
【００２７】
本明細書において「ウーロン茶重合ポリフェノール」は、茶の半発酵過程でカテキン類が重合して生成する成分の総称である。例えば、ウーロンホモビスフラバンＡ、ウーロンホモビスフラバンＢ、モノデスガロイルウーロンホモビスフラバンＡ、ジデスガロイルウーロンホモビスフラバンＢ、ウーロンホモビスフラバンＣのウーロンホモビスフラバン類が挙げられる。
【００２８】
本発明の方法におけるウーロン茶重合ポリフェノールの摂取量は、他のリパーゼ阻害剤との併用によって変動するが、単独でも小腸上部におけるリパーゼの酵素活性を阻害する作用の観点から、好ましくは３５〜１４０ｍｇである。
【００２９】
本明細書において「グロビン蛋白分解物」は、グロビン蛋白（ヘモグロビン等）を酵素分解して得られたオリゴペプチドの混合物である。グロビン蛋白分解物の活性ペプチドはテトラペプチドVal-Val-Tyr-Pro(VVYP)である。
【００３０】
本発明の方法におけるグロビン蛋白分解物の摂取量は、他のリパーゼ阻害剤との併用によって変動するが、単独でも小腸上部におけるリパーゼの酵素活性を阻害する作用の観点から、好ましくは３〜１２ｍｇである。
【００３１】
本明細書において「脂質」は、単純脂質、複合脂質、誘導脂質のいずれかを含むものである。
単純脂質は、脂肪酸とアルコールから生成するエステルであり、メタノール、エタノール等の低級アルコールと脂肪酸とのエステル、炭素数８〜２４の高級アルコールと脂肪酸とのエステルワックス、グリセリンと脂肪酸とのエステルであるグリセリド（モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリド）等が挙げられる。
複合脂質とは、単純脂質に、さらにリンや窒素等を含有する脂質であり、リン脂質や糖脂質等が挙げられる。
誘導脂質とは、単純脂質及び複合脂質から誘導される脂質であり、脂肪酸類、並びにカロテノイド、スクアレン等の炭化水素及びその誘導体等が挙げられる。
脂質を構成する脂肪酸としては、直鎖又は分岐鎖の炭素数２〜２２、好ましくは炭素数１４〜１８の飽和脂肪酸又は不飽和脂肪酸が好ましい。
（Ｃ）脂質は、ＧＬＰ−１分泌促進の観点、ＧＩＰ上昇抑制の観点から、単純脂質やリン脂質がより好ましく使用される。
【００３２】
本発明の方法における（Ｃ）脂質の摂取量は５ｇ以上であるが、ＧＬＰ−１分泌促進の観点、ＧＩＰ上昇抑制の観点から、好ましくは５ｇ以上であって、より好ましくは１０ｇ以上、更に好ましくは１５ｇ以上、更に好ましくは２０ｇ以上である。また、好ましくは２００ｇ以下、より好ましくは１５０ｇ以下、更に好ましくは１００ｇ以下、更に好ましくは５０ｇ以下である。
なお、本明細書において、脂質の質量は、食品表示基準について(平成27年3月30日消食第139号)の別添 栄養成分等の分析方法等  ２  脂質に基づき、酸分解法で求めることができる。
【００３３】
本発明の方法において、（Ａ）〜（Ｃ）の摂取は、単食品による摂取でも、複数食品の組み合わせによる摂取でも良い。
複数食品の組み合わせによる摂取の場合、（Ａ）〜（Ｃ）全ての摂取にかかる時間は、ＧＬＰ−１分泌促進作用の増強効果を奏するかぎり、また、ＧＩＰ上昇抑制作用の増強効果を奏するかぎり適宜選択しうるが、好ましくは２時間以内、より好ましくは１時間以内、より好ましくは３０分以内である。
【００３４】
本発明の方法において、上記（Ａ）〜（Ｃ）の他、炭水化物を摂取してよい。本明細書において「炭水化物」は、糖質と食物繊維の総称である。「糖質」はデンプンなどの多糖類、小糖類、二糖類、単糖類、糖アルコール、その他の総称である。「食物繊維」は消化酵素による消化を受けにくいためエネルギー源になりにくい糖類で、水溶性の食物繊維と難水溶性の食物繊維に分類される。炭水化物の摂取量は、好ましくは１０ｇ以上、より好ましくは２０ｇ以上、更に好ましくは４０ｇ以上である。また好ましくは２００ｇ以下、更に好ましくは１５０ｇ以下である。
一般的に糖質の質量は、炭水化物中の食物繊維質量を酵素−重量法に基づき定量し、炭水化物質量から食物繊維質量を除することで求めることができる。
【００３５】
また、本発明の方法において、上記（Ａ）〜（Ｃ）の他、カフェインも摂取してよいが、ＧＬＰ−１分泌促進の観点、ＧＩＰ上昇抑制の観点、血糖改善の観点から、その摂取量は、好ましくは３００ｍｇ以下、より好ましくは２００ｍｇ以下、更に好ましくは１５０ｍｇ以下である。
【００３６】
本発明の方法は、好ましくはＧＬＰ−１の分泌を促進するため、ＧＩＰの上昇を抑制するため、また、血糖を改善するための方法である。従って、上記方法の好ましい対象の例としては、単純性肥満者や糖尿病患者、それの予備軍が挙げられる。
【００３７】
〔経口組成物〕
一実施形態において、本発明は、（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び（Ｃ）脂質を含む経口組成物であって、組成物中の（Ｃ）脂質量が５ｇ以上である経口組成物を提供する。
【００３８】
本発明の経口組成物における（Ａ）クロロゲン酸類は、上述したものと同様である。
経口組成物における（Ａ）クロロゲン酸類量は、ＧＬＰ−１分泌促進の観点、ＧＩＰ上昇抑制の観点から、また、経口投与又は摂取のしやすさから、好ましくは９０ｍｇ以上、より好ましくは１００ｍｇ以上、より好ましくは１５０ｍｇ以上、更に好ましくは２００ｍｇ以上であり、また、好ましくは１０００ｍｇ以下、より好ましくは５００ｍｇ以下である。
【００３９】
本発明の経口組成物において、（Ｂ）リパーゼ阻害剤としてカテキン類、難消化性デキストリン、ウーロン茶重合ポリフェノール及びグロビン蛋白分解物から選ばれる１種又は２種以上を用いる場合、それらは、上述したものと同様である。
