中华人民共和国国家标准
GB xxxx—xxxx
 
 
食品安全 国家标准  
食品添加剂  β-胡萝卜素 （盐藻来源 ） 
 
（征求意见稿 ） 
 
中华人民共和国国家卫生健康委员会  
国家市场监督管理总局       发布 
 201x -xx-xx发布  201x-xx-xx实施GB xxxx —xxxx  
1 食品安全国家标准  
食品添加剂  β-胡萝卜素 （盐藻来源 ） 
1 范围 
本标准适用于以 杜氏盐藻 （Dunaliella Salina ）为原料，用物理方法 经d-柠烯提取得到的食品添加
剂β-胡萝卜素（盐藻来源 ）。 
2 化学名称 、分子式、结构式和相对分子质量  
2.1 化学名称  
1,1′-(3,7,12,16 -四甲基 -1,3,5,7,9,11,13,15,17 -十八碳九烯 -1,18-二基 )双[2,6,6 -三甲基环己烯 ] 
2.2 分子式 
C40H56 
2.3 结构式 
 
2.4 相对分子质量  
536.88（按2016年国际相对原子质量 ） 
3  技术要求 
3.1 感官要求 
感官要求 应符合表1的规定。 
表1 感官要求  
项     目 要    求 检验方法  
色泽 深红色 取适量试样置于清洁 、干燥的白瓷盘中 ，在自然光线
下观察色泽和状态 ，并嗅其气味。 状态 油悬浮液 、粉末或颗粒 
气味 本身固有气味  
3.2 理化指标 
理化指标 应符合表2的规定。 
表2  理化指标  
项     目 指    标 检验方法  
总天然类胡萝卜素 含量，w/%            ≥ 30.0 附录 A中A.3 GB xxxx —xxxx  
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 砷（As）/（mg/kg）                    ≤ 3.0 GB 5009.76 或GB 5009.11  
铅（Pb）/（mg/kg）                    ≤ 5.0 GB 5009.75 或GB 5009.12  
d-柠烯含量，w/%                      ≤ 0.3 附录 A中A.4 
注：商品化的 β-胡萝卜素产品应以符合本标准的 β-胡萝卜素为原料 ，可添加符合相关食品质量规格要求的食用植
物油、麦芽糊精 、蔗糖、淀粉等食品原料 和符合食品添加剂质量规格要求的阿拉伯胶 、明胶、抗坏血酸棕榈酸酯 、维生
素E、柠檬酸、二氧化硅 、辛,癸酸甘油酯 等食品添加剂 而制成，其总天然 类胡萝卜素含量符合标识值 。 GB xxxx —xxxx  
3 附录A 
检验方法  
A.1  一般规定  
本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时 ，均指分析纯试剂和 GB/T 6682 规定的三级水 。试验中
所用标准溶液 、杂质测定用标准溶液 、制剂和制品 ，在没有注明其他要求时均按 GB/T 601 、GB/T 602 、
GB/T 603 之规定制备 。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时 ，均指水溶液 。 
A.2  鉴别试验  
用分光光度计测定 ，试样的环己烷溶液 （5 mg/L）在448 nm～457 nm 和474 nm～486 nm 处有最
大吸收值 。 
A.3  总天然类胡萝卜素 含量的测定 
A.3.1  方法原理 
β-胡萝卜素是共扼双键的化合物 ，在波长 455 nm±l nm 处有最大吸收值 ，可依此来测定总类胡萝
卜素含量 。样品溶于氯仿中并用己烷稀释到合适的浓度 ，最终的稀释在环己烷中进行 ，测定吸光度，并
使用吸收度系数计算浓度 。 
A.3.2  试剂和材料 
A.3.2.1  氯仿。 
A.3.2.2  环己烷。 
A.3.2.3  己烷。 
A.3.3  仪器和设备  
分光光度计 。 
A.3.4  分析步骤  
A.3.4.1  溶液A的制备 
称取约 0.5 g的三份样品 （精确到 0.001  g）到100 mL 容量瓶（使用具有低光化性质的玻璃器皿 ） 。
添加约 10 mL 氯仿溶解样品 ，混合均匀 。透光观察 ，确定样品完全溶解 ；以己烷稀释至刻度 ，混合均
匀，即得溶液 A。当测定商品化的样品时 ，根据产品形式不同 ，需增加相应的前处理步骤 ，以保证其中
的类胡萝卜素完全溶出 。 
A.3.4.2  溶液B的制备 
吸取 2.0 mL 溶液 A到50 mL容量瓶，以己烷稀释至刻度 ，混合均匀 ，即得溶液 B。 
A.3.4.3  溶液C的制备 
吸取 2.0 mL 溶液 B到50 mL容量瓶，以环己烷稀释至刻度 ，混合均匀 ，即得溶液 C。 
A.3.4.4  测定 
在最大吸收度波长测定溶液 C的吸光度，以环己烷作为空白对照调零 。吸光度应控制在 0.3~0.7之间，
否则应调整试样液浓度 ，再重新测定吸光 度。使用吸光系数 进行计算 ，不再需要标准样品 。 
A.3.5  结果计算  
总天然类胡萝卜素含量 的质量分数 w，按式（A.1）计算： 
																																																																																									ݓ=ܣ×62500
2500×݉⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(A.1) 
 
