ICS 65.020.30 
B 43 
 GB
中华人民共和国国标准  
                      GB 4143-XXXX 
代替GB4143-84 
 
 
牛  冷  冻  精  液 
Frozen Bovin e Semen 
 
（报批稿） 
 
 
 
20XX-XX-XX发布                                       20XX-XX-XX实施  
           
中华人民共和国国家质量监 督检验检疫总局 
中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会   发布 
 GB4143-XXXX 
 
目   次 
 
前言 …………………………………………………………………………………………………………  Ⅳ 
1．范围 ………………………………………………………………………………………………………  1 
2． 规范性引用文件…………………………………………………………………………………………  1 
3． 术语和定义………………………………………………………………………………………………  1 
3.1 前进运动精子数  ………………………………………………………………………………………  1 
3.2 精子活力  ………………………………………………………………………………………………  1 
3.3 精子畸形率  ……………………………………………………………………………………………  1 
3.4 细菌数  …………………………………………………………………………………………………  1 
3.5 冷冻精液…………………………………………………………………………………………………  1 
4． 要求………………………………………………………………………………………………………  1 
4.1 种公牛……………………………………………………………………………………………………  1 
4.2 新鲜精液…………………………………………………………………………………………………  1 
4.3 冻精外观…………………………………………………………………………………………………  1 
4.4 剂型、剂量………………………………………………………………………………………………  1 
4.5 每剂量冻精解冻后的规定………………………………………………………………………………  2 
4.5.1 精子活力……………………………………………………………………………………… ………  2 
4.5.2 前进运动精子数……………………………………………………………………………… ………  2 
4.5.3 精子畸形率…………………………………………………………………………………… ………  2 
4.5.4 细菌数………………………………………………………………………………………… ………  2 
5．试验方法…………………………………………………………………………………………………   2 
5.1 抽样………………………………………………………………………………………………………  2 
5.2 外观………………………………………………………………………………………………………  2 
5.3 剂量………………………………………………………………………………………………………  2 
5.4 解冻后每剂量精液………………………………………………………………………………………  2 
6．检验规则…………………………………………………………………………………………………   2 
6.1 常规检验…………………………………………………………………………………………………  2  
6.2 型式检验…………………………………………………………………………………………………  2 
6.3 质量监督抽样检验………………………………………………………………………………………  2 
6.3.1 监督总体………………………………………………………………………………………………  2 
6.3.2 监督质量水平和监督检验等级规定…………………………………………………………………  2 
 2 
 GBXXXX-XX 
 
6.4 判定规则…………………………………………………………………………………………………  2 
6.4.1 常规试验……………………………………………………………………………………… ………  2 
6.4.2 型式检验……………………………………………………………………………………… ………  2 
6.4.3 公牛群体冻精质量监督抽样检验…………………………………………………………… ………  3 
7．标志、包装、运输、贮存………………………………………………………………………………… 3  
7.1 标志 ……………………………………………………………………………………………………… 3 
7.1.1 品种 …………………………………………………………………………………………………… 3 
7.1.2 内容 …………………………………………………………………………………………………… 3 
7.2 包装 ……………………………………………………………………………………………………… 3 
7.3 运输 ……………………………………………………………………………………………………… 3 
7.4 贮存 ……………………………………………………………………………………………………… 3 
附录A(规范性附录)种公牛的品种代号……………………………………………………………………  4 
A.1  导言 ……………………………………………………………………………………………………  4 
A.2  原则和方法 ……………………………………………………………………………………………  4 
A.3  种公牛品种代号 ………………………………………………………………………………………  4 
附录B（规范性附录）牛冷冻精液质量检验方法…………………………………………………………… 5  
B.1  抽样……………………………………………………………………………………………………… 5 
B.1.1 样品的收集 …………………………………………………………………………………………… 5 
B.1.2 抽 样方案 ……………………………………………………………………………………………… 5 
B.1.2.1质量监督检验抽样 ………………………………………………………………………………… 5 
B.1.2.2 全部取样 …………………………………………………………………………………………… 5 
B.1.3 抽 样方法 ……………………………………………………………………………………………… 5 
B.1.4 样品的保存 …………………………………………………………………………………………… 5 
B.2  剂量检查………………………………………………………………………………………………… 5 
B.2.1 主 要器材 ……………………………………………………………………………………………… 5 
B.2.2 检 查方法 ……………………………………………………………………………………………… 5 
B.2.3 计算 …………………………………………………………………………………………………… 5  
B.3  精子活力的检查………………………………………………………………………………………… 5 
B.3.1 主要仪器 和器材 ……………………………………………………………………………………… 5 
B.3.2 检 查方法 ……………………………………………………………………………………………… 6 
B.3.3 计算 …………………………………………………………………………………………………… 6 
B.4  每剂量中前进运动精子数检查………………………………………………………………………… 6 
B.4.1 主要器材 ……………………………………………………………………………………………… 6 
B.4.2 检查方法 ……………………………………………………………………………………………… 6 
 3                                                                                                  
                                                               
