(57)【要約】【課題】胃腸障害の治療にまたは結腸洗浄に有用であるペプチド及び組成物を提供すること。【解決手段】本発明は、胃腸障害を治療する組成物及び方法、ならびにそれを成し遂げるための薬学的組成物も提供する。一部の実施形態において、これらの薬学的組成物は、経口用剤形を含む。本発明は、結腸洗浄治療、ならびに本明細書において記載される他の病状及び障害のためのペプチド、組成物、及び関連方法を特色とする。一実施形態において、ペプチドを用いて、結腸内視鏡治療のための対象物を調製し得る。一部の実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容される塩を用いて、腸の外科手術などの外科手術のための対象物を調製し得る。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
本明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、結腸洗浄、ならびに胃腸管及び他の内臓器官の障害の治療のためのペプチド、組成物、及び方法に関する。
【０００２】
優先権の主張
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）の下で、２０１５年５月１日に提出された米国仮特許出願第６２／１５６，０７７号に対する優先権を主張するものであり、その全内容は参照により本明細書によって組み入れられる。
【０００３】
配列表
本出願は、２０１６年４月２８日に作成されかつ本明細書とともに電子的に提出された「ＩＷ１５４ＰＣＴ１Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ」（４５．１キロバイト）と題された配列表を参照によりその全体として組み入れる。
【背景技術】
【０００４】
背景
米国では、およそ１５００万件の結腸内視鏡が毎年実施され、そのすべては適正な結腸の準備を要する。約２０％の結腸内視鏡において、不適正な腸の準備が報告されている。不適正な腸の準備は、より低い腺腫検出、より長い処置時間、及び検査間のより短い間隔をもたらし得る。結果として、患者の幅広い集団が、結腸内視鏡を確実にかつ有効に受けて、結腸癌のリスクを低下させることを可能にする、安全で、有効で、かつ十分に耐容性を示す結腸の準備の必要性がある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
概要
本発明は、結腸洗浄治療、ならびに本明細書において記載される他の病状及び障害のためのペプチド、組成物、及び関連方法を特色とする。一実施形態において、ペプチドを用いて、結腸内視鏡治療のための対象物を調製し得る。一部の実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容される塩を用いて、腸の外科手術などの外科手術のための対象物を調製し得る。他の実施形態において、ペプチドを用いて、結腸癌、遺伝性非ポリポーシス結腸直腸癌（ＨＮＰＣＣ）、すなわちリンチ症候群、胃不全麻痺（ＧＰ）、ポリープ、痛み、広汎性腹痛、術後イレウス、オピオイド誘導性便秘、機能性ディスペプシア、ＳＵＤＤ（症候性単純性憩室疾患）及びＳＣＡＤ（憩室症に伴う分節性結腸炎）、憩室症を含むがそれらに限定されない憩室疾患、下痢優位型過敏性腸症候群、過敏性腸症候群（ｓｙｎｄｒｏｍ）（ＩＢＳ）に伴う痛み、潰瘍性結腸炎、潰瘍性直腸炎、クローン病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、慢性または急性の放射線直腸障害、直腸痛、慢性直腸神経痛、一過性直腸神経痛、肛門痛、慢性裂肛、術後肛門痛、過活動膀胱症候群、腹圧性尿失禁、間質性膀胱炎、膀胱痛症候群、結腸直腸癌、癌に伴う痛み、広汎性骨盤痛、子宮内膜症、睾丸痛、慢性前立腺炎、前立腺痛、ヴルヴォディニア、尿道症候群、陰茎痛、肛門周囲痛、ならびに他の胃腸及び内臓の障害を治療し得る。
【０００６】
本発明の一態様は、ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩を提供し、前記ペプチドは、アミノ酸配列：
【化１】
2020203954.tif 000002
、または薬学的に許容されるその塩を含み；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫ、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎ、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１１は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはペニシラミン（Ｐｅｎ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、Ｃｔｈ、Ｄｐｒ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１３は、ＡｓｎまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１６は、Ｃｙｓ、Ａｇ、Ｐｅｎ、またはＣｔｈであり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ１９は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはＰｅｎであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、Ｄｐｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり；かつ
前記ペプチドは、Ｘａａ７及びＸａａ１２、Ｘａａ８及びＸａａ１６、ならびにＸａａ１１及びＸａａ１９の間に共有結合を含有する。
【０００７】
本発明の第二の態様は、本発明のペプチドを含む薬学的組成物を提供する。
【０００８】
本発明の第三の態様は、本発明に従った薬学的組成物を投与することを含む、胃腸障害を治療するための方法を提供する。本発明に従った薬学的組成物は、結腸内視鏡、または胃腸障害及び痛みの治療のための調製物として用いられ得る。一部の実施形態において、組成物は固体の経口組成物である。
【０００９】
本発明の１つまたは複数の実施形態についての詳細は、付随する説明に明記されている。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】代表的なペプチドに関する活性及び安定性の結果を解説する。
【図２】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３〜７に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図３】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８〜１０に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図４】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２〜１３及び２３〜２７に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を提示する。
【図５】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８〜３４に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図６】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５〜３７、３９、及び４４に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図７】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２及び４０〜４２に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図８】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４３に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図９】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４〜４７に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図１０】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５、４８、及び５１〜５２に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図１１】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２、１３、２７、４７、及び５３に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図１２】オリジナルの試験、オリジナルの試験の反復、及び２回目の計量とともに、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４７に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図１３】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５４〜５９に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図１４】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０〜６４に関するＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を解説する。
【図１５】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６２及び４７に関するインビボラット十二指腸ループアッセイの結果を解説する。
【図１６】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６２及び４７に関するラット十二指腸ループ容量試験の結果を解説する。
【図１７】ＳＴコアと比較した、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２及び４７に関するマウス消化管輸送（ｍＧＩＴ）アッセイの結果を解説する。
【図１８】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７及び６９に関するインビボ結紮ラットループアッセイの結果を解説する。
【図１９】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７及び６９に関するインビボ結紮ラットループ容量試験の結果を解説する。
【図２０】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、２６、４３、４７、及び５３に関するインビトロラット腸液（ＲＩＦ）アッセイの結果を提示する。
【図２１】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０〜６６に関するインビトロＲＩＦアッセイの結果を提示する。
【図２２】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４７、６２、６７、及び６９に関するインビボＲＩＦアッセイの結果を提示する。
【図２３】代表的なペプチドに対して実施された種々のアッセイの結果を提示する。
【図２４】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４〜２２に関する、Ｔ８４細胞アッセイにおけるｃＧＭＰ蓄積の結果を提示する。
【図２５】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、７、及び１１に関する、マウス消化管輸送アッセイの結果を解説する。
【図２６】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４７に関する、マウス消化管輸送アッセイの結果を解説する。
【図２７】ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６２、６７、及び６９に関する、マウス消化管輸送アッセイの結果を解説する。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
これらの図は例として提供されるものであり、本発明の範囲を限定することを意図されるものではない。
【００１２】
詳細な説明
グアニル酸シクラーゼＣ（ＧＣ−Ｃ）は、胃及び腸における上皮細胞の先端面に位置する膜貫通受容体である。前記受容体は、細胞外リガンド結合ドメイン、１回膜貫通領域、及びＣ末グアニリルシクラーゼドメインを有する。リガンドが、ＧＣ−Ｃの細胞外ドメインに結合した場合、細胞内触媒ドメインは、ＧＴＰからｃＧＭＰの産生を触媒する。インビボにおいて、細胞内ｃＧＭＰのこの増加は、腸管腔内への塩化物及び重炭酸塩の分泌の増加、内腔ｐＨの増加、内腔ナトリウム吸収の減少、体液分泌の増加、ならびに腸管輸送の加速につながる事象のカスケードを開始させる。上皮から粘膜及び内腔へ双方向で分泌されるｃＧＭＰは、求心性Ｃ線維の発火を弱めることも示されており、内臓痛に対するＧＣ−Ｃアゴニストの観察される鎮痛効果の潜在的機構を示唆する。
【００１３】
便秘を伴う過敏性腸症候群（ＩＢＳ−ｃ）及び慢性突発性便秘（ＣＩＣ）の治療のために経口投与されかつ現在米国で認可されているペプチドＧＣ−Ｃアゴニストであるリナクロチド（Ｌｉｎａｃｌｏｔｉｄｅ）は、排便回数の増加及び便の硬さの改善につながり得る、（１）内臓痛の低下、（２）膨張の低下、及び（３）ＧＩ輸送の増加を含めた、下部ＧＩ生理機能に対して数々の効果を有する。経口投与されたリナクロチドは、内腔表面でＧＣ−Ｃ受容体を活性化することによって局所的に作用する。ゆえに、リナクロチドの臨床試験、ならびにリナクロチド及び関連ペプチドを用いて行われている前臨床調査からの結果は、ＧＣ−Ｃペプチドアゴニストが治療的に用いられ得ることを示唆する。本明細書において記載されかつ主張されるペプチドは、ＧＣ−Ｃ受容体に結合しかつ活性化し得る、またはＧＣ−Ｃペプチドアゴニストとして特徴付けされ得る。
【００１４】
定義
本明細書において使用するとき、Ｃ１２はＣ１２アルキルカルボン酸であり、Ｃ１４はＣ１４アルキルカルボン酸であり、Ｃ１６はＣ１６アルキルカルボン酸であり、Ｃ１８はＣ１８アルキルカルボン酸であり、（４−Ｆ）Ｐｈｅは４−フルオロフェニルアラニンであり、Ｃｔｈはシスタチオニンであり、Ａｇはアリルグリシンであり、Ｈａｇは還元ジカルバ結合を有するアリルグリシンであり、Ｐｅｎｔはペンテン酸であり、Ｐｅｎはペニシラミンであり、Ｃｈａはシクロヘキシルアラニンであり、Ｓａｒはサルコシンであり、ＯＨ−Ｐｒｏはヒドロキシプロリンであり、Ｎｍｅ−ＴｙｒはＮ−メチルチロシンであり、４−Ｍｅｐｉｐは１−メチル−ピペリジン−４−カルボン酸であり、Ｄｐｒはジ−アミノプロピオン酸であり、ＢＥは、側鎖カルボン酸がペプチド連結を形成するグルタミン酸であり、そしてＢＫは、側鎖アミンがペプチド連結を形成するリジンである。ＢＥ  ＢＫ結合パターンの一例は、
【化２】
2020203954.tif 000003
であろう。
【００１５】
ペプチド結合のさらなる例には、限定することなく、
Ｉ．ジカルバ
【化３】
2020203954.tif 000004
ＩＩ．Ｈａｇ−Ｈａｇ
【化４】
2020203954.tif 000005
ＩＩＩ．Ｃｔｈ−Ｃ
【化５】
2020203954.tif 000006
ＩＶ．Ｃ−Ｃｔｈ
【化６】
2020203954.tif 000007
Ｖ．Ｄ−Ｄｐｒ（ラクタム結合）
【化７】
2020203954.tif 000008
ＶＩ．
【化８】
2020203954.tif 000009
【化９】
2020203954.tif 000010
その他
【化１０】
2020203954.tif 000011
ＶＩＩ．Ａｇ−Ａｇ（２、−１０）
【化１１】
2020203954.tif 000012
ＶＩＩＩ．Ｈａｇ−Ｈａｇ（２、−１０）
【化１２】
2020203954.tif 000013
ＩＸ．Ｃｔｈ−Ｃ（２、−１０）
【化１３】
2020203954.tif 000014
Ｘ．Ｃ−Ｃｔｈ（２、−１０）
【化１４】
2020203954.tif 000015
ＸＩ．（２、−１０）
【化１５】
2020203954.tif 000016
【化１６】
2020203954.tif 000017
その他
【化１７】
2020203954.tif 000018
ＸＩＩ．Ａｇ−Ａｇ（５、−１３）
【化１８】
2020203954.tif 000019
ＸＩＩＩ．Ｈａｇ−Ｈａｇ（５、−１３）
【化１９】
2020203954.tif 000020
ＸＩＶ．Ｃｔｈ−Ｃ（５、−１３）
【化２０】
2020203954.tif 000021
ＸＶ．Ｃ−Ｃｔｈ（５、−１３）
【化２１】
2020203954.tif 000022
ＸＶＩ．（５、−１３）
【化２２】
2020203954.tif 000023
【化２３】
2020203954.tif 000024
その他
【化２４】
2020203954.tif 000025
が含まれる。
【００１６】
ペプチド
一態様において、本発明は、本明細書において記載される方法に有用なペプチドまたは薬学的に許容されるその塩を提供し、前記ペプチドは、アミノ酸配列：
【化２５】
2020203954.tif 000026
