(57)【要約】【課題】新規抗酸化物質を提供すること。【解決手段】式（Ｉ）：【化１】2020203873.tif 000011を有する化合物が開示される。式（Ｉ）の化合物の調製方法も開示される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉ）：
【化１】
2020203873.tif 000009
を有する化合物。
【請求項２】
式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物を反応させて式（Ｉ）の化合物を得るステップ：
【化２】
2020203873.tif 000010
を含む、請求項１に記載の化合物の調製方法。
【請求項３】
式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物の反応が、
式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物を反応器中に２．４：１〜２．６：１のモル比で入れるステップ；
窒素雰囲気下で溶媒及び触媒を加えて、反応混合物を得るステップ；
前記反応混合物を磁気撹拌下で５０〜７５℃で１〜４時間加熱するステップ；
前記反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得るステップ；及び
フラッシュクロマトグラフィーにより前記粗生成物を精製するステップ、を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記溶媒が、トルエン、酢酸エチル、又はアセトニトリルであり；式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物との前記モル比が、２．６：１であり；前記触媒がトリエチルアミン又は４−ジメチルアミノピリジンであり；前記反応混合物が、７５℃で加熱され；前記反応混合物が、４時間加熱される、請求項３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食品化学領域、より詳細にはヒドロキシチロソールイソホロンジイソシアネート誘導体、その調製方法及びその用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
油及び脂肪は、人々の日常の生活で重要な役割を果たし、人体にエネルギーを供給でき、人体において重要な生理機能を有する。脂肪及び油の酸化は、光、放射線、空気及び酵素の作用下における食物の表面及び内部での食物の酸化反応を指す。油の酸化による生成物は、油及び脂肪の風味、色に影響を及ぼすだけではなく、食物の品質も低下させる。油及び脂肪の酸化は、膜組織、酵素及びタンパク質にダメージを与えることがあり、それにより加齢に伴う多くの疾患や発がん性ももたらし、ヒトの健康に深刻な危険をもたらす。油及び脂肪の保存可能期間を延ばすために、油及び脂肪に抗酸化物質を添加することは、最も効果的な手段の一つである。しかし、一般的に使用されるいくつかの合成抗酸化物質は、いくらかの安全上の危険があり、それらの合成抗酸化物質は、国によっては強く反対され又は規制されている。従って、抗酸化物質についての研究は、次第に天然の抗酸化物質の応用へと移っていった。
【０００３】
オリーブオイルから抽出できるヒドロキシチロソール（式（ＩＩ）の化合物）は、様々な生物学的及び薬理学的活性を有する天然のポリフェノール化合物である。ヒドロキシチロソールは、癌、炎症性疾患、心血管疾患、脳血管疾患及び冠動脈性心疾患の予防及び治療並びに網膜色素上皮細胞の保護において役割を果たす。ヒドロキシチロソールの分子構造は、他のフェノール性物質のようにフェノール性ヒドロキシル基を有するだけではなく、ベンゼン環が付けられたエタノール鎖におけるアルコール性ヒドロキシル基も有する。従って、ヒドロキシチロソールは優れた抗酸化活性を有する。ヒドロキシチロソールの抗酸化活性はヒドロキシチロソールの以下に述べる構造と密接に関連すると推察される。ヒドロキシチロソールは、水素供与体としてアルコール性ヒドロキシル基を有し、その基は様々な活性酸素種に対して破壊作用を有し、一重項酸素Ｏ２から活性が低い三重項酸素Ｏ２へと減少させることができ、酸素フリーラジカル発生の可能性を減少させる。一方、ヒドロキシチロソールは、様々なフリーラジカルに対する効果的な捕捉剤であり、反応して反応性がより低いポリフェノールラジカルを生じ、フリーラジカル酸化の連鎖反応を妨げる。最終的に、ヒドロキシチロソールのオルトジフェノール性ヒドロキシル基は金属イオンと結合し得、酸化反応に対する金属イオンの触媒作用を減少させる。
【化１】
2020203873.tif 000002
【０００４】
イソホロンジイソシアネート（ＩＰＤＩ）（式（ＩＩＩ）の化合物）は、無黄変の脂肪族イソシアネートである優れた脂肪族ジイソシアネートである。ＩＰＤＩは常温で無色又は淡黄色の液体であり、芳香族イソシアネートよりも活性が低い。イソホロンジイソシアネートから作られるポリウレタン接着剤は、優れた光学的安定性及び耐薬品性を有し、プラスチック、接着剤、医薬品及び香料に幅広く使用される。ＩＰＤＩは、有望な高性能材料である。
【化２】
2020203873.tif 000003