 
        GB4143-XXXX 
 
B.4.3 计算 …………………………………………………………………………………………………… 6 
B.5  精子畸形率的检查……………………………………………………………………………………… 6 
B.5.1 主要仪器和材料 ……………………………………………………………………………………… 6 
B.5.2 试 剂配制 ……………………………………………………………………………………………… 6 
B.5.3 制片、染色、镜检、计算……………………………………………………………………………… 7 
B.6  细菌数的检查…………………………………………………………………………………………… 7 
B.6.1 主要器材和材料 ……………………………………………………………………………………… 7 
B.6.2 培养基的配制 ………………………………………………………………………………………… 7 
B.6.3 检查方法 ……………………………………………………………………………………………… 8 
B.6.4 计算 …………………………………………………………………………………………………… 8 
附录C（规范性附录）公牛群体冻精质量监督抽样检验 …………………………………………………  9  
C.1  确定监督总体…………………………………………………………………………………………… 9 
C.2  确定冻精产品的质量特性……………………………………………………………………………… 9 
C.3  不合格品的分类………………………………………………………………………………………… 9 
C.4  规定监督质量水平 ………………………………………………………………………………………9 
C.5  规定监督检验等级……………………………………………………………………………………… 9 
C.6  检索监督抽样方案……………………………………………………………………………………… 9 
C.7  抽取样本………………………………………………………………………………………………… 9 
C.8  检验样本………………………………………………………………………………………………… 9 
C.9  判断监督总体该公牛群体是否通过…………………………………………………………………… 9 
C.10 应用实例………………………………………………………………………………………………… 9 
C.11 监督抽样方案的通过概率与检验功效 ……………………………………………………………… 10 
C.12 第一监督检验等级的抽样方案表表C.1 …………………………………………………………… 11 
C.13 第二监督检验等级的抽样方案表表C.2 …………………………………………………………… 12 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 4 
 GB 4143-XXXX 
 
前   言 
 
本标准中第4 章是强制性的，其余为推荐性。 
本标准与GB4143-84相比主要变化如下： 
——  增加了适用对象（1984年版的引言；本版的第1章第2段） ； 
——  增加了术语和定义，并有中、英文对照（见第3 章） ； 
——  增加了抽样（见第5 章） ； 
—— 增加了试验方法（见第6 章） ； 
——  增加了判定规则（见第7 章） ； 
——  修改了规格与质量（1984 年版的第1 章；本版的第4 章） ； 
——  修改了检查方法（1984年版的第3章；本版的附录B） ； 
——  修改了种公牛品种代号（1984年版的5.2.2；本版的附录A） ； 
——  删除了牛冷冻精液的制作程序和使用方法（1984 年版的第2 章和第4 章） ； 
——  增加了规范性附录“公牛群体冻精质量监督抽样检验” （见第5章的5.1.2和附录C） ； 
—— 增加引用了 GB/T15239-1994《孤立批计数抽样检验程序及抽样表》 ，在对其中Ac-合格判定数，
Re-不合格判定数的表述；现引用 GB/T2828.1-2003《计数抽样检验程序第 1 部分：接受质 量限（AQL）检
索的逐批检验抽样计划》中的表述 Ac-接受数，Re-拒收数，d-样本中的不合格数(见第 5 章 5.1.1 和第 7
章中7.3.1)。 
本标准的附录A、附录B 和附录C 为规范性附录。 
本标准由中华人民共和国农业部提出。 
本标准由全国畜牧标准化管理委员会归口。 
本标准起草单位：农业部牛冷冻精液质量监督检验测试中心（南京） 、全国畜牧兽医总站、农业部牛冷
冻精液质量监督检验测试中心（北京） 。 
本标准主要起草人：金穗华、徐桂芳、陆汉希、张晓霞、刘长春、黄文佳、刘桂霞。 
本标准委托农业部牛冷冻精液质量监督检验测试中心（南京）负责解释。  
 