経口組成物におけるカテキン類量は、他のリパーゼ阻害剤との併用によって変動するが、（Ｂ）リパーゼ阻害剤として単独使用の場合、小腸上部におけるリパーゼの酵素活性を阻害する作用の観点から、好ましくは１００ｍｇ以上、より好ましくは２００ｍｇ以上、更に好ましくは３００ｍｇ以上、更に好ましくは４００ｍｇ以上、更に好ましくは５００ｍｇ以上であり、また、好ましくは１５００ｍｇ以下、より好ましくは１０００ｍｇ以下、更に好ましくは７００ｍｇ以下、更に好ましくは６００ｍｇ以下である。
また、経口組成物における難消化性デキストリン量は、他のリパーゼ阻害剤との併用によって変動するが、（Ｂ）リパーゼ阻害剤として単独使用の場合、小腸上部におけるリパーゼの酵素活性を阻害する作用の観点から、好ましくは２．５〜１０ｇ、より好ましくは３〜８ｇである。
また、経口組成物におけるウーロン茶重合ポリフェノール量は、他のリパーゼ阻害剤との併用によって変動するが、（Ｂ）リパーゼ阻害剤として単独使用の場合、小腸上部におけるリパーゼの酵素活性を阻害する作用の観点から、好ましくは３５〜１４０ｍｇである。
また、経口組成物におけるグロビン蛋白分解物量は、他のリパーゼ阻害剤との併用によって変動するが、（Ｂ）リパーゼ阻害剤として単独使用の場合、小腸上部におけるリパーゼの酵素活性を阻害する作用の観点から、好ましくは３〜１２ｍｇである。
【００４０】
本発明の経口組成物において、（Ｂ）リパーゼ阻害剤としてカテキン類を用いる場合、（Ａ）クロロゲン酸類とカテキン類の比率は、ＧＬＰ−１分泌促進の観点、ＧＩＰ上昇抑制の観点から、その質量比［カテキン類／クロロゲン酸類］で、好ましくは０．５以上、より好ましくは０．６以上、更に好ましくは０．８以上、更に好ましくは１．８以上であり、また、好ましくは４以下、より好ましくは３．８以下、更に好ましくは３．５以下である。
【００４１】
本発明の経口組成物における（Ｃ）脂質量は５ｇ以上であるが、ＧＬＰ−１分泌促進の観点、ＧＩＰ上昇抑制の観点から、好ましくは５ｇ以上であって、より好ましくは１０ｇ以上、更に好ましくは１５ｇ以上、更に好ましくは２０ｇ以上である。また、好ましくは２００ｇ以下、より好ましくは１５０ｇ以下、更に好ましくは１００ｇ以下、更に好ましくは５０ｇ以下である。
【００４２】
本発明の経口組成物は炭水化物を含有してもよい。炭水化物は、上述したものと同様である。
経口組成物における炭水化物量は、好ましくは１０ｇ以上、より好ましくは２０ｇ以上、更に好ましくは４０ｇ以上である。また好ましくは２００ｇ以下、更に好ましくは１５０ｇ以下である。
【００４３】
また、本発明の経口組成物はカフェインも含有してよいが、カフェイン量は、ＧＬＰ−１分泌促進の観点、ＧＩＰ上昇抑制の観点、血糖改善の観点から、好ましくは３００ｍｇ以下、より好ましくは２００ｍｇ以下、更に好ましくは１５０ｍｇ以下である。
【００４４】
本発明の経口組成物は、経口的に投与又は摂取される組成物である。その形態は室温（２５℃）で固体状、半固形状、液体状のいずれでもよい。液体状の場合、液体、ゲル状、ゼリー状、スラリー状のいずれの形態であっても構わない。
本発明の経口組成物は、好ましくは単位剤形として提供される。
【００４５】
本発明の経口組成物は、医薬品、医薬部外品、食品の形態であってよい。
医薬品（以下、医薬部外品も含む）の投与形態としては、例えば、顆粒剤、粉剤、錠剤、カプセル剤、散剤、トローチ剤、液剤、シロップ剤等が挙げられる。
このような種々の剤形の製剤は、必要に応じて、薬学的に許容される担体、例えば、賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、浸透圧調整剤、ｐＨ調整剤、乳化剤、防腐剤、安定剤、保存剤、増粘剤、流動性改善剤、嬌味剤、発泡剤、香料、被膜剤、希釈剤等や、上記成分（Ａ）〜（Ｃ）以外の薬効成分を適宜組み合わせて調製することができる。
【００４６】
食品の形態としては、各種食品組成物（パン類、ケーキ類、麺類、菓子類、ゼリー類、冷凍食品、アイスクリーム類、乳製品、シェイク、飲料等）、さらには、上述した経口投与製剤と同様の形態（顆粒剤、粉剤、錠剤、カプセル剤、散剤、トローチ剤、液剤、シロップ剤等）の栄養補給用組成物が挙げられる。飲料は、清涼飲料水、茶系飲料、コーヒー飲料、果汁飲料、炭酸飲料等が挙げられる。
種々の形態の食品は、必要に応じて、他の食品材料や食品添加物、例えば、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、酸味料、甘味料、苦味料、ｐＨ調整剤、安定剤、着色剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤、流動性改善剤、発泡剤、香科、調味料等や、上記成分（Ａ）〜（Ｃ）以外の有効成分を適宜組み合わせて調製することができる。
食品には、ＧＬＰ−１分泌促進又はＧＩＰ上昇抑制を訴求とし、必要に応じてその旨の表示が許可された食品（特定保健用食品、機能性表示食品）が含まれる。表示の例としては、「インスリン抵抗性を改善させる」「グリコヘモグロビン（hemoglobin A1c）を改善させる」「空腹時血糖値を低下させるのを助ける」がある。機能表示が許可された食品は、一般の食品と区別することができる。
【００４７】
本発明の経口組成物の１日あたりの投与量又は摂取量は、投与又は摂取対象者の体重、性別、年齢、状態又はその他の要因に従って変動し得る。投与の用量、間隔、及び摂取の量や間隔は、当業者によって適宜決定され得るが、投与又は摂取のしやすさ、小腸に到達し作用するまでに唾液、胃液、膵液、胆汁、腸液等によって希釈されることを考慮して、通常、成人１人（６０ｋｇ）に対して１日あたり、（Ａ）クロロゲン酸類として、好ましくは９０ｍｇ以上、より好ましくは１００ｍｇ以上、より好ましくは１５０ｍｇ以上、更に好ましくは２００ｍｇ以上であり、また、好ましくは１０００ｍｇ以下、より好ましくは５００ｍｇ以下である。
