식품의약품안전처 공고제2017-306호
- 2 -식품의약품안전처 공고제2017-306호
「건강기능식품의 기준및규격」(식품의약품안전처고시 제2016-143호,
2016.12.21.)을일부개정함에있어국민에게미리알려의견을수렴하고자그
취지,개정이유및주요내용을「행정절차법」제46조에따라다음과같이
공고합니다.
 2017년8월24일
 식품의약품안전처장
「건강기능식품의 기준및규격」일부개정고시(안)행정예고
1.개정이유
영양소원료확대를위해식품및식품첨가물로규격이설정되지않은
원료에대한규격적용방안을신설함
영양성분기준치개정에따라비타민D와크롬의일일섭취량을개정하고,
엽산과철의원료를추가하며,타고시등과용어를통일하여일관성을제고
하고자함
감마리놀렌산함유유지의섭취시주의사항적용을명확하게하고,
건강기능식품의기준및규격
의시험법을효율적으로개정하여영업자및
관계공무원의이해를도모하고자함- 3 -2.주요내용
가.식품및식품첨가물로규격이설정되지않은원료의규격적용
1)영양소원료중식품및식품첨가물로규격이정하여지지않는경우
주요외국의규격을적용할수있도록개정
나.영양소의일일섭취량개정
1)‘15년11월한국인영양소섭취기준개정에따라영양소기준치현행화
2)비타민D,크롬의최소함량기준개정
3)[별표2]영양소기준치및[별표3]한국인영양섭취기준현행화
4)‘영양소’를‘영양성분’으로용어통일하여타고시등과일관성제고
다.영양소의원료추가
1)엽산의원료로메틸테트라히드로엽산글루코사민 ((6S)-5-Methyltetrahydrofolic
acid,GlucosamingSalt))추가
2)철의원료로구연산제일철나트륨 (Sodiumferrouscitrate)추가
라.감마리놀렌산함유유지의섭취시주의사항적용
1)감마리놀렌산함유유지의기능성중면역과민반응에 의한피부상태
개선에도움을줄수있음에한하여섭취시주의사항적용
마.시험법개정- 4 -1)비타민E,요오드,베타글루칸,계피산,카테킨,총플라보노이드,대두
이소플라본,총폴리페놀,깅콜릭산,히알루론산,알파에스1카제인,
글루코실세라미드의 시험법개선
3.의견제출
「건강기능식품의 기준및규격」일부개정고시(안)에대하여의견이
있는단체또는개인은2017년10월23일까지다음사항을기재한의견서를
식품의약품안전처장 (우편번호:363-700,주소:충청북도청주시흥덕구오송읍
오송생명2로187오송보건의료행정타운 식품의약품안전처 ,참조:식품기준과,
(전화)043-719-2439,(팩스)043-719-2400에게제출하여주시기바랍니다.
가.예고사항에대한항목별의견(찬․반여부와그이유)
나.성명(단체의경우단체명과그대표자의성명),주소및전화번호
다.기타참고사항- 5 -식품의약품안전처 고시제2017-000호
건강기능식품에관한법률
제14조및제15조에따른
건강기능식품의
기준및규격
(식품의약품안전처 고시제2016-143호,2016.12.21.)을다음과
같이개정고시합니다.
2017년월일
식품의약품안전처장
건강기능식품의 기준및규격일부개정고시(안)
건강기능식품의기준및규격일부를다음과같이개정한다.
제1,3,2),(1)중“영양소”를“영양성분”으로한다.
제2,1,2)의“영양소”를“영양성분”으로한다.
제2,1,3),(2),(라)중“영양소”를“영양성분”으로한다.
제2,2,4)중“영양소”를“영양성분”으로한다.
제2,2,5),(2)중“영양소”를“영양성분”으로한다.- 6 -제2,3,5)중“영양소”를“영양성분”으로하고,“영양소기준치”를“영양성
분기준치”로한다.
제2,3,[표1]의2중“영양소”를“영양성분”으로한다.
제3,1.“영양소”를“영양성분”으로한다.
제3,1,3)중“영양소기준치의”를“영양성분기준치의 ”로한다.
제3,1,5)중“영양소기준치의”를“영양성분기준치의 ”로하고,“영양소”
를“영양성분”으로한다.
제3,1중“7)6)의규정에도불구하고,이공전에서정하는원료의목록
에는제시되어있으나식품또는식품첨가물의기준및규격에서기준과
규격이정하여지지않은원료에대하여는식품의약품안전처장은 국제식품
규격위원회(CodexAlimentariusCommission,CAC)규정등주요선진외
국의기준및규격을적용할수있다.”를신설한다.
제3,1-3,3)(2)를다음과같이한다.
(2)일일섭취량:3～10ug
제3,1-11,1)(1)중“(나)식품원료를사용하여엽산을보충할수있도록- 7 -제조·가공한것”을“(나)메틸테트라히드로엽산글루코사민 ((6S)-5-Methyltetrahydrofolic
acid,GlucosamingSalt))”으로하고,(다)를다음과같이신설한다.
(다)식품원료를사용하여철을보충할수있도록제조·가공한것
제3,1-17,1)(1)중“(파)식품원료를사용하여철을보충할수있도록
제조·가공한것”을“(파)구연산제일철나트륨 (Sodiumferrouscitrate)”으로
하고,(하)를다음과같이신설한다.
(하)식품원료를사용하여철을보충할수있도록제조·가공한것
제3,1-25,3)(1)을다음과같이한다.
(1)일일섭취량:0.009～9mg
제3,1-26,3)(1)중“영양소”를“영양성분”으로한다.
제3,1-27,3)(1)중“영양소”를“영양성분”으로한다.
제3,1-28,3)(1)중“영양소”를“영양성분”으로한다.
제3,“[별표2]영양소기준치”를“[별표2]1일영양성분기준치”로하고
다음과같이한다.- 8 -영양성분 기준치 영양성분 기준치 영양성분 기준치
탄수화물 (g) 324 크롬(㎍) 30 몰리브덴 (㎍) 25
당류(g) 100 칼슘(㎎) 700 비타민 B12(㎍) 2.4
식이섬유 (g) 25 철분(㎎) 12 비오틴 (㎍) 30
단백질 (g) 55 비타민 D(㎍) 10 판토텐산 (㎎) 5
지방(g) 54 비타민 E(㎎α-TE) 11 인(㎎) 700
포화지방 (g) 15 비타민 K(㎍) 70 요오드 (㎍) 150
콜레스테롤 (㎎) 300 비타민 B1(㎎) 1.2 마그네슘 (㎎) 315
나트륨 (㎎) 2,000 비타민 B2(㎎) 1.4 아연(㎎) 8.5
칼륨(㎎) 3,500 나이아신 (㎎ NE) 15 셀렌(㎍) 55
비타민 A(㎍ RE) 700 비타민 B6(㎎) 1.5 구리(㎎) 0.8
비타민 C(㎎) 100 엽산(㎍) 400 망간(㎎) 3.0- 9 -제3,“[별표3]”을다음과같이한다.
 [별표 3]한국인 영양섭취기준 
연     령탄 수 화 물
(g)지 방
(g)n-6계 
지 방 산
(g)n-3계 
지 방 산
(g)단 백 질
(g)수 분(m L)식 이 섬 유
(g)비 타 민A
(μg RE)비 타 민D
(μg)비 타 민E
(m g α-T E)비 타 민K
(μg)비 타 민C
(m g)티 아 민
(m g)리 보 플 라 민
(m g)니 아 신
(m g N E)비 타 민B6
(m g)엽 산
(μg D FE)비 타 민B12
(㎍)
권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량
(총 수 분)권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량
영 아  0～5(개 월)
     6～1160
9025
252.0
4.50.3
0.8159.5 700
800350
4505
53
44
735
450.2
0.30.3
0.42
30.1
0.365
800.3
0.5
유 아  1～2(세)
     3～515
201,100
1,50010
15300
3505
55
625
3035
400.5
0.50.5
0.66
70.6
0.7150
1800.9
1.1
남 자  6～8(세)
     9～11
     12～14
     15～18
     19～29
     30～49
     50～64
     65～74
     75 이 상30
40
55
65
65
60
60
55
551,800
2,100
2,300
2,600
2,600
2,500
2,200
2,100
2,10020
20
25
25
25
25
25
25
25450
600
750
850
800
750
750
700
7005
5
10
10
10
10
10
15
157
9
10
11
12
12
12
12
1245
55
70
80
75
75
75
75
7555
70
90
105
100
100
100
100
1000.7
0.9
1.1
1.3
1.2
1.2
1.2
1.2
1.20.9
1.2
1.5
1.7
1.5
1.5
1.5
1.5
1.59
12
15
17
16
16
16
16
160.9
1.1
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5220
300
360
400
400
400
400
400
4001.3
1.7
2.3
2.7
2.4
2.4
2.4
2.4
2.4
여 자  6～8(세)
     9～11
     12～14
     15～18
     19～29
     30～49
     50～64
     65～74
     75이 상25
40
50
50
55
50
50
45
451,700
1,900
2,000
2,000
2,100
2,000
1,900
1,800
1,80020
20
20
20
20
20
20
20
20400
550
650
600
650
650
600
550
5505
5
10
10
10
10
10
15
157
9
10
11
12
12
12
12
1245
55
65
65
65
65
65
65
6560
80
100
95
100
100
100
100
1000.7
0.9
1.1
1.2
1.1
1.1
1.1
1.1
1.10.8
1.0
1.2
1.2
1.2
1.2
1.2
1.2
1.29
12
15
14
14
14
14
14
140.9
1.1
1.4
1.4
1.4
1.4
1.4
1.4
1.4220
300
360
400
400
400
400
400
4001.3
1.7
2.3
2.4
2.4
2.4
2.4
2.4
2.4
임 신 부+ 15/
+ 30+ 200 + 5+ 70 + 0 + 0 + 0+ 10 + 0.4 + 0.4 + 4 + 0.8 + 220 + 0.2
수 유 부 + 25 + 700 + 5+ 49
0+ 0 + 3 + 0+ 40 + 0.4 + 0.5 + 3 + 0.8 + 150 + 0.4
〔사단법인 〕 보건복지부 , 한국영양학회 : 한국인 영양소 섭취기준 (2015)- 10 -연     령판 토 텐 산
(m g)비 오 틴
(μg)칼 슘
(m g)인
(m g)나 트 륨
(g)염 소
(g)칼 륨
(g)마 그 네 슘
(m g)철
(m g)아 연
(m g)구 리
(μg)불 소
(m g)망 간
(m g)요 오 드
(μg)셀 레 늄
(μg)몰 리 브 덴
(μg)크 롬
(μg)
권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량
영 아  0～5(개 월)
     6～111.7
1.95
7210
300100
3000.12
0.370.18
0.560.4
0.730
5560.3
32 240
3100.01
0.50.01
0.8130
1709
110.2
5.0
유 아  1～2(세)
     3～52
29
11500
600450
5500.9
1.01.3
1.52.0
2.380
1006
63
4280
3200.6
0.81.5
2.080
9023
2512
12
남 자  6～8(세)
     9～11
     12～14
     15～18
     19～29
     30～49
     50～64
     65～74
     75 이 상3
4
5
5
5
5
5
5
515
20
25
30
30
30
30
30
30700
800
1,000
900
800
800
750
700
700600
1,200
1,200
1,200
700
700
700
700
7001.2
1.4
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.3
1.11.9
2.1
2.3
2.3
2.3
2.3
2.3
2.0
1.72.6
3.0
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5160
230
320
400
350
370
370
370
3709
10
14
14
10
10
10
9
96
8
8
10
10
10
9
9
9440
580
740
840
800
800
800
800
8001.0
2.0
2.5
3.0
3.5
3.0
3.0
3.0
3.02.5
3.0
4.0
4.0
4.0
4.0
4.0
4.0
4.0100
110
130
130
150
150
150
150
15035
45
60
65
60
60
60
60
6030
25
25
25
2520
25
35
40
35
35
35
35
35
여 자  6～8(세)
     9～11
     12～14
     15～18
     19～29
     30～49
     50～64
     65～74
     75이 상3
4
5
5
5
5
5
5
515
20
25
30
30
30
30
30
30700
800
900
800
700
700
800
800
800550
1,200
1,200
1,200
700
700
700
700
7001.2
1.4
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.3
1.11.9
2.1
2.3
2.3
2.3
2.3
2.3
2.0
1.72.6
3.0
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5150
210
290
340
280
280
280
280
2808
10
16
14
14
14
8
8
75
8
8
9
8
8
7
7
7440
580
740
840
800
800
800
800
8001.0
2.0
2.5
2.5
3.0
2.5
2.5
2.5
2.52.5
3.0
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5100
110
130
130
150
150
150
150
15035
45
60
65
60
60
60
60
6025
25
25
25
2515
20
25
25
25
25
25
25
25
임 신 부 + 1 + 0+ 0 + 0 + 1.5 + 2.3 + 0+ 40 + 10 + 2.5 + 130 + 0 + 0+ 90 + 4 + 5
수 유 부 + 2 + 5+ 0 + 0 + 1.5 + 2.3 + 0.4 + 0 + 0 + 5.0 + 480 + 0 + 0+ 190 + 10 + 20
* 권장섭취량 : 1일 연령별로 권장되는 영양소 섭취량으로서 평균 필요량을 근거로 하여 산출
* 충분섭취량 : 권장섭취량을 산출할 수 없는 경우 역학조사 결과를 토대로 건강인의 영양소 섭취수준을 기준으로 산출
* 임신부 단백질 권장섭취량 : 임신 2, 3분기별 부가량- 11 -제3,2,2-17,3)(3)을다음과같이한다.
(3)섭취시주의사항
영·유아·어린이는섭취전의사와상담한후섭취할것
(면역과민반응에의한피부상태개선에도움을줄수있음에한함)
제4,3,3-4,3-4-1,5,5.1,5.1.1중“베타카로틴”을“토코페롤”으로한다.
제4,3,3-17,“3-17요오드”를“3-173-17-1요오드(제1법)”으로하고,“3
-17-2요오드(제2법)”을다음과같이신설한다.
3-17-2요오드(제2법)
1.시험방법의요약
본시험법은시료중에존재하는요오드를마이크로웨이브분해장치에넣
고테트라메틸암모늄하이드록사이드(TMAH)용액으로분해하여유도결합플
라즈마/질량분석기로정량하는방법이다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.150mL용폴리프로필렌부피플라스크- 12 -2.2분석장비
2.2.1유도결합플라즈마/질량분석기
2.2.2마이크로웨이브분해장치
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1요오드화칼륨(Potassiumiodide)
분자식:KI,분자량:166.0,CASNo.:7681-11-0
3.2일반시약
3.2.125%테트라메틸암모늄하이드록사이드(Tetramethylammonium
hydroxide,TMAH)
3.2.2증류수
4.시험과정
4.1시약조제
4.1.15%TMAH:25%TMAH100mL을취하여증류수로500mL로
한다.
4.2표준용액조제
4.2.1내부표준용액:시판Te표준용액(1,000 μg/mL)1mL를취하여
증류수로500mL로한다(Te2μg/mL함유).
4.2.2요오드표준용액:요오드화칼륨0.1308g을취하고증류수를가하여100mL(1,000
μg/mL)로한다.다시증류수로희석하여1μg/mL으로한다.이용액일정량
을취하여각각50mL용폴리프로필렌부피플라스크에넣고- 13 -0.5%TMAH용액으로정용한다.이들용액10mL에내부표준용액
100μL를가한것을표준용액으로한다.
4.3시험용액조제
4.3.1균질화된시료약0.5g을마이크로웨이브분해장치에넣고5%
TMAH용액을적절히가하여90℃,1시간동안분해한다.
4.3.2분해액을방냉시킨후50mL용폴리프로필렌부피플라스크에넣고
증류수를가하여정용한다.
4.3.3검량선범위에들어가게0.5%TMAH로적절히희석한다.
4.3.4이액10mL를취하여내부표준용액100μL를가한것을시험
용액으로한다.
5.분석및계산
5.1기기분석
    항목 조건
기기 ICP-MS
시료도입유속 1.0mL/min
RF파워 1.1kw
플라즈마기체 아르곤(15L/min)
이동상기체 아르곤(0.7L/min)
메이크업기체 아르곤(0.29L/min)
m/z요오드(I)127
내부표준물질(Te):128
세척용매 0.5%TMAH표.ICP-MS측정조건(예)
5.2계산- 14 -5.2.1요오드함량(ng/g)=C×(a×b)/S
C:검량선에서구한시험용액중요오드농도(ng/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
제4,3,3-25,“3-25베타글루칸”을“3-25베타글루칸3-25-1베타글루칸
(제1법영지버섯자실체추출물)”로하고,다음과같이한다.
3-25베타글루칸
3-25-1베타글루칸(제1법영지버섯자실체추출물 )
1.시험방법의요약
본시험법은시료를효소처리하여베타글루칸만을침전시킨후글루코오
스형태로분해하고발색시켜분광광도계로정량하는방법으로영지버섯자실
체추출물에적용하며최대흡수파장인470nm에서분석한다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1삼각플라스크
2.1.2pH측정기
2.1.3항온진탕기- 15 -2.1.4원심분리기
2.1.5부피플라스크(50mL)
2.2분석장비
2.2.1분광광도계
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1글루코오스(D-(+)-glucose)
분자식:C6H12O6,분자량:180.16,CASNo.:50-99-7
3.2일반시약
3.2.1에탄올(Ethanol)
3.2.2 α-아밀라아제(α-amylase,SigmaA3306또는Termamyl300L,Novo
361-6282)
3.2.3셀룰라아제(Cellulase,SigmaC8546)
3.2.4프로테아제(Protease,SigmaP3910)
3.2.5아밀로글루코시다제(Amyloglucosidase, SigmaA9913)
3.2.60.1N염산(Hydrochloricacid)- 16 -3.2.7황산(Sulfuricacid)
3.2.8페놀(Phenol)
3.2.90.1N수산화나트륨(Sodiumhydroxide)
3.3시액의조제
3.3.15%페놀용액
페놀5g을취하여증류수를가해100mL로한다.
