Viernes 28 de agosto de 2009 DIARIO OFICIAL (Primer a Sección)      
SECRETARIA DE ECONOMIA 
NORMA Oficial Mexicana NOM-173-SCFI-2009, Jugos de frutas preenvasados-Denominaciones, especificacione s 
fisicoquímicas, información comercial y métodos de prueba. 
Al margen un sello con el Escudo Nacional, que dice : Estados Unidos Mexicanos.- Secretaría de Economía . 
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-173-SCFI-2009, “JUGOS DE  FRUTAS PREENVASADOS-DENOMINACIONES, 
ESPECIFICACIONES FISICOQUIMICAS, INFORMACION COMERC IAL Y METODOS DE PRUEBA”. 
FRANCISCO RAMOS GOMEZ, Presidente del Comité Consul tivo Nacional de Normalización de Seguridad 
al Usuario, Información Comercial y Prácticas de Co mercio, con fundamento en los artículos 34 fraccion es XIII 
y XXXI de la Ley Orgánica de la Administración Públ ica Federal; 39 fracción V, 40 fracciones I y XII, 46, 47 
fracción IV de la Ley Federal sobre Metrología y No rmalización y 19 fracciones I, XIV y XV del Reglame nto 
Interior de esta Secretaría, y 
CONSIDERANDO 
Que es responsabilidad del Gobierno Federal procura r las medidas que sean necesarias para garantizar 
que los productos que se comercialicen en territori o nacional cumplan con especificaciones mínimas, co n el fin 
de garantizar una efectiva protección del consumido r; 
Que con fecha 15 de julio de 2008, el Comité Consul tivo Nacional de Normalización de Seguridad al 
Usuario, Información Comercial y Prácticas de Comer cio, aprobó la publicación del Proyecto de Norma Of icial 
Mexicana PROY-NOM-173-SCFI-2008 “Jugos de frutas pr eenvasados-Denominaciones, especificaciones 
fisicoquímicas, información comercial y métodos de prueba”, la cual se realizó en el Diario Oficial de  la 
Federación el 3 de diciembre de 2008, con objeto de  que los interesados presentaran sus comentarios; 
Qué la manifestación de impacto regulatorio a que h ace referencia el artículo 45 de la Ley Federal sob re 
Metrología y Normalización, fue sometida a la consi deración de la Comisión Federal de Mejora Regulator ia, 
emitiéndose el dictamen final aprobatorio por parte  de dicha Comisión el 12 de noviembre de 2008. 
Que durante el plazo de 60 días naturales contados a partir de la fecha de publicación de dicho proyec to 
de norma oficial mexicana, los interesados presenta ron comentarios sobre el contenido del citado proye cto, 
mismos que fueron analizados por el grupo de trabaj o, realizándose las modificaciones conducentes. 
Que con fecha 9 de julio de 2009, el Comité Consult ivo Nacional de Normalización de Seguridad al 
Usuario, Información Comercial y Prácticas de Comer cio, aprobó por unanimidad la norma referida; 
Que la Ley Federal sobre Metrología y Normalización  establece que las normas oficiales mexicanas se 
constituyen como el instrumento idóneo para la prot ección de los intereses del consumidor, expide la 
siguiente: Norma oficial mexicana NOM-173-SCFI-2009 , “Jugos de frutas preenvasados-Denominaciones, 
especificaciones fisicoquímicas, información comerc ial y métodos de prueba”. 
México, D.F., a 9 de julio de 2009.- El Director Ge neral de Normas y Presidente del Comité Consultivo 
Nacional de Normalización de Seguridad al Usuario, Información Comercial y Prácticas de Comercio, 
Francisco Ramos Gómez .- Rúbrica. 
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-173-SCFI-2009 JUGOS DE F RUTAS PREENVASADOS- 
DENOMINACIONES, ESPECIFICACIONES FISICOQUIMICAS, IN FORMACION COMERCIAL  Y 
METODOS DE PRUEBA 
PREFACIO 
En la elaboración de la presente Norma Oficial Mexi cana participaron las siguientes empresas e 
instituciones: 
ALMACENADORA ACCEL, S. A. DE C. V. 
ASOCIACION NACIONAL DE PROCESADORES DE CITRICOS, A. C. (ANAPROCI) 
ASOCIACION NACIONAL DE VITIVINICULTORES, A. C. 
CAMARA NACIONAL DE LA INDUSTRIA DE CONSERVAS ALIMEN TICIAS 
CENTRO DE CONTROL TOTAL DE CALIDADES, S.A. DE C.V. 
COCA-COLA DE MEXICO, S.A. DE C.V. 
CONFEDERACION DE CAMARAS INDUSTRIALES DE LOS ESTADO S UNIDOS MEXICANOS 
CONSEJO CITRICOLA MEXICANO 
CONSEJO MEXICANO DE LA INDUSTRIA DE PRODUCTOS DE CO NSUMO, A. C .       (Primera Sección) DIARIO OFICIAL Viernes 28 d e agosto de 2009 
GERBER, S.A. DE C.V. 
GRUPO JUMEX 
HECA, S. A. 
HERDEZ, S. A. DE C. V. 
JUGOS DEL VALLE, S. A. DE C. V. 
LEFIX Y ASOCIADOS 
PROCONSUMIDORES, A. C . 
PROCURADURIA FEDERAL DEL CONSUMIDOR 
Laboratorio Nacional de Pruebas 
Dirección General de Verificación y Vigilancia 
SABRITAS, S. DE R. L. DE C. V. 
SECRETARIA DE SALUD 
Comisión Federal de Protección contra Riesgos Sanit arios 
SECRETARIA DE AGRICULTURA, GANADERIA, DESARROLLO RU RAL, PESCA Y ALIMENTACION 
Dirección General de Fomento a la Agricultura 
SECRETARIA DE HACIENDA Y CREDITO PUBLICO 
Servicio de Administración Tributaria 
SIGMA ALIMENTOS, S. A. DE C.V. 
SOCIEDAD COOPERATIVA TRABAJADORES PASCUAL, S. A. 
SOCIEDAD MEXICANA DE NORMALIZACION Y CERTIFICACION,  S. C. 
UNILEVER DE MEXICO, S. A. DE C.V. 
UNIVERSIDAD DE LAS AMERICAS DE PUEBLA 
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO 
Instituto de Química 
Instituto de Geología 
VALLE REDONDO, S. A. DE C. V. 
INDICE 
Capítulo 
Objetivo y campo de aplicación 
Referencias 
Definiciones 
Símbolos y abreviaturas 
Clasificación y denominación comercial 
Especificaciones del producto 
Muestreo 
Métodos de prueba 
Información comercial 
Vigilancia 
Bibliografía 
Concordancia con normas internacionales 
Transitorio Viernes 28 de agosto de 2009 DIARIO OFICIAL (Primer a Sección)      
1. Objetivo y campo de aplicación 
Esta Norma Oficial Mexicana establece las caracterí sticas y especificaciones mínimas que los productos , 
procesados y preenvasados, objeto de la misma deben  cumplir para denominarse jugos de fruta, así como la 
información comercial que deben cumplir. 
Esta norma es aplicable para los productos que se d enominen jugo de fruta que se comercialicen en 
territorio nacional. 
2. Referencias 
Esta Norma Mexicana se complementa con las siguient es normas oficiales mexicanas y normas 
mexicanas vigentes: 
NOM-002-SCFI-1993 Productos preenvasados. Contenido  Neto, Tolerancias y Métodos de 
verificación, publicada en el Diario Oficial de la Federación el 13 de 
octubre de 1993. 
NOM-030-SCFI- 2006  Información comercial-Declaraci ón de cantidad en la  etiqueta- 
Especificaciones, publicada en el Diario Oficial de  la Federación el 6 de 
noviembre de 2006. 
NOM-051-SCFI-1994 Especificaciones. Generales de et iquetado para alimentos y bebidas no 
alcohólicas preenvasados, publicada en el Diario Of icial de la Federación 
el 24 de enero de 1996. 
 NOM-086-SSAI-1994 Bienes y Servicios. Alimentos y bebidas no alcohólicas con modificaciones 
en su composición. Especificaciones nutrimentales, publicada en el Diario 
Oficial de la Federación el 26 de junio de 1996. 
NOM-130-SSA1- 1995 Bienes y servicios. Alimentos en vasados en recipientes de cierre 
hermético y sometidos a tratamiento térmico. Dispos iciones y 
especificaciones sanitarias, publicada en el Diario  Oficial de la Federación 
el 21 de noviembre de 1997. 
NMX-F-103-1982  Alimentos-Frutas y Derivados- Deter minación de grados brix. Declaratoria 
de vigencia publicada en el Diario Oficial de la Fe deración el 14 de 
octubre de 1982. 
