(57)【要約】  本発明は、認知機能改善作用を有する薬剤及び／又は食品、並びに認知機能を改善する方法の提供を目的とする。  本発明は、１，２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン及び１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンを含有することを特徴とする、認知機能改善用併用剤、該併用剤の学習及び／又は記憶の向上の為の使用、並びに該併用剤を投与することを含む認知機能改善方法、学習能力及び／又は記憶能力を向上する方法に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
１，２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン及び１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンを含有することを特徴とする、認知機能改善用併用剤。
【請求項２】
認知機能改善が、認知障害を伴う疾患又は状態を有する患者における認知機能改善である、請求項１記載の併用剤。
【請求項３】
認知障害を伴う疾患又は状態が、認知症、非認知症性の認知障害、及び、学習又は記憶障害からなる群から選択される少なくとも１種である、請求項２記載の併用剤。
【請求項４】
学習能力及び／又は記憶能力の向上の為に使用されることを特徴とする、請求項１記載の併用剤。
【請求項５】
食品である、請求項４記載の併用剤。
【請求項６】
１，２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＬＰＣ）の有効量及び１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＯＰＣ）の有効量をそれを必要とする対象に投与することを含む、認知機能改善方法。
【請求項７】
認知機能改善が、認知障害を伴う疾患又は状態を有する患者における認知機能改善である、請求項６記載の方法。
【請求項８】
認知障害を伴う疾患又は状態が、認知症、非認知症性の認知障害、及び、学習又は記憶障害からなる群から選択される少なくとも１種である、請求項７記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、認知機能改善用併用剤、より詳細には認知機能改善のための２種類のホスファチジルコリンの併用に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、認知症が世界的に医療上の大きな問題となっている。認知症は、記憶障害及び判断力の低下を中心にした多種の症状を伴う疾患であるが、その原因となる病気によって症状及びその経過は異なる。しかし、いずれの場合も、患者の生活の質を著しく損なうという点で共通している。また、患者の家族をはじめとする介護者にも多大な労苦を強いるという事実を考えたとき、認知症は社会的にたいへん重大な問題であるといえよう。寿命の長期化による高齢者人口の増加が、認知症患者の増加と関係しているため、日本では今後更に認知症患者が増加すると予測されている。また、認知症には分類されない何らかの認知障害を患う人も多い。【０００３】
認知症の原因となる病気は、現在までに多数挙げられているが、脳血管性認知症とアルツハイマー型認知症が最も多く、両者及びその複合型が、原因となる病気の大部分を占めている。特にアルツハイマー型認知症が、日本において近年増加している。【０００４】
認知症発症の詳細なメカニズムは未だ解明されていない。とはいえ、認知症患者において、様々な生化学的病変が報告されている。アルツハイマー型認知症及びレビー小体型認知症などにおいて報告されているのが、脳内のアセチルコリン濃度の低下である。この事実に基づき、認知症、特にアルツハイマー型認知症の治療において、アセチルコリン分解酵素阻害剤の使用が、現在までに最も成功している方法である。日本において既に市販されている塩酸ドネペジル（商品名アリセプト）をはじめ、多種のアセチルコリン分解酵素阻害剤がこれまで開発されている。しかし、それらの薬剤は、認知症を根本的に治療するものではなく、症状の進行を遅らせる効果を有するものである。また、塩酸ドネペジルに関して、急性腎不全及び横紋筋融解症などの発症の危険性が報告されているなど、副作用の問題もある。これらの理由から、より安全で効果の高い認知症改善薬の開発が待ち望まれており、その薬剤はアセチルコリン分解酵素阻害と異なる機序で作用するものである可能性が高い。【０００５】
