(57)【要約】  天然物由来の組成物であってスキルプシンＢを高含有で含有するスキルプシンＢ含有組成物並びにそのスキルプシンＢ含有組成物の製造方法を提供する。  スキルプシンＢ含有組成物をパッションフルーツ種子から抽出して得る。また、そのスキルプシンＢを抽出する際、パッションフルーツ種子を粉砕した後、含水アルコール系溶媒及び含水ケトン系溶媒から選ばれた少なくとも１種を添加して、前記溶媒中にスキルプシンＢを抽出する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
パッションフルーツ種子から得られ、スキルプシンＢを含有することを特徴とするスキルプシンＢ含有組成物。
【請求項２】
パッションフルーツ種子に含水アルコール系溶媒及び含水ケトン系溶媒から選ばれた少なくとも１種を添加して、前記溶媒中にスキルプシンＢを抽出することを特徴とするスキルプシンＢ含有組成物の製造方法。
【請求項３】
前記パッションフルーツ種子は、パッションフルーツの生の種子又はパッションフルーツの生の種子を乾燥した種子である請求項２記載のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法。
【請求項４】
前記含水アルコール系溶媒が含水エタノール又は含水１，３−ブチレングリコールであり、又は前記含水ケトン系溶媒が含水アセトンである請求項２又は３記載のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法。
【請求項５】
抽出後、溶媒を留去する請求項２〜４のいずれか１つに記載のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法。
【請求項６】
パッションフルーツ種子由来スキルプシンＢを添加したことを特徴とする飲食品。
【請求項７】
パッションフルーツ種子由来スキルプシンＢを添加したことを特徴とする化粧品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、パッションフルーツ種子由来のスキルプシンＢを含有するスキルプシンＢ含有組成物及びスキルプシンＢ含有組成物の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
パッションフルーツは、パッシフローラ属トケイソウ科の植物であり、別名：クダモノトケイソウ(果物時計草)とよばれ、その実は甘酸っぱく果物として実をそのまま食したり、その果汁をジュースにして飲んだり、ゼリー、ケーキ等の飲食品に配合して、風味付けに用いられたりされている。パッションフルーツの種子は硬く、ジュースなどにする場合には果実から取り除かれ、果実を種ごと飲食した場合であってもその外皮は硬く消化を受けにくいのでそのまま排泄されてしまう。【０００３】
従来、パッションフルーツ種子は利用する用途もなく廃棄していたが、本出願人らは、パッションフルーツの種子抽出物を、メラニン生成抑制のための有効成分や、コラーゲンの産生を促進するための有効成分として、有効利用できることを報告した（特許文献１、２）。そしてその有効成分がポリフェノール類化合物であるピセアタンノール(Piceatannol)であることを報告した（特許文献３）。【０００４】
一方、ピセアタンノールの２量体であるスキルプシンＢ（Scirpusin B）については、それが抗HIV活性を有することや（非特許文献１）、スーパーオキシドアニオン除去活性を有することや（非特許文献２）、α−アミラーゼ活性阻害活性を有することや（非特許文献３）、キサンチンオキシダーゼ阻害活性を有すること（非特許文献４）が報告されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００９−１０２２９８号公報
【特許文献２】特開２００９−１０２２９９号公報
【特許文献３】特開２０１０−３０９１１号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Guo-xun Yang, Jin-tao Zhou, Ya-zun Li, and Chang-qi Hu「Anti-HIV Bioactive stilbene dimers of Caragana rosea.」 Planta. Med. 71 (2005), p569-571.
【非特許文献２】Ting Xiang, Toshio Uno, Fumino Ogino, Cuoqian Ai, Jie Duo, and Ushio Sankawa「Antioxidant constituents of Caragana tibetica.」 Chem. Pharm. Bull. 53 (9) (2005), p1204-1206.
【非特許文献３】Kyoko Kobayashi, Tamaki Ishihara, Eriko Khono, Toshio Miyase, and Fumihiko Yoshizaki「Constituents of stem bark of Callistemon rigidus showing inhibitory effects on mouse α-amylase activity.」 Bioi. Pharm. Bull, 29 (6), (2006) p1275-1277.
