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Tipo de documento: Norma nacional  
Subtipo de documento: No aplica  
Estado del documento: Anteproyecto  
Idioma del Documento: Español  
 
  
   
 ANTEPROYECTO  DE NORMA 
NORDOM 65:4 -009 
 
Identificación del comité: CT 65.4  
Coordinador: C Rosario  
 
 
 
DIRECTRICES PARA EL USO DE LA ESPECTROMETRÍA DE MASAS (EM) EN LA 
IDENTIFICACIÓN, CONFIRMACIÓN Y DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE 
RESIDUOS  
 
 
 
 
  Advertenc ia 
Este documento no es una norma oficial NORDOM. El es distribuido en el comité técnico para su revisión, 
estudio y aprobación como Norma Dominicana NORDOM. Esta sujeto a cambios siempre que se presentan 
la base científica.  
Los poseedores de este document o están invitados a someter observaciones relevantes, provisto de la 
documentación que la sustente, en el período de consulta pública que se anunciará debidamente.
ANTEPROYECTO                                                                NORDOM 65:4-009 
1. OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACION  
 
1.1 Objetivo.  Este anteproyecto de norma establece las di rectrices para el uso de la 
espectrometría de masa (EM), en la identificación, confirmación y determinación cuantitativa.  
 
2. NORMAS DOMINICANAS A CONSULTAR  
 
Este anteproyecto de norma es completo.  
 
Ensayos de confirmación  
 
Cuando se llevan a cabo análisis  con fines de vigilancia o aplicación reglamentaria, es 
especialmente importante que se generen datos de confirmación antes de dar un informe sobre 
muestras que contienen residuos de plaguicidas normalmente no asociados con el producto, o 
cuando parece que  se han superado los LMR. Las muestras pueden contener sustancias 
químicas que interfieren en el análisis, que se han identificado erróneamente como plaguicidas. 
En la cromatografía de gases son ejemplos de esto las respuestas de los detectores de captura 
de electrones a los ésteres de ftalato y las que se obtienen de los detectores selectivos de 
fósforo con compuestos que contienen azufre y nitrógeno.  
 
El análisis de los residuos de plaguicidas con métodos para residuos múltiples consta 
generalmente de dos  fases: cribado y confirmación. El proceso se describe esquemáticamente 
en la Fig. 2. La primera fase comprende el establecimiento de los residuos de plaguicidas que 
puede esperarse que se hallen presentes desde la interpretación de los datos sin elaborar,  
evitando en lo posible las falsas negativas. La segunda fase es la confirmación, que se 
concentra en los plaguicidas encontrados en la primera fase. El uso de los resultados a 
comunicar y la consiguiente decisión de gestión determinan los esfuerzos realiz ados en el 
proceso de confirmación.  
La elección de la técnica utilizada para la confirmación depende de su disponibilidad, tiempo y 
costos, que están basados o bien en una mayor interpretación de los datos de espectrometrías 
de masas y cromatográficos, o en métodos alternativos utilizando propiedades fisicoquímicas 
diferentes del compuesto, o la combinación de varios métodos de separación y detección. En el 
Cuadro 6 se proporcionan algunos procedimientos alternativos de confirmación.  
Siempre que se utilice n técnicas cromatográficas en el cribado o confirmación, es esencial 
determinar correctamente las ventanas del tiempo de retención. Hay que asegurarse de que el 
instrumento se regule correctamente antes de empezar el análisis, debiéndose realizar un 
ensayo  de idoneidad antes de cada lote de análisis1. La base de datos sobre tiempos de 
retención deberá ajustarse a las condiciones actuales2. En la fase 1 pueden aplicarse 
intervalos de tolerancia de 1,5 al 3% del tiempo de retención absoluto a la GC capilar 
dependiendo de la forma de un pico. Para la confirmación del tiempo de retención los intervalos 
de tolerancia absoluta aumentarán a un tiempo de retención más elevado. El intervalo de 
tolerancia debe ser inferior a 1 seg para un RT de menos de 500 seg. Para tiempos de 
retención entre 500 y 5000 seg. Se recomienda un intervalo de 0,2% del RRT. Para tiempos de 
retención más elevados es conveniente un intervalo de 6 seg.  ANTEPROYECTO                                                                NORDOM 65:4-009 
 
