식품의약품안전처 공고제2013-295호
- 2 -식품의약품안전처 공고제2013-295호
「건강기능식품의기준및규격」(식품의약품안전처고시 제2013-207호,
2013.8.16.)을일부개정함에있어국민에게미리알려의견을수렴하고자
그취지,개정이유및주요내용을「행정절차법」제46조에따라다음과
같이공고합니다.
 2013년12월27일
 식품의약품안전처장
「건강기능식품의 기준및규격」일부개정고시(안)행정예고
1.개정이유
건강기능식품의 기준및규격
의기준․규격적용을명확히하여
영업자및관계공무원의이해를도모하고기능성원료를추가확대하여
건강기능식품산업활성화에기여하고자함.
2.주요내용
가.기준및규격적용의명확화[안제2,4,제3,1,제4,1]
1)기준및규격적용대상의명확화
2)발기부전치료제등과유사한물질의기준및규격적용시험대상에
캡슐기제를포함하도록하고영양소섭취대상을특별히정한
경우의적용기준을[별표3]한국인영양섭취기준의 권장섭취량- 3 -또는충분섭취량으로함
3)기준및규격적용대상을명확히하여안전하고기능성이확보되는
건강기능식품유통을도모
나.개별기준및규격중기능성내용추가[안제3,2-6,2-29,2-49]
1)고시형원료의기능성내용추가인정에따른개정
2)녹차추출물,포스파티딜세린,키토산/키토올리고당의기능성내용추가
3)기능성내용확대표시로건강기능식품산업활성화에도움
다.기능성원료별기준및규격의추가등재[안제3,2-57,2-58,2-59,2-60]
1)기능성원료별기준및규격의추가등재
2)히알루론산,홍경천추출물,빌베리추출물,마늘의기준및규격신설
3)건강기능식품기능성원료의확대로다양한제품생산을유도하여
산업활성화및소비자확대
라.시험법의용어명확화및시험법개선[안제4.]
1)분석결과의효율성을높이기위하여시험법개정
2)용어(충진재→충전제)명확화및베타카로틴등5개성분시험법개선
3)시험법을효율적으로개정하여산업체의건강기능식품관리에도움- 4 -3.의견제출
「건강기능식품의기준및규격」일부개정고시(안)에대하여의견이
있는단체또는개인은2014년1월27일까지다음사항을기재한의견서
를식품의약품안전처장 (우편번호:363-700,주소:충청북도청원군오송
읍오송생명2로187오송보건의료행정타운 식품의약품안전처 ,참조:건
강기능식품기준과,(전화)043-719-2454,(팩스)043-719-2450)에게제
출하여주시기바랍니다.
가.예고사항에대한항목별의견(찬․반여부와그이유)
나.성명(단체의경우단체명과그대표자의성명),주소및전화번호
다.기타참고사항- 5 -식품의약품안전처 고시제2013-295호
건강기능식품에 관한법률
제14조및제15조에따른
건강기능
식품의기준및규격
(식품의약품안전처 고시제2013-207호,2013.8.16)을
다음과같이개정고시합니다.
2013년12월27일
식품의약품안전처장
건강기능식품의 기준및규격일부개정고시(안)
건강기능식품의기준및규격일부를다음과같이개정한다.
제2,4,6)중“미생물및붕해시험”을“미생물․붕해․발기부전치료제등과
유사한물질등의시험”으로한다.
제3,1,3)중“권장섭취량”을“권장섭취량또는충분섭취량”으로한다.
제3,2,2-6,3),(1)의기능성내용중“체지방감소”를“체지방감소․
혈중콜레스테롤개선”으로한다.
제3,2,2-29,3),(1)의기능성내용중“노화로인해저하된인지력
개선에도움을줄수있음”을“노화로인해저하된인지력개선․자외선에- 6 -의한피부손상으로부터 피부건강유지․피부보습에도움을줄수있음”
으로한다.
제3,2,2-49,3),(1)의기능성내용중“콜레스테롤개선”을“콜레스테롤
개선․체지방감소”로하고(2)의일일섭취량은다음과같이한다.
(2)일일섭취량
(가)혈중콜레스테롤개선에도움을줄수있음:키토산또는
키토올리고당으로서 1.2～4.5g
(나)체지방감소에도움을줄수있음:키토산으로서3.0～4.5g
제3,2-57히알루론산을다음과같이신설한다.
2-57히알루론산
1)제조기준
(1)원재료:계관(닭벼슬)또는유산구균(Streptococcuszooepidemicus)
(2)제조방법:상기(1)의원재료를배양한후추출․정제하거나
나트륨염으로제조하여야함
(3)기능성분(또는지표성분)의함량:히알루론산으로서 900mg/g
이상함유하고있어야함
2)규격
(1)성상:고유의색택과향미를가지며이미․이취가없어야함- 7 -(2)히알루론산
(가)원료성제품:표시량이상
(나)최종제품:표시량의80～120%
(3)중금속
(가)납(mg/kg):0.1이하
(나)카드뮴(mg/kg):0.1이하
(다)총수은(mg/kg):0.5이하
(라)총비소(mg/kg):0.5이하
(4)대장균군:음성
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:피부보습에도움을줄수있음
(2)일일섭취량:히알루론산으로서 120～240mg
제3,2-58홍경천추출물을다음과같이신설한다.
2-58홍경천추출물
1)제조기준
(1)원재료:홍경천(RhodiolaroseaL.)의뿌리
(2)제조방법:상기(1)의원재료를주정(물․주정혼합물포함)
으로추출하고여과,농축하여제조하여야함
(3)기능성분(또는지표성분):로사빈(Rosavin)으로서20～35mg/g- 8 -함유하고있어야함
2)규격
(1)성상:고유의색택과향미를가지며이미․이취가없어야함
(2)로사빈(Rosavin)
(가)원료성제품:표시량이상
(나)최종제품:표시량의80～120%
(3)중금속
(가)납(mg/kg):1.0이하
(나)카드뮴(mg/kg):0.5이하
(다)총수은(mg/kg):0.5이하
(라)총비소(mg/kg):1.0이하
(4)대장균군:음성
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:스트레스로인한피로개선에도움을줄수있음
(2)일일섭취량:홍경천추출물로서 200～600mg
제3,2-59빌베리추출물을다음과같이신설한다.
2-59빌베리추출물
1)제조기준- 9 -(1)원재료:빌베리(VacciniummyrtillusL.)의열매
(2)제조방법:상기(1)의원재료를주정(물․주정혼합물포함)
으로추출하고여과․농축․정제하여제조하여야함
(3)기능성분(또는지표성분):총안토시아노사이드(Anthocyanosides)
으로서300～450mg/g함유하고있어야함
2)규격
(1)성상:고유의색택과향미를가지며이미․이취가없어야함
(2)총안토시아노사이드
(가)원료성제품:표시량이상
(나)최종제품:표시량의80～120%
(3)중금속
(가)납(mg/kg):1.0이하
(나)카드뮴(mg/kg):0.5이하
(다)총수은(mg/kg):0.5이하
(라)총비소(mg/kg):1.0이하
(4)대장균군:음성
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:눈의피로개선에도움을줄수있음
(2)일일섭취량:빌베리추출물로서2,400mg(안토시아노사이드로서- 10 -72～108mg)
제3,2-60마늘을다음과같이신설한다.
2-60마늘
1)제조기준
(1)원재료:마늘(AlliumsativumL.)구근
(2)제조방법:상기(1)의원재료에서비가식부분을제거한후
동결건조하고분말화하여제조하여야함
(3)기능성분(또는지표성분)의함량:알리인(Allin)10mg/g이상함유하고
있어야함
2)규격
(1)성상:고유의색택과향미를가지며이미․이취가없어야함
(2)알리인함량
(가)원료성제품:표시량이상
(나)최종제품:표시량의80%이상
(3)중금속
(가)납(mg/kg):0.5이하
(나)카드뮴(mg/kg):0.5이하
(다)총수은(mg/kg):0.5이하
(라)총비소(mg/kg):0.5이하- 11 -(4)대장균군:음성
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:혈중콜레스테롤개선에도움을줄수있음
(2)일일섭취량:마늘분말로서0.6～1.0g
제4,1,1-1,(1)“미생물”을“미생물및발기부전치료제 등과유사한
물질등”으로한다.
제4,2-5-2,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,2-5-4-1,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,2-5-4-2,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-1-2,2.2.3중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-2,2.1중2.1.1에서2.1.8까지를다음과같이하고2.1.9와
2.1.10은삭제하며2.2.4중“충진재”는“충전제”로한다.
2.1.1원심분리기
2.1.250mL원심분리관(갈색)- 12 -2.1.3여과용멤브레인필터및디스크형멤브레인필터
2.1.4갈색부피플라스크(50mL,100mL)
2.1.5갈색플라스크(100mL또는250mL)
2.1.6액체크로마토그래프용유리병
2.1.7용매용일회용실린지
2.1.8감압농축기
제4,3-2,3.2중3.2.1에서3.2.6을다음과같이하고,3.2.8은삭제한다.
3.2.1에탄올(Ethanol)
3.2.2피로갈롤(pyrogallol)
3.2.3증류수(Distilledwater)
3.2.4초산에틸(Ethylacetate)
3.2.5헥산(n-Hexane)
3.2.6사이클로헥산(Cyclohexane)
제4,3-2,4.시험과정을다음과같이한다.
