中华人民共和国国家标准
GB XXXX —201×
食品安全国家标准  
食品营养强化剂  氯化高铁血红素  
（征求意见稿 ） 
 
201×-×× -××发布  201×-×× -××实施  
GB ×××× —201x 
1 食品安全国家标准  
食品营养强化剂  氯化高铁血红素  
1 范围  
本标准适用于以检疫合格动物的血液为主要原料 ，采用冰醋酸法经加工制得的食品营养强化剂氯化
高铁血红素 。 
2  分子式、结构式和相对分子质量  
2.1分子式  
C34H32ClFe  (III)N 4O4 
2.2 结构式  
 
 
2.3相对分子质量  
651.94（按2016年国际相对原子质量 ） 
3  技术要求  
3.1 感官要求  
感官要求应符合表 1的规定。 
表1 感官要求  
项  目 要  求 检验方法  
色泽  蓝褐色或 黑褐色  取适量试样置于清洁 、干燥的白瓷盘中 ，在自然  
光线下，观察其色泽和组织状态  状态  晶体或粉末  
3.2 理化指标 ： 
理化指标应符合表 2的规定。 
  
 
 
 
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2  表2 理化指标  
项  目 指  标 检验方法  
氯化高铁血红素含量 ，（C34H32ClFe  (III) N4O4） 
w/%                                     ≥ 90.0 附录 A中的 A.3 
氯化高铁血红素中的 铁含量，w%            ≥ 7.7 GB 5009.90  
干燥减量 ，w/%                           ≤ 5.0 GB 5009.3 （直接干燥法 ） 
总砷（以As计）/( mg/kg )                  ≤ 2.0 GB 5009.76  
铅（Pb）/(mg/kg )                          ≤ 2.0 GB 5009.75 或GB 5009.12  
汞（Hg）/(mg/kg )                          ≤ 0.5 GB 5009.17  
3.3 微生物  
微生物限量应符合表 3的规定。 
表3 微生物限量  
项  目 指  标 检验方法  
沙门氏菌 /25g 不得检出  GB 4789.4  
金黄色葡萄球菌 /25g 不得检出  GB 4789.10 定性检验  
 