4.시험과정
4.1표준용액의조제
4.1.1D-글루코오스표준물질0.1g을100mL부피플라스크에넣는다.
4.1.2증류수를가하여완전히녹이고100mL로한후희석하여표준
원액으로한다.
4.1.3위의용액을증류수로적절히희석하여표준용액으로한다.
4.2시험용액의조제(전처리과정)
4.2.1베타글루칸으로서 100mg의시료를삼각플라스크에취한다(지방이
10%이상인경우탈지하고,당을많이함유한경우85%에탄올용
액을이용하여베타글루칸20mg당10mL씩으로세척한다).
4.2.2증류수10mL를가한다.
4.2.3여기에아밀라아제(20,000∼60,000U/mL)0.1mL을가한다.
4.2.40.1N수산화나트륨용액을이용하여pH6.9로한후20℃항온수조
에서2시간동안진탕하여효소분해시킨다.- 17 -4.2.5위의용액에0.1N염산용액으로pH5.0으로맞추고셀룰라아제(1,600
U/mL)를0.1mL넣고37℃항온수조에서2시간동안진탕하여효소분해
시킨다.
4.2.6위의용액에프로테아제(600∼1,300U/mL)약0.1mL을넣고
0.1N수산화나트륨용액으로pH7.5로한후37℃항온수조에서
2시간동안진탕하여효소분해시킨다.
4.2.7위의용액에아밀로글루코시다제(10,000U/mL)약0.1mL을넣
고0.1N염산용액으로pH4.8로한후60℃항온수조에서2시
간동안진탕하여효소분해시킨다.
4.2.8효소분해물[4.2.7]에95%에탄올40mL를가하여4℃에서12시간
이상침전시킨다.
4.2.9위의용액을원심분리(3,000×G,20분)하여시료의침전물을취
한다.
4.2.10시료의침전물[4.2.9]에80%에탄올50mL를가하여4℃에서1
시간동안침전시킨다.
4.2.11위의용액을원심분리(3,000×G,20분)한다.
4.2.12원심분리된침전물[4.2.11]에증류수10mL를가한후침전물을
혼합하여균질화시킨다.
4.2.13위의용액을증류수로50mL가되도록한후,이를적정농도가되
도록희석하여시험용액으로한다.
4.3시험용액의조제(발색과정)- 18 -4.3.115mL시험관에농도별표준용액과시험용액(공시험포함)으로
구분하여각각5%페놀용액1mL를넣는다.
4.3.2위의시험관에농도별표준용액[4.1]을각각1mL씩가하고,시
험용액은시험용액[4.2]0.1mL과증류수0.9mL를가한다.공시험
은증류수1mL을가한다.이용액들을10초간잘흔들어섞는다.
4.3.3위의시험관에각각황산5mL을가하여혼합한다.
4.3.4실온에서20분간반응시킨다.
5.분석및계산
5.1흡광도측정
5.1.1파장470nm에서흡광도를측정한다.
5.2계산
5.2.1베타글루칸함량(mg/g)=C×(a×b)/S×10×1/1,000×0.9
C:시험용액중의글루코오스농도(μg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
10:발색과정의희석배수
1/1,000:단위환산계수
0.9:베타글루칸전환계수(162/180)
3-25-2베타글루칸(제2법상황버섯추출물)을다음과같이신설한다.- 19 -3-25-2베타글루칸(제2법상황버섯추출물)
1.시험방법의요약
본시험법은시료에있는총글루칸에서베타글루칸외의글루칸함량을
제거하여베타글루칸의값을구한다.산분해와효소처리를하여글루코오
스형태로분해한후발색시켜분광광도계로정량하는방법으로상황버섯
추출물에적용하며최대흡수파장인470nm에서분석한다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1분석저울
2.1.2항온수조
2.1.3pH미터
2.1.4부피플라스크(100mL)
2.1.5마개있는50mL유리시험관,5mL시험관
2.1.6원심분리기
2.1.7교반기
2.1.8유리섬유여과지(WhatmanGF/A유리섬유필터또는이와동등한것)
2.2분석장비
2.2.1분광광도계
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1글루코오스(D-(+)-glucose)- 20 -분자식:C6H12O6,분자량:180.16,CASNo.:50-99-7
3.2일반시약
3.2.1수산화칼륨(Potassiumhydroxide)
3.2.2초산(Aceticacid)
3.2.3진한염산(Hydrochloricacid,37%(v/v))
3.2.4수산화나트륨(Sodiumhydroxide)
3.2.5버섯효모베타글루칸 분석키트(MushroomandYeastBeta-glucan
assayprocedureKit,Megazyme,K-YBGL,Ireland)
[키트의구성]
①Bottle1:1,3-베타글루카나아제(1,000U/mL),베타글루코시다아제(20U/mL)혼합액
②Bottle2:Amyloglucosidase(1,630 U/mL),Invertase(500U/mL),50%글리세린혼합액
③Bottle3:포도당반응완충액
④Bottle4:포도당측정반응액(글루코오스옥시다아제12,000U/L이상,
페록시다아제650U/L이상,4-아미노안티피린0.4mM)
3.2.6증류수
3.3시액의조제- 21 -3.3.14M수산화나트륨용액
수산화나트륨80.0g을증류수로용해하여500mL로정용한다.
3.3.2200mM초산완충액(Acetatebuffer,pH5.0)
초산11.6mL를900mL증류수에용해한후4M수산화나트륨용
액으로pH를5.0으로맞추어1L로정용한다.
3.3.31.2M초산완충액(Acetatebuffer,pH3.8)
초산69.6mL를800mL증류수에용해한후4M수산화나트륨용
액으로pH를3.8로맞추어1L로정용한다.
3.3.42M수산화칼륨용액
수산화칼륨112g을증류수로용해하여1L로정용한다.
3.3.5베타글루칸효소혼합액
K-YBGL의Bottle1에200mM초산완충액(pH5.0)8mL을첨가
한다.1mL씩나누어–20℃에서보관한다.
3.3.6알파글루칸효소혼합액
K-YBGL에들어있는Bottle2를그대로사용한다.
3.3.7발색시약(GOPOD)
K-YBGL에들어있는Bottle3전량을1L부피플라스크에넣은후
증류수로희석하고1L로정용한다.이용액소량으로Bottle4전량
을녹이고다시Bottle3가녹아있는이전1L부피플라스크에넣어
충분히섞은후사용한다.40mL씩나누어–20℃에서보관한다.
4.시험과정- 22 -4.1표준용액의제조
4.1.1D-글루코오스표준물질500mg을50mL부피플라스크에넣는다
4.1.2증류수를가하여완전히녹인후표선까지정용하여표준원액으로
한다.
4.1.3표준원액을증류수로적절히희석하여표준용액으로사용한다.
4.2시험용액의제조
4.2.1총글루칸측정
4.2.1.1시료는0.5mm의체를통과할수있도록분쇄한다
4.2.1.2마개가있는50mL유리시험관에베타글루칸으로서 10mg에
해당하는시료를칭량한다.
4.2.1.3진한염산을각시험관에1.5mL씩가한후덩어리가생기지않도록
강하게교반한후40℃항온수조에서45분간반응시킨다.
4.2.1.4각시험관에증류수10mL를첨가하고강하게교반한다.
4.2.1.5시험관뚜껑을완전히닫지않은상태로100℃항온수조에서5분간
방치한후뚜껑을완전히닫아2시간반응시킨다.
4.2.1.6반응후실온까지냉각하여2M수산화칼륨용액을10mL가한다.
4.2.1.7200mM초산완충액으로시험관의잔여물을남기지않고100mL
부피플라스크로옮긴후표선까지정용한다.
4.2.1.8유리섬유여과지(WhatmanGF/A)를이용하여여과한것을시험
용액으로한다.
4.2.1.9시험용액0.1mL을새로운5mL시험관에옮긴후베타글루칸- 23 -효소혼합액0.1mL을각시험관에가하여40℃에서30분간반응
시킨다(총글루칸측정효소공시험시험관에200mM초산완충액0.1
mL와베타글루칸효소혼합액0.1mL첨가하고,발색시약공시험시험관에
200mM초산완충액0.2mL를가한후다음단계부터함께반응시킨다).
4.2.1.10반응후발색시약(GOPOD)3mL을가하여실온에서10분간반응
시킨다.
4.2.1.11증류수를대조액으로분광광도계파장510nm에서흡광도를
측정한다.
4.2.2베타글루칸을제외한글루칸측정
4.2.2.1시험관에베타글루칸으로서 10mg에해당하는시료를칭량한
다(효소공시험을동시에진행한다).
4.2.2.22M수산화칼륨용액을각시험관에2mL씩가한후덩어리가생기지
않도록강하게교반한다(덩어리가생겨제거되지않을경우실온에
20분간방치한후강하게교반한다).
4.2.2.31.2M초산완충액8mL을가하여강하게교반한후알파글루칸효
소혼합액0.2mL을가하여40℃항온수조에서30분간반응시킨다.
4.2.2.4반응액을원심분리(1,500×G,10분)하여시험용액으로한다.
4.2.2.5시험용액0.1mL을새로운시험관에옮긴후발색시약(GOPOD)
3mL을각시험관에가하여실온에서10분간반응시킨다.
4.2.2.6증류수를대조액으로분광광도계파장510nm에서흡광도를측
정한다.- 24 -5.분석및계산
5.1흡광도측정
5.1.1증류수를대조액으로하여파장510nm에서흡광도를측정한다.
5.2계산
5.2.1농도별표준용액의흡광도에서발색시약공시험흡광도를뺀값을
검량선작성에이용한다.
5.2.3.2총글루칸함량(mg/g)=C×(a×b)/S×0.9
5.2.3.3베타글루칸을제외한글루칸의함량(mg/g)=C×(a×b)/S×0.9
5.2.3.4베타글루칸함량(mg/g)
=총글루칸함량(mg/g)-베타글루칸을제외한글루칸의함량(mg/g)
C:시험용액의농도(μg/mL)
a：시험용액의전량(mL)
b：희석배수
S：시료중량（mg）
0.9：베타글루칸전환계수(162/180)
제4,3,3-47,1중“280nm”를“275nm”로한다.
제4,3,3-47,2.2.2.4“옥타데실실릴화한칼럼(안지름4.6mm,길이250
mm,octadecylsilica)또는이와동등한것”을“YMC-triartC18(안지름4.6
mm,길이250mm,충전입자크기5μm)컬럼또는이와동등한것”로한다.- 25 -제4,3,3-47,2.2.3을삭제한다.
제4,3,3-47,4,4.1,4.1.1중“4가지표준물질10mg을각각10mL”를“표
준물질(EGC,EGCG,EC,ECG)각각50mg씩50mL”로한다.
제4,3,3-47,4,4.1,4.1.3“적당량희석하여검량선작성에사용한다.”를
“50%메탄올로적당량희석하여표준용액으로사용한다(표준용액은사용시
조제한다).”로한다.
제4,3,3-47,4,4.2,4.2.1중“합계로서”를“합으로서”로하고,“메탄올을
가하여”를“50%메탄올을가한후20분간”으로하며,후단에“필요한경우
원심분리한다”를신설한다.
제4,3,3-47,4,4.2,4.2.2중“메탄올을”을“실온까지식힌후50%메탄
올을”로하고,후단에“되도록시험용액은조제후즉시기기분석한다”를
신설한다.
제4,3,3-47,5,5.1,표1.과표2를다음과같이한다.- 26 -항목 조건
주입량 10μL
검출기파장 275nm
칼럼온도 35℃
이동상A용액-0.1%인산용액
B용액-0.1%초산이함유된아세토니트릴
유속 1.0mL/분표1.고속액체크로마토그래프 조건(예)
시간(분)A용액(%)B용액(%)
090 10
290 10
385 15
10 80 20
12 10 90
16 10 90
17 90 10
20 90 10표2.이동상조건(예)
제4,3,3-49,4,4.3,4.3.1중“대조액과시험액용으로”를“공시험용과시
험용으로”로한다.
제4,3,3-49,5,5.1,“5.1결과분석(예)”를“5.1결과분석”으로하고,5.1.
2중“적용시킨다”를“적용시켜시료중총플라보노이드의 함량을구한
다”로한다.
제4,3,3-50,3-50-3을다음과같이신설한다.- 27 -3-50-3계피산(Cinnamicacid)확인(제2법)
1.시험방법의요약
본시험법은시료중계피산을20%아세토니트릴에용해한후초음파추
출하고,액체크로마토그래프/질량검출기/질량검출기를이용하여정성분
석한다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1부피플라스크(50mL)
2.1.2여과용멤브레인필터
2.1.3용매용일회용실린지
2.1.4초음파진탕기
2.2분석장비
2.2.1고속액체크로마토그래프
2.2.2질량검출기(MassSelectiveDetector)
2.2.3옥타데실실릴화한칼럼(안지름2.1mm,길이100mm,충전제
octadecylsilica,충전입자크기1.7μm)또는이와동등한것
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1계피산(Cinnamicacid,trans-3-Phenylacrylicacid)
분자식:C9H8O2,분자량:148.16,CASNo.:140-10-3- 28 -
3.2일반시약
3.2.1아세토니트릴(Acetonitrile,HPLCgrade)
3.2.2개미산(Formicacid)
4.시험과정
4.1표준용액의조제
4.1.1표준물질계피산10mg을정밀하게50mL부피플라스크에취한후
20%아세토니트릴을가하여정용한후이를표준원액으로한다.
4.1.2위의표준원액을20%아세토니트릴로적절히희석하여표준용액으로
사용한다.(10∼500μg/L)
4.2시험용액의조제
4.2.1시료약2g을50mL부피플라스크에정밀히취하여20%아세
토니트릴로정용한다.
4.2.2위의용액을30분간초음파추출한다.
4.2.3위의용액을20%아세토니트릴로적절히희석한후0.45μm멤브레인
필터로여과한것을시험용액으로한다.
5.분석및계산
5.1기기분석- 29 -5.1.1고속액체크로마토그래프/질량검출기/질량검출기
항목 조건
이동상A:0.1%개미산용액
B:0.1%개미산을함유한아세토니트릴
칼럼온도 40℃
유속 0.3mL/분
주입량 2μL
이온화 ESI,Positive
Capillaryvoltage 3.0kV
Conevoltage 26V
Desolvation
temperature350℃
Monitorions(m/z) 149(precursorion),103,77(production)표1.고속액체크로마토그래프 /질량검출기/질량검출기조건(예)
시간(분)이동상(%)
A B
0 80 20
0.1 80 20
3 5 95
4 5 95
4.1 80 20
6 80 20표2.고속액체크로마토그래프 /질량검출기/질량검출기이동상조건(예)
5.2정성확인
5.2.1시험한크로마토그램상의피크는표준용액피크의머무름시간과
선구이온(precursorion)및생성이온(production)으로계피산을
확인한다.
제4,3,3-54,“3-54대두이소플라본”을“3-54이소플라본”으로하고,“3-
54-1대두이소플라본(제1법)”을“3-54-1이소플라본(제1법)”으로하며,다- 30 -음과같이한다.
3-54이소플라본
3-54-1이소플라본(제1법)
1.시험방법의요약
본시험법은80%메탄올을이용하여시료중이소플라본을추출하고액
체크로마토그래프/자외부흡광광도검출기(최대흡수파장260nm)또는액
체크로마토그래프/질량분석기/질량분석기를이용하여이소플라본중배
당체및비배당체를정량분석한다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1부피플라스크(10mL,50mL)
2.1.2여과용멤브레인필터
2.2분석장비
2.2.1고속액체크로마토그래프/자외부흡광광도검출기
2.2.1.1고속액체크로마토그래프
2.2.1.2자외부흡광광도검출기(UVDetector)
2.2.1.3옥타데실실릴화한칼럼(안지름4.6mm,길이250mm,충전제
Octadecylsilica,충전입자크기5μm)또는이와동등한것- 31 -2.2.2고속액체크로마토그래프/질량검출기/질량검출기
2.2.2.1고속액체크로마토그래프
2.2.2.2질량검출기(MassSelectiveDetector)
2.2.2.3옥타데실실릴화한칼럼(안지름2.1mm,길이100mm,충전제
Octadecylsilica,충전입자크기1.7μm)또는이와동등한것
2.3분석장비의준비
이동상을이용하여용매를분당1.0mL로충분한시간동안흘려안정화
시킨다.
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1다이드진(Daidzin)
분자식:C21H20O9,분자량:416.38,CASNo.:552-66-9
HOO OO
HO OH
OHOH
O
3.1.2.글리시틴(Glycitin)
분자식:C22H22O10,분자량:446.41,CASNo.:40246-10-4
HOO OO
HO OH
OHOH
OHO
3.1.3.제니스틴(Genistin)- 32 -분자식:C21H20O10,분자량:432.38,CASNo.:529-59-9
HOO OO
HO OH
OHOH
OOH
3.1.4.다이드제인(Daidzein)
분자식:C15H10O4,분자량:254.23,CASNo.:486-66-8
3.1.5.제니스테인(Genistein)
분자식:C15H10O5,분자량:270.24,CASNo.:446-72-0
3.1.6.글리시테인(Glycitein)
분자식:C16H12O5,분자량:284.26,CASNo.:40957-83-3
3.2일반시약
3.2.1메탄올(Methanol,HPLCgrade)
3.2.2아세토니트릴(Acetonitrile,HPLCgrade)
3.2.3초산(Aceticacid)
3.2.4디메틸설폭시드(Dimethylsulfoxide)
3.2.5개미산(Formicacid)- 33 -4.시험과정
4.1표준용액조제
4.1.1각이소플라본(Daidzin,Genistin,Glycitin,Daidzein,Genistein,
Glycitein)표준물질50mg을정밀히측정한다.
