中华人民共和国国家标准
GB 13737—201x
 
食品安全国家标准  
食品添加剂   L-苹果酸 
（送审稿） 
 
中 华 人 民 共 和 国 
国家卫生和计划生育委员 会  发布 
 201x -xx-xx发布  201x-xx-xx实施GB 13737 —201x 
1 前    言 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 本标准代替 GB 13737 ─200 8 《食品添加剂  L-苹果酸》。 GB 13737 —201x 
2 食品安全国家标准  
食品添加剂   L-苹果酸 
1 范围 
本标准适用于以酶工程法 、发酵法制得的食品添加剂 L-苹果酸。 
2 化学名称 、分子式、结构式和相对分子质量  
2.1  化学名称  
L-羟基丁二酸  
2.2  分子式 
C4H6O5 
2.3  结构式 
  
  
2.4  相对分子质量  
134.09（按2007年国际相对原子质量 ） 
3 技术要求  
3.1 感官要求 
感官要求 应符合表 1的规定。 
表1  感官要求  
项     目 要    求 检验方法  
色泽 白色 
取适量试样置于清洁 、干燥的白瓷盘中 ，在自然光下
观察其色泽和状态 ，嗅其气味 状态 结晶或结晶粉末  
气味 特殊的酸味  
3.2 理化指标 
理化指标 应符合表 2的规定。 
 
 
 
 
 
 
 
 GB 13737 —201x 
3 表2  理化指标  
项    目 指    标 检验方法  
L-苹果酸 (C4H6O5)含量  (w)/%                     ≥ 99.0 附录 A中A.4 
比旋光度 αm(20℃,D)/[ (°)·dm2·kg-1]  ﹣1.6～﹣2.6 附录 A中A.5 
灼烧残渣 (w)/%                                 ≤ 0.10 附录 A中A.6 
澄清度  通过试验  附录 A中A.7 
硫酸盐 (以SO 4计) (w)/ %                         ≤ 0.02 附录 A中A.8 
氯化物 (以Cl计) (w)/ %                          ≤ 0.004  附录 A中A.9 
富马酸 (w)/%                                   ≤ 0.5 
附录 A中A.10 
马来酸 (w)/%                                   ≤ 0.05 
重金属  (以Pb计)/(mg/kg )                        ≤ 10  附录 A中A.11  
砷 (以As计)/(mg/kg )                            ≤ 2  附录 A中A.12 
铅(Pb)/(mg/kg)                                 ≤ 2  附录 A中A.13 GB 13737 —201x 
4 附录A 
检验方法  
A.1  警示 
试验方法规定的一些试验过程可能导致危险情况 。操作者应采取适当的安全和健康措施 。 
A.2  一般规定  
本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时 ，均指分析纯试剂和 GB/T 6682 规定的三级水 。试验
中所用标准滴定溶液 、杂质测定用标准溶液 、制剂及制品 ，在没有注明其他要求时 ，均按 GB/T 601 、
GB/T 602 和GB/T 603 的规定制备 。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时 ，均指水溶液 。 
A.3  鉴别试验  
A.3.1  试剂和材料 
A.3.1.1  氨水溶液 ：2+3。 
A.3.1.2  对氨基苯磺酸溶液 ：10 g/L。 
A.3.1.3  亚硝酸钠溶液 ：200 g/L。 
A.3.1.4  氢氧化钠溶液 ：40 g/L。 
A.3.2  鉴别方法  
A.3.2.1  苹果酸氨盐呈色试验  
称取 0.5 g试样，精确至 0.01 g，置于 50 mL试管中，加入 10 mL水溶解。用氨水溶液中和至中性 ，
加入 1 mL对氨基苯磺酸溶液 ，在沸水浴中加热 5 min。加入 5 mL亚硝酸钠溶液 ，再置于水浴加热 3 min
后，加入 5 mL氢氧化钠溶液 ，试验溶液应立即呈红色 。 
A.3.2.2  旋光特性试验  
试验方法同 A.5，试样水溶液应呈左旋特性 。 
A.4   L-苹果酸(C4H6O5)含量的测定  
A.4.1  方法提要 
以酚酞为指示剂 ，用氢氧化钠标准 滴定溶液滴定 试样水溶液，根据氢氧化钠标准滴定溶液的用量 ，
计算以 C4H6O5计的总酸含量为 L-苹果酸含量 。 
A.4.2  试剂和材料  
A.4.2.1  无二氧化碳的水 。 
A.4.2.2  氢氧化钠标 准滴定溶液 ：c(NaOH)＝1.0 mol/L。 
A.4.2.3  酚酞指示液 ：10 g/L。 
A.4.3  分析步骤  
A.4.3.1  称取 2.0 g试样，精确至 0.000  2 g，加20 mL无二氧化碳的水溶解 ，加2 滴酚酞指示液 ，用氢氧
化钠标准溶液滴定至微红色 ，保持 30 s不褪色为终点 。 
A.4.3.2  在测定的同时 ，按与测定相同的步骤 ，对不加试 样而使用相同数量的试剂溶液做空白试验 。 GB 13737 —201x 
5 A.4.4  结果计算  
L-苹果酸（C4H6O5）的质量分数 w1，按公式（A.1）计算： 
%1001000
10 1
1 
mMcVV
w ……………………………………… （A.1） 
式中： 
V1——试样消耗氢氧化钠标准滴定溶液 的体积，单位为毫升 (mL)； 
V0——空白试验消耗氢氧化钠标准滴定溶液 的体积，单位为毫升 (mL)； 
1000 ——换算因子 ； 
c——氢氧化钠标准滴定溶液 的浓度，单位为摩尔每升 (mol/L)； 
M ——苹果酸的摩尔质量 ，单位为克每摩尔 (g/mol)，[M(21C4H6O5)=67.04) ]； 
m1 ——试样的质量，单位为克 (g)。 
计算结果表示到小数点后两位 。 
取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果 ，两次平行测定结果的绝对差值不大于 0.2 %。 
A.5  比旋光度的测定  
A.5.1  称取 4.25 g试样，精确至 0.001  g，加入 20 mL水溶解，移至 50 mL容量瓶中 ，用水稀释至刻度 ，
摇匀。 
   比旋光度 αm(20℃,D)数值以“ ( º)·dm2· kg-1”表示，按公式 (A.2)计算： 
                                                                                         
