中华人民共和国国家标准  
 
GB4789.7—xxxx 
 
 
食品安全 国家标准  
食品微生物学检验   副溶血性弧菌检验  
 
 
（征求意见稿）  
中华人民共和国卫生部    发布 xxxx -xx-xx发布  xxxx -xx-xx实施  GB 4789.7—xxxx  
I 前    言 
本标准代替 GB/T 4789.7 -2008《食品卫生微生物学检验  副溶血性弧菌检验》。  
本标准与 GB/T  4789. 7-2008相比，主要变化 如下：  
——修改了标准的中英文名称；  
——修改了范围；  
——修改了设备和材料；  
——修改了培养基和试剂；  
——修改了检验程序；  
——规范了样品制备过程；  
——修改了嗜盐性试验的盐浓度 。 GB 4789.7—xxxx  
1 食品安全国家标准  
食品微生物学检验   副溶血性弧 菌检验  
1 范围 
本标准规定了食品中副溶血性弧菌 （Vibrio parahaemolyticus ）的检验方法。  
本标准适用于 食品中副溶血性弧菌的检验。  
2 设备和材料 设备和材料  
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：  
2.1 恒温培养箱： 36 ℃± 1 ℃。 
2.2 冰箱： 2 ℃～5 ℃、7 ℃～10 ℃。 
2.3 恒温水浴箱： 36 ℃± 1 ℃。 
2.4 均质器或无菌乳钵。  
2.5 天平：感量 0.1 g。 
2.6 无菌试管： 18 mm× 180 mm 、15 mm× 100 mm 。 
2.7 无菌吸管： 1 mL（具 0.01 mL刻度）、 10 mL（具 0.1 mL刻度）或微量移液器及吸头。  
2.8 无菌锥形瓶：容量 250 mL、500 mL、1000 mL。 
2.9 无菌培养 皿：直径 90 mm。 
2.10 全自动微生物生化鉴定系统。  
2.11 无菌手术剪、镊子。  
3 培养基和试剂  
3.1 3％氯化钠碱性蛋白胨水 ：见附录 A中A.1。 
3.2 硫代硫酸盐 -柠檬酸盐 -胆盐 -蔗糖（ TCBS）琼脂：见附录 A中A.2。 
3.3 3％氯化钠 胰蛋白胨大豆琼脂： 见附录 A中A.3。 
3.4 3％氯化钠三糖铁琼脂 ：见附录 A中A.4。 
3.5 嗜盐性试验培养基 ：见附录 A中A.5。 
3.6 3％氯化钠甘露醇试验培养基 ：见附录 A中A.6。  
3.7 3％氯化钠赖氨酸脱羧酶试验培养基 ：见附录 A中A.7。 GB 4789.7—xxxx  
2 3.8 3％氯化钠 MR-VP培养基：见附录 A中A.8。 
3.9 3％氯化钠溶液： 见附录 A中A.9。 
3.10 我妻氏血琼脂 ：见附录 A中A.10。 
3.11 氧化酶试剂 ：见附录 A中A.11。 
3.12 革兰氏染色液 ：见附录 A中A.12。 
3.13 ONPG试剂：见附录 A中A.13。 
3.14 Voges -Proskauer （V-P）试剂：见附录 A中A.14。 
3.15 弧菌显色培养基 。 
3.16 生化鉴定试剂盒 。 
4 检验程序  
副溶血性弧菌检验程序 见图 1。 
 GB 4789.7—xxxx  
3  
图1 副溶血性弧菌检验程序  
5 操作步骤  
5.1 样品制备  
5.1.1 非冷冻样品采集后应立即置 7℃～10℃冰箱保存，尽可能及早检验；冷冻样品应在 45 ℃以下
不超过 15 min或在 2℃～5℃不超过18 h解冻。  
5.1.2 鱼类和头足类动物取表面组织、肠或鳃。贝类取全部内容物，包括贝肉和体液；甲壳类取整个
动物，或者动物的中心部分，包括肠和鳃。如为带壳贝类或甲壳类，则应先在自来水中洗刷外壳并甩
干表面水分，然后以无菌操作打开外壳，按上述要求取相应部分。  
5.1.3 以无菌操作取样品 25 g（mL），加入 3％氯化钠碱性蛋白胨水 225 mL，用旋转刀片式均质器
以8 000 r/min 均质 1 min，或拍击式均质器拍击 2 min，制备成 1:10的样品匀液。如无均质器，则将
