식품의약품안전처 공고 제2015-137 호
- 2 -식품의약품안전처 공고 제2015-137 호
식품의기준및규격
(식품의약품안전처고시 제2015-4호,2015.2.3.)을
일부개정함에있어국민에게미리알려의견을수렴하고자그취지,
개정이유및주요내용을
행정절차법
제46조에따라다음과같이
공고합니다.
 2015년4월28일
 식품의약품안전처장
식품의 기준 및규격 일부개정고시 (안)행정예고
1.개정 이유
식품등의한시적기준및규격인정기준
(식품의약품안전처 고시
제2014-147호)에따라인정된식품원료의
식품의기준및규격
에
등재요건을명확히하고자함.
국내외에서사용되는농약의잔류허용기준을 개정하고동물용의약
품의적용대상식품명을명확히하며,관련시험법을개정하여식품
중잔류물질의안전관리를강화하고자함.
2.주요 내용
가.한시적으로 사용이 인정된 식품원료의 「식품의 기준 및규격 」- 3 -등재 요건 명확화〔안제2.2.3)〕
1)「식품등의한시적기준및규격인정기준」에따라인정된식품
원료가증가함에따라「식품의기준및규격」등재요건의명확화필요
2)등재요건을충족하는경우[별표1]“식품에사용할수있는원
료”의목록또는[별표2]“식품에제한적으로사용할수있는
원료”의목록에추가로등재
나.농산물 중농약 잔류허용기준 개정 및신설[안별표4중(9)
델타메트린,(29)디플루벤주론,(101)이미다클로프리드 ,(116)카탑
하이드로클로라이드 ,(133)테부코나졸,(227)아세타미프리드,
(237)피메트로진,(257)플루퀸코나졸,(299)티플루자마이드,
(321)디노테퓨란,(324)비페나제이트,(333)테부피림포스,(352)
메톡시페노자이드 ,(394)비스트리플루론,(408)스피네토람,(416)
클로란트라닐리프롤 ,(417)플루벤디아마이드,(419)프로헥사디온-칼슘,
(422)펜티오피라드,(423)피콕시스트로빈,(424)피리플루퀴나존,
(428)플루오피람,(430)설폭사플로르,(433)사이안트라닐리프롤 ,
(437)플룩사피록사드,(438)피리오페논,(439)스피로테트라맷,
(442)이프펜카바존,(443)테퓨릴트리온,(444)트리아파몬,(445)
이마자픽,(446)이마자피르]
1)
농약관리법
에등록되어있는농약에대해농산물적용범위
확대,수입농산물의농약잔류허용기준요청등으로농약잔류허용
- 4 -기준제·개정이필요
2)델타메트린등32종에대한농약잔류허용기준개정및신설
3)농산물에농약잔류허용기준을합리적으로개정하여국민에게안전한
식품을공급하고자함
다.인삼 중농약 잔류허용기준 신설[안별표5중(79)포스티아제이트]
1)
농약관리법
에등록되어있는농약중인삼에대한사용범위
확대에따라해당농약의잔류허용기준을마련필요
2)포스티아제이트에 대한농약잔류허용기준신설
3)농약잔류허용기준신설을통하여국민에게안전한식품을공급하고자함
라.축산물 중농약 잔류허용기준 개정[안별표6중(21)사이퍼메
트린]
1)농약과동물용의약품에공통으로사용되는물질에대한기준조화필요
2)유중동물용의약품사이퍼메트린기준신설에따른농약기준삭제
3)농약및동물용의약품잔류허용기준조화를통한혼란방지
마.식품 중동물용의약품 잔류허용기준 적용 대상 식품명 개정[안
별표6중(4)노보비오신,(29)오르메토프림,(30)옥소린산,(32)
올레안도마이신,(36)죠렌]
1)동물용의약품의 잔류허용기준대상식품명이“고기”로설정되어- 5 -있어기준적용이해석의논란발생
2)노보비오신등5종의대상식품명을“고기”에서“근육”으로개정
3)동물용의약품잔류허용기준적용대상식품명을명확히하여검사의
신뢰성을높이고자함
바.일반시험법 개정[안제9.4.1.4.174∼177,제9.5.2∼5.3]
1)농약잔류허용기준 신설에따른이프펜카바존등4종농약잔류분석법
신설
2)동물용의약품의정성시험법에물리·화학적시험법신설
3)식품중겐타마이신등아미노글리코사이드계 ,아목시실린등페니
실린계및벌꿀중테트라싸이클린계 정량시험법개정
4)농약잔류허용기준신설에따른분석법을마련하고식품공전과축·수
산물유해물질분석법편람시험법을통일하여국민에게안전한식
품을공급하고자함
3.의견 제출
「식품의기준및규격」일부개정고시(안)에대하여의견이있는
단체또는개인은 2015년6월29일까지 다음사항을기재한의견서를
식품의약품안전처장 (우편번호:363-700,주소:충청북도청원군오송읍
오송생명2로187(연제리643번지)오송보건의료행정타 운식품의약품
안전처,참조:식품기준과,전화043-719-2417, 팩스043-719-2400)에게제출
- 6 -하여주시기바랍니다.
가.예고사항에대한항목별의견(찬․반여부와그이유)
나.성명(단체의경우단체명과그대표자의성명),주소및전화번호
다.기타참고사항- 7 -식품의약품안전처 고시 제2015-00 호
「식품위생법」제7조제1항에따른「식품의기준및규격」(식품의약품
안전처고시제2015-4호,2015.2.3.)을다음과같이개정고시합니다.
2015년4월0일
식품의약품안전처장
식품의 기준 및규격 일부개정고시 (안)행정예고
식품의기준및규격일부를다음과같이개정한다.
제2,2,3)을다음과같이신설한다.
3)한시적인정식품원료의추가등재
(1)「식품등의한시적기준및규격인정기준」에따라인정된식
품원료는다음의어느하나를충족하면「식품의기준및규
격」[별표1]“식품에사용할수있는원료”의목록또는[별표
2]“식품에제한적으로사용할수있는원료”의목록에추가로
등재할수있다.
①한시적기준및규격을인정받은날로부터3년이경과한경우
②한시적기준및규격을인정받은자가3인이상인경우
③한시적기준및규격을인정받은자가등재를요청하는경우
- 8 -(다만,인정받은자가2명인경우모두등재를요청하는경우)
제9,4.1.4.174부터4.1.4.177까지신설한다.
4.1.4.174이프펜카바존(Ipfencarbazone)
1)분석법적용범위
곡류,과일류,채소류,콩류및서류등의식품에적용한다.
2)분석원리
검체를아세톤으로추출한후헥산을이용하여 액-액분배하고실
리카카트리지로정제한후기체크로마토그 래프로분석한다.
3)장치
가)기체크로마토그 래프-전자포획검출기(GC-ECD)
나)기체크로마토그 래프-질량분석기(GC-MS)
4)시약및시액
가)용매:잔류농약시험용또는특급
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:표준품을아세톤에녹여1,000mg/L이되게한다.
라)표준용액:표준원액을각각아세톤에녹여적당한농도로 희석
한다.
마)실리카카트리지:실리카(1g)고정상이충전되어있는일회용
카트리지(용량6mL)또는이와동등한것을사용한다.
바)기타시약:잔류농약시험용또는특급- 9 -5)시험용액의조제
가)추출
검체를분쇄하여균질화한 후10g(곡류및콩류는약1kg을
혼합하여표준체420㎛를통과하도록한10g,과일류․채소류․
서류는약1kg을잘게갈아혼합한10g)을정밀히달아균질기
용기에넣고(건조검체의경우증류수10mL를가한후30분간
방치)아세톤100mL을가하여진탕기에서5분간진탕한후추출
물을여과지와여과보조제가 깔려있는부흐너깔때기로감압여과
하고,아세톤15mL로잔사및용기를씻어내려앞의여액과합
한다.여과액을500mL용량의분액깔때기에옮기고포화식염수
20mL와증류수100mL을차례로가한후헥산50mL를가하여
2분간격렬하게진탕하고층이완전히분리될때까지정치한다.
헥산층을무수황산나트륨에통과시켜감압농축플라스 크에받고,
수용액층에헥산50mL를추가로가하고헥산층을무수황산
나트륨에통과시켜감압농축플라스 크에받는과정을 반복한다.
이를40℃이하의수욕상에서감압하여용매를모두날려버리고
플라스크를상온으로 냉각한후,잔류물을헥산10mL에녹인다.
나)정제
실리카카트리지에헥산5mL를2～3방울/초의속도로유출하
여버린다.이어서고정상상단이노출되기전에‘가)추출’로부터
얻은추출액중2mL를카트리지상단에 넣고1～2방울/초의
- 10 -속도로용출시키고고정상상단이노출되기전에에틸아세테이
트/헥산(10/90,v/v)10mL를유출시켜버린후에틸아세테이트 /
헥산(20/80,v/v)10mL를유출시켜받은시험액을감압농축플라스
크에취한다.이를40℃이하수욕상에서 감압하여용매를모두
날려버리고플라스크를상온으로 냉각한후,잔류물에아세톤을가
하여최종부피2mL가되게하여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)기체크로마토그 래프의측정조건
(1)칼럼:DB-5(0.25mmi.d.×30m,0.25㎛)또는이와동등한것
(2)이동상가스및유량:질소,1mL/min.
(3)오븐온도:200℃에서검체를주입하고10℃/min.의비율로온도
를280℃까지상승시켜10분간유지
(4)주입부온도:250℃
(5)검출기온도:280℃
(6)주입량:1μL,splitratio(20:1)
나)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하여기체크로마토그 래프에각각
주입한다.얻어진크로마토그 램상의각피크높이또는면적을
구하여검량선을작성한다.
다)표준품의 크로마토그 램- 11 -
그림.기체크로마토그 래프에서표준품의 크로마토그 램
이프펜카바존(9.7분)
라)정량한계
0.01mg/kg
7)정량시험
위조건으로 얻어진크로마토그 램상의피크가표준용액피크의머무름
시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량
한다.
8)확인시험
기체크로마토그 래프-질량분석기상의 머무름시간과질량분석스펙
트럼으로이프펜카바존을확인한다.
가)기체크로마토그 래프-질량분석기의 측정조건
(1)칼럼:DB-5MS(0.25mmi.d.×30m,0.25㎛)또는이와
동등한것
(2)이동상가스및유량:헬륨,1mL/min.
(3)오븐온도:200℃에서검체를주입하고10℃/min.의비율로온도
- 12 -를280℃까지상승시켜10분간유지
(4)주입부:260℃
(5)인터페이스온도:280℃
(6)분자량범위:100～550m/z
(7)주입량:1μL,splitless
표.기체크로마토그 래프-질량분석기분석을위한특성이온
머무름시간(분)분자량(MW)관측질량
(Exactmass)관측이온(m/z)
8.9 427.2426198,228
4.1.4.175테퓨릴트리온(Tefuryltrione)
1)시험법적용범위
곡류,과일류,채소류,콩류및서류등의식품에적용한다.
2)분석원리
검체중테퓨릴트리온을포름산을포함한아세토니트릴로추출한후
에틸아세테이트 /디클로로메 탄혼합용매로액-액분배하고플로리실
카트리지로정제한후액체크로마토그 래프-질량분석기로분석한다.
3)장치
가)액체크로마토그 래프-질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액- 13 -가)용매:잔류농약시험용또는특급
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:표준품을아세토니트릴에 녹여1,000mg/L이되게한다.
라)표준용액:표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한
농도로각각혼합,희석한다.
마)플로리실카트리지:플로리실고정상(1g)이충진되어있는일회용
카트리지(용량6mL)또는이와동등한것을사용한다.
바)기타시약:잔류농약시험용또는특급
5)시험용액의조제
가)추출
검체를분쇄하여균질화한후10g(곡류및콩류는약1kg을혼합하여
표준체420㎛를통과하도록분쇄한후그10g,과일류․채소류․
서류는약1kg을잘게갈아혼합한10g)을정밀히달아균질기
용기에넣고(건조검체의경우증류수10mL를가한후30분방치)
아세토니트릴30mL,증류수10mL및포름산0.4mL를가하여
진탕기에서30분간진탕한후추출물을여과지와여과보조제가 깔려
있는부흐너깔때기로감압여과하고,아세토니트릴30mL로잔사
및용기를씻어내려앞의여액과합친다.여과액을500mL분액
깔때기에옮기고포화식염수20mL와증류수40mL를차례로
가한후에틸아세테이트 /디클로로메 탄(70/30,v/v)혼합용매20mL를
가하여2분간격렬하게진탕하고층이완전히분리될때까지정치
- 14 -한다.상층의에틸아세테이트 /디클로로메 탄층을무수황산나트륨에
통과시켜감압농축플라스 크에받고,남아있는수용액층에에틸
아세테이트 /디클로로메 탄(70/30,v/v)혼합용매20mL를추가로
가하고상층의에틸아세테이트 /디클로로메 탄층을무수황산나트륨에
통과시켜감압농축플라스 크에받는과정을3회반복한다.이를40℃
이하의수욕상에서감압하여용매를모두날려버리고플라스크를
상온으로 냉각한후,잔류물을아세톤/디클로로메 탄(50/50,v/v)혼합
용매10mL에녹인다.
나)정제
플로리실카트리지에아세톤/디클로로메 탄(50/50,v/v)혼합용매5mL를
2～3방울/초의속도로유출하여버린다.이어서고정상상단이노
출되기전에‘가)추출’로부터얻은추출액중1mL를카트리지상단
에넣고1～2방울/초의속도로용출시키고고정상상단이노출되
기전에아세톤/디클로로메 탄(50/50,v/v)혼합용매5mL를유출
시켜씻어버린후4%포름산이포함된아세톤/디클로로메 탄(60/40,
v/v)혼합용매8mL를유출시켜받은시험액을감압농축플라스 크
에취한다.이를40℃이하수욕상에서감압하여용매를모두날려
버리고플라스크를상온으로 냉각한후,잔류물에아세토니트릴을
가하여최종부피2mL가되게하여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프측정조건- 15 -(1)칼럼:C18(2mmi.d.×100mm,3㎛)또는이와동등한것
(2)칼럼온도:40℃
(3)이동상:
(가)이동상A:0.1%포름산포함아세토니트릴
(나)이동상B:0.1%포름산수용액
시간(분) A(%) B(%)
0.1 50 50
3 80 20
4 80 20
5.5 50 50
15 50 50
(4)이동상유량:0.25mL/min.
(5)주입량:10μL
나)질량분석기 측정조건
(1)이온화:ESIpositive-ionmode
(2)Capillarytemperature:300℃
(3)Sprayvoltage:3.5kV
(4)Collisiongas:아르곤
(5)충돌에너지
- 16 -분석성분선구이온
(Precursorion,
m/z)토막이온
(Fragmention,
m/z)충돌에너지
(Collisionenergy,
eV)
테퓨릴트리온 443261 30
305 20
※각토막이온에대한질량분석기의기기조건은사용기기의
최적값으로변경하여사용할수있으며,제시된이외의토막
이온도적용이가능함
다)검량선작성
표준용액을아세토니트릴에일정농도로 희석한다음검체에주입
하고시험용액의조제과정에따라시험한후,액체크로마토그 래프-
질량분석기에 각각주입한다.이온의피크높이또는면적을구하
여검량선(matrixmatchedcalibrationcurve)을작성한다.
라)표준품의 크로마토그 램
그림.액체크로마토그 래프에서표준품의 크로마토그 램
테퓨릴트리온(4.3분)- 17 -마)정량한계
0.03mg/kg
7)정량시험
위조건으로 얻은크로마토그 램상의피크가표준용액피크의머무름
시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량한다.
4.1.4.176트리아파몬(Triafamone)
1)시험법적용범위
곡류,과일류,채소류,콩류및서류등의식품에적용한다.
2)분석원리
검체중트리아파몬을포름산을포함한아세토니트릴로추출한후
에틸아세테이트 /디클로로메 탄혼합용매로액-액분배하고C18카트
리지로정제한후액체크로마토그 래프-질량분석기로분석한다.
3)장치
가)액체크로마토그 래프-질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매:잔류농약시험용또는특급
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:표준품을아세토니트릴에 녹여1,000mg/L이되게한다.
라)표준용액:표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농
도로각각혼합,희석한다.
- 18 -마)C18카트리지:C18고정상(500mg)이충진되어있는일회용카트
리지(용량3mL)또는이와동등한것을사용한다.
바)기타시약:잔류농약시험용또는특급
5)시험용액의조제
가)추출
검체를분쇄하여균질화한후10g(곡류및콩류는약1kg을혼합
하여표준체420㎛를통과하도록분쇄한후그10g,과일류․채소류․
서류는약1kg을잘게갈아혼합한10g)을정밀히달아균질기용기에
넣고(건조검체의경우증류수10mL를가한후30분방치)아세토
니트릴30mL,증류수10mL및포름산0.4mL를가하여진탕기에서
30분간진탕한후추출물을여과지와여과보조제가 깔려있는부흐너
깔때기로감압여과하고,아세토니트릴30mL로잔사및용기를씻어내려
앞의여액과합친다.여과액을500mL용량의분액깔때기에옮기고
포화식염수20mL와증류수40mL를차례로가한후에틸아세테이트
/디클로로메 탄(70/30,v/v)혼합용매20mL를가하여2분간격렬하게
진탕하고층이완전히분리될때까지정치한다.상층의에틸아세테이트
/디클로로메 탄층을무수황산나트륨에통과시켜감압농축플라스 크에
받고,남아있는수용액층에에틸아세테이트 /디클로로메 탄(70/30,
v/v)혼합용매20mL를추가로가하고상층의에틸아세테이트 /디클로로
메탄층을무수황산나트륨에통과시켜감압농축플라스 크에받는과정을
3회반복한다.이를40℃이하의수욕상에서감압하여용매를모두- 19 -날려버리고플라스크를상온으로 냉각한후,잔류물을증류수10mL에
녹인다.
나)정제
C18카트리지에1%포름산이함유된메탄올3mL를2～3방울/초의
속도로유출하여버린다.이어서고정상상단이노출되기전에1%
포름산이함유된메탄올/물(20/80,v/v)3mL를2～3방울/초의속도
로유출하여버린다.고정상상단이노출되기전에‘가)추출’로부터
얻은추출액중2mL를카트리지상단에넣고1～2방울/초의속도
로용출시키고고정상상단이노출되기전에1%포름산이함유된
메탄올/물(80/20,v/v)4mL를유출시켜받은시험액을시험용액으
로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프-질량분석기 측정조건
(1)칼럼:C18(2mmi.d.×100mm,3㎛)또는이와동등한것
(2)칼럼온도:40℃
(3)이동상:0.1%포름산포함아세토니트릴 /0.1%포름산수용액
(90/10,v/v)
(4)이동상유량:0.25mL/min.
(5)주입량:5μL
나)질량분석기 측정조건
(1)이온화:ESIpositive-ionmode
- 20 -(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Sprayvoltage:4.0kV
(4)Collisiongas:아르곤
(5)충돌에너지
분석성분선구이온
(Precursorion,
m/z)토막이온
(Fragmention,
m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
트리아파몬 407160 43
245 24
※각토막이온에대한질량분석기의기기조건은사용기기의
최적값으로변경하여사용할수있으며,제시된이외의토막이온도
적용이가능함
다)검량선작성
표준용액을아세토니트릴에일정농도로 희석한다음검체에주입
하고시험용액의조제과정에따라시험한후,액체크로마토그 래프-
질량분석기에 각각주입한다.이온의피크높이또는면적을구하여
검량선(matrixmatchedcalibrationcurve)을작성한다.
라)표준품의 크로마토그 램- 21 -
그림.액체크로마토그 래프에서표준품의 크로마토그 램
트리아파몬(5.8분)
마)정량한계
0.03mg/kg
7)정량시험
위조건으로 얻어진크로마토그 램상의피크가표준용액피크의머무름
시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량한다.
4.1.4.177이마자피르(Imazapyr)
1)분석법적용범위
곡류,서류,콩류,과일류및채소류등의식품에적용한다.
2)분석원리
검체중이마자피르를메탄올로추출한후pH를2.5로조절하고디클
로로메탄으로액-액분배한후액체크로마토그 래프로분석한다.
3)장치
가)액체크로마토그 래프-자외부흡광검출기(HPLC-UVD)
- 22 -나)액체크로마토그 래프-질량분석기(LC-MS)
4)시약및시액
가)용매:잔류농약시험용또는특급
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:표준품을메탄올에녹여1,000mg/L이되게한다.
라)표준용액:표준원액을각각메탄올/0.5%아세트산수용액(50/50,
v/v)에녹여적당한농도로혼합,희석한다.
마)기타시약:잔류농약시험용또는특급
5)시험용액의조제
가)추출
검체를분쇄하여균질화한 후10g(곡류및콩류는약1kg을
혼합하여표준체420㎛를통과하도록분쇄한후10g,과일류․
채소류·서류는약1kg을잘게갈아혼합한10g)을정밀히달아
균질기용기에 넣고메탄올100mL(과일류,채소류,콩류의경우
60%메탄올,곡류및서류는70%메탄올)를가하여진탕기에서5분간
진탕한다.이를여과지가 깔려있는부흐너깔때기로감압여과한 뒤
메탄올30mL로잔사및용기를씻어내려앞의여액과합한다.합친
여액을40℃이하의수욕상에서감압하여농축액이40mL이하가
될때까지메탄올을모두날려버리고플라스크를상온으로 냉각한후,
증류수60mL를더하고4NHCl을가하여pH2.5가되도록한다.
이를500mL분액깔때기에옮기고염화나트륨15g및디클로로- 23 -메탄50mL를차례로가한후심하게흔들어층이완전히분리될
때까지정치시킨후디클로로메 탄층을무수황산나트륨에통과시켜
감압농축플라스 크에받는과정을2회반복한다.이를40℃이하의
수욕상에서감압하여용매를모두날려버리고플라스크를상온으로
냉각한후,잔류물을메탄올/0.5%아세트산수용액(50/50,v/v)을
가하여최종부피5mL가되게한뒤시린지필터로여과한후시험
용액으로한다.[지방성검체의경우잔류물에미리아세토니트릴로
포화시킨헥산30mL를건고물에가하여녹인후250mL분량의
분액여두에옮기고미리헥산으로포화시킨아세토니트릴30mL으로
2회분배추출한다.합친아세토니트릴 층을40℃에서감압농축한
후잔류물을메탄올/0.5%아세트산수용액(50/50,v/v)을가하여
최종부피5mL가되게한뒤시린지필터를이용해여과한후시험
용액으로한다.]
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프의측정조건
(1)칼럼:C18(4.6mmi.d.×150mm,3㎛)또는이와동등한것
(2)이동상:아세토니트릴 /0.5%아세트산수용액(12/88,v/v)
(3)이동상유량:1mL/min.
(4)칼럼온도:40℃
(5)검출기파장:260nm
(6)주입량:20μL
- 24 -나)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하여액체크로마토그 래프에각각주입
한다.얻어진크로마토그 램상의각피크높이또는면적을구하여
검량선을작성한다.
다)표준품의 크로마토그 램
그림.액체크로마토그 래프에서표준품의 크로마토그 램
이마자피르(9.6분)
라)정량한계
0.05mg/kg
7)정량시험
위조건으로 얻어진크로마토그 램상의피크가표준용액피크의머무름
시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량한다.
8)확인시험
액체크로마토그 래프-질량분석기상의 머무름시간과질량분석스펙트럼
으로이마자피르를확인한다.
가)액체크로마토그 래프-질량분석기의 측정조건
(1)칼럼:C18(2.0mmi.d.×100mm,3㎛)또는이와동등한것- 25 -(2)이동상:0.1%포름산포함아세토니트릴 /0.1%포름산수용액(20/80,
v/v)
(3)이동상유량:0.25mL/min.
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5μL
(6)이온화:ESIpositive-ionmode
표.액체크로마토그 래프-질량분석기분석을위한특성이온
머무름시간(분)분자량(MW)관측질량
(Exactmass)이온(m/z)
4.0 261.3 261 262
제9.5.2“간이시험법”을“정성시험법”으로하고,“5.2.1생물학적시험
법”을신설한다.
제9.5.2.2를다음과같이신설한다.
5.2.2물리·화학적시험법
5.2.2.1축산물중동물용의약품동시다성분시험법
1)시험법적용범위
축산물(유,알,벌꿀은제외)등에적용한다.