、または薬学的に許容されるその塩を含み；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫ、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎ、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１１は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはペニシラミン（Ｐｅｎ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、Ｃｔｈ、Ｄｐｒ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１３は、ＡｓｎまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１６は、Ｃｙｓ、Ａｇ、Ｐｅｎ、またはＣｔｈであり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ１９は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはＰｅｎであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、Ｄｐｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり；かつ
前記ペプチドは、Ｘａａ７及びＸａａ１２、Ｘａａ８及びＸａａ１６、ならびにＸａａ１１及びＸａａ１９の間に共有結合を含有する。
【００１７】
一部の実施形態において、ペプチドのＮ末をＮ末でアセチル化してまたは修飾して、ペプチドに付加的安定性を提供する。他の実施形態において、Ｎ末を、ペンテン酸、ビオチン、４−Ｍｅｐｉｐ（１−メチル−４−カルボン酸）、Ｃ１２アルキルカルボン酸、Ｃ１４アルキルカルボン酸、Ｃ１６アルキルカルボン酸、またはＣ１８アルキルカルボン酸でキャッピングする。一部の実施形態において、ペンテン酸のＣ＝Ｃ二重結合を別のＣ＝Ｃ二重結合と環化して、ジカルバ結合を形成し得る。
【００１８】
一部の実施形態において、ペプチドのＣ末をＣ末でアミド化してまたは修飾して、ペプチドに付加的安定性を提供する。
【００１９】
さらに別の実施形態において、ペプチドのＮ末をアセチル化しまたはキャッピングし、かつＣ末をアミド化する。
【００２０】
一部の実施形態において、ペプチド残基間のジカルバ結合（ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２）または本明細書において記載される他の共有結合は、ペプチドを安定化することにおいて有用であり得る。ジカルバ結合及び本明細書において記載される他の共有結合は、ある場合には、ジスルフィド結合よりもペプチドの大きな安定性を提供し得る。一部の実施形態において、ジカルバ結合は還元され得る（ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２）。
【００２１】
一部の実施形態において、ペプチドの安定性の増強は、長期間の室温での保管を可能にする。
【００２２】
一部の実施形態において、Ｘａａ７及びＸａａ１２は両方ともＡｇであり、かつジカルバ結合がＡｇ７及びＡｇ１２の間に存在している；Ｘａａ７及びＸａａ１２は両方ともＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ７及びＣｙｓ１２の間に存在している；Ｘａａ８及びＸａａ１６は両方ともＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ８及びＣｙｓ１６の間に存在している；Ｘａａ１１及びＸａａ１９は両方ともＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ１１及びＣｙｓ１９の間に存在している；またはそれらの任意の組み合わせ。
【００２３】
他の実施形態において、Ｘａａ７はＣｔｈであり、Ｘａａ１２はＣｙｓであり、かつ結合がＣｔｈ７及びＣｙｓ１２の間に存在している；Ｘａａ８はＣｔｈであり、Ｘａａ１６はＣｙｓであり、かつ結合がＣｔｈ８及びＣｙｓ１６の間に存在している；またはそれらの任意の組み合わせ。
【００２４】
一部の実施形態において、Ｘａａ７はアリルグリシンまたはＣｙｓである。
【００２５】
一部の実施形態において、Ｘａａ８はＣｙｓまたはシスタチオニンである。
【００２６】
一部の実施形態において、Ｘａａ９はＧｌｕである。
【００２７】
一部の実施形態において、Ｘａａ１０はＬｅｕである。
【００２８】
一部の実施形態において、Ｘａａ１２はＣｙｓまたはアリルグリシンである。
【００２９】
一部の実施形態において、Ｘａａ１４はＶａｌまたはＰｒｏである。
【００３０】
一部の実施形態において、Ｘａａ１７はＴｙｒまたはＴｈｒである。
【００３１】
一部の実施形態において、Ｘａａ２０はＴｙｒであるまたは欠如している。
【００３２】
一部の実施形態において、Ｘａａ２１は欠如している。
【００３３】
一部の実施形態において、Ｘａａ１は欠如しており；Ｘａａ２は欠如しており；Ｘａａ３は欠如しており；Ｘａａ４は欠如しており；Ｘａａ５は欠如しており；Ｘａａ６は欠如しており；Ｘａａ７はＡｇ、Ｃｙｓ、またはＣｔｈであり；Ｘａａ８はＣｙｓまたはＣｔｈであり；Ｘａａ９はＧｌｕであり；Ｘａａ１０はＬｅｕであり；Ｘａａ１２はＡｇまたはＣｙｓであり；Ｘａａ１４はＶａｌまたはＰｒｏであり；Ｘａａ１７はＴｙｒまたはＴｈｒであり；かつＸａａ２０はＴｙｒであるまたは欠如している。
【００３４】
一部の実施形態において、Ｘａａ１４はＰｒｏではない。
【００３５】
一部の実施形態において、Ｘａａ１７はＰｈｅではない。
【００３６】
一部の実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩が提供され、前記ペプチドは、アミノ酸配列：
【化２６】
2020203954.tif 000027
【化２７】
2020203954.tif 000028
【化２８】
2020203954.tif 000029
【化２９】
2020203954.tif 000030
を含み、式中、Ａｃ−はアセチル化されたＮ末を示し、Ｐｅｎｔ−はペンテン酸でキャッピングされたＮ末を示し、ｂｉｏｔｉｎ−はビオチンでキャッピングされたＮ末を示し、４−Ｍｅｐｉｐは４−Ｍｅｐｉｐ（１−メチル−ピペリジン−４−カルボン酸）でキャッピングされたＮ末を示し、Ｃ１２−はＣ１２アルキルカルボン酸でキャッピングされたＮ末を示し、Ｃ１４−はＣ１４アルキルカルボン酸でキャッピングされたＮ末を示し、Ｃ１６−はＣ１６アルキルカルボン酸でキャッピングされたＮ末を示し、Ｃ１８−はＣ１８アルキルカルボン酸でキャッピングされたＮ末を示し、Ｈ−は修飾されていないＮ末を示し、−ＮＨ２はアミド化されたＣ末を示し、そして−ＣＯＯＨは修飾されていないＣ末を示す。
【００３７】
さらなる実施形態において、２つのＡｇ残基間のジカルバ結合は、ジカルバ結合でのシスまたはトランス異性体のいずれかであり得る。本明細書において使用するとき、ジカルバ結合のシス異性体は、Ｃ＝Ｃ二重結合の同じ側に両水素原子を有し、そしてジカルバ結合のトランス異性体は、Ｃ＝Ｃ二重結合の反対側に水素原子を有する。
【００３８】
一部の実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩が提供され、前記ペプチドは、わずか（ｎｏ  ｍｏｒｅ  ｔｈａｎ）５０、４０、３０、または２０個のアミノ酸を含む。さらなる実施形態において、前記ペプチドは、わずか（ｎｏ  ｍｏｒｅ  ｔｈａｎ）１９、１８、１７、１６、１５、または１４個のアミノ酸を含む。
【００３９】
別の態様において、本発明は、ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩を提供し、前記ペプチドは、アミノ酸配列
【化３０】
2020203954.tif 000031
、または薬学的に許容されるその塩からなり；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫ、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎ、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１１は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはペニシラミン（Ｐｅｎ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、Ｃｔｈ、Ｄｐｒ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１３は、ＡｓｎまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１６は、Ｃｙｓ、Ａｇ、Ｐｅｎ、またはＣｔｈであり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ１９は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはＰｅｎであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、Ｄｐｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり、かつ
前記ペプチドは、Ｘａａ７及びＸａａ１２、Ｘａａ８及びＸａａ１６、ならびにＸａａ１１及びＸａａ１９の間に共有結合を含有する。
【００４０】
一部の実施形態において、ペプチドのＮ末をアセチル化して、ペプチドに付加的安定性を提供する。他の実施形態において、Ｎ末を、ペンテン酸、ビオチン、４−Ｍｅｐｉｐ（１−メチル−ピペリジン−４−カルボン酸）、Ｃ１２アルキルカルボン酸、Ｃ１４アルキルカルボン酸、Ｃ１６アルキルカルボン酸、またはＣ１８アルキルカルボン酸でキャッピングする。一部の実施形態において、ペンテン酸のＣ＝Ｃ二重結合を別のＣ＝Ｃ二重結合と環化して、ジカルバ結合を形成し得る。
【００４１】
一部の実施形態において、ペプチドのＣ末をアミド化して、ペプチドに付加的安定性を提供する。
【００４２】
一部の実施形態において、Ｘａａ７及びＸａａ１２は両方ともＡｇであり、かつジカルバ結合がＡｇ７及びＡｇ１２の間に存在している；Ｘａａ７及びＸａａ１２は両方ともＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ７及びＣｙｓ１２の間に存在している；Ｘａａ８及びＸａａ１６は両方ともＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ８及びＣｙｓ１６の間に存在している；Ｘａａ１１及びＸａａ１９は両方ともＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ１１及びＣｙｓ１９の間に存在している；またはそれらの任意の組み合わせ。
【００４３】
一部の実施形態において、Ｘａａ７はアリルグリシンまたはＣｙｓである。
【００４４】
一部の実施形態において、Ｘａａ８はＣｙｓまたはシスタチオニンである。
【００４５】
一部の実施形態において、Ｘａａ９はＧｌｕである。
【００４６】
一部の実施形態において、Ｘａａ１０はＬｅｕである。
【００４７】
一部の実施形態において、Ｘａａ１２はＣｙｓまたはアリルグリシンである。
【００４８】
一部の実施形態において、Ｘａａ１４はＶａｌまたはＰｒｏである。
【００４９】
一部の実施形態において、Ｘａａ１７はＴｙｒまたはＴｈｒである。
【００５０】
一部の実施形態において、Ｘａａ２０はＴｙｒであるまたは欠如している。
【００５１】
一部の実施形態において、Ｘａａ２１は欠如している。
【００５２】
一部の実施形態において、Ｘａａ１は欠如しており；Ｘａａ２は欠如しており；Ｘａａ３は欠如しており；Ｘａａ４は欠如しており；Ｘａａ５は欠如しており；Ｘａａ６は欠如しており；Ｘａａ７はＡｇ、Ｃｙｓ、またはＣｔｈであり；Ｘａａ８はＣｙｓまたはＣｔｈであり；Ｘａａ９はＧｌｕであり；Ｘａａ１０はＬｅｕであり；Ｘａａ１２はＡｇまたはＣｙｓであり；Ｘａａ１４はＶａｌまたはＰｒｏであり；Ｘａａ１７はＴｙｒまたはＴｈｒであり；かつＸａａ２０はＴｙｒであるまたは欠如している。
【００５３】
一部の実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩が提供され、前記ペプチドは、アミノ酸配列：
【化３１】
2020203954.tif 000032
【化３２】
2020203954.tif 000033
【化３３】
2020203954.tif 000034
からなる。
【００５４】
別の実施形態において、本発明は、本明細書において記載される方法に有用なペプチドまたは薬学的に許容されるその塩を提供し、前記ペプチドは、アミノ酸配列：
【化３４】
2020203954.tif 000035
、または薬学的に許容されるその塩を含みまたはからなり；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり；かつ
前記ペプチドは、Ｘａａ７及びＸａａ１２、Ｘａａ８及びＣｙｓ１６、ならびにＣｙｓ１１及びＣｙｓ１９の間に共有結合を含有する。
【００５５】
さらなる実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩、前記ペプチドは、アミノ酸配列：
【化３５】
2020203954.tif 000036
、または薬学的に許容されるその塩を含みまたはからなり；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり；かつ式中、
Ｘａａ７及びＸａａ１２は両方ともＡｇであり、かつジカルバ結合がＡｇ７及びＡｇ１２の間に存在している；
Ｘａａ７及びＸａａ１２は両方ともＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ７及びＣｙｓ１２の間に存在している；
Ｘａａ８はＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ８及びＣｙｓ１６の間に存在している；
Ｘａａ７はＣｔｈであり、かつ結合がＣｔｈ７及びＣｙｓ１２の間に存在している；
Ｘａａ８はＣｔｈであり、かつ結合がＣｔｈ８及びＣｙｓ１６の間に存在している；
ジスルフィド結合がＣｙｓ１１及びＣｙｓ１９の間に存在している；または
それらの任意の組み合わせ。
【００５６】
一部の実施形態において、ペプチドを単離する。他の実施形態において、ペプチドを精製する。
【００５７】
一部の実施形態において、ペプチドの薬学的に許容される塩が提供される。ある場合には、薬学的に許容される塩は、塩化物塩、酢酸塩、リン酸塩、または硫酸塩である。
【００５８】
一部の実施形態において、本明細書において記載されるペプチドのＮ末をアセチル化するまたはキャッピングする。この修飾は、ペプチドに安定性の増強を提供し得る。他の実施形態において、Ｎ末のペプチドは、イミダゾリジノン誘導体に改変されているシステイン残基である。
【００５９】
本明細書において開示されるペプチドは、検出機会または結腸癌治療のためにも用いられ得る。検出の状況において前記ペプチドを用いる場合、リンカーをＮ末に抱合する。次いで、リンカーを色素に抱合し得る、またはペプチドとの結合の前に色素に抱合し得る。当業者であれば、ペプチドに抱合した色素は、ペプチド結合相互作用の検出において有用であろうことを認識するであろう。
【００６０】
別の実施形態は、本明細書において開示されるペプチドをリンカーにより毒素に抱合することを含む。本明細書において記載されるペプチドまたは薬学的に許容される塩と抱合されかつコーティングされた毒素は、結腸癌治療として有用であろう。そのような製剤は、長期間作用する治療のための体循環をもたらすであろう。当業者であれば、結腸癌の治療における、本明細書において記載される長期間作用するペプチドまたは薬学的に許容されるその塩の使用を認識するであろう。
【００６１】
ペプチドの産生
一実施形態において、本発明のペプチドまたは前駆体ペプチドは、細菌（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉまたはＢａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、昆虫細胞系（例えば、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  Ｓｆ９細胞系）、酵母細胞系（例えば、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｓ．ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、または糸状菌発現系、または動物細胞発現系（例えば、哺乳類細胞発現系）を含むがそれらに限定されない、任意の公知のタンパク質発現系で組換えにより産生され得る。ペプチドまたは変種ペプチドを組換えにより、例えばＥ．ｃｏｌｉで産生すべき場合、ペプチドをコードする核酸分子は、細胞からの成熟ペプチドの分泌を可能にするリーダー配列もコードし得る。ゆえに、ペプチドをコードする配列は、例えば天然に存在する細菌耐熱性エンテロトキシン（ＳＴ）ペプチドのプレ配列及びプロ配列を含み得る。分泌された成熟ペプチドは、培養培地から精製され得る。
【００６２】
本明細書において記載されるペプチドをコードする配列は、細菌細胞に核酸分子を送達しかつ維持し得るベクター内に挿入され得る。ＤＮＡ分子は、自律複製ベクター（適切なベクターには、例えばｐＧＥＭ３Ｚ及びｐｃＤＮＡ３、ならびにそれらの誘導体が含まれる）に挿入され得る。ベクター核酸は、バクテリオファージλまたはＭ１３及びそれらの誘導体など、細菌またはバクテリオファージＤＮＡであり得る。本明細書において記載される核酸を含有するベクターの構築の後に、細菌などの宿主細胞の形質転換が続き得る。適切な細菌宿主には、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、及びＳａｌｍｏｎｅｌｌａが含まれるが、それらに限定されるわけではない。遺伝子構築物は、コード核酸分子に加えて、プロモーター及び調節配列など、発現を可能にするエレメントも含む。発現ベクターは、プロモーター、エンハンサー、オペレーター、及びリプレッサー配列など、転写開始を制御する転写制御配列を含有し得る。多様な転写制御配列が当業者に周知である。発現ベクターは、翻訳調節配列（例えば、非翻訳５’配列、非翻訳３’配列、または内部リボソーム進入部位）も含み得る。ベクターは自律複製ができ得る、またはそれは宿主ＤＮＡ内に組み込まれて、ペプチド産生の間の安定性を確保し得る。
