(57)【要約】  一般式（Ｍ）2012036287.tif 000047（式中、Ｒ１は、置換もしくは無置換の芳香族複素環基を表す。Ｒ２は、水素原子、置換もしくは無置換の炭素数１〜３のアルキル基、ＯＲ３基、Ｎ（Ｒ３）２基、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３基またはＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２基を表す。Ｒ３は、水素原子、炭素数１〜４のアルキル基または炭素数１〜４のアシル基を表す。Ｒ４は、水素原子、酸素原子、ＯＲ５基を表す。Ｒ５は、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基または炭素数１〜３のアシル基を表す。）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩は、コルチスタチンＡが有する生物活性を維持しつつ、化学合成により大量供給可能な単純な化学構造を有するコルチスタチンＡ類似体であり、癌の予防または治療薬の有効成分として有用である。
2012036287.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｍ）
【化１】
2012036287.tif 000040
（式中、Ｒ１は、置換もしくは無置換の芳香族複素環基を表す。Ｒ２は、水素原子、置換もしくは無置換の炭素数１〜３のアルキル基、ＯＲ３基、Ｎ（Ｒ３）２基、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３基またはＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２基を表す。Ｒ３は、水素原子、炭素数１〜４のアルキル基または炭素数１〜４のアシル基を表す。Ｒ４は、水素原子、酸素原子、ＯＲ５基を表す。Ｒ５は、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基または炭素数１〜３のアシル基を表す。）
で示される化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
一般式（Ｉ）
【化２】
2012036287.tif 000041
（式中、Ｒ１は、置換もしくは無置換の芳香族複素環基を表す。Ｒ２は、水素原子、置換もしくは無置換の炭素数１〜３のアルキル基、ＯＲ３基、Ｎ（Ｒ３）２基、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３基またはＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２基を表す。Ｒ３は、水素原子、炭素数１〜４のアルキル基または炭素数１〜４のアシル基を表す。）
で示される化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ１が、ピリジル基、キノリル基またはイソキノリル基である請求項１または２に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
式（ＩＩ）
【化３】
2012036287.tif 000042
または式（ＸＶＩＩＩ）
【化４】
2012036287.tif 000043
または式（ＸＩＸ）
【化５】
2012036287.tif 000044
または式（ＸＸＩＩＩ）
【化６】
2012036287.tif 000045
または式（ＬＩＶ）
【化７】
2012036287.tif 000046
である請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体を含有してなる医薬組成物。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する血管内皮細胞増殖阻害剤。
【請求項７】
請求項１〜４のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する血管新生阻害剤。
【請求項８】
請求項１〜４のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する癌の予防または治療薬。
【請求項９】
化学療法剤、免疫療法剤またはホルモン療法剤と併用することを特徴とする請求項８に記載の癌の予防または治療薬。
【請求項１０】
放射線療法と併用することを特徴とする請求項８に記載の癌の予防または治療薬。
【請求項１１】
哺乳動物に対して、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを特徴とする癌の予防または治療方法。
【請求項１２】
癌の予防または治療薬を製造するための、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１３】
癌の予防または治療に使用するための、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規コルチスタチンＡ類似体およびその用途に関するものであり、詳細には、血管内皮細胞増殖阻害活性および血管新生阻害活性を有し、癌の予防または治療に有用な新規コルチスタチンＡ類似体に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
癌克服は人類の大きな課題であり、その化学療法剤の開発は現在も精力的に行われているが、未だ癌細胞特異的に効果を示す医薬品の創製には至っていない。癌における血管新生は、固形癌の生育や転移に必須の現象であり、癌血管新生阻害剤の開発は、これまで行われてきた癌細胞に直接作用する薬剤開発とは方向性が異なるものである。癌血管新生阻害剤は、腫瘍細胞周辺の微小環境を応用するものであることから、薬剤耐性癌細胞の出現率の低下や癌細胞に対する効果の特異性向上が期待できる。このような概念に基づき創製された薬剤としては、血管新生促進因子の１つであるＶＥＧＦ（vascular endothelial growth factor）とそのレセプターとの結合を阻害するモノクローナル抗体ベバシズマブ（商品名：アバスチン）、ＶＥＧＦ受容体を含む受容体型チロシンリン酸化酵素を阻害するソラフェニブ（商品名：ネクサバール）およびスニチニブ（商品名：スーテント）の３剤が臨床で使用されている。しかしながら、これらの医薬品は適用範囲が限られており、副作用等の問題もある。また、これらはいずれもＶＥＧＦのシグナル伝達阻害を作用メカニズムとしており、これらとは化学構造や作用メカニズムの異なる医薬品の創製は、非常に重要な課題である。【０００３】
このような背景のもと、本発明者らは、癌血管新生において重要な役割を担う血管内皮細胞に着目し、血管内皮細胞選択的に増殖阻害活性を示す天然物を探索した結果、インドネシア産海綿Ｃｏｒｔｉｃｉｕｍ ｓｉｍｐｌｅｘのメタノール抽出エキスに、ヒト臍帯静脈血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）特異的な細胞増殖阻害作用を見出した。そして活性試験の結果を指標に活性物質を精製し、その化学構造を解析したところ、構造中にｏｘａｂｉｃｙｃｌｏ〔３．２．１〕ｏｃｔｅｎｅ構造とｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ側鎖を有する４種類の新規変異ステロイドアルカロイドを発見し、これらをコルチスタチン（cortistatin）類と命名した。中でも下記式で表わされるコルチスタチンＡ（cortistatin A）は、ＨＵＶＥＣに対する増殖阻害活性（ＩＣ５０＝１．８ｎＭ）が他の癌細胞に対する増殖阻害活性より３０００倍以上強く、血管新生の重要な指標となるＨＵＶＥＣの遊走や管腔形成も阻害することを確認した。さらに、その作用メカニズムはＶＥＧＦのシグナル伝達を阻害するものではないことを明らかにした（非特許文献１〜３参照）。【０００４】
【化１】
2012036287.tif 000003
【０００５】
しかしながら、天然から得られるコルチスタチン類は非常に微量であること、およびコルチスタチン類は複雑な化学構造を有するため、化学合成による工業的製造が困難であることから、大量供給可能な類似体の創製が望まれている。
コルチスタチンＡの類似体は、例えば特許文献１〜３に記載のものが知られている。しかし、特許文献１〜３に記載されているコルチスタチンＡ類似体の化学構造はコルチスタチンＡと同様に複雑であり、合成に多工程を要するため、工業的な大量供給に適したものとは言えない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２０１０／０２４９３０号
【特許文献２】国際公開第２００９／１３７３３７号
【特許文献３】国際公開第２００９／１３７３３５号
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Aoki, S., et al. J. Am. Chem. Soc. 2006, 128, 3148-3149.
【非特許文献２】Aoki, S., et al. Tetrahedron Lett. 2007, 48, 4485-4488.
【非特許文献３】Aoki, S., et al. Bioorg. Med. Chem. 2007, 15, 6758-6762.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、コルチスタチンＡが有する生物活性を維持しつつ、化学合成により大量供給可能な単純な化学構造を有するコルチスタチンＡ類似体を提供すること、および当該コルチスタチンＡ類似体を有効成分として含有する癌の予防または治療薬を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、上記課題を解決するために、以下の各発明を包含する。
［１］
一般式（Ｍ）
【化２】
2012036287.tif 000004
（式中、Ｒ１は、置換もしくは無置換の芳香族複素環基を表す。Ｒ２は、水素原子、置換もしくは無置換の炭素数１〜３のアルキル基、ＯＲ３基、Ｎ（Ｒ３）２基、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３基またはＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２基を表す。Ｒ３は、水素原子、炭素数１〜４のアルキル基または炭素数１〜４のアシル基を表す。Ｒ４は、水素原子、酸素原子、ＯＲ５基を表す。Ｒ５は、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基または炭素数１〜３のアシル基を表す。）
で示される化合物またはその薬学的に許容される塩。
［２］一般式（Ｉ）
【化３】
2012036287.tif 000005
（式中、Ｒ１は、置換もしくは無置換の芳香族複素環基を表す。Ｒ２は、水素原子、置換もしくは無置換の炭素数１〜３のアルキル基、ＯＲ３基、Ｎ（Ｒ３）２基、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３基またはＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２基を表す。Ｒ３は、水素原子、炭素数１〜４のアルキル基または炭素数１〜４のアシル基を表す。）
で示される化合物またはその薬学的に許容される塩。
［３］Ｒ１が、ピリジル基、キノリル基またはイソキノリル基である前記［１］または［２］に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
［４］式（ＩＩ）
【化４】
2012036287.tif 000006
または式（ＸＶＩＩＩ）
【化５】
2012036287.tif 000007
または式（ＸＩＸ）
【化６】
2012036287.tif 000008
または式（ＸＸＩＩＩ）
【化７】
2012036287.tif 000009
または式（ＬＩＶ）
【化８】
2012036287.tif 000010
である前記［３］に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
［５］前記［１］〜［４］のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体を含有してなる医薬組成物。
［６］前記［１］〜［４］のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する血管内皮細胞増殖阻害剤。
［７］前記［１］〜［４］のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する血管新生阻害剤。
［８］前記［１］〜［４］のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する癌の予防または治療薬。
［９］化学療法剤、免疫療法剤またはホルモン療法剤と併用することを特徴とする前記［８］に記載の癌の予防または治療薬。
