(57)【要約】      （修正有）【課題】全身性エリテマトーデス、インスリン依存性糖尿病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、自己免疫性甲状腺炎、関節リウマチ、糸球体腎炎、強皮症、筋炎、および狼瘡性腎炎等のＩ型ＩＦＮ（ＩＦＮＡＲ１）媒介疾患の治療のための、高濃度の抗ＩＮＦＡＲ１抗体を含む安定な低粘度の抗体製剤の提供。【解決手段】下記a〜cを含む安定な抗体製剤。ａ．約１５０〜２００ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブ；ｂ．約２５〜１５０ｍＭのリジン塩；ｃ．非荷電賦形剤。製剤が５．５〜６．２５のｐＨであることが好ましい。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．約１５０〜２００ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブ；
ｂ．約２５〜１５０ｍＭのリジン塩；
ｃ．非荷電賦形剤；
を含む安定な抗体製剤。
【請求項２】
製剤が５．５〜６．２５のｐＨ、任意に５．９のｐＨである、請求項１に記載の抗体製剤。
【請求項３】
前記リジン塩が、リジン酢酸塩、リジンモノクロリド、リジンジクロリド、リジンＬ−アスパラギン酸塩、リジンＬ−グルタミン酸塩およびリジンＨＣｌからなる群から選択される、請求項１または２に記載の抗体製剤。
【請求項４】
界面活性剤を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗体製剤。
【請求項５】
界面活性剤が、トリトンＸ−１００、ツイーン８０、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ノノキシノール−９、ポリオキサマー、ステアリルアルコール、ドデシル硫酸ナトリウム、およびモノステアリン酸ソルビタンからなる群から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体製剤。
【請求項６】
界面活性剤がポリソルベート８０である、請求項５に記載の抗体製剤。
【請求項７】
約０．０２％〜約０．０８％の界面活性剤を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗体製剤。
【請求項８】
約０．０５％の界面活性剤を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の抗体製剤。
【請求項９】
調合緩衝液を含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の抗体製剤。
【請求項１０】
調合緩衝液が酢酸緩衝液、トリス緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液、塩酸緩衝液、アルギニン緩衝液、グリシン緩衝液、クエン酸緩衝液、ヒスチジン緩衝液、またはＴＥＳ緩衝液である、請求項９に記載の抗体製剤。
【請求項１１】
調合緩衝液がヒスチジン緩衝液である、請求項９に記載の抗体製剤。
【請求項１２】
ヒスチジン緩衝液がヒスチジン塩酸塩を含む、請求項１１に記載の抗体製剤。
【請求項１３】
調合緩衝液がヒスチジン／ヒスチジン塩酸塩である、請求項１１に記載の抗体製剤。
【請求項１４】
前記緩衝液が約１０ｍＭ〜約４０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジン塩酸塩を含む、請求項１２に記載の抗体製剤。
【請求項１５】
前記緩衝液が約２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジン塩酸塩を含む、請求項１３に記載の抗体製剤。
【請求項１６】
非荷電賦形剤が、フルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、乳糖、マルトース、スクロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、トレハロース、ソルビトール、エリスリトール、イソマルト、ラクチトール、マルチトール、キシリトール、グリセロール、ヒドロキシエチルデンプン、水溶性グルカンからなる群から選択される、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の抗体製剤。
【請求項１７】
非荷電賦形剤が、グルコース、スクロース、トレハロース、およびグリセロールからなる群から選択される、請求項１６に記載の抗体製剤。
【請求項１８】
非荷電賦形剤がトレハロースである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の抗体製剤。
【請求項１９】
非荷電賦形剤がトレハロース二水和物である、請求項１８に記載の抗体製剤。
【請求項２０】
約１００ｍＭ〜約１５０ｍＭの非荷電賦形剤を含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の抗体製剤。
【請求項２１】
静脈内、皮下、または筋肉内投与に適する、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の抗体製剤。
【請求項２２】
請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗体製剤を含む、プレフィルドシリンジ。
【請求項２３】
Ｉ型ＩＦＮ媒介疾患または障害の治療を、それを必要とする対象において行う方法に使用される、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗体製剤を含む医薬組成物であって、該方法が治療有効量の抗体製剤を投与するステップを含むものである、医薬組成物。
【請求項２４】
前記疾患または障害が、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、インスリン依存性糖尿病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、自己免疫性甲状腺炎、関節リウマチ、糸球体腎炎、強皮症、筋炎、および狼瘡性腎炎からなる群から選択される、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記疾患または障害が全身性エリテマトーデスである、請求項２４に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、本出願と共にＥＦＳ−Ｗｅｂを介してテキストフィールドとして提出された、２０１６年８月１８日に作成され、かつ２，４９０のサイズを有する「ＩＦＮＡＲ−３５０ＷＯ１＿ＳＬ．ｔｘｔ」という名称の配列表を参照により組み込む。
【０００２】
本発明は、インターフェロンα受容体１（ＩＦＮＡＲ１）またはその抗原結合断片に特異的に結合する高濃度の抗体を含む、安定な低粘度の抗体製剤に関する。実施形態では、抗体製剤は、アニフロルマブまたはその抗原結合断片を含む。
【０００３】
いくつかの実施形態では、本発明は、ＩＦＮＡＲ１に特異的に結合する約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの抗体またはその断片；約２５ｍＭ〜約１３０ｍＭのリジンまたはリジン塩；非荷電賦形剤；界面活性剤；および調合緩衝液を含む安定な抗体製剤に関する。いくつかの実施形態では、本発明は、容器、剤形、およびキットを対象とする。いくつかの実施形態では、本発明は、安定な抗体製剤を製造および使用する方法を対象とする。
【背景技術】
【０００４】
抗体は、それらの標的認識特異性のために、様々な疾患および病状の治療で使用され、それによって全身投与に続いて非常に選択的な成果をもたらす。抗体が有効性を保つために、それらは、製造、精製、輸送、および保存中にそれらの生物学的活性を維持しなくてはならない。製造される大量の高純度モノクローナル抗体を提供するための、新しい製造および精製技術が開発されている。しかしこれらの抗体を輸送および保存のために安定化させるという難題が依然として存在し、投与に適した剤形で抗体を提供するという、なおもさらにより大きい難題も存在する。
【０００５】
変性、凝集、混入、および粒子形成は、抗体の製剤と保存における著しい障害であり得る。幅広い多様な抗体があるために、全ての抗体の保存に適する普遍的な配合または条件はない。ある抗体の最適配合は、抗体に特異的であることが多い。さらに、抗体製剤は、抗体濃度および／または例えば抗体製剤の粘度などの所望の物理的性質次第で、特定の抗体に合わせてさらに調整する必要があり得る。抗体保存製剤は、多くの場合、市販の抗体のための研究および開発過程の重要な部分である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
抗体安定性と関連する難題を克服するための様々な方法が提案されている。例えば、場合により、抗体は、頻繁に凍結乾燥され、次に投与の直前に再構成される。しかし、再構成は、投与過程に追加的なステップを付け加え、製剤に汚染物質を導入し得る。それに加えて、再構成された抗体は、凝集および粒子形成の問題に直面する場合がある。したがって、輸送および保存と関連する難題を克服し得る、安定した抗体製剤を提供する必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、高濃度の抗インターフェロンα受容体１抗体またはその抗原結合断片を含む安定な低粘度の抗体製剤に関する。いくつかの実施形態では、本発明は、概して、ＩＦＮＡＲ１またはその断片に特異的に結合する約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの抗体、約２５ｍＭ〜約１３０ｍＭのリジンまたはリジン塩；非荷電賦形剤；界面活性剤；および調合緩衝液を含む安定な抗体製剤に関する。
【０００８】
実施形態では、本発明は、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブまたはその抗原結合断片；約４０ｍＭ〜約６０ｍＭのリジンＨＣｌ；約１００ｍＭ〜約１６０ｍＭのトレハロース二水和物；約０．０２％〜約０．１％のポリソルベート８０；約１５ｍＭ〜約３５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む抗体製剤を対象とし、製剤は約５．５〜６．５のｐＨである。
【０００９】
実施形態では、本発明は、約１４５ｍｇ／ｍＬ〜約１５５ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブまたはその抗原結合断片；約４５ｍＭ〜約５５ｍＭのリジンＨＣｌ；約１２０ｍＭ〜約１４０ｍＭのトレハロース二水和物；約０．０４％〜約０．０８％のポリソルベート８０；および約２０ｍＭ〜約３０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む抗体製剤を対象とし、製剤は約５．８〜約６．１のｐＨである。
【００１０】
いくつかの実施形態では、本発明は、約１５０ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブまたはその抗原結合断片；約５０ｍＭのリジンＨＣｌ；約１３０ｍＭのトレハロース二水和物；約０．０５％のポリソルベート８０；および約２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む抗体製剤を対象とし、製剤は約５．９のｐＨである。
【００１１】
いくつかの実施形態では、本発明は、１５０ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブまたはその抗原結合断片；５０ｍＭのリジンＨＣｌ；１３０ｍＭのトレハロース二水和物；０．０５％のポリソルベート８０；および２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む抗体製剤を対象とし、製剤は約５．９のｐＨである。
【００１２】
追加的な実施形態では、本発明は、１５０ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブ；５０ｍＭのリジンＨＣｌ；１３０ｍＭのトレハロース二水和物；０．０５％のポリソルベート８０；２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む抗体製剤を対象とし、製剤は５．９のｐＨである。
【００１３】
いくつかの実施形態では、本発明は、適切な容器内において本明細書に記載の抗体製剤のいずれか１つを含む、ヒトへの非経口投与に適する医薬単位用量剤形を対象とする。
【００１４】
いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載される任意の抗体製剤、本明細書に記載されるような容器、本明細書に記載されるような単位用量剤形、または本明細書に記載されるようなプレフィルドシリンジを含むキットを対象とする。
【００１５】
いくつかの実施形態では、本発明は、抗体を約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＦＮＡＲ抗体またはその抗原結合断片に精製するステップと、単離抗体を安定化製剤に入れて安定な抗体製剤を形成するステップとを含む、安定な抗体製剤を製造する方法を対象とし、得られた安定な抗体製剤は、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの抗体；約２５ｍＭ〜約１３０ｍＭのリジンまたはリジン塩；約１００ｍＭ〜約１５０ｍＭの非荷電賦形剤；約０．０２％〜約０．１％の界面活性剤；および調合緩衝液を含む。
【００１６】
いくつかの実施形態では、本発明は、Ｉ型ＩＦＮ媒介疾患または障害の治療を、それを必要とする対象において行う方法であって、本明細書に記載の抗体製剤のいずれか１つの治療有効量を投与するステップを含む方法を対象とする。
【００１７】
本発明を例示する目的で、本発明の特定の実施形態が図面に示される。しかし、本発明は、図面に示された実施形態の正確な配置および手段に限定されない。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】ハイスループットスクリーニングビーズに基づく方法において、ｐＨの関数として粘度を示す。
【００１９】
【図２】ハイスループットスクリーニングビーズに基づく方法を用いて、リジンＨＣｌ濃度の関数として粘度を示す。
【００２０】
【図３】ｐＨ６．０における２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ、２５ｍＭのリジン、１３０ｍＭのトレハロース（丸）；およびｐＨ６．０における２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣＬ、５０ｍＭのリジン、１３０ｍＭのトレハロース（菱形）を含有する製剤について、抗体（アニフロルマブ）濃度の濃度の関数として粘度を示す。
【００２１】
【図４】０ｍＭのリジン（菱形）；５ｍＭのリジン（四角形）；１２．５ｍＭのリジン（三角形）；２５ｍＭのリジン（×印）；および５０ｍＭのリジン（星印）を含有する溶液について、抗体（アニフロルマブ）濃度の関数として粘度を示す。
【００２２】
【図５】１３５ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブ（菱形）；１５０ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブ（四角形）；および１８０ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブ（三角形）を含有する溶液について、リジンＨＣｌ濃度の関数として粘度を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
定義
本発明について詳細に説明する前に、本発明は、変動し得る特定の組成物または工程段階に限定されないものと理解される。本明細書および添付の特許請求の範囲の用法では、文脈上例外が明記されていない限り、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、複数の指示対象を含むことに留意すべきである。「１つの（ａ）」（または「１つの（ａｎ）」）という用語ならびに「１つまたは複数」および「少なくとも１つ」という用語は、本明細書で同義的に使用され得る。
