中华人民共和国国家标准  
 
GB xxxx—xxxx 
 
  
中华人民共和国卫生部    发布 xxxx -xx-xx发布  
 xxxx -xx-xx实施  
 食品安全国家标准  
贝类中麻痹性贝类毒素的测定  
（征求意见稿）  GB xxxx—xxxx  
I 前    言 
本标准代替 GB/T 5009.213 -2008《贝类中麻痹性贝类毒素的测定 》。 
本标准中附录 A、B均为资料 /规范性附录。 
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：  
—— GB/T 5009.213 -2008。 GB xxxx—xxxx  
1 食品安全国家标准  
贝类中麻痹性贝类毒素的测定  
1 范围 
本标准规定了贝类及其制品中 麻痹性贝类毒素 的测定方法。 
本标准适用于贝类及其制品中 麻痹性贝类毒素的 测定。 
2 术语和定义？ 
 
3 原理 
本方法采用 小鼠生物 法对PSP予以定量。根据小鼠 腹腔注射贝类提取液后的死亡时间，查出鼠单
位，并按小鼠体重，校正鼠单位 (corrected mouse unit ，CMU)，计算确定每 100 g样品中 PSP的鼠单位 。
以石房蛤毒素 作为标准，将鼠单位换算成毒素的微克数 ，计算确定每 100 g贝肉内的 PSP微克数。 所测
定结果代表存在于贝肉内各种化学结构的 PSP毒素总量  
4 试剂和材料  
除非另有说明， 本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。 
4.1 盐酸溶液（ 0.18 mol/L ）：将15 mL浓盐酸（ HCL）用蒸馏水稀释至 1 L。 
4.2 盐酸溶液（ 5 mol/L）：将41.7 mL浓盐酸用蒸馏水稀释至 100 mL。 
4.3 氢氧化钠溶液（ 0.1 mol/L ）：将4.0 g 氢氧化钠（ NaOH）溶于 1 L蒸馏水中。  
4.4 石房蛤毒素（ Saxitoxin ，STX , C10H17N7O4· 2HCl）标准溶液  
STX贮备液（100 μg/mL ）：用蒸馏水配制 20％（ v/v）的乙醇溶液，用 5 mol/L盐酸调节 pH到2.0～
4.0之间，备用。精确称取 STX标准品， 用上述溶液 定容至 STX浓度为（100 μg/mL ）。 
STX工作液（1 μg/mL）： 准确吸取 1 mL贮备液用蒸馏水 定容至100mL。该标准工作液可在 3℃～4℃
下稳定数周。  
4.5 小鼠：体重为 19 g～21 g的健康 ICR系雄性小鼠， 可通过查附录 B表B.1得到小鼠体重校正系数 。 
5 仪器和设备  
5.1 均质器。  
5.2  电炉。 
5.3  天平：感量 0.1 g，0.0001 g 。 
5.4  离心机：转速 ≥2000 转/分钟。 GB xxxx—xxxx  
2 5.5  pH计或pH试纸。 
5.7  一次性注射器： 1 mL。 
6 试样制备和保存  
6.1 试样制备  
分析样品要有充分的代表性，应从足量（一般应 2 kg以上）的混合样品中挑选良好的贝类去壳，
用于分析的去壳肉量应达 200 g以上。 
不能及时送检 的新鲜贝类 ，按6.1.1或6.1.2方法将贝肉分离，将沥水后的 200 g贝肉放入 0.18 
mol/L、200 mL的盐酸溶液中，置 4℃冷藏保存，备检。  
6.1.1 牡蛎、蛤及贻贝  
用清水将贝壳外表彻底洗净，切断闭壳肌，开壳，用蒸馏水淋洗内部去除泥沙及其他异物。将闭
壳肌和连接在胶合部的组织分开，仔细取出贝肉，切勿割破贝体。严禁加热或用麻醉剂开壳。收集约
200 g肉分散置于筛子中沥水 5 min（不要使肉堆积），检出碎壳等杂物，将贝肉粉碎备用。  
6.1.2 扇贝 
取可食部分用作检测，过程同 6.1.1。 
6.1.3 冷冻贝类  
在室温下，使冷冻的样品（带壳或脱壳的） 自然融化 ，按 6.1.1方法开壳、淋洗、取肉、 粉碎、备
用。 
6.1.4 贝类罐头  
将罐内所有内容物（肉及液体）倒入均质器中充分均质。如果是大罐，将贝肉沥水并收集沥下的
液体分别称重并存放固形物和汤汁，将固形物和汤汁按原罐装比例混合，均质后备用。  
6.1.5 用酸保存的贝肉  
沥去酸液，分别存放贝肉及酸液，备用。  
6.1.6 贝肉干制品  
干制品可于等体积 0.18 mol/L 盐酸溶液中浸泡 24 h～48 h（4℃冷藏），按 6.1.4方法沥干 ，分别存
放贝肉和酸液备用 。 
6.2 试样保存  
送检样品应尽可能及时检验，如不能及时检测， 可取 200 g样品按 6.1方法处理，加入 200 mL 0.18 
mol/L盐酸溶液，置 4℃冷藏保存。  
7 检验步骤  
7.1 PSP标准品对照试验  
7.1.1 PSP标准工作液的配制  