本発明者は、塩酸ドネペジルとは異なる薬剤として、今までにホスファチジルコリンに認知機能改善作用があることを報告している（特許文献１）。しかしながら、依然として、認知機能を改善するための薬剤が求められているのが現状である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００９−７３２９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、認知機能改善用薬剤及び認知機能を改善する方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、以前の研究から、ホスファチジルコリンに認知機能改善作用があることを見出している。そこで、かかる知見に基づいて、より効果的に認知機能を改善し得る薬剤を得ることを目的としてさらに鋭意検討を重ねた。結果、特定の２種類のホスファチジルコリンの併用が、認知機能の改善に対してより効果的であることを見出し、さらに、臨床においても十分な効果を発揮することを確認して本発明を完成するに至った。即ち、本発明は、以下の通りである。
（１）１，２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＬＰＣ）及び１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＯＰＣ）を含有することを特徴とする、認知機能改善用併用剤。
（２）認知機能改善が、認知障害を伴う疾患又は状態を有する患者における認知機能改善である、上記（１）記載の併用剤。
（３）認知障害を伴う疾患又は状態が、認知症（老人性認知症、アルツハイマー型認知症、脳血管性認知症、外傷後認知症、脳腫瘍により生じる認知症、慢性硬膜下血腫により生じる認知症、正常圧脳水腫により生じる認知症、髄膜炎後認知症及びパーキンソン型認知症などの種々の疾患により生じる認知症）、非認知症性の認知障害（軽度認知障害（ＭＣＩ））、及び、学習又は記憶障害（脳発達障害に伴う学習及び記憶障害）からなる群から選択される少なくとも１種である、上記（２）記載の併用剤。
（４）学習能力及び／又は記憶能力の向上の為に使用されることを特徴とする、上記（１）記載の併用剤。
（５）食品である、上記（４）記載の併用剤。
（６）１，２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＬＰＣ）の有効量及び１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＯＰＣ）の有効量をそれを必要とする対象に投与することを含む、認知機能改善方法。
（７）認知機能改善が、認知障害を伴う疾患又は状態を有する患者における認知機能改善である、上記（６）記載の方法。
（８）認知障害を伴う疾患又は状態が、認知症（老人性認知症、アルツハイマー型認知症、脳血管性認知症、外傷後認知症、脳腫瘍により生じる認知症、慢性硬膜下血腫により生じる認知症、正常圧脳水腫により生じる認知症、髄膜炎後認知症及びパーキンソン型認知症などの種々の疾患により生じる認知症）、非認知症性の認知障害（軽度認知障害（ＭＣＩ））、及び、学習又は記憶障害（脳発達障害に伴う学習及び記憶障害）からなる群から選択される少なくとも１種である、上記（７）記載の方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の併用剤は、認知機能改善作用を有し、例えば、認知症、非認知症性の認知障害、及び学習又は記憶障害などを含む様々の疾患又は状態の予防又は治療、あるいは学習能力及び／又は記憶能力の向上に有用であり得る。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は、正常ラットにおける習得潜時に対する、ＤＬＰＣ単独投与、ＰＯＰＣ単独投与、及びＤＬＰＣとＰＯＰＣの併用投与の効果を示したグラフである。各ポイントは連続した２日間の習得潜時の平均値（±ＳＥＭ）を示す。Ｎ＝６
【図２】図２は、認知障害におけるＰＯＰＣ及びＤＬＰＣ併用投与の効果を示したグラフである。各値は、各時点での平均値（±ＳＥＭ）ＭＭＳＥスコアを表している。***P<0.0001, paired t-test.
【図３】図３は、認知障害における、ＰＯＰＣ単独、ＤＬＰＣ単独、あるいはＰＯＰＣ＋ＤＬＰＣ併用投与の効果を示したグラフである。摂取前と摂取して５カ月後でのＭＭＳＥスコアの差を算出した（Δ increase in MMSE score）。各カラムは平均値（±ＳＥＭ）Δincrease in MMSE scoreを表している。Ｐ値、unpaired t-test.