また、カテキン類として、好ましくは１００ｍｇ以上、より好ましくは２００ｍｇ以上、更に好ましくは３００ｍｇ以上、更に好ましくは４００ｍｇ以上、更に好ましくは５００ｍｇ以上であり、また、好ましくは１５００ｍｇ以下、より好ましくは１０００ｍｇ以下、更に好ましくは７００ｍｇ以下、更に好ましくは６００ｍｇ以下である。
また、難消化性デキストリンとして、好ましくは２．５〜１０ｇ、より好ましくは３〜８ｇである。
また、ウーロン茶重合ポリフェノールとして、好ましくは３５〜１４０ｍｇである。
また、グロビン蛋白分解物として、好ましくは３〜１２ｍｇである。
また、脂質として、好ましくは５ｇ以上、より好ましくは１０ｇ以上、更に好ましくは１５ｇ以上、更に好ましくは２０ｇ以上である。
本発明では斯かる量を１日に１回〜複数回、好ましくは１日に１回投与又は摂取するのが好ましい。
【００４８】
本発明の経口組成物は、任意の計画に従って投与又は摂取され得る。投与又は摂取期間は特に限定されないが、反復・連続して投与又は摂取することが好ましく、２週間以上、更に４週間以上、更に８週間以上、連続して投与又は摂取することが好ましい。
【００４９】
後記実施例に示すように、脂質の摂取と共にクロロゲン酸類及びカテキン類を摂取すると、血中ＧＬＰ−１濃度が有意に上昇し、また、血中ＧＩＰ濃度が有意に減少する。また、食後血糖値の上昇が有意に抑制される。それらの作用は、クロロゲン酸類、カテキン類それぞれ単独での作用と比べて優れ、且つ、それぞれ単独で経口摂取した場合に得られる効果の相加を超え、相乗的効果であると云える。
この理由としては、以下のように考えられる。
前述したように、ヒトの消化管における脂質の吸収過程においては膵リパーゼによって脂質が脂肪酸に分解されて主に小腸上部で脂肪酸が吸収される。一方、カテキン類はリパーゼ阻害作用を有することから、脂質、クロロゲン酸類及びカテキン類を摂取した場合は小腸を通過する際にこのカテキン類のリパーゼ阻害作用により脂質から脂肪酸への分解が遅延し、結果、小腸上部に存在するＫ細胞への脂肪酸による刺激が減って、ここにクロロゲン酸類が共存することでその作用が加わり、ＧＩＰの分泌は減少する。対して、Ｌ細胞の高局在する小腸下部においては脂肪酸の局在が増えることでＬ細胞への刺激が増大し、ＧＬＰ−１分泌促進の増強が生じると推測される。ここに消化管で吸収されにくいクロロゲン酸類が共存してその作用が加わることで更にＬ細胞への刺激が増大し、ＧＬＰ−１分泌促進の増強が生じると推測される。
従って、本発明の経口組成物は、ＧＬＰ−１の分泌を促進するために、また、ＧＩＰの上昇を抑制するために好適に用いることができる。また、これらＧＬＰ−１分泌促進、ＧＩＰ上昇抑制の作用を介して様々な状態の制御、例えば、肥満、糖尿病等の生活習慣病の予防及び／又は改善のため、肝・筋での糖取り込み増加のため、インスリン抵抗性改善のため、中枢神経系での食欲抑制のため、消化管における胃排泄遅延のため、食後の消化促進のため、胃もたれや胃酸分泌能の改善のため、エネルギー代謝を亢進するため、抗疲労のために、とりわけ血糖改善のために用いることができる。
【００５０】
本明細書において「ＧＬＰ−１分泌促進」とは、生体内でのＧＬＰ−１分泌を促進することを意味する。「ＧＬＰ−１分泌促進」は、生体内でのＧＬＰ−１分泌に伴う血中ＧＬＰ−１濃度上昇の促進、上昇したＧＬＰ−１濃度の維持、又は上昇したＧＬＰ−１濃度の低下抑制、すなわち血中ＧＬＰ−１濃度の安定化のいずれをも含む概念である。
また、「ＧＩＰ上昇抑制」とは、生体内でのＧＩＰの上昇を抑制することを意味する。「ＧＩＰ上昇抑制」は、生体内でのＧＩＰ分泌を抑制することでＧＩＰ上昇を抑制するＧＩＰ分泌抑制、及び血中ＧＩＰ濃度を低下させることによりＧＩＰ上昇を抑制するＧＩＰ低下のいずれをも含む概念である。
【００５１】
本明細書において「血糖改善」とは、血糖値の上昇の抑制、上昇した血糖値の低下促進、血糖値の安定化のいずれをも含む概念である。単回で測定可能な血液中のブドウ糖濃度（血糖値）の状態を示す指標には、空腹時血糖値や食後血糖値を含む随時血糖値の他、７５ｇブドウ糖負荷試験後の血糖値、グリコヘモグロビン（hemoglobin A1c）、グリコアルブミン、１，５−アンヒドロ−Ｄ−グルシトールなどが知られている。
そのため、本明細書での「血糖改善」は単純に空腹時血糖値が改善することだけでなく、食物を摂取した後の食後血糖値やブドウ糖を負荷した後の随時血糖値又は長期的な平均血糖値を示す指標であるグリコヘモグロビン、グリコアルブミン、１，５−アンヒドログルシトールのいずれの指標が改善してもよい。特に、グリコヘモグロビン、空腹時血糖値、ブドウ糖負荷試験での２時間値、又は食後血糖値を含む随時血糖値は糖尿病診断に用いられる検査項目であることから、このいずれかが改善することは高血糖者又は糖尿病患者にとって好ましい「血糖改善」と考えられる。
【００５２】
〔その他の実施形態〕
一実施形態において、本発明は、（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び（Ｃ）脂質を有効成分とするＧＬＰ−１分泌促進剤、ＧＩＰ上昇抑制剤又は血糖改善剤を提供する。ここで、（Ａ）クロロゲン酸類、（Ｂ）リパーゼ阻害剤及び（Ｃ）脂質は、上述したものと同様である。
斯かるＧＬＰ−１分泌促進剤等は、ヒトを含む動物に投与又は摂取した場合にＧＬＰ−１分泌促進効果、ＧＩＰ上昇抑制効果又は血糖改善効果を発揮する医薬品（医薬部外品）又は食品となり、また当該医薬品（医薬部外品）又は食品に配合して使用される素材又は製剤となり得る。医薬品（医薬部外品）又は食品は、上述したものと同様である。