                                        
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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3 附 录 A 
检 验 方 法 
A.1  一般规定  
除非另有说明 ，在分析中仅使用确认为分析纯试剂和  GB/T 6682 中规定的三级水 。试验方法中所
用标准滴定溶液 、杂质测定用标准溶液 、制剂及制品 ，在没有注明其他要求时 ，均按  GB/T 601 、GB/T 
602、GB/T 603 之规定制备 。所用溶液在未注明用何种溶剂配制时 ，均指水溶液 。 
A.2  鉴别试验   
A.2.1试剂和仪器  
A.2.1.1硝酸。 
A.2.1.2  硫化钠。 
A.2.1.3  硫酸溶液 ：取5 mL浓硫酸，缓慢加入约 80 mL水中，再加水定容至 100 mL。 
A.2.1.4盐酸溶液 ：取50 mL浓盐酸，加水稀释定容至 100 mL。 
A.2.1.5硫氰酸铵溶液 ：溶解 8 g硫氰酸铵于适量水中 ，用水稀释至 100 mL。 
A.2.1.6  吡啶氢氧化钠溶液 ：溶解 1.2 g氢氧化钠于 200 mL水中，再加入 100 mL吡啶，混合。 
A.2.1.7氨溶液：取氨水 400 mL，用水稀释至 1000 mL。 
A.2.1.8 水浴箱。 
A.2.2 鉴别方法  
A.2.2.1 颜色反应  
A.2.2.1.1取氯化高铁血红素 0.010 g，加入硫酸溶液 (A.2.1.3) 1 mL和硝酸 1 mL使之溶解 ，水浴蒸干 。残
留物用盐酸溶液 （A.2.1.4）10 mL溶解，滴入数滴硫氰酸铵溶液 （A.2.1.5）。溶液呈暗红色 。 
A.2.2.1.2将氯化高铁血红素 0.005 g用吡啶氢氧化钠溶液 (A.2.1.6) 10 mL溶解，加入硫化钠 0.1 g。溶液
呈暗红色 。 
A.2.2.1.3取氯化高铁血红素 0.010 g，加入硝酸 5 mL，加热。溶液呈黄色 。冷却后，用氨溶液 (A.2.1.7)
调节至碱性 。溶液颜色变为橙黄色 。 
A.2.2.2红外光谱法  
采用溴化钾压片法 ，按照 GB/T 6040 的规定进行试验 ，试样的红外光谱应与对照的谱图一致 。对照
谱图见附录 B。 
A.3 氯化高铁血红素 （C34H32ClFe (III)N 4O4）含量的测定  
A.3.1 紫外分光度法  
A.3.1.1 方法提要  
氯化高铁血红素以 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液溶解后 ，采用紫外分光度法测定 ，在386 nm±1nm 处有
最大吸收峰 ，测定吸光度值 A，根据标准工作液浓度计算试样含量 。 
A. 3.1.2  试剂与仪器  GB ×××× —201x 
4 A.3.1.2.1  氢氧化钠溶液 0.1 mol/L ：称取 4.0 g氢氧化钠 ，加入适量水溶解 ，用水定容至 1L。 
A.3.1.2.2  氯化高铁血红素标准物质 （hemin）：C34H32ClFe  (III)N 4O4，CAS： 16009 -13-5，纯度 ≥97%。 
A.3.1.2.3  氯化高铁血红素标准储备液 ：准确称取氯化 高铁血红素标准物质 20 mg（精确到 0.1 mg），用
0.1 mol/L （A.3.1.2.1）氢氧化钠溶液配制成浓度为 200.0 mg/L 的标准储备液 。该溶液于棕色试剂瓶中
0 ℃～4 ℃避光保存 ，有效期 3天。 
A.3.1.2.4 氯化高铁血红素标准工作液 ：准确吸取 0.4 mL标准储备液 （A.3.1.2.3）置于 10.0 mL容量瓶
中，加0.1 mol/L 氢氧化钠溶液定容至刻度 ，配制成浓度为 8.0 mg/L 的标准工作液 。临用时配制 。 
A.3.1.2.5 紫外分光光度计 。 
A. 3.1.3 分析步骤  
称取经 105℃干燥至恒重的试样 ，按每 1 mL约含 8 µg氯化高铁血红素制备试 样溶液，加
入0.1 mol/L 氢氧化钠溶解 ，必要时经超声处理使之完全溶解 。 
取适量试样溶液 ，采用紫外分光光度法验证试样溶液的最大吸收峰应在 386 nm±1nm 范围。并确
保标准曲线及试样样液吸光度值 A在0.3-0.7之间。当吸光度值 A超过此线性范围时 ，可适当加大试样
的稀释倍数 。 
分别取氯化高铁血红素标准溶液和试样液 ，以0.1mol/L 的氢氧化钠溶液为空白 ，在386 
nm±1nm 波长处测定吸光度值 A。 
A. 3.1.4 结果计算  
氯化高铁血红素的质量分数 w1，按式（A.1）计算：  
      …………… （A.1） 
式中 :  
A —— 试样液中氯化高铁血红素的 吸光度值 ； 
c ——氯化高铁血红素标准工作溶液的浓度 ，单位为毫克每升 （mg/ L）；  
V —— 最终试样液的定容体积 ，单位为升 （L）；  
AS —— 氯化高铁血红素标准工作溶液的 吸光度值 ； 
m—— 最终试样溶液所代表试样质量 ，单位为克 （g）。 
取平行测定结果的算术平均值为测定结果 ，两次平行测定结果的绝对差值不大于 5.0%。 
A.3.2 液相色谱法  
A.3.2.1 方法提要  
氯化高铁血红素以 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液溶解后 ，离心过滤 ，高效液相色谱仪 （配紫外检测器 ）
测定，外标法定量 。 
A. 3.2.2  试剂与仪器  
A.3.2.2.1甲醇：色谱纯。 
A.3.2.2.2乙酸：色谱纯。 
A.3.2.2.3乙酸溶液 ：吸取 6 mL乙酸（A.3.2.2.2），用水定容至 1 L。 %1001000
m AVcAW1 
sGB ×××× —201x 
5 A.3.2.2.4氯化高铁血红素标准物质 （Hemin）：见A.3.1.2.2。 
A.3.2.2.5氯化高铁血红素标准储备液 ：见A.3.1.2.3。 
A.3.2.2.6滤膜：0.45μm，水相。 
A.3.2.2.7高效液相色谱仪 ，配紫外检测器 。 
A.3.2.3 分析步骤  
精密称取经 105℃干燥至恒重的试样 ，按每 1 mL约含 200 µg氯化高铁血红素 ，加入 0.1 
mol/L氢氧化钠 溶解。必要时超声使之完全溶解 ，0.45 µm微孔滤膜过滤 ，供高效液相色谱测定 。 
A.3.2.4 参考色谱条件  
A.3.2.4.1 色谱柱：C18柱，250 mm×4.6 mm ，粒径 5 μm，或同等性能的色谱柱 。 
A.3.2.4.2 流动相：甲醇∶乙酸液＝70∶30（体积比）。  
A.3.2.4.3  柱温：35 ℃。 
A.3.2.4.4 流速：1 mL/min 。 
A.3.2.4.5 检测波长 ：399 nm。 
A.3.2.4.6 进样量：10 μL。 
A.3.2.5色谱测定   
在上述色谱条件下 ，氯化高铁血红素的保留时间约为 5.021 min 。标准品的色谱图参见附录 C 
A.3.2.6 结果计算  
氯化高铁血红素 的质量分数 w2，按式（A.2）计算  
      …………… （A.2） 
式中 : 
A1 —— 样液中氯化高铁血红素的 色谱峰面积 ； 
c —— 氯化高铁血红 素标准储备液的浓度 ，单位为毫克每升 （mg/L）；  
V —— 最终样液的定容体积 ，单位为升 （L）；  
AS ——氯化高铁血红素标准储备液的 色谱峰面积 ； 
m—— 最终样液所代表试样质量 ，单位为克 （g）。 
取平行测定结果的算术平均值为测定结果 ，两次平行测定结果的绝对差值不大 于5.0%。 
 
 
 
 
 
 
 
 %10010001
m A V c A W2 
s GB ×××× —201x 
6 附录  B  
氯化高铁血红素的标准红外光谱图  
    氯化高铁血红素的标准红外光谱图见图 B.1。 
 
      
  图B.1 氯化高铁血红素的标准红外光谱图  
 
附录 C.  
氯化高铁血红素的高效液相色谱图  
氯化高铁血红 素的高效液相谱图见图 C.1。 
 
 
图C.1 氯化高铁血红素的标准品色谱图