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明は２種類の特定のホスファチジルコリンを併用することに特徴がある。
一方のホスファチジルコリンは、下記式
【００１２】
【化１】
2012090713.tif 000003
【００１３】
（式中、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１及び−Ｃ（Ｏ）Ｒ２はそれぞれリノール酸残基である）で表される、ジリノレオイルホスファチジルコリン（１，２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；以下、ＤＬＰＣ）である。
もう一方のホスファチジルコリンは、下記式
【００１４】
【化２】
2012090713.tif 000004
【００１５】
（式中、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３はパルミチン酸残基であり、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４はオレイン酸残基である）
で表される、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；以下、ＰＯＰＣ）である。
【００１６】
ＤＬＰＣ及びＰＯＰＣは、その活性や安全性の面から誘導体化されていてもよい。例えば、水素添加、水酸化、アルキル化、ハロゲン化等の誘導体化が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１７】
本発明に用いるＤＬＰＣ及びＰＯＰＣは、動物（卵黄など）、植物（大豆など）、真菌（酵母、カビ）などから単離精製されたもの、化学的に合成されたもの等、特に制限はない。そして本発明に用いるＤＬＰＣ及びＰＯＰＣは、これを医薬として使用できる程度に精製されたものであれば、特に制限無く用いることができる。また、市販されているものを用いることもできる。
【００１８】
本発明において「併用剤」とは、上記ＤＬＰＣとＰＯＰＣとが併用されて投与されることを意味する。
【００１９】
本発明の併用剤の投与形態は、特に限定されず、投与時に、ＤＬＰＣとＰＯＰＣとが組み合わされていればよい。このような投与形態としては、例えば、
（１）ＤＬＰＣとＰＯＰＣとを同時に製剤化して得られる単一の製剤としての投与、
（２）ＤＬＰＣとＰＯＰＣとを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での同時投与、
（３）ＤＬＰＣとＰＯＰＣとを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での時間差をおいての投与、
（４）ＤＬＰＣとＰＯＰＣとを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での同時投与、
（５）ＤＬＰＣとＰＯＰＣとを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での時間差をおいての投与
等が挙げられる。
簡便性の観点から、単一の製剤としての投与、又は２種の製剤の同一経路での同時投与が好ましい。
【００２０】
以下、本発明において、「製剤」と称する場合は、ＤＬＰＣ及びＰＯＰＣとを同時に製剤化して得られる単一の製剤、及びＤＬＰＣとＰＯＰＣとを別々に製剤化して得られる２種の製剤の各々、のいずれをも包含する。
【００２１】
本発明の併用剤におけるＤＬＰＣ及びＰＯＰＣの量は、それぞれ、該併用剤の投与形態（上述）、病気の重篤度、投与対象となる動物種、投与対象の薬物受容性、体重、年齢等によって異なる。通常、成人１日あたり、５０〜５００ｍｇ、好ましくは１００〜３００ｍｇのＤＬＰＣ、及び５０〜５００ｍｇ、好ましくは１００〜３００ｍｇのＰＯＰＣが対象に投与される。ＤＬＰＣとＰＯＰＣとの摂取比は１：１程度であることが好ましい。ＤＬＰＣ及びＰＯＰＣは併用することにより、それぞれを単独で用いた場合より、より少ない投与量とすることができる。
【００２２】