【実施例】
【００５３】
［飲料の調製］
（試験例１）
試験例１で用いた試験飲料、比較飲料、及び対照飲料の各飲料は、次の原料飲料（１）〜（４）を、後述の表１に示される量で混合することにより調製した。
（１）カテキン飲料Ａ
緑茶（Camellia sinensis）葉熱水抽出物の乾燥粉末を熱水に溶解した後、当量のクロロホルム、３倍量のエタノールを加えて混合し水相を回収、再乾燥して得られた茶カテキンを用い、茶カテキンを含むカテキン飲料Ａを得た。本飲料は、１００ｇ中に茶カテキン１８１．４ｍｇ且つクロロゲン酸０ｍｇ且つカフェイン２４．７ｍｇを含有した。
（２）クロロゲン酸飲料Ａ
生コーヒー豆の粉砕物を熱水で抽出後、スプレードライ乾燥し、得られたパウダーをエタノール水溶液に溶解させてろ過し、ろ過液を活性炭及びイオン交換樹脂を用いたカラムで処理することで生コーヒー豆抽出物を得た。生コーヒー豆抽出物を酸味料、甘味料及びその他材料と配合して、クロロゲン酸飲料Ａを得た。本飲料は、１００ｇ中に茶カテキン０ｍｇ且つクロロゲン酸２０４．５ｍｇ且つカフェイン２７．７ｍｇを含有した。
（３）プラセボ（緑茶風味対照）粉末飲料Ａ
カフェイン含有粉末、着色料、緑茶風味を呈する香料及びその他材料を混合した後に充填することでプラセボ（緑茶風味対照）粉末飲料Ａを得た。本飲料は、１００ｇ中に茶カテキン０ｍｇ且つクロロゲン酸０ｍｇ且つカフェイン１１５０ｍｇを含有した。
（４）ミネラルウオーター
ミネラルウオーターとして、「サントリー南アルプスの天然水」（サントリー食品インターナショナル（株）製）を使用した。
【００５４】
【表１】
2020158490.tif 000002
【００５５】
（試験例２）
試験例２で用いた試験飲料及び対照飲料の各飲料は、次の原料飲料（１）〜（４）を、後述の表２に示される量で混合することにより調製した。
（１）カテキン飲料Ｂ
緑茶（Camellia sinensis）葉熱水抽出物の乾燥粉末を熱水に溶解した後、当量のクロロホルム、３倍量のエタノールを加えて混合し水相を回収、再乾燥して得られた茶カテキンを用い、茶カテキンを含むカテキン飲料を得た。本飲料は、１００ｇ中に茶カテキン１６８．１ｍｇ且つクロロゲン酸０ｍｇ且つカフェイン２４．３ｍｇを含有した。
（２）クロロゲン酸飲料Ｂ
生コーヒー豆の粉砕物を熱水で抽出後、スプレードライ乾燥し、得られたパウダーをエタノール水溶液に溶解させてろ過し、ろ過液を活性炭及びイオン交換樹脂を用いたカラムで処理することで生コーヒー豆抽出物を得た。生コーヒー豆抽出物を酸味料、甘味料及びその他材料と配合して、クロロゲン酸飲料を得た。本飲料は、茶カテキン０ｍｇ且つクロロゲン酸２１３．９ｍｇ且つカフェイン２８．３ｍｇを含有した。
（３）プラセボ（緑茶風味対照）飲料Ｂ
純水、カフェイン含有粉末、着色料、緑茶風味を呈する香料及びその他材料を混合して調整した調合液を殺菌処理することによりプラセボ（緑茶風味対照）飲料Ｂを得た。本飲料は、１００ｇ中に茶カテキン０ｍｇ且つクロロゲン酸０ｍｇ且つカフェイン２２．６ｍｇを含有した。
（４）ミネラルウオーター
ミネラルウオーターとして、「サントリー南アルプスの天然水」（サントリー食品インターナショナル（株）製）を使用した。
【００５６】
【表２】
2020158490.tif 000003
【００５７】
調製した飲料中のカテキン類の定量は、各飲料をフィルター（０．４５μｍ）で濾過し、高速液体クロマトグラフ（型式ＬＣＶＰ、島津製作所（株）製）を用い、オクタデシル基導入液体クロマトグラフ用パックドカラム（Ｌ−カラムＴＭ ＯＤＳ、４．６ｍｍφ×２５０ｍｍ：財団法人 化学物質評価研究機構製）を装着し、カラム温度３５℃でグラジエント法により分析した。移動相Ａ液は酢酸を０．１ｍｏｌ／Ｌ含有する蒸留水溶液、Ｂ液は酢酸を０．１ｍｏｌ／Ｌ含有するアセトニトリル溶液とし、試料注入量は２０μＬ、ＵＶ検出器波長は２８０ｎｍの条件で行った。
濃度勾配条件（体積％）
時間          移動相Ａ          移動相Ｂ
０分          ９７％              ３％
５分          ９７％              ３％
３７分          ８０％            ２０％
４３分          ８０％            ２０％
４３．５分        ０％          １００％
４８．５分        ０％          １００％
４９分          ９７％              ３％
６２分          ９７％              ３％
【００５８】
調製した飲料中のクロロゲン酸類の定量にはＨＰＬＣ（日立製作所（株）製）を使用した。ＨＰＬＣでは、試料１ｇを精秤後、溶離液にて１０ｍＬにメスアップし、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク２５Ａ，孔径０．４５μｍ、ジーエルサイエンス（株））にて濾過後、分析に供した。５−カフェオイルキナ酸を標準物質として、波長３２５ｎｍの吸光度により３−カフェオイルキナ酸、４−カフェオイルキナ酸、５−カフェオイルキナ酸、３−フェルロイルキナ酸、４−フェルロイルキナ酸及び５−フェルロイルキナ酸を定量した。
クロロゲン酸類と同様に、カフェインは試薬カフェインを標準物質とし、波長２７０ｎｍの吸光度により測定した。５．２分のピーク面積から求めた面積比からカフェインを定量した。
【００５９】
上記調製した対照飲料、比較飲料、試験飲料の各組成を以下の表３に示す：
【００６０】
【表３】
2020158490.tif 000004
【００６１】
試験例１  単回併用摂取試験