Los ensayos de confirmación pueden ser cuantitativos y/o cualitativos, pero en la mayor par te 
de los casos se necesitarán ambos tipos de información. Se plantean problemas particulares 
cuando se deben confirmar los residuos en el límite de determinación o próximos al mismo, 
pero aunque en este nivel es difícil cuantificarlos, es imprescindible q ue se confirme 
adecuadamente su nivel de identidad.  
La necesidad de ensayos de confirmación puede depender del tipo de muestra o de su historial 
conocido. En algunos cultivos o productos se encuentran con frecuencia determinados 
residuos. Tratándose de una  serie de muestras de origen similar, que contenga residuos del 
mismo plaguicida, quizás baste con confirmar la identidad de los residuos en una pequeña 
parte de las muestras, tomada al azar. De igual forma, cuando se sabe que se ha aplicado un 
determinado  plaguicida al material de la muestra, no hay mucha necesidad de confirmar la 
identidad, si bien deberán confirmarse algunos de los resultados seleccionados al azar. 
Cuando se disponga de muestras de control, deberían utilizarse para comprobar la presencia  
de posibles sustancias que interfieren en el análisis.  
 
1 Soboleva E. Ambrus A., Aplicación del ensayo de idoneidad del sistema para garantizar la 
calidad y optimizar el rendimiento de un sistema de cromatografía de gases para el análisis 
de residuos de p laguicidas , J. Chromatogr. A. 1027. 2004. 55 -65. 
 
2  Lantos J., Kadenczki L., Zakar F., Ambrus A. Validación de bases de datos de 
cromatografía de gases para la identificación cualitativa de ingredientes activos de residuos 
de plaguicidas en Fajgelj A. Am brus A. (eds)(eds) Príncipios de Validación del Método, 
Real Sociedad de Química, Cambridge, 2000, pp 128 -137. 
 
Cromatografía de gases/espectrometría de masas (gc/ms). Los datos sobre residuos 
obtenidos mediante espectrometría de masas suponen las pruebas m ás definitivas y, cuando 
se dispone del equipo necesario, constituyen la técnica de confirmación preferible. La técnica 
también se utiliza normalmente a efectos de selección de residuos (fase 1). Generalmente el 
análisis de residuos mediante espectrometría  de masas se aplica conjuntamente con una 
técnica cromatográfica de separación, con el fin de obtener simultáneamente datos sobre el 
tiempo de retención, la relación masa/carga en los iones y la abundancia de los mismos. La 
transmisión cuantitativa de anal itos lábiles a través del sistema cromatográfico plantea 
problemas semejantes a los experimentados con otros detectores. En lo que respecta a la 
cuantificación, los iones que se controlen deberán ser los más específicos del analito, los que 
sufran menos in terferencias y aquellos en los cuales la relación señal/ruido sea buena.  
 
Cuando se utiliza el monitoreo selectivo de iones (SIM), los intervalos de tolerancia de la 
relación de iones y los tiempos de retención basados en la inyección del plaguicida tipo e n 
disolvente puro a la concentración cercana al nivel crítico deberían haberse establecido en este 
punto. Los intervalos de tolerancia para las relaciones iónicas deben estar dentro de los límites 
de ± 30 % de la relación iónica absoluta. Cuando 2 (ó 3) re laciones iónicas seleccionadas están 
dentro de los intervalos de tolerancia establecidos, se confirma3 el residuo. Para un pequeño 
número de plaguicidas la espectrometría de masas probablemente solo muestre un ión 
específico, en cuyo caso debe buscarse una  confirmación alternativa.  
Cuando los iones detectados indican todavía la posible presencia de un residuo, el resultado 
puede comunicarse como identificado provisionalmente.  ANTEPROYECTO                                                                NORDOM 65:4-009 
 
 
Sin embargo, cuando el resultado dé lugar a una medida reglamentaria o los resu ltados se 
utilicen con otra finalidad (p. ej.: evaluación de la ingestión dietética), se buscará mayor 
confirmación de la identidad del analito. Esto puede lograrse con el mismo instrumental de GC -
MS, inyectando compuestos tipo ajustados a la matriz del an alito sospechado, para compensar 
la influencia de la matriz sobre las relaciones iónicas. En este caso, deben realizarse 
inyecciones posteriores del compuesto tipo ajustado a la matriz y la muestra sospechosa. La 
desviación del RRT del analito en el compue sto tipo y el pico sospechado en la muestra debe 
ser normalmente inferior al 0,1%. Dos relaciones iónicas medidas en una muestra deben estar 
dentro del intervalo de tolerancia calculado en base a las relaciones iónicas en el compuesto 
tipo ajustado a la ma triz. Se considerará que el residuo ha sido confirmado si cumple la norma 
general expuesta anteriormente. Si las relaciones iónicas no se encuentran dentro de los 
intervalos de tolerancia, puede obtenerse una confirmación adicional de la identidad utilizan do 
otras técnicas analíticas, ejemplos de las cuales figuran en la Tabla 6.  
 
Otra confirmación por espectrometría de masas puede realizarse mediante la formación de su 
espectro completo de masas mediante ionización por impacto electrónico (en la práctica, 
normalmente desde m/z50 hasta más allá de la región de iones moleculares).  
 
