(57)【要約】【課題】極性反転通電方法によって生体内のIV型コラーゲンα１鎖の発現を有意に上昇させるイオン化成分を含有する、化粧料を提供することを目的とする。【解決手段】基剤と、プラスにイオン化されたプラスイオン化成分及びマイナスにイオン化されたマイナスイオン成分を含むイオン化成分と、を含有し、プラス極性の群発パルス信号とマイナス極性の群発パルス信号とが交互に供給される導入電極を介して生体に導入される化粧料において、前記イオン化成分は、ヒドロキシプロリンと、アセチルヒドロキシプロリンと、アラニルグルタミンと、を含有し、化粧料全量を１００質量％としたとき、ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンが合計３．０質量％以下含有されていることを特徴とする。【選択図】図２
2020045333.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
基剤と、プラスにイオン化されたプラスイオン化成分及びマイナスにイオン化されたマイナスイオン成分を含むイオン化成分と、を含有し、プラス極性の群発パルス信号とマイナス極性の群発パルス信号とが交互に供給される導入電極を介して生体に導入される化粧料において、
前記イオン化成分は、ヒドロキシプロリンと、アセチルヒドロキシプロリンと、アラニルグルタミンと、を含有し、
化粧料全量を１００質量％としたとき、ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンが合計３．０質量％以下含有されていることを特徴とする化粧料。
【請求項２】
化粧料のｐＨは、５．０以上８．０以下であることを特徴とする請求項１に記載の化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化粧料に関し、特に、美容を目的として皮膚に電気刺激を付与する際に用いられる化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚のしわやたるみを改善するために、化粧料に含まれる有効成分を皮膚から生体内に導入する方法として、一対の電極を生体に接触させて各電極へ通電を行いながら、イオン化された化粧料（イオン化化粧料）の有効成分（イオン化成分）を生体に導入する方法（イオン導入法）が用いられている。
【０００３】
具体的には、例えば一方の電極を、イオン化成分を導入させたい生体の所定部位（例えば、顔）に接触させる導入電極として使用し、他方の電極を、生体の上記所定部位以外の部位に接触させる対極電極として使用し、上記所定部位にイオン化化粧料を塗布した導入電極を接触させ、対極電極を他の部位に接触させた状態で両電極への通電を行うことによって、導入電極から生体内へイオン化成分を導入する方法が知られている。
【０００４】
使用するイオン化化粧料のｐＨが５．０未満である場合（酸性領域）、又は８．０より高い場合（アルカリ性領域）には、導入電極に単極性のパルス電圧を印加して、イオン化成分を生体内に導入させることがある。具体的には、使用するイオン化化粧料が酸性領域又はアルカリ性領域であって、プラスにイオン化される有効成分（以下、プラスイオン化成分という。）を含む場合には、導入電極にプラス極性のパルス電圧を印加する。また、使用するイオン化化粧料が酸性領域又はアルカリ性領域であって、マイナスにイオン化される有効成分（以下、マイナスイオン化成分という。）を含む場合には、導入電極にマイナス極性のパルス電圧を印加する。これにより、イオン化成分とパルス電圧との極性を同一として反発効果を生じさせ、各イオン化成分を生体内に移動、導入させる。
【０００５】
一方、使用されるイオン化化粧料にプラスイオン化成分とマイナスイオン化成分との双方を含むものがあることや、１回の生体治療にプラスイオン化成分の薬物とマイナスイオン化成分の薬物とを併用投与する場合がある。例えば、イオン化化粧料のｐＨが５．０以上８．０以下（中性領域）である場合、イオン化化粧料には、プラスイオン化成分及びマイナスイオン化成分の双方が含まれる。
したがって、プラスイオン化成分及びマイナスイオン化成分の双方を含むイオン化化粧料（例えば、中性領域のイオン化化粧料）を使用する場合には、プラスイオン化成分及びマイナスイオン化成分の双方を導入する方法が用いられる。
【０００６】
このようなイオン導入法として、特許文献１には、生体に接触させるための一対の電極に対して、プラス極性の群発パルス信号とマイナス極性の群発パルス信号とを１００Ｈｚ以上の周波数にて交互に供給するイオン導入通電方法（以下、極性反転通電方法という）が開示されている。このイオン導入通電方法によれば、パルス信号の極性を反転させることで、中性領域のイオン化化粧料に含まれるイオン化成分（プラスイオン化成分及びマイナスイオン化成分の双方）を一度に生体内に浸透させることができる。すなわち、中性領域のイオン化化粧料に含まれる各イオン化成分を、効率的に生体内に導入することができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００３−１０２８５１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ここで、近年、人々の美容意識が高まる中で、皮膚のしわやたるみを改善するニーズが大きくなっている。皮膚のしわやたるみを改善するためには、IV型コラーゲンα１鎖を有意に発現させ、肌のコラーゲン及びエラスチンの産生を促進させることが有効である。しかしながら、IV型コラーゲンα１鎖に着目した化粧料は、特許文献１には開示されていない。