                                      ………… ……………………………………… (A.2) 
 
式中： 
α ——  测得的旋光角 ，单位为度 （°）； 
l ——  旋光管的长度 ，单位为分米 （dm）； 
ρa——溶液中有效组分的质量浓度 ，单位为克每毫升 (g/mL)。 
A.5.2  其他按GB/T 613 的规定进行 。 
A.6  灼烧残渣的测定  
称取 2.5 g试样，精确至 0.001  g。其他按 GB/T 9741 的规定进行 。 
取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果 ，两次平行测定结果的绝对差值不大于 0.02 %。 
A.7  澄清度 
A.7.1  方法提要  
将试样溶于水，与标准比浊溶液进行比较 。 
A.7.2  试剂和材料  
A.7.2.1  硝酸溶液 ：1+2。 
alDC m , 20GB 13737 —201x 
6 A.7.2.2  糊精溶液 ：20 g/L。 
A.7.2.3  硝酸银溶液 ：20 g/L。 
A.7.2.4  盐酸标准溶液 ：c(HCl)=0.1  mol/L。 
A.7.2.5  浊度标准溶液 ：含氯 (Cl)0.01  mg/mL。量取 c(HCl)=0.1  mol/L盐酸标准滴定溶液 14.1 mL±0.02 
mL，置于 50 mL容量瓶中 ，稀释至刻度 。量取该溶液 10 mL±0.02 mL于1000  mL容量瓶中 ，加水稀
释至刻度 ，摇匀。 
A.7.3 分析步骤  
    称取约 1.0 g试样，精确至 0.01 g，置于比色管中 ，加入 20 mL水溶解，做为试样溶液；取另一只
比色管，准确加入 0.50 mL浊度标准溶液 ，加水至 20 mL，加1 mL硝酸溶液 、0.2 mL糊精溶液及 1 mL
硝酸银溶液 ，摇匀，避光放置 15 min，作为标准比浊溶液 。 
    在无阳光直射情况下 ，轴向及侧向观察 ，试样溶液的浊度不得大于标准比浊溶液的浊度 。 
A.8  硫酸盐(以SO4计)的测定 
A.8.1  方法提要  
在酸性 (盐酸 )溶液中，试样中的硫酸盐和氯化钡生成硫酸钡白色沉淀 ，与标准比浊溶液进行比较 ，
做限量试验 。 
A.8.2  试剂和材料  
A.8.2.1  盐酸溶液 ：1+4。 
A.8.2.2  氯化钡溶液 : 250  g/L。 
A.8.2.3  硫酸盐 (SO 4)标淮溶液 ：0.1 mg/mL。 
A.8.3  分析步骤  
称取 1 g试样，精确至 0.01 g，置于 50 mL比色管中 ，同时量取 2 mL±0.02 mL硫酸盐 (SO 4)标淮溶液
置于另一只 50 mL比色管中 。两只比色管中分别加入 0.5 mL盐酸溶液 、1 mL氯化钡溶液 ，用水稀释至刻
度，摇匀。放置 10 min后观察，试样溶液产生的浊度应不深于标准比浊溶液产生的浊度 。 
A.9  氯化物(以Cl计)的测定 
A.9.1  试剂和材料  
氯化物（Cl）标准溶液 ：0.1 mg/mL。 
A.9.2  分析步骤  
称取 1.0 g试样，精确至 0.01 g。量取 0.4 mL氯化物 (Cl)标准溶液 (含氯化物 0.04 mg )制备限量标准
液。样品所呈浊度不得大于标准 。其他按 GB/T 9729 的规定进行 。 
A.10  富马酸和马来酸的测定  
A.10.1  方法提要  
用高效液相色谱法 ，在选定的工作条件下 ，通过色谱柱使 试样溶液中各组分分离 ，用紫外吸收检
测器检测 ，用外标法定量 ，计算试样中富马酸及马来酸的含量 。 
A.10.2  试剂和材料  
A.10.2.1  氢氧化钠溶液 ：20 g/L； GB 13737 —201x 
7 A.10.2.2  磷酸溶液 ：量取 1 mL±0.02 mL磷酸（优级纯试剂 ）于1 000 mL容量瓶中 ，加入 100 mL