【００２４】
さらに本明細書で使用される「および／または」は、他方の有無にかかわらず、２つの指定された特徴または成分のそれぞれの特定の開示と見なされるべきである。したがって、本明細書において、「Ａおよび／またはＢ」などの語句で使用される「および／または」という用語は、「ＡおよびＢ」、「ＡまたはＢ」、「Ａ」（単独）、および「Ｂ」（単独）を含むことが意図される。同様に、「Ａ、Ｂ、および／またはＣ」などの語句における用法では、「および／または」という用語は、以下の実施形態のそれぞれを包含することが意図される：Ａ、Ｂ、およびＣ；Ａ、Ｂ、またはＣ；ＡまたはＣ；ＡまたはＢ；ＢまたはＣ；ＡおよびＣ；ＡおよびＢ；ＢおよびＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；およびＣ（単独）。
【００２５】
本開示全体にわたり、百分率、比率などの全ての表現は、特に断りのない限り、「重量基準」である。本明細書の用法では、「重量基準」は、「質量基準」という用語と同義であり、本明細書で定義される比率または百分率が、容積、厚さ、またはその他の尺度でなく、重量に準拠することを示す。
【００２６】
「約」という用語は、本明細書では、およそ、範囲、大体、または前後を意味するために使用される。数値範囲に関連して「約」という用語が使用される場合、それは記載される数値の上下の境界を延長することで範囲を修飾する。一般に「約」という用語は、規定値の上下の数値を１０％の差異で修飾するために本明細書で使用される。
【００２７】
特に断りのない限り、本明細書で使用される全ての技術的および科学的用語は、本発明が関連する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。例えば、Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｕｏ，Ｐｅｉ−Ｓｈｏｗ，２ｎｄ  ｅｄ．，２００２，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ；Ｔｈｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，３ｒｄ  ｅｄ．，１９９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；およびＯｘｆｏｒｄ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  Ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｒｅｖｉｓｅｄ，２０００，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓは、本開示で使用される多数の用語の一般的辞書を当業者に提供する。
【００２８】
単位、接頭辞、および記号は、それらの国際単位系（ＳＩ）公認形式で示される。数値範囲は、範囲を規定する数を包含する。特に断りのない限り、アミノ酸配列は、アミノからカルボキシ方向で左から右に記述される。本明細書で提供される見出しは、本明細書全体を参照することにより有し得る本発明の様々な態様または実施形態を限定しない。したがって、直下で定義される用語は、本明細書全体を参照してより詳細に定義される。
【００２９】
本明細書で実施形態が「含む」という言葉を用いて記述される場合には常に、「からなる」および／または「から本質的になる」によって記述される、その他の点で類似した実施形態も提供されるものと理解される。
【００３０】
アミノ酸は、それらの一般に知られている三文字記号によるか、またはＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ生化学命名委員会が推奨する一文字記号によるかのいずれかで本明細書において言及される。同様にヌクレオチドは、それらの一般に認められた一文字コードによって言及される。
【００３１】
本明細書の用法では、「射出力」という用語は、抗体製剤を針に通過させるのに必要な圧力（ニュートン単位）である。
【００３２】
本明細書の用法では、「自己免疫疾患」という用語は、患者自身の細胞に反応性であり抗原抗体複合体を形成する自己抗体の形成に関連する障害、病態または病状を指す。「自己免疫疾患」という用語は、例えば、全身性エリテマトーデスなどの病状、および例えば急性リウマチ熱などの特定の外的作用因子によって引き起こされる障害を含む。自己免疫障害の例としては、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、ベルジェ病、慢性疲労症候群、クローン病、皮膚筋炎、線維筋痛症、グレーブス病、橋本甲状腺炎、特発性血小板減少症紫斑病、扁平苔癬、多発性硬化症、重症筋無力症、乾癬、リウマチ熱、関節リウマチ、強皮症、シェーグレン症候群、全身性エリテマトーデス、Ｉ型糖尿病、潰瘍性大腸炎、および白斑が挙げられるが、これに限定されない。特定の態様では、自己免疫疾患は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、強皮症（ＳＳｅ）、筋炎、または狼瘡性腎炎である。
【００３３】
「インターフェロンα受容体−１」、「ＩＦＮＡＲＩ」、および「ＩＦＮＡＲ」という用語は同義的に使用され、ヒトＩＦＮＡＲ１の変種、イソ型、種同族体を含み、ＩＦＮＡＲＩに共通する少なくとも１つのエピトープを有する類似体を含む。例えば、ｄｅ  Ｗｅｅｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｉ．Ｃｈｅｒｎ．２８２：２００５３−２００５７（２００７）を参照されたい。したがって、特定の例では、ヒトＩＦＮＡＲ１に対して特異的なヒト抗体は、ヒト以外の種からのＩＦＮＡＲＩ、またはヒトＩＦＮＡＲ１と構造的に関連するその他のタンパク質（例えば、ヒトＩＦＮＡＲ１同族体）と交差反応する。他の事例では、抗体はヒトＩＦＮＡＲＩに対して完全に特異的であり得、種交差反応またはその他の各種交差反応性を示さない。ヒトＩＦＮＡＲ１の完全なｃＤＮＡの配列は、Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号ＮＭ  ０００６２９を有する。
【００３４】
「Ｉ型インターフェロン」または「Ｉ型ＩＦＮ」という用語は、本明細書の用法ではＩＦＮＡＲ１のリガンドである、Ｉ型インターフェロン分子ファミリーのメンバー（すなわちＩＦＮＡＲ１に結合できるＩ型インターフェロン分子ファミリーのメンバー）を指す。Ｉ型インターフェロンリガンドの例は、インターフェロンα１、２ａ、２ｂ、４、５、６、７、Ｓ、１０、１４、１６、１７、２１、インターフェロンβ、およびインターフェロンωである。
【００３５】
「Ｉ型ＩＦＮ媒介疾患または障害」という用語は、Ｉ型ＩＦＮ薬力学（「ＰＤ」）マーカー発現プロファイルまたは遺伝子シグネチャー（Ｉ型ＩＦＮ  ＧＳ）を呈示する、あらゆるＩ型ＩＦＮまたはＩＦＮａ誘導性疾患、障害、または病状を指す。ＰＤマーカー発現プロファイルおよび遺伝子シグネチャーは均等物であると理解される。これらの疾患、障害、または病状としては、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、強皮症、狼瘡性腎炎、ｏワスレナグサ（ｏ  ｍｙｏｓｏｔｉｓ）などの自己免疫要素があるものが挙げられる。Ｉ型ＩＦＮ媒介疾患または障害は、例えば抗体またはその抗原結合断片である小分子または生物剤の投与によって治療され得る。治療薬が生物剤である場合、それはＩ型ＩＦＮまたはＩＦＮαのあらゆるサブタイプに対して特異的な抗体であってもよい。例えば、抗体は、ＩＦＮα１、ＩＦＮα２、ＩＦＮα４、ＩＦＮα５、ＩＦＮα６、ＩＦＮα７、ＩＦＮα８、ＩＦＮα１０、ＩＦＮα１４、ＩＦＮα１７、ＩＦＮα２１、ＩＦＮβ、またはＩＦＮωのいずれか１つに対して特異的であってもよい。代替的に、抗体は、任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、任意の６つ、任意の７つ、任意の８つ、任意の９つ、任意の１０、任意の１１、任意の１２のＩ型ＩＦＮまたはＩＦＮαサブタイプに対して特異的であってもよい。抗体が２つ以上のＩ型ＩＦＮサブタイプに特異的である場合、抗体は、ＩＦＮα１、ＩＦＮα２、ＩＦＮα４、ＩＦＮα５、ＩＦＮα８、ＩＦＮα１０、およびＩＦＮα２１に対して特異的であってもよく；またはそれはＩＦＮα１、ＩＦＮα２、ＩＦＮα４、ＩＦＮα５、ＩＦＮα８、およびＩＦＮα１０に対して特異的であってもよく；またはそれはＩＦＮα１、ＩＦＮα２、ＩＦＮα４、ＩＦＮα５、ＩＦＮα８、およびＩＦＮα２１に対して特異的であってもよく；またはそれはＩＦＮα１、ＩＦＮα２、ＩＦＮα４、ＩＦＮα５、ＩＦＮα１０、およびＩＦＮα２１に対して特異的であってもよい。ＩＦＮα活性を調節する治療薬は、ＩＦＮα活性を中和してもよい。Ｉ型ＩＦＮ媒介疾患または障害はまた、例えばＩＦＮＡＲ１などのＩ型ＩＦＮ受容体に対して特異的な抗体で治療し得る。いくつかの態様では、抗ＩＦＮＡＲ１抗体は、ヒト以外の種からのＩＦＮＡＲ１と交差反応し得る。その他の態様では、抗ＩＦＮＡＲ１抗体は、ＩＦＮＡＲ１のみに対して特異的であり得、種交差反応またはその他のタイプの交差反応を示さない。いくつかの態様では、抗ＩＦＮＡＲ１抗体は、未修飾抗体と比較して、ＦＣリガンドに対する結合親和性の低下を示し、エフェクター機能（ＡＤＣＣおよび／もしくはＣＤＣ）の低下もしくは低減、Ｆｃリガンドに対する結合の低下もしくは低減、または毒性の低下もしくは低減を有する。
【００３６】
「ＭＥＤＩ−５４６」という用語は、米国特許第７，６６２，３８１号明細書に記載される抗ＩＦＮＡＲ９Ｄ４抗体のＦｃ修飾型を指す。「ＭＥＤＩ−５４６」および「アニフロルマブ」という用語は、本明細書で同義的に使用される。ＭＥＤＩ−５４６の配列は、米国特許第２０１１−００５９０７８号明細書に記載される。ＭＥＤＩ−５４６は、ヒトＩｇＧ１の下側ヒンジおよびＣＨ２ドメインに導入されたＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、およびＰ３３１Ｓの３つの変異の組み合わせを含み、それらは、ヒトＦｃｙＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃｙＲＩＩＡ（ＣＤ３２Ａ）、ＦｃｙＲＩＩＩ（ＣＤ１６）、およびＣ１ｑに対するそれらの結合低下を引き起こし、番号付与はＫａｂａｔに記載されるＥＵ指標に従う。例えば、それらの内容全体が参照により本明細書に援用される米国特許出願公開第２０１１／００５９０７８号明細書およびＯｇａｎｅｓｙａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｉｃａ  Ｄ  ６４：７００−７０４（２００８）を参照されたい。ＭＥＤＩ−５４６のＶＨおよびＶκ配列は、表１に示される。
【表１】
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【００３７】
「Ｉ型ＩＦＮ活性を調節する抗体またはその抗原結合断片」という用語は、患者においてＩ型ＩＦＮ活性を調節できる、その最も広い意味での抗体を指す（後述参照）。「調節」という用語は、本明細書の用法では、Ｉ型ＩＦＮ活性の阻害または抑制、およびＩ型ＩＦＮ活性の誘導または増強を含む。特定の態様では、Ｉ型ＩＦＮ活性はＩＦＮα活性である。いくつかの態様では、型ＩＦＮ  ＧＳの抑制は、Ｉ型ＩＦＮ活性の抑制である。いくつかの態様では、抗体またはその抗原結合断片は、モノクローナルである。特定の態様では、Ｉ型ＩＦＮ活性を調節する抗体またはその抗原結合断片は、ＩＦＮＡＲ１などのＩ型ＩＦＮ受容体に特異的に結合する。いくつかの特定の態様では、抗体またはその抗原結合断片は、ＩＦＮＡＲ１のサブユニット１に特異的に結合する。
【００３８】
「抗体」という用語は、本明細書では、その最も広い意味で使用され、例えばモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多価抗体、多特異性抗体、キメラ抗体、およびヒト化抗体を含む。「抗体」という用語は、抗体全体を含む。「抗体」という用語はまた、ジスルフィド結合またはその抗原結合部分によって相互連結する、少なくとも２本の免疫グロブリン重（Ｈ）鎖および２本の免疫グロブリン軽（Ｌ）鎖を含むタンパク質も指す。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書でＶＨと略記される）および重鎖定常領域から構成される。重鎖定常領域は、ＣＨＩ、ＣＨ２、およびＣＨ３の３つのドメインから構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書でＶＬと略記される）および軽鎖定常領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬから構成される。ＶＨおよびＶＬ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される超可変性領域にさらに細分化され得、フレームワーク領域（ＦＲ）と称される、より保存された領域がその中に散在する。各ＶＨおよびＶＬは、ＦＲＩ、ＣＤＲＩ、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順でアミノ末端からカルボキシ末端に配置された３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成される。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫グロブリンと、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）および古典的補体系の第１の成分（Ｃ１ｑ）を含む宿主組織または要素との結合を媒介し得る。
【００３９】
「抗原結合断片」という用語は、抗原（例えば、ＩＦＮＡＲ）に特異的に結合する能力を保つ抗体の１つまたは複数の断片を指す。抗体の抗原結合機能は、全長抗体の断片によって遂行され得ることが示されている。抗体の「抗原結合断片」という用語に包含される結合断片の例としては、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、およびＣＨＩドメインからなる一価の断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域のジスルフィド架橋によって連結する２つのＦａｂ断片を含む二価の断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨＩドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片；（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４Ｉ：５４４−５４６）；および（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。さらに、Ｆｖ断片であるＶＬおよびＶＨの２つのドメインは別個の遺伝子によってコードされるが、それらは、組換え法を用いて、その中でＶＬおよびＶＨ領域が対合して、その中で一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られている一価の分子を形成する単一タンパク質鎖になるようにする、合成リンカーによって連結され得る。例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；およびＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３）を参照されたい。このような一本鎖抗体も抗体の「抗原結合断片」という用語に包含されることが意図される。これらの抗体断片は、当業者に公知の従来の技術を用いて得られ、断片は非損傷抗体と同じ方法で有用性についてスクリーニングされる。
【００４０】
「単離抗体」は、本明細書の用法では、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指すことを意図する（例えば、ＩＦＮＡＲに特異的に結合する単離抗体は、ＩＦＮＡＲ以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。しかし、ＩＦＮＡＲに特異的に結合する単離抗体は、その他の生物種に由来するＩＦＮＡＲ分子などのその他の抗原との交差反応性を有し得る。さらに、単離抗体は、その他の細胞物質および／または化学物質を実質的に含まなくてもよい。
