中华人民共和国国家标准  
 
GB  xxxx—xxxx 
 
  
中华人民共和国卫生部    发布 xxxx -xx-xx发布  
 xxxx -xx-xx实施  
 食品安全国家标准  
保健食品中α -亚麻酸甲酯、二十碳五烯酸甲酯、
二十二碳五烯酸甲酯和二十二碳六烯酸甲酯
含量的测定  
 
 GB xxxx—xxxx  
I 前  言 
本标准为首次发布。  
 
 GB xxxx—xxxx  
1 食品安全国家标准  
保健食品中 α-亚麻酸甲酯、二十碳五烯酸甲酯、二十二碳五烯酸甲酯
和二十二碳六烯酸甲酯含量的测定  
 
1 范围 
本标准规定了 保健食品中 α-亚麻酸甲酯、二十碳五烯酸甲酯（简称 EPA甲酯，下同） 、二十二碳
五烯酸甲酯（简称 DPA甲酯，下同）和二十二碳六烯酸甲酯（简称 DHA甲酯，下同）的 气相色谱 测定
方法。 
本标准适用于 保健品食品中 α-亚麻酸甲酯、EPA甲酯、DPA甲酯、DHA甲酯含量的测定 ，不适用
于以脂肪酸乙酯为有效成分的保健食品中 α-亚麻酸甲酯、EPA甲酯、DPA甲酯、DHA甲酯含量的测定 。  
注1：脂肪酸乙酯型油类制品的物理鉴别 见附录 B。 
2 原理 
样品经酸水解后提取脂肪，其中 α-亚麻酸、二十碳五烯酸（ EPA）、二十二碳五烯酸（ DPA）、二
十二碳六烯酸（ DHA）经酯交换生成甲酯后，通过气相色谱分离检测，以保留时间定性， 外标法定量。  
3 试剂和材料  
除特别规定外，所有试剂均为分析纯，水为 GB/T6682 规定的二级水。  
3.1  试剂 
3.1.1 氢氧化钾（ KOH）。 
3.1.2 盐酸（ HCl）。 
3.1.3 无水乙醚（ C2H5OC 2H5）。 
3.1.4 乙醇（CH 3CH 2OH）：体积分数≥95％。 
3.1.5 石油醚：沸程 30℃～60℃。 
3.1.6 正己烷（ CH 3(CH 2)2CH 3）：色谱纯。  
3.1.7 甲醇（CH 3OH）：色谱纯。 
3.1.8  无水硫酸钠 （Na2SO 4）。 
3.2  试剂配制  
3.2.1  氢氧化钾甲醇溶液 （0.5 mol/L）：称取 2.8 g氢氧化钾，用甲醇溶解并定容至 100 mL，混匀。  
3.3 标准品 
3.3.1  α-亚麻酸(C18:3n3)甲酯，纯度≥99.0％。 
3.3.2  EPA(C20:5n3)甲酯，纯度 ≥98.5％。   
3.3.3  DPA(C22:5n3)甲酯，纯度 ≥98.0％。 GB xxxx—xxxx  
2 3.3.4   DHA (C22:6n 3)甲酯，纯度≥98.5％。  
3.4 标准溶液的配制  
3.4.1  脂肪酸甲酯标准储备液：浓度分别为 4.0 mg/mL。准确称取 100.0  mg α -亚麻酸甲酯、 EPA 甲
酯、 DPA甲酯、 DHA甲酯标准物质于 25.0 mL容量瓶中，用正己烷溶解并定容至刻度，摇匀。此溶液
应贮存于 -18℃冰箱中。  
3.4.2  脂肪酸甲酯混合标准中间液： 浓度分别为 1.0 mg/mL。 分别吸取脂肪酸甲酯标准储备液 2.50 mL
于10.0 mL容量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀。亦为标准曲线最高浓度；临用时配制。  
3.4.3  脂肪酸甲酯标准工作液：分别吸取脂肪酸甲酯中间液  0.40 mL、0.80 mL、1.0 mL、2.0 mL、
4.0 mL于10.0 mL容量瓶中，用正己烷定容。此浓度即为  0 mg/mL、0.040 mg/mL、0.080  mg/mL、0.10 
mg/mL、0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、1.0 mg/mL 的标准工作液，临用时配制。  
4 仪器与设备  
4.1 气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器（ FID）。 
4.2 天平：感量为 1 mg和0.1 mg。 
4.3 旋转蒸发仪。  
4.4 离心机：转速 ≥4000 r/min 。 
4.5 旋涡混合器。  
4.6 恒温水浴锅。  
5 分析步骤  
5.1 试样制备  
5.1.1 试样处理  
5.1.1.1 固体试样  
准确称取已粉碎混合均匀的待测试样 0.500 g～2.000 g（含待测组分约 5 mg/g～10 mg/g）加入 50 
mL比色管中，加 8 mL水，混匀后再加 10 mL盐酸。将试管放入 70℃～80℃水浴中，每隔 5 min～
10 min以漩涡混合器混合一次，至试样水解完全为止，约需 40 min～50 min。取出试管，加入 10 mL
乙醇，混合。冷却至室温后将混合物移入 100 mL具塞量筒中，以 25 mL无水乙醚分次洗试管，一并
倒入量筒中。密塞振摇 1 min。加入 25 mL石油醚，密塞振摇 1 min，静置、分层，将有机层经过无
水硫酸钠（约 5 g）滤入浓缩瓶中。再加入 25 mL无水乙醚密塞振摇 1 min，25 mL石油醚，密塞振
摇1 min，静置、分层，将有机层经过无水硫酸钠（约 5g）滤入浓缩瓶中，按 “再加入 15 mL无水乙
醚……, 静置、分层、过无水硫酸钠 ”，将全部提取液用旋转蒸发仪于 45℃减压浓缩至有机溶剂挥发
完毕。用正己烷少量多次溶解浓缩物，转移至 25 ml容量瓶并定容，按 5.1.2步骤甲酯化处理。  
5.1.1.2 油类制品  
准确称取混合均匀的油类制品 0.200 g～1.000 g（含待测组分约 10 mg/g～20 mg/g。 ）至 25 mL容
量瓶中，加入 5 mL正己烷轻摇溶解，并用正己烷定容至刻度，按 5.1.2步骤甲酯化处理。  
5.1.2  甲酯化  
吸取待测液（ 5.1.1.1，5.1.1.2）2.0 mL至10 mL具塞刻度试管中，加入 2.0 mL氢氧化钾 甲醇溶液，
立即移至漩涡混合器上振荡混合 5 min，静置 5 min，加入 6 mL蒸馏水，上下振摇 0.5 min，静置分层
（若有机相有乳化现象，以 4000转/分钟离心 10分钟） ，吸取正己烷层待上机测试用。  
注2：如使用塑料离心管或塑料刻度试管进行试样 处理须同步进行空白对照试验。  GB xxxx—xxxx  
3 5.2 测定 
5.2.1 气相色谱参考条件  
5.2.1.1  色谱柱 : 键合 /交联聚乙二醇固定相， 30 m× 0.32 mm , 0.5 µ m或同等性能的色谱柱。  
5.2.1.2  柱温升温程序： 起始温度 180 ℃，10 ℃/min升温至 220 ℃，再以 8 ℃/min升温至 250 ℃，保
持13 min。 
5.2.1.3  进样口：温度 250 ℃；进样量 1 µ L，分流进样，分流比 1∶20。 
5.2.1.4  检测器：氢火焰离子化检测器（ FID） ，温度 270℃。 
5.2.1.5  载气：高纯氮气，流量 1.0 mL/min ，尾吹 25 mL/min 。 
5.2.1.6  氢气： 40 mL/min ；空气 450 mL/min 。 
5.2.2 色谱分析  
分别吸取 1 µ L的标准系列各浓度溶液（ 3.3.3） ，注入气相色谱仪中，可测得不同浓度被测物的响
应值峰面积或峰高，以浓度为 横坐标，相应的峰面积或峰高为纵坐标，绘制标准曲线。  
同样进样 1 µ L的试样待测液（ 5.1.2） ，保留时间定性，测得峰面积或峰高，根据标准曲线得到进
样液中的组分浓度。  
6 分析结果的表述  
试样中 α-亚麻酸甲酯、 EPA甲酯、 DPA甲酯、 DHA甲酯含量按式（ 1）计算  
 