 
 
 
 
 
 
 
 5                                                                                                  
                                                               
 
 GB4143-XXXX 
  
牛冷冻精液 
 
1  范围     
本标准规定了牛冷冻精液的命名、技术要求、抽样、试验方法、判定规则和标志及包装。 
本标准适用于各品种牛的冷冻精液产品，以下简称冻精。  
2 规范性引用文件 
 
    下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，凡是注日期的引用文件，其随后所有的修
改单（不包括勘误的内容）或修订版，均不适用于本标准，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是
否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 
GB/T 2828.1-2003  计数抽样检验程序中第1部分：按接受质量限（AQL）检索的逐批检验抽样计划 
GB/T 4789.2-2003   食品卫生微生物学检验中菌落总数测定 
GB/T 5458  液氮生物容器 
GB/T 15239-1994   孤立批计数抽样检验程序及抽样表 
GB/T 15482-1995   产品质量监督小总体计数一次抽样检验程序及抽样表 
 
3 术语和定义 
 
   下列术语和定义适用于本标准。 
3.1  
前进运动精子数 Progressive Motility 
每剂量精液中呈前进运动精子数。 
3.2  
精子活力 Sperm Motility 
在37℃环境下前进运动精子占总精子数的百分率。 
3.3  
精子畸形率 Abnormal Sperm Percentage  
畸形精子占总精子数的百分率。 
3.4  
细菌数 Bacteria  Count 
每剂量精液经培养后观察到的细菌菌落数。 
3.5  
冷冻精液 Frozen Semen 
经特殊方法处理的精液超低温冷冻后在液氮中（-196℃）长期保存。  
 
 6 
 GB 4143-XXXX 
 
4 要求 
      
4.1  种公牛   
应具有种用价值，外貌评价为特等或一等，体质健康，无遗传病，不允许有已发布的动物防疫法中所
明确的二类疫病中的任何一种病。 
4.2 新鲜精液 
色泽乳白色或淡黄色。 精子活力≥65%，精子密度≥6×108个/ml，精子畸形率≤15%。 
4.3  冻精外观 
细管无裂痕，两端封口严密。   
4.4  剂型、剂量 
细管冻精  微型：≥0.18ml；中型：≥0.40ml。  
4.5  每剂量冻精解冻后 
4.5.1  精子活力 
≥35%（即≥0.35） ，水牛≥30%（即≥0.30） 。 
4.5.2  前进运动精子数 
≥800 万个，水牛≥1000 万个。  
4.5.3  精子畸形率 
  ≤18%，水牛≤20%。  
4.5.4  细菌数 
≤800 个。 
 
5 抽样 
 
5.1 抽样检验方案 
5.1.1  生产方抽样检验 
生产方和使用方为质量保证概率把关，按照GB/T15239-1994中的第5章，采用LQ=8.0，模式A抽样
方案检索一次抽样方案，确定抽样公牛样本量。 
5.1.2  质量监督抽样检验 
质量监督抽样检验按照GB/T15482-1995中的第5章，该群体公牛为一监督总体，采用Do=10，选用第
二检验等级的抽样方案，确定抽检公牛的样本量，抽样检验程序见附录C。 
5.1.3  复检和仲裁抽样检验 
    复检可根据原抽样方案确定，仲裁需抽检按照5.1.2规定的方案和7.3.2评定。 
5.2  抽样方法 
抽样方法见附录B中1.2.3和1.3。 
 