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明において、イソホロンジイソシアネートは、ヒドロキシチロソール構造により修飾され、ヒドロキシチロソールイソホロンジイソシアネート誘導体が得られる。予備の抗酸化物質実験において、当該化合物が、抗酸化食品、医薬品、及び健康製品の分野において、優れた抗酸化活性及び高い医学的研究及び応用価値を有することが示されている。
【０００６】
（発明の概要）
１つの実施形態において、本発明は、食品、ヘルスケア製品、及び医薬品の分野においてフリーラジカル生成物を捕捉する抗酸化調製物として使用され得るヒドロキシチロソールイソホロンジイソシアネート誘導体を提供する。ヒドロキシチロソールイソホロンジイソシアネート誘導体は、以下の式（Ｉ）を有する。
【化３】
2020203873.tif 000004
【０００７】
他の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物を調製する方法を提供する。当該方法は、式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物を反応させて、式（Ｉ）の化合物を得ることを含む。
【化４】
2020203873.tif 000005
【０００８】
他の実施形態において、式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物との反応は、以下のステップを含む：式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物を反応器中に２．４：１〜２．６：１のモル比で入れるステップ；窒素雰囲気下で溶媒及び触媒を加え反応混合物を得るステップ；反応混合物を磁気撹拌下で５０〜７５℃で１〜４時間加熱するステップ；反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得るステップ；フラッシュクロマトグラフィーにより粗生成物を精製するステップ。
【０００９】
他の実施形態において、溶媒は、トルエン、酢酸エチル、又はアセトニトリルである。
【００１０】
他の実施形態において、有機溶媒は、トルエンである。
【００１１】
他の実施形態において、式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物とのモル比は、２．６：１である。
【００１２】
他の実施形態において、触媒は、トリエチルアミン又は４−ジメチルアミノピリジンである。
【００１３】
他の実施形態において、触媒は、トリエチルアミンである。
【００１４】
他の実施形態において、反応混合物は、７５℃で加熱される。
【００１５】
他の実施形態において、反応混合物は、４時間加熱される。
【００１６】
上述の一般的な説明及び以下に述べる詳細な説明は具体例であって、例示を目的としており、特許請求されている本発明の更なる説明の提供を意図するものであることが理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
添付図面は、本発明の更なる理解を提供するために含めたものであり、同図面は、本明細書に組み込まれ、本明細書の一部を構成して本発明の実施形態を図示し、発明の詳細な説明と合まって、本発明の原理を説明する役割を果す。
図面において：
【図１】図１は、異なる濃度での試料及び対照溶液の捕捉活性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
（図示された実施形態の詳細な説明）
【００１９】
本発明の実施形態を詳細に参照し、その実施例は添付図面で示される。以下の実施例は本発明を示すが、本発明は、以下の実施例に限定されない。
【００２０】
実施例１
【００２１】
ヒドロキシチロソールイソホロンジイソシアネート誘導体：３，４−ジヒドロキシフェネチル（（５−（（（３，４−ジヒドロキシフェネトキシ）−カルボニル）アミノ）−１，３，３−トリメチルシクロヘキシル）メチル）カルバメートの調製
【００２２】
８７．９ｍｇ(０．５７ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び３１μＬ（０．２２ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを１００ｍＬの三つ口フラスコ中で窒素雰囲気下にて５０ｍＬのトルエンに溶解した。５０ｍｇ(０．２２ｍｍｏｌ)のイソホロンジイソシアネートを反応液にゆっくり滴下した。イソホロンジイソシアネートを添加後、温度を７５℃に上げ、反応を４時間行った。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了までモニターし、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として酢酸エチル：石油エーテル＝３：１０でシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、７９．７ｍｇの表題化合物を得た（収率：６８．３２％）。
【００２３】