甲醇（HPLC级试剂） （可根据柱效调整加入量 ） ，加水稀释至刻度 ，再经 0.45 μm滤膜过滤 。   
A.10.2.3  富马酸标准品：纯度≥99.0 %；  
A.10.2.4  马来酸标准品：纯度≥99.0 %。 
A.10.3  仪器和设备  
    高效液相色谱仪 ：配备紫外检测器 ，或其他等效的检测器 。 
A.10.3.1  高压泵：无脉冲，能将流速保持在 0.1 mL/min～10.0 mL/min 。 
A.10.3.2  抽滤系统  
抽滤系统使用孔径为 0.45 μm的纤维素酯膜滤纸 （用于流动相的预处理 ） 。 
A.10.3.3  过滤系统  
过滤系统使用孔径为 0.45 μm的纤维素酯膜滤纸 （用于试样的预处理 ） 。 
A.10.4  参考色谱条件  
推荐的色谱柱及 典型操作条件见表 A.1，富马酸和马来酸含量测定 典型高效液相色谱图参见附录
B图B.1，各组分的相对保留时间参见附录 B表B.1。其他能达到同等分离程度的 色谱柱和 色谱操作条
件均可使用 。 
表A.1  色谱柱和 典型色谱操作条件  
色谱柱  柱长 250 mm，柱内径 4.6 mm ，以硅胶为基质 ，表面键合 C8 官能团的非极性填料色谱柱   
柱温  室温～60 ℃，控制精度 ±1 ℃ 
流动相  磷酸溶液  
流动速度 /( mL/min)  1.0 
检测器检测波长 /nm 214 
进样量 /μL 5 
A.10.5  分析步骤  
A.10.5.1  标准溶液的制备  
A.10.5.1.1  富马酸标准 溶液的制备  
称取 50 mg富马酸标准品，精确至 0.2 mg，溶于适量水 （必要时加入少量氢氧化钠溶液 ） ，转移
至50 mL容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度 。 
移取上述溶液 1 mL±0.02 mL，置于 50 mL容量瓶中，用磷酸溶液稀释至刻度 ，摇匀，经0.45 μm
滤膜过滤 ，再经超声波脱气处理 。 
A.10.5.1.2  马来酸标准 溶液的制备  
称取 50 mg马来酸标准品，精确至 0.2 mg，溶于适量水 （必要时加入少量氢氧化钠溶液 ） ，转移
至250 mL容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度 。 
移取上述溶液 1 mL±0.02 mL，置于 100 mL容量瓶中，用磷酸溶液稀释至刻度 ，摇匀，经0.45 μm
滤膜过滤 ，再经超声波脱气处理 。 
A.10.5.2  试样溶液的制备  
称取 0.2 g试样，精确至 0.000  2 g，置于 50 mL容量瓶中，用磷酸溶液 稀释至刻度 ，摇匀，经0.45 
μm滤膜过滤 ，再经超声波脱气处理 。 
A.10.5.3  测定 
在A.10.4参考色谱条件下 ，分别对试样溶液、标准溶液进行色谱分析 。记录试样溶液色谱图中 待
测物质的峰面积 A1和标准溶液色谱图中 富马酸或马来酸的峰面积 A2。 
A.10.6  结果计算  GB 13737 —201x 
8 富马酸或马来酸的质量分数 w2，按公式 (A.3)计算：  
%100
3 22 1
2 mAmAw ……………………… ………………… …… (A.3) 
式中：  
A1 ——  试样溶液色谱图中 待测物质的峰面积 。 
m2 ——  标准溶液中富马酸或马来酸的进样量 ，单位为微克 (μg)。 
A2 ——  标准溶液色谱图中 富马酸或马来酸的峰面积 。 
m3 ——  试样的进样量 ，单位为微克 (μg)。 
A.11  重金属(以Pb计)的测定 
A.11.1  方法提要  
    在弱酸性 （pH为3～4）条件下，试样中的重金属离子与硫化氢作用 ，生成棕黑色 ，与同法处理
的铅标准溶液比较 ，做限量试验 。 
A.11.2  试剂和材料  
A.11.2.1   氨水溶液 ：2+3。 
A.11.2.2  乙酸溶液 ：1+19。 
