식품의약품안전처 공고제2017-124호
- 1 -식품의약품안전처 공고제2017-124호
축산물위생관리법
제4조제2항의규정에따라
축산물의가공기준및
성분규격
을다음과같이개정함에있어개정의취지와내용을국민에게
미리알려의견을듣고자
행정절차법
제46조의규정에의하여다음과
같이공고합니다.
 2017년3월13일
 식품의약품안전처장
축산물의가공기준및성분규격
일부개정고시(안)행정예고
1.개정이유
불량달걀을유통·판매하거나가공품의원료로사용하는등위반사례가
지속되고있고,달걀의신선도등에대한관심이증대됨에따라안전한신선란
공급을위해달걀의세척기준및보존·유통기준을신설하고,알가공품의
가공기준을개정하여국민에게안전한축산물을공급하고자함
냉동자연치즈,가공치즈,버터류를해동판매할수있도록보존및유통
기준을합리적으로개선하고자함
미생물의신속한검사를위해분자생물학적검사법을도입하고,식용란의
살모넬라시험법을개정하여검사의효율성및신속성을제고하고자함
현행고시에서원료알과식용란의구분이모호하므로원료알관련용어를
개정하여그의미를명확히하고자함- 2 -2.주요내용
가.달걀의세척및보관방법신설[안제2.7.자,차]
1)달걀의신선도및위생확보를위하여세척기준및보존·유통기준마련필요
2)달걀세척시,차아염소산나트륨이함유된30℃이상이면서품온보다
5℃이상의깨끗한물로세척하도록하고,세척란및냉장보관중인달걀은
냉장에서보존·유통하도록규정신설
3)달걀의세척방법과보존유통온도를신설하여국민에게안전한식품을
공급하고자함
나.달걀의유통기간산출기준등개정[안제2.7.러,제2.7.머]
1)유통기간산출기준의합리적설정필요
2)혼합또는단순처리제품에대한유통기한설정시점을명확히하기
위해문구개정
3)달걀을장기간냉장보관한후,포장일자를유통기간산출시점으로하는
현행규정에따라포장일로부터유통기간을표시하고신선란인것처럼
유통하는것을방지하기위해달걀의유통기간산출시점을‘산란일자
(채집일자)’로하도록단서조항신설
4)냉동자연치즈,가공치즈,버터류의해동판매허용
5)축산물에대한보존및유통기준을합리적으로개정하여소비자의편
의를제고하고국민에게안전한식품을제공하고자함- 3 -다.알가공품의가공기준개정[안제2.1.가.(9),제3.3.(3)(가),제3.
3.(3)(다),제3.3.(3)(라),제3.3.(3)(차),제3.3.(3)(타)]
1)위생상태가불량한알가공품이유통되지않도록알가공품의제조·가
공기준개정필요
2)본규정에서정하는원료알이알가공품의제조·가공에사용하는식용
란임을명확히하도록원료알의보관기준을알가공품의가공기준으로
이동
3)가공용식용란의세척기준개정및보관기준신설
4)할란한상태의알내용물은쉽게부패·변질될수있으므로,5℃이하에서
72시간이내에사용하도록규정신설
5)알내용물채취시난각표면에묻어있는오염물질등이알내용물에
교차오염되는것을방지하기위해원심분리또는압착방법을통한
알내용물채취금지규정신설
6)알가공품의제조·가공기준을개정하여위생상안전성을확보함으로써
국민에게안전한식품을공급하고자함
라.미생물시험법신설및개정[안제1.1.도,제4.Ⅱ.9.가.(5)(다),
제4.Ⅱ.9.가.(5)(라),제4.Ⅱ.9.가.(5)(마),제4.Ⅱ.9.파.(가)
4)및안제4.Ⅱ.9.어]
1)식중독균등미생물의신속한검출을위해분자생물학적시험방법- 4 -도입필요
2)분자생물학적방법을사용할수있도록총칙및일반사항개정
3)식용란의살모넬라검출을위한관련시험법개정
4)축산물중미생물시험법을 개정하여검사신뢰도및효율성을제고
함으로써국민에게안전한식품을공급하고자함
마.용어개정[안제2.1.가.(10),,제3.3.(3)(카),제4.Ⅱ.9.파.(3)
(가)2),제4.Ⅱ.9.파.(3)(가)3),제4.Ⅱ.9.거.(3)(가)2),제4.