【００６３】
本明細書において記載されるペプチドを含むタンパク質コード配列は、また、精製を容易にするためのペプチドアフィニティータグ、例えばグルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、マルトースＥ結合タンパク質、プロテインＡ、ＦＬＡＧタグ、６−ヒスチジン、ｍｙｃタグ、またはインフルエンザＨＡタグをコードする核酸に融合され得る。アフィニティータグまたはレポーターの融合により、関心対象のペプチドのリーディングフレームと、アフィニティータグをコードする遺伝子のリーディングフレームとがつながり、それにより翻訳融合体が生成される。融合遺伝子の発現は、関心対象のペプチド及びアフィニティータグの両方を含む単一ペプチドの翻訳をもたらす。アフィニティータグが利用される一部の場合には、プロテアーゼ認識部位をコードするＤＮＡ配列を、アフィニティータグ及び関心対象のペプチドに対するリーディングフレームの間に融合させる。
【００６４】
細菌以外のタンパク質発現系における、本明細書において記載されるペプチド及び変種の未成熟及び成熟形態の産生に適し、かつ当業者に周知の遺伝子構築物及び方法を用いても、生物学的な系においてペプチドを産生し得る。
【００６５】
一部の実施形態において、ペプチドは化学的に産生され得る。ペプチドは、伝統的なＢＯＣまたはＦＭＯＣ保護を用いた液相及び固相合成を含めた、いくつかの異なる方法によって合成され得る。例えば、ペプチドは、連続アミノ酸カップリングを用いて、２−クロロトリチルクロリドまたはワング樹脂上に合成され得る。限定することなく、以下の保護基：フルオレニルメチルオキシカルボニルまたはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（α−アミノ基、Ｎ末）；トリチルまたはｔｅｒｔ−ブチル（Ｃｙｓのチオール基）；ｔｅｒｔ−ブチル（存在する場合には、グルタミン酸のγ−カルボキシル及びスレオニンのヒドロキシル基）；トリチル（存在する場合には、アスパラギン側鎖のβ−アミド（ａｍｉｄ）官能基及びチロシンのフェノール基）；トリチルまたはｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（存在する場合には、セリンのヒドロキシ基）、ならびにｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（後続の側鎖修飾前のＮ末）を含めた、様々な保護基が用いられ得る。カップリング、脱保護、及び切断は、様々な方法により達成され得る。一部の実施形態において、カップリングは、第三級アミンの存在下でＤＩＣ及びＨＯＢｔを用いて達成され、そしてペプチドは、カクテルＫ（トリフルオロ酢酸８１％、フェノール５％、チオアニソール５％、１，２−エタンジオール２．５％、水３％、硫化ジメチル２％、ヨウ化アンモニウム１．５％  ｗ／ｗ）を用いる際に脱保護され得かつ固体担体から切断され得る。ペプチドは、様々な方法により単離され得る。一実施形態において、トリフルオロ酢酸及び他の揮発性物質の除去後、ペプチドは、有機溶媒を用いて沈降され得る。Ｃｙｓ残基間のジスルフィド結合は、様々な方法を用いて形成され得る。一実施形態において、Ｃｙｓ残基間のジスルフィド結合は、ジメチルスルホキシド（Ｔａｍ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１３：６６５７−６２）を用いてまたは空気酸化ストラテジーを用いて形成され得る。結果として生じたペプチドは、限定することなく、逆相クロマトグラフィーによるものを含めた様々な方法により精製され得、かつ凍結乾燥され得る。
【００６６】
ペプチドは、遊離塩基の形態でまたは薬学的に許容されるその塩として、作製され得る、単離され得る、または用いられ得る。塩の例には、限定することなく、ペプチドの酢酸塩、塩化物塩、硫酸塩、及びリン酸塩が含まれる。
【００６７】
ペプチド及びＧＣ−Ｃ受容体アゴニストの組成物
別の態様において、ペプチドが、単独でまたは組み合わせで、任意の薬学的に許容されるキャリアまたは媒体と組み合わせられ得る組成物が提供される。一部の実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、薬学的に許容される組成物に製剤化され得る。他の実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、非薬学的に許容される組成物に製剤化され得る。ペプチドは、患者に投与された場合に、有害な、アレルギー性の、または別様に望ましくない反応を生み出さない材料と組み合わせられ得る。用いられるキャリアまたは媒体には、溶媒、分散剤、コーティング、吸収促進剤、制御放出剤、及び１種または複数種の不活性な賦形剤（それには、デンプン、ポリオール、造粒剤、微結晶セルロース（例えば、ｃｅｌｐｈｅｒｅ、Ｃｅｌｐｈｅｒｅビーズ（登録商標））、希釈剤、潤滑油、結合剤、崩壊剤などが含まれる）が含まれ得る。所望の場合には、開示される組成物のタブレット剤は、標準的な水性または非水性技法によってコーティングされ得る。
【００６８】
薬学的に許容されるキャリア及び薬学的に許容される不活性キャリア及び前述の付加的成分としての使用のための賦形剤の例には、結合剤、充填剤、崩壊剤、潤滑油、抗微生物剤、及びコーティング剤が含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【００６９】
本明細書において使用するとき、「結合剤」という用語は、本発明の実践において用いられ得る任意の薬学的に許容される結合剤を指す。薬学的に許容される結合剤の例には、限定することなく、デンプン（例えば、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、及びアルファー化デンプン（例えば、Ｃｏｌｏｒｃｏｎ，Ｌｔｄ．によって販売されるＳＴＡＲＣＨ  １５００（登録商標）及びＳＴＡＲＣＨ  １５００  ＬＭ（登録商標）、ならびに他のデンプン）、マルトデキストリン、ゼラチン；アカシア、粉末トラガカント、グアーガムなどの天然及び合成ガム、セルロース及びその誘導体（例えば、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、及びヒドロキシプロピルメチルセルロース（ヒプロメロース）、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、粉末セルロース、超微粒セルロース、微結晶セルロース（例えば、ＦＭＣ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍａｒｃｕｓ  Ｈｏｏｋ，ＰＡ，ＵＳＡによって販売されるＡＶＩＣＥＬ−ＰＨ−１０１（商標）、−１０３（商標）、及び−１０５（商標）などのＡＶＩＣＥＬ（商標））、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン（例えば、ポリビニルピロリドンＫ３０）、ならびにそれらの混合物が含まれる。
【００７０】
薬学的組成物において特に用いられ得る結合剤の例には、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン（ポビドン）、デンプン、マルトデキストリン、またはセルロースエーテル（例えば、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、及びヒドロキシプロピルメチルセルロースなど）が含まれる。
【００７１】
本明細書において使用するとき、「充填剤」という用語は、本発明の実践において用いられ得る任意の薬学的に許容される充填剤を指す。薬学的に許容される充填剤の例には、限定することなく、タルク、炭酸カルシウム（例えば、顆粒または粉末）、第二リン酸カルシウム、第三リン酸カルシウム、硫酸カルシウム（例えば、顆粒または粉末）、微結晶セルロース（例えば、Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１またはＣｅｌｐｈｅｒｅ  ＣＰ−３０５）、超微粒セルロース、粉末セルロース、デキストレート、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、デンプン（例えば、Ｓｔａｒｃｈ  １５００）、アルファー化デンプン、ラクトース、グルコース、フルクトース、ガラクトース、トレハロース、スクロース、マルトース、イソマルト、ラフィノース、マルチトール、メレジトース、スタキオース、ラクチトール、パラチニット、キシリトール、ミオイノシトール、及びそれらの混合物が含まれる。
【００７２】
ペプチドをコーティングするために特に用いられ得る薬学的に許容される充填剤の例には、限定することなく、タルク、微結晶セルロース（例えば、Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１またはＣｅｌｐｈｅｒｅ  ＣＰ−３０５）、粉末セルロース、デキストレート、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、デンプン、アルファー化デンプン、ラクトース、グルコース、フルクトース、ガラクトース、トレハロース、スクロース、マルトース、イソマルト、第二リン酸カルシウム、ラフィノース、マルチトール、メレジトース、スタキオース、ラクチトール、パラチニット、キシリトール、マンニトール、ミオイノシトール、及びそれらの混合物が含まれる。
【００７３】
本明細書において使用するとき、「添加物」という用語は、任意の薬学的に許容される添加物を指す。薬学的に許容される添加物には、限定することなく、崩壊剤、分散添加物、潤滑油、滑剤、酸化防止剤、コーティング添加物、希釈剤、界面活性剤、香味添加物、保湿剤、吸収促進添加物、制御放出添加物、固化防止添加物、抗微生物剤（例えば、防腐剤）、着色料、乾燥剤、可塑剤、及び色素が含まれる。本明細書において使用するとき、「賦形剤」とは、任意の薬学的に許容される添加物、充填剤、結合剤、または作用物質である。
【００７４】
本発明の組成物は、他の治療用成分、固化防止剤、防腐剤、甘味剤、着色料、香味料、乾燥剤、可塑剤、色素、滑剤、接着防止剤、静電気防止剤、界面活性剤（湿潤剤）、酸化防止剤、フィルムコーティング剤なども随意に含み得る。任意のそのような随意の成分は、製剤の安定性を保証するために、本明細書において記載される化合物と適合性でなければならない。組成物は、例えばラクトース、グルコース、フルクトース、ガラクトース、トレハロース、スクロース、マルトース、ラフィノース、マルチトール、メレジトース、スタキオース、ラクチトール、パラチニット、デンプン、キシリトール、マンニトール、ミオイノシトールなど、及びそれらの水和物、ならびにアミノ酸、例えばアラニン、グリシン、ならびにベタイン、ならびにペプチド及びタンパク質、例えば卵白を含めた、必要とされる他の添加物を含有し得る。
【００７５】
組成物は、例えば様々な付加的溶媒、分散剤、コーティング、吸収促進添加物、制御放出添加物、及び１種または複数種の不活性添加物（それには、例えばデンプン、ポリオール、造粒添加物、微結晶セルロース、希釈剤、潤滑油、結合剤、崩壊添加物などが含まれる）などを含み得る。所望の場合には、所望の場合には、開示される組成物のタブレット剤は、標準的な水性または非水性技法によってコーティングされ得る。組成物は、例えば固化防止添加物、防腐剤、甘味添加物、着色料、香味料、乾燥剤、可塑剤、色素なども含み得る。
【００７６】
適切な崩壊剤には、例えば寒天（ａｇａｒ−ａｇａｒ）、炭酸カルシウム、微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポビドン、ポラクリリンカリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、他のデンプン、アルファー化デンプン、粘土、他のアルギン、他のセルロース、ガム、及びそれらの混合物が含まれる。
【００７７】
適切な潤滑油には、例えばステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、鉱油、軽油、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、他のグリコール、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、水添植物油（例えば、落花生油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、及び大豆油）、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル、寒天（ａｇａｒ）、ｓｙｌｏｉｄシリカゲル（ＡＥＲＯＳＩＬ  ２００、Ｗ．Ｒ．Ｇｒａｃｅ  Ｃｏ．，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ  ＵＳＡ）、合成シリカの凝固エアロゾル（Ｅｖｏｎｉｋ  Ｄｅｇｕｓｓａ  Ｃｏ．，Ｐｌａｎｏ，ＴＸ  ＵＳＡ）、焼成二酸化ケイ素（ＣＡＢ−Ｏ−ＳＩＬ，Ｃａｂｏｔ  Ｃｏ．，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ  ＵＳＡ）、及びそれらの混合物が含まれる。
【００７８】
適切な滑剤には、例えばロイシン、コロイド状二酸化ケイ素、三ケイ酸マグネシウム、粉末セルロース、デンプン、タルク、及び第三リン酸カルシウムが含まれる。
【００７９】
適切な固化防止添加物には、例えばケイ酸カルシウム、ケイ酸マグネシウム、二酸化ケイ素、コロイド状二酸化ケイ素、タルク、及びそれらの混合物が含まれる。
【００８０】
例えばペプチド組成物のための防腐剤として用いられ得る適切な抗微生物添加物には、例えば塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、ブチルパラベン、塩化セチルピリジニウム、クレゾール、クロロブタノール、デヒドロ酢酸、エチルパラベン、メチルパラベン、フェノール、フェニルエチルアルコール、フェノキシエタノール、酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、ソルビン酸カリウム、プロピルパラベン、安息香酸ナトリウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、ソルビン酸、チメロゾル（ｔｈｉｍｅｒｓｏｌ）、チモ（ｔｈｙｍｏ）、及びそれらの混合物が含まれる。
【００８１】
適切な酸化防止剤には、例えばＢＨＡ（ブチル化ヒドロキシアニソール）、ＢＨＴ（ブチル化ヒドロキシトルエン）、ビタミンＥ、没食子酸プロピル、アスコルビン酸及びその塩またはエステル、トコフェロール及びそのエステル、α−リポ酸、ならびにβ−カロテンが含まれる。
【００８２】
適切なコーティング添加物には、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、酢酸フタル酸セルロース、エチルセルロース、ゼラチン、薬学的釉薬、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルアセタートフタレート、セラック、スクロース、二酸化チタン、カルナウバロウ、微結晶ロウ、及びそれらの混合物が含まれる。適切な保護コーティングには、Ａｑｕａｃｏａｔ（例えば、Ａｑｕａｃｏａｔエチルセルロース水性分散体、１５％  ｗ／ｗ、ＦＭＣ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒ、ＥＣＤ−３０）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｅ  ＰＯ  ＰＥ−ＥＬ、Ｒｏｅｈｍ  Ｐｈａｒｍａ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ）、及びＯｐａｄｒｙ（例えば、Ｏｐａｄｒｙ  ＡＭＢ分散体、２０％  ｗ／ｗ、Ｃｏｌｏｒｃｏｎ）が含まれる。
【００８３】
ある特定の実施形態において、ペプチド組成物のための適切な添加物には、スクロース、タルク、ステアリン酸マグネシウム、クロスポビドン、またはＢＨＡのうちの１つまたは複数が含まれる。
【００８４】
本発明の組成物は、Ｌ−ヒスチジン、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）、ポロキサマー（Ｌｕｔｒｏｌ（登録商標）及びポロキサマー１８８など）、アスコルビン酸、グルタチオン、透過性増強剤（例えば、脂質、コール酸ナトリウム、アシルカルニチン、サリチレート、混合胆汁塩、脂肪酸ミセル、キレート剤、脂肪酸、界面活性剤、中鎖グリセリド）、プロテアーゼ阻害剤（例えば、大豆トリプシン阻害剤、有機酸）、生物学的利用能を促進するのに有効なｐＨ降下剤及び吸収増強剤（ＵＳ  ６０８６９１８及びＵＳ  ５９１２０１４に記載されているものを含むが、それらに限定されるわけではない）、チュアブル錠のための材料（デキストロース、フルクトース、ラクトース一水和物、ラクトース及びアスパルテーム、ラクトース及びセルロース、マルトデキストリン、マルトース、マンニトール、微結晶セルロース及びグアーガム、ソルビトール結晶のようなもの）；非経口物（マンニトール及びポビドンのようなもの）；可塑剤（セバシン酸ジブチル、コーティングのための可塑剤、ポリビニルアセタートフタレートのようなもの）；粉末潤滑油（ベヘン酸グリセリルのようなもの）；軟ゼラチンカプセル（ソルビトール特殊溶液のようなもの）；コーティングのための球体（糖類球体のようなもの）；球形化剤（ベヘン酸グリセリル及び微結晶セルロースのようなもの）；懸濁化／ゲル化剤（カラギーナン、ゲランガム、マンニトール、微結晶セルロース、ポビドン、デンプングリコール酸ナトリウム、キサンタンガムのようなもの）；甘味料（アスパルテーム、アスパルテーム及びラクトース、デキストロース、フルクトース、ハチミツ、マルトデキストリン、マルトース、マンニトール、糖蜜、ソルビトール結晶、ソルビトール特殊溶液、スクロースのようなもの）；湿式造粒剤（炭酸カルシウム、無水ラクトース、ラクトース一水和物、マルトデキストリン、マンニトール、微結晶セルロース、ポビドン、デンプンのようなもの）、カラメル、カルボキシメチルセルロースナトリウム、チェリークリーム香味料及びチェリー香味料、無水クエン酸、クエン酸、粉砂糖、Ｄ＆Ｃ赤色Ｎｏ．３３、Ｄ＆Ｃ黄色＃１０アルミニウムレーキ、エデト酸二ナトリウム、エチルアルコール１５％、ＦＤ＆Ｃ黄色Ｎｏ．６アルミニウムレーキ、ＦＤ＆Ｃ青色＃１アルミニウムレーキ、ＦＤ＆Ｃ青色Ｎｏ．１、ＦＤ＆Ｃ青色ｎｏ．２アルミニウムレーキ、ＦＤ＆Ｃ緑色Ｎｏ．３、ＦＤ＆Ｃ赤色Ｎｏ．４０、ＦＤ＆Ｃ黄色Ｎｏ．６アルミニウムレーキ、ＦＤ＆Ｃ黄色Ｎｏ．６、ＦＤ＆Ｃ黄色Ｎｏ．１０、パルミトステアリン酸グリセロール、モノステアリン酸グリセリル、インジゴカルミン、レシチン、マニトール、メチル及びプロピルパラベン、グリチルリチン酸モノアンモニウム、天然及び人工のオレンジ香味料、薬学的釉薬、ポロキサマー１８８、ポリデキストロース、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ポリビドン、アルファー化トウモロコシデンプン、アルファー化デンプン、赤色酸化鉄、サッカリンナトリウム、カルボキシメチルエーテルナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、イチゴ香味料、合成黒色酸化鉄、合成赤色酸化鉄、二酸化チタン、ならびに白ロウを含むがそれらに��定されない、他の賦形剤、作用物質、及びそれらの部類も含み得る。
