(57)【要約】スタチン系薬剤のＰＥＴプローブを提供可能な標識前駆体化合物の提供。式（Ｉ）又は式（ＩＶ）で表される標識前駆体化合物。式（Ｉ）及び（ＩＶ）中、Ｒ１１及びＲ１２は、Ｈ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−３アルコキシ等を示し、Ｒ１５は、Ｃ３−６シクロアルキル等を示し、Ｙは、Ｃ１−２アルキル、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−等を示し、Ｚ１は−Ｑ−ＣＨ２−Ｗ−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）で表される基を示し、Ｑは−Ｃ（Ｏ）−又は−ＣＨ（ＯＨ）−を示し、Ｗは−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−を示し、Ｒ１６はＨ、アルキル基等を示し、式（Ｉ）中、Ｌ１は−Ｏ（ＣＨ２）ｍ−等を示し、ｍは１〜４の整数を示し、Ｘ１は反応性官能基を示し、Ｒ１４は、Ｈ、Ｃ１−４アルキル等を示し、式（ＩＶ）中、Ｍはボロン酸エステルを示す。2012121285.tif 000058
2012121285.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)
【化１】
2012121285.tif 000043
[式(I)中、Ｒ１１は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、−ＮＲ１７Ｒ１８で表される基、ベンジルオキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１７及びＲ１８はそれぞれ独立してＣ１−２アルキル基を示し、
Ｒ１２は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、
Ｒ１４は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、
Ｒ１５は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−６シクロアルキル基、又はフェニル基を示し、
Ｌ１は、−（ＣＨ２）ｍ−、−Ｏ（ＣＨ２）ｍ−、−（ＡＯ）ｎ−、又は−Ｏ（ＡＯ）ｎ−を示し、ｍは、１〜４の整数を示し、ＡＯは、Ｃ２−４オキシアルキレン基を示し、ｎは、２〜４の整数を示し、
Ｘ１は、反応性官能基を示し、
Ｙは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−を示し、
Ｚ１は、−Ｑ−ＣＨ２−Ｗ−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、下記式(II)で表される基、又は下記式(III)で表される基を示し、Ｑ及びＷは、それぞれ独立して−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、又は−ＣＨ（ＯＲ１９）−を示し、Ｒ１９は、独立してＣ１−４アルキル基を示し、Ｒ１６は、水素原子、アルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示す。］
【化２】
2012121285.tif 000044
で表される標識前駆体化合物又はその塩。
【請求項２】
式(IV)
【化３】
2012121285.tif 000045
[式(IV)中、Ｒ１１は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、−ＮＲ１７Ｒ１８で表される基、ベンジルオキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１７及びＲ１８はそれぞれ独立してＣ１−２アルキル基を示し、
Ｒ１２は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、
Ｒ１５は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−６シクロアルキル基、又はフェニル基を示し、
Ｙは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−を示し、
Ｚ１は、−Ｑ−ＣＨ２−Ｗ−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、下記式(II)で表される基、又は下記式(III)で表される基を示し、Ｑ及びＷは、それぞれ独立して−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、又は−ＣＨ（ＯＲ１９）−を示し、Ｒ１９は、独立してＣ１−４アルキル基を示し、Ｒ１６は、水素原子、アルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示し、
Ｍは、ボロン酸エステル基を示す。］
【化４】
2012121285.tif 000046
で表される標識前駆体化合物又はその塩。
【請求項３】
式(V)
【化５】
2012121285.tif 000047
[式(V)中、Ｒ１１は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、−ＮＲ１７Ｒ１８で表される基、ベンジルオキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１７及びＲ１８はそれぞれ独立してＣ１−２アルキル基を示し、
Ｒ１２は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、
Ｒ１４は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、
Ｒ１５は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−６シクロアルキル基、又はフェニル基を示し、
Ｌ２は、結合手、−（ＣＨ２）ｍ−、−Ｏ（ＣＨ２）ｍ−、−（ＡＯ）ｎ−、又は−Ｏ（ＡＯ）ｎ−を示し、ｍは、０〜４の整数を示し、ＡＯは、Ｃ２−４オキシアルキレン基を示し、ｎは、２〜４の整数を示し、
Ｘ２は、放射性核種を示し、
Ｙは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−を示し、
Ｚ１は、−Ｑ−ＣＨ２−Ｗ−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、下記式(II)で表される基、又は下記式(III)で表される基で表される基を示し、Ｑ及びＷは、それぞれ独立して−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、又は−ＣＨ（ＯＲ１９）−を示し、Ｒ１９は、独立してＣ１−４アルキル基を示し、Ｒ１６は、水素原子、アルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示す。］
【化６】
2012121285.tif 000048
で表される放射性標識化合物又はその塩。
【請求項４】
請求項３記載の放射性標識化合物を製造する方法であって、
請求項１又は２に記載の標識前駆体化合物を、標識物質を用いて標識することを含む、製造方法。
【請求項５】
式(VI)
【化７】
2012121285.tif 000049
[式(VI)中、Ｒ１１は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、−ＮＲ１７Ｒ１８で表される基、ベンジルオキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１７及びＲ１８はそれぞれ独立してＣ１−２アルキル基を示し、
Ｒ１２は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、
Ｒ１５は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−６シクロアルキル基、又はフェニル基を示し、
Ｙは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−を示し、
Ｚ１は、−Ｑ−ＣＨ２−Ｗ−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、下記式(II)で表される基、又は下記式(III)で表される基を示し、Ｑ及びＷは、それぞれ独立して−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、又は−ＣＨ（ＯＲ１９）−を示し、Ｒ１９は、独立してＣ１−４アルキル基を示し、Ｒ１６は、水素原子、アルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示し、
Ｘ３は、スルホン酸エステル基、ハロゲン原子、ニトロ基、又はトリメチルアンモニウム基を示す。］
【化８】
2012121285.tif 000050
で表される化合物又はその塩と、ボロン酸エステル又はジボロンエステルとをカップリング反応させることを含む、
式(IV)
【化９】
2012121285.tif 000051
［式(IV)中、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｙ、及びＺ１は、式(VI)と同義であり、Ｍは、ボロン酸エステル基を示す。］
で表される化合物又はその塩の製造方法。
【請求項６】
請求項３記載の放射性標識化合物を予め投与された被検体から前記放射性標識化合物の放射性シグナルを検出することを含む、イメージング方法。
【請求項７】
請求項３記載の放射性標識化合物を予め投与された被検体から前記放射性標識化合物の放射性シグナルを検出することを含む、有機アニオン輸送ポリペプチド（ＯＡＴＰ）における取り込み機能の評価方法。
【請求項８】
請求項３記載の放射性標識化合物を予め投与された被検体から前記放射性標識化合物の放射性シグナルを検出することを含む、肝臓に発現する取り込みトランスポータ機能の観察方法。
【請求項９】
請求項３記載の放射性標識化合物を予め投与された被検体から前記放射性標識化合物の放射性シグナルを検出することを含む、胆汁排泄トランスポータ機能の観察方法。
【請求項１０】
式（X）
【化１０】
2012121285.tif 000052
［式(X)中、Ｘ１は、メシラート基、トシラート基、トリフラート基、又はフッ素原子を示し、
−Ｙ−Ｚ１は、下記式(II’)で表される基、又は下記式(III’)で表される基を示す。］
【化１１】
2012121285.tif 000053
［式(III’)中、Ｒ１６は、水素原子、生理的に加水分解し得るアルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示す。］
で表される化合物又はその塩。
【請求項１１】
式（XI）
【化１２】
2012121285.tif 000054
［式(XI)中、−Ｙ−Ｚ１は、下記式(II’)で表される基、又は下記式(III’)で表される基を示す。］
【化１３】
2012121285.tif 000055
［式(III’)中、Ｒ１６は、水素原子、生理的に加水分解し得るアルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示す。］
で表される化合物又はその塩。
【請求項１２】
式（XII）
【化１４】
2012121285.tif 000056
［式(XII)中、−Ｙ−Ｚ１は、下記式(II’)で表される基、又は下記式(III’)で表される基を示し、−Ｌ２−Ｘ２は、[18F]フッ素原子、又は−Ｏ−（ＣＨ２）２−[18F]Ｆを示す。］
【化１５】
2012121285.tif 000057
［式(III’)中、Ｒ１６は、水素原子、生理的に加水分解し得るアルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示す。］
で表される放射性標識化合物又はその塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、標識前駆体化合物、放射性標識化合物、及びそれらの製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
臨床試験における成功確率を上げるためには、ヒトにおいて好ましい体内動態特性を示す化合物を開発候補として選択することが最も重要である。この様な状況下、欧米では、本格的な臨床試験開始前にヒトにおける体内動態を検証するための新しい手法として「早期ヒト臨床試験」に関するガイドライン（欧州ＥＭＥＡ；２００３年１月，米国ＦＤＡ；  ２００６年１月）が策定された。一方、日本においても２００８年６月に厚生労働省より「マイクロドーズ臨床試験の実施に関するガイダンス」が公示され（非特許文献１）、国内での早期臨床試験の本格的実施にむけた法的基盤が整備された。マイクロドーズ臨床試験（ＭＤ臨床試験）とは、薬効用量の１／１００又は１００μｇ以下という非常に低い投与量（マイクロドーズ）の被験物質を健常人に単回投与する試験であり、第Ｉ相臨床試験の実施前に行うことによって、被験物質のヒトにおける薬物動態の検証を可能とした画期的な試験である。その具体的な目的としては、被験物質の吸収や血中動態、排泄特性、ヒトにおける代謝物プロファイル等を明らかにすること、分子イメージング技術を用いて被験物質の体内における局在に関する情報を得ること等が挙げられる。また、２０１０年２月には、早期探索的臨床試験のための非臨床試験、免疫毒性等に関する非臨床試験等についてのガイドラインが示されている（非特許文献２）。【０００３】
薬物の薬効や副作用を決定付ける要因として、薬効標的組織（標的分子近傍）における薬物濃度の時間推移が重要であると考えられる。例えば、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤の一つであるプラバスタチンは、主に取り込みトランスポータである有機アニオン輸送ポリペプチド（ＯＡＴＰ）１Ｂ１によって肝取り込みされた後、多剤耐性関連タンパク質（ＭＲＰ）２によって胆汁中へと排泄されることが知られている。このため、プラバスタチンの血中及び肝曝露に対するＯＡＴＰ１Ｂ１及びＭＲＰ２の輸送活性変化の影響を、血液、肝臓、及び末梢組織を含む生理学的薬物速度論（ＰＢＰＫ）モデルを用いたシミュレーションを行うことが試みられている（例えば、非特許文献３）。さらには、ＭＤ臨床試験とポジトロン放射断層撮影（ＰＥＴ）を用いた分子イメージングを行い、これを新たな医薬品開発に活用することが試みられている（例えば、非特許文献４）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】厚生労働省医薬食品局審査管理課長  マイクロドーズ臨床試験の実施に関するガイダンス（薬食審査発第０６０３００１号）平成２０（２００８）年６月３日
【非特許文献２】厚生労働省医薬食品局審査管理課長  「医薬品の臨床試験及び製造販売承認申請のための非臨床安全性試験の実施についてのガイダンス」について（薬食審査発第０２１９第４号）平成２２（２０１０）年２月１９日
【非特許文献３】Watanabe T, et al., Physiologically based pharmacokinetic modeling to predict transporter-mediated clearance and distribution of pravastatin in humans. J. Pharmacol Exp. Ther.; 328: 652-62, 2009
【非特許文献４】Sugiyama Y. Effective use of microdosing and Positron Emission Tomography (PET) studies on new drug discovery and development. Drug Metab. Pharmacokinet; 24(2): 127-29, 2009
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上記のように、プラバスタチンといったスタチン系薬剤は、肝取り込みトランスポータであるＯＡＴＰ類によって血中から肝臓へと輸送される化合物であることが知られている。このため、これらの化合物のＰＥＴプローブを得るための様々な試みがなされている。しかしながら、ＰＥＴプローブの合成に成功した報告は現時点ではなされていない。そもそも、放射性標識してＰＥＴプローブを得るためのスタチン系薬剤の標識前駆体についての成功例についても報告されていない。【０００６】
本発明は、スタチン系薬剤のＰＥＴプローブを提供可能な標識前駆体化合物、放射性標識化合物、及びそれらの製造方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、一態様において、式(I)
【化１】
2012121285.tif 000003
[式(I)中、Ｒ１１は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、−ＮＲ１７Ｒ１８で表される基、ベンジルオキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１７及びＲ１８はそれぞれ独立してＣ１−２アルキル基を示し、Ｒ１２は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１４は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１５は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−６シクロアルキル基、又はフェニル基を示し、Ｌ１は、−（ＣＨ２）ｍ−、−Ｏ（ＣＨ２）ｍ−、−（ＡＯ）ｎ−、又は−Ｏ（ＡＯ）ｎ−を示し、ｍは、１〜４の整数を示し、ＡＯは、Ｃ２−４オキシアルキレン基を示し、ｎは、２〜４の整数を示し、Ｘ１は、反応性官能基を示し、Ｙは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−を示し、Ｚ１は、−Ｑ−ＣＨ２−Ｗ−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、下記式(II)で表される基、又は下記式(III)で表される基を示し、Ｑ及びＷは、それぞれ独立して−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、又は−ＣＨ（ＯＲ１９）−を示し、Ｒ１９は、独立してＣ１−４アルキル基を示し、Ｒ１６は、水素原子、アルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示す。］
【化２】
2012121285.tif 000004
で表される標識前駆体化合物又は塩に関する。【０００８】
本発明は、その他の態様として、式(IV)
【化３】
2012121285.tif 000005