4.1시약제조
4.1.160%수산화칼륨용액
수산화칼륨60g을증류수에녹여100mL로조제한다.
4.1.21%염화나트륨용액
염화나트륨1g을증류수에녹여100mL로조제한다.- 13 -4.2표준용액제조
4.2.1베타카로틴을20mg을정밀히취하여100mL갈색부피플라스크에
넣는다.
4.2.2사이클로헥산을이용하여완전히녹인다(200μg/mL).
4.2.3에탄올로적당히희석하여표준용액으로한다(예.0.5,1,2,4,8μg/mL).
4.3시험용액제조
4.3.1베타카로틴약100～200ug에해당하는시료를취하여갈색
원심분리관에넣는다.
4.3.23%피로갈롤에탄올용액10mL과60%수산화칼륨용액1mL을
가하여70℃수욕중에30분간진탕하며비누화한다.
4.3.3이를흐르는물에냉각하고1%염화나트륨용액22.5mL을
가한후헥산․초산에틸(9:1)혼합용액을15mL가하여10분간
진탕한다.
4.3.42,000rpm에서5분간원심분리하여상층을갈색플라스크로옮긴다.
4.3.5하층에헥산․초산에틸(9:1)15mL을가하여2회반복추출하여
상층액을합한다.
4.3.6감압농축후,에탄올50mL에녹여시험용액으로한다.
제4,3-4-2,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.- 14 -제4,3-5-1"비타민K(제1법)"을“비타민K1(제1법)”으로하고2.2.4중
“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-5-2,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-6-2,1중“Polyglycerylmethacrylate로충진된”을“옥타데실
실릴화한”으로하고“형광검출기를이용하여비타민B1의”를“페리시안과
반응하여티오크롬으로환원된비타민B1을형광검출기를이용하여”로하며,
2.장비와재료2.2.3의“충진재Polyglycerylmethacrylate)”를“충전제
octadecylsilica)”로하고2.3분석장비의준비는다음과같이한다.
2.3분석장비의준비
이동상을분당0.8mL씩흘려줌으로써기기와칼럼을안정화시키고
분석시분리된비타민B1이페리시안․수산화나트륨용액과반응
할수있도록장치하여0.4mL로흘려준다.
제4,3-6-2,3.2중3.2.1“염산(Hydrochlonicacid)”을“초산나트륨
(Sodiumacetate)”으로하고3.2.2“염화칼륨(Potassiumchloride)”을“다
카디아스타제(Taka-Diastase)”로하며,3.2.3초산(Aceticacid)을활성
비타첸지(Vitachange,activated)로하고3.2.4질산은(Silvernitrate)을
페리시안화칼륨(Potassiumferricynate)로한다.- 15 -제4,3-6-2중4.1.2‘다카디아스타제’를‘효소’로하고“퍼무티트
(Purmutit)칼럼”을“녹인후그상등액을퍼무티트(Purmutit)칼럼※”으로하고
후단을다음과같이신설한다.
※활성비타첸지(Wako227-00611)혹은이와동등한것1.5g을유리솜이
채워진유리컬럼에물과함께채운후기포를제거하여사용한다.
이때효소용액의유속은1mL/분으로한다.
제4,3-6-2중4.1.3‘페리시안화칼륨․수산화나트륨용액’을‘0.01%페리시안화
칼륨․15%(w/v)수산화나트륨용액’으로하고“하고이에”를“하여15%수산화
나트륨용액을조제하고여기에”로하며,4.1.4를다음과같이신설한다.
4.1.4.10mM제1인산나트륨수용액․0.15M과염소산나트륨수용 액
(pH2.2):제1인산수소나트륨2.4g,과염소산나트륨36.7g을
2L증류수에녹인후과염소산용액을이용하여pH를2.2로
조정하여조제한다.
제4,3-6-2중5.분석및계산을다음과같이한다.
5.1기기분석.- 16 -항목 조건
주입량 10μL
칼럼온도 40℃
이동상10mM제1인산나트륨수용액․0.15M과염소산나트륨수용액:
메탄올(9:1)
검출기파장여기파장:375nm,측정파장:450nm
유량 0.8mL/분
반응액※0.01%페리시안화칼륨․15%(w/v)수산화나트륨용액(유속:0.4mL/분)표1.고속액체크로마토그래프조건(예)
※반응액은컬럼통과후이동상Line과T자관으로연결하고티오크롬
환원을위해반응코일(규격:0.8mmI.D×1m)을컬럼오븐에장치
한다.이때반응액의역류방지를위해반응액펌프에0.25mmI.D의
코일을5～10m길이가되도록설치하여사용한다.
5.2계산
5.2.1비타민B의함량mgg
×××
C：시험용액중의비타민B1의농도(μg/mL)
a：시험용액의전량(mL)
b：시험용액의희석배수
S:시료채취량(g)
제4,3-7-2비타민B2(제2법)2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.- 17 -제4,3-8-3,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-9-2,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-10-1,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-11-2,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-13-2,2.2.5중“충진재”를각각“충전제”로한다.
제4,3-24,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-26-2,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-28-3,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-32-2,1.시험방법의요약을다음과같이한다.
1.시험방법의요약
본시험법은유지를메탄올성수산화나트륨용액으로처리하여알칼리염을
만든후트리플루오로보란메탄올용액을가하고가열하여에스테르화한다.
생성된지방산에스테르를이소옥탄에녹여분석을행한다.개별지방산의- 18 -함량및대표적인지방산의합을계산한다.
제4,3-32-2,2중2.2.4“100%dimethylpolysiloxane(길이50m,안
지름0.32mm,필름두께0.5μm)”을“poly(biscyanopropylsiloxane)
(100m×0.25mm,0.2μm)”로하고3.표준물질및일반시약의3.1.1
“각종지방산”을“분석하고자하는지방산의메틸에스테르”로하며,
3.2.1“C11:0triundecanoicacidmethylester”를“undecanoicacid
methylester”로하고3.3.3“헵탄(Heptane,GC급)또는이소옥탄
(Isooctane,GC급)”을“이소옥탄(Isooctane,GC급)”으로하며,3.4.3
“C11:0triundecanoicacidmethylester1,000 μg/mL이되도록이소옥탄에
녹인다.”를“내부표준용액：triundecanoin(C11:0)0.01g을이소옥탄용액에
녹여10mL가되게한다(1mg/mL).”로한다.
제4,3-32-2,4,4.1표준용액의“조제”를“제조”로하고4.1.1“지방산
표준물질을헵탄에녹여1,000 μg/mL가되게한다.”를“분석하고자하는
지방산메틸에스테르와내부표준물질undecanoicacid메틸에스테르를
이소옥탄에녹여각각0.5mg/mL이되도록조제한다.”로하며4.1.2는
삭제한다.
제4,3-32-2,4,4.2시험용액의“조제”를“제조”로하고4.2.3과4.2.4
의후단에각각“(이때공액리놀레산의경우,70℃에서가온한다).”를- 19 -신설하며,4.2.5의“질소충진후”를“질소를불어넣은후뚜껑을덮고”로
하고4.2.6의“염화나트륨용액”을“포화염화나트륨용액”으로하며,“질소
충진”을“질소를불어넣은”으로하고4.2.7의“새유리튜브에넣고질소를
불어넣은후즉시뚜껑을덮는다.”를“무수황산나트륨으로탈수하여시험
용액으로한다.”로하며,4.2.8과4.2.9를삭제한다.
제4,3-32-2,5.분석및계산을다음과같이한다.
5.1기기분석
표1.크로마토그래프조건(예)
항목 조건
주입부 온도 225℃
칼럼 온도 100℃(4분) → 3℃/분 → 240℃(15분)
검출기 온도 285℃
캐리어 가스 및 유량 헬륨, 0.75 mL/분
Split ratio 200 : 1
5.2계산
5.2.1시험용액및표준용액에서얻은각지방산의피크면적,내부표준
물질의피크면적으로부터다음과같이정량을한다.
5.2.1.1개별지방산메틸에스테르의함량계산
WFAMEi =Pti×WtC11:0×1.0067
PtC11:0×Ri
WFAMEi:지방산i의메틸에스테르로서의양(mg)
Pti:시험용액중지방산i의피크면적
WtC11:0:시험용액중내부표준물질(C11:0triundecanoin)첨가량(mg)- 20 -1.0067:내부표준물질(C11:0triundecanoin)의트리글리세라이드로부터
지방산메틸에스테르로의전환계수
PtC11:0:시험용액중내부표준물질(undecanoicacidmethylester)의피크면적
5.2.1.2지방산i의반응계수(responsefactor,Ri)의계산
※  Ri=Psi×WC 11:0
PsC11:0 Wi
Psi:표준용액중지방산메틸에스테르i의피크면적
PsC11:0:표준용액중내부표준물질(undecanoicacidmethylester)의
피크면적
WC11:0:표준용액중내부표준물질(undecanoicacidmethylester)의양(mg)
Wi:표준용액중지방산메틸에스테르i의양(mg)
※공액리놀레산의경우리놀레산메틸에스테르의반응계수를
사용할수있다.
5.2.1.3개별지방산및지방함량계산
지방산 (g/100 g) =WFAi×100
Wspl
WFAi=WFAMEi×fFAi
fFAi:지방산i(메틸에스테르로서)의지방산전환계수(표1.)