【０００９】
そこで、本発明は、極性反転通電方法によって生体内のIV型コラーゲンα１鎖の発現を有意に上昇させるイオン化成分を含有する、化粧料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記課題を解決するために、本発明に係る化粧料は、（１）基剤と、プラスにイオン化されたプラスイオン化成分及びマイナスにイオン化されたマイナスイオン成分を含むイオン化成分と、を含有し、プラス極性の群発パルス信号とマイナス極性の群発パルス信号とが交互に供給される導入電極を介して生体に導入される化粧料において、前記イオン化成分は、ヒドロキシプロリンと、アセチルヒドロキシプロリンと、アラニルグルタミンと、を含有し、化粧料全量を１００質量％としたとき、ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンが合計３．０質量％以下含有されていることを特徴とする。
【００１１】
（２）化粧料のｐＨは、５．０以上８．０以下であることを特徴とする（１）に記載の化粧料。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、イオン化化粧料に含まれるヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン、アラニルグルタミンを効率的に生体内に浸透させることができる。これにより、皮膚線維芽細胞内のIV型コラーゲンα１鎖の発現が有意に上昇する。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１ａ】電気刺激装置が備えるパルス生成回路の一例を示す、ブロック回路図である。
【図１ｂ】パルス生成回路における出力のタイミングチャートである。
【図２】本実施形態において、極性反転通電方法を用いる際に使用される電気刺激装置の一例を説明する図である。
【図３】図２に示す電気刺激装置の使用状態を示す図である。
【図４】使用試験の前後における、被験者１の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図５】使用試験の前後における、被験者２の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図６】使用試験の前後における、被験者３の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図７】使用試験の前後における、被験者４の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図８ａ】使用試験の前後における、被験者５の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図８ｂ】使用試験の前後における、被験者５の別の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図９ａ】使用試験の前後における、被験者６の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図９ｂ】使用試験の前後における、被験者６の別の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１０ａ】使用試験の前後における、被験者７の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１０ｂ】使用試験の前後における、被験者７の別の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１１ａ】使用試験の前後における、被験者８の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１１ｂ】使用試験の前後における、被験者８の別の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１２ａ】使用試験の前後における、被験者９の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１２ｂ】使用試験の前後における、被験者９の別の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１３ａ】使用試験の前後における、被験者１０の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１３ｂ】使用試験の前後における、被験者１０の別の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１４ａ】使用試験の前後における、被験者１１の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１４ｂ】使用試験の前後における、被験者１１の別の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１５ａ】使用試験の前後における、被験者１２の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【図１５ｂ】使用試験の前後における、被験者１２の別の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
（電気刺激装置について）
本実施形態の化粧料を生体に効果的に浸透させる電気刺激装置について、詳細に説明する。図１ａは電気刺激装置が備えるパルス生成回路の一例を示すブロック回路図であり、図１ｂはパルス生成回路における出力のタイミングチャートである。