【００４１】
「モノクローナル抗体」という用語は、本明細書の用法では、単一分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体は、特定のエピトープに対する単一結合特異性および親和性を示す。
【００４２】
「ヒト抗体」という用語は、本明細書の用法では、フレームワークおよびＣＤＲ領域の両方が、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する抗体を含むことが意図される。さらに、抗体が定常領域を含有する場合、定常領域もヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する。本開示のヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基を含み得る（例えば、生体外でのランダムもしくは部位特異的変異誘発、または生体内での体細胞変異によって導入された変異）。しかし、「ヒト抗体」という用語は、本明細書の用法では、マウスなどの別の哺乳類種の生殖細胞に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列上にグラフトされた抗体を含むことは意図されない。
【００４３】
「ヒトモノクローナル抗体」という用語は、フレームワークおよびＣＤＲ領域の両方がヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する、単一結合特異性を示す抗体を指す。一実施形態では、ヒトモノクローナル抗体は、例えば、不死化細胞に融合されたヒト重鎖導入遺伝子および軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有する、遺伝子組換えマウスなどの遺伝子組換え非ヒト動物から得られたＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生される。
【００４４】
「組換ヒト抗体」という用語は、本明細書の用法では、（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子またはそれから調製されたハイブリドーマについて、遺伝子組換えまたは染色体導入された動物（例えば、マウス）から単離抗体（下でさらに詳しく説明される）、（ｂ）ヒト抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から、例えば、トランスフェクトーマから単離抗体、（ｃ）組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離抗体、および（ｄ）ヒト免疫グロブリン遺伝子配列の他のＤＮＡ配列へのスプライシングを伴う、その他のあらゆる手段によって調製、発現、作製または単離抗体などの組換え手段によって調製、発現、作製、または単離された全てのヒト抗体を含む。このような組換えヒト抗体は、フレームワークおよびＣＤＲ領域がヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。しかし、特定の実施形態では、このような組換えヒト抗体は、生体外変異誘発（またはヒトＩｇ配列について遺伝子組換えされた動物が使用される場合、生体内体細胞変異誘発）の対象となり得、したがって、組換え抗体のＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列ＶＨおよびＶＬ配列に由来し関連する配列である一方、生体内においてヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然に存在しなくてもよい。
【００４５】
「抗体」という用語は、本明細書の用法では、それらが所望の生物学的活性を示しさえすれば、その中で重鎖および／または軽鎖の一部が、特定の種に由来しまたは特定の抗体クラスまたはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一または相同的である一方、鎖の残部は、別の種に由来しまたは別の抗体クラスまたはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一または相同的である、「キメラ」抗体およびこのような抗体の断片も含む（米国特許第４，８１６，５６７号明細書；およびＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：６８５１−６８５５（１９８４））。
【００４６】
脊椎動物系における基本的な抗体構造は、比較的よく知られている。例えば、Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（２ｎｄ  ｅｄ．；Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ）を参照されたい。
【００４７】
用語に、当該技術分野で使用されおよび／または受け入れられている２つ以上の定義がある場合、本明細書で使用される用語の定義は、明示的に別段の定めがある場合を除いて、そのような意味の全てを含むことが意図される。特定の例は、重鎖および軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見出される非隣接抗原結合位置を描写するための、「相補性決定領域」（「ＣＤＲ」）という用語の使用である。この特定の領域は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９８３）Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”およびＣｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｉ．１９６：９０１−９１７（１９８７）によって記載され、その定義には、互いに比較した際のアミノ酸残基の重複またはサブセットが含まれる。それにもかかわらず、抗体またはその変異型のＣＤＲを指すためにいずれかの定義を適用することは、本明細書で定義および使用される用語の範囲内にあることが意図される。上で引用された参考文献のそれぞれによって定義されるようなＣＤＲを包含する適切なアミノ酸残基は、以下の表２に比較として記載される。特定のＣＤＲを包含する正確な残基数は、ＣＤＲの配列およびサイズに次第で変動するであろう。当業者は、抗体の可変領域アミノ酸配列を所与として、特定のＣＤＲを含む残基を慣例的に判定し得る。
【表２】
2020158527.tif 000003
【００４８】
Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．も、あらゆる抗体に適用可能な可変ドメイン配列の番号付与体系を定義した。当業者は、配列自体を、以上のいかなる実験データに依存することなく、この「Ｋａｂａｔ番号付与」体系を任意の可変ドメイン配列に明白に割り当て得る。本明細書の用法では、「Ｋａｂａｔ番号付与」は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９８３）Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”に記載される番号付与体系を指す。別段の指定がない限り、本開示の抗ＩＦＮＡＲ抗体またはその抗原結合断片、変異型または誘導体における特定のアミノ酸残基位置の番号付与への言及は、Ｋａｂａｔ番号付与体系に従う。
【００４９】
「治療する」または「治療」という用語は、本明細書の用法では、治療処置および予防または防止的手段の両方を指し、目的は、炎症性疾患または病状の進行など、対象の望まれない生理学的変化または障害を予防しまたは遅延させる（軽減する）ことである。有益なまたは所望の臨床結果としては、症状の緩和、疾患の程度の減少、疾患の状態の安定化（すなわち、悪化なし）、疾患の進行の遅延または減速、疾患状態の改善または緩和、および（部分的または完全を問わない）寛解または検出不可能が挙げられるが、これに限定されない。「治療」という用語はまた、治療を受けない場合の予測生存期間と比較して、生存を長期化させることを意味する。治療を必要とする対象としては、既に状態もしくは障害を有する対象、および病状もしくは障害を有しやすい対象または病状もしくは障害が予防される対象が挙げられる。
【００５０】
「治療すること」または「治療」または「治療する」などの用語は、（１）症状を治癒、遅延、軽減し、および／または診断された病的状態または障害の進行を食い止める治療手段、および（２）標的病的状態または障害の進行を阻止しおよび／または遅延させる予防または防止手段の両方を指す。したがって、治療を必要とする対象としては、既に障害がある対象；障害を起こしやすい対象；その中で障害が予防される対象が挙げられる。
【００５１】
「有効量」または「ための有効量」または「治療有効量」という用語は、所望の結果を生じるのに十分な治療薬の用量への言及を含む。
【００５２】
「対象」または「患者」は、診断、予後診断、または治療法が所望される、あらゆる対象、特に哺乳類対象を意味する。本明細書の用法では、「対象」または「患者」という用語は、あらゆるヒトまたは非ヒト動物を含む。「非ヒト動物」という用語は、例えば、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、クマ、ニワトリ、両生類、爬虫類などの哺乳類および非哺乳類などの全ての脊椎動物を含む。本明細書の用法では、「Ｉ型ＩＦＮ媒介疾患または障害を有する患者」などの語句は、例えば検出、画像診断、またはその他の診断手順のための、Ｉ型ＩＦＮ活性を調節する抗体またはその抗原結合断片の投与から、および／またはこのような抗体またはその抗原結合による治療、すなわち疾患の一時的緩和または予防から利益を受ける哺乳類対象などの対象を含む。
【００５３】
抗体製剤
実施形態では、本発明は、抗ＩＦＮＡＲ１抗体またはその抗原結合断片を含む安定な抗体製剤を提供する。実施形態では、抗ＩＦＮＡＲ１抗体はアニフロルマブである。実施形態では、本発明の製剤は、アニフロルマブおよびその抗原結合断片の両方を含む。
【００５４】
実施形態において、本発明の抗体製剤は、配列番号１のアミノ酸配列を有する参照ＶＨからの０〜つの５アミノ酸置換を含むＶＨドメイン配列を含む、抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５５】
実施形態において、本発明の抗体製剤は、配列番号２のアミノ酸配列を有する参照Ｖκからの０〜つの５アミノ酸置換を含むＶκドメインを含む、抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５６】
いくつかの実施形態では、抗体製剤中の抗体は、抗体製剤に添加される前に精製される。「単離する」および「精製する」という用語は、例えば宿主細胞タンパク質を含む組成物など、抗体がその中にある組成物中の不純物またはその他の汚染物質からの抗体の分離を指す。いくつかの実施形態では、抗体から、少なくとも５０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、９９％、９９．５％、または９９．９％（ｗ／ｗ）の不純物が浄化される。例えば、いくつかの実施形態では、例えば抗ＩＦＮＡＲ１抗体などの抗体の精製は、組成物中に元々存在する、９９％（ｗ／ｗ）の宿主細胞タンパク質からの抗体の分離を含むであろう。
【００５７】
いくつかの実施形態では、「単離する」、および「精製する」という用語は、例えば世界保健機関または米国食品医薬品局など、政府機関のガイドラインに一致する程度に、例えば抗ＩＦＮＡＲ１抗体などの抗体を組成物中の不純物またはその他の汚染物質から分離することを指す。
【００５８】
抗体を精製する方法は、当業者に知られている。精製を実施するための適切な技術としては、アフィニティクロマトグラフィー、疎水性相互作用、イオン交換（カチオン交換クロマトグラフィーまたは混合モードクロマトグラフィーなど）などの様々なタイプのクロマトグラフィー、および濾過が挙げられる。
【００５９】
アフィニティクロマトグラフィーは、それによって抗体が、その特異的結合特性のために抗体に対する親和性リガンドと結合する、分離法を指す。機能的親和性リガンドは、抗体を含む組成物がリガンドおよび固体担体の上を通過すると、リガンドに対する特異的結合親和性を有する抗体がリガンドに吸着され、１つまたは複数のその他の不純物は吸着されずに（またはより低い親和力で結合して）、抗体から分離されるように、固体または半固体担体上に固定化し得る。典型的に結合しない（または十分に結合しない）不純物の例としては、処理関連不純物（例えば、宿主細胞タンパク質、ＤＮＡ、培地成分）およびいくつかの生成物関連不純物（例えば、抗体断片）が挙げられる。いくつかの実施形態では、吸着された抗体をリガンドおよび担体から除去する前に、リガンドを含む固体担体を緩衝液で１回または複数回洗浄して、追加的な不純物を除去する。１つまたは複数の不純物が除去（溶出）された後、吸着された抗体をリガンドおよび担体から除去して、最初の組成物からの抗体の単離をもたらし得る。リガンドおよび担体から抗体を除去する方法は、リガンドに依存して、当業者に知られており、例えば、ｐＨ、添加もしくはカオトロピック剤もしくは変性剤、または市販の溶出緩衝液の添加などの環境変化が挙げられる。いくつかの実施形態では、抗体組成物に対して、２つ以上の親和性精製処理を用い得る。プロテインＡおよびプロテインＧ（およびそれらの組み合わせ）を含む様々な親和性リガンドが、当該技術分野で公知である。固定化リガンドは、市販される。例えば、プロテインＡアフィニティシステムとしては、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ  ＳｕＲｅ、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ  Ｘｔｒａ、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ  ＳｕＲｅ  ＬＸ、Ｓｅｐａｈａｒｏｓｅ  ＣＬ−４Ｂ、ＰｒｏＳｅｐ  ｖＡ、ＰｒｏＳｅｐ  ｖＡ  Ｕｌｔｒａ、およびＣｅｒａｍｉｃ  ＨｙｐｅｒＤが挙げられる。
【００６０】
イオン交換クロマトグラフィーとしては、カチオン交換クロマトグラフィーおよび混合クロマトグラフィーが挙げられる。カチオン交換クロマトグラフィーは、カチオン交換マトリックスを使用して、電荷の差に基づいて、抗体および数種の不純物を分離させ得る任意の方法を指す。カチオン交換マトリックスは、通常は、共有結合した負荷電基を含む。弱いまたは強力なカチオン交換樹脂を用いてもよい。通常、強力なカチオン交換樹脂は、ｐＨ次第でスルホン酸またはスルホネート基を含む、担持される有機基を含む。弱いカチオン交換体樹脂は、通常、ｐＨ次第でカルボン酸またはカルボキシレート基を含む、担持される有機基を含む。特定の実施形態では、追加的な結合機構、ならびに例えば水素結合相互作用および疎水性相互作用の１つまたは複数のイオン性相互作用を組み込んだ、マルチモーダルカチオン交換樹脂を利用し得る。適切なカチオン交換樹脂の例は、当該技術分野で周知であり、フラクトゲル、カルボキシメチル（ＣＭ）、スルホエチル（ＳＥ）、スルホプロピル（ＳＰ）、ホスフェート（Ｐ）およびスルホネート（Ｓ）、ＰＲＯＰＡＣ  ＷＣＸ−１０（商標）（Ｄｉｏｎｅｘ）、Ｃａｐｔｏ  Ｓ、Ｓ−セファロースＦＦ、フラクトゲルＥＭＤ  ＳＯ３Ｍ、Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ  Ｍｅｇａｃａｐ  ＩＩ  ＳＰ  ５５０Ｃ、Ｐｏｒｏｓ  ５０  ＨＳ、およびＳＰ−セファロースマトリックスが挙げられるが、これに限定されない。いくつかの実施形態では、組成物に対して、２つ以上のカチオン交換クロマトグラフィー処理を用い得る。
【００６１】
混合モードクロマトグラフィーは、不純物（例えば、宿主細胞タンパク質、ＤＮＡなどの処理関連不純物、および／または内在性または偶発性ウイルス）からの分析物の分離を達成するために、固定層と分析物間の相互作用の２つ以上の形態を利用する方法を指す。適切なアニオン交換マトリックスの例は、当該技術分野で公知であり、Ｃａｐｔｏ  Ａｄｈｅｒｅ、Ｓａｒｔｏｂｉｎｄ  Ｑ、Ｎａｔｒｉｘ  Ｑ、Ｃｈｒｏｍａｓｏｒｂ  Ｑ、およびＭｕｓｔａｎｇ  Ｑが挙げられるが、これに限定されない。