Wspl:검체량(mg)
표1.지방산메틸에스테르로부터지방산으로의전환계수- 21 -지방산명 fFAi
C4:0 Butyric acid 0.8627
C6:0 Caproic acid 0.8923
C8:0 Caprylic acid 0.9114
C10:0 Capric acid 0.9247
C11:0 Undecanoic acid 0.9300
C12:0 Lauric acid 0.9346
C13:0 Tridecanoic acid 0.9386
C14:0 Myristic acid 0.9421
C14:1 Tetradecenenoic 0.9417
C15:0 Pentadecanoic acid 0.9453
C15:1 Pentadecenoic acid 0.9449
C16:0 Palmitic acid 0.9481
C16:1 Hexadecenoic acid 0.9477
C17:0 Margaric acid 0.9507
C17:1 Margaroleic acid 0.9503
C18:0 Stearic acid 0.9530
C18:1 Octadecenoic acid 0.9527
C18:2 Octadecadienoic acid 0.9524
C18:3 Linolenic acid 0.9520
C20:0 Arachidic acid 0.9570
C20:1 Eicosenic acid 0.9568
C20:2 Eicosadienoic acid 0.9565
C20:3 Eicosatrienoic acid 0.9562
C20:4 Arachidonic acid 0.9560
C20:5 Eicosapentaenoic acid 0.9557
C21:0 Heneicosanoic acid 0.9588
C22:0 Behenic acid 0.9604
C22:1 Docosaenoic acid 0.9602
C22:2 Docosadienoic acid 0.9600
C22:3 Docosatrienoic acid 0.9598
C22:4 Docosatetraenoic acid 0.9595
C22:5 Docosapentaenoic acid 0.9593
C22:6 Docosahexaenoic acid 0.9590
C23:0 Tricosanoic acid 0.9620
C24:0 Lignoceric acid 0.9563
C24:1 Nervonic acid 0.9632
제4,3-36,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-38,2,2.1.1“환저플라스크”를“감압농축기”로하고2.1.2“분액
여두”를“자석교반-가열기”로하며,2.1.3“감압농축기”를“교반기- 22 -(vortexmixer)”로하고2.1.4와2.1.5를다음과같이신설한다.
2.1.4분석저울:0.0001g까지측정이가능한것
2.1.5초자기구:삼각플라스크(250mL),환저플라스크(250mL),피펫,
메스실린더,분획여두(500mL)
제4,3-38,2.2.2.“Detector”를“Detector,FID”로하고3.2.1“에탄올
(Ethanol)”을“톨루엔:잔류농약급또는이와동등한것”으로하며
3.2.5부터3.3.7을다음과같이신설한다.
3.2.5클로로포름(Chloroform):기체크로마토그래피용
3.2.6무수황산나트륨
3.2.7유리솜
제4,3-38,3.3과3.4를다음과같이한다.
3.3내부표준물질
3.3.15α-콜레스탄(5α-Cholestane)
분자식:C27H48,분자량:372.67,CASNo.:481-21-0
3.4시액의제조- 23 -3.4.15α-콜레스탄내부표준물질용액
1mg/mL,5α-콜레스탄20mg을클로로포름에녹여20mL로한다.
3.4.2수산화칼륨에탄올용액
3.4.2.150%(w/w):수산화칼륨500g을증류수에녹여1L로한다.
3.4.2.21M:수산화칼륨56g을증류수에녹여1L로한다.
3.4.2.30.5M:1M수산화칼륨용액을증류수로희석하여조제한다.
제4,3-38,4.시험과정을다음과같이하고4.2.3과4.2.4를삭제한다.
4.시험과정
4.1표준용액의제조
4종의표준물질을각각10mg을정밀하게달아내부표준용액
10mL에녹여표준용액으로한다(1mg/mL).
4.2시험용액의조제
4.2.1비누화과정
4.2.1.1베타-시토스테롤,브라시카스테롤,스티그마스테롤,캄페스테롤의
합계량으로서25～100mg이함유되도록적당량의시료를
삼각플라스크에취한다.
4.2.1.2자석막대를삼각플라스크에넣고95%에탄올40mL과
50%수산화칼륨용액8mL을가한다(95%에탄올40mL
중일정량을50%수산화칼륨용액첨가후잔류물세척에- 24 -사용하여플라스크와콘덴서가같이붙어서떨어지지않는
것을방지할수있다.)
4.2.1.3콘덴서를설치하고자석교반-가열기를이용하여교반하면서
가열하여70±10분간환류시킨다.비누화를위해시료를
지속적으로관찰하면서덩어리가생길경우유리봉으로
분산시키거나교반하면서50%수산화칼륨용액을추가하여
시험용액을교반한다.
4.2.1.4환류가완료되면가열기를끄고교반중에콘덴서의상부를
통해95%에탄올60mL을첨가하고15분간방치한다.
4.2.1.5콘덴서를플라스크에서제거하고플라스크에마개를막아
실온으로냉각시킨후12시간이상(24시간이내)동안정치하여
시험용액을안정화한다.
4.2.2추출
4.2.2.1비누화가끝난시험용액을교반하면서톨루엔100mL을
첨가하고마개를하여30초이상교반한다.
4.2.2.2이를세척과정없이500mL분액여두로옮기고1M수
산화칼륨용액110mL을넣고10초간강렬하게진탕하여
정치하고분리된아래층을버린다.
4.2.2.30.5M수산화칼륨용액40mL을분액여두에넣고분액여두를
천천히내용물이소용돌이가생기도록10초간섞어준후
정치하여분리된아래층을버린다.- 25 -4.2.2.4톨루엔층을증류수40mL로천천히분액여두를돌려주며
수세한후정치하여분리된아래층을버리고수세과정을3회
이상반복한다.이때수세과정이반복될수록더욱강렬하게
진탕하며,만약에멀젼이발생하면소량의95%알코올을
첨가하여분액여두의내용물이회오리가생기도록섞어준
후정치하여층을분리한다.톨루엔층이맑게보일때까지
수세과정을계속한다.
4.2.2.5유리솜과약20g의무수황산나트륨이채워진유리깔대기를
통해수세한톨루엔층을약2g무수황산나트륨이채워진
삼각플라스크로흘려주어탈수한다.
4.2.2.6삼각플라스크에마개를막고15분이상정치한다.이때
마개의막음상태가완벽하더라도24시간이상방치하여서는
안된다.
4.2.2.7추출한톨루엔층20mL을250mL환저플라스크에취하고
이를50±3℃에서감압농축하여건고하고잔류물에아세톤
약3mL을가한후다시감압농축하여완전건고한다.
4.2.2.8잔류물을5mL내부표준용액에녹여여과한뒤시험용액
으로한다.
제4,3-38,5.분석및계산5.1기기분석의표1.가스크로마토그래프조건
(예)의“-”를“→”로하고5.2계산중5.2.1“개별식물스테롤함량(mg/g)- 26 -=STc×(SAfa/STfa)×(STis/SAis)×V/S”를“개별식물스테롤함량
(mg/g)=STc×(SAfa/STfa)×(STis/SAis)×5×V/S”으로한다.
제4,3-39,2.2.2.“Detector”를“Detector,FID”로하고3.3부터3.4를
다음과같이한다.
3.3내부표준물질
3.3.15α-콜레스탄(5α-Cholestane)
분자식:C27H48,분자량:372.67,CASNo.:481-21-0
3.4시액의제조
3.4.15α-콜레스탄내부표준물질용액
1mg/mL,5α-콜레스탄20mg을클로로포름에녹여20mL로한다.
제4,3-39,4,4.1표준용액의“조제”를“제조”로하고4.1.1의"25mg"을
각각“10mg”으로한다.
제4,3-39,4.2시험용액의“조제”를“제조”로하고4.2.3의"이헥산층을"을
“추출한헥산층20mL를”로하며4.2.4"25mL"을“5mL”로한다.- 27 -제4,3-39,5,5.1기기분석의표1.가스크로마토그래프조건(예)의
“-”를“→”로하고5.2계산중5.2.1“개별식물스테롤 함량(mg/g)=
STc×(SAfa/STfa)×(STis/SAis)×V/S”를“개별식물스테롤함량
(mg/g)=STc×(SAfa/STfa)×(STis/SAis)×5×V/S”으로한다.
제4,3-43,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-44,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-45,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-50,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-51,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-52,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-53,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-54-1,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.- 28 -제4,3-54-2,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-55,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.
제4,3-57-2,2.2.4중“충진재”를“충전제”로한다.- 29 -부칙
제1조(시행일)이고시는고시한날부터시행한다.다만,제3.개별
기준및규격중2-57히알루론산,2-58홍경천추출물,2-59빌베리
추출물은2016년1월1일부터시행하고2-60마늘은2015년1월1일
부터시행한다.
제2조(적용례)이고시는고시시행이후최초로제조·가공또는수
입한건강기능식품(원료를포함한다)부터적용한다.
제3조(경과조치)①이고시시행당시검사가접수되어진행중인
사항에대하여는종전의규정에따른다.
②이고시시행당시종전의규정에따라제조․가공․수입(선적일을
기준으로한다)한건강기능식품은종전의규정에따른다.이경우해당
건강기능식품은유통기한까지판매할수있다.
