(57)【要約】【課題】バリア機能の向上やタイトジャンクション構造の形成促進を実現する新規の技術を提供することを課題とする。【解決手段】マッシリア（Ｍａｓｓｉｌｉａ）属細菌を有効成分として含む、皮膚外用組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マッシリア（Ｍａｓｓｉｌｉａ）属細菌を有効成分として含む、皮膚外用組成物。
【請求項２】
前記マッシリア（Ｍａｓｓｉｌｉａ）属細菌がマッシリア・エリラタ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ａｅｒｉｌａｔａ）である、請求項１に記載の皮膚外用組成物。
【請求項３】
バリア機能向上及び／又はタイトジャンクション構造形成促進のための、請求項１又は２に記載の皮膚外用組成物。
【請求項４】
乾燥肌、肌荒れ、シワ、色素沈着、タルミから選ばれる１又は２以上の予防又は改善のための、請求項１〜３の何れか１項に記載の皮膚外用組成物。
【請求項５】
マッシリア（Ｍａｓｓｉｌｉａ）属細菌を有効成分とする、バリア機能向上及び／又はタイトジャンクション構造形成促進剤。 
【請求項６】
前記マッシリア（Ｍａｓｓｉｌｉａ）属細菌がマッシリア・エリラタ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ａｅｒｉｌａｔａ）である、請求項５に記載のバリア機能向上及び／又はタイトジャンクション構造形成促進剤。
【請求項７】
乾燥肌、肌荒れ、シワ、色素沈着、タルミから選ばれる１又は２以上の予防又は改善のための、請求項５又は６に記載のバリア機能向上及び／又はタイトジャンクション構造形成促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｍ．ａｅｒｉｌａｔａを有効成分とする皮膚外用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は、大きく分けて表皮、真皮、そして皮下組織の３層よりなる。最外層に位置する表皮は、さらに角質層、顆粒層、有棘層及び基底層の４つの層に分類され、これらを構成する主な細胞は表皮角化細胞（ケラチノサイト）と呼ばれる。
【０００３】
皮膚は外界からの刺激や生体内への異物侵入の防止、過剰な水分放出の防止など重要な役割を担っており、これをバリア機能という。バリア機能の低下は、肌荒れやかゆみ、炎症の原因となることが知られている。そのため、バリア機能の向上ないし保全は化粧料開発における重点テーマの一つである（例えば特許文献１、２）。
【０００４】
バリア機能は、複数の防御構成要素の相互作用からなり、その中でも近年、細胞間タイトジャンクションがとりわけ重要な要素であるとされ、注目を集めている（例えば非特許文献１）。
【０００５】
角質層に隣接する顆粒層に存在する細胞間タイトジャンクション、すなわち細胞間接着構造体は、角質層における生体の内と外を隔てる機能を有しており、バリア機能において果たす役割は大きいと認識されている（特許文献３）。
【０００６】
バリア機能の指標としては、ＴＥＲ値(Ｔｒａｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｅｌｅｃｔｒｉｃａｌ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ)が用いられており、ＴＥＲ値を向上させることにより、バリア機能を向上・改善する技術が提案されている（非特許文献１）。
【０００７】
ＴＥＲ値に関与する接着タンパク質には、ＴＪＰ１（Ｔｉｇｈｔ  Ｊｕｎｃｔｉｏｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  １）、ＣＬＤ１（Ｃｌａｕｄｉｎ  １）、ＯＣＬ（Ｏｃｃｌｕｄｉｎ）、ＺＯ１（Ｚｏｎｕｌａ  Ｏｃｃｌｕｄｅｎｓ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  １）などがある（非特許文献２）。
【０００８】
ところで、近年、人体に有用な作用を有する菌体を有効成分として含む化粧料が提案されている（例えば特許文献４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２０１８−１０４３２２号公報
【特許文献２】特開２０１７−００２０１３号公報
【特許文献３】特開２０１８−０９０６３１号公報