【非特許文献４】G. Schmeda-Hirschmann, M.I.Gutierrez, J.I.Loyola, and J.Zuniga「Biological activity and xanthine oxidase inhibitors from Scirpus californicus (C. A. Mey.) Steud.」 Phytotherapy Research, 10, (1996) p683-685.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
食品安全に関する一般的観念からは、機能性食品や健康食品などの飲食品に配合されるスキルプシンＢは、天然物由来のものであることが好ましい。しかしながら、従来知られていたスキルプシンＢを含む天然物は、その含有量が少なく、非常に低含有のスキルプシンＢ組成物しか得られなかった。【０００８】
したがって、本発明の目的は、天然物由来の組成物であってスキルプシンＢを高含有で含有するスキルプシンＢ含有組成物、並びにその製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意研究した結果、従来、利用する用途もなく廃棄していたパッションフルーツ種子に、スキルプシンＢが豊富に含まれていることを見出し、本発明を完成するに至った。【００１０】
すなわち、本発明のスキルプシンＢ含有組成物は、パッションフルーツ種子から得られ、スキルプシンＢを含有することを特徴とする。【００１１】
本発明のスキルプシンＢ含有組成物によれば、スキルプシンＢを高含有で含有する、天然物由来の組成物を提供することができる。そして天然物由来の組成物であるので、化粧品や医薬品、更には機能性食品や健康食品などの飲食品に配合するのにも適している。【００１２】
一方、本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法は、パッションフルーツ種子に含水アルコール系溶媒及び含水ケトン系溶媒から選ばれた少なくとも１種を添加して、前記溶媒中にスキルプシンＢを抽出することを特徴とする。【００１３】
本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法によれば、パッションフルーツ種子に含水アルコール系溶媒及び含水ケトン系溶媒から選ばれた少なくとも１種を添加して、前記溶媒中にスキルプシンＢを抽出するので、天然物由来の組成物であってスキルプシンＢを高含有で含有するものを、収率よく製造することができる。【００１４】
本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法においては、前記パッションフルーツ種子は、パッションフルーツの生の種子又はパッションフルーツの生の種子を乾燥した種子であることが好ましい。【００１５】
また、本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法においては、前記含水アルコール系溶媒が含水エタノール又は含水１，３−ブチレングリコールであり、又は前記含水ケトン系溶媒が含水アセトンであることが好ましい。これによれば、スキルプシンＢの抽出効率がより良い。【００１６】
また、本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法においては、抽出後、溶媒の除去を行ったり、更に濃縮、スプレードライ、凍結乾燥、精製などの処理することができる。【００１７】
一方、本発明の他の１つは、パッションフルーツ種子由来スキルプシンＢを添加した飲食品である。【００１８】
また、本発明の更に他の１つは、パッションフルーツ種子由来スキルプシンＢを添加した化粧品である。
【発明の効果】
【００１９】
本発明のスキルプシンＢ含有組成物によれば、スキルプシンＢを高含有で含有する、天然物由来の組成物を提供することができる。そして天然物由来の組成物であるので、化粧品や医薬品、更には機能性食品や健康食品などの飲食品に配合するのにも適している。一方、本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法によれば、パッションフルーツ種子に含水アルコール系溶媒及び含水ケトン系溶媒から選ばれた少なくとも１種を添加して、前記溶媒中にスキルプシンＢを抽出するので、天然物由来の組成物であってスキルプシンＢを高含有で含有するものを、収率よく製造することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】パッションフルーツ種子からのスキルプシンＢの定量分析用ＨＰＬＣクロマトグラムを示す図である。