【００８５】
一部の実施形態において、本明細書において記載されるペプチド、及びＭｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋、もしくはＡｌ３＋より選択される１種もしくは複数種の安定剤、それらの組み合わせ、及び／または立体障害第一級アミンを含む薬学的組成物が提供される。さらなる実施形態において、作用物質は、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、もしくはＺｎ２＋、またはそれらの組み合わせである。一部の実施形態において、陽イオンは、限定することなく、酢酸マグネシウム、塩化マグネシウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、酢酸カルシウム、塩化カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、酢酸亜鉛、塩化亜鉛、リン酸亜鉛、硫酸亜鉛、酢酸マンガン、塩化マンガン、リン酸マンガン、硫酸マンガン、酢酸カリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、硫酸カリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、酢酸アルミニウム、塩化アルミニウム、リン酸アルミニウム、または硫酸アルミニウムとして提供される。さらなる実施形態において、陽イオンは、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、酢酸亜鉛、塩化マンガン、塩化カリウム、塩化ナトリウム、または塩化アルミニウムとして提供される。他の実施形態において、陽イオンは、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、または酢酸亜鉛として提供される。
【００８６】
別の実施形態において、安定剤は立体障害第一級アミンである。さらなる実施形態において、立体障害第一級アミンはアミノ酸である。なおさらなる実施形態において、アミノ酸は、天然に存在するアミノ酸である。さらにさらなる実施形態において、天然に存在するアミノ酸は、ヒスチジン、フェニルアラニン、アラニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、グルタミン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、チロシン、スレオニン、イソロイシン、トリプトファン、グリシン、及びバリンからなる群より選択され；なおさらに、天然に存在するアミノ酸は、ロイシン、イソロイシン、アラニン、またはメチオニンである。別の実施形態において、立体障害第一級アミンは、天然に存在しないアミノ酸（例えば、１−アミノシクロヘキサンカルボン酸）である。さらなる実施形態において、立体障害第一級アミンは、シクロヘキシルアミン、２−メチルブチルアミン、またはキトサンなどの高分子アミンである。別の実施形態において、１つまたは複数の立体障害第一級アミンが、組成物において用いられ得る。
【００８７】
ある場合には、立体障害第一級アミンは、式：
【化３６】
2020203954.tif 000037
を有し、式中、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、独立して、Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルエーテル、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオエーテル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボン酸、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボキシルアミド、及びアルキルアリールより選択され、式中、任意の基は、ハロゲンまたはアミノで単独にまたは多重に置換され得、かつ、ただし、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３のうちのわずか（ｎｏ  ｍｏｒｅ  ｔｈａｎ）２個はＨである。別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３のうちのわずか（ｎｏ  ｍｏｒｅ  ｔｈａｎ）１個はＨである。
【００８８】
他の実施形態において、薬学的に許容されるキャリア、ペプチド、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋、もしくはＡｌ３＋より選択される陽イオン、またはそれらの混合物、及び立体障害第一級アミンを含む薬学的組成物が提供される。一実施形態において、陽イオンは、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、もしくはＺｎ２＋、またはそれらの混合物である。さらなる実施形態において、薬学的組成物は、薬学的に許容される結合剤及び／または薬学的に許容される滑剤、潤滑油、もしくは滑剤及び潤滑油の両方として作用する添加物、及び／または酸化防止剤をさらに含む。一部の実施形態において、薬学的組成物はキャリアに適用される。一部の実施形態において、キャリアは充填剤である。
【００８９】
ある場合には、キャリアに適用される、水溶液中の陽イオン：立体障害第一級アミン：ペプチドのモル比は、５〜１００：５〜５０：１である。ある場合には、陽イオン：立体障害第一級アミンのモル比は、２：１と同等であり得るまたはそれよりも大きくあり得る（例えば、５：１〜２：１）。ゆえに、ある場合には、キャリアに適用される、陽イオン：立体障害第一級アミン：ペプチドのモル比は、１００：５０：１、１００：３０：１、８０：４０：１、８０：３０：１、８０：２０：１、６０：３０：１、６０：２０：１、５０：３０：１、５０：２０：１、４０：２０：１、２０：２０：１、１０：１０：１、１０：５：１、または５：１０：１である。キャリアに適用されるＧＣ−Ｃアゴニストペプチド溶液中に結合剤、例えばメチルセルロースが存在する場合、それは、重量で０．５％〜２．５％（例えば、０．７％〜１．７％または０．７％〜１％または１．５％または０．７％）で存在し得る。
【００９０】
Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋、及びＡｌ３＋より選択される陽イオンは、保管中に、ＧＣ−Ｃ受容体アゴニストポリペプチドの酸化産物の形成を抑制するのに有用であることが見出されている。立体障害第一級アミンは、保管中に、ＧＣ−Ｃ受容体アゴニストポリペプチドのホルムアルデヒドイミン付加物（「ホルムアルデヒドイミン産物」）の形成を抑制するのに有用であることも見出されている。ゆえに、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋、またはＡｌ３＋より選択される陽イオン、例えばＺｎ２＋、Ｍｇ２＋、及びＣａ２＋より選択される二価陽イオン、及び／またはアミノ酸などの立体障害第一級アミンを含むＧＣ−Ｃ受容体アゴニストポリペプチド製剤は、薬物を製造し、保管し、かつ分配するのに十分な貯蔵寿命（クロマトグラフィー純度によって及び／または重量／重量アッセイによって測定される）を有する。さらに、立体障害アミンのみの存在は、保管中に、ＧＣ−Ｃ受容体アゴニストポリペプチドの加水分解産物の形成を増加させ得るものの、例えばロイシンとＣａ２＋との組み合わせ、しかしながらそれに限定されない、立体障害第一級アミンと陽イオンとの組み合わせは、保管中に、ＧＣ−Ｃ受容体アゴニストポリペプチドの加水分解産物、ならびにＧＣ−Ｃ受容体アゴニストポリペプチドの酸化産物の形成を抑制し、重量／重量アッセイによって及び／またはクロマトグラフィー純度によって判定される、さらにより大きな全体的安定性につながる。
【００９１】
さらなる実施形態において、薬学的組成物は、薬学的に許容される結合剤もしくは添加物、及び／または薬学的に許容される滑剤、潤滑油、もしくは滑剤及び潤滑油の両方として作用する添加物、及び／または酸化防止剤をさらに含む。
【００９２】
本発明に従った適切な薬学的組成物は、概して、意図される用途に応じて、ある値域の最終濃度を与える、滅菌水溶液などの許容される薬学的な希釈剤または賦形剤とともに、ある量の活性化合物を含む。調製の技法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９５）によって例示されるように、当技術分野において一般的に周知である。
【００９３】
胃腸障害の治療のために、本明細書において記載されるペプチドは、例えばタブレット、カプセル、既定量の活性成分ペレットを含有する小袋、ゲル、ペースト、シロップ、ボーラス、舐剤、スラリー、粉末、凍結乾燥粉末、顆粒として、水性液体もしくは非水性液体状の溶液もしくは懸濁液として；水中油型液体エマルションもしくは油中水型液体エマルションとして、リポソーム製剤（例えば、ＥＰ  ７３６２９９を参照されたい）により、または何らかの他の形態で、経口でまたは直腸に投与される。経口投与される組成物は、結合剤、潤滑油、不活性希釈剤、潤滑剤、表面活性剤、または分散剤、香味剤、及び保湿剤を含み得る。タブレットなどの経口投与製剤を、随意にコーティングしまたは切れ目を入れ、かつ製剤化して、その中の活性成分の持続性、遅延性、または制御性の放出を提供し得る。ペプチドは、本明細書において記載される作用物質を含むがそれらに限定されない、胃腸障害を治療するために用いられる他の作用物質とともに共投与され得る。
【００９４】
別の態様において、適切な薬学的組成物は、１種または複数種の他の治療用作用物質を含み得る。そのような治療用作用物質には、限定することなく、鎮痛剤；プロトンポンプ阻害剤、アシッドポンプアンタゴニスト、Ｈ２受容体アンタゴニストを含めた抗分泌剤；ＰＤＥ５阻害剤；ＯＤＣ阻害剤；ＧＡＢＡ−Ｂアンタゴニスト；胆汁酸封鎖剤；運動促進剤及び機能調整剤；抗うつ薬；抗生物質；制吐薬；オピオイド；ならびに粘膜保護剤が含まれる。
【００９５】
治療の方法
様々な実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、結腸洗浄治療または胃腸障害の治療のための方法において有用であり得る。一部の実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、結腸内視鏡または外科的処置の前に結腸を洗浄するための方法において有用であり得る。さらなる実施形態において、ペプチドを用いて、結腸内視鏡治療のための対象物を調製し得る。一部の実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容される塩を用いて、腸の外科手術などの外科手術のための対象物を調製し得る。他の実施形態において、ペプチドを用いて、胃腸障害、内臓障害、結腸癌、遺伝性非ポリポーシス結腸直腸癌（ＨＮＰＣＣ）、すなわちリンチ症候群、胃不全麻痺（ＧＰ）、ポリープ、痛み、広汎性腹痛、術後イレウス、オピオイド誘導性便秘、機能性ディスペプシア、ＳＵＤＤ（症候性単純性憩室疾患）及びＳＣＡＤ（憩室症に伴う分節性結腸炎）、憩室症を含むがそれらに限定されない憩室疾患、下痢優位型過敏性腸症候群、過敏性腸症候群（ｓｙｎｄｒｏｍ）（ＩＢＳ）に伴う痛み、潰瘍性結腸炎、潰瘍性直腸炎、クローン病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、慢性または急性の放射線直腸障害、直腸痛、慢性直腸神経痛、一過性直腸神経痛、肛門痛、慢性裂肛、術後肛門痛、過活動膀胱症候群、腹圧性尿失禁、間質性膀胱炎、膀胱痛症候群、結腸直腸癌、癌に伴う痛み、広汎性骨盤痛、子宮内膜症、睾丸痛、慢性前立腺炎、前立腺痛、ヴルヴォディニア、尿道症候群、陰茎痛、肛門周囲痛、ならびに他の胃腸及び内臓の障害を治療し得る。本発明の一部の実施形態において、胃腸障害のために、治療の方法が提供される。一実施形態において、胃腸障害は結腸癌またはポリープである。別の実施形態において、胃腸障害は遺伝性非ポリポーシス結腸直腸癌（ＨＮＰＣＣ）、すなわちリンチ症候群である。別の実施形態において、胃腸障害は胃腸痛である。さらなる実施形態において、胃腸障害は、内臓もしくは腹部の痛み、または癌に伴う痛みである。別の実施形態において、胃腸障害は直腸癌である。別の実施形態において、胃腸障害は機能性ディスペプシアである。
【００９６】
一実施形態において、対象に有効用量の結腸洗浄組成物を投与することを含む、結腸内視鏡処置のための準備において対象の結腸を洗浄するための方法が提供され、前記結腸洗浄組成物は、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、またはキャリア、及びペプチドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、前記ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、アミノ酸配列：
【化３７】
2020203954.tif 000038
、または薬学的に許容されるその塩を含み；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫ、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎ、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１１は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはペニシラミン（Ｐｅｎ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、Ｃｔｈ、Ｄｐｒ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１３は、ＡｓｎまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１６は、Ｃｙｓ、Ａｇ、Ｐｅｎ、またはＣｔｈであり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ１９は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはＰｅｎであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、Ｄｐｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり、かつ前記ペプチドは、Ｘａａ７及びＸａａ１２、Ｘａａ８及びＸａａ１６、ならびにＸａａ１１及びＸａａ１９の間に共有結合を含有する。
【００９７】
別の実施形態において、対象に有効用量の結腸洗浄組成物を投与することを含む、結腸内視鏡処置のための準備において対象の結腸を洗浄するための方法が提供され、前記結腸洗浄組成物は、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、またはキャリア、及びペプチドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、前記ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、アミノ酸配列：
【化３８】
2020203954.tif 000039
【化３９】
2020203954.tif 000040
【化４０】
2020203954.tif 000041
【化４１】
2020203954.tif 000042
を含む。
【００９８】
一実施形態において、本明細書において記載されるペプチド及び組成物は、結腸内視鏡の前に患者を準備するための治療を提供する。
【００９９】
一部の実施形態において、本明細書において記載されるペプチド及び薬学的に許容される塩は、結腸内視鏡処置のための準備における結腸洗浄のための方法として用いられ得る。一部の実施形態において、結腸洗浄のための方法は、５μｇ〜１００ｍｇのペプチドまたは薬学的に許容される塩など、有効な第一の用量を投与することを含む。翌朝、５μｇ〜１００ｍｇのペプチドまたは薬学的に許容される塩など、有効な第二の用量を投与して、結腸を実質的に洗浄する。他の実施形態において、ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、５μｇ〜２００ｍｇの単回用量で投与される。
【０１００】
本明細書において記載されるペプチド及び薬学的に許容される塩は、胃腸障害、癌、広汎性骨盤痛、膀胱痛、過活動膀胱、子宮内膜症、睾丸痛、慢性前立腺炎、前立腺痛、ヴルヴォディニア、尿道症候群、陰茎痛、及び肛門周囲痛に伴う内臓痛、または本明細書において記載される別の障害に伴う痛みの治療、阻止、または低下のために、単独でまたは併用療法で用いられ得る。
【０１０１】
