Podophyllotoxine 
 
Podophyllotoxinum  
 
 
 
C22 H22 O8       Mr 414,4 
[518-28-5] 
 
 
Définition 
 
Lactone d’acide (1 R,2 R,3 R,4 R)-1-Hydroxy-2-hydroxyméthyl-6,7-méthylendioxy-4-(3’ ,4’,5’-
triméthoxyphényl)-1,2,3,4-tétrahydronaphtalén-3-car boxylique 
 
Teneur:  au minimum  98,5 pour cent 
 
 
Caractères 
 
Aspect: poudre cristalline, blanche ou sensiblement blanche . 
Solubilité:  pratiquement insoluble dans l’eau, facilement solu ble dans l’acétone, soluble dans le 
méthanol. 
 
 
Identification 
 
A. Chromatographie sur couche mince (2.2.27). 
Mélange de solvants:  méthanol R, acide acétique anhydre R (900:1 V/V) 
Solution à examiner . Dissolvez 10 mg de podophyllotoxine dans le mélan ge de solvants et 
complétez à 20 ml avec le mélange de solvants. 
Solution témoin . Dissolvez 10 mg de podophyllotoxine RN  dans le mélange de solvants et 
complétez à 20 ml avec le mélange de solvants. 
Plaque:  plaque au gel de silice GF 254  pour CCM R.  
Phase mobile:  méthanol R, toluène R (1:5 V/V). 
Dépôt:  10 µl, en bandes. 
Développement:  sur les 2/3 de la plaque. 
Séchage:  à l’air. 
Détection A:  examinez en lumière ultraviolette à  254 nm. 
Résultats A:  la bande principale du chromatogramme obtenu avec la solution à examiner est 
semblable quant à sa position, sa coloration et ses  dimensions à la bande principale du 
chromatogramme obtenu avec la solution témoin. Détection B:  pulvérisez du mélange de 9 volumes de méthanol R et de 1 volume d’acide 
sulfurique R et chauffez à 140 °C pendant 15 min. 
Résultats B:  la bande principale du chromatogramme obtenu avec la solution à examiner est 
semblable quant à sa position, sa coloration et ses  dimensions à la bande principale du 
chromatogramme obtenu avec la solution témoin. 
B.   Spectrophotométrie d’absorption dans l’ultravi olet et le visible (2.2.25). 
Solution à examiner . Dissolvez 10 mg de podophyllotoxine dans de l’éth anol à 96 pour cent R puis 
complétez à 20,0 ml avec le même solvant. Prélevez 1 ml de solution et complétez à 25 ml avec 
de l’éthanol à 96 pour cent R. Mesurez immédiatement l’absorption de cette solut ion. 
Région spectrale:  200-350 nm. 
Maximum d’absorption:  à 292 nm. 
Minimum d’absorption:  à 260 nm. 
C. Pouvoir rotatoire spécifique (2.2.7): –107,0 à – 112,0 (substance desséchée). 
Dissolvez 0,20 g de podophyllotoxine dans de l’étha nol anhydre R et complétez à 20 ml avec le 
même solvant. 
 
 
Essai 
 
Aspect de la solution : La solution est limpide (2.2.1) et n’est pas plus  fortement colorée que la 
solution témoin JB 7 (2.2.2, Procédé II). 
Dissolvez 0,50 g de podophyllotoxine dans de l’acét one R et complétez à 10,0 ml avec le même 
solvant. 
 