【００１５】
図１ａに示すように、本実施形態におけるパルス生成回路は、パルス信号を出力するパルス出力回路２と、パルス出力回路２より出力されたパルス信号の極性を切り替えるための極性切替回路３と、パルス出力回路２及び極性切替回路３を制御するＣＰＵ１と、ＣＰＵ１にクロック信号を供給するクロック発振器４と、これら各回路に電源を供給する電源回路５とを有している。
【００１６】
このパルス生成回路では、クロック発振器４で励起されるクロック信号に基づいてＣＰＵ１が駆動され、クロック信号に基づく所定周波数のパルスがＣＰＵ１からパルス出力回路２に出力される。
【００１７】
パルス出力回路２は、ＣＰＵ１からのパルスを所定の出力レベル（出力電圧値）に調整して極性切替回路３に出力する。パルス出力回路２から出力されるパルス信号は、図１ｂの〔Ａ〕に示すように、単極性（この実施の形態ではプラス）の矩形パルス波となっている。
【００１８】
極性切替回路３は、不図示のブリッジ回路を含む。このブリッジ回路は、ＣＰＵ１から出力された制御信号に基づいて、パルス出力回路２から出力された単極性のパルス信号を、プラス極性の複数のパルス信号（以下、群発パルス信号と言う。）とマイナス極性の群発パルス信号とに切り替えて交互に出力する。極性切替回路３から出力される各群発パルス信号は、生体に接触する一対の電極に出力される。
【００１９】
ここで、各電極の使用態様としては、一方の電極を、イオン化化粧料が含浸可能でかつ生体の被導入部に接触するための導入電極として使用し、他方の電極を生体の被導入部以外の部位に接触する対極電極として使用する。
【００２０】
また、各電極の他の使用態様としては、双方の電極を、イオン化化粧料が含浸可能でかつ生体の被導入部に接触するための導入電極として使用することも可能である。
【００２１】
極性切替回路３に供給される制御信号としては、プラス極性のパルス信号を出力するタイミングを指示するＢ信号（図１ｂの〔Ｂ〕）と、マイナス極性のパルス信号を出力するタイミングを指示するＣ信号（図１ｂの〔Ｃ〕）が、それぞれＣＰＵ１から出力される。
【００２２】
そして、極性切替回路３は、図１ｂの〔Ｂ〕及び〔Ｄ〕に示すように、ＣＰＵ１から供給されるＢ信号がオンの間は、パルス出力回路２の出力したパルス信号の極性を維持して出力し続けることにより、プラス極性の群発パルス信号を出力する。また、極性切替回路３は、図１ｂの〔Ｃ〕及び〔Ｄ〕に示すように、ＣＰＵ１から供給されるＣ信号がオンの間は、パルス出力回路２の出力したパルス信号の極性を反転して出力し続けることにより、マイナス極性の群発パルス信号を出力する。
【００２３】
詳細には、ＣＰＵ１は、Ｂ信号及びＣ信号として、図１ｂの〔Ｂ〕及び〔Ｃ〕に示すように、矩形波によるオンオフ信号を出力しており、いずれかの信号がオン（立ち上がり状態）のときには他方の信号がオフ（立ち下がり状態）になるように出力する。
【００２４】
また、図１ｂの〔Ａ〕と比較して分かるように、ＣＰＵ１は、Ｂ信号及びＣ信号のオンの期間（矩形波の立ち上がり時から立ち下がり時までの期間）が、パルス出力回路２から出力されるパルス信号の周期よりも長くなるように、Ｂ信号及びＣ信号を出力するようになっており、これにより極性切替回路３からはプラス及びマイナス極性のパルス信号がそれぞれ群発パルス信号として生成される。
【００２５】
次に、群発パルス信号による上述の極性反転通電を行うイオン導入用の電気刺激装置の一例について、図２及び図３を参照して説明する。図２に示す電気刺激装置１０では、図１で上述したパルス生成回路が合成樹脂等の絶縁部材からなる筐体部１１の内部に格納され、パルス生成回路における極性切替回路３からの出力信号が、筐体部１１の一方の主面に設けられた導入電極１２と、筐体部１１の他方の主面に設けられた対極電極１３とに供給されるようになっている。また、筐体部１１における対極電極１３の近傍には、図１ａの電源回路５の一部を構成し主電源のオンオフを切り替えるための電源オンスイッチ５ａと電源オフスイッチ５ｂとが設けられる。
【００２６】
なお、電気刺激装置１０では、電源として、ボタン型電池（この実施の形態では２個のＣＲ２０３２による直流６ボルト電源）が使用され、筐体部１１の下端側に開閉可能に設けられた電池収納部１１ａを開けることで、電池交換ができるようになっている。
【００２７】
導入電極１２は、例えばシリコンゴム及びカーボン等からなる不図示の導電性部材に対して、イオン化化粧料を含浸させるためのコットン等の吸湿性部材１２ａが対向配置されている。
【００２８】
この電気刺激装置１０の使用に際しては、導入電極１２の吸湿性部材１２ａに、使用するイオン化化粧料を含浸させた後に、図３に示すように、イオン化化粧料を浸透（導入）させたい顔の頬等の所定部位に吸湿性部材１２ａを接触させ、かつ、筐体部１１を手で持って対極電極１３が指等に接触した状態において電源オンスイッチ５ａを押圧することにより動作が開始する。動作開始後は、パルス生成回路から導入電極１２及び対極電極１３に対して、プラス極性の群発パルス信号とマイナス極性の群発パルス信号が例えば１．５ｓｅｃ毎に交互に供給されることによって、導入電極１２の吸湿性部材１２ａ中のイオン化化粧料のプラスイオン化成分とマイナスイオン化成分とが交互に効率良く生体内に導入される。
【００２９】
このように、本実施形態における電気刺激装置１０では、生体に接触する導入電極１２及び対極電極１３に対して、プラス極性の群発パルス信号とマイナス極性の群発パルス信号とを交互に供給する構成となっているので、プラスイオン化成分とマイナスイオン化成分が混在したイオン化化粧料中の各イオン化成分を、効率良く生体内に導入することが可能となり、さらには、使用するイオン化化粧料のイオン極性に関わりなく、各イオン化成分を生体へ導入することが可能となる。