[式(IV)中、Ｒ１１は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、−ＮＲ１７Ｒ１８で表される基、ベンジルオキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１７及びＲ１８はそれぞれ独立してＣ１−２アルキル基を示し、Ｒ１２は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１５は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−６シクロアルキル基、又はフェニル基を示し、Ｙは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−を示し、Ｚ１は、−Ｑ−ＣＨ２−Ｗ−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、下記式(II)で表される基、又は下記式(III)で表される基を示し、Ｑ及びＷは、それぞれ独立して−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、又は−ＣＨ（ＯＲ１９）−を示し、Ｒ１９は、独立してＣ１−４アルキル基を示し、Ｒ１６は、水素原子、アルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示し、Ｍは、ボロン酸エステル基を示す。］
【化４】
2012121285.tif 000006
で表される標識前駆体化合物又はその塩に関する。【０００９】
本発明は、さらにその他の態様として、式(V)
【化５】
2012121285.tif 000007
[式(V)中、Ｒ１１は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、−ＮＲ１７Ｒ１８で表される基、ベンジルオキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１７及びＲ１８はそれぞれ独立してＣ１−２アルキル基を示し、Ｒ１２は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｌ２は、結合手、−（ＣＨ２）ｍ−、−Ｏ（ＣＨ２）ｍ−、−（ＡＯ）ｎ−、又は−Ｏ（ＡＯ）ｎ−を示し、ｍは、０〜４の整数を示し、ＡＯは、Ｃ２−４オキシアルキレン基を示し、ｎは、２〜４の整数を示し、Ｘ２は、放射性核種を示し、Ｒ１４は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１５は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−６シクロアルキル基、又はフェニル基を示し、Ｙは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−を示し、Ｚ１は、−Ｑ−ＣＨ２−Ｗ−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、下記式(II)で表される基、又は下記式(III)で表される基で表される基を示し、Ｑ及びＷは、それぞれ独立して−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、又は−ＣＨ（ＯＲ１９）−を示し、Ｒ１９は、独立してＣ１−４アルキル基を示し、Ｒ１６は、水素原子、アルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示す。］
【化６】
2012121285.tif 000008
で表される放射性標識化合物又はその塩に関する。【００１０】
本発明は、さらにその他の態様として、本発明の放射性標識化合物を製造する方法であって、本発明の標識前駆体化合物を、標識物質を用いて標識することを含む製造方法に関する。【００１１】
本発明は、さらにその他の態様として、式(VI)
【化７】
2012121285.tif 000009
[式(VI)中、Ｒ１１は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、−ＮＲ１７Ｒ１８で表される基、ベンジルオキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１７及びＲ１８はそれぞれ独立してＣ１−２アルキル基を示し、Ｒ１２は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示し、Ｒ１５は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−６シクロアルキル基、又はフェニル基を示し、Ｙは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−を示し、Ｚ１は、−Ｑ−ＣＨ２−Ｗ−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、下記式(II)で表される基、又は下記式(III)で表される基を示し、Ｑ及びＷは、それぞれ独立して−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、又は−ＣＨ（ＯＲ１９）−を示し、Ｒ１９は、独立してＣ１−４アルキル基を示し、Ｒ１６は、水素原子、アルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示し、Ｘ３は、スルホン酸エステル基、ハロゲン原子、ニトロ基、又はトリメチルアンモニウム基を示す。]
【化８】
2012121285.tif 000010
で表される化合物又はその塩と、ボロン酸エステル又はジボロンエステルとをカップリング反応させることを含む、
式(IV)
【化９】
2012121285.tif 000011
［式(IV)中、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｙ、及びＺ１は、式(VI)と同義であり、Ｍは、ボロン酸エステル基を示す。］で表される化合物又はその塩の製造方法に関する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、スタチン系薬剤のイメージング用プローブ、好ましくはメバロノラクトン誘導体のＰＥＴプローブを提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、肝取り込みトランスポータ（ＯＡＴＰ１Ｂ１，ＯＡＴＰ１Ｂ３）によるpitavastatin及びPTVS6の輸送の時間推移及び飽和性を示すグラフである。
【図２】図２は、[18F]PTVS2の体内分布の経時変化の結果の一例を示すグラフである。
【図３】図３は、[18F]PTVS2の体内分布の経時変化の結果のその他の例を示すグラフである。
【図４】図４は、[18F]PTVS2を用いたＰＥＴ撮像の結果の一例を示す画像である。
【図５】図５は、ヒト肝ミクロソームを用いたin vitro実験による代謝安定性の評価の結果の一例を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明は、式(I)及び式(IV)で表される化合物であれば、スタチン系薬剤のＰＥＴプローブを提供できるという知見に基づく。
【００１５】
ＭＤ臨床試験は、通常の臨床試験と比較してより簡便な毒性試験データのみで実施できることから、その有効利用によって医薬品開発の効率化・成功確率の向上に大きく貢献するものと期待されている。また、薬物の薬効、副作用の個体間変動を決定付ける要因として、個々人における薬効標的組織における薬物濃度の時間推移が重要であると考えられている。このため、薬物の組織内への取り込みトランスポータの機能を定量的に測定可能なイメージング用プローブが求められている。
【００１６】
ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤は、肝臓内におけるＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を阻害することによって薬効（血清コレステロール低下）を示す薬剤であって、例えば、プラバスタチン（US4346227）、シンバスタチン、ロバスタチン、ロスバスタチン、及びピタバスタチン（例えば、特開平1-279866号公報、EP304063、US5856336）等の様々なスタチン系薬剤が知られている。中でも、ピタバスタチン及びロスバスタチンは、ヒト肝細胞において主にＯＡＴＰ１Ｂ１によって取り込まれることが知られており、本発明者等はピタバスタチンに着目しＰＥＴプローブ化を試みた。ピタバスタチンは、下記構造を有するキノリンメバロン酸化合物であって、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤として市販されている。
【化１０】
2012121285.tif 000012
【００１７】
ＰＥＴプローブ化にあたり、本発明者等はピタバスタチンを様々な直接標識法を用いて標識することを試みた。しかしながら、標識化反応が進行せず、目的とする放射性標識化合物が得られなかった。そこで、本発明者等は新たな合成ルートの構築を行い、その過程で、式(I)及び式(IV)で表される化合物を標識前駆体として使用することによって、ピタバスタチン又はその誘導体のＰＥＴプローブを製造できることを見出した。
【００１８】
本発明によれば、スタチン系薬剤を放射性標識したＰＥＴプローブを提供できる。また、本発明によれば、その一態様において、ピタバスタチン又はその誘導体を放射性標識したＰＥＴプローブを提供できる。このため、本発明によれば、例えば、本発明の放射性標識化合物を用いたＰＥＴ撮像により得られたin vivoパラメータと、ヒト遺伝子発現細胞、ヒト凍結肝細胞、ヒト胆管側膜ベシクル、及び／又はヒト肝ミクロソームを用いて得られた輸送・代謝にかかるin vitroパラメータとに基づき、ヒト生体内における肝臓中の被験薬物濃度の時間推移を予測するモデルを構築することができるという効果を好ましくは奏する。さらには、薬物の肝取り込み／排泄過程の個体間変動要因としての遺伝子多型及び／又は薬物間相互作用がある場合の薬物動態の定量的な変動予測を行うことができるという効果を好ましくは奏する。
【００１９】
また、ピタバスタチンは、肝臓でほとんど代謝されず、ほとんど変わらない形態で胆汁に排出されることが知られている。さらには、後述する実施例で示すように、式(V)で表される放射性標識化合物のコールド体であるピタバスタチン誘導体についても同様に、肝細胞においてほとんど代謝されることなく、代謝的に安定であるとのデータが得られている。このため、本発明の式(V)で表される放射性標識化合物についても同様に、代謝的に安定であると考えられる。したがって、本発明の放射性標識化合物は、ＰＥＴプローブとして極めて有用であり、さらには肝内動態の測定又は評価に極めて有用なＰＥＴプローブとなりうるといえる。
【００２０】
本明細書において、式(I)、(IV)、(V)、及び(VI)で表される化合物は少なくとも１又は２ヶの不斉炭素原子をもっており、各々少なくとも２、３又は４種の光学異性体が存在する。このため、式(I)、(IV)、(V)、及び(VI)で表される化合物は、いずれも、これらの光学異性体の全て及びこれらの混合物の全てを包含するものである。また、式(X)、(XI)、(XII)、(XIII)及び(XIV)で表される化合物についても同様に２ヶの不斉炭素原子をもっており、各々少なくとも２、３又は４種の光学異性体が存在するため、これらの化合物は、いずれも、これらの光学異性体の全て及びこれらの混合物の全てを包含するものである。
【００２１】
本明細書において「化合物の塩」としては、例えば、アルカリ金属塩、硫酸塩、酢酸塩、硝酸塩、及びリン酸塩等が挙げられる。アルカリ金属塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、及びリチウム塩等が挙げられる。
【００２２】
［標識前駆体化合物(I)］
本発明は、一態様において、式(I)で表される標識前駆体化合物又はその塩（以下、「本発明の標識前駆体化合物(I)」ともいう）に関する。
【化１１】
2012121285.tif 000013
【００２３】
本発明の標識前駆体化合物(I)によれば、例えば、ピタバスタチン誘導体のＰＥＴプローブを提供できる。本発明の標識前駆体化合物(I)を放射性標識して得られるＰＥＴプローブは、例えば、ピタバスタチンと非常に類似する同様の肝取り込みトランスポータ（ＯＡＴＰ）における輸送特性を示す。このため、得られるＰＥＴプローブを用いてＰＥＴ撮像を行うことにより、例えば、ヒトin vivo肝臓中濃度の時間推移を予測するモデルの構築、薬物の肝取り込み／排泄過程の個体間変動要因としての遺伝子多型及び／又は薬物間相互作用の予測等を行うことができる。得られるＰＥＴプローブを用いることにより、例えば、臓器の機能評価、好ましくは臓器における薬剤トランスポータの機能評価を行うことができる。
【００２４】
式(I)において、Ｒ１１は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、−ＮＲ１７Ｒ１８で表される基、ベンジルオキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示す。Ｃ１−４アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基及びｔ−ブチル基が挙げられる。Ｃ１−３アルコキシ基としては、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基及びｉ−プロポキシ基が挙げられる。
Ｒ１７及びＲ１８はそれぞれ独立してＣ１−２アルキル基を示し、例えば、メチル基、及びエチル基が挙げられる。Ｒ１１は、好ましくは水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、Ｃ１−３アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ジメチルアミノ基、又はベンジルオキシ基である。
【００２５】
式(I)において、Ｒ１２は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示す。Ｃ１−４アルキル基及びＣ１−３アルコキシ基は、Ｒ１１の通りである。Ｒ１２は、好ましくは水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、Ｃ１−３アルキル基、又はＣ１−３アルコキシ基である。
【００２６】
式(I)において、Ｒ１４は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、フッ素原子、塩素原子、又は臭素原子を示す。Ｃ１−４アルキル基は、Ｒ１１の通りである。中でも、Ｒ１４は、水素原子、メチル基、又はフッ素原子が好ましく、より好ましくは水素原子である。Ｒ１４が水素原子以外の場合、Ｒ１４は、−Ｌ１−Ｘ１基に対してオルト位又はメタ位であることが好ましい。
【００２７】
式(I)において、Ｒ１５は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−６シクロアルキル基、又はフェニル基を示す。Ｃ１−６アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル、及びｎ−ヘキシルが挙げられる。Ｃ３−６シクロアルキル基としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルが挙げられる。中でも、Ｒ１５は、１級又は２級のＣ１−６アルキル基、又はＣ３−６シクロアルキル基が好ましく、より好ましくはエチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、又はシクロプロピル基、さらに好ましくはｉ−プロピル基、又はシクロプロピル基である。
【００２８】
式(I)において、Ｌ１は、−（ＣＨ２）ｍ−、−Ｏ（ＣＨ２）ｍ−、−（ＡＯ）ｎ−、又は−Ｏ（ＡＯ）ｎ−を示し、Ｌ１において、ＡＯは、Ｃ２−４オキシアルキレン基を示し、例えば、オキシエチレン基、オキシプロピレン基、及びオキシブチレン基等が挙げられ、好ましくはオキシエチレン基である。ｍは、１〜４の整数を示し、好ましくは１、２又は３であり、より好ましくは２である。ｎは、２〜４の整数を示し、好ましくは２又は３である。Ｌ１は、−（ＣＨ２）２−、又は−Ｏ（ＣＨ２）ｍ−が好ましく、より好ましくは−Ｏ（ＣＨ２）２−である。
【００２９】
式(I)において、Ｘ１は、反応性官能基を示す。反応性官能基としては、放射性標識を行う標識物質と反応しうる官能基が挙げられ、例えば、スルホン酸エステル基、ハロゲン原子、ニトロ基、トリメチルアンモニウム基、及びアルキルケイ素基等が挙げられる。スルホン酸エステル基としては、例えば、メシラート（ＯＭｓ）基、トシラート（ＯＴｓ）基、及びトリフラート（ＯＴｆ）基等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば、臭素原子、ヨウ素原子、及び塩素原子等が挙げられる。
【００３０】
式(I)において、−Ｌ１−Ｘ１基は、キノリン環の４位に置換されたフェニルにおいてキノリン環と接続する炭素を１位とした場合に、２位、３位及び４位のいずれにあってもよく、好ましくは３位又は４位、より好ましくは４位である。
【００３１】
式(I)において、Ｙは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−を示し、好ましくは−ＣＨ２ＣＨ２−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−であり、より好ましくは−ＣＨ＝ＣＨ−である。
【００３２】
式(I)において、Ｚ１は、−Ｑ−ＣＨ２−Ｗ−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、下記式(II)で表される基、又は下記式(III)で表される基を示す。Ｑ及びＷは、それぞれ独立して−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、又は−ＣＨ（ＯＲ１９）−を示す。Ｒ１９は、Ｃ１−４アルキル基を示し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、及びｔ−ブチル基等が挙げられる。Ｚ１は、−ＣＨ（ＯＲ１９）−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＲ１９）−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、−ＣＨ（ＯＲ１９）−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、下記式(II)で表される基、又は下記式(III)で表される基が好ましく、より好ましくは−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＯ２Ｒ１６、下記式(II)で表される基、又は下記式(III)で表される基である。