【図２】パッションフルーツ種子からのスキルプシンＢのマススペクトルを示す図である。
【図３】パッションフルーツ種子からの抽出物の分画用ＨＰＬＣクロマトグラムを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明のスキルプシンＢ含有組成物は、パッションフルーツ種子から得られた組成物であって、スキルプシンＢを含有するものである。その形状は液状、固形状、半固形状、ゲル状などであってよく、そのスキルプシンＢ含有組成物中のスキルプシンＢの含有量については、好ましい範囲として１×１０−６質量％〜９９．９質量％であることを例示でき、より好ましい範囲として１×１０−４質量％〜２０質量％であることを例示でき、更に好ましい範囲として１×１０−３質量％〜５質量％であることを例示できる。また、そのスキルプシンＢの固形分換算含有量については、好ましい範囲として０．０１〜９９．９質量％であることを例示でき、より好ましい範囲として０．０５〜３０質量％であることを例示でき、更に好ましい範囲として０．１〜２０質量％であることを例示できる。
【００２２】
スキルプシンＢ（Scirpusin B）は、下記化学式（１）で表される。
【００２３】
【化１】
2012144064.tif 000002
【００２４】
パッションフルーツは、パッシフローラ属トケイソウ科の植物であり、別名：クダモノトケイソウ(果物時計草)とよばれ、その実は甘酸っぱく果物として実をそのまま食したり、その果汁をジュースにして飲んだり、ゼリー、ケーキ等の飲食品に配合して、風味付けに用いられたりされている。パッションフルーツの種子は硬く、ジュースなどにする場合には果実から取り除かれ、果実を種ごと飲食した場合であってもその外皮は硬く消化を受けにくいのでそのまま排泄されてしまう。本発明は、従来、利用する用途もなく廃棄していたパッションフルーツ種子に、スキルプシンＢが豊富に含まれていることを見出したことに基づく発明である。なお、本発明に用いられる、パッションフルーツ種子は、従来からのパッションフルーツの食経験からも裏付けられるように、機能性食品や健康食品などの飲食品に配合しても、その安全性には問題がないものである。
【００２５】
本発明のスキルプシンＢ含有組成物は、好ましくは例えば、生のままの、又は乾燥させたパッションフルーツ種子をそのまま、又は粉砕し、種々の溶媒を用いて抽出する方法により得ることができる。そのパッションフルーツ種子には、抽出効率をよくするため、適宜、酸又はアルカリ分解、酵素分解等の化学的処理を施して、それから抽出してもよい。更に、下記に説明する本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法によれば、スキルプシンＢを高含有に含有する組成物を特に収率よく得られるので、その方法により得ることが最も好ましい。
【００２６】
以下に、本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法について説明する。
【００２７】
本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法においては、パッションフルーツ種子は、生のままの、又は乾燥させたパッションフルーツ種子を用いることができる。また、パッションフルーツ種子は抽出効率をよくするため、適宜、粉砕、搾油、酸又はアルカリ分解、酵素分解等の化学的処理を施して、それから抽出してもよい。粉砕は、周知の粉砕機を用いて行うことができる。なお、パッションフルーツ種子には油分が多いため粉砕後にはペースト状になることがある。
【００２８】
次に、パッションフルーツ種子に含水アルコール系溶媒を及び含水ケトン系溶媒から選ばれた少なくとも１種を添加して、その溶媒中にスキルプシンＢを抽出する。このとき撹拌、振とうあるいは加熱還流などして抽出することが好ましい。
【００２９】