【００３０】
また、電気刺激装置１０では、各電極１２，１３に印加される電圧が±数ボルト程度の比較的低い場合であっても、各イオン化成分を効率良く生体内に導入することが可能であるため、通電中の生体への刺激が少なくなり、顔等の敏感な箇所にも安心して使用でき、さらには消費電力が抑えられることから、電源電池の長寿命化、小型化、ひいては筐体部１１の小型化や装置全体の軽量化等を図ることができる。
【００３１】
なお、各電極に供給される群発パルス信号の周波数については、１００Ｈｚより低い周波数とすると通電時における生体への刺激が強くなり、顔等の敏感な箇所に対して安心して使用できなくなる可能性があるため、１００Ｈｚ以上の周波数とするのが好ましい。
【００３２】
（化粧料について）
続いて、本発明に係る化粧料について説明する。本発明に係る化粧料は、基剤及びイオン化成分を含有する。
（基剤について）
基剤は、化粧料の土台となる要素であり、美容液、乳液、クリームなどの用途に応じて作られる骨組の部分である。また、求められる使用感（サッパリ感、シットリ感）に応じて成分を変更することができる。本実施形態の基剤は、電気刺激によって生体に導入される美容液であり、水と、グリセリンと、１，２−ペンタンジオールと、１，３−ブチレングリコールとを含んでいる。ただし、これらに限られない。グリセリン、１，２−ペンタンジオール及び１，３−ブチレングリコールの少なくとも１つの成分に代えて、ジプロピレングリコール、イソペンチルジオール、１，２−ヘキサンジオール、ポリエチレングリコール、グリセリン、ジグリセリン、ソルビトール、マルチトール、ラフィノース等の多価アルコールを用いることができる。
【００３３】
本願発明の目的は、皮膚線維芽細胞内のIV型コラーゲンα１鎖を優位に発現させることにあり、基剤の成分が当該効果に与える影響は殆どないため、基剤の成分は特に限定しない。
【００３４】
（イオン化成分について）
本発明において用いられるイオン化成分は、ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンを含む。上述の極性反転通電方法によって、これら３成分が生体内に含浸されることにより、皮膚線維芽細胞内のIV型コラーゲンα１鎖の発現が有意に上昇する。なお、後述の実施例において示すように、本発明に係る化粧料に含まれるヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンは、化粧料全体を１００質量％として、合計３．０質量％以下であることが好ましい。また、本発明に係る化粧料に含まれるヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンの含有率の下限値は、特に限定しないが、例えば、それぞれ０．０１質量％としてもよい。ここで、化粧料が中性領域の場合（ｐＨ５．０以上８．０以下）、アセチルヒドロキシプロリンはマイナスイオン化成分となり、ヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンはプラスイオン化成分とマイナスイオン化成分とになり、これらが混在した状態となって、化粧料内に存在している。
【００３５】
なお、上記３成分（ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミン）以外のイオン化成分として、カルボキシメチルフェニルアミノカルボキシプロピルホスホン酸メチル、ジパルミトイルヒドロキシプロリン、リン酸アスコルビルマグネシウム、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸カリウム、トコフェリルリン酸ナトリウム、ベタイン、アルギニン、セリン、ＰＣＡ−Ｎａ、グリチルリチン酸２Ｋ、ヒアルロン酸ナトリウム、パーム脂肪酸グルタミン酸ナトリウム、クエン酸及びクエン酸ナトリウムが含まれ得るが、これらの成分がIV型コラーゲンα１鎖の発現に与える影響はほとんどないため、上記３成分（ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミン）以外のイオン化成分は特に限定しない。
【００３６】
（その他の成分について）
化粧料は、基剤及びイオン化成分（ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン、アラニルグルタミン）以外の他の成分を含んでよい。他の成分は、IV型コラーゲンα１鎖の発現とは無関係の成分であり、例えば、アスタキサンチン、アロエベラ葉エキス、クズ根エキス、クロレラエキス、キハダ樹脂エキス、アラントイン、グルコース、グルコシルルチン、キサンタンガム、ＰＥＧ−２０フィトステロール、コレステロール、オリーブ果実油、カニナバラ果実油、ホホバ種子油、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル、海塩、ＤＰＧ、ジグリセリン、ポリクオタニウム−５１、フェノキシエタノール等が含まれ得る。
【００３７】
（実施例１）