式中： 
A——溶液 C在455nm附近的最大吸光度 ； 
62500 ——以mL为单位的稀释因子 ； GB xxxx —xxxx  
4 2500 —— β-胡萝卜素 在环己烷中的百分 吸光系数 （1%，1 cm）； 
m——样品的质量，单位为克 （g）。 
结果保留 3位有效数字 。 
试验结果以平行测定结果的算术平均值为准 ，在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值
不得超过算术平均值的 1.5 %。 
A.4 d-柠烯含量的测定  
A.4.1  方法原理  
    加入内标物的样品用二氯甲烷溶解后 ，采用气相色谱法进行分析 ，内标法测定 d-柠烯的含量 。 
A.4.2  试剂和材料  
A.4.2.1  正己烷：分析纯。 
A.4.2.2  二氯甲烷 ：分析纯。 
A.4.2.3  d-柠烯标准品 ：纯度≥95 %。 
A.4.2.4  γ-松油烯标准品 ：纯度≥96 %。 
A.4.3  仪器和设备  
A.4.3.1  气相色谱仪 ：具有氢火焰离子检测器 (FID)。 
A.4.3.2  毛细管色谱柱 ：聚乙二醇强极性固定相 ，柱长 30 m，内径 0.53 mm，膜厚 1.0 m极，或其它等
效色谱柱 。 
A.4.3.3  参考色谱条件  
A.4.3.3.1  进样器温度 ：150 ℃。 
A.4.3.3.2  检测器温度 ：200 ℃。 
A.4.3.3.3  柱温：80 ℃保持 5 min，以10 ℃/min升温至 150 ℃，保持 3 min；总运行时间 15 min。 
A.4.3.3.4  载气：高纯氮气，恒压 12 kPa。 
A.4.3.3.5  分流比：5：1，或不分流 。 
A.4.3.3.6  进样体积 ：2.0L（分流）， 0.5L（不分流）。 
A.4.4  分析步骤  
A.4.4.1  试验溶液的制备  
A.4.4.1.1  γ-松油烯内标储备液 
精确称取 1.0 g γ-松油烯标准品 (精确至 0.0001 g) ，正己烷溶解 ，移入 100 mL容量瓶中 ，正己烷定
容至刻度 ，摇匀，备用。 
A.4.4.1.2  d-柠烯标准储备液  
精确称取 0. 5 g（精确至 0.0001 g）d-柠烯标准品 ，正己烷溶解 ，移入 50 mL容量瓶中 ，正己烷定容
至刻度，摇匀，备用。 
A.4.4.1.3  d-柠烯标准工作液  
精确移取 5.00 mL  d-柠烯标准储备液于 50 mL容量瓶中 ，正己烷定容至刻度 ，摇匀，备用。 
A.4.4.1.4  系列标准工作液  
精确移取 1.00 mL γ-松油烯内标储备液和10.00 mL  d-柠烯标准储备液于 25 mL容量瓶中 ，用正己烷稀
释至刻度 ，摇匀，备用；精确移取 2.00 mL γ-松油烯内标储备液和5.00 mL  d-柠烯标准储备液于 50 mL容
量瓶中，用正己烷稀释至刻度 ，摇匀，备用；精确移取 2.00 mL γ-松油烯内标储备液和5.00 mL d-柠烯标
准工作液于 50 mL容量瓶中 ，用正己烷稀释至刻度 ，摇匀，备用；精确移取 2.00 mL γ-松油烯内标储备液
和2.00 mL  d-柠烯标准工作液于 50 mL容量瓶中 ，用正己烷稀释至刻度 ，摇匀，备用；空白液，精确移