【化１２】
2012121285.tif 000014
【００３３】
Ｚ１及び式(III)において、Ｒ１６は、水素原子、アルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示す。アルキル基としては、生理的に加水分解し得るアルキル基が好ましく、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、及びｔ−ブチル基等が挙げられる。Ｒ１６は、水素原子、又はｔ−ブチル基が好ましい。
【００３４】
標識前駆体化合物(I)の形態としては、例えば、溶液、及び粉末等が挙げられ、取扱いの点からは、粉末が好ましく、より好ましくは凍結乾燥された粉末（凍結乾燥製剤）である。標識前駆体化合物(I)は、下記の実施例、及び特開平５−３１０７００号公報等の記載を参照することにより合成することができる。
【００３５】
標識前駆体化合物(I)の好ましい形態の一例としては、下記式（X）で表される化合物又はその塩が挙げられる。
【化１３】
2012121285.tif 000015
【００３６】
式(X)において、Ｙ、Ｚ１、及びＸ１は本発明の標識前駆体化合物(I)と同様であり、式(I)で示した通りである。Ｘ１は、好ましくは、メシラート基、トシラート基、トリフラート基、又はフッ素原子を示す。−Ｙ−Ｚ１は、好ましくは、下記式(II’)で表される基、又は下記式(III’)で表される基を示す。式(III’)において、Ｒ１６は、水素原子、生理的に加水分解し得るアルキル基、ＮＨ４、ナトリウム、カリウム、又は１／２カルシウムを示す。
【化１４】
2012121285.tif 000016
【００３７】
本発明の標識前駆体化合物(I)は、放射性標識化合物を製造するための標識前駆体として使用することができる。したがって、本発明は、その他の態様として、標識前駆体としての化合物(I)の使用、放射性標識化合物を製造するための化合物(I)の使用、又は化合物(I)を放射性標識前駆体として使用する方法に関する。
【００３８】
［標識前駆体化合物(IV)］
本発明は、さらにその他の態様として、式(IV)で表される標識前駆体化合物又はその塩（以下、「本発明の標識前駆体化合物(IV)」ともいう）に関する。本発明の標識前駆体化合物(IV)によれば、例えば、ピタバスタチン又はその誘導体のＰＥＴプローブを提供できる。
【化１５】
2012121285.tif 000017
【００３９】
式(IV)において、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｙ及びＺ１は、本発明の標識前駆体化合物(I)と同様であり、式(I)で示した通りである。Ｍは、ボロン酸エステル基を示す。本明細書において「ボロン酸エステル基」とは、アルコールと、対応するボロン酸とのエステル化による生成物のことをいう。アルコールとしては、例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノール、ｔ−ブタノール、エチレングリコール、及びピナコール等が挙げられる。ボロン酸エステル基としては、例えば、−Ｂ（ＯＲ３１）（ＯＲ３２）、−Ｂ（ＯＲ３３Ｏ）、及び下記式で表される基等が挙げられる。Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、及びＲ３７は、それぞれ独立してＣ１−６アルキル基であり、置換されていてもよく、中でもメチル基が好ましい。
【化１６】
2012121285.tif 000018
【００４０】
本発明の標識前駆体化合物(IV)の形態としては、例えば、溶液、及び粉末等が挙げられ、取扱いの点からは、粉末が好ましく、より好ましくは凍結乾燥された粉末（凍結乾燥製剤）である。
【００４１】
標識前駆体化合物(IV)の好ましい形態の一例としては、下記式（XI）で表される化合物又はその塩が挙げられる。式(XI)において、Ｙ、及びＺ１は本発明の標識前駆体化合物(I)と同様であり、式(I)で示した通りである。−Ｙ−Ｚ１は、好ましくは、上記式(II’)で表される基、又は上記式(III’)で表される基を示す。
【化１７】
2012121285.tif 000019
【００４２】
本発明の標識前駆体化合物(IV)は、後述する標識前駆体化合物の製造方法、及び実施例等に基づき製造することができる。
【００４３】
本発明の標識前駆体化合物(IV)は、放射性標識化合物を製造するための標識前駆体として使用することができる。したがって、本発明は、その他の態様として、放射性標識前駆体としての化合物(IV)の使用、放射性標識化合物を製造するための化合物(IV)の使用、又は化合物(IV)を放射性標識前駆体として使用する方法に関する。
【００４４】
［標識前駆体化合物(VI)の製造方法］
本発明は、さらにその他の態様として、式(VI)で表される化合物と、ボロン酸エステル又はジボロンエステルとをカップリング反応させることを含む、式(IV)で表される化合物の製造方法（以下、「本発明の標識前駆体化合物の製造方法」ともいう）に関する。本発明の標識前駆体化合物の製造方法によれば、本発明の標識前駆体化合物(IV)を効率よく製造することができる。本発明の製造方法は、例えば、下記スキーム及び実施例を参照して行うことができる。
【化１８】
2012121285.tif 000020
【００４５】
式(VI)において、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｙ、及びＺ１は、式(I)で示した通りである。式(VI)において、Ｘ３は、スルホン酸エステル基、ハロゲン原子、ニトロ基、又は第４級アンモニウムを示す。スルホン酸エステル基、及びハロゲン原子は、式(I)で示した通りである。第４級アンモニウムとしては、例えば、トリメチルアンモニウム等が挙げられる。Ｘ３は、ＯＭｓ基、ＯＴｓ基、ＯＴｆ基、臭素原子、ヨウ素原子、又は塩素原子が好ましい。
【００４６】
式(VI)で表される化合物は、後述するメバロノラクトン誘導体の製造方法及び実施例の記載を参照することにより適宜合成することができる。
【００４７】
カップリング反応は、式(VI)で表される化合物と、ボロン酸エステル又はジボロンエステルとを、例えば、触媒及び塩基存在下で不活性溶媒中で反応させることにより行うことができる。
【００４８】
ボロン酸エステルとしては、例えば、２−（ブロモメチル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン、及び２−アレニル−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン等が挙げられる。ジボロンエステルとしては、例えば、ビス（ピナコラト）ジボロン、ビス（ヘキシレングリコラト）ジボロン、及びビス（ネオペンチルグリコラト）ジボロン等が挙げられる。中でも、カップリング反応は、ジボロンエステルを用いて行うことが好ましく、より好ましくはビス（ピナコラト）ジボロンである。
【００４９】
触媒としては、特に制限されないが、パラジウム化合物、白金／インジウム等の金属触媒、及び相間移動触媒等が使用できる。パラジウム化合物としては、例えば、PdCl2(dppf)CH2Cl2、及びPd(PPh3)4等が挙げられ、１種で用いてもよいし、２種類以上を併用してもよい。塩基としては、炭素塩、酢酸カリウム、ＮａＯＨ、Ｅｔ３Ｎ、及びＫ３ＰＯ４等が挙げられる。炭酸塩としては、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、及び炭酸カリウム等が挙げられる。これらの中でも、塩基としては、効率よく目的化合物を得る点からは、炭酸カリウムが好ましい。カップリング反応は、反応効率を向上させる観点から、マイクロウェーブ照射下で行ってもよい。
【００５０】
不活性溶媒としては、例えば、アルコール系溶媒、ニトリル系溶媒、アミド系溶媒、ハロゲン化炭化水素系溶媒、エーテル系溶媒、芳香族炭化水素系溶媒等が挙げられる。アルコール系溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、２−プロパノール、ブタノール、イソブタノール、及びｔｅｒｔ−ブタノール等が挙げられる。ニトリル系溶媒としては、例えば、アセトニトリル、及びプロピオニトリル等が挙げられる。アミド系溶媒としては、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、及びＮ−メチルピロリドン等が挙げられる。ハロゲン化炭化水素系溶媒としては、例えば、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、及び四塩化炭素等が挙げられる。エーテル系溶媒としては、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、１，４−ジオキサン、及び１，２−ジメトキシエタン等が挙げられる。芳香族炭化水素系溶媒としては、例えば、ベンゼン、トルエン、及びキシレン等が挙げられる。これらは、単独で使用してもよいし、二種以上を混合して用いてもよい。中でも、不活性溶媒は、ＴＨＦ、及び／又はジクロロメタン等が好ましい。
【００５１】
［放射性標識化合物］
本発明は、その他の態様として、式(V)で表される放射性標識化合物又はその塩（以下、「本発明の放射性標識化合物」ともいう）に関する。本発明の放射性標識化合物は、例えば、ピタバスタチンと非常に類似する同様の肝取り込みトランスポータＯＡＴＰ１Ｂ１及びＯＡＴＰ１Ｂ３における輸送特性を示す。このため、本発明の放射性標識化合物を用いてＰＥＴ撮像を行うことにより、ヒトではＯＡＴＰ１Ｂ１及びＯＡＴＰ１Ｂ３における取り込みを評価することができる。本発明の放射性標識化合物によれば、例えば、ヒト生体内における肝臓の被験薬物濃度の時間推移を予測するモデルの構築、薬物の肝取り込み／排泄過程の個体間変動要因としての遺伝子多型及び／又は薬物間相互作用の予測等を行うことができる。本発明の放射性標識化合物によれば、例えば、臓器の機能評価、好ましくは臓器における薬剤トランスポータの機能評価を行うことができる。
【化１９】
2012121285.tif 000021
【００５２】
式(V)において、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｙ、及びＺ１は、本発明の標識前駆体化合物(I)と同様であって、式(I)で示した通りである。
【００５３】
式(V)において、Ｌ２は、結合手、−（ＣＨ２）ｍ−、−Ｏ（ＣＨ２）ｍ−、−（ＡＯ）ｎ−、又は−Ｏ（ＡＯ）ｎ−を示し、Ｌ２において、ＡＯは、Ｃ２−４オキシアルキレン基を示し、例えば、オキシエチレン基、オキシプロピレン基及びオキシブチレン基等が挙げられ、好ましくはオキシエチレン基である。ｍは、０〜４の整数を示し、好ましくは０、１、２又は３であり、より好ましくは２である。ｎは、２〜４の整数を示し、好ましくは２又は３である。Ｌ２は、結合手、−（ＣＨ２）２−、又は−Ｏ（ＣＨ２）ｍ−が好ましく、より好ましくは結合手、又は−Ｏ（ＣＨ２）２−である。
【００５４】
式(V)において、Ｘ２は、放射性核種を示す。放射性核種としては、特に制限されるものではないが、ポジトロン放出核種が好ましく、中でも１１Ｃ、又は１８Ｆがより好ましく、１８Ｆがさらに好ましい。
【００５５】
式(V)において、−Ｌ２−Ｘ２基は、キノリン環の４位に置換されたフェニルにおいてキノリン環と接続する炭素を１位とした場合に、２位、３位及び４位のいずれにあってもよく、好ましくは３位又は４位であり、より好ましくは４位である。
【００５６】
本発明の放射性標識化合物(IV)の好ましい形態の一例としては、下記式（XII）で表される化合物又はその塩が挙げられる。
【化２０】
2012121285.tif 000022
【００５７】
式(XII)において、式(XII)において、Ｙ、及びＺ１は本発明の標識前駆体化合物(I)と同様であり、式(I)で示した通りである。−Ｙ−Ｚ１は、好ましくは、上記式(II’)で表される基、又は上記式(III’)で表される基を示す。式(XII)において、Ｌ２、及びＸ２は本発明の標識前駆体化合物(IV)と同様であり、式(IV)で示した通りである。−Ｌ２−Ｘ２は、好ましくは、[18F]フッ素原子、又は−Ｏ−（ＣＨ２）２−[18F]Ｆを示す。
【００５８】
本発明の放射性標識化合物は、イメージング、例えば、ＰＥＴ撮像に用いることができ、好ましくは体内動態の個体間変動、ヒトにおける生体内での薬物代謝・輸送機能の評価のためのイメージングを行うことができる。本発明の放射性標識化合物は、ＰＥＴプローブとして使用でき、例えば、上述するイメージングに用いる組成物、イメージング用試薬、造影剤、画像診断剤等として用いることができる。これらの組成物、画像診断剤等の取り得る形態としては、例えば、溶液、及び粉末等が挙げられ、放射性核種の半減期及び放射能減衰等を考慮すると、溶液が好ましく、注射液がより好ましい。
【００５９】
本発明の放射性標識化合物を含むイメージング用組成物、イメージング用試薬、造影剤、及び画像診断剤は、例えば、担体等の医薬品添加物を含んでいてもよい。本明細書において医薬品添加物は、日本薬局方、アメリカ薬局方及び／又はヨーロッパ薬局方等で医薬品添加物として許認可を受けている化合物をいう。担体としては、例えば、水性溶媒及び非水性溶媒が使用できる。水性溶媒としては、例えば、リン酸カリウム緩衝液、生理食塩水、リンゲル液、及び蒸留水等が挙げられる。非水性溶媒としては、例えば、ポリエチレングリコール、植物性油脂、エタノール、グリセリン、ジメチルスルホキサイド、及びプロピレングリコール等が挙げられる。
【００６０】
本発明の放射性標識化合物は、例えば、本発明の標識前駆体化合物(I)又は(IV)を標識物質を用いて標識することによって製造することができる。したがって、本発明は、さらにその他の態様として、本発明の標識前駆体化合物(I)又は(IV)を、標識物質を用いて標識することを含む本発明の放射性標識化合物の製造方法に関する。本発明の製造方法によれば、本発明の放射性標識化合物(V)を効率よく製造することができる。
【００６１】
標識物質は、標識する放射性核種及び標識前駆体化合物の種類に応じて適宜決定できる。放射性核種が、１８Ｆである場合は、例えば、[18F]ＫＦ、又は１−[18F]フルオロ−４−ヨードベンゼン等を用いて公知の方法により行うことができる。標識反応は、例えば、触媒及び塩基存在下で不活性溶媒中で行うことができ、触媒、塩基、及び不活性溶媒としては、上記のものが挙げられる。
【００６２】
本発明の放射性標識化合物は、例えば、下記スキーム及び実施例を参照することにより、製造することができる。
【化２１】
2012121285.tif 000023
【００６３】
本発明の放射性標識化合物(V)は、後述するイメージング方法、ＯＡＴＰ取り込み機能の評価方法、取り込みトランスポータ機能の観察方法、又は胆汁排泄トランスポータ機能の観察方法等に用いることができる。このため、本発明は、さらにその他の態様として、イメージング剤としての化合物(V)の使用、イメージング剤の製造のための化合物(V)の使用、化合物(V)をイメージング剤として使用する方法、又は、イメージング方法、ＯＡＴＰ取り込み機能の評価方法、取り込みトランスポータ機能の観察方法若しくは胆汁排泄トランスポータ機能の観察方法のために用いる化合物(V)の使用に関する。
【００６４】
［イメージング方法］
本発明は、さらにその他の態様として、本発明の放射性標識化合物を予め投与された被検体から前記放射性標識化合物の放射性シグナルを検出することを含むイメージング方法に関する。本発明のイメージング方法によれば、例えば、体内動態の個体間変動、ヒトにおける生体内での薬物輸送機能の評価を行うことができる。被検体としては、例えば、ヒト及び／又はヒト以外の哺乳類が挙げられる。
【００６５】
シグナルの検出は、経時的に行うことが好ましく、より好ましくは本発明の放射性標識化合物を投与後、速やかに開始することが好ましい。
【００６６】
シグナルの検出は、被検体の全体から行ってもよく、局所的に行ってもよく、少なくとも、本発明の放射性標識化合物の取り込みを行う取り込みトランスポータ、及び／又は本発明の放射性標識化合物の排出を行う排泄トランスポータが発現する臓器又は生体内の組織において行うことが好ましい。該トランスポータが発現する臓器としては、例えば、肝臓、小腸、脳及び腎臓等が挙げられる。
【００６７】
本発明のイメージング方法は、例えば、検出されたシグナルを再構成処理して画像に変換し表示すること、及び／又は検出されたシグナルを数値化して集積量を提示することを含んでいてもよい。表示には、例えば、モニタに表示すること、及び印字すること等を含む。提示には、例えば、算出した集積量を保存すること、及び外部に出力することを含む。
【００６８】
［ＯＡＴＰ取り込み機能の評価方法］
本発明は、さらにその他の態様として、本発明の放射性標識化合物を予め投与された被検体から前記放射性標識化合物の放射性シグナルを検出することを含む、有機アニオン輸送ポリペプチドにおける取り込み機能の評価方法に関する。本発明の評価方法によれば、体内動態の個体間変動、薬物輸送機能の評価をヒトの生体内で行うことができる。本発明の評価方法により得られた結果に基づき、例えば、他の同様の輸送経路を持つ薬剤について、被検体の薬物輸送機能に応じた投与量や投与間隔など最適な処方設計の判断基準を得ることができる。被検体としては、例えば、ヒト及び／又はヒト以外の哺乳類が挙げられる。シグナルの検出等は、本発明のイメージング方法と同様に行うことができる。
【００６９】
有機アニオン輸送ポリペプチド（ＯＡＴＰ）としては、ヒトの場合、ＯＡＴＰ１Ｂ１及びＯＡＴＰ１Ｂ３をはじめとする各種ＯＡＴＰ類であり、マウス及びラットの場合、Ｏａｔｐ１ａ１、Ｏａｔｐ１ａ４、Ｏａｔｐ１ｂ２をはじめとする各種Ｏａｔｐ類である。
【００７０】
取り込み機能を評価する臓器としては、例えば、ＯＡＴＰが発現する臓器であり、肝臓、小腸、脳及び腎臓等が挙げられる。中でも、上記の通りピタバスタチンは肝細胞の血管側に発現し血液から肝細胞への取り込みに関与する肝トランスポータＯＡＴＰ１Ｂ１によって主に取り込まれることが知られていることから、肝取り込み機能を評価することが好ましい。
【００７１】
［取り込みトランスポータ機能の観察方法］
本発明は、さらにその他の態様として、本発明の放射性標識化合物を予め投与された被検体から前記放射性標識化合物の放射性シグナルを検出することを含む肝細胞に発現する取り込みトランスポータ機能の観察方法に関する。本発明の観察方法によれば、本発明の放射性標識化合物を用いたイメージングを行うことにより、肝臓に発現する取り込みトランスポータ機能を観察することができる。
【００７２】
本発明の観察方法によれば、検出した放射性シグナルに基づき取り込みトランスポータ機能を測定、分析、及び／又は評価することができる。これにより、本発明の観察方法によれば、例えば、肝取り込みトランスポータ機能における個体間変動及び／又は薬物輸送機能の評価をヒトの生体内で行うことができる。また、本発明の観察方法により得られた測定、分析、及び／又は評価結果に基づき、例えば、他の同様の輸送経路を持つ薬剤について、被検体の薬物輸送機能に応じた投与量や投与間隔など最適な処方設計の判断基準を得ることができる。被検体、シグナルの検出等は、上述のとおりである。