本発明について、実施例を示してさらに詳細に説明する。ヒト皮膚線維芽細胞を、１０質量％のＦＢＳを含有するＤＭＥＭ培地（１０％ＦＢＳ−ＤＭＥＭ）において５日間培養した。培養されたヒト皮膚線維芽細胞を回収し、２４ｗｅｌｌｐｌａｔｅに３００００〜７００００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの割合で播種し、１０％ＦＢＳ−ＤＭＥＭにおいて１日培養した。次いで、培地を、０．２質量％のＦＢＳを含有するＤＭＥＭ培地（０．２％ＦＢＳ−ＤＭＥＭ）に交換し、１日培養した。さらに、培地を、表１に示す成分組成の、イオン化成分を含有する０．２％ＦＢＳ−ＤＭＥＭに交換して、各ｐｌａｔｅに対し１５分間通電した。通電は、群発パルス信号による上述の極性反転通電を採用し、各ｐｌａｔｅにつき、０Ｖのパターン（無通電）と、±５Ｖを印加するパターンと、の２パターンの通電をそれぞれ行った。±５Ｖ印加パターンにおける出力パラメータとしては、群発パルス信号の出力周波数を４８００Ｈｚとし、かつ、１．５ｓｅｃごとに群発パルス信号の極性が反転するように設定した。通電後に２日間培養し、ヒト皮膚線維芽細胞を回収した。回収したヒト皮膚線維芽細胞から、トータルＲＮＡを抽出及び精製し、逆転写反応によりｃＤＮＡを得た。得られたｃＤＮＡに基づき、ＲＴ−ＰＣＲ法によってIV型コラーゲンα１鎖のｍＲＮＡ発現量の測定を行った。ＲＴ−ＰＣＲ法には、TaqMan Assays(Applied Biosystems社製)を用いた。ＰＣＲ反応は、９５℃で２０秒間初期変性を行った後に、９５℃１秒、６０℃２０秒を１サイクルとして、合計４０サイクル行った。なお、内部標準はＭＲＰＬ１９を使用した。ＭＲＰＬ１９のｍＲＮＡ発現量に対するIV型コラーゲンα１鎖のｍＲＮＡ発現量の割合を算出し、算出結果を用いて評価した。
【００３８】
評価方法は、以下の通りである。すなわち、まず、イオン化成分（ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン、アラニルグルタミン）を含まない培地における、０Ｖ通電時のIV型コラーゲンα１鎖の発現量を１とし（表１の比較例２９参照）、これに基づいて、表１に示す各実施例及び各比較例（比較例２９を除く）におけるIV型コラーゲンα１鎖の発現量を、相対値Ｘとして求める。そして、表１に示す各実施例及び各比較例における、同一の成分組成を有する培地について、０Ｖ通電時の相対値に対する±５Ｖ通電時の相対値（評価レベルＡ）を求める。その結果、Ｘの値が１．５以上であり、かつＡの値が１．１５以上である場合には、評価を「○」とし、Ｘの値が１．５未満またはＡの値が１．１５未満である場合には、評価を「×」とした。ここで、比較例１〜２９は、各組成において０Ｖ通電を行ったパターンを示しており、評価レベルＡを算出するうえでの基準としての位置づけであるため、評価を「なし」とした。
【００３９】
表１に、各実施例及び各比較例の成分組成と、各培地に対する通電の有無（５Ｖまたは０Ｖ）と、それぞれの相対値Ｘ、評価レベルＡ及び評価結果と、を示す。なお、表１中の「ＨＹＰ」はヒドロキシプロリン、「ＡＨＹＰ」はアセチルヒドロキシプロリン、「ＡＬＧＬ」はアラニルグルタミンを、それぞれ示す。また、表中の「％」は、質量％を意味するものとする。比較例２１〜２４、２１´〜２４´においては、比較例１３〜１６、１３´〜１６´のアラニルグルタミンに代えて、ジペプチドとしてバリルトリプトファン（sederma社製）を用いた。また、比較例２５〜２８、２５´〜２８´においては、比較例１３〜１６、１３´〜１６´のアラニルグルタミンに代えて、ジペプチドとしてＮ−グリシルシステイン（ISP社製）を用いた。
【００４０】
【表１】
2020045333.tif 000003
【００４１】
ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンのうちいずれか１つを含有させた場合（比較例５〜１６、５´〜１６´）、Ａの値が１．１５未満となり、評価が「×」となった。
ヒドロキシプロリン及びアセチルヒドロキシプロリンを含有させ、アラニルグルタミンを含有させなかった場合（比較例１７、１７´）、Ｘの値が１．５未満となったため、評価が「×」となった。
ヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンを含有させ、アセチルヒドロキシプロリンを含有させなかった場合（比較例１８、１８´）と、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンを含有させ、ヒドロキシプロリンを含有させなかった場合（比較例１９、１９´）と、では、Ａの値が１．１５未満となり、評価が「×」となった。
アラニルグルタミンに代えてバリルトリプトファンを含有させた場合（比較例２１〜２４、２１´〜２４´）、Ａの値が１．１５未満となり、評価が「×」となった。同様に、アラニルグルタミンに代えてＮ−グリシルシステインを含有させた場合（比較例２５〜２８、２５´〜２８´）、Ａの値が１．１５未満となり、評価が「×」となった。
ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンのいずれも含有させなかった場合（比較例２９、２９´）、Ａの値が１．１５未満となり、評価が「×」となった。
【００４２】
一方、実施例１〜４より、ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンを全て含有させ、かつこれら３種のイオン化成分の合計が３．０質量％以下であれば、Ｘの値が１．５以上であり、かつＡの値が１．１５以上となり、評価が「○」となった。
【００４３】
なお、比較例２０及び比較例２０´においては、ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンを全て含有させたが、これら３種のイオン化成分の合計が３．０質量％を超えたため、Ａの値が１．１５未満となり、評価が「×」となった。