2)분석원리
검체를80%아세토니트릴로추출한후C18분말로분산하고아세토
- 26 -물질명 용매표준원액
(μg/mL)희석용매표준용액
(μg/mL)
나프실린(Nafcillin) DMSO 5,000 물1,500
날리딕스산(Nalidixic
acid)0.1%암모니아수5,000아세토니트릴 150
노르플록사신
(Norfloxacin)0.5%개미산 5,000아세토니트릴 500
노보비오신(Novobiocin) DMSO 5,000 - -
다노플록사신
(Danofloxacin)0.5%개미산 5,000아세토니트릴 1,000
답손(Dapsone) DMSO 5,000아세토니트릴 500
독시싸이클린
(Doxycycline)DMSO 5,000아세토니트릴 500
디클록사실린
(Dicloxacillin)DMSO 5,000 물1,500
디플록사신(Difloxacin)50%메탄올2,00050%메탄올2,000니트릴포화헥산으로정제하여지방을제거한다음액체크로마토
그래프/질량분석기로분석한다.
3)장치
액체크로마토그 래프/질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약
가)용매：액체크로마토그 래프용또는이와동등한것
나)물：3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액및표준용액：각동물용의약품의표준품을아래의표1과
같이조제하여표준원액및표준용액으로
사용하고모두냉동실에보관하여사용
한다.
표1.표준원액및표준용액의조제방법- 27 -물질명 용매표준원액
(μg/mL)희석용매표준용액
(μg/mL)
린코마이신(Lincomycin) DMSO 5,000아세토니트릴 500
마보플록사신
(Marbofloxacin)0.5%개미산 5,000아세토니트릴 750
발네물린(Valnemulin) DMSO 5,000아세토니트릴 250
버지니아마이신
(VirginiamycinM1)DMSO 5,000아세토니트릴 500
벤질페니실린
(Benzylpenicillin)DMSO 5,000 물250
사라플록사신
(Sarafloxacin)메탄올1,000아세토니트릴 50
세파졸린(Cefazolin) DMSO 5,000 물250
세파피린(Cephapirin) DMSO 5,000 물250
세팔렉신(Cephalexin)50%DMSO 2,500 물1,000
세팔로니움(Cefalonium) DMSO 5,000 물 50
세포페라존
(Cefoperazone)DMSO 5,000 물150
세푸록심(Cefuroxime) DMSO 5,000 물100
세프퀴놈(Cefquinome) DMSO 5,000 물250
세프티오퍼(Ceftiofur) DMSO 5,000 - -
스피라마이신
(Spiramycin)DMSO 5,000아세토니트릴 1,000
시프로플록사신
(Ciprofloxacin)0.5%개미산 5,000아세토니트릴 500
암피실린(Ampicillin) DMSO 5,000 물250
에리스로마이신
(Erythromycin)DMSO 5,000아세토니트릴 250
엔로플록사신
(Enrofloxacin)0.5%개미산 5,000아세토니트릴 500
오르메토프림
(Ormetoprim)DMSO 5,000아세토니트릴 500
오비플록사신
(Orbifloxacin)0.5%개미산 5,000아세토니트릴 100
오플록사신(Ofloxacin)0.5%개미산 5,000아세토니트릴 500
옥사실린(Oxacillin) DMSO 5,000 물500
- 28 -물질명 용매표준원액
(μg/mL)희석용매표준용액
(μg/mL)
옥소린산(Oxolinicacid)0.1%암모니아수5,000아세토니트릴 250
옥시테트라싸이클린
(Oxytetracycline)DMSO 5,000아세토니트릴 1,000
조사마이신(Josamycin) DMSO 5,000아세토니트릴 200
클로람페니 콜
(Chloramphenicol )DMSO 5,000아세토니트릴 500
클로르테트라싸이클린
(Chlortetracycline )Methanol 5,000아세토니트릴 1,000
클록사실린(Cloxacillin) DMSO 5,000 물1,500
클린다마이신
(Clindamycin)DMSO 5,000아세토니트릴 500
타일로신(Tylosin) DMSO 5,000아세토니트릴 500
테트라싸이클린
(Tetracycline)DMSO 5,000아세토니트릴 1,000
트리메토프림
(Trimethoprim)DMSO 5,000아세토니트릴 250
티아물린(Tiamulin) DMSO 5,000아세토니트릴 500
티암페니콜
(Thiamphenicol)DMSO 5,000아세토니트릴 250
틸미코신(Tilmicosin) DMSO 5,000아세토니트릴 500
페플록사신(Pefloxacin)0.5%개미산 5,000아세토니트릴 500
플로르페니 콜(Florfenicol) DMSO 5,000아세토니트릴 1,000
플로르페니 콜아민
(Florfenicolamine,플로
르페니콜대사체)DMSO 10,000아세토니트릴 1,000
플루메퀸(Flumequine)0.1%암모니아수5,000아세토니트릴 500
MQCA1
(올라퀸독스대사체)DMSO 5,000아세토니트릴 500
QCA2
(카바독스대사체)DMSO 5,000아세토니트릴 500
1MQCA:3-methylquinoxaline-2-carboxylicacid
2QCA:quinoxaline-2-carboxylicacid
라)혼합표준용액의조제:100mL용량플라스 크에50종의표준용액을- 29 -각각1mL씩넣고50%아세토니트릴로
표시선까지채워조제하고,각성분의
농도가잔류허용기준의50배(성분별최저
0.5에서최대50μg/mL)가되도록하여
냉동실에보관한다.혼합한표준용액은
0.1%개미산과메탄올의1:1비율로혼
합한용액으로희석하여사용한다.
마)0.5%개미산:50mL용량플라스 크에증류수를적당히넣고개
미산250μL를가한뒤증류수로표시선까지채
운다.
바)0.1%암모니아수:10mL용량플라스 크에증류수를적당히넣
고10%수산화암모늄용액0.1mL를가한뒤
증류수로표시선까지채운다.
사)이동상 A의조제:1L용량플라스 크에증류수를적당히 넣고
개미산1mL를가한뒤증류수로표시선까
지채워0.1%개미산을조제하고,0.1%개미
산650mL와메탄올50mL를혼합하여사
용한다.
아)C18분말:잔여실란올기가제거된C18분말(55-105 μm,125Å)
또는이와동등한것
자)기타시약 ：특급또는이와동등한것
- 30 -5)시험용액의조제
균질화한검체5g을50mL원심분리관에취하여80%아세토니트릴
10mL를가한뒤,1분간균질화하고15분간진탕한다.5,000g에서
10분간원심분리한후,상층액을C18분말1g을미리넣어둔원심
분리관과합한다.남은침전물에다시80%아세토니트릴10mL를
가하고1분간균질화한후15분간진탕한다.5,000g에서10분간원
심분리하고상층액을이전의상층액과합한후아세토니트릴포화
헥산10mL을가한다.1분간진탕하고5,000g에서5분간원심분리
한후상층(헥산층)을제거하고하층(80%아세토니트릴 층)을새
로운원심분리관으로 옮긴다.이를50°C이하에서질소건고한후
메탄올0.25mL와0.1%개미산0.25mL로재분산하고5분간초음파
추출한다.이용액을0.2μmPVDF멤브레인필터로여과하여시험
용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프측정조건
(1)칼럼:C18(2.1ｘ100mm,1.7μm)또는이와동등한것
(2)칼럼온도:40℃
(3)이동상
(가)이동상A:0.1%개미산:메탄올(95:5,v/v)
(나)이동상B:메탄올- 31 -연
번물질명
(Compound)이온화
(Ionizati
on
mode)머무름
시간
(분)분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precusor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
Energy,
eV)
1나프실린
(Nafcillin)positive7.43414.47414.1249415.22199.12
171.05
115.0914
40
60
1‘나프실린-Na
(Nafcillin-Na2)positive7.43436.45436.1068437.20278.17
261.18
319.1818
16
16
2날리딕스산
(Nalidixicacid)positive6.36232.24232.0849233.12215.12
187.11
159.0914
26
30
3노르플록사신
(Norfloxacin)positive3.92319.33319.1333320.23302.23
233.15
276.2522
24
18
4노보비오신
(Novobiocin)positive8.92612.62612.2319613.33189.15
133.07
218.1334
60
12
4‘노보비오신-Na
(Novobiocin-Na)positive8.91634.60634.2138635.25418.25
240.14
211.1622
20
38시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
095 5
0.25 95 5
8.25 0 100
10.25 0 100
(4)유속:0.2mL/min
(5)주입량:5μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive,negative)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Capillaryvoltage:3.0kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤)
(5)분석대상및개별조건(MRM조건)
- 32 -연
번물질명
(Compound)이온화
(Ionizati
on
mode)머무름
시간
(분)분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precusor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
Energy,
eV)
5다노플록사신
(Danofloxacin)positive4.06357.37357.1490358.25340.22
96.07
314.2524
24
18
6답손
(Dapsone)positive3.78248.30248.0619249.03155.96
92.03
108.0014
26
22
7독시싸이클린
(Doxycycline)positive5.79444.43444.1532445.25428.22
98.02
154.0520
42
30
8디클록사실린
(Dicloxacillin)positive7.42470.32469.0265470.12160.05
311.12
114.0516
14
36
8‘디클록사실린-Na
(Dicloxacillin-Na)positive7.42492.30491.0085492.10333.06
182.0714
14
9디플로삭신
(Difloxacin)positive4.26399.39399.1396400.24356.29
299.21
382.2520
28
20
10린코마이신
(Lincomycin)positive3.72406.53406.2237407.31126.17
359.34
389.3330
20
18
11마보플록사신
(Marbofloxacin)positive3.57362.36362.1392363.2472.08
345.22
320.2322
22
16
12발네물린
(Valnemulin)positive7.22564.81564.3596565.46263.20
147.08
164.0214
40
34
13버지니아마이신
(Virginiamycin
M1)positive7.20525.59525.2474526.28508.38
355.24
109.1014
20
36
14벤질페니실린-Na
(Benzylpenicillin-Na)positive6.56356.37356.0806357.11198.11
181.24
239.7914
16
18
15사라플록사신
(Sarafloxacin)positive4.40385.36385.1239386.22368.22
299.17
342.2620
28
20
16세파졸린
(Cefazolin)positive4.26454.50454.0299455.13323.13
156.01
124.0212
16
38
17세파피린
(Cephapirin)positive3.09423.46423.0558424.15292.17
152.04
181.0914
22
24
18세팔렉신
(Cephalexin)positive4.12347.38347.0939348.19158.05
174.07
106.118
14
26
19세팔로니움
(Cefalonium)positive3.67458.51458.0718459.17152.03
337.13
123.1120
10
12
20세포페라존
(Cefoperazone)positive4.47645.66645.1423646.24143.11
530.26
290.2034
12
20- 33 -연
번물질명
(Compound)이온화
(Ionizati
on
mode)머무름
시간
(분)분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precusor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
Energy,
eV)
21세푸록심-Na
(Cefuroxime-Na)positive4.28446.36446.0508447.15386.13
174.96
342.1512
20
14
22세프퀴놈
(Cefquinome)positive3.33528.60528.1249529.22134.12
167.03
396.1216
24
12
23세프티오퍼
(Ceftiofur)positive5.65523.56523.0289524.13241.13
125.19
210.0718
56
22
24스피라마이신
(Spiramycin)positive4.99843.05842.5139843.55174.11
101.02
142.1336
46
32
25시프로플록사신
(Ciprofloxacin)positive4.02331.35331.1333332.23314.241
231.11
288.2722
34
18
26암피실린
(Ampicillin)positive4.39349.40349.1096350.14106.04
174.07
160.0718
14
12
27에리스로마이신
(Erythromycin)positive6.61733.93733.4612734.49158.09
116.06
576.4130
40
20
28엔로플록사신
(Enrofloxacin)positive4.05359.40359.1647360.26316.27
342.24
245.1818
20
26
29오르메토프림
(Ormetoprim)positive4.03274.31274.1429275.18123.12
259.20
81.0126
26
42
30오비플록사신
(Orbifloxacin)positive4.22395.37395.1258396.24352.30
226.15
295.2218
46
26
31오플록사신
(Ofloxacin)positive3.80361.37361.1439362.24318.26
261.17
221.6520
28
38
32옥사실린
(Oxacillin)positive6.98401.43401.1045402.20160.06
243.16
114.0612
14
38
32‘옥사실린-Na
(Oxacillin-Na)positive6.98423.41423.0864424.18182.08
265.11
248.1218
18
16
33옥소린산
(Oxolinicacid)positive5.54261.33261.0637262.16244.14
216.08
157.5920
28
34
34옥시테트라싸이클린
(Oxytetracycline)positive4.19460.43460.1481461.18426.20
201.01
443.3120
40
14
35조사마이신
(Josamycin)positive6.97827.99827.4667828.56109.09
174.11
229.2042
34
32
36클로람페니 콜
(Chloramphenicol)negative5.49323.13322.0123321.11151.98
257.15
194.1220
12
14
- 34 -연
번물질명
(Compound)이온화
(Ionizati
on
mode)머무름
시간
(분)분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precusor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
Energy,
eV)
37클로르테트라싸이클린
(Chlortetracycline)positive5.10478.88478.1142479.27444.24
154.06
462.2022
28
18
38클록사실린
(Cloxacillin)positive7.14435.88435.0655436.16277.13
114.05
160.0516
48
12
38‘클록사실린-Na
(Cloxacillin-Na)positive7.14475.87475.0580458.14299.13
182.0614
14
39클린다마이신
(Clindamycin)positive5.94424.98424.1798425.28126.14
377.25
389.3528
20
20
40타일로신
(Tylosin)positive6.50916.10915.5191916.55174.11
83.09
101.0140
52
40
41테트라싸이클린
(Tetracycline)positive4.10444.43444.1532445.25410.26
154.05
427.3718
28
12
42트리메토프림
(Trimethoprim)positive3.68290.31290.1378291.23230.15
123.05
261.1524
24
24
43티아물린
(Tiamulin)positive6.43493.74493.3225494.42192.16
73.06
119.0722
60
38
44티암페니콜
(Thiamphenicol)negative3.79356.22355.0047354.10185.08
290.11
78.9918
12
32
45틸미코신
(Tilmicosin)positive5.63869.13868.5660869.66174.11
88.05
696.6444
64
42
46페플록사신
(Pefloxacin)positive3.80333.36333.1490334.25290.29
316.26
233.1918
20
26
47플로르페니 콜
(Florfenicol)negative4.55358.21357.0004356.03185.07
336.12
119.0718
10
38
47‘플로르페니 콜아민
(Florfenicol
amine,
플로르페니 콜
대사체)positive1.58247.28247.0678248.10230.13
130.21
91.0512
22
42
48플루메퀸
(Flumequine)positive6.56261.25261.0802262.18244.16
202.09
174.0120
32
38
49MQCA
(올라퀸독스
대사체)positive4.99188.18188.0585189.09145.08
143.00
102.0714
15
32
50QCA
(카바독스
대사체)positive4.82174.15174.0429175.07129.00
131.02
102.0218
15
30
1밑줄표시되어있는것은정량이온이며그외이온들은정성이온 임- 35 -상대이온강도 (% ofbase peak) LC-MS/MS (relative)
>50% ≤20%
20%to50% ≤25%
10%to20% ≤30%
≤10% ≤50%2Compound-Na:sodiumadduct를의미
※각생성이온(production)에대한질량분석기의기기조건은사용기기의 최적값으로변
경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함
7)정성시험
위의조건에서 얻어진크로마토그 램상의피크는어느측정조건에서
도표준물질피크의머무름시간과일치하여야한다.또한표준용액
과시험용액을각각질량분석기에주입하였을때선구이온및생성
이온이일치하여야하고,표준용액과시험용액의생성이온 간반응세
기의비율(responseratio)을비교하여그상대비율이20～50%이내에
서일치하여야한다.※주1)참조
8)정량시험
정성시험에서검출된잔류동물용의약품은 식품공전5.3의정량시험법
을따른다.
주1)생성이온간반응세기의비율허용범위
- 36 -
그림 1. 퀴놀론계 크로마토그램
그림 2. 페니실린계 크로마토그램- 37 -
그림 3. 세팔로스포린계 크로마토그램
그림 4. 테트라싸이클린계 크로마토그램
그림 5. 마크로라이드계 크로마토그램
- 38 -
그림 6. 린코사마이드계 크로마토그램
그림 7. 플레로무티린계 크로마토그램
그림 8. 암페니콜계 크로마토그램
- 39 -그림 9. 기타 항균제 크로마토그램
5.2.2.2수산물중동물용의약품동시다성분시험법
1)시험법적용범위
수산물(어류,갑각류)등에적용한다.
2)분석원리
균질화한검체에개미산암모늄용액과80%아세토니트릴을 넣어
분석대상물질을 추출하고,C18분말을분산시켜헥산으로정제한
후액체크로마토그 래프/질량분석기로분석한다.
3)장치
액체크로마토그 래프/질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그 래프용또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액：각동물용의약품표준품을정밀히달아용매(메탄올,물
또는50%메탄올)에녹여50～100mg/L로조제하여표준원액으로한다.
※주1)참조
라)혼합표준용 액：50mL용량플라스 크에각표준원액을각동물
용의약품잔류허용기준의 10배농도가되도록취하여혼합한 후
물로표시선까지채워냉동실에보관한다.혼합표준용 액은물로
희석하여사용한다.
- 40 -마)2mM개미산암모늄용액:1L용량플라스크에초산암모늄
0.12g을넣고아세토니트릴 /물
(80/20,v/v)혼합용매로용해하여
표시선까지채운다.
바)C18분말:잔여실란올기가제거된C18분말(55-105 μm,125Å)
또는이와동등한것
사)기타시약 ：특급또는이와동등한것
5)시험용액의조제
균질화한검체2g을50mL원심분리관에취하여2mM개미산암
모늄용액10mL를가하여20분간진탕한후,10,000g에서10분간
원심분리하고추출액을다른원심분리관에취한다.분리된추출액에
C18분말500mg을분산시킨후,헥산10mL을가하여30초간진탕
한다.10,000g에서5분간원심분리하고,하층액중5mL만을취해
눈금이표시된새로운원심분리관에 옮긴다.40℃수욕상에서액이
1mL남을때까지질소농축한 후,0.2μmPVDF멤브레인필터로
여과하여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프의측정조건
(1)칼럼：C18(2.1mmi.d.ｘ150mm,3.5μm)또는이와동등한
것
(2)이동상
(가)이동상A:0.1%개미산수용액- 41 -연
번물질명
(Compound)이온화
(Ionization
mode)머무름
시간
(분)분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precusor
ion,m/z)생성이온1
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
Energy,
eV)
1날리딕스산
(Nalidixicacid)positive7.50232.2232.0848233104
187
21539
24
14
2노르플록사신
(Norfloxacin)positive3.65319.3319.1332320205
233
27631
23
16
3독시싸이클린
(Doxycycline)positive5.80444.4444.1533445267
321
42834
29
16
4디플록사신
(Difloxacin)positive4.88399.3399.1394400299
35627
17(나)이동상B:0.1%개미산을함유한아세토니트릴용액
시간 (분)이동상 A(%) 이동상 B(%)
0 90 10
1 90 10
6 60 40
10 5 95
15 5 95
15.1 90 10
20 90 10
(3)유속:0.4mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive,negative)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Capillaryvoltage:positive-5.0kV
negative-3.5kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤,또는비활성기체)
(5)분석대상(45종)및개별조건(MRM조건)
- 42 -연
번물질명
(Compound)이온화
(Ionization
mode)머무름
시간
(분)분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precusor
ion,m/z)생성이온1
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
Energy,
eV)
381 20
5린코마이신
(Lincomycin)positive3.07406.5406.213840783
126
35953
30
15
6설파구아니딘
(Sulfaguanidine)positive1.12214.2214.052421565
92
15636
25
13
7설파독신
(Sulfadoxine)positive5.50310.3310.073631192
108
15629
25
17
8설파디메톡신
(Sulfadimethoxine )positive6.53310.3310.073631192
108
15631
29
19
9설파디아진
(Sulfadiazine)positive2.50250.2250.052425165
92
15640
26
15
10설파메라진
(Sulfamerazine)positive3.49264.3264.068126592
108
15528
24
15
11설파메타진
(Sulfamethazine)positive4.23278.3278.083727965
124
18643
22
16
12설파메톡사졸
(Sulfamethoxazole )positive5.47253.2253.052125492
108
15626
23
14
13설파메톡시피리다진
(Sulfamethoxypyridazine )positive4.33280.3280.063028192
108
15629
25
15
14설파모노메톡신
(Sulfamonomethoxine )positive4.89280.0280.0630281156
248
26517
27
21
15설파퀴녹살린
(Sulfaquinoxaline )positive6.57300.3300.068130192
155
20829
15
13
16설파클로르피라진
(Sulfachlorpyrazine )positive6.36284.7284.013528565
92
15545
28
13
17설파클로르피리다진
(Sulfachlorpyridazine )positive5.09284.7284.013528592
108
15529
22
13
18설파티아졸
(Sulfathiazole)positive2.87255.3255.013625692
108
15624
22
15
19설파페나졸
(Sulfaphenazole)positive6.66314.3314.0837315131
158
16046
28
20
20설피속사졸
(Sulfisoxazole)positive5.82267.3267.067826865
92
15539
27
13
21세팔렉신
(Cefalexin)positive3.48347.3347.0940348106
157
17432
6
13
22세프티오퍼 positive6.18523.6523.02905249542- 43 -연
번물질명
(Compound)이온화
(Ionization
mode)머무름
시간
(분)분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precusor
ion,m/z)생성이온1
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
Energy,
eV)
(Ceftiofur)126
24158
16
22‘데스후로일세프티오퍼
(Desfuroylceftiofur )positive4.28429.5429.0235430126
227
24132
22
14
23스피라마이신
(Spiramycin)positive5.29843.0842.514042283
88
17431
35
18
24시프로플록사신
(Ciprofloxacin)positive3.95331.3331.1332332148
231
31453
35
19
25아목시실린
(Amoxicillin)positive1.35365.4365.1045366113
133
34919
31
5
26암피실린
(Ampicillin)positive3.61349.4349.1096350106
114
17419
29
11
27에리스로마이신
(Erythomycin)positive6.97733.9733.461273482
115
15735
34
29
28엔로플록사신
(Enrofloxacin)positive4.34359.4359.1645360245
316
34225
17
20
29오르메토프림
(Ormethoprim)positive4.01274.3274.143027581
123
25942
25
27
30오플록사신
(Ofloxacin)positive3.67361.3361.1438362261
318
34425
17
19
31옥소린산
(Oxolinicacid)positive6.05261.2261.0637262160
216
24435
28
17
32옥시테트라싸이클린
(Oxytetracycline)positive3.93460.4460.1482461200
426
44336
16
10
33조사마이신
(Josamycin)positive8.27827.9827.4667828108
173
22835
30
29
34클로람페니 콜
(Chloramphenicol )negative6.20322.1322.0123321120
151
25740
24
14
35클로르테트라싸이클린
(Chlortetracycline )positive5.48478.8478.114347998
444
46235
18
14
36클린다마이신
(Clindamycin)positive5.70424.9424.179942583
126
37751
31
17
37키타사마이신
(Kitasamycin)positive7.68771.9771.440577282
108
17335
34
28
38테트라싸이클린
(Tetracycline)positive4.32444.4444.1533445153
410
42725
16
10
- 44 -연
번물질명
(Compound)이온화
(Ionization
mode)머무름
시간
(분)분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precusor
ion,m/z)생성이온1
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
Energy,
eV)
39트리메토프림
(Trimethoprim)positive3.62290.3290.1379291123
230
26133
22
24
40티아물린
(Tiamulin)positive7.57493.7493.322649473
118
19253
34
19
41티암페니콜
(Thiamphenicol)negative4.15356.2355.0048354118
184
29037
23
15
42페플록사신
(Pefloxacin)positive3.71333.3333.1489334233
290
31623
16
18
43프라지콴텔
(Praziquantel)positive8.79312.4312.183831355
132
20336
33
16
44플로르페니 콜
(Florfenicol)negative5.73358.2357.0005356118
184
33640
21
13
44‘플로르페니 콜아민
(Florfenicolamine)positive1.12247.2247.067824891
130
23042
25
10
45플루메퀸
(Flumequine)positive7.73261.2261.0801262126
202
24447
31
17
1밑줄그은이온은정량이온이며그외이온들은정성이온 임
※각생성이온(production)에대한질량분석기의기기조건은사용기기의 최적값으로
변경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함
7)정성시험
위의조건으로 얻어진크로마토그 램상의피크는표준용액피크의
머무름시간과비교하여일치하여야한다.또한표준용액과시험용
액의선구이온(precursorion)및생성이온(production)이일치하여
야하고,표준용액과시험용액의생성이온 간반응세기의비율
(responseratio)을비교하여그상대비율이20～50%이내에서일치
하여야한다.※주2)참조
8)정량시험
정성시험에서검출된잔류동물용의약품은 식품공전5.3의정량시험법- 45 -상대이온강도 (% ofbase peak) LC-MS/MS (relative)
>50% ≤20%
20%to50% ≤25%
10%to20% ≤30%
≤10% ≤50%을따른다.