［１０］放射線療法と併用することを特徴とする前記［８］に記載の癌の予防または治療薬。
［１１］哺乳動物に対して、前記［１］〜［４］のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを特徴とする癌の予防または治療方法。
［１２］癌の予防または治療薬を製造するための、前記［１］〜［４］のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用。
［１３］癌の治療または予防に使用するための、前記［１］〜［４］のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の一般式（Ｍ）または一般式（Ｉ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩は、コルチスタチンＡより単純な化学構造を有しており、化学合成により大量供給が可能である。本発明の一般式（Ｍ）または一般式（Ｉ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩は、コルチスタチンＡが有する血管内皮細胞選択的な細胞増殖阻害活性および血管新生阻害活性を維持しており、癌の予防または治療薬の有効成分として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】式（ＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−１）の合成スキームを示す図である。
【図２】式（ＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−１）の腹腔内投与によるｉｎ ｖｉｖｏ血管新生阻害活性を評価する試験において、各群のマウスにおけるマトリゲル移植部位を示す写真である。
【図３】式（ＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−１）の腹腔内投与によるｉｎ ｖｉｖｏ血管新生阻害活性を評価する試験において、マウス皮下に移植したマトリゲル内に蓄積したヘモグロビン量を測定した結果を示すグラフである。
【図４】式（ＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−１）の腹腔内投与による癌細胞移植モデルマウスにおける抗腫瘍活性を評価する試験において、各群のマウスから摘出した腫瘍の大きさを示す写真である。
【図５】式（ＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−１）の腹腔内投与による癌細胞移植モデルマウスにおける抗腫瘍活性を評価する試験において、腫瘍重量を測定した結果を示すグラフである。
【図６】式（ＸＶＩＩＩ）、式（ＸＩＸ）および式（ＸＸＩＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−２、ＣＡ−３およびＣＡ−４）の合成スキームを示す図である。
【図７】式（ＬＩＶ）で示される化合物（ＣＡ−５）の合成スキームを示す図である。
【図８】式（ＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−１）の血管内皮細胞選択的な細胞増殖阻害活性を評価した結果を示す図である。
【図９】式（ＸＶＩＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−２）の血管内皮細胞選択的な細胞増殖阻害活性を評価した結果を示す図である。
【図１０】式（ＸＩＸ）で示される化合物（ＣＡ−３）の血管内皮細胞選択的な細胞増殖阻害活性を評価した結果を示す図である。
【図１１】式（ＸＸＩＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−４）の血管内皮細胞選択的な細胞増殖阻害活性を評価した結果を示す図である。
【図１２】式（ＬＩＶ）で示される化合物（ＣＡ−５）の血管内皮細胞選択的な細胞増殖阻害活性を評価した結果を示す図である。
【図１３】式（ＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−１）の経口投与によるｉｎ ｖｉｖｏ血管新生阻害活性を評価する試験において、各群のマウスにおけるマトリゲル移植部位を示す写真である。
【図１４】式（ＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−１）の経口投与によるｉｎ ｖｉｖｏ血管新生阻害活性を評価する試験において、マウス皮下に移植したマトリゲル内に蓄積したヘモグロビン量を測定した結果を示すグラフである。
【図１５】式（ＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−１）の経口投与による癌細胞移植モデルマウスにおける抗腫瘍活性を評価する試験において、各群のマウスから摘出した腫瘍の大きさを示す写真である。
【図１６】式（ＩＩ）で示される化合物（ＣＡ−１）の経口投与による癌細胞移植モデルマウスにおける抗腫瘍活性を評価する試験において、腫瘍重量を測定した結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明は、一般式（Ｍ）
【化９】
2012036287.tif 000011
（式中、Ｒ１は、置換もしくは無置換の芳香族複素環基を表す。Ｒ２は、水素原子、置換もしくは無置換の炭素数１〜３のアルキル基、ＯＲ３基、Ｎ（Ｒ３）２基、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３基またはＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２基を表す。Ｒ３は、水素原子、炭素数１〜４のアルキル基または炭素数１〜４のアシル基を表す。Ｒ４は、水素原子、酸素原子、ＯＲ５基を表す。Ｒ５は、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基または炭素数１〜３のアシル基を表す。）
で示される化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１３】
また、本発明は、一般式（Ｉ）
【化１０】
2012036287.tif 000012
（式中、Ｒ１は、置換もしくは無置換の芳香族複素環基を表す。Ｒ２は、水素原子、置換もしくは無置換の炭素数１〜３のアルキル基、ＯＲ３基、Ｎ（Ｒ３）２基、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３基またはＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２基を表す。Ｒ３は、水素原子、炭素数１〜４のアルキル基または炭素数１〜４のアシル基を表す。）
で示される化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１４】
Ｒ１の「置換もしくは無置換の芳香族複素環基」とは、環構成原子として窒素原子、硫黄原子、酸素原子等の複素原子を少なくとも１以上含む、５員環または６員環の基であり、これらはベンゼン環と縮合していてもよく、さらに環上に１個以上の種々の置換基を有していてもよい基をいい、例えば、ピリジル、フリル、チエニル、インドリル、キノリル、イソキノリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、ピラゾリル、ピリミジル、ピラジニル、イソオキサゾリル、イソインドリル、ピロリル等の基を挙げることができる。好ましくはピリジル基、キノリル基またはイソキノリル基であり、より好ましくは７−イソキノリル基である。
【００１５】
置換基としては、例えば、フッ素原子、塩素原子、シアノ基、水酸基、ニトロ基、アルキル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アミノ基、フェニル基、ナフチル基、アントリル基、スチリル基、ピリジル基、ピリドインドリル基、キノリル基、ベンゾチアゾリル基などを挙げることができ、これらの置換基はさらに置換されていてもよい。
【００１６】
Ｒ２の「置換もしくは無置換の炭素数１〜３のアルキル基」とは、置換基を１個以上有していてもよいメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基等が挙げられる。置換基としては、例えば上記例示した置換基が挙げられる。
Ｒ３の「炭素数１〜４のアルキル基」としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等が挙げられる。Ｒ３の「炭素数１〜４のアシル基」としては、ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基等が挙げられる。
Ｒ５の「炭素数１〜３のアルキル基」とは、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基等が挙げられ、「炭素数１〜３のアシル基」とは、ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基、マロニル基等が挙げられる。
【００１７】
本発明の一般式（Ｍ）または一般式（Ｉ）で示される化合物としては、例えば、以下の化合物（ＩＩ）〜（ＣＣＸＬＶ）などが挙げられる。
【００１８】
【化１１】
2012036287.tif 000013
【００１９】
【化１２】
2012036287.tif 000014
【００２０】
【化１３】
2012036287.tif 000015
【００２１】
【化１４】
2012036287.tif 000016
【００２２】
【化１５】
2012036287.tif 000017
【００２３】
【化１６】
2012036287.tif 000018
【００２４】
【化１７】
2012036287.tif 000019
【００２５】
【化１８】
2012036287.tif 000020
【００２６】
【化１９】
2012036287.tif 000021
【００２７】
【化２０】
2012036287.tif 000022
【００２８】
【化２１】
2012036287.tif 000023
【００２９】
【化２２】
2012036287.tif 000024
【００３０】
【化２３】
2012036287.tif 000025
【００３１】
【化２４】
2012036287.tif 000026
【００３２】
【化２５】
2012036287.tif 000027
【００３３】
【化２６】
2012036287.tif 000028
【００３４】
【化２７】
2012036287.tif 000029
【００３５】
【化２８】
2012036287.tif 000030
【００３６】
【化２９】
2012036287.tif 000031
【００３７】
【化３０】
2012036287.tif 000032
【００３８】
【化３１】
2012036287.tif 000033
【００３９】
本発明の化合物として特に好ましくは、以下の式（ＩＩ）、式（ＸＶＩＩＩ）、式（ＸＩＸ）、式（ＸＸＩＩＩ）または式（ＬＩＶ）で示される化合物である。
【００４０】
【化３２】
2012036287.tif 000034
【００４１】
【化３３】
2012036287.tif 000035
【００４２】
【化３４】
2012036287.tif 000036
【００４３】
【化３５】
2012036287.tif 000037
【００４４】
【化３６】
2012036287.tif 000038
【００４５】
式（ＩＩ）で示される化合物は、１２工程で化学合成可能であり、収率は約１４％である。式（ＩＩ）で示される化合物の血管内皮細胞に対する増殖阻害活性は、他の癌細胞に対する増殖阻害活性より１００倍以上強く、ヒト臍帯静脈血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）の遊走および管腔形成を阻害すること、ｉｎ ｖｉｖｏ血管新生阻害活性を有すること、癌細胞移植モデルマウスにおける抗腫瘍活性を有することが確認されている。また、式（ＸＶＩＩＩ）、式（ＸＩＸ）、式（ＸＸＩＩＩ）、式（ＬＩＶ）で示される化合物も、式（ＩＩ）の化合物と同様の合成方法を用いることで容易に化学合成が可能であり、コルチスタチンＡと同様に、広い濃度範囲で血管内皮細胞選択的な細胞増殖阻害活性を有する。
【００４６】