6    试验方法 
 
6.1  外观 
    用目测法，其结果应符合4.3 的规定。 
 
 
 7                                                                                                  
                                                               
 
 GB 4143-XXXX 
 
6.2  剂量 
    检验按附录B.2 的方法，其结果应符合标准4.4 的规定。 
6.3  解冻后每剂量精液 
    解冻方法及精子活力、前进运动精子数、精子畸形率、细菌数的检验按照附录B.3 - B.5 规定的方法，
其结果应分别符合4.5.1，4.5.2，4.5.3，4.5.4的规定。 
6.4  检验分类 
6.4.1  常规检验 
对冻精的单项目检验是型式检验的一部分，主要是在生产批入库前和销出站时的检验 
6.4.2  型式检验  
对冻精全部项目检验，评定产品质量是否全面符合标准也是在生产方抽样检验、仲裁和质量监督抽样
检验时选定项的检验。  
6.5  检验项目 
6.5.1  常规检验 
    本标准中4.3和4.5.1规定。 
6.5.2  型式检验 
    本标准中4.3—4.5规定。 
 
7  判定规则 
 
7.1  常规检验  
样品中任何一项目检验未达到本标准中要求的规定,则判为不合格。 
7.2  型式检验 
样品中任何一项目检验未达到本标准中要求的规定,则判为不合格。 
7.3  抽样检验对群体质量水平的评定 
7.3.1  生产方抽样检验 
    引用GB/T2828.1-2003第3章中Ac-接收数，Re-拒 收数，d-不合格品数。 
生产方抽样检验按照GB/T15239-1994中5.11的规定， 通过对样本检验，若样本中不合格品数   d
≤Ac，则判可接收,样本中不合格品数d≥Re，则判不可接收。  
7.3.2  质量监督抽样检验 
按照GB//T15482-1995中的规定，在样本中ｄ＜ｒ（不通过判定数） ，则判为可通过；ｄ≥ｒ，则判为
不可通过，群体公牛（冻精）质量监督抽样检验程序见附录C。  
 
8  标志、包装 
 
8.1  标志 
8.1.1  品种 
种公牛的品种以代号表示，具体遵照附录A 的规定。 
8.1.2  内容 
细管冻精应在管壁（或包装袋）上印制以下内容并且印制标识要清楚。 
 8.1.2.1 生产站名 
 8 
   GB 4143-XXXX        
 
8.1.2.2 公牛品种 
    8.1.2.3 公牛号 
    8.1.2.4 生产日期或批次 
8.2  包装 
料管或灭菌纱布袋，每一包装量不得超过100 份。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 9                                                                                                  
                                                               
 
 GB 4143-XXXX 
 
附  录  A 
(规范性附录) 
种公牛的品种代号 
 
A.1  导言 
 
本附录给出了最简称的公牛品种代号。 
 
A.2  原则和方法 
 
是以牛品种英译汉的汉语名称第一和第二个字的汉语拼音第一字母组合，涉及国家为多字的，以该国
的第一字、第二字和品种第一字的汉语拼音的第一字母组合。 
示例1：荷斯坦牛的品种代号以“荷”和“斯”两字汉语拼音第一字母组合为HS。 
示例2：“丹麦红牛”以国家第一字、第二字和品种第一字的汉语“丹麦”和“红”的拼音第一字组合
为“DMH”。     
 
A.3 种公牛品种代号见表A.1 
 
表A.1 种公牛品种代号 
公牛品种                 品种代号                          公牛品种                    品种代号 
荷斯坦牛                    HS                              婆罗门                        PM 
沙西瓦                      SX                              丹麦红牛                      DMH 
娟珊牛                      JS                              皮埃蒙特                      PA 
西门达尔                    XM                              南阳牛                        NY 
兼用短角                    JD                              秦川牛                        QC 
草原红牛                    CH                              延边牛                        YB 
新疆褐牛                    XH                              鲁西黄牛                      LX 
三河牛                      SH                              晋南牛                        JN 
肉用短角                    RD                              复州牛                        FZ 
夏洛来                      XL                              摩拉水牛                      ML 
海福特                      HF                              尼里／拉菲                    NL 
安格斯                      AG                              金黄阿奎丹                    JH 
利木赞                      LM                              比利时兰                      BL 
莫累灰                      MH                              南德文                        ND 
抗旱王                      KH                              德国黄牛                     DGH 
辛地红                      XD                              蒙贝利亚                     MB 
    楼来恩                      LL 
 
 
 
 
 