本発明の併用剤は、有効成分であるＤＬＰＣ及びＰＯＰＣ以外に、任意の添加物、例えば医薬上許容され得る担体を含むことができる。医薬上許容され得る担体としては、例えば、ショ糖、デンプン、マンニット、ソルビット、乳糖、グルコース、セルロース、タルク、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の賦形剤、セルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリプロピルピロリドン、ゼラチン、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、ショ糖、デンプン等の結合剤、デンプン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、ナトリウム−グリコール−スターチ、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、クエン酸カルシウム等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、エアロジル、タルク、ラウリル硫酸ナトリウム等の滑剤、クエン酸、メントール、グリシルリシン・アンモニウム塩、グリシン、オレンジ粉等の芳香剤、安息香酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン等の保存剤、クエン酸、クエン酸ナトリウム、酢酸等の安定剤、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸アルミニウム等の懸濁剤、界面活性剤等の分散剤、水、生理食塩水、オレンジジュース等の希釈剤、カカオ脂、ポリエチレングリコール、白灯油等のベースワックスなどが挙げられるが、それらに限定されない。
【００２３】
一つの実施態様において、本発明の併用剤は経口投与に好適な製剤として処方され得る。経口投与に好適な製剤は、水、生理食塩水のような希釈液に有効量の物質を溶解させた液剤、有効量の物質を固体や顆粒として含んでいるカプセル剤、顆粒剤、散剤又は錠剤、適当な分散媒中に有効量の物質を懸濁させた懸濁液剤、有効量の物質を溶解させた溶液を適当な分散媒中に分散させ乳化させた乳剤等である。
【００２４】
別の実施態様において、本発明の併用剤は非経口的な投与に好適な製剤として処方され得る。非経口的な投与（例、静脈内注射、皮下注射、筋肉注射、局所注入など）に好適な製剤としては、水性および非水性の等張無菌の注射液剤があり、これには抗酸化剤、緩衝液、制菌剤、等張化剤等が含まれていてもよい。また、水性および非水性の無菌の懸濁液剤が挙げられ、これには懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定化剤、防腐剤等が含まれていてもよい。当該製剤は、アンプルやバイアルのように単位投与量あるいは複数回投与量ずつ容器に封入することができる。また、有効成分および医薬上許容され得る担体を凍結乾燥し、使用直前に適当な無菌のビヒクルに溶解又は懸濁すればよい状態で保存することもできる。
【００２５】
有効成分としてＤＬＰＣ及びＰＯＰＣを含有する本発明の併用剤は、哺乳動物（例、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、サル、ヒトなど）に対して認知機能を改善する作用を有し、従ってＤＬＰＣ及びＰＯＰＣを含有する本発明の併用剤は、認知障害を伴う疾患又は状態の予防又は治療用として有用であり、医薬品として提供される。認知障害を伴う疾患又は状態としては、具体的には、認知症（例、老人性認知症、アルツハイマー型認知症、脳血管性認知症、外傷後認知症、脳腫瘍により生じる認知症、慢性硬膜下血腫により生じる認知症、正常圧脳水腫により生じる認知症、髄膜炎後認知症及びパーキンソン型認知症などの種々の疾患により生じる認知症）、非認知症性の認知障害（例、軽度認知障害（ＭＣＩ））、学習又は記憶障害（例、脳発達障害に伴う学習及び記憶障害）などを含む様々の疾患又は状態が挙げられる。さらに本発明の併用剤は、学習や記憶（例、短期記憶、長期記憶）の向上のために使用することができる。
【００２６】
本明細書中で用いられる場合、「予防」とは、認知障害、学習・記憶障害等を示さない対象（被験体）において、該症状が顕在化するのを防ぐことを意味し、「治療」とは、認知障害、学習・記憶障害等を示す被験体において、該症状を軽減すること、あるいは該症状の悪化を防ぐこと又は遅延させることを意味する。「改善」とは、認知障害、学習・記憶障害等を示さない対象においては、認知能力や学習・記憶能力の向上を意味し、認知障害、学習・記憶障害等を示す被験体においては、該症状を緩和、好ましくは日常生活に差し支えない程度にまで症状を緩和することを意味する。