含水アルコール系溶媒としては、エタノール、メタノール、プロパノール、１，３−ブチレングリコール等の含水溶媒を用いることができ、特に、含水エタノール又は含水１，３−ブチレングリコールが好ましい。また、含水ケトン系溶媒としては、アセトン、メチルエチルケトン、ジエチルケトン、クロロアセトン等の含水溶媒を用いることができ、特に、含水アセトンが好ましい。
【００３０】
その含水率としては、含水エタノールの場合には、エタノールを20〜99.9体積％含むものであることが好ましく、40〜99.9体積％含むものであることが更に好ましく、60〜80体積％含むものであることが最も好ましい。含水１，３−ブチレングリコールの場合には、１，３−ブチレングリコールを10〜90体積％含むものであることが好ましく、20〜60体積％含むものであることが更に好ましく、30〜50体積％含むものであることが最も好ましい。含水アセトンの場合には、アセトンを20〜99.9体積％含むものであることが好ましく、40〜99.9体積％含むものであることが更に好ましく、60〜80体積％含むものであることが最も好ましい。上記範囲を外れると、スキルプシンＢの抽出効率が悪くなる傾向にあるので、好ましくない。なお、以下、含水溶媒の含水率の表記については、簡便化のため、例えば、２０体積％で含水させた８０体積％エタノールのことを「８０％含水エタノール」と表記する。また、例えば、３０体積％で含水させた７０体積％エタノールのことを「７０％含水エタノール」と表記する。また、例えば、７０体積％で含水させた３０体積％１，３−ブチレングリコールのことを「７０％含水ＢＧ」と表記する。更に、例えば、３０体積％で含水させた７０体積％アセトンのことを「７０％含水アセトン」と表記する。
【００３１】
本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法において、その抽出は、周知の振とう装置を用いて行うことができる。その温度条件は15〜40℃程度、振とう時間は0.5〜3時間程度であることが好ましい。また、この抽出を、超音波振動をともなう振とうによって行うこともできる。これによれば、粉砕され上記各溶媒に接したパッションフルーツ種子に、有効に振動が与えられるので、パッションフルーツ種子からの上記各溶媒中へのスキルプシンＢの抽出効率を高めることができる。その超音波振動をともなう振とうは周知の超音波装置などによって付与することができる。
【００３２】
本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法において、その抽出は、上記含水アルコール系溶媒又は含水ケトン系溶媒を用いて、周知の加熱還流の方法で行うことができる。その加熱温度は６０〜９５℃程度、還流時間は１〜２時間程度であることが好ましい。
【００３３】
また、本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法においては、抽出後、上記溶媒を減圧留去することもできる。これによれば、有機溶媒を含まない組成物とすることができ、機能性食品や健康食品などの飲食品に配合するための食品素材として、その安全性の基準等に適合させることが可能である。
【００３４】
本発明のスキルプシンＢ含有組成物の製造方法においては、複数の溶媒で段階的な抽出を行うことができる。これにより、スキルプシンＢを高含有に含有するスキルプシンＢ含有組成物を、より収率よく製造することができる。
【００３５】
具体的には、例えば、パッションフルーツ種子を粉砕した後、上記含水アルコール系溶媒及び上記含水ケトン系溶媒のいずれか一方を添加し、振とうあるいは加熱還流などを行って、その溶媒中にスキルプシンＢを抽出して第１抽出物を得る。遠心等により抽出物とその抽出物として回収されなかった残渣に分離し、その残渣に、上記溶媒のうち選択しなかった他方を添加して、振とうあるいは加熱還流などを行って、その溶媒中にスキルプシンＢを抽出して第２抽出物を得る。そして、前記第１抽出物と第２抽出物とを混合する。なお、この第２抽出物の単独でもパッションフルーツ種子の抽出物として利用可能であることはいうまでもない。
【００３６】
このように、複数の溶媒で段階的な抽出を行うことにより、パッションフルーツ種子が、上記含水アルコール系溶媒又は上記含水ケトン系溶媒による第１の抽出処理を受けることによって、その物性等の特性が抽出のために好適なものに変化することが考えられるので、続く第２の抽出処理の際には、上記含水アルコール系溶媒又は上記含水ケトン系溶媒を用いる場合はもとより、それ以外の溶媒を用いる場合であっても、その抽出効率が改善されることが期待できる。