【００４４】
本発明に係る化粧料のうち、イオン化成分（ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン、アラニルグルタミン）を除く成分を、上述の実施例では、表１に記載の培地の各成分組成のうちヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンを除いた成分（０．２％ＦＢＳ−ＤＭＥＭ）によって模擬している。ここで、本実施例においては、ＤＭＥＭとして、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ製のDulbecco’s Modified Eagle’s Medium -low glucose With 1000 mg/L glucose, L-glutamine, and sodium bicarbonate, liquid, sterile-filtered, suitable for cell cultureを用いた。ただし、これに限られず、ＤＭＥＭとして、Gibco社製のDMEM, low glucose, pyruvate、GE Healthcare社製のHyClone Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) with low glucose:Liquid、GeneDireX社製のDMEM, Low Glucose及び富士フイルム和光純薬株式会社製のD-MEM (Low Glucose) with L-Glutamine and Phenol Red等を用いることもできる。
【００４５】
（実施例２）
ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンを全て含有させ、かつこれら３種のイオン化成分の合計が３．０質量％以下となる化粧料を、電気刺激を付与しながら人体に含侵させた場合に、培地試験に対応した効果が得られることは言うまでもない。この点は技術常識であるが、一実施例を示すと、以下のとおりである。
【００４６】
２種類の異なる化粧料を用いて、４０代〜５０代の女性１２人を被験者として、４週間の使用試験を実施し、肌のたるみ及びしわの改善レベルを評価した。被験者１〜６には、化粧料全量を１００質量％として、ヒドロキシプロリン０．３質量％、アセチルヒドロキシプロリン０．１質量％及びアラニルグルタミン０．３質量％を含有する化粧料（以下、化粧料１と称す）を使用した。被験者７〜１２には、化粧料全量を１００質量％として、ヒドロキシプロリン０．３質量％及びアラニルグルタミン０．３質量％を含有する化粧料（以下、化粧料２と称す）を使用した。また、被験者１〜３及び被験者７〜９には、化粧料塗布後、塗布部に対して電気刺激装置による電気刺激を付与するよう指示した。この電気刺激については、上述の培地試験と同様、群発パルス信号による極性反転通電を採用した。すなわち、群発パルス信号の出力周波数を４８００Ｈｚとし、かつ、１．５ｓｅｃごとに群発パルス信号の極性が反転するように設定し、±５Ｖを印加する通電を行った。各被験者における、使用する化粧料及び電気刺激装置の使用の有無を、表２に示す。なお、化粧料２は、化粧料１の組成におけるアセチルヒドロキシプロリンを水と置換して調製した。したがって、化粧料１におけるヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン、アラニルグルタミン及び水を除いた成分及びその含有量は、化粧料２におけるヒドロキシプロリン、アラニルグルタミン及び水を除いた成分及びその含有量と同一である。ここで、「同一」とは、完全一致のみならず、化粧料の調製等の際に生じる微小な誤差も含む。化粧料１におけるヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン、アラニルグルタミン及び水を除いた成分（すなわち、化粧料２におけるヒドロキシプロリン、アラニルグルタミン及び水を除いた成分）は、IV型コラーゲンα１鎖の発現にほとんど影響を与えない成分（例えば、グリセリンなど）から適宜選択した。
【００４７】
被験者１〜３の試験条件（化粧料１及び電気刺激装置を使用する条件）は、上記培地試験における実施例３の実験条件に相当する。被験者４〜６の試験条件（化粧料１を使用し、電気刺激装置を使用しない条件）は、上記培地試験における比較例３の実験条件に相当する。被験者７〜９の試験条件（化粧料２及び電気刺激装置を使用する条件）は、上記培地試験における比較例１８´の実験条件に相当する。被験者１０〜１２の試験条件（化粧料２を使用し、電気刺激装置を使用しない条件）は、上記培地試験における比較例１８の実験条件に相当する。
【００４８】
【表２】
2020045333.tif 000004
【００４９】
たるみについては、Cutometer Dual MPA 580（インテグラル社製）を使用し、０週間（試験前）と、使用試験開始から４週間後（試験後）と、において、Ｒ２及びＲ７をそれぞれ算出して比較した。ここで、Ｒ２は、皮膚表面を引っ張って解放したときの「皮膚長の回復率」を意味し、Ｒ７は、皮膚引っ張り時の瞬時の戻り量である「皮膚の弾性率」を意味する。Ｒ２は（Ｕａａ１／Ｕｆ１）値、Ｒ７は（Ｕｒ１／Ｕｆ１）値で、それぞれ表した。