〔試験概要〕
（１）被験者及び方法
健常男性１８名（平均年齢４４±８歳、平均体格指数ＢＭＩ２３．１±１．９ｋｇ／ｍ2）を対象に、４つのフェーズからなるランダム化二重盲検クロスオーバープラセボ対照比較デザインにて実施した。被験者は１週間のＲｕｎ−ｉｎ期間後、第１回目の負荷試験を行った。負荷試験は表１に示す対照飲料１、比較飲料Ｃ、比較飲料Ｔ、又は試験飲料１のいずれかを摂取した。
負荷試験前日は、規定の朝食（５９５ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝１３／３５／５２、たんぱく質１９．０ｇ、脂質２３．１ｇ、炭水化物７７．６ｇ）、昼食（５８９ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝１６／１８／６３、たんぱく質２３．１ｇ、脂質１１．９ｇ、炭水化物９２．８ｇ）、間食（５１２ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝１１．６／２９．２／５９．１、たんぱく質１４．９ｇ、脂質１６．６ｇ、炭水化物７５．７ｇ）、及び夕食（７１６ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝１４／１８／６９、たんぱく質２４．２ｇ、脂質１４．１ｇ、炭水化物１２２．６ｇ）を２１時までに摂取してその後は絶食させた（飲水可）。
翌日の負荷試験当日は、被験者は完全排尿し、絶飲食で参加した。９時の朝食（試験食）摂取の３０分前に採血を行った。朝食には、耐糖能試験検査用のミールテストＳ（５９２ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝５／４４／５１、たんぱく質８．０ｇ、脂質２８．５ｇ、炭水化物７８．５ｇ、炭水化物中の糖質７５．０ｇ、サラヤ（株）製）を用いた。５分毎に試験食１／３と水１／３ずつを摂取し、試験食と水１００ｍＬを１５分間で完食した。朝食後１０分以内に対照飲料１、比較飲料Ｃ、比較飲料Ｔ、又は試験飲料１を摂取した後、再度血液検査を行った。約１週間のウォッシュアウト期間を設け、摂取飲料を変えて再び負荷試験を行った。試験参加期間中は、試験飲料以外の緑茶・コーヒーの摂取を１日１杯以内に、また、カテキン類・クロロゲン酸高濃度含有飲料の飲用、特定保健用食品・機能性表示食品・ビタミン類及びミネラル類をサプリメントの摂取は控えさせた。試験食以外は普段の食生活を維持させた。
【００６２】
採血は全て上腕静脈から行った。ａｃｔｉｖｅ  ＧＬＰ−１及びＴｏｔａｌ  ＧＩＰの測定はＥＬＩＳＡ  Ｋｉｔ（ａｃｔｉｖｅ  ＧＬＰ−１：株式会社  免疫生物研究所、Ｔｏｔａｌ  ＧＩＰ：Ｍｅｒｃｋ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて測定した。
血中ＧＬＰ−１濃度及びＧＩＰ濃度の有意差の検定は、群間の比較を対応のあるｔ検定で評価した。また、後掲のＧＬＰ−１  ＡＵＣ及びＧＩＰ  Ｃmaxの有意差の検定は、一元配置分散分析を行い、群間の比較はＤｕｎｎｅｔｔの方法を用いた。有意水準は５％以下とした（†ｐ＜０．０５、††ｐ＜０．０１、比較飲料Ｃｖｓ．対照飲料１、‡ｐ＜０．０５、‡‡ｐ＜０．０１、比較飲料Ｔｖｓ．対照飲料１、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１、試験飲料１ｖｓ．対照飲料１）。有意差の検定には統計解析ソフト（ＳＰＳＳ  １８、ＩＢＭ）を使用した。得られた数値は平均値±標準誤差で示した。
【００６３】
（２）結果
（血中ＧＬＰ−１分泌亢進作用）
試験食摂取１２０分後のＧＬＰ−１の血中濃度を表４に示す。
空腹時（試験食摂取の３０分前、０分）及び食後３０分、６０分、９０分、１２０分、２４０分の血中ＧＬＰ−１濃度を用いて血中濃度-時間曲線下面積（AUC：area underthe blood concentration time curve）を求めた。ＡＵＣの計算方法は以下のとおりである。（0分値＋30分値）×30/2＋（30分値＋60分値）×30/2＋（60分値＋90分値）×30/2＋90分値＋120分値）×30/2+（120分値＋240分値）×120/2
以上の計算方法により、比較飲料Ｃ、比較飲料Ｔ又は試験飲料１摂取によるＧＬＰ−１ ＡＵＣを算出し、対照飲料１摂取時と比較してどの程度の減少率であったのかを調べた。
その結果、比較飲料ＣによるＧＬＰ−１ ＡＵＣは対照飲料１と比較して約１４．４％の増加、比較飲料ＴによるＧＬＰ−１ ＡＵＣは対照飲料１と比較して約１０．７％の増加であった。一方、試験飲料１によるＧＬＰ−１ ＡＵＣは対照飲料１と比較して２０．２％の増加であった（表４）。さらに、図１に示すように、試験飲料１を摂取した場合にのみ、対照飲料１と比べてＧＬＰ−１  ＡＵＣを有意に増加させたことから、カテキン類とクロロゲン酸類を併用摂取することによる効果は相乗的であると考えられた。
【００６４】
【表４】
2020158490.tif 000005
【００６５】
（血中ＧＩＰ分泌抑制作用）
空腹時（試験食摂取の３０分前、０分）及び食後３０分、６０分、９０分、１２０分、２４０分までのＧＩＰの変動及び最高血中ＧＩＰ濃度（Ｃmax）を図２及び図３に示す。
図３に示すとおり、試験食摂取後のＧＩＰの最高血中ＧＩＰ濃度（Ｃmax）は対照飲料１摂取時と比較して試験飲料１摂取時のみ有意に減少したことから、カテキン類とクロロゲン酸類を併用摂取することによる効果は相乗的であると考えられた。
【００６６】
試験例２  単回併用摂取試験
〔試験概要〕
（１）被験者及び方法