4.1.2정밀히측정한표준물질을50mL부피플라스크에넣는다.
4.1.3배당체(Daidzin,Genistin,Glycitin)표준품은메탄올을가하여완전히
녹인후이를표준원액으로한다.
4.1.4비배당체(Daidzein,Genistein,Glycitein)표준품은Dimethylsulfoxide를
가하여완전히녹인후이를표준원액으로한다.
4.1.5위의용액을메탄올로적절히희석하여표준용액으로한다(표준
용액농도범위0.1～80μg/mL).
4.2시험용액의조제
4.2.1분말형제품
4.2.1.1균질화한시료일정량(검량선내들어갈수있도록)을50mL부피
플라스크에정밀히취하여80%메탄올로정용한다.
4.2.1.230분간초음파처리한다.
4.2.1.30.45μm의멤브레인필터로여과한것을시험용액으로한다.
4.2.2유지형제품
4.2.2.1균질화한시료일정량(검량선내들어갈수있도록)을50mL부피
플라스크에정밀히취한다.
4.2.2.2클로로포름2mL을넣어충분히분산시킨다.- 34 -4.2.2.380%메탄올로정용한후30분간초음파처리한다.
4.2.2.40.45μm의멤브레인필터로여과한것을시험용액으로한다.
5.분석및계산
5.1기기분석
표1.고속액체크로마토그래프 조건(예)
항목 조건
주입량 5μL
칼럼온도 40℃
이동상A:0.1%초산용액
B:0.1%초산을함유한메탄올
시간(분)이동상(%)
A B
080 20
1550 50
2530 70
3080 20
검출기파장 260nm
유량 1.0ml/분- 35 -표2.고속액체크로마토그래프 /질량분석기/질량분석기조건(예)
항목 조건
주입량 2μL
유량 0.3ml/분
칼럼온도 40℃
이동상A:0.1%개미산용액
B:0.1%개미산을함유한아세토니트릴
시간(분)이동상(%)
A B
095 5
5.05 95
5.595 5
6.095 5
이온화 ESI,positive
CapillaryVoltage 3.5kV
SourceTemp. 120℃
DesolvationTemp. 350℃
표3.질량분석기분석을위한이온
성분Precursorion(m/z)Production(m/z)Cone(V)
Daidzin 417 255 25
Glycitin 447 285 25
Genistin 433 271 30
Daidzein 255 199,13730
Glycitein 285 242,27050
Genistein 271 153,14925
5.2계산
5.2.1각이소플라본(비배당체)함량(mg/g)=C×(a×b)/S×1/1,000
C:시험용액중의각이소플라본(비배당체)농도(μg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수- 36 -S:시료채취량(g)
1/1,000:단위환산계수
*이소플라본배당체일경우1/1.6(0.625)전환계수적용함
제4,3,3-54,3-54-2을다음과같이한다.
3-54-2이소플라본(제2법)
1.시험방법의요약
본시험법은염기성가수분해를통해시료에존재하는이소플라본중아
세틸배당체,말로닐배당체를배당체로전환시켜함께정량할수있는방
법으로,액체크로마토그래프/자외부흡광광도검출기(최대흡수파장260nm)또는
액체크로마토그래프/질량분석기/질량분석기를이용하여정량분석한다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1부피플라스크(10mL,50mL)
2.1.2여과용멤브레인필터
2.2분석장비
2.2.1고속액체크로마토그래프/자외부흡광광도검출기
2.2.1.1고속액체크로마토그래프- 37 -2.2.1.2자외부흡광광도검출기(UVDetector)
2.2.1.3옥타데실실릴화한칼럼(안지름4.6mm,길이250mm,충전제
Octadecylsilica,충전입자크기5μm)또는이와동등한것
2.2.2고속액체크로마토그래프/질량검출기/질량검출기
2.2.2.1고속액체크로마토그래프
2.2.2.2질량검출기(MassSelectiveDetector)
2.2.2.3옥타데실실릴화한칼럼(안지름2.1mm,길이100mm,충전제
Octadecylsilica,충전입자크기1.7μm)또는이와동등한것
2.3분석장비의준비
이동상을이용하여용매를분당1.0mL로충분한시간동안흘려안정
화시킨다.
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1다이드진(Daidzin)
분자식:C21H20O9,분자량:416.38,CASNo.:552-66-9
HOO OO
HO OH
OHOH
O
3.1.2.글리시틴(Glycitin)
분자식:C22H22O10,분자량:446.41,CASNo.:40246-10-4- 38 -HOO OO
HO OH
OHOH
OHO
3.1.3.제니스틴(Genistin)
분자식:C21H20O10,분자량:432.38,CASNo.:529-59-9
HOO OO
HO OH
OHOH
OOH
3.1.4.다이드제인(Daidzein)
분자식:C15H10O4,분자량:254.23,CASNo.:486-66-8
3.1.5.제니스테인(Genistein)
분자식:C15H10O5,분자량:270.24,CASNo.:446-72-0
3.1.6.글리시테인(Glycitein)
분자식:C16H12O5,분자량:284.26,CASNo.:40957-83-3
3.2일반시약
3.2.1메탄올(Methanol,HPLCgrade)- 39 -3.2.2아세토니트릴(Acetonitrile,HPLCgrade)
3.2.3초산(Aceticacid)
3.2.4디메틸설폭시드(Dimethylsulfoxide)
3.2.5개미산(Formicacid)
3.2.6수산화나트륨(Sodiumhydroxide)
4.시험과정
4.1표준용액의조제
4.1.1각이소플라본(Daidzin,Genistin,Glycitin,Daidzein,Genistein,
Glycitein)표준물질50mg을정밀히측정한다.
4.1.2정밀히측정한표준물질을50mL부피플라스크에넣는다.
4.1.3배당체(Daidzin,Genistin,Glycitin)표준품은메탄올을가하여완
전히녹인후이를표준원액으로한다.
4.1.4비배당체(Daidzein,Genistein,Glycitein)표준품은Dimethylsulfoxide를가하여
완전히녹인후이를표준원액으로한다.
4.1.5위의용액을메탄올로적절히희석하여표준용액으로한다(표준용액
농도범위0.1～80μg/mL).
4.2시험용액의조제
4.2.1분말형제품
4.2.1.1균질화한시료일정량(검량선내들어갈수있도록)을50mL부피
플라스크에정밀히취한다.- 40 -4.2.1.280%메탄올40mL를넣은후30분간초음파추출한다.
4.2.1.32M수산화나트륨용액3mL를넣고상온에서10분간회전교
반한다.
4.2.1.4초산1mL를넣고80%메탄올을사용하여50mL로정용한
다.
4.2.1.50.45㎛멤브레인필터로여과한것을시험용액으로한다.
4.2.2유지형제품
4.2.2.1균질화한시료일정량(검량선내들어갈수있도록)을50mL부피
플라스크에정밀히취한다.
4.2.2.2클로로포름2mL을넣어충분히분산시킨다.
4.2.2.380%메탄올40mL를넣은후30분간초음파추출한다.
4.2.2.42M수산화나트륨용액3mL를넣고상온에서10분간회전교
반한다.
4.2.2.5초산1mL를넣고80%메탄올을사용하여50mL로정용한다.
4.2.2.60.45㎛멤브레인필터로여과한것을시험용액으로한다.
5.분석및계산
5.1기기분석
표1.고속액체크로마토그래프 조건(예)- 41 -항목 조건
주입량 5μL
칼럼온도 40℃
이동상A:0.1%초산용액
B:0.1%초산을함유한메탄올
시간(분)이동상(%)
A B
080 20
1550 50
2530 70
3080 20
검출기파장 260nm
유량 1.0ml/분
표2.고속액체크로마토그래프 /질량분석기/질량분석기조건(예)
항목 조건
주입량 2μL
유량 0.3ml/분
칼럼온도 40℃
이동상A:0.1%개미산용액
B:0.1%개미산을함유한아세토니트릴
시간(분)이동상(%)
A B
095 5
5.05 95
5.595 5
6.095 5
이온화 ESI,positive
CapillaryVoltage 3.5kV
SourceTemp. 120℃
DesolvationTemp. 350℃- 42 -표3.질량분석기분석을위한이온
성분Precursorion(m/z)Production(m/z)
Daidzin 417 255
Glycitin 447 285
Genistin 433 271
Daidzein 255 199,137
Glycitein 285 242,270
Genistein 271 153,149
5.2계산
5.2.1각이소플라본(비배당체)함량(mg/g)=C×(a×b)/S×1/1,000
C:시험용액중의각이소플라본(비배당체)농도(μg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
1/1,000:단위환산계수
*이소플라본배당체일경우1/1.6(0.625)전환계수적용함
제4,3,3-64를다음과같이한다.
3-64총폴리페놀
1.시험방법의요약
본시험법은시료중총폴리페놀함량을구하는방법으로시료를증류수에- 43 -용해하고초음파추출한후발색시약과반응시켜분광광도계를사용하여
파장760nm에서측정한후,비타민C함량을제외한값으로정량분석
한다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1부피플라스크(50mL)
2.1.2시험관
2.1.3용매용일회용실린지
2.1.4초음파진탕기
2.2분석장비
2.2.1자외분광광도계(UV/VisibleSpectrophotometer)
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1탄닌산(Tannicacid)
분자식:C76H52O46,분자량:1701.2,CASNo.:1401-55-4- 44 -
3.2일반시약
3.2.1폴린데니스시약(Folin-DenisReagent)
3.3시약의제조
3.3.135%탄산나트륨용액(Sodiumcarbonateanhydrous)
탄산나트륨35g을정밀히달아증류수100mL을넣고70℃에서녹
여상온에방치한후과포화된용액에Na2CO3·10H2O결정이생기면
유리솜(glasswool)으로여과한다.
4.시험과정
4.1표준용액의조제
4.1.1탄닌산10mg을정밀하게칭량하여50mL부피플라스크에취한후
증류수를가하여정용한다.
4.1.2위의표준원액을증류수로적절히희석하여표준용액으로사용한
다.
4.2.시험용액의조제- 45 -4.2.1탄닌산으로5∼10mg에상당한양을취하여50mL부피플라스크
에취한후증류수를소량가한다.
4.2.230분동안초음파추출한다.
4.2.3위의용액을증류수로50mL정용한후적절히희석하여시험용액
으로한다.
4.2.4증류수7.5mL를시험관에각각취한다.
4.2.54.2.4의시험관에각각표준용액,시험용액및증류수(공시험용)를
1mL씩취한다.
4.2.64.2.5의각시험관에Folin-Denis시약0.5mL을가한후35%탄
산나트륨1mL을넣어혼합한다.
4.2.7암소에서30분방치한후760nm에서흡광도를측정한다.
5.분석및계산
5.1결과분석
5.1.1표준물질의농도별흡광도와공시험흡광도의차를이용하여표준물질의
검량선을작성한다.
5.1.2시료의흡광도와공시험흡광도의차를이용하여정량한다.
5.1.3비타민C가총폴리페놀함량에간섭하는양을보정하기위해시료중비
타민C의함량을「건강기능식품의 기준및규격」중제4.건강
기능식품시험법3-14비타민C(제3법)에따라미리분석한다.
5.2비타민C간섭보정계수설정- 46 -5.2.1시료중비타민C가총폴리페놀함량에간섭하는양을보정하기위
해순수한비타민C를일정량(mg)(5.1.3에서분석한값과근접한
값)취한다.
5.2.24.2.1에서4.2.7까지의과정을동일하게수행한다.
5.2.3흡광도로측정한비타민C의실험값을이론값으로나누어비타민
C간섭보정계수를설정한다.
5.3계산
5.3.1총폴리페놀의함량(탄닌산으로서)(mg/g)=[C×(a×b)/S]-(D
×E/F)
C:시험용액중의탄닌산의농도(mg/mL)
a:시험용액전량(mL)
b:희석배수
S:시료무게(g)
D:5.1.3에서측정한비타민C의함량(mg/g)
E:5.2.2에따라흡광도법으로측정한비타민C의함량(mg/g)
F:5.2.1에서취한순수한비타민C의함량(mg/g)
*=비타민C간섭보정계수
제4,3,3-67을다음과같이한다.
3-67깅콜릭산(Ginkgolicacid)- 47 -1.시험방법의요약
본시험법은시료중깅콜릭산(깅콜릭산C13:0,C15:1,C17:1의합)을50%
에탄올과클로로포름을이용하여2회추출후클로로포름층을감압농축
한것을액체크로마토그래프/자외부흡광광도검출기(최대흡수파장210nm)
또는액체크로마토그래프/질량검출기/질량검출기를이용하여정량분석하
는방법이다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1부피플라스크(50mL)
2.1.2메스실린더(200mL)
2.1.3용매용일회용실린지
2.1.4여과용멤브레인필터및디스크형멤브레인필터
2.1.5액체크로마토그래피용유리병
2.1.6분액여두(100mL)
2.1.7진탕기
2.1.8감압농축기
2.2분석장비
2.2.1고속액체크로마토그래프/자외부흡광도검출기- 48 -2.2.1.1고속액체크로마토그래프
2.2.1.2자외부흡광광도검출기또는포토다이오드어레이검출기
2.2.1.3스위칭밸브
2.2.1.4C8컬럼(안지름4.6mm,길이150mm,충진입자크기5μm,전
처리컬럼)또는이와동등한것
2.2.1.5C18컬럼(안지름4.6mm,길이250mm,충진입자크기5μm,분
석컬럼)또는이와동등한것
2.2.2고속액체크로마토그래프/질량검출기/질량검출기
2.2.2.1고속액체크로마토그래프
2.2.2.2질량검출기
2.2.2.3옥타데실실릴화한칼럼(C18,안지름2.1mm,길이100mm,충
전입자크기1.7μm,충전제octadecylsilica)또는이와동등한
것
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1깅콜릭산C15:1(GinkgolicacidC15:1)
분자식:C22H34O3,분자량:346.50,CASNo.:22910-60-7- 49 -OH
OHO
H3C(H2C)4H2C
3.1.2깅콜릭산C17:1(GinkgolicacidC17:1)
분자식:C24H38O3,분자량:374.56,CASNo.:111047-30-4
OH
OHO
H3C(H2C)4H2C
3.1.3깅콜릭산C13:0(GinkgolicacidC13:0)
분자식:C20H32O3,분자량:320.47,CASNo.:202617-38-5
OH
OHO
CH2(CH2)11CH3
3.2일반시약
3.2.1메탄올(Methanol,HPLCgrade)
3.2.2클로로포름(Chloroform,HPLCgrade)
3.2.3아세토니트릴(Acetonitrile,HPLCgrade)- 50 -3.2.4에탄올(Ethanol,HPLCgrade)
3.2.5인산(Phosphoricacid)
3.2.6증류수(Distilledwater)
4.시험과정
4.1표준용액의조제
4.1.1깅콜릭산C15:150mg을정밀하게칭량하여50mL부피플라스
크에취한후메탄올로용해한다.
4.1.2깅콜릭산C17:150mg을정밀하게칭량하여50mL부피플라스
크에취한후메탄올로용해한다.
4.1.3깅콜릭산C13:050mg을정밀하게칭량하여50mL부피플라스
크에취한후메탄올로용해한다.
4.1.4위의표준원액을적정농도로희석하여표준용액으로사용한다.
4.2시험용액의제조
4.2.1시료1g을정밀하게칭량하여50%에탄올10mL에용해한후분
액여두로옮긴다.
4.2.2분액여두에클로로포름50mL를가하여진탕추출한다.
4.2.3클로로포름층을별도로취한다음남은수용액층에대해서는다
시에탄올10mL,클로로포름50mL를넣고재추출한다.
4.2.4클로로포름층을모아감압농축한후메탄올5mL를가하여녹인
다.- 51 -4.2.5위의용액을0.45μm멤브레인필터로여과하여시험용액으로한
다.
5.분석및계산
5.1기기분석
항목 조건
주입량 50μL
검출기파장 210nm
컬럼온도 40℃
이동상전처리용매:0.1%인산을함유한70%아세토니트릴
분석용매:이동상A-0.1%인산
이동상B–아세토니트릴
시간(분)이동상(%)
A B
030 70
430 70
30595
32595
32.130 70
4030 70
유속 1.0mL/분
분석시간 40분표1.고속액체크로마토그래프 조건(예)- 52 -항목 조건
주입량 2μL
유속 0.53mL/분
칼럼온도 40℃
이동상A-0.1%개미산용액
B-100%아세토니트릴
시간(분)이동상(%)
AB
03070
0.33 3070
5.43 2080
8.26 2080
8.32 3070
103070
이온화 ESI,Negative
CapillaryVoltage 3.5kV
SourceTemp. 150℃
DesolvationTemp. 200℃표2.고속액체크로마토그래프 /질량검출기/질량검출기조건(예)
성분Precursorion(m/z)Production(m/z)Cone(V)
GingkolicAcid
C13:0319 119,133,27525
GingkolicAcid
C15:1345 119,133,30125
GingkolicAcid
C17:1373 119,133,32930표3.질량검출기분석을위한이온
5.2계산
5.2.1GinkgolicacidC15:1,C17:1의정량한계는0.036 μg/mL으로,
정량한계이하일경우불검출로판정한다.- 53 -5.2.2GinkgolicacidC13:0의경우표준품C15:1의표준품을이용한
RRT(relativeretentiontime,상대머무름시간)을확인하여함량을
계산한다.