【００２７】
本発明の併用剤は、食品として提供することができる。有効成分としてＤＬＰＣ及びＰＯＰＣを含有する本発明の併用剤は、哺乳動物（例、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、サル、ヒトなど）に対して認知機能を改善する作用を有し、従って有効成分としてＤＬＰＣ及びＰＯＰＣを含有する本発明の併用剤は、認知障害を伴う疾患や状態の予防や調節に効果的である。特に認知障害を伴う疾患や状態の予防や調節に効果的な機能性食品、及び学習や記憶の向上に効果的な機能性食品として提供することができる。
【００２８】
本発明において「食品」とは、医薬品及び医薬部外品以外の全ての飲食物を意味する。例えば、特定保健用食品、栄養機能食品、及びいわゆるサプリメントを含むが、これらに限定されない。
【００２９】
本発明の併用剤を食品として用いる場合には、食品としては、例えば、一般食品（例えば、パン、乳製品（例、牛乳、ヨーグルト）、菓子、キャンデー、飴、チョコレート、ケーキ、プリン、ゼリー、清涼飲料水、麺類）、健康食品、ダイエタリーサプリメント、並びに厚生労働省の保健機能食品制度に規定される特定保健用食品及び栄養機能食品が挙げられる。該食品は、液状物（水溶性、不溶性）、粉末、顆粒、錠剤、カプセル等の固形物、ゼリー状等の半固形物などの任意の形態であり得る。本発明の併用剤は水又は所定の水溶液に溶解して用いることができる。このような場合、本発明の併用剤は溶解補助物（例、リノール酸）、安定化剤を含んでいてもよい。
【００３０】
本発明の併用剤を食品として用いる場合、その摂取量は、用いる形態（例、液状物、固形物、半固形物）、ＤＬＰＣ及びＰＯＰＣの含有濃度、並びにＤＬＰＣ及びＰＯＰＣ以外に含まれる成分の有無、種類及び量等によって異なり一概に云えないが、通常、食品中に、ＤＬＰＣ及びＰＯＰＣの合計量が好ましくは３０％以上、より好ましくは９０％以上の割合で含められる。食品中のＤＬＰＣ及びＰＯＰＣ以外の成分としては、上記した任意の添加物が挙げられる。
【００３１】
本発明の併用剤は、該併用剤の単位摂取量又はその分割量が個別に包装又は充填されたもの、あるいは多数の単位摂取量又はその分割量が包括的に包装又は充填されたものであり得る。
本発明の併用剤が、単一の製剤として提供される場合には、該併用剤の単位摂取量又はその分割量は、ＤＬＰＣ及びＰＯＰＣ両方の、即ち、ホスファチジルコリン全体の単位摂取量又はその分割量である。本発明の併用剤が、２種の製剤の併用として提供される場合には、該併用剤の単位摂取量又はその分割量は、ＤＬＰＣの単位摂取量又は分割量と、ＰＯＰＣの単位摂取量又はその分割量との組み合わせである。
【００３２】
単位摂取量又はその分割量が個別に包装又は充填された医薬品あるいは食品としては、例えば、単位摂取量又はその分割量を、通常の包装物（例えば、ＰＴＰ（press through packing）シート、紙容器、フィルム（例、プラスチックフィルム）容器、ガラス容器、プラスチック容器）中に別々に包装又は充填したものが挙げられる。このように個別に包装又は充填された医薬品あるいは食品は、さらに組み合わされて、１つの容器（例えば、紙容器、フィルム（例、プラスチックフィルム）容器、ガラス容器、プラスチック容器）中に一緒に包装又は充填されていてもよい。多数の単位摂取量又はその分割量が包括的に包装又は充填された医薬品あるいは食品としては、例えば、多数の錠剤又はカプセル剤が区分されることなく１つの容器（例えば、紙容器、フィルム（例、プラスチックフィルム）容器、ガラス容器、プラスチック容器）中に包装又は充填されたものが挙げられる。本発明の医薬品あるいは食品はまた、単位摂取量又はその分割量を、長期間の摂取に十分な数で含み得るが、例えば食品の場合であれば３日以上、好ましくは７日、１０日、１４日又は２１日以上あるいは１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月以上の摂取に十分な数で含み得る。
【００３３】
本発明の併用剤には、必須の有効成分であるＤＬＰＣ及びＰＯＰＣに加え、他の、神経変性疾患を予防又は治療し得る１種類以上の化合物を含めてもよい。
【００３４】