【００３７】
上記の方法で得られたパッションフルーツ種子の抽出物は、その抽出物中のスキルプシンＢの含有量については、好ましい範囲として１×１０−６質量％〜９９．９質量％であることを例示でき、より好ましい範囲として１×１０−４質量％〜２０質量％であることを例示でき、更に好ましい範囲として１×１０−３質量％〜５質量％であることを例示できる。また、そのスキルプシンＢの固形分換算含有量については、好ましい範囲として０．０１〜９９．９質量％であることを例示でき、より好ましい範囲として０．０５〜３０質量％であることを例示でき、更に好ましい範囲として０．１〜２０質量％であることを例示できる。これを、そのまま又は濃縮して液体状のものをスキルプシンＢ含有組成物とすることもできる。更に凍結乾燥又は噴霧乾燥により粉末化して粉末状のものをスキルプシンＢ含有組成物とすることもできる。また、これらの形態に制限されるものでもない。抽出物中に含まれる不溶物は、適宜、濾過などで除くことができる。不溶物はさらに粉砕し、微細粒子状にしてもよい。
【００３８】
また、上記のようにして得られるパッションフルーツ種子からの一次的抽出物を、イオン交換、サイズ排除カラムクロマト法、ＨＰＬＣ法、ゲルろ過、膜分離等により、スキルプシンＢを指標にして分画、精製して、これをスキルプシンＢ含有組成物とすることもできる。
【００３９】
すなわち、パッションフルーツ種子からのスキルプシンＢを下記条件で分析用ＨＰＬＣにかけたときには、そのスキルプシンＢは12.54分付近に溶出される（図１参照、なお、図１中、8.9分付近に溶出される物質はピセアタンノール（Piceatannol）である。）。また、質量分析装置によるマススペクトル測定を行うと、ネガティブイオンモードのシグナルとしてｍ／ｚ485を呈する（図２参照）。
【００４０】
［ＨＰＬＣ条件］
・  カラム：ODS-3  径4.6mm、長さ150mm（ジーエルサイエンス株式会社製）
・  カラム温度：45℃
・  溶出条件：流速0.75ml/min、15％アセトニトリル（0min）→40％アセトニトリル（20min）→45％アセトニトリル（25min）
・  ＵＶ検出：280nm  
【００４１】
したがって、本発明においては、上記に例示されるような分析手段により、パッションフルーツ種子からのスキルプシンＢの存在を確認しながら、適宜分画、精製して、スキルプシンＢの含有量の高められた、パッションフルーツ種子由来のスキルプシンＢ含有組成物を調製することができる。
【００４２】
パッションフルーツ種子由来のスキルプシンＢは、必要に応じて、薬学的に許容される基材や担体を添加して、錠剤、顆粒剤、散剤、液剤、粉末、顆粒、カプセル剤、ゼリー状剤等の形態にして、これを医薬に利用することができる他、軟膏剤、クリーム剤、ジェル、パック、化粧水、化粧料等の形態にして、これを化粧品として利用することができる。
【００４３】
また、パッションフルーツ種子由来のスキルプシンＢは、特定保健用食品、栄養補助食品、機能性食品等に配合して摂取することもできる。このような食品としては、例えば、チョコレート、ビスケット、ガム、キャンディー、クッキー、グミ、打錠菓子等の菓子類；シリアル；粉末飲料、清涼飲料、乳飲料、栄養飲料、炭酸飲料、ゼリー飲料等の飲料；アイスクリーム、シャーベットなどの冷菓が挙げられる。更に、そば、パスタ、うどん、そーめん等の麺類も好ましく例示できる。また、特定保健用食品や栄養補助食品等の場合であれば、粉末、顆粒、カプセル、シロップ、タブレット、糖衣錠等の形態のものであってもよい。
【００４４】
パッションフルーツ種子由来のスキルプシンＢを、飲食品又は化粧品に添加して利用する場合、その飲食品中又は化粧品中のスキルプシンＢの含有量については、好ましい範囲として１×１０−６質量％〜５０質量％であることを例示でき、より好ましい範囲として１×１０−４質量％〜２０質量％であることを例示でき、更に好ましい範囲として１×１０−３質量％〜５質量％であることを例示できる。また、そのスキルプシンＢの固形分換算含有量については、好ましい範囲として０．０１〜８０質量％であることを例示でき、より好ましい範囲として０．０５〜３０質量％であることを例示でき、更に好ましい範囲として０．１〜２０質量％であることを例示できる。