本明細書において記載されるペプチド及び薬学的に許容される塩は、他の作用物質と組み合わせて投与され得る。例えば、ペプチドは、鎮痛性ペプチド、可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）刺激因子または化合物とともに投与され得る。鎮痛性ペプチドもしくは化合物は、本明細書において記載されるペプチドに共有結合で接着され得る、またはそれは、併用療法において本明細書において記載されるペプチドと一緒にもしくは逐次的に投与される別個の作用物質であり得る。本明細書において記載されるペプチド及び薬学的に許容される塩は、抗うつ薬、機能調整剤または運動促進剤、制吐薬、抗生物質、プロトンポンプ阻害剤、アシッド遮断薬（例えば、ヒスタミンＨ２受容体アンタゴニスト）、アシッドポンプアンタゴニスト、ＰＤＥ５阻害剤、ＯＤＣ阻害剤、ＧＡＢＡ−Ｂアゴニスト、胆汁酸封鎖剤、ＣＯＸ−２阻害剤、ＮＳＡＩＤＳ、コルチコステロイド、オピオイド、β−３アドレナリン受容体アゴニスト；ムスカリン受容体アンタゴニスト、三環系抗うつ薬、及び粘膜保護剤を含むがそれらに限定されない抗コリン剤を含めた、ＧＩ障害を治療するために用いられる他の作用物質と組み合わせても投与され得る。
【０１０２】
他の実施形態において、ペプチドの治療的組み合わせには、特発性及びリンチ症候群という結腸ポリープのための、セレコキシブ、スリダク（Ｓｕｌｉｄａｃ）及び異性体を含めた他の非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ）、ならびにホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）阻害剤及びオルニチンデカルボキシラーゼ（ＯＤＣ）阻害剤（例えば、ｄ，ｌ−α−ジフルオロメチルオルニチンＤＦＭＯ）；炎症性腸疾患（例えば、クローン病及び潰瘍性結腸炎）のための、メサラミンもしくは５−アミノサリチル酸（５−ａｓａ）、またはステロイド、ブデソニド；癌の痛みを含めた慢性痛のための、オピオイド、トラマドールならびにトラマドールの異性体及び類似体；あるいはエルクサロジン（Ｅｌｕｘａｌｏｄｉｎｅ）が含まれる。
【０１０３】
一部の実施形態において、本明細書において記載されるペプチドとともに用いられ得る有用な鎮痛剤には、Ｃａチャンネル遮断薬（例えば、ジコノチド）、５ＨＴ受容体アンタゴニスト（例えば、５ＨＴ３、５ＨＴ４、及び５ＨＴ１受容体アンタゴニスト）、５ＨＴ４アゴニスト（例えば、テガセロド（Ｚｅｌｎｏｒｍ（登録商標）、モサプリド、メトクロプラミド、ザコプリド、シサプリド、レンザプリド、ＢＩＭＵ１及びＢＩＭＵ８などのベンゾイミダゾロン誘導体、ならびにリレキサプリド）、５ＨＴ１アゴニスト（例えば、スマトリプタン及びブスピロン）、オピオイド受容体アゴニスト（例えば、ロペラミド、フェドトジン、エンケファリンペンタペプチド、モルヒネ、ジフェニルオキシレート（ｄｉｐｈｅｎｙｌｏｘｙｌａｔｅ）、フラケファミド、トリメブチン、及びフェンタニル）、ＣＣＫ受容体アゴニスト（例えば、ロキシグルミド及びデクスロキシグルミド）、ＮＫ１受容体アンタゴニスト（例えば、アプレピタント、ヴォフォピタント、エズロピタント、Ｒ−６７３（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ  Ｒｏｃｈｅ  Ｌｔｄ）、ＳＲ−４８９６８及びＳＲ−１４０３３、（Ｓａｎｏｆｉ  Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ）、ＣＰ−１２２，７２１（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、ＧＷ６７９７６９（Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ）、ならびにＴＡＫ−６３７（Ｔａｋｅｄａ／Ａｂｂｏｔ））、ＮＫ２受容体アンタゴニスト（例えば、ネパデュタント、サレデュタント、ＧＷ５９７５９９（Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ）、ＳＲ−１４４１９０（Ｓａｎｏｆｉ−Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ）、及びＵＫ−２９０７９５（Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ））、ＮＫ３受容体アンタゴニスト（例えば、オサネタント（ＳＲ−１４２８０１；Ｓａｎｏｆｉ−Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ）、ＳＲ−２４１５８６、及びタルネタント）、ノルエピネフリン−セロトニン再取り込み阻害剤（ＮＳＲＩ）（例えば、ミルナシプラン）、バニロイド及びカンナバノイド（ｃａｎｎａｂａｎｏｉｄ）受容体アゴニスト、シアロルフィン及びシアロルフィン関連ペプチドが含まれる。様々なクラスの鎮痛剤が文献に記載されている。
【０１０４】
一部の実施形態において、１種または複数種の他の治療用作用物質が、本明細書において記載されるペプチドと組み合わせて用いられ得る。そのような作用物質には、抗うつ薬、機能調整剤または運動促進剤、制吐薬、抗生物質、プロトンポンプ阻害剤、アシッド遮断薬（例えば、ヒスタミンＨ２受容体アンタゴニスト）、アシッドポンプアンタゴニスト、ＰＤＥ５阻害剤、ＯＤＣ阻害剤、ＧＡＢＡ−Ｂアゴニスト、胆汁酸封鎖剤、オピオイド、及び粘膜保護剤が含まれる。
【０１０５】
抗うつ薬の例には、限定することなく、アミトリプチリン（エラビル（登録商標））、デシプラミン（Ｎｏｒｐｒａｍｉｎ（登録商標））、イミプラミン（トフラニル（登録商標））、アモキサピン（Ａｓｅｎｄｉｎ（登録商標））、ノルトリプチリンなどの三環系抗うつ薬；パロキセチン（パキシル（登録商標））、フルオキセチン（プロザック（登録商標））、セルトラリン（ゾロフト（登録商標））、及びシトラロプラム（ｃｉｔｒａｌｏｐｒａｍ）（セレクサ（登録商標））などの選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）；ならびにドキセピン（シネクアン（登録商標））及びトラゾドン（デジレル（登録商標））などの他のものが含まれる。
【０１０６】
機能調整剤及び運動促進剤の例には、限定することなく、イトプリド、オクトレオチド、ベタネコール、メトクロプラミド（Ｒｅｇｌａｎ（登録商標））、ドンペリドン（Ｍｏｔｉｌｉｕｍ（登録商標））、エリスロマイシン（及びその誘導体）、及びシサプリド（Ｐｒｏｐｕｌｓｉｄ（登録商標））が含まれる。制吐薬の例には、限定することなく、プロクロルペラジンが含まれる。
【０１０７】
用いられ得る抗生物質の例には、アモキシシリン、テトラサイクリン、メトロニダゾール、またはクラリスロマイシンなど、Ｈｅｌｉｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ感染を治療するために用いられ得るものが含まれる。エリスロマイシン及びその誘導体などの他の抗生物質も、本明細書において記載されるペプチドと組み合わせて用いられ得る。
【０１０８】
プロトンポンプ阻害剤の例には、限定することなく、オメプラゾール（Ｐｒｉｌｏｓｅｃ（登録商標））、エソメプラゾール（Ｎｅｘｉｕｍ（登録商標））、ランソプラゾール（プレバシッド（登録商標））、パントプラゾール（Ｐｒｏｔｏｎｉｘ（登録商標））、及びラベプラゾール（Ａｃｉｐｈｅｘ（登録商標））が含まれる。Ｈ２受容体遮断薬の例には、限定することなく、シメチジン、ラニチジン、ファモチジン、及びニザチジンが含まれる。アシッドポンプアンタゴニストの例には、限定することなく、レバプラザン、ＣＳ−５２６（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．（２００７）３２３：３０８−３１７）、ＰＦ−０３７１６５５６（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．（２００９）３２８（２）：６７１−９）、及びＹＨ１８８５（Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．（２００１）２９（１）：５４−９）が含まれる。
【０１０９】
ＰＤＥ５阻害剤の例には、限定することなく、アバナフィル、ロデナフィル、ミロデナフィル、クエン酸シルデナフィル、タダラフィル、バルデナフィル、及びウデナフィルが含まれる。ＧＡＢＡ−Ｂアゴニストには、限定することなく、バクロフェン及びＸＰ１９９８６（ＣＡＳ登録番号８４７３５３−３０−４）が含まれる。胆汁酸封鎖剤の例には、限定することなく、ＧＴ１０２−２７９、コレスチラミン、コレセベラム、塩酸コレセベラム、ウルソデオキシコール酸、コレスチポール、コレスチラン、セベラマー、エピクロロヒドリンと架橋したポリジアリルアミン、架橋デキストランのジアルキルアミノアルキル誘導体、及びＮ−（シクロアルキル）アルキルアミンが含まれる。粘膜保護剤の例には、限定することなく、スクラルファート（Ｃａｒａｆａｔｅ）、テプレノン、ポラプレジンク、セトラキサート、及び次サリチル酸ビスマスが含まれる。
【０１１０】
併用療法は、そのそれぞれが別個に製剤化されかつ投与される２種もしくはそれを上回る種類の活性剤、例えば本明細書において記載されるペプチドまたは薬学的に許容される塩、及び別の治療用ペプチドもしくは化合物を投与することによって、または単一製剤で２種もしくはそれを上回る種類の活性剤を投与することによって実現され得る。他の組み合わせも併用療法によって包含される。例えば、２種の活性剤を一緒に製剤化し得、かつ第三の活性剤を含有する別個の製剤と併せて投与し得る。併用療法における２種またはそれを上回る種類の活性剤は一斉に投与され得るものの、それらはそうである必要があるわけではない。例えば、第一の活性剤（または活性剤の組み合わせ）の投与は、第二の作用物質（または作用物質の組み合わせ）の投与に数分間、数時間、数日間、または数週間先行し得る。ゆえに、２種またはそれを上回る種類の活性剤は、互いの数分間以内に、または互いの１、２、３、６、９、１２、１５、１８、もしくは２４時間以内に、または互いの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４日間以内に、または互いの２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０週間以内に投与され得る。ある場合には、さらにより長い間隔が可能である。多くの場合、併用療法において用いられる２種またはそれを上回る種類の活性剤は、患者の体内に同時に存在することが望ましいものの、これはそうである必要があるわけではない。
【０１１１】
投薬量
成人に対する用量域は、本明細書において記載されるペプチド及び薬学的に許容される塩に関して、経口でまたは直腸に、概して５μｇ〜１００ｍｇ／日であり得る。個別単位で提供されるタブレット、カプセル、または他の提示の形態は、そのような投薬量でまたは複数回のそれとして有効である、ある量の本明細書において記載される化合物を好都合に含有し得、例えば単位は、２５μｇ〜２ｍｇまたはおおよそ１００μｇ〜１ｍｇを含有する。患者に処方される化合物の正確な量は、主治医の責任である。しかしながら、採用される用量は、患者の年齢及び性別、治療されている正確な障害、ならびにその重症度を含めたいくつかの因子に依存する。
【０１１２】
様々な実施形態において、投薬単位は、一日のうちのいつでも食物とともに、一日のうちのいつでも食物なしで、一晩絶食後に食物とともに（例えば、朝食とともに）、低脂肪の軽食後の就寝前に投与される。一つの特定の実施形態において、投薬単位は、食物消費（例えば、食事）の前にまたは後で投与される。さらなる実施形態において、投薬単位は、食物消費のおよそ１５分間〜１時間前に投与される。様々な実施形態において、投薬単位は、１日１回、１日２回、１日３回、１日４回、１日５回、または１日６回投与される。ある特定の実施形態において、投薬単位及び一日用量は同等である。
【０１１３】
一部の実施形態において、本明細書において記載されるペプチドを含有する組成物は、分割用量で提供される。分割用量は、結腸内視鏡の前夜及び当日に投与される。他の実施形態において、投薬量は、結腸内視鏡の前夜もしくは前日、または当日に単回用量で提供される。
【０１１４】
本発明の併用療法の実施形態において、投薬単位中の２種またはそれを上回る種類の活性成分のそれぞれについての正確な量は、各構成要素の所望の投薬量に依存する。ゆえに、特定の投薬スケジュール（例えば、ある特定の数の単位及び投与の特定のタイミングを指定する投薬スケジュール）に従って投与された場合に、患者が単一の構成要素のみで治療されている場合に投与されるであろう量と同じ投薬量の各構成要素を送達するであろう投薬単位を創出することが有用であり得る。他の状況において、患者が単一の構成要素のみで治療されている場合に投与されるであろうものを下回る投薬量の１種または複数種の構成要素を送達するであろう投薬単位を創出することが望ましくあり得る。最後に、患者が単一の構成要素のみで治療されている場合に投与されるであろうものを上回る投薬量の１種または複数種の構成要素を送達するであろう投薬単位を創出することが望ましくあり得る。
【０１１５】
薬学的組成物は、本明細書において記載される活性成分及び賦形剤を含むがそれらに限定されない、付加的成分を含み得る。ある特定の実施形態において、投薬単位のうちの１種または複数種の治療用作用物質は、長期または制御性の放出製剤に存在し得、かつ付加的な治療用作用物質は、長期放出製剤には存在し得ない。例えば、本明細書において記載されるペプチドまたはアゴニストは、制御放出または長期放出製剤のいずれかにあり得るまたはいずれにもあり得ない別の作用物質とともに、同じ投薬単位で制御放出製剤または長期放出製剤に存在し得る。ゆえに、ある特定の実施形態において、本明細書において記載される作用物質のうちの１種または複数種の即時放出、及び１種または複数種の他の作用物質の制御放出を提供することが望ましくあり得る。
【０１１６】
本発明は、そのある特定の例示的な実施形態に関して記載されている。しかしながら、上記で記載される例示的な実施形態のもの以外の特異的形態で本発明を採用することが可能であることは当業者に容易に明白であろう。これは、本発明の精神から逸脱することなくなされ得る。例示的な実施形態は、単に例示的であるにすぎず、かつ決して制限的であると見なされるべきではない。本発明の範囲は、先行する記載によってよりもむしろ、添付の特許請求の範囲及びそれらの同等物によって規定される。
【実施例】
【０１１７】
実施例１：ＧＣ−Ｃ活性の解析のための、Ｔ８４細胞におけるｃＧＭＰ蓄積
ｃＧＭＰアッセイのために、２．０×１０５細胞／ｍＬのＴ８４細胞を、９６ウェル組織培養プレートで一晩成長させた。翌日、Ｔ８４細胞を、２００μＬのＤＭＥＭ＋２０ｍＭ  ＭＥＳ（ｐＨ５）またはＤＭＥＭ＋５０ｍＭ重炭酸ナトリウム（ｐＨ８）またはｐＨ７のための添加物なしのＤＭＥＭで２回洗った。これらのバッファーは、血清を含有しない。２回目の洗いの後、細胞を、ｐＨ５、７、または８のバッファーのいずれか中の１８０μＬの１ｍＭイソブチルメチルキサンチン（ＩＢＭＸ）とともに３７℃で１０分間インキュベートして、任意のホスホジエステラーゼ活性を阻害した。次いで、ペプチドをｐＨ５、７、または８のバッファーのいずれかで１０×濃度に希釈した。２０μＬのペプチド溶液を、Ｔ８４細胞を有して２００μＬの最終容量に希釈し、各ペプチド濃度を１×の状態にした。ｎＭで１００００、３０００、１０００、３００、１００、３０、１０、３、１、０．３、０．１の、各アッセイにおいて試験される最終ペプチド濃度を用いて、各ペプチドに対して１１点曲線解析を行った。
【０１１８】
内因性レベルのｃＧＭＰを判定するために用いられるペプチド対照はなかった。ペプチドを３７℃で３０分間インキュベートした。３０分後、上清を除去し、かつ細胞を２００μＬの０．１Ｍ  ＨＣｌで溶解した。細胞を氷上で３０分間溶解した。３０分後、溶解物をピペットで取り出し、かつ９６ウェルＨＰＬＣプレートに置き、かつ１０，０００×Ｇで１０分間スピンして、いかなる細胞残屑も除去した。前のスピンからの上清を取り出し、かつ新鮮な９６ウェルＨＰＬＣプレートに置いた。サンプルを等量の１Ｍ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）で希釈して、より良好なクロマトグラフィーのためにサンプルを中和した。２×ｃＧＭＰ標準曲線を０．１Ｍ  ＨＣｌで準備し、次いで等量の１Ｍ酢酸アンモニウムで希釈し、ｎｇ／ｍＬでの以下の最終濃度：１０００、５００、２５０、１２５、５０、２５、５、２．５、０．５を有した。ＳＴコアペプチド（以下、ＳＴコア）は、アミノ酸配列：
【化４２】
2020203954.tif 000043
を有する。
【０１１９】
表４におけるＬＣ／ＭＳ条件及び算出された標準曲線を用いて、ｃＧＭＰ濃度を各サンプルから判定した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアで作り出された濃度応答曲線から、ＥＣ５０値を算出した。選択されたペプチドに関する結果は、図１〜１４、２３、及び２４に見出され得る。
【表１】
2020203954.tif 000044
【０１２０】
実施例２：ＧＣ−Ｃ結合アッセイ
すべてのＧＣ−Ｃ結合を、ｐＨ５、７、または８で２００μＬの媒体の最終容量で行った。ＤＭＥＭ及び０．５％ＢＳＡ及び２０ｍＭの２−（Ｎ−モルフォリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）を用いて、ｐＨ５の媒体を調製した。ＤＭＥＭ及び０．５％ＢＳＡを用いて、ｐＨ７の媒体を調製した。２０ｍＭの重炭酸ナトリウムとともにＤＭＥＭ及び０．５％ＢＳＡを用いて、ｐＨ８の媒体を調製した。
【０１２１】
１反応あたり２５０，０００個細胞の割合でＴ８４細胞を用いた。ＤＭＥＭ−Ｆ１２  ５０／５０培地及び５ｍＭのＬ−グルタミン及び５％ＦＢＳを用いて、細胞をＴ−１５０フラスコでコンフルエンスまで成長させた。細胞を、ＤＭＥＭ及び０．５％ＢＳＡを用いてこすり取り、かつカウントして、２００μＬの最終容量で１反応あたり２５０，０００個細胞を与えるためにどのくらいの容量を添加するべきかを判定した。次いで、反応を開始するための、１反応あたり２００，０００ＣＰＭのＩ１２５−ＳＴｐ、コールドペプチド競合物、及びその後Ｔ８４細胞。次いで、サンプルを３７℃で１時間インキュベートした。１時間後、サンプル全体を、あらかじめブロッキングしたＧＦ−Ｃプレートに添加しかつ吸引した。次いで、各ウェルを２００μＬの冷却ＰＢＳで２回洗った。フィルタープレートの底を取り外し、かつ９６ウェルプレートを５０度に置いて乾燥させた。乾燥後、１００μＬのシンチレーション液を各ウェルに添加し、かつカウント前に穏やかにボルテックスした。選択されたペプチドに関する結果は、図１及び２３に見出され得る。