【特許文献４】特開平０９−０２０６３８号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，  ２０１１  Ｊａｎ；１４１（１）：８７−９４
【非特許文献２】Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２０１５，  Ｖｏｌｕｍｅ  ６，  Ａｒｔｉｃｌｅ  ６１２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、バリア機能の向上やタイトジャンクション構造の形成促進を実現する新規の技術を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは鋭意研究努力の結果、マッシリア属に属する細菌にバリア機能の向上、及びタイトジャンクション構造の形成を促進する作用があることを見出し、本発明を完成させた。
【００１３】
すなわち、上記課題を解決する本発明は、マッシリア（Ｍａｓｓｉｌｉａ）属細菌を有効成分として含む、皮膚外用組成物である。
本発明の皮膚外用組成物は、バリア機能の向上及び／又はタイトジャンクション構造の形成促進作用を有する。
【００１４】
本発明の好ましい形態では、前記マッシリア（Ｍａｓｓｉｌｉａ）属細菌がマッシリア・エリラタ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ａｅｒｉｌａｔａ）である。
マッシリア・エリラタを有効成分として含む形態の本発明の皮膚外用組成物は、バリア機能の向上及び／又はタイトジャンクション構造の形成促進作用に優れる。
【００１５】
本発明の好ましい形態では、前記皮膚外用組成物は、バリア機能向上及び／又はタイトジャンクション構造形成促進のために用いられる。
【００１６】
本発明の好ましい形態では、前記皮膚外用組成物は、乾燥肌、肌荒れ、シワ、色素沈着、タルミから選ばれる１又は２以上の予防又は改善のために用いられる。
【００１７】
また、本発明は、マッシリア（Ｍａｓｓｉｌｉａ）属細菌を有効成分とする、バリア機能向上及び／又はタイトジャンクション構造形成促進剤にも関する。
【００１８】
本発明の好ましい形態では、前記マッシリア（Ｍａｓｓｉｌｉａ）属細菌は、マッシリア・エリラタ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ａｅｒｉｌａｔａ）である。
【００１９】
また、本発明の好ましい形態では、乾燥肌、肌荒れ、シワ、色素沈着、タルミから選ばれる１又は２以上の予防又は改善のために用いる。
【発明の効果】
【００２０】
本発明は、バリア機能向上及び／又はタイトジャンクション構造形成促進作用、より具体的には乾燥肌、肌荒れ、シワ、色素沈着、タルミなどの予防又は改善作用を有する。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】バリア機能の指標となるＴＥＲ値の測定結果を表す棒グラフである。
【図２】免疫染色法によりタイトジャンクション構造の形成を可視化した共焦点顕微鏡による撮像画像である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
次に、本発明の好ましい実施形態について詳細に説明する。但し、本発明は以下の実施形態に限定されず、本発明の範囲内で自由に変更することができる。
【００２３】
本発明における有効成分であるマッシリア属細菌としては、特に制限なくマッシリア属に属する細菌を用いることができ、マッシリア・エリラタ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ａｅｒｉｌａｔａ）、マッシリア・ウレア（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ａｕｒｅａ）、マッシリア・チモナエ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ｔｉｍｏｎａｅ）、マッシリア・プリカータ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ｐｌｉｃａｔａ）、マッシリア・デュラ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ｄｕｒａ）、マッシリア・アルビディフラバ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ａｌｂｉｄｉｆｌａｖａ）、マッシリア・ルテア（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ｌｕｔｅａ）などを例示することができる。