주1)표준원액조제에사용되는용매
용매 대상동물용의약품표준품
메탄올날리딕스산,노르플록사신,독시싸이클린,디플록사신,린코마이신,설파
구아니딘,설파독신,설파디메톡신,설파디아진,설파메라진,설파메타진,
설파메톡사졸,설파메톡시피리다진 ,설파모노메톡신,설파퀴녹살린,설파
클로르피라진,설파클로르피리다진 ,설파티아졸,설파페나졸,설피속사
졸,스피라마이신,시프로플록사신,에리스로마이신,엔로플록사신,오르
메토프림,오플록사신,옥시테트라싸이클린 ,조사마이신,클로르테트라싸
이클린,클린다마이신,키타사마이신,테트라싸이클린,트리메토프림,티
아물린,페플록사신,플로르페니 콜아민,플루메퀸
50%메탄올세팔렉신,세프티오퍼,데스후로일세프티오퍼,클로람페니 콜,
티암페니콜,프라지콴텔,플로르페니 콜
물아목시실린,암피실린,옥소린산
주2)생성이온간반응세기의비율허용범위
- 46 -
 
 
 
- 47 -
 
그림1.수산물중45종동물용의약품의 크로마토그 램
- 48 -제9.5.3.1을다음과같이한다.
5.3.1겐타마이신(Gentamicin),네오마이신(Neomycin),디히드로스트 렙
토마이신(Dihydrostreptomycin ),스트렙토마이신(Streptomycin),스펙
티노마이신(Spectinomycin),아미카신(Amikacin),아프라마이신
(Apramycin),카나마이신(Kanamycin),하이그로마이신 B(HygromycinB)
1)시험법적용범위
축산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중분석대상물질을 삼염화초산이함유된인산완충용액으로
추출한후HLB및약양이온교환카트리지로정제하여 액체크로
마토그래프/질량분석기로분석한다.
3)장치
액체크로마토그 래프/질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그 래프용또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:각표준품을100mL용량플라스 크에정밀히달아
물40mL에녹인후아세토니트릴20mL와초산2mL를
넣고물로표시선까지채워100mg/L로한다.조제된표준원
액은냉동실에보관한다.- 49 -라)혼합표준용 액:각표준원액을아세토니트릴 /초산/물(10/1/39)
혼합용액으로희석하여적당한농도가되게한다.
마)내부표준물질표준원액:토브라마이신표준품을100mL용
량플라스 크에정밀히달아물40mL에녹인후아세토니트
릴20mL와초산2mL를넣고물로표시선까지채워100
mg/L로조제한다.
바)내부표준물질용액:내부표준원액을아세토니트릴 /초산/물
(10/1/39)혼합용액으로희석하여적당한농도가되게한다.
사)2%삼염화초산이함유된10mM인산완충용액:2L용량플
라스크에제일인산칼 륨(KH2PO4)2.72g을넣고물1.9L로
녹인후1M염산으로pH4.0을맞춘다.여기에EDTA-나트
륨(Na2EDTAdihydrate)0.3g과삼염화초산40g을넣고용
해시킨후물로표시선까지채운다.
아)1.6%삼염화초산용액:250mL용량플라스 크에삼염화초산
4g을넣고물100mL를넣어용해시킨후아세토니트릴50
mL를넣고물로표시선까지채운다.
자)20mMHFBA(heptafluorobutyric acid)/5%아세토니트릴:1
L용량플라스 크에아세토니트릴 50mL와HFBA
(heptafluorobutyric acid)2.6mL를넣은후물로표시선까지
채운다.
- 50 -차)20mMHFBA(heptafluorobutyric acid)/50%아세토니트릴:
1L용량플라스 크에아세토니트릴500mL와HFBA
(heptafluorobutyric acid)2.6mL를넣은후물로표시선까지
채운다.
카)HLB(HydrophilicLipophilicBalance)카트리지:
Divinylbenzene-N-vinylpyrrolidoneCopolymer가200mg충
진된카트리지또는이와동등한것
타)약양이온교환(WeakCationExchange)카트리지:약양이온교
환수지가150mg충진된카트리지또는이와동등한것
파)기타시약:특급또는이와동등한것
하)기구:사용하는 모든용기는 폴리프로필렌재질또는이와
동등한것
5)시험용액의조제
균질화한검체3g을50mL원심분리관에취하고내부표준물질
(토브라마이신)을첨가한다.2%삼염화초산이함유된10mM인
산완충용액15mL를가하여10분간진탕한후4℃에서5,000g로
15분간원심분리한다.상층액을50mL원심분리관에취한후5
M수산화나트 륨용액0.2∼0.3mL을가하여 pH7.5로조정하고
(필요시1M염산용액또는1M수산화나트 륨용액을가하여pH
를조정한다)이액을추출액으로한다.미리메탄올5mL와물- 51 -5mL로HLB카트리지 와WCX(약양이온교환)카트리지를 각각
활성화시킨후HLB카트리지위에WCX카트리지를 연결한다.
연결한카트리지에추출액을흡착시키고물5mL로세척한후
감압하여물을완전히제거해준다.15mL프로필렌원심분리관
에1.6%삼염화초산용액6mL로용출한다.이용액을균질화
한후0.2㎛PVDF멤브레인필터로여과하여 액체크로마토그 래
프용폴리프로필렌바이알에 옮겨시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프측정조건
(1)칼럼:C18(2.1mm×150mm,3.5μm)또는이와동등한것
(2)이동상
(가)이동상A:20mMHFBA/5%아세토니트릴
(나)이동상B:20mMHFBA/50%아세토니트릴
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
0.0 80 20
0.5 80 20
9.0 5 95
10.0 5 95
10.1 80 20
15.0 80 20
(3)유속:0.3mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:10μL
- 52 -연
번물질명
(Compound)머무름
시간 (분)선구이온
(Precusor
ion, m/z)생성이온
(Product
ion, m/z)충돌에너지
(Collision
Energy,eV)
1겐타마이신 C1a
(GentamicinC1a)8.6450160 20
32211
2겐타마이신 C2,C2a
(GentamicinC2,C2a)8.6464160 22
32210
3겐타마이신 C1
(GentamicinC1)8.6478157 20
32213
4네오마이신
(Neomycin)8.74615161 28
29321
5디히드로스트 렙토마이신
(Dihydrostreptomycin )5.9358424633
263 29
6스트렙토마이신
(Streptomycin)5.8458224636
263 29
7스펙티노마이신
(Spectinomycin)4.663519829
20720
33317
8아미카신
(Amikacin)6.8058616332
264 23
9아프라마이신
(Apramycin)7.9454021726
37814
10카나마이신
(Kanamycin)7.04485163 24
32414
11파로모마이신
(Paromomycin)8.91616163 32
29322
12하이그로마이신
(HygromycinB)5.62528177 27
35221
13토브라마이신
(Tobramycin,
내부표준물질)8.15468163 22
32413나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Collisiongas:Ar(아르곤,또는비활성기체)
(4)분석대상물질의개별조건
1밑줄그은이온은정량이온이며그외이온들은정성이온 임- 53 -※각생성이온(production)에대한질량분석기의기기조건은사용기기의 최적값으로
변경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함
7)정성시험
위의조건으로 얻어진크로마토그 램상의피크는표준용액피크의
머무름시간과비교하여일치하여야한다.또한표준용액과시험
용액의선구이온(precursorion)및생성이온(production)이일치
하여야하고,표준용액과시험용액의생성이온 간반응세기의비율
(responseratio)을비교하여그비율이20～50%이내에서일치하
여야한다.※주1)참조
8)정량시험
정성시험과 똑같은조건에서표준용액을일정농도로제조한후얻
어진크로마토그 램상의각피크높이또는면적을구하여검량선
을작성하고,시험용액의크로마토그 램으로부터정량이온
(quantitativeion)의각피크높이또는피크면적에따라각각정
량한다.단겐타마이신은겐타마이신 C1,겐타마이신 C1a,겐타마
이신C2,겐타마이신 C2a의각정량값의합으로정량한다.
- 54 -상대이온강도 (% ofbase peak) LC-MS/MS (relative)
>50% ≤20%
20%to50% ≤25%
10%to20% ≤30%
≤10% ≤50%
물질 정량한계 (mg/kg)
겐타마이신(Gentamicin) 0.006
네오마이신(Neomycin) 0.030
스트렙토마이신(Streptomycin)/
디히드로스트 렙토마이신(Dihydrostreptomycin )0.02
스펙티노마이신(Spectinomycin) 0.020
아미카신(Amikacin) 0.006
아프라마이신(Apramycin) 0.030
카나마이신(Kanamycin) 0.006
파로모마이신(Paromomycin) 0.006
하이그로마이신(HygromycinB) 0.006
※단,벌꿀,알,유에서6)나)(4)의분석대상물질이 검출될경우정
량분석은유에서겐타마이신을제외하고5.3의물질별정량분석법
을따른다.
주1)생성이온간반응세기의비율허용범위- 55 -그림1.액체크로마토그 래프/질량분석기에서표준품의 크로마토그 램.스
펙티노마이신(4.6분),하이그로마이신(5.6분),스트렙토마이신(5.8분),디
히드로스트 렙토마이신(5.9분),아미카신(6.8분),카나마이신(7.0분),아프
라마이신(7.9분),토브라마이신(내부표준물질,8.1분),겐타마이신(8.6
분),네오마이신(8.7분),파로모마이신(8.9분)
5.3.26을삭제하고5.3.27,5.3.28을각각5.3.26및5.3.27로한다.
5.3.29를5.3.28로하고5.3.29.1제1법중시험법적용범위를“축산물”
에서“유”로한다.
5.3.30,5.3.31을각각5.3.29및5.3.30으로한다.
5.3.32를아래와같이한다.
5.3.31나프실린(Nafcillin),디클록사실린(Dicloxacillin),벤질페니실린
(Benzylpenicillin,PenicillinG),아목시실린(Amoxicillin),암피실린
(Ampicillin),클록사실린(Cloxacillin),옥사실린(Oxacillin),,페녹시
메틸페니실린(Phenoxymethylpenicillin,PenicillinV)
1)시험법적용범위
축산물등에적용한다.
- 56 -2)분석원리
검체중분석대상물질을 나트륨이함유된인산완충용액(축산물),
아세토니트릴수용액(수산물)또는트리클로로 초산이함유된아세
토니트릴(유및알)로추출한후HLB카트리지로정제하여 액체
크로마토그 래프/질량분석기로분석한다.표준품과시료는 직사광
선을피하고어두운냉동실에보관한다.
3)장치
액체크로마토그 래프/질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그 래프용또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:각표준품을100mL용량플라스 크에정밀히달아
메탄올50mL로용해한후물로표시선까지채워100mg/L
로한다.조제된표준원액은냉동실에보관한다.
라)혼합표준용 액:각표준원액을물로희석하여적당한농도가
되게한다.
마)내부표준물질표준원액:피페라실린표준품을100mL용량
플라스크에정밀히달아메탄올50mL로용해한후물로표
시선까지채워100mg/L로한다.조제된내부표준물질표준
원액은냉동실에보관한다.- 57 -바)내부표준물질용액:내부표준원 액을물로희석하여적당한
농도로조제한다.
사)0.05%포름산용액:1L용량플라스크에포름산5mL첨
가한후,물로표시선까지채운다.
아)0.05%포름산아세토니트릴용액:1L용량플라스크에포
름산5mL첨가한후아세토니트릴로표시선까지채운다.
자)0.1M인산나트 륨완충용액(pH4.5):500mL용량플라스크
에제일인산나트 륨(NaH2PO4)6g을넣어물로표시선까지
채운후5MNaOH를가하여pH4.5로맞춘다.
차)0.17M황산:100mL용량플라스크에황산1.67g을넣은
후물로표시선까지채운다.
카)25mM인산칼륨완충용액(pH9.0):100mL용량플라스크에
인산이수소칼 륨(KH2PO4)0.34g넣은후물로표시선까지채
운후,NaOH를가하여pH9.0이되도록조절한다.
타)0.1M인산수소나트 륨용액:1L용량플라스 크에제이인산수
소나트륨(Na2HPO4)14.2g을넣고물에녹여표시선까지채
운다.
파)0.05mM인산수소칼 륨용액:1L용량플라스 크에인산이수소
칼륨(KH2PO4)6.8g을넣고물에녹여표시선까지채운다.
하)기타시약:특급또는이와동등한것
거)HLB카트리지(500mg,6cc)또는이와동등한것
- 58 -5)시험용액의조제
가)축산물
균질화한검체2g을50mL원심분리관에취하고,내부표준물질
(피페라실린)을첨가한다.0.1M인산나트 륨완충용액(pH4.5)6
mL,0.17M황산1.5mL,5%텅스텐산나트륨1.5mL를넣고
10분간진탕한후4℃에서5,000g로15분간원심분리한다.상층
액을50mL원심분리관에취하여5MNaOH를가하여pH8.1
∼8.5로조절후4℃에서5,000g로15분간원심분리후상층액
을취하여20%NaCl10mL를넣고이액을추출액으로한다.메
탄올5mL,물5mL,2%NaCl5mL로활성화시킨HLB카트
리지에추출액을흡착시키고2%NaCl5mL,25mM인산칼륨
완충용액(pH9.0)5mL순서로세척한후카트리지를건조시킨
다.아세토니트릴3mL로두번에걸쳐대상성분을용출시키고
40℃이하의수욕상에서질소농축시 킨다.5mM인산칼륨완충용
액(pH9.0)1mL로재용해하고0.2μmPVDF필터로여과하여
시험용액으로한다.
나)유및알
균질화한검체(유20mL,알5g)를50mL원심분리관에취하
고유는아세토니트릴50mL,알은20%트리클로로 초산0.5mL
이포함된아세토니트릴20mL을가하여10분간진탕혼합한다.- 59 -혼합액을9,000g,4℃에서10분간원심분리하고상층액을감압
농축플라스 크에넣은후50℃이하의수욕상에서4mL의잔사가
남을때까지감압농축한다.농축액을50mL원심분리관에 옮기고
아세토니트릴:물혼합액(50:50,v/v)6mL로플라스크를세
척하여앞의용액과합한다.원심분리관에헥산10mL을넣고5
분간진탕한후9,000g,4℃에서10분간원심분리를하여헥산
층을버린다.원심분리관에다시헥산10mL를가한후위의과
정을한번더반복한다.남은용액을농축플라스 크에옮기고5
0℃이하의수욕상에서2.5mL의잔사가 남을정도로농축하고
0.1M인산수소나트 륨용액(Na2HPO4)2.5mL과합한다.용액을
0.1M수산화나트 륨용액으로pH9.0±0.2로조절한다.미리메탄
올5mL,물5mL,0.05M인산수소나트 륨용액(Na2HPO4)5
mL로활성화를시킨HLB카트리지에시료추출액을흡착시키고,
0.05M인산수소나트 륨용액5mL용액으로세척한후카트리지
를건고시킨다.카트리지에0.05M인산이수소칼 륨용액(KH2PO4)
:아세토니트릴(50:50,v/v)5mL로대상성분을용출시키고5
0℃이하의수욕상에서질소가스를이용하여아세토니트릴을 날
려보낸다.남은용액을물로희석하여최종부피를5mL로맞추
고0.2μmPVDF필터로여과하여시험용액으로한다.
다)수산물
균질화한검체2g을정밀히달아균질기용기에넣고아세토니
- 60 -트릴:물혼합액(80:20v/v)10mL를넣고2분간균질화시킨
다.균질화시킨검체를50mL원심분리관으로 옮기고아세토니
트릴:물혼합액(80:20,v/v)10mL로잔사및용기를씻어내
려앞의시료와합한다.합친시료를5,000g,4℃에서10분간원
심분리하고상층액을감압농축플라스 크에넣은후50℃이하의
수욕상에서4mL의잔사가남을때까지감압농축한다.농축액을
여분의50mL원심분리관에 옮기고아세토니트릴:물혼합액
(50:50,v/v)6mL로플라스크를세척하여앞의용액과합한다.
원심분리관에헥산10mL을넣고5분간진탕한후5,000g,4℃
에서10분간원심분리를하여헥산층을버린다.원심분리관에다
시헥산10mL를가한후위의과정을한번더반복한다.남은
용액을농축플라스 크에옮기고50℃이하의수욕상에서2.5mL
의잔사가 남을정도로농축하고0.1M인산수소나트 륨용액
(Na2HPO4)2.5mL과합한다.미리메탄올5mL,물5mL,0.05
M인산수소나트 륨용액(Na2HPO4)5mL로활성화를시킨HLB
카트리지에시료추출액을흡착시키고,0.05M인산수소나트 륨용
액5mL용액으로세척한후카트리지를건고시킨다.카트리지
에0.05M인산이수소칼 륨용액(KH2PO4):아세토니트릴(50:50,
v/v)5mL로대상성분을용출시키고50℃이하의수욕상에서질
소가스를이용하여아세토니트릴을 날려보낸다.남은용액을물
로희석하여 최종부피를5mL로맞추고0.2μmPVDF필터로- 61 -여과하여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프측정조건
(1)칼럼:C18(2.1mm×150mm,3.5μm)또는이와동등한것
(2)이동상
(가)이동상A:0.05%포름산이포함된물
(나)이동상B:0.05%포름산이포함된아세토니트릴
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
0.0 90 10
10.0 50 50
15.0 25 75
15.1 90 10
20.0 90 10
(3)유속:0.2mL/분
(4)칼럼온도:35℃
(5)주입량:10μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Collisiongas:Ar(아르곤,또는비활성기체)
(4)분석대상물질의개별조건
- 62 -연
번물질명
(Compound)머무름
시간 (분)선구이온
(Precusor
ion, m/z)생성이온
(Product
ion, m/z)충돌에너지
(Collision
Energy,eV)
1나프실린
(Nafcillin)12.86415171
199
25633
14
14
2디클록사실린
(Dicloxacillin),13.52470114
160
198
31136
13
36
15
3벤질페니실린,페니실린 G
(Benzylpenicillin,PenicillinG)10.30335160
17612
13
4아목시실린
(Amoxicillin)2.65366114
34920
7
5암피실린
(Ampicillin)5.15350106
114
19217
29
17
6옥사실린
(Oxacillin)11.72402114
144
160
24333
27
13
13
7클록사실린
(Cloxacillin)12.48436160
164
27714
33
14
8페녹시메틸페니실린,
페니실린 V
(Phenoxymethylpenicillin ,
PenicillinV)11.22351114
160
19234
11
11
9피페라실린
(내부표준물질,Piperacillin)9.66518143
16020
12
1밑줄그은이온은정량이온이며그외이온들은정성이온 임
※각생성이온(production)에대한질량분석기의기기조건은사용기기의 최적값으로
변경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함
7)정성시험
위의조건으로 얻어진크로마토그 램상의피크는표준용액피크의
머무름시간과비교하여일치하여야한다.또한표준용액과시험- 63 -상대이온강도 (% ofbase peak)LC-MS/MS
(relative)
>50% ≤20%용액의선구이온(precursorion)및생성이온(production)이일치
하여야하고,표준용액과시험용액의생성이온 간반응세기의비율
(responseratio)을비교하여그비율이20～50%이내에서일치하
여야한다.※주1)참조
8)정량시험
가)정성시험과 똑같은조건에서표준용액을일정농도로제조한후
얻어진크로마토그 램상의각피크높이또는면적을구하여검량
선을작성하고,시험용액의크로마토그 램으로부터정량이온
(quantitativeion)의각피크높이또는피크면적에따라각각정
량한다.
나)정량한계
물질정량한계 (mg/kg 또는 mg/L)
축산물 수산물 유 알
나프실린 0.03 0.005 0.001 0.001
디클록사실린 0.03 0.005 0.001 0.001
벤질페니실린
(페니실린 G)0.01 0.001 0.005 0.001
아목시실린 0.01 0.005 0.002 0.001
암피실린 0.01 0.001 0.001 0.001
옥사실린 0.01 0.005 0.001 0.001
클록사실린 0.03 0.005 0.005 0.001
페녹시메틸페니실린
(페니실린 V)0.01 - - -
주1)생성이온간반응세기의비율허용범위
- 64 -20%to50% ≤25%
10%to20% ≤30%
≤10% ≤50%
그림1.액체크로마토그 래프/질량분석기에서표준품의 크로마토그 램.아
목시실린(2.6분),암피실린(5.1분),피페라실린(내부표준물질,9.6분),벤
질페니실린(10.3분),페녹시메틸페니실린(11.2분),옥사실린(11.7분),클
록사실린(12.5분),나프실린(12.8분),디클록사실린(13.5분)
5.3.33∼5.3.35를각각5.3.32∼5.3.34로한다.
5.3.36을5.3.35로하고아프라마이신의 시험법적용범위를“축·수산물”- 65 -에서“유,알및수산물등”으로한다.
5.3.37∼5.3.48을각각5.3.36∼5.3.47로한다.
5.3.48을다음과같이한다.
5.3.48독시싸이클린(Doxycycline),옥시테트라싸이클린 (Oxytetracycline),클
로르테트라싸이클린 (Chlortetracycline),테트라싸이클린(Tetracycline)
5.3.48.1제1법
1)시험법적용범위
축․수산물등에적용한다.
2)분석원리
가)유(乳)
검체에트리클로로 초산용액을넣어단백질을제거한후여과하여
액체크로마토그 래프/자외부흡광검출기로측정한다.
나)수산물
검체에 EDTA가함유된트리클로로 초산을가하여 균질화한 후원
심분리하고여기에헥산을가해추출하여농축한다음Sep-pakC18
카트리지에 흘려흡착및용출시켜액체크로마토그 래프/자외부흡광
검출기로측정한다.
다)유(乳)및수산물을제외한식품
검체에C18분말,수산(oxalicacid)과EDTA를넣고균질화한후혼
- 66 -합물을주사기에 채우고헥산,디클로로메 탄으로세척한다음,수산
함유메탄올로용출하여건조시킨다.여기에이동상을가하여용해
시킨후액체크로마토그 래프/자외부흡광검출기로측정한다.
3)장치
액체크로마토그 래프/자외부흡광검출기
4)시약및시액
가)표준원액
(1)유(乳),알(卵),수산물
옥시테트라싸이클린 ,클로르테트라싸이클린 ,테트라싸이클린,독시싸
이클린표준품을 각각정밀히달아100mL메스플라스 크에취하고
메탄올로표시선까지채워100mg/L농도가되게한다.
(2)유(乳),알(卵)을제외한식품
옥시테트라싸이클린 ,클로르테트라싸이클린 ,테트라싸이클린,독시싸
이클린표준품10mg을정밀히달아100mL메스플라스 크에취하
고메탄올10mL에잘녹인다음물로표시선까지채워잘혼합한
다(100ppm).
나)표준용액
(1)유(乳)
표준원액을물로희석해서사용한다.
(2)알(卵),수산물
표준원액을메탄올로10mg/L농도가되게한후희석하여사용한- 67 -다.
(3)유(乳),알(卵)을제외한식품
표준원액10mL을정확히취하여100mL메스플라스 크에옮기고
이동상으로표시선까지채운다음잘혼합하여사용한다(10ppm).
다)이동상：무수수산1.26g을물1L에용해시킨후이액720mL
와아세토니트릴180mL그리고메탄올100mL를잘혼합한후
0.45μm멤브레인필터로여과하여이동상으로사용한다.
라)기타시약：특급
5)시험용액의조제
가)유(乳)
검체1mL에1.5mL20%트리클로로 초산(TCA)용액을넣어30초
간균질화한 후0.45μm멤브레인필터로여과하여시험용액으로
한다.
나)알(卵)
C18분말2g을유발에취하고검체0.5g,수산과EDTA각각0.05
g을가하고 막자로C18분말과검체가 완전히균질화되게한다.여
과지(WhatmanNo.1)2장을10mL주사기에 넣고균질화된혼합
물을주사기에 옮겨담는다.혼합물위에여과지1장을놓고주사봉
을이용하여혼합물의부피가약4.5mL되게압축한다.헥산8mL
를가하여 흘려보내고주사기를 vacuummanifold로옮겨혼합물
내에남아있는헥산을음압하에서제거한다.다시디클로로메 탄8
- 68 -mL로세척하고주사기를 vacuummanifold로옮겨음압하에서 완
전히건조시킨다.0.01M메탄올함유수산8mL로용출시킨후그
용출액을질소농축하여건조한다.건조물에이동상1mL를가하여
10분간초음파를통과시키고용해시킨후4℃15,000rpm에서10분
간원심분리하여상층액을취해0.45μm멤브레인필터로여과하여
시험용액으로사용한다.