样品放入无菌乳钵， 自225 mL 3 ％氯化钠碱性蛋白胨水中取 少量稀释液加入 无菌乳钵 ，样品磨碎后放
入500 mL无菌锥形瓶，再用少量稀释液冲洗乳钵中的残留样品 1～2次，洗液放入锥形瓶，最后将剩
余稀释液全部放入锥形瓶，充分振荡，制备 1:10的样品匀液。  
5.2 增菌 
5.2.1 定性检测  36 ℃± 1 ℃，18 h～24 h 36 ℃± 1 ℃，18 h～24 h 36 ℃± 1 ℃，8 h～18 h 样品 25 g（mL）+225 mL 3 ％氯化钠碱性蛋白胨水  
3％氯化钠碱性蛋白胨水 3管×3个合适的稀释度 
如果进行定性检测，则不需要 进行此步骤 
挑取可疑菌落，接种于 3％氯化钠 胰蛋白胨大豆琼 脂 
生化试验或选用 生化鉴定试剂盒或全自动微生
物生化鉴定系统  
结果与报告 血清学试验、神奈川试验  
（可选作项）  TCBS或弧菌显色 培养基 
 
筛选试验  
氧化酶试验，革兰氏染色，  
3％氯化钠三糖铁琼脂 ，嗜盐性试验  
 GB 4789.7—xxxx  
4 将上述 1:10样品匀液 于36 ℃±1 ℃培养 8 h～18 h。 
5.2.2 定量检测  
5.2.2.1  用无菌吸管吸取 1:10样品匀液 1 mL，注入含有9 mL 3％氯化钠碱性蛋白胨 水的试管内 ，振
摇试管混匀，制备 1:100的样品匀液 。  
5.2.2.2  另取 1 mL无菌吸管，按 5.2.2.1操作程序， 依次制备 10倍系列稀释样品匀液 ，每递增稀释
一次，换用一支1 mL无菌吸管。  
5.2.2.3  根据对检样污染情况的估计，选择三个连续的适宜稀释度，每个稀释度接种 三支含有9 mL 
3％氯化钠碱性蛋白胨 水的试管 ，每管接种 1 mL。置 36 ℃±1 ℃恒温箱内，培养 8 h～18 h。 
5.3 分离 
5.3.1 对所有显示生长的增菌液 ，用接种环 在距离液面以下 1 cm内沾取一环增菌液 ，于TCBS平板或
弧菌显色 培养基平板 上划线分离。一支试管划线一块平板。于 36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。 
5.3.2 典型的副溶血性弧菌在 TCBS上呈圆形、半透明 、表面光滑的绿 色菌落，用接种环轻触，有类
似口香糖的质感，直径 2 mm～3 mm。从培养箱取出 TCBS平板后，应尽快 （不超过1 h）挑取菌落或标
记要挑取的菌落。典型的副溶血性弧菌在 弧菌显色培养基 上的特征按照产品说明进行判定 。 
5.4 纯培养 
挑取三个或以上 可疑菌落，划线 接种 3％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂 平板， 36 ℃±1 ℃培养 18 h～
24 h。 
5.5 初步鉴定  
5.5.1 氧化酶试验 ：挑选纯培养的单个菌落进行氧化酶试验，副溶血性弧菌为氧化酶阳性。  
5.5.2 涂片镜检 ：将可疑菌落涂片，进行革兰氏染色，镜检观察形态。 副溶血性弧菌为革兰氏阴性 ，
呈棒状、弧状、卵圆状 等多形态 ，无芽胞，有鞭毛 。 
5.5.3 挑取纯培养的单个可疑菌落，转种 3％氯化钠三糖铁琼脂 斜面并穿刺底层， 36 ℃±1 ℃培养
24 h观察结果。 副溶血性弧菌 在3％氯化钠三糖铁琼脂中的 反应为底层变黄不变黑，无气泡，斜面颜
色不变或红色加深，有动力。  
5.5.4 嗜盐性试验 ：挑取纯培养的单个可疑菌落，分别接种 0％、6％、8％和10％不同氯化钠浓度的
胰胨水，36 ℃±1 ℃培养24 h，观察液体混浊情况。副溶血性弧菌在无氯化钠和 10％氯化钠的 胰胨
水中不生长或微弱生长，在 6％氯化钠和8％氯化钠的 胰胨水中生长旺盛。  
5.6 确定鉴定  
取纯培养物 分别接种含3％氯化钠的甘露醇 试验培养基 、 赖氨酸脱羧酶试验培养基 、MR-VP培养基，
36 ℃±1 ℃培养24 h～48 h后观察结果 ；3％氯化钠三糖铁琼脂 隔夜培养物进行 ONPG试验。可选择
生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统 。  