【００６２】
いくつかの実施形態では、追加的な濾過ステップを利用して、不純物を除去し得る。例えば、いくつかの実施形態では、ナノ濾過または限外濾過が使用される。ナノ濾過は、例えば、７５ｎｍ未満、５０ｎｍ未満、および未満１５ｎｍでさえある孔径を有するマトリックスを通して、組成物を通過させ、例えばウイルスなどの不純物を抗体から分離するステップを含む。用い得る市販のナノフィルターおよびウルトラフィルターは、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，Ｍａｓｓ．、例えば、Ｖｉｒｅｓｏｌｖｅ  ＰｒｏおよびＶｉｒｅｓｏｌｖｅ  Ｐｒｏ＋）、ＰａｌｌＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｅａｓｔ  Ｈｉｌｌｓ，Ｎ．Ｙ．）、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）、およびＳａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｇｏｅｔｔｉｎｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）などの様々な供給業者によって製造される。
【００６３】
いくつかの実施形態では、例えば、抗ＩＦＮＡＲまたはその抗原結合断片などの本発明の製剤で使用される抗体は、配列番号１のＫａｂａｔ定義ＶＨ配列および配列番号２のＫａｂａｔ定義Ｖκを含み、抗体は、１０ｍｇ／ｍｌ〜３００ｍｇ／ｍｌ、３０ｍｇ／ｍｌ〜２５０ｍｇ／ｍｌ、５０ｍｇ／ｍｌ〜２００ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌ〜２００ｍｇ／ｍｌ、１２５ｍｇ／ｍｌ〜１７５ｍｇ／ｍｌ、１３０ｍｇ／ｍｌ〜１７０ｍｇ／ｍＬ、１３５ｍｇ／ｍｌ〜１６５ｍｇ／ｍＬ、１４０ｍｇ／ｍｌ〜１６０ｍｇ／ｍＬ、１４５ｍｇ／ｍｌ〜１５５ｍｇ／ｍＬ、１３０ｍｇ／ｍｌ、１３５ｍｇ／ｍｌ、１４０ｍｇ／ｍｌ、１４５ｍｇ／ｍｌ、１４６ｍｇ／ｍｌ、１４７ｍｇ／ｍｌ、１４８ｍｇ／ｍｌ、１４９ｍｇ／ｍｌ、１５０ｍｇ／ｍｌ、１５１ｍｇ／ｍｌ、１５２ｍｇ／ｍｌ、１５３ｍｇ／ｍｌ、１５４ｍｇ／ｍｌ、１５５ｍｇ／ｍｌ、１５６ｍｇ／ｍｌ、１５７ｍｇ／ｍｌ、１５８ｍｇ／ｍｌ、１５９ｍｇ／ｍｌまたは１６０ｍｇ／ｍｌの濃度で製剤中にある。いくつかの実施形態では、抗体は、約５０ｍｇ／ｍｌ、５５ｍｇ／ｍｌ、６０ｍｇ／ｍｌ、６５ｍｇ／ｍｌ、７０ｍｇ／ｍｌ、７５ｍｇ／ｍｌ、８０ｍｇ／ｍｌ、８５ｍｇ／ｍｌ、９０ｍｇ／ｍｌ、９５ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌ、１２５ｍｇ／ｍｌ、１３０ｍｇ／ｍｌ、１４０ｍｇ／ｍｌ、１５０ｍｇ／ｍｌ、１６０ｍｇ／ｍｌ、１７０ｍｇ／ｍｌ、１８０ｍｇ／ｍｌ、１９０ｍｇ／ｍｌ、２００ｍｇ／ｍｌの濃度である。
【００６４】
本発明の抗体製剤は、リジンを含む。リジンは、
【化１】
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の構造を有する必須アミノ酸である。本明細書の用法では、リジンは、リジンの遊離塩基形態およびあらゆる全てのそれらの塩を含み得る。実施形態において、リジンの塩形態は、リジン酢酸塩、リジンモノクロリド、リジンジクロリド、リジンＬ−アスパラギン酸塩、およびリジンＬ−グルタミン酸塩である。いくつかの実施形態では、リジンは、その薬学的に許容可能な塩を含む。例えば、リジンはリジン塩酸塩を含む。リジンは、本明細書の用法では、全ての鏡像異性体（例えば、Ｌ−リジンおよびＳ−リジン）、および鏡像異性体の任意の組み合わせ（例えば、５０％のＬ−リジンおよび５０％のＳ−リジン；９０％〜１００％のＬ−リジンおよび１０％−０％のＳ−リジンなど）も含む。いくつかの実施形態では、「リジン」という用語には、９９％を超えるＬ−リジンおよび１％未満のＳ−アリジンが含まれる。いくつかの実施形態では、「リジン」という用語は、鏡像異性的に純粋なＬ−リジンが含まれる。いくつかの実施形態では、リジンは製薬等級リジンである。
【００６５】
実施形態において、本発明の抗体製剤は、例えば、１００〜２００ｍｇ／ｍＬの抗体、または約１５０ｍｇ／ｍＬの抗体を含む抗体製剤などの抗体製剤中に約１０〜約１００ｍＭのリジン、約２０〜約９０ｍＭのリジン、約３０ｍＭのリジン〜約８０ｍＭリジン、約４０〜約７０ｍＭのリジン、約４５〜約６５ｍＭのリジン、約４５〜約６０ｍＭのリジン、約５０〜約５５ｍＭのリジンを含む。実施形態において、本発明の製剤は、抗体製剤中に約５０ｍＭのリジンＨＣｌ、１００〜２００ｍｇ／ｍＬの抗体、または約１５０ｍｇ／ｍＬの抗体、非荷電賦形剤、界面活性剤、および調合緩衝液を含む。
【００６６】
本発明の抗体製剤は、非荷電賦形剤を含み得る。賦形剤という用語は、本明細書に記載される抗体と共に製剤化される、薬理学的不活性物質を指す。いくつかの実施形態では、賦形剤は、変性防止を促進し、または別の方法での抗体の安定化を促進し得る。医薬組成物で使用してもよい適切な賦形剤は、当該技術分野で公知である。例は、例えば手引き書Ｇｅｎｎａｒｏ，Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．：“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９９０にある。いくつかの実施形態では、賦形剤は、「非荷電」賦形剤であり、すなわち、陽性「＋」または陰性「−」電荷のいずれも保有しない賦形剤である。いくつかの実施形態では、賦形剤は、フルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、乳糖、マルトース、スクロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、トレハロース、ソルビトール、エリスリトール、イソモルト、ラクチトール、マルチトール、キシリトール、グリセロール、ラクチトール、ヒドロキシエチルデンプン、水溶性グルカンからなる群から選択される。
【００６７】
いくつかの実施形態では、非荷電賦形剤は、抗体製剤中に約１ｍＭ〜約１Ｍ、約２ｍＭ〜約５００ｍＭ、約５ｍＭ〜約４００ｍＭ、約１０ｍＭ〜約３００ｍＭまたは約２０ｍＭ〜約２５０ｍＭで存在する。いくつかの実施形態では、非荷電賦形剤は、抗体製剤中に約３０ｍＭ〜約２３０ｍＭ、約４０ｍＭ〜約２２０ｍＭ、約５０ｍＭ〜約２１０ｍＭ、約６０ｍＭ〜約２１０ｍＭ、約７０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約７０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約７０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約７０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約８０ｍＭ〜約１９０ｍＭ、約９０ｍＭ〜約１８０ｍＭ、約１００ｍＭ〜約１７０ｍＭ、約１１０ｍＭ〜約１６０ｍＭ、約１２ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約１２５ｍＭ〜約１４５ｍＭ、約１２５ｍＭ〜約１４０ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１２５ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１３５ｍＭ、約１４０ｍＭ、約１５０ｍＭ、約１６０ｍＭ、または約１７０ｍＭで存在し、例えば抗体製剤は、１００〜２００ｍｇ／ｍＬの抗体を含む。一実施形態では、非荷電賦形剤は、抗体製剤中に約１３０ｍＭで存在する。いくつかの実施形態では、非荷電賦形剤は、抗体製剤中に約５０ｍＭ〜約５００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約４５０ｍＭ、約１１０ｍＭ〜約３５０ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１２５ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１４０ｍＭ、または約１４５ｍＭで存在し、例えば、抗体製剤は、１００〜２００ｍｇ／ｍＬの抗体または約１５０ｍｇ／ｍＬの抗体を含む。一実施形態では、非荷電賦形剤は、抗体製剤中に約１３０ｍＭで存在する。
【００６８】
いくつかの実施形態では、非荷電賦形剤は、式：
【化２】
2020158527.tif 000005
によって表わされるトレハロースである。
【００６９】
いくつかの実施形態では、トレハロースは、抗体製剤中に約１ｍＭ〜約１Ｍ、約２ｍＭ〜約５００ｍＭ、約５ｍＭ〜約４００ｍＭ、約１０ｍＭ〜約３００ｍＭまたは約２０ｍＭ〜約２５０ｍＭで存在する。いくつかの実施形態では、トレハロースは、抗体製剤中に約３０ｍＭ〜約２３０ｍＭ、約４０ｍＭ〜約２２０ｍＭ、約５０ｍＭ〜約２１０ｍＭ、約６０ｍＭ〜約２１０ｍＭ、約７０ｍＭ〜約２００ｍＭ、約８０ｍＭ〜約１９０ｍＭ、約９０ｍＭ〜約１８０ｍＭ、約１００ｍＭ〜約１７０ｍＭ、約１１０ｍＭ〜約１６０ｍＭ、約１２０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約１２５ｍＭ〜約１４５ｍＭ、約１２５ｍＭ〜約１４０ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１２５ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１３５ｍＭ、約１４０ｍＭ、約１５０ｍＭ、約１６０ｍＭ、または約１７０ｍＭで存在し、例えば、抗体製剤は、１００〜２００ｍｇ／ｍＬの抗体を含む。一実施形態では、トレハロースは、抗体製剤中に約１３０ｍＭで存在する。いくつかの実施形態では、トレハロースは、抗体製剤中に約５０ｍＭ〜約５００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約４５０ｍＭ、約１１０ｍＭ〜約３５０ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１２５ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１４０ｍＭ、または約１４５ｍＭで存在し、例えば、抗体製剤は、１００〜２００ｍｇ／ｍＬの抗体または約１５０ｍｇ／ｍＬの抗体を含む。一実施形態では、トレハロースは、抗体製剤中に約１３０ｍＭで存在する。
【００７０】
抗体製剤には、様々なその他の成分が含まれ得る。いくつかの実施形態では、抗体製剤は、緩衝液（例えば、ヒスチジン、酢酸、リン酸またはクエン酸緩衝液）、および／または安定剤（例えば、ヒトアルブミン）などを含み得る。いくつかの実施形態では、抗体製剤は、例えば、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩などの緩衝物質、スクロース、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、硫酸プロタミンなどの塩または電解質、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、およびポリエチレングリコールを含む、薬学的に許容可能な担体を含み得る。
【００７１】
いくつかの実施形態では、抗体製剤は、界面活性剤をさらに含む。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、トリトンＸ−１００、ツイーン８０、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ノノキシノール−９、ポリオキサマー、ステアリルアルコール、ドデシル硫酸ナトリウム、およびモノステアリン酸ソルビタンからなる群から選択される。
【００７２】
いくつかの実施形態では、界面活性剤は、式：
【化３】
2020158527.tif 000006
によって表わされるポリソルベート８０、すなわち、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレアートである。ポリソルベート８０（ＰＳ−８０）は、例えば、Ａｌｋｅｓｔ（登録商標）ＴＷ８０（Ｕｎｉｖａｒ（登録商標））、およびＴｗｅｅｎ（登録商標）８０（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（登録商標））などのいくつかの商業的供給業者から市販される。本出願人らは、場合により、抗体製剤中のＰＳ−８０の濃度を調節することで、長期間にわたる貯蔵時に安定性が増し、粒子形成量が減少することを見出した。
【００７３】
いくつかの実施形態では、ＰＳ−８０は、例えば、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの抗体または約１５０ｍｇ／ｍＬの抗体を含む抗体製剤などの抗体製剤の約０．０１％〜約０．１％、約０．０２％〜約０．０９％、約０．０２％〜約０．０８％、約０．０３％〜約０．０８％、約０．０４％〜約０．０７％、約０．０５％〜約０．０６％、約０．０２％、約０．０３％、約０．０４％、約０．０５％、約０．０６％約０．０７％である。いくつかの実施形態では、ＰＳ−８０は抗体製剤中において約０．０５％である。
【００７４】
いくつかの実施形態では、抗体製剤は、ヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ緩衝液をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗体製剤は、例えば、１００〜２００ｍｇ／ｍＬの抗体または約１５０ｍｇ／ｍＬの抗体を含む抗体製剤などの本発明の抗体製剤中に約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約５ｍＭ〜約８０ｍＭヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ緩衝液、約１０ｍＭ〜約６０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ緩衝液、約１５ｍＭ〜約５０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ緩衝液、約１５ｍＭ〜約３０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ緩衝液、または約２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ緩衝液を含む。一実施形態では、ヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ緩衝液は、抗体製剤中に約２５ｍＭである。
【００７５】
いくつかの実施形態では、本発明は、１５０ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブまたはその抗原結合断片；５０ｍＭのリジンＨＣｌ；１３０ｍＭの非荷電賦形剤；０．０５％の界面活性剤；２５ｍＭの調合緩衝液を含む抗体製剤を対象とし、製剤は約５．９のｐＨである。
【００７６】
いくつかの実施形態では、本発明は、１５０ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブ；５０ｍＭのリジンＨＣｌ；１３０ｍＭの非荷電賦形剤；０．０５％の界面活性剤；２５ｍＭの調合緩衝液を含む抗体製剤を対象とし、製剤は約５．９のｐＨである。
【００７７】
追加的な実施形態では、本発明は、１５０ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブ；５０ｍＭのリジンＨＣｌ；１３０ｍＭのトレハロース二水和物；０．０５％のポリソルベート８０；２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む抗体製剤を対象とし、製剤は５．９のｐＨである。
【００７８】
いくつかの実施形態では、本発明は、（ａ）約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの抗体またはその抗原結合断片、（ｂ）約０．０２％〜約０．１％のポリソルベート８０、（ｃ）約１００ｍＭ〜約１６０ｍＭのトレハロース、（ｄ）約４０ｍＭ〜約６０ｍＭのＬ−リジンＨＣｌ、および（ｅ）１５〜３５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む安定な抗体製剤を対象とし、抗体はアニフロルマブである。実施形態において、製剤ｐＨは約５．５〜約６．５である。