다)수산물
검체를마쇄한후10g을취해0.5%EDTA가함유된5%트리클로
로초산40mL를가하여균질기로2분간균질화한다.이액을8,000
rpm에서20분간원심분리해상층액을취해분액깔때기로옮기고헥
산：클로로포 름(9：1)혼합액40mL를가해혼합한후액층이분리
될때까지정치한다.분리된 액층중아래층은다른분액깔때기에
옮겨헥산：클로로포 름(9：1)혼합액을다시40mL가하여 액층을
분리한다.분리된아래액층은농축플라스 크에받아3mL정도가
되도록40℃에서감압농축한다.농축액은활성화시킨Sep-pakC18
카트리지에 흘린후,증류수40mL를흘려세척한다.카트리지에
흡착된성분은메탄올40mL를흘려용출시키고,용출액은다시감
압하에서농축기로건조시킨다.시험액이건조된플라스크에이동
상2mL를가하여녹이고0.45μm멤브레인필터로여과한후시
험용액으로사용한다.
*Sep-pakC18카트리지 활성화- 69 -진공음압기에장착하여20mL의메탄올과20mL의증류수를 순차
적으로흘려세척하고,5%EDTA용액10mL를흘린다.
라)유(乳),알(卵)을제외한식품
C18분말2g을유발에취하고검체0.5g,수산과EDTA각각0.05
g을가하고 막자로C18분말과검체가 완전히균질화되게한다.여
과지(WhatmanNo.1)2장을10mL주사기에 넣고균질화된혼합
물을주사기에 옮겨담는다.혼합물위에여과지1장을놓고주사봉
을이용하여혼합물의부피가약4.5mL되게압축한다.헥산8mL
를가하여 흘려보내고주사기를 vacuummanifold로옮겨혼합물
내에남아있는헥산을음압하에서제거한다.다시디클로로메 탄8
mL로세척하고주사기를 vacuummanifold로옮겨음압하에서 완
전히건조시킨다.0.01M수산함유메탄올8mL로용출시킨후그
용출액을40℃에서건조시키고잔류물에이동상0.5mL을가하여
초음파장치에서5분간방치하여완전히용해시킨다음원심분리하
여상층액을0.45μm멤브레인필터로여과하여시험용액으로사용
한다.
6)시험조작
가)측정조건
(1)칼럼
(가)유(乳),알(卵),수산물
:C18(4.6×250mm,5μm)또는이와동등한것
- 70 -(나)유(乳),알(卵)을제외한식품
:μ-BondapakC18(3.9×300mm,10μm)또는이와동등한것
(2)이동상：0.01M수산：아세토니트릴 ：메탄올(700：200：100)
(3)유속：1.0mL/분
(4)측정파장：UV360nm
7)정량시험
가)시험용액및표준용액을위의조건에따라액체크로마토그 래프
에주입한다.얻어진각피크의머무름시간을비교하여피크의
높이또는면적으로검량선을작성하여검체중옥시테트라싸
이클린,클로르테트라싸이클린 ,테트라싸이클린,독시싸이클린의
함량을각각구한다.
나)독시싸이클린정량한계 ：0.05mg/kg
8)확인시험
가)측정조건
(1)액체크로마토그 래프조건
-칼럼:C18(2.1×100mm,1.7μm)또는이와동등한것
-칼럼온도:35℃
-이동상
․이동상A:0.1%개미산용액
․이동상B:0.1%개미산아세토니트릴- 71 -시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
0.0 70 30
3.0 60 40
3.1 70 30
4.0 70 30
-유속:0.3mL/분
-주입량:5μL
(2)질량분석기조건
-Ionization:ESI(positive)
-Capillarytemperature:350℃
-Collisiongas:아르곤(Ar)
-Collisionenergy:15～30V
나)확인
시험용액및표준용액을각각질량분석기에주입하여아래표의특
이이온을확인한다.표준용액에서분리확인되는 특이이온이시험용
액에서존재하는지를비교확인한다.얻어진크로마토그 램상의피크
는어느측정조건에서도표준용액피크의머무름시간과일치하여
야한다.
물질Precursor
ion(m/z)Fragmention(m/z)
옥시테트라싸이클린 461426,443,381
테트라싸이클린 445427,410,154
클로르테트라싸이클린 479462,444,154
독시싸이클린 445428,321,154
- 72 -5.3.48.2제2법
1)시험법적용범위
벌꿀등에적용한다.
2)분석원리
아카시아꿀,유채꿀,잡화꿀중의옥시테트라싸이클린 ,클로르테트라
싸이클린,테트라싸이클린,독시싸이클린은0.1M초산나트륨완충
용액(pH5.0)으로추출한후약양이온교환카트리지로정제하고 밤
꿀등기타꿀중의옥시테트라싸이클린 ,클로르테트라싸이클린 ,테
트라싸이클린,독시싸이클린은 맥바인(Macllvaine)완충용액으로추
출하여페닐카트리지 와약양이온교환카트리지로정제한 후액체
크로마토그 래프/질량분석기로분석한다.
3)장치
액체크로마토그 래프/질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매:액체크로마토그 래프용또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:옥시테트라싸이클린 ,클로르테트라싸이클린 ,테트라
싸이클린,독시싸이클린표준품을 각각정밀히달아
100μg/mL이되게한다.
라)표준용액:표준원액을0.1%개미산수용액으로희석하여사용- 73 -한다.
마)0.1M초산나트륨완충용액(pH5.0):1L메스플라스 크에초산
나트륨(CH3COONa)8.2g을
취하여물에녹이고초산으
로pH5.0으로맞춘후표시
선까지채운다.
바)2%개미산메탄올용액:100mL메스플라스 크에개미산용액
(≥95%)2.1mL를취한후메탄올에녹
여표시선까지채운다.
사)맥바인(Macllvaine)완충용액:구연산(citricacidmonohydrate)
11.8g과EDTA․2Na33.62g및
제이인산나트 륨(d i s o d i u m
hydrogenphosphatedihydrate)
13.72g을물1L에녹인다.
아)페닐(Phenyl)카트리지:페닐충진제(1,000mg,6cc)또는이
와동등한것
자)약양이온교환카트리지:WCX(WeakCationExchange)카트
리지(150mg,6cc)또는이와동등한것
차)기타시약:특급
5)시험용액의조제
가)아카시아꿀,유채꿀,잡화꿀
- 74 -균질화한검체5g을50mL원심관에취하여0.1M초산나트륨
완충용액(pH5.0)10mL를가한후흔들어섞는다.이용액을미
리메탄올5mL와물5mL로활성화시킨약양이온교환카트리지
에흡착시키고,물5mL와아세토니트릴5mL로세척후2%개
미산메탄올용액10mL로용출한다.용출액은40℃이하의수욕
중에서 감압하여농축하고,잔류물은0.1%개미산수용액1mL에
녹인후0.2μmPVDF멤브레인필터로여과하여시험용액으로한
다.
나)밤꿀,기타꿀(현행과같음)
균질화한검체2g을50mL원심관에취하고맥바인(Macllvaine)
완충용액10mL를가하여 흔들어섞는다.이용액을미리메탄올
5mL,아세토니트릴5mL,0.01M수산5mL,포화Na2EDTA
용액5mL순으로활성화시킨페닐카트리지에 흡착시키고,0.01
M수산용액5mL로세척후,에틸아세테이트:메탄올(9:1)10
mL로용출시킨다.이용출액에물2mL를가하고40℃이하의수
욕중에서 감압하여잔류물이2mL가되도록농축한다.이농축액
에0.1M초산나트륨완충용액(pH5.0)5mL를가한후미리메
탄올5mL와물5mL로활성화시킨약양이온교환카트리지에 흡
착시키고,물5mL와아세토니트릴5mL로세척후2%개미산
메탄올용액10mL로용출시킨다.용출액은40℃이하의수욕중에
서감압하여농축하고잔류물은0.01M수산용액:아세토니트릴- 75 -(8:2)용액1mL로녹인후0.2μmPVDF멤브레인필터로여과하
여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프측정조건
(1)칼럼:C18(2.1×150mm,3.5μm)또는이와동등한것
(2)칼럼온도:40℃
(3)이동상
(가)이동상A:0.1%개미산수용액
(나)이동상B:0.1%개미산이함유된아세토니트릴용액
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
09010
29010
71090
91090
129010
159010
(4)유속:0.2mL/분
(5)주입량:10μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Capillaryvoltage:4.2kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤)
- 76 -7)정성시험
위의조건에서 얻어진크로마토그 램상의피크는표준물질피크의
머무름시간과일치하여야한다.또한표준용액과시험용액을각각
질량분석기에주입하였을때선구이온(precursorion)및생성이온
(production)이일치하여야하고,표준용액과시험용액의생성이온
간반응세기의비율(responseratio)을비교하여그비율이20～50%
이내에서일치하여야한다.※주1)참조
8)정량시험
가)정성시험과동일한조건에서 얻어진표준용액크로마토그 램상의
각물질에대한정량이온(옥시테트라싸이클린 m/z426이온,클
로르테트라싸이클린 m/z154이온,테트라싸이클린 m/z154이
온,독시싸이클린 m/z428이온)의피크면적값을구하여검량
선을작성하고,시험용액크로마토그 램상의각물질에대한정량
이온의피크면적값에따라각각의함량을구한다.- 77 -상대이온강도 (% ofbase peak) LC-MS/MS (relative)
>50% ≤20%
20%to50% ≤25%
10%to20% ≤30%
≤10% ≤50%물질명
(Compounds)분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursor
ion,m/z)생성이온
(Production,
m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
독시싸이클린
(Doxycycline)444.4444.153344598
154
42844
32
22
옥시테트라싸이클린
(Oxytetracycline)460.4460.1482461201
426
44342
22
16
클로르테트라싸이클린
(Chlortetracycline)478.9478.1143479154
444
46228
24
18
테트라싸이클린
(Tetracycline)444.4444.1533445154
410
42730
18
16
1밑줄그은이온은정량이온이며그외이온들은정성이온 임
※각생성이온(production)에대한질량분석기의기기조건은사용기기의 최적값으로변
경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함
나)정량한계:0.01mg/kg
주1)생성이온간반응세기의비율허용범위
- 78 -
옥시테트라싸이클린
클로르테트라싸이클린
테트라싸이클린
독시싸이클린
그림1.액체크로마토그 래프/질량분석기에서표준품의 크로마토그 램.옥
시테트라싸이클린 (1ng,5.1분),테트라싸이클린(1ng,5.3분),
클로르테트라싸이클린 (1ng,5.7분),독시싸이클린(1ng,5.8분)
5.3.49와5.3.50을삭제한다.
5.3.51∼5.3.72를각각5.3.49∼5.3.70으로하고5.3.73및5.3.74를
삭제한다.
5.3.75∼5.3.83을각각5.3.71∼5.3.79로한다.
5.3.84를5.3.80으로하고시험법적용범위를“축·수산물”에서“유,알및수산
물”로한다.- 79 -5.3.85∼5.3.106을각각5.3.81∼5.3.102로한다.
5.3.107을5.3.103으로하고시험법적용범위를“축산물”에서“유”로한
다.
5.3.108∼5.3.116을각각5.3.104∼5.3.112로한다.
[별표4],(9)델타메트린(Deltamethrin)중다음항목을신설한다.
양파 0.05
[별표4],(29)디플루벤주론(Diflubenzuron)중다음항목을각각신설
한다.
대두0.1
풋콩1.0
[별표4],(101)이미다클로프리드 (Imidacloprid)중다음항목을신설
한다.
참깨0.05
[별표4],(114)카보퓨란(Carbofuran)의잔류물의정의를다음과같이
- 80 -한다.
◎잔류물의정의:Benfuracarb,Carbofuran,3-hydroxycarbofuran ,
Carbosulfan,Furathiocarb의합을carbofuran으로함
[별표4],(116)카탑하이드로클로라이드 (Cartaphydrochloride)중다
음항목을신설한다.
마늘 0.05
[별표4],(133)테부코나졸(Tebuconazole)중다음항목을 각각신설
한다.
상추 0.05
양상추 0.05
[별표4],(227)아세타미프리드(Acetamiprid)중다음항목을신설한다.
풋콩0.5
[별표4],(237)피메트로진(Pymetrozine)중다음항목을각각신설한
다.
엇갈이배추0.5
배추 0.2
참외 0.1- 81 -[별표4],(257)플루퀸코나졸(Fluquinconazole))중다음항목을 각각
신설한다.
상추 0.05
오디 2.0
[별표4],(299)티플루자마이드(Thifluzamide)중다음항목을신설한
다.
파 0.05
[별표4],(321)디노테퓨란(Dinotefuran)중다음항목을신설한다.
마늘 0.05
[별표4],(324)비페나제이트(Bifenazate)중다음항목을신설한다.
토마토 0.3
[별표4],(333)테부피림포스(Tebupirimfos)중다음항목을신설한다.
양파 0.05
[별표4],(352)메톡시페노자이드 (Methoxyfenozide )중다음항목을
신설한다.
- 82 -당근 0.05
[별표4],(394)비스트리플루론(Bistrifluron)중“엇갈이배추1.0”을
“엇갈이배추3.0”으로하고,“배추0.3”을“배추1.0”으로한다.
[별표4],(408)스피네토람(Spinetoram)중다음항목을 각각신설한
다.
가지 0.5
브로콜리0.5
양배추0.05
[별표4],(416)클로란트라닐리프롤 (Chlorantraniliprole )중다음항목
을신설한다.
면실 0.3†
[별표4],(417)플루벤디아마이드 (Flubendiamide)중다음항목을각각
신설한다.
대두 0.1
풋콩 1.0
[별표4],(419)프로헥사디온-칼슘(Prohexadione-Calcium)중다음항목을- 83 -각각신설한다.
마늘 0.05
풋마늘0.05
양파 0.05
[별표4],(422)펜티오피라드(Penthiopyrad)중다음항목을 각각신
설한다.
고추 1.0
피망 1.0
[별표4],(423)피콕시스트로빈(Picoxystrobin)중다음항목을각각신설한
다.
마늘 0.05
풋마늘2.0
파 0.3
[별표4],(424)피리플루퀴나존(Pyrifluquinazon)중다음항목을신설
한다.
감 0.5
[별표4],(428)플루오피람(Fluopyram)중다음항목을 각각신설한
- 84 -다.
가지 2.0
복숭아0.4
[별표4],(430)설폭사플로르(Sulfoxaflor)중다음항목을각각신설한
다.
양상추 5.0
매실 0.3
[별표4],(433)사이안트라닐리프롤 (Cyantraniliprole)중다음항목을
각각신설한다.
마늘0.05
아몬드 0.04†
피칸0.01†
면실 1.5†
유채씨0.8†
해바라기 씨0.5†
[별표4],(437)플룩사피록사드(Fluxapyroxad)중다음항목을신설한
다.
양파 0.05- 85 -[별표4],(438)피리오페논(Pyriofenone)중다음항목을신설한다.
토마토 3.0
[별표4],(439)스피로테트라맷(Spirotetramat)중다음항목을 각각
신설한다.
감자 0.3
피망 2.0
[별표4],(442)이프펜카바존(Ipfencarbazone)을다음과같이신설한
다.
◎잔류물의정의:Ipfencarbazone
쌀 0.05
[별표4],(443)테퓨릴트리온(Tefuryltrione)을다음과같이신설한다.
◎잔류물의정의:Tefuryltrione
쌀 0.05
[별표4],(444)트리아파몬(Triafamone)을다음과같이신설한다.
◎잔류물의정의:Triafamone
쌀 0.05
- 86 -[별표4],(445)이마자픽(Imazapic)을다음과같이신설한다.
◎잔류물의정의:Imazapic
대두 0.3†
[별표4],(446)이마자피르(Imazapyr)를다음과같이신설한다.
◎잔류물의정의:Imazapyr
대두 3.0†
[별표5],(79)포스티아제이트(Fosthiazate)를다음과같이각각신설
한다.
◎잔류물의정의:Fosthiazate
수삼 0.05
건삼 0.1
[별표6],(21)사이퍼메트린(Cypermethrin)중“유0.05(F)”를삭제한다.
[별표7],(4)노보비오신(Novobiocin)을다음과같이한다.
(4)노보비오신(Novobiocin):항균제
◎잔류물의정의:Novobiocin
식품명 mg/kg
소근육1.0
닭근육1.0- 87 -칠면조근육1.0
오리근육1.0
[별표7],(29)오르메토프림(Ormethoprim)을다음과같이한다.
(29)오르메토프림(Ormethoprim):항염증제
◎잔류물의정의:Ormethoprim
식품명 mg/kg
칠면조근육0.1
오리근육0.1
닭근육0.1
닭간0.1
닭지방0.1
닭신장0.1
어류*0.1
[별표7],(30)옥소린산(Oxolinicacid)을다음과같이한다.
(30)옥소린산(Oxolinicacid):항균제
◎잔류물의정의:Oxolinicacid
식품명 mg/kg
소근육0.05
돼지근육0.05
- 88 -닭근육0.1
닭간0.15
닭지방0.05
닭신장0.15
송어0.1
연어0.1
방어0.1
뱀장어0.1
은어0.1
잉어0.1
갑각류0.1
[별표7],(32)올레안도마이신(Oleandomycin)을다음과같이한다.
(32)올레안도마이신(Oleandomycin):항균제
◎잔류물의정의:Oleandomycin
식품명 mg/kg
소근육0.15
유0.05
[별표7],(36)죠렌(Zoalene)을다음과같이한다.
(36)죠렌(Zoalene):항원충제- 89 -◎잔류물의정의:Zoalene
식품명 mg/kg
닭근육3.0
칠면조근육3.0
부칙
제1조(시행일)이고시는고시후60일이경과한날부터시행한다.
제2조(적용례)이고시는이고시시행이후최초로제조·가공또는
수입한식품(수입하기위해선적한식품을포함한다)부터적용한다.
제3조(경과조치)이고시는이고시시행당시제조․가공․판매또는
수입되어검사가진행중인사항에대하여는종전의규정에따른다.
- 90 -현 행 개 정(안)
제1.총칙
(생략)
제2.식품일반에 대한 공통기준
및규격
1.(생략)
2.식품원료기준
1)～2)(생략)
<신설>제1.총칙
(현행과같음)
제2.식품일반에 대한 공통기준
및규격
1.(현행과같음)
2.식품원료기준
1)～2)(현행과같음)
3)한시적인정식품원료의추
가등재
(1)「식품등의한시적기준및
규격인정기준」에따라
인정된식품원료는다음의
어느하나를충족하면「식
품의기준및규격」[별표
1]“식품에사용할수있는
원료”의목록또는[별표
2]“식품에제한적으로사
용할수있는원료”의목록
에추가로등재할수있다.
①한시적기준및규격을
인정받은날로부터3년이
경과한경우
②한시적기준및규격을인
- 91 -제3.∼제8.(생략)
제9.일반시험법(생략)
1∼3(생략)
4.식품중잔류농약분석법
4.1∼4.1.3.42(생략)
4.1.4단성분분석법(Individual
residuemethods)
4.1.4.1∼4.1.4.173(생략)
<신설>정받은자가3인이상인경
우
③한시적기준및규격을인
정받은자가등재를요청하
는경우(다만,인정받은자
가2명인경우모두등재를
요청하는경우)
제3.∼제8.(현행과같음)
제9.일반시험법(현행과같음)
1∼3(현행과같음)
4.식품중잔류농약분석법
4.1∼4.1.3.42(현행과같음)
4.1.4단성분분석법(Individual
residuemethods)
4.1.4.1∼4.1.4.173(현행과같음)
4.1.4.174이프펜카바존(Ipfencarbazone)
1)분석법적용범위
곡류,과일류,채소류,콩류및
서류등의식품에적용한다.
2)분석원리
검체를아세톤으로추출한후
헥산을이용하여 액-액분배하고
실리카카트리지로정제한후기체
크로마토그래프로분석한다.
3)장치
- 92 -가)기체크로마토그래프-전자포
획검출기(GC-ECD)
나)기체크로마토그래프-질량분
석기(GC-MS)
4)시약및시액
가)용매:잔류농약시험용또는
특급
나)물:3차증류수또는이와동
등한것
다)표준원액:표준품을아세톤에
녹여1,000mg/L이되게한다.
라)표준용액:표준원액을각각
아세톤에녹여적당한농도로희석
한다.
마)실리카카트리지:실리카(1g)
고정상이충전되어있는일회용
카트리지(용량6mL)또는이와
동등한것을사용한다.
바)기타시약:잔류농약시험용
또는특급
5)시험용액의조제
가)추출
검체를분쇄하여균질화한후10
g(곡류및콩류는약1kg을혼합
하여표준체420㎛를통과하도록
한10g,과일류․채소류․서류는
약1kg을잘게갈아혼합한10g)을- 93 -정밀히달아균질기용기에넣고
(건조검체의경우증류수10mL를
가한후30분간방치)아세톤100
mL을가하여진탕기에서5분간진탕
한후추출물을여과지와여과보조제가
깔려있는부흐너깔때기로감압여과
하고,아세톤15m L로잔사및용기를
씻어내려앞의여액과합한다.여과
액을500mL용량의분액깔때기에
옮기고포화식염수20mL와증류
수100mL을차례로가한후헥산
50mL를가하여2분간격렬하게
진탕하고층이완전히분리될때까지
정치한다.헥산층을무수황산나트
륨에통과시켜감압농축플라스 크에
받고,수용액층에헥산50mL를
추가로가하고헥산층을무수황산
나트륨에통과시켜감압농축플라스
크에받는과정을반복한다.이를
40℃이하의수욕상에서감압하여
용매를모두날려버리고플라스크
를상온으로 냉각한후,잔류물을
헥산10mL에녹인다.
나)정제
실리카카트리지에헥산5mL를
2～3방울/초의속도로유출하여버
린다.이어서고정상상단이노출
- 94 -되기전에‘가)추출’로부터얻은추
출액중2mL를카트리지상단에
넣고1～2방울/초의속도로용출시
키고고정상상단이노출되기전에
에틸아세테이트 /헥산(10/90,v/v)10
mL를유출시켜버린후에틸아세
테이트/헥산(20/80,v/v)10mL를
유출시켜받은시험액을감압농축
플라스크에취한다.이를40℃이하
수욕상에서감압하여용매를모두
날려버리고플라스크를상온으로
냉각한후,잔류물에아세톤을가
하여최종부피2mL가되게하여
시험용액으로한다.
6)시험조작
가)기체크로마토그래프의측정조건
(1)칼럼:DB-5(0.25mmi.d.
×30m,0.25㎛)또는이와동등
한것
(2)이동상가스및유량:질소,1
mL/min.
(3)오븐온도:200℃에서검체를
주입하고10℃/min.의비율로온도를
280℃까지상승시켜10분간유지
(4)주입부온도:250℃
(5)검출기온도:280℃
(6)주입량:1μL,splitratio- 95 -(20:1)
나)검량선작성
표준용액을농도별로일정량
취하여기체크로마토그래프에각각
주입한다.얻어진크로마토그램상의
각피크높이또는면적을구하여
검량선을작성한다.
다)표준품의크로마토그램
그림.기체크로마토그래프에서
표준품의크로마토그램
이프펜카바존(9.7분)
라)정량한계
0.01mg/kg
7)정량시험
위조건으로 얻어진크로마토
그램상의피크가표준용액피크의
머 무름시간과일치할때피크높이
또는면적을검량선에대입하여
정량한다.
8)확인시험
기체크로마토그래프-질량분석기
상의머무름시간과질량분석스펙
트럼으로이프펜카바존을확인한다.
가)기체크로마토그래프-질량분석
- 96 -<신설>기의측정조건
(1)칼럼:DB-5MS(0.25mm
i.d.×30m,0.25㎛)또는이와
동등한것
(2)이동상가스및유량:헬륨,
1mL/min.
(3)오븐온도:200℃에서검체를
주입하고10℃/min.의비율로온도
를280℃까지상승시켜10분간유
지
(4)주입부:260℃
(5)인터페이스온도:280℃
(6)분자량범위:100~550m/z
(7)주입량:1μL,splitless
표.기체크로마토그래프-질량분석기
분석을위한특성이온
머무름
시간 (분)분자량 (MW)관측질량
(Exact
mass)관측이온
(m/z)
8.9 427.2 426 198, 228
4.1.4.175테퓨릴트리온(Tefuryltrione)
1)시험법적용범위
곡류,과일류,채소류,콩류및
서류등의식품에적용한다.
2)분석원리- 97 -검체중테퓨릴트리온을포름산을
포함한아세토니트릴로추출한후
에틸아세테이트 /디클로로메 탄혼합
용매로액-액분배하고플로리실
카트리지로정제한후액체크로마
토그래프-질량분석기로분석한다.
3)장치
가)액체크로마토그래프-질량
분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매:잔류농약시험용또는
특급
나)물:3차증류수또는이와
동등한것
다)표준원액:표준품을아세토니
트릴에녹여1,000mg/L이되게
한다.