A.11.2.3   硫化钠溶液 ：称取 5 g硫化钠，精确至 0.01 g，用10 mL水及 30 mL甘油的混合液溶解 ，
置于棕色瓶中 。配制三个月内有效 。 
A.11.2.4   铅（Pb）标准溶液 ：0.01 mg/mL。临用前用水将 0.1 mg/mL的铅（Pb）标准溶液稀释而成 。 
A.11.2.5   酚酞指示液：10 g/L。 
A.11.3  分析步骤  
A.11.3.1  试样溶液的制备  
称取 1 g试样，精确至 0.01 g，置于 50 mL比色管中 ，加入 25 mL水溶解，加1 滴酚酞指示 液，
滴加氨水溶液至溶液呈微红色 ，再加 2 mL乙酸溶液 ，摇匀，作为试样溶液。 
A.11.3.2  测定 
取另一只 50 mL比色管，加入 1 mL±0.02 mL铅（Pb）标准溶液 ，再加入 2 mL乙酸及水至 25 mL，
摇匀，作为比较溶液 。 
在两比色管中各加入 2 滴硫化钠溶液 ，并加水至 50 mL刻度，混匀，于暗处放置 5 min后，在无
阳光直射情况下 ，在白色背景下轴向及侧向观察 ，试样溶液的颜色不得深于比较溶液的颜色 。 
A.12  砷(以As计)的测定 
A.12.1  试剂和材料  
A.12.1.1  氨水溶液 ：1+4。 
A.12.1.2  砷（As）标准溶液 ：0.001 mg/mL。临用前用水将 0.1 mg/mL的砷（As）标准溶液稀释而
成。 
A.12.1.3  溴酚蓝指示液 ：0.4 g/L。 
A.12.2  分析步骤  
    称取 1.0 g试样，精确至 0.01 g，加入 5 mL水溶解，加入 1 滴溴酚蓝指示液 ，再滴加氨水溶液中GB 13737 —201x 
9 和至溶液呈紫色 ，摇匀。量取 2 mL±0.02 mL砷（As）标准溶液 （相当于 2.0 μg As）制备限量标准 溶
液，与试样同时同样处理 。其他按 GB/T 5009.76 -2003砷斑法的规定进行 。 
A.13  铅(Pb)的测定 
A.13.1  原子吸收光谱法  
试样处理按 GB/T 5009.75 -2003中5.2.2干法消解进行 。其他按 GB 5009.12 -2010原子吸收光谱法
的规定进行 。 
A.13.2  比色法（仲裁法） 
A.13.2.1  试剂和材料  
A.13.2.1.1  硝酸溶液：1→100。 
A.13.2.1.2  铅（Pb）标准溶液 ：5 μg /mL。临用前用水将 0.1 mg/mL的铅（Pb）标准溶液稀释而成 。 
A.13.2.2  分析步骤  
试样处理按 GB/T 5009.75 -2003中5.2.2干法消解进行 。测定时量取 （25±0.02)  mL试样溶液 （相
当于 2.5 g试样）及（1±0.02)  mL铅（Pb）标准溶液 （相当于 5 μgPb），分别置于 125 mL分液漏斗
中，铅（Pb）标准溶液中加硝酸 溶液至25 mL。其他按 GB/T 5009.75 -2003的规定进行 。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 GB 13737 —201x 
10 附  录  B 
（资料性附录） 
富马酸和马来酸 含量测定典型高效液相色谱图 和相对保留时间  
B.1  富马酸和马来酸 含量测定典型 高效液相色谱图 。 
富马酸和马来酸含量测定 典型高效液相色图见图 B.1。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
1、4、5、8、9——未知峰； 
2——L-苹果酸； 
3——马来酸；  
6——丁二酸； 
7——富马酸。 
图B.1   富马酸和马来酸 含量测定典型高效液相色谱图  
B.2  各组分的相对保留时间  
各组分的相对保留时间 见表B.1。 
表B.1   各组分的相对保留时间  
峰序  组分名称  相对保留时间  
1、4、5、8、9 未知峰  — 
2 L-苹果酸  1 
3 马来酸  1.40 
6 丁二酸  1.70 
7 富马酸  1.80