6  血清学分型 （可选择项）  
6.1  制备：接种两管 3％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂 试管斜面， 36 ℃± 1 ℃培养 18 h～24 h。用含 3％
氯化钠的 5％甘油溶液冲洗 3％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂 斜面培养物，获得浓厚的菌悬液。  
6.2  K抗原的鉴定： 取一管上述制备好的菌悬液，首先用多价 K抗血清进行检测，出现凝集反应时再
用单个的抗血清进行检测。用蜡笔在一张玻片上划出适当数量的间隔和一个对照间隔。在每个间隔内
各滴加一滴菌悬液，并 对应加入 一滴 K抗血清。在对照间隔内加一滴 3％氯化钠溶液。轻微倾斜玻片，
使各成分相混合，再前后倾动玻片 1 min。阳性凝集反应应 可以立即观察到。  
6.3  O抗原的鉴定： 将另外一管的菌悬液转移到离心管内， 121 ℃灭菌 1 h。灭菌后 4 000  r/min离心
15 min，弃去上层液体 ，沉淀用生理盐水洗三次，每次 4 000  r/min离心 15 min，最后一次离心后留少GB 4789.7—xxxx  
5 许上层液 体，混匀制成菌悬液 。用蜡笔将玻片划分成相等的间隔。在每个间隔内加入一滴菌悬液，将
O群血清分别加一滴到间隔内，最后一个间隔加一滴 生理盐水 作为自凝对照。轻微倾斜玻片，使各成
分相混合，再前后倾动玻片 1 min。阳性凝集反应应 可以立即观察到。如果未见到与 O群血清的凝集
反应，将菌悬液 121 ℃再次高压 1 h后，重新检测。如果仍旧为阴性，则培养物的 O抗原属于未知。
根据表 3报告血清学分型结果。  
表3  副溶血性弧菌的抗原  
O群 K型 
1 1，5，20，25，26，32，38，41，56，58，60，64，69 
2 3，28 
3 4，5，6，7，25，29，30，31，33，37，43，45，48，54，56，57，58，59，72，75 
4 4，8，9，10，11，12，13，34，42，49，53，55，63，67，68，73 
5 15，17，30，47，60，61，68 
6 18，46 
7 19 
8 20，21，22，39，41，70，74 
9 23，44 
10 24，71 
11 19，36，40，46，50，51，61 
12 19，52，61，66 
13 65 
7  神奈川试验 （可选择项）  
  神奈川试验是在我妻氏琼脂上测试是否存在特定溶血素。神奈川试验阳性结果与副溶血性弧菌分
离株的致病性显著相关。  
用接种环将测试菌株的 3％氯化钠 胰蛋白胨大豆琼脂 18 h培养物点种表面干燥的我妻氏血琼脂平
板。每个平板上可以环状点种几个菌。 36 ℃± 1 ℃培养不超过 24 h，并立即观察。阳性结果为菌落周
围呈半透明环的β溶血。  
8 结果与报告  
当检出的可疑菌落生化 性状符合表 1要求时，报告 25 g（mL）样品中 检出副溶血性弧菌。如果进
行定量检测，根据证实为副溶血性弧菌阳性的 试管管数，查 最可能数（ MPN）检索表，报告 每g（mL）
副溶血性弧菌的 MPN值。副溶血性弧菌主要性状与其他弧菌的鉴别见表 2。 
表1  副溶血性弧菌的生化性状  
试验项目  结果  
革兰氏染色镜检  阴性，无芽胞  
氧化酶  ＋ 
动力  ＋ 
蔗糖  － 
葡萄糖  ＋ 
甘露醇  ＋ 
分解葡萄糖产气  － 
乳糖  － GB 4789.7—xxxx  
6 试验项目  结果  
硫化氢  － 
赖氨酸脱羧酶  ＋ 
V-P － 
ONPG  － 
注：＋阳性；－阴性。  
 
表2  副溶血性弧菌主要性状与其他弧菌的鉴别  
名称  氧
化
酶 赖
氨
酸 精
氨
酸 鸟
氨
酸 明
胶 脲
酶 V 
︱
P 42℃
生长  蔗
糖 D
︱
纤
维
二
糖 乳
糖  
阿
拉
伯
糖 D
︱
甘
露
糖 D
︱
甘
露
醇 ONPG  嗜盐性试验  
氯化钠含量 /％ 
0 3 6 8 10 
副溶血性弧菌  
V . 