Ⅱ.9.거.(3)(가)3),제4.Ⅲ,제4.Ⅲ.3,제4.Ⅲ.3.다.(1)(나)]
‘원료알’과‘식용란’의명확히전달될수있도록관련용어개정
3.의견제출
축산물의가공기준및성분규격
일부개정고시(안)에대하여의견이
있는단체또는개인은2017년4월2일까지다음사항을기재한의견서를식품
의약품안전처(우편번호:363-700,주소:충청북도청주시흥덕구오송읍오
송생명2로187(연제리643번지)오송보건의료행정타운 식품의약품안전처 ,참조:
식품기준과,전화043-719-2414,2420,팩스043-719-2400)에게제출하여주시기
바랍니다.- 5 -가.예고사항에대한항목별의견(찬․반여부와그이유)
나.성명(단체의경우단체명과그대표자의성명),주소및전화번호
다.기타참고사항- 6 -식품의약품안전처 고시제2017-호
축산물위생관리법
제4조제2항의규정에따른
축산물의가공기준및
성분규격
(식품의약품안전처 고시제2016-130호,2016.12.5.)을다음과같이
개정고시합니다.
2017년월일
식품의약품안전처장
축산물의가공기준및성분규격일부개정고시(안)
축산물의가공기준및성분규격일부를다음과같이개정한다.
제1.1.도중“Kit”를“키트(kit)또는장비”로한다.
제2.1.가.(9)를다음과같이한다.
원유는0～10℃에,원료육은냉장시5℃이하,냉동시는-18℃이하에서
보존하여야한다.
제2.1.가.(10)중“원료알”을“식용란”으로한다.- 7 -제2.7.중자를다음과같이한다.
자.식용란은가능한한냉소(0∼15℃)에,알가공품은10℃이하(다만,액란
제품은5℃이하)에서냉장또는냉동보관·유통하여야한다.다만,
건조,당장,염장등부패를막을수있도록가공된제품은냉장또는
냉동하지않을수있으며,냉장보관중인식용란은냉장으로보관·유통
하여야한다.
제2.7.중종전의차를카로하고차를다음과같이신설한다.
차.달걀을세척하는경우,30℃이상이면서품온보다5℃이상의깨끗한
물(150ppm이상의차아염소산나트륨함유또는이와동등이상의
살균효력이있는물)로세척하여야하고,세척한달걀은냉장으로보
존·유통하여야한다.
제2.7.중종전의카,타,파,하,거,너.를각각타,파,하,거,너,더.로
한다.
제2.7.중종전의더를러로하고러를다음과같이한다.
러.“유통기간”의산출은포장완료(단,포장후가공공정을거치는제품은
최종공정을마친)시점으로하고선물세트와같이유통기한이상이한- 8 -제품이혼합된경우와단순절단,식품등을이용한단순결착등원료
제품의저장성이변하지않는단순가공처리만을하는제품은유통기한
이먼저도래하는원료제품의유통기한을최종제품의유통기한으로
정하여야한다.다만,달걀은‘산란일자(채집일자)’를유통기간산출시점
으로한다.
제2.7.중러를머로하고후단을다음과같이신설한다.
다만,제조업자가냉동제품인자연치즈,가공치즈,버터류에냉동포장완료
일자,해동일자,해동일로부터유통조건에서의유통기한(냉동제품으로서의
유통기한이내)을별도로표시하여해동시키는경우는제외한다.
제2.7.중종전의머를각각버로한다.
제3.3.(3)중종전의(가)를(나)로하고(가)를다음과같이신설한다.
(가)실금란,오염란,연각란은입고후24시간이내에가공처리(단,즉시
10℃이하에서보관하는경우72시간이내에가공)하여야하고,정상란을
3일이상보관할경우10℃이하에서보관하여야한다.
제3.3.(3)중종전의(나)를(다)로하고(다)를다음과같이한다.
(다)세척하지않은식용란을사용하는경우에는30℃이상이면서품온보다
5℃이상의깨끗한물(150ppm이상의차아염소산나트륨함유또는- 9 -이와동등이상의살균효력이있는물)로세척하여야한다.
제3.3.(3)중종전의(다),(라),(마),(바),(사)를각각(마),(바),(사),
(아),(자)로하고(라)를다음과같이신설한다.
