(57)【要約】  【課題】本発明は、新規なアセチルコリンエステラーゼ阻害剤を探索し、提供することを課題とした。  【解決手段】木クレオソートを有効成分とする、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤を提供する。【選択図】図１
2020164463.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
木クレオソートを有効成分とするアセチルコリンエステラーゼ阻害剤。
【請求項２】
請求項１に記載の木クレオソートを有効成分とするアセチルコリンエステラーゼ阻害剤を含む医薬組成物又は食品組成物。
【請求項３】
請求項２に記載の組成物であって、
経口投与用または直腸内投与用であり、有効成分であるクレオソートの投与量が、１日あたり体重１ｋｇに対して０．１〜５００ｍｇとなるように調製してある、
組成物。
【請求項４】
請求項２に記載の組成物であって、
非経口投与用であり、有効成分であるクレオソートの投与量が、１日あたり体重１ｋｇに対して０．２〜３００ｍｇとなるように調製してある、
組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、木クレオソートを含むアセチルコリンエステラーゼ阻害剤、および、その各種用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
アセチルコリンは、副交感神経や運動神経の末端から放出され、神経刺激を伝える神経伝達物質である。アセチルコリンは、コリンアセチルトランスフェラーゼ（ＣｈＡＴ）によって合成され、アセチルコリンエステラーゼ（ＡＣｈＥ）によって分解されることで、体内に一定の濃度に保たれている。
【０００３】
生体の局所においてアセチルコリン濃度が低下すると、コリン作動性神経の伝達が不十分となる。例えば、脳におけるこのような状態は、学習機能の低下やアルツハイマー認知症発症の原因の一つと考えられている。コリンエステラーゼ阻害剤であるドネペジル（商品名アリセプト）はアルツハイマー認知症の治療薬として用いられている。
【０００４】
他にも、例えば、排尿障害に対して臭化ジスチグミンが、重症筋無力症に対して臭化ジスチグミンや塩化アンベノニウムが、全身麻酔時の筋弛緩薬に対する拮抗薬としてネオスチグミンやエドロホニウムが、治療目的として使用されている。これらはいずれも、アセチルコリンエステラーゼ阻害作用により神経末端のアセチルコリンの濃度を上昇させることで、病態の改善効果を狙った薬剤である。
【０００５】
しかしながら、これらのアセチルコリンエステラーゼ阻害剤に共通する副作用として、嘔吐、悪心、下痢など消化器症状が指摘されており、より副作用の少ない薬剤の探索が進められている（例えば、特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１６−２０４２７４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、新規なアセチルコリンエステラーゼ阻害剤を探索し、提供することを課題とした。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、止瀉薬としての効果が知られている木クレオソートが、驚くべきことに、アセチルコリンエステラーゼ阻害作用を有することを発見し、本発明を完成させるに到った。
【０００９】
すなわち本発明は、木クレオソートを有効成分とするアセチルコリンエステラーゼ阻害剤に関する。
【００１０】
本発明の一実施形態は、木クレオソートを有効成分とするアセチルコリンエステラーゼ阻害剤を含む医薬組成物又は食品組成物であることを特徴とする。
【００１１】
本発明の一実施形態は、経口投与用または直腸内投与用であり、有効成分であるクレオソートの投与量が、１日あたり体重１ｋｇに対して０．１〜５００ｍｇとなるように調製してある、組成物であることを特徴とする。
【００１２】
本発明の一実施形態は、非経口投与用であり、有効成分であるクレオソートの投与量が、１日あたり体重１ｋｇに対して０．２〜３００ｍｇとなるように調製してある、組成物であることを特徴とする。
【００１３】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とする重症筋無力症の治療用または進行抑制用の医薬組成物または食品組成物に関する。
【００１４】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とする緑内障の治療用または進行抑制用の医薬組成物または食品組成物に関する。