parahaemolyticus  ＋ ＋ － ＋ ＋ V － ＋ － V － ＋ ＋ ＋ － － ＋ ＋ ＋ － 
创伤弧菌  
V . vulnificus  ＋ ＋ － ＋ ＋ － － ＋ － ＋ ＋ － ＋ V ＋ － ＋ ＋ － － 
溶藻弧菌  
V. alginolyticus  ＋ ＋ － ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ － － － ＋ ＋ － － ＋ ＋ ＋ ＋ 
霍乱弧菌  
V. cholerae  ＋ ＋ － ＋ ＋ － V ＋ ＋ － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － － － 
拟态弧菌  
V . mimicus  ＋ ＋ － ＋ ＋ － － ＋ － － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － － － 
河弧菌  
V . fluvialis  ＋ － ＋ － ＋ － － V ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ V － 
弗氏弧菌  
V . furnissii  ＋ － ＋ － ＋ － － － ＋ － － ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ － 
梅氏弧菌  
V . metschnikovii  － ＋ ＋ － ＋ － ＋ V ＋ － － － ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ V － 
霍利斯弧菌  
V . hollisae  ＋ － － － － － － nd － － － ＋ ＋ － － － ＋ ＋ － － 
注： nd 表示未试验； V表示可变。  
 
 
 
 
 GB 4789.7—xxxx  
7 附录A 
培养基与试剂  
A.1 3％氯化钠碱性蛋白胨水  
A.1.1 成分 
蛋白胨                                      10.0 g  
氯化钠                                      30.0 g  
蒸馏水                                  1 000 .0 mL 
pH 8.5±0.2 
A.1.2 制法 
将上述成分 溶于蒸馏水中 ，调节 pH，121 ℃高压灭菌 10 min。 
A.2 硫代硫酸盐 -柠檬酸盐 -胆盐-蔗糖（TCBS）琼脂 
A.2.1 成分 
    蛋白胨                                      10.0 g 
酵母浸膏                                     5.0 g 
    柠檬酸钠（ C6H5O7Na3˙2H2O）                10.0 g 
    硫代硫酸钠（ Na2S2O3˙5H2O）                10.0 g 
    氯化钠                                      10.0 g 
    牛胆汁粉                                    5.0 g 
柠檬酸铁                                     1.0 g 
    胆酸钠                                       3.0 g 
    蔗糖                                        20.0 g 
    溴麝香草酚蓝                                0.04 g 
    麝香草酚蓝                                  0.04 g 
    琼脂                                        15.0 g 
    蒸馏水                                  1 000 .0 mL 
    pH 8.6±0.2 
A.2.2 制法 
将上述成分 溶于蒸馏水中，调节 pH，加热煮沸 至完全溶解 。冷至 50 ℃左右倾注平板备用 。 
A.3 3％氯化钠胰 蛋白胨大豆琼脂  
A.3.1 成分 
胰蛋白胨                                    15.0 g 
大豆蛋白胨                                   5.0 g 
氯化钠                                      30.0 g 
琼脂                                        15.0 g  
蒸馏水                                  1 000 .0 mL 
pH 7.3±0.2 
A.3.2 制法 
将上述成分 溶于蒸馏水中， 调节 pH，121 ℃高压灭菌 15 min。 
A.4 3％氯化钠三糖铁琼脂  GB 4789.7—xxxx  