【００７３】
本発明の観察方法において、観察対象となる取り込みトランスポータは、ＯＡＴＰが好ましい。本発明の観察方法は、肝臓に発現するＯＡＴＰにおける取り込みトランスポータ機能を測定し、被検体の肝取り込み機能を測定及び／又は評価することがより好ましい。
【００７４】
取り込みトランスポータ機能の観察は、イメージングを経時的に行うことによって行うことが好ましい。本発明の観察方法は、例えば、放射性シグナルの検出を経時的に行うこと、及び検出されたシグナルを経時的に比較することによって取り込みトランスポータにおける本発明の放射性標識化合物の取り込みを測定、評価又は分析することを含んでいてもよい。本発明の放射性標識化合物の取り込みの測定、評価又は分析は、例えば、検出されたシグナルを再構成処理して得られた画像の比較、検出されたシグナルに基づく取り込み量の定量化等を行うことが挙げられる。
【００７５】
［胆汁排泄トランスポータ機能の観察方法］
本発明は、さらにその他の態様として、本発明の放射性標識化合物を予め投与された被検体から前記放射性標識化合物の放射性シグナルを検出することを含む胆汁排泄トランスポータ機能の観察方法に関する。本発明の放射性標識化合物は、肝臓においてほとんど代謝されることなく、代謝的に安定であるとの知見が得られている。このため、本発明の測定方法によれば、本発明の放射性標識化合物を用いたイメージングを行うことにより、胆汁排泄トランスポータ機能の評価を生体内で行うことができる。
【００７６】
本発明の観察方法によれば、検出した放射性シグナルに基づき胆汁排泄トランスポータ機能を測定、分析、及び／又は評価することができる。これにより、本発明の観察方法によれば、例えば、胆汁排泄トランスポータ機能における個体間変動及び／又は薬物輸送機能の評価をヒトの生体内で行うことができる。また、本発明の観察方法により得られた測定、分析、及び／又は評価結果に基づき、例えば、他の同様の輸送経路を持つ薬剤について、被検体の薬物輸送機能に応じた投与量や投与間隔など最適な処方設計の判断基準を得ることができる。被検体、シグナルの検出等は、上述のとおりである。
【００７７】
胆汁排泄トランスポータとしては、例えば、ＭＤＲ１（multidrug resistance 1; P-glycoprotein）、ＭＲＰ２（multidrug resistance-associated protein 2）、ＢＣＲＰ（breast cancer resistance protein）、及びＢＳＥＰ（bile salt export pump）等が知られている。
【００７８】
胆汁排泄機能の観察は、イメージングを経時的に行うことによって行うことが好ましい。本発明の観察方法は、例えば、放射性シグナルの検出を経時的に行うこと、及び検出されたシグナルを経時的に比較することによって胆汁排泄トランスポータにおける本発明の放射性標識化合物の排出を測定、評価又は分析することを含んでいてもよい。本発明の放射性標識化合物の排出の測定、評価又は分析は、例えば、検出されたシグナルを再構成処理して得られた画像の比較、又は検出されたシグナルに基づく排出量の定量化等を行うことが挙げられる。
【００７９】
肝臓に発現する取り込みトランスポータ機能の観察と、胆汁排泄トランスポータ機能の観察とを同時に行ってもよい。取り込みトランスポータと胆汁排泄トランスポータとについてそのトランスポータ機能を同時に観察することにより、例えば、肝細胞における胆汁排泄機構をより正確に評価することができる可能性がある。
【００８０】
なお、本発明において、トランスポータ機能の観察方法は上記に特に限定されることなく、例えば、胆汁排泄トランスポータ以外の本発明の標識化合物が基質となりうる排出トランスポータの機能を観察してもよい。
【００８１】
［キット］
本発明は、さらにその他の態様として、標識前駆体化合物(I)、標識前駆体化合物(IV)又は放射性標識化合物(V)を含むキットに関する。本発明のキットは、例えば、放射性標識化合物の合成、イメージング、並びにＯＡＴＰ取り込み機能、肝取り込みトランスポータ機能、胆汁排泄トランスポータ機能の測定又は評価等に用いることができる。本発明のキットは、それぞれの形態に応じた取扱い説明書を含むことが好ましい。取扱い説明書は、キットに同梱されてもよいし、ウェブ上で提供されてもよい。
【００８２】
本発明のキットは、標識前駆体化合物(I)、標識前駆体化合物(IV)又は放射性標識化合物(V)を入れるための容器をさらに含んでいてもよい。容器としては、例えば、シリンジやバイアル瓶等が挙げられる。
【００８３】
本発明のキットは、例えば、バッファー、浸透圧調整剤等の分子プローブを調製するための成分、及び／又は注射器等のペプチド誘導体の投与に使用する器具等をさらに含んでいてもよい。
【００８４】
［メバロノラクトン誘導体の新規製造方法］
本発明は、さらにその他の態様として、メバロノラクトン誘導体の新たな製造方法に関する。すなわち、本発明は、式(VI)で表される化合物とボロン酸エステル又はジボロンエステルとをカップリング反応させて式(IV)で表される化合物を得ること(工程１)、及び式(IV)で表される化合物と式(VII)で表される化合物とを反応させること(工程２)を含む式(VIII)で表される化合物の製造方法に関する。本発明の合成方法によれば、ピタバスタチン又はその誘導体を容易に得ることができる。
【００８５】
本発明の製造方法は、例えば、下記スキームに基づき行うことができる。
【化２２】
2012121285.tif 000024
【００８６】
（工程１）
式(VI)で表される化合物と、ボロン酸エステル又はジボロンエステルとのカップリング反応は、本発明の標識前駆体化合物の製造方法と同様に行うことができる。式(VI)におけるＲ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｙ、Ｚ１及びＸ３、ボロン酸エステル、並びにジボロンエステルは、上記のとおりである。
【００８７】
（工程２）
式(IV)で表される化合物と式(VII)で表される化合物との反応は、触媒及び塩基存在下で不活性溶媒中でこれらの化合物を反応させることで行うことができる。式(IV)で表される化合物は、本発明の標識前駆体化合物(IV)である。
【００８８】
式(VII)において、Ｒ１３は、水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−３アルコキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ベンジルオキシ基、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、トリフルオロメチル基、フェノキシ基、又はフェニル基を示す。Ｒ３３は、水素原子、フッ素原子、塩素原子、又はメチル基が好ましく、より好ましくはフッ素原子である。Ｒ１３は、フェニルにおいてＸ４が結合する炭素を１位とした場合に、２位、３位及び４位のいずれにあってもよく、好ましくは３位又は４位であり、より好ましくは４位である。
【００８９】
式(VII)において、Ｒ１４は、式(I)で示したとおりである。Ｒ１４が水素原子以外の場合、Ｒ１４は、Ｒ１３に対してオルト位又はメタ位であることが好ましい。
【００９０】
式(VII)において、Ｘ４は、反応性官能基である。反応性官能基としては、ボロン酸エステル基と反応しうる官能基が挙げられ、例えば、上記式(I)で示したものが使用でき、中でも、ヨウ素原子等が好ましい。
【００９１】
式(VIII)において、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｙ、及びＺ１は、上記したとおりである。
【００９２】
触媒としては、特に制限されないが、パラジウム化合物、白金／インジウム等の金属触媒等が使用できる。パラジウム化合物としては、例えば、PdCl2(dppf)CH2Cl2、Pd(PPh3)4、及びPdCl2(dppf)CH2Cl2とPd(PPh3)4との併用等が挙げられる。塩基としては、炭素塩、酢酸カリウム、ＮａＯＨ、Ｅｔ３Ｎ、及びＫ３ＰＯ４等が挙げられる。炭酸塩としては、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸セリウム、及び炭酸カリウム等が挙げられる。これらの中でも、塩基としては、効率よく目的化合物を得る点からは、炭酸ナトリウムが好ましい。反応時間を大幅に短縮でき、製造効率の向上の点から、カップリング反応は、マイクロウェーブ照射下で行うことが好ましい。
【００９３】
式(VI)で表される化合物は、例えば、式(IXa)で表される化合物を塩基と反応させた後、式(Xa)又は式(XIa)で表される化合物と縮合反応させ、ついで得られた化合物を脱保護、加水分解及び／又はラクトン化することによって得ることができる。この合成は、下記スキーム及び実施例の記載に基づき行うことができる。
【化２３】
2012121285.tif 000025
【００９４】
塩基としては、例えば、ナトリウム化合物、カリウム化合物、及びアルキルリチウム化合物等が挙げられる。ナトリウム化合物としては、水素化ナトリウム等が挙げられる。カリウム化合物としては、例えば、ｔ−ブトキシカリウム等が挙げられる。アルキルリチウム化合物としては、例えば、ブチルリチウム等が挙げられる。
【００９５】
式(IXa)において、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、及びＸ３は、上記したとおりである。
【００９６】
式(Xa)及び(XIa)において、Ｒ３８ａ及びＲ３８ｂは、水酸基の保護基を意味する。Ｒ３８ａ及びＲ３８ｂとしては、それぞれ独立して、メトキシメチル基、２−メトキシメチル基、テトラヒドロキシピラニル基、４−メトカエシテトラヒドロピラニル基、２−エトキシエチル基、１−メチル−１−メトキシエチル基、トリフェニルメチル基、又はトリメチルシリル基を示すか、Ｒ３８ａ及びＲ３８ｂが一緒になって、イソプロピリデン、シクロペンチリデン、シクロヘキシリデン、又はベンジリデンを示す。式(Xa)において、Ｒ１６は、上記したとおりである。
【００９７】
式(Xa)及び(XIa)において、−Ｙ１は、−Ｐ＋Ｒ４１Ｒ４２Ｒ４３Ｈａｌ−又は−Ｐ（Ｗ１）Ｒ４４Ｒ４５を示す。Ｒ４１、Ｒ４２、及びＲ４３は、それぞれ独立して、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、２−クロロエチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、フェニル基、メチルフェニル基、メトキシフェニル基、ペンタフルオロフェニル基、又はベンジル基を示す。Ｈａｌは、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を示す。Ｒ４４及びＲ４５は、それぞれ独立して、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、２−クロロエチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、フェニル基、メトキシフェニル基、メチルフェニル基、ペンタフルオロフェニル基、ベンジル基、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、２−クロロエトキシ基、２，２，２−トリフルオロエトキシ基、フェノキシ基、メトキシフェニルオキシ基、メチルフェニルオキシ基、ペンタフルオロフェニルオキシ基、メチルフェニルオキシ基、又はベンジルオキシ基を示すか、又はＲ４４及びＲ４５が一緒になって５員環又は６員環を形成していてもよい。Ｗ１は、酸素原子又は硫黄原子を示す。式(Xa)及び(XIa)において、−Ｙ１は、Ｐ（Ｗ１）Ｒ４４Ｒ４５が好ましく、より好ましくは−ＰＯＲ４４Ｒ４５であり、より好ましくはＲ４４及びＲ４５がメトキシ基である−ＰＯＲ４４Ｒ４５である。
【００９８】
式(VI)で表される化合物は、例えば、式(IXb)で表される化合物を塩基と反応させた後、式(Xb)又は式(XIb)で表される化合物と縮合反応させ、ついで得られた化合物を脱保護、加水分解及び／又はラクトン化することによって得てもよい。この合成は、下記スキーム及び実施例の記載に基づき行うことができる。
【化２４】
2012121285.tif 000026
【００９９】
式(IXb)におけるＲ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｙ１、及びＸ３、式(Xb)及び式(XIb)におけるＲ３８ａ、Ｒ３８ｂ、及びＲ１６、使用する塩基は、上記のとおりである。
【０１００】
［新たなメバロノラクトン誘導体］
本発明は、さらにその他の態様として、新たなメバロノラクトン誘導体に関する。すなわち、本発明は、式(XIII)で表される化合物又はその塩（以下、「本発明の化合物(XIII)」ともいう）に関する。本発明の化合物(XIII)によれば、従来のメバロノラクトン誘導体と比較して容易に製造することができ、また安価な製造コストで製造できるという効果を奏しうる。また、本発明の化合物(XIII)は、例えば、従来のピタバスタチンと同等の作用・効果を奏しうる。
【化２５】
2012121285.tif 000027
【０１０１】
式(XIII)において、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｙ及びＺ１は、本発明の標識前駆体化合物(I)と同様であり、式(I)で示した通りである。式(XIII)において、Ｌ３は、−Ｏ（ＣＨ２）ｍ−、−（ＡＯ）ｎ−、又は−Ｏ（ＡＯ）ｎ−を示し、ｍは、０〜４の整数を示し、ＡＯは、Ｃ２−４オキシアルキレン基を示し、ｎは、２〜４の整数を示す。−Ｌ３−は、−Ｏ（ＣＨ２）ｍ−が好ましく、より好ましくは−Ｏ（ＣＨ２）２−である。式(XIII)において、Ｘ５は、ハロゲン原子であり、好ましくは臭素原子、ヨウ素原子、及び塩素原子であり、より好ましくはフッ素原子である。
【０１０２】
本発明の化合物(XIII)の好ましい形態の一例としては、下記式(XIV)で表される化合物が挙げられる。式(XIV)において、−Ｙ−Ｚ１は式(I)と同様であり、Ｘ５は式(XIII)と同様である。
【化２６】
2012121285.tif 000028
【０１０３】
本発明の化合物(XIII)は、例えば、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤として使用することができる。また、本発明の化合物(XIII)は、例えば、高脂血症、及び動脈硬化症等の治療にも用いることができうる。したがって、本発明は、さらにその他の態様として、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤としての化合物(XIII)の使用、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤の製造のための化合物(XIII)の使用、化合物(XIII)をＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤として使用する方法、高脂血症及び又は動脈硬化症の治療方法に用いるための化合物(XIII)、高脂血症及び又は動脈硬化症の非医薬的な処置方法のための化合物(XIII)、又は、高脂血症及び又は動脈硬化症の治療薬を製造するための化合物(XIII)の使用に関する。
【０１０４】
以下に、実施例を用いて本発明をさらに説明する。但し、本発明は以下の実施例に限定して解釈されない。
【０１０５】
本明細書の記載において、以下の略語を使用する。
ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ’−ジメチルアセトアミド
ＫＭ：３−シクロプロピル−３−オキソプロピオン酸メチル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＢＳＣｌ：ｔ−ブチルジメチルシリルクロリド
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＫＭ：３−シクロプロピル−３−オキソプロパン酸メチル
ＰＰｈ３：トリフェニルホスフィン
Ｐｈ２ＰＯＥｔ：エトキシジフェニルホスフィン
ＴＭＰ：２，２，６，６−テトラメチルピペリジン
ＤＩＯ：tert-Butyl (3R, 5S)-6-oxo-3,5-O-isopropylidene-3,5-dihydroxyhexanoate
ＴＢＡＦ：テトラブチルアンモニウムフロリド
ＴｓＣｌ：ｐ−トルエンスルホニルクロリド
Kryptofix（登録商標）２．２．２（製品名：Merck社製）：4,7,13,16,21,24-Hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane
ＢｕＯＮＯ：亜硝酸ｔ−ブチル
ＤＩＢＡＬ：水素化ジイソブチルアンモニウム
ＴＢＡＢ：テトラブチルアンモニウムブロミド
ＴＥＭＰＯ：［（２，２，６，６−テトラメチルピペリジニル）オキシ］ラジカル
（Ｂｐｉｎ）２：ビスピナコラトジボロン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＭｓＣｌ：メタンスルフォニルクロリド
【０１０６】
本明細書において、測定機器は以下の機器を用いた。
ＮＭＲ
分光計：ＡＤＶＡＮＣＥ  ＤＲＸ  （ＢＲＵＫＥＲ  ＢＩＯＳＰＩＮ）
マグネット：ＵｌｔｒａＳｈｉｅｌｄ  ４００ＭＨｚ／５４ｍｍ
標準物質：ＴＭＳ（テトラメチルシラン）
ＭＳ
測定装置：Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＡＱ（Ｗａｔｅｒｓ）
イオン化：ＥＳＩ
【実施例】
【０１０７】
（製造例１）標識前駆体化合物の製造
下記のスキームに従い、標識前駆体化合物であるPTVS1を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化２７】
2012121285.tif 000029
【０１０８】
化合物（i-2）の合成
窒素気流下、化合物（i-1）(2.57g,6.27mmol)の塩化メチレン(10mL)溶液を氷水浴にて冷却し、ＴＦＡ／チオアニソール＝１０／１(10mL)を滴下した。室温まで徐々に昇温しながら２日間撹拌し、ＴＦＡ／チオアニソール＝１０／１(10mL)を追加して一晩撹拌した後、反応液を濃縮した。氷水浴にて冷却した飽和重曹水(200mL)に濃縮物を滴下し、酢酸エチル(140mL,50mL)にて２回抽出した。得られた有機層を合わせ、飽和食塩水(100mL)にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：35g,展開溶媒：ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝４／１→０／１)にて精製した。薄茶色固体として目的とする化合物(i-2)を収率６３％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 1.02-1.09 (m, 2H), 1.34-1.39 (m, 2H), 2.16-2.22 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 5.64 (br. s., 1H), 6.92-6.96 (m, 2H), 7.24-7.28 (m, 2H), 7.36-7.40 (m, 1H), 7.59-7.61 (m, 1H), 7.65-7.69 (m, 1H), 7.97-8.01 (m, 1H). 【０１０９】