NMX-F-309-NORMEX-2001  Determinación de benzoatos, salicilatos y sorbatos en alimentos. 
Declaratoria de vigencia publicada en el Diario Ofi cial de la Federación el 
26 de julio de 2001. 
3. Definiciones 
Para los efectos de esta Norma se establecen las si guientes definiciones: 
3.1 Adulteración 
Producto cuya naturaleza no corresponda a aquella c on que se etiquete, anuncie, expenda suministre o 
por no cumplir con las especificaciones respectivas , aun cuando haya sufrido un tratamiento que disimu le 
dichas circunstancias o bien, que encubra defectos en su proceso o en la calidad sanitaria de las mate rias 
primas utilizadas en él. 
3.2 Frutas cítricas 
Son frutas de la familia Rutaceae  que se dañan con bajas temperaturas, que se caract erizan porque tienen 
aceites y pigmentos en su cáscara, 
3.3 Fruta sana 
Fruta libre de enfermedades, heridas, pudriciones, daños producidos por insectos u otras plagas, libre  de 
insectos vivos o muertos o sus larvas. 
3.4 Fruta Madura 
Fruta que está en su punto de sazón o madurez.       (Primera Sección) DIARIO OFICIAL Viernes 28 d e agosto de 2009 
3.5 Grados Brix 
Es el por ciento de sólidos disueltos en un product o derivado de las frutas o de un líquido azucarado.  
3.6 Jugo de fruta  
Es el producto líquido sin fermentar, pero fermenta ble obtenido al exprimir frutas en buen estado, 
debidamente maduras y frescas o frutas que se han m antenido en buen estado por procedimientos 
adecuados, inclusive por tratamientos de superficie  aplicados después de la cosecha, clarificado o no,  y 
sometido al tratamiento adecuado que asegura su con servación en el envase. No debe contener corteza  y  
semillas, ni materia extraña objetable. 
El jugo debe prepararse mediante procedimientos que  mantengan las características físicas, químicas, 
organolépticas y nutricionales esenciales de la fru ta de que procede. Podrán añadirse pulpa y células (en el 
caso de las frutas cítricas, la pulpa y las células  son las envolturas del jugo obtenido del endocarpi o) obtenidas 
por procedimientos físicos adecuados del mismo tipo  de fruta. 
Este producto puede elaborarse a partir de jugo de fruta congelado, y/o de jugo de fruta concentrado 
reconstituido, siempre que cumpla con las especific aciones citadas en la presente norma. 
3.7 Jugo de fruta concentrado 
Es el jugo de fruta al cual se ha eliminado físicam ente el agua en una cantidad suficiente para elevar  el 
nivel de grados Brix al menos en un 50% más que el valor Brix establecido para el producto líquido obt enido al 
exprimir frutas sanas y maduras, que ha sido someti do al tratamiento físico o a las condiciones de 
almacenamiento adecuadas que aseguren su conservaci ón en el envase. No debe contener corteza  y 
semillas, ni materia extraña objetable. 
3.8 Jugo de frutas múltiple (mixto)  
Es la mezcla de dos o más productos líquidos obteni dos al exprimir frutas sanas y maduras de la varied ad 
correspondiente, clarificado o no, no fermentado y sometido al tratamiento adecuado que asegura su 
conservación en el envase. No debe contener corteza  y semillas, ni materia extraña objetable. 
Este producto puede elaborarse a partir de la mezcl a de dos o más jugos y/o purés congelados, y/o de 
jugos y/o purés concentrados reconstituidos de dife rentes tipos de frutas. 
El jugo debe prepararse mediante procedimientos que  mantengan las características físicas, químicas, 
organolépticas y nutricionales esenciales de la fru ta de que procede. Podrán añadirse pulpa y células (en el 
caso de las frutas cítricas, la pulpa y las células  son las envolturas del jugo obtenido del endocarpi o) obtenidas 
por procedimientos físicos adecuados del mismo tipo  de fruta. 
3.9 Jugo congelado  
Es el jugo de fruta que ha sido sometido mediante u n equipo apropiado a un proceso térmico, hasta que el 
producto alcance una temperatura de -15 ° C en el ce ntro térmico y se haya mantenido a temperatura de 
congelación durante el almacenamiento. 
3.10 Productos Preenvasados  
Son los alimentos y bebida no alcohólica, que cuand o son colocados en un envase de cualquier 
naturaleza, no se encuentra presente el consumidor,  y la cantidad de producto contenido en él no puede  ser 
alterada, a menos que el envase sea abierto o modif icado perceptiblemente. 
3.11 Pulpa de fruta  
Es la masa carnosa y a menudo jugosa de la fruta (s ólidos insolubles). En el caso de las frutas cítric as la 
pulpa está formada por un considerable número de ga jos llenos de jugo. 
3.12 Puré de fruta  
Es el producto sin fermentar, pero fermentable, obt enido mediante procedimientos idóneos, por ejemplo 
tamizando, triturando o desmenuzando la parte comes tible de la fruta entera o pelada sin eliminar el j ugo. La 
fruta deberá estar en buen estado, debidamente madu ra y fresca, o conservada por procedimientos físico s o 
por tratamientos aplicados de conformidad con las d isposiciones pertinentes de la autoridad competente . Viernes 28 de agosto de 2009 DIARIO OFICIAL (Primer a Sección)      
3.13 Puré concentrado de fruta  
Es el producto obtenido mediante la eliminación fís ica de agua del puré de fruta en una cantidad sufic iente 
para elevar al menos el nivel de grados Brix en 50%  más que el valor Brix establecido para el jugo 
reconstituido de la misma fruta. 
3.14 Sólidos disueltos de fruta  
Son los sólidos solubles provenientes de fruta y qu e son cuantificados como grados Brix. 
4. Símbolos y abreviaturas 
° Bx grado Brix 
% por ciento 
g gramo 
mg miligramo 
µg  microgramo 
kg kilogramo 
L o l litro 
mL o ml mililitro 
µL o µl microlitro 
mm milímetro 
cm centímetro 
m3 metro cúbico 
B.P.F. Buenas prácticas de fabricación 
pH Potencial de hidrógeno 
m/v Sólidos/Volumen Total 
m/m masa/masa 
13 C Número total de átomos de carbono 13 
12 C Número total de átomos de carbono 12 
δ13 C Delta de carbono 13 
VPDB Vienna Pee dee Beelemnite 
‰  Partes por mil 
g  aceleración de la gravedad 
mol mol 
rpm revoluciones por minuto 
h hora 
min minuto 
s segundo 
° C  grados Celsius 
K Kelvin 
Pa  pascal 
kPa kilopascal 
mbar milibar       (Primera Sección) DIARIO OFICIAL Viernes 28 d e agosto de 2009 
uma unidad de masa atómica 
σ desviación estándar 
5. Clasificación y denominación comercial 
5.1 Jugos 
Los jugos objeto de esta norma deben denominarse co n el mismo tamaño de letra de acuerdo a lo 
siguiente. 
5.1.1 Los jugos de fruta definidos en 3.6 se denominan de  la siguiente forma: 
JUGO DE _________ 
El nombre de la fruta correspondiente se colocará e n el espacio en blanco 
5.1.2 Los jugos de fruta concentrados definidos en 3.7 se denominan de la siguiente forma: 
JUGO DE _________CONCENTRADO 
El nombre de la fruta correspondiente se colocará e n el espacio en blanco. 
5.1.3.  “Los jugos de frutas definidos en el inciso 3.8, l a denominación debe ser: 
JUGO DE ___________ 
Colocando en el espacio en blanco los nombres de lo s jugos de fruta que componen la mezcla en orden 
descendente del peso (m/m) o de las palabras “mezcl a de jugos de frutas”, “jugo de frutas mixto/mezcla do” o 
un texto similar. 
6. Especificaciones del producto 
6.1 Jugos 
6.1.1  Características Sensoriales 
Color: Característico semejante a la variedad emple ada. 
Olor: Característico del jugo que se trate. 
Sabor: Característico del jugo de que se trate, sin  sabores extraños. 
No debe contener corteza y semillas, ni materia ext raña objetable. 
6.1.2 Fisicoquímicas 
Los jugos objeto de esta norma deben cumplir con la s especificaciones físicas y químicas que se muestr an 
en la siguiente Tabla 1. 