8 A.4.1 成分 
蛋白胨                                      15.0 g 
月示蛋白胨                                   5.0 g 
牛肉膏                                       3.0 g 
酵母浸膏                                     3.0 g 
氯化钠                                      30.0 g 
乳糖                                        10.0 g 
蔗糖                                        10.0 g 
葡萄糖                                       1.0 g 
硫酸亚铁（FeSO 4）                           0.2 g 
苯酚红                                     0.024 g  
硫代硫酸钠 （Na2S2O3）                       0.3 g  
琼脂                                        12.0 g 
水                                     1 000 .0 mL 
pH 7.4±0.2 
A.4.2 制法 
将上述成分 溶于蒸馏水中， 调节 pH。分装到适当容量的试管中。 121 ℃高压灭菌 15 min。制成高
层斜面，斜 面长 4 cm～5 cm，高层深度为 2 cm～3 cm。 
A.5 嗜盐性试验培养基  
A.5.1 成分 
胰蛋白胨                                     10.0 g 
氯化钠                                按不同量加 入 
蒸馏水                                   1 000 .0 mL 
pH 7.2±0.2 
A.5.2 制法 
将上述成分 溶于蒸馏水中， 调节 pH，共配制 5瓶，每瓶 100 mL。每瓶分别加入不同量的氯化钠 ：
（1）不加；（2）3 g；（3）6 g；（4）8g；（5）10 g。分装试管 ，121 ℃高压灭菌 15 min。 
A.6 3％氯化钠甘露醇试验培养基  
A.6.1 成分 
    牛肉膏                                         5.0 g 
    蛋白胨                                        10.0 g 
    氯化钠                                        30.0 g 
    磷酸氢二钠 （Na2HPO 4˙12H2O）                  2.0 g 
    溴麝香草酚蓝                                  .024 g  
    蒸馏水                                    1 000.0 mL 
    pH7.4±0.2 
A.6.2 制法 
将上述成分 溶于蒸馏水中， 调节 pH，分装每瓶 100 mL，121 ℃高压灭菌 10 min。另配 10％甘露
醇溶液，同时高压灭菌。将 5 mL糖溶液加入于 100 mL培养基内 ，以无菌操作分装小试管。  
A.6.3 试验方法  
从琼脂斜面上挑取培养物接种 ，于36 ℃± 1 ℃培养不少于 24 h，观察结果。甘露醇 阳性者培养物GB 4789.7—xxxx  
9 呈黄色，阴性者为绿色或蓝色。 
A.7 3％氯化钠赖氨酸脱羧酶试验培养基  
A.7.1 成分 
蛋白胨                                       5.0 g 
酵母浸膏                                     3.0 g 
    葡萄糖                                       1.0 g 
    溴甲酚紫                                    0.02 g 
L-赖氨酸                                     5.0 g 
氯化钠                                      30.0 g 
蒸馏水                                  1 000 .0 mL 
pH6.8±0.2 
A.7.2 制法 
    除赖氨酸以外的成分 溶于蒸馏水中 ，调节 pH。再按0.5％的比例加入赖氨酸，对照培养基不加赖
氨酸。分装小试管 ，每管 0.5 mL，121 ℃高压灭菌 15 min。 
A.7.3 试验方法  
    从琼脂斜面上挑取培养物接种 ，于36 ℃± 1 ℃培养不少于 24 h，观察结果。赖氨酸脱羧酶阳性
者由于产碱 中和葡萄糖产酸 ，故培养基仍应呈紫色。阴性者无碱性产物 ，但因葡萄糖产酸而使培养基
