(57)【要約】      （修正有）【課題】培地の種類ごとに各液の分注条件を調整する必要性を排除し、分注条件の設定作業を容易にする。【解決手段】培地処理システムは、濾過容器５０と回収容器５４からなる抽出デバイスが配置される抽出デバイス配置部１２と、試料容器６が配置される試料容器配置部２と、試薬容器１０が配置される試薬容器配置部８と、試料容器６から試料を採取し試料分注位置３２に配置された濾過容器５０に分注するように構成された試料分注部２０と、試薬容器１０から試薬を採取し試薬分注位置３２に配置された濾過容器５０に分注するように構成された試薬分注部２６と、濾過ポートに設置された抽出デバイスの濾過容器５０内の溶液の濾過処理を行なって回収容器５４に回収するための濾過部３０と、濾過容器５０及び／又は回収容器５４を保持し、試料分注位置３２、試薬分注位置３２及び濾過部３０へ搬送するように構成された搬送アーム２４と、制御部１００と、を備える。【選択図】図１
2020176914.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
上方が開放され、細胞培養のための培地の除タンパク処理を行なうための濾過フィルタを内部に有するとともに前記濾過フィルタを通過した濾液を下方へ抽出するための抽出口を下端に有する濾過容器、及び前記濾過容器の直下に配置されて前記濾過容器の前記抽出口から抽出された濾液を回収するための回収容器からなる抽出デバイスが空の状態で配置される抽出デバイス配置部と、
除タンパク処理を施すべき培地を試料として収容する試料容器が配置される試料容器配置部と、
少なくともメタノール溶液、アセトニトリル溶液をそれぞれ試薬として収容する試薬容器が配置される試薬容器配置部と、
前記試料容器配置部に配置された試料容器から試料を採取し、所定の試料分注位置に配置された前記濾過容器に採取した試料を分注するように構成された試料分注部と、
前記試薬容器配置部に配置された試薬容器から所望の試薬を採取し、所定の試薬分注位置に配置された前記濾過容器に採取した試薬を分注するように構成された試薬分注部と、
前記濾過容器の直下に前記回収容器が配置された状態の前記抽出デバイスが設置される濾過ポートを有し、前記濾過ポートに設置された前記抽出デバイスの前記濾過容器内の溶液の濾過処理を行なって濾液を前記回収容器に回収するための濾過部と、
前記抽出デバイス配置部に配置された前記抽出デバイスの前記濾過容器及び／又は前記濾過容器を保持し、保持した前記濾過容器及び／又は前記濾過容器を前記試料分注位置、前記試薬分注位置及び前記濾過部へ搬送するように構成された搬送アームと、
試料の除タンパク処理を行なうために前記試料分注部、前記試薬分注部及び前記搬送アームの動作を制御するように構成された制御部と、を備え、
前記制御部は、空の前記濾過容器にメタノール溶液を分注して前記濾過フィルタのコンディショニングを行なった後で、前記濾過容器に試料を分注し、前記濾過容器内の試料にアセトニトリル溶液を除タンパク剤として添加し、その後、前記濾過部にて前記濾過処理を行なうように構成されている、培地処理システム。
【請求項２】
前記制御部は、前記試料である培地の種類とは無関係に一定量のメタノール溶液、試料、アセトニトリル溶液を前記濾過容器に分注するように構成されている、請求項１に記載の培地処理システム。
【請求項３】
前記試薬容器配置部には、内部標準溶液を収容する標準溶液容器が配置され、
前記制御部は、前記濾過フィルタのコンディショニングを行なった後で前記濾過容器に試料を分注する前に前記内部標準溶液を前記濾過容器内に分注するように構成されている、請求項１又は２に記載の培地処理システム。
【請求項４】
前記制御部は、前記試料である培地の種類とは無関係に一定量の前記内部標準溶液を前記濾過容器内に分注するように構成されている、請求項３に記載の培地処理システム。
【請求項５】
前記濾過処理により前記回収容器に回収された濾液を一定量だけ吸入し、液体クロマトグラフィー分析用の分析流路に注入する試料注入部、及び、前記試料注入部により前記分析流路に注入された濾液の液体クロマトグラフィー分析を行なうための分析部を有するＬＣ部を備えている、請求項１から４のいずれか一項に記載の培地処理システム。
【請求項６】
前記試料注入部は、前記回収容器から吸入した一定量の濾液を所定の倍率に希釈するように構成されている、請求項５に記載の培地処理システム。
【請求項７】
上方が開放され、細胞培養のための培地の除タンパク処理を行なうための濾過フィルタを内部に有するとともに前記濾過フィルタを通過した濾液を下方へ抽出するための抽出口を下端に有する濾過容器、及び前記濾過容器の直下に配置されて前記濾過容器の前記抽出口から抽出された濾液を回収するための回収容器からなる抽出デバイスを用い、