３，４−ジヒドロキシフェネチル（（５−（（（３，４−ジヒドロキシフェネトキシ）−カルボニル）アミノ）−１，３，３−トリメチルシクロヘキシル）メチル）カルバメート：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：８．４６（２Ｈ，ｂ），６．９０（２Ｈ，ｓ），６．８３〜６．７１（４Ｈ，ｍ），５．５７（４Ｈ，ｓ），４．６２（４Ｈ，ｔ），３．７５（Ｈ，ｍ），２．９９〜２．８１（６Ｈ，ｍ），１．８４〜１．６７（４Ｈ，ｍ），１．６３〜１．１２（５Ｈ，ｍ），１．０１（６Ｈ，ｓ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：１５９．３，１５７．２，１４８．６，１４６．２，１３０．５，１２５．８，１１７．４，１１６．９，６４．６，４９．６，４７．５，４３．８，３３．６，２８．１，２４．５，２０．１；（Ｍ＋Ｈ）＋に対するＭＳ（ＥＳＩ）：５３１．３。
【００２４】
実施例２
【００２５】
３，４−ジヒドロキシフェネチル（（５−（（（３，４−ジヒドロキシフェネトキシ）−カルボニル）アミノ）−１，３，３−トリメチルシクロヘキシル）メチル）カルバメートの調製
【００２６】
８７．９ｍｇ(０．５７ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び３１μＬ（０．２２ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを１００ｍＬの三つ口フラスコ中で窒素雰囲気下にて５０ｍＬの酢酸エチルに溶解した。５０ｍｇ(０．２２ｍｍｏｌ)のイソホロンジイソシアネートを反応液にゆっくり滴下した。イソホロンジイソシアネートを添加後、温度を５０℃に上げ、反応を２時間行った。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了までモニターし、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として酢酸エチル：石油エーテル＝３：１０でシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、５４．９ｍｇの表題化合物を得た（収率：４７．０２％）。
【００２７】
実施例３
【００２８】
３，４−ジヒドロキシフェネチル（（５−（（（３，４−ジヒドロキシフェネトキシ）−カルボニル）アミノ）−１，３，３−トリメチルシクロヘキシル）メチル）カルバメートの調製
【００２９】
８１．７ｍｇ(０．５３ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び３１μＬ（０．２２ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを１００ｍＬの三つ口フラスコ中で窒素雰囲気下にて５０ｍＬのアセトニトリルに溶解した。５０ｍｇ(０．２２ｍｍｏｌ)のイソホロンジイソシアネートを反応液にゆっくり滴下した。イソホロンジイソシアネートを添加後、温度を６０℃に上げ、反応を４時間行った。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了までモニターし、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として酢酸エチル：石油エーテル＝３：１０でシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、６２．８ｍｇの表題化合物を得た（収率：５３．７８％）。
【００３０】
実施例４
【００３１】
３，４−ジヒドロキシフェネチル（（５−（（（３，４−ジヒドロキシフェネトキシ）−カルボニル）アミノ）−１，３，３−トリメチルシクロヘキシル）メチル）カルバメートの調製
【００３２】
８７．９ｍｇ(０．５７ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び２．５ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）を１００ｍＬの三つ口フラスコ中で窒素雰囲気下にて５０ｍＬのトルエンに溶解した。５０ｍｇ(０．２２ｍｍｏｌ)のイソホロンジイソシアネートを反応液にゆっくり滴下した。イソホロンジイソシアネートを添加後、温度を６０℃に上げ、反応を１時間行った。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了までモニターし、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として酢酸エチル：石油エーテル＝３：１０でシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、３０．０ｍｇの表題化合物を得た（収率：２５．６９％）。
【００３３】
実施例５
【００３４】
３，４−ジヒドロキシフェネチル（（５−（（（３，４−ジヒドロキシフェネトキシ）−カルボニル）アミノ）−１，３，３−トリメチルシクロヘキシル）メチル）カルバメートの調製
【００３５】
８７．９ｍｇ(０．５７ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び２．５ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰを１００ｍＬの三つ口フラスコ中で窒素雰囲気下にて５０ｍＬの酢酸エチルに溶解した。５０ｍｇ(０．２２ｍｍｏｌ)のイソホロンジイソシアネートを反応液にゆっくり滴下した。イソホロンジイソシアネートを添加後、温度を７５℃に上げ、反応を２時間行った。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了までモニターし、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として酢酸エチル：石油エーテル＝３：１０でシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、６５．５ｍｇの表題化合物を得た（収率：５６．１５％）。