准确量取 1 mL浓度为 100 µ g/mL的石房蛤毒素 标准液 ,用蒸馏水稀释，调节pH在2.0～4.0之间，定
容至100 mL。该溶液为 l μg/mL 石房蛤毒素 标准液， 该标准液可 在3℃～4℃下稳定数周。  
用10 mL、15 mL、20 mL、25 mL和30 mL的蒸馏水分别稀释 1 μg/mL的石房蛤毒素标准液 10 mL，
配制成系列浓度的标准稀释液。  
7.1.2 中位数死亡时间的标准液选择  GB xxxx—xxxx  
3 取按 7.1.1配制的系列浓度的标准稀释液各 1 mL，腹腔注射小鼠数只，选择中位数死亡时间为 5  
min～7 min的浓度剂量。如某浓度稀释液已达到要求，还需以 1 mL蒸馏水的增减量进行补充稀释试
验。例如：用 25 mL蒸馏水稀释的 10 mL标准液在 5 min～7 min杀死小鼠，还需进行 24 mL＋10 mL
和26 mL＋10mL稀释度的试验。  
每只小鼠试验前称重，以 10只小鼠为一组，用中位数死亡时间在 5 min～7 min范围内的二个浓
度含量的标准稀释液注射小鼠，测定并记录每只小鼠腹腔注射完毕至停止呼吸的所需死亡时间。  
7.1.3 毒素转换系数 (conversion factor ，CF)的计算 
7.1.3.1 小鼠中位数死亡时间的选择  
计算所选择浓度的标准稀释液受试组中位数死亡时间。弃去中位数死亡时间小于 5 min或大于7 
min的受试组；选择中位数死亡时间在 5 min～7 min的受试组，该受试组中可有个别小鼠的死亡时间
可小于5 min或大于 7 min。 
7.1.3.2 校正鼠单位 (CMU)的计算 
对于所选定的中位数死亡时间为 5 min～7 min的受试组，根据附录 A查得组中每只小鼠死亡时间所
对应的鼠单位（ MU），再根据附录 B查得组中每只小鼠 体重所对应的 体重校正系数，同一只小鼠的 体重
校正系数与鼠单位相乘得该只受试小鼠的校正鼠单位（ CMU）。 
7.1.3.3 转换系数 (CF)的计算 
对于选定的受试组，用该受试组所选稀释液每毫升实际毒素含量的微克数（以 石房蛤毒素 为例计
算） ，除以受试组中每只小鼠的 CMU值，得到单只小鼠的毒素转换系数（ CF） ，计算见公式（ 1），再
计算每组 10只小鼠的平均 CF值，即为组内毒素转换系数。  
CF ＝ C ……………………………………………  （1） CMU  
式中：  
CF—转换系数；  
C—每毫升 STX实际毒素含量 ，单位为微克每毫升 （μg/mL）； 
CMU—校正鼠单位。  
7.1.3.4 组间毒素转换系数 (CF)的计算 
取不同受试组组内毒素转换系数的平均值， 即为组间毒素转换系数。 以组间毒素转换系数进行 8.2
中检测样品的毒力计算。  
7.1.3.5 CF值定期检查  
如PSP检测间隔时间较长，每次测定时要用适当的标准稀释液注射 5只小鼠，重新测定 CF值。
如果一周有几次检测，则用中位数死亡时间 5 min～7 min的标准稀释液每周检查一次，测得的 CF值
应在原测定 CF值的± 20％范围内。若结果不符，用同样的标准稀释液另外注射 5只小鼠，综合先前
注射的 5只小鼠结果，算出 CF值。并用同样的标准稀释液注射第二组 10只小鼠，将第二组求出的
CF值和第一组的 CF值进行平均，即为一个新的 CF值。  
重复检查的 CF值通常在原结果的± 20％之内，若经常发现有较大偏差，在进行常规检测前应调
查该方法中是否存在未控制或未意识到的可变因素。  
7.2 试样提取  
7.2.1 取100 g按6.1.1、6.1.2、6.1.3或6.1.4处理的样品于 800 mL烧杯中，加 0.18 mol/L 盐酸溶液
100 mL充分搅拌，均质，调整 pH在2.0～4.0范围内；按 6.1.5或6.1.6和6.2处理的样品，取 100 g
贝肉，加入相应的酸液 100 mL，调 pH为2.0～4.0后均质。必要时，可逐滴加入 5 mol/L 盐酸溶液或GB xxxx—xxxx  
4 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液调整 pH，加碱时速度要慢，同时需不断搅拌，防止局部碱化破坏毒素。  
7.2.2 将混合物加热，并文火煮沸 5 min，冷却至室温，将混合物移至量筒中并稀释至 200 mL，调节
pH至2.0～4.0（pH值切勿 >4.5）。 
7.2.3 将混合物倒回烧杯，搅拌均匀，自然沉降至上清液呈半透明状，不堵塞注射针头即可，必要时
将混合物或上清液以 3000  r/min离心 5 min，或用滤纸过滤。收集上清液备用。  
7.3 小鼠试验  
7.3.1 取19.0 g ~21 .0 g健康 ICR雄性小鼠 6只，称重并记录重量。 随机分为实验组和空白对照组 （ 0.18 