空の前記濾過容器にメタノール溶液を分注して前記濾過フィルタのコンディショニングを行なうコンディショニングステップと、
前記濾過容器に試料である培地を分注する試料分注ステップと、
前記濾過容器内の試料にアセトニトリル溶液を除タンパク剤として添加する除タンパク剤分注ステップと、
前記濾過容器の直下に前記回収容器が配置された状態で前記濾過容器内の溶液の濾過処理を行ない、濾液を前記回収容器に回収する濾過ステップと、をその順に実行する、培地処理方法。
【請求項８】
前記コンディショニングステップにおいて前記濾過容器に分注するメタノール溶液の量、前記試料分注ステップにおいて前記濾過容器に分注する試料の量、前記除タンパク剤分注ステップにおいて前記濾過容器に分注するアセトニトリル溶液の量はそれぞれ、前記試料である培地の種類とは無関係に一定である、請求項７に記載の培地処理方法。
【請求項９】
前記コンディショニングステップの後で前記試料分注ステップの前に内部標準溶液を前記濾過容器内に分注する標準溶液分注ステップを実行する、請求項７又は８に記載の培地処理方法。
【請求項１０】
前記標準溶液分注ステップにおいて前記試料である培地の種類とは無関係に一定量の前記内部標準溶液を前記濾過容器内に分注する、請求項９に記載の培地処理方法。
【請求項１１】
前記濾過ステップの後で、前記濾過ステップにより前記回収容器に回収された濾液を一定量だけ吸入し、液体クロマトグラフィー用の分析流路中に注入する注入ステップと、
前記濾液注入ステップにより前記分析流路中に注入された濾液の液体クロマトグラフィー分析を行なう分析ステップと、を実行する、請求項７から１０のいずれか一項に記載の培地処理方法。
【請求項１２】
前記注入ステップにおいて、前記回収容器に回収された濾液を一定量だけ吸入した後、所定の倍率で前記濾液を希釈する、請求項１１に記載の培地処理方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞を培養するための培地の除タンパク処理を行なうための培地処理システム及び培地処理方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
培養している細胞の状態（分化／未分化など）を判定するために、細胞培養中の容器から培地の上澄み液を採取し、その培地に除タンパク処理を施してから液体クロマトグラフィー分析を行なうことがある。培地の除タンパク処理を行なうために、特許文献１に開示されているような前処理装置が用いられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】ＷＯ２０１６／０１７０４２Ａ１
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
培地の除タンパク処理は、濾過フィルタが内部に設けられた濾過容器を用いて行なう。具体的には、濾過容器にコンディショニング剤を分注して濾過フィルタのコンディショニング処理を行なってから、濾過容器に内部標準試料、試料である培地、除タンパク剤を分注して撹拌し、その後、濾過容器内に圧力を付加して濾過容器内の液に濾過フィルタを通過させ、濾液を回収容器に回収する。
【０００５】
これまでの除タンパク処理では、コンディショニング剤及び除タンパク剤として同じ種類の有機溶媒が用いられていたが、細胞の培養に用いる培地は細胞の種類によって異なるため、得られる濾液の量（回収率）は培地の種類によって異なっていた。そのため、従来は、培地の種類に応じて、測定に準備する培地の液量を多く準備する必要があった。しかしながら、培養に使用する培地は少量である場合もあり、測定に必要な培地の液量を準備するのが困難な場合もあった。。
【０００６】
本発明は上記問題に鑑みてなされたものであり、濾液の回収率を向上させ、測定に使用する培地の液量をできる限り少量にできるようにすることを目的とする。。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、除タンパク処理において、コンディショニング剤としてメタノール溶液を用い、除タンパク剤としてアセトニトリル溶液を用いることで、培地の種類とは無関係に高い回収率が得られることを見出した。本発明はこのような知見に基づいてなされている。
【０００８】