「薬学的に許容される塩」とは、例えば、アルカリ金属（例えば、カリウム、ナトリウム、リチウム等）の塩、アルカリ土類金属（例えば、カルシウム、マグネシウム等）の塩、アンモニウム塩（例えば、テトラメチルアンモニウム塩、テトラブチルアンモニウム塩等）、有機アミン（例えば、トリエチルアミン、メチルアミン、ジメチルアミン、シクロペンチルアミン、ベンジルアミン、フェネチルアミン、ピペリジン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、リジン、アルギニン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン等）の塩、酸付加物塩（例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩等の無機酸塩；例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、グルクロン酸塩、グルコン酸塩等の有機酸塩）などが挙げられる。
【００４７】
以下、本発明の一般式（Ｍ）または一般式（Ｉ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩を「本発明の化合物」と記す。
【００４８】
本発明の化合物の製造方法は特に限定されず、例えば、実施例１、実施例４、実施例５に記載の合成方法に準じて製造することができる。
本発明の化合物は、公知の手段、例えば、転溶、濃縮、溶媒抽出、分溜、液性変換、晶出、再結晶、クロマトグラフィー等によって単離、精製することができる。本発明の化合物が遊離化合物として得られた場合には、公知の方法により目的とする塩に変換することができ、逆に塩で得られた場合には、公知の方法により遊離体または目的とする他の塩に変換することができる。
【００４９】
本発明の化合物が、光学異性体、立体異性体、位置異性体、回転異性体等の異性体を有する場合には、いずれか一方の異性体も混合物も本発明の化合物に包含される。例えば、本発明の化合物に光学異性体が存在する場合には、ラセミ体から分割された光学異性体も本発明の化合物に包含される。これらの異性体は、公知の合成手法、分離手法（濃縮、溶媒抽出、カラムクロマトグラフィー、再結晶等）によりそれぞれを単品として得ることができる。
本発明の化合物は、水和物または溶媒和物であってもよい。また、同位元素等で標識されていてもよい。
【００５０】
本発明の化合物は、血管内皮細胞選択的な増殖阻害活性を有するので、血管内皮細胞増殖阻害剤の有効成分として有用である。また、本発明の化合物は、血管新生阻害活性を有するので、血管新生阻害剤の有効成分として有用である。したがって、本発明の化合物は、血管内皮細胞増殖および／または血管新生を伴う疾病の予防または治療に、好適に用いることができる。血管内皮細胞増殖および／または血管新生を伴う疾病としては、癌（固形癌の生育や転移）、黄斑変性症、糖尿病性網膜症、血管新生緑内障、炎症性皮膚疾患、関節リウマチ、変形性関節症などが挙げられる。
【００５１】
さらに、本発明の化合物は、癌細胞移植モデルマウスにおける抗腫瘍活性を有するので、癌の予防または治療薬の有効成分として有用である。本発明の化合物による予防または治療対象の癌は、特に限定されず、例えば、肺癌、大腸癌、前立腺癌、乳癌、膵臓癌、食道癌、胃癌、肝臓癌、胆道癌、脾臓癌、腎癌、膀胱癌、子宮癌、卵巣癌、精巣癌、甲状腺癌、脳腫瘍、血液腫瘍等が挙げられる。好ましくは、血管新生により生育する固形癌である。
【００５２】
本発明は、本発明の化合物と、薬学的に許容される担体とを含有する医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物は、本発明の化合物を有効成分とし、薬学的に許容される担体、さらに添加剤を適宜配合して製剤化することができる。具体的には錠剤、被覆錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の経口剤；注射剤、輸液、坐剤、軟膏、パッチ剤等の非経口剤とすることができる。担体または添加剤の配合割合については、医薬品分野において通常採用されている範囲に基づいて適宜設定すればよい。配合できる担体または添加剤は特に制限されないが、例えば、水、生理食塩水、その他の水性溶媒、水性または油性基剤等の各種担体；賦形剤、結合剤、ｐＨ調整剤、崩壊剤、吸収促進剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、香料等の各種添加剤が挙げられる。
【００５３】
錠剤、カプセル剤などに混和することができる添加剤としては、例えば、ゼラチン、コーンスターチ、トラガント、アラビアゴムのような結合剤、結晶性セルロースのような賦形剤、コーンスターチ、ゼラチン、アルギン酸などのような膨化剤、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤、ショ糖、乳糖またはサッカリンのような甘味剤、ペパーミント、アカモノ油またはチェリーのような香味剤などが用いられる。調剤単位形態がカプセルである場合には、上記タイプの材料にさらに油脂のような液状担体を含有することができる。注射のための無菌組成物は注射用水のようなベヒクル中の活性物質、胡麻油、椰子油などのような天然産出植物油などを溶解または懸濁させるなどの通常の製剤実施に従って処方することができる。注射用の水性液としては、例えば、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液（例えば、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウムなど）などが用いられ、適当な溶解補助剤、例えば、アルコール（例、エタノール）、ポリアルコール（例、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、非イオン性界面活性剤（例、ポリソルベート８０ＴＭ、ＨＣＯ−５０）などと併用してもよい。油性液としては、例えば、ゴマ油、大豆油などが用いられ、溶解補助剤である安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどと併用してもよい。また、緩衝剤（例えば、リン酸塩緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液）、無痛化剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカインなど）、安定剤（例えば、ヒト血清アルブミン、ポリエチレングリコールなど）、保存剤（例えば、ベンジルアルコール、フェノールなど）、酸化防止剤などと配合してもよい。
【００５４】
このようにして得られる製剤は、例えばヒトや他の哺乳動物（例えば、ラット、マウス、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して投与することができる。投与量は、投与対象動物の状態、対象癌種、症状、投与方法などにより異なるが、経口投与の場合、一般的に例えば、体重約６０ｋｇのヒトにおいては、１日当たり有効成分として約０.１〜１０００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５００ｍｇ、より好ましくは約３．０〜２００ｍｇである。非経口的に投与する場合は、その１回投与量は投与対象動物の状態、対象癌種、症状、投与方法などにより異なるが、例えば注射剤では、通常例えば体重１ｋｇ当たり約０．０１〜１００ｍｇ程度、好ましくは約０．０１〜５０ｍｇ程度、より好ましくは約０．０１〜２０ｍｇ程度を静脈注射により投与するのが好都合である。１日当たりの総投与量は、単一投与量であっても分割投与量であってもよい。
【００５５】
本発明の癌の予防または治療薬は、他の癌治療用薬剤と併用して用いることができる。他の癌治療用薬剤は特に限定されないが、例えば、化学療法剤、免疫療法剤またはホルモン療法剤と併用して用いることが好ましい。また、本発明の癌の予防または治療薬は、放射線療法と併用して用いることができる。
【００５６】
化学療法剤としては、特に限定されないが、例えば、ナイトロジェンマスタード、塩酸ナイトロジェンマスタード−Ｎ−オキシド、クロラムブチル、シクロフォスファミド、イホスファミド、チオテパ、カルボコン、トシル酸インプロスルファン、ブスルファン、塩酸ニムスチン、ミトブロニトール、メルファラン、ダカルバジン、ラニムスチン、リン酸エストラムスチンナトリウム、トリエチレンメラミン、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン、ピポブロマン、エトグルシド、カルボプラチン、シスプラチン、ミボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、アルトレタミン、アンバムスチン、塩酸ジブロスピジウム、フォテムスチン、プレドニムスチン、プミテパ、リボムスチン、テモゾロミド、トレオスルファン、トロフォスファミド、ジノスタチンスチマラマー、アドゼレシン、システムスチン、ビゼレシン等のアルキル化剤；例えば、メルカプトプリン、６−メルカプトプリンリボシド、チオイノシン、メトトレキサート、ペメトレキセド、エノシタビン、シタラビン、シタラビンオクフォスファート、塩酸アンシタビン、５−ＦＵ系薬剤（例、フルオロウラシル、テガフール、ＵＦＴ、ドキシフルリジン、カルモフール、ガロシタビン、エミテフール、カペシタビン等）、アミノプテリン、ネルザラビン、ロイコボリンカルシウム、タブロイド、ブトシン、フォリネイトカルシウム、レボフォリネイトカルシウム、クラドリビン、エミテフール、フルダラビン、ゲムシタビン、ヒドロキシカルバミド、ペントスタチン、ピリトレキシム、イドキシウリジン、ミトグアゾン、チアゾフリン、アンバムスチン、ベンダムスチン等の代謝拮抗剤；例えば、アクチノマイシンＤ、アクチノマイシンＣ、マイトマイシンＣ、クロモマイシンＡ３、塩酸ブレオマイシン、硫酸ブレオマイシン、硫酸ペプロマイシン、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸アクラルビシン、塩酸ピラルビシン、塩酸エピルビシン、ネオカルチノスタチン、ミスラマイシン、ザルコマイシン、カルチノフィリン、ミトタン、塩酸ゾルビシン、塩酸ミトキサントロン、塩酸イダルビシン等の抗癌性抗生物質；例えば、エトポシド、リン酸エトポシド、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンデシン、テニポシド、パクリタキセル、ドセタクセル、ビノレルビン等の植物由来抗癌剤などが挙げられる。
【００５７】
免疫療法剤としては、特に限定されないが、例えば、ピシバニール、クレスチン、シゾフィラン、レンチナン、ウベニメクス、インターフェロン、インターロイキン、マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球コロニー刺激因子、エリスロポイエチン、リンホトキシン、ＢＣＧワクチン、コリネバクテリウムパルブム、レバミゾール、ポリサッカライドＫ、プロコダゾール、抗ＣＴＬＡ４抗体などが挙げられる。
【００５８】
ホルモン療法剤としては、特に限定されないが、例えば、ホスフェストロール、ジエチルスチルベストロール、クロロトリアニセン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、酢酸クロルマジノン、酢酸シプロテロン、ダナゾール、アリルエストレノール、ゲストリノン、メパルトリシン、ラロキシフェン、オルメロキシフェン、レボルメロキシフェン、抗エストロゲン（例、クエン酸タモキシフェン、クエン酸トレミフェン等）、ピル製剤、メピチオスタン、テストロラクトン、アミノグルテチイミド、ＬＨ−ＲＨアゴニスト（例、酢酸ゴセレリン、ブセレリン、リュープロレリン等）、ドロロキシフェン、エピチオスタノール、スルホン酸エチニルエストラジオール、アロマターゼ阻害薬（例、塩酸ファドロゾール、アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、フォルメスタン等）、抗アンドロゲン（例、フルタミド、ビカルタミド、ニルタミド等）、５α−レダクターゼ阻害薬（例、フィナステリド、エプリステリド等）、副腎皮質ホルモン系薬剤（例、デキサメタゾン、プレドニゾロン、ベタメタゾン、トリアムシノロン等）、アンドロゲン合成阻害薬（例、アビラテロン等）などが挙げられる。
【００５９】
本発明の癌の予防または治療薬と他の癌治療用薬剤または放射線療法とを併用することにより、（１）相乗効果が得られる、（２）投与量を軽減することができる、（３）治療期間を長く設定することができる、（４）治療効果の持続を図ることができる、等の効果が得られる。
【００６０】
本発明の癌の予防または治療薬と他の癌治療用薬剤とを併用する場合、これらを投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。併用薬剤の投与量は、臨床上用いられている投与量に準ずればよく、投与対象、投与対象の年齢および体重、症状、投与時間、剤形、投与方法、組み合わせ等により適宜選択することができる。
【実施例】
【００６１】
以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。【００６２】
〔実施例１：式（ＩＩ）で示される化合物の合成〕
図１に示したスキームに従って、式（ＩＩ）で示される化合物（以下、「ＣＡ−１」と記す。）を合成した。【００６３】