La ausencia de iones que interfieren es una consideración importante en la confirmación de la 
identidad. Una confirmación complementaria de la identidad puede conseguirse: i) utili zando 
una columna cromatográfica alternativa; ii) otra técnica de ionización (por ejemplo ionización 
química); iii) controlando otros productos de reacción de determinados iones mediante 
espectrometría doble de masas (MS/MS o MSn) o iv) controlando otros i ones con una masa 
mayor de resolución.  
 
Las determinaciones por espectrometría de masas deberán satisfacer unos controles de 
calidad analítica similares a los que se aplican a otros sistemas.  
 
HPLC y HPLC -MS. La confirmación de los residuos detectados tras  la separación por 
cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) suele ser más problemática con respecto a la 
cromatografía de gases. Si la detección se efectúa por absorción de rayos UV, la producción de 
un espectro completo puede proporcionar una prue ba adecuada de la identidad. Sin embargo, 
los espectros UV de algunos plaguicidas no son muy útiles para el diagnóstico por ser análogos 
a los producidos por muchos otros compuestos que poseen grupos funcionales o estructuras  
3 Soboleva E. Ahad K. Ambrus A . Aplicabilidad de algunos criterios de MS para la confirmación 
de residuos de plaguicidas), Analyst, 129, 1123 -1129, 2004.  
 
Similares, y la coelución simultánea de compuestos que provocan interferencia puede 
determinar otros problemas. Los datos sobre la absorción UV obtenidos con diversas 
longitudes de onda pueden apoyar o refutar la identificación, pero en general por sí solos no 
son suficientemente característicos. Se pueden emplear datos de fluorescencia para apoyar los 
obtenidos por absorción UV. El e mpleo de cromatografía de líquidos -espectrometría de masas 
(CL-EM) puede proporcionar datos justificativos adecuados, pero considerando que 
habitualmente los espectros generados son muy simples y presentan una escasa ANTEPROYECTO                                                                NORDOM 65:4-009 
fragmentación característica, es improb able que los resultados obtenidos mediante CL -EM 
sean definitivos. Una técnica más potente es la aplicación de CL -EM/EM, ya que combina 
selectividad y especificidad y a menudo ofrece pruebas adecuadas de la identidad del 
compuesto. Las técnicas de CL -EM ti enden a estar sujetas a los efectos de las matrices, 
especialmente la supresión, y por consiguiente para confirmar la cantidad puede hacerse 
necesaria la adición de compuesto tipo o compuestos tipo marcados por isótopos. Asimismo se 
podrá recurrir a la der ivación para confirmar los residuos detectados por HPLC (Tabla 6).  
 
Cromatografía en capa fina ( TLC). En algunos casos será muy conveniente confirmar 
mediante cromatografía en capa fina (CCF) los resultados de la cromatografía de gases. La 
identificación s e basa en dos criterios: valor fR y reacción de visualización. Los métodos de 
detección basados en bioensayos (por ejemplo con enzimas, proliferación fúngica, inhibición 
del cloroplasto) resultan particularmente idóneos para la confirmación cualitativa pue sto que 
son específicos de cierto tipo de compuestos, sensibles, y normalmente se ven muy poco 
afectados por los coextractos 4,5.  
 
La literatura científica contiene numerosas referencias a esta técnica6. Sin embargo, los 
aspectos cuantitativos de la cromat ografía en capa fina son limitados. Una extensión ulterior de 
esta técnica implica la eliminación de la superficie de la placa correspondiente al fR del 
compuesto de interés, seguida de coelución del material de la capa y de un nuevo análisis 
químico o fís ico de confirmación. Habrá que poner siempre en la placa, junto al extracto de la 
muestra, gotas de una solución del plaguicida tipo para evitar problemas de no repetibilidad del 
fR. Echando sobre el extracto gotas del plaguicida tipo también se puede obte ner información 
útil. Las ventajas de la cromatografía en capa fina son la rapidez, el bajo costo y la aplicabilidad 
a materiales sensibles al calor; las desventajas consisten en que normalmente es menos 
sensible que las técnicas instrumentales de detecció n cromatográfica y exige una purificación 
más eficiente cuando la detección se basa en las reacciones cromáticas de las sustancias 
químicas.  
 
Derivación.   Al seleccionar iones para confirmación GC/MS basados en una derivación, los 
iones seleccionados tiene n que ser estructuralmente pertinentes para el residuo y no 
representar fragmentos del agente de derivación. Aunque la derivación puede ser una forma 
valiosa de confirmar la identidad de un residuo, debe tenerse en cuenta que añade también un 
elemento extr a a la incertidumbre de una confirmación cuantitativa.  
 