本発明にかかる培地処理システムは、上方が開放され、細胞培養のための培地の除タンパク処理を行なうための濾過フィルタを内部に有するとともに前記濾過フィルタを通過した濾液を下方へ抽出するための抽出口を下端に有する濾過容器、及び前記濾過容器の直下に配置されて前記濾過容器の前記抽出口から抽出された濾液を回収するための回収容器からなる抽出デバイスが空の状態で配置される抽出デバイス配置部と、除タンパク処理を施すべき培地を試料として収容する試料容器が配置される試料容器配置部と、少なくともメタノール溶液、アセトニトリル溶液をそれぞれ試薬として収容する試薬容器が配置される試薬容器配置部と、前記試料容器配置部に配置された試料容器から試料を採取し、所定の試料分注位置に配置された前記濾過容器に採取した試料を分注するように構成された試料分注部と、前記試薬容器配置部に配置された試薬容器から所望の試薬を採取し、所定の試薬分注位置に配置された前記濾過容器に採取した試薬を分注するように構成された試薬分注部と、前記濾過容器の直下に前記回収容器が配置された状態の前記抽出デバイスが設置される濾過ポートを有し、前記濾過ポートに設置された前記抽出デバイスの前記濾過容器内の溶液の濾過処理を行なって濾液を前記回収容器に回収するための濾過部と、前記抽出デバイス配置部に配置された前記抽出デバイスの前記濾過容器及び／又は前記濾過容器を保持し、保持した前記濾過容器及び／又は前記濾過容器を前記試料分注位置、前記試薬分注位置及び前記濾過部へ搬送するように構成された搬送アームと、試料の除タンパク処理を行なうために前記試料分注部、前記試薬分注部及び前記搬送アームの動作を制御するように構成された制御部と、を備え、前記制御部は、空の前記濾過容器にメタノール溶液を分注して前記濾過フィルタのコンディショニングを行なった後で、前記濾過容器に試料を分注し、前記濾過容器内の試料にアセトニトリル溶液を除タンパク剤として添加し、その後、前記濾過部にて前記濾過処理を行なうように構成されている。
【０００９】
本発明に係る培地処理方法は、上方が開放され、細胞培養のための培地の除タンパク処理を行なうための濾過フィルタを内部に有するとともに前記濾過フィルタを通過した濾液を下方へ抽出するための抽出口を下端に有する濾過容器、及び前記濾過容器の直下に配置されて前記濾過容器の前記抽出口から抽出された濾液を回収するための回収容器からなる抽出デバイスを用い、空の前記濾過容器にメタノール溶液を分注して前記濾過フィルタのコンディショニングを行なうコンディショニングステップと、前記濾過容器に試料を分注する試料分注ステップと、前記濾過容器内の試料にアセトニトリル溶液を除タンパク剤として添加する除タンパク剤分注ステップと、前記濾過容器の直下に前記回収容器が配置された状態で前記濾過容器内の溶液の濾過処理を行なって濾液を前記回収容器に回収する濾過ステップと、をその順に実行する。
【発明の効果】
【００１０】
本発明に係る培地処理システムでは、濾過フィルタのコンディショニングを行なうためのコンディショニング剤としてメタノール溶液を用い、除タンパク剤としてアセトニトリル溶液を使用するので、試料である培地の種類とは無関係に高い回収率で濾液を回収することができ、測定に使用する培地の液量をできる限り少量にすることができる。
【００１１】
本発明に係る培地処理方法では、濾過フィルタのコンディショニングを行なうためのコンディショニング剤としてメタノール溶液を用い、除タンパク剤としてアセトニトリル溶液を使用するので、試料である培地の種類とは無関係に高い回収率で濾液を回収することができ、測定に使用する培地の液量をできる限り少量にすることができる。。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】培地処理システムの一実施例の除タンパク処理部を示す平面図である。
【図２Ａ】同実施例で使用される抽出デバイスの濾過容器の一例を示す正面図である。
【図２Ｂ】図２Ａの濾過容器の断面図である。
【図３Ａ】同抽出デバイスの回収容器の一例を示す正面図である。
【図３Ｂ】図３Ａの回収容器の断面図である。
【図４】同実施例の培地処理システムの動作を説明するためのフローチャートである。
【図５】同実施例の培地処理システム全体の構成の一例を示す概略構成図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、培地処理システム及び培地処理方法の一実施例について説明する。
【００１４】
図１に培地処理システムの除タンパク処理部の一例を示す。
【００１５】
除タンパク処理部１は、濾過容器５０及び回収容器５４からなる抽出デバイスを用いて培地の除タンパク処理を行なう。濾過容器５０及び回収容器５４は搬送アーム２４によって搬送される。搬送アーム２４は先端側に濾過容器５０及び回収容器５４を保持するための保持部２５を有し、保持部２５が円弧状の軌道を描くようにその基端部を保持する鉛直軸２９を回転中心として水平面内において回転する。