mol/L 盐酸）两组，每组 三只。  
7.3.2 对每只试验小鼠腹腔注射 1 mL提取液或空白对照液。注射过程中若有一滴以上提取液溢出，
须将该只小鼠丢弃，并重新注射一只小鼠。  
7.3.3 记录注射完毕时间，仔细观察并记录小鼠停止呼吸时的死亡时间（到小鼠呼出最后一口气止） 。   
7.3.4 若注射样品原液后， 1只或 2只小鼠的死亡时间大于 7 min，则需再注射至少 三只小鼠以确定样
品的毒力。  
7.3.5 若小鼠的死亡时间小于 5 min，则要稀释样品提取液后，再注射另一组小鼠（ 3只） ，直至得到
5 min～7 min的死亡时间；稀释提取液时，要逐滴加入 0.18 mol/L盐酸溶液，调节 pH至2.0～4.0。 
7.3.6为避免毒素的危害，应戴手套进行检验操作。移液管等用过的器材应在 5%的次氯酸钠溶液中浸
泡1h以上， 以使毒素分解 。 同样，废弃的提取液等也应以 5%次氯酸钠溶液处理。 小鼠尸体应按 GB 14925 
要求焚烧处理，其排放物应达到污物焚烧排放规定的要求。  
8 结果的计算与判断  
8.1 待测样品校正鼠单位 (CMU)的确定 
根据待测样品的小鼠死亡时间，在附录 A中查出相应的鼠单位数 MU；根据小鼠的 体重，在附录
B中查出其对应的 体重校正系数。 同一只小鼠的鼠单位与 体重校正系数相乘，即得该只小鼠的 CMU。
选取检测样品受试组中 三只小鼠 CMU的中位数，即为该样品受试组的中位数 CMU，以此值进行 8.2
的计算。  
8.2 毒素毒力的计算与结果表述  
8.2.1 PSP 毒力的计算与结果表述  
8.2.1.1 PSP 毒力的计算  
每100 g样品中PSP的含量按公式（ 2）计算。  
X = CMU 1×CF×DF×200   ………………………………………………（ 2） 
式中：  
X——每100 g样品中 PSP的含量，单位为微克每百克（ µg /100 g）； 
CMU 1——检测样品受试组小鼠的中位数 校正鼠单位；  
CF——毒素转换系数；  
DF——稀释倍数；  
200——表示样品提取液定容的体积 ，单位为毫升 （ mL） （提示： 7.2.2操作中该定容体积为 200 mL）。 
8.2.1.2 PSP 毒力的结果表述  
若空白对照组 小鼠正常，则报告待测 样品中PSP毒素含量为： ××× µ g /100  g。 
8.2.2 MU毒力的计算与结果判断  
8.2.2.1 MU 毒力的计算  GB xxxx—xxxx  
5 对于取得麻痹性贝类毒素标准品有困难的实验室，可按公式（ 3），使用鼠单位 MU对检验结果进
行计算。  
Y = CMU 1×DF×200  ……………………………………………………（ 3） 
式中：  
Y——每100 g样品的 MU值，单位为鼠 单位每百克（ MU /100 g ）； 
CMU 1——检测样品受试组小鼠的中位数 校正鼠单位；  
DF——稀释倍数；  
200——表示样品提取液定容的体积 ，单位为毫升 （ mL）（提示：7.2.2操作中该定容体积为 200 mL）。 
注：检验结果的仲裁以 8.2.1为准。 
8.2.2.2 MU 毒力的判断与结果表述  
在空白对照组 小鼠正常的情况下进行如下判断和表述：  
若小鼠的死亡时间大于 60 min，则待测样品的鼠单位即相当小于 0.875  MU/g。 
若实验组中位数死亡时间小于 5 min，则应对样品提取液进行稀释，再选取 3只小鼠进 行试验，
直至得到中位数死亡时间为 5 min~7  min为止，根据最后的稀释液实验结果计算样品的 鼠单位毒力，
报告该样品的 鼠单位为： ×××  MU/100 g。 
若实验组中位数死亡时间大于 7 min，则直接计算确定样品 鼠单位毒力，报告该样品的 鼠单位为：
×××  MU/100 g。 
若实验组中所有小鼠在观察 15 min内均不死亡，则 也可报告 该样品的鼠单位 小于 400 MU/ 100 g。 GB xxxx—xxxx  
6 附  录  A 
（规范性附录 ) 
痹性贝类毒素死亡时间  — 鼠单位的关系  
    麻痹性贝类毒素死亡时间 -鼠单位的关系见表 A.1。 
表A.1  麻痹性贝类毒素死亡时间  — 鼠单位的关系  
时间          鼠单位  
（分秒）     （MU） 时间          鼠单位  
（分秒）     （MU） 
1：00        100  
1：10        66.2  
1：15        38.3  
1：20        26.4  
1：25        20.7  
1：30        16.5  
1：35        13.9  
1：40        11.9  