깅콜릭산(GinkgolicacidC13:0,C15:1,C17:1)함량(mg/kg)=C×(a×b)/S
C:시험용액농도(μg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
제4,3,3-74,3.3중“제조”를“조제”로하고,3.3.1중“pH8.0”을“pH6.
8”로한다.
제4,3,3-74,4,4.14.1.3중“33mMTris-HCl(pH8.0)완충용액”를“33m
MTris-HCl(pH6.8)완충용액”으로한다.
제4,3,3-74,4,4.2중“제조”를“조제”로하고,4.2.3“33mMTris-HCl(p
H8.0)완충용액”를“33mMTris-HCl(pH6.8)완충용액”으로한다.
제4,3,3-74,5,5.1,표1중“0.05MNaCl(pH3.5)”를“0.01MNaCl(pH
3.5)”으로하고,5.2.1을다음과같이한다.
히알루론산의함량(mg/g)- 54 -=C×(a×b)/S×1/1,000×378.3/401.3
C:시험용액중의히알루론산의농도(μg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
1/1,000:단위환산계수
378.3:히알루론산이당류의분자량
401.3:히알루론산나트륨이당류의분자량
제4,3,3-79를다음과같이한다.
3-79알파에스1카제인(αS1-casein)(f91-100)
1.시험방법의요약
본시험법은시료중알파에스1카제인(f91-100)을이동상으로용해한후초
음파추출하여최대흡수파장인276nm에서액체크로마토그래프/자외부흡
광광도검출기또는액체크로마토그래프/질량검출기/질량검출기를이용하
여정량분석한다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품- 55 -2.1.1부피플라스크(50mL)
2.1.2용매용일회용실린지
2.1.3여과용멤브레인필터
2.1.4초음파진탕기
2.2분석장비
2.2.1고속액체크로마토그래프/자외부흡광광도검출기
2.2.1.1고속액체크로마토그래프
2.2.1.2자외부흡광광도검출기(UVDetector)
2.2.1.3옥타데실실릴화한칼럼(안지름4.6mm,길이250mm,충전제
Octadecylsilica,충전입자크기5μm)또는이와동등한것
2.2.2고속액체크로마토그래프/질량검출기/질량검출기
2.2.2.1고속액체크로마토그래프
2.2.2.2질량검출기(MassSelectiveDetector)
2.2.2.3옥타데실실릴화한칼럼(안지름2.1mm,길이100mm,충전제
Octadecylsilica,충전입자크기1.7μm)또는이와동등한것
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1알파에스1카제인(αS1-Casein)(f91-100)
분자식:C60H94N14O16,분자량:1267.50
Tyr1-Leu-Gly-Tyr-Leu-Glu-Gln-Leu-Leu-Arg10- 56 -3.2일반시약
3.2.1트리플루오로아세트산(Trifluoroaceticacid)
3.2.2개미산(Formicacid)
3.2.3아세토니트릴(Acetonitrile,HPLCgrade)
4.시험과정
4.1표준용액의조제
4.1.1알파에스1카제인표준물질10mg을정밀하게칭량하여50mL부피플
라스크에취한후추출용매로정용한후표준원액으로한다.
4.1.2표준원액을추출용매로적절히희석하여표준용액으로사용한다.
4.2.추출용매의조제
4.2.10.1%트리플로우로아세트산이첨가된증류수와0.1%트리플루오르아
세트산이첨가된아세토니트릴을74:26(v:v)의비율로잘혼합
하여사용한다.
4.3시험용액의조제
4.3.1알파에스1카제인으로1.0∼1.5mg에상당하는양을취하여50mL부피플
라스크에넣은후,추출용매를넣어시료를녹인다.
4.3.230분동안초음파추출한다.
4.3.3위의용액을추출용매로50mL정용하고적절히희석한후0.45
μm멤브레인필터로여과하여시험용액으로한다.
4.3.4시험용액을고속액체크로마토그래프/자외부흡광광도검출기또는- 57 -고속액체크로마토그래프/질량검출기/질량검출기로분석하여알파에
스1카제인함량을구한다.
5.분석및계산
5.1기기분석
5.1.1고속액체크로마토그래프/자외부흡광광도검출기
항목 조건
주입량 20μL
칼럼온도 37℃
이동상A:0.1%트리플루오르아세트산용액
B:0.1%트리플루오르아세트산을 함유한아세토니트릴
검출기파장 276㎚
유량 0.8mL/분표1.고속액체크로마토그래프 /자외부흡광광도검출기 조건(예)
시간(분)이동상(%)
A B
0 74 26
20 66 34
20.1 1 99
25 1 99
25.1 74 26
34 74 26표2.고속액체크로마토그래프 /자외부흡광광도검출기 이동상조건(예)- 58 -5.1.2고속액체크로마토그래프 /질량검출기/질량검출기
항목 조건
이동상A:0.1%개미산,0.01%트리플루오르아세트산을
함유한증류수
B:0.1%개미산,0.01%트리플루오르아세트산을
함유한아세토니트릴
칼럼온도 40℃
유속 0.5mL/분
주입량 5μL
이온화 ESI,Positive
Capillaryvoltage 2.0kV
Conevoltage 30V
Desolvation
temperature350℃
Monitorions(m/z) 1268(precursorion),771,658(production)표3.고속액체크로마토그래프 /질량검출기/질량검출기조건(예)
시간(분)이동상(%)
A B
0 85 15
1 85 15
11 30 70
12 30 70
12.5 0 100
14 0 100
15.5 85 15
17 85 15표4.고속액체크로마토그래프 /질량검출기/질량검출기이동상조건(예)
5.2계산
5.2.1알파에스1카제인(αS1-casein)(f91-100)의함량(mg/g)=C×(a×b)/S
C:시험용액중의알파에스1카제인(αS1-casein)(f91-100)의농도(mg/mL)- 59 -a:시험용액전량(mL)
b:희석배수
S:시료무게(g)
제4,3,3-81을다음과같이한다.
3-81글루코실세라미드 (Glucosylceramide)
1.시험방법의요약
본시험법은메탄올성수산화칼륨용액을처리한후클로로포름으로글루코실세
라미드를추출하고액체크로마토그래프/질량검출기/질량검출기를이용하여정성
및정량분석하는방법이다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.1부피플라스크(10mL및100mL)
2.1.2용매용일회용실린지
2.1.3여과용멤브레인필터
2.1.4액체크로마토그래프용유리병
2.1.5환저플라스크(250mL)
2.1.6회전진공증발농축기
2.2분석장비- 60 -2.2.1액체크로마토그래프
2.2.2질량검출기
2.2.3옥타데실실릴화한칼럼(안지름2.1mm,길이100mm,충진입자크기
1.7μm,octadecylsilica)또는이와동등한것
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1곤약글루코실세라미드 (Konjacglucosylceramide, Funakoshi,
NS170302또는NS170303)
분자식:C42H79NO9,분자량:742.08,CASNo.:58173-44
3.2일반시약
3.2.1메탄올(Methanol)
3.2.2클로로포름(Chloroform)
3.2.3수산화칼륨(Potassiumhydroxide)
4.시험과정
4.1표준용액의조제- 61 -4.1.1표준물질글루코실세라마이드 50mg을50mL부피플라스크에 넣
고소량의메탄올로완전히녹인후정용하여표준원액으로한다.
4.1.2위의표준원액을메탄올로적절히희석하여표준용액으로한다.
4.2시험용액의조제
4.2.1글루코실세라미드로서 약2.4mg에해당하는시료를100mL비이커에넣
고0.4N메탄올성수산화칼륨용액50mL을가한후2시간동안교반한다.
4.2.2위액을250mL분액여두로옮기고증류수40mL을이용하여비
커를씻어분액여두에합친다.
4.2.3분액여두에클로로포름45mL을가하여진탕혼합하고층분리가충분히
되도록방치한후클로로포름층을환저플라스크로옮긴다.이과정을2
회더반복한다.
4.2.4환저플라스크로옮긴클로로포름층을60℃에서감압농축한후소량의
메탄올에녹여20mL부피플라스크에옮긴후메탄올로정용한다.
4.2.5위의시험용액을메탄올로적절히희석한후0.2μm멤브레인필터로
여과하여시험용액으로한다.
5.분석및계산
5.1기기분석- 62 -항목 조건
이동상A용액:0.1%개미산
B용액:0.1%개미산함유메탄올
칼럼온도 40℃
유속 0.35mL/min
주입량 1μL
이온화 ESI,Positive
CapillaryVoltage 2.5kV
SourceTemp. 150℃
Desolvationtemperature 350℃표1.고속액체크로마토그래프 /질량검출기/질량검출기조건(예)
성분Precursorion(m/z)Production(m/z)Cone(V)
글루코실세라미드 743 262 20표2.질량검출기분석을위한이온
시간(분)A용액(%)B용액(%)
0 5 95
1.5 5 95
2.0 0 100
5.0 0 100
5.1 5 95
10 5 95표3.이동상조건(예)
5.2계산
5.2.1글루코실세라미드 (mg/g)=C×(a×b)/S×1/1,000
C:시험용액중글루코실세라마이드의 농도(μg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)- 63 -1/1,000:단위환산계수
부칙
제1조(시행일)이고시는고시한날부터즉시시행한다.
제2조(적용례)이고시는이고시시행이후최초로제조·가공또는수입
(선적일을기준으로한다.이하같다)한건강기능식품(원료를포함한다)
부터적용한다.
제3조(경과조치)①이고시시행당시검사가접수되어진행중인사항
에대하여는종전의규정에따른다.
②이고시시행당시종전의규정에따라제조․가공․수입한건강기능식
품은종전의규정에따른다.이경우해당건강기능식품은유통기한까지판
매할수있다.- 64 -
현행 개정안
제1.총칙
1.～2.(생략)
3.(생략)
1)(생략)
2)(생략)
(1)----영양소-------영양
소와----------------------.제1.총칙
1.～2.(현행과같음)
3.(현행과같음)
1)(현행과같음)
2)(현행과같음)
(1)----영양성분-------영
양성분과------------------.
제2.공통기준및규격
1.(생략)
1)(생략)
2)영양소
3)(생략)
(1)(생략)
(2)(생략)
(가)∼(다)(생략)
(라)---2)영양소.---------
----------------------------
--------------------------.
2.(생략)
1)∼3)(생략)
4)-----------영양소에서-----
--------------------.
5)(생략)제2.공통기준및규격
1.(현행과같음)
1)(현행과같음)
2)영양성분
3)(현행과같음)
(1)(현행과같음)
(2)(현행과같음)
(가)∼(다)(현행과같음)
(라)---2)영양성분.-------
----------------------------
----------------------------.
2.(현행과같음)
1)∼3)(현행과같음)
4)-----------영양성분에서----
---------------------.
5)(현행과같음)- 65 -(1)(생략)
(2)-------------- 영양소---
----------------.
3.(생략)
1)∼4)(생략)
5)-------------------------
----------------- 영양소의----
--영양소기준치----------------
-----.
6)∼7)(생략)
표1](생  략)
<적용해야할 규격 >
1.(생략 ) →
→
↓
2.(생략 ) →∘영양소 함량
↓
3.(생략 ) →
↓
4.(생략 ) →(1)(현행과같음)
(2)-------------- 영양성분--
-----------------.
3.(현행과같음)
1)∼4)(현행과같음)
5)-------------------------
--------------- 영양성분의-----
--영양소성분기준치 ------------
-----.
6)∼7)(현행과같음)
표1](현행과 같음 )
<적용해야할 규격 >
1.(현행과 같음 ) →
→
↓
2.(현행과 같음 ) →∘영양성분 함량
↓
3.(현행과 같음 ) →
↓
4.(현행과 같음 ) →
제3.개별기준및규격
1.영양소
1)～2)(생략)
3)-----------영양소기준치의---
----------------------------
---------------------.
4)(생략)
5)영양소기준치의--------------
---------영양소의------------
-------.
6)(생략)제3.개별기준및규격
1.영양성분
1)～2)(현행과같음)
3)-----------영양성분기준치의 -
---------------------------
------------------------.
4)(현행과같음)
5)영양성분기준치의 ------------
--------영양성분의------------
--------.
6)(현행과같음)- 66 -<신설> 7)6)의규정에도불구하고,이공
전에서정하는원료의목록에는제
시되어있으나,식품또는식품첨가
물의기준및규격에서기준과규
격이정하여지지않은원료에대하
여는식품의약품안전처장은 국제식
품규격위원회(CodexAlimentarius
Commission,CAC)규정등주요
선진외국의기준및규격을적용할
수있다.
1-1～1-2(생략)
1-3비타민D
1)～2)(생략)
3)(생략)
(1)(생략)
(2)-----:1.5～10ug
4)(생략)1-1～1-2(현행과같음)
1-3비타민D
1)～2)(현행과같음)
3)(현행과같음)
(1)(현행과같음)
(2)-----:3～10ug
4)(현행과같음)
1-4～1-10(생략)
1-11엽산
1)(생략)
(가)(생략)
(나)식품원료를사용하여엽산을
보충할수있도록제조·가공한것
<신설>1-4～1-10(현행과같음)
1-11엽산
1)(현행과같음)
(가)(현행과같음)
(나)메틸테트라히드로엽산글루코사민
((6S)-5-Methyltetrahydrofolic acid,Gluco
samingSalt))
(다)식품원료를사용하여엽산을
보충할수있도록제조·가공한것- 67 -2)～4)(생략)
1-12～1-16(생략)2)～4)(현행과같음)
1-12～1-16(현행과같음)
1-17철
1)(생략)
(가)～(타)(생략)
(파)식품원료를사용하여철을보
충할수있도록제조·가공한것
<신설>1-17철
1)(현행과같음)
(가)～(타)(현행과같음)
(파)구연산제일철나트륨 (Sodiumf
errouscitrate)
(하)식품원료를사용하여철을
보충할수있도록제조·가공한것
1-18～1-24(생략)
1-25크롬
1)～2)(생략)
3)(생략)
(1)-----:0.015～9mg
4)(생략)1-18～1-24(현행과같음)
1-25크롬
1)～2)(현행과같음)
3)(현행과같음)
(1)-----:0.009～9mg
4)(현행과같음)
1-25(생략)
1-26식이섬유(생략)
1)～2)(생략)
3)(생략)
(1)영양소기능
----------
(2)～(3)(생략)
4)(생략)1-25(현행과같음)
1-26식이섬유(현행과같음)
1)～2)(현행과같음)
3)(현행과같음)
(1)영양성분기능
----------
(2)～(3)(현행과같음)
4)(현행과같음)
1-27단백질(생략)
1)～2)(생략)
3)(생략)1-27단백질(현행과같음)
1)～2)(현행과같음)
3)(현행과같음)- 68 -(1)영양소기능
----------
(2)～(3)(생략)
4)(생략)(1)영양성분기능
----------
(2)～(3)(현행과같음)
4)(현행과같음)
1-28필수지방산(생략)
1)～2)(생략)
3)(생략)
(1)영양소기능
----------
(2)～(3)(생략)
4)(생략)1-28필수지방산(현행과같음)
1)～2)(현행과같음)
3)(현행과같음)
(1)영양성분기능
----------
(2)～(3)(현행과같음)
4)(현행과같음)
[별표1](생략)
[별표2]영양소기준치
영양소 기 준 치영양소 기 준 치영양소기 준 치
탄수화물 (g)330 철분(㎎)12판토텐산 (㎎)5
식이섬유 (g)25비타민D(㎍)5 인(㎎)700
단백질(g)55비 타 민E(㎎ α-TE) 11요오드(㎍)150
지방(g) 51비타민K(㎍)70마그네슘 (㎎)315
포화지방 (g)15비타민B1(㎎)1.2아연(㎎)8.5
콜 레 스 테 롤 (㎎)300비타민B2(㎎)1.4셀렌(㎍)55
나트륨(㎎)2,000나 이 아 신 (㎎  NE) 15구리(㎎)0.8
칼륨(㎎)3,500 엽산(㎍)400 망간(㎎)3.0
비 타 민A(㎍  RE)700비타민B6(㎎)1.5크롬(㎍)50
비타민C(㎎)100비타 민B12(㎍)2.4몰리브덴 (㎍)25
칼슘(㎎)700 비오틴(㎍)30[별표1](현행과같음)
[별표2]1일영양성분기준치
영양성분 기 준 치영양성분 기 준 치영양성분 기 준 치
탄수화물 (g)324 크롬(㎍)30몰리브덴 (㎍)25
당류(g)100 칼슘(㎎)700비 타 민B12(㎍)2.4
식이섬유 (g)25 철분(㎎)12비오틴(㎍)30
단백질(g)55비타민D(㎍)10판토텐산 (㎎)5
지방(g) 54비 타 민E(㎎ α-TE)11 인(㎎)700
포화지방 (g)15비타민K(㎍)70요오드(㎍)150
콜 레 스 테 롤 (㎎)300비타민B1(㎎)1.2마그네슘 (㎎)315
나트륨(㎎)2,000 비타민B2(㎎) 1.4아연(㎎)8.5
칼륨(㎎)3,500나 이 아 신 (㎎  N E)15셀렌(㎍)55
비 타 민A (㎍  R E)700비타민B6(㎎)1.5구리(㎎)0.8
비타민C(㎎)100 엽산(㎍)400 망간(㎎)3.0- 69 -[별표3]한국인영양섭취기준
<별첨1>[별표3]한국인영양섭취기준
<별첨1>
2.기능성원료
2-1～2-16(생략)
2-17감마리놀렌산함유유지
1)～2)(생략)
3)최종제품의요건
(1)～(2)(생략)
(3)섭취시주의사항
---------------------------
<신설>2.기능성원료
2-1～2-16(현행과같음)
2-17감마리놀렌산함유유지
1)～2)(현행과같음)
3)최종제품의요건
(1)～(2)(생략)
(3)섭취시주의사항
---------------------------
(면역과민반응에 의한피부상태개
선에도움을줄수있음에한함)
제4.건강기능식품시험법
1.～2.(생략)
3.개별성분별시험법
3-1～3-3(생략)
3-4비타민E
3-4-1비타민E(제1법)
1.～4.(생략)
5.계산
5.1.1-----------------------
A:-----------베타카로틴의
-------
-:-----------------------
-:-----------------------
-:-----------------------제4.건강기능식품시험법
1.～2.(현행과같음)
3.개별성분별시험법
3-1～3-3(현행과같음)
3-4비타민E
3-4-1비타민E(제1법)
1.～4.(생략)
5.계산
5.1.1-----------------------
A:-----------토코페롤의
-------
-:-----------------------
-:-----------------------
-:-----------------------
3-5～3-16(생략)3-5～3-16(현행과같음)- 70 -3-17요오드(생략)
<신설>3-17요오드
3-17-1요오드(제1법)(현행과같
음)
3-17-2요오드(제2법)
1.시험방법의요약
본시험법은시료중에존재하는요
오드를마이크로웨이브분해장치에
넣고테트라메틸암모늄하이드록사이
드(TMAH)용액으로분해하여유도결
합플라즈마/질량분석기로정량하는방법
이다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품
2.1.150mL용폴리프로필렌부피플
라스크
2.2분석장비
2.2.1유도결합플라즈마/질량분석기
2.2.2마이크로웨이브분해장치
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1요오드화칼륨(Potassiumiodide)
분자식:KI,분자량:166.0,
CASNo.:7681-11-0
3.2일반시약- 71 -3.2.125%테트라메틸암모늄하이드록
사이드(Tetramethylammonium
hydroxide,TMAH)
3.2.2증류수
4.시험과정
4.1시약조제
4.1.15%TMAH:25%TMAH100
mL을취하여증류수로500mL
로한다.