健常男性１８名（平均年齢４１±２歳、平均体格指数ＢＭＩ２２．６±０．４ｋｇ／ｍ2）を対象に、３つのフェーズからなるランダム化二重盲検クロスオーバープラセボ対照比較デザインにて実施した。被験者は１週間のＲｕｎ−ｉｎ期間後、第１回目の負荷試験を行った。負荷試験は対照飲料２、試験飲料２又は試験飲料３のいずれかを摂取した。
負荷試験前日及び負荷試験当日の試験方法は、前述の試験例１と同様の方法を用いた。
【００６７】
採血は全て上腕静脈から行った。ａｃｔｉｖｅ  ＧＬＰ−１及びＴｏｔａｌ  ＧＩＰの測定はＥＬＩＳＡ  Ｋｉｔ（ａｃｔｉｖｅ  ＧＬＰ−１：株式会社  免疫生物研究所、Ｔｏｔａｌ  ＧＩＰ：Ｍｅｒｃｋ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて測定した。
血中ＧＬＰ−１濃度及びＧＩＰ濃度の有意差の検定は、群間の比較を対応のあるｔ検定で評価した。また、後掲のＧＬＰ−１  ＡＵＣ及びＧＩＰ  ＡＵＣの有意差の検定は、一元配置分散分析を行い、群間の比較はＤｕｎｎｅｔｔの方法を用いた。有意水準は５％以下とした（†ｐ＜０．０５、††ｐ＜０．０１、試験飲料２ｖｓ．対照飲料２、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、試験飲料３ｖｓ．対照飲料２）。有意差の検定には統計解析ソフト（SPSS 18、IBM）を使用した。得られた数値は平均値±標準誤差で示した。
【００６８】
（血中ＧＬＰ−１分泌亢進作用）
試験食摂取１０５分後のＧＬＰ−１の血中濃度を表５に示す。
空腹時（試験食摂取の３０分前、０分）及び食後４５分、７５分、１０５分、１３５分、２５５分の血中ＧＬＰ−１濃度を用いて血中濃度−時間曲線下面積（AUC：area underthe blood concentration time curve）を求めた。結果を図４に示す。ＡＵＣの計算方法は以下のとおりである。
（0分値＋45分値）×45/2＋（45分値＋75分値）×30/2＋（5分値＋105分値）×30/2＋（105分値＋135分値）×30/2+（135分値＋255分値）×120/2
以上の計算方法により、試験飲料２又は試験飲料３摂取によるＧＬＰ−１ ＡＵＣを算出し、対照飲料２摂取時と比較してどの程度の減少率であったのかを調べた。
その結果、試験飲料２によるＧＬＰ−１ ＡＵＣは対照飲料２と比較して約２．９％の増加、試験飲料３によるＧＬＰ−１ ＡＵＣは対照飲料２と比較して約２１．３％の増加であった。
【００６９】
【表５】
2020158490.tif 000006
【００７０】
（血中ＧＩＰ分泌抑制作用）
空腹時（試験食摂取の３０分前、０分）及び食後４５分、７５分、１０５分、１３５分、２５５分の血中ＧＩＰ濃度を用いて血中濃度-時間曲線下面積（AUC：area underthe blood concentration time curve）を求めた。結果を図５に示す。ＡＵＣの計算方法は以下のとおりである。
（0分値＋45分値）×45/2＋（45分値＋75分値）×30/2＋（5分値＋105分値）×30/2＋（105分値＋135分値）×30/2+（135分値＋255分値）×120/2
ＧＩＰ  ＡＵＣは、対照飲料２摂取時と比較して試験飲料２及び試験飲料３摂取時の両方で有意に減少したことから、カテキン類とクロロゲン酸類を併用摂取することによってＧＩＰの分泌抑制効果があると考えられた。
【００７１】
［飲料の調製］
（試験例３）
試験例３で用いた試験飲料及び対照飲料の各飲料は、次の原料飲料（１）〜（４）を、後述の表６に示される量で混合することにより調製した。
（１）カテキン飲料Ｃ
緑茶（Camellia sinensis）葉熱水抽出物の乾燥粉末を熱水に溶解した後、当量のクロロホルム、３倍量のエタノールを加えて混合し水相を回収、再乾燥して得られた茶カテキンを用い、茶カテキンを含むカテキン飲料Ｃを得た。本飲料は、１００ｇ中に茶カテキン１８３．９ｍｇ且つクロロゲン酸０ｍｇ且つカフェイン２４．８ｍｇを含有した。
（２）クロロゲン酸飲料Ｃ
生コーヒー豆の粉砕物を熱水で抽出後、スプレードライ乾燥し、得られたパウダーをエタノール水溶液に溶解させてろ過し、ろ過液を活性炭及びイオン交換樹脂を用いたカラムで処理することで生コーヒー豆抽出物を得た。生コーヒー豆抽出物を酸味料、甘味料及びその他材料と配合して、クロロゲン酸飲料Ｃを得た。本飲料は、１００ｇ中に茶カテキン０ｍｇ且つクロロゲン酸１９８．５ｍｇ且つカフェイン２７．８ｍｇを含有した。
（３）プラセボ（緑茶風味対照）粉末飲料Ｃ
カフェイン含有粉末、着色料、緑茶風味を呈する香料及びその他材料を混合した後に充填することでプラセボ（緑茶風味対照）粉末飲料Ｃを得た。本飲料は、１００ｇ中に茶カテキン０ｍｇ且つクロロゲン酸０ｍｇ且つカフェイン１１５０ｍｇを含有した。
（４）ミネラルウオーター
ミネラルウオーターとして、「サントリー南アルプスの天然水」（サントリー食品インターナショナル（株）製）を使用した。
【００７２】
【表６】
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【００７３】
調製した飲料中のカテキン類、クロロゲン酸類及びカフェインの定量は、上記と同様の条件で行った。
【００７４】
上記調製した対照飲料、試験飲料の各組成を以下の表７に示す。
【００７５】
【表７】
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【００７６】
試験例３  単回併用摂取試験
〔試験概要〕
（１）被験者及び方法