【０１２２】
実施例３：ラット腸液（ＲＩＦ）インビトロ代謝インキュベーション
結紮したラット空腸ループにＰＢＳを３０分間添加することによって、ラット腸液を獲得した。次いで、体液を回収し、プールし、かつ４℃での遠心分離前に氷上で保った。上清を取り出し、かつ急速冷凍した。次いで、６０μＭのペプチド（１００μｇ／ｍＬ）を、ＰＢＳ及び０．５％ＢＳＡとともにラット腸液に添加した。対照インキュベーションをＰＢＳ中で実施した。次いで、すべてのサンプルからの５０μＬのアリコートを、０、１０、３０、及び６０分間の時点で二つ組で採取し、かつ内部標準を含有する１２％トリクロロ酢酸で停止させた。
【０１２３】
サンプルをスピンし、かつ各ペプチド（または予測される代謝産物）の算出された精確な質量を用いたＬＣ−ＭＳによる解析のために上清を取り出して、抽出されたイオンクロマトグラムを作り出した。各サンプルに対する相対的応答係数（解析物ピークエリア／内部標準ピークエリア）を用いて、時間＝０と比べた残留パーセントを構築した。選択されたペプチドに関する結果は、図１、２０、２１、及び２３に見出され得る。
【０１２４】
実施例４：インビボ結紮ラットループ
まず、６０μＭのペプチドを、２００μＬのＰＢＳ中に調製した。この溶液を、長さがおよそ３〜５ｃｍである結紮したラット十二指腸ループに注入した。１種のペプチドあたり、１つの時点あたり、３匹の動物を用いた。３０分間及び６０分間の時点で、ループを摘出し、測定し、かつ計量した。次いで、体液をエッペンドルフチューブに回収しかつ急速冷凍し、そしてループを再計量してそれらの空の重量を判定した。次いで、サンプルを解凍しかつスピンし、そして上清を各サンプルから取り出した。次いで、５０μＬのアリコートを取り出し、かつ内部標準を含有する１２％トリクロロ酢酸に添加した。
【０１２５】
各ペプチド（または予測される代謝産物）の算出された精確な質量を用いたＬＣ−ＭＳによって解析を行って、抽出されたイオンクロマトグラムを作り出した。各サンプルに対する相対的応答係数（解析物ピークエリア／内部標準ピークエリア）を用いて、時間＝０と比べた残留パーセントを構築した。インキュベーションの間の体液分泌の量を、式（体液分泌＝（ループ全部−ループ空）／長さ）によって判定した。この式を用いて、どのくらいの体液が各時点でループに入ったかを算出した。選択されたペプチドに関する結果は、図１５、１６、１８、１９、２２、及び２３に見出され得る。
【０１２６】
実施例５：ジカルバペプチドの調製
標準的なＦｍｏｃ−／Ｔｒｔ／Ｏｔｂｕ保護アミノ酸を用いて、ジカルバペプチドを作製した。０．５Ｍの濃度でジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解したアミノ酸により、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｓｙｍｐｈｏｎｙ  Ｘ（登録商標）でジカルバペプチドを合成した。Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨを、ＤＭＦ中に０．５Ｍのｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを含有する溶液に溶解した。次いで、ＨＣＴＵをＮＭＰで０．５Ｍに溶解し、かつＮＭＰ中１．０ＭのＤＩＰＥＡも用いた。ＤＩＣをＮＭＰで０．５Ｍに溶解する。ＤＭＦ中に２０％ピペリジンを含有する溶液を用いて、Ｆｍｏｃ脱保護を実施した。
【０１２７】
Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｏ−Ｗａｎｇ樹脂（０．２ｍｍｏｌ、０．２９ｍｍｏｌ／ｇ）をＤＭＦ中２０％ピペリジンで処理した（３×６ｍＬ、３分間、１×６ｍＬ、１０分間）。結果として生じた樹脂をＤＭＦで洗った（６×１０ｍＬ、３０秒間）。３０秒間あらかじめ混合されている、ＮＭＰ中にＦｍｏｃ−Ｘａａ−ＯＨ、ＨＣＴＵ、及びＤＩＰＥＡを含有する溶液を添加し、かつ混合物を３０分間撹拌した。樹脂を濾過し、かつＤＭＦで１回洗った。３０秒間あらかじめ混合されている、ＮＭＰ中にＦｍｏｃ−Ｘａａ−ＯＨ、ＨＣＴＵ、及びＤＩＰＥＡを含有する第二の溶液を添加し、かつ混合物を３０分間再度撹拌した。Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨの場合、アミノ酸／ｏｘｙｍａ溶液をＮＭＰ中ＤＩＣと５分間混合し、樹脂に添加し、かつ４５分間撹拌した。樹脂を濾過し、かつＤＭＦで１回洗った。結果として生じた樹脂を濾過し、かつＤＭＦ（６×１０ｍＬ）で洗った。材料を前述のプロトコールに供し、かつペプチドを配列全体に伸長させた。メタセシスの前に樹脂を乾燥させるために、樹脂をＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）及びヘキサン（３×１０ｍＬ）で洗い、かつ減圧下で一晩乾燥させた。材料を前述のプロトコールに供し、かつペプチドを大環状化まで伸長させた。
【０１２８】
ペプチドに対してメタセシスを実施するために、以下の手順を用いた。５００ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）の保護された樹脂結合ペプチドに、５ｍＬの４：１のＤＭＡ中１，２−ジクロロエタン−０．４Ｍ  ＬｉＣｌ中のＨＧＩＩの６ｍｇ／ｍＬ溶液を添加した。結果として生じた懸濁液を、２００Ｗでの電子レンジで１６０℃に５分間加熱した。懸濁液を冷却し、濾過し、かつジクロロメタン（３×１０ｍＬ）及びＮＭＰ（３×１０ｍＬ）で洗った。ごく一部を切断して、メタセシスが完全であるかどうかを判定した。樹脂をＮＭＰ溶液中１０％ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）に一晩浸して、過剰なＨＧＩＩ触媒を掃除した。結果として生じた樹脂をＮＭＰ（３×１０ｍＬ）で洗い、かつＤＭＦ中２０％ピペリジンで処理した（３×１５ｍＬ、１０分間）。樹脂をＤＭＦ（５×１０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）、及びヘキサン（３×１０ｍＬ）で洗い、かつ減圧下で乾燥させた。
【０１２９】
ペプチドを樹脂から切断するために、樹脂を、９０：５：５のＴＦＡ−ＴＩＰＳ−Ｈ２Ｏを含有する溶液（２０ｍＬ）で処理した。２時間後、樹脂を濾過し、かつＴＦＡ（３ｍＬ）で洗い、かつ５０％濃縮した。冷却（−７８℃）エーテルを溶液（５０ｍＬ）に添加し、かつ結果として生じた混合物を３５００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。エーテルをデカントで除き、かつ冷却（−７８℃）エーテルを用いて、固体を２回のさらなる洗いに供しかつ遠心分離した。結果として生じた固体を減圧下で乾燥させ、１：１のＨ２Ｏ−ＡＣＮに溶解し、冷凍し、かつ凍結乾燥させた。
【０１３０】
４０ｍＬ／分の流速におけるＷａｔｅｒｓ  ＰＳＴ  Ｃ１８  ＲＰカラム（２５０×３０ｍｍ、１０μ、１３０Å）にて、水中０．１％ＴＦＡ及びアセトニトリル中０．１％ＴＦＡを用いたＷａｔｅｒｓ  Ａｕｔｏｐｕｒｅ（登録商標）システムでペプチドを精製した。４０または６０分間にわたり、５〜４５％アセトニトリルによる、線形勾配を用いた。所望の産物を含有する画分をプールし、かつ酸化した。
【０１３１】
ジスルフィド結合形成のためにシステイン残基を酸化するために、以下の手順を用いた。９：１の水−アセトニトリル中に１００ｍＬの０．０５Ｎ  ＮＨ４ＨＣＯ３（ｐＨ約８）を含有する溶液に、５ｍＬのＤＭＳＯを添加した。７２時間後、酸化は、ＨＰＬＣにより完全であるように見え、かつ材料を酢酸で酸性化し、冷凍し、かつ凍結乾燥させた。４０ｍＬ／分の流速におけるＷａｔｅｒｓ  ＰＳＴ  Ｃ１８  ＲＰカラム（２５０×３０ｍｍ、１０μ、１３０Å）にて、水中０．１％ＴＦＡ及びアセトニトリルを用いたＷａｔｅｒｓ  Ａｕｔｏｐｕｒｅシステムでペプチドを精製した。６０分間にわたり、５〜４０％アセトニトリルから、線形勾配を用いた。所望の産物を含有する画分をプールし、かつ凍結乾燥させた。
【０１３２】
実施例６：シスタチオニン含有ペプチドの調製
０．５ＭでＤＭＦに溶解したアミノ酸により、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｓｙｍｐｈｏｎｙ  Ｘ（登録商標）で材料を合成した。Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨを、ＤＭＦ中に０．５Ｍのｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを含有する溶液に溶解した。ＨＣＴＵをＮＭＰで０．５Ｍに溶解し、かつＮＭＰ中１．０ＭのＤＩＰＥＡも用いた。ＤＩＣをＮＭＰで０．５Ｍに溶解した。ＤＭＦ中に２０％ピペリジンを含有する溶液を用いて、Ｆｍｏｃ脱保護を実施した。
【０１３３】
ペプチドを樹脂にカップリングするために、Ｒｉｎｋアミド樹脂（０．２ｍｍｏｌ、０．２４ｍｍｏｌ／ｇ）をＤＭＦ中２０％ピペリジンで処理した（３×６ｍＬ、３分間、１×６ｍＬ、１０分間）。結果として生じた樹脂をＤＭＦで洗った（６×１０ｍＬ、３０秒間）。３０秒間あらかじめ混合されている、ＮＭＰ中にＦｍｏｃ−Ｘａａ−ＯＨ、ＨＣＴＵ、及びＤＩＰＥＡを含有する溶液を添加し、かつ混合物を３０分間撹拌した。樹脂を濾過し、かつＮＭＰで１回洗った。３０秒間あらかじめ混合されている、ＮＭＰ中にＦｍｏｃ−Ｘａａ−ＯＨ、ＨＣＴＵ、及びＤＩＰＥＡを含有する第二の溶液を添加し、かつ混合物を３０分間再度撹拌した。Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨの場合、アミノ酸／ｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅ溶液をＮＭＰ中ＤＩＣと５分間混合し、樹脂に添加し、かつ４５分間撹拌した。樹脂を濾過し、かつＤＭＦで１回洗った。結果として生じた樹脂を濾過し、かつＤＭＦ（６×１０ｍＬ）で洗った。材料を前述のプロトコールに供し、かつペプチドを大環状化まで伸長させた。
【０１３４】
ジアミノ酸をカップリングするために、樹脂をＤＭＦ中２０％ピペリジンで処理した（３×６ｍＬ、３分間、１×６ｍＬ、１０分間）。結果として生じた樹脂をＤＭＦで洗った（６×１０ｍＬ、３０秒間）。５ｍＬのＮＭＰ中にａｌｌｏｃ−ＨＣｙｓ（（Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ）−３−イル）−ａｌｌ（２２７ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）、ＰｙＡＯＰ（２０９ｍｇ  ０．４ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ（１３９μｌ、１２５ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）を含有する溶液を樹脂に添加した。９０分後、樹脂を濾過し、かつＤＭＦ（６×１０ｍＬ）で洗った。次いで、前述のプロトコールを用いて、ペプチドを伸長させた。
【０１３５】
アリル−Ａｌｌｏｃ脱保護を実施するために、樹脂（０．２ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＭＦに懸濁し、かつ１０ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中にＰｄ（ＰＰｈ３）４（３００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を含有する溶液、それに続いて０．２５ｍＬ（２ｍｍｏｌ）のフェニルシランを添加した。結果として生じた混合物を、光のない下で２時間振とうした。少量のサンプルを切断して、完全な脱保護を確保した。結果として生じた樹脂を濾過し、かつＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）及びＤＭＦ（３×１０ｍＬ）で洗った。樹脂を、ＤＭＦ中に０．５％ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウムを含有する溶液で処理し（１０ｍＬ、４×１５分間）、かつＤＭＦ（３×１０ｍＬ）で洗った。
【０１３６】
大環状化を実施するために、樹脂をＤＭＦ溶液中２０％ピペリジンで処理し（２×５分間、１×１０分間、１５ｍＬ）、かつＤＭＦ（６×１５ｍＬ）で洗った。１５ｍＬのＤＭＦ中に５２１ｍｇ（１ｍｍｏｌ）のＰｙＡＯＰを含有する溶液を添加し、そして１分後、０．３５ｍＬ（２ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡを添加しかつ６０分間振とうした。少量のサンプルを解析のために採取した。結果として生じた樹脂をＤＭＦ（３×１５ｍＬ）で洗い、かつＳｙｍｐｈｏｎｙＸに戻して合成を完了させた。
【０１３７】
ペプチドを樹脂から切断するために、樹脂を、９０：５：３：２のＴＦＡ−ＴＩＰＳ−ＤＯＤＴ−Ｈ２Ｏを含有する溶液（２０ｍＬ）で処理した。２時間後、樹脂を濾過し、かつＴＦＡ（３ｍＬ）で洗い、かつ５０％濃縮した。冷却（−７８℃）エーテルを溶液（５０ｍＬ）に添加し、かつ結果として生じた混合物を３５００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。エーテルをデカントで除き、かつ冷却（−７８℃）エーテルを用いて、固体を２回のさらなる洗いに供しかつ遠心分離した。結果として生じた固体を減圧下で乾燥させ、１：１のＨ２Ｏ−ＡＣＮに溶解し、冷凍し、かつ凍結乾燥させた。次いで、４０ｍＬ／分の流速におけるＷａｔｅｒｓ  ＰＳＴ  Ｃ１８  ＲＰカラム（２５０×３０ｍｍ、１０μ、１３０Å）にて、水中０．１％ＴＦＡ及びアセトニトリル中０．１％ＴＦＡを用いたＷａｔｅｒｓ  ａｕｔｏｐｕｒｅシステムでペプチドを精製した。４０または６０分間にわたり、５〜４５％アセトニトリルの、線形勾配を用いた。所望の産物を含有する画分をプールし、かつ酸化した。
【０１３８】
酸化は、９：１の水−アセトニトリル中に１００ｍＬの０．０５Ｎ  ＮＨ４ＨＣＯ３（ｐＨ約８）を含有する溶液に、５ｍＬのＤＭＳＯを添加して実施した。７２時間後、酸化は、ＨＰＬＣにより完全であるように見え、かつ材料を酢酸で酸性化し、冷凍し、かつ凍結乾燥させた。４０ｍＬ／分の流速におけるＷａｔｅｒｓ  ＰＳＴ  Ｃ１８  ＲＰカラム（２５０×３０ｍｍ、１０μ、１３０Å）にて、水中０．１％ＴＦＡ及びアセトニトリル中０．１％ＴＦＡを用いたＷａｔｅｒｓ  Ａｕｔｏｐｕｒｅ（登録商標）システムでペプチドを精製した。６０分間にわたり、５〜４０％アセトニトリルから、線形勾配を用いた。所望の産物を含有する画分をプールし、かつ凍結乾燥させた。
【０１３９】
実施例７：ラクタム結合含有ペプチドの産生
標準的なＦｍｏｃ−／Ｔｒｔ／Ｏｔｂｕ保護アミノ酸を用いて、ペプチドを合成した。０．５ＭでＤＭＦに溶解したアミノ酸により、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｓｙｍｐｈｏｎｙ  Ｘ（登録商標）で材料を合成した。Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨを、ＤＭＦ中に０．５Ｍのｏｘｙｍａ  ｐｕｒｅを含有する溶液に溶解した。ＨＣＴＵをＮＭＰで０．５Ｍに溶解し、かつＮＭＰ中１．０ＭのＤＩＰＥＡも用いた。ＤＩＣをＮＭＰで０．５Ｍに溶解した。ＤＭＦ中に２０％ピペリジンを含有する溶液を用いて、Ｆｍｏｃ脱保護を実施した。珍しいアミノ酸を、下記で記載されるように手作業でカップリングした。
【０１４０】
Ｆｍｏｃ−Ｄｐｒ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨを組み入れるために、６ｍＬのＤＭＦ中に５３３ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）のＦｍｏｃ−Ｄｐｒ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨ、５２１ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）のＰｙＡＯＰ、及び３４８μＬ（２５８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡを含有する溶液を、脱保護された樹脂（０．２ｍｍｏｌ）に添加した。９０分後、樹脂を濾過し、かつＤＭＦ（３×１０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）、及び再度ＤＭＦ（３×１０ｍＬ）で洗った。樹脂を合成器に戻して合成を続けた。
【０１４１】
Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＤｍａｂ）−ＯＨを組み入れるために、６ｍＬのＤＭＦ中に６６７ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）のＦｍｏｃ−Ａｓｐ（Ｏｄｍａｂ）−ＯＨ、５２１ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）のＰｙＡＯＰ、及び３４８μＬ（２５８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡを含有する溶液を、脱保護された樹脂（０．２ｍｍｏｌ）に添加した。９０分後、樹脂を濾過し、かつＤＭＦ（３×１０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）、及び再度ＤＭＦ（３×１０ｍＬ）で洗った。最終的な脱保護のために、樹脂を合成器に戻した。
【０１４２】
Ｎ末をＢｏｃ保護するために、樹脂を５ｍＬのＤＭＦ中２１８ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルで処理した。４時間後、少量のサンプル（約１０ｍｇ）を取り出し、かつ１０μＬの無水酢酸及び３０μＬのＤＭＦ中ＤＩＰＥＡでアセチル化して完了をチェックした。結果として生じた樹脂をＤＭＦ（５×１０ｍＬ）で洗い、かつ１００μＬの無水酢酸及び３００μＬのＤＭＦ中ＤＩＰＥＡで５０分間処理した。結果として生じた樹脂をＤＭＦ（６×１０ｍＬ）で洗った。
【０１４３】