Tabla 1 
Especificaciones para Jugos y Jugos de Concentrados  una vez Reconstituidos 
Parámetro Naranja Mandarina Manzana Toronja Piña Uva  De frutas 
Múltiples Métodos de 
Prueba 
 * Sólidos disueltos 
mínimos de la fruta 
correspondiente 
(° Brix) 11,2 11,8 11,5 10 12,8 16 10 Ref. punto 8.1 y 
NMX-F-103-
1982 
Relación Isotópica 
de Carbono ( 13 C/ 
12 C), expresada en 
δ13 CVPDB  (‰). <-24 a -28  -24 a -28 -24 a -28 -24 a -28 N.A. -24 a -28  Ref. punto 8.1 
* Esta especificación debe cumplirse aunque el prod ucto sea modificado en su composición, conforme a l o 
dispuesto en la NOM-086-SSA1-1994. 
N.A.: No aplicable Viernes 28 de agosto de 2009 DIARIO OFICIAL (Primer a Sección)      
Se prohíbe la adición de azúcares y acidulantes al mismo jugo de fruta, toda vez que se considera 
adulteración de la composición del producto, de con formidad con lo establecido en el Codex Alimentariu s. 
Nota -  Cuando un jugo proceda de una fruta no mencionada en esta tabla, el nivel mínimo de grados Brix 
de la fruta será el normado internacionalmente por el Codex Alimentarius. 
7. Muestreo 
Para efectos oficiales, el muestreo estará sujeto a  las disposiciones legales y reglamentarias aplicab les. 
8. Método de Prueba 
Determinación de la adición de azúcar de caña o jar abe de maíz empleando la relación Isotópica de 
Carbono ( 13 C/ 12 C) en azúcares provenientes de jugos de fruta de pl antas C 3 empleando la Espectrometría  de 
Masas de Isótopos Estables. 
8.1 Objetivo y campo de aplicación. 
Esta metodología tiene como objeto cuantificar la a dición de edulcorantes industriales exógenos como l os 
detallados en la Norma de CODEX para los Azúcares C ODEX STAN 212-1999 enmienda 1-2) a las diferentes 
clasificaciones de jugos de fruta industrializados provenientes de plantas C 3, elaborados a partir de frutas 
sanas y maduras o preparados a partir de concentrad os de fruta obtenidos por un proceso industrial de 
eliminación del agua contenida en los jugos. Este m étodo no es aplicable para el caso de jugo de piña.  
Los azúcares exógenos que se pueden considerar está n: El azúcar de caña, jarabes de maíz con alto 
contenido de fructosa o glucosa 
8.2  Fundamento 
El fundamento del método está en la determinación d e las relaciones isotópicas de Carbono ( 13 C/ 12 C) por 
Espectrometría de Masas de Isótopos Estables, la cu al se expresa por los cocientes de las abundancias de 
los átomos estables de carbono 12 y 13 como ( 13 C/ 12 C) mediante el empleo de unidades δ13 CVPDB  (‰), los 
cuales están referidos a un patrón internacional qu e es físicamente un carbonato de calcio (CaCO 3) de origen 
marino proveniente de la formación cretácica Pee de e de Carolina del Sur, conocido como PDB (Pee Dee 
Beelemnite Limestone). La unidad de reporte es δ expresada en partes por mil (‰). De acuerdo a la s iguiente 
ecuación (Craig, 1957): 
 
Los responsables de establecer, mantener y desarrol lar la metrología de los isótopos estables 
internacionalmente es la Unión Internacional de Quí mica Pura y Aplicada (IUPAC, International Union of  Pure 
and Applied Chemistry), la Comisión de Pesos Atómic os y Abundancias Isotópicas (CIAAW Commission on 
Isotopic Abundances and Atomic Weights), la IUPAC h a designado como los responsables operativos de la 
metrología de los isótopos estables al Subcomité de  Medidas en Abundancia Isotópica (Subcommittee on 
Isotope Abundance Measurements, SIAM) el cual está formado por un grupo de expertos quienes publican 
reportes y emiten las recomendaciones metrológicas sobre las Abundancias Isotópicas y Pesos Atómicos. 
Recientemente en la reunión realizada en su 43a. As amblea General de IUPAC que se llevó a cabo en agos to 
de 2005 en Beijing China. Emitió las recomendacione s siguientes: a) Que los valores de δ13 C de todos los 
materiales que contienen carbono en su composición deben ser medidos y los resultados expresados relat ivos 
a VPDB (Vienna Pee dee Beelemnite), b) Normalizar l a escala VPDB se emplean los materiales de referenc ia 
NBS-19 y L-SVEC usando los valores asignados por co nsenso de δ13 CVPDB  = –46,6‰ para el carbonato de 
litio L-SVEC y δ13 CVPDB  = +1,95‰ para el carbonato de calcio NBS-19. c) Ad emás que las personas que 
analizan estos materiales que contienen carbono lo deben expresar claramente en sus reportes. (Coplen,  T et 
al 2006). 
8.3 Principio del Método. 
Todos los compuestos orgánicos que forman a los ser es vivos contienen el elemento químico llamado 
carbono. En la naturaleza existen dos átomos de car bono estables cuya única diferencia entre ellos es su 
masa atómica, todas las demás propiedades químicas en su mayoría son idénticas. A estos átomos se les 
conoce con el nombre de isótopos y se representan c omo carbono-13 (¹³C) y carbono-12 (¹²C). 
La proporción de isótopos estables ( 13 C/ 12 C) contenidos en los alimentos, son típicos y fijad os 
principalmente por su origen o su procedencia y en mucha menor escala de los posteriores procesos       (Primera Sección) DIARIO OFICIAL Viernes 28 d e agosto de 2009 
industriales que sufren. En general la proporción i sotópica de origen se mantiene, por lo cual nos per mite 
identificar su fuente. 
La base del método consiste en relacionar la cantid ad de isótopos estables expresada en unidades delta  
de un producto determinado con el correspondiente c iclo fotosintético de la planta origen de la materi a prima. 
Lo anterior es debido a que los mecanismos fotosint éticos de la fijación del CO 2 atmosférico por las plantas se 
realizan a través de tres procesos. 
Los diferentes tipos de origen de las plantas se es tablecen en función de la fotosíntesis, los cuales se 
clasifican en tres grandes grupos dependiendo del p roceso fotosintético que utilizan para fijar el CO 2 
atmosférico, estos son: las plantas tipo C 3 utilizan el ciclo de Calvin; las plantas tipo C 4 siguen el ciclo de 
Hatch Slack y las plantas denominadas CAM (Crasulac ean Acid Metabolism). 
En la naturaleza, el ciclo de Calvin es empleado po r plantas tipo C 3; a este ciclo pertenecen, árboles, 
arbustos y algunas frutas de este ciclo fotosintéti co como son: manzana, pera, durazno, plátano, uva, mango, 
guayaba, ciruela, chabacano, cereza, arándano, nara nja, toronja, mandarina, limón, jitomate, etc. De e stas 
frutas es de donde se extraen la gran mayoría jugos  y néctares industrializados. 
En la naturaleza, el ciclo de Hatch Slack es emplea do por plantas C 4, a este ciclo pertenecen plantas 
como: caña de azúcar y maíz. Es a partir de este ti po de plantas de donde se derivan edulcorantes 
industriales como son entre otros el azúcar de caña  y el jarabe de maíz con alto contenido en fructuos a o 
glucosa, este tipo de edulcorantes son los más empl eados como azúcares exógenos que se adicionan a los  
jugos y néctares. 
El tercer grupo de plantas es denominado CAM (Crasu lacean Acid Metabolism). A este grupo pertenecen 
los agaves, la vainilla, y plantas como la piña. 
Entre los grupos de plantas C 3 y C 4 existe una diferencia considerable y medible en la proporción de 
isótopos estables ( 13 C/ 12 C) contenidos en las plantas. Por lo que midiendo l a δ13 C en jugos o jugos 
concentrados es posible reconocer el proceso fotosi ntético de la planta que les dio origen y en su cas o 
cuantificar su mezcla. 
El grado de mezcla entre azúcares provenientes de l as plantas C 3 con las plantas C 4 (azúcares exógenos 
caña de azúcar o jarabe de maíz), se puede cuantifi car mediante una proporción lineal construida toman do 
como extremos, por un lado la composición isotópica  de δ13 C de los edulcorantes exógenos y por el otro la 
composición isotópica de δ13 C de los sólidos solubles contenidos en el jugo de frutas. 
8.4 Descripción del método de prueba. 
La δ13 CVPDB  se determina en un Espectrómetro de Masas de Isóto pos Estables utilizando el CO 2 obtenido 
de la combustión del material orgánico mayoritario contenido en una muestra de jugo como son los sólid os 
disueltos y la pulpa. Los resultados obtenidos de a mbos se reportan como δ13 CVPDB  expresado en ‰ 
evaluados de acuerdo a la ecuación 1. 