4.2표준용액조제
4.2.1내부표준용액:시판Te표준
용액(1,000 μg/mL)1mL를취하
여증류수로500mL로한다(Te
2μg/mL함유)
4.2.2요오드표준용액:요오드화칼륨
0.1308g을취하고증류수를가하
여100mL(1,000 μg/mL)로한다.
다시증류수로희석하여1μ
g/mL으로한다.이용액일정량
을취하여각각50mL용폴리
프로필렌부피플라스크에넣고
0.5%TMAH용액으로정용
한다.이들용액10mL에
내부표준용액100μL를가
한것을표준용액으로한다.- 72 -4.3시험용액조제
4.3.1균질화된시료약0.5g을
마이크로웨이브분해장치에
넣고5%TMAH용액을적
절히가하여90℃,1시간동
안분해한다.
4.3.2분해액을방냉시킨후50
mL용폴리프로필렌부피플
라스크에넣고증류수를가하
여정용한다.
4.3.3검량선범위에들어가게
0.5%TMAH로적절히희
석한다.
4.3.4이액10mL를취하여내
부표준용액100μL를가한
것을시험용액으로한다.
5.분석및계산
5.1기기분석
5.1.1표.ICP-MS측정조건(예)- 73 -항목 조건
기기 ICP-MS
시료도입
유속1.0mL/min
RF파워 1.1kw
플라즈마기체아르곤(15L/min)
이동상기체아르곤(0.7L/min)
메이크업기체아르곤(0.29L/min)
m/z요오드(I)127
내부표준물질(Te):128
세척용매 0.5%TMAH
5.2계산
5.2.1요오드함량(ng/g)=C×(a×b)/S
C:검량선에서구한시험용액
중요오드농도(ng/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
3-17～3-24(생략)3-17～3-24(현행과같음)
3-25베타글루칸
1.시험방법의요약
-----시료의베타글루칸을효
소처리하여글루코오스형태로
분해하고발색시켜분광광도계
로정량하는방법이다.이때글3-25베타글루칸
3-25-1베타글루칸(제1법영지버섯
자실체추출물)
1.시험방법의요약
-----시료를효소처리하여베타
글루칸만을침전시킨후글루코
오스형태로분해하고발색시켜
분광광도계로정량하는방법으로- 74 -루코오스를표준물질으로사용하
며---------------------- 정
량분석한다.
2.(생략)
2.1(생략)
2.1.1∼2.1.4(생략)
2.1.5------(100mL)
2.2∼2.3(생략)
3.(생략)
3.1.(생략)
3.2.일반시약
3.2.1∼3.2.6(생략)
<신설>
3.3.(생략)
4.(생략)
4.1(생략)
4.2(생략)
4.2.1(생략)
4.2.2시료약2∼10g을정밀히
달아--------------------
-------------------------영지버섯자실체추출물에 적용하며
-------------------- 에서분석
한다.
2.(현행과같음)
2.1∼2.1.4(현행과같음)
2.1.1∼2.1.4(현행과같음)
2.1.5------(50mL)
2.2∼2.3(현행와같음)
3.(현행과같음)
3.1.(현행과같음)
3.2.일반시약
3.2.1∼3.2.6(현행과같음)
3.2.7황산(Sulfuricacid)
3.2.8페놀(Phenol)
3.2.90.1N수산화나트륨(Sodium
hydroxide)
3.3.(현행과같음)
4.(현행과같음)
4.1(현행과같음)
4.2(현행과같음)
<삭제>
4.2.1베타글루칸으로서 100mg의
시료를------------------
------------------------- 75 ------------------------ 에
탄올용액으로시료1g당10mL
씩으로----).
4.2.3---100mL-----.
4.2.4---------(20unit)약40
∼200mg을취한다.
4.2.5------------------------
-------------20℃에서----
-------------------------
--------.
4.2.6--------------------
-----------------------
------(50unit)를--------
-----------------------
-----------------------
---.
4.2.7---------------
(10unit)약15∼80mg을
-----------------------
---------------- 37℃에
서---------------------
---.
4.2.8---------------
---(70unit)약20∼100mg을
------------------------
------------------ 60℃에---------------------- 에
탄올용액을이용하여베타글루
칸20mg당10mL씩으로
------).
4.2.2---10mL------.
4.2.3여기에아밀라아제(20,000∼
60,000U/mL)0.1mL을가한다.
4.2.4-------------------
------------- 20℃항온수
조에서---------------------
--------.
4.2.5-----------------
-----------------------
-----(1,600U/mL)를0.1mL
------------------------
------------------------
---.
4.2.6위의용액에프로테아제(600∼
1,300U/mL)약0.1mL을--
-----------------------
-----------37℃항온수조에
서------------------------
---.
4.2.7----------------
---(10,000U/mL)약0.1
mL--------------------
-----------------60 ℃항- 76 -서---------------------
-----------.
4.2.9-----[4.2.8]-----------
400mL-----------------
--------.
4.2.10--------------- (10,000
rpm,10분)--------------
----.
4.2.11------[4.2.10]----------
500mL--------------------
------------.
4.2.12--------------------
(10,000rpm,10분)--.
4.2.13--------------[4.2.12]-
---20mL---------------
---------------- .
4.2.14------------100mL-
-----------------------
----------------------.
4.3(생략)
4.3.125mL----------------
------------------------
------------------------
---------------.
4.3.2∼4.3.4(생략)
5.(생략)
5.1(생략)온수조에서--------------
---------.
4.2.8-----[4.2.7]-------------
40mL-----------------------
--------.
4.2.9---------------- (3,000
×G,20분)---------------
----.
4.2.10-----[4.2.9]------------ 
50mL--------------------
--------.
4.2.11------------------ (3,000
×G,20분)--.
4.2.12-------------[4.2.11]-
---10mL---------------
------------.
4.2.13---------------50mL-
-----------------------------
----------------------------.
4.3(현행과같음)
4.3.115mL-------------
-------------------------
-------------------------
-----------.
4.3.2∼4.3.4(현행과같음)
5.(현행과같음)
5.1(현행과같음)- 77 -5.2(생략)
5.2.1-------------
=C×a/S×10×1/1,000×
0.9
-:---------------------
-:-------------
10:----
-:-------
<신설>
----:---------
--:--------------------5.2(현행과같음)
5.2.1-------------
=C×(a×b)/S×10×1/1,000
×0.9
-:---------------------
-:--------------
b:----
-:-------
10:발색과정의희석배수
----:--------
--:--------------------
<신설> 3-25-2베타글루칸(제2법상황버섯추출물)
1.시험방법의요약
본시험법은시료에있는총글루
칸에서베타글루칸외의글루칸
함량을제거하여베타글루칸의
값을구한다.산분해와효소처리를
하여글루코오스형태로분해한후
발색시켜분광광도계로정량하는
방법으로상황버섯추출물에적용하며
최대흡수파장인470nm에서분석
한다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품- 78 -2.1.1분석저울
2.1.2항온수조
2.1.3pH미터
2.1.4부피플라스크(100mL)
2.1.5마개있는50mL유리시험
관,5mL시험관
2.1.6원심분리기
2.1.7교반기
2.1.8유리섬유여과지(Whatman
GF/A유리섬유필터또는이와
동등한것)
2.2분석장비
2.2.1분광광도계
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1글루코오스(D-(+)-glucose)
분자식:C6H12O6,분자량:
180.16,CASNo.:50-99-7
- 79 -3.2일반시약
3.2.1수산화칼륨(Potassium
hydroxide)
3.2.2초산(Aceticacid)
3.2.3진한염산(Hydrochloric
acid,37%(v/v))
3.2.4수산화나트륨(Sodium
hydroxide)
3.2.5버섯효모베타글루칸
분석키트(Mushroomand
YeastBeta-glucanassay
procedureKit,Megazyme,
K-YBGL,Ireland)
[키트의구성]
①Bottle1:
1,3-베타글루카나아제(1,000
U/mL),베타글루코시다아제(20
U/mL)혼합액
②Bottle2:
Amyloglucosidase(1,630 U/mL),
Invertase(500U/mL),50%
글리세린혼합액
③Bottle3:포도당반응완충액
④Bottle4:포도당측정
반응액(글루코오스옥시다아제
12,000U/L이상,페록시다아제650- 80 -U/L이상,4-아미노안티피린0.4
mM)
3.2.6증류수
3.3시액의조제
3.3.14M수산화나트륨용액
수산화나트륨80.0g을증류
수로용해하여500mL로정
용한다.
3.3.2200mM
초산완충액(Acetatebuffer,
pH5.0)
초산11.6mL를900mL증
류수에용해한후4M수산
화나트륨용액으로pH를5.0으
로맞추어1L로정용한다.
3.3.31.2M초산완충액(Acetate
buffer,pH3.8)
초산69.6mL를800mL증
류수에용해한후4M수산
화나트륨용액으로pH를3.8로
맞추어1L로정용한다.
3.3.42M수산화칼륨용액
수산화칼륨112g을증류수
로용해하여1L로정용한다.
3.3.5베타글루칸효소혼합액
K-YBGL의Bottle1에200
mM초산완충액(pH5.0)8- 81 -mL을첨가한다.1mL씩나
누어–20℃에서보관한다.
3.3.6알파글루칸효소혼합액
K-YBGL에들어있는
Bottle2를그대로사용한다.
3.3.7발색시약(GOPOD)
K-YBGL에들어있는Bottle3
전량을1L부피플라스크에넣은
후증류수로희석하고1L로정
용한다.이용액소량으로
Bottle4전량을녹이고다시
Bottle3가녹아있는이전1L
부피플라스크에넣어충분히섞
은후사용한다.40mL씩나누
어–20℃에서보관한다.
4.시험과정
4.1표준용액의제조
4.1.1D-글루코오스표준물질
500mg을50mL부피플라스
크에넣는다
4.1.2증류수를가하여완전히
녹인후표선까지정용하여
표준원액으로한다.
4.1.3표준원액을증류수로적절
히희석하여표준용액으로사
용한다.- 82 -4.2시험용액의제조
4.2.1총글루칸측정
4.2.1.1시료는0.5mm의체를통
과할수있도록분쇄한다
4.2.1.2마개가있는50mL유리
시험관에베타글루칸으로서
10mg에해당하는시료를
칭량한다.
4.2.1.3진한염산을각시험관에
1.5mL씩가한후덩어리가
생기지않도록강하게교반
한후40℃항온수조에서45
분간반응시킨다.
4.2.1.4각시험관에증류수10
mL를첨가하고강하게교
반한다.
4.2.1.5시험관뚜껑을완전히
닫지않은상태로100℃항
온수조에서5분간방치한후뚜
껑을완전히닫아2시간반응
시킨다.
4.2.1.6반응후실온까지냉각하
여2M수산화칼륨용액을
10mL가한다.
4.2.1.7200mM초산완충액으로
시험관의잔여물을남기지않
고100mL부피플라스크로- 83 -옮긴후표선까지정용한다.
4.2.1.8유리섬유여과지(Whatman
GF/A)를이용하여여과한것
을시험용액으로한다.
4.2.1.9시험용액0.1mL을새로
운5mL시험관에옮긴후
베타글루칸효소혼합액0.1
mL을각시험관에가하여4
0℃에서30분간반응시킨다
(총글루칸측정효소공시험
시험관에200mM초산완충
액0.1mL와베타글루칸효
소혼합액0.1mL을첨가하
고,발색시약공시험시험관
에200mM초산완충액0.2
mL를가한후다음단계부
터함께반응시킨다).
4.2.1.10반응후발색시약(GOPOD)
3mL를가하여실온에서10분
간반응시킨다.
4.2.1.11증류수를대조액으로분
광광도계파장510nm에서
흡광도를측정한다.
4.2.2베타글루칸을제외한글루
칸측정
4.2.2.1시험관에베타글루칸으로서
10mg에해당하는시료를칭- 84 -량한다(효소공시험을동시에진
행한다).
4.2.2.22M수산화칼륨용액을각
시험관에2mL씩가한후덩
어리가생기지않도록강하게
교반한다(덩어리가생겨제거
되지않을경우실온에20분
간방치한후강하게교반한다).
4.2.2.31.2M초산완충액8mL
을가하여강하게교반한후
알파글루칸효소혼합액0.2mL
을가하여40℃항온수조에서
30분간반응시킨다.
4.2.2.4반응액을원심분리(1,500
×G,10분)하여시험용액으
로한다.
4.2.2.5시험용액0.1mL을새로운
시험관에옮긴후발색시약
(GOPOD)3mL를각시험관
에가하여실온에서10분간
반응시킨다.
4.2.2.6증류수를대조액으로분
광광도계파장510nm에서
흡광도를측정한다.
5.분석및계산
5.1흡광도측정- 85 -5.1.1증류수를대조액으로하여
파장510nm에서흡광도를
측정한다.
5.2계산
5.2.1농도별표준용액의흡광도에
서발색시약공시험흡광도를
뺀값을검량선작성에이용한다.
5.2.3.2총글루칸함량(mg/g)
=C×(a×b)/S×0.9
5.2.3.3베타글루칸을제외한글
루칸의함량(mg/g)=C×
(a×b)/S×0.9
5.2.3.4베타글루칸함량(mg/g)
=총글루칸함량
(mg/g)-베타글루칸을
제외한글루칸의함량
(mg/g)
C:시험용액의농도(μ
g/mL)
a：시험용액의전량(mL)
b：희석배수
S：시료중량（mg）
0.9：베타글루칸
전환계수(162/180)
3-26～3-46(생략)3-26～3-46(현행과같음)
3-47카테킨 3-47카테킨- 86 -1.시험방법의요약
---------------------------
----------------------------
----280nm--------.
2.(생략)
2.1(생략)
2.2(생략)
2.2.1～2.2.3(생략)
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안
지름4.6mm,길이250mm,
octadecylsilica)또는이와동등한
것
2.3분석장비의준비
3.(생략)
4.(생략)
4.1(생략)
4.1.14가지표준물질10mg을각
각10mL----------------------.
4.1.1～4.1.2(생략)
4.13.적당량희석하여검량선
작성에사용한다.
4.2(생략)1.시험방법의요약
---------------------------
----------------------------
----275nm--------.
2.(현행과같음)
2.1(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1～2.2.3(현행과같음)
2.2.4YMC-triartC18(안지름4.6
mm,길이250mm,충전입자크기5
μm)컬럼또는이와동등한것
<삭제>
3.(현행과같음)
4.(현행과같음)
4.1(현행과같음)
4.1.1표준물질(EGC,EGCG,EC,
ECG)각각50mg씩50
mL----------------------.
4.1.1～4.1.2(현행과같음)
4.13.50%메탄올로적당량희
석하여표준용액으로사용한다(표준용
액은사용시조제한다)
---------------------------
----------------------------
-----------
4.2(현행과같음)- 87 -4.2.1---------------------
-------------- 합계로서-------
------------------ 메탄올을가
하여-----------.
<신설>
4.2.2메탄올을--------------
------------------.
<신설>
5.(생략)
5.1(생략)
항목 조건
--- 20μL
---- 280nm
---- 40℃
---A:0.1%초산용액,
B:100%아세토니트릴
-- -----표1.(생략)
시간(분)A용액(%)B용액(%)
0955
207525
210100
350100
36955
50955표2.(생략)4.2.1---------------------
-------------- 합으로서-------
------------------50 %메탄올
을가한후20분간-----------.
필요한경우원심분리한다.
4.2.2실온까지식힌후50%메
탄올을----------------------.