Substances apparentées : Chromatographie liquide (2.2.29). 
Solution A: méthanol R, acide acétique anhydre R (900:1  V/V ).  
Solution B : solution A, eau  R (10:7  V/V ).  
Solution à examiner . Dissolvez  25,0 mg de podophyllotoxine dans 2,0 ml de solutio n A et complétez à 
25,0 ml avec la solution B.  
Solution témoin a . Prélevez 1,0 ml de solution à examiner et complét ez à 50,0 ml avec la solution B. 
Prélevez 1,0 ml de cette solution et complétez à 20 ,0 ml avec la solution B. 
Solution témoin a . Dissolvez 25,0 mg de podophyllotoxine dans  2,5 m l d’éthanol anhydre R. Ajoutez  
1,0 ml d’une solution d’acétate de sodium R (82,0 g . l-1). Agitez pendant 15 h à température ambiante 
puis ajoutez 0,1 ml acide acétique R et 3,0 ml de solution A. Prélevez 1,0 ml de cette solution et 
complétez à 20,0 ml avec la solution B. 
Colonne: 
-  dimensions: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm 
-  phase stationnaire: gel de silice octadécylsilyl é postgreffé pour chromatographie R (5 µm) 1 
-  température: 40 oC 
Phase mobile:  méthanol R, eau R (45:55 V/V) ; prémélangez les solvants. 
Débit:  1,0 ml . min -1. 
Détection:  spectrophotomètre à 240 nm. 
Injection: 10 µl. 
Enregistrement:  5 fois le temps de rétention de la podophyllotoxin e. 
Rétention relative par rapport à la podophyllotoxine (temps de rétenti on =  environ 18 min) 
-  Impureté A = environ 0,2  
-  Impureté B = environ 0,4 
                                                 
1 ODS Hypersil® convient. Conformité du système:  Solution témoin (b): 
- résolution: au minimum 5,0 entre les pics dus à l ’impureté A et la podophyllotoxine. 
- Temps de rétention du pic principal: 18 ± 4 min. 
Limites : 
- impuretés A, B:  pour chaque impureté, au maximum la surface du pic  principal du 
chromatogramme obtenu avec la solution témoin (a) ( 0,1 pour cent) 
- impuretés non spécifiées : pour chaque impureté, au maximum la surface du pi c principal du 
chromatogramme obtenu avec la solution témoin (a) ( 0,10 pour cent) 
- total:  au maximum 5 fois la surface du pic principal du c hromatogramme obtenu avec la solution 
témoin (a) (0,5 pour cent) 
- limite d’exclusion:  0,5 fois la surface du pic principal du chromatogr amme obtenu avec la solution 
témoin (a) (0,05 pour cent). 
 
Perte à la dessiccation (2.2.32): au maximum 1,0 Prozent, déterminé à 105 ° C sous vide pendant 2 
h sur 1,000 g de podophyllotoxine. 
 
Cendres sulfuriques (2.4.14): au maximum 0,1 pour cent, déterminé sur l e résidu obtenu sous l’essai 
„Perte à la dessiccation“.   
 
 
Dosage 
 
Calculez la teneur en podophyllotoxine en tenant co mpte des valeurs obtenues dans les essais 
„Substances apparentées“, „Perte à la dessiccation“  et „Cendres sulfuriques“. 
 
Conservation  
 
A l’abri de la umière, à une température de 2 °C à 8 °C. 
 
 
Impuretés 
 
Impuretés spécifiées:  A, B 
 
 
 
A. Picropodophyllotoxine 
  
B. 4’-Déméthylepipodophyllotoxine 
 
 
Podophyllotoxine RN  
C22 H22 O8 Mr 414,4 
[518-28-5] 
Poudre cristalline, blanche à sensiblement blanche.  
Podophyllotoxine correspond à la monographie „Podop hyllotoxine“ à l’exception de l’identification A 
ainsi que les essais „Aspect de la solution“ et „Ce ndres sulfuriques“.  
Spectroscopie nucléaire magnétique (2.2.33):  
1H-NMR (500 MHz, J in Hz, CDCl 3): δ (ppm) = 2,73-2,85 (m, 2H); 3,75 (s, 6H); 3,81 (s, 3H); 4,07 (t, 
J=9,4, 1H); 4,58-4,61 (m, 2H); 4,76 (t, J=8,6, 1H);  5,96 (d, J=1,3, 1H); 5,98 (d, J=1,3, 1H); 6,37 (s,  
2H); 6,51 (s, 1H); 7,11 (s, 1H). 
13 C-NMR (125 MHz, CDCl 3): δ (ppm) = 40,8; 44,1; 45,3; 56,3; 60,8; 71,3; 72,8; 101,5; 106,3; 108,5; 
109,8; 131,2; 133,2; 135,4; 137,3; 147,7; 147,8; 15 2,6; 174,4.