라)표준용액:표준원액을무처리
시료추출물을이용하여적당한
농도로각각혼합,희석한다.
마)플로리실카트리지:플로리실
고정상(1g)이충진되어있는일회용
카트리지(용량6mL)또는이와
동등한것을사용한다.
바)기타시약:잔류농약시험용
또는특급
5)시험용액의조제
- 98 -가)추출
검체를분쇄하여균질화한후
10g(곡류및콩류는약1kg을
혼합하여표준체420㎛를통과
하도록분쇄한후그10g,과일류․
채소류․서류는약1kg을잘게
갈아혼합한10g)을정밀히달아
균질기용기에넣고(건조검체의
경우증류수10mL를가한후30
분방치)아세토니트릴30mL,증류수
10mL및포름산0.4mL를가하여
진탕기에서30분간진탕한후추출
물을여과지와여과보조제가 깔려
있는부흐너깔때기로감압여과하고,
아세토니트릴30mL로잔사및
용기를씻어내려앞의여액과합친다.
여과액을500mL분액깔때기에
옮기고포화식염수20mL와증류수
40mL를차례로가한후에틸아세
테이트/디클로로메 탄(70/30,v/v)
혼합용매20mL를가하여2분간
격렬하게진탕하고층이완전히
분리될때까지정치한다.상층의
에틸아세테이트 /디클로로메 탄층을
무수황산나트륨에통과시켜감압
농축플라스 크에받고,남아있는
수용액층에에틸아세테이트 /디클- 99 -로로메탄(70/30,v/v)혼합용매20
mL를추가로가하고상층의에틸
아세테이트 /디클로로메 탄층을
무수황산나트륨에통과시켜감 압농축
플라스크에받는과정을3회반복
한다.이를40℃이하의수욕상에서
감압하여용매를모두날려버리고
플라스크를상온으로 냉각한후,
잔류물을아세톤/디클로로메 탄(50/50,
v/v)혼합용매10mL에녹인다.
나)정제
플로리실카트리지에아세톤/
디클로로메 탄(50/50,v/v)혼합용매
5mL를2～3방울/초의속도로유출
하여버린다.이어서고정상상단이
노출되기전에‘가)추출’로부터얻은
추출 액중1mL를카트리지상단에
넣고1～2방울/초의속도로용출시
키고고정상상단이노출되기전에
아세톤/디클로로메 탄(50/50,v/v)
혼합용매5mL를유출시켜씻어
버린후4%포름산이포함된아세톤
/디클로로메 탄(60/40,v/v)혼합용매
8mL를유출시켜받은시험액을
감압농축플라스 크에취한다.이를
40℃이하수욕상에서감압하여
용매를모 두날려버리고플라스크를
- 100 -상온으로 냉각한후,잔류물에
아세토니트릴을가하여최종부피
2mL가되게하여시험용액으로
한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그래프측정조건
(1)칼럼:C18(2mmi.d.×100
mm,3㎛)또는이와동등한것
(2)칼럼온도:40℃
(3)이동상:
(가)이동상A:0.1%포름산
포함아세토니트릴
(나)이동상B:0.1%포름산
수용액
시간 (분) A(%) B(%)
0.1 50 50
3 80 20
4 80 20
5.5 50 50
15 50 50
(4)이동상유량:0.25mL/min.
(5)주입량:10μL
나)질량분석기 측정조건
(1)이온화:ESIpositive-ion
mode
(2)Capillarytemperature:300℃
(3)Sprayvoltage:3.5kV- 101 -(4)Collisiongas:아르곤
(5)충돌에너지
분석성분선구이온
(Precursor
ion, m/z)토막이온
(Fragme
ntion,
m/z)충돌에너지
(Collision
energy,
eV)
테퓨릴트리온443261 30
305 20
※각토막이온에대한질량
분석기의기기조건은사용기기의
최적값으로변경하여사용할수
있으며,제시된이외의토막이온도
적용이가능함
나)검량선작성
표준용액을아세토니트릴에
일정농도로 희석한다음검체에
주입하고시험용액의조제과정에
따라시험한후,액체크로마토그래프
-질량분석기에 각각주입한다.
이온의피크높이또는면적을구
하여검량선(matrixmatched
calibrationcurve)을작성한다.
다)표준품의크로마토그램
- 102 -<신설>
그림.액체크로마토그래프에서
표준품의크로마토그램
테퓨릴트리온(4.3분)
라)정량한계
0.03mg/kg
7)정량시험
위조건으로 얻은크로마토그램
상의피크가표준용액피크의머 무 름
시간과일치할때피크높이또는
면적을검량선에대입하여정량한다.
4.1.4.176트리아파몬(Triafamone)
1)시험법적용범위
곡류,과일류,채소류,콩류및
서류등의식품에적용한다.
2)분석원리
검체중트리아파몬을포름산을
포함한아세토니트릴로추출한후
에틸아세테이트 /디클로로메 탄혼합
용매로액-액분배하고C18카트리
지로정제한후액체크로마토그
래프-질량분석기로분석한다.- 103 -3)장치
가)액체크로마토그래프-질량
분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매:잔류농약시험용또는
특급
나)물:3차증류수또는이와동
등한것
다)표준원액:표준품을아세토
니트릴에 녹여1,000mg/L이되게
한다.
라)표준용액:표준원액을무처리
시료추출물을이용하여적당한
농도로각각혼합,희석한다.
마)C18카트리지:C18고정상(500
mg)이충진되어있는일회용카트
리지(용량3mL)또는이와동등
한것을사용한다.
바)기타시약:잔류농약시험용
또는특급
5)시험용액의조제
가)추출
검체를분쇄하여균질화한후
10g(곡류및콩류는약1kg을
혼합하여표준체420㎛를통과
하도록분쇄한후그10g,과일류․
채소류․서류는약1kg을잘게
- 104 -갈아혼합한10g)을정밀히달아
균질기용기에넣고(건조검체의
경우증류수10mL를가한후
30분방치)아세토니트릴30mL,
증류수10mL및포름산0.4mL를
가하여진탕기에서30분간진탕한후
추출물을여과지와여과보조제가
깔려있는부흐너깔때기로감압여과
하고,아세토니트릴30mL로잔사
및용기를씻어내려앞의여액과
합친다.여과액을500mL용량의
분액깔때기에옮기고포화식염수
20mL와증류수40mL를차례로
가한후에틸아세테이트 /디클로로
메탄(70/30,v/v)혼합용매20mL를
가하여2분간격렬하게진탕하고
층이완전히분리될때까지정치한다.
상층의에틸아세테이트 /디클로로
메탄층을무수황산나트륨에통과
시켜감압농축플라스 크에받고,
남아있는수용액층에에틸아세
테이트/디클로로메 탄(70/30,v/v)
혼합용매20mL를추가로가하고
상층의에틸아세테이트 /디클로로
메탄층을무수황산나트륨에통과
시켜감 압농축플라스 크에받는과정을
3회반복한다.이를40℃이하의- 105 -수욕상에서감압하여용매를모두
날려버리고플라스크를상온으로
냉 각한후,잔류물을증류수10mL에
녹인다.
나)정제
C18카트리지에1%포름산이
함유된메탄올3mL를2～3방울/
초의속도로유출하여버린다.
이어서고정상상단이노출되기전에
1%포름산이함유된메탄올/물
(20/80,v/v)3mL를2～3방울/초의
속도로유출하여버린다.고정상
상단이노출되기전에‘가)추출’로
부터얻은추출액중2mL를카트
리지상단에넣고1～2방울/초의
속도로용출시키고고정상상단이
노출되기전에1%포름산이함유된
메탄올/물(80/20,v/v)4mL를
유출시켜받은시험액을시험용액
으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그래프-질량
분석기측정조건
(1)칼럼:C18(2mmi.d.×100
mm,3㎛)또는이와동등한것
(2)칼럼온도:40℃
(3)이동상:0.1%포름산포함
- 106 -아세토니트릴 /0.1%포름산수용액
(90/10,v/v)
(4)이동상유량:0.25mL/min.
(5)주입량:5μL
나)질량분석기 측정조건
(1)이온화:ESIpositive-ion
mode
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Sprayvoltage:4.0kV
(4)Collisiongas:아르곤
(5)충돌에너지
분석성분선구이온
(Precursor
ion, m/z)토막이온
(Fragment
ion, m/z)충돌에너지
(Collision
energy,
eV)
트리아파몬407160 43
245 24
※각토막이온에대한질량
분석기의기기조건은사용기기의
최적값으로변경하여사용할수있
으며,제시된이외의토막이온도
적용이가능함
다)검량선작성
표준용액을아세토니트릴에
일정농도로 희석한다음검체에
주입하고시험용액의조제과정에
따라시험한후,액체크로마토그래프- 107 -<신설>-질량분석기에 각각주입한다.
이온의피크높이또는면적을구
하여검량선(matrixmatched
calibrationcurve)을작성한다.
라)표준품의크로마토그램
그림.액체크로마토그래프에서
표준품의크로마토그램
트리아파몬(5.8분)
마)정량한계
0.03mg/kg
7)정량시험
위조건으로 얻어진크로마토
그램상의피크가표준용액피크의
머 무름시간과일치할때피크높이
또는면적을검량선에대입하여
정량한다.
4.1.4.177이마자피르(Imazapyr)
1)분석법적용범위
곡류,서류,콩류,과일류및
채소류등의식품에적용한다.
- 108 -2)분석원리
검체중이마자피르를메탄올로
추출한후pH를2.5로조절하고
디클로로메 탄으로액-액분배한후
액체크로마토그래프로분석한다.
3)장치
가)액체크로마토그래프-자외부
흡광검출기(HPLC-UVD)
나)액체크로마토그래프-질량
분석기(LC-MS)
4)시약및시액
가)용매:잔류농약시험용또는
특급
나)물:3차증류수또는이와
동등한것
다)표준원액:표준품을메탄올에
녹여1,000mg/L이되게한다.
라)표준용액:표준원액을각각
메탄올/0.5%아세트산수용액
(50/50,v/v)에녹여적당한농도로
혼합,희석한다.
마)기타시약:잔류농약시험용
또는특급
5)시험용액의조제
가)추출
검체를분쇄하여균질화한후
10g(곡류및콩류는약1kg을- 109 -혼합하여표준체420㎛를통과
하도록분쇄한후10g,과일류․
채소류·서류는약1kg을잘게
갈아혼합한10g)을정밀히달아
균질기용기에넣고메탄올100
mL(과일류,채소류,콩류의경우
60%메탄올,곡류및서류는70%
메탄올)를가하여진탕기에서5분간
진탕한다.이를여과지가 깔려있는
부흐너깔때기로감압여과한뒤
메탄올30mL로잔사및용기를
씻어내려앞의여액과합한다.
합친여액을40℃이하의수욕상에서
감압하여농축액이40mL이하가
될때까지메탄올을모 두날려버리고
플라스크를상온으로 냉각한후,
증류수60mL를더하고4NHCl을
가하여pH2.5가되도록한다.
이를500mL분액깔때기에옮기고
염화나트륨15g및디클로로메 탄
50mL를차례로가한후심하게
흔들어층이완전히분리될때까지
정치시킨후디클로로메 탄층을
무수황산나트륨에통과시켜감압
농축플라스 크에받는과정을2회
반복한다.이를40℃이하의수욕
상에서감압하여용매를모두날려
- 110 -버리고플라스크를상온으로 냉각
한후,잔류물을메탄올/0.5%아세
트산수용액(50/50,v/v)을가하여
최종부피5mL가되게한뒤시린지
필터로여과한후시험용액으로
한다.[지방성검체의경우잔류물에
미리아세토니트릴로포화시킨
헥산30mL를건고물에가하여녹
인후250mL분량의분액여두에
옮기고미리헥산으로포화시킨
아세토니트릴30mL으로2회분배
추출한다.합친아세토니트릴 층을
40℃에서감압농축한후잔류물을
메탄올/0.5%아세트산수용액
(50/50,v/v)을가하여최종부피5
mL가되게한뒤시린지필터를
이용해여과한후시험용액으로한다.]
6)시험조작
가)액체크로마토그래프의측정조건
(1)칼럼:C18(4.6mmi.d.×
150mm,3㎛)또는이와동등한것
(2)이동상:아세토니트릴 /0.5%
아세트산수용액(12/88,v/v)
(3)이동상유량:1mL/min.
(4)칼럼온도:40℃
(5)검출기파장:260nm
(6)주입량:20μL- 111 -나)검량선작성
표준용액을농도별로일정량
취하여액체크로마토그래프에각각
주입한다.얻어진크로마토그램상의
각피크높이또는면적을구하여
검량선을작성한다.
다)표준품의크로마토그램
그림.액체크로마토그래프에서
표준품의크로마토그램
이마자피르(9.6분)
라)정량한계
0.05mg/kg
7)정량시험
위조건으로 얻어진크로마토
그램상의피크가표준용액피크의
머 무 름시간과일치할때피크높이
또는면적을검량선에대입하여
정량한다.
8)확인시험
액체크로마토그래프-질량분석기
상의머무름시간과질량분석스펙
트럼으로이마자피르를확인한다.
가)액체크로마토그래프-질량
- 112 -4.2∼4.3(생략)
5.식품중잔류동물용의약품시험법
5.1(생략)
5.2간이시험법
<신설>
1)시험법의적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)∼7)(생략)
<신설>분석기의측정조건
(1)칼럼:C18(2.0mmi.d.×
100mm,3㎛)또는이와동등한것
(2)이동상:0.1%포름산포함
아세토니트릴 /0.1%포름산수용액
(20/80,v/v)
(3)이동상유량:0.25mL/min.
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5μL
(6)이온화:ESIpositive-ionm ode
표.액체크로마토그 래프-질량
분석기분석을위한특성이온
머무름
시간 (분)분자량
(MW)관측질량
(Exact mass)관측이온 
(m/z)
4.0 261.3 261 262
4.2∼4.3(현행과같음)
5.식품중잔류동물용의약품시험법
5.1(현행과같음)
5.2정성시험법
5.2.1생물학적시험법
1)시험법의적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)∼7)(현행과같음)
5.2.2물리·화학적시험법- 113 -5.2.2.1축산물중동물용의약품동
시다성분시험법
1)시험법적용범위
축산물(유,알,벌꿀은제외)등
에적용한다.
2)분석원리
검체를80%아세토니트릴로추
출한후C18분말로분산하고
아세토니트릴포화헥산으로
정제하여지방을제거한다음
액체크로마토그 래프/질량분석기
로분석한다.
3)장치
액체크로마토그 래프/질량분석기
(LC-MS/MS)
4)시약
가)용매：액체크로마토그 래프
용또는이와동등한것
나)물：3차증류수또는이와
동등한것
다)표준원액및표준용액：각
동물용의약품의표준품을아래의
표1과같이조제하여표준원액
및표준용액으로사용하고모두
냉동실에보관하여사용한다.
- 114 -물질명용매표준
원액
(μg/mL)희석
용매표준
용액
(μg/m L)
나프실린
(Nafcillin)DMSO5,000물1,500
날리딕스산
(Nalidixic
acid)0.1%
암모니
아수5,000아세
토니
트릴150
노르플록사신
(Norfloxacin)0.5%
개미산5,000아세
토니
트릴500
노보비오신
(Novobiocin)DMSO5,000--
다노플록사신
(Danofloxacin)0.5%
개미산5,000아세
토니
트릴1,000
답손
(Dapsone)DMSO5,000아세
토니
트릴500
독시싸이클린
(Doxycycline)DMSO5,000아세
토니
트릴500
디클록사실린
(Dicloxacillin)DMSO5,000물1,500
디플록사신
(Difloxacin)50%
메탄올2,00050%
메탄
올2,000
린코마이신
(Lincomycin)DMSO5,000아세
토니
트릴500
마보플록사신
(Marbofloxacin)0.5%
개미산5,000아세
토니
트릴750
발네물린
(Valnemulin)DMSO5,000아세
토니
트릴250
버지니아마이신
(Virginiamycin
M1)DMSO5,000아세
토니
트릴500
벤질페니실린
(Benzylpenicillin)DMSO5,000물250표1.표준원액및표준용액의조
제방법- 115 -물질명용매표준
원액
(μg/mL)희석
용매표준
용액
(μg/m L)
사라플록사신
(Sarafloxacin)메탄올1,000아세
토니
트릴50
세파졸린
(Cefazolin)DMSO5,000물250
세파피린
(Cephapirin)DMSO5,000물250
세팔렉신
(Cephalexin)50%
DMSO2,500물1,000
세팔로니움
(Cefalonium)DMSO5,000물50
세포페라존
(Cefoperazone)DMSO5,000물150
세푸록심
(Cefuroxime)DMSO5,000물100
세프퀴놈
(Cefquinome)DMSO5,000물250
세프티오퍼
(Ceftiofur)DMSO5,000--
스피라마이신
(Spiramycin)DMSO5,000아세
토니
트릴1,000
시프로플록사신
(Ciprofloxacin)0.5%
개미산5,000아세
토니
트릴500
암피실린
(Ampicillin)DMSO5,000물250
에리스로마이신
(Erythromycin)DMSO5,000아세
토니
트릴250
엔로플록사신
(Enrofloxacin)0.5%
개미산5,000아세
토니
트릴500
오르메토프림
(Ormetoprim)DMSO5,000아세
토니
트릴500
오비플록사신
(Orbifloxacin)0.5%
개미산5,000아세
토니
트릴100
오플록사신
(Ofloxacin)0.5%
개미산5,000아세
토니
트릴500
옥사실린
(Oxacillin)DMSO5,000물500
- 116 -물질명용매표준
원액
(μg/mL)희석
용매표준
용액
(μg/m L)
옥소린산
(Oxolinic
acid)0.1%
암모니아
수5,000아세
토니
트릴250
옥시테트라싸이
클린
(Oxytetracycline)DMSO5,000아세
토니
트릴1,000
조사마이신
(Josamycin)DMSO5,000아세
토니
트릴200
클로람페니 콜
(Chloramphenicol)DMSO5,000아세
토니
트릴500
클로르테트라싸
이클린
(Chlortetracycline)Methanol5,000아세
토니
트릴1,000
클록사실린
(Cloxacillin)DMSO5,000물1,500
클린다마이신
(Clindamycin)DMSO5,000아세
토니
트릴500
타일로신
(Tylosin)DMSO5,000아세
토니
트릴500
테트라싸이클린
(Tetracycline)DMSO5,000아세
토니
트릴1,000
트리메토프림
(Trimethoprim)DMSO5,000아세
토니
트릴250
티아물린
(Tiamulin)DMSO5,000아세
토니
트릴500
티암페니콜
(Thiamphenicol)DMSO5,000아세
토니
트릴250
틸미코신
(Tilmicosin)DMSO5,000아세
토니
트릴500
페플록사신
(Pefloxacin)0.5%
개미산5,000아세
토니
트릴500
플로르페니 콜
(Florfenicol)DMSO5,000아세
토니
트릴1,000- 117 -물질명용매표준
원액
(μg/mL)희석
용매표준
용액
(μg/m L)
플로르페니 콜아
민(Florfenicol
amine,플로르
페니콜대사체)DMSO10,000아세
토니
트릴1,000
플루메퀸
(Flumequine)0.1%
암모니아
수5,000아세
토니
트릴500
MQCA1
(올라퀸독스
대사체)DMSO5,000아세
토니
트릴500
QCA2
(카바독스
대사체)DMSO5,000아세
토니
트릴500
1MQCA:3-methylquinoxaline-2-carboxylicacid
2QCA:quinoxaline-2-carboxylicacid
라)혼합표준용액의조제:100
mL용량플라스 크에50종의표준용
액을각각1mL씩넣고50%아
세토니트릴로표시선까지채워
조제하고,각성분의농도가잔류
허용기준의50배(성분별최저0.5
에서최대50μg/mL)가되도록
하여냉동실에보관한다.혼합한
표준용액은0.1%개미산과메탄
올의1:1비율로혼합한용액으
로희석하여사용한다.
마)0.5%개미산:50mL용량
플라스크에증류수를적당히 넣
고개미산250μL를가한뒤증
류수로표시선까지채운다.
바)0.1%암모니아수:10mL
- 118 -용량플라스 크에증류수를적당히
넣고10%수산화암모늄용액
0.1mL를가한뒤증류수로표
시선까지채운다.
사)이동상 A의조제:1L용
량플라스 크에증류수를적당히
넣고개미산1mL를가한뒤증
류수로표시선까지채워0.1%
개미산을조제하고,0.1%개미산
650mL와메탄올50mL를혼합
하여사용한다.
아)C18분말:잔여실란올기가
제거된C18분말(55-105um,125
Å)또는이와동등한것
자)기타시약 ：특급또는이와
동등한것
5)시험용액의조제
균질화한검체5g을50mL원
심분리관에취하여80%아세토
니트릴10mL를가한뒤,1분간
균질화하고15분간진탕한다.
5,000g에서10분간원심분리한
후,상층액을C18분말1g을미
리넣어둔원심분리관과합한
다.남은침전물에다시80%아
세토니트릴10mL를가하고1
분간균질화한 후15분간진탕- 119 -한다.5,000g에서10분간원심
분리하고상층액을이전의상층
액과합한후아세토니트릴포
화헥산10mL을가한다.1분
간진탕하고5,000g에서5분간
원심분리한후상층(헥산층)
을제거하고하층(80%아세토
니트릴 층)을새로운원심분리
관으로 옮긴다.이를50°C이하
에서질소건고한 후메탄올
0.25mL와0.1%개미산0.25
mL로재분산하고5분간초음파
추출한다.이용액을0.2μm
PVDF멤브레인필터로여과하
여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프측정조건
(1)칼럼:C18(2.1ｘ100mm,
1.7μm)또는이와동등한것
(2)칼럼온도:40℃
(3)이동상
(가)이동상 A:0.1%개미산
:메탄올(95:5,v/v)
(나)이동상B:메탄올
- 120 -연번물질명
(Compoun
d)이온화
(Ionizatio
nm ode)머무
름시
간
(분)분자
량
(M W)관측질량
(Exact
m ass)선구이
온
(Precuso
r
ion,m /z)생성이온
(Product
ion,m /z)충돌에너
지
(Collision
Energy,
eV)
1나프실린
(Nafcillin)positiv
e7.43414.
47414.124
9415.22199.12
171.05
115.0914
40
60
1‘나프실린-
Na
(Nafcillin-
Na2)positiv
e7.43436.
45436.106
8437.20278.17
261.18
319.1818
16
16
2날리딕스
산
(Nalidixic
acid)positiv
e6.36232.
24232.084
9233.12215.12
187.11
159.0914
26
30
3노르플록
사신
(Norfloxac
in)positiv
e3.92319.
33319.133
3320.23302.23
233.15
276.2522
24
18
4노보비오
신
(Novobioci
n)positiv
e8.92612.
62612.231
9613.33189.15
133.07
218.1334
60
12
4‘노보비오
신-Na
(Novobioci
n-Na)positiv
e8.91634.
60634.213
8635.25418.25
240.14
211.1622
20
38
5다노플록
사신
(Danoflox
acin)positiv
e4.06357.
37357.149
0358.25340.22
96.07
314.2524
24
18시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
0955
0.25955
8.250100
10.250100
(4)유속:0.2mL/min
(5)주입량:5μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive,
negative)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Capillaryvoltage:3.0kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤)
(5)분석대상및개별조건
(MRM조건)- 121 -연번물질명
(Compoun
d)이온화
(Ionizatio
nm ode)머무
름시
간
(분)분자
량
(M W)관측질량
(Exact
m ass)선구이
온
(Precuso
r
ion,m /z)생성이온
(Product
ion,m /z)충돌에너
지
(Collision
Energy,
eV)
6답손
(Dapsone)positiv
e3.78248.
30248.061
9249.03155.96
92.03
108.0014
26
22
7독시싸이
클린
(Doxycycli
ne)positiv
e5.79444.
43444.153
2445.25428.22
98.02
154.0520
42
30
8디클록사
실린
(Dicloxacil
lin)positiv
e7.42470.
32469.026
5470.12160.05
311.12
114.0516
14
36
8‘디클록사실
린-Na
(Dicloxacilli
n-Na)positiv
e7.42492.
30491.008
5492.10333.06
182.0714
14
9디플로삭
신
(Difloxaci
n)positiv
e4.26399.
39399.139
6400.24356.29
299.21
382.2520
28
20
10린코마이
신
(Lincomyc
in)positiv
e3.72406.
53406.223
7407.31126.17
359.34
389.3330
20
18
11마보플록
사신
(Marboflox
acin)positiv
e3.57362.
36362.139
2363.2472.08
345.22
320.2322
22
16
12발네물린
(Valnemul
in)positiv
e7.22564.
81564.359
6565.46263.20
147.08
164.0214
40
34
13버지니아
마이신
(Virginiam
ycinM1)positiv
e7.20525.