化合物（i-3）の合成
窒素気流下、２−ブロモエタノール(3.00g,24.0mmol)のＤＭＦ(15mL)溶液に、イミダゾール(4.08g,60.0mmol)、及びＴＢＳＣｌ(4.34g,28.8mmol)を加えて室温にて３．５時間撹拌した。反応液に水(50mL)を加え、酢酸エチル(50mL)にて抽出した。有機層を０．５Ｍ塩酸(30mL)、水(30mL)、飽和重曹水(50mL)、水(30mL)、飽和食塩水(30mL)にて順次洗浄し、それぞれの水層を酢酸エチル(50mL)にて抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。無色油状物として（２−ブロモエトキシ）（ｔ−ブチル）ジメチルシラン(5.30g,22.1mmol)を収率９２％にて得た。【０１１０】
窒素気流下、化合物(i-2)(1.27g,3.97mmol)のＤＭＦ(13mL)溶液に、炭酸カリウム(1.10g,7.96mmol)を加え、（２−ブロモエトキシ）（ｔ−ブチル）ジメチルシラン(1.73g,7.23mmol)を滴下した。室温にて１３．５時間撹拌した後、５５℃の水浴にて３時間加熱撹拌した。反応液に酢酸エチル(50mL)を加え、水(50mL)、飽和食塩水(30mL)にて順次洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：30g,展開溶媒：トルエン／酢酸エチル＝４０／１)にて精製した。淡黄色固体として目的とする化合物(i-3)(1.65g,3.45mmol)を収率８６％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 0.15 (s, 6H), 0.95 (s, 9H), 1.03-1.10 (m, 2H), 1.35-1.56 (m, 2H), 2.17-2.21 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 4.04 (t, J=5.04 Hz, 2H), 4.13 (t, J=5.04 Hz, 2H), 7.02-7.04 (m, 2H), 7.29-7.31 (m, 2H), 7.36-7.39 (m, 1H), 7.58-7.60 (m, 1H), 7.64-7.68 (m, 1H), 7.97-7.99 (m, 1H). 【０１１１】
化合物（i-4）の合成
窒素気流下、化合物(i-3)(1.50g,3.13mmol)のＴＨＦ(30mL)溶液を氷水浴にて冷却した。水素化リチウムアンモニウム(360mg、9.48mmol)を３回に分けて加え、氷水浴にて２０分間、室温にて１．５時間撹拌した。反応液を氷水浴にて冷却し、水(360μL)、１５％水酸化ナトリウム水溶液(360μL)、水(1mL)を順次滴下した。酢酸エチル(20mL)を加えてセライト濾過し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。黄色油状物として目的とする化合物(i-4)(1.45g,3.22mmol)を粗体収率１０２％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 0.15 (s, 6H), 0.95 (s, 9H), 1.09-1.11 (m, 2H), 1.37-1.39 (m, 2H), 2.05 (s, 2H), 2.55-2.65 (m, 1H), 4.05 (t, J=5.04 Hz, 2H), 4.14 (t, J=5.04 Hz, 2H), 4.79 (br. s., 1H), 7.06-7.09 (m, 2H), 7.23-7.25 (m, 2H), 7.32-7.34 (m, 1H), 7.38-7.42 (m, 1H), 7.58-7.63 (m, 1H), 7.96-7.98 (m, 1H). MS(ES+) 450.1【０１１２】
化合物（i-5）の合成
窒素気流下、化合物(i-4)(1.30g,2.89mmol)の塩化メチレン(15mL)懸濁液に四臭化炭素(1.83g,5.82mmol)を加えた。氷水浴にて冷却し、PPh3(1.52g,5.79mmol)の塩化メチレン(1.5mL)溶液を滴下した。氷水浴にて３０分間撹拌した後、飽和重曹水(40mL)を滴下し、クロロホルム(35mL,15mL)にて２回抽出した。有機層を硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：50g,展開溶媒：クロロホルム)にて精製した。黄色油状物として目的とする化合物(i-5)(1.28g,2.49mmol)を収率８６％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 0.16 (s, 6H), 0.96 (s, 9H), 1.13-1.16 (m, 2H), 1.38-1.40 (m, 2H), 2.50-2.54 (m, 1H), 4.06 (t, J=5.04 Hz, 2H), 4.17 (t, J=5.04 Hz, 2H), 4.65 (s, 2H), 7.09-7.11 (m, 2H), 7.30-7.36 (m, 4H), 7.59-7.64 (m, 1H), 7.95-7.97 (m, 1H). MS(ES+) 512.3【０１１３】
化合物（i-6）の合成
窒素気流下、化合物(i-5)(1.28g,2.49mmol)のトルエン(28mL)溶液に、Ｐｈ２ＰＯＥｔ(0.70g,3.04mmol)を加え、撹拌下３時間還流した。室温まで冷却後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：20g,展開溶媒：クロロホルム／酢酸エチル＝５０／１→１／３)にて精製した。黄色アモルファス状固体として目的とする化合物(i-6)(1.55g,2.44mmol)を粗体収率９７％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 0.18 (s, 6H), 0.93-0.98 (m, 2H), 0.97 (s, 9H), 1.23-1.29 (m, 2H), 2.50-2.54 (m, 1H), 4.05-4.16 (m, 6H), 6.69-6.87 (m, 4H), 7.13-7.58 (m, 12H), 7.81-7.86 (m, 1H), 7.93-7.95 (m, 1H). MS(ES+) 634.2【０１１４】
化合物（i-7）の合成
窒素気流下、ＴＭＰ(0.45g,3.18mmol)のＴＨＦ(10mL)溶液をドライアイス−アセトン浴にて冷却し、１．６Ｍ  ｎ−ＢｕＬｉのｎ−ヘキサン溶液(3.50mL,5.62mmol)を滴下し、−２０℃にて１０分間撹拌した。−７０℃以下まで冷却し、化合物(i-6)(1.55g,2.44mmol)のＴＨＦ(20mL)溶液を滴下後、同温にて３０分間撹拌した。同温にてＤＩＯ(1.00g,3.90mmol)のＴＨＦ(10mL)溶液を滴下し、室温まで徐々に昇温しながら一晩撹拌後、飽和重曹水(20mL)を滴下し、水(40mL)を加え、酢酸エチル(60mL,30mL)にて２回抽出した。得られた有機層を合わせて飽和食塩水(60mL)にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：40g,展開溶媒：トルエン／酢酸エチル＝５０／１→１／１)にて精製した。黄褐色油状物として目的とする化合物(i-7)(569mg,844μmol)を収率３４％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 0.16 (s, 6H), 0.96 (s, 9H), 1.00-1.13 (m, 2H), 1.23-1.35 (m, 2H), 1.40 (s, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.57 (s, 3H), 2.29-2.47 (m, 5H), 4.02-4.07 (m, 2H), 4.10-4.16 (m, 2H), 4.20-4.30 (m, 1H), 4.35-4.45 (m, 1H), 5.68 (dd, J=16.37, 6.04 Hz, 1H), 6.56 (dd, J=16.37, 1.13 Hz, 1H), 6.99-7.03 (m, 2H), 7.10-7.31 (m, 3H), 7.42-7.44 (m, 1H), 7.55-7.60 (m, 1H), 7.93-7.95 (m, 1H). 【０１１５】
化合物（i-8）の合成
窒素気流下、化合物(i-7)(540mg,801μmol)のＴＨＦ(6mL)溶液を氷水浴にて冷却し、１Ｍ  ＴＢＡＦのＴＨＦ溶液(1.60mL,1.60mmol)を滴下し、室温にて４０分間撹拌した。反応液に１０％塩化アンモニウム水溶液(6mL)を加え、酢酸エチル(36mL,10mL)にて２回抽出した。得られた有機層を合わせ、飽和食塩水(10mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：10g,展開溶媒：トルエン／酢酸エチル＝４／１)にて精製した。無色油状物として目的とする化合物(i-8)(294mg,525μmol)を収率６５％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 0.96-1.06 (m, 2H), 1.25-1.32 (m, 1H), 1.37 (s, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.57 (s, 3H), 2.23-2.31 (m, 2H), 2.40-2.48 (m, 3H), 4.02-4.14 (m, 2H), 4.16-4.27 (m, 3H), 4.35-4.45 (m, 1H), 5.62 (dd, J=16.37, 6.04 Hz, 1H), 6.56 (dd, J=16.37, 1.13 Hz, 1H), 6.99-7.05 (m, 2H), 7.10-7.22 (m, 2H), 7.28-7.32 (m, 1H), 7.26-7.32 (m, 1H), 7.42-7.46 (m, 1H), 7.56-7.62 (m, 1H), 7.93-7.95 (m, 1H). MS(ES+) 559.69【０１１６】
化合物（i-9）の合成
窒素気流下、化合物(i-8)(246mg,439μg)の塩化メチレン(4mL)溶液に、Ｎ−メチルイミダゾール(70μL,886μmol)、及びトリエチルアミン(122μL,880μmol)を加え、氷水浴にて冷却し、ｐ−トルエンスルホニルクロリド(169mg,886μmol)のアセトニトリル(1.5mL)溶液を滴下した。室温まで徐々に昇温しながら２時間撹拌した後、氷水浴にて冷却し、飽和重曹水(10mL)、及びクロロホルム(12mL)を加えて分液した。有機層を水(10mL,10mL)にて２回洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：10g,展開溶媒：トルエン／酢酸エチル＝４／１)にて精製した。淡黄色アモルファス状固体として目的とする化合物(i-9)(285mg,399μmol)を収率９０％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 1.00-1.11 (m, 2H), 1.25-1.32 (m, 2H), 1.37 (s, 3H), 1.45-1.46 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.56 (s, 3H), 2.22-2.32 (m, 2H), 2.34-2.43 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 4.26-4.45 (m, 6H), 5.66 (dd, J=16.24, 6.17 Hz, 1H), 6.54 (dd, J=16.37, 1.26 Hz, 1H), 6.88-6.93 (m, 2H), 7.10-7.40 (m, 6H), 7.56-7.62 (m, 1H), 7.86-7.90 (m, 2H), 7.93-7.95 (m, 1H). MS(ES+) 714.4【０１１７】
PTVS1の合成
窒素気流下、化合物(i-9)(201mg,281μmol)の塩化メチレン(2mL)溶液を氷水浴にて冷却し、TFA(2mL,26.9mmol)を滴下した。室温まで徐々に昇温しながら２０時間撹拌した。反応液を氷水浴にて冷却し、飽和重曹水(20mL)にて２回洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：10g,展開溶媒：トルエン／酢酸エチル＝１／１)にて精製した。赤みを帯びた白色アモルファス状固体として目的とする化合物(PTVS1)(100mg,166μmol)を収率５９％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 1.02-1.09 (m, 2H), 1.32-1.35 (m, 2H), 1.61-1.78 (m, 2H), 2.05 (s, 3H), 2.37-2.75 (m, 5H), 4.29-4.32 (m, 2H), 4.41-4.43 (m, 2H), 5.12-5.20 (m, 1H), 5.61 (dd, J=16.24, 6.17 Hz, 1H), 6.71 (dd, J=16.24, 1.38 Hz, 1H), 6.93-6.99 (m, 1H), 7.13-7.41 (m, 8H), 7.58-7.62 (m, 1H), 7.84-7.88 (m, 1H), 7.95-7.97 (m, 1H). MS(ES+) 600.2【０１１８】
（製造例２）放射性標識化合物の製造
下記のスキームに従い、製造例１で得られたPTVS1を標識前駆体化合物として放射性標識を行い、放射性標識化合物である[18F]PTVS2を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化２８】
2012121285.tif 000030
【０１１９】
Ｈｅガス気流下、[18F]ＫＦにKryptofix(登録商標)2.2.2(10.0mg)のアセトニトリル(0.5mL)溶液を加え、減圧加熱して溶媒を留去した。PTVS1(0.5mg)のアセトニトリル(0.05mL)溶液を加え、８０〜１００℃で10分間フッ素化反応を行った。室温に冷却後、ＥｔＯＨ(0.08mL)と１Ｎ  ＮａＯＨ(0.06mL)を加え室温で１５分間反応させた。反応終了後、ＨＰＬＣに導入して分離精製した。目的とする放射性標識化合物([18F]PTVS2)を放射化学的収率７９％、放射化学的純度＞９９％にて得た。【０１２０】
本発明の標識前駆体化合物であるPTVS1を用いて放射性標識を行うことにより、高い収率で高純度の放射性標識化合物である[18F]PTVS2を製造できた。【０１２１】
（製造例３）放射性標識化合物の製造
下記のスキームに従い、製造例１で得られた化合物(i-9)を標識前駆体化合物として放射性標識を行い、放射性標識化合物である[18F]PTVS2を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化２９】
2012121285.tif 000031
【０１２２】
Ｈｅガス気流下、[18F]ＫＦにKryptofix(登録商標)2.2.2(10.0mg)のアセトニトリル(0.5mL)溶液を加え、減圧加熱して溶媒を留去した。化合物(i-9)(0.5mg)のアセトニトリル(0.05mL)溶液を加え、８０〜１００℃で１０分間フッ素化反応を行った。室温に冷却後、ＴＦＡ(0.05mL)溶液を加え、室温で１５分間反応させた。反応終了後、ＨＰＬＣに導入して分離精製した。目的とする放射性標識化合物([18F]PTVS2)を放射化学的収率７０％、放射化学的純度＞９９％にて得た。【０１２３】
本発明の標識前駆体化合物である化合物(i-9)を用いて放射性標識を行うことにより、高い収率で高純度の放射性標識化合物である[18F]PTVS2を製造できた。【０１２４】
（製造例４）PTVS3及びPTVS4の製造
下記のスキームに従い、標識前駆体化合物であるPTVS3とPTVS4とを製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化３０】
2012121285.tif 000032
【０１２５】
化合物（ii-2）の合成
窒素気流中、ＫＭ(20.0g,140mmol)のトルエン(280mL)溶液に化合物(ii-1)(16.6g,140mmol)を加えた。反応容器を水浴(１５℃)に浸し、塩化スズ(IV)(73.3g,281mmol)を滴下した。室温にて３０分間撹拌後、還流温度にて３時間撹拌した。室温まで冷却し、飽和炭酸ナトリウム水溶液(700g)を滴下して析出した固形物を粉砕した。反応液をセライト濾過して得られた濾液を分液し、水層を酢酸エチル(300mL)にて抽出した。合わせた有機層を２０％食塩水(300mL)にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥して溶媒を留去した。紫色固体として目的とする化合物(ii-2)(28.5g)を収率８３．９％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 0.93-0.96 (m, 2H), 1.21-1.29 (m, 2H), 2.59-2.66 (m, 2H), 3.98 (s, 3H), 6.61 (br. s., 2H), 7.34-7.40 (m, 1H), 7.61-7.65 (m, 1H). MS(ES+) 243.2 【０１２６】
化合物（ii-3）の合成
窒素気流中、化合物(ii-2)(28.5g,117mmol)にアセトニトリル(350mL)及び臭化銅(I)(29.5g,206mmol)を加えた。反応容器を水浴(１５℃)に浸し、亜硝酸ｔ−ブチル(18.2g,176mmol)を滴下した。４０℃にて２．５時間撹拌後、室温にて一晩撹拌した。トルエン(200mL)及び５％炭酸水素ナトリウム水溶液(200mL)を加えてセライト濾過し、得られた濾液を分液した。水層をトルエン(200mL)にて抽出し、得られた有機層を合わせ、２０％食塩水(200mL)にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥して溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：300g,展開溶媒：トルエン／酢酸エチル＝２０／１)にて精製した。橙色油状物として目的とする化合物(ii-3)(20.9g)を収率５８．０％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 1.02-1.19 (m, 2H), 1.27-1.36 (m, 2H), 2.03-2.10 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 7.54-7.58 (m, 1H), 7.70-7.74 (m, 1H), 7.91-7.96 (m, 1H), 8.14-8.16 (m, 1H). MS(ES+) 306.1【０１２７】