제4조(재검토기한)「훈령․예규등의발령및관리에관한규정」(대통령
훈령제248호)에따라이고시발령후의법령이나현실여건의변화등을
검토하여이고시를폐지하거나개정등의조치를하여야하는기한은
2017년6월13일까지로한다.- 30 -현행 개정안
제1.총칙 제1.총칙
1～5.(생략) 1～6.(현행과같음)
제2.공통기준및규격 제2.공통기준및규격
1～3.(생략) 1～3.(현행과같음)
4.기준및규격의적부판정
1)～5)(생략)
6)기준및규격은캡슐기제를제외한
내용물에대하여적용한다.단,미생물
및붕해시험은제외한다.
7)～9)(생략)4.기준및규격의적부판정
1)～5)(현행과같음)
6)---------------------------
-------------------- 단,미생물․
붕해․발기부전치료제등과유사한물질
등의시험은제외한다.
7)～9)(현행과같음)
5～6.(생략) 5～6.(현행과같음)
제3.개별기준및규격 제3.개별기준및규격
1.영양소
1)～2)(생략)
3)비타민과무기질의최소함량은영양소
기준치(별표2)의30%이상으로한다.
다만,섭취대상을특별히정하는
경우에는한국인영양섭취기준(별
표3)에서정한대상연령군의권장
섭취량의30%이상이어야하며,대상
연령군에해당하는권장섭취량이2개
이상인경우그중높은값을사용한다.1.영양소
1)～2)(현행과같음)
3)---------------------------
---------------------------
---------------------------
---------------------------
---------------------- 권장
섭취량또는충분섭취량---------
------------------ 권장섭취량
또는충분섭취량--------------.
- 31 -2.기능성원료 2.기능성원료
2-6녹차추출물
1)〜2)(생략)
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:항산화․체지방감소에
도움을줄수있음
(2)〜(3)(생략)
4)(생략)2-6녹차추출물
1)〜2)(현행과같음)
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:항산화․체지방감소․
혈중콜레스테롤개선에도움을
줄수있음
(2)〜(3)(현행과같음)
4)(현행과같음)
2-29포스파티딜세린
1)〜2)(생략)
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:노화로인해저하된
인지력개선에도움을줄수있음
(2)〜(3)(생략)
4)(생략)2-29포스파티딜세린
1)〜2)(현행과같음)
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:노화로인해저하된
인지력개선․자외선에의한피부
손상으로부터피부건강유지․피부
보습에도움을줄수있음
(2)〜(3)(현행과같음)
4)(현행과같음)
2-49키토산/키토올리고당
1)〜2)(생략)
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:혈중콜레스테롤
개선에도움을줄수있음
(2)일일섭취량
키토산또는키토올리고당으로서
1.2～4.5g2-49키토산/키토올리고당
1)〜2)(현행과같음)
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:혈중콜레스테롤
개선․체지방감소에도움을줄
수있음
(2)일일섭취량
(가)혈중콜레스테롤개선에도움을
줄수있음:키토산또는키토올리- 32 - 고당으로서1.2～4.5g
(나)체지방감소에도움을줄수
있음:키토산으로서3.0～4.5g
<신설> 2-57히알루론산
1)제조기준
(1)원재료:계관(닭벼슬)또는유산
구균(Streptococcuszooepidemicus)
(2)제조방법:상기(1)의원재료를추출
또는배양․추출한후정제하거나
나트륨염으로제조하여야함
(3)기능성분(또는지표성분)의함량
:히알루론산으로서 900mg/g
이상함유하고있어야함
2)규격
(1)성상:고유의색택과향미를
가지며이미․이취가없어야함
(2)히알루론산
(가)원료성제품:표시량이상
(나)최종제품:표시량의80～120%
(3)중금속
(가)납(mg/kg):0.1이하
(나)카드뮴(mg/kg):0.1이하
(다)총수은(mg/kg):0.5이하
(라)총비소(mg/kg):0.5이하
(4)대장균군:음성
3)최종제품의요건- 33 -(1)기능성내용:피부보습에도움을
줄수있음
(2)일일섭취량
히알루론산으로서 120～240mg
<신설> 2-58홍경천추출물
1)제조기준
(1)원재료:홍경천(RhodiolaroseaL.)의뿌리
(2)제조방법:상기(1)의원재료를
주정(물․주정혼합물포함)으로
추출하고여과,농축하여제조하여야함
(3)기능성분(또는지표성분):로사빈
(Rosavin)으로서20～35mg/g함유
되어있어야함
2)규격
(1)성상:고유의색택과향미를가지며
이미․이취가없어야함
(2)로사빈(Rosavin)
(가)원료성제품:표시량이상
(나)최종제품:표시량의80～120%
(3)중금속
(가)납(mg/kg):1.0이하
(나)카드뮴(mg/kg):0.5이하
(다)총수은(mg/kg):0.5이하
(라)총비소(mg/kg):1.0이하
(4)대장균군:음성
3)최종제품의요건- 34 -(1)기능성내용:스트레스로인한피로
개선에도움을줄수있음
(2)일일섭취량
홍경천추출물로서 200～600mg
<신설> 2-59빌베리추출물
1)제조기준
(1)원재료:빌베리(Vacciniummy
rtillusL.)의열매
(2)제조방법:상기(1)의원재료를
주정(물․주정혼합물포함)으로
추출하고여과․농축․정제하여
제조하여야함
(3)기능성분(또는지표성분):총
안토시아노사이드(Anthocyanosides)
으로서300～450mg/g함유되어
있어야함
2)규격
(1)성상:고유의색택과향미를
가지며이미․이취가없어야함
(2)총안토시아노사이드
(가)원료성제품:표시량이상
(나)최종제품:표시량의80～120%
(3)중금속
(가)납(mg/kg):1.0이하
(나)카드뮴(mg/kg):0.5이하
(다)총수은(mg/kg):0.5이하- 35 -(라)총비소(mg/kg):1.0이하
(4)대장균군:음성
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:눈의피로개선에
도움을줄수있음
(2)일일섭취량
빌베리추출물로서2,400mg(안
토시아노사이드로서72～108mg)
<신설> 2-60마늘
1)제조기준
(1)원재료:마늘(AlliumsativumL.)구근
(2)제조방법:상기(1)의원재료에서
비가식부분을제거한후동결건조
하고분말화하여제조하여야함
(3)기능성분(또는지표성분)의함량:
알리인10mg/g이상함유하고
있어야함
2)규격
(1)성상:고유의색택과향미를가지며
이미․이취가없어야함
(2)알리인함량
(가)원료성제품:표시량이상
(나)최종제품:표시량의80%이상
(3)중금속
(가)납(mg/kg):0.5이하
(나)카드뮴(mg/kg):0.5이하- 36 -(다)총수은(mg/kg):0.5이하
(라)총비소(mg/kg):0.5이하
(4)대장균군:음성
3)최종제품의요건
(1)기능성내용:혈중콜레스테롤
개선에도움을줄수있음
(2)일일섭취량
마늘분말로서0.6～1.0g
4)시험법
(1)알리인:제4.3-73알리인
(2)납,카드뮴:[별표4]참조
(3)대장균군:[별표4]참조
제4.시험법 제4.시험법
1.일반원칙
1-1.시료채취방법
1)～2)(생략)
3)시험에사용된시료는규격항목에
따라채취방법을달리한다.
(1)미생물
(가)캡슐은외피를포함하여시험의
시료로사용한다.
(2)(생략)
1-2(생략)1.일반원칙
1-1.시료채취방법
1)～2)(현행과같음)
3)---------------------------
---------------------.
(1)미생물및발기부전치료제등과
유사한물질등
(가)------------------------
---------------.
(2)(현행과같음)
1-2(현행과같음)
2-5-2카페인 2-5-2카페인- 37 -1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안지름4.6mm,
길이250mm,충진재octadecylsilica)
또는이와동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
----------충전제---------
---------------.
2.2(현행과같음)
3～5(현행과같음)
2-5-4시트리닌
2-5-4-1시트리닌(제1법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안지름4.6mm,
길이250mm,충진재octadecylsilica)
또는이와동등한것
2.3(생략)2-5-4시트리닌
2-5-4-1시트리닌(제1법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
----------충전제---------
---------------.