【００１６】
試料である培地を収容した試料容器６を設置するための試料容器配置部２が設けられ、その近傍に試料容器配置部２に設置された試料容器６から培地を吸入して濾過容器５０に分注するためのサンプリングアーム２０（試料分注部）が設けられている。試料容器配置部２には複数の試料容器６を保持するサンプルラック４が円環状に設置される。試料容器配置部２はサンプルラック４をその周方向に移動させるように水平面内において回転し、試料容器配置部２の回転によって所望の試料容器６が所定の吸入位置に配置されるようになっている。吸入位置とは、サンプリングアーム２０の先端のサンプリングノズル２１の軌道に沿った位置であって、サンプリングノズル２１により培地を吸入するための位置である。
【００１７】
サンプリングアーム２０は、基端部を鉛直軸２２が貫通し、軸２２を中心とする水平面内での回転動作及び軸２２に沿った鉛直方向への上下動を行なう。サンプリングノズル２１はサンプリングアーム２０の先端側でその先端が鉛直下方向を向くように保持されており、サンプリングアーム２０によって水平面内における円弧状の軌道を描く移動と鉛直方向への上下動を行なう。
【００１８】
サンプリングノズル２１の軌道上で、かつ搬送アーム２４の保持部２５の軌道上の位置に分注ポート３２が設けられている。分注ポート３２は空の濾過容器５０に対してサンプリングノズル２１が培地を分注するための試料分注位置である。空の濾過容器５０は搬送アーム２４によって分注ポート３２に設置される。また、分注ポート３２は、培地を収容した濾過容器５０に種々の試薬を添加するための試薬分注位置でもある。
【００１９】
試料容器配置部２の内側に、試薬容器１０を設置するための試薬容器配置部８が設けられ、試薬容器配置部８に配置された試薬容器１０から試薬を採取するための試薬アーム２６（試薬分注部）が設けられている。試薬アーム２６は基端が搬送アーム２４と共通の鉛直軸２９によって支持されており、水平面内において回転するとともに上下動を行なうようになっている。試薬アーム２６の先端部に試薬ノズル２７が設けられている。試薬ノズル２７はその先端が鉛直下方向を向いた状態で設けられており、搬送アーム２４の保持部２５と同一の円弧状の軌道を描く水平面内の移動と上下動を行なう。試薬ノズル２７の基端は液の吸入と吐出を行なうシリンジポンプに接続されており、先端から試薬の吸入と吐出を行なうものである。
【００２０】
試薬容器配置部８は試料容器配置部２とは独立して水平面内で回転する。試薬容器配置部８には複数の試薬容器１０が円環状に配置され、試薬容器配置部８が回転することによって試薬容器１０がその回転方向に搬送され、所望の試薬容器１０が所定の試薬採取位置に配置されるようになっている。試薬採取位置とは、試薬アーム２６の試薬ノズル２７の軌道に沿った位置であって、試薬ノズル２７により試薬の吸入を行なうための位置である。試薬ノズル２７は所定の試薬を吸入した後、分注ポート３２に設置された濾過容器５０に対して吸入した試薬を分注する。試薬容器配置部８に配置される試薬には、メタノール溶液、アセトニトリル溶液、内部標準溶液が含まれる。
【００２１】
試料容器配置部２及び試薬容器配置部８とは異なる位置に、抽出デバイス配置部１２が設けられている。抽出デバイス配置部１２は、未使用の濾過容器５０及び回収容器５４が重ねられた状態の複数組の抽出デバイスを円環状に設置するようになっている。抽出デバイス配置部１２は水平面内において回転して抽出デバイスを円周方向に移動させ、任意の一組の抽出デバイスを搬送アーム２４の保持部２５の軌道に沿った位置に配置する。搬送アーム２４は、保持部２５の軌道に沿った位置に配置された未使用の濾過容器５０及び／又は回収容器５４を保持することができる。
【００２２】
抽出デバイスをなす濾過容器５０及び回収容器５４について、図２Ａ、図２Ｂ、図３Ａ及び図３Ｂを用いて説明する。
【００２３】
濾過容器５０は、図２Ａ及び図２Ｂに示されているように、上方が開放された円筒状の容器である。内部空間の底部に濾過フィルタ５２が設けられており、下端に濾過フィルタ５２を通過した濾液を抽出するための抽出口５１が設けられている。濾過フィルタ５２は、試料である培地に含まれるタンパク質を濾過によって除去するためのフィルタであり、ＰＴＦＥ、アクリル共重合体膜などで構成されている。回収容器５４は、図３Ａ及び図３Ｂに示されているように、濾過容器５０の下部を収容し、濾過容器５０の抽出口５１から抽出された濾液を回収するための円筒状の容器である。
【００２４】