(라)할란을한상태의식용란은5℃이하로냉각하여야하며,72시간을
초과하여보관하여서는아니된다.
제3.3.(3)중종전의(아)를(차)로하고(차)를다음과같이한다.
알가공품의제조·가공에사용하는식용란은직사광선을피하여
냉소(0∼15℃)에서보관하여야하고,냉장보관할때에는알가공품과
구획하여보관하여야한다.
제3.3.(3)중(자)를(카)로하고“원료알”을“식용란”으로한다.
제3.3.(3)에(타)를다음과같이신설한다.
(타)식용란은압착이나원심분리등의방법으로내용물을채취하여서는
아니된다.
제4.Ⅱ.9.가.(5)(다)를다음과같이한다.
(다)균의확인시험에서각종생화학시험은국제적으로공인된키트(kit)
또는장비를이용할수있다.또한,필요한경우혈청형확인시험,- 10 -독소유전자확인시험,상동성분석시험을추가할수있다.
①혈청형확인시험:비브리오혈청형확인(O1,O139등),장출혈성대장
균혈청형확인(O157,O111,O26등),살모넬라혈청형확인
(SalmonellaEnteritidis,S.Typhimurium등)등
②독소유전자확인시험:장출혈성대장균(VT1,VT2)등
③상동성분석시험:PFGE(Pulsed-FieldGelElectrophoresis)등
제4.Ⅱ.9.가.(5)(라)를다음과같이신설한다.
(라)식품의약품안전처장이 필요하다고인정하는경우에는식중독균증균
배양후PCR등분자생물학적시험법을활용한스크리닝시험을
통하여불검출로판정할수있다.다만,유전자가확인된경우분리
배양후생화학적검사를통하여해당식중독균으로동정되면검출로
판정한다.
제4.Ⅱ.9.가.(5)(마)를다음과같이신설한다.
(마)발효제품에서균주확인이필요한경우차세대염기서열분석기를활용한
유전체분석(전장유전체,메타게놈등)을할수있다.
제4.Ⅱ.9.파.(3),(가),2)중“원료알”을“식용란”으로한다.
제4.Ⅱ.9.파.(3),(가),3)중“원료알”을“식용란”으로한다.- 11 -제4.Ⅱ.9.파.(3)(가)4)를다음과같이한다.
식용란:식용란20개를채취하여제4.축산물시험방법Ⅲ.원유·식육·식
용란의시험법3.식용란의시험법다.세균학적시험법(1)시료채취및
조제에따라소독한후말린식용란을깨서4L용량의멸균비이커
또는멸균비닐백등적정한용량의멸균용기에넣어서준비한다음(달
걀을깰때는위생장갑을껴야하며샘플마다위생장갑을바꾸어준
다.)멸균도구등을이용하여난황과난백이섞이도록균질화를시
킨다.준비된시료에2L의멸균TSB를섞어35℃에서24±2시간동
안증균한다.1차배양액은1)축산물가공품및식육의2차증균과정
을따라증균시킨다.
제4.Ⅱ.9.거.(3),2)중“원료알”을“식용란”으로한다.
제4.Ⅱ.9.거.(3),3)중“원료알”을“식용란”으로한다.
제4.Ⅱ.9.중어를다음과같이신설한다.
어.식중독균에대한분자생물학적시험법
(1)살모넬라시험법
(가)주형유전자준비
증균배양액(1∼2mL)을취한후,10분간끓여원심분리하고,상등액
10∼20μL를취하여시료로사용한다.
※상기의방법과동등이상인유전자추출키트및장비를사용할수- 12 -있다.
(나)Real-timePCR프라이머및프로브염기서열
(다)Real-timePCR반응액조제
1)PowerAmpTMReal-timePCRMasterMix와동등이상의시약을사
용할수있다.유전자 프라이머/프로브 염기서열(5‘→3’)
invAinvA-F
invA-R
invA-P5‘-GAATCCTCAGTTTTTCAACGTTTC-3’
5‘-CGAATTGCCCGAACGTGGCGA-3’
5‘-FAM-CTCTTTCGTCTGGCATTATCG
ATCAGTACCAG-BHQ1-3’
성분 최종농도Stock용액농도1회용량
MasterMix1)1× 2× 10μL
invA프라이머(F)0.5pmol/μL10pmol/μL1μL
invA프라이머(R)0.5pmol/μL10pmol/μL1μL
invA프로브(P)0.1pmol/μL2pmol/μL1μL
주형DNA - - 5μL
증류수 - - 2μL
총량 - - 20μL- 13 -(라)Real-timePCR반응조건
PCR반응조건은50℃에서2분간유지및95℃에서10분간방치하여
최초변성이일어나게한후,95℃에서15초간변성시키고,60℃에서
1분간유전자결합및신장반응이일어나는것을1회로하여총40회
의증폭반응을한다.