化合物（ii-4）の合成
窒素気流中、化合物(ii-3)(21.9g,71.8mmol)のトルエン(165mL)溶液を塩氷浴にて冷却した。１．０１Ｍ  ＤＩＢＡＬのトルエン溶液(156mL,158mmol)を滴下し、室温にて１時間撹拌した。塩氷浴にて再度冷却し、エタノール(5mL)及び５％ロッシェル塩水溶液(10mL)を続けて滴下した。室温にて１５％ロッシェル塩水溶液(340mL)及び酢酸エチル(100mL)を加えて分液し、有機層を飽和食塩水(200mL)にて洗浄した。水層をそれぞれ酢酸エチル(100mL)にて抽出し、有機層を合わせて硫酸ナトリウムにて乾燥し、溶媒を留去した。淡黄色固体として化合物(ii-4)(19.4g)を収率９７．５％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 1.02-1.15 (m, 2H), 1.24-1.31 (m, 2H), 2.23 (br. s., 1H), 2.51-2.571 (m, 1H), 5.24 (s, 2H), 7.49-7.53 (m, 1H), 7.63-7.67 (m, 1H), 7.88-7.94 (m, 1H), 8.11-8.13 (m, 1H). MS(ES+) 278.1【０１２８】
化合物（ii-5）の合成
窒素気流中、化合物(ii-4)(7.01g,25.2mmol)に塩化メチレン(50mL)、臭化カリウム(0.60g,5.04mmol)、５％炭酸水素ナトリウム水溶液(30mL)、ＴＢＡＢ(170mg,0.527mmol)、及びＴＥＭＰＯ(473mg,3.02mmol)を加えた。反応液を氷冷し、１０％次亜塩素酸ナトリウム水溶液を滴下して室温撹拌する操作を、原料が消失するまで繰り返した。反応液を分液し、水層をクロロホルム(40mL)にて抽出した。有機層を合わせて硫酸ナトリウムにて乾燥し、溶媒を留去し、得られた固体をｎ−ヘプタンにて洗浄した。淡黄色固体として目的とする化合物(ii-5)(57.9g)を収率８３．３％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 1.01-1.14 (m, 2H), 1.30-1.37 (m, 2H), 3.00-3.07 (m, 1H), 7.57-7.62 (m, 1H), 7.77-7.81 (m, 1H), 7.91-7.93 (m, 1H), 8.28-8.31 (m, 1H), 10.77 (s, 1H). MS(ES+) 276.1【０１２９】
化合物（ii-6）の合成
窒素気流中、６０％水素化ナトリウム(0.73g,18.2mmol)にＴＨＦ(12.5mL)を加えて氷冷した。(R)-ketophosphonate(7.00g,18.3mmol)のＴＨＦ(48mL)溶液を滴下し、同温度にて１時間撹拌した。化合物(ii-5)のＴＨＦ(75mL)溶液を滴下し、同温度にて３０分間撹拌し、室温にて３．５時間撹拌した。反応液を再度氷冷し、飽和塩化アンモニウム水溶液(70mL)を滴下してクエンチした。反応液にＴＨＦ(40mL)及び水(20mL)を加えて分液し、水層を酢酸エチル(40mL)にて抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水(100mL)にて洗浄後、硫酸ナトリウムにて乾燥し、溶媒を留去した。得られた赤褐色油状物の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：100g,展開溶媒：トルエン／酢酸エチル＝１００／１→５０／１)にて精製した。黄色油状物として目的とする化合物(ii-6)(8.57g)を収率９２．５％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCL3-d)δ: 0.10 (s, 3H), 0.11 (s, 3H), 0.86 (s, 9H), 1.01-1.08 (m, 2H), 1.33-1.37 (m, 2H), 2.28-2.34 (m, 1H), 2.59 (dd, J=15.11, 6.04 Hz, 1H), 2.66 (dd, J=15.11, 6.04 Hz, 1H), 2.98 (dd, J=15.61, 5.79 Hz, 1H), 3.07 (dd, J=15.61, 6.55 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 4.74-4.80 (m, 1H), 6.72 (d, J=16.62 Hz, 1H), 7.53-7.58 (m, 1H), 7.68-7.72 (m, 1H), 7.90-7.93 (m, 1H), 7.93 (d, J=16.62 Hz, 1H), 8.17-8.19 (m, 1H). MS(ES+) 532.2【０１３０】
化合物（ii-7）の合成
窒素気流中、化合物(ii-6)(8.57g,16.0mmol)のＴＨＦ(80mL)溶液を氷冷し、酢酸(0.76g,12.6mmol)及びトリエチルアミン(1.21g,11.9mmol)のＴＨＦ(30mL)溶液を加えた。同温度にて１Ｍ  ＴＢＡＦのＴＨＦ溶液(24mL,24mmol)を滴下し、同温度にて１０分間撹拌し、室温にて３時間撹拌した。反応液を再度氷冷し、水(120mL)を加えて酢酸エチル(130mL)にて抽出した。水層を酢酸エチル(50mL)にて抽出し、得られた有機層を合わせ、飽和食塩水(100mL)にて洗浄後、硫酸ナトリウムにて乾燥し、溶媒を留去した。得られた赤褐色油状物の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：110g,展開溶媒：トルエン／酢酸エチル＝５／１)にて精製した。黄色油状物として目的とする化合物(ii-7)(4.03g)を収率５９．８％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCL3-d)δ: 1.04-1.09 (m, 2H), 1.33-1.38 (m, 2H), 2.27-2.37 (m, 1H), 2.66 (d, J=6.29 Hz, 2H), 3.00-3.06 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 4.64-4.68 (m, 1H), 6.72 (d, J=16.62 Hz, 1H), 7.53-7.57 (m, 1H), 7.68-7.72 (m, 1H), 7.90-7.94 (m, 1H), 7.95 (d, J=16.62 Hz, 1H), 8.16-8.19 (m, 1H). MS(ES+) 418.1【０１３１】
化合物（ii-8）の合成
窒素気流中、化合物(ii-7)(4.03g,9.63mmol)のＴＨＦ(30mL)溶液にメタノール(6mL)を加え、ドライアイス−アセトン浴にて冷却した。１．０Ｍ  Ｅｔ２ＢＯＭｅのＴＨＦ溶液(10.8mL,108mmol)を加え、同温度にて２０分間撹拌した。水素化ホウ素ナトリウム(452mg,10.7mmol)を加え、同温度にて１時間撹拌した。酢酸(5.7mL)の酢酸エチル(27mL)溶液を滴下し、同温度にて10分間撹拌後、室温にて3時間撹拌した。５％炭酸水素ナトリウム水溶液(100mL)を加え、酢酸エチル(10mL)にて抽出した。水層を酢酸エチル(40mL)にて抽出し、得られた有機層を合わせ、飽和食塩水(100mL)にて洗浄後、硫酸ナトリウムにて乾燥した。溶媒を留去し、メタノールを加えて濃縮する操作を３回繰り返し、得られた黄色個体をジイソプロピルエーテルにて洗浄した。黄色固体として化合物(ii-8)(2.93g)を収率７２．０％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 1.00-1.05 (m, 2H), 1.26-1.32 (m, 2H), 1.81-1.94 (m, 2H), 2.41-2.47 (m, 1H), 2.59 (d, J=6.29 Hz, 2H), 3.50 (br. s., 1H), 3.74 (br. s., 1H), 3.75 (s, 3H), 4.40-4.48 (m, 1H), 4.73-4.78 (m, 1H), 6.11 (dd, J=16.11, 5.79 Hz, 1H), 6.90 (dd, J=16.24, 1.38 Hz, 1H), 7.49-7.53 (m, 1H), 7.62-7.66 (m, 1H), 7.88-7.90 (m, 1H), 8.14-8.16 (m, 1H). MS(ES+) 420.1【０１３２】
PTVS3の合成
化合物(ii-8)(1.01g,2.40mmol)、（ＢＰｉｎ）２(0.79g,3.12mmol)、炭酸カリウム(0.99g,7.20mmol)、及びPdCl2(dppf)CH2Cl2(0.19g,0.240mmol)を加え、系内をアルゴン置換した。ジメチルスルホキシド(40mL)を加え、脱気及びアルゴン置換を３回実施した。７０℃にて４時間撹拌し、室温に冷却してシリカゲル(4.14g)を加えてセライト濾過した。濾液に酢酸エチル(40mL)を加え、水で２回、飽和食塩水で１回洗浄して硫酸ナトリウムにて乾燥した。溶媒を留去し、メタノール共沸を３回実施後にＯＤＳカラムにて精製した。得られた褐色あめ状物をジイソプロピルエーテル／ｎ−ヘプタン＝１／１にて粉末化し、濾取した。淡褐色固体として目的とする化合物(PTVS3)(0.29g)を収率２５．９％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 0.98-1.01 (m, 2H), 1.23-1.26 (m, 2H), 1.47 (s, 12H),1.79-1.89 (m, 2H), 2.26-2.47 (m, 1H), 2.55-2.57 (m, 2H), 3.31 (br. s., 1H), 3.74 (s, 3H), 3.75 (br. s., 1H), 4.35-4.48 (m, 1H), 4.65-4.78 (m, 1H), 6.05 (dd, J=15.86, 5.54 Hz, 1H), 7.21 (dd, J=16.24, 1.38 Hz, 1H), 7.39-7.43 (m, 1H), 7.55-7.59 (m, 1H), 7.89-7.94 (m, 2H). MS(ES+) 467.3【０１３３】
PTVS4の合成
PTVS3(36.9mg,0.0789mmol)、１−フルオロ−４−ヨードベンゼン(26.2mg,0.118mmol)、炭酸ナトリウム(25.0mg,0.236mmol)、及びPd(PPh3)4(9.1mg,0.00789mmol)を加え、系内をアルゴン置換した。ジメチルスルホキシド(0.5mL)を加え、脱気及びアルゴン置換を３回実施した。８０℃にて８時間撹拌し、室温に冷却して水を加えた。酢酸エチルにて抽出し、水及び飽和食塩水で洗浄して硫酸ナトリウムにて乾燥した。溶媒を留去し、ＯＤＳカラムにて精製した。あめ状物として目的とする化合物(PTVS4)(2.3mg)を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 1.01-1.10 (m, 2H), 1.22-1.37 (m, 5H), 1.41-1.54 (m, 1H), 2.37-2.51 (m, 3H), 3.74 (s, 3H), 4.10-4.16 (m, 1H), 4.385-4.43 (m, 1H), 5.58 (dd, J=16.24, 6.17 Hz, 1H), 6.64 (dd, J=16.11, 1.26 Hz, 1H), 7.14-7.35 (m, 6H), 7.57-7.61 (m, 1H), 7.94-7.96 (m, 1H). MS(ES+) 436.3【０１３４】
（製造例５）PTVS4の製造
PTVS3(20mg,0.0429mmol)、１−フルオロ−４−ヨードベンゼン(14.2mg,0.0641mmol)、炭酸ナトリウム(13.5mg,0.128mmol)、及びPd(PPh3)4(3.4mg,0.00427mmol)を加え、系内をアルゴン置換した。ジメチルスルホキシド(2mL)を加え、脱気及びアルゴン置換を３回実施した。マイクロウェーブ照射下で１２０℃にて１０分間反応させた。LC-MSを用いて反応の進行を確認したところ、目的とする化合物(PTVS4)を収率１０％にて得た。マイクロウェーブ照射下でカップリング反応を行うことにより、マイクロウェーブを照射しない場合と比較して極めて短時間で目的とする化合物(PTVS4)を得ることができた。【０１３５】
（製造例６）PTVS5及びPTVS6の製造
下記のスキームに従い、PTVS5及びPTVS6を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化３１】
2012121285.tif 000033
【０１３６】
化合物（iii-2）の合成
窒素気流下、化合物(iii-1)(540mg,1.32mmol)のＴＨＦ(10mL)溶液を氷水浴にて冷却した。水素化リチウムアンモニウム(99.3mg、2.61mmol)を３回に分けて加え、室温にて３時間撹拌した。反応液を氷水浴にて冷却し、水(110μL)、１５％水酸化ナトリウム水溶液(110μL)、水(330μL)を順次滴下した。酢酸エチル(16mL)を加えてセライト濾過し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をイソプロピルエーテル／ヘプタン＝１／１溶液(15mL)にて洗浄後、濾取、乾燥した。薄茶色固体として目的とする化合物(iii-2)(401mg,1.05mmol)を粗体収率７９％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 1.09-1.12 (m, 2H), 1.36-1.41 (m, 2H), 1.62 (br.s., 1H), 2.59-2.64 (m, 1H), 4.80 (s, 2H), 5.17 (s, 2H), 7.12-7.98 (m, 13H).【０１３７】
化合物（iii-3）の合成
窒素気流下、化合物(iii-2)(1.30g,3.41mmol)の塩化メチレン(14mL)懸濁液に四臭化炭素(2.28g,6.87mmol)を加えた。氷水浴にて冷却し、PPh3(1.79g,6.82mmol)の塩化メチレン(10mL)溶液を滴下した。氷水浴にて２０分間撹拌した後、飽和重曹水(20mL)を滴下し、クロロホルム(20mL,10mL)にて２回抽出した。得られた有機層を合わせ、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：50g,展開溶媒：クロロホルム／ｎ−ヘキサン＝７／１)にて精製した。薄茶色固体として目的とする化合物(iii-3)(1.26g,2.83mmol)を収率８２％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 1.11-1.16 (m, 2H), 1.36-1.40 (m, 2H), 2.50-2.55 (m, 1H), 4.64 (s, 2H), 5.17 (s, 2H), 7.15-7.96 (m, 13H).【０１３８】
化合物（iii-4）の合成
窒素気流下、化合物(iii-3)(1.25g,2.81mmol)のトルエン(26mL)溶液に、Ph2POEt(3.09g,13.4mmol)を加え、撹拌下３．５時間還流した。室温まで冷却し、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をイソプロピルエーテル(30mL)で洗浄後、濾取、乾燥した。赤みを帯びた白色固体として目的とする化合物(iii-4)(1.52g,2.69mmol)を粗体収率９５％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 0.93-0.96 (m, 2H), 1.22-1.26 (m, 2H), 2.68-2.74 (m, 1H), 4.09 (d, J=14.35 Hz, 2H), 5.15 (s, 2H), 6.68-6.70 (m, 2H), 6.91-6.93 (m, 2H), 7.13-7.16 (m, 1H), 7.21-7.58 (m, 17H), 7.94-7.96 (m, 1H).【０１３９】
化合物（iii-5）の合成
窒素気流下、ＴＭＰ(148mg,1.04mmol)のＴＨＦ(4mL)溶液をドライアイス−アセトン浴にて冷却し、１．６Ｍ  ｎ−ＢｕＬｉのｎ−ヘキサン溶液(1.15mL,1.84mmol)を滴下し、−２０℃にて１０分間撹拌した。−７０℃以下まで冷却し、化合物(iii-4)(456mg,806μmol)のＴＨＦ(14mL)溶液を滴下後、同温にて３０分間撹拌した。同温にてＤＩＯ(354mg,1.37mmol)のＴＨＦ(3mL)溶液を滴下し、室温まで徐々に昇温しながら１５．５時間撹拌後、飽和重曹水(6mL)を滴下し、酢酸エチル(30mL)にて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水(6mL)にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：35g,展開溶媒：トルエン／酢酸エチル＝１５／１→２／３)にて精製した。無色油状物として目的とする化合物(iii-5)(226mg,343μmol)を収率４６％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 1.01-1.12 (m, 2H), 1.25-1.35 (m, 2H), 1.38-1.41 (m, 5H), 1.46 (s, 9H), 1.48 (s, 3H), 2.25-2.45 (m, 3H), 4.21-4.42 (m, 2H), 5.16 (s, 2H), 5.66 (dd, J=16.24, 6.17 Hz, 1H), 6.57 (dd, J=16.24, 1.13 Hz, 1H), 7.06-7.58 (m, 12H), 7.93-7.95 (m, 1H). MS(ES+) 605.76【０１４０】
化合物（iii-6）の合成