しわについては、皮膚画像解析装置として、Canfield Scientific社製のVISIA（登録商標）を使用して、評価を行った。具体的には、VISIAによって顔写真を撮影し、モニター開始時と終了時の写真を目視にて比較して確認した。目視での確認に加えて、VISIA には搭載された、画像の３Ｄ化機能を用いて、しわ部の３Ｄ画像の形状及び色味から定性評価を実施した。なお、VISIA にはポジショニング機能がついているため、各撮影時に撮影箇所の相違がほとんどなく、しわ部をより正確に前後比較することができた。上述と同様の評価方法（顔写真の目視での確認及び３Ｄ画像の定性評価）により、たるみについても評価を行うことができる。
【００５０】
表３に、各被験者におけるＲ２の変化率及びＲ７の変化率を示す。表３におけるＲ２の変化率は、各被験者において、試験前のＲ２の値を１００％として試験後のＲ２の値（％）を求め、試験後のＲ２の値から試験前のＲ２の値を引いた差分を示している。表３におけるＲ７の変化率は、各被験者において、試験前のＲ７の値を１００％として試験後のＲ７の値（％）を求め、試験後のＲ７の値から試験前のＲ７の値を引いた差分を示している。
【００５１】
【表３】
2020045333.tif 000005
【００５２】
表３を参照して、被験者１〜３における試験後のＲ２及びＲ７は、試験前のＲ２及びＲ７と比較して大幅に増加した。すなわち、化粧料１の使用後に電気刺激装置を用いて電気刺激を行うことにより（実施例３に相当）、皮膚長の回復率及び皮膚の弾性率が大幅に改善した。一方、被験者７〜９における試験後のＲ２及びＲ７は、試験前のＲ２及びＲ７と比較してほとんど変化しなかった。すなわち、化粧料２の使用後に電気刺激装置を用いて電気刺激を行っても（比較例１８´に相当）、皮膚長の回復率及び皮膚の弾性率の改善がほとんど見られなかった。
【００５３】
また、同じく表３を参照して、被験者１〜３におけるＲ２及びＲ７の増加率は、被験者４〜６におけるＲ２及びＲ７の増加率と比べ、非常に大きくなった。すなわち、化粧料１を用いた場合において、電気刺激装置を用いて電気刺激を行ったとき（実施例３に相当）は、電気刺激装置を用いないとき（比較例３に相当）と比べ、皮膚長の回復率及び皮膚の弾性率が大幅に改善した。一方、被験者７〜９におけるＲ２及びＲ７の増加率と、被験者１０〜１２におけるＲ２及びＲ７の増加率と、でほとんど差が見られなかった。すなわち、化粧料２を用いた場合においては、電気刺激装置を用いて電気刺激を行ったとき（比較例１８´に相当）と、電気刺激装置を用いないとき（比較例１８に相当）とで、皮膚長の回復率及び皮膚の弾性率の改善がほとんど見られなかった。
これらの結果は、上述の培地試験における実施例３、比較例３、１８及び１８´の評価と符合する。
【００５４】
図４ないし図１５ｂに、使用試験の前後における各被験者１〜１２の肌表面画像及びVISIAによって３Ｄ化された３Ｄ画像を示す。これらの図において、左側の画像は試験前の肌表面画像及び３Ｄ画像であり、右側の画像は試験後の肌表面画像及び３Ｄ画像である。VISIA でポジショニングを行った領域を、肌表面画像に四角で囲って示す。
【００５５】
図４ないし図６の肌表面画像を参照して、被験者１〜３においては、試験前と比較して、しわの状態が大幅に改善されていることが目視にて確認された。また、図４ないし図６の３Ｄ画像を参照しても、被験者１〜３は、試験前と比較して、しわの状態が大幅に改善されていることが確認された。すなわち、化粧料１の使用後に電気刺激装置を用いて電気刺激を行うことにより（実施例３に相当）、しわの状態が大幅に改善された。
一方、図１０ａないし図１２ｂの肌表面画像及び３Ｄ画像を参照して、被験者７〜９においては、試験前と比較して、しわの状態がほとんど改善されなかった。すなわち、化粧料２の使用後に電気刺激装置を用いて電気刺激を行っても（比較例１８´に相当）、しわの状態はほとんど改善されなかった。
【００５６】
また、図４ないし図９ｂの肌表面画像及び３Ｄ画像を参照して、被験者１〜３における肌のしわの状態は、被験者４〜６における肌のしわの状態と比べ、大幅に改善されていることが確認された。すなわち、化粧料１を用いた場合において、電気刺激装置を用いて電気刺激を行ったとき（実施例３に相当）は、電気刺激装置を用いないとき（比較例３に相当）と比べ、肌のしわの状態が大幅に改善された。
一方、図１０ａないし図１５ｂの肌表面画像及び３Ｄ画像を参照して、被験者７〜９と被験者１０〜１２とで、肌のしわの改善状況に差がほとんど見られなかった。すなわち、化粧料２を用いた場合においては、電気刺激装置を用いて電気刺激を行ったとき（比較例１８´に相当）と電気刺激装置を用いないとき（比較例１８に相当）とで、肌のしわの状態はほとんど改善しなかった。
これらの結果は、上述の培地試験における実施例３、比較例３、１８及び１８´の評価と符合する。
【００５７】
なお、肌のたるみの状態においても、上述の培地試験における実施例３、比較例３、１８及び１８´の評価と符合する結果が得られた。
すなわち、図４ないし図６の肌表面画像を参照して、被験者１〜３においては、試験前と比較して、たるみの状態が大幅に改善されていることが目視にて確認された。また、図４ないし図６の３Ｄ画像を参照しても、被験者１〜３は、試験前と比較して、たるみの状態が大幅に改善されていることが確認された。すなわち、化粧料１の使用後に電気刺激装置を用いて電気刺激を行うことにより（実施例３に相当）、たるみの状態が大幅に改善された。
一方、図１０ａないし図１２ｂの肌表面画像及び３Ｄ画像を参照して、被験者７〜９においては、試験前と比較して、たるみの状態がほとんど改善されなかった。すなわち、化粧料２の使用後に電気刺激装置を用いて電気刺激を行っても（比較例１８´に相当）、たるみの状態はほとんど改善されなかった。
【００５８】