Para realizar el análisis, se toma una alícuota de jugo al cual por métodos físicos (centrifugación) s e 
separan la pulpa de los sólidos disueltos, una vez separado el material orgánico, se oxida mediante un a 
combustión cuantitativa para formar principalmente CO 2 y H 2O. El CO 2 obtenido de la reacción de oxidación es 
purificado mediante un proceso de separación criogé nica y empleando sistemas de vacío inciso 8.7.2.1.1 ) o 
mediante un proceso de separación utilizando una co lumna cromatográfica como es el caso del analizador  
elemental al separar el N 2 del CO 2. 
En la literatura internacional se reportan básicame nte tres métodos de combustión cuantitativa. El pri mero 
que utiliza una combustión dinámica. El segundo mét odo, es el más preciso de los tres, el cual realiza  la 
combustión a alta temperatura en tubo de cuarzo sel lado; los productos de combustión se llevan a una l ínea 
de vacío donde el CO 2 se separa y se purifica cuantitativamente; la líne a de vacío fue diseñada ex profeso 
para esta metodología; la determinación de la δ13 CVPDB  se realiza empleando el CO 2, purificado 
criogénicamente utilizando el sistema de introducci ón dual de gases del espectrómetro. El tercer métod o, es 
un método rápido de combustión y purificación cuant itativa que emplea un Analizador Elemental y median te la 
técnica de flujo continuo con helio y el empleo de una-interfase-que conduce el CO 2 de la muestra al 
espectrómetro de masas de isótopos estables para la  determinación de la δ13 CVPDB  Viernes 28 de agosto de 2009 DIARIO OFICIAL (Primer a Sección)      
8.5 Instrumentación. 
El equipo indispensable para la implementación de e ste método es un Espectrómetro de masas para la 
determinación de relaciones de isótopos estables co n la capacidad analítica para determinar la δ13 CVPDB  en el 
intervalo de abundancias naturales en CO 2 con una precisión interna del orden de 0,02 ‰ (es d efinida aquí 
como la diferencia entre dos medidas de relaciones isotópicas consecutivas de una muestra de CO 2) y es y la 
precisión externa de 0,05 ‰ (expresada en valores de lta eq 1). La linearidad debe ser < 0,05 ‰ por 
nanoamper de corriente de iones. Durante la operaci ón del espectrómetro, las mesetas de los picos para  
colector universal CNOS debe ser m/ ∆m = 95 (10% valle). 
El espectrómetro de masas deberá ser capaz de reali zar las determinaciones isotópicas mediante lectura s 
simultáneas de las masas moleculares 44, 45 y 46 um a. El espectrómetro debe tener un sistema de 
introducción de muestras dual para determinaciones simultáneas entre el gas muestra y el gas de un pat rón 
de trabajo. El método de introducción dual es intrí nsicamente más preciso. Sin embargo, recientemente se ha 
desarrollado una instrumentación específica para ac oplar un Analizador Elemental (AE) y para ello se h a 
desarrollado un método analítico, que emplea el flu jo continuo de helio para mover e introducir el CO 2 
producto de la combustión al Espectrómetro de Masas  de Relaciones Isotópicas. Los resultados obtenidos  
mediante esta última técnica son igualmente confiab les, pero para ello, es necesario analizar en serie  con las 
muestras un conjunto de alícuotas de materiales de referencia. 
En caso de emplear el AE en línea con el espectróme tro de masas de isótopos estables el AE debe ser 
acoplado directamente al espectrómetro mediante una  interfase especial diseñada para esta metodología.  El 
AE deberá ser capaz de manejar los gases provenient es de la combustión de muestra o de los materiales de 
referencia y manejar simultáneamente el gas utiliza do como patrón de trabajo. Además el AE debe tener la 
capacidad de convertir cuantitativamente todo el ca rbono de la muestra en dióxido de carbono y debe se r 
capaz de eliminar los demás productos de la combust ión de la muestra principalmente los óxidos de 
nitrógeno, óxidos de azufre y agua. 
8.6 Otros Equipos para la realización de la metodología  
Centrífuga para realizar la separación física de lo s sólidos disueltos de la fruta y la pulpa se debe emplear 
una centrífuga con rotor de 45°  para seis tubos de centrífuga con una capacidad volumétrica en cada br azo de 
al menos 50 ml. con una fuerza de al menos 1400 g. 
Parrilla eléctrica con agitador magnético: con cont rol de temperatura y control de agitación. 
Horno para secado con una temperatura entre 50 ° C a  60 ° C 
Refractómetro de mano para determinación de ° Brix. 
La preparación de las muestras que se describe en e l inciso 8.7 es aplicable a todos los tipos de jugo s 
tanto en forma de jugo fresco natural como en sus p resentaciones comerciales. En el caso de jugos 
concentrados, éstos se deben diluir al 50% con agua  destilada. El procedimiento que se debe seguir es el 
siguiente. 
8.7  Procedimientos 
8.7.1  Preparación de la muestra 
8.7.1.1  Reactivos y Materiales 
Para la preparación de la muestra se deben emplear exclusivamente los reactivos de grado analítico 
siguientes: 
/bdash2 Hidróxido de Calcio {Ca(OH) 2} grado analítico. Se prepara una solución al 25% c on agua grado III. 
/bdash2 Acido Sulfúrico (H 2SO 4) 95-97% grado analítico. Concentración 1M 
/bdash2 Agua al menos grado III de acuerdo con EN ISO 3696 :1995 
/bdash2 Papel pH 
/bdash2 Tubos para centrífuga de 40 ml o 50 ml. 
/bdash2 Pipetas graduadas de 10 ml       (Primera Sección) DIARIO OFICIAL Viernes 28 d e agosto de 2009 
/bdash2 Propipeta. 
/bdash2 Vasos de precipitados de 100 ml 
/bdash2 Vaso de precipitados de 1 L 
/bdash2 Mortero con pistilo de ágata 
8.7.1.2 Procedimiento para la separación y preparación de l os sólidos solubles (azúcares) y sólidos no 
solubles (pulpa) para análisis isotópico. 
Para separar físicamente los constituyentes de un j ugo, en sólidos disueltos y pulpa, se toman 50 ml d e 
jugo de cualquier especificación y se coloca en tub o para centrífuga y se somete a centrifugación a 14 00 g por 
10 minutos. 
a)  Preparación de los sólidos solubles (azúcares) par a análisis isotópico. 
/bdash2 Los sólidos solubles después de la centrifugación anterior están contenidos en el sobrenadante, por 
lo que se decanta este sobrenadante y se colocan 10  ml de sobrenadante en un vaso de precipitados 
de 100 ml. 
/bdash2 Adicionar una solución de hidróxido de calcio al 2 5% hasta ajustar el pH entre 8,5 y 9. Calentar la 
mezcla en un baño a 90 ° C por 10 min., con agitació n. 
/bdash2 Los ácidos orgánicos, aminoácidos y otros componen tes se precipitan en este paso y para 
separarlos, se centrifuga por 10 min la solución a 1400 g. 
/bdash2 Decantar el sobrenadante y colocarlo en un vaso de  precipitados de 100 ml, acidificar con H 2SO 4 1M 
hasta pH 5 esto es aproximadamente cuando la soluci ón cambie de color y verificar el pH colocando 
una gota de la solución en papel pH, cuidar de no i ntroducir el papel en la muestra. 
/bdash2 Guardar en un refrigerador a 4 ° C durante 12 horas  y decantar el sobrenadante líquido. 
/bdash2 Tomar una alícuota del sobrenadante para el anális is isotópico de δ13 C. La concentración 
aproximada en ° Brix de los sólidos disueltos que co ntiene principalmente los azúcares del jugo puede 
medirse con un refractómetro de mano. 
b)  Preparación para sólidos no solubles (pulpa) 
Los sólidos no solubles (pulpa) obtenidos de la pri mera centrifugación están precipitados en el fondo del 
tubo de centrifugación, se separan y se preparan de  la siguiente forma: 
/bdash2 La pulpa se lava con agua destilada caliente a 90 ° C en el tubo de centrífuga, y se vuelve a 
centrífugar por otros 10 min. a 1400 g. Se decanta el sobrenadante y se desecha; este paso se debe 
repetir cinco veces. 
/bdash2 Se realiza un segundo lavado de la pulpa, con 40 m l de acetona, se centrífuga por 10 min a 1400  g 
se decanta el sobrenadante y se desecha (este paso se debe repetir al menos dos veces). Una vez 
lavada la pulpa con agua y acetona, ésta se liofili za o se puede secar en un horno entre  60 ° C – 80 
° C durante toda la noche. 
/bdash2 La pulpa seca se homogeneiza, pulverizándola en un  mortero de ágata. 