血糖値の判定は、空腹時血糖値又は７５ｇブドウ糖負荷試験２時間後の血糖値の組み合わせにより、血糖値正常型、境界型、糖尿病型の３つに分類される。さらに、(ｉ）空腹時血糖値が１２６ｍｇ／ｄＬ以上又は(ii)７５ｇブドウ糖負荷試験２時間後の血糖値が２００ｍｇ／ｄＬ以上又は(iii)随時血糖値２００ｍｇ／ｄＬ以上又は(iv)グリコヘモグロビン６．５％以上は糖尿病型に分類される。空腹時血糖値が１１０ｍｇ／ｄＬ未満及び７５ｇブドウ糖負荷試験２時間後の血糖値が１４０ｍｇ／ｄＬ未満に該当すると正常型と分類され、さらに空腹時血糖値１００ｍｇ／ｄＬ以上１０９ｍｇ／ｄＬ以下は正常型の中でも正常高値に分類される。また、血糖値が糖尿病型にも正常型にも該当しない場合、境界型とされる（日本糖尿病学会. 糖尿病診療ガイドライン2019. p.5-7）。
空腹時血糖値が正常高値又は境界型に該当する男性１５名（平均年齢４５±１１歳、平均体格指数ＢＭＩ２７．９±５．０ｋｇ／ｍ2、空腹時血糖値１０８±６ｍｇ／ｄＬ）を対象に、４つのフェーズからなるランダム化二重盲検クロスオーバープラセボ対照比較デザインにて実施した。被験者は１週間のＲｕｎ−ｉｎ期間後、第１回目の負荷試験を行った。負荷試験は表７に示す対照飲料３、試験飲料４、試験飲料５、又は試験飲料６のいずれかを摂取した。
負荷試験前日は、規定の朝食（７３４ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝１４／３８／４８、たんぱく質２５．８ｇ、脂質３１．１ｇ、炭水化物８７．６ｇ）、昼食（６８５ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝１２／２１／６７、たんぱく質２１．１ｇ、脂質１６．１ｇ、炭水化物１１５．２ｇ）、及び夕食（７４７ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝１６／１７／６７、たんぱく質２９．６ｇ、脂質１４．１ｇ、炭水化物１２４．７ｇ）を２１時までに摂取してその後は絶食させた（飲水可）。
翌日の負荷試験当日は、被験者は完全排尿し、絶飲食で参加した。朝食（試験食）摂取の３０分前に採血を行った。朝食には、耐糖能試験検査用のミールテストＳ（５９２ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝５／４４／５１、たんぱく質８．０ｇ、脂質２８．５ｇ、炭水化物７８．５ｇ、炭水化物中の糖質７５．０ｇ、サラヤ（株）製）を用いた。５分毎に試験食１／３と水１／３ずつを摂取し、試験食と水１００ｍＬを１５分間で完食した。朝食後１０分以内に対照飲料３、試験飲料４、試験飲料５、又は試験飲料６を摂取した後、再度血液検査を行った。約１週間のウォッシュアウト期間を設け、摂取飲料を変えて再び負荷試験を行った。試験参加期間中は、試験飲料以外の緑茶・コーヒーの摂取を１日１杯以内に、また、カテキン類・クロロゲン酸高濃度含有飲料の飲用、特定保健用食品・機能性表示食品・ビタミン類及びミネラル類をサプリメントの摂取は控えさせた。試験食以外は普段の食生活を維持させた。
【００７７】
採血は全て上腕静脈から行った。血糖値は外部の検査機関に依頼し、血漿血糖値を酵素法にて測定した。
後掲の血糖値  Ｃmaxの有意差の検定は、ＳＡＳ ９．４／ｇｌｉｍｍｉｘ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅを用いて、混合効果モデルでの解析を行った。分散共分散の推定はＲＥＭＬ法で行い、経験分散（ＥＭＰＩＲＩＣＡＬオプション）を用い、期と順序の効果を調整した。各飲料による効果はＥＳＴＩＭＡＴＥオプションで推定した。多重性の調整にはＭａｎｃｌ ａｎｄ Ｄｅｒｏｕｅｎの方法を用いた。有意水準は全て５％とし、P値が有意水準を下回った時に、統計的に有意と判断した（＊ｐ＜０．０５  試験飲料４ｖｓ．対照飲料３、試験飲料５ｖｓ．対照飲料３、＊＊ｐ＜０．０１  試験飲料６ｖｓ．対照飲料３）。得られた数値は平均値±標準誤差で示した。
【００７８】
（２）結果
（食後血糖値の上昇抑制作用）
食後３０分、６０分、９０分、１０５分、１２０分、２４０分までの血糖値の最高血中濃度（Ｃmax）を表８に示す。
表８に示すとおり、試験食摂取後の血糖値の最高血中濃度（Ｃmax）は対照飲料３摂取時と比較して試験飲料４、試験飲料５、及び試験飲料６の３種の試験飲料摂取時に有意に減少したことから、カテキン類とクロロゲン酸類を併用摂取することによる血糖改善効果は相乗的であると考えられた。
【００７９】
【表８】
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【００８０】
［飲料の調製］
（試験例４）
試験例４で用いた試験飲料及び対照飲料の各飲料は、次の原料飲料（１）〜（４）を、後述の表９に示される量で混合することにより調製した。
（１）カテキン飲料Ｄ
緑茶（Camellia sinensis）葉熱水抽出物の乾燥粉末を熱水に溶解した後、当量のクロロホルム、３倍量のエタノールを加えて混合し水相を回収、再乾燥して得られた茶カテキンを用い、茶カテキンを含むカテキン飲料Ｄを得た。本飲料は、１００ｇ中に茶カテキン１８２．５ｍｇ且つクロロゲン酸０ｍｇ且つカフェイン２４．１ｍｇを含有した。
（２）クロロゲン酸飲料Ｄ
生コーヒー豆の粉砕物を熱水で抽出後、スプレードライ乾燥し、得られたパウダーをエタノール水溶液に溶解させてろ過し、ろ過液を活性炭及びイオン交換樹脂を用いたカラムで処理することで生コーヒー豆抽出物を得た。生コーヒー豆抽出物を酸味料、甘味料及びその他材料と配合して、クロロゲン酸飲料Ｄを得た。本飲料は、１００ｇ中に茶カテキン０ｍｇ且つクロロゲン酸２１４．８ｍｇ且つカフェイン１９．８ｍｇを含有した。
（３）プラセボ（緑茶風味対照）粉末飲料Ｄ
カフェイン含有粉末、着色料、緑茶風味を呈する香料及びその他材料を混合した後に充填することでプラセボ（緑茶風味対照）粉末飲料Ｄを得た。本飲料は、１００ｇ中に茶カテキン０ｍｇ且つクロロゲン酸０ｍｇ且つカフェイン１１６４ｍｇを含有した。
