REGLAMENTO (UE) N  o 15/2011 DE LA COMISIÓN  
de 10 de enero de 2011  
por el que se modifica el Reglamento (CE) n  o 2074/2005 en lo relativo a los métodos de análisis 
reconocidos para la detección de biotoxinas marinas en moluscos bivalvos vivos  
(Texto pertinente a efectos del EEE)  
LA COMISIÓN EUROPEA,  
Visto el Tratado de Funcionamiento de la Unión Europea,  
Visto el Reglamento (CE) n  o 853/2004 del Parlamento Europeo 
y del Consejo, de 29 de abril de 2004, por el que se establecen 
normas específicas de higiene de los alimentos de origen ani ­
mal (  1 ), y, en particular, su artículo 11, apartado 4,  
Visto el Reglamento (CE) n  o 854/2004 del Parlamento Europeo 
y del Consejo, de 29 de abril de 2004, por el que se establecen 
normas específicas para la organización de controles oficiales de 
los productos de origen animal destinados al consumo hu ­
mano (  2 ), y, en particular, su artículo 18, apartado 13, letra a),  
Considerando lo siguiente:  
(1) El Reglamento (CE) n  o 854/2004 establece normas espe ­
cíficas para la organización de controles oficiales de los 
productos de origen animal y el Reglamento (CE) n  o 
853/2004 establece normas específicas de higiene para 
los alimentos de origen animal. Las normas de aplicación 
de dichos Reglamentos en relación con los métodos de 
análisis de las biotoxinas marinas figuran en el Regla ­
mento (CE) n  o 2074/2005 de la Comisión, de 5 de di ­
ciembre de 2005, por el que se establecen medidas de 
aplicación para determinados productos con arreglo a lo 
dispuesto en el Reglamento (CE) n  o 853/2004 del Parla ­
mento Europeo y del Consejo y para la organización de 
controles oficiales con arreglo a lo dispuesto en los Re ­
glamentos (CE) n  o 854/2004 del Parlamento Europeo y 
del Consejo y (CE) n  o 882/2004 del Parlamento Europeo 
y del Consejo, se introducen excepciones a lo dispuesto 
en el Reglamento (CE) n  o 852/2004 del Parlamento Eu ­
ropeo y del Consejo y se modifican los Reglamentos (CE) 
n o 853/2004 y (CE) n  o 854/2004 (  3 ). Es necesario mo ­
dificar dichas normas de aplicación a la luz de las nuevas 
pruebas científicas.  
(2) En julio de 2006, la Comisión solicitó a la Autoridad 
Europea de Seguridad Alimentaria (EFSA) que emitiese 
un dictamen científico para evaluar los límites y métodos 
de análisis actuales con respecto a la salud humana en el 
caso de varias biotoxinas marinas contempladas en la 
legislación comunitaria, incluidas las toxinas de nueva 
aparición. El 24 de julio de 2009 se publicó el último 
de una serie de dictámenes.  
(3) El bioensayo en ratones y el bioensayo en ratas son los 
métodos oficiales de detección de las toxinas lipofílicas. 
La Comisión Técnica de Contaminantes de la Cadena 
Alimentaria de la EFSA indicó que dichos bioensayos presentan deficiencias y que no se consideran adecuados 
para el control debido a la alta variabilidad de los resul ­
tados, la insuficiente capacidad de detección y el carácter 
limitado de la especificidad.  
(4) Se han ensayado con éxito en estudios de prevalidación 
unos métodos alternativos, desarrollados recientemente, 
distintos de los métodos de referencia, para la determi ­
nación de las biotoxinas marinas con unos límites de 
detección más bajos.  
(5) En un estudio de validación entre laboratorios realizado 
por los Estados miembros, se validó un método de cro ­
matografía líquida/espectrometría de masas en tándem 
(LC-MS/MS) bajo la coordinación del laboratorio de refe ­
rencia de la Unión Europea para las biotoxinas marinas 
(LR-UE). Dicho método es objeto de una consulta pública 
en el sitio web del laboratorio de referencia de la Unión 
Europea para las biotoxinas marinas (http://www.aesan. 
msps.es/en/CRLMB/web/home.shtml). Esta técnica vali ­
dada de la cromatografía líquida/espectrometría de masas 
debe aplicarse como método de referencia para la detec ­
ción de las toxinas lipofílicas y debe utilizarse de forma 
habitual para los controles oficiales en cualquier etapa de 
la cadena alimentaria y para los autocontroles de los 
operadores de empresas alimentarias.  