【００７９】
さらなる実施形態では、本発明は、（ａ）約１４５ｍｇ／ｍＬ〜約１５５ｍｇ／ｍＬの抗体またはその抗原結合断片、（ｂ）約０．０４％〜約０．０８％のポリソルベート８０、（ｃ）約１２０〜１４０ｍＭのトレハロース二水和物、（ｄ）約４５〜５５ｍＭのＬ−リジンＨＣｌ、および（ｅ）約２０〜３０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む安定な抗体製剤を対象とし、抗体はアニフルロマブである。実施形態において、製剤ｐＨは約５．８〜約６．１である。
【００８０】
さらなる実施形態では、本発明は、（ａ）約１５０ｍｇ／ｍＬの抗体またはその抗原結合断片、（ｂ）約０．０５％のポリソルベート８０、（ｃ）約１３０ｍＭのトレハロース二水和物、（ｄ）約５０ｍＭのＬ−リジンＨＣｌ、および（ｅ）約２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む安定な抗体製剤を対象とし、抗体はアニフルロマブである。実施形態において、製剤ｐＨは約５．９である。
【００８１】
いくつかの実施形態では、本発明は、１５０ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブまたはその抗原結合断片；５０ｍＭのリジンＨＣｌ；１３０ｍＭのトレハロース二水和物；０．０５％のポリソルベート８０；２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む抗体製剤を対象とし、製剤は約５．９のｐＨである。
【００８２】
追加的な実施形態では、本発明は、１５０ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブ；５０ｍＭのリジンＨＣｌ；１３０ｍＭのトレハロース二水和物；０．０５％のポリソルベート８０；２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む抗体製剤を対象とし、製剤は５．９のｐＨである。
【００８３】
いくつかの実施形態では、抗体製剤から様々な成分を省くことができ、または抗体製剤は、その成分を「実質的に含まない」。「実質的に含まない」という用語は、本明細書の用法では、０．０１％未満、０．００１％未満、０．０００５％未満、０．０００３％未満、または０．０００１％未満の指定された成分を含有する抗体製剤を指す。
【００８４】
抗体製剤は、異なるモル浸透圧濃度を有し得る。抗体製剤のモル浸透圧濃度の測定法は、当業者に知られており、例えば浸透圧計（例えば、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｉｎｃ  ２０２０凝固点降下浸透圧計）が挙げられる。いくつかの実施形態では、製剤は、２００〜６００ｍｏｓｍ／ｋｇ、２６０〜５００ｍｏｓｍ／ｋｇ、または３００〜４５０ｍｏｓｍ／ｋｇのモル浸透圧濃度を有する。
【００８５】
本発明の抗体製剤は、様々なｐＨレベルを有し得る。いくつかの実施形態では、抗体製剤のｐＨは、４〜７、４．５〜６．５、または５〜６である。いくつかの実施形態では、抗体製剤のｐＨは５．０である。いくつかの実施形態では、抗体製剤のｐＨは６．０である。いくつかの実施形態では、抗体製剤のｐＨは≦７．０である。適切な緩衝液の添加を含むがこれに限定されない、様々な手段を利用して、所望のｐＨレベルを得てもよい。
【００８６】
本明細書に記載される抗体製剤は、様々な粘度を有する。抗体製剤の粘度測定法は当業者に知られており、例えばレオメータ（例えば、５０ｍｍ、４０ｍｍまたは２０ｍｍプレート付属品を備えたＡｎｔｏｎ  Ｐａａｒ  ＭＣＲ３０１レオメータ）が挙げられる。本発明のいくつかの実施形態では、粘度は、毎秒剪断速度１０００の高剪断限界で報告された。いくつかの実施形態では、抗体製剤は、２０センチポアズ（ｃＰ）未満、１８ｃＰ未満、１５ｃＰ未満、１３ｃＰ未満、または１１ｃＰ未満の粘度を有する。いくつかの実施形態では、抗体製剤は１３ｃＰ未満の粘度を有する。当業者は、粘度が温度に左右されることを理解し、したがって別段の指定がない限り、本明細書で提供される粘度は、別段の指定がない限り２５℃で測定される。
【００８７】
射出力は、抗体製剤が対象に投与される際に抗体製剤によって提供される抵抗性と相関する。射出力は、投与針のゲージおよび温度に左右される。いくつかの実施形態では、抗体製剤は、２７Ｇａのクモ膜下穿刺肉薄（ＳＴＷ）針を通過する際に１５Ｎ、１２Ｎ、１０Ｎ、または８Ｎ未満の射出力を有する。いくつかの実施形態では、抗体製剤は、２９ＧａのＳＴＷ針を通過する際に１５Ｎ、１２Ｎ、１０Ｎ、または８Ｎ未満の射出力を有する。
【００８８】
追加的な実施形態において、本発明の抗体製剤は水溶液である。いくつかの実施形態では、抗体製剤は、凍結温度にさらされず、および／または冷凍されず、すなわち、それらは液体状態のままであった。いくつかの実施形態では、抗体製剤中の抗体は凍結乾燥されなかった。
【００８９】
本明細書の用法では、安定性という用語は、一般に、タンパク質、ペプチド、または別の生理活性高分子などの生物活性作用物質の完全性維持、または分解、変性、凝集またはアンフォールディングの最小化に関連する。本明細書の用法では，「改善された安定性」とは、一般に、分解、変性、凝集またはアンフォールディングをもたらすことが知られている条件下で、関心のあるタンパク質（例えば、アニフロルマブなどの抗体）、ペプチドまたは別の生理活性高分子が、対照タンパク質、ペプチドまたは別の生理活性高分子と比較して、より大きい安定性を維持することを意味する。
【００９０】
いくつかの実施形態では、安定性とは、低から検出不能レベルの粒子形成を有する抗体製剤を指す。「低から検出不能レベルの粒子形成」という語句は、本明細書の用法では、約４０℃での約１８ヶ月間にわたる貯蔵後、粒度が１０ミクロンを超える粒子が検出されるＨＩＡＣ分析または視覚的分析による判定で、１０００／ｍＬ未満の粒子、７００／ｍＬ未満の粒子、６５０／ｍＬ未満の粒子、５００／ｍＬ未満の粒子、４００／ｍＬ未満の粒子、２００／ｍＬ未満の粒子、１００／ｍＬ未満の粒子または１／ｍＬ未満の粒子を含有するサンプルを指す。いくつかの実施形態では、ＨＩＡＣ分析または視覚的分析のいずれによっても抗体製剤中に粒子は検出されない。
【００９１】
いくつかの実施形態では、安定性は、抗体断片化の減少を指す。実施形態において、本発明の製剤中の例えばアニフロルマブなどの抗体の断片化率は、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施されたＨＰ−ＳＥＣ分析による判定で、１２ヶ月間にわたり１ヶ月当たり約２．０〜４．０％である。実施形態において、本発明の製剤中の例えばアニフロルマブなどの抗体の断片化率は、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施されたＨＰ−ＳＥＣ分析による判定で、６ヶ月間にわたり１ヶ月当たり約２．０〜４．０％である。実施形態において、本発明の製剤中の例えばアニフロルマブなどの抗体の断片化率は、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施されたＨＰ−ＳＥＣ分析による判定で、２ヶ月間にわたり１ヶ月当たり約２．０〜４．０％である。実施形態において、本発明の製剤中の例えばアニフロルマブなどの抗体の断片化率は、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施されたＨＰ−ＳＥＣ分析による判定で、２ヶ月間にわたり１ヶ月当たり約３．０〜４．０％である。
【００９２】
さらなる実施形態では、安定性は、抗体の凝集の減少を指す。実施形態において、例えば、アニロルマブを含有する本発明の抗体製剤の凝集率は、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施されたＨＰ−ＳＥＣ分析による判定で、１２ヶ月間にわたり１ヶ月当たり約０．５〜２．５％である。実施形態において、例えば、アニロルマブを含有する本発明の抗体製剤の凝集率は、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施されたＨＰ−ＳＥＣ分析による判定で、６ヶ月間にわたり１ヶ月当たり約０．５〜２．５％である。実施形態において、例えば、アニロルマブを含有する本発明の抗体製剤の凝集率は、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施されたＨＰ−ＳＥＣ分析による判定で、２ヶ月間にわたり１ヶ月当たり約０．５〜２．５％である。追加的な実施形態において、例えば、アニロルマブを含有する本発明の抗体製剤の凝集率は、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施されたＨＰ−ＳＥＣ分析による判定で、２ヶ月間にわたり１ヶ月当たり約１〜２％である。
【００９３】
さらなる実施形態では、安定性は、純度低下の減少を意味する。実施形態において、例えば、アニロルマブを含有する本発明の抗体製剤の純度低下率は、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施されたＨＰ−ＳＥＣ分析による判定で、１２ヶ月間にわたり１ヶ月当たり約３〜５％である。実施形態において、例えば、アニロルマブを含有する本発明の抗体製剤の純度低下率は、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施されたＨＰ−ＳＥＣ分析による判定で、６ヶ月間にわたり１ヶ月当たり約３〜５％である。追加的な実施形態において、例えば、アニロルマブを含有する本発明の抗体製剤の純度低下率は、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００カラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施されたＨＰ−ＳＥＣ分析による判定で、２ヶ月間にわたり１ヶ月当たり約３．５〜４．５％である。
【００９４】
当業者は、タンパク質の安定性が、製剤組成に加えて、その他の特性に左右されることを理解するであろう。例えば、安定性は、温度、圧力、湿度、ｐＨ、および外的形態の放射線によって影響され得る。したがって、特に断りのない限り、本明細書で言及される安定性は、４０℃、１気圧、５０％相対湿度、ｐＨ６．０、および標準的バックグラウンドレベルの放射線で測定されると見なされる。抗体製剤中の抗体安定性は、様々な手段によって判定し得る。いくつかの実施形態では、抗体安定性は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって判定される。ＳＥＣは、それらの流体力学的サイズ、拡散係数、および表面特性の組み合わせに基づいて、分析物（例えば、タンパク質および抗体などの巨大分子）を分離する。したがって例えばＳＥＣは、様々な変性状態にある抗体および／または分解された抗体から、天然の三次元立体構造にある抗体を分離し得る。ＳＥＣでは、固定層は、一般に、ガラスまたは鋼鉄カラム内の緻密な三次元マトリックスに充填された、不活性粒子から構成される。移動相は、純水、水性緩衝液、有機溶剤、これらの混合物、またはその他の溶媒であり得る。固定相粒子は、特定サイズ未満の化学種のみを進入させる小さい孔および／またはチャンネルを有する。したがって大型粒子は、これらの孔およびチャンネルから排除されるが、より小型の粒子は、流動移動相から取り出される。粒子が、固定相孔内で固定化状態にある時間は、それらが孔内にどの程度浸透したかに、ある程度左右される。移動相流から取り出されることで、それらのカラムからの溶出にはより長い時間がかかり、サイズの違いに基づいて粒子間の分離がもたらされる。
【００９５】
いくつかの実施形態では、ＳＥＣを同定技術と組み合わせて、タンパク質またはその断片を同定し、または特性解析する。タンパク質同定および特性解析は、例えば高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）などのクロマトグラフィー技術、免疫測定法、電気泳動、紫外線／可視／赤外線分光法、ラマン分光法、表面増強ラマン分光法、質量分光分析、ガスクロマトグラフィー、静的光散乱（ＳＬＳ）、フーリエ変換赤外線分光法（ＦＴＩＲ）、円二色性（ＣＤ）、尿素誘導タンパク質アンフォールディング技術、内在性トリプトファン蛍光、示差走査熱量測定、および／またはＡＮＳタンパク質結合を含むがこれに限定されない、様々な技術によって達成し得る。
【００９６】
いくつかの実施形態では、タンパク質同定は、高圧液体クロマトグラフィーによって達成される。ＨＰＬＣ実施するための様々な手段および装置が、当業者に知られている。一般にＨＰＬＣは、その中で分離が起きる分離カラムに、関心のあるタンパク質を含有する液体溶媒を装填することを伴う。ＨＰＬＣ分離カラムは、固体粒子（例えば、シリカ、ポリマー、または吸着材）で充填され、サンプル混合物は、カラム粒子との相互作用に伴って、化合物に分離される。ＨＰＬＣ分離は、液体溶媒条件（例えば、圧力、温度）、サンプル混合物と液体溶媒との化学相互作用（例えば、疎水性、プロトン付加など）、およびサンプル混合物と分離カラム内に充填された固体粒子との化学相互作用（例えば、リガンド親和性、イオン交換など）の影響を受ける。
【００９７】
いくつかの実施形態では、ＳＥＣおよびタンパク質の同定は、同一装置内で、または同時に行われる。例えば、ＳＥＣとＨＰＬＣは併用し得、ＨＰ−ＳＥＣと称されることが多い。
【００９８】
いくつかの実施形態では、抗体製剤は、約１００ｍｇ／ｍｌ〜約２００ｍｇ／ｍｌ抗体またはその抗原結合断片を含み、約４０℃での１〜２４ヶ月間にわたる貯蔵時に安定しており、抗体はアニフロルマブである。いくつかの実施形態では、製剤は、約２５℃での１〜１８ヶ月間にわたる保存時に安定している。いくつかの実施形態では、製剤は、約５℃での１〜６ヶ月間にわたる保存時に安定している。いくつかの実施形態では、製剤は、約５℃での１〜３ヶ月間にわたる保存時に安定している。いくつかの実施形態では、製剤は、約５℃での１〜１２ヶ月間にわたる保存時に安定している。いくつかの実施形態では、製剤は、約５℃での少なくとも１８ヶ月間にわたる保存時に安定している。いくつかの実施形態では、製剤は、約５℃での少なくとも２４ヶ月または３６ヶ月間にわたる保存時に安定している。
【００９９】
「安定した」という用語は相対的であり得、絶対的でない。したがって、いくつかの実施形態では、抗体を２℃〜８℃で６ヶ月間にわたり保存した際、ＨＰ−ＳＥＣによる測定で２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満または２％未満の抗体が分解、変性、凝集し、または折り畳まれていない場合、抗体は安定している。いくつかの実施形態では、抗体を２℃〜８℃で１２ヶ月間にわたり保存した際、ＳＥＣ  ＨＰＬＣによる測定で２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満または２％未満の抗体が分解、変性、凝集し、または折り畳まれていない場合、抗体は安定している。いくつかの実施形態では、抗体を２℃〜８℃で１８ヶ月間にわたり保存した際、ＨＰ−ＳＥＣによる測定で２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満または２％未満の抗体が分解、変性、凝集し、または折り畳まれていない場合、抗体製剤中の抗体は安定している。いくつかの実施形態では、抗体を２℃〜８℃で２４ヶ月間にわたり保存した際、ＳＥＣ  ＨＰＬＣによる測定で２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満または２％未満の抗体が分解、変性、凝集し、または折り畳まれていない場合、抗体製剤中の抗体は安定している。
【０１００】