【００３６】
実施例６
【００３７】
３，４−ジヒドロキシフェネチル（（５−（（（３，４−ジヒドロキシフェネトキシ）−カルボニル）アミノ）−１，３，３−トリメチルシクロヘキシル）メチル）カルバメートの調製
【００３８】
８７．９ｍｇ(０．５７ｍｍｏｌ)のヒドロキシチロソール及び３１μＬ（０．２２ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを１００ｍＬの三つ口フラスコ中で窒素雰囲気下にて５０ｍＬのトルエンに溶解した。５０ｍｇ(０．２２ｍｍｏｌ)のイソホロンジイソシアネートを反応液にゆっくり滴下した。イソホロンジイソシアネートを添加後、温度を５０℃に上げ、反応を１時間行った。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了までモニターし、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。溶離液として酢酸エチル：石油エーテル＝３：１０でシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて粗生成物を精製し、溶離液を減圧下で濃縮し乾燥して、３９．５ｍｇの表題化合物を得た（収率：３３．８４％）。
【００３９】
実施例７
【００４０】
ＤＰＰＨラジカル捕捉活性検査により測定されたヒドロキシチロソールイソホロンジイソシアネート誘導体の抗酸化活性
【００４１】
２，２−ジフェニル−１−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）は、安定した有機ラジカルから成る有機化合物である。ＤＰＰＨ分子において、ベンゼン環の複数の電子吸引性−ＮＯ２及び大きいπ結合の存在により、窒素フリーラジカルは安定する。そのメタノール溶液は紫色であり、５１７ｎｍの最大吸収ピークを有する。抗酸化物質を添加後、ＤＰＰＨは、自由電子と対になる電子を捕捉し、紫色は色あせ、黄色の物質となる。５１７ｎｍの吸収波長は消え、色あせの程度は、量的にＤＰＰＨが捕捉する電子数に関連する。この原理に基づき、分光光度計を用いてＤＰＰＨラジカル及び試料溶液の吸光度の変化を検出し、試料が水素原子を提供する及びフリーラジカルを捕捉する能力を測定できる。
【００４２】
ＤＰＰＨ溶液の調製：２，２−ジフェニル−１−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）の正確な量の測定し、トルエン中に溶解し０．２ｍｍｏｌ／ＬのＤＰＰＨ溶液を調製し、０℃で暗所にて保存する。
【００４３】
試験溶液の調製：Ｖｃ（ビタミンＣ、陽性対照），ヒドロキシチロソールイソホロンジイソシアネート誘導体（試料）及びヒドロキシチロソール（対照）。試料溶液をトルエンで勾配希釈に付し、２組の対照を一定量のトルエンで試験管中にて別々に溶解し、試料として同じ濃度勾配を調製した。対照溶液の対応する２群を得た（勾配の設定は表１に示す）。
【表１】
2020203873.tif 000006
【００４４】
具体的なステップ：
【００４５】
試料液体吸収測定：２ｍＬの試料液を採取し（表１：Ｖｃ、Ｂ）、濃度が２＊１０−４ｍｏｌ／ＬのＤＰＰＨ溶液を２ｍＬ加え、混合し、暗所室温で３０分間反応させ、トルエンでゼロまで調整し、５１７ｎｍで測定する。２ｍＬの試料液と混合した２ｍＬのトルエンの吸光度Ａｊと２ｍｌのトルエンと混合した２ｍＬのＤＰＰＨ溶液の吸光度Ａｏと同時に吸光度Ａｉを測定した（実験結果を表２に示す）。
【表２】
2020203873.tif 000007
クリアランスの計算: クリアランス率（％）＝［１−（Ａｉ−Ａｊ）/Ａｏ］＊１００％
【表３】
2020203873.tif 000008
【００４６】
実験結果を図１及び表１〜３に示す。ヒドロキシチロソールイソホロンジイソシアネート誘導体（Ａ）の抗酸化活性は、濃度に依存する関連性を示した。濃度が上昇するにつれ、化合物ＡがＤＰＰＨラジカルを捕捉する能力が高まる。濃度領域において、ＤＰＰＨフリーラジカル捕捉率は、９０．６２％まで達することができ、その抗酸化活性は、陽性の抗酸化活性を有する陽性対照群（３４．５６ｍｇ／ｍＬ）の抗酸化活性と基本的に同じである。ヒドロキシチロソール（Ｂ）を単独で加えた対照群と比較して、同じ濃度のヒドロキシチロソールイソホロンジイソシアネート誘導体（Ａ）は、ＤＰＰＨラジカル捕捉においてほとんど勝っている。高濃度では、ヒドロキシチロソールイソホロンジイソシアネート誘導体（Ａ）の抗酸化活性は、ヒドロキシチロソール（Ｂ）を加えた等量濃度の対照群よりもはるかに高いものだった。
【図１】
2020203873.tif 000012
【外国語明細書】
2020203873000001.pdf
2020203873000002.pdf
2020203873000003.pdf
2020203873000004.pdf