図１に戻って説明を続ける。除タンパク処理部１は、濾過部３０、攪拌部３６、温調部３８及び温調部４０を備えている。濾過部３０は、抽出デバイス配置部１２の内側の２ヶ所の位置に設けられている。撹拌部３６は、３つの攪拌ポート３６ａを備えており、攪拌ポート３６ａに設置された濾過容器５０内を攪拌するためのものである。温調部３８は濾過容器５０の温調を行なうためのものであり、温調部４０は回収容器５４の温調を行なうためのものである。温調部３６及び４０は円弧上に並んで配置されている。
【００２５】
濾過部３０は、濾過容器５２の直下に回収容器５４が配置された状態、すなわち、回収容器５４上に濾過容器５２が重ね合わされた状態の抽出デバイスを設置するための濾過ポートを備えている。濾過部３０は、濾過ポートに設置された濾過容器５２内の液に対して圧力（例えば負圧）を付加する機構を備えている。濾過容器５２内の液に対して負圧を付加する機構の構成は、特許文献１に開示されたものと同じであってよい。
【００２６】
撹拌部３６は、各撹拌ポート３６ａを個別に水平面内で周期的に動作させる機構を有し、各撹拌ポート３６ａに配置された濾過容器５０内を撹拌する。攪拌部３６の構成は、特許文献１に開示された攪拌部の構成と同じであってよい。
【００２７】
除タンパク処理部１はさらに、回収容器５４に回収された濾液を除タンパク処理部１に隣接配置されたＬＣ部２００（図５参照）側へ転送するための転送装置４２を備えている。転送装置４２はラックピニオン機構を有する駆動機構により水平面内で一方向（図１の矢印の方向）へ移動する移動部４４を備えている。移動部４４の上面に、濾液を収容した回収容器５４を設置するための転送ポート４３が設けられている。
【００２８】
ＬＣ部２００側への濾液の転送を行なっていないときは、転送ポート４３が搬送アーム２４の保持部２５の軌道に沿う位置（図の実践で示されている位置）に配置され、この位置において、搬送アーム２４による転送ポート４３への回収容器５４の設置や転送ポート４３からの回収容器５４の回収が行われる。
【００２９】
分注ポート３２の近傍で搬送アーム２４の保持部２５の軌道に沿う位置に、使用済みの濾過容器５０及び回収容器５４を廃棄するための廃棄ポート３４が設けられている。また、サンプリングノズル２１の軌道に沿う位置に、サンプリングノズル２１の洗浄を行なうための洗浄ポート４５が設けられている。
【００３０】
除タンパク処理部１の試料容器配置部２、試薬容器配置部８、抽出デバイス配置部１２、サンプリングアーム２０、搬送アーム２４、試薬アーム２６、濾過部３０、攪拌部３６、温調部３８，４０及び転送装置４２の動作は、制御部１００によって制御される。制御部１００は、例えば、除タンパク処理部１に設けられたコンピュータ回路においてプログラムが実行されることにより得られる機能である。
【００３１】
図１とともに図４のフローチャートを用いて、培地の脱タンパク処理からＬＣＭＳ分析までの流れについて説明する。
【００３２】
まず、空の濾過容器５０を搬送アーム２４によって分注ポート３２へ搬送し、濾過容器５０に試薬ノズル２７によってメタノール溶液をコンディショニング剤として分注する（ステップ１０１）。これにより、濾過容器５０内の濾過フィルタ５２のコンディショニングがなされる。メタノール溶液の分注量は、脱タンパク処理を施す培地の種類とは無関係に一定であってよい。その後、濾過容器５０に試薬ノズル２７によって内部標準溶液を分注し（ステップ１０２）、さらにサンプリングノズル２１によって試料である培地を分注する（ステップ１０３）。ここでの内部標準溶液の分注量、試料の分注量も培地の種類とは無関係に一定であってよい。
【００３３】
さらに試薬ノズル２７によってアセトニトリル溶液を除タンパク剤として分注する（ステップ１０４）。ここでの除タンパク剤の分注量は培地の種類とは無関係に一定であってよい。
【００３４】
次に、搬送アーム２４によって、濾過容器５０を攪拌部３６の攪拌ポート３６ａへ搬送し、濾過容器５０内を攪拌する（ステップ１０５）。その後、回収容器５４上に濾過容器５０が重ね合わされた状態となるように搬送アーム２４によって濾過容器５０及び回収容器５４を濾過部３０の濾過ポートへ搬送し、濾過容器５０内の溶液に圧力を付加して濾液を回収容器５４に回収する（ステップ１０６）。濾過処理が終了した後、使用済みの濾過容器５０を搬送アーム２４によって廃棄ポート３４へ搬送して廃棄する。
【００３５】
濾液を回収した回収容器５４を搬送アーム２４によって転送装置４２の転送ポート４３へ搬送し（ステップ１０７）、回収容器５４をＬＣ部２００へ転送する（ステップ１０８）。ＬＣ部２００では、一定量の濾液がサンプリング用のニードルによって吸入され（ステップ１０９）、濾液が所定の倍率に希釈される（ステップ１１０）。希釈された濾液は、液体クロマトグラフィー分析の分析流路に注入され、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣＭＳ分析）が行なわれる（ステップ１１１）。