 
 10 
 GB 4143-XXXX 
 
附  录  B 
(规范性附录) 
牛冷冻精液质量检验方法 
 
    本附录给出了通用的牛冷冻精液质量检验方法。 
B.1  抽样 
 
B.1.1  样品的收集 
抽样：从受检单位精液贮存容器中按规定随机抽取样品。 
送样：生产、使用单位将抽取的样品送至检验机构。   
B.1.2  抽样方案 
B.1.2.1  生产方抽样检验 
    按本标准5.1.1确定样本数。 
B.1.2.2  质量监督抽样检验 
    按本标准5.1.2确定样本数。 
B.1.2.3  抽样方法 
按牛号顺序排列，由抽样人员现场按样本头数随机确定各样品公牛。 
B.1.2.4  全部取样 
    对已投产的每头公牛取样。     
B.1.3  取样方法 
对确定取样的公牛，从其冻精贮藏容器中随机抽取一个包装量（不得少于25 份）的冻精。 
B.1.4  样品的保存 
存放冷冻精液的低温容器质量应符合GB/Ｔ5458-1997规定， 使用前经过清洗后加入新鲜液氮， 样品浸
在液氮中。取放样品时在空中暴露时间不得超过10ｓ。由专人保管样品，样品不允许脱离液氮，抽样登记
单与样品随行。样品包装、标记应保持原样。 
 
B.2  剂量检查 
 
B.2.1  主要器材   
小试管、剪刀。 
B.2.2  检查方法   
取三支细管冻精自然解冻后剪去两端，把精液倒入一小试管内，用1.0ml吸管准确吸取精液，并检测
其精液量。 
B.2.3  计算  
三支冻精的剂量平均数为样品的剂量按式（B.1）计算： 
                                                   n 1 + n2 + n3                                             Q = —————————  …………………………（B.1）                                                         3 
式中： 
Q  ———— 剂量值，ml； 
n1 ———— 第一支样品剂量，ml； 
n2 ———— 第二支样品剂量，ml； 
n3 ———— 第三支样品剂量，ml。 
 11                                                                                                  
                                                               
 
 GB 4143-XXXX 
 
B.3  精子活力的检查 
 
B.3.1  主要仪器和器材    
显微镜或显微电视装置、恒温水浴箱、5.0ml试管、载玻片或精液性状板、盖 玻片（18×18） 、显 
微镜保温箱或恒温装置、滴管。 
B.3.2  检查方法 
三支细管分别直接置于37℃水浴中解冻， 取解冻三支混合后精液约 50ul(微升)置于载玻片上加盖玻片
立即在载物台温度保持38℃的情况下用200～400 倍显微镜下观察活力,也可通过电视显微装置在荧光屏上
观察活力。每样片观察3 个视野,并应观察不同液层内的精子运动状态,进行全面评定。 
B.3.3  计算 
三个视野活力评价值的平均数按式（B.2）计算： 
                                                      n 1 + n2 + n3                                               M = —————————  …………………………（B.2）                                                           3 
式中： 
M  ———— 活力； 
n1 ———— 第一视野活力； 
n2 ———— 第二视野活力； 
n3 ———— 第三视野活力。  
 
B.4  每剂量前进运动精子数检查 
 
B.4.1  主要器材    
血球计数板、血色素管、1ml 吸管、小试管、计数器、显微镜或电视显微装置、滴管、3.0%氯化钠溶
液。 
B.4.2  检查方法    
细管精液用血色素管准确吸取20ul解冻精液（也可使用B.2已检查后 的样品），注入盛有0.98ml  
的 3.0%氯化钠溶液的试管内，混匀，使之成为 50 倍稀释的稀释精液。将备好的血球计数板用血盖片将计
数室盖好，用小吸管吸取一滴稀释精液于血盖片边缘，使精液自行流入计数室，均匀充满，不允许有气泡或厚度过大，然后在显微镜下或电视荧光屏上观察计数。 
B.4.3  计算 
a）每剂量中精子数=5 个中方格中的精子数×5（即计数室 25 个中方格的总精子数）×10（1ｍｍ3内
的精子数）×1000（每ml精液的精子数）×50（细管稀释倍数）×剂量值。 
    上式可简化为 
    每剂量中精子数=5 个中方格精子数×250 万（细管）×剂量值 
b）每样品观察上下两个计数室，取平均值，如二个计数室计数结果误差超过5%，则应重检。 
c）每剂量中呈前进运动精子数按式( B.3)计算: 
                                              c ＝s × m  ……… …………………………………（B.3）  
式中： 
c ———— 每剂量中前进运动精子数，个； 
s ———— 每剂量中 精子数，个； 
m ———— 活力，% 。 
 12 
 GB 4143-XXXX 
 