いくつかの実施形態では、抗体を２３℃〜２７℃で３ヶ月間にわたり保存した際、ＨＰ−ＳＥＣによる測定で２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満または２％未満の抗体が分解、変性、凝集し、または折り畳まれていない場合、抗体は安定している。いくつかの実施形態では、抗体を２３℃〜２７℃で６ヶ月間にわたり保存した際、ＨＰ−ＳＥＣによる測定で２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満または２％未満の抗体が分解、変性、凝集し、または折り畳まれていない場合、抗体は安定している。いくつかの実施形態では、抗体を２３℃〜２７℃で１２ヶ月間にわたり保存した際、ＨＰ−ＳＥＣによる測定で２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満または２％未満の抗体が分解、変性、凝集し、または折り畳まれていない場合、抗体は安定している。いくつかの実施形態では、抗体を２３℃〜２７℃で２４ヶ月間にわたり保存した際、ＨＰ−ＳＥＣによる測定で２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満または２％未満の抗体が分解、変性、凝集し、または折り畳まれていない場合、抗体は安定している。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、抗体を４０℃で保存した際、ＨＰ−ＳＥＣによる測定で１ヶ月当たり６％未満、４％未満、３％未満、２％未満または１％未満の抗体が分解、変性、凝集し、または折り畳まれていない場合、抗体は安定している。いくつかの実施形態では、抗体を５℃で保存した際、ＨＰ−ＳＥＣによる測定で１ヶ月当たり６％未満、４％未満、３％未満、２％未満または１％未満の抗体が分解、変性、凝集し、または折り畳まれていない場合、抗体は安定している。
【０１０２】
実施形態において、抗体が５℃で貯蔵された際、ＨＰ−ＳＥＣによる判定で、１〜３ヶ月間、１〜６ヶ月間、１〜１２ヶ月間、１〜１８ヶ月間、または１〜２４ヶ月間にわたり１ヶ月当たり１％、２％、３％、４％、５％または６％（または約１％〜６％）の抗体が分解、変性、凝集またはアンフォールドされる場合、抗体は安定している。
【０１０３】
いくつかの実施形態では、８週間、４ヶ月、６ヶ月、９ヶ月、１２ヶ月または２４ヶ月間にわたり、例えばＥＬＩＳＡなどの当業者に知られている抗体結合アッセイによる測定で、抗体が、参照抗体と比較して、製剤の抗体（その抗体断片を含む）の結合活性に、非常にわずかまたは皆無の低下を示す場合、本発明の抗体製剤は安定していると見なし得る。いくつかの実施形態では、約４０℃で少なくとも１ヶ月間にわたり保存された抗体は、保存されていない参照抗体と比較して、ＩＮＦＡＲ１受容体ポリペプチドとの結合能力の少なくとも８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％を保つ。いくつかの実施形態では、約５℃で少なくとも６ヶ月間にわたり保存された抗体は、保存されていない参照抗体と比較して、ＩＮＦＡＲ１受容体ポリペプチドとの結合能力の少なくとも８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％を保つ。いくつかの実施形態では、約４０℃で少なくとも１ヶ月間にわたり保存された抗体は、保存されていない参照抗体と比較して、ＩＮＦＡＲ１受容体ポリペプチドとの結合能力の少なくとも９５％を保つ。いくつかの実施形態では、約５℃で少なくとも６ヶ月間にわたり保存された抗体は、保存されていない参照抗体と比較して、ＩＮＦＡＲ１受容体ポリペプチドとの結合能力の少なくとも９５％を保つ。
【０１０４】
本出願人らは、本明細書で提供される抗体製剤が、目視検査、マイクロフローイメージング（ＭＦＩ）、またはサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）による判定で、粒子形成の大幅低下をもたらすことを見出した。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、製剤は、約４０℃での少なくとも１ヶ月間にわたる保存時、目視検査による判定で粒子を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、製剤は、約５℃での少なくとも６ヶ月間、少なくとも９ヶ月間、少なくとも１２ヶ月間、少なくとも１５ヶ月間、少なくとも１８ヶ月間、少なくとも２４ヶ月間、または少なくとも３６ヶ月間にわたる保存時、目視検査による判定で粒子を実質的に含まない。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、本発明の抗体製剤は、製薬目的で使用し得る。製薬用途で使用される抗体は、概して、特に細胞タンパク質汚染物質、細胞ＤＮＡ汚染物質、ウイルスおよびその他の伝染性作用物質を含む、細胞培養物からの汚染物質に関して、高レベルの純度を有しなくてはならない。“ＷＨＯ  Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ａｎｉｍａｌ  ｃｅｌｌｓ  ａｓ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ：Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ  Ｎｏ．５０．”Ｎｏ．８７８．Ａｎｎｅｘ  １，１９９８を参照されたい。汚染物質に対する懸念に応えて、世界保健機関（ＷＨＯ）は、様々な汚染物質のレベルに対する制限を設けた。例えば、ＷＨＯは、タンパク質製品の１投与当たり１０ｎｇ未満のＤＮＡ許容限度を推奨する。同様に米国食品医薬品局（ＦＤＡ）は、０．５ｐｇ／ｍｇタンパク質以下のＤＮＡ許容限度を設定する。したがっていくつかの実施形態では、本発明は、例えば米国食品医薬品局および／または世界保健機関などの１つまたは複数の政府機関によって規定される、汚染物質制限を満たし、またはそれに優る、抗体製剤を対象とする。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、抗本明細書に記載される抗体製剤は、薬学的に許容可能である。「薬学的に許容可能」とは、健全な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性またはその他の合併症なしに、ヒトおよび動物組織との接触に適する、妥当な利点／リスク比が釣り合った抗体製剤を指す。
【０１０８】
抗体製剤の純度は、変動し得る。いくつかの実施形態では、例えば抗ＩＮＦＡＲ１抗体などの関心のある治療用抗体は、抗体製剤中に存在する全ポリペプチドの９０％（ｗｔ／ｗｔ）を超える。いくつかの実施形態では、例えば抗ＩＮＦＡＲ１などの関心のある治療用抗体は、抗体製剤中に存在する全ポリペプチドの９５％（ｗｔ／ｗｔ）、９８％（ｗｔ／ｗｔ）、９９％（ｗｔ／ｗｔ）、９９．５％（ｗｔ／ｗｔ）または９９．９％（ｗｔ／ｗｔ）を超える。
【０１０９】
本発明は、本明細書に記載される抗体製剤の治療有効量を投与することにより、Ｉ型ＩＦＮ媒介疾患または障害の治療を、それを必要とする対象において行う方法をさらに提供する。実施形態において、疾患または障害は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、インスリン依存性糖尿病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、自己免疫性甲状腺炎、関節リウマチ、糸球体腎炎、強皮症、筋炎、および狼瘡性腎炎からなる群から選択される。さらなる実施形態では、疾患または障害は、クローン病、潰瘍性大腸炎、およびセリアック病などの炎症性腸疾患である。さらなる実施形態では、疾患または障害は、肺疾患または全身性エリテマトーデスなどの障害である。
【０１１０】
本発明の抗体製剤は、様々な手段を通じて対象に投与し得る。いくつかの実施形態では、抗体製剤は、例えば、吸入（例えば、粉末またはエアゾールスプレー）、経粘膜、静脈内、皮下、または筋肉内投与を通じた非経口投与に適する。いくつかの実施形態では、製剤は注射用製剤である。いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載されるような抗体製剤のいずれかを含む、密封容器を対象とする。
【０１１１】
いくつかの態様では、本発明は様々な医薬品剤形を対象とする。様々な剤形が、本明細書で提供される製剤に適用し得る。例えば、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｖｏｌｕｍｅ  １，２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎを参照されたい。一実施形態では、本発明の医薬単位用量は、例えば、バイアルまたはシリンジなどの適切な容器内の抗体製剤を構成する。一実施形態では、本発明の医薬単位用量は、静脈内、皮下、または筋肉内に送達される抗体製剤を構成する。別の実施形態では、本発明の医薬単位用量は、煙霧剤で送達される抗体製剤を構成する。特定の実施形態では、本発明の医薬単位用量は、皮下送達される抗体製剤を構成する。別の実施形態では、本発明の医薬単位用量は、煙霧剤で送達される抗体製剤を構成する。さらなる実施形態では、本発明の医薬単位用量は、鼻腔内投与される抗体製剤を構成する。
【０１１２】
本発明の抗体製剤は、単回使用のための水性抗体製剤のアリコートを含有するバイアルを調製することで単位用量剤形として調製し得る。例えば、１バイアル当たりの単位用量は、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約３００ｍｇ／ｍｌの範囲にわたるＩＮＦＡＲ１受容体に特異的に結合する抗体を１ｍｌ、２ｍｌ、３ｍｌ、４ｍｌ、５ｍｌ、６ｍｌ、７ｍｌ、８ｍｌ、９ｍｌ、１０ｍｌ、１５ｍｌ、または２０ｍｌの異なる濃度で含有してもよい。必要に応じて、これらの製剤は、各バイアルに無菌希釈剤を添加することで所望の濃度に調節し得る。特定の実施形態では、本発明の水性抗体製剤は、約２ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの抗体またはその抗原結合断片を含有する滅菌液体として単回用量バイアルに処方され、抗体はアニフロルマブである。別の特定の実施形態では、本発明の水性抗体製剤は、約１００ｍｇ／ｍｌ〜約２００ｍｇ／ｍｌの抗体またはその抗原結合断片、約４５〜５５ｍＭのリジンＨＣｌ、約０．０４％〜約０．０８％のポリソルベート８０、約１２０ｍＭ〜約１４０ｍＭのトレハロース、および約２０〜３０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含有する滅菌液体として単回用量バイアルに処方され、抗体はアニフロルマブである。実施形態において、製剤のｐＨは約６である。一実施形態では、本発明の抗体は、３ｃｃ  ＵＳＰ  Ｉ型ホウケイ酸琥珀色バイアル（Ｗｅｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓパーツ番号６８００−０６７５）内に１４０〜１６０ｍｇ／ｍｌで提供される。別の実施形態では、本発明の抗体は、３ｃｃ  ＵＳＰ  Ｉ型ホウケイ酸琥珀色バイアル内に１５０ｍｇ／ｍｌで提供される。
【０１１３】
本発明の抗体製剤は、単回使用のための水性抗体製剤のアリコートを含有するプレフィルドシリンジを調製することで単位用量剤形として調製し得る。例えば、１プレフィルドシリンジ当たりの単位用量は、約１４０ｍｇ／ｍｌ〜約１６０ｍｇ／ｍｌの範囲のＩＦＮＡＲ１ポリペプチドと特異的に結合する、０．１ｍｌ、０．２ｍｌ、０．３ｍｌ、０．４ｍｌ、０．５ｍｌ、０．６ｍｌ、０．７ｍｌ、０．８ｍｌ、０．９ｍｌ、１ｍｌ、２ｍｌ、３ｍｌ、４ｍｌ、５ｍｌ、６ｍｌ、７ｍｌ、８ｍｌ、９ｍｌ、１０ｍｌ、１５ｍｌ、または２０ｍｌの様々な濃度の抗体またはその抗原結合断片を含有してもよい。特定の実施形態では、本発明の水性抗体製剤は、約１４５ｍｇ／ｍＬ〜約１５５ｍｇ／ｍＬの抗体またはその抗原結合断片、約４５〜５５ｍＭのリジンＨＣｌ、約０．０４％〜約０．０８％のポリソルベート８０、約１２０ｍＭ〜約１４０ｍＭのトレハロース、および約２０〜３０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含有する滅菌液体として単回用量プレフィルドシリンジに処方され、抗体はアニフロルマブである。実施形態において、製剤のｐＨは約６である。特定の実施形態では、本発明の水性抗体製剤は、約１４５ｍｇ／ｍＬ〜約１５５ｍｇ／ｍＬの抗体またはその抗原結合断片、約４５〜５５ｍＭのリジンＨＣｌ、約０．０４％〜約０．０８％のポリソルベート８０、約１２０ｍＭ〜約１４０ｍＭのトレハロース、および約２０〜３０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含有する滅菌液体として単回用量プレフィルドシリンジに処方され、抗体はアニフロルマブである。実施形態において、製剤のｐＨは約６である。
【０１１４】
様々な用量が、単回使用で投与され得る。例えば、いくつかの実施形態では、単回用量で、０．１ｍｇ、０．２ｍｇ、０．３ｍｇ、０．４ｍｇ、０．５ｍｇ、０．６ｍｇ、０．７ｍｇ、０．８ｍｇ、０．９ｍｇ、１．０ｍｇ、１．１ｍｇ、１．２ｍｇ、１．３ｍｇ、１．４ｍｇ、１．５ｍｇ、１．６ｍｇ、１．７ｍｇ、１．８ｍｇ、１．９ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、６ｍｇ、７ｍｇ、８ｍｇ、９ｍｇ、１０ｍｇ、１２ｍｇ、１４ｍｇ、１６ｍｇ、１８ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、７０ｍｇ、または１００ｍｇの抗体を投与し得る。
【０１１５】
様々なタイプのシリンジを使用し得る。シリンジは、対象への投与の例えば１週間、１日、６時間、３時間、２時間、１時間、３０分間、２０分間、または１０分間未満前など、対象への投与直前に抗体製剤で充填し得る。いくつかの実施形態では、シリンジは、小売販売の時点で、または対象の治療が行われる施設によって抗体製剤で充填される。いくつかの実施形態では、シリンジはあらかじめ充填され、例えば、シリンジは、対象への投与の１日、２日、４日、１週間、２週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、６ヶ月、１２ヶ月、１８ヶ月、２４ヶ月、３年、または４年以上前などに抗体製剤で充填される。いくつかの実施形態では、プレフィルドシリンジは、例えば、２７Ｇ通常針、２７Ｇ肉薄針、２９Ｇ通常針、または２９Ｇ肉薄針などの針を含む。いくつかの実施形態では、プレフィルドシリンジは、２７Ｇクモ膜下穿刺肉薄針を含む。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、所望の対象への投与に適する任意のシリンジを使用し得る。いくつかの実施形態では、シリンジは、プラスチックシリンジまたはガラスシリンジである。いくつかの実施形態では、シリンジは、タングステンを実質的に含まない材料からできている。いくつかの実施形態では、シリンジは、シリコーンで被覆される。いくつかの実施形態では、プレフィルドシリンジは、フルオロポリマー樹脂ディスクを有するプランジャーを含む。シリンジの例としては、２７Ｇ  ＳＴＷ針付きＢＤ  Ｈｙｐａｋ（商標）ＳＣＦ  １ＭＬＬ  ２７Ｇ１／２−５Ｂ  ＢＤ２６０Ｌ  ＷＬ，０．４ｍｇシリコン油ＭＤＮ；Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  Ｈｙｐａｋ  １ｍＬ  ｌｏｎｇプランジャーストッパー４０２３付きＨｙｐａｋ（商標）ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  １ｍｌ  Ｌｏｎｇ（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）；Ｆｌｕｒｏｔｅｃ  Ｄａｉｋｙｏ  Ｓｉ１０００（カタログ番号４７２７１９１９）；Ｃ３Ｐｉｎ；Ｈｙｐａｋ（商標）ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  ０．８ｍｇシリコーン油（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）；およびＣＺシリンジ（Ｗｅｓｔ、カタログ番号１９５５０８０７）が挙げられるが、これに限定されない。
【０１１７】
本発明の水性抗体製剤は、滅菌濾過、放射線などを含む様々な滅菌法によって滅菌されてもよい。特定の実施形態では、透析濾過抗体製剤は、滅菌済み０．２ミクロンフィルターによって濾過滅菌される。本発明の滅菌された水性抗体製剤は、例えば炎症応答などの免疫応答を予防、治療および／または管理するために対象に投与されてもよい。