(6) Para la detección de las toxinas lipofílicas puede aplicarse 
cualquier otro método reconocido, distinto de la croma ­
tografía líquida/espectrometría de masas, siempre que di ­
cho método cumpla los criterios de eficacia establecidos 
por el LR-UE. Dichos métodos deben validarse entre la ­
boratorios y ser sometidos a ensayo con éxito en el 
marco de un programa de pruebas de aptitud reconocido. 
En caso de discrepancia sobre los resultados, el método 
de referencia debe ser el método LC-MS/MS del LR-UE.  
(7) Para que los Estados miembros puedan adaptar sus mé ­
todos al método químico, se debe seguir utilizando los 
métodos biológicos durante un período limitado. Tras 
dicho período, los métodos biológicos no deben utili ­
zarse habitualmente, sino solo durante los controles pe ­
riódicos de las zonas de producción para detectar toxinas 
marinas nuevas o desconocidas.  
(8) Procede, por tanto, modificar en consonancia el Regla ­
mento (CE) n  o 2074/2005.  
(9) Las medidas previstas en el presente Reglamento se ajus ­
tan al dictamen del Comité permanente de la cadena 
alimentaria y de sanidad animal.ES 11.1.2011 Diario Oficial de la Unión Europea L 6/3  
( 1 ) DO L 139 de 30.4.2004, p. 55.  
( 2 ) DO L 139 de 30.4.2004, p. 206.  
( 3 ) DO L 338 de 22.12.2005, p. 27.HA ADOPTADO EL PRESENTE REGLAMENTO:  
Artículo 1  
El anexo III del Reglamento (CE) n  o 2074/2005 queda modifi ­
cado con arreglo a lo dispuesto en el anexo del presente Re ­
glamento.  Artículo 2  
El presente Reglamento entrará en vigor el vigésimo día si ­
guiente al de su publicación en el  Diario Oficial de la Unión 
Europea.  
Será aplicable a partir del 1 de julio de 2011.  
El presente Reglamento será obligatorio en todos sus elementos y directamente aplicable en 
cada Estado miembro.  
Hecho en Bruselas, el 10 de enero de 2011.  
Por la Comisión  
El Presidente  
José Manuel BARROSOES L 6/4 Diario Oficial de la Unión Europea 11.1.2011ANEXO  
En el anexo III del Reglamento (CE) n  o 2074/2005, el capítulo III se sustituye por el texto siguiente:  
«CAPÍTULO III  
MÉTODOS DE DETECCIÓN DE LAS TOXINAS LIPOFÍLICAS  
A. Metodología química  
1. El método LC-MS/MS del LR-UE será el método de referencia para la detección de las toxinas marinas contem ­
pladas en el anexo III, sección VII, capítulo V, punto 2, letras c), d) y e), del Reglamento (CE) n  o 853/2004. Dicho 
método determinará, como mínimo, los compuestos siguientes:  
— las toxinas del grupo del ácido ocadaico: AO, DTX1, DTX2, DTX3 incluidos sus ésteres,  
— las toxinas del grupo de las pectenotoxinas: PTX1 y PTX2,  
— las toxinas del grupo de las yesotoxinas: YTX, 45 OH YTX, Homo YTX y 45 OH Homo YTX,  
— las toxinas del grupo de los azaspirácidos: AZA1, AZA2 y AZA3.  
2. La equivalencia de la toxicidad total se calculará mediante factores de equivalencia de la toxicidad recomendados 
por la EFSA.  
3. Si se descubren nuevos análogos importantes en relación con la salud pública, estos se incluirán en el análisis. La 
equivalencia de la toxicidad total se calculará mediante factores de equivalencia de la toxicidad recomendados por 
la EFSA.  