取2.00 mL γ-松油烯内标储备液于25 mL容量瓶中，用正己烷稀释至刻度 ，摇匀，备用。配制成分别含有
d-柠烯 0，0.04 mg/mL ，0.1 mg/mL ，1.0 mg/mL ，4.0 mg/mL 且其中分别含有 0.4 mg/mL  γ-松油烯的系列
标准工作液 。 GB xxxx —xxxx  
5 A.4.4.2  系统稳定性试验  
A.4.4.2.1  气相色谱运行两次空白液 ，不应出现 d-柠檬烯色谱峰 。 
A.4.4.2.2  气相色谱运行 5次含有 d-柠烯 1.0 mg/mL 和0.4 mg/mL  γ-松油烯的系列标准工作液 ，变异系数
应不超过 1.00 %。d-柠烯和γ-松油烯的保留时间相差应 不小于 0.5 min。 
A.4.4.3  试样溶液的制备  
用锥形瓶精确 称取 1.0 g～2.5 g（精确至 0.0001 g）试样，精确移取 1.00 mL γ-松油烯内标储备液至
锥形瓶中 ，混合均匀 。加入 10 mL二氯甲烷 ，混合均匀 。将混合后的溶液 移入 25 mL容量瓶中 ，二氯甲
烷定容至刻度 ，摇匀。 
A.4.4.4  测定  
在A.4.3.3参考色谱条件下 ，吸取试样溶液注入色谱仪 ，记录所得的试样溶液中 d-柠烯的峰面积和 内
标物质峰面积。 
A.4.5  结果计算 
A.4.5.1  响应因子 f1，按式（A.2）的计算： 
																																							݂ଵ=ܣଶ×ܿଵ
ܣଵ×ܿଶ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(A.2)	 
式中： 
c1—— d-柠烯标准液浓度 ，%； 
c2—— γ-松油烯内 标液浓度 ，%； 
A1—— d-柠烯标准物质峰面积 ； 
A2—— γ-松油烯内标物质色谱峰面积 。 
A.4.5.2  d-柠烯含量的质量分数 w，按式（A.3）计算： 
																																																																												ݓ=ܣସ݉ଵ	݂ଵ
ܣଷ	݉⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(A.3) 
式中： 
A3——试样溶液中 γ-松油烯内标物质色谱峰面积 ； 
A4——试样溶液中 d-柠烯峰面积 ； 
m1——试样液中 γ-松油烯内标物质 质量，单位为克 （g） ； 
f1——响应因子 ； 
m——试样的质量，单位为克 （g）。 
A.4.5.3  系统稳定性试验中变异系数 CofV，按式（A.4）的计算： 
																																																																					ܸ݂݋ܥ=100
ܺ	[∑(ܺ௜−ܺ)ଶ ே
௜ୀଵ
ܰ−1]ଵଶൗ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(A.4) 
式中： 
Xi——稳定性试验中单次测量值 ； 
N——稳定性试验测量次数 ； 
X——稳定性试验测量平均数 。