되도록시험용액은조제후즉시
기기분석한다.
5.(현행과같음)
5.1(현행과같음)
항목 조건
--- 10μL
---- 275nm
---- 35℃
---A용액-0.1%인산용액
B용액-0.1%초산이함유된
아세토니트릴
-- -----표1.(현행과같음)
시간(분)A용액(%)B용액(%)
09010
29010
38515
108020
121090
161090
179010
209010표2.(생략)
3-49총플라보노이드
1～3.(생략)3-49총플라보노이드
1～3.(현행과같음)- 88 -4.(생략)
4.1～4.2(생략)
4.3(생략)
4.3.1--------------- 대조액
과시험액용으로---------------.
5.(생략)
5.1결과분석(예)
5.1.1(생략)
5.1.2---------------------
------------적용시킨다.4.(현행과같음)
4.1～4.2(현행과같음)
4.3(현행과같음)
4.3.1--------------- 공시험
용과시험용으로---------------.
5.(현행과같음)
5.1결과분석
5.1.1(현행과같음)
5.1.2---------------------
------------적용시켜시료중총
플라보노이드의함량을구한다.
3-50파라(ρ)-쿠마르산 (Coumaric acid),
계피산 (Cinnamic acid)
3-50-1～3-50-2(생략)3-50파라(ρ)-쿠마르산 (Coumaric acid),
계피산 (Cinnamic acid)
3-50-1～3-50-2(현행과같음)
<신설> 3-50-3계피산(Cinnamicacid)확인
(제2법)
1.시험방법의요약
본시험법은시료중계피산을20%
아세토니트릴에용해한후초음파
추출하고,액체크로마토그래프/질량
검출기/질량검출기를이용하여정성
분석한다.
2.장비와재료
2.1실험실장비및소모품- 89 -2.1.1부피플라스크(50mL)
2.1.2여과용멤브레인필터
2.1.3용매용일회용실린지
2.1.4초음파진탕기
2.2분석장비
2.2.1고속액체크로마토그래프
2.2.2질량검출기(MassSelective
Detector)
2.2.3옥타데실실릴화한칼럼(안
지름2.1mm,길이100
mm,충전제octadecyl
silica,충전입자크기1.7μ
m)또는이와동등한것
3.표준물질및일반시약
3.1표준물질
3.1.1계피산(Cinnamicacid,
trans-3-Phenylacrylic
acid)
분자식:C9H8O2,분자량:
148.16,CASNo.:
140-10-3
3.2일반시약- 90 -3.2.1아세토니트릴(Acetonitrile,
HPLCgrade)
3.2.2개미산(Formicacid)
4.시험과정
4.1표준용액의조제
4.1.1표준물질계피산10mg을
정밀하게50mL부피플라스
크에취한후20%아세토니트릴
을가하여정용한후이를표준
원액으로한다.
4.1.2위의표준원액을20%아세토니
트릴로적절히희석하여표준용
액으로사용한다(10∼500μ
g/L).
4.2시험용액의조제
4.2.1시료약2g을50mL부피플
라스크에정밀히취하여20%
아세토니트릴로정용한다.
4.2.2위의용액을30분간초음
파추출한다.
4.2.3위의용액을20%아세토
니트릴로적절히희석한후
0.45μm멤브레인필터로여
과한것을시험용액으로한
다.- 91 -5.분석및계산
5.1기기분석
5.1.1고속액체크로마토그래프/질
량검출기/질량검출기
항목 조건
이동상A:0.1%개미산용액
B:0.1%개미산을함유한
아세토니트릴
칼럼온도 40℃
유속 0.3mL/분
주입량 2μL
이온화 ESI,Positive
Capillary
voltage3.0kV
Conevoltage 26V
Desolvation
temperature350℃
Monitor
ions(m/z)149(precursorion),
103,77(production)표1.고속액체크로마토그래프 /질량검출기/질량
검출기조건(예)
시간(분)이동상(%)
AB
08020
0.18020
3595
4595
4.18020
68020표2.고속액체크로마토그래프 /질량검출기/
질량검출기이동상조건(예)
5.2정성확인
5.2.1시험한크로마토그램상의
피크는표준용액피크의머
무름시간과머무름시간과
선구이온(precursorion)및- 92 -생성이온(production)으로
계피산을확인한다.
3-51～3-53(생략) 3-51～3-53(현행과같음)
3-54대두이소플라본
3-54-1대두이소플라본(제1법)
1.시험방법의요약
-----메탄올을----------
-------추출하여----------
------------------------- 를
이용하여분석하는방법으로최대
흡수파장인260nm에서정량분
석한다.
2.(생략)
2.1(생략)
2.1.1----------(100mL)
2.1.2(생략)
2.1.3액체크로마토그래프용유
리병
2.2(생략)
2.2.1고속액체크로마토그래프
<신설>
<신설>3-54이소플라본
3-54-1이소플라본(제1법)
1.시험방법의요약
------80%메탄올을----------
----------추출하고-----------
-------------------------- (최
대흡수파장260nm)또는액체크
로마토그래프/질량분석기/질량분석
기를이용하여이소플라본중배당
체및비배당체를정량분석한다.
2.(현행과같음)
2.1(현행과같음)
2.1.1-------(10mL,50mL)
2.1.2(현행과동일)
<삭제>
2.2(현행과같음)
2.2.1고속액체크로마토그래프/자외
부흡광광도검출기
2.2.1.1고속액체크로마토그래프
2.2.1.2자외부흡광광도검출기(UVDetector)- 93 -<신설>
2.2.2자외부흡광광도검출기
<신설>
<신설>
<신설>
2.2.3칼럼오븐
2.2.4옥타데실실릴화한칼럼(안지름
4.6mm,길이250mm,충전
제Octadecylsilica)또는
이와동등한것
2.3(생략)
3.(생략)
3.1(생략)
3.2(생략)
3.2.1∼3.2.4(생략)2.2.1.3옥타데실실릴화한칼럼
(안지름4.6mm,길이250
mm,충전제Octadecyl
silica,충전입자크기5μ
m)또는이와동등한것
2.2.2고속액체크로마토그래프/질량
검출기/질량검출기
2.2.2.1고속액체크로마토그래프
2.2.2.2질량검출기(MassSelective
Detector)
2.2.2.3옥타데실실릴화한칼럼
(안지름2.1mm,길이100
mm,충전제Octadecyl
silica,충전입자크기1.7μ
m)또는이와동등한것
<삭제>
<삭제>
2.3(현행과같음)
3.(현행과같음)
3.1(현행과같음)
3.2(현행과같음)
3.2.1∼3.2.4(현행과같음)- 94 -3.2.5<신설>
4.(생략)
4.1----제조
4.1.1∼4.1.4(생략)
4.1.5---------------------
----------------------
-<신설>
4.2(생략)
4.2.1시료약0.5g을50mL
부피플라스크에정밀히취하
여메탄올로정용한다.
<신설>
<신설>
4.2.230분간초음파처리한다.
<신설>3.2.5개미산(Formicacid)
4.(현행과같음)
4.1----조제
4.1.1∼4.1.4(현행과같음)
4.1.5--------------------
----------------------
-(표준용액농도범위0.1～
80μg/mL)
4.2(현행과같음)
4.2.1분말형제품
4.2.1.1균질화한시료일정량(검
량선내들어갈수있도록)
을50mL부피플라스크에
정밀히취하여80%메탄
올로정용한다.
4.2.1.230분간초음파처리한다.
4.2.1.30.45μm의멤브레인필
터로여과한것을시험용액
으로한다.
4.2.2유지형제품
4.2.2.1균질화한시료일정량(검
량선내들어갈수있도록)
을50mL부피플라스크에
정밀히취한다.- 95 -<신설>
<신설>
<신설>
4.2.30.45μm의멤브레인필터로
여과한것을시험용액으로
한다.
5.(생략)
5.1(생략)
표1.(생략)
항목 조건
--- 10μL
---- ----
---A:물/메탄올/초산(88:10:2)
B:메탄올/초산(98:2)
---- 260nm
---- 1.0ml/분
표2.이동상조건(예)4.2.2.2클로로포름2mL을넣
어충분히분산시킨다.
4.2.2.380%메탄올로정용한
후30분간초음파처리한
다.
4.2.2.40.45μm의멤브레인필
터로여과한것을시험용액
으로한다.
<삭제>
5.(현행과같음)
5.1(현행과같음)
표1.(현행과같음)
항목 조건
--- 5μL
----- ---
---A:0.1%초산용액
B:0.1%초산을함유한메탄올
시간
(분)이동상(%)
AB
08020
155050
253070
308020
------ ----
-- ----
표2.고속액체크로마토그래프 /질량분
석기/질량분석기조건(예)
항목 조건
주입량 2μL- 96 -시간 A용액(%) B용액(%)
090 10
2160 40
3260 40
3540 60
3690 10
5.2(생략)
5.2.1각이소플라본(비배당체)함량
(mg/g)=A×(B/S)×P×(1/1,000)
A:시료의농도(μg/mL)
B:시험용액의전량(mL)
S:시료채취량(g)
P:표준품의순도표3.질량분석기분석을위한이온
성분Precursorion(m/z)Product
ion(m/z)
Daidzin417 255
Glycitin447 285
Genistin 433 271
Daidzein 255199,137
Glycitein 285242,270
Genistein 271153,149
5.2(현행과같음)
5.2.1각이소플라본(비배당체)함량
(mg/g)=C×(a×b)/S×
1/1,000
C:시험용액중의각이소
플라본(비배당체)농도(μ
g/mL)
a:시험용액의전량(mL)유량 0.3ml/분
칼럼온도 40℃
이동상A:0.1%개미산용액
B:0.1%개미산을함유한
아세토니트릴
시간
(분)이동상(%)
AB
0955
5.0595
5.5955
6.0955
이온화 ESI,positive
CapillaryVoltage 3.5kV
SourceTemp. 120℃
DesolvationTemp. 350℃- 97 -※이소플라본배당체일경우
1/1.6(0.625)전환계수적용함b:희석배수
S:시료채취량(g)
1/1,000:단위환산계수
*이소플라본배당체일경우
1/1.6(0.625)전환계수적용함
3-54-2대두이소플라본(제2법)
1.-------
------메탄올을이용하여시료
중이소플라본을추출하여액체크로
마토그래프/자외부흡광광도검출기
를이용하여분석하는방법으로
최대흡수파장인260nm에서정
량분석한다.
2.(생략)
2.1(생략)
2.1.1삼각플라스크(250mL)
2.1.2항온수조
2.1.3원심분리기
2.1.4용매용일회용실린지
2.1.5여과용멤브레인필터
2.1.6액체크로마토그래프용유3-54-2이소플라본(제2법)
1.--------
-----염기성가수분해를통해시
료에존재하는이소플라본중아세틸
배당체,말로닐배당체를배당체로전
환시켜함께정량할수있는방법
으로,액체크로마토그래프/자외부흡
광광도검출기(최대흡수파장260nm)
또는액체크로마토그래프/질량분석기/질량
분석기를이용하여정량분석한다.
2.(현행과같음)
2.1(현행과같음)
2.1.1부피플라스크(10mL,50mL)
2.1.2여과용멤브레인필터
<삭제>
<삭제>
<삭제>
<삭제>- 98 -리병
2.1.7부피플라스크(50mL)
2.2(생략)
2.2.1고속액체크로마토그래프
<신설>
<신설>
<신설>
2.2.2자외부흡광광도검출기
<신설>
<신설>
<신설>
2.2.3칼럼오븐
2.2.4옥타데실실릴화한한칼럼
(안지름4.6mm,길이250
mm,충전제octadecylsilica)
<삭제>
2.2(현행과같음)
2.2.1고속액체크로마토그래프/자외
부흡광광도검출기
2.2.1.1고속액체크로마토그래프
2.2.1.2자외부흡광광도검출기(UV
Detector)
2.2.1.3옥타데실실릴화한칼럼
(안지름4.6mm,길이
250mm,충전제Octadecyl
silica,충전입자크기5μ
m)또는이와동등한것
2.2.2고속액체크로마토그래프/질량
검출기/질량검출기
2.2.2.1고속액체크로마토그래프
2.2.2.2질량검출기(Mass
SelectiveDetector)
2.2.2.3옥타데실실릴화한칼럼
(안지름2.1mm,길이100
mm,충전제Octadecyl
silica,충전입자크기1.7μ
m)또는이와동등한것
<삭제>
<삭제>- 99 -또는이와동등한것
2.3(생략)
3.(생략)
3.1(생략)
3.1.1이소플라본류
3.1.1.1다이드진(Daidzin)
3.1.1.2.글리시틴(Glycitin)
3.1.1.3.제니스틴(Genistin)
3.1.1.4.다이드제인(Daidzein)
3.1.1.5.제니스테인(Genistein)
3.1.1.6.글리시테인(Glycitein)
3.2(생략)
3.2.1메탄올(Methanol)
3.2.2초산(Aceticacid)
3.2.3증류수(Distilledwater)
3.2.4수산화나트륨(Sodium
hydroxide)
<신설>
<신설>
4.(생략)
4.1----제조2.3(현행과같음)
3.(현행과같음)
3.1(현행과같음)
3.1.1다이드진(Daidzin)
3.1.2.글리시틴(Glycitin)
3.1.3.제니스틴(Genistin)
3.1.4.다이드제인(Daidzein)
3.1.5.제니스테인(Genistein)
3.1.6.글리시테인(Glycitein)
<삭제>
3.2(현행과같음)
3.2.1메탄올(Methanol,HPLC
grade)
3.2.2아세토니트릴(Acetonitrile,HPLC
grade)
3.2.3초산(Aceticacid)
3.2.4 디메틸설폭시드
(Dimethylsulfoxide)
3.2.5개미산(Formicacid)
3.2.6수산화나트륨(Sodium
hydroxide)
4.(현행과같음)
4.1----조제- 100 -4.1.1∼4.1.4(생략)
4.1.5---------------------
-----------------------
-<신설>
4.2(생략)
4.2.1시료1～10g을정밀히취
한다.
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
4.2.2위의시료를250mL삼각플라
스크에넣는다.
<신설>4.1.1∼4.1.4(현행과동일)
4.1.5--------------------
----------------------
-(표준용액농도범위0.1～
80μg/mL).
4.2(현행과같음)
4.2.1분말형제품
4.2.1.1균질화한시료일정량(검
량선내들어갈수있도
록)을50mL부피플라스
크에정밀히취한다.
4.2.1.280%메탄올40mL를
넣은후30분간초음파
추출한다.
4.2.1.32M수산화나트륨용액3mL
를넣고상온에서10분간
회전교반한다.
4.2.1.4초산1mL를넣고80%메
탄올을사용하여50mL로
정용한다.
4.2.1.50.45㎛멤브레인필터로
여과한것을시험용액으로
한다.
4.2.2유지형제품
4.2.2.1균질화한시료일정량(검- 101 -<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
4.2.3여기에80%메탄올40mL
를넣은후호일을씌운다.
4.2.465℃항온수조에서2시간추
출한다.
4.2.5냉각시킨후2M수산화나트
륨용액3mL를넣는다.
4.2.6이를상온에서10분간회전교
반한후초산1mL를넣는다.
4.2.780%메탄올을사용하여50
mL로하여하고혼합한다.량선내들어갈수있도
록)을50mL부피플라스
크에정밀히취한다.
4.2.2.2클로로포름2mL을넣어
충분히분산시킨다.
4.2.2.380%메탄올40mL를
넣은후30분간초음파
추출한다.
4.2.2.42M수산화나트륨용액3mL
를넣고상온에서10분간
회전교반한다.
4.2.2.5초산1mL를넣고80%메
탄올을사용하여50mL로
정용한다.
4.2.2.60.45㎛멤브레인필터로여
과한것을시험용액으로한
다.
<삭제>
<삭제>
<삭제>
<삭제>
<삭제>- 102 -4.2.8여액5mL에증류수4mL
를넣고메탄올을사용하여
10mL로한다.
4.2.9원심분리(5,000rpm,5분)한상
등액을0.45㎛멤브레인필터
로여과한다.
5.(생략)
5.1(생략)
표1.(생략)
항목 조건
--- 10μL
---- ---
---A:물/메탄올/초산(88:10:2)
B:메탄올/초산(98:2)
----- ----
---- ----
표2.이동상조건(예)
시간A용액
(%)B용액
(%)
090 10
2160 40
3260 40
3540 60
3690 10<삭제>
<삭제>
5.(현행과같음)
5.1(현행과같음)
표1.(현행과같음)
항목 조건
주입량 5μL
---- --
---A:0.1%초산용액
B:0.1%초산을함유한메탄올
시간
(분)이동상(%)
AB
08020
155050
253070
308020
---- ----
-- ---
표2.고속액체크로마토그래프 /질량분석기/질
량분석기조건(예)
항목 조건
주입량 2μL
유량 0.3ml/분
칼럼온도 40℃
이동상A:0.1%개미산용액
B:0.1%개미산을함유한
아세토니트릴
시간
(분)이동상(%)
AB
0955
5.0595
5.5955
6.0955
이온화 ESI,positive
CapillaryVoltage 3.5kV- 103 -<신설>
5.2(생략)
5.2.1각이소플라본(비배당체)함량
(mg/g) =
A×(B/S)×P×(1/1,000)
A:시료의농도(μg/mL)
B:시험용액의전량(mL)
S:시료채취량(g)
P:표준품의순도
※이소플라본배당체일경우
1/1.6(0.625)전환계수적용함표3.질량분석기분석을위한이온
성분Precursorion(m/z)Product
ion(m/z)
Daidzin417 255
Glycitin447 285
Genistin 433 271
Daidzein 255199,137
Glycitein 285242,270
Genistein 271153,149
5.2(현행과같음)
5.2.1각이소플라본(비배당체)함량
(mg/g)=C×(a×b)/S×
1/1,000
C:시험용액중의각이소
플라본(비배당체)농도(μ
g/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
1/1,000:단위환산계수
*이소플라본배당체일경우
1/1.6(0.625)전환계수적용함SourceTemp. 120℃
DesolvationTemp. 350℃
3-55～3-63(생략)3-55～3-63(현행과같음)
3-64총폴리페놀 3-64총폴리페놀- 104 -1.(생략)
---------------------------
--------------------------
------------------------ 정
량하는방법이다.