ｉｖＤＤＥ及びＤｍａｂを除去するために、保護された樹脂を、ＤＭＦ中に２％ヒドラジン一水和物を含有する溶液で処理した（５×５ｍＬ、５分間）。結果として生じた樹脂をＤＭＦ（６×１０ｍＬ）で洗った。
【０１４４】
ラクタムを形成するために、樹脂を５ｍＬのＤＭＦ中５２１ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）のＰｙＡＯＰ及び３４８μＬ（２５８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡで処理した。結果として生じた混合物を、電子レンジによる加熱（２００Ｗ）で１００℃に１０分間加熱した。結果として生じた樹脂を冷却し、濾過し、かつＤＭＦ（６×１０ｍＬ）及びＣＨ２Ｃｌ２（６×１０ｍＬ）で洗い、かつ減圧下で乾燥させた。
【０１４５】
ペプチドを樹脂から切断するために、樹脂を、９０：５：３：２のＴＦＡ−ＴＩＰＳ−ＤＯＤＴ−Ｈ２Ｏを含有する溶液（２０ｍＬ）で処理した。２時間後、樹脂を濾過し、かつＴＦＡ（３ｍＬ）で洗い、かつ５０％濃縮した。冷却（−７８℃）エーテルを溶液（５０ｍＬ）に添加し、かつ結果として生じた混合物を３５００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。エーテルをデカントで除き、かつ冷却（−７８℃）エーテルを用いて、固体を２回のさらなる洗い／遠心分離に供した。結果として生じた固体を減圧下で乾燥させ、１：１のＨ２Ｏ−ＡＣＮに溶解し、冷凍し、かつ凍結乾燥させた。
【０１４６】
ペプチドを酸化するために、粗ペプチド（２８０ｍｇ）を水に溶解し、かつ混合物を固体ＮＨ４ＨＣＯ３で処理して、ｐＨが＞７であるように調整した。その後、２０ｍＬのアセトニトリル、それに続いて１０ｍＬのＤＭＳＯを添加した。２４時間後、酸化は、ＨＰＬＣにより完全であるように見え、かつ材料をトリフルオロ酢酸でｐＨ約２に酸性化し、濾過し、冷凍し、かつ凍結乾燥させた。
【０１４７】
４０ｍＬ／分の流速におけるＷａｔｅｒｓ  ＰＳＴ  Ｃ１８  ＲＰカラム（２５０×３０ｍｍ、５μ、１３０Å）にて、水中０．１％ＴＦＡ及びアセトニトリル中０．１％ＴＦＡを用いたＷａｔｅｒｓ  Ａｕｔｏｐｕｒｅ（登録商標）システムでペプチドを精製した。４０分間にわたる、アセトニトリル中５％０．１％ＴＦＡからアセトニトリル中２５％０．１％ＴＦＡへの線形勾配を用いた。所望の産物を含有する画分をプールし、冷凍し、かつ凍結乾燥させた。材料を第二の通過精製に供した。
【０１４８】
２０ｍＬ／分の流速におけるＷａｔｅｒｓ  ＰＳＴ  Ｃ１８  ＲＰカラム（２５０×１９ｍｍ、５ｕ、１３０Ａ）にて、水中０．１％ＴＦＡ及びアセトニトリル中０．１％ＴＦＡを用いたＷａｔｅｒｓ  Ａｕｔｏｐｕｒｅ（登録商標）システムでペプチドを精製した。６０分間にわたる、アセトニトリル中１５％０．１％ＴＦＡからアセトニトリル中２５％０．１％ＴＦＡへの線形勾配を用いた。所望の産物を含有する画分をプールし、冷凍し、かつ凍結乾燥させて、無色の固体を与えた。
【０１４９】
実施例８：マウスにおける胃腸管輸送
アッセイの目的は、マウスにおけるインビボ胃腸管輸送に対する、グアニル酸シクラーゼＣアゴニストペプチドの効果を試験することであった。経口投薬されたグアニル酸シクラーゼＣアゴニストは、マウスにおいて、炭の食事が巡回する距離％を増加させることが実証された。
【０１５０】
アッセイに関しては、２５〜３０ｇの重量がある雌のＣＤ−１マウス（１群あたりｎ＝１０）を一晩絶食させ、かつ水への自由裁量での接近を与えた。活性炭（２０ｇ；１００メッシュ；Ｓｉｇｍａカタログ＃２４２２７６）を２００ｍＬのアラビアガム（１００ｍｇ／ｍＬ）に懸濁し、かつ少なくとも１時間かき混ぜた。試験ペプチドを、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ６．９ビヒクル中に調製した。
【０１５１】
試験ペプチド及びビヒクルを、経口強制飼養によって２００μＬ用量で投与した。試験ペプチドを投薬した７分後、２００μＬの炭／アラビアガム懸濁液を経口強制飼養によって投薬した。１５分後、マウスをＣＯ２過剰摂取によって屠殺した。食道から盲腸まで、胃腸管を取り出した。幽門接合部から回盲接合部まで、小腸の全長を測定した。幽門接合部から炭の最前線まで、炭が巡回する距離を測定した。巡回する距離（％）を（炭が巡回する距離／小腸の全長）×１００として判定した。データをＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアプログラムに入力し、かつＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ多重比較事後検定を用いたＡＮＯＶＡによって解析した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアパッケージを用いて、データのプロット及びＥＤ５０も判定した。選択されたペプチドに関する結果は、図１７、２５、２６、及び２７に見出され得る。
【０１５２】
他の実施形態
本開示において言及されるすべての刊行物及び特許は、あたかもそれぞれ個々の刊行物または特許出願が、参照により組み入れられることを具体的かつ個々に示されているのと同じ程度に、参照により本明細書に組み入れられる。万一、参照により組み入れられる特許または刊行物のいずれかにおける用語の意味が、本開示において用いられる用語の意味と矛盾するならば、本開示における用語の意味が支配的であることが意図される。さらには、先の記述は、本発明の例示的な実施形態を単に開示しかつ記載しているにすぎない。当業者であれば、そのような記述からならびに付随する図面及び特許請求の範囲から、様々な変化、改変、及び変動が、以下の特許請求の範囲において規定される本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、その中でなされ得ることを容易に認識するであろう。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩であって、前記ペプチドは、アミノ酸配列
【化４３】
2020203954.tif 000045
、または薬学的に許容されるその塩を含み；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫ、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎ、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１１は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはペニシラミン（Ｐｅｎ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、Ｃｔｈ、Ｄｐｒ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１３は、ＡｓｎまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１６は、Ｃｙｓ、Ａｇ、Ｐｅｎ、またはＣｔｈであり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ１９は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはＰｅｎであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、Ｄｐｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり；かつ
前記ペプチドは、Ｘａａ７及びＸａａ１２、Ｘａａ８及びＸａａ１６、ならびにＸａａ１１及びＸａａ１９の間に共有結合を含有する、前記ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目２）
Ｎ末は、酢酸、ペンテン酸、ビオチン、４−Ｍｅｐｉｐ、Ｃ１２アルキルカルボン酸、Ｃ１４アルキルカルボン酸、Ｃ１６アルキルカルボン酸、またはＣ１８アルキルカルボン酸でキャッピングされている、項目１に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目３）
Ｃ末はアミド化されている、項目１または２のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目４）
Ｘａａ７及びＸａａ１２は両方ともＡｇであり、かつジカルバ結合がＡｇ７及びＡｇ１２の間に存在している；
Ｘａａ７及びＸａａ１２は両方ともＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ７及びＣｙｓ１２の間に存在している；
Ｘａａ８及びＸａａ１６は両方ともＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ８及びＣｙｓ１６の間に存在している；
Ｘａａ７はＣｔｈであり、かつＸａａ１２はＣｙｓであり、かつ結合がＣｔｈ７及びＣｙｓ１２の間に存在している；
Ｘａａ８はＣｔｈであり、かつＸａａ１６はＣｙｓであり、かつ結合がＣｔｈ８及びＣｙｓ１６の間に存在している；
Ｘａａ１１及びＸａａ１９はＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ１１及びＣｙｓ１９の間に存在している；または
それらの任意の組み合わせである
項目１〜３のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目５）
Ｘａａ７はアリルグリシン、Ｃｔｈ、またはＣｙｓである、項目１〜３のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目６）
Ｘａａ８はＣｙｓまたはシスタチオニンである、項目１〜３のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目７）
Ｘａａ９はＧｌｕである、項目１〜６のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目８）
Ｘａａ１０はＬｅｕである、項目１〜７のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目９）
Ｘａａ１２はＣｙｓまたはアリルグリシンである、項目１〜８のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目１０）
Ｘａａ１４はＶａｌまたはＰｒｏである、項目１〜９のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目１１）
Ｘａａ１７はＴｙｒまたはＴｈｒである、項目１〜１０のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目１２）
Ｘａａ２０はＴｙｒであるまたは欠如している、項目１〜１１のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目１３）
Ｘａａ２１は欠如している、項目１〜１２のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目１４）
Ｘａａ１は欠如しており；
Ｘａａ２は欠如しており；
Ｘａａ３は欠如しており；
Ｘａａ４は欠如しており；
Ｘａａ５は欠如しており；
Ｘａａ６は欠如しており；
Ｘａａ７はＡｇ、Ｃｙｓ、またはＣｔｈであり；
Ｘａａ８はＣｙｓまたはＣｔｈであり；
Ｘａａ９はＧｌｕであり；
Ｘａａ１０はＬｅｕであり；
Ｘａａ１２はＡｇまたはＣｙｓであり；
Ｘａａ１４はＶａｌまたはＰｒｏであり；
Ｘａａ１７はＴｙｒまたはＴｈｒであり；かつ
Ｘａａ２０はＴｙｒであるまたは欠如している
項目１に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目１５）
前記ペプチドは、アミノ酸配列：
【化４４】
2020203954.tif 000046
を含む、項目１３に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目１６）
前記ペプチドは、アミノ酸配列：
【化４５】
2020203954.tif 000047
【化４６】
2020203954.tif 000048
【化４７】
2020203954.tif 000049
【化４８】
2020203954.tif 000050
を含む、項目１に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目１７）
ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩であって、前記ペプチドは、アミノ酸配列
【化４９】
2020203954.tif 000051
、または薬学的に許容されるその塩からなり；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫ、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎ、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１１は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはペニシラミン（Ｐｅｎ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、Ｃｔｈ、Ｄｐｒ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１３は、ＡｓｎまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１６は、Ｃｙｓ、Ａｇ、Ｐｅｎ、またはＣｔｈであり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ１９は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはＰｅｎであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、Ｄｐｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり；かつ
前記ペプチドは、Ｘａａ７及びＸａａ１２、Ｘａａ８及びＸａａ１６、ならびにＸａａ１１及びＸａａ１９の間に共有結合を含有する、前記ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目１８）
Ｎ末は、酢酸、ペンテン酸、ビオチン、４−Ｍｅｐｉｐ、Ｃ１２アルキルカルボン酸、Ｃ１４アルキルカルボン酸、Ｃ１６アルキルカルボン酸、またはＣ１８アルキルカルボン酸でキャッピングされている、項目１７に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目１９）
Ｃ末はアミド化されている、項目１７または１８のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目２０）
Ｘａａ７及びＸａａ１２は両方ともＡｇであり、かつジカルバ結合がＡｇ７及びＡｇ１２の間に存在している；
Ｘａａ７及びＸａａ１２は両方ともＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ７及びＣｙｓ１２の間に存在している；
Ｘａａ８及びＸａａ１６は両方ともＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ８及びＣｙｓ１６の間に存在している；
Ｘａａ７はＣｔｈであり、かつＸａａ１２はＣｙｓであり、かつ結合がＣｔｈ７及びＣｙｓ１２の間に存在している；
Ｘａａ８はＣｔｈであり、かつＸａａ１６はＣｙｓであり、かつ結合がＣｔｈ８及びＣｙｓ１６の間に存在している；
Ｘａａ１１及びＸａａ１９はＣｙｓであり、かつジスルフィド結合がＣｙｓ１１及びＣｙｓ１９の間に存在している；または
それらの任意の組み合わせである
項目１７〜１９のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目２１）
Ｘａａ７はアリルグリシンまたはＣｙｓである、項目１７〜１９のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目２２）
Ｘａａ８はＣｙｓまたはシスタチオニンである、項目１７〜１９のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目２３）
Ｘａａ９はＧｌｕである、項目１７〜２２のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目２４）
Ｘａａ１０はＬｅｕである、項目１７〜２３のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目２５）
Ｘａａ１２はＣｙｓまたはアリルグリシンである、項目１７〜２４のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目２６）
Ｘａａ１４はＶａｌまたはＰｒｏである、項目１７〜２５のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目２７）
Ｘａａ１７はＴｙｒまたはＴｈｒである、項目１７〜２６のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目２８）
Ｘａａ２０はＴｙｒであるまたは欠如している、項目１７〜２７のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目２９）
Ｘａａ２１は欠如している、項目１７〜２８のいずれか１項に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目３０）
Ｘａａ１は欠如しており；
Ｘａａ２は欠如しており；
Ｘａａ３は欠如しており；
Ｘａａ４は欠如しており；
Ｘａａ５は欠如しており；
Ｘａａ６は欠如しており；
Ｘａａ７はＡｇ、Ｃｙｓ、またはＣｔｈであり；
Ｘａａ８はＣｙｓまたはＣｔｈであり；
Ｘａａ９はＧｌｕであり；
Ｘａａ１０はＬｅｕであり；
Ｘａａ１２はＡｇまたはＣｙｓであり；
Ｘａａ１４はＶａｌまたはＰｒｏであり；
Ｘａａ１７はＴｙｒまたはＴｈｒであり；かつ