变为黄色。对照管应为黄色。  
A.8 3％氯化钠 MR-VP培养基  
A.8.1 成分 
多胨                                         7.0 g 
    葡萄糖                                       5.0 g  
磷酸氢二钾（ K2HPO 4）                       5.0 g 
氯化钠                                      30.0 g 
蒸馏水                                  1 000.0 mL 
pH 6.9±0.2 
A.8.2 制法 
    将上述成分 溶于蒸馏水中， 调节 pH，分装试管， 121 ℃高压灭菌 15 min。 
A.9 3％氯化钠溶液  
A.9.1 成分 
氯化钠                                      30.0 g 
蒸馏水                                  1 000.0 mL 
pH 7.2±0.2 
A.9.2 制法 
    将氯化钠溶于蒸馏水中， 121 ℃高压灭菌 15 min。 
A.10 我妻氏血琼脂  
A.10.1 成分 
酵母浸膏                                      3.0 g 
蛋白胨                                       10.0 g GB 4789.7—xxxx  
10 氯化钠                                       70.0 g 
磷酸氢二钾 （K2HPO 4）                        5.0 g 
甘露醇                                       10.0 g 
结晶紫                                      0.001  g 
琼脂                                         15.0 g 
蒸馏水                                   1 000.0 mL 
pH 8.0±0.2 
A.10.2 制法 
将上述成分 溶于蒸馏水中， 调节 pH，加热至 100 ℃， 保持 30 min， 冷至 45 ℃～50 ℃， 与 50 mL
预先洗涤的新鲜人或兔红细胞 （含抗凝血剂 ）混合，倾注平板。彻底干燥平板，尽快使用。  
A.11 氧化酶试剂  
A.11.1 成分 
N,N,N',N'-四甲基对苯二胺盐酸盐                   1.0 g  
蒸馏水                                     100.0 mL 
A.11.2 制法 
少量新鲜配制，于 2 ℃～5 ℃冰箱内避光保存，在 7 d 之内使用。  
A.11.3 试验方法  
用细玻璃棒或一次性接种针挑取新鲜（ 24 h）菌落，涂布在氧化酶试剂湿润的滤纸平板上。如果
滤纸在 10 s 之内呈现粉红或紫红色，即为氧化酶试验阳性。不变色为氧化酶试验阴性。  
A.12 革兰氏染色液  
A.12.1 结晶紫染色液  
A.12.1.1  成分  
结晶紫                                       1.0 g 
    95％乙醇                                   20.0 mL 
    1％草酸铵水溶液                            80.0 mL 
A.12.1.2 制法  
将结晶紫完全溶解于乙醇中 ，然后与草酸铵溶液混合。  
A.12.2 革兰氏碘液  
A.12.2.1 成分  
碘                                          1.0 g 
    碘化钾                                       2.0 g 
    蒸馏水                                    300.0 mL 
A.12.2.2  制法  
将碘与碘化钾先进行混合 ，加入蒸馏水少许充分振摇 ，待完全溶解后 ，再加蒸馏水至 300 mL。 
A.12.3 沙黄复染液  
A.12.3.1  成分  
    沙黄                                        0.25 g 
    95％乙醇                                   10.0 mL     
    蒸馏水                                     90.0 mL 
A.12.3.2 制法  
将沙黄溶解于乙醇中 ，然后用蒸馏水稀释。  GB 4789.7—xxxx  
11 A.12.4 染色法 
A.12.4.1 将涂片在 酒精灯火 焰上固定 ，滴加结晶紫染色液 ，染1 min，水洗。  
A.12.4.2  滴加革兰氏碘液 ，作用 1 min，水洗。  