（１）化合物３（(3aS,7aS)-7a-Methylhexahydro-1H-indene-1,5(6H)-dione）の合成
Ａｒガス雰囲気下、ＣｕＩ（882 mg, 4.63 mmol）のＴＨＦ溶液（28 mL）に、−５０℃でｔ−ＢｕＭｇＣｌ（1.0 M in THF, 6.02 mL, 6.02 mmol）を加え、２０分撹拌した。反応液にＨＭＰＡ（8.10 mL, 46.3 mmol）を加え、−５０℃で２０分撹拌した。化合物２（760 mg, 4.63 mmol）のＴＨＦ溶液を−７８℃で、キャニュレーションによって加えた後、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（1.0 M in n-hexane, 7.41 mL, 7.41 mmol）、ＨＭＰＡ（4.05 mL, 23.2 mmol）のＴＨＦ溶液（9.0 mL）をキャニュレーションによってゆっくり滴下し、−７８℃で３０分撹拌した。−４０℃までゆっくり昇温し、さらに３時間撹拌した。反応液を０℃にした後、５％ＨＣｌ水溶液を加え、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 2:1）にて精製し、化合物３（592 mg, 77%）を得た。
IR(KBr): 2959, 1738, 1711 cm-1. [α]D21 +150.0 (c 1.70, CHCl3). 1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 2.55-2.50 (2H, m), 2.48-2.40 (3H, m), 2.22-2.14 (1H, m), 2.08-2.00 (1H, m), 1.96-1.90 (2H, m), 1.68 (1H, tt, J = 11.6, 8.5 Hz), 1.60 (1H, dd, J = 13.4, 9.2 Hz), 1.05 (3H, s).【００６４】
（２）化合物４（(3a'S,7a'S)-7a'-Methylhexahydrospiro[[1,3]dioxolane-2,5'-inden]-1'(6'H)-one）の合成
化合物３（535 mg, 3.22 mmol）のＣＨ３ＣＮ溶液（32 mL）に、０℃でｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ（5.4 mL, 96.6 mmol）、ｏｘａｌｉｃ ａｃｉｄ ｄｉｈｙｄｒａｔｅ（203 mg, 1.61 mmol）を加え、室温で８時間撹拌した。反応液を０℃にした後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加え、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 2:1）にて精製し、化合物４（624 mg, 92%）を得た。
IR(KBr): 2953, 2887, 1732, 1068 cm-1. [α]D21 +91.3 (c 1.28, CHCl3). 1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 3.92-3.86 (4H, m), 2.40 (1H, dd, J = 19.0, 9.2 Hz), 2.09 (1H, dt, J = 19.0, 11.0 Hz), 1.97-1.93 (1H, m), 1.83-1.80 (1H, m), 1.73-1.64 (5H, m), 1.57 (1H, tt, J = 12.5, 9.0 Hz), 1.44 (1H, td, J = 13.9, 5.7 Hz), 0.88 (3H, s). ESI MS: m/z 233 (M+Na)+. HR-ESI MS: m/z 233.1154, calcd for C12H18O3Na. Found: 233.1160.【００６５】
（３）化合物５（(3a'S,7a'S)-7a'-Methyl-3',3a',4',6',7',7a'-hexahydrospiro[[1,3]dioxolane-2,5'-indene]-1'-yltrifluoromethanesulfonate）の合成
化合物４（300 mg, 1.43 mmol）のＴＨＦ溶液（14 mL）に、−７８℃でｐｈｅｎｙｌ−Ｎ−ｔｒｉｆｌｉｍｉｄｅ（1.02 g, 2.86 mmol）、ＫＨＭＤＳ（0.5 M in toluene, 4.3 mL, 2.15 mmol）を加え、３０分撹拌した。反応液を０℃にした後、Ｈ２Ｏを加え、Ｅｔ２Ｏで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 4:1）にて精製し、化合物５（420 mg, 85%）を得た。
IR(KBr): 2955, 2885, 1421, 1213, 1141, 1055 cm-1. [α]D20 +69.2 (c 1.41, CHCl3).
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 5.57 (1H, dd, J = 3.3, 1.6 Hz), 3.92 (4H, m), 2.23-2.15 (2H, m), 2.05-2.02 (1H, m), 1.77-1.60 (7H, m), 1.02 (3H, s). ESI MS: m/z 365 (M+Na)+. HR-ESI MS: m/z 365.0647, calcd for C13H17O5F3NaS. Found: 365.0646.【００６６】
（４）化合物６（7-((3a'S,7a'S)-7a'-Methyl-3',3a',4',6',7',7a'-hexahydrospiro[[1,3]dioxolane-2,5'-indene]-1'-yl) isoquinoline）の合成
化合物５（200 mg, 0.584 mmol）のＤＭＦ溶液（5.0 mL）に、室温で 7-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)isoquinoline（162 mg, 0.642 mmol）のＤＭＦ溶液（5.0 mL）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（100 mg, 0.0876 mmol）、Ｋ２ＣＯ３（239 mg, 1.75 mmol）を加え、５０℃で３０分撹拌した。反応液を０℃にした後、Ｈ２Ｏを加え、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮して、化合物６を含む粗生成物を得た。【００６７】
（５）化合物７（(3aS,7aS)-3-(Isoquinolin-7-yl)-3a-methyl-4,5,7,7a-tetrahydro-1H-inden-6(3aH)-one）の合成
上記化合物６を含む粗生成物のａｃｅｔｏｎｅ／Ｈ２Ｏ溶液（6.2 mL + 0.62 mL）に、０℃でｐ−ｔｏｌｕｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｍｏｎｏｈｙｄｒａｔｅ（237 mg, 1.23 mmol）を加え、室温で２時間撹拌した。反応液を０℃にした後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加え、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 1:2）にて精製し、化合物７（80 mg, 50% in 2 steps）を得た。
IR(KBr): 2935, 1707, 850 cm-1. [α]D20 +94.0 (c 2.54, CHCl3). 1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.22 (1H, s), 8.49 (1H, d, J = 6.1 Hz), 7.92 (1H, s), 7.77 (1H, d, J = 9.8 Hz), 7.75 (1H, dd, J = 8.9, 1.5 Hz), 6.17 (1H, s), 2.62-2.50 (4H, m), 2.39-2.36 (4H, m), 2.28-2.21 (1H, m), 1.97-1.95 (1H, m), 1.32 (3H, s). ESI MS: m/z 278 (M+H)+. HR-ESI MS: m/z 278.1545, calcd for C19H20NO. Found: 278.1544.【００６８】
（６）化合物８（(1S,3aS,7aS)-1-(Isoquinolin-7-yl)-7a-methylhexahydro-1H-inden-5(6H)-one）の合成
化合物７（73 mg, 0.261 mmol）のＡｃＯＥｔ溶液（3.0 mL）に、室温でＰｄ／Ｃ（21.9 mg）を加え、Ｈ２雰囲気下で１２時間撹拌した。反応液をセライトろ過し、減圧濃縮することで、化合物８（71 mg, 98%）を得た。
IR(KBr): 2959, 1709, 852 cm-1. 1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.22 (1H, s), 8.48 (1H, d, J = 6.1 Hz), 7.80 (1H, s), 7.75 (1H, d, J = 7.9 Hz), 7.62 (1H, d, J = 6.1 Hz), 7.57 (1H, d, J = 8.5 Hz), 2.99 (1H, t, J = 9.8 Hz), 2.46-2.44 (1H, m), 2.37-2.30 (3H, m), 2.19-2.18 (1H, m), 2.12-2.10 (1H, m), 1.91-1.90 (1H, m), 1.78-1.75 (2H, m), 1.59-1.57 (1H, m), 0.75 (3H, s). ESI MS: m/z 280 (M+H)+. HR-ESI MS: m/z 280.1701, calcd for C19H22NO. Found: 280.1714.【００６９】
（７）化合物９（(1R,3aS,7aR)-1-(Isoquinolin-7-yl)-7a-methyl-2,3,3a,4-tetrahydro-1H-inden-5(7aH)-one）の合成
化合物８（28 mg, 0.100 mmol）のＣＨ３ＣＮ溶液（2.0 mL）に、０℃でＨＭＤＳ（0.21 mL, 1.00 mmol）、ＮａＩ（75.2 mg, 0.500 mmol）、ＴＭＳＣｌ（0.062 mL, 0.500 mmol）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液を０℃にした後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。得られた生成物のＤＭＳＯ溶液（1.0 mL）に、０℃で２−ヨードキシ安息香酸（19.1 mg, 0.635 mmol）を加え、室温で８時間撹拌した。反応液を０℃にした後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 1:2）にて精製し、化合物９（19 mg, 71% in 2 steps）を得た。
IR(KBr): 2962, 1672, 852 cm-1. [α]D19 −3.95 (c 1.07, CHCl3). 1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.26 (1H, s), 8.52 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.85 (1H, s), 7.82 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.65-7.63 (2H, m), 7.07 (1H, d, J = 9.8 Hz), 5.90 (1H, d, J = 10.4 Hz), 3.24 (1H, t, J = 9.8 Hz), 2.62-2.58 (1H, m), 2.45-2.43 (2H, m), 2.33-2.28 (2H, m), 2.01-1.99 (1H, m), 1.74-1.72 (1H, m), 0.81 (3H, s).  ESI MS: m/z 278 (M+H)+. HR-ESI MS: m/z 278.1545, calcd for C19H20NO. Found: 278.1544.【００７０】
（８）化合物１０（(1R,3aS,7aS)-1-(Isoquinolin-7-yl)-7a-methyl-2,3,3a,7a-tetrahydro-1H-inden-5-yltrifluoromethanesulfonate）の合成