2.(생략)
2.1(생략)
2.1.1-------(100mL)
2.1.2(생략)
2.1.3수용성일회용실린지
<신설>
2.2(생략)
3.(생략)
3.1(생략)
3.2(생략)
3.2.1(생략)
3.2.2증류수(Distilledwater)
3.3시액-----
4.(생략)
4.1(생략)
4.1.1----------정밀히칭량
하여100mL부피플라스크에1.(현행과같음)
--------------------------
---------------------------
------------------------- 파
장760nm에서측정한후,비타민C
함량을제외한값으로정량분석
한다.
2.(현행과같음)
2.1(현행과같음)
2.1.1-------(50mL)
2.1.2(현행과같음)
2.1.3용매용일회용실린지
2.1.4초음파진탕기
2.2(현행과같음)
3.(현행과같음)
3.1(현행과같음)
3.2(현행과같음)
3.2.1(현행과같음)
<삭제>
3.3시약-----
4.(현행과같음)
4.1(현행과같음)
4.1.1---------정밀하게칭량
하여50mL부피플라스크에- 105 -넣고증류수로표선까지채
운다.
4.1.2---------------- 적정
농도희석하여-----------
----.
4.2(생략)
4.2.1시료100mg을칭량하여
100mL부피플라스크에담
는다.
4.2.2증류수를넣어표선까지맞춘
후초음파처리하여용해시
킨다.
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>취한후증류수를가하여정
용한다.
4.1.2---------------- 적절
히희석하여-------------
----.
4.2(현행과같음)
4.2.1탄닌산으로5∼10mg에상
당한양을취하여50mL부
피플라스에취한후증류수
를소량가한다.
4.2.230분동안초음파추출한
다.
4.2.3위의용액을증류수로50mL
정용한후적절히희석하여시
험용액으로한다.
4.2.4증류수7.5mL를시험관에
각각취한다.
4.2.54.2.4의시험관에각각표준
용액,시험용액및증류수
(공시험용)를1mL씩취한
다.
4.2.64.2.5의각시험관에
Folin-Denis시약0.5mL을
가한후35%탄산나트륨1
mL를넣어혼합한다.
4.2.7암소에서30분방치한후- 106 -4.3시험조작
4.3.1증류수7.5mL를시험관에
취한다.
4.3.2위의시험관에표준용액및
시험용액을각각1mL을취
한다.
4.3.3Folin-Denis시약0.5mL,
35%탄산나트륨1mL를반드
시순서대로가하여혼합한다.
4.3.4암소에서1시간방치후
760nm에서흡광도를측정
한다.
5.(생략)
5.1결과분석(예)
5.1.1-------------------- 
각농도별각공시험의흡광
도---------------------
------.
5.1.2---------------------
---------검량선에적용
시킨다.
총폴리페놀의함량(탄닌산으로760nm에서흡광도를측정
한다.
<삭제>
<삭제>
<삭제>
<삭제>
<삭제>
5.(현행과같음)
5.1결과분석
5.1.1-------------------- 
공시험의흡광도----------
----------------------
----.
5.1.2--------------------
--------이용하여정량한
다.
<삭제>- 107 -서)(mg/g)=××
A:시험용액전량(mL)
B:희석배수
C:시험용액중의총폴리페놀
농도(mg/mL)
D:시료채취량(g또는mL)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>5.1.3비타민C가총폴리페놀
함량에간섭하는양을보정
하기위해시료중비타민C
의함량을「건강기능식품의
기준및규격」중제4.건
강기능식품시험법3-14비타
민C(제3법)에따라미리분
석한다.
5.2비타민C간섭보정계수설정
5.2.1시료중비타민C가총폴리
페놀함량에간섭하는양을
보정하기위해순수한비타
민C를일정량(mg)(5.1.3에서
분석한값과근접한값)취
한다.
5.2.24.2.1에서4.2.7까지의과정
을동일하게수행한다.
5.2.3흡광도로측정한비타민C
의실험값을이론값으로나
누어비타민C간섭보정계수- 108 -<신설>를설정한다.
5.3계산
5.3.1총폴리페놀의함량(탄닌산으로
서)(mg/g)=[C×(a×b)/S]
-(D×E/F)
C:시험용액중의탄닌산의농
도(mg/mL)
a:시험용액전량(mL)
b:희석배수
S:시료무게(g)
D:5.1.3에서측정한비타민C의
함량(mg/g)
E:5.2.2에따라흡광도법으로
측정한비타민C의함량
(mg/g)
F:5.2.1에서취한순수한비타
민C의함량(mg/g)
*=비타민C간섭보정계
수
3-65～3-66(생략)3-65～3-66(현행과같음)
3-67깅콜릭산(Ginkgolicacid)
1.(생략)
-------------------------
--------------------------
--------------------------3-67깅콜릭산(Ginkgolicacid)
1.(현행과같음)
-------------------------
-------------------------
--------------------------- 109 --------------------------
-------------------------
이용하여분석하는방법으로최대
흡수파장인210nm에서정량분석
한다.
2.(생략)
2.1(생략)
2.1.1------(10mL)
2.1.2∼2.1.8(생략)
2.2(생략)
2.2.1고속액체크로마토그래피
2.2.2자외부흡광광도검출기(UV
Detector)또는포토다이오드어레이
검출기(PhotodiodeArray
Detector)
2.2.3스위칭밸브
2.2.4C8컬럼(안지름4.6mm,길이
150mm,충진입자크기5μm,전
처리컬럼)또는이와동등한것
2.2.5C18컬럼(안지름4.6mm,길이
250mm,충진입자크기5μm,분석--------------------------
-------------------------
(최대흡수파장210nm)또는액
체크로마토그래프/질량검출기/질
량검출기를이용하여정량분석
하는방법이다.
2.(현행과같음)
2.1(현행과같음)
2.1.1------(50mL)
2.1.2∼2.1.8(현행과같음)
2.2(현행과같음)
2.2.1고속액체크로마토그래프/자외
부흡광도검출기
2.2.1.1고속액체크로마토그래프
2.2.1.2자외부흡광광도검출기또
는포토다이오드어레이검출
기
2.2.1.3스위칭밸브
2.2.1.4C8컬럼(안지름4.6mm,
길이150mm,충진입자크기
5μm,전처리컬럼)또는이
와동등한것
2.2.1.5C18컬럼(안지름4.6mm,
길이250mm,충진입자크기5- 110 -컬럼)또는이와동등한것
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
3.(생략)
3.1(생략)
3.1.1(생략)
---:-------------------
---:-------------------
OH
OHO
H3C(H2C)4H2C
<GinkgolicacidC15:1>
3.1.2(생략)μm,분석컬럼)또는이와동등
한것
2.2.2고속액체크로마토그래프/질
량검출기/질량검출기
2.2.2.1고속액체크로마토그래프
2.2.2.2질량검출기
2.2.2.3옥타데실실릴화한칼럼
(C18,안지름2.1mm,길이
100mm,충전입자크기1.7μ
m,충전제octadecylsilica)
또는이와동등한것
3.(현행과같음)
3.1(현행과같음)
3.1.1(현행과같음)
---:-------------------
---:-------------------
OH
OHO
H3C(H2C)4H2C
<삭제>
3.1.2(현행과같음)- 111 ----:-------------------
---:-------------------
OH
OHO
H3C(H2C)4H2C
<GinkgolicacidC17:1>
3.1.3(생략)
---:-------------------
---:-------------------
OH
OHO
CH2(CH2)11CH3
<GinkgolicacidC13:0>
4.(생략)
4.1(생략)
4.1.1--------------- 10mg을
------------------- 10mL
------------------- 메탄올
10mL에----.
4.1.2-------10mg--------
----10mL-----------------:-------------------
---:-------------------
OH
OHO
H3C(H2C)4H2C
<삭제>
3.1.3(생략)
---:-------------------
---:-------------------
OH
OHO
CH2(CH2)11CH3
<삭제>
4.(현행과같음)
4.1(생략)
4.1.1-------------- 50mg을
---------------- 50mL
----------------- 메탄올
로----.
4.1.2-------50mg--------
50mL----------------- 112 -메탄올10mL에용해한다.
4.1.3----------10mg------
------10mL-------------
----메탄올10mL에용해한다.
4.1.4.(생략)
4.2(생략)
5.(생략)
5.1(생략)
항목 조건
--- 50μL
--- 210nm
---- 40℃
이동상----:----------------------
----:----------------------
<신설>
--- ---
----- ----표1.고속액체크로마토그래 피조건(예)메탄올로----.
4.1.3---------50mg-------
------50mL-----------
----메탄올로----.
4.1.4.(현행과같음)
4.2(현행과같음)
5.(현행과같음)
5.1(현행과같음)
항목 조건
--- ---
----- ---
--- ---
이동상-----:---------------------
-----:---------------------
시간(분)이동상(%)
AB
03070
43070
30595
32595
32.13070
403070
--- ---
---- ---표1.고속액체크로마토그래 프조건(예)- 113 -표2.이동상조건(분석컬럼)
시간(분)이동상(%)
AB
03070
43070
30595
32595
32.13070
403070
<신설>
5.2(생략)
깅콜릭산(ginkgolic
acidC13:0,C15:1,
C17:1)함량(mg/kg)=A×B×
C
D×100
A:시험용액농도(μg/mL)성분Precursor
ion(m/z)Product
ion(m/z)Cone
(V)
Gingkolic
AcidC13:0319119,133,27525
Gingkolic
AcidC15:1345119,133,30125
Gingkolic
AcidC17:1373119,133,32930항목 조건
주입량 2μL
유속 0.53mL/분
칼럼온도 40℃
이동상A-0.1%개미산용액
B-100%아세토니트릴
시간(분)이동상(%)
AB
03070
0.333070
5.432080
8.262080
8.323070
103070
이온화 ESI,Negative
Capillary
Voltage3.5kV
Source
Temp.150℃
Desolvation
Temp.200℃표2.고속액체크로마토그래프 /질량검출기/질
량검출기조건(예)
표3.질량검출기분석을위한이온
5.2(현행과같음)
깅콜릭산(GinkgolicacidC13:0,C15:1,
C17:1)함량(mg/kg)=C×(a×
b)/S
C:시험용액농도(μg/mL)- 114 -B:용액량(mL)
C:표준품순도(%)
D:시료채취량(g)a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
3-68～3-73(생략)3-68～3-73(현행과같음)
3-74히알루론산
1.(생략)
2.(생략)
2.1∼2.2(생략)
2.3분석장비의준비
3.(생략)
3.1∼3.2(생략)
3.3---제조
3.3.1(생략)
-----------------------
------------------------
------------------------
--------------- pH8.0으로
------------------ .
4.(생략)
4.1----제조
4.1.1∼4.1.2(생략)
4.1.3--------------------
---------------------
---------------- 33mM3-74히알루론산
1.(현행과같음)
2.(현행과같음)
2.1∼2.2(현행과같음)
<삭제>
3.(현행과같음)
3.1∼3.2(현행과같음)
3.3---조제
3.3.1(현행과같음)
트리스염3.99g과아세트산나
----------------------
----------------------
-------------- pH6.8으로
------------------ .
4.(현행과같음)
4.1----조제
4.1.1∼4.1.2(현행과같음)
4.1.3--------------------
----------------------
---------------- 33mM- 115 -Tris-HCl(pH8.0)완충용액
-------------------------
-----.
4.1.4(생략)
4.2----제조
4.2.1∼4.2.2(생략)
4.2.3---------------------
---------------------
---------------- 33mM
Tris-HCl(pH8.0)완충용액
------------------------
-----.
4.2.4.(생략)
5.1(생략)
항목 조건
--- ----L
---- ---
---0.05MNaCl(pH3.5)
----- ----
--- -------표1.(생략)
5.2(생략)
5.2.1.히알루론산표준용액에서
얻은히알루론산의피크면
적으로검량선을작성하고,
검량선식을이용하여시험
용액중의히알루론산의농Tris-HCl(pH6.8)완충용액
-------------------------
-----.
4.1.4(현행과같음)
4.2----조제
4.2.1∼4.2.2(현행과같음)
4.2.3---------------------
---------------------
---------------- 33mM
Tris-HCl(pH6.8)완충용액
-------------------------
-----.
4.2.4.(현행과같음)
5.1(현행과같음)
항목 조건
--- ---
---- ---
---0.01MNaCl(pH3.5)
----- ----
--- ----표1.(현행과같음)
5.2(현행과같음)
5.2.1.<삭제>- 116 -도를구한후아래식을이
용하여히알루론산함량을
계산한다.
히알루론
산의함
량
(mg/g)=A×
B×C
×378.
3
D×1,00
0401.
3
A:시험용액의전량(mL)
B:희석배수
C:시험용액중의히알루론산
의농도(μg/mL)
D:시료채취량(g)
1/1,000:단위환산계수
378.3:히알루론산이당류의
분자량
401.3:히알루론산나트륨
이당류의분자량히알루론산의함량(mg/g)
=C×(a×b)/S×1/1,000
×378.3/401.3
C:시험용액중의히알루론산
의농도(μg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
1/1,000:단위환산계수
378.3:히알루론산이당류의
분자량
401.3:히알루론산나트륨
이당류의분자량
3-79알파에스1카제인(αs1-casein)(f91-100)
1.(생략)
------시료로부터알파에스1카
제인(f91-100)을고속액체크로마토그
래프분석하는방법으로자외부흡
광광도검출기를이용하여분석한
다.3-79알파에스1카제인(αs1-casein)(f91-100)
1.(현행과같음)
--------시료중알파에스1카제
인(f91-100)을이동상으로용해한후
초음파추출하여최대흡수파장인
276nm에서액체크로마토그래프/
자외부흡광광도검출기또는액체크로
마토그래프/질량검출기/질량검출기- 117 -2.(생략)
2.1(생략)
2.1.1(생략)
2.1.2HPLC유리병
2.1.3용매용일회용실린지
2.1.4여과용멤브레인필터(PTFE,
0.45mm)
2.1.5교반기
2.2(생략)
2.2.1고속액체크로마토그래프
<신설>
<신설>
<신설>
2.2.2자외부흡광광도검출기(UV
Detector)
<신설>
<신설>
2.2.3옥타데실실릴화한칼럼(안지름를이용하여정량분석한다.
2.(현행과같음)
2.1(현행과같음)
2.1.1(현행과같음)
2.1.2용매용일회용실린지
2.1.3여과용멤브레인필터
2.1.4초음파진탕기
<삭제>
2.2(현행과같음)
2.2.1고속액체크로마토그래프/자외
부흡광광도검출기
2.2.1.1고속액체크로마토그래프
2.2.1.2자외부흡광광도검출기(UV
Detector)
2.2.1.3옥타데실실릴화한칼럼
(안지름4.6mm,길이250
mm,충전제Octadecyl
silica,충전입자크기5μ
m)또는이와동등한것
2.2.2고속액체크로마토그래프/질량
검출기/질량검출기
2.2.2.1고속액체크로마토그래프
2.2.2.2질량검출기(MassSelective
Detector)
2.2.2.3옥타데실실릴화한칼럼- 118 -4.6mm,길이250mm,충전
제octadecylsilica)또는
이와동등한것
3.(생략)
3.1(생략)
3.1.1Decapeptide(Synthetic α
S1-Casein)(f91-100)
분자식:C60H94N14O16,분자
량:1267.50
3.2(생략)
3.2.1(생략)
3.2.2증류수
3.2.3(생략)
4.(생략)
4.1-----제조
4.1.1Synthethic알파에스카제인
(αS1-Casein)(f91-100)표준물
질을5mg∼100mg을정밀
히측정하여10mL부피플라
스크에넣는다.
4.1.2이동상A,B가혼합된용
액(74:26(v:v))으로완전
히녹인후이를표준원액(안지름2.1mm,길이100
mm,충전제Octadecyl
silica,충전입자크기1.7μ
m)또는이와동등한것
3.(현행과같음)
3.1(현행과같음)
3.1.1알파에스1카제인(α
S1-Casein)(f91-100)
분자식:C60H94N14O16,분자량
:1267.50
Tyr1-Leu-Gly-Tyr-Leu-Gl
u-Gln-Leu-Leu-Arg10
3.2(현행과같음)
3.2.1(현행과같음)
3.2.2개미산(Formicacid)
3.2.3(현행과동일)
4.(현행과같음)
4.1------조제
4.1.1알파에스1카제인표준물질10
mg을정밀하게칭량하여50
mL부피플라스크에 취한
후추출용매로정용한후
표준용액으로한다.
4.1.2표준원액을추출용매로적
절히희석하여표준용액으로
사용한다.- 119 -으로한다.
4.1.3위의용액을적절히단계별
로희석하여표준용액으로
한다.
4.1.430분간교반한후표준원
액을적절히희석(예;1:20)
하여검량선작성용표준용
액을조제한다.
4.1.50.45mm멤브레인필터로
여과한것을표준용액으로
한다.
4.2시험용액제조
4.2.1원료약20mg(±0.1mg)을50
mL의용기에취하여이동상
A,B가혼합된용액(74:26
(v:v))으로녹인다.