/bdash2 Pesar una alícuota de la pulpa para determinar la δ13 C. 
8.7.2 Técnicas para la combustión de las muestras sólidos  disueltos o de pulpa provenientes de las 
muestras de jugo para su posterior determinación la  δ13 CVPDB  en el Espectrómetro de Masas de Isótopos 
Estables. 
8.7.2.1  Objetivo de la combustión. 
El objetivo de las diferentes técnicas de combustió n es transformar cuantitativamente el carbono 
proveniente de la materia orgánica (sólidos disuelt os o pulpa) preparados de acuerdo 8.7.1.2 a) y 8.7. 1.2 b) de 
las muestras de los jugos a bióxido de carbono CO 2. Mediante una combustión y posteriormente separar los 
otros productos de la combustión y purificar el bió xido de carbono CO 2, para medir su δ13 CVPDB  en el 
Espectrómetro de Masas de Isótopos Estables. Viernes 28 de agosto de 2009 DIARIO OFICIAL (Primer a Sección)      
Para realizar la combustión cuantitativa de la mate ria orgánica se pueden emplear dos métodos, el prim er 
método de combustión, utiliza un tubo de cuarzo sel lado, realizando la combustión a una temperatura de   950 
° C, de los gases formados se separa y purifica el C O 2 realizando la introducción del CO 2 puro al sistema de 
dual de introducción de gases del Espectrómetro de Masas de Isótopos Estables. El segundo método de 
combustión y purificación utiliza un Analizador Ele mental acoplado en línea al espectrómetro de masas.  
A continuación se hace la descripción detallada de cada uno de los métodos 
8.7.2.1.1 Método de combustión en tubo de cuarzo 
Reactivos y Materiales para la combustión en tubo d e cuarzo. 
• Materiales de referencia ver Tabla 2. 
• Tanque de CO 2 de 99,995 % mínimo de pureza en un cilindro de 7 L , contenido en un tanque 
metálico a una presión máxima de 5860 kPa a 294 K ( 21 oC) con un regulador de dos pasos con una 
presión de entrega de 5,0 ml/min, para trabajar con  cilindros con una presión máxima de 100 kPa. 
Para ser utilizado como patrón de trabajo en el esp ectrómetro de masas de relaciones isotópicas. 
• Oxido cúprico en alambre grado reactivo analítico.  El óxido cúprico es pasado por una malla del No. 
40 para retirar el polvo. Posteriormente es quemado  en una mufla a 850 oC durante tres horas para 
oxidar toda la materia orgánica que contenga. 
• Plata 99,9994 % de pureza. Es laminada con un gros or entre 0,1 y 0,4 mm y cortada en secciones de 
1 mm de ancho por 7 mm de largo. Las cuales son lim piadas con una solución de ácido nítrico  al 1 
%, posteriormente son lavadas con agua destilada y son calentadas en una mufla a 400 oC durante 
una hora. La plata es usada como catalizador en el tubo de combustión. 
• Cobre metálico activado (granalla) grado reactivo analítico. 
• Un soplete (antorcha) de gas - oxígeno capaz de al canzar la temperatura de fusión del cuarzo, para 
sellar los tubos de cuarzo. 
• Tanque de oxígeno industrial, con regulador y mang ueras para operación del soplete. 
• Gas butano para uso doméstico entubado para la ope ración del soplete. 
• Hielo seco. 
• Etanol absoluto industrial al 95% alcohol volumen.  
• Nitrógeno líquido. 
• Grasa para alto vacío tipo Apiezon N o M. 
• Pinzas de punta y espátula de acero inoxidable par a el manejo de muestras de 10 mg. 
• Secadora de aire caliente tipo industrial con capa cidad de alcanzar 500 ° C con ventilador tipo jaula 
de ardilla de 1500 rpm. 
• Gatos mecánicos de laboratorio de diferentes tamañ os. 
• Generador tesla para detección de fugas en sistema s al vacío de vidrio. 
• Tubo de cuarzo de 9 mm de diámetro externo, 7 mm d e diámetro interno y 20 cm de largo, sellado 
por un lado con soplete. El cual se utiliza como tu bo de combustión. 
• Tubo de cuarzo de 6 mm de diámetro externo, 4 mm d e diámetro interno y aproximadamente 2 cm 
de largo, sellado por un lado con soplete. El cual se utiliza para mantener separado el óxido cúprico 
del cobre metálico y como contenedor para muestras orgánicas sólidas. 
• Tubo de cuarzo de 4 mm de diámetro externo, 2 mm d e diámetro interno y aproximadamente 2 cm 
de largo terminado en punta para ser utilizado como  tubo capilar como contenedor de muestras 
orgánicas líquidas. 
• Tubo de cuarzo de 4 mm de diámetro externo, 2 mm d e diámetro interno y aproximadamente 2 cm 
de largo se coloca un filamento de plata de 1 mm x 7 mm de largo y se sella por ambos lados 
dejando un pequeño orificio para sostener el filame nto de plata.       (Primera Sección) DIARIO OFICIAL Viernes 28 d e agosto de 2009 
• A todo el material de cuarzo empleado en esta técn ica, se elimina la materia orgánica en una mufla a 
600 ° C durante 1 h para eliminar cualquier partícul a de materia orgánica, una vez purificado se 
guarda en recipientes que deben ser mantenidos en u n horno de secado entre 40 ° C - 60 ° C para 
evitar humedad. 
• Frascos contenedores de vidrio pyrex con válvula p ara alto vacío con pistón de teflón o de vidrio. 
Estos frascos se utilizan para transportar el CO 2 de la línea de preparación de muestras al sistema de 
introducción del espectrómetro de masas de relacion es isotópicas. 
• Termos de vidrio pyrex de diferentes tamaños (1, 1 /2 y 1/4 L) para nitrógeno líquido. 
• Termo de 50 litros de acero inoxidable para guarda r nitrógeno líquido. 
• Uniones cajón ultra torr de 3/8 No. SS-6-UT-6 y fi ltro para gases SS4VCR25M. 
• Se requiere un sistema para romper el tubo de cuar zo que contiene el gas CO 2 proveniente de la 
muestra, este sistema se encuentra formado por las siguientes partes: a) una unión reductora cajón 
de ½ a ¼ ultra torr, No. SS-8-UT-6-4, b) tubo flexi ble cajón de ½, No. 321-8X-1, c) dos conos de 
acero inoxidable 304-8-XOA d) una unión reductora c ajón ultra torr de ½ a 3/8 y un filtro para gases 
SS4VCR25M. El material de este inciso es para un so lo rompedor. (Uniones Cajón. Swagelok 
Companies). Descrito en el artículo DesMaris y Haye s 1976. 
• Micropipetas de volumen variable de: 0 a 200 µl; 0  a 50 µl y de 0 a 10 µl con puntas de plástico 
desechables. 
 Equipos necesarios para realizar la combustión en tubo de cuarzo. 
• Mufla. La combustión de la materia orgánica en tub o de cuarzo sellado se realiza en una mufla que 
puede operar a una temperatura máxima de 1100,0 oC equipada con control digital de temperatura 
con un error no mayor de ± 5 oC y un control de tiempo con una resolución de 1 mi n. 
• Línea de Vacío 1. Para la des-gasificación de las muestras. Equipada con dos bombas de vacío con 
una capacidad de bombeo de 4 m³/h y una bomba difus ora con trampa para nitrógeno líquido con 
una velocidad de bombeo de 100 l/s capaz de alcanza r una presión de 0,1 Pa o 10 -4 mbar 
• Línea de Vacío 2. Para la purificación criogénica de las muestras. Equipada con dos bombas de 
vacío con una capacidad de bombeo de 4 m³/h y una b omba difusora con trampa para nitrógeno 
líquido con una velocidad de bombeo de 100 l/s, cap az de alcanzar una presión de 0,1 Pa o  10 -4 
mbar 
• Balanza analítica: con capacidad de 200 g y una pr ecisión de 0,1 mg. 
• Horno de secado. Que mantenga una temperatura cons tante. Con variación máxima de ± 0,1 grados 
Celsius mediante un sistema de medición y control q ue emplee un termopar en un intervalo de 
temperaturas entre 50 ° C-60 ° C. 