他の神経変性疾患を予防又は治療する化合物の例として、ポリフェノール、コエンザイムＱ１０、β−シトステロール、イソフラボン、メビニン酸、ビタミンＣ、ビタミンＥ、フラボノイド類、テルペン類、葉酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、セスキルペンラクトン、ウロキナーゼ、ナットウキナーゼ、ジリノレオイルホスファチジルエタノールアミン、硫化プロピル、リンゴペクチン、酢酸、ＥＰＡ、及びＤＨＡが挙げられる。
【００３５】
本発明において、ＤＬＰＣ及びＰＯＰＣを併用投与することにより、哺乳動物（例、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、サル、ヒトなど）に対して認知機能を改善し得る。従ってＤＬＰＣ及びＰＯＰＣを併用投与することにより、認知障害を伴う疾患又は状態の予防又は治療が可能となる。認知障害を伴う疾患又は状態としては、具体的には、認知症（例、老人性認知症、アルツハイマー型認知症、脳血管性認知症、外傷後認知症、脳腫瘍により生じる認知症、慢性硬膜下血腫により生じる認知症、正常圧脳水腫により生じる認知症、髄膜炎後認知症及びパーキンソン型認知症などの種々の疾患により生じる認知症）、非認知症性の認知障害（例、軽度認知障害（ＭＣＩ））、学習又は記憶障害（例、脳発達障害に伴う学習及び記憶障害）などを含む様々の疾患又は状態が挙げられる。さらに本発明のＤＬＰＣ及びＰＯＰＣを併用投与することにより、学習や記憶（例、短期記憶、長期記憶）の向上が期待できる。本発明の方法におけるＤＬＰＣ及びＰＯＰＣの投与量や投与形態は、上記本発明の併用剤で述べたものと同様である。
【００３６】
本明細書中で挙げられた特許及び特許出願明細書を含む全ての刊行物に記載された内容は、本明細書での引用により、その全てが明示されたと同程度に本明細書に組み込まれるものである。
【００３７】
以下に実施例を挙げ、本発明を更に詳しく説明するが、本発明は下記実施例等に何ら制限されるものではない。
【実施例】
【００３８】
（実験方法及び材料）
１．水迷路試験
雄性ウィスターラット（７週）を水迷路試験に用いた。円形のプラスチック製の水槽（直径１８０ｃｍ、深さ４５ｃｍ）を用いた。水槽の内側は全て黒色に塗り、底から２５ｃｍまで墨汁で濁った水を満たした（２２℃）。黒色に塗ったプラットホーム（直径１１ｃｍ）を水中に置き、水面下１ｃｍ水没するようにした。水槽は試験室に置き、ラットが水槽から見られる目印を幾つか設けた。試験を行っている間は、目印の位置は変えずにおいた。プラットホームを水槽の中央と端から等距離のところにある一定の位置、すなわち、４分円の一つの中心に設けた。無作為に選択した５箇所のうちの一つに水槽の壁に向き合わせてラットを放し、プラットホーム上に退避するまでの時間（習得潜時：acquisition latency）を測定した。うまく退避できれば、ラットをそのままプラットホーム上で１０秒間滞在させた。水迷路試験の７日前から試験の間中、毎日、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）に溶解したＤＬＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ）単独、ＤＬＰＣ（１０ｍｇ／ｋｇ）単独、ＰＯＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ）単独、ＰＯＰＣ（１０ｍｇ／ｋｇ）単独、又はＤＬＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ）及びＰＯＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ）、あるいはＰＥＧ単独を経口投与した。水迷路試験は、１日に２回試験を行い、２回目の試験は最初の試験の２分後に開始した。連続して８日間試験を行い、連続した２日間からプラットホームにたどりつくまでの習得潜時の平均値（±ＳＥＭ）を計算した。【００３９】
２．ミニメンタルステート（Mini Mental State Examination（ＭＭＳＥ））テスト
ＭＭＳＥテストを、認知障害を有する、５９歳〜９５歳（平均、７６±１．１歳）の患者３１０人（男性１３５人、女性１７５人）について行なった。２１４人の患者にはＰＯＰＣ（９０ｍｇ／ｄａｙ）を、２１人にはＤＬＰＣ（１００ｍｇ／ｄａｙ）を、７５人にはＤＬＰＣ（５０ｍｇ／ｄａｙ）とＰＯＰＣ（４５ｍｇ／ｄａｙ）とを、それぞれ朝食後に１回、経口的に投与した。ＭＭＳＥテストについては、満点を３０とし、２０未満の場合を軽度認知障害及び認知症と判定した。【００４０】