4. Como alternativa o como complemento al método LC-MS/MS del LR-UE podrán utilizarse otros métodos, como la 
cromatografía líquida (LC)/espectrometría de masas (MS), la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con la 
detección adecuada, los inmunoensayos y los ensayos funcionales como el de la inhibición de fosfatasas, a 
condición de que:  
a) puedan detectar, por separado o combinados, al menos los análogos que se indican en la letra A, punto 1, del 
presente capítulo; en caso necesario se definirán criterios más adecuados;  
b) cumplan los criterios de eficacia establecidos por el LR-UE. Dichos métodos deben validarse entre laboratorios 
y ser sometidos a ensayo con éxito en el marco de un programa de pruebas de aptitud reconocido. El LR-UE 
proporcionará apoyo a las actividades destinadas a la validación interlaboratorios de la técnica para conseguir la 
normalización oficial;  
c) su aplicación proporcione un nivel equivalente de protección de la salud pública.  
B. Métodos biológicos  
1. Para la detección de las toxinas marinas contempladas en el anexo III, sección VII, capítulo V, punto 2, letras c), d) 
y e), del Reglamento (CE) n  o 853/2004, hasta el 31 de diciembre de 2014 aún podrá utilizarse una serie de 
procedimientos de bioensayo en ratones que difieren en la porción de ensayo (hepatopáncreas o cuerpo entero) y 
en los disolventes utilizados en las fases de extracción y purificación, a fin de permitir que los Estados miembros 
adapten sus métodos al método LC-MS/MS definido en la letra A, punto 1, del presente capítulo.  
2. La sensibilidad y selectividad del método dependen de los disolventes escogidos para las fases de extracción y 
purificación; esto debe tenerse presente al decidir qué método se va a emplear, a fin de incluir toda la gama de 
toxinas.  
3. Para la detección de ácido ocadaico, dinofisistoxinas, azaspirácidos, pectenotoxinas y yesotoxinas puede emplearse 
un único bioensayo en ratones consistente en una extracción con acetona. Este ensayo puede complementarse, si 
fuera preciso, con fases de separación líquido-líquido con acetato de etilo y agua o diclorometano y agua, a fin de 
eliminar posibles interferencias.  
4. En cada ensayo deben utilizarse tres ratones. La muerte de dos de los tres ratones en un lapso de 24 horas tras la 
inoculación en cada uno de ellos de un extracto equivalente a 5 g de hepatopáncreas o 25 g de cuerpo entero debe 
considerarse un resultado positivo con respecto a la presencia de una o más de las toxinas contempladas en el 
anexo III, sección VII, capítulo V, punto 2, letras c), d) y e), del Reglamento (CE) n  o 853/2004 a niveles superiores 
a los establecidos.ES 11.1.2011 Diario Oficial de la Unión Europea L 6/55. Para la detección de ácido ocadaico, dinofisistoxinas, pectenotoxinas y azaspirácidos puede emplearse un bioen ­
sayo en ratones con extracción con acetona seguido de la separación líquido-líquido con éter dietílico, pero no 
podrá utilizarse para las yesotoxinas, ya que pueden ser eliminadas durante la fase de separación. En cada ensayo 
deben utilizarse tres ratones. La muerte de dos de los tres ratones en un lapso de 24 horas tras la inoculación en 
cada uno de ellos de un extracto equivalente a 5 g de hepatopáncreas o 25 g de cuerpo entero debe considerarse 
un resultado positivo con respecto a la presencia de ácido ocadaico, dinofisistoxinas, pectenotoxinas y azaspirá ­
cidos a niveles superiores a los establecidos en el anexo III, sección VII, capítulo V, punto 2, letras c) y e), del 
Reglamento (CE) n  o 853/2004.  
6. Para la detección de ácido ocadaico, dinofisistoxinas y azaspirácidos puede utilizarse un bioensayo en ratas. En 
cada ensayo deben utilizarse tres ratas. Una reacción diarreica en cualquiera de las tres ratas se considerará un 
resultado positivo con respecto a la presencia de ácido ocadaico, dinofisistoxinas y azaspirácidos a niveles 
superiores a los señalados en el anexo III, sección VII, capítulo V, punto 2, letras c) y e), del Reglamento (CE) 
n o 853/2004.  
C. Tras el período establecido en la letra B, punto 1, del presente capítulo, el bioensayo en ratones se utilizará solo 
durante los controles periódicos de las zonas de producción y las zonas de reinstalación para detectar toxinas marinas 
nuevas o desconocidas conforme a los programas nacionales de control elaborados por los Estados miembros.»ES L 6/6 Diario Oficial de la Unión Europea 11.1.2011