*상기PCR조건이최적이아닌경우변형하여사용할수있다.
(마)결과확인
PCR반응에서증폭곡선이확인되는경우살모넬라가검출된것으로
판정한다.다만,음성대조군에서증폭곡선이확인되거나양성대조군에
서증폭곡선이확인되지않을경우재시험하여야한다.
제4.Ⅲ.원유·식육·원료알의시험법중“원료알”을“식용란”으로한다.
제4.Ⅲ.3.원료알의시험법중“원료알”을“식용란”으로한다.
제4.Ⅲ.3.다.(나)중“원료알”을“식용란”으로한다.구분 온도 시간반응회수
50℃2분1회
초기변성
(Initialdenaturation)95℃10분1회
변성(denaturation)95℃15초
40회결합(annealing)/
신장(extension)60℃1분- 14 -부칙<제2017-호,2017...>
제1조(시행일)이고시는고시한날부터시행한다.다만,제2.7.머의개정
규정은2017년7월1일부터시행하고제2.7.자및차,제3.3.(3)(다)
의개정규정은2018년1월1일부터시행한다.
제2조(적용례)이고시는이고시시행후제조·가공또는수입(선적일기준)
하는축산물부터적용한다.
제3조(경과조치)이고시시행당시접수되어검사가진행중인사항에대하여는
종전의규정을적용한다.- 15 -
현행 개정안
제1.총칙
1.일반원칙
가.∼노.(생략)
도.이축산물의가공기준및성
분규격에정하여진가공기준
및성분규격에대한적·부판
정은제4.축산물시험방법에
서규정한시험방법으로실시
하여판정하는것을원칙으로
한다.다만,제4.축산물시험
방법에서규정한시험방법보
다더정밀하다고인정된때
에는그방법을사용할수있
고,특히미생물및독소등
에대한시험에는상품화된
Kit를사용할수있으나,그
결과에대하여의문이있다고
인정될때에는규정한방법에
의하여시험하고판정하여야
한다.
로.(생략)
2.(생략)
제2.축산물에대한공통기준및규격
1.원료등의구비요건제1.총칙
1.일반원칙
가.∼노.(현행과같음)
도.-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
키트(kit)또는장비를----
-----------------------
-----------------------
-----------------------
---.
로.(현행과같음)
2.(현행과같음)
제2.축산물에대한공통기준및규격
1.원료등의구비요건- 16 -가.축산물원료
(1)∼(8)(생략)
(9)원료알은직사광선을피하여
냉소(0～15℃)에,원유는0～10℃에,
원료육은냉장시5℃이하,
냉동시는-18℃이하에서
보존하여야한다.
(10)축산물의제조
가공등에
사용하는원료알은부패된
알,산패취가있는알,
곰팡이가생긴알,이물이
혼입된알,혈액이함유된
알,내용물이누출된알,
난황이파괴된알(단,
물리적원인에의한것은
제외한다),부화를중지한
알,부화에실패한알등
식용에부적한알이
아니어야한다.
나.(생략)
2.∼6.(생략)
7.보존및유통기준
가.∼아.(생략)
자.식용란은가능한한냉소(0∼
15℃)에,알가공품은10℃이
하(다만,액란제품은5℃이가.축산물원료
(1)∼(8)(현행과같음)
(9)원유는0～10℃에,원료육은냉장
시5℃이하,냉동시는
-18℃이하에서보존하여야
한다.
(10)---------------------
------식용란--------
---------------------
---------------------
---------------------
---------------------
---------------------
---------------------
---------------------
---------------------
---------------------
---------------.