窒素気流下、化合物(iii-5)(701mg,1.15mmol)の塩化メチレン(1mL)溶液を氷水浴にて冷却し、ＴＦＡ／チアニソール＝１０／１(6mL)溶液を滴下した。室温まで徐々に昇温しながら１７時間撹拌した。氷水浴にて冷却した飽和重曹水(90mL)に反応溶液を滴下し、酢酸エチル(30mL,25mL,30mL)にて３回抽出した。得られた有機層を合わせ飽和食塩水(50mL)にて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：10g,展開溶媒：クロロホルム／酢酸エチ＝１／１→０／１)にて精製した。淡黄色アモルファス状固体として化合物(iii-6)(280mg,697μmol)を収率６０％にて得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 1.01-1.07 (m, 2H), 1.21-1.23 (m, 2H), 1.57-1.68 (m, 2H), 2.31-2.65 (m, 4H), 3.47 (br.s., 1H), 5.05-5.21 (m, 1H), 5.71 (dd, J=16.24, 6.55 Hz, 1H), 6.65 (dd, J=16.24, 1.13 Hz, 1H), 6.88-7.87 (m, 8H), 9.66 (br.s., 1H). MS(ES+) 401.45【０１４１】
PTVS5の合成
窒素気流下、２−フルオロエタノール(1.00g,15.6mmol)のクロロホルム(10mL)溶液にトリエチルアミン(1.80mL,12.8mmol)を加え、氷水浴にて冷却し、ＭｓＣｌ(1.00mL,12.8mmol)を加えた。室温にて１時間撹拌後、濃縮し、酢酸エチル(50mL)、水(40mL)を加え分液した。得られた有機層を水(40mL)、飽和重曹水(30mL)にて順次洗浄し、流酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。無色油状物としてメタンスルホン酸２−フルオロエチル(1.75g,12.3mmol)を粗体収率９６％にて得た。【０１４２】
窒素気流下、化合物(iii-6)(126mg,314μmol)のＤＭＦ(1.9mL)溶液に炭酸カリウム(86.6mg,626μmol)、メタンスルホン酸２−フルオロエチル(170μL,956μmol)を順次加えた。４０℃の水浴にて２１．５時間撹拌した。反応液に酢酸エチル(4mL)を加え、水(4mL)、飽和食塩水(4mL)にて順次洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥、濾過した後、減圧下４０℃にて溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：１０g，展開溶媒：トルエン／酢酸エチル＝１／２×２回)にて精製した。無色油状物として目的とする化合物（PTVS5）(28．1mg，62.8μmol)を収率２０％にて得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d)δ: 0.98-1.15 (m, 2H), 1.18-1.43 (m, 2H), 1.52-1.72 (m, 2H), 1.76-1.86 (m, 1H), 1.96 (br.s., 1H), 2.32-2.42 (m, 1H), 2.55 (ddd, J=17.69, 4.60, 1.38 Hz, 1H),2.70 (dd, J=17.75, 4.91 Hz, 1H), 4.25-4.38 (m, 2H), 4.70-4.90 (m, 2H), 5.14-5.19 (m, 1H), 5.63 (dd, J=16.24, 6.17 Hz, 1H), 6.70 (dd, J=16.24, 1.38 Hz, 1H), 6.98-7.08 (m, 2H), 7.12-7.20 (m, 2H), 7.29-7.34 (m, 1H), 7.37-7.46 (m, 1H), 7.57-7.61 (m, 1H), 7.91-8.00 (m, 1H). MS(ES+) 448.2【０１４３】
PTVS6の合成
PTVS5(19.2mg,42.9μmol)のエタノール(80μL)溶液に１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液(65μL,65μmol)を加え、室温にて１５分間撹拌した。水(80μL)を加えた後、濃縮し、水(0.2mL)、０．１Ｍ塩化カルシウム水溶液(236μL,23.6μmol)を順次加え、室温にて３０分間撹拌した。析出固体を濾取し、水(5mL)にて洗浄した後、減圧下４０℃にて乾燥した。淡黄色固体として目的とする化合物(PTVS6)(12.7mg,13.1μmol)を収率６１％にて得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 0.99-1.05 (m, 2H), 1.12-1.23 (m, 3H), 1.38-1.46 (m, 2H), 1.83-1.91 (m, 1H), 1.98-2.05 (m, 1H), 2.52-2.56 (m, 1H), 3.58-3.63 (m, 1H), 4.09-4.17 (m, 1H), 4.26-4.42 (m, 2H), 4.73-4.87 (m, 2H), 5.66 (dd, J=16.11, 6.17 Hz, 1H), 6.48 (dd, J=16.11, 1.38 Hz, 1H), 7.02-7.20 (m, 4H), 7.30-7.38 (m, 2H), 7.59-7.64 (m, 1H), 7.78-7.86 (m, 1H). MS(ES+) 466.1【０１４４】
［肝取り込み評価］
PTVS6について、トランスポータ（ＯＡＴＰ１Ｂ１，ＯＡＴＰ１Ｂ３）による肝取り込みの評価を行った。なお、コントロールとしては、下記のピタバスタチンのカルシウム塩（以下、「pitavastatin」という）を準備した。
【化３２】
2012121285.tif 000034
【０１４５】
ＯＡＴＰ１Ｂ１，ＯＡＴＰ１Ｂ３安定発現ＨＥＫ２９３細胞をcollagen type Iでコートした12well dish上に培養した。実験開始２４時間前に、培地（DMEM(low glucose)）を、５ｍＭ sodium butyrate入り培地に置換することによって発現細胞におけるトランスポータの発現を誘導した。実験開始１５分前に、培地を取り除いた後、３７℃に加温したKrebs-Henseleit buffer（KH buffer；118mM NaCl,23.8mM NaHCO3,4.8mM KCl,1.0mM KH2PO4,1.2mM MgSO4,12.5mM HEPES,5.0mM glucose,1.5mM CaCl2、pH7.4）に置換して２度細胞を洗浄した後、３７℃に加温したKH bufferと共に、プレインキュベーションを行った。次に、KH bufferを取り除き、基質（pitavastatin又はPTVS6）（tracer条件：final 0.5mM,excess条件：100mM）を含むKH bufferを細胞の播種されたwellに入れることで、取り込みを開始させた。一定時間、３７℃条件下で培養後、KH bufferを取り除き、氷冷KH bufferで細胞を３回洗浄した。その後、0.2N NaOH  500μLをwellに入れて細胞を溶解後、2N HCl  50μLで中和したサンプルをＬＣ／ＭＳにて測定を行った。その結果を図１のグラフに示す。【０１４６】
図１は、肝取り込みトランスポータ（ＯＡＴＰ１Ｂ１，ＯＡＴＰ１Ｂ３）によるpitavastatin及びPTVS6の輸送の時間推移及び飽和性を示すグラフであって、Ａ及びＢがpitavastatin、Ｃ及びＤがPTVS6の結果を示す。図１に示すように、tracer条件下においては、pitavastatin及びPTVS6はいずれも、時間依存的にＯＡＴＰ１Ｂ１，ＯＡＴＰ１Ｂ３発現ＨＥＫ２９３細胞に取り込みが観察された(Ａ及びＣ：1B1 tracer、Ｂ及びＤ：1B3 tracer)。また、その取り込みは、対照細胞(mock)では観察されなかった。これらのことから、この細胞内取り込みは、ＯＡＴＰ１Ｂ１又はＯＡＴＰ１Ｂ３を介した取り込みであることが確認された。さらに、図１に示すように、excess条件下においては、pitavastatin及びPTVS6はいずれも、その取り込みが低下したことから(Ａ及びＣ：1B1 excess、Ｂ及びＤ：1B3 excess)、この輸送は飽和性を示すことが明らかとなり、pitavastatin及びPTVS6の取り込みがトランスポータを介した取り込みであることをさらに支持された。また、PTVS6の輸送特性は、pitavastatinの輸送特性と非常に類似していた。したがって、PTVS6の輸送は、ＯＡＴＰ１Ｂ１，ＯＡＴＰ１Ｂ３の輸送能力を反映するものになることが示唆された。【０１４７】
［体内分布実験］
[18F]PTVS2を用いてラット及びマウスの体内分布実験を行った。[18F]PTVS2(１００μＣｉ／１００μＬ／匹)を無麻酔の６週齢ＳＤラット（雄性）に静脈注射（尾静脈）により投与した。投与２分後、５分後、１０分後、１５分後、３０分後、６０分後に各臓器を摘出した（ｎ＝５）。各臓器の放射能を測定し、各臓器あたりの放射能の集積量（%dose/organ）を算出した。その結果の一例を図２に示す。【０１４８】
ラットに替えてマウス（ddY系雄性、１２週齢）を用い、[18F]PTVS2の投与量を２０μＣｉ／１００μＬ／匹とした以外は、同様に体内分布実験を行った（ｎ＝５）。その結果の一例を表１及び図３に示す。【０１４９】
【表１】
2012121285.tif 000035
【０１５０】
図２及び３は、各臓器への[18F]PTVS2の集積の経時変化の一例を示すグラフであって、図２がラットの結果を示し、図３がマウスの結果を示す。図２及び３に示すように、ラット及びマウスのいずれにおいても、[18F]PTVS2は、投与後速やかに肝臓に移行し、その後腸に移行して排出されていることが確認できた。また、その他の臓器への移行は、腎臓以外はほとんど確認されなかった。【０１５１】
［ＰＥＴ撮像］
[18F]PTVS2を用いて下記の条件でＰＥＴ撮像を行った。その結果の一例を図４に示す。
投与量：１２２μＣｉ
６週齢ＳＤラット（雄性）
撮像装置：ｅＸｐｌｏｒｅ  Ｖｉｓｔａ（製品名、ＧＥ社製）
撮像方法：Ｓｔａｔｉｃ  Ｓｃａｎ、６０秒ごと１フレーム
リコンストラクション：２ＤＯＳＥＭ（Ｄｙｎａｍｉｃ  ＯＳ−ＥＭ）【０１５２】
図４に示す画像は、いずれもcoronal画像であって、左から順に投与１分後、４分後、及び２０分後の画像である。図４に示すように、体内分布実験の結果と同様に、[18F]PTVS2は、投与後速やかに肝臓に移行し、その後腸に移行し排出されていることが確認できた。また、その他の臓器への移行は、腎臓以外はほとんど確認されなかった。【０１５３】
以上に示すように、PTVS6及び[18F]PTVS2の輸送特性は、pitavastatinの輸送特性と非常に類似していた。また、pitavastatinは、ヒト肝細胞において主にＯＡＴＰ１Ｂ１によって取り込まれるとの報告がなされている。このため、PTVS6及び[18F]PTVS2についても同様に、ヒト肝細胞において主にＯＡＴＰ１Ｂ１によって取り込まれうることが示唆された。【０１５４】
［代謝安定性の評価］
PTVS6について、ヒト肝ミクロソームを用いたin vitro実験による代謝安定性の評価を行った。なお、in vitro実験による代謝安定性の評価は、既に報告されている方法(Obach et al. Drug Metab Dispos 30:831-837(2002))に準じる形で行った。【０１５５】
まず、基質として、PTVS6、Pitavastatin、及びCYP3A4基質であるmidazolamを準備し、各基質（final 3 μM）と、ヒト肝ミクロソーム（final 1 mg protein/mL）と、3.3mM MgCl2を含む100 mM potassium phosphate buffer(pH 7.4)とを混合し、5分間37℃でプレインキュベーションを行った。ついで、代謝反応に必要な駆動力となるNADPHをfinal 1.3mMになるように添加して最終的に500μLとし、37℃でインキュベーションを行いつつ、NADPH添加直後、２分後及び１０分後にそれぞれ25μLずつサンプルを採取した。得られたサンプルを、測定のための内部標準を含むAcetonitrile 25μLと混合した後、遠心分離によるタンパク質除去を行い、上清を採取し、LC/MS/MSでサンプル中に残存する基質量を測定した。その結果を図５のグラフに示す。【０１５６】
図５は、代謝反応開始(NADPH添加)から１０分後までの間におけるサンプル中に残存する基質の割合を示すグラフであって、縦軸が添加した量に対するサンプル中に残存する基質の割合を示し、横軸が時間を示す。図５のグラフに示すように、CYP3A4基質であってヒトにおいてよく代謝されることが知られているmidazolamは、過去の報告同様に、代謝反応開始から10分の間に基質残存率が数％にまで減少した。一方、PTVS6及びPitavastatinはいずれも代謝反応開始から１０分の間に基質の減少はほとんど見られなかった。【０１５７】
図５のグラフに示すように、ヒトにおいてよく代謝されるmidazolamについては、in vitro実験系においても極めて速やかに代謝されていたことから、本実験系がヒトにおける代謝反応を反映するものであることが確認された。そして、この実験系において、PTVS6及びpitavastatinは共に代謝的に極めて安定であることが示された。したがって、PTVS6及びpitavastatinは、PETプローブとしての理想的な性質の一つである親化合物としての安定性が担保されていることが示唆された。このことから、PTVS6及びpitavastatinを放射性標識して得られるPETプローブは、代謝的に安定であり、該PETプローブを用いたイメージングにより得られた放射能の定量値がこれらの化合物の量を主に反映しうるという極めて理想的な性質を有していることが示唆された。【０１５８】
以上の結果により、[18F]PTVS2を用いた肝内動態をＭＤ及び/又は臨床投与量で行うことによって、[18F]PTVS2を用いて得られたin vivoパラメータと、ヒト遺伝子発現細胞、ヒト凍結肝細胞、ヒト胆管側膜ベシクル、及び／又はヒト肝ミクロソームを用いて得られた輸送・代謝にかかるin vitroパラメータとに基づき、ヒト生体内の肝臓における被験薬物濃度の時間推移を予測するモデルを構築することが可能になることが示唆された。さらには、薬物の肝取り込み／排泄過程の個体間変動要因としての遺伝子多型及び／又は薬物間相互作用がある場合の薬物動態の定量的な変動予測が可能になることが示唆された。【０１５９】
（製造例７）PTVS7、PTVS5及びPTVS8の製造
下記のスキームに従い、PTVS7,PTVS5及びPTVS8を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化３３】
2012121285.tif 000036
【０１６０】
化合物（vi-2）の合成
アルゴン気流下、化合物(iv-1)(2.2g,5.4mmol)の塩化メチレン(20ml)/メタノール(20ml)溶液にパラジウム炭素(2.2g)を加えた後、反応容器内を水素で置換した。水素気流下、室温で１時間激しく攪拌した。攪拌後、不溶物をHyflo Super-Celによる濾過で除去し、酢酸エチルで洗浄後、溶媒を留去し得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:ヘキサン=1:4)で精製し、無色固体として目的とする化合物(iv-2)(1.5g,87%)を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ: 7.96 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.64 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.35 (br dd, J = 8.0 Hz, 7.4 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.91 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 2.16 (tt, J = 8.0 Hz, 4.6 Hz, 1H), 1.33 (ddd, J = 4.6 Hz, 4.6 Hz, 1.7 Hz, 1H), 1.03 (ddd, J = 6.3 Hz, 6.3 Hz, 2.9 Hz, 1H); MS (EI+, 70 eV): m/z: 319 (M+, 68), 293 (100), 260 (81), 234 (36); HRMS calcd for C20H17NO3 (M+): 319.1208, found 319.1200.【０１６１】
化合物（vi-3）の合成
アルゴン気流下、化合物(iv-2)(1.5mg,4.7mmol)及び2-Fluoroethyl 4-methylbenzenesulfonate(986μl,5.6mmol)のN,N,-dimethylformamide(15ml)溶液に炭酸カリウム(1.3g,9.3mmol)を室温攪拌下にて加え、同温にて１０分攪拌後、７０℃にて２０時間攪拌した。反応終了後、蒸留水を加え、ジエチルエーテルで４回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:ヘキサン=1:5)で精製し、淡黄色固体として目的とする化合物(iv-3)(1.3g,76%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 7.97 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.36 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.04 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 4.81 (dt, JF = 47.3 Hz, J = 4.1 Hz, 2H), 4.30 (dt, JF = 27.6 Hz, J = 4.1 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 2.18 (tt, J = 8.2 Hz, 4.6 Hz, 1H), 1.36 (ddd, J = 4.6 Hz, 4.6 Hz, 1.7 Hz, 1H), 1.05 (ddd, J = 6.3 Hz, 6.3 Hz, 2.9 Hz, 1H); MS (EI+, 70 eV): m/z: 365 (M+, 99), 337 (100), 322 (34), 306 (57), 269 (22); HRMS calcd for C22H20FNO3(M+): 365.1427, found 365.1424【０１６２】
化合物（vi-5）の合成
アルゴン気流下、lithium aluminum hydride(270mg,98%,7.1mmol)のテトラヒドロフラン(15ml)懸濁液に化合物(iv-3)(1.3g,3.55mmol)のテトラヒドロフラン(10.0ml)溶液を０℃攪拌下にて加え、同温にて１時間撹拌後、室温で２．５時間攪拌した。反応終了後、ジエチルエーテルで希釈し、飽和硫酸ナトリウム水溶液を０℃攪拌下でゆっくり加え、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後、溶媒を留去し無色固体の粗精製物として化合物(iv-4)(1.2g)を得た。【０１６３】