2.3(현행과같음)- 38 -3～5(생략) 3～5(현행과같음)
2-5-4-2시트리닌(제2법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안지름4.6mm,
길이250mm,충진재octadecylsilica)
또는이와동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)2-5-4-2시트리닌(제2법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
----------충전제---------
---------------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-1-2비타민A(제2법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.2(생략)
2.2.3옥타데실실릴화한칼럼(안지름4.6mm,
길이250mm,충진재octadecylsilica)
또는이와동등한것3-1-2비타민A(제2법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.2(현행과같음)
2.2.3------------------------
----------충전제---------
---------------.- 39 -2.3(생략)
3～5(생략)2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-2베타카로틴
1.(생략)
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1환류냉각기
2.1.2수욕조
2.1.3갈색분액깔때기(250mL)
2.1.4냉각관
2.1.5여과용멤브레인필터
2.1.6감압건조기
2.1.7액체크로마토그래프용유리병
2.1.8용매용일회용실린지
2.1.9갈색플라스크(100mL또는250mL)
2.1.10부피플라스크(200mL)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안지름4.6mm,
길이250mm,충진재octadecylsilica)
또는이와동등한것
2.3(생략)3-2베타카로틴
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1원심분리기
2.1.250mL원심분리관(갈색)
2.1.3여과용멤브레인필터및디스
크형멤브레인필터
2.1.4갈색부피플라스크(50mL,100mL)
2.1.5갈색플라스크(100mL또는250mL)
2.1.6액체크로마토그래프용유리병
2.1.7용매용일회용실린지
2.1.8감압농축기
<삭제>
<삭제>
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안지름4.6mm,
길이250mm,충전제octadecylsilica)
또는이와동등한것
2.3(현행과같음)- 40 -3.표준물질및일반시약
3.1(생략)
3.2일반시약
3.2.1메탄올(Methanol)
3.2.2아세토니트릴(Acetonitrile)
3.2.3이소프로판올(2-propanol)
3.2.4디클로로메탄(Dichloromethane)
3.2.5에탄올(Ethanol)
3.2.6피로갈롤(Pyrogallol)
3.2.7수산화칼륨(Potassiumhydroxide)
3.2.8석유에테르(Petroleumether)
4.시험과정
<신설>
4.1표준용액의조제
4.1.1베타카로틴을10mg을정밀히
취하여200mL부피플라스크에
넣는다.3.표준물질및일반시약
3.1(현행과같음)
3.2일반시약
3.2.1에탄올(Ethanol)
3.2.2피로갈롤(pyrogallol)
3.2.3증류수(Distilledwater)
3.2.4초산에틸(Ethylacetate)
3.2.5헥산(n-Hexane)
3.2.6사이클로헥산(Cyclohexane)
3.2.7수산화칼륨(Potassiumhydroxide)
<삭제>
4.시험과정
4.1시약제조
4.1.160%수산화칼륨용액
수산화칼륨60g을증류수에
녹여100mL로조제한다.
4.1.21%염화나트륨용액
염화나트륨1g을증류수에
녹여100mL로조제한다.
4.2표준용액제조
4.2.1베타카로틴을20mg을정밀히
취하여100mL갈색부피플라
스크에넣는다.- 41 -4.1.2이소프로판올을이용하여완전히
녹인다(50μg/mL).
4.1.3이소프로판올로적당히희석한다
(예.25,12.5,6.25μg/mL).
4.1.40.45μm멤브레인필터로여과
하여표준용액으로한다.
4.2시험용액의조제
4.2.1베타카로틴이5～10μg함유
되도록시료를취한다.
4.2.2에탄올30mL,10%피로갈롤
에탄올용액1mL를가하여잘
섞은후수산화칼륨용액(9→
10)3mL를가한다.
4.2.3환류냉각기를부착하여비등수욕
중에서30분간비누화시킨다.단,
검체가유지를함유하지않는경우
비누화과정을생략할수있다.
4.2.4이를신속히냉각하여실온으로
한후분액깔때기로옮긴다.
4.2.5냉각관수기를증류수30mL로
씻어낸후,씻은액은분액깔때기에
합하여잘혼합한다.
4.2.6방치하여층분리를완전히
시킨후물층은별도의갈색
분액깔때기에옮긴다.
4.2.7물층은석유에테르30mL로4.2.2사이클로헥산을이용하여완전히
녹인다(200μg/mL).
4.2.3에탄올로적당히희석하여표준
용액으로한다(예.0.5,1,2,4,
8μg/mL).
4.3시험용액제조
4.3.1베타카로틴약100～200ug에
해당하는시료를취하여갈색
원심분리관에넣는다.
4.3.23%피로갈롤에탄올용액10
mL과60%수산화칼륨용액1
mL을가하여70℃수욕중에
30분간진탕하며비누화한다.
4.3.3이를흐르는물에냉각하고1%
염화나트륨용액22.5mL을가한후
헥산․초산에틸(9:1)혼합용액을
15mL가하여10분간진탕한다.
4.3.42,000rpm에서5분간원심분리하여
상층을갈색플라스크로옮긴다.
4.3.5하층에헥산․초산에틸(9:1)
15mL을가하여2회반복추출
하여상층액을합한다.
4.3.6감압농축후,에탄올50mL에
녹여시험용액으로한다.
<삭제>- 42 -추출한다(2회반복).
4.2.8모든석유에테르추출액을합하여
증류수10mL1회,이어50mL
(페놀프탈레인시액으로정색되지
않을때까지)씻는다.
4.2.9물층을완전히분리한후,석유
에테르층을취하여무수황산나트륨을
가해탈수하고석유에테르층을갈색
플라스크에옮긴다.
4.2.10이어위에서사용한황산나트륨을
석유에틸에테르10mL씩으로2회
씻고,씻은액을[4.2.9]의갈색
플라스크에더한다.
4.2.11석유에테르추출액을모두합하여
40～50℃에서감압건조한다.
4.2.12잔류물을이소프로판올로녹여
1mL로한것을시험용액으로한다.
5.분석및계산
5.1∼5.2(생략)<삭제>
<삭제>
<삭제>
<삭제>
<삭제>
5.분석및계산
5.1∼5.2(현행과같음)
3-4-2비타민E(제2법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)3-4-2비타민E(제2법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)- 43 -2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4순상형칼럼(안지름4.6mm,
길이250mm,충진재Silica
gel)또는이와동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
-----------충전제-----
-------------------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-5비타민K
3-5-1비타빈K(제1법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.2(생략)
2.2.3순상형칼럼(안지름4.6mm,
길이250mm,충진재Silica
gel)또는이와동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-5비타민K
3-5-1비타빈K1(제1법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.2(현행과같음)
2.2.3------------------------
----------충전제------
-------------------
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-5-2비타빈K1(제2법)
1.(생략)3-5-2비타빈K1(제2법)
1.(현행과같음)- 44 -2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.2(생략)
2.2.3컬럼
2.2.3.1분석컬럼:옥타데실실릴화한
컬럼으로carbonloading량이
10%이상인것(안지름4.6mm,
길이250mm,충진제Silica
gel)또는이와동등한것
2.2.3.2(생략)
2.3(생략)
3～5(생략)2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.2(현행과같음)
2.2.3컬럼
2.2.3.1----------------------
----------------------
----------------------
------------충전제----
--------------------
2.2.3.2(현행과같음)
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-6비타민B1
3-6-2비타민B1(제2법)
1.시험방법의요약
본시험법은시료중비타민B1을
삼염화초산용액으로균질화시킨후
원심분리를하여상등액채취하여
다카디아스타제용액으로효소분해를한
용액을Polyglycerylmethacrylate로
충진된칼럼을이용하여비타민B1을
분리하는방법으로형광검출기를
이용하여비타민B1의여기파장인3-6비타민B1
3-6-2비타민B1(제2법)
1.시험방법의요약
----------------------------
----------------------------
----------------------------
----------------------------
----옥타데실실릴화한---------
----------------------------
-------------- 페리시안과반응하여
티오크롬으로환원된비타민B1을형광- 45 -375nm와측정파장450nm에서검출하여
정량한다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1∼2.1.5(생략)
2.2분석장비
2.2.1∼2.2.2(생략)
2.2.3비타민B1분리용칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
Polyglycerylmethacrylate)또는
이와동등한것
2.3분석장비의준비
이동상으로사용되는0.1M제1
인산나트륨용액을분당0.7mL씩
흘려줌으로써기기와칼럼을안정화
시킨다.
3.표준물질및일반시약
3.1(생략)
3.2일반시약
3.2.1염산(Hydrochlonicacid)
3.2.2염화칼륨(Potassiumchloride)
3.2.3초산(Aceticacid)
3.2.4질산은(Silvernitrate)
3.2.5∼3.2.7(생략)검출기를이용하여----------------
---------------------------.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1∼2.1.5(현행과같음)
2.2분석장비
2.2.1∼2.2.2(현행과같음)
2.2.3------------------------
-----------------, 충전제
octadecylsilica)---------
-----------------.
2.3분석장비의준비
이동상을분당0.8mL씩흘려줌으로써
기기와칼럼을안정화시키고분석시
분리된비타민B1이페리시안․수산화
나트륨용액과반응할수있도록장치
하여0.4mL로흘려준다.
3.표준물질및일반시약
3.1(현행과같음)
3.2일반시약
3.2.1초산나트륨(Sodiumacetate)
3.2.2다카디아스타제(Taka-Diastase)
3.2.3활성비타첸지(Vitachange,activated)
3.2.4페리시안화칼륨(Potassiumferricynate)
3.2.5∼3.2.6(현행과같음)- 46 -4.시험과정
4.1시약제조
4.1.1(생략)
4.1.2다카디아스타제용액
다카디아스타제를물에녹여
2%로하여퍼무티트(Purmutit)
칼럼에넣고다카디아스타제
중에존재하는비타민B1을
제거한후사용한다.사용시
제조한다.
<신설>
4.1.3페리시안화칼륨․수산화나트륨용액
수산화나트륨30g을물에녹여
200mL로하고이에페리시안화
칼륨20mg을녹인다.사용시
제조한다.
<신설>4.시험과정
4.1시약제조
4.1.1(현행과같음)
4.1.2효소용액
----------------------
---------녹인후그상등액을
퍼무티트(Purmutit)칼럼※에넣고
--------------------
-----------------------
---------.
※활성비타첸지(Wako227-00611)
혹은이와동등한것1.5g을
유리솜이채워진유리컬럼에
물과함께채운후기포를
제거하여사용한다.이때효소
용액의유속은1mL/분으로한다.