【００２４】
その中でも、マッシリア・エリラタ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ａｅｒｉｌａｔａ）を有効成分とすることが、より好ましい。
【００２５】
マッシリア属細菌は、マッシリア属細菌の生息環境として報告されている種々の環境より採取された試料から分離して用いることもできるし、市販菌株や寄託菌株を用いることもできる。
【００２６】
寄託菌株としては、マッシリア・エリラタ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ａｅｒｉｌａｔａ）  ＫＡＣＣ  １２５０５（以下、Ｍ．エリラタ  ＫＡＣＣ  １２５０５）を使用することができる。
【００２７】
Ｍ．エリラタ  ＫＡＣＣ  １２５０５は、２００９年に、独立行政法人製品評価技術基盤機構特許生物寄託センター（郵便番号：３０５−８５６６、住所：茨城県つくば市東１−１―１  つくばセンター中央第６）に、ブダペスト条約に基づく国際寄託がなされ、受託番号ＮＢＲＣ  １０６４３２が付与されている。
【００２８】
Ｍ．エリラタ  ＫＡＣＣ  １２５０５は、常法により培養することができる。例えば、Ｒ２Ａ寒天培地を用いて、温度５〜３５℃（好ましくは３０℃）、ｐＨ５〜９（好ましくはｐＨ６〜８）、好気的条件下で培養することが可能である。
【００２９】
本発明の皮膚外用組成物の有効成分であるマッシリア属細菌は、バリア機能の向上及び／又はタイトジャンクション構造の形成促進作用を有する。
また、バリア機能の低下及び／又はタイトジャンクション構造形成能の低下により引き起こされる皮膚の状態の予防又は改善に特に有用である。
バリア機能の低下及び／又はタイトジャンクション構造形成能の低下により引き起こされる皮膚の状態としては、乾燥肌、肌荒れ、シワ、色素沈着、タルミなどを挙げることができる。
マッシリア属細菌は上述の皮膚状態の予防又は改善に有効である。
【００３０】
この通り、マッシリア属細菌は皮膚に関して有効な作用をもたらすものであるから、皮膚外用組成物の形態で提供されることが好ましい。
【００３１】
本発明の皮膚外用組成物におけるマッシリア属細菌の菌体の配合量は、皮膚外用組成物の剤形によって異なるが、好ましくは５０ＣＦＵ／ｍＬ以上、より好ましくは５×１０２〜５×１０５ＣＦＵ／ｍＬを目安とすることができる。なお、ＣＦＵは、コロニー形成単位：Ｃｏｌｏｎｙ  Ｆｏｒｍｉｎｇ  Ｕｎｉｔを意味する。
【００３２】
本発明の皮膚外用組成物の実施形態は特に限定されず、化粧品、医薬部外品、医薬品などが好適に例示できる。
剤型としては、通常知られているローション剤形、乳液剤形、エッセンス剤形、クリーム剤形、粉体含有剤形の何れをも取ることができる。
【００３３】
皮膚外用組成物の形態として提供する場合、その組成も特に限定されず、本発明の効果を損ねない限度において、通常使用される任意成分を含有することもできる。このような任意成分としては、例えば、マカデミアナッツ油、アボカド油、トウモロコシ油、オリーブ油、ナタネ油、ゴマ油、ヒマシ油、サフラワー油、綿実油、ホホバ油、ヤシ油、パーム油、液状ラノリン、硬化ヤシ油、硬化油、モクロウ、硬化ヒマシ油、ミツロウ、キャンデリラロウ、カルナウバロウ、イボタロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、ホホバロウ等のオイル、ワックス類；流動パラフィン、スクワラン、プリスタン、オゾケライト、パラフィン、セレシン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素類；オレイン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、ウンデシレン酸等の高級脂肪酸類；セチルアルコール、ステアリルアルコール、イソステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、オクチルドデカノール、ミリスチルアルコール、セトステアリルアルコール等の高級アルコール等；イソオクタン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、イソステアリン酸ヘキシルデシル、アジピン酸ジイソプロピル、セバチン酸ジ−２−エチルヘキシル、乳酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ−２−エチルヘキサン酸エチレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジ−２−ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ−２−エチルヘキサン酸ペンタンエリトリット等の合成エステル油類等の油剤類；脂肪酸セッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類；塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン界面活性剤類；イミダゾリン系両性界面活性剤（２−ココイル−２−イミダゾリニウムヒドロキサイド−１−カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、ベタイン系界面活性剤（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、アシルメチルタウリン等の両性界面活性剤類；ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキオレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（モノステアリン酸グリセリン等）、プロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビタンモノオレエート、モノステアリン酸ポリオキエチレンソルビタン等）、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−ソルビットモノラウレート等）、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレート等）、ＰＯＥ脂肪酸エステル類（ポリエチレングリコールモノオレート、ＰＯＥジステアレート等）、ＰＯＥアルキルエーテル類（ＰＯＥ２−オクチルドデシルエーテル等）、ＰＯＥアルキルフェニルエーテル類（ＰＯＥノニルフェニルエーテル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２−デシルテトラデシルエーテル等）、テトロニック類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類；ポリエチレングリコール、グリセリン、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、プロピレングリコール、２，４−ヘキサンジオール等の多価アルコール類；ピロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム等の保湿成分類；パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤；アントラニル酸系紫外線吸収剤；サリチル酸系紫外線吸収剤；桂皮酸系紫外線吸収剤；ベンゾフェノン系紫外線吸収剤；糖系紫外線吸収剤；２−（２'−ヒドロキシ−５'−ｔ−オクチルフェニル)ベンゾトリアゾール、４−メトキシ−４'−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類などが好ましく例示できる。
【００３４】
また、マッシリア属細菌は経口組成物の形態として提供してもよい。
経口組成物の形態としては、食品組成物又は医薬組成物の形態が挙げられる。
【００３５】
食品組成物としては、菓子やパン、麺などの一般食品、ドリンク製剤、顆粒剤、粉末剤、カプセル剤や錠剤の形態をとる健康増進の目的を有する食品群（例えば、特定保健用食品等）などの実施形態が好適に例示できる。
医薬組成物としては、顆粒剤、粉末剤、カプセル剤や、錠剤の形態をとる経口投与医薬品などの実施形態が好適に例示できる。特に好ましくは、食品組成物としての形態である。
【００３６】
またこれらの食品組成物及び医薬組成物は、許容される任意成分を含有することができる。この様な任意成分としては、食品組成物であれば、一般的な食品素材に加え、塩、砂糖、グルタミン酸ナトリウム、イノシン酸ナトリウム、酢等の調味成分、着色成分、フレーバー等の矯臭成分、増粘剤、乳化・分散剤、保存料、安定剤、各種ビタミン類等が好適に例示でき、健康増進の目的を有する食品群や医薬組成物であれば、結晶セルロース、乳糖等の賦形剤、アラビヤガムやヒドロキシプロピルセルロース等の結合剤、クロスカルメロースナトリウム、デンプン等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、矯味、矯臭剤、着色剤、各種ビタミン類等が好ましく例示できる。これらを常法に従って処理することにより、本発明の組成物を製造することができる。