나.(현행과같음)
2.∼6.(현행과같음)
7.보존및유통기준
가.∼아.(현행과같음)
자.식용란은가능한한냉소(0∼
15℃)에,알가공품은10℃이
하(다만,액란제품은5℃이- 17 -하)에서냉장또는냉동보
관·유통하여야한다.다만,건
조,당장,염장등부패를막
을수있도록가공된제품은
냉장또는냉동하지않을수
있다.
<신설>
차.(생략)
카.∼너.(생략)
더.“유통기간”의산출은포장완
료(단,포장후가공공정을
거치는제품은최종공정을
마친)시점으로하고선물세
트와같이유통기한이상이
한제품이혼합된경우에는
유통기한이짧은제품을전체
제품의유통기한으로정하여야하)에서냉장또는냉동보
관·유통하여야한다.다만,건
조,당장,염장등부패를막
을수있도록가공된제품은
냉장또는냉동하지않을수
있으며,냉장보관중인달걀
은냉장으로보관·유통하여
야한다.
차.달걀을세척하는경우30℃이
상이면서품온보다5℃이상의
깨끗한물(150ppm이상의
차아염소산나트륨함유또
는이와동등이상의살균효
력이있는물)로세척하여야
하며,세척한달걀은냉장으
로보존·유통하여야한다.
카.(현행과같음)
타.∼ 더.(현행과같음)
러.----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
---------------- 경우와
단순절단,식품등을이용한
단순결착등원료제품의저- 18 -한다.원료제품의저장성이
변하지않는단순가공처리
만을하는제품은원료제품의
포장시점을유통기간산출
시점으로하여야한다.
러.냉동제품을해동시켜실온또
는냉장제품으로유통시켜서
는아니된다.(신설)
머.(생략)장성이변하지않는단순가공
처리만을하는제품은유통기
한이먼저도래하는원료제
품의유통기한을최종제품의
유통기한으로정하여야한다.
다만,달걀은산란일자(채집일
자)를유통기간산출시점으로
한다.
머.----------------------
----------------------
--------.다만,제조업자가
냉동제품인자연치즈,가공치
즈,버터류에냉동포장완료일
자,해동일자,해동일로부터
유통조건에서의 유통기한(냉
동제품으로서의 유통기한이
내)을별도로표시하여해동
시키는경우는제외한다.
버.(현행과같음)
제3.축산물별기준및규격
1.∼2.(생략)
3.알가공품
(1)∼(2)(생략)
(3)가공기준
<신설>제3.축산물별기준및규격
1.∼2.(현행과같음)
3.알가공품
(1)∼(2)(현행과같음)
(3)가공기준
(가)실금란,오염란,연각란은
입고후24시간이내에가- 19 -(가)(생략)
(나)난각이분변등에오염된
알을사용하는경우에는
깨끗이세척하는동시에
150ppm이상의차아염소
산나트륨으로살균또는
이와동등이상의효력이
있는방법으로살균하여야
한다.
<신설>
(다)∼(사)(현행과같음)
(아)원료용알을냉장보관할
때에는알가공품과
구획하여보관하여야한다.공처리(단,즉시10℃이하
에서보관하는경우72시
간이내에가공)하여야하
고,정상란을3일이상보
관할경우10℃이하에서
보관하여야한다.
(나)(현행과같음)
(다)세척하지않은식용란을사
용하는경우에는30℃이상
이면서품온보다5℃이상의
깨끗한물(150ppm이상의
차아염소산나트륨함유또
는이와동등이상의살균
효력이있는물)로세척하
여야한다.
(라)할란을한상태의식용란은
5℃이하로냉각하여야하
며,72시간을초과하여보
관하여서는아니된다.
(마)∼(자)(현행과같음)
(차)알가공품의제조·가공에
사용하는식용란은직사광선을
피하여냉소(0∼15℃)에서보관
하여야하고,냉장보관할
때에는알가공품과구획하여
보관하여야한다.- 20 -(자)혈반,육반이함유된원료알은
이를적절한방법으로
제거하고사용하여야한다.
<신설>(카)-------------- 식용란은
----------------------
--------------------.
(타)식용란은압착이나원심분리
등의방법으로내용물을
채취하여서는아니된다.