A.12.4.3  滴加 95％乙醇脱色 ，约15 s～30 s，直至染色液被洗掉，不要过分脱色，水洗。  
A.12.4.4  滴加复染液，复染 1 min。水洗、待干、镜检。  
A.13 ONPG试剂 
A.13.1 缓冲液 
A.13.1.1  成分 
磷酸二氢钠 （NaH 2PO 4˙H2O）                     6.9 g  
用蒸馏水加至                                  50.0 mL 
A.13.1.2  制法 
将磷酸二氢钠 溶于蒸馏水中，调节 pH值至 7.0。缓冲液置 2 ℃～5 ℃冰箱保存。  
A.13.2 ONPG溶液 
A.13.2.1  成分 
邻硝基酚 -β-D-半乳糖苷 （ONPG）                0.08 g  
蒸馏水                                        15.0 mL 
缓冲液                                         5.0 mL 
A.13.2.2  制法 
    将ONPG在37 ℃的蒸馏水中溶解，加入缓冲液。 ONPG溶液置 2 ℃～ 5 ℃冰箱保存，试验前，
将所需用量的 ONPG溶液加热至 37 ℃。 
A.13.3 试验方法  
将待检培养物接种 3％氯化钠三糖铁琼脂，  36 ℃±1 ℃培养 18 h。挑取 1满环新鲜培养物接种
于0.25 mL 3％氯化钠溶液 ，在通风橱中， 滴加 1滴甲苯， 摇匀后置 37 ℃水浴 5 min。加0.25 mL ONPG
溶液，36 ℃± 1 ℃培养观察 24 h。阳性结果呈黄色。 阴性结果则 24 h不变色。  
A.14 Voges-Proskauer （V-P）试剂  
A.14.1 成分 
甲液  
α-萘酚                                     5.0ｇ 
无水乙醇                                100.0 mL 
乙液  
氢氧化钾                                  40.0ｇ 
用蒸馏水加至                            100.0 mL 
A.14.2 试验方法  
将3％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂生长物接种 3％氯化钠 MR-VP培养基，36 ℃±1 ℃培养 48 h。取 1 
mL培养物，转放到一个试管内，加 0.6 mL甲液，摇动。加 0.2 mL乙液，摇动。随意加一点肌酸结晶，
4 h后观察结果。阳性结果呈现伊红的粉红色。  
 
 
 
 
 GB 4789.7—xxxx  
12 附录B 
副溶血性弧菌最可能数（ MPN）检索表  
B.1 副溶血性弧菌 最可能数（ MPN）检索表  
 每g（mL）检样中副溶血性弧菌最可能数（ MPN）的检索见表 B.1。 
表B.1  副溶血性弧菌最可能数（ MPN）检索表  
阳性管数 
MPN 95%可信限 阳性管数 
MPN 95%可信限 
0.10 0.01 0.001 下限 上限 0.10 0.01 0.001 下限 上限 
0 0 0 <3.0 -- 9.5 2 2 0 21 4.5 42 
0 0 1 3.0 0.15 9.6 2 2 1 28 8.7 94 
0 1 0 3.0 0.15 11 2 2 2 35 8.7 94 
0 1 1 6.1 1.2 18 2 3 0 29 8.7 94 
0 2 0 6.2 1.2 18 2 3 1 36 8.7 94 
0 3 0 9.4 3.6 38 3 0 0 23 4.6 94 
1 0 0 3.6 0.17 18 3 0 1 38 8.7 110 
1 0 1 7.2 1.3 18 3 0 2 64 17 180 
1 0 2 11 3.6 38 3 1 0 43 9 180 
1 1 0 7.4 1.3 20 3 1 1 75 17 200 
1 1 1 11 3.6 38 3 1 2 120 37 420 
1 2 0 11 3.6 42 3 1 3 160 40 420 
1 2 1 15 4.5 42 3 2 0 93 18 420 
1 3 0 16 4.5 42 3 2 1 150 37 420 
2 0 0 9.2 1.4 38 3 2 2 210 40 430 
2 0 1 14 3.6 42 3 2 3 290 90 1,000 
2 0 2 20 4.5 42 3 3 0 240 42 1,000 
2 1 0 15 3.7 42 3 3 1 460 90 2,000 
2 1 1 20 4.5 42 3 3 2 1100 180 4,100 
2 1 2 27 8.7 94 3 3 3 >1100 420 -- 
注1：本表采用 3个稀释度 [0.1g(mL)、0.01g(mL) 和0.001g(mL)] ，每个稀释度接种 3管。  
    注2：表内所列检样量如改用 lg(mL）、0.1g(mL) 和0.01g(mL) 时，表内数字应相应降低 10倍；
如改用 0.01g(mL) 、0.001g(mL) 、0.0001g(mL) 时，则表内数字应相应增加 10倍，其余类推。