化合物９（100 mg, 0.361 mmol）のＴＨＦ溶液（3.6 mL）に、−７８℃で、ｐｈｅｎｙｌ−Ｎ−ｔｒｉｆｌｉｍｉｄｅ（258 mg, 1.12 mmol）、ＫＨＭＤＳ（0.5 M in toluene, 2.25 mL, 1.12 mmol）を加え、３０分撹拌した。反応液を０℃にした後、Ｈ２Ｏを加え、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 1:1）にて精製し、化合物１０（138 mg, 94%）を得た。
IR(KBr): 2964, 1419, 1211, 1141 cm-1. 1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.22 (1H, s), 8.51 (1H, d, J = 6.1 Hz), 7.83 (1H, s), 7.80 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.64-7.62 (2H, m), 6.26 (1H, d, J = 9.8 Hz), 5.92 (1H, t, J = 2.5 Hz), 5.79 (1H, dd, J = 9.8, 2.2 Hz), 3.31 (1H, t, J = 10.1 Hz), 3.04-2.99 (1H, m), 2.37-2.34 (2H, m), 2.03-2.01 (1H, m), 1.88-1.86 (1H, m), 0.67 (3H, s). ESI MS: m/z 410 (M+H)+. HR-ESI MS: m/z 410.1038, calcd for C20H19NO3F3S. Found: 410.1024.【００７１】
（９）化合物１１（(1R,3aS,7aS)-Methyl  1-(isoquinolin-7-yl)-7a-methyl-2,3,3a,7a-tetrahydro-1H-indene-5-carboxylate）の合成
化合物１０（265 mg, 0.648 mmol）のＤＭＦ溶液（20 mL）に、室温で、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（75 mg, 0.0648 mmol）、ＭｅＯＨ（8.3 mL）、Ｅｔ３Ｎ（1.45 mL, 9.72 mmol）を加え、一酸化炭素雰囲気下、４０℃で３時間撹拌した。反応液を０℃にした後、Ｈ２Ｏを加え、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 1:1）にて精製し、化合物１１（200 mg, 98%）を得た。
IR(KBr): 2955, 1714, 1267 cm-1. [α]D19 -88.6 (c 1.51, CHCl3). 1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.24 (1H, s), 8.50 (1H, d, J = 6.1 Hz), 7.84 (1H, s), 7.79 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.64 (2H, dd, J = 12.2, 3.7 Hz), 7.13 (1H, s), 6.34 (1H, d, J = 9.8 Hz), 6.17 (1H, d, J = 9.8 Hz), 3.77 (3H, s), 3.31 (1H, t, J = 9.8 Hz), 2.93-2.91 (1H, m), 2.39-2.33 (2H, m), 2.09-2.02 (1H, m), 1.89-1.88 (1H, m), 0.58 (3H, s). ESI MS: m/z 320 (M+H)+. HR-ESI MS: m/z 320.1651, calcd for C21H22NO2. Found: 320.1643.【００７２】
（１０）化合物１２（(1R,3aS,7aS)-1-(Isoquinolin-7-yl)-7a-methyl-2,3,3a,7a-tetrahydro-1H-indene-5-carbaldehyde）の合成
化合物１１（54.2 mg, 0.188 mmol）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（13 mL）に、−７８℃で、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（1.0 M in n-hexane, 0.56 mL, 0.56 mmol）を加え、１５分撹拌した。反応液を０℃にした後、１５％ＮａＯＨ水溶液を加え、セライトろ過し、減圧濃縮することで ((1R,3aS,7aS)-1-(Isoquinolin-7-yl)-7a-methyl-2,3,3a,7a-tetrahydro-1H-inden-5-yl)methanolを含む粗生成物（49 mg）を得た。得られた粗生成物のＣＨ２Ｃｌ２溶液（3.4 mL）に、０℃でＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ（107 mg, 0.254 mmol）、ＮａＨＣＯ３（71 mg, 0.847 mmol）を加え、室温で３０分撹拌した。反応液を０℃にした後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 1:4）にて精製し、化合物１２（38 mg, 67% in 2 steps）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.44 (1H, s), 9.25 (1H, s), 8.50 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.85 (1H, s), 7.80 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.66-7.64 (2H, m), 6.95 (1H, s), 6.37 (1H, d, J = 9.8 Hz), 6.23 (1H, d, J = 9.8 Hz), 3.35 (1H, t, J = 9.8 Hz), 3.05 (1H, t, J = 10.0 Hz), 2.41-2.36 (2H, m), 2.08 (1H, s), 1.98-1.96 (1H, m), 0.58 (3H, s). ESI MS: m/z 290 (M+H)+.【００７３】
（１１）目的化合物１（ＣＡ−１、(3R,3aR,11aS,11bR)-3-(Isoquinolin-7-yl)-3a-methyl-1,2,3,3a,9,10,11a,11b-octahydrocyclopenta[c]xanthen-7(8H)-one）の合成
化合物１２（12 mg, 0.0415 mmol）のＡｃＯＥｔ溶液（4.0 mL）に、０℃で１，３−ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅｄｉｏｎｅ（11 mg, 0.083 mmol）、ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅ（3.6 mL, 0.0498 mmol）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液を０℃にした後、Ｈ２Ｏを加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 1:4）にて精製し、化合物１（15 mg, 97%）を得た。
IR(KBr): 2959, 1653, 1582, 1375 cm-1. [α]D19 -101.7 (c 1.24, CHCl3). 1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.26 (1H, s), 8.51 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.85 (1H, s), 7.80 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.65 (2H, t, J = 6.4 Hz), 6.37 (1H, s), 6.05 (1H, d, J = 9.2 Hz), 5.90 (1H, d, J = 9.2 Hz), 4.86 (1H, d, J = 11.6 Hz), 3.23 (1H, t, J = 9.8 Hz), 2.57-2.28 (4H, m), 2.03-2.02 (2H, m), 1.84-1.81 (1H, m), 1.61-1.59 (1H, m), 1.20 (1H, m), 0.93-0.90 (2H, m), 0.68 (3H, s). ESI MS: m/z 384 (M+H)+.【００７４】
〔実施例２：血管内皮細胞選択的な細胞増殖阻害活性の評価（１）〕
式（ＩＩ）で示されるＣＡ−１を被験化合物とし、対照化合物に既存の抗がん剤であるドキソルビシン（doxorubicin）を用いた。被験化合物および対照化合物は、ＥｔＯＨに溶解し、所定の濃度に調製した。細胞には、正常ヒト臍帯静脈血管内皮細胞ＨＵＶＥＣおよびヒト咽頭上皮がん細胞ＫＢ３−１を使用した。【００７５】
ＨＵＶＥＣおよびＫＢ３−１をそれぞれ２×１０３ｃｅｌｌｓ／１００μＬ／ｗｅｌｌの濃度で９６ｗｅｌｌのマルチウェルプレートに播種し、３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下で２４時間培養した。次に、各種濃度に調製した被検化合物または対照化合物のエタノール溶液１．０μＬを添加し、同条件でさらに７２時間培養した。７２時間後、ＷＳＴ−８ [2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium, monosodium salt] 試薬１０μＬを添加し、３時間培養後に生存細胞が形成する水溶性のｆｏｒｍａｚａｎをＯＤ４５０ｎｍで比色定量し、化合物非添加群のそれと比較することにより生育阻害率を算出した。被検化合物および対照化合物の各細胞に対する増殖阻害活性は５０％生育阻止濃度（ＩＣ５０値）で示し、細胞種選択性（Ｓ．Ｉ．値）は、ＫＢ３−１に対するＩＣ５０値を、ＨＵＶＥＣに対するＩＣ５０値で除した値とした。【００７６】
結果を表１に示した。被検化合物ＣＡ−１は、ＨＵＶＥＣおよびＫＢ３−１に対してそれぞれ０．１μＭおよび１０．５μＭのＩＣ５０値を示した。また、そのＳ．Ｉ．値は１０５倍であった。一方、対照化合物ドキソルビシンは、ＨＵＶＥＣおよびＫＢ３−１に対して、それぞれ０．１３μＭおよび０．３６μＭのＩＣ５０値を示し、そのＳ．Ｉ．値は２．７倍と低く、細胞種選択性がほとんど観察されなかった。これら結果から被検化合物ＣＡ−１は、血管新生において重要な役割を担う、血管内皮細胞の増殖を選択的に抑制することが明らかとなった。【００７７】
【表１】
2012036287.tif 000039
【００７８】
〔実施例３：腹腔内投与によるｉｎ ｖｉｖｏ血管新生阻害活性の評価〕
被験化合物のＣＡ−１は、１％ＣＭＣを用いて所定の濃度に調製した。コントロール群には溶媒（１％ＣＭＣ）を投与した。【００７９】
５００μＬのマトリゲル（商品名、ＢＤ社製）に血管新生促進因子である塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ：basic fibroblast growth factor）２００ｎｇ／ｍＬおよびヘパリン１００Ｕ／ｍＬを添加し、これをｄｄＹ雌性マウス（６週令）の腹側部皮下に２３Ｇの注射針を用いて移植した。被験化合物ＣＡ−１または溶媒を、マトリゲル移植日から２日に１回、計５回のスケジュールで腹腔内投与した。別途、ｂＦＧＦを添加していないマトリゲルを移植し、溶媒を投与した群（ネガティブコントロール群）を設けた。血管新生阻害効果は、被験化合物の最終投与翌日にマトリゲルを摘出し、マトリゲル内に蓄積したヘモグロビン量をコントロール群のそれと比較することで評価した。有意差検定はＤｕｎｎｅｔｔ’ｓ法により行い、有意水準を５％以下とした。【００８０】
結果を図２および図３に示した。図２は、各群のマウスにおけるマトリゲル移植部位の写真であり、図３は、マトリゲル内に蓄積したヘモグロビン量を測定した結果を示すグラフである。図２および図３から明らかなように、ＣＡ−１投与群のマトリゲル内におけるヘモグロビンの蓄積量は、１０ｍｇ／ｋｇ以上の用量で有意に抑制され、その阻害程度は、血管新生促進因子であるｂＦＧＦを含有しないマトリゲルを用いて検討した場合とほぼ同程度であった。これらのことから、被験化合物ＣＡ−１はｉｎ ｖｉｖｏにおいて血管新生阻害効果を示すことが明らかとなった。【００８１】
〔実施例３：腹腔内投与による癌細胞移植モデルマウスでの抗腫瘍活性の評価〕
被験化合物のＣＡ−１は、１％ＣＭＣを用いて所定の濃度に調製した。コントロール群には溶媒（１％ＣＭＣ）を投与した。【００８２】