B.5  精子畸型率的检查 
 
B.5.1  主要器材和材料    
显微镜、载玻片、血球分类计数器、小吸管、蒸馏水、姬姆萨染料、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、甲醛、
甲醇、甘油、所用试剂为AR 
B.5.2   试剂配制 
ａ) 磷酸盐缓冲液    
磷酸二氢钠（NaH 2PO4.2H2O）               0.55g 
    磷酸氢二钠(Na 2HPO4.12H2O)                2.25g 
    双蒸馏水定容至100ml。 
    b) 中性福尔马林固定液 
    40%甲醛HCHO（使用前经碳酸镁中和过滤）  8.0ml 
    磷酸二氢钠（NaH 2PO4.2H2O）               0.55g 
    磷酸氢二钠(Na 2HPO4.12H2O)                2.25g 
    用0.89%氯化钠约50.0ml溶解后加入8.0ml中和后的甲醛，再加0.89%氯化钠溶液定容至100.0ml。 
c) 姬姆萨原液     
姬姆萨染料                             1.0g 
    甘油 (C 3H5(OH)3)                       66.0ml 
    甲醇（CH 3OH）                         66.0ml 
    姬姆萨染料放入研钵中加少量甘油充分研磨至无颗粒为止，然后将甘油全部倒入并放入恒温箱中保温
继续溶解4h，再加甲醇充分溶解混匀，过滤后贮于棕色瓶中待用，贮存时间越久染色效果越好。 
ｄ) 姬姆萨染液       
姬姆萨原液                              2.0ml 
    磷酸盐缓冲液                            3.0ml 
    蒸馏水                                  5.0ml 
    现配现用 
B.5.3  制片染色、镜检、计算 
精液解冻见B.3，允许同时使用精子活力检查解冻的样品。 
a）抹片 取解冻后精液一滴滴于载玻片一端， 用另一边缘光滑的载玻片与有样品的载玻片呈 35°夹角，
将样品均匀地拖布于载玻片上，自然风干（约5min） ，每样品制作两个抹片。 
b） 固定  在已风干的抹片上滴上1.0ml～2.0ml中性福尔马林固定液， 固定15min后用清水缓缓冲去
固定液，吹干或自然风干。 
c) 染色  将固定好后的抹片反扣在带有平槽的有机玻璃面上，把姬姆萨染液滴于槽和抹片之间，  
让其充满平槽并使抹片接触染液，染色1.5h后用清水缓缓冲去染液，凉干待检。                                  
d) 镜检  将制备好的抹片在显微镜（400～600倍）下观察, 每个抹片观察200个以上的精子（分左、
右两个区） ，取两片的平均值，两片的变异系数不得大于20%，若超过应重新制片。 
e) 精子畸形率按式（B.4）计算：                         
A1
                                        A =———————×100   ……………………………………… （B.4） 
S 
 