Esta forma de confirmación puede considerarse bajo tres amplios epígrafes:  
 
a) Reacciones químicas.   Se han utilizado frecuentemente reacciones químicas en pequeña 
escala que originan productos de deg radación, adición o condensación de plaguicidas, 
seguidas de un preexamen de los productos por técnicas cromatográficas. Las reacciones dan 
origen a productos que tienen tiempos de retención y/o respuesta al detector distintos de los 
del compuesto de orige n. Hay que tratar una muestra de plaguicida tipo juntamente con el 
residuo sospechado a fin de poder comparar directamente los respectivos resultados. Deberá 
incluirse también un extracto enriquecido para probar que la reacción ha tenido lugar en 
presencia  de material de la muestra. Cuando los derivados se detectan gracias a las 
propiedades del reactivo del que se derivan, pueden producirse interferencias. Cochrane, W.P., 
ha publicado una reseña de las reacciones químicas utilizadas para fines de confirmaci ón 
(Chemical derivatisation in pesticide analysis, Plenum Press, NY (1981)).  ANTEPROYECTO                                                                NORDOM 65:4-009 
 
 
Reacciones químicas tienen la ventaja de ser rápidas y fáciles de realizar, pero es necesario 
comprar o purificar reactivos especializados.  
 
b) Reacciones físicas . Una técnica  útil es la alteración fotoquímica de un residuo de plaguicida 
para obtener uno o más productos de patrón cromatográfico reproducible. Hay que tratar 
siempre de igual manera una muestra del plaguicida tipo y del extracto enriquecido. Las 
muestras que conti enen más de un residuo de plaguicida pueden plantear problemas en la 
interpretación de los resultados. En tales casos, puede efectuarse antes de la reacción una 
separación previa de residuos específicos mediante CCF, cromatografía de alto rendimiento o 
fraccionamiento en columna.  
 
c) Otros métodos.   Muchos plaguicidas pueden degradarse o transformarse por la acción de 
enzimas. En contraposición a las reacciones químicas normales, estos procesos son muy 
específicos y generalmente consisten en oxidación, hidr ólisis o desalquilación. Los productos 
de la conversión poseen características cromatográficas distintas de las del plaguicida de 
origen, y pueden utilizarse a efectos de confirmación si se comparan con los productos de 
reacción utilizando plaguicidas tipo . 
 
Tabla 6. Métodos de detección apropiados para el cribado (fase 1) y la confirmación (fase 
2) de residuos  
 
  Fase 1 - Cribado  
  
GC con columna capilar -ECD, NPD, 
PD, PFPD  
GC -MS 
LC-MS 
LC-DAD o exploración UV  
LC-UV/VIS (longitud de onda simple)  
LC-fluores cencia  
GC con columna envasada -ECD; NPD, 
FPD 
TLC – enzimas, proliferación fangal, 
inhibición del cloroplasto  Fase 2, 
confirmació
n  GC con columna capilar -ECD, NPD, PD, 
PFPD  x1 x1 x x x x x x 
GC -MS x X 
1,2 x x x x x x ANTEPROYECTO                                                                NORDOM 65:4-009 
LC-MS x x  x x x x x 
Técnica de  examen completas  x x x x x x x x 
(MS)n HRMS, otras técnicas de ionización  x x x x x x x x 
LC-DAD o exploración UV  x x x  x x x x 
LC-UV/VIS (longitud de onda simple)  x x    x x x 
LC-UV/VIS (longitud de onda simple)  x x  x x  x x 
TLC – enzimas, pr oliferación fangal, inhibición 
del cloroplasto  x x x x x x ..x X 2,3 
Derivación  x x x x x x x x 
Perfil especifico de isómeros  x x x x x x x  
 
 
 
 
 
1- Se utilizará o bien la columna de polaridad diferente que da lugar a un orden de elusión 
diferente o el usión de residuos y contaminantes en las proximidades del pisco de interés u 
otro detector especifico.  
 
2- Puede utilizarse la misma técnica GC -MS para la fase 2 (confirmación) si se seleccionan 
iones diferentes o se establecen intervalos de tolerancia basado s en soluciones ajustadas a 
la matriz.  
 
3- Se utilizara la fase móvil o estacionaria de polaridad diferente . 
 
 
 
 
 
 
 
 
 ANTEPROYECTO                                                                NORDOM 65:4-009 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Tabla 6. Métodos de detección apropiados para el cribado (fase 1) y la 
confirmación (fase 2) de residuos.  ANTEPROYECTO                                                                NORDOM 65:4-009 
 
 
 
 
 
 
 ANTEPROYECTO                                                                NORDOM 65:4-009 
 
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