マウス肉腫Ｓ１８０細胞を無血清のＲＰＭＩ培地で１×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍＬの密度に調製し、氷上で保存した。次に、Ｓ１８０細胞の浮遊液１００μＬ（１×１０６ｃｅｌｌｓ）をｄｄＹ雌性マウス（５週令）の腹側部皮下に２３Ｇの注射針を用いて移植した。１週間飼育を行うことによりＳ１８０細胞を生着させた後、各用量（５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ）の被験化合物または溶媒（１％ＣＭＣ）を２日に１回、計７回の投与スケジュールで腹腔内投与した。抗腫瘍活性は、最終投与の１日後に腫瘍を摘出して重量を計測し、コントロール群と比較することにより評価した。【００８３】
結果を図４および図５に示した。図４は、各群のマウスから摘出した腫瘍の大きさを示す写真であり、図５は、腫瘍重量を測定した結果を示すグラフである。図４および図５から明らかなように、ＣＡ−１投与群の腫瘍重量は、コントロール群に対して５ｍｇ／ｋｇ投与群で３４％、１０ｍｇ／ｋｇ投与群で２３％、２５ｍｇ／ｋｇ投与で１７％に減少し、顕著な抗腫瘍活性を示した。また、いずれの投与群においてもマウスの体重減少や下痢、目視での臓器の異常は観察されなかった。【００８４】
〔実施例４：、式（ＸＶＩＩＩ）、式（ＸＩＸ）、式（ＸＸＩＩＩ）で示される化合物の合成〕
図６に示したスキームに従って、式（ＸＶＩＩＩ）で示される化合物（以下、「ＣＡ−２」と記す。）、式（ＸＩＸ）で示される化合物（以下、「ＣＡ−３」と記す。）、式（ＸＸＩＩＩ）で示される化合物（以下、「ＣＡ−４」と記す。）を合成した。【００８５】
（１）化合物１４（tert-Butyl((3,5-dimethoxycyclohexa-2,5-dien-1-yl)methoxy)diphenylsilane）の合成
化合物１３（17 mg, 0.098 mmol）のＤＭＦ溶液（1.0 mL）に、０℃でｉｍｉｄａｚｏｌｅ（33 mg, 0.48 mmol）、ＴＢＤＰＳＣｌ（80 μL, 0.31 mmol）を加え、０℃で３０分間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、ＣＨＣｌ３で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 10:1）にて精製し、化合物１４（37.5 mg, 93%）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 7.71-7.69 (4H, m), 7.44-7.37 (6H, m), 4.73 (2H, d, J = 3.0 Hz), 3.56 (6H, s), 3.55 (2H, d, J = 7.5 Hz), 3.26-3.19 (1H, m), 2.84-2.74 (2H, m), 1.09 (9H, s).【００８６】
（２）化合物１５（5-(((tert-Butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)cyclohexane-1,3-dione）の合成
化合物１４（227 mg, 0.56 mmol）のＴＨＦ溶液（2.8 mL）に、１Ｍ ＨＣｌ（0.55 mL）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液をａｃｅｔｏｎｅおよびｔｏｌｕｅｎｅで希釈し、減圧濃縮して、化合物１５（198 mg, 94%）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 7.71-7.69 (4H, m), 7.44-7.37 (6H, m), 3.65-3.30 (3H, m), 2.75-2.30 (4H, m).【００８７】
（３）化合物１６（(3R,3aR,11aS,11bR)-9-(((tert-Butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-3-(isoquinolin-7-yl)-3a-methyl-1,3,3a,8,9,10,11a,11b-octahydrocyclopenta[c]xanthen-7(2H)-one）の合成
化合物１２（実施例１および図１参照、56 mg, 0.19 mmol）のＡｃＯＥｔ／ＣＨ２Ｃｌ２溶液（1:3, 8.0 mL）に、０℃で化合物１５（134 mg, 0.35 mmol）、ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅ（16 μL, 0.23 mmol）を加え、室温で１０時間撹拌した。反応液を０℃にした後、Ｈ２Ｏを加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 1:1）にて精製し、化合物１６（57 mg, 45%）をジアステレオマー混合物（1:1）として得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.25 (1H, s), 8.51 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.85 (1H, s), 7.80 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.67-7.62 (5H, m), 7.47-7.35 (7H, m), 6.37 (1/2H, brs), 6.34 (1/2H, brs), 6.05 (1H, dd, J = 10.0, 1.0 Hz), 5.90 (1H, d, J = 10.0 Hz), 4.89 (1/2H, dd, J = 12.0, 2.0 Hz), 4.87 (1/2H, dd, J = 12.0, 2.0 Hz), 3.67-3.57 (2H, m), 3.23 (1H, t, J = 10.0 Hz), 2.60-2.20 (9H, m), 1.87-1.78 (1H, m), 1.08 (9/2H, s), 1.07 (9/2H, s), 0.69 (3H, s).【００８８】
（４）化合物１７（ＣＡ−２、(3R,3aR,11aS,11bR)-9-(Hydroxymethyl)-3-(isoquinolin-7-yl)-3a-methyl-1,3,3a,8,9,10,11a,11b-octahydrocyclopenta[c]xanthen-7(2H)-one）の合成
化合物１６（42 mg, 0.066 mmol）のＴＨＦ溶液（0.7 mL）に、０℃でＴＢＡＦ（1.0 M in THF, 0.13 mL, 0.13 mmol）とＣＨ３ＣＯＯＨ（4 μL）を加え、室温で終夜撹拌した。飽和食塩水と飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（AcOEtおよびAcOEt/MeOH = 10:1）にて精製し、化合物１７（24.3 mg, 88%）をジアステレオマー混合物（1:1）として得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.25 (1H, s), 8.51 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.85 (1H, s), 7.80 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.66-7.63 (2H, m), 6.36 (1/2H, brs), 6.35 (1/2H, brs), 6.05 (1/2H, d, J = 9.0 Hz), 6.04 (1/2H, d, J = 9.0 Hz), 5.91 (1/2H, d, J = 9.0 Hz), 5.90 (1/2H, d, J = 9.0 Hz), 4.89 (1/2H, dd, J = 12.0, 2.0 Hz), 4.85 (1/2H, dd, J = 12.0, 2.0 Hz), 3.67-3.57 (3H, m), 3.23 (1H, t, J = 10.0 Hz), 2.60-2.20 (9H, m), 1.87-1.78 (1H, m), 0.68 (3H, s).【００８９】
（５）化合物１８（ＣＡ−３、(3R,3aR,11aS,11bR)-9-(Aminomethyl)-3-(isoquinolin-7-yl)-3a-methyl-1,3,3a,8,9,10,11a,11b-octahydrocyclopenta[c]xanthen-7(2H)-one）の合成
化合物１７（4.2 mg, 0.01 mmol）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（0.2 mL）に、０℃でＭｓＣｌ（4 μL, 0.05 mmol）とＥｔ３Ｎ（8 μL, 0.10 mmol）を加え、室温で５時間撹拌した。Ｈ２Ｏを加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣のＤＭＦ溶液（0.2 mL）に、ＮａＮ３（6.4 mg, 0.10 mmol）を加え、室温で３日間撹拌した。Ｈ２Ｏを加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液（0.4 mL + 0.1 mL）にＰＰｈ３（8.0 mg, 0.07 mmol）を加え、室温で５時間撹拌した。Ｈ２Ｏを加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（AcOEtおよびCH2Cl2/MeOH = 10:1）にて精製し、化合物１８（2.3 mg, 42%）をジアステレオマー混合物（1:1）として得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.25 (1H, s), 8.51 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.84 (1H, s), 7.80 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.66-7.63 (2H, m), 6.33 (1H, brs), 6.03 (1H, d, J = 9.5 Hz), 5.91 (1H, d, J = 9.0 Hz), 4.85 (1H, d, J = 13.0 Hz), 3.65 (2H, brs), 3.23-3.16 (3H, m), 2.60-2.20 (9H, m), 1.87-1.78 (1H, m), 0.67 (3H, s).【００９０】
（６）化合物１９（ＣＡ−４、(3R,3aR,11aS,11bR)-3-(Isoquinolin-7-yl)-3a-methyl-7-oxo-1,2,3,3a,7,8,9,10,11a,11b-decahydrocyclopenta[c]xanthene-9-carboxylic acid）の合成
化合物１７（4.5 mg, 0.011 mmol）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（0.3 mL）に、０℃でＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ（6.9 mg, 0.016 mmol）、ＮａＨＣＯ３（3.7 mg, 0.044 mmol）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液を０℃にした後、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液を加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣のｔ−ＢｕＯＨ溶液（0.2 mL）に、ＮａＣｌＯ２（3.0 mg, 0.033 mmol）、２−ｍｅｔｈｙｌ−２−ｂｕｔｅｎｅ（70 μL）、ＮａＨ２ＰＯ４水溶液（20%, 0.2 mL）を加え、室温で２時間撹拌した。反応液を０℃にした後、Ｈ２Ｏを加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（AcOEtおよびCH2Cl2/MeOH = 5:1）にて精製し、化合物１９（1.1 mg, 25% in 2 steps）をジアステレオマー混合物（1:1）として得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.28 (1H, brs), 8.50 (1H, d, J = 6.0 Hz), 7.87 (1H, s), 7.81 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.67-7.63 (2H, m), 6.35 (1H, brs), 6.03 (1H, d, J = 9.5 Hz), 5.91 (1H, d, J = 9.0 Hz), 4.88 (1H, d, J = 11.0 Hz), 3.23-3.16 (2H, m), 2.60-2.20 (8H, m), 1.87-1.78 (1H, m), 0.67 (3H, s).【００９１】
〔実施例５：、式（ＬＩＶ）で示される化合物の合成〕
図７に示したスキームに従って、式（ＬＩＶ）で示される化合物（以下、「ＣＡ−５」と記す。）を合成した。【００９２】