제4.축산물시험방법
Ⅰ.(생략)
Ⅱ.일반시험법
1.∼8.(생략)
9.미생물시험법
가.일반사항
(1)∼(4)(생략)
(5)기타사항
(가)∼(나)(생략)
(다)균의확인을위한각종생
화학적성상시험은API킷
트또는Vitek등의미생
물동정기를이용할수있
다.제4.축산물시험방법
Ⅰ.(현행과같음)
Ⅱ.일반시험법
1.∼8.(현행과같음)
9.미생물시험법
가.일반사항
(1)∼(4)(현행과같음)
(5)기타사항
(가)∼(나)(현행과같음)
(다)균의확인시험에서각종
생화학시험은국제적으로
공인된키트(kit)또는장
비를이용할수있다.또
한,필요한경우혈청형
확인시험,독소유전자
확인시험,상동성분석시
험을추가할수있다.
①혈청형확인시험:비브
리오혈청형확인(O1,- 21 -<신설>
<신설>O139등),장출혈성대장
균혈청형확인(O157,
O111,O26등),살모넬라
혈청형확인(Salmonella
Enteritidis,S.
Typhimurium등)등
②독소유전자확인시험:
장출혈성대장균(VT1,
VT2)등
③상동성분석시험:
PFGE(Pulsed-FieldGel
Electrophoresis)등
(라)식품의약품안전처장이 필요
하다고인정하는경우에는
식중독균증균배양후
PCR등분자생물학적시
험법을활용한스크리닝시
험을통하여불검출로판
정할수있다.다만,유전
자가확인된경우분리배
양후생화학적검사를통
하여해당식중독균으로
동정되면검출로판정한
다.
(마)발효제품에서균주확인이
필요한 경우- 22 -나.∼타.(생략)
파.살모넬라(Salmonellaspp.)
(1)∼(2)(생략)
(3)시험방법
(가)증균배양
1)(생략)
2)소,돼지도체:제4.축산물
시험방법 Ⅲ
.원유·식육·원료알의
시험법...(이하생략)
3)닭,오리도체:제4.축산물
시 험 방 법
Ⅲ.원유·식육·원료알의
시험법...(이하생략)
4)식용란:식용란20개를
채취하여 제4.
축산물시험방법 Ⅲ.
원유·식육·원료알의시험법
3.원료알의시험법다.
세균학적시험법(1)
시료채취및조제에따라
소독한후말린식용란을차세대염기서열분석기를
활용한 유전체
분석(전장유전체,메타게놈
등)을할수있다.
나.∼타.(현행과같음)
파.살모넬라(Salmonellaspp.)
(1)∼(2)(현행과같음)
(3)시험방법
(가)증균배양
1)(현행과같음)
2)--------------------
--------------------
-------------- 식용란-
-----...(현행과같음)
3)--------------------
--------------------
-------------- 식용란-
-----...(현행과같음)
4)식용란:식용란20개를
채취하여 제4.
축산물시험방법 Ⅲ.
원유·식육·원료알의시험법
3.원료알의시험법다.
세균학적시험법(1)
시료채취및조제에따라
소독한후말린식용란을- 23 -깨서멸균비닐팩에
넣어서준비한
다음(달걀을깰때는
위생장갑을껴야하며
샘플마다위생장갑을
바꾸어준다.)손으로
난황과난백이섞이도록
균질화를시킨다.준비된
시료는상온(20~24℃)에서
96±2시간동안정치한후25
mL을채취하여225mL의
ferroussulfate
supplementedTSB(35
mgferroussulfate+1,000
mLTSB)와섞어
균질화를시킨후60±5분
동안상온에두고
균질화를시키고test
paper를사용하여pH를
측정한다.pH조절이
필요하다면6.8±0.2로
조절한다.이용액은
36±1℃에서18~24시간
증균한다.1차배양액은
1)축산물가공품및식육의
2차증균과정을따라깨서4L용량의멸균
비이커또는멸균비닐백등
적정한용량의멸균용기에
넣어서준비한
다음(달걀을깰때는
위생장갑을껴야하며
샘플마다위생장갑을
바꾸어준다.)멸균도구
등을이용하여난황과
난백이섞이도록
균질화를시킨다.준비된
시료에2L의멸균TSB를
섞어35℃에서24±2시간
동안증균한다.-------
--------------------
--------------------
--------------------
--------------------
--------------------
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--------------------
--------------------
--------------------- 24 -증균시킨다.