【実施例】
【００３７】
＜菌株の培養＞
後述する試験例に使用したマッシリア・エリラタ（Ｍａｓｓｉｌｉａ  ａｅｒｉｌａｔａ）、スタフィロコッカス・エピデルミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）は、いずれも独立行政法人製品評価技術基盤機構から購入した。なお、マッシリア・エリラタは、Ｍ．エリラタ  ＫＡＣＣ  １２５０５の菌株を購入した。
【００３８】
購入した細菌は、それぞれに適した寒天培地又は液体培地を用いて培養し、続く試験において使用する菌株とした。
【００３９】
＜試験例１：バリア機能向上効果の評価（ＴＥＲ値測定試験）＞
以下の方法により、マッシリア属細菌のバリア機能向上効果を評価した。
まず、正常ヒト表皮角化細胞（ＮＨＥＫ）（クラボウ社製）を１２穴トランズウェルプレートに播種（７０，０００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）した。その後、播種したＮＨＥＫを３７℃、５％ＣＯ２環境下で３日間培養した。３日間の培養後、培養液を高カルシウム培地（１．４５ｍＭ）に置換した。ここへ、最終的に７，５００ＣＦＵ／ｗｅｌｌとなるように培地で濃度を調整した各菌株の懸濁液を添加した。なお、菌株を含まない試料を比較対照として用意した。
【００４０】
６時間の培養後、Ｍｉｌｌｉｃｅｌｌ  ＥＲＳ２（ミリポア社製）を用いて経上皮細胞電気抵抗値（ＴＥＲ：Ｔｒａｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉｃａｌ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）を測定した。結果を図１に示す。図１において、縦軸は、ＴＥＲ値（Ω・ｃｍ２）を表す。
【００４１】
図１の結果より、マッシリア・エリラタは、比較対照に比して有意なＴＥＲ値の上昇を示した。また、マッシリア・エリラタは、他の菌株と比べても顕著なＴＥＲ値の上昇を示している。この結果は、マッシリア属に属する細菌が、優れたバリア機能向上効果を有することを示す。
【００４２】
＜試験例２：タイトジャンクション構造形成促進効果の評価＞
以下の方法で、タイトジャンクション構造の形成を可視化し、マッシリア属細菌のタイトジャンクション構造形成促進効果を評価した。
まず、正常ヒト表皮角化細胞（ＮＨＥＫ）（クラボウ社製）を４穴チャンバープレートに播種（３０，０００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）した。その後、播種したＮＨＥＫを３７℃、５％ＣＯ２環境下で３日間培養した。３日間の培養後、培養液を高カルシウム培地（１．４５ｍＭ）に置換した。ここへ、最終的に２，３００ＣＦＵ／ｗｅｌｌとなるように培地で濃度を調整した各菌株の懸濁液を添加した。なお、菌株を含まない試料を比較対照として用意した。
【００４３】
６時間の培養後、培地を除去し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）により一度洗浄した。次に、細胞を固定するため、４℃、１５分間のエタノール処理、その後室温で１分間のアセトン処理を行った。その後、０．１％Ｔｗｅｅｎ２０／ＰＢＳ溶液を用いて５分間処理し、さらに０．５％ＴｒｉｔｏｎＸ１００／ＰＢＳ溶液を用いて２０分間処理した。そして、非特異的反応を阻止するため、１０％ブロックエース／ＰＢＳ溶液を用いて室温で３０分間処理した。
【００４４】
その後、１００倍希釈したマウス抗Ｏｃｃｌｕｄｉｎ抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）、及び２００倍希釈したウサギ抗Ｚｏｎｕｌａ  Ｏｃｃｌｕｄｉｎ−１（ＺＯ−１）抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を一次抗体として４穴チャンバープレート内に添加し、４℃で一晩反応させた。０．