【００１５】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とするアルツハイマー型認知症の治療用または進行抑制用の医薬組成物または食品組成物に関する。
【００１６】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とするレビー小体型認知症の治療用または進行抑制用の医薬組成物または食品組成物に関する。
【００１７】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とするパーキンソン病の治療用または進行抑制用の医薬組成物または食品組成物に関する。
【００１８】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とする、排尿困難の治療用または進行抑制用の医薬組成物または食品組成物に関する。
【００１９】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とする、排便困難の治療用または進行抑制用の医薬組成物または食品組成物に関する。
【００２０】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とする、機能性ディスペプシアの治療用または進行抑制用の医薬組成物または食品組成物に関する。
【００２１】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とする、抗コリン薬中毒の解毒のための医薬組成物または食品組成物に関する。
【００２２】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とする、非脱分極筋弛緩薬の抑制のための医薬組成物または食品組成物に関する。
【００２３】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とする、明晰夢の発生率増加のための医薬組成物または食品組成物に関する。
【００２４】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とする、統合失調症患者の認知障害の治療のための医薬組成物または食品組成物に関する。
【００２５】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とする、除草剤に関する。
【００２６】
本発明の他の実施形態は、木クレオソートを有効成分とする、殺虫剤（昆虫または線虫の殺虫剤）に関する。
【００２７】
上記に挙げた本発明の一又は複数の特徴を任意に組み合わせた発明も、本発明の範囲に含まれる。
【発明の効果】
【００２８】
本発明のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、アセチルコリンエステラーゼ阻害活性に基づく薬効のみならず、木クレオソートの止瀉作用によって、既存のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤の副作用（消化器症状）も低減し得る。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】図１は、各濃度における木クレオソートのアセチルコリンエステラーゼ阻害活性をプロットしたグラフを示す。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
本発明は、木クレオソートを有効成分とするアセチルコリンエステラーゼ阻害剤、および、その各種用途に関する。
【００３１】
木クレオソート
本発明の有効成分である木クレオソート自体は従来から公知であり、日本薬局方、米国のナショナル  フォーミュラリー（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ）等に収載されている。本発明の有効成分である木クレオソートは、ブナ、カシ、モミジ、マツ等の樹木、特に広葉樹から得られる木タールを蒸留し、分留により２００〜２３０℃程度（７６０ｍｍＨｇ）の留分を集めて得られるいわゆる木クレオソート（ウッドクレオソート）であり、石炭タールから得られるクレオソートとは明確に区別されているものである（Ｎ．  Ｏｇａｔａ  ａｎｄ  Ｔ．  Ｂａｂａ，  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍｕｎ．  Ｃｈｅｍ．  Ｐａｔｈｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ６６，  ４１１-４２３，  １９８９））。