Preparación y Acondicionamiento del Material y de l a Muestra para la combustión en tubo de cuarzo 
sellado. 
a) Preparación del tubo de combustión. Al tubo de cuar zo quemado previamente a 600 ° C, se le 
adicionan 3 g de óxido cúprico y un pequeño capilar  con filamento de plata. El conjunto es calentado 
una (1) hora a 600 oC en una mufla para eliminar cualquier resto de mat eria orgánica. Los tubos así 
preparados son almacenados en un recipiente de vidr io con tapa en un horno entre 40 oC - 60 oC 
Que mantenga una temperatura constante con variació n máxima de ± 1,0 grados Celsius. 
b) Preparación de muestras de azúcares disueltos o pul pa proveniente de jugos, néctares  y 
concentrados de jugos para análisis isotópico. Se r ealiza la preparación siguiendo 8.7.1.2 a) y  
8.7.1.2 b) 
c)  Se toman entre 40 a 90 µl de los sólidos disueltos  o de 8 a 10 mg de pulpa seca y se coloca un tubo 
pequeño de 6 mm de diámetro externo de cuarzo y se deposita invertido dentro del tubo de 
combustión de cuarzo de 9 mm de diámetro externo qu e contiene CuO, el filamento de plata y la 
muestra, finalmente se colocan 3 g de cobre metálic o con un embudo. La combustión de la muestra 
se realiza utilizando el oxígeno liberado por el óx ido cúprico, siendo la plata el catalizador de la 
reacción y el cobre metálico sirve para poder conve rtir los óxidos de nitrógeno en N 2 a una 
temperatura de 650 ° C. Viernes 28 de agosto de 2009 DIARIO OFICIAL (Primer a Sección)      
d)  Los tubos de combustión preparados como en el inci so anterior, se colocan en la línea de vacío 
mediante una unión ultra torr de 3/8". Las muestras  se liofilizan a una presión de 1,33 Pa y finalment e 
se evacuan hasta alcanzar una presión de 0,133 Pa, una vez alcanzada esta presión, el tubo de 
cuarzo es sellado con soplete de alta temperatura. 
e)  Cada vez que se prepara un conjunto de muestras pa ra análisis isotópico de δ13 C, simultáneamente 
se preparan al menos dos materiales de referencia d e distribución internacional como ejemplo:  NBS-
22 (5 µl), IAEA-CH-7 (4 mg) o IAEA-CH6 (8 mg). Para calibr ar el espectrómetro de masas. 
Combustión. 
Las muestras en sus correspondientes tubos de cuarz o sellados son calentadas hasta alcanzar una 
temperatura de 900 oC la cual se mantiene durante dos horas en una mufl a, al término de este periodo se baja 
la temperatura a 650 oC y se mantienen ahí durante 1 h. A partir de esto los tubos se dejan enfriar lentamente 
hasta alcanzar la temperatura ambiente. 
Purificación criogénica de CO 2. 
El CO 2 producto de la combustión de la muestra es separad o y purificado criogénicamente, iniciando con 
la separación del agua mediante una mezcla frigoríf ica (mezcla de hielo seco con alcohol o acetona a - 80 oC), 
para la purificación se utiliza otra trampa enfriad a con nitrógeno líquido (-190 oC) que captura el CO 2 y se 
eliminan los gases no condensables a través de una línea de vacío. 
Los frascos con el CO 2 purificado se colocan en el sistema automático de introducción dual de gases del 
espectrómetro de masas de isótopos estables para de terminar la δ13 C de las muestras. 
8.7.2.1.2  Método de Combustión de las muestras de sólidos di sueltos o pulpa utilizando un analizador 
elemental acoplado a un espectrómetro de masas de i sótopos estables. 
Reactivos y Materiales 
• Cápsulas de estaño de 5 mm X 9mm 
• Microespátula 
• Pinzas 
• Micropipeta de volumen variable de 0 a 10 µl. con puntas de plástico desechables. 
• Materiales de referencia 
• Los materiales empleados para la operación correct a del analizador elemental se describen en los 
manuales de los respectivos fabricantes de estos eq uipos. 
• Helio 99,999 % pureza o Helio 99,995 % pureza con trampas de purificación para agua e 
hidrocarburos. 
• Oxígeno 99,996 % pureza 
• CO 2 99,995 % pureza 
• N 2 99,999 % pureza 
Equipo. 
• Microbalanza con capacidad de 5 g sensibilidad de 1,0 µg 
• Analizador elemental e interfase ver inciso 8.5 in strumentación 
• Espectrómetro de Masas de Isótopos Estables ver in ciso 8.5 instrumentación 
8.7.3  Obtención de resultados de δ13 CVPDB  para el CO 2 obtenido por cualquiera de los métodos de 
combustión. 
El CO 2 producto de la combustión de las muestras de sólid os disueltos y/o pulpa descritos en los 
numerales 8.7.1.2 a) y b), es empleado para la dete rminación de las relaciones isotópicas de 13 C/ 12 C mediante 
un espectrómetro de masas con características defin idas en el inciso 8.5 
La determinación de las relaciones isotópicas se re aliza con las especies isotópicas 13 C16 O16 O/ 12 C16 O16 O 
proveniente de las correspondientes intensidades de  los haces de iones moleculares masa 44 y 45 uma 
corregidas por contenido de 17 O según Santrock et al 1985.       (Primera Sección) DIARIO OFICIAL Viernes 28 d e agosto de 2009 
8.7.4  Obtención de los resultados de δ15 NAIR para el N 2 proveniente de materia orgánica obtenido por 
cualquiera de los métodos de combustión y reducción  con cobre metálico. 
Empleando el analizador elemental, los óxidos del n itrógeno obtenidos en la combustión de la pulpa, se  
convierten a N 2 mediante una reducción con cobre metálico. Se deben  programar las condiciones del 
espectrómetro para obtener el análisis isotópico de  N 2 producto de la pulpa empleado para la determinació n 
de las relaciones isotópicas de 14 N/ 15 N mediante un espectrómetro de masas con caracterís ticas definidas en 
el inciso 8.5 
La determinación de las relaciones isotópicas se re aliza con las especies isotópicas 14 N14 N/ 14 N15 N 
proveniente de las correspondientes intensidades de  los haces de iones moleculares masa 28 y 29 uma. 
8.7.5  Cálculos 
La unidad de reporte δ es el sistema de unidades más empleado para indica r el contenido isotópico. Los 
valores δ son usados para indicar las variaciones en la abun dancia isotópica. 
La δ13 C de un compuesto está expresada mediante las relac iones isotópicas de la muestra con la relación 
isotópica del patrón de acuerdo a la ecuación 1 en partes por mil (‰). 
 
Donde la δ13 C está expresada por los cocientes de los isótopos estables ( 13 C/ 12 C) de la muestra contra el 
patrón internacional VPDB el cual es un carbonato d e origen marino de la formación cretácica Peedee en  
Carolina del Sur (Craig, 1957). Cuya relación isotó pica absoluta de ( 13 C/ 12 C) PDB = 0,0112372. Este valor es el 
punto de referencia en la escala de PDB de δ que se calculan con la ecuación 1 (Ec 1). 
El espectrómetro de masas de isótopos estables da e l resultado de cada análisis, directamente en 
unidades de δ13 C incluyendo en el resultado, varias correcciones e ntre ellas están las correcciones por efecto: 
de presión, de masas parásitas, efecto de memoria, gas residual, mezcla de gases por cambio de válvula s  y 
por abundancia isotópica, (Mook, W.G. y Grootes P.M . 1973). 
Como se mencionó anteriormente el resultado que ent rega el espectrómetro estará en la escala VPDB, si 
y solo si, el CO 2 utilizado como patrón interno está calibrado previ amente con respecto a VPDB. Sin embargo 
para cumplir con la recomendación de la IUPAC del 2 005 el resultado del análisis de δ13 C, posteriormente se 
normaliza utilizando la escala L-SVEC y NBS 19, y s e verifica la normalización utilizando al menos tre s de los 
materiales de referencia de la tabla 2, con el únic o requisito de que cubran la escala de medición de las 
muestras problema. 
Para el caso de jugos de fruta, los materiales de r eferencia pueden ser el IAEA-CH7 (polietileno), NBS -22 
(aceite) y el IAEA-CH6 (Sacarosa). Tanto para la no rmalización como para la verificación se realiza 
empleando una regresión por mínimos cuadrados, en l a cual en el eje de las “x” se colocan los resultad os 
experimentales obtenidos del espectrómetro de masas  de relaciones isotópicas y en el eje de las “y” se  
colocan los valores de δ13 CVPDV  asignados para cada uno de los materiales de refer encia mostrados en la 
Tabla 2. El coeficiente de correlación lineal R 2 no debe ser menor a 0,9999. Por ejemplo una ecuaci ón de 
calibración resultante de esta normalización podría  ser: δ13 CVPDB = 1,004* δ13 CVPDB(experimental) + 0,06. A partir de 
esta calibración verificada se calcula el resultado  final del valor de δ13 CVPDB normalizada de acuerdo a la 
recomendación de la IUPAC de 2005. 