(나)∼(라)(생략)
하.(생략)
거.캠필로박터제주니/콜리
(1)∼(2)(생략)
(3)시험방법
(가)증균배양
1)(생략)
2)소,돼지도체:제4.
축 산 물 시 험 방 법
Ⅲ.원유·식육·원료알의
시험법...(이하생략)
3)닭,오리도체:제4.
축 산 물 시 험 방 법
Ⅲ.원유·식육·원료알의
시험법...(이하생략)
(나)∼(다)(생략)
너.∼서.(생략)
<신설>
--------.
(나)∼(라)(현행과같음)
하.(현행과같음)
거.캠필로박터제주니/콜리
(1)∼(2)(현행과같음)
(3)시험방법
(가)증균배양
1)(현행과같음)
2)--------------------
--------------------
-------------- 식용란-
-------...(현행과같음)
3)--------------------
--------------------
-------------- 식용란-
-------...(현행과같음)
(나)∼(다)(현행과같음)
너.∼서.(현행과같음)
어.식중독균에대한분자생물학적
시험법
(1)살모넬라시험법
(가)주형유전자준비
증균배양액(1~2mL)을취한
후,10분간끓여원심분리하고,
상등액10~20μL를취하여
시료로사용한다.- 25 -※상기의방법과동등이상인
유전자추출키트및장비를
사용할수있다.
(나)Real-timePCR프라이머
및프로브염기서열
(다)Real-timePCR반응액
조제
성분 최종농도Stock용액 
농도1회 
용량
Master Mix1)1× 2× 10μL
invA프라이머 (F) 0.5pmol/ μL10pmol/ μL 1μL
invA프라이머 (R) 0.5pmol/ μL10pmol/ μL 1μL
invA프로브 (P) 0.1pmol/ μL 2pmol/ μL 1μL
주형 DNA - - 5μL
증류수 - - 2μL
총량 - - 20μL
1)PowerAmpTMReal-timePCR
MasterMix와동등이상의시
약을사용할수있다.
유전자프라이머 /
프로브염기서열 (5‘→3’)
invAinvA-F
invA-R
invA-P5‘-GAA TCC TCA GTT TTT CAA
CGT TTC-3’
5‘-CGA ATT GCC CGA ACG TGG
CGA- 3’
5‘-FA M -CTC TTT CGT CTG GCA
TTA TCG ATC AGT ACC AG -
BHQ1- 3’- 26 -(라)Real-timePCR반응조건
PCR반응조건은50℃에서2분
간유지및95℃에서10분간
방치하여최초변성이일어나
게한후,95℃에서15초간변
성시키고,60℃에서1분간유
전자결합및신장반응이일어
나는것을1회로하여총40회
의증폭반응을한다.
*상기PCR조건이최적이아
닌경우변형하여사용할수
있다.
(마)결과확인
PCR반응에서증폭곡선이확
인되는경우살모넬라가검출
된것으로판정한다.다만,음
성대조군에서증폭곡선이확인
되거나양성대조군에서증폭곡
선이확인되지않을경우재시
험하여야한다.구분 온도 시간반응회수
50℃ 2분 1회
초기변성 (Initial
denaturation)95℃ 10분 1회
변성(denaturation) 95℃ 15초
40회결합(annealing)/
신장(extension)60℃ 1분- 27 -11.∼16.(생략) 11.∼16.(현행과같음)
Ⅲ.원유·식육·원료알의시험법
1.∼2.(생략)
3.원료알의시험법
가.∼나.(생략)
다.세균학적시험법
(1)시료채취및조제
(가)(생략)
(나)시료의조제법
달걀(실금란·오란·연란을
제외한정상란)의껍질에
묻어있는잔물질을제거하고
루골솔루션(iodine/potassium
iodidesolution)250mL과750
mL의70%알콜을섞은
소독액에10초간담근후
꺼내어말린다.소독한
원료알을멸균백에깨넣고
충분히교반하여균일하게
한다.
(2)∼(6)(생략)
Ⅳ.∼Ⅷ.(생략)Ⅲ.원유·식육·식용란의시험법
1.∼2.(현행과같음)
3.식용란의시험법
가.∼나.(현행과같음)
다.세균학적시험법
(1)시료채취및조제
(가)(현행과같음)
(나)시료의조제법
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식용란-----------------
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(2)∼(6)(현행과같음)
Ⅳ.∼Ⅷ.(현행과같음)