【０１１８】
本発明は、標記発明の抗体製剤を含むプレフィルドシリンジをさらに提供する。いくつかの実施形態では、プレフィルドシリンジは、（ａ）約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＦＮＡＲ１抗体、約２５ｍＭ〜１３０ｍＭのリジンまたはリジン塩、非荷電賦形剤、界面活性剤、および調合緩衝液を含む。
【０１１９】
本発明は、標記発明の抗体製剤を含むプレフィルドシリンジをさらに提供する。いくつかの実施形態では、プレフィルドシリンジは、（ａ）約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブまたはその抗原結合断片、約４０〜６０ｍＭのリジンＨＣｌ、約１００ｍＭ〜約１６０ｍＭのトレハロース二水和物、０．０２％〜約０．１％のポリソルベート８０、および約１５ｍＭ〜約３５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む。実施形態において、製剤のｐＨは約５．５〜約６．５である。
【０１２０】
本発明は、標記発明の抗体製剤を含むプレフィルドシリンジをさらに提供する。いくつかの実施形態では、プレフィルドシリンジは、（ａ）約１４５ｍｇ／ｍＬ〜約１５５ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブまたはその抗原結合断片、約４５〜５５ｍＭのリジンＨＣｌ、１２０ｍＭ〜約１４０ｍＭのトレハロース二水和物、０．０４％〜約０．０８％のポリソルベート８０、および２０ｍＭ〜約３０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む。実施形態において、製剤のｐＨは約５．８〜６．１である。
【０１２１】
本発明は、標記発明の抗体製剤を含むプレフィルドシリンジをさらに提供する。いくつかの実施形態では、プレフィルドシリンジは、（ａ）約１５０ｍｇ／ｍＬの抗体またはその抗原結合断片、いくつかの実施形態では５０ｍＭのリジンＨＣｌ、約０．０５％のポリソルベート８０、約１３０ｍＭのトレハロース二水和物、および約２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含み、抗体はアニフロルマブである。実施形態において、製剤のｐＨは約５．９である。
【０１２２】
本発明は、標記発明の抗体製剤を含むプレフィルドシリンジをさらに提供する。いくつかの実施形態では、プレフィルドシリンジは、（ａ）約１５０ｍｇ／ｍＬのアニフロルマブ、約５０ｍＭのリジンＨＣｌ、約０．０５％のポリソルベート８０、約１３０ｍＭのトレハロース二水和物、および約２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含む。実施形態において、製剤のｐＨは約５．９である。
【０１２３】
特定の実施形態では、本発明の抗体製剤は、約１４５ｍｇ／ｍＬ〜約１５５ｍｇ／ｍＬの抗体またはその抗原結合断片、約４５〜５５ｍＭのリジンＨＣｌ、約０．０４％〜約０．０８％のポリソルベート８０、約１２０ｍＭ〜約１４０ｍＭのトレハロース、および約２０〜３０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含有する滅菌液体として単回用量プレフィルドシリンジに処方され、抗体はアニフロルマブである。実施形態において、製剤のｐＨは約６である。
【０１２４】
実施形態において、本発明は、本発明の抗体製剤を含むプレフィルドシリンジを対象とし、プレフィルドシリンジは、２７ゲージクモ膜下穿刺肉薄（ＳＴＷ）針を装着された際に１〜２０Ｎの平均滑り力を有する。実施形態において、本発明は、本発明の抗体製剤を含むプレフィルドシリンジを対象とし、プレフィルドシリンジは、２７ゲージクモ膜下穿刺肉薄（ＳＴＷ）針を装着された際に５〜１５Ｎの平均滑り力を有する。実施形態において、本発明は、本発明の抗体製剤を含むプレフィルドシリンジを対象とし、プレフィルドシリンジは、２７ゲージクモ膜下穿刺肉薄（ＳＴＷ）針を装着された際に約８Ｎの平均滑り力を有する。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載される抗体製剤、本明細書に記載される容器、本明細書に記載される単位用量剤形、または本明細書に記載されるプレフィルドシリンジのいずれかを含むキットを対象とする。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、本発明はまた、（ａ）抗体またはその抗原結合断片を約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬに精製するステップであって、抗体はアニフロルマブである、ステップと、（ｂ）単離抗体を安定化製剤に入れて安定な抗体製剤を形成するステップとを含む、抗体を含む安定な抗体製剤を製造する方法も対象とし、得られた安定な抗体製剤は、（ｉ）アニフロルマブである約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの抗体またはその抗原結合断片、（ｉｉ）約２５ｍＭ〜約１３０ｍＭのリジンまたはリジン塩、（ｉｉｉ）約１００ｍＭ〜約１５０ｍＭのトレハロース、（ｉｖ）約０．０２％〜約０．１％のポリソルベート８０を含む、。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、本発明はまた、（ａ）抗体またはその抗原結合断片を約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬに精製するステップであって、抗体はアニフロルマブである、ステップと、（ｂ）単離抗体を安定化製剤に入れて安定な抗体製剤を形成するステップとを含む、抗体を含む安定な抗体製剤を製造する方法も対象とし、得られた安定な抗体製剤は、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの抗体；約４５ｍＭ〜約５５ｍＭのリジンのリジンＨＣｌまたはリジン塩；約１００ｍＭ〜約１５０ｍＭの非荷電賦形剤；約０．０２％〜約０．１％の界面活性剤；および調合緩衝液を含む。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、本発明はまた、（ａ）抗体またはその抗原結合断片を約１４５ｍｇ／ｍＬ〜約１５５ｍｇ／ｍＬに精製するステップであって、抗体はアニフロルマブである、ステップと、（ｂ）単離抗体を安定化製剤に入れて安定な抗体製剤を形成するステップとを含む、抗体を含む安定な抗体製剤を製造する方法も対象とし、得られた安定な抗体製剤は、約１４５ｍｇ／ｍＬ〜約１５５ｍｇ／ｍＬの抗体、約２５ｍＭ〜約１３０ｍＭのリジンＨＣｌまたはリジン塩；約１２０ｍＭ〜約１４０ｍＭのトレハロース二水和物；約０．０４％〜約０．０８％のポリソルベート８０、約２０ｍＭ〜約３０ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌを含み、製剤のｐＨは約５．８〜６．１である。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、本発明は、（ａ）抗体またはその抗原結合断片を約１５０ｍｇ／ｍＬに精製するステップであって、抗体はアニフロルマブである、ステップと、（ｂ）単離抗体を安定化製剤に入れて安定な抗体製剤を形成するステップとを含む、安定な抗体製剤を製造する方法を対象とし、得られた安定な抗体製剤は、（ｉ）約１５０ｍｇ／ｍＬの抗体またはその抗原結合断片、（ｉｉ）約５０ｍＭのリジンＨＣｌ；（ｉｉｉ）約１３０ｍＭのトレハロース、（ｉｖ）約０．０５％％）のポリソルベート８０を含み、抗体はアニフロルマブである。
【０１３０】
本発明の多くの態様は、水性製剤を対象とするが、均等物の目的で、本発明の抗体または抗体製剤は、必要に応じて凍結乾燥されてもよいことに留意すべきである。したがって、本発明は、後から水性形態に再構成される本発明の製剤の凍結乾燥形態または凍結乾燥抗体を包含する。いくつかの実施形態では、本発明は、アニフロルマブを含む、再構成された抗体またはその抗原結合断片の製剤を製造する方法を対象とし、方法は、（ａ）細胞培養物から抗体を精製するステップと；（ｂ）単離抗体を凍結乾燥するステップと；（ｃ）凍結乾燥抗体を水溶液に添加して、再構成された抗体製剤を形成するステップとを含み、再構成された抗体製剤は、（ｉ）アニフロルマブである約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの抗体またはその抗原結合断片、および（ｉｉ）約４５〜約５５ｍＭのリジンＨＣｌを含む。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、本発明は、抗体またはその抗原結合断片を含む抗体製剤を対象とし、抗体はアニフロルマブであり、抗体製剤は、粒子を本質的に含まない。いくつかの実施形態では、「粒子を本質的に含まない」をという用語は、ライトボックス下で観察した際の可視粒子の不在を指す。いくつかの実施形態では、「粒子を本質的に含まない」という用語は、前述の「低から検出不能レベルの粒子形成」という語句と同義である。いくつかの実施形態では、粒子を本質的に含まないとは、サンプルが３０個未満の粒子／ｍＬ、２０個未満の粒子／ｍｌ、２０個未満の粒子／ｍｌ、１５個未満の粒子／ｍｌ、１０個未満の粒子／ｍｌ、５個未満の粒子／ｍｌ、２個未満の粒子／ｍｌまたは１個未満の粒子／ｍｌを含有することを指し、粒子は２５μｍよりも大きく、粒子数はＨＩＡＣ分析または視覚的分析によって確認される。いくつかの実施形態では、粒子を本質的に含まないとは、サンプルが１〜５０個の粒子／ｍＬ、２〜４０個の粒子／ｍｌ、３〜３０個の粒子／ｍｌ、４〜２５個の粒子／ｍｌ、または５〜２０個の粒子／ｍｌを含有することを指し、粒子は２５μｍよりも大きく、粒子数はＨＩＡＣ分析または視覚的分析によって確認される。いくつかの実施形態では、「可視粒子」という用語は、２５μｍよりも大きい粒子を指す。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、粒子を本質的に含まないとは、１〜２００個の粒子／ｍＬ、１０〜１５０個の粒子／ｍｌ、約３０個の粒子／ｍｌ〜１００個の粒子／ｍｌ、または４０〜８０個の粒子／ｍｌを含有するサンプルを指し、粒子は５μｍよりも大きく、粒子数はＨＩＡＣ分析または視覚的分析によって確認される。いくつかの実施形態では、「可視粒子」という用語は、５μｍよりも大きい粒子を指す。いくつかの実施形態では、ＨＩＡＣ分析または視覚的分析のいずれによっても抗体製剤中に粒子は検出されない。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、本発明は、抗体またはその抗原結合断片を含む抗体製剤を対象とし、抗体製剤は、３８℃〜４２℃での貯蔵時、少なくとも１ヶ月間、少なくとも２ヶ月間、少なくとも３ヶ月間、少なくとも４ヶ月間、少なくとも５ヶ月間、少なくとも６ヶ月間、少なくとも８ヶ月間、少なくとも１０ヶ月間、少なくとも１２ヶ月間、または少なくとも１８ヶ月間にわたり粒子を本質的に含まず、抗体はアニフロルマブである。いくつかの実施形態では、本発明は、抗体またはその抗原結合断片を含む抗体製剤を対象とし、抗体製剤は、２〜６℃での貯蔵時、少なくとも１ヶ月間、少なくとも２ヶ月間、少なくとも３ヶ月間、少なくとも４ヶ月間、少なくとも５ヶ月間、少なくとも６ヶ月間、少なくとも８ヶ月間、少なくとも１０ヶ月間、少なくとも１２ヶ月間、少なくとも１８ヶ月間、少なくとも２４ヶ月間、少なくとも３０ヶ月間、少なくとも３６ヶ月間、または少なくとも４８ヶ月間にわたり粒子を本質的に含まず、抗体はアニフロルマブである。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、本発明は、抗体がアニフロルマブである、抗体またはその抗原結合断片を精製する方法であって、（ｉ）抗体を含む細胞培養物を得るステップと、（ｉｉ）抗体にアフィニティクロマトグラフィー実施するステップと、（ｉｖ）抗体にカチオン交換を実施するステップと、（ｖ）抗体に混合モードクロマトグラフィーを実施するステップとを含む方法を対象とする。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、本発明は、抗体またはその抗原結合断片を精製する方法を対象とし、抗体はアニフロルマブであり、方法は、（ｉ）抗体を含む細胞培養物を得るステップと、（ｉｉ）抗体をプロテインＡカラムに結合させるステップと、（ｉｉｉ）抗体をプロテインＡカラムから溶出させるステップと、（ｉｖ）抗体にカチオン交換を実施するステップと、（ｖ）抗体に混合モードクロマトグラフィーを実施するステップとを含む。いくつかの実施形態では、抗体を精製する方法は、ウイルス不活性化処理をさらに含む。いくつかの実施形態では、ウイルス不活性化ステップは、ｐＨを４．０未満に低下させることで実施される。いくつかの実施形態では、方法は、透析濾過処理をさらに含む。いくつかの実施形態では、方法は、濾過処理をさらに含む。いくつかの実施形態では、活性ウイルス粒子を除去するのに、濾過処理で十分である。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、本発明は、患者を治療する方法を対象とする。いくつかの実施形態では、方法は、本明細書に記載される抗体製剤を、それを必要とする対象に投与するステップと、本明細書に記載される容器、本明細書に記載される単位用量剤形、または本明細書に記載されるプレフィルドシリンジを含む。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載される抗体製剤を投与することで肺疾患または障害を治療するのに適する。いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載される抗体製剤を投与することで、好酸球性疾患または障害がある患者を治療する方法を対象とする。いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載される抗体製剤を投与するステップを含む、対象において肺疾患または障害を治療する方法を対象とする。いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載される抗体製剤を投与するステップを含む、対象において好酸球性疾患または障害を治療する方法を対象とする。いくつかの実施形態では、本発明は，本明細書に記載される抗体製剤を投与するステップを含む、対象における、例えば、喘息、ＣＯＰＤ、好酸球性喘息、混合型好酸球性・好中球喘息、アスピリン高感度喘息、アレルギー性気管支肺のアスペルギルス症、急性および慢性好酸球性気管支炎、急性および慢性好酸球性肺炎、チャーグ・ストラウス症候群、過好酸性症候群、薬物・刺激物・放射線誘発性肺好酸球増加症、感染誘発性肺好酸球増加症（真菌、結核、寄生生物）、己免疫関連肺好酸球増加症、好酸球性食道炎、またはクローン病またはそれらの組み合わせなどの肺疾患または障害の治療法を対象とする。いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載される抗体製剤を投与するステップを含む、対象における喘息の治療法を対象とする。いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載される抗体製剤を投与するステップを含む、対象におけるＣＯＰの治療法を対象とする。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される抗体製剤の治療有効量が投与されて、病状が治療される。本明細書の用法では、「治療有効量」という用語は、疾患または障害（例えば、ＩＦＮＡＲ１受容体ポリペプチドの異常な発現および／または活性によって特徴付けられる疾患または障害、ＩＦＮＡＲ１受容体またはその１つまたは複数のサブユニットの異常な発現および／または活性によって特徴付けられる疾患または障害、自己免疫疾患、炎症性疾患、増殖性疾患、または感染症あるいは１つまたは複数のその症状）の重症度を低下させ、病状の持続期間を低下させ、このような疾患または障害の１つまたは複数の症状を改善し、このような疾患または障害の進行を予防し、このような疾患または障害の退縮を引き起こし、または別の治療法の治療効果を高めまたは改善するのに十分な治療法（例えば、ＩＦＮＡＲ１ポリペプチドと免疫特異的に結合する抗体）の量を指す。いくつかの実施形態では、治療有効量は、事前に特定され得ず、例えば用量漸増などの様々な手段を使用して、例えば医師またはその他の保健医療提供者などの介護者によって判定され得る。適切な治療有効量はまた、例えば動物モデルを使用して、日常的実験法によって判定し得る。