１％Ｔｗｅｅｎ２０／ＰＢＳ溶液を用いて洗浄した後、２５０倍希釈したヤギ抗マウスＩｇＧ抗体Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）、及び２５０倍希釈したヤギ抗ウサギＩｇＧ抗体Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５５５（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を二次抗体として４穴チャンバープレート内に添加し、室温で４５分間反応させた。洗浄後、Ｆｌｕｏｒｏｍｏｕｎｔ−Ｇ（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ＢｉｏＳｙｓｔｅｍｓ社製）を用いて封入した。調製した試料は、共焦点顕微鏡（ＬＳＭ５１０：Ｃａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ社製）を用いて観察した。
【００４５】
図２は、共焦点顕微鏡によるＮＨＥＫの免疫染色画像を示す。画像中、矢印はＯｃｃｌｕｄｉｎ及びＺＯ−１が連続的に共染色されている箇所を示す（図２最下段Ｃ−２）。また、矢頭は、Ｏｃｃｌｕｄｉｎ及びＺＯ−１が断続的に共染色されている箇所を示す（図２最下段Ｃ−３及びＣ−４）。なお、スケールバーは５０μｍを示す。
【００４６】
マッシリア・エリラタを添加したＮＨＥＫは、細胞間の強い発色を示し、Ｏｃｃｌｕｄｉｎ及びＺＯ−１が細胞間隙に多く局在していることが確認された（図２最上段Ａ−２及び中段Ｂ−２）。また、図２最下段Ｃ−２に示されるように、Ｏｃｃｌｕｄｉｎ及びＺＯ−１を統合した画像において、これらが連続的に共染色された箇所が多く確認された。これらの結果は、マッシリア属に属する細菌が、優れたタイトジャンクション構造形成促進効果を有することを示している。
【００４７】
＜処方例＞
（１）菌体濃縮液の調製
マッシリア・エリラタの菌株をＲ２Ａ培地中で好気培養した。次いで、増殖した菌株を生理食塩水で懸濁し、菌体濃縮液（菌体濃度：約４．６×１０６ＣＦＵ／ｍＬ）とした。調製した菌体濃縮液は、以下に示す処方例の配合材料として使用した。なお、マッシリア・エリラタは、Ｍ．エリラタ  ＫＡＣＣ  １２５０５の菌株を使用した。
【００４８】
（２）化粧水の調製
表１の処方に従って、本発明の皮膚外用剤である化粧水を調製した。まず、表１に示したＡの成分を常温で、Ｂの成分を６０℃に加温して、それぞれ混合した。その後、攪拌下でＡにＢを徐々に加え、攪拌冷却することで化粧水を得た。
【００４９】
【表１】
2020045296.tif 000002
【００５０】
（３）エッセンスの調製
表２の処方に従って、本発明の皮膚外用剤であるエッセンスを調製した。まず、表２に示したＡ及びＢの成分を８０℃に加温して、それぞれ混合した。その後、攪拌下でＡにＢを徐々に加え、攪拌冷却することでエッセンスを得た。
【００５１】
【表２】
2020045296.tif 000003
【００５２】
（４）乳液の調製
表３の処方に従って、本発明の皮膚外用剤である乳液を調製した。まず、表３に示したＡ及びＢの成分を８０℃に加温して、それぞれ混合した。その後、攪拌下でＡにＢを徐々に加え、攪拌冷却することで乳液を得た。
【００５３】
【表３】
2020045296.tif 000004
【００５４】
（５）Ｏ／Ｗクリームの調製
表４の処方に従って、本発明の皮膚外用剤であるＯ／Ｗクリームを調製した。まず、表４に示したＡ及びＢの成分を８０℃に加温して、それぞれ混合した。その後、攪拌下でＡにＢを徐々に加え、攪拌冷却することでＯ／Ｗクリームを得た。
【００５５】
【表４】
2020045296.tif 000005
【００５６】
（６）Ｗ／Ｏクリームの調製
表５の処方に従って、本発明の皮膚外用剤であるＷ／Ｏクリームを調製した。まず、表５に示したＡ及びＢの成分を８０℃に加温して、それぞれ混合した。その後、攪拌下でＢにＡを徐々に加え、攪拌冷却することでＷ／Ｏクリームを得た。
【００５７】
【表５】
2020045296.tif 000006
【００５８】
（７）ＵＶクリームの調製
表６の処方に従って、本発明の皮膚外用剤であるＯ／Ｗ  ＵＶクリームを調製した。まず、表６に示したＡ及びＢの成分を８０℃に加温して、それぞれ混合した。その後、攪拌下でＡにＢを徐々に加え、攪拌冷却することでＯ／Ｗ  ＵＶクリームを得た。
【００５９】
【表６】
2020045296.tif 000007
【産業上の利用可能性】
【００６０】
本発明は、化粧品、医薬部外品、医薬品に応用できる。
【図１】
2020045296.tif 000008
【図２】
2020045296.tif 000009