59525.247
4526.28508.38
355.24
109.1014
20
36
14벤질페니실
린-Na
(Benzylpeni
cillin-Na)positiv
e6.56356.
37356.080
6357.11198.11
181.24
239.7914
16
18
15사라플록
사신
(Sarafloxa
cin)positiv
e4.40385.
36385.123
9386.22368.22
299.17
342.2620
28
20
16세파졸린
(Cefazolin)positiv
e4.26454.
50454.029
9455.13323.13
156.01
124.0212
16
38
17세파피린
(Cephapiri
n)positiv
e3.09423.
46423.055
8424.15292.17
152.04
181.0914
22
24
18세팔렉신
(Cephalexi
n)positiv
e4.12347.
38347.093
9348.19158.05
174.07
106.118
14
26
19세팔로니
움
(Cefaloniu
m)positiv
e3.67458.
51458.071
8459.17152.03
337.13
123.1120
10
12
20세포페라
존
(Cefoperaz
one)positiv
e4.47645.
66645.142
3646.24143.11
530.26
290.2034
12
20
21세푸록심-
Na
(Cefuroxi
me-Na)positiv
e4.28446.
36446.050
8447.15386.13
174.96
342.1512
20
14
- 122 -연번물질명
(Compoun
d)이온화
(Ionizatio
nm ode)머무
름시
간
(분)분자
량
(M W)관측질량
(Exact
m ass)선구이
온
(Precuso
r
ion,m /z)생성이온
(Product
ion,m /z)충돌에너
지
(Collision
Energy,
eV)
22세프퀴놈
(Cefquino
me)positiv
e3.33528.
60528.124
9529.22134.12
167.03
396.1216
24
12
23세프티오
퍼
(Ceftiofur)positiv
e5.65523.
56523.028
9524.13241.13
125.19
210.0718
56
22
24스피라마
이신
(Spiramyc
in)positiv
e4.99843.
05842.513
9843.55174.11
101.02
142.1336
46
32
25시프로플록
사신
(Ciproflox
acin)positiv
e4.02331.
35331.133
3332.23314.241
231.11
288.2722
34
18
26암피실린
(Ampicilli
n)positiv
e4.39349.
40349.109
6350.14106.04
174.07
160.0718
14
12
27에리스로
마이신
(Erythrom
ycin)positiv
e6.61733.
93733.461
2734.49158.09
116.06
576.4130
40
20
28엔로플록
사신
(Enrofloxa
cin)positiv
e4.05359.
40359.164
7360.26316.27
342.24
245.1818
20
26
29오르메토
프림
(Ormetopr
im)positiv
e4.03274.
31274.142
9275.18123.12
259.20
81.0126
26
42
30오비플록
사신
(Orbifloxa
cin)positiv
e4.22395.
37395.125
8396.24352.30
226.15
295.2218
46
26
31오플록사
신
(Ofloxacin
)positiv
e3.80361.
37361.143
9362.24318.26
261.17
221.6520
28
38
32옥사실린
(Oxacillin)positiv
e6.98401.
43401.104
5402.20160.06
243.16
114.0612
14
38
32‘옥사실린-
Na
(Oxacillin
-Na)positiv
e6.98423.
41423.086
4424.18182.08
265.11
248.1218
18
16
33옥소린산
(Oxolinic
acid)positiv
e5.54261.
33261.063
7262.16244.14
216.08
157.5920
28
34
34옥시테트라
싸이클린
(Oxytetrac
ycline)positiv
e4.19460.
43460.148
1461.18426.20
201.01
443.3120
40
14
35조사마이
신
(Josamyci
n)positiv
e6.97827.
99827.466
7828.56109.09
174.11
229.2042
34
32
36클로람페
니콜
(Chloramphe
nicol)negati
ve5.49323.
13322.012
3321.11151.98
257.15
194.1220
12
14- 123 -연번물질명
(Compoun
d)이온화
(Ionizatio
nm ode)머무
름시
간
(분)분자
량
(M W)관측질량
(Exact
m ass)선구이
온
(Precuso
r
ion,m /z)생성이온
(Product
ion,m /z)충돌에너
지
(Collision
Energy,
eV)
37클로르테트라
싸이클린
(Chlortetra
cycline)positiv
e5.10478.
88478.114
2479.27444.24
154.06
462.2022
28
18
38클록사실
린
(Cloxacilli
n)positiv
e7.14435.
88435.065
5436.16277.13
114.05
160.0516
48
12
38‘클록사실린
-Na
(Cloxacillin
-Na)positiv
e7.14475.
87475.058
0458.14299.13
182.0614
14
39클린다마
이신
(Clindamy
cin)positiv
e5.94424.
98424.179
8425.28126.14
377.25
389.3528
20
20
40타일로신
(Tylosin)positiv
e6.50916.
10915.519
1916.55174.11
83.09
101.0140
52
40
41테트라싸
이클린
(Tetracycl
ine)positiv
e4.10444.
43444.153
2445.25410.26
154.05
427.3718
28
12
42트리메토
프림
(Trimethop
rim)positiv
e3.68290.
31290.137
8291.23230.15
123.05
261.1524
24
24
43티아물린
(Tiamulin)positiv
e6.43493.
74493.322
5494.42192.16
73.06
119.0722
60
38
44티암페니
콜
(Thiamphe
nicol)negati
ve3.79356.
22355.004
7354.10185.08
290.11
78.9918
12
32
45틸미코신
(Tilmicosi
n)positiv
e5.63869.
13868.566
0869.66174.11
88.05
696.6444
64
42
46페플록사
신
(Pefloxaci
n)positiv
e3.80333.
36333.149
0334.25290.29
316.26
233.1918
20
26
47플로르페
니콜
(Florfenic
ol)negati
ve4.55358.
21357.000
4356.03185.07
336.12
119.0718
10
38
47‘플로르페
니콜아민
(Florfenic
olamine,
플로르페
니콜
대사체)positiv
e1.58247.
28247.067
8248.10230.13
130.21
91.0512
22
42
48플루메퀸
(Flumequi
ne)positiv
e6.56261.
25261.080
2262.18244.16
202.09
174.0120
32
38
49MQCA
(올라퀸독
스대사체)positiv
e4.99188.
18188.058
5189.09145.08
143.00
102.0714
15
32
- 124 -연번물질명
(Compoun
d)이온화
(Ionizatio
nm ode)머무
름시
간
(분)분자
량
(M W)관측질량
(Exact
m ass)선구이
온
(Precuso
r
ion,m /z)생성이온
(Product
ion,m /z)충돌에너
지
(Collision
Energy,
eV)
50QCA
(카바독스
대사체)positiv
e4.82174.
15174.042
9175.07129.00
131.02
102.0218
15
30
1밑줄그은이온은정량이온이며그외이
온들은정성이온 임
2Compound-Na:sodiumadduct를의미
※각생성이온(Production)에대한질량
분석기의기기조건은사용기기의 최적값
으로변경하여사용할수있으며,제시된
이외의생성이온도적용이가능함
7)정성시험
위의조건에서 얻어진크로마토
그램상의피크는어느측정조건
에서도표준물질피크의머무름
시간과일치하여야한다.또한
표준용액과시험용액을각각질
량분석기에주입하였을때선구
이온및생성이온이일치하여야
하고,표준용액과시험용액의생
성이온간반응세기의비율
(responseratio)을비교하여그
상대비율이20～50%이내에서일
치하여야한다.※주1)참조
8)정량시험
정성시험에서검출된잔류동물
용의약품은식품공전5.3의정량
시험법을따른다.- 125 -상대이온강도(%of
basepeak)LC-MS/MS
(relative)
>50% ≤20%
20%to50% ≤25%
10%to20% ≤30%
≤10% ≤50%주1)생성이온간반응세기의비율
허용범위
그림 1. 퀴놀론계 크로마토그램
- 126 -
그림 2. 페니실린계 크로마토그램
그림 3. 세팔로스포린계 크로마토그
램- 127 -
그림 4. 테트라싸이클린계 크로마토
그램
그림 5. 마크로라이드계 크로마토그
램
그림 6. 린코사마이드계 크로마토그
램
- 128 -
그림 7. 플레로무티린계 크로마토그
램
그림 8. 암페니콜계 크로마토그램
그림 9. 기타 항균제 크로마토그램- 129 -<신설>5.2.2.2수산물중동물용의약품동
시다성분시험법
1)시험법적용범위
수산물(어류,갑각류)등에적용한다.
2)분석원리
균질화한검체에개미산암모늄
용액과80%아세토니트릴을 넣어
분석대상물질을 추출하고,C18
분말을분산시켜헥산으로정제
한후액체크로마토그 래프/질량
분석기로분석한다.
3)장치
액체크로마토그 래프/질량분석기
(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그 래프
용또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와
동등한것
다)표준원액：각동물용의약품표
준품을정밀히달아용매(메탄올,
물또는50%메탄올)에녹여50～
100mg/L로조제하여표준원액으
로한다.※주1)참조
라)혼합표준용 액：50mL용량
플라스크에각표준원액을각
- 130 -동물용의약품 잔류허용기준의
10배농도가되도록취하여혼
합한후물로표시선까지채워
냉동실에보관한다.혼합표준용
액은물로희석하여사용한다.
마)2mM개미산암모늄용액:
1L용량플라스크에초산암모
늄0.12g을넣고아세토니트릴
/물(80/20,v/v)혼합용매로용
해하여표시선까지채운다.
바)C18분말:잔여실란올기가
제거된C18분말(55-105um,125
Å)혹은이와동등한것
사)기타시약 ：특급또는이와
동등한것
5)시험용액의조제
균질화한검체2g을50mL원
심분리관에취하여2mM개미
산암모늄용액10mL를가하여
20분간진탕한후,10,000g에서
10분간원심분리하고추출액을
다른원심분리관에취한다.분리
된추출액에C18분말500mg을
분산시킨후,헥산10mL을가
하여30초간진탕한다.10,000g
에서5분간원심분리하고,하층
액중5mL만을취해눈금이- 131 -표시된 새로운원심분리관에 옮
긴다.40℃수욕상에서 액이1
mL남을때까지질소농축한 후,
0.2μmPVDF멤브레인필터로
여과하여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프의측정
조건
(1)칼럼：C18(2.1mmi.d.ｘ
150mm,3.5μm)또는이와동
등한것
(2)이동상
(가)이동상 A:0.1%개미산
수용액
(나)이동상 B:0.1%개미산
을함유한아세토니트릴용액
시간 (분)이동상 A(%) 이동상 B(%)
0 90 10
1 90 10
6 60 40
10 5 95
15 5 95
15.1 90 10
20 90 10
(3)유속:0.4mL/min
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive,
negative)
(2)Capillarytemperature:350℃
- 132 -연번물질명
(Compound)이온화
(Ionizatio
nmode)머무
름시
간
(분)분자
량
(MW)관측질
량
(Exact
mass)선구이
온
(Precus
or
ion,
m/z)생성이온1
(Product
ion,m/z)충돌에너
지
(Collision
Energy,
eV)
1날리딕스산
(Nalidixicacid)positive7.50232.2232.0848233104
187
21539
24
14
2노르플록사신
(Norfloxacin)positive3.65319.3319.1332320205
233
27631
23
16
3독시싸이클린
(Doxycycline)positive5.80444.4444.1533445267
321
42834
29
16
4디플록사신
(Difloxacin)positive4.88399.3399.1394400299
356
38127
17
20
5린코마이
신
(Lincomyc
in)
6설파구아
니딘
(Sulfagua
nidine)
7설파독신
(Sulfadoxine)positive5.50310.3310.073631192
108
15629
25
17
8설파디메톡신
(Sulfadimethoxi
ne)positive6.53310.3310.073631192
108
15631
29
19
9설파디아진
(Sulfadiazine)positive2.50250.2250.052425165
92
15640
26
15
10설파메라진
(Sulfamerazine)positive3.49264.3264.068126592
108
15528
24
15
11설파메타
진
(Sulfamet
hazine)
12설파메톡
사졸
(Sulfamet
hoxazole)
13설파메톡시피리
다진positive4.33280.3280.063028192
10829
25(3)Capillaryvoltage:positive
-5.0kV,negative-3.5kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤,
또는비활성기체)
(5)분석대상(45종)및개별조
건(MRM조건)- 133 -연번물질명
(Compound)이온화
(Ionizatio
nmode)머무
름시
간
(분)분자
량
(MW)관측질
량
(Exact
mass)선구이
온
(Precus
or
ion,
m/z)생성이온1
(Product
ion,m/z)충돌에너
지
(Collision
Energy,
eV)
(Sulfamethoxyp
yridazine)156 15
14설파모노메톡신
(Sulfamonometh
oxine)positive4.89280.0280.0630281156
248
26517
27
21
15설파퀴녹살린
(Sulfaquinoxalin
e)positive6.57300.3300.068130192
155
20829
15
13
16설파클로르피라
진
(Sulfachlorpyraz
ine)positive6.36284.7284.013528565
92
15545
28
13
17설파클로르피리
다진
(Sulfachlorpyrid
azine)positive5.09284.7284.013528592
108
15529
22
13
18설파티아졸
(Sulfathiazole)positive2.87255.3255.013625692
108
15624
22
15
19설파페나졸
(Sulfaphenazole)positive6.66314.3314.0837315131
158
16046
28
20
20설피속사졸
(Sulfisoxazole)positive5.82267.3267.067826865
92
15539
27
13
21세팔렉신
(Cefalexin)positive3.48347.3347.0940348106
157
17432
6
13
22세프티오퍼
(Ceftiofur)positive6.18523.6523.029052495
126
24142
58
16
22‘데스후로일세프
티오퍼
(Desfuroylceftio
fur)positive4.28429.5429.0235430126
227
24132
22
14
23스피라마이신
(Spiramycin)positive5.29843.0842.514042283
88
17431
35
18
24시프로플록사신
(Ciprofloxacin)positive3.95331.3331.1332332148
231
31453
35
19
25아목시실린
(Amoxicillin)positive1.35365.4365.1045366113
133
34919
31
5
26암피실린
(Ampicillin)positive3.61349.4349.1096350106
114
17419
29
11
27에리스로마이신
(Erythomycin)positive6.97733.9733.461273482
115
15735
34
29
28엔로플록사신
(Enrofloxacin)positive4.34359.4359.1645360245
316
34225
17
20
29오르메토프림
(Ormethoprim)positive4.01274.3274.143027581
123
25942
25
27
- 134 -연번물질명
(Compound)이온화
(Ionizatio
nmode)머무
름시
간
(분)분자
량
(MW)관측질
량
(Exact
mass)선구이
온
(Precus
or
ion,
m/z)생성이온1
(Product
ion,m/z)충돌에너
지
(Collision
Energy,
eV)
30오플록사신
(Ofloxacin)positive3.67361.3361.1438362261
318
34425
17
19
31옥소린산
(Oxolinicacid)positive6.05261.2261.0637262160
216
24435
28
17
32옥시테트라싸이
클린
(Oxytetracycline)positive3.93460.4460.1482461200
426
44336
16
10
33조사마이신
(Josamycin)positive8.27827.9827.4667828108
173
22835
30
29
34클로람페니콜
(Chloramphenic
ol)negative6.20322.1322.0123321120
151
25740
24
14
35클로르테트라싸
이클린
(Chlortetracycli
ne)positive5.48478.8478.114347998
444
46235
18
14
36클린다마이신
(Clindamycin)positive5.70424.9424.179942583
126
37751
31
17
37키타사마이신
(Kitasamycin)positive7.68771.9771.440577282
108
17335
34
28
38테트라싸이클린
(Tetracycline)positive4.32444.4444.1533445153
410
42725
16
10
39트리메토프림
(Trimethoprim)positive3.62290.3290.1379291123
230
26133
22
24
40티아물린
(Tiamulin)positive7.57493.7493.322649473
118
19253
34
19
41티암페니콜
(Thiamphenicol)negative4.15356.2355.0048354118
184
29037
23
15
42페플록사신
(Pefloxacin)positive3.71333.3333.1489334233
290
31623
16
18
43프라지콴텔
(Praziquantel)positive8.79312.4312.183831355
132
20336
33
16
44플로르페니콜
(Florfenicol)negative5.73358.2357.0005356118
184
33640
21
13
44‘플로르페니콜아
민
(Florfenicol
amine)positive1.12247.2247.067824891
130
23042
25
10
45플루메퀸
(Flumequine)positive7.73261.2261.0801262126
202
24447
31
17
43티아물린
(Tiamulin)positive7.57493.7493.322649473
11853
34- 135 -연번물질명
(Compound)이온화
(Ionizatio
nmode)머무
름시
간
(분)분자
량
(MW)관측질
량
(Exact
mass)선구이
온
(Precus
or
ion,
m/z)생성이온1
(Product
ion,m/z)충돌에너
지
(Collision
Energy,
eV)
192 19
44프라지콴텔
(Praziquantel)positive8.79312.4312.183831355
132
20336
33
16
45세프티오퍼
(Ceftiofur)positive6.18523.6523.029052495
126
24142
58
16
45‘데스후로일세프
티오퍼
(Desfuroylceftio
fur)positive4.28429.5429.0235430126
227
24132
22
14
1밑줄그은이온은정량이온이며그외이
온들은정성이온 임
※각생성이온(Production)에대한질량
분석기의기기조건은사용기기의 최적값
으로변경하여사용할수있으며,제시된
이외의생성이온도적용이가능함
7)정성시험
위의조건으로 얻어진크로마토
그램상의피크는표준용액피크의
머무름시간과비교하여일치하여
야한다.또한표준용액과시험용
액의선구이온(precursorion)및
생성이온(Production)이일치하
여야하고,표준용액과시험용액
의생성이온 간반응세기의비율
(responseratio)을비교하여그
상대비율이20～50%이내에서일
치하여야한다.※주2)참조
8)정량시험
- 136 -상대이온강도(%ofbase
peak)LC-MS/MS
(relative)
>50% ≤20%
20%to50% ≤25%
10%to20% ≤30%
≤10% ≤50%정성시험에서검출된잔류동물
용의약품은식품공전5.3의정량
시험법을따른다.
주1)표준원액조제에사용되는용매
용매대상동물용의약품표준품
메탄
올날리딕스산,노르플록사신,독시싸이클린,
디플록사신,린코마이신,설파구아니딘,설
파독신,설파디메톡신,설파디아진,설파메
라진,설파메타진,설파메톡사졸,설파메톡
시피리다진,설파모노메톡신,설파퀴녹살린,
설파클로르피라진 ,설파클로르피리다진 ,설
파티아졸,설파페나졸,설피속사졸,스피라
마이신,시프로플록사신,에리스로마이신,
엔로플록사신,오르메토프림,오플록사신,
옥시테트라싸이클린 ,조사마이신,클로르테
트라싸이클린,클린다마이신,키타사마이신,
테트라싸이클린,트리메토프림,티아물린,
페플록사신,플로르페니 콜아민,플루메퀸
50%
메탄
올세팔렉신,세프티오퍼,
데스후로일세프티오퍼,클로람페니 콜,
티암페니콜,프라지콴텔,플로르페니 콜
물아목시실린,암피실린,옥소린산
주2)생성이온간반응세기의비율
허용범위- 137 -
 
 
- 138 -
 
- 139 -
 
- 140 -5.3정량시험법
5.3.1겐타마이신(Gentamicin),네
오마이신(Neomycin),디히드로스
트렙토 마 이 신
(Dihydrostreptomycin ),스트렙토
마이신(Streptomycin),스펙티노마
이신(Spectinomycin)
그림1.수산물중45종동물용의
약품의크로마토그 램
5.3정량시험법
5.3.1겐타마이신(Gentamicin),
네오마이신(Neomycin),디히드
로 스 트 렙토 마 이 신
(Dihydrostreptomycin ),스트렙
토마이신(Streptomycin),스펙티
노마이신(Spectinomycin),아미
카신(Amikacin),아프라마이신
(Apramycin),카나마이신
(Kanamycin),하이그로마이신
B(HygromycinB)- 141 -1)시험법적용범위
축산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중겐타마이신,네오마이
신,디히드로스트 렙토마이신,스
트렙토마이신및스펙티노마이
신을삼염화초산이함유된인산
완충용액으로추출한후,HLB
및약양이온교환카트리지로정
제하여 액체크로마토그 래프/질
량분석기로분석한다.
3)장치
가)액체크로마토그래프/질량분석기
나)HLB(HydrophilicLipophilic
Balance)카트리지:
D i v i n y l b e n z e n e 
-N-vinylpyrrolidoneCopolymer
가200mg충진된카트리지또
는이와동등한것
다)약양이온교환(WeakCation
Exchange)카트리지:약양이온
교환수지가150mg충진된카
트리지또는이와동등한것
4)시약및시액
가)용매:액체크로마토그 래프
용또는이와동등한것1)시험법적용범위
축산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중분석대상물질을 삼염
화초산이함유된인산완충용액
으로추출한후HLB및약양
이온교환카트리지로정제하
여액체크로마토그 래프/질량분
석기로분석한다.
3)장치
액체크로마토그 래프/질량분석
기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그 래프
- 142 -나)표준원액:겐타마이신,네
오마이신,디히드로스트 렙토마이
신,스트렙토마이신및스펙티노
마이신표준품을 각각정밀히
달아100mL메스플라스 크에
취한다.물40mL에녹인후아
세토니트릴20mL와초산2
mL를넣고물로표시선까지채
워각각100μg/mL로한다.조
제된표준원액은냉동보관한
다.
다)표준원액을아세토니트릴:
초산:물(10:1:39)혼합용액으
로겐타마이신은0.01,0.025,
0.05,0.1,0.15및0.2mg/L,네
오마이신과스펙티노마이신은
0.05,0.125,0.25,0.5,0.75,1.0
mg/L,디히드로스트 렙토마이신
과스트렙토마이신은0.06,0.15,
0.3,0.6,0.9및1.2mg/L가되
게한다.시험당일제조하도록
한다.
라)2%삼염화초산이함유된10
mM인산완충용액:2L메스플
라스크에제일인산칼 륨
(KH2PO4)2.72g를넣고물1.9
L로녹인후1N염산으로pH용또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와
동등한것
다)표준원액:각표준품을
100mL용량플라스 크에정밀
히달아물40mL에녹인후
아세토니트릴20mL와초산2
mL를넣고물로표시선까지
채워100mg/L로한다.조제된
표준원액은냉동실에보관한다.
라)혼합표준용 액:각표준원
액을아세토니트릴 /초산/물
(10/1/39)혼합용액으로희석하
여적당한농도가되게한다.
마)내부표준물질표준원액:
토브라마이신표준품을100
mL용량플라스 크에정밀히달
아물40mL에녹인후아세
토니트릴20mL와초산2mL
를넣고물로표시선까지채워
100mg/L로조제한다.
바)내부표준물질용액:내부
표준원액을아세토니트릴 /초산/
물(10/1/39)혼합용액으로희석
하여적당한농도가되게한다.
사)2%삼염화초산이함유된- 143 -4.0을맞춘다.여기에EDTA-나
트륨(Na2EDTAdihydrate)0.3
g과삼염화초산40g을넣고용
해시킨후물로표시선까지채
운다.
마)1.6%삼염화초산용액:
250mL메스플라스 크에삼염화
초산4.1g을넣고물100mL
를넣어용해시킨후아세토니
트릴50mL를넣고물로표시
선까지채운다.
바)20mMHFBA
(heptafluorobutyric acid)/5%아
세토니트릴:1L메스플라스 크
에아세토니트릴50mL와
HFBA(heptafluorobutyric acid)
2.6mL를넣은후물로표시선
까지채운다.
사)20mMHFBA
(heptafluorobutyric acid)/50%
아세토니트릴:1L메스플라스
크에아세토니트릴500mL와
HFBA(heptafluorobutyric acid)
2.6mL를넣은후물로표시선
까지채운다.10mM인산완충용액:2L용
량플라스 크에제일인산칼 륨
(KH2PO4)2.72g을넣고물
1.9L로녹인후1M염산으
로pH4.0을맞춘다.여기에
EDTA-나트륨(Na2EDTA
dihydrate)0.3g과삼염화초산
40g을넣고용해시킨후물로
표시선까지채운다.
아)1.6%삼염화초산용액:
250mL용량플라스 크에삼염
화초산4g을넣고물100mL
를넣어용해시킨후아세토니
트릴50mL를넣고물로표시
선까지채운다.
자)20 mM
HFBA(heptafluorobutyric 
acid)/5%아세토니트릴:1L
용량플라스 크에아세토니트릴
50 mL와 HFBA
(heptafluorobutyric acid)2.6
mL를넣은후물로표시선까
지채운다.