Ｘａａ２０はＴｙｒであるまたは欠如している
項目１７に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目３１）
前記ペプチドは、アミノ酸配列
【化５０】
2020203954.tif 000052
からなる、項目３０に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目３２）
前記ペプチドは、アミノ酸配列：
【化５１】
2020203954.tif 000053
【化５２】
2020203954.tif 000054
【化５３】
2020203954.tif 000055
【化５４】
2020203954.tif 000056
からなる、項目１７に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目３３）
ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩であって、前記ペプチドは、アミノ酸配列：
【化５５】
2020203954.tif 000057
、または薬学的に許容されるその塩を含み；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり；かつ
前記ペプチドは、Ｘａａ７及びＸａａ１２、Ｘａａ８及びＣｙｓ１６、ならびにＣｙｓ１１及びＣｙｓ１９の間に共有結合を含有する、前記ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目３４）
Ｎ末は、酢酸、ペンテン酸、４−Ｍｅｐｉｐ、Ｃ１２アルキルカルボン酸、Ｃ１４アルキルカルボン酸、Ｃ１６アルキルカルボン酸、またはＣ１８アルキルカルボン酸でキャッピングされている、項目３３に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目３５）
Ｃ末はアミド化されている、項目３３に記載のペプチドまたは薬学的に許容されるその塩。
（項目３６）
ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩、及び少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、またはキャリアを含む薬学的組成物であって、前記ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、アミノ酸配列：
【化５６】
2020203954.tif 000058
、または薬学的に許容されるその塩を含み；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫ、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎ、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、４−ペンテン酸（Ｐｅｎｔ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１１は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはペニシラミン（Ｐｅｎ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、Ｃｔｈ、Ｄｐｒ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１３は、ＡｓｎまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１６は、Ｃｙｓ、Ａｇ、Ｐｅｎ、またはＣｔｈであり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ１９は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはＰｅｎであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、Ｄｐｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり；かつ
前記ペプチドは、Ｘａａ７及びＸａａ１２、Ｘａａ８及びＸａａ１６、ならびにＸａａ１１及びＸａａ１９の間に共有結合を含有する、前記薬学的組成物。
（項目３７）
前記ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、アミノ酸配列：
【化５７】
2020203954.tif 000059
【化５８】
2020203954.tif 000060
【化５９】
2020203954.tif 000061
【化６０】
2020203954.tif 000062
からなる、項目３６に記載の薬学的組成物。
（項目３８）
前記ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、アミノ酸配列：
【化６１】
2020203954.tif 000063
からなる、項目３６に記載の薬学的組成物。
（項目３９）
前記ペプチドのＮ末は、酢酸、ペンテン酸、４−Ｍｅｐｉｐ、Ｃ１２アルキルカルボン酸、Ｃ１４アルキルカルボン酸、Ｃ１６アルキルカルボン酸、もしくはＣ１８アルキルカルボン酸でキャッピングされている；前記ペプチドのＣ末はアミド化されている；またはそれらの任意の組み合わせである、項目３６〜３８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目４０）
前記薬学的組成物は固形剤形である、項目３６〜３９のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目４１）
前記薬学的組成物は経口用固形剤形として製剤化されている、項目４０に記載の薬学的組成物。
（項目４２）
対象に有効用量の結腸洗浄組成物を投与することを含む、結腸内視鏡処置のための準備において対象の結腸を洗浄する方法であって、前記結腸洗浄組成物は、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、またはキャリア、及びペプチドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、前記ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、アミノ酸配列：
【化６２】
2020203954.tif 000064
、または薬学的に許容されるその塩を含み；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫ、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎ、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、４−ペンテン酸（Ｐｅｎｔ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１１は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはペニシラミン（Ｐｅｎ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、Ｃｔｈ、Ｄｐｒ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１３は、ＡｓｎまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１６は、Ｃｙｓ、Ａｇ、Ｐｅｎ、またはＣｔｈであり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ１９は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはＰｅｎであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、Ｄｐｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり；かつ
前記ペプチドは、Ｘａａ７及びＸａａ１２、Ｘａａ８及びＸａａ１６、ならびにＸａａ１１及びＸａａ１９の間に共有結合を含有する、前記方法。
（項目４３）
前記方法は、
ａ．対象に有効な第一の用量の結腸洗浄組成物を経口でまたは直腸に投与すること；及びｂ．対象に有効な第二の用量の結腸洗浄組成物を投与して、対象の結腸を実質的に洗浄すること
をさらに含む、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
有効な第一の用量を投与した次の朝に有効な第二の用量を投与する、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記結腸洗浄組成物は、アミノ酸配列：
【化６３】
2020203954.tif 000065
【化６４】
2020203954.tif 000066
【化６５】
2020203954.tif 000067
【化６６】
2020203954.tif 000068
を含むペプチドまたは薬学的に許容されるその塩を含む、項目４２に記載の方法。
（項目４６）
前記結腸洗浄組成物は、アミノ酸配列：
【化６７】
2020203954.tif 000069
を含むペプチドまたは薬学的に許容されるその塩を含む、項目４２に記載の方法。
（項目４７）
前記ポリペプチドをコードする核酸分子を持する細胞を提供すること、前記ペプチドが発現される条件下で前記細胞を培養すること、及び前記発現したペプチドを単離することを含む、項目１〜３５のいずれか１項に記載のペプチドを産生する方法。
（項目４８）
前記ペプチドを化学的に合成すること、及び前記合成されたペプチドを精製することを含む、項目１〜３５のいずれか１項に記載のペプチドを産生する方法。
（項目４９）
対象に項目１〜３５のいずれか１項に記載のペプチドを投与することを含む、胃腸または内臓の障害を治療する方法。
（項目５０）
対象に項目１〜３５のいずれか１項に記載のペプチドを投与することを含む、結腸癌、遺伝性非ポリポーシス結腸直腸癌（ＨＮＰＣＣ）、リンチ症候群、胃不全麻痺（ＧＰ）、ポリープ、痛み、広汎性腹痛、術後イレウス、オピオイド誘導性便秘、機能性ディスペプシア、ＳＵＤＤ（症候性単純性憩室疾患）及びＳＣＡＤ（憩室症に伴う分節性結腸炎）、憩室症を含むがそれらに限定されない憩室疾患、下痢優位型過敏性腸症候群、過敏性腸症候群（ｓｙｎｄｒｏｍ）（ＩＢＳ）に伴う痛み、潰瘍性結腸炎、潰瘍性直腸炎、クローン病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、慢性または急性の放射線直腸障害、直腸痛、慢性直腸神経痛、一過性直腸神経痛、肛門痛、慢性裂肛、術後肛門痛、過活動膀胱症候群、腹圧性尿失禁、間質性膀胱炎、膀胱痛症候群、結腸直腸癌、癌に伴う痛み、広汎性骨盤痛、子宮内膜症、睾丸痛、慢性前立腺炎、前立腺痛、ヴルヴォディニア、尿道症候群、陰茎痛、肛門周囲痛、ならびに他の胃腸及び内臓の障害より選択される障害を治療する方法。
（項目５１）
対象に、オピオイド、トラマドール、β−３アドレナリン受容体アゴニスト、抗コリン剤、及び三環系抗うつ薬より選択される活性成分を含む薬学的組成物を投与することをさらに含む、項目５１に記載の方法。
（項目５２）
結腸内視鏡処置のための準備において対象における結腸を洗浄することにおける使用のための薬学的組成物であって、前記薬学的組成物は、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、またはキャリア、及びペプチドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、前記ペプチドまたは薬学的に許容されるその塩は、アミノ酸配列：
【化６８】
2020203954.tif 000070
、または薬学的に許容されるその塩を含み；式中、
Ｘａａ１は、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ２は、ＢＫ、Ａｓｎでありまたは欠如しており；
Ｘａａ３は、Ａｓｎ、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒでありまたは欠如しており；
Ｘａａ５は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、ＢＥでありまたは欠如しており；
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、ＢＫでありまたは欠如しており；
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、アリルグリシン（Ａｇ）、４−ペンテン酸（Ｐｅｎｔ）、Ｈａｇ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ、シスタチオニン（Ｃｔｈ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、またはアリルグリシン（Ａｇ）であり；
Ｘａａ９は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、またはＧｌｎであり；
Ｘａａ１０は、Ｌｅｕ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｐｈｅ、または４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）であり；
Ｘａａ１１は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはペニシラミン（Ｐｅｎ）であり；
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、アリルグリシン（Ａｇ）、Ｈａｇ、Ｃｔｈ、Ｄｐｒ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１３は、ＡｓｎまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ１４は、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｌｅｕ、またはヒドロキシプロリン（ＯＨ−Ｐｒｏ）であり；
Ｘａａ１６は、Ｃｙｓ、Ａｇ、Ｐｅｎ、またはＣｔｈであり；
Ｘａａ１７は、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、またはＡｌａであり；
Ｘａａ１９は、Ｃｙｓ、Ａｇ、またはＰｅｎであり；
Ｘａａ２０は、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、４−フルオロフェニルアラニン（（４−Ｆ）Ｐｈｅ）、シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ（Ｎｍｅ−Ｔｙｒ）でありまたは欠如しており；
Ｘａａ２１は、欠如しておりまたはＡｓｎであり；
式中、少なくとも１つのＸａａは、ＢＥ、ＢＫ、（４−Ｆ）Ｐｈｅ、Ｃｔｈ、Ａｇ、Ｈａｇ、Ｐｅｎ、Ｃｈａ、Ｓａｒ、Ｄｐｒ、またはＯＨ−Ｐｒｏであり；かつ
前記ペプチドは、Ｘａａ７及びＸａａ１２、Ｘａａ８及びＸａａ１６、ならびにＸａａ１１及びＸａａ１９の間に共有結合を含有する、前記薬学的組成物。
（項目５３）
結腸癌、遺伝性非ポリポーシス結腸直腸癌（ＨＮＰＣＣ）、リンチ症候群、胃不全麻痺（ＧＰ）、ポリープ、痛み、広汎性腹痛、術後イレウス、オピオイド誘導性便秘、機能性ディスペプシア、ＳＵＤＤ（症候性単純性憩室疾患）及びＳＣＡＤ（憩室症に伴う分節性結腸炎）、憩室症を含むがそれらに限定されない憩室疾患、下痢優位型過敏性腸症候群、過敏性腸症候群（ｓｙｎｄｒｏｍ）（ＩＢＳ）に伴う痛み、潰瘍性結腸炎、潰瘍性直腸炎、クローン病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、慢性または急性の放射線直腸障害、直腸痛、慢性直腸神経痛、一過性直腸神経痛、肛門痛、慢性裂肛、術後肛門痛、過活動膀胱症候群、腹圧性尿失禁、間質性膀胱炎、膀胱痛症候群、結腸直腸癌、癌に伴う痛み、広汎性骨盤痛、子宮内膜症、睾丸痛、慢性前立腺炎、前立腺痛、ヴルヴォディニア、尿道症候群、陰茎痛、肛門周囲痛、ならびに他の胃腸及び内臓の障害より選択される障害を治療することにおける使用のための薬学的組成物であって、かつ前記薬学的組成物は項目１〜３５のいずれか１項に記載のペプチドを含む、前記薬学的組成物。
【図１】
2020203954.tif 000071
【図２】
2020203954.tif 000072
【図３】
2020203954.tif 000073
【図４】
2020203954.tif 000074
【図５】
2020203954.tif 000075
【図６】
2020203954.tif 000076
【図７】
2020203954.tif 000077
【図８】
2020203954.tif 000078
【図９】
2020203954.tif 000079
【図１０】
2020203954.tif 000080
【図１１】
2020203954.tif 000081
【図１２】
2020203954.tif 000082
【図１３】
2020203954.tif 000083
【図１４】
2020203954.tif 000084
【図１５】
2020203954.tif 000085
【図１６】
2020203954.tif 000086
【図１７】
2020203954.tif 000087
【図１８】
2020203954.tif 000088
【図１９】
2020203954.tif 000089
【図２０】
2020203954.tif 000090
【図２１】
2020203954.tif 000091
【図２２】
2020203954.tif 000092
【図２３】
2020203954.tif 000093
【図２４】
2020203954.tif 000094
【図２５】
2020203954.tif 000095
【図２６】
2020203954.tif 000096
【図２７】
2020203954.tif 000097
【配列表】
2020203954000001.app
【外国語明細書】
2020203954000001.pdf