（１）化合物２０（(1'S,2'R,3a'S,7a'S)-1'-(Isoquinolin-7-yl)-7a'-methyloctahydrospiro[[1,3]dioxolane-2,5'-inden]-2'-ol）の合成
化合物６（実施例１および図１参照、350 mg, 1.09 mmol）のＴＨＦ溶液（13.6 mL）に、ＢＨ３・ＴＨＦ（1.0M in THF, 3.3 mL, 3.3 mmol）を加え、室温で４時間撹拌した。反応液を０℃にした後、２Ｎ ＮａＯＨ水溶液（17 mL）および３０％Ｈ２Ｏ２水溶液（17 mL）を加え、室温で３日間撹拌した後、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をＭｅＯＨ（10 mL）に溶解し、Ｎａ２ＣＯ３（800 mg）を加えて、７時間加熱還流した後、不溶物をろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（CHCl3/MeOH/H2O = 30:3:1 (lower phase)）にて精製し、化合物２０（258 mg, 70%）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.17 (1H, s), 8.46 (1H, d, J = 6.5 Hz), 7.79 (1H, s), 7.76 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.61 (1H, d, J = 6.5 Hz), 7.56 (1H, dd, J = 8.5, 1.5 Hz), 5.01 (1H, td, J = 9.0, 1.5 Hz), 4.00-3.95 (4H, m), 2.90 (1H, d, J = 7.5 Hz), 2.46-2.38 (1H, m), 2.02 (1H, td, J = 13.0, 8.5 Hz), 1.80-1.43 (7H, m), 0.63 (3H, s).【００９３】
（２）化合物２１（(1S,2R,3aS,7aS)-2-Hydroxy-1-(isoquinolin-7-yl)-7a-methylhexahydro-1H-inden-5(6H)-one）の合成
化合物２０（209 mg, 0.62 mmol）のａｃｅｔｏｎｅ／Ｈ２Ｏ溶液（10 mL + 2 mL）に、ｐ−ｔｏｌｕｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｍｏｎｏｈｙｄｒａｔｅ（293 mg, 1.54 mmol）を加え、７０℃で５時間撹拌した。反応液を０℃にした後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加え、ＣＨＣｌ３で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（CHCl3/MeOH/H2O = 30:3:1 (lower phase)）にて精製し、化合物２１（174 mg, 96%）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.24 (1H, s), 8.51 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.85 (1H, s), 7.82 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.65 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.59 (1H, dd, J = 8.5, 1.5 Hz), 5.10 (1H, td, J = 9.0, 1.5 Hz), 3.64 (1H, s), 2.97 (1H, d, J = 8.0 Hz), 2.53-2.26 (5H, m), 2.15-2.08 (1H, m), 1.91 (1H, ddd, J = 14.5, 8.0, 2.0 Hz), 1.85 (1H, td, J = 12.0, 5.5 Hz), 1.75 (1H, ddd, J = 12.0, 6.5, 1.5 Hz), 0.83 (3H, s).【００９４】
（３）化合物２２（(1S,2R,3aS,7aS)-1-(Isoquinolin-7-yl)-7a-methyl-2-((triethylsilyl)oxy)hexahydro-1H-inden-5(6H)-one）の合成
化合物２１（214 mg, 0.73 mmol）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（7.3 mL）に、−７８℃でＴＥＳＯＴｆ（180 μL, 0.80 mmol）および２，６−ｌｕｔｉｄｉｎｅ（110 μL, 0.95 mmol）を加え、−７８℃で２０分間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を加え、ＣＨＣｌ３で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（CHCl3/MeOH/H2O = 100:3:1 (lower phase)）にて精製し、化合物２２（207 mg, 70%）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.25 (1H, s), 8.52 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.81-7.78 (2H, m), 7.65 (1H, d, J = 6.0 Hz), 7.58 (1H, dd, J = 8.5, 1.5 Hz), 4.95 (1H, td, J = 9.0, 2.0 Hz), 2.98 (1H, d, J = 7.5 Hz), 2.51-2.24 (5H, m), 2.04 (1H, td, J = 12.5, 8.5 Hz), 1.87-1.78 (2H, m), 1.69 (1H, ddd, J = 13.0, 7.5, 2.0 Hz), 0.83 (3H, s), 0.74 (9H, t, J = 8.0 Hz), 0.46-0.31 (6H, m).【００９５】
（４）化合物２３（(1R,2R,3aS,7aR)-1-(Isoquinolin-7-yl)-7a-methyl-2-((triethylsilyl)oxy)-2,3,3a,4-tetrahydro-1H-inden-5(7aH)-one）の合成
化合物２２（154 mg, 0.38 mmol）のＣＨ３ＣＮ溶液（7.5 mL）に、０℃でＨＭＤＳ（0.8 mL, 3.82 mmol）、ＮａＩ（280 mg, 1.87 mmol）、ＴＭＳＣｌ（0.24 mL, 1.89 mmol）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液を０℃にした後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。得られた生成物のＤＭＳＯ溶液（7.5 mL）に、０℃で２−ヨードキシ安息香酸（210 mg, 0.75 mmol）を加え、室温で９時間撹拌した。反応液を０℃にした後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液および飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液を加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 1:1）にて精製し、化合物２３（72 mg, 47%）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.25 (1H, s), 8.52 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.84-7.80 (2H, m), 7.66 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.61 (1H, dd, J = 8.5, 1.5 Hz), 6.96 (1H, d, J = 14.5 Hz), 5.86 (1H, d, J = 14.5 Hz), 4.88 (1H, t, J = 7.0 Hz), 3.16 (1H, d, J = 7.0 Hz), 2.87-2.78 (1H, m), 2.63 (1H, dd, J = 17.5, 4.0 Hz), 2.41 (1H, dd, J = 17.5, 15.0 Hz), 2.16 (1H, td, J = 13.5, 8.5 Hz), 1.90 (1H, dd, J = 13.5, 7.5 Hz), 0.86 (3H, s), 0.73 (9H, t, J = 8.0 Hz), 0.46-0.31 (6H, m).【００９６】
（５）化合物２４（(1R,2R,3aS,7aS)-1-(Isoquinolin-7-yl)-7a-methyl-2-((triethylsilyl)oxy)-2,3,3a,7a-tetrahydro-1H-inden-5-yl trifluoromethanesulfonate）の合成
化合物２３（85.5 mg, 0.21 mmol）のＴＨＦ溶液（4.2 mL）に、−７８℃で、ｐｈｅｎｙｌ−Ｎ−ｔｒｉｆｌｉｍｉｄｅ（300 mg, 0.84 mmol）、ＫＨＭＤＳ（0.5 M in toluene, 1.7 mL, 0.85 mmol）を加え、１５０分撹拌した。反応液を０℃にした後、Ｈ２Ｏを加え、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 3:1）にて精製し、化合物２４（72 mg, 64%）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.25 (1H, s), 8.51 (1H, d, J = 6.0 Hz), 7.84 (1H, s), 7.83 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.69 (1H, d, J = 6.5 Hz), 7.62 (1H, d, J = 8.5 Hz), 6.16 (1H, d, J = 10.0 Hz), 5.90 (1H, s), 5.77 (1H, dd, J = 10.0, 2.0 Hz), 4.92 (1H, t, J = 7.0 Hz), 3.41-3.36 (1H, m), 3.24 (1H, d, J = 6.5 Hz), 2.30 (1H, td, J = 13.0, 8.5 Hz), 1.94 (1H, dd, J = 13.0, 8.0 Hz), 0.73 (3H, s), 0.73 (9H, t, J = 8.0 Hz), 0.46-0.31 (6H, m).【００９７】
（６）化合物２５（(1R,2R,3aS,7aS)-Methyl 1-(isoquinolin-7-yl)-7a-methyl-2-((triethylsilyl)oxy)-2,3,3a,7a-tetrahydro-1H-indene-5-carboxylate）の合成
化合物２４（8.3 mg, 0.015 mmol）のＤＭＦ溶液（0.5 mL）に、室温で、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（2 mg, 0.002 mmol）、ＭｅＯＨ（0.2 mL）、Ｅｔ３Ｎ（0.015 mL, 0.11 mmol）を加え、一酸化炭素雰囲気下、４０℃で１時間撹拌した。反応液を０℃にした後、Ｈ２Ｏを加え、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 2:1）にて精製し、化合物２５（6.7 mg, 97%）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.25 (1H, s), 8.51 (1H, d, J = 6.0 Hz), 7.85 (1H, s), 7.81 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.67 (1H, d, J = 6.5 Hz), 7.63 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.10 (1H, d, J = 2.5 Hz), 6.32 (1H, d, J = 10.0 Hz), 6.05 (1H, d, J = 10.0 Hz), 4.93 (1H, t, J = 7.0 Hz), 3.77 (3H, s), 3.29 (1H, ddd, J = 12.0, 8.5, 2.5 Hz), 3.25 (1H, d, J = 6.5 Hz), 2.32 (1H, td, J = 13.0, 8.5 Hz), 1.95 (1H, dd, J = 13.0, 8.5 Hz), 0.73 (9H, t, J = 8.0 Hz), 0.62 (3H, s), 0.46-0.31 (6H, m).【００９８】