차)20 mM
HFBA(heptafluorobutyric 
acid)/50%아세토니트릴:1L
- 144 -5)시험용액의조제
균질화한검체3g을50mL폴
리프로필렌원심분리관에취하
고2%삼염화초산이함유된10
mM인산완충용액15mL를넣용량플라스 크에아세토니트릴
500 mL와 HFBA
(heptafluorobutyric acid)2.6
mL를넣은후물로표시선까
지채운다.
카) HLB(Hydrophilic
LipophilicBalance)카트리지
: Divinylbenzene
-N-v i n y l p y r r o l i d o n e 
Copolymer가200mg충진된
카트리지또는이와동등한것
타)약양이온교환(Weak
CationExchange)카트리지:
약양이온교환수지가150mg
충진된카트리지또는이와동
등한것
파)기타시약:특급또는이
와동등한것
하)기구:사용하는 모든용
기는폴리프로필렌재질또는
이와동등한것
5)시험용액의조제
균질화한검체3g을50mL
원심분리관에취하고내부표
준물질(토브라마이신)을첨가
한다.2%삼염화초산이함유- 145 -은후10분간격렬하게흔들어
섞은후3,000G에서약10분간
원심분리한다.상층액을여과지
로여과하여50mL폴리프로필
렌원심분리관에취하고잔사에
2%삼염화초산이함유된10
mM인산완충용액15mL를넣
은후위와동일하게원심분리
하여상층액을합한다.모아진
상층액에30%수산화나트 륨용
액0.2mL를가하여pH7.5로
조정하고(필요시1N염산용액
또는1N수산화나트 륨용액을
가하여pH를조정한다)이액을
추출액으로한다.미리메탄올5
mL와물5mL로HLB카트리
지와약양이온교환카트리지를
각각활성화시킨후HLB카트
리지위에약양이온교환카트리
지를연결한다.연결한카트리지
에추출액을흡착시키고물5
mL로세척한다.이때감압하여
물을완전히제거해준다.1.6%
삼염화초산용액6mL로15
mL폴리프로필렌원심분리관에
용출하고용출용액은최종6
mL로조정한다.이용액을균질된10mM인산완충용액15
mL를가하여10분간진탕한
후4℃에서5,000g로15분간
원심분리한다.상층액을50
mL원심분리관에취한후5
M수산화나트 륨용액0.2∼0.3
mL을가하여 pH7.5로조정
하고(필요시1M염산용액또
는1M수산화나트 륨용액을
가하여 pH를조정한다)이액
을추출액으로한다.미리메
탄올5mL와물5mL로
HLB카트리지 와WCX(약양
이온교환)카트리지를 각각활
성화시킨후HLB카트리지
위에WCX카트리지를 연결한
다.연결한카트리지에추출액
을흡착시키고물5mL로세
척한후감압하여물을완전
히제거해준다.15mL프로
필렌원심분리관에1.6%삼염
화초산용액6mL로용출한
다.이용액을균질화한후
0.2㎛PVDF멤브레인필터
로여과하여 액체크로마토그
래프용폴리프로필렌바이알
에옮겨시험용액으로한다.
- 146 -화한후멤브레인필터로여과
하여액체크로마토그 래프용폴
리프로필렌바이알에 옮겨시험
용액으로한다.
6)시험조작
가)측정조건
(1)액체크로마토그 래프조건
(가)칼럼：C18(2.0×75mm,
3.5μm)또는이와동등한것
(나)칼럼온도:40℃
(다)이동상
①이동상 A:20mM
HFBA/5%아세토니트릴
②이동상 B:20mM
HFBA/50%아세토니트릴
시간(분) A(%) B(%)
 0.0 80 20
 0.5 80 20
9.0 5 95
10.0 5 95
10.1 80 20
15.0 80 20
③유속:0.3mL/분
④주입량:10μL
(2)질량분석기조건
(가)Ionization:ESI(positive)
(나)Capillarytemperature:6)시험조작
가)액체크로마토그 래프측정
조건
(1)칼럼:C18(2.1mm×150
mm,3.5μm)또는이와동등한것
(2)이동상
(가)이동상 A:20mM
HFBA/5%아세토니트릴
(나)이동상 B:20mM
HFBA/50%아세토니트릴
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
0.08020
0.58020
9.0595
10.0595
10.18020
15.08020
(3)유속:0.3mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:10μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive)
(2)Capillarytemperature:- 147 -450℃
(다)Collisiongas:아르곤
(Ar)
(라)Collisionenergy:10V
연
번물질명
(Compound)머 무
름시
간(분)선 구이온
(Precu
sorion,
m/z)생성이온
(Product
i o n,
m/z)충돌에너
지
(Collision
Energy,eV)
1겐타마이
신C1a
(Gentam
icinC1a)8.6450160
32220
11
2겐타마이
신C2,C2a
(Gentamici
nC2,C2a)8.6464160
32222
10
3겐타마이
신C1
(Gentam ici
nC1)8.647815720
32213
4네오마이신
(Neomycin)8.74615161
29328
21
5디히드로
스트렙토
마이신
(Dihydrost
reptomycin)5.93584246
26333
29
6스트렙토
마이신
(Strepto
mycin)5.84582246
26336
29
7스펙티노
마이신
(Spectin
omycin)4.6635198
207
33329
20
17
8아미카신
(Amikacin)6.80586163
26432
23
9아프라마
이신
(Apram ycin)7.94540217
37826
14
10카나마이신
(Kanam
ycin)7.04485163
32424
14
11파로모마
이신
(Paromo
mycin)8.91616163
29332
22
12하이그로
마이신
(Hygrom
ycinB)5.62528177
35227
21
13토브라마
이신
(Tobramy8.15468163
32422
13350℃
(3)Collisiongas:Ar(아르곤,
또는비활성기체)
(4)분석대상물질의개별조건
- 148 -7)정량시험
가)표준용액과시험용액을각
각질량분석기에주입하여아래
표의특이이온을확인한다.이후
크로마토그 램으로부터얻은피연
번물질명
(Compound)머 무
름시
간(분)선 구이온
(Precu
sorion,
m/z)생성이온
(Product
i o n,
m/z)충돌에너
지
(Collision
Energy,eV)
cin,내부
표준물질)
1밑줄그은이온은정량이온이며그외이
온들은정성이온 임
※각생성이온(Production)에대한질량
분석기의기기조건은사용기기의 최적값
으로변경하여사용할수있으며,제시된
이외의생성이온도적용이가능함
7)정성시험
위의조건으로 얻어진크로마토
그램상의피크는표준용액피크
의머무름시간과비교하여일
치하여야한다.또한표준용액
과시험용액의선구이온
(precursorion)및생성이온
(Production)이일치하여야하
고,표준용액과시험용액의생
성이온간반응세기의비율
(responseratio)을비교하여그
비율이20～50%이내에서일치
하여야한다.※주1)참조
8)정량시험
정성시험과 똑같은조건에서표
준용액을일정농도로제조한후
얻어진크로마토그 램상의각피
크높이또는면적을구하여검- 149 -크의머무름시간을비교하고,
겐타마이신은겐타마이신(C1a),
겐타마이신(C2,C2a),겐타마이
신(C1)을각각m/z322이온의
면적에대한합으로써검량선을
작성하여시험용액중겐타마이
신의함량을구한다.또한네오
마이신은 m/z455,디히드로스
트렙토마이신은 m/z263,스트
렙토마이신은 m/z263,스펙티
노마이신은 m/z333이온에대
한각각의면적을구하고검량
선을작성하여시험용액중각
각의함량을구한다.
물질Precursor 
ion(m/z)Fragment 
ion(m/z)
Gentamicin(C1a) 450 322, 160
G e n ta m ic in (C 2 , C 2 a ) 464 322, 160
Gentamicin(C1) 478 322, 160
Neomycin 615455, 323, 294, 
161
D ih y d r o str e p to m y c in 584 263, 246, 221
Streptomycin 582 263, 246, 221
Spectinomycin 351 333, 315, 98
8)정량한계
가)겐타마이신:0.05mg/kg
나)네오마이신:0.02mg/kg
다)디히드로스트 렙토마이신:
0.01mg/kg
라)스트렙토마이신:0.05
mg/kg량선을작성하고,시험용액의
크로마토그 램으로부터정량이온
(quantitativeion)의각피크높
이또는피크면적에따라각각
정량한다.단겐타마이신은겐
타마이신 C1,겐타마이신 C1a,
겐타마이신 C2,겐타마이신 C2a
의각정량값의합으로정량한
다.
물질정량한계
(mg/kg)
겐타마이신(Gentamicin)0.006
네오마이신(Neomycin)0.030
스트렙토마이신(Streptomycin)/
디히드로스트 렙토마이신(D
ihydrostreptomycin)0.02
스펙티노마이신
(Spectinomycin)0.020
아미카신(Amikacin)0.006
아프라마이신(Apramycin)0.030
카나마이신(Kanamycin)0.006
파로모마이신
(Paromomycin)0.006
하이그로마이신
(HygromycinB)0.006
※단,벌꿀,알,유에서6)나)
(4)의분석대상물질이검출될
경우정량분석은유에서겐타
마이신을제외하고5.3의물
질별정량분석법을따른다.
주1)생성이온간반응세기의비율
허용범위(CAC/GL-71-2009)
- 150 -마)스펙티노마이신:0.05
mg/kg
5.3.2∼5.3.25(생략)
상대이온강도(%ofbase
peak)LC-MS/MS
(relative)
>50% ≤20%
20%to50% ≤25%
10%to20% ≤30%
≤10% ≤50%
그림1.액체크로마토그 래프/질량
분석기에서표준품의 크로마토그
램.스펙티노마이신(4.6분),하이그
로마이신(5.6분),스트렙토마이신
(5.8분),디히드로스트 렙토마이신
(5.9분),아미카신(6.8분),카나마
이신(7.0분),아프라마이신(7.9분),
토브라마이신(내부표준물질,8.1
분),겐타마이신(8.6분),네오마이
신(8.7분),파로모마이신(8.9분)
5.3.2∼5.3.25(현행과같음)- 151 -5.3.26나프실린(Nafcillin),디클록
사실린(Dicloxacillin),벤질페니실
린(Benzylpenicillin),클록사실린
(Cloxacillin)
5.3.27∼5.3.28(생략)
5.3.29스펙티노마이신(Spectinomycin)
5.3.29.1제1법
1)시험법적용범위
축산물에적용한다.
2)∼7)(생략)
5.3.29.2제2법(생략)
5.3.30∼5.3.31(생략)
5.3.32아목시실린(Amoxicillin),
암피실린(Ampicillin),벤질페니실
린(Benzylpenicillin),클록사실린
(Cloxacillin),디클록사실린
(Dicloxacillin),나프실린
(Nafcillin),옥사실린(Oxacillin)
1)시험법의적용범위
축․수산물등에적용한다.<삭제>
5.3.26∼5.3.27(현행과같음)
5.3.28스펙티노마이신(Spectinomycin)
5.3.28.1제1법
1)시험법적용범위
유에적용한다.
2)∼7)(현행과같음)
5.3.29.2제2법(현행과같음)
5.3.29∼5.3.30(현행과같음)
5.3.31나프실린(Nafcillin),디클록
사실린(Dicloxacillin),벤질페니실
린(Benzylpenicillin,PenicillinG),
아목시실린(Amoxicillin),암피실
린(Ampicillin),클록사실린
(Cloxacillin),옥사실린(Oxacillin),
페녹시메틸페니실린(Phenoxymethyl
penicillin,PenicillinV)
1)시험법적용범위
축산물등에적용한다.
- 152 -2)분석원리
검체에아세토니트릴:물혼합
액(유및알의경우트리클로로
초산이함유된아세토니트릴)을
가한후대상성분을추출하고
액-액분배및고상추출법으로
정제하여 액체크로마토그 래프/
질량분석기(LC-MS/MS)로분
석한다.
3)장치
액체크로마토그 래프/질량분석기
4)시약및시액
가)표준원액:아목시실린,암피
실린,벤질페니실린,클록사실린,
디클록사실린및나프실린표준
품을정밀히달아메탄올에녹여
100mg/L농도가되게한다
나)표준용액:표준원액을이동
상으로적당한농도가되게희
석하여사용한다.
다)HLB카트리지(6cc,500
mg)또는이와동등한것
라)0.1M인산수소나트 륨용액:2)분석원리
검체중분석대상물질을 나트
륨이함유된인산완충용액(축
산물),아세토니트릴수용액(수
산물)또는트리클로로 초산이
함유된아세토니트릴(유및알)
로추출한후HLB카트리지로
정제하여 액체크로마토그 래프/
질량분석기로분석한다.표준품
과시료는 직사광선을피하고
어두운냉동실에보관한다.
3)장치
액체크로마토그 래프/질량분석
기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그 래프
용또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와
동등한것
다)표준원액:각표준품을
100mL용량플라스 크에정밀
히달아메탄올50mL로용해
한후물로표시선까지채워
100mg/L로한다.조제된표준
원액은냉동실에보관한다.
라)혼합표준용 액:각표준원- 153 -1L용량플라스 크에제이인산수
소나트륨(Na2HPO4)14.2g을넣고
물에녹여표시선까지채운다.
마)0.05mM인산수소카 륨용액
:1L용량플라스 크에인산이수
소칼륨(KH2PO4)6.8g을넣고
물에녹여표시선까지채운다.
바)기타시약:특급또는이와
동등한것액을물로희석하여적당한농
도가되게한다.
마)내부표준물질표준원액:
피페라실린표준품을100mL
용량플라스 크에정밀히달아
메탄올50mL로용해한후물
로표시선까지채워100mg/L
로한다.조제된내부표준물질
표준원액은냉동실에보관한다.
바)내부표준물질용액:내부
표준원액을물로희석하여적
당한농도로조제한다.
사)0.05%포름산용액:1L
용량플라스크에포름산5mL
첨가한후,물로표시선까지
채운다.
아)0.05%포름산아세토니트
릴용액:1L용량플라스크
에포름산5mL첨가한후
아세토니트릴로 표시선까지채
운다.
자)0.1M인산나트 륨완충용액
(pH4.5):500mL용량플라
스크에제일인산나트 륨
(NaH2PO4)6g을넣어물로
표시선까지채운후5M
- 154 -NaOH를가하여 pH4.5로맞
춘다.
차)0.17M황산:100mL용
량플라스크에황산1.67g을
넣은후물로표시선까지채운
다.
카)25mM인산칼륨완충용액
(pH9.0):100mL용량플라
스크에인산이수소칼 륨
(KH2PO4)0.34g넣은후물로
표시선까지채운후,NaOH를
가하여 pH9.0이되도록조절
한다.
타)0.1M인산수소나트 륨용액
:1L용량플라스 크에제이인산
수소나트 륨(Na2HPO4)14.2g을
넣고물에녹여표시선까지채
운다.
파)0.05mM인산수소칼 륨용
액:1L용량플라스 크에인산
이수소칼 륨(KH2PO4)6.8g을
넣고물에녹여표시선까지채
운다.
하)기타시약:특급또는이와
동등한것
거)HLB카트리지(500mg,6
cc)또는이와동등한것- 155 -5)시험용액의조제
가)축․수산물
균질화한시료(소고기,닭고기,
광어)2g을정밀히달아균질
기용기에 넣고아세토니트릴:
물혼합액(80:20v/v)10mL
를넣고2분간균질화시킨다.균
질화시킨시료를50mL원심분
리관으로 옮기고아세토니트릴:
물혼합액(80:20,v/v)10mL
로잔사및용기를 씻어내려
앞서의시료와합한다.합친시
료를5,000G,4℃에서10분간
원심분리하고상층액을감압농
축플라스 크에넣은후50℃이
하의수욕상에서4mL의잔사
가남을때까지감압농축한다.
농축액을여분의50mL원심분
리관에 옮기고아세토니트릴:
물혼합액(50:50,v/v)6mL로
플라스크를세척하여앞서의용
액과합한다.원심분리관에헥산
10mL을넣고5분간진탕한후
5,000G,4℃에서10분간원심분
리를하여헥산층을버린다.원
심분리관에다시헥산10mL를
가한후위의과정을한번더5)시험용액의조제
가)축산물
균질화한검체2g을50mL
원심분리관에취하고,내부표준
물질(피페라실린)을첨가한다.
0.1M인산나트 륨완충용액(pH
4.5)6mL,0.17M황산1.5
mL,5%텅스텐산나트륨1.5
mL를넣고10분간진탕한후
4℃에서5,000g로15분간원
심분리한다.상층액을50mL
원심분리관에취하여5M
NaOH를가하여 pH8.1∼8.5로
조절후4℃에서5,000g로15
분간원심분리후상층액을취
하여20%NaCl10mL를넣고
이액을추출액으로한다.메탄
올5mL,물5mL,2%NaCl
5mL으로활성화를시킨HLB
카트리지에추출액을흡착시키
고2%NaCl5mL,25mM인
산칼륨완충용액(pH9.0)5mL
순서로세척한후카트리지를
건조시킨다.아세토니트릴3
mL로두번에걸쳐대상성분
을용출시키고40℃이하의수
- 156 -반복한다.남은용액을농축플라
스크에옮기고50℃이하의수
욕상에서2.5mL의잔사가남을
정도로농축하고0.1M인산수
소나트륨용액(Na2HPO4)2.5mL
과합한다.★미리메탄올5
mL,물5mL,0.05M인산수소
나트륨용액(Na2HPO4)5mL로
활성화를시킨HLB카트리지에
시료추출액을흡착시키고,0.05
M인산수소나트 륨용액5mL
용액으로세척한후카트리지를
건고시킨다.카트리지에0.05M
인산이수소칼 륨용액(KH2PO4):
아세토니트릴(50:50,v/v)5
mL로대상성분을용출시키고
50℃이하의수욕상에서질소가
스를이용하여아세토니트릴을
날려보낸다.남은용액을물로
희석하여 최종부피를5mL로
맞추고0.2μm필터로여과하여
시험용액으로한다.
나)유및알
균질화한시료(유(乳)20mL,알
5g)를50mL원심분리관에취
하고유는아세토니트릴50mL,
알은20%트리클로로 초산0.5욕상에서질소농축시 킨다.5
mM인산칼륨완충용액(pH9.0)
1mL으로재용해하고0.2μm
PVDF필터로여과하여시험용
액으로한다.
나)유및알
균질화한검체(유20mL,알5
g)를50mL원심분리관에취하
고유는아세토니트릴50mL,- 157 -mL이포함된아세토니트릴20
mL을가하여10분간진탕혼합
한다.혼합액을9,000G,4℃에
서10분간원심분리하고상층액
을감압농축플라스 크에넣은후
50℃이하의수욕상에서4mL
의잔사가 남을때까지감압농축
한다.농축액을50mL원심분리
관에옮기고아세토니트릴:물
혼합액(50:50,v/v)6mL로플
라스크를세척하여앞서의용액
과합한다.원심분리관에헥산
10mL을넣고5분간진탕한후
9,000G,4℃에서10분간원심분
리를하여헥산층을버린다.원
심분리관에다시헥산10mL를
가한후위의과정을한번더
반복한다.남은용액을농축플라
스크에옮기고50℃이하의수
욕상에서2.5mL의잔사가남을
정도로농축하고0.1M인산수
소나트륨용액(Na2HPO4)2.5mL
과합한다.용액을0.1M수산
화나트륨용액으로pH9.0±0.2로
조절한다.추가정제과정은위의
★이후과정을따른다.알은20%트리클로로 초산0.5
mL이포함된아세토니트릴20
mL을가하여10분간진탕혼
합한다.혼합액을9,000g,4℃
에서10분간원심분리하고상
층액을감압농축플라스 크에넣
은후50℃이하의수욕상에서
4mL의잔사가 남을때까지감
압농축한다.농축액을50mL
원심분리관에 옮기고아세토니
트릴:물혼합액(50:50,v/v)
6mL로플라스크를세척하여
앞의용액과합한다.원심분리
관에헥산10mL을넣고5분
간진탕한후9,000g,4℃에서
10분간원심분리를하여헥산
층을버린다.원심분리관에다
시헥산10mL를가한후위
의과정을한번더반복한다.
남은용액을농축플라스 크에
옮기고50℃이하의수욕상에
서2.5mL의잔사가남을정도
로농축하고0.1M인산수소나
트륨용액(Na2HPO4)2.5mL과
합한다.용액을0.1M수산화나
트륨용액으로pH9.0±0.2로조
절한다.미리메탄올5mL,물
- 158 -5mL,0.05M인산수소나트 륨
용액(Na2HPO4)5mL로활성화
를시킨HLB카트리지에시료
추출액을흡착시키고,0.05M
인산수소나트 륨용액5mL용
액으로세척한후카트리지를
건고시킨다.카트리지에0.05M
인산이수소칼 륨용액(KH2PO4):
아세토니트릴(50:50,v/v)5
mL로대상성분을용출시키고
50℃이하의수욕상에서질소
가스를이용하여아세토니트릴
을날려보낸다.남은용액을
물로희석하여 최종부피를5
mL로맞추고0.2μmPVDF필
터로여과하여시험용액으로
한다.
다)수산물
균질화한검체2g을정밀히
달아균질기용기에 넣고아세
토니트릴:물혼합액(80:20
v/v)10mL를넣고2분간균질
화시킨다.균질화시킨검체를
50mL원심분리관으로 옮기고
아세토니트릴:물혼합액(80:
20,v/v)10mL로잔사및용- 159 -기를씻어내려앞의시료와
합한다.합친시료를5,000g,
4℃에서10분간원심분리하고
상층액을감압농축플라스 크에
넣은후50℃이하의수욕상에
서4mL의잔사가 남을때까
지감압농축한다.농축액을여
분의50mL원심분리관에 옮
기고아세토니트릴:물혼합액
(50:50,v/v)6mL로플라스
크를세척하여앞의용액과합
한다.원심분리관에헥산10
mL을넣고5분간진탕한후
5,000g,4℃에서10분간원심
분리를하여헥산층을버린다.
원심분리관에다시헥산10
mL를가한후위의과정을한
번더반복한다.남은용액을
농축플라스 크에옮기고50℃
이하의수욕상에서2.5mL의
잔사가 남을정도로농축하고
0.1M인산수소나트 륨용액
(Na2HPO4)2.5mL과합한다.
미리메탄올5mL,물5mL,
0.05M인산수소나트 륨용액
(Na2HPO4)5mL로활성화를
시킨HLB카트리지에시료추
- 160 -6)시험조작
가)측정조건
(1)액체크로마토그 래프조건
(가)칼럼:C18(2.0mm×
150mm,3μm)
(나)칼럼온도:40℃
(다)이동상
①이동상 A:0.1%포름산
이포함된물
②이동상 B:0.1%포름산
이포함된아세토니트릴출액을흡착시키고,0.05M인
산수소나트 륨용액5mL용액
으로세척한후카트리지를건
고시킨다.카트리지에0.05M
인산이수소칼 륨용액(KH2PO4):
아세토니트릴(50:50,v/v)5
mL로대상성분을용출시키고
50℃이하의수욕상에서질소
가스를이용하여아세토니트릴
을날려보낸다.남은용액을
물로희석하여 최종부피를5
mL로맞추고0.2μmPVDF필
터로여과하여시험용액으로
한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프측정조건
(1)칼럼:C18(2.1mm×150
mm,3.5μm)또는이와동등
한것
(2)이동상
(가)이동상 A:0.05%포름
산이포함된물
(나)이동상B:0.05%포름산
이포함된아세토니트릴- 161 -시간(분) A(%) B(%)
0 98 2
2 98 2
2.1 80 20
8.0 80 20
10 0 100
30 0 100
40 98 2
45 98 2
(라)유속:0.2mL/min
(마)주입량:10μL
(2)질량분석기조건
(가) Ionization:
ESI(positive)
(나)Capillarytemperature:
350℃
(다)Collisiongas:아르곤
(Ar)
(라)Collisionenergy:
물질Precursor 
ion(m/z)Fragment 
ions(m/z)Collision 
energy (V)
아목시실
린366 349, 114 8
암피실린 350 106, 192 17
벤질페니
실린335 160, 176 11
클록사실
린436 277, 160 15
디클록사
실린470 160, 311 13
나프실린 415 199, 171 14
옥사실린 402 160, 243 13
나)검량선의작성
표준용액을농도별로일정량취연
번물질명
(Compou
nd)머무름
시간(
분)선 구이온
(Precu
sor
ion,
m/z)생성이온
(Product
ion,
m/z)충돌에
너지
(Collis
ion
Energy
,eV)
1나프실린
(Nafcillin)12.86415171
199
25633
14
14
2디클록사
실린
(Dicloxaci
llin),13.52470114
160
198
31136
13
36
15
3벤질페니
실린,
페니실린
G
(Benzylpeni10.30335160
17612
13시간(분)이동상
A(%)이동상
B(%)
0.09010
10.05050
15.02575
15.19010
20.09010
(3)유속:0.2mL/분
(4)칼럼온도:35℃
(5)주입량:10μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive)
(2)Capillarytemperature:
350℃
(3)Collisiongas:Ar(아르곤,
또는비활성기체)
(4)분석대상물질의개별조건
- 162 -하여질량분석기에주입한다.얻
어진크로마토그 램상의각피크
높이또는면적을구하여검량
선을작성한다.