【０１３９】
「治療法（ｔｈｅｒａｐｉｅｓ）」および「治療法（ｔｈｅｒａｐｙ）」という用語は、疾患または障害（例えば、ＩＦＮＡＲ１ポリペプチドの異常な発現および／または活性によって特徴付けられる疾患または障害、ＩＦＮＡＲ１受容体またはその１つもしくは複数のサブユニットの異常な発現および／または活性によって特徴付けられる疾患または障害、自己免疫疾患、炎症性疾患、増殖性疾患、または感染症（好ましくは呼吸器感染症）あるいはその１つまたは複数の症状）の予防、治療、管理、または改善において使用し得る、あらゆるプロトコル、方法、および／または作用物質を指し得る。特定の実施形態では、「治療法（ｔｈｅｒａｐｙ）」および「治療法（ｔｈｅｒａｐｙ）」という用語は、熟練した医療関係者に知られている、そのような疾患もしくは障害または１つもしくは複数の症状の治療、管理、予防、または改善において有用な、生物学的療法、支持療法、および／またはその他の治療法を指す。
【０１４０】
本明細書の用法では、「治療法プロトコル」という用語は、投薬および治療的に有効な１つまたは複数の治療法（例えば、治療薬）の実施のタイミングのためのレジメンを指す。
【０１４１】
本発明の抗体製剤の投与経路は、例えば、経口、非経口、吸入または局所投与法を介し得る。非経口という用語は、本明細書の用法では、例えば静脈内、動脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、直腸または膣内投与を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、抗ＩＦＮＡＲ１抗体であり、投与経路は筋肉内注射である。これらの投与形態は全て、本発明の範囲内として明確に検討される一方で、いくつかの実施形態では、抗体製剤は、注射、特に静脈内もしくは動脈内注射または点滴による投与に適する。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物および方法は、コストの削減、方法段階の削減、誤りの機会の減少、安全でないまたは不適切な添加剤の導入の機会の減少、廃棄物の低減、保存時間の増加などのいずれかにより、製造会社がより効率的な方法でヒトへの投与に適した抗体製剤を製造できるようにする。
【実施例】
【０１４３】
ここで、本発明を以下の実施例を参照して説明する。これらの実施例は例示のみを目的とし、本発明はこれらの実施例にどのようにも限定されず、むしろ本明細書で提供される教示の結果として明らかになるあらゆる全ての変形形態を包含すると解釈されるべきである。
【０１４４】
実施例１
材料および方法
材料
使用された全ての材料は、ＵＳＰまたは複数公定等級であった。全ての溶液および緩衝液は、ＵＳＰまたはＨＰＬＣ水を使用して調製し、さらなる使用前に濾過した。安定性試験のためのサンプルは、バイオセーフティキャビネットフード（ＢＳＣ）の無菌条件下で調製した。バルク材料は、２〜８℃で保存した。安定性試験は、表３に列挙される供給品を用いて実施した。
【表３】
2020158527.tif 000007
【０１４５】
タンパク質濃度判定
タンパク質濃度は、ＳＯＰＤＶ−６２３３から適応された手法を用いて、Ａｇｉｌｅｎｔ  ＵＶ−Ｖｉｓ分光光度計を用いて２８０ｎｍでの吸光度を測定することによって判定した。測定された１．３９（ｍｇ／ｍＬ）−〜ｃｍ〜の吸光係数を用いた。サンプルについて、ＴＤ−００２５に従って糖または非糖含有製剤のための密度補正係数を適用した。
【０１４６】
円錐平板粘度測定
粘度は、円錐形およびプレート付属品を備えたＡｎｔｏｎ  Ｐａａｒ  ＭＣＲ３０１レオメータを用いて測定した。必要な容積を最小化するために、スクリーニング目的の１回の反復測定で２０ｍｍの円錐を使用した。結果を１０００の毎秒剪断速度の高剪断限界で報告した。
【０１４７】
サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＳＥＣ）による純度判定
ＳＥＣは、現行の製剤科学ガイドラインに従って、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００を有するＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣ装置で実施された。
【０１４８】
外観
標準的な操作手順：タンパク質原薬および医薬品の外観評価（Ｖｉｓｕａｌ  Ａｐｐｅａｒａｎｃｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｓｕｂｓｔａｎｃｅ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｐｒｏｄｕｃｔ）から適応された粒子標準および指標を用いて、サンプルをそれらの各容器内で色および透明度について調べることによってサンプルの目視検査を実施した。
【０１４９】
安定性および粘度に対する賦形剤レベルの影響を評価するための研究
安定性および粘度（応答）に対する濃度、トレハロースレベルおよびリジンＨＣｌレベル（要素）の影響を研究するために、実験アプローチの設計を利用した。ボックスベーンケン計画は、ＪＭＰ９．１ソフトウェア（ＳＡＳ，Ｉｎｃ．，ＮＣ，Ｃａｒｙ）を用いて作成した。設計は、濃度（１００〜２００ｍｇ／ｍＬ）；トレハロースレベル（０〜２１１ｍＭ）；およびリジンＨＣｌレベル（２５〜１３０ｍＭ）の要素を含んだ。ｐＨは、サイクル１製剤についての以前の製剤安定性データに基づいて６．０に設定した。ポリソルベートレベルは、０．０２％に設定した。高濃度において、０〜２５ｍＭのリジンＨＣＬの範囲にわたり粘度の大幅な低下が観察された、予備的ハイスループット粘度スクリーニング研究に基づいて、低リジンレベルは２５ｍＭと定義された（実施例２参照）。安定性は、外観およびＨＰ−ＳＥＣによる純度の評価（モノマー損失、凝集、断片化）を用いて、４０℃での加速安定性試験を実施して評価した。５℃での１．８ヶ月後における肉眼不可視の粒子数も測定したが、サンプル間で有意な差異は観察されなかったため、さらに分析しなかった。
【０１５０】
堅固さおよびリジンＨＣｌ濃度の粘度プロファイルに対する影響
２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ、２５ｍＭのリジンＨＣｌ（注：これは低リジンＨＣｌ区分内である）、１３０ｍＭのトレハロース二水和物中の約２００ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ−５４６の原液（ｐＨ６．０）を調製して、ポリソルベート８０を０．０２％配合した希釈系列を調製した。濃度および粘度を測定し、プロットした。公称製剤条件（５０ｍＭのリジンＨＣｌ）も調製し、測定した。０．５ＭのリジンＨＣｌ原液を調製し、ＭＥＤＩ−５４６原液を公称５０ｍＭのリジンレベルにスパイクするのに使用した。同一希釈および処方を実施して、粘度および濃度を測定した。
【０１５１】
２７Ｇａ  ＳＴＷプレフィルドシリンジ内のリード製剤の機能評価
プレフィルドシリンジ（「ＰＦＳ」）（ＢＤ  Ｈｙｐａｋ  ＳＣＦ  １ＭＬＬ  ２７Ｇ１／２−ＳＢ）；０．４ｍｇシリコーン油ＭＤＮ、２７ＧＳＴＷ肉薄針装着）に、２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ、５０ｍＭのリジンＨＣｌ、１３０ｍＭのトレハロース二水和物、０．０５％のポリソルベート８０（ｐＨ５．９）中の１５０ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ−５４６を充填した。このロットの粘度は９．４ｍＰａｓ、濃度は１５０．７ｍｇ／ｍＬと測定された。ＢＤ  Ｈｙｐａｋ  ＳＣＦ  １ＭＬＬ  ４０２３  ＦＬＵＲ  Ｄａｉｋｙｏ  ＳＩ１０００ストッパーを真空ストッパーによって装着した。インストロン５５４２（Ｎｏｒｗｏｏｄ，ＭＡ  ０２０６２）を使用して、２６０ｍｍ／分で滑り性能を測定した。さらに、３人の分析者が関節炎シミュレーション手袋を装着し、または非装着で注射までの時間を評価した（Ｇｅｏｒｇｉａ  Ｔｅｃｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅからの関節炎手袋およびＬｉｍｂｓｎｔｈｉｎｇｓ，ＵＫからの注射トレーナー）。
【０１５２】
実施例２
ハイスループット粘度スクリーニング結果の概要
ハイスループット粘度スクリーニングは、ナノ粒子を使用して実施した。手短に述べると、水（既知の粘度）およびサンプル（未知の粘度）中で既知の粒度のナノ粒子を測定し、比率を用いて未知のサンプル粘度を判定した。これらのデータは、絶対粘度測定のためでなく、スクリーニングおよび趨勢のために収集した。
【０１５３】
ｐＨに対する粘度のＨＴＳスクリーニング結果は、図１に示される。結果は、粘度がｐＨと共に増加することを示唆した。ＴＦＦ中における、粘度および可能なドーマン型効果に対するこの潜在的なｐＨの影響に基づいて、本発明者らは、製剤ｐＨを５．９に選択すべきであると判断した。ＰＦＳの開発のためには、ｐＨの影響を中心とするさらなる堅固さが必要となる。リジンＨＣｌに対する粘度のＨＴＳスクリーニング結果（図２）は、０〜２５ｍＭのリジンＨＣｌにかけて粘度の大幅な低下を示した。サンプル調製の実地実験室観察も、リジンなしではサンプル粘度がより高く、より高い濃度での取り扱いが困難であることを示した。この理由から、実験は２５ｍＭのリジンＨＣｌを低レベルとして開始した。
【０１５４】
実施例３
製剤の安定性および粘度の総合評価
表４は、抗体製剤の粘度および加速安定性結果の概要を示す。表５は、５℃で１．８ヶ月後における製剤の（ＨＩＡＣによる）肉眼不可視の粒子の結果の概要を示す。結果の総合評価は、４０℃での純度低下率が全て許容可能であり、１ヶ月当たり３．８〜４．８％の範囲であったことを示す。断片化率は１ヶ月当たり２．８〜３．４％の範囲であり、凝集率は１ヶ月当たり０．７〜２．０％の範囲であった。４０℃で１ヶ月後における目視検査は、全ての製剤について同様の性能を示す（全て粒子は標準１、透明度は＜ＩＩＩまたはＩＩ、色はＹ６）。肉眼不可視の粒子（ＨＩＡＣ）データは、全てのサンプルが、粒度１０ミクロンを超える粒子を１ｍＬ当たり６７０個未満有したことを示した。粘度は、全ての製剤について２．８〜３９．７ｍＰａｓの範囲であった。１５０ｍｇ／ｍＬの製剤のいくつかは、許容可能な粘度値を有した。
【０１５５】
以下の実施例におけるデータの追加的な分析は、安定性を最大にしながら許容可能な粘度を提供する適切で堅固な製剤を選択するために、データがどのように使用および解釈されたかを示す。
【表４】
2020158527.tif 000008
【表５】
2020158527.tif 000009
【０１５６】
実施例４
結果の分析
表６は、データから得られた解釈および結論を要約する。
【表６】
2020158527.tif 000010
【０１５７】
分析結果に基づいて、２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ、５０ｍＭのリジンＨＣｌ、１３０ｍＭのトレハロース脱水物、０．０５％のポリソルベート８０（ｐＨ５．９）中の１５０ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ−５４６を有する製剤をさらに評価した。
【０１５８】
実施例６
抗体製剤の粘度およびシリンジ機能性の確認
理想的には、プレフィルドシリンジの滑り力は、機能性を確保するために可能な限り低いべきである。この研究において、本発明者らは、２０ｍＰａｓ未満の粘度および１５Ｎ未満の滑り力を目標値とする。以前の経験では、１５ｍＰａｓ未満の公称粘度を有する製剤が、２７ゲージの薄肉針を装着された場合、許容可能な滑り性能を有した。２７Ｇａ  ＳＴＷ  ＰＦＳでは、最大２０ｍＰａｓが実現可能であってもよい。製剤およびＰＦＳは、シリンジおよび製剤のばらつきを補償するために、堅固さを含むべきである。
【０１５９】
このセクションにおいて、本発明者らは、より低い区分（２５ｍＭ）のリジンＨＣｌ製剤と比較した場合の、濃度曲線と対比した製剤粘度の堅固さを実証する追加的なデータを記載する。２７Ｇａ  ＳＴＷ  ＰＦＳ内の公称製剤による、滑り性能および注射時間実現可能性の結果もこのセクションで評価される。
【０１６０】
堅固さおよびリジンＨＣｌ濃度の粘度プロファイルに対する影響
１００〜２００ｍｇ／ｍＬにわたるＭＥＤＩ−５４６の希釈系列を２つの製剤中で調製した。それらは、２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジン−ＨＣｌ、１３０ｍＭのトレハロース脱水物、０．０２％のポリソルベート８０（ｐＨ６．０）に２５ｍＭまたは５０ｍＭのいずれかのリジンＨＣｌを配合した中にＭＥＤＩ−５４６を含有した。粘度曲線は、図３に示される。結果は、低（２５ｍＭ）および公称（５０ｍＭ）の両方のリジンレベルを有する製剤の粘度が１５０ｍｇ／ｍＬ（＜１５ｍＰａｓ）で許容可能であり、いずれも１６５ｍｇ／ｍＬで約２０ｍＰａｓ未満であることを示す。したがって、５０ｍＭのリジンＨＣｌの公称レベルが粘度性能の観点から２５ｍＭの低レベルで適切に切り分けられるという結果が確認された。ＴＦＦ中における、粘度および可能なドーマン型効果に対するｐＨの影響に基づいて、抗体製剤のｐＨは５．９に選択された。
【０１６１】
プレフィルドシリンジ内の抗体製剤の機能性の評価
表７は、２５ｍＭのヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌ、５０ｍＭのリジンＨＣｌ、１３０ｍＭのトレハロース脱水物、０．０５％のポリソルベート８０（ｐＨ５．９）中に１５０ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ−５４６を有する製剤の機能評価の結果を示す。
【０１６２】
ＭＥＤＩ−５４６医薬品を注射するのに必要な力は、許容範囲内であった。表８は、使用者注射評価（実験室分析者）の結果を示す。使用者らは、「射出力が軽かった」、「関節炎手袋がＡＰＦＳの取り扱いを困難にした」、「ＳＳＩデバイスが機能した」と報告した。ユーザーは、注射トレーナーおよび手袋を初めて使用したため、注射速度にいくらかのばらつきがあった（注：注射するための力は問題とされなかった）。これらの結果は、この製剤が２７Ｇａ  ＳＴＷ針を装着したＰＦＳでの使用に適することを示す。これらの研究は、抗体製剤の粘度に関していかなる問題も特定しなかった。
【表７】
2020158527.tif 000011
【表８】
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【０１６３】
実施例７
粘度に対するリジンおよびタンパク質の影響
表９および図４に示されるように、異なる濃度におけるリジン溶液の粘度をタンパク質（アニフロルマブ）濃度の関数として測定した。
【表９】
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【０１６４】
表１０および図５に示されるように、異なる濃度における抗体（アニフロルマブ）溶液の粘度をタンパク質濃度の関数として測定した。
【表１０】
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【０１６５】
上に示された実施例は、本発明の様々な態様および本発明の方法の実施を例示する。これらの実施例は、本発明の多くの異なる実施形態の網羅的な説明を提供することは意図されない。したがって、理解の明確さのために、本発明を例示および実施例によっていくらか詳細に説明してきたが、当業者は、添付の特許請求の範囲の趣旨または範囲から逸脱することなく、多くの変更形態および修正形態がなされ得ることを容易に理解するであろう。
【０１６６】
本明細書で言及される全ての刊行物、特許、および特許出願は、個々の刊行物、特許または特許出願が、あたかも具体的かつ個別に参照により本明細書に援用されたかのように、参照により本明細書に援用される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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