Al igual que el carbono, la IUPAC recomendó que la relación isotópica de cualquier material que conten ga 
nitrógeno se debe medir y expresar en δ15 NAIR  la cual se calcula por los cocientes de los isótop os estables 
(15 N/ 14 N) de la muestra relativa al patrón internacional, que es aire, de acuerdo a la ecuación 2, las unidad es 
de reporte están en partes por mil (‰). Al igual qu e el carbono, la normalización se realiza empleando  USGS 
24, USGS 25 para la verificación de la escala de la  δ15 NAIR  se realiza al igual que en el ejemplo anterior 
utilizando para ello los materiales de referencia d e la tabla 2. 
 
8.7.6  Materiales de Referencia Viernes 28 de agosto de 2009 DIARIO OFICIAL (Primer a Sección)      
Los materiales de referencia de la Tabla 2, han sid o aprobados por el Subcomité de Medidas en 
Abundancia Isotópica (Subcommittee on Isotope Abund ance Measurements, SIAM) de la IUPAC y se 
adquieren en el Organismo Internacional de Energía Atómica (IAEA International Atomic Energy Agency) o  a 
través del National Institute of Standards and Tech nology NIST. 
Los materiales de referencia para calibrar el CO 2 que se utilizará como patrón de trabajo y determin ar  δ
13 CVPDB  y la δ18 OVPDB  son el NBS-19, L-SVEC y el NBS-18 que se preparan utilizando la técnica de J. M. 
McCrea (1950) y normalizados de acuerdo a Tyler Cop len, 1988 y 2006. O puede utilizarse un tanque de C O 2 
o N 2 calibrado, como por ejemplo los fabricados por Ozt ech Trading Corporation. 
Tabla 2 
Materiales de Referencia δ13 CVPDB . (‰) ± σ δ15 NAIR  (‰) ± σ 
NBS-19 carbonato de calcio +1,95  
L-SVEC carbonato de litio -46,6  
NBS-18 carbonato de calcio -5,01 ± 0,06  
IAEA-CO-1 carbonato de calcio +2,49 ± 0,06  
IAEA-CO-8 carbonato de calcio -5,76 ± 0,06  
IAEA-CO-9 carbonato de bario -47,32 ± 0,06  
NBS-22 aceite -30,03 ± 0,09  
IAEA CH7 poliuretano -32,15 ± 0,1  
USGS24 grafito -16,05 ± 0,07  
IAEA CH6 Sacarosa -10,45 ± 0,09  
USGS40 ácido-L glutámico -26,39 ± 0,08 -4,52 ± 0,12 
USGS41 ácido-L glutámico +37,63 ± 0,1 +47,57 ± 0,22 
IAEA-CH3 celulosa -24,72 ± 0,08  
IAEA-600 cafeína -27,77 ± 0,09 +1 ± 0,2 
IAEA-601 ácido benzoico -28,81 ± 0,09  
IAEA-602 ácido benzoico -28,85 ± 0,09  
IAEA-N1 (NH 4)2SO 4  +0,43 ± 0,07 
IAEA-N2 (NH 4)2SO 4  +20,32 ± 0,09 
IAEA-NO-3 KNO 3  +4,69 ± 0,09 
USGS32 KNO 3  +180 
USGS34 KNO 3  -1,8 ± 0,2 
USGS35 KNO 3  +2,7 ± 0,2 
USGS 25 (NH 4)2SO 4  -30,25 ± 0,38 
USGS 26 (NH 4)2SO 4  +53,62 ± 0,25 
Precisión 
La precisión del método para un jugo en particular se puede derivar de los resultados obtenidos a trav és 
de un estudio de validación del método que se llevó  a cabo entre varios laboratorios. Los resultados d e la 
validación se encuentran en la norma europea ENV 12 140 y ENV 13070. 
Repetibilidad (de los resultados de mediciones). 
Se expresa como la proximidad de la concordancia en tre los resultados de las mediciones sucesivas del 
mismo mesurando, con las mediciones realizadas con la aplicación de la totalidad de las siguientes 
condiciones, esto es en dos análisis para la misma muestra, el mismo instrumento de medición utilizado  en las 
mismas condiciones; el mismo lugar; la repetición d entro de un periodo corto de tiempo.       (Primera Sección) DIARIO OFICIAL Viernes 28 d e agosto de 2009 
El análisis isotópico de δ13 CVPDB  en materia orgánica tiene una repetibilidad de: 
Para sólidos disueltos el límite de la repetibilida d es 0,21‰ 
Para pulpa el límite de la repetibilidad es 0,38‰ 
Esto significa que si una muestra fuese enviada nue vamente al laboratorio para un análisis de δ13 CVPDB , 
existe una probabilidad del 95% que el nuevo result ado de la muestra sometida estaría en un intervalo de  ± 
0,21‰ para sólidos disueltos y ± 0,38‰ para pulpa. 
Reproducibilidad (de los resultados de las medicion es). 
Se expresa como la proximidad de la concordancia en tre los resultados de las mediciones del mismo 
mesurando, con las mediciones realizadas haciendo v ariar las condiciones de medición por diferentes 
laboratorios. 
Para el análisis isotópico de δ13 CVPDB  en materia orgánica se debe alcanzar una reproduci bilidad menor de: 
Para sólidos disueltos el límite de la reproducibil idad es ± 0,25‰  
Para pulpa el límite de la reproducibilidad es ± 0, 68‰ 
Reporte de resultados 
Para el reporte de resultados se empleará el format o sugerido en la NMX-EC-17025-IMNC-20006 
“Requisitos generales para la competencia de los la boratorios de ensayo y calibración” 
 inciso 8.16.5.10. 
Expresión de Resultados 
Las plantas C 3 (naranja, manzana, toronja, uva, mandarina, mango, pera, ciruela, durazno, chabacano, 
guayaba, papaya, guanábana, fresa, tamarindo) tiene n un intervalo de sólidos disueltos de –24‰ a -28‰, en 
pulpa de –24‰ a -28‰ y en etanol derivado de la fer mentación de los correspondientes sólidos disueltos  de  
–25,5‰ a -28‰. Estos intervalos de δ13 CVPDB  no aplican para el caso de la piña por ser una pla nta CAM, 
razón por la que se tratará aparte. 
Para estimar con mayor precisión el por ciento de f ruta contenida en un jugo, se debe recordar que par a 
esto se requiere determinar en la misma muestra, la  δ13 CVPDB  en los sólidos disueltos, así como, la δ13 CVPDB 
en pulpa, donde la inclusión de este último parámet ro, es con el fin emplearlo como patrón interno. Es to tiene 
como objeto corregir los resultados de δ13 CVPDB en los sólidos disueltos por diferentes factores co mo son: la 
variación en el tipo de fruta y/o por la variación de las diferentes condiciones ambientales en las qu e crecieron 
las frutas. El fundamento de este hecho radica en q ue, en las frutas tanto los carbohidratos solubles 
contenidos en el jugo como otras moléculas orgánica s más complejas que forman la pulpa se generan 
simultáneamente durante el proceso del crecimiento de un tipo de fruta dada y por lo tanto tienen un v alor de 
δ13 CVPDB  casi idéntico, por lo que podemos definir la sigui ente ecuación. 
 
A través de una gran cantidad de análisis reportado s en la literatura internacional, así como de muest ras 
analizadas en el laboratorio, se encontró que el va lor numérico de –11,45‰ es un buen estimador para e l 
promedio de δ13 Cpromedio(Azúcar Caña / Maíz)  para ser empleado en las ecuaciones 3 y 4. Las cual es, representan al 
promedio histórico de varios tipos de carbohidratos  provenientes de plantas C 4 (caña de azúcar y/o 
edulcorantes provenientes de maíz) que son empleado s como edulcorantes exógenos que comúnmente se 
adicionan a los jugos. 
La δ13 CVPDB  de sólidos disueltos de la fruta se denota como la δ13 Csólidos disueltos Jugo. Finalmente la δ13 CVPDB  
de la pulpa se representa como δ13 CPulpa jugo.  Por último, el valor de +0,24 en el denominador de  las 
ecuaciones 3 y 4 es una constante que ha sido obten ida experimentalmente a partir de resultados analít icos 
realizados en diferentes tipos de fruta, que está r elacionada con el valor promedio de la δ13 CVPDB  de los Viernes 28 de agosto de 2009 DIARIO OFICIAL (Primer a Sección)      
sólidos disueltos de la fruta con la δ13 CVPDB de la pulpa que tiene una correlación cercana a 1. Esta constante 
se utiliza en la ecuación 3 de la siguiente manera:  
 
En la aplicación de la ecuación 4 con la metodologí a descrita, estudios de validación han mostrado que  se 
tiene un error probable máximo hasta de 5% en la de terminación del % Fruta. 