【００３６】
本発明者らは、濾過フィルタ５２のコンディショニング剤としてメタノール溶液を用い、除タンパク剤としてアセトニトリル溶液を用いることで、高い回収効率をもって濾液が得られるという知見を実験により得ている。その実験データを以下の表１に示す。
【００３７】
【表１】
2020176914.tif 000003
【００３８】
上記実験では、コンディショニング剤（Ｃｏｎ）及び除タンパク剤（Ｄｅｐ）としてメタノール溶液を用いた場合、コンディショニング剤（Ｃｏｎ）及び除タンパク剤（Ｄｅｐ）としてアセトニトリル溶液を用いた場合、コンディショニング剤（Ｃｏｎ）としてメタノール溶液、除タンパク剤（Ｄｅｐ）としてアセトニトリル溶液を用いた場合、のそれぞれについて、各種培地の濾液の回収量（及び回収率）を求めた。いずれの場合も、濾過容器５０にコンディショニング剤を１０〜２０μＬ、内部標準溶液（純水）を２０〜３５μＬ、培地を２０μＬ、除タンパク剤を２４０〜２８０μＬ分注し、濾過容器５０内の溶液総量が３１０〜３３０μＬとなるようにした。
【００３９】
表１からわかるように、コンディショニング剤（Ｃｏｎ）及び除タンパク剤（Ｄｅｐ）としてメタノール溶液を用いた場合、mTeSR1については良好な濾液回収率が得られている一方で、他の３種の培地については回収率が低かった。コンディショニング剤（Ｃｏｎ）及び除タンパク剤（Ｄｅｐ）としてアセトニトリル溶液を用いた場合は、AK03N、FBSの培地については良好な濾液回収率が得られている一方で、他の２種の培地について回収率が低かった。これに対し、コンディショニング剤（Ｃｏｎ）としてメタノール溶液、除タンパク剤（Ｄｅｐ）としてアセトニトリル溶液を用いた場合には、いずれの培地についても良好な濾液回収率が得られている。このことから、コンディショニング剤（Ｃｏｎ）としてメタノール溶液、除タンパク剤（Ｄｅｐ）としてアセトニトリル溶液を用い、培地の種類とは無関係に、コンディショニング剤、培地、内部標準溶液、除タンパク剤のそれぞれの濾過容器５０への分注量を一定にしても、良好な濾液回収率が得られることがわかる。
【００４０】
上記の知見を踏まえ、この実施例では、濾過フィルタ５２のコンディショニング剤としてメタノール溶液を用い、除タンパク剤としてアセトニトリル溶液を用い、培地の種類とは無関係に、コンディショニング剤、培地、内部標準溶液、除タンパク剤のそれぞれの濾過容器５０への分注量を一定としている。これにより、培地の種類ごとにユーザが濾過容器５０へ分注する溶液の種類や量を設定する必要がなく、分注条件の設定が容易である。
【００４１】
次に、除タンパク処理部１を備えた培地処理システム全体の構成の一例について図５を用いて説明する。
【００４２】
上記実施例において説明した除タンパク処理部１に隣接してＬＣ部２００が配置され、さらにそのＬＣ部２００に隣接して質量分析計（ＭＳ）２００が配置されている。除タンパク処理部１、ＬＣシステム２００及びＭＳ３００は、共通のシステム管理装置４００によってその動作管理がなされる。システム管理装置４００は、除タンパク処理部１、ＬＣシステム２００及びＭＳ３００の制御や管理を行なうためのソフトウェアを備えた専用のコンピュータ又は汎用のパーソナルコンピュータである。
【００４３】
ＬＣ部２００は、試料注入部２０２及び分析部２０４を備えている。試料注入装置２０２は、除タンパク処理部１の転送装置４２によりＬＣ部２００側に転送されてきた回収容器５４から一定量の濾液を採取し、採取した濾液を所定の倍率で希釈して、液体クロマトグラフィー分析用の分析流路に注入するように構成されている。転送装置４２の移動部４４がＬＣ部２００側へ移動すると、移動部４４の転送ポート４３に設置された回収容器５４が試料注入装置２０２内の所定の位置に配置されるようになっている。分析部２０４は、試料注入部２０２により注入された濾液の液体クロマトグラフィー分析を行なうように構成されている。
【００４４】
以上において説明した実施例では、培地処理システムが除タンパク処理部１、ＬＣ部２００、ＭＳ３００及びシステム管理装置４００によって構成されているが、本発明はこれに限定されるものではなく、除タンパク処理部１を含む一部の要素によって培地処理システムが構成されていてもよい。本発明に係る培地処理システム及び培地処理方法の実施形態は、以下のとおりである。
【００４５】