1：45        10.4  
1：50        9.33  
1：55        8.42  
2：00        7.67  
2：05        7.04  
2：10        6.52  
2：15        6.06  
2：20        5.66  
2：25        5.32  
2：30        5.00  
2：35        4.73  
2：40        4.48  
2：45        4.26  
2：50        4.06  
2：55        3.88  
3：00        3.70  
3：05        3.57  
3：10        3.43  
3：15        3.31  
3：20        3.19  
3：25        3.08  
3：30        2.98  
3：35        2.88  
3：40        2.79  
3：45        2.71  
3：50        2.63  
3：55        2.56  
4：00        2.50  
4：05        2.44  
4：10        2.38  
4：15        2.32  
4：20        2.26  
4：25        2.21 
4：30        2.16  
4：35        2.12  
4：40        2.08  
4：45        2.04  
4：50        2.00  
4：55        1.96  5：00         1.92  
5：05         1.89  
5：10         1.86  
5：15         1.83  
5：20         1.80  
5：30         1.74  
5：40         1.69  
5：45         1. 67 
5：50         1.64  
6：00         1.60  
6：15         1.54  
6：30         1.48  
6：45         1.43  
7：00         1.39  
7：15         1.35  
7：30         1.31  
7：45         1.28  
8：00         1.25  
8：15         1.22  
8：30         1.20  
8：45         1.18  
9：00         1.16  
9：30         1.13  
10：00        1.11  
10：30        1.09  
11：00        1.075  
11：30        1.06  
12：00        1.05  
13：00        1.03  
14：00        1.015  
15：00        1.000  
16：00        0.99  
17：00        0.98  
18：00        0.972  
19：00        0.965  
20：00        0.96  
21：00        0.954  
22：00        0.948  
23：00        0.942  
24：00        0.937  
25：00        0.934  
30：00        0.917  
40：00        0.898  
60：00        0.875  GB xxxx—xxxx  
7 附  录  B 
（规范性附录）  
小鼠体重校正表  
    小鼠体重校正系数见表 B.1。 
表B.1  小鼠体重校正表  
                 小鼠体重， g                  校正系数  
10 
10.5 
11 
11.5 
12 
12.5 
13 
13.5 
14 
14.5 
15 
15.5 
16 
16.5 
17 
17.5 
18 
18.5 
19 
19.5 
20 
20.5 
21 
21.5 
22 
22.5 
23 0.50 
0.53 
0.56 
0.59 
0.62 
0.65 
0.675  
0.70 
0.73 
0.76 
0.785  
0.81 
0.84 
0.86 
0.88 
0.905  
0.93 
0.95 
0.97 
0.985  
1.000  
1.015  
1.03 
1.04 
1.05 
1.06 
1.07