【実施例】
【００４５】
以下実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。  【００４６】
＜試験例１＞（パッションフルーツからのスキルプシンＢの回収・精製・同定）
パッションフルーツ種子を凍結乾燥粉砕させた粉砕物（30〜60メッシュパス）の60gに80%アセトンの200ｍｌを添加し、室温で攪拌して種子抽出液を作製した。これを、ODSカラムを用いたHPLCによって分画した。ＨＰＬＣによる分画条件は、以下のとおりとした。【００４７】
・  カラム：ODS-3  径20mm、長さ250mm（ジーエルサイエンス株式会社製）
・  カラム温度：室温
・  溶出条件：流速5ml/min、10％アセトニトリル（0min）→50％アセトニトリル（70min）→80％アセトニトリル（75min）→80％アセトニトリル（90min）
・  ＵＶ検出：280nm  【００４８】
図３には、そのＨＰＬＣクロマトグラムを示す。その結果、保持時間51分付近に最大のピークが見られた。また、保持時間57分付近に第２のピークが見られた。【００４９】
上記保持時間57分付近に溶出する成分が、どのような物質であるかを以下のように同定した。【００５０】
まず、保持時間57分付近に溶出する画分を分取して、更にＨＰＬＣで、純度97％程度になるまで精製した。これを、ＨＰＬＣ／質量分析（アジレントテクノロジー株式会社製、装置名「Agillent 1100 LC/MC System」）ならびにＮＭＲ分析を行なった。その結果は以下のとおりであった。【００５１】
ESI：m/z485(M-)；
1H NMR（CD30D, 500MHz）：δ4.38 (1H,d, J=6.0Hz), δ5.32((1H,d, J=6.0Hz), δ6.19(2H,d, J=2.2Hz), δ6.21(1H,t, J=2.0Hz), δ6.30(1H,d, J=6.0Hz), 6.58(1H,d, J=16.1Hz), 6.62(1H,dd, J=2.2, 8.5Hz) 6.66(1H,d, J=1.9Hz), δ6.68(1H,d, J=7.8Hz), 6.74(1H,d, J=2.2Hz) 6.78(1H,d, J=8.2Hz), 6.81 (1H,d, J=16.4Hz), δ6.80(1H,d, J=1.9Hz) ；
13C NMR: (CD3OD, 125MHz)：δ:58.1, 94.8, 96.8, 102.2, 104.4, 107.3x2, 113.6, 114.0, 116.2x2, 116.3, 118.4, 119.8, 120.0, 123.6,δ: 130.9, 131.0, 134.9, 137.0, 146.3, 146.4, 146.5, 146.6, 147.6, 159.8x3, 162.7【００５２】
以上のＮＭＲ分析の結果は、下記式（１）で表されるスキルプシンＢ（Scirpusin B）であることを示していた。【００５３】
【化２】
2012144064.tif 000003
【００５４】
また、上記57分付近に溶出する成分の旋光度測定（日本分光株式会社製、装置名「P-2200旋光計」）の結果は[α]D23：0.0oであり、フーリエ変換赤外分光光度計（日本分光株式会社製、装置名「FT/IR-6200 Fourier-Transform Infrared Spectrometer」）による赤外吸収スペクトルの結果では、1605cm-1, 1520cm-1, 1445cm-1, 1339cm-1, 1282cm-1, 1197cm-1, 1156cm-1, 1116cm-1, 1002cm-1に吸収ピークがあった。これらの結果も、上記の同定結果と矛盾するものではなかった。なお、「Kyoko Kobayashi et al,; Biol. Pharm. Bull. 29(6), (2006) p1275-1277」にも、スキルプシンＢのＮＭＲ、旋光度、赤外吸収スペクトル等の分析結果が記載されている。【００５５】
一方、保持時間51分付近に溶出する成分は、別途、下記化学式（２）で表されるピセアタンノール（Piceatannol）であると同定された。【００５６】
【化３】
2012144064.tif 000004
【００５７】