【００３２】
本発明の有効成分である木クレオソートは、グアヤコール（ｇｕａｉａｃｏｌ）、クレオソール（ｃｒｅｏｓｏｌ）、フェノール（ｐｈｅｎｏｌ）、ｐ−クレゾール（ｐ−ｃｒｅｓｏｌ）、４−エチルグアヤコール（４−ｅｔｈｙｌｇｕａｉａｃｏｌ）、ｏ−クレゾール（ｏ−ｃｒｅｓｏｌ）等を含む、無色〜淡黄色の液体である。
【００３３】
製剤（形態）
本発明においては、上記木クレオソートが一般的な医薬組成物（例えば、医療用薬剤）または食品組成物（例えば、サプリメント）の形態で用いられる。すなわち、薬学的に許容され、通常使用される賦形剤ないし希釈剤を用いて常法に従い調製され、治療目的に応じて各種の形態とすることができる。その代表的なものとしては、錠剤、丸剤、散剤、カプセル剤、ソフトカプセル剤、顆粒剤、内服液剤等の経口投与に適した剤形、注射剤等の血管内投与、筋肉内投与、皮下又は皮内投与等に適した剤形及び坐剤等の直腸内投与に適した剤形等を挙げることができる。
【００３４】
錠剤、顆粒剤、散剤の形態に調製する際には、公知の担体を広く使用でき、例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、澱粉、結晶セルロース等の賦形剤、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ゼラチン、トラガント、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム等の結合剤、例えば、澱粉、カルボキシメチルセルロース、炭酸カルシウム等の崩壊剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸等の滑沢剤が使用できる。錠剤には、必要に応じて、通常の剤皮を施すこともでき、例えば、糖衣錠、フィルムコーティング錠等とすることができ、さらに二層錠、多層錠としてもよい。また、顆粒剤や散剤も通常の剤皮を施すことができる。
【００３５】
丸剤の形態に調製する場合も、この分野で従来から公知の各種担体を用いることができ、例えば、甘草末、ブドウ糖、小麦粉等の賦形剤、例えば、グリセリン、水シロップ、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン等の結合剤、薬用酵母、アロールート、ラミナリア末等の崩壊剤等が使用できる。
【００３６】
カプセル剤の形態に調製するには、この分野で従来から公知の各種担体、例えば、乳糖、オリーブ油、大豆油等の賦形剤が使用できる。
【００３７】
内用液剤は、水性又は油性懸濁液、溶液、シロップ、その他の形態であってもよい。このような液体製剤には、普通に用いられる添加剤、例えば、懸濁化剤、例えば、ソルビットシロップ、メチルセルロース、ゼラチン、カルボキシメチルセルロース、乳化剤、例えば、レシチン、モノオレフィン酸ソルビタン、アラビアゴム等が使用できる。
【００３８】
注射剤の形態に調製するには、組成物は、懸濁液、溶液、油性又は水性ビヒクル中の乳液のような形態であってもよく、懸濁化剤、安定化剤及び分散剤のような処方剤を含んでいてもよい。
【００３９】
坐剤の形態に調製するには、公知の担体を広く使用できる。例えば、カカオ脂、グリセロゼラチン、マクロゴール等の基剤が使用できる。坐剤には必要に応じて乳化剤、懸濁化剤が使用できる。更に本発明の薬剤には、必要に応じて着色剤、香味剤等を添加することもできる。
【００４０】
本発明の医薬組成物または食品組成物中に有効成分として含有される木クレオソートの量は特に制限されず、製剤の形態等に応じて適宜選択すればよいが、一般には、製剤全重量の０．２〜６０％程度が好ましい。
【００４１】
本発明の医薬組成物または食品組成物の投与量は、患者の性別、年齢、体重、症状の程度等により適宜選択されるが、一般に、経口投与及び直腸内投与の場合には、成人に対し、有効成分である木クレオソートを１日当たり体重１ｋｇに対して０．１〜５００ｍｇ程度、好ましくは２〜１００ｍｇ程度、より好ましくは２〜２５ｍｇ程度とすればよい。注射剤として非経口的に投与する場合は、同じく成人に対し、有効成分である木クレオソートを１日当たり体重１ｋｇに対して０．２〜３００ｍｇ程度、好ましくは０．２〜５０ｍｇ程度、より好ましくは０．５〜５ｍｇ程度とすればよい。なお、これらを１日２〜４回程度に分けて投与してもよい。
【００４２】
具体的な用途