Para el caso especial de los Jugos clarificados y q ue por elaboración no contienen pulpa como son el j ugo 
de manzana y el jugo de uva, el por ciento de sólid os disueltos fruta se puede calcular por medio de l a 
ecuación 4: 
 
En la aplicación de la ecuación 5 con la metodologí a descrita, estudios de validación han mostrado que  se 
tiene un error probable máximo hasta de 10% en la d eterminación del % sólidos disueltos en Fruta. 
Criterios para interpretar los resultados de δ13 CVPDB  en fruta 
Los criterios para interpretar los resultados al ap licar las ecuaciones 3 y 4 de % sólidos disueltos f ruta son 
los siguientes: 
La aplicación de la ecuación 4 para jugos que conti enen pulpa, se requiere de la calificación de la pu lpa 
como un patrón interno para lo cual se aplican las siguientes condiciones: 
• La δ13 CVPDB  en pulpa se debe encontrar en el intervalo de plan tas C 3 (-28,5‰ a –24‰) 
• El análisis de la δ15 NAIRE  en pulpa debe ser detectable y tener un valor mayo r a cero. 
Una vez que se acepta a la pulpa como patrón intern o, se deben tener las siguientes consideraciones: 
• Si la diferencia numérica ( δ13 CVPDB  en pulpa - δ13 CVPDB  en los sólidos disueltos) es menor que 1, y 
los valores de la δ13 CVPDB  en sólidos disueltos y la pulpa se encuentran en l os intervalos de las 
plantas C 3 se puede considerar como un producto en el cual lo s sólidos disueltos provienen 100% de 
la fruta y se puede asumir como auténtico. En este caso, al aplicar la ecuación 4 resulte un valor de 
98% o inclusive un poco mayor a 100%. 
• Si la diferencia numérica de δ13 CVPDB  en pulpa - δ13 CVPDB  en sólidos disueltos es mayor que 1, se 
aplica la ecuación 4 para determinar el % sólidos d isueltos de la fruta el cual podrá tener un error d el 
5%. 
• Si la δ13 CVPDB  en pulpa no se encuentra en el intervalo de planta s C 3 y/o no hay el valor δ15 NAIRE  de 
la presencia de nitrógeno entonces la pulpa no se p uede utilizar como patrón interno y no se podrá 
emplear la ecuación 3. Sin embargo, es posible empl ear la ecuación 5 para determinar el % sólidos 
disueltos de la fruta el cual podrá tener un error del 10 %. En este caso implica adición de 
espesantes o celulosa, que en principio de acuerdo al numeral 6.1.2 Estabilizantes y espesantes de 
la presente norma no se deben de agregar. 
Para el cálculo del contenido de ° Brix de sólidos d isueltos en la fruta se puede aplicar la ecuación 6 : 
 
° Brix Producto son determinados mediante una medición directa de l os ° Brix del producto que se está 
analizando. 
9. Información comercial       (Primera Sección) DIARIO OFICIAL Viernes 28 d e agosto de 2009 
Las etiquetas de los productos objeto de esta norma  deben cumplir con las disposiciones de etiquetado 
establecidas en la NOM-051-SCFI-1994, indicada en e l apartado de referencias. 
La letra de la denominación comercial deber ser del  mismo tipo y tamaño. 
10. Vigilancia 
Esta Norma Oficial Mexicana no es certificable, y s u cumplimiento será vigilado por la Secretaría de 
Economía y la Procuraduría Federal del Consumidor, conforme a sus respectivas atribuciones. 
11. Bibliografía 
11.1 Cienfuegos Edith, Casar Isabel y Morales Pedro, (19 98). “Carbon isotopic composition of mexican 
honey”. Journal of Apicultural Reseach 36(3/4): 169  - 179 
11.2  Craig Harmon. (1953). The geochemistry of stable c arbon isotopes. Geochimica et Cosmochimica 
Acta, 3: 53-92. 
11.3  Craig Harmon (1957). Isotopic standards for carbon  and oxygen and correction factors for  mass-
spectrometric analysis of carbon dioxide. Geochimic a et Cosmochimica Acta, 12:133-149. 
11.4  DesMaris, D.J. and Hayes J.M. (1976). Tube cracker  for opening glass Sealed ampoules under 
vacuum. Analytical Chem. 48: 1651-1652. 
11.5  Mook, W.G. and Grootes P.M. (1973). The measuring procedure and corrections for the high precision 
mass-spectrometric analysis of isotopic abundance r atios, especially referring to carbon, oxygen and n itrogen. 
International Journal of Mass Spectrometry and Ion Physics. Vol 12, 273-298. 
11.6  A.O.A.C. Official Method 981.09 Corn Syrup in Appl e Juice Carbon Ratio Mass Spectrometric Method. 
Chapter 37, P. 19, Fruit and Fruit Products. A.O.A. C. 16th Edition, Vol. II. 1995. 
11.7  A.O.A.C. Official Method 982.21 Corn Syrup in Oran ge Juice Carbon Ratio Mass Spectrometric 
Method. Chapter 37, P. 20, Fruit and Fruit Products . A.O.A.C. 16th Edition, Vol. II. 1995. 
11.8  J. Bricout & J. Koziet (1987). Control of the Auth enticity of Orange Juices by Isotopic Analysis. J. 
Agric. Food Chem. 35, 758-780 
11.9  Doner Landis & Bills Donald. (1982). Mass Spectrom etric 13C/12C Determinations to detect High 
Fructose Corn Syrup in Orange Juice: Collaborative Study”. J. Assoc. OFF. Anal. Chem 65 (3): 608-610. 
11.10  J. Koziet, A. Rossmann, G.J. Martin & P.R. Ashurst  (1993). Determination of carbon-13 content of 
sugar of fruit and vegetable juices. Analytica Chim ica Acta, 271, 31-38 
11.11  G.G. Martin, V. Hanote, M. Lees, Y.L. Martin (1996 ) Interpretation of combined ²H SNIF/NMR and 
¹³C SIRA/MS analyses of fruit juices to detec added  sugar, Journal of AOAC International, Vol. 79,  No . 162-
72. 
11.12  M. Gensler & H. L. Schmidt. (1994). Isolation of t he main organic acid from fruit juices and nectars for 
carbon isotope ratio measurements. Analytica Chimic a Acta, 299, 231-237. 
11.13  E. Jamin, J. González, G. Remaud, N. Naulet & G. M artin. (1997). Detection of Exogenous Sugar or 
Organic Acid Addition in Pineapple Juices and conce ntrates by ¹³C IRMS Analysis. J. Agric. Food Chem. 45, 
3961-3967. 
11.14 J. Koziet, A. Rossmann, G.J. Martin, P. Johnson. (1 995). Determination of the oxygen-18 and 
deuterium content of fruit and vegetable juice wate r an European inter-laboratory comparison study, An alytica 
Chimica Acta 302 (1) pp. 29-37. Anal. Chim. Acta. ( 1995), 302, 29-37. 
11.15  UNE-EN-12140:1997 Zumos de frutas y hortalizas. De terminación de la relación de los isótopos 
estables del carbono (¹³C/¹²C) en los azúcares de l os zumos de fruta. Método por Espectrometría de Mas as de 
Relaciones Isotópicas. Viernes 28 de agosto de 2009 DIARIO OFICIAL (Primer a Sección)      
11.16  PNE-ENV-13070 Zumos de fruta y hortalizas. Determi nación de la relación de los isótopos estables 
de carbono (¹³C/¹²C) en la pulpa de los zumos de fr uta. Método por espectrometría de masas de relacion es 
isotópicas. 
11.17  Code of Practice publicado por la AINJ Association  of the Juice and Nectar producing Industry. 
11.18  Handbook of indices of Food Quality and Authentici ty. Woodhead Publishing, 1997 
11.19  Reglamento de Control Sanitario de Productos y Ser vicios VII.1 
12. Concordancia con normas internacionales 
Esta Norma Oficial Mexicana concuerda parcialmente con la Norma Internacional CODEX STAN 247-
2005, Norma general del Codex para zumos (jugos) y néctares de frutas. 
TRANSITORIO 
UNICO.-  La presente Norma Oficial Mexicana entrará en vigo r 60 días naturales después de su 
publicación en el Diario Oficial de la Federación. 
México, D.F., a 9 de julio de 2009.- El Director Ge neral de Normas y Presidente del Comité Consultivo 
Nacional de Normalización de Seguridad al Usuario, Información Comercial y Prácticas de Comercio, 
Francisco Ramos Gómez .- Rúbrica.