アルゴン気流下、化合物(iv-4)(1.2g)及び四臭化炭素(2.35g,7.1mmol)の塩化メチレン(12ml)溶液にtriphenylphosphine(1.9g,7.1mmol)の塩化メチレン溶液(6.0 ml)を０℃攪拌下にて加え、同温下３０分攪拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:ヘキサン=1:10)で精製し、淡黄色固体として目的とする化合物(iv-5)(1.1g,76%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 7.95 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.65 - 7.59 (m, 1H), 7.37 - 7.30 (m, 4H), 7.11 (dd, J = 8.8 Hz, 2.7 Hz, 1H), 4.84 (dt, JF = 47.3 Hz, J = 3.9 Hz, 2H), 4.71 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.34 (dt, JF = 27.8 Hz, J = 4.1 Hz, 2H), 2.52 (tt, J = 8.0 Hz, 4.0 Hz, 1H), 1.38 - 1.37 (m, 2H), 1.15 - 1.05 (m, 2H); MS (EI+, 70 eV): m/z: 399 (M+, 5.7), 355 (26), 320 (100), 273 (17), 244 (21); HRMS calcd for C21H19BrFNO (M+): 399.0634, found 399.0637【０１６４】
化合物（vi-6）の合成
アルゴン気流下、化合物(iv-5)(1.1g,2.7mmol)のトルエン(20ml)溶液にethoxydiphenylphosphine(2.9ml,13.6mmol)を室温攪拌下にて加え、１２０℃にて２０時間攪拌した。溶媒を留去し得られた油状物へジエチルエーテルを加え、析出した結晶をジエチルエーテルで洗浄し、無色結晶として目的とする化合物(vi-6)(1.3g,91%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 7.93 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.55 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.46 (qt, J = 7.0 Hz, 1.5 Hz, 1H), 7.40 - 7.30 (m, 9H), 7.22 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.83 (dt, JF = 47.3 Hz, J = 4.0 Hz, 2H), 4.28 (dt, JF = 27.9 Hz, J = 4.1 Hz, 2H), 4.08 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.64 (tt, J = 8.0 Hz, 4.0 Hz, 1H), 1.23 - 1.20 (m, 2H), 0.93 - 0.90 (m, 2H); MS (EI+, 70 eV): m/z: 521 (M+, 50), 396 (100), 320 (41), 280 (23), 244 (21), 201 (37); HRMS calcd for C33H29FNO2P (M+): 521.1920, found 521.1927【０１６５】
PTVS7の合成
アルゴン気流下、2,2,6,6-tetramethylpiperidine(TMP)(212μl,1.2mmol)のテトラヒドロフラン(4.0 ml)溶液に、n-butyllithium(2.69M in hexane,2.2mmol,820μl)を−７８℃攪拌下にて滴下し、同温にて１０分攪拌後、０℃で１時間攪拌した。攪拌後、化合物(vi-6)(500mg,0.96mmol)のテトラヒドロフラン(15ml)溶液を−７８℃攪拌下にて２０分間かけて滴下し、同温にて３０分攪拌した。撹拌後、DIO(421mg,1.63mmol)のテトラヒドロフラン溶液(4.0ml)を−７８℃攪拌下にて滴下し、自然昇温させ、室温下で２４時間攪拌した。反応終了後、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:ヘキサン=1:7)で精製し、無色アモルファス状固体として目的とする化合物(PTVS7)(320mg,59%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) (major : minor = 9 : 1) δ; 8.00 - 7.85 (m, 1H), 7.61 - 7.55 (m, 1H), 7.47 - 7.27 (m, 2H), 7.15 (dd, J = 23 Hz, 7.7 Hz, 2H), 7.04 - 6.96 (m, 2H), 6.55 (dd, J = 16.3 Hz, 1.1 Hz, 0.9H), 6.42 (d,  = 11.4 Hz, 0.1H), 5.64 (dd, J = 16.3 Hz, 6.0 Hz, 1H), 4.88 - 4.75 (m, 2H), 4.37 - 4.21 (m, 4H), 2.46 - 2.17 (m, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.41 - 1.25 (m, 9H), 1.08 - 0.93 (m, 3H) 13C-NMR (100 MHz, CDCl3)δ170.1, 160.6, 157.8, 146.7, 145.0, 137.5, 131.6, 131.2, 130.1, 129.1, 128.7, 128.5, 126.2, 125.1, 114.5, 114.1, 98.7, 82.5, 81.2, 80.5, 69.9, 67.2, 65.8, 42.6, 36.4, 29.9, 28.0 (3),19.7, 16.0, 15.2, 10.4, 10.1; MS (EI+, 70 eV): m/z: 561 (M+, 6.7), 490 (17), 430 (36), 388 (31), 332 (100), 319 (82); HRMS calcd for C34H40FNO5(M+): 561.2890, found 561.2882【０１６６】
なお、DIOは下記スキームに従い合成した。
【化３４】
2012121285.tif 000037
まず、アルゴン気流下、oxalyl chloride(813μl,9.6mol)の塩化メチレン(10ml)溶液に−７８℃攪拌下にてDimethyl sulfoxide(1.64ml,23.0mol)をゆっくり滴下し、同温にて３０分撹拌した。撹拌後、カネカシントン(500mg,1.92mol)の塩化メチレン(2.0ml)溶液を−７８℃攪拌下にて滴下し、１時間攪拌した。攪拌後、Triethylamine(5.4ml,38.4mol)を滴下し、１時間攪拌した。反応終了後、−２５℃まで自然昇温させ、−２５℃攪拌下で２０％食塩水(6.0ml)を滴下し、室温まで昇温した。その後、２０%食塩水(6.0ml)でニ回洗浄し、溶媒を留去し得られた淡黄色油状物にイソプロピルエーテル(12ml)を加え、セライト濾過を行い、濾液を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:ヘキサン=1:2)で精製し、無色針状結晶として目的とする化合物（DIO）(448mg,90%)を得た。【０１６７】
PTVS5の合成
アルゴン気流下、PTVS7(80mg,0.14mmol)の塩化メチレン(2.0ml)溶液にトリフルオロ酢酸(1.0ml)を０℃攪拌下にて加え、室温下で１時間攪拌した。反応終了後、反応液を氷冷下で飽和炭水素ナトリウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し得られた粗生成物を分取薄層クロマトグラフィー(酢酸エチル:トルエン=4:1)で精製し、淡黄色油状物として目的とする化合物（PTVS5）(45mg,70%)を得た。【０１６８】
PTVS8の合成
PTVS5(45mg,100μmol)のメタノール(1.0 ml)溶液に２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液(1.0ml,1.0mmol)を加え、室温にて３０分間撹拌した。反応終了後、HPLCで精製を行い、目的とする化合物(PTVS8)(45mg,100%)を得た。【０１６９】
（製造例８）標識前駆体化合物の製造
下記のスキームに従い、標識前駆体化合物であるPTVS9を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化３５】
2012121285.tif 000038
【０１７０】
化合物（i-3）の合成
アルゴン気流下、化合物(i-2)(2.1g,6.6mmol)及び(2-Bromoethoxy)-tert-butyldimethylsilane(1.7ml,7.9mmol)のN,N,-dimethylformamide(30ml)溶液に炭酸カリウム(1.8g,13.1mmol)を室温攪拌下にて加え、同温にて１０分攪拌後、７０℃にて１３時間攪拌した。反応終了後、蒸留水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:ヘキサン=1:10)で精製し、無色油状物として目的とする化合物(i-3)(2.5g,79%)を得た。【０１７１】
化合物（i-4）の合成
アルゴン気流下、lithium aluminum hydride(400mg,98%,10.5 mmol)のテトラヒドロフラン(25ml)懸濁液に化合物(i-3)(2.5g,5.2mmol)のTHF(15.0ml)溶液を０℃攪拌下にて加え、室温で５時間攪拌した。反応終了後、ジエチルエーテルで希釈し、飽和硫酸ナトリウム水溶液を０℃攪拌下でゆっくり加え、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後、溶媒を留去し無色固体の粗精製物として化合物(i-4)(2.4g)を得た。【０１７２】
化合物（i-5）の合成
アルゴン気流下、化合物(i-4)(2.4g)及び四臭化炭素(3.6g,10.9mmol)の塩化メチレン(20ml)溶液にtriphenylphosphine(2.9g,10.9mmol)の塩化メチレン溶液(10ml)を０℃攪拌下にて加え、同温下で２５分攪拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:ヘキサン=1:15)で精製し、淡黄色固体として目的とする化合物(i-5)(1.9g,69%)を得た。【０１７３】
化合物（i-6）の合成
アルゴン気流下、化合物(i-5)(1.9g,3.8mmol)のトルエン(35ml)溶液にethoxydiphenylphosphine(4.1ml,19.9mmol)を室温攪拌下にて加え、１２０℃にて４．５時間攪拌した。溶媒を留去し得られた油状物へジエチルエーテルを加え、析出した結晶をジエチルエーテルで洗浄し、無色結晶として化合物(i-6)(2.2g,92%)を得た。【０１７４】
化合物（i-7）の合成
アルゴン気流下、2,2,6,6-tetramethylpiperidine (TMP)(698μl,4.1mmol)のテトラヒドロフラン(20ml)溶液にn-butyllithium(2.69M in hexane,7.3mmol,2.7ml)を−７８℃攪拌下にて滴下し、同温にて１０分攪拌後、０℃で１時間攪拌した。攪拌後、化合物(i-6)(4.2g,18.5mmol)のテトラヒドロフラン(50ml)溶液を−７８℃攪拌下にて１５分かけて滴下した。同温にて４５分攪拌後、DIO(1.4g,5.4mmol)のテトラヒドロフラン(15ml)溶液を−７８℃攪拌下にて滴下し、室温まで自然昇温させた後、１２時間攪拌した。反応終了後、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:ヘキサン=1:20)で精製し、無色アモルファス状固体として目的とする化合物(i-7)(1.0g,47%)を得た。【０１７５】
化合物（i-8）の合成
アルゴン気流下、化合物(i-6)(1.0g,1.5mmol)のTHF(15ml)溶液にフッ化テトラブチルアンモニウム1.0M テトラヒドロフラン溶液(1.8ml,1.8mmol)を０℃攪拌下にて加え、室温下で１．５時間攪拌した。反応終了後、反応液に蒸留水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し、無色油状物として目的とする化合物(i-8)(827mg)を得た。【０１７６】
PTVS9の合成
アルゴン気流下、化合物(i-8)(827mg,1.5mmol)及びtriethylamine(414μl,3.0mmol)の塩化メチレン(15ml)溶液に、塩化p-トルエンスルホン酸(329mg,1.8mmol)及びN,N-Dimethylaminopyridine(18mg,0.15mmol)を０℃攪拌下にて加え、室温下で１８時間攪拌した。反応終了後、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:ヘキサン=1:10)で精製し、目的とする化合物(PTVS9)(900mg,85%)を得た。【０１７７】
［毒性試験］
常法に従って、マウス（雄性、５週齢）に、製造例７で得られた化合物(PTVS8)を尾静脈内に１回投与した。投与用量は174μg/kg又は400μg/kgとした。コントロールには媒体（0.1％ Tween80添加生理食塩水）のみを投与した。その結果、いずれの投与郡も実験期間を通じて体重が順調に推移し、血液学的検査、血液生化学的検査、器官重量、病理解剖検査、及び病理組織学的検査においても投与に起因した変化は認められなかった。また、局所刺激性（静脈刺激性）は認められなかった。【０１７８】
（製造例１１）PTVS4の製造
下記表３に示す条件１及び２の触媒及び溶媒を用いた以外は、下記のスキームに従い、製造例５と同様にして化合物(PTVS3)から目的とする化合物(PTVS4)を製造した。製造例４と同様にして化合物(PTVS3)から目的とする化合物(PTVS4)を製造した（表３の条件３）。下記表３に示す条件４の触媒及び溶媒を用い、攪拌温度を９０℃、攪拌時間を７時間とした以外は、製造例４と同様にして化合物(PTVS3)から目的とする化合物(PTVS4)を製造した。
【化３６】
2012121285.tif 000039
【０１７９】
【表２】
2012121285.tif 000040
【０１８０】
得られた化合物の収率を下記表３に示す。表３に示すように、触媒としてPdCl2(dppf)CH2Cl2/Pd(PPh3)4を用いると、もっとも高い収率でPTVS4が製造できた。【０１８１】
（製造例１１）放射性標識化合物の製造
下記のスキームに従い、製造例４で得られた化合物(PTVS3)を標識前駆体化合物として放射性標識を行い、放射性標識化合物であるPTVS10を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化３７】
2012121285.tif 000041
【０１８２】
[18F]4-Fluoroiodobenzenの合成
[18F]4-Fluoroiodobenzeneを下記スキームに従い製造した。
【化３８】
2012121285.tif 000042
【０１８３】
Kryptofix（登録商標）222(2.0mg,6.9μmol)のAcetonitrile(Merck,Lot.K41266036,50ml,max10ppm H2O)(300μl)溶液に[18F]KFの炭酸カリウム水溶液(20μl,2.23mCi)を加え、Acetonitrile(300μlx3)による共沸脱水を120℃、15分で行った（1.963mCi）。(4-iodophenyl)diphenylsulfoniumtriflate(1.0mg,1.9μmol)、Acetonitrile(100μl)を加え、120℃にて15分加熱した。反応終了後、高速液体クロマトグラフィー(ナカライテスク社製Cosmosil 5C18-AR-II,10x250mm,Acetonitrile:phosphate buffer=70:30,Flow rate=5.0ml/min,column oven temperature=30℃)で精製し、[18F]4-FluoroiodobenzeneのAcetonitrile/Phosphate buffer溶液(0.695mCi,RCY 31%)を得た。【０１８４】
Sep-pak Plus PS-2にAcetonitrile(5.0ml),Milli-Q水(5.0ml)の順で通した後、Milli-Q水で30倍に希釈した[18F]4-FluoroiodobenzeneのAcetonitrile/Phosphate buffer溶液(0.9mCi)、Milli-Q水(30ml)の順で通した。次に、DMF(1.0ml)を通し、最後にDMF(200μl)を通した液を回収した(0.275mCi)。【０１８５】
PTVS10の合成
PTVS3(1.0mg,2.1μmol)、[18F]4-Fluoroiodobenzene(300μCi)、炭酸ナトリウム(1.0mg,9.4μmol)、及びPdCl2(dppf)CH2Cl2(1.0mg,1.2μmol)を加え、系内をアルゴン置換した。ジメチルホルムアミド（DMF）/H2O(=90/10)(0.25mL)を加え、脱気及びアルゴン置換を３回実施した。マイクロウェーブ照射下で１２０℃にて２０分間反応させた。反応終了後、ＨＰＬＣに導入して分離精製した。目的とする放射性標識化合物（PTVS10）を放射化学的収率１２％にて得た。【０１８６】
本発明の標識前駆体化合物である化合物(PTVS3)を用いて放射性標識を行うことにより、短時間かつ高い収率で放射性標識化合物であるPTVS10を製造できた。
【産業上の利用可能性】
【０１８７】
本発明の試料分析方法は、例えば、医療分野、臨床検査の分野、新薬開発等の様々な分野に有用である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図５】
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【図４】
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【国際調査報告】
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