（４）ミネラルウオーター
ミネラルウオーターとして、「サントリー南アルプスの天然水」（サントリー食品インターナショナル（株）製）を使用した。
【００８１】
【表９】
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【００８２】
調製した飲料中のカテキン類、クロロゲン酸類及びカフェインの定量は、上記と同様の条件で行った。
【００８３】
上記調製した対照飲料、試験飲料の各組成を以下の表１０に示す。
【００８４】
【表１０】
2020158490.tif 000011
【００８５】
試験例４  単回併用摂取試験
〔試験概要〕
（１）被験者及び方法
健常男性１８名（平均年齢４６±９歳、平均体格指数ＢＭＩ２３．３±１．５ｋｇ／ｍ2）を対象に、２つのフェーズからなるランダム化二重盲検クロスオーバープラセボ対照比較デザインにて実施した。被験者は１週間のＲｕｎ−ｉｎ期間後、第１回目の負荷試験を行った。負荷試験は表１０に示す対照飲料４又は試験飲料７のいずれかを摂取した。
負荷試験前日は、試験例１及び試験例２と同じものを使用した。すなわち、規定の朝食（５９５ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝１３／３５／５２、たんぱく質１９．０ｇ、脂質２３．１ｇ、炭水化物７７．６ｇ）、昼食（５８９ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝１６／１８／６３、たんぱく質２３．１ｇ、脂質１１．９ｇ、炭水化物９２．８ｇ）、間食（５１２ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝１１．６／２９．２／５９．１、たんぱく質１４．９ｇ、脂質１６．６ｇ、炭水化物７５．７ｇ）、及び夕食（７１６ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝１４／１８／６９、たんぱく質２４．２ｇ、脂質１４．１ｇ、炭水化物１２２．６ｇ）を２１時までに摂取してその後は絶食させた（飲水可）。
翌日の負荷試験当日は、被験者は完全排尿し、絶飲食で参加した。９時の朝食（試験食）摂取の３０分前に採血を行った。朝食には、市販のレトルト米飯であるサトウのごはんを２個（４００ｇ、５８８ｋｃａｌ、Ｐ／Ｆ／Ｃ＝６／０／９２、たんぱく質８．４ｇ、脂質０．０ｇ、炭水化物１３５．６ｇ、佐藤食品工業（株）製）を用いた。７分３０秒毎に試験食１／２と水１／２ずつを摂取し、試験食と水１００ｍＬを１５分間で完食した。朝食後１０分以内に対照飲料４、又は試験飲料７を摂取した後、再度血液検査を行った。約１週間のウォッシュアウト期間を設け、摂取飲料を変えて再び負荷試験を行った。試験参加期間中は、試験飲料以外の緑茶・コーヒーの摂取を１日１杯以内に、また、カテキン類・クロロゲン酸高濃度含有飲料の飲用、特定保健用食品・機能性表示食品・ビタミン類及びミネラル類をサプリメントの摂取は控えさせた。試験食以外は普段の食生活を維持させた。
【００８６】
採血は全て上腕静脈から行った。ａｃｔｉｖｅ  ＧＬＰ−１の測定はＥＬＩＳＡ  Ｋｉｔ（ａｃｔｉｖｅ  ＧＬＰ−１：株式会社  免疫生物研究所）を用いて測定した。
血中ＧＬＰ−１濃度の有意差の検定は、群間の比較を対応のあるｔ検定で評価した。また、後掲のＧＬＰ−１  ＡＵＣの有意差の検定は、群間の比較を対応のあるｔ検定で評価した。有意水準は５％以下とした（＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．００１、試験飲料４ｖｓ．対照飲料７）。有意差の検定には統計解析ソフト（ＳＰＳＳ  ２４、ＩＢＭ）を使用した。得られた数値は平均値±標準誤差で示した。
【００８７】
（２）結果
（血中ＧＬＰ−１分泌亢進作用）
試験食摂取１２０分後のＧＬＰ−１の血中濃度を表１１に示す。
空腹時（試験食摂取の３０分前、０分）及び食後３０分、６０分、９０分、１２０分、２４０分の血中ＧＬＰ−１濃度を用いて血中濃度-時間曲線下面積（AUC：area underthe blood concentration time curve）を求めた。結果を図６に示す。ＡＵＣの計算方法は以下のとおりである。
（0分値＋30分値）×30/2＋（30分値＋60分値）×30/2＋（60分値＋90分値）×30/2＋（90分値＋120分値）×30/2+（120分値＋240分値）×120/2
以上の計算方法により、試験飲料７摂取によるＧＬＰ−１ ＡＵＣを算出し、対照飲料４摂取時と比較してどの程度の減少率なのかを調べた。
その結果、試験飲料７を摂取した場合のＧＬＰ−１ ＡＵＣは対照飲料４と比較して１．９％であり、有意な上昇ではなかった。さらに、図６に示すように、試験飲料７を摂取した場合と対照飲料４を摂取した場合を比べるとＧＬＰ−１  ＡＵＣに統計学的な差はなかった。試験例４では、脂質を含まない食事（あくまで試験上のモデル食事であって通常の食事では脂質を含む）を摂取しており、カテキン類とクロロゲン酸類を併用摂取したとしても、試験例１〜試験例３に示したカテキン類とクロロゲン酸類を併用摂取することによるＧＬＰ−１の分泌を促進する効果はなかった。このことから、カテキン類及びクロロゲン酸類と共に脂質を略同時に摂取することが、ＧＬＰ−１分泌促進効果の発現に必要であると示唆された。
【００８８】
【表１１】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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