本発明のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、さらに様々な具体的な用途に利用し得る。例えば、本発明のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、既に他のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤による治療効果が確認されている、重症筋無力症、緑内障、アルツハイマー型認知症、レビー小体型認知症、パーキンソン病、排尿・排便困難、機能性ディスペプシア、等の治療のために用いることができる。また、本発明のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、抗コリン薬中毒の解毒、非脱分極筋弛緩薬の抑制、明晰夢の発生率増加、統合失調症患者の認知障害の治療、等のために用いることもできる。さらに、本発明のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、その作用機序から、除草剤や殺虫剤（例えば、虫の駆除のための殺虫剤）として用いることもできる。
【００４３】
本明細書において用いられる用語は、特定の実施態様を説明するために用いられるのであり、発明を限定する意図ではない。
【００４４】
また、本明細書において用いられる「含む」との用語は、文脈上明らかに異なる理解をすべき場合を除き、記載された事項（部材、ステップ、要素または数字等）が存在することを意図するものであり、それ以外の事項（部材、ステップ、要素または数字等）が存在することを排除しない。
【００４５】
異なる定義が無い限り、ここに用いられるすべての用語（技術用語および科学用語を含む。）は、本発明が属する技術の当業者によって広く理解されるのと同じ意味を有する。ここに用いられる用語は、異なる定義が明示されていない限り、本明細書および関連技術分野における意味と整合的な意味を有するものとして解釈されるべきであり、理想化され、または、過度に形式的な意味において解釈されるべきではない。
【００４６】
本発明の実施態様は模式図を参照しつつ説明される場合があるが、模式図である場合、説明を明確にするために、誇張されて表現されている場合がある。
【００４７】
本明細書において、例えば、「１〜１０ｗ／ｗ％」と表現されている場合、当業者は、当該表現が、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０ｗ／ｗ％を個別具体的に指すことを理解する。
【００４８】
本明細書において、成分含有量や数値範囲を示すのに用いられるあらゆる数値は、特に明示がない限り、用語「約」の意味を包含するものとして解釈される。例えば、「１０倍」とは、特に明示がない限り、「約１０倍」を意味するものと理解される。
【００４９】
本明細書中に引用される文献は、それらのすべての開示が、本明細書中に援用されているとみなされるべきであって、当業者は、本明細書の文脈に従って、本発明の精神および範囲を逸脱することなく、それらの先行技術文献における関連する開示内容を、本明細書の一部として援用して理解する。
【実施例】
【００５０】
＜実験材料＞
１．被験物質
１．１  被験物質１
名称：木クレオソート（以下ＷＣと記載）
分子量：混合物のため分子量表記なし
入手先：大幸薬品株式会社
保存条件：冷蔵（４℃），遮光
【００５１】
１．２  被験物質２（ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｃｏｎｔｒｏｌ）
名称：ガランタミン臭化水素酸塩（以下ＧＡＬと記載）
分子量：３６８．３
製品番号：Ｇ１６６０−２ＭＧ
入手先：Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ
保存条件：冷凍（−２０℃）
【００５２】
＊ガランタミン（ｇａｌａｎｔａｍｉｎｅ）はアセチルコリンエステラーゼ阻害作用を有する物質として知られており、軽−中度のアルツハイマー病や記憶障害の治療に用いられている。
【００５３】
２．試薬
２．１  ＡｃｈＥ酵素
名称：Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ  ｆｒｏｍ  Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｕｓ  ｅｌｅｃｔｒｉｃｕｓ（ｅｌｅｃｔｒｉｃ  ｅｅｌ）Ｔｙｐｅ  ＶＩ−Ｓ
製品番号：Ｃ３３８９−５００ＵＮ
入手先：Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ
保存条件：冷凍（−２０℃）
【００５４】
２．２  ＡｃｈＥ活性測定キット
名称：Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ
製品番号：ＭＡＫ１１９
入手先：Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ
保存条件：室温
【００５５】
２．３  溶媒
名称：ＵｌｔｒａＰｕｒｅ  １Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣＬ  ｐＨ７．５
製品番号：１５５６７−０２７
入手先：Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ
保存条件：冷蔵（４℃）
【００５６】
２．４  水
超純水製造装置うるぴゅあにて精製したものを使用（以後超純水と略す）
【００５７】
３．使用機器・器具
３．１  電子天秤
型式：ＡＵＸ１２０
メーカー：ＳＨＩＭＡＤＺＵ
【００５８】
３．２  ピペット
型式：ｐｉｐｅｔｍａｎ  Ｐシリーズ
メーカー：ＧＩＬＳＯＮ
【００５９】
３．２  連続分注器（マルチチャンネルピペット）
型式：ｐｉｐｅｔｍａｎ  Ｎｅｏシリーズ
メーカー：ＧＩＬＳＯＮ
【００６０】
３．３  恒温水槽
型式：ＢＦ４００
メーカー：ヤマト科学
【００６１】
３．４  冷凍冷蔵庫
型式：ＧＲ−３８ＮＤ
メーカー：ＴＯＳＨＩＢＡ
【００６２】
３．５  マイクロプレートリーダー
型式：ＳＨ−９０００Ｌａｂ
メーカー：ＣＯＲＯＮＡ  ＥＬＥＣＴＲＩＣ
【００６３】
３．６  ９６ウェルマイクロプレート
型式：３５３０７２
メーカー：ＦＡＬＣＯＮ
【００６４】
＜試験方法＞
１．  被験物質１溶液の調製
ＷＣを秤量し、超純水へ溶解することで５ｍｇ／ｍＬの濃度に調製し、被験物質１溶液とした。
【００６５】
２．  被験物質２溶液の調製
ＧＡＬを秤量し、１ｍｇ／ｍＬの濃度となるように超純水へ溶解した。その後、更に超純水にて１．２５倍希釈することで８００μｇ／ｍＬの濃度に調製し、被験物質２溶液とした。
【００６６】
３．  ＡｃｈＥ酵素溶液の調製
ＡｃｈＥ酵素（凍結乾燥粉末品）２ｍｇ（５００ｕｎｉｔｓ）を２０ｍＭの濃度に調製したＴｒｉｓ−ＨＣＬＢｕｆｆｅｒ  ｐＨ７．５  ２ｍＬに溶解した。その後、更に超純水にて３０倍希釈し、３３．３μｇ／ｍＬの濃度に調製した。
【００６７】
４．  ＡｃｈＥ活性測定用Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎの調製
ＡｃｈＥ活性測定キットに含まれているＲｅａｇｅｎｔ  ２ｍｇを秤量し、Ａｓｓａｙ  Ｂｕｆｆｅｒ２００ｍＬに溶解し、Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎとした。
【００６８】
５．  測定手順
５．１  被験物質１（ＷＣ）のＡｃｈＥ活性測定
以下の順序に従い測定を実施した。
１）ＡｃｈＥ酵素溶液（３３．３μｇ／ｍＬ）を被験物質１溶液（５ｍｇ／ｍＬ）、超純水と以下の表１に従い混合する。
【表１】
2020164463.tif 000003
２）恒温水槽にて３７℃で１０分間反応させる。
３）９６ウェルマイクロプレートの４ウェル（ｎ＝４）に超純水を２００μＬずつ加える。（Ｂｌａｎｋウェル）
４）手順３）とは別の４ウェル（ｎ＝４）にＡｃｈＥ活性測定キットに含まれているＣａｌｉｂｒａｔｏｒ  を２００μＬずつ加える。（Ｃａｌｉｂｒａｔｏｒウェル）
５）さらに別の２４ウェル（６ｓａｍｐｌｅｓ×４）にＷｏｒｋｉｎｇ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎを１９０μＬずつ加える。（Ｓａｍｐｌｅウェル）
６）Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎを加えたウェルに手順２）にて得られたＮｏ．１〜６の反応後溶液をそれぞれ４ウェル（ｎ＝４）ごとに１０μＬずつ加える。
７）プレートを軽くタップして混合し、２分間室温で反応させた後にマイクロプレートリーダーにて４１２ｎｍにおける吸光度を測定する。
８）さらに８分間室温で反応させた（合計１０分間）後に４１２ｎｍにおける吸光度を測定する。
【００６９】
５．２  被験物質２（ＧＡＬ）のＡｃｈＥ活性測定
以下の順序に従い測定を実施した。
１）ＡｃｈＥ酵素溶液（３３．３μｇ／ｍＬ）を被験物質２溶液（８００μｇ／ｍＬ）、超純水と以下の表２に従い混合する。
【表２】
2020164463.tif 000004
２）恒温水槽にて３７℃で１０分間反応させる。
３）９６ウェルマイクロプレートの４ウェル（ｎ＝４）に超純水を２００μＬずつ加える。（Ｂｌａｎｋウェル）