              
100
1000i
iCVXm ………………………………………………………(1)  
 
式中：  
iX
—试样中 α-亚麻酸甲酯、 EP A甲酯、 DPA甲酯、 DHA甲酯的含量 ， 单位为克每百克 （g/100g）； 
iC
—由标准曲线查得测定样液中各脂肪酸甲酯的浓度，单位为毫克每毫升（ mg/mL）； 
      
V— 被测定样液的最终定容体积，单位为毫升（ mL）； 
      
m — 试样的称样质量，单位为克（ g）。 
以重复条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。  
各脂肪酸甲酯转化为脂肪酸的换算系数如下：  
0.9520 — α-亚麻酸甲 酯与 α-亚麻酸的转换系数。  
0.9557 — EPA甲酯与 EPA脂肪酸的转换系数。  
0.9592 — DPA甲酯与 DPA脂肪酸的转换系数 。 
0.9590 — DHA甲酯与 DHA脂肪酸的转换系数 。 
7 精密度 
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的 10% 。 
8 线性范围和定量限  
标准浓度的线性范围 0.040～1.0 mg/mL ；当试样量为 0.5 g、定容体积为 25 mL，各脂肪酸的定
量限分别为 α-亚麻酸甲酯 0.010 g/100g ， EPA甲酯  0.018 g/100g ，DPA 甲酯 0.024  g/100g、DHA甲
酯 0.018 g/100g 。 
 
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4  
附录A 
 
 
图A.1  α-亚麻酸甲酯、 EPA甲酯、DPA甲酯、DHA甲酯标准溶液色谱图  
 
图A.2  检出α-亚麻酸甲酯、 EPA甲酯、DPA甲酯、DHA甲酯的试样溶液色谱图  
 
 
 
 
 
 
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5 附录B 
 
称取 1 g样品，加入 1.0 mL无水乙醇，于漩涡混合器（ 2000 r/min ）混匀 30秒钟，静置，观察油
在乙醇中的溶解情况。如 果油样不溶于乙醇，出现明显的油和乙醇分层的现象，则判断此产品为脂肪
酸甘油酯型油类制品， 可采用本标准进行分析 ；若静置后，看不见油状液滴， 溶解完全且 溶液清澈透
明，可判断此产品为脂肪酸乙酯型油类制品 ，不能使用本标准进行分析 。