以上から、上記種子抽出物の、上記分画用ＨＰＬＣ分析での57分付近のピークはスキルプシンＢのピークであり、パッションフルーツの種子にはスキルプシンＢが多く含まれていることが明らかとなった。なお、パッションフルーツの果皮や果肉からはスキルプシンＢは検出できなかった。  【００５８】
＜試験例２＞（パッションフルーツ種子からのスキルプシンＢの抽出）
パッションフルーツ種子からのスキルプシンＢの抽出方法について検討した。具体的には、下記の抽出方法で、スキルプシンＢの抽出効率を調べた。【００５９】
（１）含水エタノール及び含水アセトンによる振とう抽出
粉砕した種子の60gに80％含水エタノール200mlを加え、30分間室温にて振とうし、抽出を行い、その上清を回収した。この工程を２回繰り返した。更に、その残渣固形物に80％含水アセトンの200mlを加え、30分間室温にて振とうし、抽出を行い、その上清を回収した。この工程を３回繰り返した。そして回収した上清を集めて得られた抽出液を濃縮し、80%含水エタノールで200mlに定容し、その10μｌを分析用ＨＰＬＣにかけた。そして、あらかじめ高純度に精製したもの(97％)を標準として検量線を作成し、その抽出物に含まれるスキルプシンＢの量を定量した。【００６０】
（２）含水エタノールによる加熱還流抽出
粉砕した種子の300gに80％、90％、又は95％の含水エタノール3Lを加え、92℃で90分間加熱還流抽出を行った。そして、得られた抽出液を濃縮し、80%含水エタノールで200mlに定容し、その10μｌを分析用ＨＰＬＣにかけた。そして、あらかじめ作成した検量線により、その抽出物に含まれるスキルプシンＢの量を定量した。【００６１】
（３）含水１，３−ブチレングリコール（含水ＢＧ）による攪拌抽出
熱風乾燥した種子または更に粉砕した種子10gに20％、40％、50%、60％、又は80％の含水ＢＧ約100mlを加え、80℃で1時間の加熱攪拌抽出を行った。そして、得られた抽出液の一部をＨＰＬＣ分析に供し、あらかじめ作成した検量線により、その抽出液に含まれるスキルプシンＢの量を定量した。【００６２】
結果を下記表1、２にまとめた。なお、この表1では、（Ａ）抽出に用いた種子の100g当たりから抽出されるスキルプシンＢの量(mg)、又は（Ｂ）抽出液の固形分中のスキルプシンＢ含有量（質量％）に換算して表している。【００６３】
【表１】
2012144064.tif 000005
【００６４】
表１に示されるように、パッションフルーツ種子100g当たり、220mg〜363mgのスキルプシンＢが抽出された。各抽出方法における抽出液の固形分中の含有量としては、振とう抽出では、2.5質量％であり、80％含水エタノール加熱還流抽出では、2.1質量％であり、90％含水エタノール加熱還流抽出では、3.2質量％であり、95％含水エタノール加熱還流抽出では、1.9質量％であった。したがって、抽出方法の比較では、９０％含水エタノールによる加熱還流抽出により、最も効率よくスキルプシンＢが抽出された。また、パッションフルーツ種子に含まれるスキルプシンＢの含有量を、最も抽出効率の高い値から換算すると、パッションフルーツ種子は少なくとも０．３６質量％程度の高含有量でスキルプシンＢを含むことが明らかとなった。そして、それを効率よく抽出できることが明らかとなった。【００６５】
また、表２では、（Ａ）抽出に用いた種子の100g当たりから抽出されるスキルプシンＢの量(mg)、又は（Ｂ）抽出液中のスキルプシンＢ含有量（μg/mL）に換算して表している。【００６６】
【表２】
2012144064.tif 000006
【００６７】
表２に示されるように、含水１，３−ブチレングリコール（含水ＢＧ）による攪拌抽出によって、パッションフルーツ種子100g当たり92.6mg〜401mgのスキルプシンＢが抽出された。なお、50%含水ＢＧの場合には、粉砕を行っていないホール種子から抽出を行った結果である。抽出効率が若干低下したものの、粉砕を行わなくとも抽出できることが確かめられた。
【図１】
2012144064.tif 000007
【図２】
2012144064.tif 000008
【図３】
2012144064.tif 000009
【国際調査報告】
2012144064.tif 000010
2012144064.tif 000011
2012144064.tif 000012
2012144064.tif 000013