4.1.30.01%페리시안화칼륨․15%(w/v)
수산화나트륨용액
------------------------
--------하여15%수산화나
트륨용액을조제하고여기에
-----------------------
-------------.
4.1.4.10mM제1인산나트륨수용액․
0.15M과염소산나트륨수용 액
(pH2.2):제1인산수소나트륨- 47 -
4.2∼4.4(생략)
5.분석및계산
5.1기기분석.
항목 조건
주입량 50μL
칼럼온도 35℃
이동상0.1M제1인산나트륨용액
검출기
파장여기파장:375nm,측정파장:450
nm
유량 0.7mL/분
반응액페리시안화칼륨․수산화나트륨용액(유속
:0.7mL/분)표 1. 고속액체크로마토그래프 조건(예)
<신설>
5.2계산
5.2.1비타민B의함량mgg
×
시료채취량××
S：시험용액중의비타민B1의농도(μg/mL)2.4g,과염소산나트륨36.7g을
2L증류수에녹인후과염소
산용액을이용하여pH를2.2로
조정하여조제한다.
4.2∼4.4(현행과같음)
5.분석및계산
5.1기기분석.
항목 조건
주입량 10μL
칼럼온도 40℃
이동상10mM제1인산나트륨수용액․0.15M
과염소산나트륨수용액:메탄올(9:1)
검출기
파장여기파장:375nm,측정파장:450
nm
유량 0.8mL/분
반응액※0.01%페리시안화칼륨․15%(w/v)수산화
나트륨용액(유속:0.4mL/분)표 1. 고속액체크로마토그래프 조건(예)
※반응액은컬럼통과후이동상Line과
T자관으로연결하고티오크롬환원을
위해반응코일(규격:0.8mmI.D×1
m)을컬럼오븐에장치한다.이때반응
액의역류방지를위해반응액펌프에
0.25mmI.D의코일을5～10m길이가
되도록설치하여사용한다.
5.2계산
5.2.1비타민B의함량mgg
×
××
C：시험용액중의비타민B1의농도(μg/mL)- 48 -a：시험용액의전량(mL)
b：시험용액의희석배수
<신설>a：시험용액의전량(mL)
b：시험용액의희석배수
S:시료채취량(g)
3-7-2비타민B2(제2법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-7-2비타민B2(제2법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
------------------ 충전제
------------------------
-----------
2.3(현행과같음)
3～5(생략)
3-8-3나이아신(제3법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)3-8-3나이아신(제3법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)- 49 -2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
------------------ 충전제
------------------------
-----------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-9-2판토텐산(제2법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-9-2판토텐산(제2법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
------------------ 충전제
------------------------
-----------
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-10비타민B6
3-10-1비타민B6(제1법)3-10비타민B6
3-10-1비타민B6(제1법)- 50 -1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
------------------ 충전제
------------------------
-----------
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-11-2엽산(제2법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)3-11-2엽산(제2법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
------------------ 충전제
------------------------
-----------
2.3(현행과같음)- 51 -3～5(생략) 3～5(현행과같음)
3-13-2비오틴(제2법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.4(생략)
2.2.5칼럼
2.2.5.1(생략)
2.2.5.2농축컬럼:CapcellpakC18
UG120V(안지름2.0mm,길이
35mm,충진재octadecylsilica)
또는이와동등한것
2.2.5.3분석컬럼:CapcellpakC18
UG120V(안지름1.5mm,길이
250mm,충진재octadecylsilica)
또는이와동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-13-2비오틴(제2법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.4(현행과같음)
2.2.5칼럼
2.2.5.1(생략)
2.2.5.2----------------------
----------------------
------충전제------------
-------------------.
2.2.5.3----------------------
----------------------
------충전제------------
-------------------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-24N-아세틸글루코사민
1.(생략)3-24N-아세틸글루코사민
1.(현행과같음)- 52 -2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4NH2P-50(안지름4.6mm,길이
250mm,충진재polyamine
bondedpolymergel)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
--------충전재----------
-------------------------
----------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-26-2식이섬유(제2법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4Sugar-Pak(안지름6.5mm,길이
300mm,충진재8%cross-linked
resin/calciumionicform)또는
이와동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-26-2식이섬유(제2법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
------충전제-------------
---------------------------
----------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)- 53 -3-28-3콘드로이친황산(제3법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4음이온교환수지칼럼(안지름4.6
mm,길이250mm,충진재:
강염기성암모늄음이온교환수
지로코팅된실리카겔),
Hypercil-SAX칼럼또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-28-3콘드로이친황산(제3법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
---------------- 충전제-
------------------------
------------------------
------------------------
-------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-32지방산
3-32-2지방산(제2법)
1.시험방법의요약
본시험법은0.5N메탄올성수산화
나트륨과14%트리플루오르보란
메탄올을이용하여메틸에스테르화
시켜분석하는방법으로내부표준
물질의반응면적과비교하여정량3-32지방산
3-32-2지방산(제2법)
1.시험방법의요약
-------유지를메탄올성수산화
나트륨용액으로처리하여알칼리염을
만든후트리플루오로보란메탄올
용액을가하고가열하여에스테르화
한다.생성된지방산에스테르를이소- 54 -할수있다.
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2분석장비
2.2.1∼2.2.3(생략)
2.2.4100%dimethylpolysiloxane
(길이50m,안지름0.32mm,
필름두께0.5μm)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1각종지방산
3.2내부표준물질
3.2.1C11:0triundecanoicacidmethylester
3.3시약
3.3.1∼3.3.2(생략)
3.3.3헵탄(Heptane,GC급)또는이소
옥탄(Isooctane,GC급)
3.3.4∼3.3.6(생략)
3.4시액의조제
3.4.1∼3.4.2(생략)옥탄에녹여분석을행한다.개별
지방산의함량및대표적인지방산의
합을계산한다.
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2분석장비
2.2.1∼2.2.3(현행과같음)
2.2.4poly(biscyanopropylsiloxane)
(100m×0.25mm,0.2μm)
------------------.
2.3(현행과같음)
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1분석하고자하는지방산의메틸
에스테르
3.2내부표준물질
3.2.1undecanoicacidmethylester
3.3시약
3.3.1∼3.3.2(현행과같음)
3.3.3이소옥탄(Isooctane,GC급)
3.3.4∼3.3.6(현행과같음)
3.4시액의제조
3.4.1∼3.4.2(현행과같음)- 55 -3.4.3C11:0triundecanoicacidmethyl
ester1,000 μg/mL이되도록
이소옥탄에녹인다.
3.4.4(생략)
4.시험과정
4.1표준용액의조제
4.1.1지방산표준물질을헵탄에녹여
1,000 μg/mL가되게한다.
4.1.2[3.4.3]용액과1:1로혼합하여
표준용액으로사용한다(500μg/mL).
4.2시험용액의조제
4.2.1∼4.2.2(생략)
4.2.3이어100℃heatingblock에서
5분간가온한다.(<신설>)
4.2.4이를냉각한후14%트리플루
오르보란메탄올용액2mL을가
하고다질소를충진한후뚜
껑을덮고혼합하고100℃에서
30분간가열한다(<신설>).
4.2.5이어30～40℃로냉각하여이소3.4.3내부표준용액：triundecanoin(C11:0)
0.01g을이소옥탄용액에녹여
10mL가되게한다(1mg/mL).
3.4.4(현행과같음)
4.시험과정
4.1표준용액의제조
4.1.1분석하고자하는지방산메틸
에스테르와내부표준물질undecanoic
acid메틸에스테르를이소옥탄에
녹여각각0.5mg/mL이되도록
조제한다.
<삭제>
4.2시험용액의제조
4.2.1∼4.2.2(현행과같음)
4.2.3------------------------
---------------. (이때공액
리놀레산의경우,70℃에서가
온한다).
4.2.4------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
---------(이때공액리놀레산의
경우,70℃에서가온한다).- 56 -옥탄1mL을가하여질소충진
후30초간격렬히진탕한다.
4.2.6즉시염화나트륨용액5mL을
가하고질소충진후뚜껑을
덮고진탕한다.
4.2.7상온으로냉각한후수층으로
부터분리된이소옥탄층을새
유리튜브에넣고질소를불어
넣은후즉시뚜껑을덮는다.
4.2.8수층에이소옥탄1mL를추가
로넣고추출한후이소옥탄
층을4.2.7과합한다.
4.2.9이액을무수황산나트륨으로
탈수하고질소를충진한후분
석전까지밀봉한다.
※공액리놀레산의경우70～80℃
에서가열한다.
5.분석및계산
5.1기기분석
표1.크로마토그래프조건(예)4.2.5------------------------
------------------- 질소를
불어넣은후뚜껑을덮고----
---------------.
4.2.6---포화염화나트륨용액---
------질소를불어넣은----
-----------.
4.2.7------------------------
------------------- 무수
황산나트륨으로탈수하여시
험용액으로한다.