다)정량한계
물질정량한계 (mg/kg 또는 mg/L)
축산물 수산물 유 알
아목시실린 0.005 0.005 0.002 0.001
암피실린 0.005 0.001 0.001 0.001
벤질페니실
린0.001 0.001 0.005 0.001
클록사실린 0.005 0.005 0.005 0.001
디클록사실
린0.001 0.005 0.001 0.001
나프실린 0.001 0.005 0.001 0.001
옥사실린 0.001 0.005 0.001 0.001
그림1.액체크로마토그 래프/질량연
번물질명
(Compou
nd)머무름
시간(
분)선 구이온
(Precu
sor
ion,
m/z)생성이온
(Product
ion,
m/z)충돌에
너지
(Collis
ion
Energy
,eV)
cillin,
Penicillin
G)
4아목시실
린
(Amoxicil
lin)2.65366114
34920
7
5암피실린
(Ampicilli
n)5.15350106
114
19217
29
17
6옥사실린
(Oxacillin
)11.72402114
144
160
24333
27
13
13
7클록사실
린
(Cloxacilli
n)12.48436160
164
27714
33
14
8페녹시메
틸페니실
린,
페니실린
V
(Phenoxy
methylpen
i c i l l i n,
Penicillin
V)11.22351114
160
19234
11
11
9피페라실
린
(내부표준
물질,
Piperacillin
)9.66518143
16020
12
1밑줄그은이온은정량이온이며그외이
온들은정성이온 임
※각생성이온(Production)에대한질량
분석기의기기조건은사용기기의 최적값
으로변경하여사용할수있으며,제시된- 163 -분석기에서표준품의 크로마토그 램
벤질페니실린(12.5분),암피실린
(6.4분),아목시실린(6.1분),옥사
실린(12.7분),나프실린(12.8분),
클록사실린(12.8분),디클록사실
린(13.0분)
7)정성시험
위의조건에서 얻어진크로마토
그램상의피크는어느측정조건
에서도표준피크의머무름시간
과일치하여야한다.또한표준용
액과시험용액을각각질량분석
기에주입하였을때Precursor
ion및Fragmention이일치하여
야한다.
8)정량시험
정성시험과 똑같은조건에서 얻
어진시험결과에의해각화합물
의특이이온을확인하고 각각의
크로마토그 램으로부터피크높이
법또는피크면적법에따라정이외의생성이온도적용이가능함
7)정성시험
위의조건으로 얻어진크로마토
그램상의피크는표준용액피크
의머무름시간과비교하여일
치하여야한다.또한표준용액
과시험용액의선구이온
(precursorion)및생성이온
(production)이일치하여야하
고,표준용액과시험용액의생
성이온간반응세기의비율
(responseratio)을비교하여그
비율이20～50%이내에서일치
하여야한다.※주1)참조
8)정량시험
가)정성시험과 똑같은조건에서
표준용액을일정농도로제조한
후얻어진크로마토그 램상의각
피크높이또는면적을구하여
검량선을작성하고,시험용액의
- 164 -량한다.
상대이온강도(%ofbase
peak)LC-MS/MS
(relative)
>50% ≤20%
20%to50% ≤25%
10%to20% ≤30%
≤10% ≤50%크로마토그 램으로부터정량이온
(quantitativeion)의각피크높
이또는피크면적에따라각각
정량한다.
나)정량한계
물질정량한계 (mg/kg 또는 mg/L)
축산물 수산물 유 알
나프실린0.030.0050.0010.001
디클록사실린0.030.0050.0010.001
벤질페니실린
(페니실린 G)0.010.0010.0050.001
아목시실린0.010.0050.0020.001
암피실린0.010.0010.0010.001
옥사실린0.010.0050.0010.001
클록사실린0.030.0050.0050.001
페녹시메틸페
니실린
(페니실린 V)0.01---
주1)생성이온간반응세기의비
율허용범위
그림1.액체크로마토그 래프/질량
분석기에서표준품의 크로마토그
램.아목시실린(2.6분),암피실린
(5.1분),피페라실린(내부표준물질,- 165 -5.3.33∼5.3.35(생략)
5.3.36아프라마이신(Apramycin),
콜리스틴(Colistin)
1)시험법적용범위
축․수산물등에적용한다.
2)∼7)(생략)
5.3.37∼5.3.48(생략)
5.3.49옥시테트라싸이클린
(Oxytetracycline),클로르테트라
9.6분),벤질페니실린(10.3분),페
녹시메틸페니실린(11.2분),옥사실
린(11.7분),클록사실린(12.5분),
나프실린(12.8분),디클록사실린
(13.5분)
5.3.32∼5.3.34(현행과같음)
5.3.35아프라마이신(Apramycin),콜
리스틴(Colistin)
1)시험법적용범위
아프라마이신은유,알및수산물
등에적용하고 콜리스틴은축․수
산물등에적용한다.
2)∼7)(현행과같음)
5.3.36∼5.3.47(현행과같음)
5.4.48 독시싸이클린(Doxycycline),
옥 시 테 트 라 싸 이 클 린
- 166 -싸이클린(Chlortetracycline ),테트
라싸이클린(Tetracycline),독시싸
이클린(Doxycycline)
1)시험법적용범위
축․수산물등에적용한다.
2)∼8)(생략)
<신설>(Oxytetracycline),클로르테트라싸이
클린(Chlortetracycline),테트라싸이
클린(Tetracycline)
5.3.48.1제1법
1)시험법적용범위
축․수산물등에적용한다.
2)∼8)(현행과같음)
5.3.48.2제2법
1)시험법적용범위
벌꿀등에적용한다.
2)분석원리
아카시아꿀,유채꿀,잡화꿀중
의옥시테트라싸이클린 ,클로르
테트라싸이클린,테트라싸이클
린,독시싸이클린은0.1M초
산나트륨완충용액(pH5.0)으로
추출한후약양이온교환카트
리지로정제하고 밤꿀등기타
꿀중의옥시테트라싸이클린 ,
클로르테트라싸이클린 ,테트라
싸이클린,독시싸이클린은 맥바
인(Macllvaine)완충용액으로
추출하여페닐카트리지 와약양
이온교환카트리지로정제한
후액체크로마토그 래프/질량분
석기로분석한다.
3)장치- 167 -액체크로마토그 래프/질량분석
기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매:액체크로마토그 래
프용또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와
동등한것
다)표준원액:옥시테트라싸이
클린,클로르테트라싸이클린 ,테
트라싸이클린,독시싸이클린
표준품을 각각정밀히달아
100μg/mL이되게한다.
라)표준용액:표준원액을
0.1%개미산수용액으로희석
하여사용한다.
마)0.1M초산나트륨완충용
액(pH5.0):1L메스플라스 크
에초산나트륨(CH3COONa)8.2
g을취하여물에녹이고초산
으로pH5.0으로맞춘후표시
선까지채운다.
바)2%개미산메탄올용액:
100mL메스플라스 크에개미
산용액(≥95%)2.1mL를취
한후메탄올에녹여표시선까
지채운다.
아)페닐(Phenyl)카트리지:
- 168 -페닐충진제(1,000mg,6cc)또
는이와동등한것
사)약양이온교환카트리지:
WCX(WeakCationExchange)
카트리지(150mg,6cc)또는
이와동등한것
아)기타시약:특급
5)시험용액의조제
가)아카시아꿀,유채꿀,잡화꿀
균질화한검체5g을50mL
원심관에취하여0.1M초산
나트륨완충용액(pH5.0)10
mL를가한후흔들어섞는다.
이용액을미리메탄올5mL
와물5mL로활성화시킨약
양이온교환카트리지에 흡착시
키고,물5mL와아세토니트
릴5mL로세척후2%개미
산메탄올용액10mL로용출
한다.용출액은40℃이하의
수욕중에서 감압하여농축하
고,잔류물은0.1%개미산수
용액1mL에녹인후0.2㎛
PVDF멤브레인필터로여과
하여시험용액으로한다.
나)밤꿀,기타꿀(현행과같음)
균질화한검체2g을50mL- 169 -원심관에취하고 맥바인
(Macllvaine)완충용액10mL
를가하여 흔들어섞는다.이
용액을미리메탄올5mL,아
세토니트릴5mL,0.01M수
산5mL,포화Na2EDTA용
액5mL순으로활성화시킨
페닐카트리지에 흡착시키고,
0.01M수산용액5mL로세
척후,에틸아세테이트:메탄올
(9:1)10mL로용출시킨다.
이용출액에물2mL를가하
고40℃이하의수욕중에서감
압하여잔류물이2mL가되도
록농축한다.이농축액에0.1
M초산나트륨완충용액(pH
5.0)5mL를가한후미리메
탄올5mL와물5mL로활성
화시킨약양이온교환카트리지
에흡착시키고,물5mL와아
세토니트릴5mL로세척후
2%개미산메탄올용액10
mL로용출시킨다.용출액은
40℃이하의수욕중에서 감압
하여농축하고잔류물은0.01
M수산용액:아세토니트릴
(8:2)용액1mL로녹인후
- 170 -0.2㎛PVDF멤브레인필터로
여과하여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그 래프측정조건
(1)칼럼:C18(2.1×150mm,
3.5μm)또는이와동등한것
(2)칼럼온도:40℃
(3)이동상
(가)이동상 A:0.1%개미산
수용액
(나)이동상 B:0.1%개미산
이함유된아세토니트릴용액
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
09010
29010
71090
91090
129010
159010
(4)유속:0.2mL/min
(5)주입량:10μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive)
(2)Capillarytemperature:
350℃
(3)Capillaryvoltage:4.2kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤)
7)정성시험
위의조건에서 얻어진크로마
토그램상의피크는표준물질- 171 -피크의머무름시간과일치하
여야한다.또한표준용액과시
험용액을각각질량분석기에
주입하였을때선구이온
(precursorion)및생성이온
(production)이일치하여야하
고,표준용액과시험용액의생
성이온간반응세기의비율
(responseratio)을비교하여그
비율이20～50%이내에서일치
하여야한다.※주1)참조
8)정량시험
가)정성시험과동일한조건에서
얻어진표준용액크로마토그 램
상의각물질에대한정량이온
(옥시테트라싸이클린 m/z426
이온,클로르테트라싸이클린 m/z
154이온,테트라싸이클린 m/z
154이온,독시싸이클린 m/z428
이온)의피크면적값을구하여
검량선을작성하고,시험용액크
로마토그 램상의각물질에대한
정량이온의피크면적값에따라
각각의함량을구한다.
- 172 -상대이온강도(%ofbase
peak)LC-MS/MS
(relative)
>50% ≤20%
20%to50% ≤25%
10%to20% ≤30%
≤10% ≤50%물질명
(Compounds)분자
량
(M W)관측질
량
(Exact
mass)선구이온
(Precursor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너
지
(Collisio
n
energy,e
V)
독시싸이클린
(Doxycycline)444.4444.15
3344598
154
42844
32
22
옥시테트라싸
이클린
(Oxytetracycl
ine)460.4460.14
82461201
426
44342
22
16
클로르테트라
싸이클린
(Chlortetracy
cline)478.9478.11
43479154
444
46228
24
18
테트라싸이클
린
(Tetracycline)444.4444.15
33445154
410
42730
18
16
1밑줄그은이온은정량이온이며그외이
온들은정성이온 임
※각생성이온(Production)에대한질량
분석기의기기조건은사용기기의 최적값
으로변경하여사용할수있으며,제시된
이외의생성이온도적용이가능함
나)정량한계:0.01mg/kg
주1)생성이온간반응세기의비율
허용범위- 173 -5.3.50옥시테트라싸이클린(Oxytetracycline)
5.3.51∼5.3.72(생략)
5.3.73암피실린(Ampicillin),아목
시실린(Amoxicillin)
5.3.74암피실린(Ampicillin)
옥시테트라싸이클린
클로르테트라싸이클린
테트라싸이클린
독시싸이클린
그림1.액체크로마토그 래프/질량
분석기에서표준품의 크로마토그
램.옥시테트라싸이클린 (1ng,5.1
분),테트라싸이클린(1ng,5.3분),
클로르테트라싸이클린 (1ng,5.7
분),독시싸이클린(1ng,5.8분)
<삭제>
5.3.49∼5.3.70(현행과같음)
<삭제>
<삭제>
- 174 -5.3.75∼5.3.83(생략)
5.3.84카나마이신(Kanamycin)
1)시험법적용범위
축산물,수산물등에적용한다.
2)∼7)(생략)
5.3.85∼5.3.106(생략)
5.3.107아미카신(Amikacin)
1)시험법적용범위
축산물에적용한다.
2)∼7)(생략)
5.3.108∼5.3.116(생략)
6.∼9.(생략)
제10.∼제11.(생략)
[별표1]∼[별표3](생략)
[별표4]농산물의농약잔류허용기준
(1)∼(8)(생략)
(9)델타메트린(Deltamethrin)5.3.71∼5.3.79(현행과같음)
5.3.80카나마이신(Kanamycin)
1)시험법적용범위
유,알및수산물에적용한다.
2)∼7)(현행과같음)
5.3.81∼5.3.102(현행과같음)
5.3.103아미카신(Amikacin)
1)시험법적용범위
유에적용한다.
2)∼7)(현행과같음)
5.3.104∼5.3.112(현행과같음)
6.∼9.(현행과같음)
제10.∼제11.(현행과같음)
[별표1]∼[별표3](현행과같음)
[별표4]농산물의농약잔류허용기준
(1)∼(8)(현행과같음)
(9)델타메트린(Deltamethrin)- 175 -(생략)
<신설>
(10)∼(28)(생략)
(29)디플루벤주론(Diflubenzuron)
(생략)
<신설>
<신설>
(30)∼(100)(생략)
(101)이미다클로프리드(Imicacloprid)
(생략)
<신설>
(102)∼(113)(생략)
(114)카보퓨란(Carbofuran)
◎잔류물의정의:Carbofuran과
3-hydroxycarbofuran 의합을
carbofuran으로함
(생략)
(115)(생략)(현행과같음)
앙파0.05
(10)∼(28)(현행과같음)
(29)디플루벤주론(Diflubenzuron)
(현행과같음)
대두0.1
풋콩 1.0
(30)∼(100)(현행과같음)
(101)이미다클로프리드(Imicacloprid)
(현행과같음)
참깨 0.05
(102)∼(113)(현행과같음)
(114)카보퓨란(Carbofuran)
◎잔류물의정의:Benfuracarb,
Carbofuran,3-hydroxycarbofuran ,
Carbosulfan,Furathiocarb의
합을carbofuran으로함
(현행과같음)
(115)(현행과같음)
- 176 -(116)카탑하이드로클로라이드
(Cartaphydrochloride)
(생략)
<신설>
(117)∼(132)(생략)
(133)테부코나졸(Tebuconazole)
(생략)
<신설>
<신설>
(134)∼(226)(생략)
(227)아세타미프리드(Acetamiprid)
(생략)
<신설>
(228)∼(236)(생략)
(237)피메트로진(Pymetrozine)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
(238)∼(256)(생략)(116)카탑하이드로클로라이드
(Cartaphydrochloride)
(현행과같음)
마늘0.05
(117)∼(132)(현행과같음)
(133)테부코나졸(Tebuconazole)
(현행과같음)
상추 0.05
양상추0.05
(134)∼(226)(현행과같음)
(227)아세타미프리드(Acetamiprid)
(현행과같음)
풋콩 0.5
(228)∼(236)(현행과같음)
(237)피메트로진(Pymetrozine)
(현행과같음)
배추0.2
엇갈이배추0.5
참외0.1
(238)∼(256)(현행과같음)- 177 -(257)플루퀸코나졸(Fluquinconazole)
(생략)
<신설>
<신설>
(258)∼(298)(생략)
(299)티플루자마이드(Thifluzamide)
(생략)
<신설>
(300)∼(320)(생략)
(321)디노테퓨란(Dinotefuran)
(생략)
<신설>
(322)∼(323)(생략)
(324)비페나제이트(Bifenazate)
(생략)
<신설>
(325)∼(332)(생략)
(333)테부피림포스(Tebupirimfos)(257)플루퀸코나졸(Fluquinconazole)
(현행과같음)
상추 0.05
오디 2.0
(258)∼(298)(현행과같음)
(299)티플루자마이드(Thifluzamide)
(현행과같음)
파 0.05
(300)∼(320)(현행과같음)
(321)디노테퓨란(Dinotefuran)
(현행과같음)
마늘0.05
(322)∼(323)(현행과같음)
(324)비페나제이트(Bifenazate)
(현행과같음)
토마토 0.3
(325)∼(332)(현행과같음)
(333)테부피림포스(Tebupirimfos)
- 178 -(생략)
<신설>
(334)∼(351)(생략)
(352)메톡시페노자이드(Methoxyfenozide)
(생략)
<신설>
(353)∼(393)(생략)
(394)비스트리플루론(Bistrifluron)
(생략)
엇갈이배추1.0
배추0.3
(395)∼(407)(생략)
(408)스피네토람(Spinetoram)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
(409)∼(415)(생략)
(416)클로란트라닐리프롤(Chlorantraniliprole)(현행과같음)
양파0.05
(334)∼(351)(현행과같음)
(352)메톡시페노자이드(Methoxyfenozide)
(현행과같음)
당근 0.05
(353)∼(393)(현행과같음)
(394)비스트리플루론(Bistrifluron)
(현행과같음)
엇갈이배추3.0
배추1.0
(395)∼(407)(현행과같음)
(408)스피네토람(Spinetoram)
(현행과같음)
가지 0.5
브로콜리0.5
양배추0.05
(409)∼(415)(현행과같음)
(416)클로란트라닐리프롤(Chlorantraniliprole)- 179 -(생략)
<신설>
(417)플루벤디아마이드(Flubendiamide)
(생략)
<신설>
<신설>
(418)(생략)
(419)프로헥사디온-칼슘(Prohexadione
-Calcium)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
(420)∼(421)(생략)
(422)펜티오피라드(Pentiopyrad)
(생략)
<신설>
<신설>
(423)피콕시스트로빈(Picoxystrobin)
(생략)
<신설>(현행과같음)
면실0.3†
(417)플루벤디아마이드(Flubendiamide)
(현행과같음)
대두0.1
풋콩 1.0
(418)(현행과같음)
(419)프로헥사디온-칼슘(Prohexadione
-Calcium)
(현행과같음)
마늘0.05
풋마늘0.05
양파0.05
(420)∼(421)(현행과같음)
(422)펜티오피라드(Pentiopyrad)
(현행과같음)
고추 1.0
피망1.0
(423)피콕시스트로빈(Picoxystrobin)
(현행과같음)
마늘0.05
- 180 -<신설>
<신설>
(424)피리플루퀴나존(Pyrifluquinazon)
(생략)
<신설>
(425)∼(427)(생략)
(428)플루오피람(Fluopyram)
(생략)
<신설>
<신설>
(429)(생략)
(430)설폭사플로르(Sulfoxaflor)
(생략)
<신설>
<신설>
(431)∼(432)(생략)
(433)사이안트라닐리프롤(Cyantraniliprole)
(생략)
<신설>
<신설>풋마늘2.0
파 0.3
(424)피리플루퀴나존(Pyrifluquinazon)
(현행과같음)
감 0.5
(425)∼(427)(현행과같음)
(428)플루오피람(Fluopyram)
(현행과같음)
가지 2.0
복숭아0.4
(429)(현행과같음)
(430)설폭사플로르(Sulfoxaflor)
(현행과같음)
양상추5.0
매실0.3
(431)∼(432)(현행과같음)
(433)사이안트라닐리프롤(Cyantraniliprole)
(현행과같음)
마늘0.05
아몬드 0.04†- 181 -<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(434)∼(436)(생략)
(437)플룩사피록사드(Fluxapyroxad)
(생략)
<신설>
(438)피리오페논(Pyriofenone)
(생략)
<신설>
(439)스피로테트라맷(Spirotetramat)
(생략)
<신설>
<신설>
(440)(생략)
<신설>
<신설>피칸0.01†
면실1.5†
유채씨0.8†
해바라기 씨0.5†
(434)∼(436)(현행과같음)
(437)플룩사피록사드(Fluxapyroxad)
(현행과같음)
양파0.05
(438)피리오페논(Pyriofenone)
(현행과같음)
토마토 3.0
(439)스피로테트라맷(Spirotetramat)
(현행과같음)
감자0.3
피망2.0
(440)(현행과같음)
(442)이프펜카바존(Ipfencarbazone)
◎잔류물의정의:Ipfencarbazone
쌀 0.05
(443)테퓨릴트리온(Tefuryltrione)
- 182 -<신설>
<신설>
<신설>
[별표5]인삼의농약잔류허용기준
(1)∼(78)(생략)
<신설>
[별표6]축산물의농약잔류허용기준
(1)∼(20)(생략)
(21)사이퍼메트린(Cypermethrin)◎잔류물의정의:Tefuryltrione
쌀 0.05
(444)트리아파몬(Triafamone)
◎잔류물의정의:Triafamone
쌀 0.05
(445)이마자픽(Imazapic)
◎잔류물의정의:Imazapic
대두0.3†
(446)이마자피르(Imazapyr)
◎잔류물의정의:Imazapyr
대두3.0†
[별표5]인삼의농약잔류허용기준
(1)∼(78)(현행과같음)
(79)포스티아제이트(Fosthiazate)
◎잔류물의정의:Fosthiazate
수삼 0.05
건삼 0.1
[별표6]축산물의농약잔류허용기준
(1)∼(20)(현행과같음)
(21)사이퍼메트린(Cypermethrin)- 183 -(생략)
유 0.05(F)
(22)∼(82)(생략)
[별표7]식품중동물용의약품의잔
류허용기준
(1)∼(3)(생략)
(4)노보비오신(Novobiocin):항
균제
◎잔류물의정의:Novobiocin
식품명 mg/kg
소고기1.0
닭고기1.0
칠면조고기1.0
오리고기1.0
(5)∼(28)(생략)
(29)오르메토프림(Ormethoprim)
:항염증제
◎잔류물의정의:Ormethoprim
식품명 mg/kg
칠면조고기0.1
오리고기0.1
닭근육0.1
닭간0.1
닭지방0.1
닭신장0.1(현행과같음)
<삭제>
(22)∼(82)(현행과같음)
[별표7]식품중동물용의약품의잔
류허용기준
(1)∼(3)(현행과같음)
(4)노보비오신(Novobiocin):항
균제
◎잔류물의정의:Novobiocin
식품명 mg/kg
소근육1.0
닭근육1.0
칠면조근육1.0
오리근육1.0
(5)∼(28)(현행과같음)
(29)오르메토프림(Ormethoprim)
:항염증제
◎잔류물의정의:Ormethoprim
식품명 mg/kg
칠면조근육0.1
오리근육0.1
닭근육0.1
닭간0.1
닭지방0.1
닭신장0.1
- 184 -어류*0.1
(30)옥소린산(Oxolinicacid):
항균제
◎잔류물의정의:Oxolinicacid
식품명 mg/kg
소고기0.05
돼지고기0.05
닭근육0.1
닭간0.15
닭지방0.05
닭신장0.15
송어0.1
연어0.1
방어0.1
뱀장어0.1
은어0.1
잉어0.1
갑각류0.1
(31)(생략)
(32)올레안도마이신(Oleandomycin)
:항균제
◎잔류물의정의:Oleandomycin
식품명 mg/kg
소고기0.15
유0.05
(33)∼(35)(생략)
(36)죠렌(Zoalene):항원충제어류*0.1
(30)옥소린산(Oxolinicacid):
항균제
◎잔류물의정의:Oxolinicacid
식품명 mg/kg
소근육0.05
돼지근육0.05
닭근육0.1
닭간0.15
닭지방0.05
닭신장0.15
송어0.1
연어0.1
방어0.1
뱀장어0.1
은어0.1
잉어0.1
갑각류0.1
(31)(현행과같음)
(32)올레안도마이신(Oleandomycin)
:항균제
◎잔류물의정의:Oleandomycin
식품명 mg/kg
소근육0.15
유0.05
(33)∼(35)(현행과같음)
(36)죠렌(Zoalene):항원충제- 185 -◎잔류물의정의:Zoalene
식품명 mg/kg
닭고기3.0
칠면조고기3.0
(37)∼(127)(생략)
[별표8](생략)◎잔류물의정의:Zoalene
식품명 mg/kg
닭근육3.0
칠면조근육3.0
(37)∼(127)(현행과같음)
[별표8](현행과같음)