また、図４ないし図９ｂの肌表面画像及び３Ｄ画像を参照して、被験者１〜３における肌のたるみの状態は、被験者４〜６における肌のたるみの状態と比べ、大幅に改善されていることが確認された。すなわち、化粧料１を用いた場合において、電気刺激装置を用いて電気刺激を行ったとき（実施例３に相当）は、電気刺激装置を用いないとき（比較例３に相当）と比べ、肌のたるみの状態が大幅に改善された。
一方、図１０ａないし図１５ｂの肌表面画像及び３Ｄ画像を参照して、被験者７〜９と被験者１０〜１２とで、肌のたるみの改善状況に差がほとんど見られなかった。すなわち、化粧料２を用いた場合においては、電気刺激装置を用いて電気刺激を行ったとき（比較例１８´に相当）と電気刺激装置を用いないとき（比較例１８に相当）とで、肌のたるみの状態はほとんど改善しなかった。
【００５９】
なお、本明細書において、生体の「皮膚」とは、顔の皮膚のみを指すものではなく、例えば、首、胸郭、腕、手、脚、臀部の皮膚を含む。
【００６０】
（変形例１）
上述した電気刺激装置１０において、生体に接触する一対の電極１２，１３が互いに異なる主面に設けられているが、これに限定されず、一対の電極１２、１３が同じ主面に設けられていてよい。この場合、例えば、対極電極１３が導入電極１２を包囲した構成であってよい。
【００６１】
（変形例２）
上述した電気刺激装置１０において、生体に接触する一対の電極１２，１３は、導入電極と対極電極とから構成されるものであったが、これに限定されず、上述のように、一対の電極の双方を導入電極とする構成のものであっても良い。
【００６２】
（変形例３）
上述した電気刺激装置１０において、電源として、ボタン型電池（２個のＣＲ２０３２による直流６ボルト電源）が使用されているが、これに限られず、単三形の電池（例えば、ＬＲ０３（アルカリ乾電池、公称電圧１．５Ｖ））を使用することもできる。
【００６３】
（変形例４）
群発パルス信号における極性反転までの期間や極性反転までに生成されるパルスの本数については、各イオン化成分が生体内に移動するのに十分な期間や本数が確保されていれば、特に限定されない。
【００６４】
（変形例５）
本実施形態においては、導入電極１２の吸湿性部材１２ａにイオン化化粧料を含浸させ、イオン化化粧料を浸透（導入）させたい顔の頬等の所定部位に、吸湿性部材１２ａを接触させて、イオン化化粧料を生体内に導入させている。しかしながら、これに限られず、イオン化化粧料を所定部位に直接塗布した後、導入電極１２をその所定部位に接触させて、イオン化化粧料を生体内に導入させてもよい。この場合、吸湿性部材１２ａを用いることなく、イオン化化粧料を生体内に導入させることができる。
【符号の説明】
【００６５】
１：ＣＰＵ  ２：パルス出力回路  ３：極性切替回路  ４：クロック発振器  ５：電源回路  ５ａ：電源オンスイッチ  ５ｂ：電源オフスイッチ  １０：電気刺激装置  １１：筐体部  １２：導入電極  １３：対極電極
【図１ａ】
2020045333.tif 000006
【図１ｂ】
2020045333.tif 000007
【図２】
2020045333.tif 000008
【図３】
2020045333.tif 000009
【図４】
2020045333.tif 000010
【図５】
2020045333.tif 000011
【図６】
2020045333.tif 000012
【図７】
2020045333.tif 000013
【図８ａ】
2020045333.tif 000014
【図８ｂ】
2020045333.tif 000015
【図９ａ】
2020045333.tif 000016
【図９ｂ】
2020045333.tif 000017
【図１０ａ】
2020045333.tif 000018
【図１０ｂ】
2020045333.tif 000019
【図１１ａ】
2020045333.tif 000020
【図１１ｂ】
2020045333.tif 000021
【図１２ａ】
2020045333.tif 000022
【図１２ｂ】
2020045333.tif 000023
【図１３ａ】
2020045333.tif 000024
【図１３ｂ】
2020045333.tif 000025
【図１４ａ】
2020045333.tif 000026
【図１４ｂ】
2020045333.tif 000027
【図１５ａ】
2020045333.tif 000028
【図１５ｂ】
2020045333.tif 000029
【手続補正書】
【提出日】令和1年9月27日(2019.9.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
基剤と、プラスにイオン化されたプラスイオン化成分及びマイナスにイオン化されたマイナスイオン成分を含むイオン化成分と、を含有し、プラス極性の群発パルス信号とマイナス極性の群発パルス信号とが交互に供給される導入電極を介して生体に導入される化粧料において、
前記イオン化成分は、ヒドロキシプロリンと、アセチルヒドロキシプロリンと、アラニルグルタミンと、を含有し、
化粧料全量を１００質量％としたとき、ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンが合計３．０質量％以下含有されており、ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン及びアラニルグルタミンはそれぞれ、少なくとも０．０１質量％含有されていることを特徴とする化粧料。
【請求項２】
化粧料のｐＨは、５．０以上８．０以下であることを特徴とする請求項１に記載の化粧料。