<삭제>
<삭제>
5.분석및계산
5.1기기분석
표1.크로마토그래프조건(예)- 57 -항목 조건
주입부 온도 250℃
칼럼 온도180℃(1분) → 10℃/분 
→ 230℃(1분)
검출기 온도 250℃
캐리어 가스 및 
유량질소, 3.0 mL/분
Split ratio 10 : 1
5.2계산
5.2.1지방산함량(mg/g)
=STc×(SAfa/STfa)×(STis/SAis)
×(V/S)×1.0067×fFAi×(1/1,000)
STc:표준물질용액의농도(μg/mL)
SAfa:시험용액내표준물질의
피크면적
STfa:표준물질의피크면적
STis:표준물질용액내
내부표준물질피크면적
SAis:시험용액내내부표준물질
피크면적
V:최종희석용액(mL)
S:시료채취량(g)
1.0067:내부표준물질(C11:0)
트리글리세라이드로부터
지방산으로의전환계수
(단공액리놀레산FFA의
경우적용하지않음)
fFAi:지방산메틸에스테르로부터
지방산으로의전환계수(표1)
1/1,000:단위환산계수
<신설>항목 조건
주입부 온도 225℃
칼럼 온도100℃(4분) → 3℃/분 
→ 240℃(15분)
검출기 온도 285℃
캐리어 가스 및 유량 헬륨, 0.75 mL/분
Split ratio 200 : 1
5.2계산
5.2.1시험용액및표준용액에서얻은
각지방산의피크면적,내부
표준물질의피크면적으로부터
다음과같이정량을한다.
5.2.1.1개별지방산메틸에스테르의
함량계산
WFAMEi =Pti×WtC11:0×1.0067
PtC11:0×Ri
WFAMEi:지방산i의메틸에스테르로서
의양(mg)
Pti:시험용액중지방산i의피크면적
WtC11:0:시험용액중내부표준물질(C11:0
triundecanoin)첨가량(mg)
1.0067:내부표준물질(C11:0triundecanoin)의
트리글리세라이드로부터지방산
메틸에스테르로의전환계수
PtC11:0:시험용액중내부표준물질(undecanoic
acidmethylester)의피크면적
5.2.1.2지방산i의반응계수(response- 58 -
<신설>
표1.지방산메틸에스테르로부터
지방산으로의전환계수factor,Ri)의계산
※  Ri=Psi×WC 11:0
PsC11:0 Wi
Psi:표준용액중지방산메틸에스
테르i의피크면적
PsC11:0:표준용액중내부표준물질
(undecanoicacidmethyl
ester)의피크면적
WC11:0:표준용액중내부표준물질
(undecanoicacidmethyl
ester)의양(mg)
Wi:표준용액중지방산메틸에스
테르i의양(mg)
※공액리놀레산의경우리놀레산
메틸에스테르의반응계수를사용
할수있다.
5.2.1.3개별지방산및지방함량계산
지방산 (g/100 g) =WFAi×100
Wspl
WFAi=WFAMEi×fFAi
fFAi:지방산i(메틸에스테르로서)의
지방산전환계수(표1.)
Wspl:검체량(mg)
표1.지방산메틸에스테르로부터지
방산으로의전환계수- 59 -지방산명 fFAi
12:0 0.9346
14:0 0.9421
14:1 0.9417
16:0 0.9481
16:1 0.9477
18:0 0.9530
18:1 0.9521
18:2 0.9524
18:3 0.9520
18:4 0.9517
20:5 0.9557
22:5 0.9593
22:6 0.9590지방산명 fFAi
C4:0 Butyric acid 0.8627
C6:0 Caproic acid 0.8923
C8:0 Caprylic acid 0.9114
C10:0 Capric acid 0.9247
C11:0 Undecanoic acid 0.9300
C12:0 Lauric acid 0.9346
C13:0 Tridecanoic acid 0.9386
C14:0 Myristic acid 0.9421
C14:1 Tetradecenenoic 0.9417
C15:0 Pentadecanoic acid 0.9453
C15:1 Pentadecenoic acid 0.9449
C16:0 Palmitic acid 0.9481
C16:1 Hexadecenoic acid 0.9477
C17:0 Margaric acid 0.9507
C17:1 Margaroleic acid 0.9503
C18:0 Stearic acid 0.9530
C18:1 Octadecenoic acid 0.9527
C18:2 Octadecadienoic acid 0.9524
C18:3 Linolenic acid 0.9520
C20:0 Arachidic acid 0.9570
C20:1 Eicosenic acid 0.9568
C20:2 Eicosadienoic acid 0.9565
C20:3 Eicosatrienoic acid 0.9562
C20:4 Arachidonic acid 0.9560
C20:5 Eicosapentaenoic acid 0.9557
C21:0 Heneicosanoic acid 0.9588
C22:0 Behenic acid 0.9604
C22:1 Docosaenoic acid 0.9602
C22:2 Docosadienoic acid 0.9600
C22:3 Docosatrienoic acid 0.9598
C22:4 Docosatetraenoic acid 0.9595
C22:5 Docosapentaenoic acid 0.9593
C22:6 Docosahexaenoic acid 0.9590
C23:0 Tricosanoic acid 0.9620
C24:0 Lignoceric acid 0.9563
C24:1 Nervonic acid 0.9632- 60 -3-36구연산
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-36구연산
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
----------------- 충전제
--------------------------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-38식물스테롤
1.(생략)
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1환저플라스크
2.1.2분액여두
2.1.3감압농축기3-38식물스테롤
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1감압농축기
2.1.2자석교반-가열기
2.1.3교반기(Vortexmixer)- 61 -<신설>
<신설>
2.2분석장비
2.2.1(생략)
2.2.2불꽃이온화검출기(FlameIonization
Detector)
2.2.3∼2.2.4(생략)
2.3(생략)
3.표준물질및일반시약
3.1(생략)
3.2일반시약
3.2.1에탄올(Ethanol)
3.2.2∼3.2.4(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
3.3내부표준물질
3.3.1디히드로콜레스테롤(Dihydrocholesterol)
분자식:C27H48O,분자량:388.67,
CASNo.:80-97-72.1.4분석저울:0.0001g까지측정이
가능한것
2.1.5초자기구:삼각플라스크(250mL),
환저플라스크(250mL),피펫,
메스실린더,분획여두(500mL)
2.2분석장비
2.2.1(현행과같음)
2.2.2---------------( FlameIonization
Detector,FID)
2.2.3∼2.2.4(현행과같음)
2.3(현행과같음)
3.표준물질및일반시약
3.1(현행과같음)
3.2일반시약
3.2.1톨루엔:잔류농약급또는이와
동등한것
3.2.2∼3.2.4(현행과같음)
3.2.5클로로포름(Chloroform):기체
크로마토그래피용
3.3.6무수황산나트륨
3.3.7유리솜
3.3내부표준물질
3.3.15α-콜레스탄(5α-Cholestane)
분자식:C27H48,분자량:372.67,
CASNo.:481-21-0- 62 -
3.4시액의조제
3.4.10.1N에탄올성수산화칼륨
수산화칼륨5.61g을소량의
증류수에녹인후에탄올을
가하여1L로한다.
3.4.2내부표준용액
디히드로콜레스테롤을클로로포름에
녹여5mg/mL이되도록한다.
4.시험과정
4.1표준용액의조제
4.1.14종의표준물질을각각25mg씩
정밀하게달아내부표준용액25
mL에녹여만든다(1mg/mL).
4.2시험용액의조제
4.2.1베타-시토스테롤,브라시카스
3.4시액의제조
3.4.15α-콜레스탄내부표준물질용액
1mg/mL,5α-콜레스탄20mg을
클로로포름에녹여20mL로한다.
3.4.2수산화칼륨에탄올용액
3.4.2.150%(w/w):수산화칼륨500g을
증류수에녹여1L로한다.
3.4.2.21M:수산화칼륨56g을
증류수에녹여1L로한다.
3.4.2.30.5M:1M수산화칼륨
용액을증류수로희석하여
조제한다.
4.시험과정
4.1표준용액의제조
4종의표준물질을각각10mg을
정밀하게달아내부표준용액10mL에
녹여표준용액으로한다(1mg/mL).
4.2시험용액의조제
4.2.1비누화과정- 63 -테롤,스티그마스테롤,캄페스
테롤의합계량으로서25mg～
100mg이함유되도록적당량
의시료를환저플라스크에정
밀하게단다.4.2.1.1베타-시토스테롤,브라시카
스테롤,스티그마스테롤,캄
페스테롤의합계량으로서
25mg～100mg이함유되도록
적당량의시료를삼각플라스크에
취한다.
4.2.1.2자석막대를삼각플라스크에
넣고95%에탄올40mL과
50%수산화칼륨용액8mL을
가한다(95%에탄올40mL
중일정량을50%수산화칼륨
용액첨가후잔류물세척에
사용하여플라스크와콘덴서가
같이붙어서떨어지지않는
것을방지할수있다.)
4.2.1.3콘덴서를설치하고자석교반
-가열기를이용하여교반하면서
가열하여70±10분간환류시킨다.
비누화를위해시료를지속적
으로관찰하면서덩어리가생길
경우유리봉으로분산시키거나
교반하면서50%수산화칼륨용액을
추가하여시험용액을교반한다.
4.2.1.4환류가완료되면가열기를끄고
교반중에콘덴서의상부를
통해95%에탄올60mL을
첨가하고15분간방치한다.- 64 -4.2.2에탄올40mL와0.1N에탄올성
수산화칼륨용액10mL를넣고
95℃에서1시간동안검화시킨다.4.2.1.5콘덴서를플라스크에서제거하고
플라스크에마개를막아실온으로
냉각시킨후12시간이상(24시간
이내)동안정치하여시험용액을
안정화한다.