４）手順３）とは別の４ウェル（ｎ＝４）にＡｃｈＥ活性測定キットに含まれているＣａｌｉｂｒａｔｏｒを２００μＬずつ加える。（Ｃａｌｉｂｒａｔｏｒウェル）
５）さらに別の２４ウェル（６ｓａｍｐｌｅｓ×４）にＷｏｒｋｉｎｇ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎを１９０μＬずつ加える。（Ｓａｍｐｌｅウェル）
６）Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎを加えたウェルに手順２）にて得られたＮｏ．１〜６の反応後溶液をそれぞれ４ウェル（ｎ＝４）ごとに１０μＬずつ加える。
７）プレートを軽くタップして混合し、２分間室温で反応させた後にマイクロプレートリーダーにて４１２ｎｍにおける吸光度を測定する。
８）さらに８分間室温で反応させた（合計１０分間）後に４１２ｎｍにおける吸光度を測定する。
【００７０】
６．  データ処理
得られた吸光度の値を用いて下記式よりＡｃｈＥ  Ａｃｔｖｉｔｙ（ｕｎｉｔｓ／ｍＬ）を算出し、各被験物質の各濃度におけるＡｃｈＥ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  （ｕｎｉｔｓ／ｍＬ）の平均値と標準偏差を算出した。
【数１】
2020164463.tif 000005
（Ａ４１２）ｆｉｎａｌ：１０分間反応後の４１２ｎｍにおける吸光度の値
（Ａ４１２）ｉｎｉｔｉａｌ：２分間反応後の４１２ｎｍにおける吸光度の値
ｎ：希釈係数（ｎ＝１２０）
０．２：Ｃａｌｉｂｒａｔｏｒによる係数
【００７１】
また、被験物質の各濃度におけるＡｃｈＥ  Ａｃｔｉｖｉｔｙを用いてＧｒａｐｈＰａｄ  ＰｒｉｓｍによりＯｎｅ  ｐｈａｓｅ  ｅｘｐｏｎｅｎｔｉａｌ  ｄｅｃａｙ曲線を求め、ＩＣ５０値（ｍｇ／ｍＬ）を算出した。
【００７２】
＜試験結果＞
１．  木クレオソート（ＷＣ）のアセチルコリンエステラーゼ活性
以下に被験物質１（ＷＣ）、被験物質２（ＧＡＬ）の各ウェルで得られたＡｃｈＥ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ（ｕｎｉｔｓ／ｍＬ）の平均値及び標準偏差の値を示す。
【表３】
2020164463.tif 000006
【表４】
2020164463.tif 000007
【００７３】
２．  ＩＣ５０の算出
得られた被験物質１の各濃度におけるＡｃｈＥ  Ａｃｔｉｖｉｔｙの値を用いて求めた非線形回帰曲線とＩＣ５０値を図１に示す。図１に示すとおり、ＩＣ５０値は０．２７ｍｇ／ｍＬであった。
【００７４】
以上の結果から、木クレオソート（ＷＣ）のアセチルコリンエステラーゼ阻害作用が確認された。さらに、木クレオソートは、既にアセチルコリンエステラーゼ阻害剤として実用されているガランタミン（ＧＡＬ）と比肩しうるアセチルコリンエステラーゼ阻害活性を有することが示された。
【００７５】
＜考察＞
本研究の結果から、木クレオソートには優れたアセチルコリンエステラーゼ阻害作用を有することが示された。この結果は、木クレオソートが、アセチルコリンエステラーゼに起因する様々な疾患や状態の治療や改善のために用い得ることを示唆する。また、木クレオソートは既に止瀉薬として広く使用されている物質であるため、本発明のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、既存のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤に共通する副作用である消化器症状の低減も期待できる。
【図１】
2020164463.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】令和1年8月8日(2019.8.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
木クレオソートを有効成分とする、アセチルコリンエステラーゼ阻害用医薬組成物又はアセチルコリンエステラーゼ阻害用食品組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の組成物であって、
経口投与用または直腸内投与用であり、有効成分であるクレオソートの投与量が、１日あたり体重１ｋｇに対して０．１〜５００ｍｇとなるように調製してある、
組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の組成物であって、
非経口投与用であり、有効成分であるクレオソートの投与量が、１日あたり体重１ｋｇに対して０．２〜３００ｍｇとなるように調製してある、
組成物。