本発明に係る培地処理システムの実施形態は、上方が開放され、細胞培養のための培地の除タンパク処理を行なうための濾過フィルタを内部に有するとともに前記濾過フィルタを通過した濾液を下方へ抽出するための抽出口を下端に有する濾過容器、及び前記濾過容器の直下に配置されて前記濾過容器の前記抽出口から抽出された濾液を回収するための回収容器からなる抽出デバイスが空の状態で配置される抽出デバイス配置部と、除タンパク処理を施すべき培地を試料として収容する試料容器が配置される試料容器配置部と、少なくともメタノール溶液、アセトニトリル溶液をそれぞれ試薬として収容する試薬容器が配置される試薬容器配置部と、前記試料容器配置部に配置された試料容器から試料を採取し、所定の試料分注位置に配置された前記濾過容器に採取した試料を分注するように構成された試料分注部と、前記試薬容器配置部に配置された試薬容器から所望の試薬を採取し、所定の試薬分注位置に配置された前記濾過容器に採取した試薬を分注するように構成された試薬分注部と、前記濾過容器の直下に前記回収容器が配置された状態の前記抽出デバイスが設置される濾過ポートを有し、前記濾過ポートに設置された前記抽出デバイスの前記濾過容器内の溶液の濾過処理を行なって濾液を前記回収容器に回収するための濾過部と、前記抽出デバイス配置部に配置された前記抽出デバイスの前記濾過容器及び／又は前記濾過容器を保持し、保持した前記濾過容器及び／又は前記濾過容器を前記試料分注位置、前記試薬分注位置及び前記濾過部へ搬送するように構成された搬送アームと、試料の除タンパク処理を行なうために前記試料分注部、前記試薬分注部及び前記搬送アームの動作を制御するように構成された制御部と、を備え、前記制御部は、空の前記濾過容器にメタノール溶液を分注して前記濾過フィルタのコンディショニングを行なった後で、前記濾過容器に試料を分注し、前記濾過容器内の試料にアセトニトリル溶液を除タンパク剤として添加し、その後、前記濾過部にて前記濾過処理を行なうように構成されている。
【００４６】
本発明に係る培地処理システムの上記実施形態の第１態様では、濾過フィルタのコンディショニングを行なうためのコンディショニング剤としてメタノール溶液を用い、除タンパク剤としてアセトニトリル溶液を使用するので、試料である培地の種類とは無関係に高い回収率で濾液を回収することができる。そのため、本発明に係る培地処理システムの上記実施形態の第１態様では、前記制御部は、前記試料である培地の種類とは無関係に一定量のメタノール溶液、試料、アセトニトリル溶液を前記濾過容器に分注するように構成することができる。このような態様により、培地の種類ごとに各液の分注条件を調整する必要性がなく、分注条件の設定作業が容易である。
【００４７】
本発明に係る培地処理システムの上記実施形態の第２態様では、前記試薬容器配置部には、内部標準溶液を収容する標準溶液容器が配置され、前記制御部は、前記濾過フィルタのコンディショニングを行なった後で前記濾過容器に試料を分注する前に前記内部標準溶液を前記濾過容器内に分注するように構成されている。濾過容器内にメタノール溶液を分注した直後に培地を分注すると、培地とメタノールの急激な反応が起こって除タンパク処理が正常になされないことも考えられるが、培地を分注する前に内部標準溶液（例えば純水）を分注しておくことで、培地とメタノールとの急激な反応が緩和され、除タンパク処理を正常に行なうことができる。この第２態様は上記第１態様と組み合わせることができる。
【００４８】
上記第２態様において、前記制御部は、前記試料である培地の種類とは無関係に一定量の前記内部標準溶液を前記濾過容器内に分注するように構成されていてもよい。
【００４９】
本発明に係る培地処理システムの上記実施形態の第３態様では、前記濾過処理により前記回収容器に回収された濾液を一定量だけ吸入し、液体クロマトグラフィー分析用の分析流路に注入する試料注入部、及び、前記試料注入部により前記分析流路に注入された濾液の液体クロマトグラフィー分析を行なうための分析部を有するＬＣ部を備えている。本発明の培地処理システムでは、除タンパク処理の際に、濾過フィルタのコンディショニング剤としてメタノール溶液を用い、除タンパク剤としてアセトニトリル溶液を用いるので、高い濾液回収率が得られる。そのため、分析に必要な濾液量が回収容器に確実に回収されているため、一定量の濾液を確実に吸入して分析流路へ注入することが可能である。この第３態様は上記第１態様及び第２態様と自由に組み合わせることができる。
【００５０】
上記第３態様において、前記試料注入部は、前記回収容器から吸入した一定量の濾液を所定の倍率に希釈するように構成されていてもよい。
【００５１】