4.2.2추출
4.2.2.1비누화가끝난시험용액을
교반하면서톨루엔100mL을
첨가하고마개를하여30초
이상교반한다.
4.2.2.2이를세척과정없이500mL
분액여두로옮기고1M수산화
칼륨용액110mL을넣고10초간
강렬하게진탕하여정치하고
분리된아래층을버린다.
4.2.2.30.5M수산화칼륨용액40mL을
분액여두에넣고분액여두를
천천히내용물이소용돌이가
생기도록10초간섞어준후
정치하여분리된아래층을
버린다.
4.2.2.4톨루엔층을증류수40mL로
천천히분액여두를돌려주며
수세한후정치하여분리된
아래층을버리고수세과정을
3회이상반복한다.이때수세
과정이반복될수록더욱강렬- 65 -하게진탕하며,만약에멀젼이
발생하면소량의95%알코올을
첨가하여분액여두의내용물이
회오리가생기도록섞어준후
정치하여층을분리한다.톨루엔
층이맑게보일때까지수세
과정을계속한다.
4.2.2.5유리솜과약20g의무수황
산나트륨이채워진유리깔대
기를통해수세한톨루엔
층을약2g무수황산나트
륨이채워진삼각플라스크
로흘려주어탈수한다.
4.2.2.6삼각플라스크에마개를막고
15분이상정치한다.이때
마개의막음상태가완벽하더
라도24시간이상방치하여
서는안된다.
4.2.2.7추출한톨루엔층20mL을
250mL환저플라스크에
취하고이를50±3℃에서감
압농축하여건고하고잔류
물에아세톤약3mL을가
한후다시감압농축하여
완전건고한다.
4.2.2.8잔류물을5mL내부표준용
액에녹여여과한뒤시험- 66 -4.2.3검화후냉각하고염화나트륨
포화용액50mL를넣어잘혼합한
후분액여두로옮겨헥산100mL
씩으로4회추출한다.
4.2.4이헥산층을감압농축하여내부
표준용액을25mL를넣은후
여과한다.
5.분석및계산
5.1기기분석
표1.가스크로마토그래프조건(예)
항목 조건
주입부온도 270℃
칼럼온도200(2분)-5℃/분-300℃(5
분)
검출기온도 300℃
캐리어가스및
유량질소,3.0mL/분
Splitratio 10:1
5.2계산
5.2.1개별식물스테롤함량(mg/g)
=STc×(SAfa/STfa)×
(STis/SAis)×V/S
STc:표준물질용액의농도(mg/mL)
SAfa:시험용액내표준물질의피크면적
STfa:표준물질의피크면적
STis:표준물질용액내내부표준물질
피크면적용액으로한다.
<삭제>
<삭제>
5.분석및계산
5.1기기분석
표1.가스크로마토그래프조건(예)
항목 조건
주입부온도 270℃
칼럼온도200(2분)→5℃/분→
300℃(5분)
검출기온도 300℃
캐리어가스및
유량질소,3.0mL/분
Splitratio 10:1
5.2계산
5.2.1개별식물스테롤함량(mg/g)
=STc×(SAfa/STfa)×
(STis/SAis)×5×V/S
STc:표준물질용액의농도(mg/mL)
SAfa:시험용액내표준물질의피크면적
STfa:표준물질의피크면적
STis:표준물질용액내내부표준물질
피크면적- 67 -SAis:시험용액내내부표준물질피크면적
V:시험용액의전량(mL)
S:시료채취량(g)
5.2.2(생략)SAis:시험용액내내부표준물질피크면적
V:시험용액의전량(mL)
S:시료채취량(g)
5.2.2(현행과같음)
3-39유리식물스테롤
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2분석장비
2.2.1(생략)
2.2.2불꽃이온화검출기(FlameIonization
Detector)
2.2.3∼2.2.4(생략)
2.3(생략)
3.표준물질및일반시약
3.1∼3.2(생략)
3.3내부표준물질
3.3.1디히드로콜레스테롤(Dihydrocholesterol)
분자식:C27H48O,분자량:388.67,
CASNo.:80-97-73-39유리식물스테롤
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2분석장비
2.2.1(현행과같음)
2.2.2------------(-----------
Detector,FID)
2.2.3∼2.2.4(현행과같음)
2.3(현행과같음)
3.표준물질및일반시약
3.1∼3.2(현행과같음)
3.3내부표준물질
3.3.15α-콜레스탄(5α-Cholestane)
분자식:C27H48,분자량:372.67,
CASNo.:481-21-0- 68 -
3.4시액의조제
3.4.1내부표준용액
디히드로콜레스테롤을클로로포름에
녹여5mg/mL이되도록한다.
4.시험과정
4.1표준용액의조제
4.1.14종의표준물질을각각25mg씩
정밀하게달아내부표준용액25
mL에녹여만든다(1mg/mL).
4.2시험용액의조제
4.2.1∼4.2.2(생략).
4.2.3이헥산층을감압농축한다.
4.2.4내부표준용액을25mL를넣은
후여과한다.
5.분석및계산
5.1기기분석
표1.가스크로마토그래프조건(예)
3.4시액의제조
3.4.15α-콜레스탄내부표준물질용액
1mg/mL,5α-콜레스탄20mg을
클로로포름에녹여20mL로한다.
4.시험과정
4.1표준용액의제조
4.1.1----------------- 10mg-
--------------------- 10
mL-------------------.
4.2시험용액의제조
4.2.1∼4.2.2(현행과같음)
4.2.3추출한헥산층20mL를-----.
4.2.4------------5mL-------
--------------.
5.분석및계산
5.1기기분석
표1.가스크로마토그래프조건(예)- 69 -항목 조건
주입부온도 270℃
칼럼온도200(2분)-5℃/분-300℃(5
분)
검출기온도 300℃
캐리어가스및
유량질소,3.0mL/분
Splitratio 10:1
5.2계산
5.2.1개별식물스테롤함량(mg/g)
=STc×(SAfa/STfa)×
(STis/SAis)×V/S
STc:표준물질용액의농도(mg/mL)
SAfa:시험용액내표준물질의피크면적
STfa:표준물질의피크면적
STis:표준물질용액내내부표준물질
피크면적
SAis:시험용액내내부표준물질피크면적
V:시험용액의전량(mL)
S:시료채취량(g)
5.2.2(생략)항목 조건
주입부온도 270℃
칼럼온도200(2분)→5℃/분→
300℃(5분)
검출기온도 300℃
캐리어가스및
유량질소,3.0mL/분
Splitratio 10:1
5.2계산
5.2.1개별식물스테롤함량(mg/g)
=STc×(SAfa/STfa)×
(STis/SAis)×5×V/S
STc:표준물질용액의농도(mg/mL)
SAfa:시험용액내표준물질의피크면적
STfa:표준물질의피크면적
STis:표준물질용액내내부표준물질
피크면적
SAis:시험용액내내부표준물질피크면적
V:시험용액의전량(mL)
S:시료채취량(g)
5.2.2(현행과같음)
3-4310-히드록시-2-데센산(10-HDA)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)3-4310-히드록시-2-데센산(10-HDA)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)- 70 -2.2.4옥타데실실릴화한한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)2.2.4------------------------
----------------- 충전제
--------------------------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-44총(-)-Hydroxycitricacid
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-44총(-)-Hydroxycitricacid
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
----------------- 충전제
--------------------------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-45루테인
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)3-45루테인
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)- 71 -2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4silica칼럼(안지름4.6mm,길이
250mm,충진재silicagel,5μm)
또는이와동등한것
2.2.5(생략)
2.3(생략)
3～5(생략)2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
-----충전제-------------
-----------------.
2.2.5(현행과같음)
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-50파라(ρ)-쿠마르산(Coumaricacid),계
피산(Cinamicacid)확인
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-50파라(ρ)-쿠마르산(Coumaricacid),계
피산(Cinamicacid)확인
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
----------------- 충전제
--------------------------
--------------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-51다이드제인및제니스테인확인3-51다이드제인및제니스테인확인- 72 -1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
----------------- 충전제
--------------------------
--------------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-52총모나콜린K
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)3-52총모나콜린K
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
----------------- 충전제
--------------------------
--------------.
2.3(현행과같음)- 73 -3～5(생략) 3～5(현행과같음)
3-53코엔자임 Q10
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.2(생략)
2.2.3옥타데실실릴화한한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-53코엔자임 Q10
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.2(현행과같음)
2.2.3------------------------
----------------- 충전제
--------------------------
--------------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-54대두이소플라본
3-54-1대두이소플라본(제1법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)3-54대두이소플라본
3-54-1대두이소플라본(제1법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)- 74 -2.2.4옥타데실실릴화한한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)2.2.4------------------------
----------------- 충전제
--------------------------
--------------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-54-2대두이소플라본(제2법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-54-2대두이소플라본(제2법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
----------------- 충전제
--------------------------
--------------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-55진세노사이드
1.(생략)3-55진세노사이드
1.(현행과같음)- 75 -2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
----------------- 충전제
--------------------------
-----------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)
3-57-2총페오포르바이드(제2법)
1.(생략)
2.장비와재료
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충진재
octadecylsilica)또는이와
동등한것
2.3(생략)
3～5(생략)3-57-2총페오포르바이드(제2법)
1.(현행과같음)
2.장비와재료
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4------------------------
----------------- 충전제
--------------------------
-----------.
2.3(현행과같음)
3～5(현행과같음)