（７）化合物２６（((1R,2R,3aS,7aS)-1-(Isoquinolin-7-yl)-7a-methyl-2-((triethylsilyl)oxy)-2,3,3a,7a-tetrahydro-1H-inden-5-yl)methanol）の合成
化合物２５（46 mg, 0.10 mmol）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（2.5 mL）に、−７８℃で、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（1.0 M in n-hexane, 0.3 mL, 0.3 mmol）を加え、３０分撹拌した。反応液を０℃にした後、ＣＨ２Ｃｌ２（5 mL）で希釈し、酒石酸ナトリウムカリウム水溶液（7 mL）を加え、６時間撹拌した後、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 1:1）にて精製し、化合物２６（22.5 mg, 52%）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.24 (1H, s), 8.51 (1H, d, J = 6.0 Hz), 7.85 (1H, s), 7.81 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.65 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.63 (1H, dd, J = 8.5, 2.0 Hz), 6.03 (1H, d, J = 9.0 Hz), 5.90 (1H, brs), 5.89 (1H, dd, J = 9.0, 1.5 Hz), 4.93 (1H, t, J = 7.0 Hz), 4.16 (1H, d, J = 12.5 Hz), 4.11 (1H, d, J = 12.5 Hz), 3.24 (1H, d, J = 7.5 Hz), 3.24-3.19 (1H, m), 2.23 (1H, td, J = 13.5, 8.5 Hz), 1.88 (1H, dd, J = 12.0, 8.5 Hz), 0.73 (9H, t, J = 8.0 Hz), 0.63 (3H, s), 0.46-0.31 (6H, m).【００９９】
（８）化合物２８（(2R,3R,3aS,11aS,11bR)-3-(Isoquinolin-7-yl)-3a-methyl-2-((triethylsilyl)oxy)-1,3,3a,8,9,10,11a,11b-octahydrocyclopenta[c]xanthen-7(2H)-one）の合成
化合物２６（22.5 mg, 0.054 mmol）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（1.3 mL）に、０℃でＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ（34.1 mg, 0.08 mmol）、ＮａＨＣＯ３（22.6 mg, 0.27 mmol）を加え、室温で３０分撹拌した。反応液を０℃にした後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮して、化合物２７を含む混合物（27.5 mg）を得た。
上記生成物のＡｃＯＥｔ溶液（2.7 mL）に、０℃で１，３−ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅｄｉｏｎｅ（12 mg, 0.11 mmol）、ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅ（4.3 μL, 0.064 mmol）を加え、室温で２時間撹拌した。反応液を０℃にした後、Ｈ２Ｏを加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-hexane/AcOEt = 1:1）にて精製し、化合物２８（16.5 mg, 60% in 2 steps）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.26 (1H, s), 8.51 (1H, d, J = 6.0 Hz), 7.83 (1H, s), 7.81 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.66 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.61 (1H, dd, J = 8.5, 1.5 Hz), 6.36 (1H, brs), 6.01 (1H, d, J = 9.0 Hz), 5.78 (1H, d, J = 9.0 Hz), 4.95 (1H, t, J = 7.0 Hz), 4.81 (1H, dd, J = 11.5, 2.5 Hz), 3.17 (1H, d, J = 6.5 Hz), 2.84 (1H, td, J = 13.5, 7.5 Hz), 2.57 (1H, ddd, J = 18.0, 9.0, 5.0 Hz), 2.50 (1H, dt, J = 18.0, 5.0 Hz), 2.44-2.40 (2H, m), 2.25 (1H, td, J = 13.5, 8.5 Hz), 2.12-1.95 (3H, m), 0.75 (3H, s), 0.73 (9H, t, J = 8.0 Hz), 0.46-0.31 (6H, m).【０１００】
（９）化合物３０（ＣＡ−５、(3R,3aS,11aS,11bR)-3-(Isoquinolin-7-yl)-3a-methyl-1,3,3a,9,10,11b-hexahydrocyclopenta[c]xanthene-2,7(8H,11aH)-dione）の合成
化合物２６（4.7 mg, 0.009 mmol）のＭｅＯＨ溶液（0.7 mL）に、０℃で５％ＨＣｌ溶液（0.18 mL, 0.25 mmol）を加え、１０分撹拌した。反応液にＮａＨＣＯ３（64 mg）を加え、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をＣＨＣｌ３に溶解し、不溶物を綿栓ろ過し、減圧濃縮して、化合物２９を含む混合物（5.4 mg）を得た。
上記生成物のＣＨ２Ｃｌ２溶液（0.3 mL）に、０℃でＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ（11.6 mg, 0.03 mmol）を加え、室温で３０分撹拌した。反応液を０℃にした後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液および飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液を加え、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（CHCl3/MeOH/H2O = 100:3:1 (lower phase)）にて精製し、化合物３０（3.3 mg, 91% in 2 steps）を得た。
1H-NMR(500 MHz, CDCl3)δ: 9.26 (1H, s), 8.55 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.84 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.77 (1H, s), 7.67 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.46 (1H, d, J = 8.5 Hz), 6.47 (1H, brs), 6.16 (1H, d, J = 9.0 Hz), 5.97 (1H, d, J = 9.0 Hz), 4.99 (1H, d, J = 9.0 Hz), 3.71 (1H, s), 2.90-2.81 (2H, m), 2.61 (1H, ddd, J = 18.0, 9.5, 5.5 Hz), 2.56-2.44 (4H, m), 2.12-1.95 (2H, m), 0.80 (3H, s).【０１０１】
〔実施例６：血管内皮細胞選択的な細胞増殖阻害活性の評価（２）〕
ＣＡ−１、ＣＡ−２、ＣＡ−３、ＣＡ−４およびＣＡ−５について、正常ヒト臍帯静脈血管内皮細胞ＨＵＶＥＣおよびヒト咽頭上皮がん細胞ＫＢ３−１に対する細胞増殖阻害活性を評価した。各被験化合物は、ＥｔＯＨに溶解し、所定の濃度に調製した。ＨＵＶＥＣおよびＫＢ３−１をそれぞれ２×１０３ｃｅｌｌｓ／１００μＬ／ｗｅｌｌの濃度で９６ｗｅｌｌのマルチウェルプレートに播種し、３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下で２４時間培養した。次に、各種濃度に調製した被検化合物または対照化合物のエタノール溶液１．０μＬを添加し、同条件でさらに７２時間培養した。７２時間後、ＷＳＴ−８ [2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium, monosodium salt] 試薬１０μＬを添加し、３時間培養後に生存細胞が形成する水溶性のｆｏｒｍａｚａｎをＯＤ４５０ｎｍで比色定量し、化合物非添加群のそれと比較することにより生育阻害率を算出した。【０１０２】
ＣＡ−１の結果を図８に、ＣＡ−２の結果を図９に、ＣＡ−３の結果を図１０に、ＣＡ−４の結果を図１１に、ＣＡ−５の結果を図１２にそれぞれ示した。図８〜１２から明らかなように、これらの化合物はいずれも血管内皮細胞の増殖を選択的に抑制することが明らかとなった。【０１０３】
〔実施例７：経口投与によるｉｎ ｖｉｖｏ血管新生阻害活性の評価〕
実験は、投与経路を経口投与に変更したこと、５０ｍｇ／ｋｇ群を設けたこと以外は、実施例３と同様に行った。
結果を図１３および図１４に示した。図１３は、各群（２５ｍｇ／ｋｇ群を除く）のマウスにおけるマトリゲル移植部位の写真であり、図１４は、マトリゲル内に蓄積したヘモグロビン量を測定した結果を示すグラフである。図１３および図１４から明らかなように、ＣＡ−１投与群のマトリゲル内におけるヘモグロビンの蓄積量は、１０ｍｇ／ｋｇ以上の用量で有意に抑制され、５０ｍｇ／ｋｇ群では、血管新生促進因子であるｂＦＧＦを含有しないマトリゲルを用いて検討した場合とほぼ同程度の血管新生阻害活性を示した。これらのことから、被験化合物ＣＡ−１は、経口投与によってもｉｎ ｖｉｖｏ血管新生阻害効果を示すことが明らかとなった。【０１０４】
〔実施例８：経口投与による癌細胞移植モデルマウスでの抗腫瘍活性の評価〕
実験は、投与経路を経口投与に変更したこと、５ｍｇ／ｋｇ群を設けずに５０ｍｇ／ｋｇ群を設けたこと以外は、実施例３と同様に行った。
結果を図１５および図１６に示した。図１５は、各群のマウスから摘出した腫瘍の大きさを示す写真であり、図１６は、腫瘍重量を測定した結果を示すグラフである。図１５および図１６から明らかなように、ＣＡ−１投与群の腫瘍重量は、コントロール群に対して１０ｍｇ／ｋｇ投与群で６７％、２５ｍｇ／ｋｇ投与群で５０％、５０ｍｇ／ｋｇ投与で２５％に減少し、顕著な抗腫瘍活性を示した。また、いずれの投与群においてもマウスの体重減少や下痢、目視での臓器の異常は観察されなかった。【０１０５】
なお本発明は上述した各実施形態および実施例に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。また、本明細書中に記載された学術文献および特許文献の全てが、本明細書中において参考として援用される。
【図１】
2012036287.tif 000048
【図２】
2012036287.tif 000049
【図３】
2012036287.tif 000050
【図４】
2012036287.tif 000051
【図５】
2012036287.tif 000052
【図６】
2012036287.tif 000053
【図７】
2012036287.tif 000054
【図８】
2012036287.tif 000055
【図９】
2012036287.tif 000056
【図１０】
2012036287.tif 000057
【図１１】
2012036287.tif 000058
【図１２】
2012036287.tif 000059
【図１３】
2012036287.tif 000060
【図１４】
2012036287.tif 000061
【図１５】
2012036287.tif 000062
【図１６】
2012036287.tif 000063
【国際調査報告】
2012036287.tif 000064
2012036287.tif 000065
2012036287.tif 000066
2012036287.tif 000067
2012036287.tif 000068
2012036287.tif 000069