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 GB 4143-XXXX  
 
式中： 
A ————精子畸形率，% ； 
A1———— 畸形精子数，单位为个； 
S ———— 精子总数，单位为个 。 
 
B.6  细菌数的检查 
 
B.6.1  主要器材和材料   
培养箱、超净化工作台、三角烧瓶、烧杯、量筒、玻棒、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅（或  
微波炉） 、培养皿、水浴箱、pH 试纸（p H5.5～9.0pH） 、棉花、牛皮纸、记号笔、棉绳、纱布、放大镜、牛
肉浸膏、蛋白胨、磷酸氢二钾、氯化钠、琼脂粉、1 mol/L NaoH、1mol/L Hcl、蒸馏水。 
B.6.2  培养基的配制 
普通琼脂的制作 
牛肉浸膏                    5.0g 
    蛋白胨                     10.0g 
    磷酸氢二钾(K 2HPO4.3H2O)      1.0g 
    氯化钠(NaCl)                5.0g 
用蒸馏水1000ml溶解后加琼脂粉20g加温融解。 
矫正PH至7.4-7.6并用脱脂棉过滤，分装于三角烧瓶中经高压 灭菌（0.1ＭPa  20min）。 
也可使用营养琼脂培养基其质量应符合GB/T4789-2003。 
B.6.3  检查方法 
灭菌平皿事先标号。细管冻精37℃水浴解冻，用酒精棉球消毒以无菌操作（一支直接注于一个灭菌平
皿内；把已凉至50℃左右的普通琼脂以无菌操作倾倒入平皿内， 每皿约15ml， 并转动平皿使精液混合均匀，
同时作空白对照平皿。待琼脂凝固后翻转平皿，置 37℃恒温箱内培养 48 小时取出，计数平皿内菌落数。
每头公牛样品取二支作两个平皿，取平均值。 
B.6.4  计算 
所检细管样品的细菌数按式(B.5)计算: 
                                                      n 1 + n2    
                                               B = ———————     ……………………………………（B.5）    
                                   2 
式中： 
B  ———— 细菌数，单位为个； 
n1 ———— 第一平皿菌落数，单位为个； 
n2 ———— 第二平皿菌落数，单位为个 。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 14 
 GB 4143-XXXX 
 
附  录  C 
(规范性附录) 
群体公牛冻精质量监督抽样检验程序 
 
C.1  导言 
 
本附录给出牛冷冻精液质量监督抽样检验程序，对此特定对象产品，在质量监督时通过抽样检验是对
在群公牛冻精质量评价。 
 
C.2  引用标准 
 
    GB/T15482  《产品质量监督小总体计数一次抽样检验程序及抽样表》 
C.3  质量监督抽样检验程序 
 
C.3.1  确定监督总体  
    所确定的监督总体是一群体公牛，监督总体中的产品是该群体中公牛(冻精)，每头公牛一个生产批的
冻精为每一单位产品。 
C.3.2  确定冻精产品的质量特性 
冻精产品的质量应符合本标准中4.4～4.5 中的规定。 
C.3.3  不合格品的分类 
按照标准规定对冻精产品不合格不区分类别。 
C.3.4  规定监督质量水平 
按照标准 5.1.2确定监督质量水平Ｄ 0=10。   
C.3.5  规定监督检验等级 
监督检验等级越高，检验的功效越高，本标准选定第二检验等级。  
C.3.6  检索监督抽样方案 
在GB/T15482-1995 表 2 中由监督总体量Ｎ所在列和规定的监督质量水平Ｄ 0所在行的相交处读出监督
抽样方案，若相交处为箭头，则沿箭头方向，读出第一个抽样方案，当监督总体量介于某两数之间，应使用其中数大者确定抽样方案。  
C.3.7  抽取样本 
    根据公牛样本量按附录B.1.2.3和B.1.3抽取公牛冻精样品。 
C.3.8  检验样本 
    按照标准中 4.4～4.5中的检验项目和附录Ｂ规定的检验方法及样品合格与否判别准则逐一检验样本中
的每一个样品，并统计被检样本中的不合格品数。 
C.3.9  判断监督总体该群体公牛（冻精）是否可通过 
根据监督质量水平和监督检验等级确定监督抽样方案后，按GB/T15482-1995中5.9的规定检验样 
本结果在样本中不合格品数ｄ不小于不通过判定数ｒ，即ｄ≥ｒ，则判该监督总体为不可通过；样本 
        
 
GB 4143-XXXX 
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中不合格品数ｄ小于不通过判定数ｒ，即ｄ＜ｒ，则判该监督总体为可通过。 
C.3.10  应用实例 
例1：质量监督抽样检验评价有一群50 头公牛（冻精）产品，用监督质量水平Ｄ 0=10，第二监督检验等级的抽样方案，
在表2 中Ｎ=50 的列和Ｄ 0=5的行查得所需抽样方案为ｎ＝４，ｒ＝２。从监督总体（该群公牛）中随机抽取4 头公牛（冻精）
样品检验，若其中不合格公牛（冻精）的数小于2，即d < r，则判该群体公牛（冻精）可通过，若其中不合格公牛（冻精）
的数不小于2，即d ≥ r，则判该群体公牛（冻精）不通过。 
C.3.11 监督抽样方案的通过概率与检验功效 
    对监督抽样方案的通过概率与检验功效按照 GB/T15482-1995 中的第 6章。 
 
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