本発明に係る培地処理方法の実施形態では、上方が開放され、細胞培養のための培地の除タンパク処理を行なうための濾過フィルタを内部に有するとともに前記濾過フィルタを通過した濾液を下方へ抽出するための抽出口を下端に有する濾過容器、及び前記濾過容器の直下に配置されて前記濾過容器の前記抽出口から抽出された濾液を回収するための回収容器からなる抽出デバイスを用い、空の前記濾過容器にメタノール溶液を分注して前記濾過フィルタのコンディショニングを行なうコンディショニングステップと、前記濾過容器に試料である培地を分注する試料分注ステップと、前記濾過容器内の試料にアセトニトリル溶液を除タンパク剤として添加する除タンパク剤分注ステップと、前記濾過容器の直下に前記回収容器が配置された状態で前記濾過容器内の溶液の濾過処理を行ない、濾液を前記回収容器（５４）に回収する濾過ステップと、をその順に実行する。
【００５２】
本発明に係る培地処理方法の上記実施形態では、濾過フィルタのコンディショニングを行なうためのコンディショニング剤としてメタノール溶液を用い、除タンパク剤としてアセトニトリル溶液を使用するので、試料である培地の種類とは無関係に高い回収率で濾液を回収することができる。そこで、本発明に係る培地処理方法の上記実施形態の第１態様では、前記コンディショニングステップにおいて前記濾過容器に分注するメタノール溶液の量、前記試料分注ステップにおいて前記濾過容器に分注する試料の量、前記除タンパク剤分注ステップにおいて前記濾過容器に分注するアセトニトリル溶液の量はそれぞれ、前記試料である培地の種類とは無関係に一定であるとすることができる。このような態様により、培地の種類ごとに各液の分注条件を調整する必要性がなく、分注条件の設定作業が容易である。
【００５３】
本発明に係る培地処理方法の上記実施形態の第２態様では、前記コンディショニングステップの後で前記試料分注ステップの前に内部標準溶液を前記濾過容器内に分注する標準溶液分注ステップを実行する。メタノールによってコンディショニングのなされた濾過フィルタ上に培地を分注する前に内部標準溶液（例えば純水）を分注しておくことで、培地とメタノールとの急激な反応が緩和され、除タンパク処理を正常に行なうことができる。この第２態様は上記第１態様と組み合わせることができる。
【００５４】
上記第２態様において、前記標準溶液分注ステップにおいて、一定量の前記内部標準溶液を、前記試料である培地の種類とは無関係に前記濾過容器内に分注することができる。
【００５５】
本発明に係る培地処理方法の実施形態の第３態様では、前記濾過ステップの後で、前記濾過ステップにより前記回収容器に回収された濾液を一定量だけ吸入し、液体クロマトグラフィー用の分析流路中に注入する注入ステップと、前記濾液注入ステップにより前記分析流路中に注入された濾液の液体クロマトグラフィー分析を行なう分析ステップと、を実行する。本発明の培地処理方法では、除タンパク処理の際に、濾過フィルタのコンディショニング剤としてメタノール溶液を用い、除タンパク剤としてアセトニトリル溶液を用いるので、高い濾液回収率が得られる。そのため、分析に必要な濾液量が回収容器に確実に回収されているため、一定量の濾液を確実に吸入して分析流路へ注入することが可能である。この第３態様は上記第１態様及び第２態様と自由に組み合わせることができる。
【００５６】
上記第３態様では、前記注入ステップにおいて、前記回収容器に回収された濾液を一定量だけ吸入した後、所定の倍率で前記濾液を希釈するようにしてもよい。
【符号の説明】
【００５７】
１      除タンパク処理部
２      試料容器配置部
４      サンプルラック
６      試料容器
８      試薬容器配置部
１０      試薬容器
１２      抽出デバイス配置部
２０      サンプリングアーム
２１      サンプリングノズル
２２、２９  軸
２４      搬送アーム
２５      保持部
２６      試薬アーム
２７      試薬ノズル
３０      濾過部
３２      分注ポート
３４      廃棄ポート
３６      撹拌部
３６ａ      撹拌ポート
３８，４０      温調部
４２      転送装置
４３      転送ポート
４４      移動部
４５      洗浄ポート
５０      濾過容器
５１      抽出口
５２      濾過フィルタ
５４      回収容器
１００      制御部
２００      ＬＣ部
２０２      試料注入部
２０４      分析部
３００      ＭＳ
４００      システム管理装置
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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