（結果）
実験例１．ラットにおける習得潜時に対する、ＤＬＰＣ単独投与、ＰＯＰＣ単独投与、及びＤＬＰＣとＰＯＰＣの併用投与の効果
ラットにＰＥＧ、ＤＬＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ）、ＤＬＰＣ（１０ｍｇ／ｋｇ）、ＰＯＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ）、ＰＯＰＣ（１０ｍｇ／ｋｇ）又は、ＤＬＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ）及びＰＯＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ）を試験７日前から水迷路試験の間中毎日経口投与した。
ＤＬＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ）及びＰＯＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ）を併用した場合に、ラットの習得潜時は顕著に短縮化した。一方、ＤＬＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ）単独投与あるいはＰＯＰＣ（５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ）単独投与の場合には、顕著な効果は観察されなかった（図１）。
このことは、ＤＬＰＣとＰＯＰＣの併用が学習及び記憶能力を増強し得ることを示唆している。【００４１】
実験例２．認知障害におけるＰＯＰＣ及びＤＬＰＣ併用投与の効果
認知障害におけるＰＯＰＣ及びＤＬＰＣの併用投与の効果をＭＭＳＥテストにより調べた。
７５人の患者に対して、朝食後に１回、ＰＯＰＣ（５０ｍｇ／ｄａｙ）及びＤＬＰＣ（４５ｍｇ／ｄａｙ）を経口的に摂取させた後で、ＭＭＳＥテストを月１回の割合で実施した。結果を図２に示す。
また、同様にして、ＰＯＰＣ単独（９０ｍｇ/ｄａｙ、朝食後１回、毎日）を経口的に摂取させた２１４人の患者、ＤＬＰＣ単独（１００ｍｇ／ｄａｙ、朝食後１回、毎日）を経口的に摂取させた２１人の患者についても、ＭＭＳＥテストを月１回の割合で実施した。摂取前と摂取して５カ月後でのＭＭＳＥスコアの差を算出した（Δ increase in MMSE score)。結果を図３に示す。
本試験で調べた患者（３１０人）のうち凡そ６５％が軽度認知障害及び認知症を患っている。ＰＯＰＣとＤＬＰＣとの両方を摂取した７５患者について、摂取前の平均ＭＭＳＥスコアは１４．７±０．７であった（図２）。朝食後１回、毎日ＤＬＰＣ（５０ｍｇ／ｄａｙ）とＰＯＰＣ（４５ｍｇ／ｄａｙ）とを併用摂取すると、顕著にＭＭＳＥスコアが上昇し、平均スコアは２０を超えた。すなわち、摂取後５カ月では正常な認知機能にまで回復した（図２）。
ＤＬＰＣ（５０ｍｇ／ｄａｙ）とＰＯＰＣ（４５ｍｇ／ｄａｙ）とを併用摂取して５カ月の患者では、ＰＯＰＣ（９０ｍｇ／ｄａｙ）を単独摂取した患者、あるいはＤＬＰＣ（１００ｍｇ／ｄａｙ）を単独摂取した患者に比べて、より顕著にＭＭＳＥスコアが上昇した（図３）。
これらの結果は、ＤＬＰＣとＰＯＰＣとの併用処置がＰＯＰＣやＤＬＰＣをそれぞれ単独で処置した場合に比べてより軽度認知障害や認知症を改善するのに効果的であることを示している。
【産業上の利用可能性】
【００４２】
本発明の併用剤は、認知機能改善作用を有し、例えば、認知症、非認知症性の認知障害、及び学習又は記憶障害などを含む様々の疾患又は状態の予防又は治療、あるいは学習能力及び／又は記憶能力の向上に有用であり得る。【００４３】
本出願は日本で出願された特願２０１０−２９４４８７（出願日：平成２２年１２月２９日）を基礎としており、その内容は本明細書にすべて包含される。
【図２】
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【図１】
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【図３】
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【国際調査報告】
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