4.2.2유단백가수분해물로서 2
mg/mL의농도가되도록한
다.
4.2.330분간교반한후0.45
mm멤브레인필터로여과한
것을시험용액으로한다.
<신설>
<신설><삭제>
<삭제>
<삭제>
4.2추출용매의조제
4.2.10.1%트리플로우로아세트산이
첨가된증류수와0.1%트리풀
루오르아세트산이첨가된아
세토니트릴을74:26(v:v)의
비율로잘혼합하여사용한
다.
<삭제>
<삭제>
4.3시험용액의조제
4.3.1알파에스1카제인으로1.0∼1.5
mg에상당하는양을취하여- 120 -<신설>
<신설>
<신설>
5.(생략)
5.1(생략)
5.1.1고속액체크로마토그래프(예)50mL부피플라스크에취한
후추출용매를넣어시료를
녹인다.
4.3.230분동안초음파추출한
다.
4.3.3위의용액을추출용매로50
mL로정용하고추출용매로적
절히희석한후0.45mm멤
브레인필터로여과하여시
험용액으로한다.
4.3.4시험용액을고속액체크로마
토그래프/자외부흡광광도검출
기또는고속액체크로마토그
래프/질량검출기/질량검출기로
분석하여알파에스1카제인함량을
구한다.
5.(현행과같음)
5.1(현행과같음)
5.1.1고속액체크로마토그래프/자외
부흡광광도검출기- 121 -항목 조건
---- 100μL
---- ----
---A용액:0.1%
트리플루오르아세트산
수용액
B용액:0.1%삼불화초산이
첨가된아세토니트릴
---- 280㎚
--- ----표1.(생략)
시간(분)이동상(%)
A용액B용액
---
---
---
---
---
---표2.이동상조건(예)
<신설>
<신설>항목 조건
---- 20μL
--- -
---A:0.1%
트리플루오르아세트산용액
B:0.1%
트리플루오르아세트산을
함유한아세토니트릴
---- 276㎚
--- ----표1.(현행과같음)
시간(분)이동상(%)
AB
---
---
---
---
---
---표2.고속액체크로마토그래프 /자외부흡
광광도검출기이동상조건(예)
5.1.2고속액체크로마토그래프/질
량검출기/질량검출기
항목 조건
이동상A:0.1%개미산,0.01%
트리플루오르아세트산을
함유한증류수
B:0.1%개미산,0.01%
트리플루오르아세트산을
함유한아세토니트릴
칼럼온도 40℃
유속 0.5mL/분
주입량 5μL
이온화 ESI,Positive
Capillary 2.0kV표3.고속액체크로마토그래프 /질량검출
기/질량검출기조건(예)- 122 -<신설>
5.2(생략)
알 파 에 스1카 제 인(α
S1-casein)(f91-100)의함량(mg/g)=
××
A:시험용액중의알파에스1카
제인(αS1-casein)(f91-100)의농
도(mg/mL)
B:시험용액전량(mL)
C:표준품순도
S:시료채취량(g)시간(분)이동상(%)
AB
08515
18515
113070
123070
12.5 0100
140100
15.58515
178515표4.고속액체크로마토그래프 /질량검출기/
질량검출기이동상조건(예)
5.2(현행과같음)
5.2.1알파에스1카제인(α
S1-casein)(f91-100)의함량
(mg/g)=C×(a×b)/S
C:시험용액중의알파에스1
카제인(αS1-casein)(f91-100)의
농도(mg/mL)
a:시험용액전량(mL)
b:희석배수
S:시료무게(g)voltage
Cone
voltage30V
Desolvation
temperatur
e350℃
Monitor
ions(m/z)1268(precursorion),771,
658(production)
3-81글루코실세라미드(Glucosylceramide) 3-81글루코실세라미드(Glucosylceramide)- 123 -1.(생략)
------시료로부터추출한글루코
실세라미드(Glucosylceramide) 를
고속액체크로마토그래프분석하는
방법으로ELSD(EvaporativeLight
ScatteringDetector)검출기를이용
하여정성및정량분석을한다.
2.(생략)
2.1(생략)
2.1.1-------(10mL)
2.1.2삼각플라스크(100mL)
2.1.3분액여두(200mL)
2.1.40.45μm멤브레인필터
<신설>
<신설>
2.2(생략)
2.2.1고속액체크로마토그래프
2.2.2Inertsil100A(3.0×150mm,
5um,GLscience)또는이와
동등한것
2.2.3증기화광산란검출기(ELSD,
EvaporativeLightScattering
Detector)1.(현행과같음)
-----메탄올성수산화칼륨용액을처리
한후클로로포름으로글루코실세라미드
를추출하고액체크로마토그래프/질량
검출기/질량검출기를이용하여정성
및정량분석하는방법이다.
2.(현행과같음)
2.1(현행과같음)
2.1.1-------(10mL및100
mL)
2.1.2용매용일회용실린지
2.1.3여과용멤브레인필터
2.1.4액체크로마토그래프용유리병
2.1.5환저플라스크(250mL)
2.1.6회전진공증발농축기
2.2(현행과같음)
2.2.1액체크로마토그래프
2.2.2질량검출기
2.2.3옥타데실실릴화한칼럼(안지름
2.1mm,길이100mm,충진입자
크기1.7μm,octadecylsilica)- 124 -3.(생략)
3.1(생략)
3.1.1글루코실세라미드
(Glucosylceramide)
3.2(생략)
3.2.1∼3.2.3(생략)
3.2.4증류수
4.(생략)
4.1표준용액
4.1.110mL용량플라스크에 글
루코실세라미드표준물질
10mg을정밀하게달아클로
로포름:메탄올=9:1혼합액일
정량을넣어초음파처리하
여방냉후정용한것(1.0또는이와동등한것
3.(현행과같음)
3.1(현행과같음)
3.1.1곤약글루코실세라미드(Konjac
glucosylceramide,Funakoshi,
NS170302또는NS170303)
분자식:C42H79NO9,분자량:
742.08,CASNo.:58173-44
3.2(현행과같음)
3.2.1∼3.2.3(생략)
<삭제>
4.(현행과같음)
4.1표준용액의조제
4.1.1표준물질글루코실세라마이드
50mg을50mL부피플라스크에
넣고소량의메탄올로완전히녹
인후정용하여표준원액으로
한다.
- 125 -mg/mL)을표준원액이라한
다.표준원액을적절히희석
하여0.1,검량선작성용표
준용액을조제한다.
<신설>
4.2시험용액
4.2.1100mL삼각플라스크에
시료약1g을취한후0.4
N메탄올성KOH용액50
mL을첨가하여상온에서2
시간교반하여알칼리처리
를한다.
4.2.2200mL분액여두에알칼리
처리액을옮긴후증류수40
mL로삼각플라스크를세척
하여분액여두에옮긴후다
시클로로포름45mL로삼각
플라스크를세척하여분액여
두로옮긴다.
4.2.3분액여두를약10분간진
탕한후정치시켜층을분리
시킨후클로로포름층을취
한다.
4.2.4위클로로포름추출과정을4.1.2위의표준원액을메탄올로적절
히희석하여표준용액으로한다.
4.2시험용액의조제
4.2.1글루코실세라미드로서약2.4mg에
해당하는시료를100mL비이커에넣
고0.4N메탄올성수산화칼륨용액50
mL을가한후2시간동안교반한다.
4.2.2위액을250mL분액여두
로옮기고증류수40mL을
이용하여비커를씻어분액여
두에합친다.
4.2.3분액여두에클로로포름45mL을가하
여진탕혼합하고층분리가충분히되
도록방치한후클로로포름층을환저
플라스크로옮긴다.이과정을2회더
반복한다.
4.2.4환저플라스크로옮긴클로로포름층을- 126 -2회반복하여회수된클로로
포름층을합한다.
4.2.5클로로포름을감압농축을
통하여농축한다.
4.2.6농축된잔류물을클로로포
름:메탄올=9:1혼합액에용
해시켜20mL로정용
한후0.45μm멤브레인필
터로여과한것을시험용액
으로한다.
5.(생략)
5.1기기분석
항목 조건
시료
주입량10μL
가스
유량2L/min
칼럼
온도37℃
이동상A용액-클로로포름
B용액-클로로포름:메탄올=1:1혼
합액
유속 0.6mL/min
검출기
drift
tube
온도70℃표1.고속액체크로마토그래프 조건(예)60℃에서감압농축한후소량의메탄올
에녹여20mL부피플라스크에옮긴
후메탄올로정용한다.
4.2.5위의시험용액을메탄올로적절히희
석한후0.2μm멤브레인필터로여과
하여시험용액으로한다.
<삭제>
5.(현행과같음)
5.1기기분석
항목 조건
이동상A용액:0.1%개미산
B용액:0.1%개미산
함유메탄올
칼럼온도 40℃
유속 0.35mL/min
주입량 1μL
이온화 ESI,Positive
Capillary
Voltage2.5kV
SourceTemp. 150℃
Desolvation
temperature350℃표1.고속액체크로마토그래프 /질량검출
기/질량검출기조건(예)- 127 -<신설>
5.2계산
5.2.1표준용액및시험용액동일
한양을주입하여앞의시험조
작에따라시험하여다음과같
이글루코실세라미드 함량을
구한다.시간(분)A용액(%)B용액(%)
0991
5973
103565
22199
27991표2.이동상조건
글루코실세라미드 함량
(mg/g)=
시험용액의
농도
(mg/mL)×시험용액의전량
(mL)×1,000시료채취량
(mg)성분Precursor
ion(m/z)Product
ion(m/z)Con
e(V)
글루코실
세라미드74326220표2.질량검출기분석을위한이온
시간(분)A용액(%)B용액(%)
0595
1.5595
2.00100
5.00100
5.1595
10595표3.이동상조건(예)
5.2계산
5.2.1글루코실세라미드 (mg/g)
=C×(a×b)/S×1/1,000
C:시험용액중글루코실세라
마이드의농도(μg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
1/1,000:단위환산계수- 128 -<별첨 1> [별표 3]한국인 영양섭취기준 (현행 )
연    령탄수화물
(g)지방
(g)n-6불포화
지방산 (g)n-3불포화
지방산 (g)단백질
(g)식이섬유
(g)수분
(ml)비타민 C
(mg)티아민
(mg)리보플라민
(mg)니아신
(mg NE비타민 B6
(mg)엽산
(μg DFE)비타민 B12
(μg)판토텐산
(mg)비오틴
(μg)
권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량
영아0～5(개월)
6～1155
9025
252.0
4.50.3
0.813.59.5 700
80035
450.2
0.30.3
0.42
30.1
0.365
800.3
0.51.7
1.85
7
소아1～2(세)
3～515
2010
151,100
1,40040
400.5
0.50.6
0.76
70.6
0.7150
1800.9
1.12
39
11
남자6～8(세)
9～11
12～14
15～18
19～29
30～49
50～64
65～74
75이상25
35
50
55
55
55
50
50
5020
20
25
25
25
25
25
25
251,800
2,000
2,300
2,600
2,600
2,500
2,200
2,100
2,10060
70
100
110
100
100
100
100
1000.7
0.9
1.1
1.3
1.2
1.2
1.2
1.2
1.20.9
1.1
1.5
1.7
1.5
1.5
1.5
1.5
1.59
11
15
17
16
16
16
16
160.9
1.1
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5220
300
400
400
400
400
400
400
4001.3
1.7
2.3
2.7
2.4
2.4
2.4
2.4
2.43
4
5
6
5
5
5
5
515
20
25
30
30
30
30
30
30
여자6～8(세)
9～11
12～14
15～18
19～29
30～49
50～64
65～74
75이상25
35
45
45
50
45
45
45
4515
15
20
20
20
20
20
20
201,700
1,800
2,000
2,100
2,100
2,000
1,900
1,800
1,80060
80
100
100
100
100
100
100
1000.7
0.9
1.1
1.0
1.1
1.1
1.1
1.1
1.10.7
0.9
1.2
1.2
1.2
1.2
1.2
1.2
1.29
11
14
14
14
14
14
14
140.9
1.1
1.4
1.4
1.4
1.4
1.4
1.4
1.4220
300
400
400
400
400
400
400
4001.5
1.9
2.4
2.4
2.4
2.4
2.4
2.4
2.43
4
5
6
5
5
5
5
515
20
25
30
30
30
30
30
30
임신부 +30+5+200+10+0.4+0.4+4+0.8+200+0.2+1+0
수유부 +25+5+700+35+0.4+0.4+5+0.8+150+0.4+2+5
[사단법인 한국영양학회 :한국인 영양섭취기준 (2010년)- 129 -연    령비타민 A
(μg RE)비타민 D
(μg)비타민 E
(mg α-TE)비타민 K
(μg)칼슘
(m g)인
(mg)나트륨
(g)염소
(g)칼륨
(g)마그네슘
(mg)철
(mg)아연
(mg)구리
(μg)불소
(mg)망간
(mg)요오드
(μg)셀레늄
(μg)
권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량권장
섭 취 량충분
섭 취 량
영아0～5(개월)
6～11300
4005
53
44
7200
300100
3000.12
0.370.18
0.560.4
0.730
55 60.3
2.81.7 230
3000.01
0.50 .0 1
0.8130
1708.5
11
소아1～2(세)
3～5300
3005
55
625
30500
600500
5000.7
0.91.1
1.41.7
2.375
1006
73
4290
3300.6
0.81.4
2.080
9020
25
남자6～8(세)
9～11
12～14
15～18
19～29
30～49
50～64
65～74
75이상400
550
700
850
750
750
700
700
7005
5
5
5
5
5
10
10
108
9
10
12
12
12
12
12
1245
55
70
80
75
75
75
75
75700
800
1 ,0 0 0
900
750
750
700
700
700700
1 ,0 0 0
1 ,0 0 0
1 ,0 0 0
700
700
700
700
7001.2
1.3
1.5
1.5
1.5
1.5
1.4
1.2
1.11.8
2.0
2.3
2.3
2.3
2.3
2.1
1.9
1.62.8
3.2
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5150
210
300
400
340
350
350
350
3508
11
14
15
10
10
9
9
95
8
8
10
10
9
9
9
9430
570
740
870
800
800
800
800
8001.0
2.0
2.5
3.0
3.5
3.0
3.0
3.0
3.02.5
3.0
4.0
4.0
4.0
4.0
4.0
4.0
4.0100
110
130
130
150
150
150
150
15030
40
50
60
55
55
55
55
55
여자6～8(세)
9～11
12～14
15～18
19～29
30～49
50～64
65～74
75이상400
500
650
600
650
650
600
600
6005
5
5
5
5
5
10
10
107
8
9
10
10
10
10
10
1045
55
65
65
65
65
65
65
65700
800
900
800
650
650
700
700
700600
900
900
800
700
700
700
700
7001.2
1.3
1.5
1.5
1.5
1.5
1.4
1.2
1.11.8
2.0
2.3
2.3
2.3
2.3
2.1
1.9
1.62.8
3.2
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5150
210
290
340
280
280
280
280
2808
10
13
17
14
14
8
8
85
7
7
9
8
8
8
7
7430
570
740
870
800
800
800
800
8001.0
2.0
2.5
2.5
3.0
2.5
2.5
2.5
2.52.5
3.0
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5100
110
130
130
150
150
150
150
15030
40
50
60
55
55
55
55
55
임신부 + 7 0 +5 +0 +0+ 2 8 0 + 0 +0 +0 +0+40 +10 + 2 .5 + 1 3 0 +0 +0+90 +4
수유부 + 4 9 0 +5 +3 +0+ 3 7 0 + 0 +0 + 0 + 0.4 +0 +0 + 5 .0 + 4 5 0 +0 +0+ 1 8 0 +10
*권장섭취량 :1일 연령별로 권장되는 영양소 섭취량으로서 평균 필요량을 근거로 하여 산출
*충분섭취량 :권장섭취량을 산출할 수 없는 경우 역학조사 결과를 토대로 건강인의 영양소 섭취수준을 기준으로 산출- 130 -<별첨 1> [별표 3]한국인 영양섭취기준 (개정안 )
연     령탄 수 화 물
(g)지 방
(g)n-6계 
지 방 산
(g)n-3계 
지 방 산
(g)단 백 질
(g)수 분(m L)식 이 섬 유
(g)비 타 민A
(μg RE)비 타 민D
(μg)비 타 민E
(m g α-T E)비 타 민K
(μg)비 타 민C
(m g)티 아 민
(m g)리 보 플 라 민
(m g)니 아 신
(m g N E)비 타 민B6
(m g)엽 산
(μg D FE)비 타 민B12
(㎍)
권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량
(총 수 분)권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량
영 아  0～5(개 월)
     6～1160
9025
252.0
4.50.3
0.8159.5 700
800350
4505
53
44
735
450.2
0.30.3
0.42
30.1
0.365
800.3
0.5
유 아  1～2(세)
     3～515
201,100
1,50010
15300
3505
55
625
3035
400.5
0.50.5
0.66
70.6
0.7150
1800.9
1.1
남 자  6～8(세)
     9～11
     12～14
     15～18
     19～29
     30～49
     50～64
     65～74
     75 이 상30
40
55
65
65
60
60
55
551,800
2,100
2,300
2,600
2,600
2,500
2,200
2,100
2,10020
20
25
25
25
25
25
25
25450
600
750
850
800
750
750
700
7005
5
10
10
10
10
10
15
157
9
10
11
12
12
12
12
1245
55
70
80
75
75
75
75
7555
70
90
105
100
100
100
100
1000.7
0.9
1.1
1.3
1.2
1.2
1.2
1.2
1.20.9
1.2
1.5
1.7
1.5
1.5
1.5
1.5
1.59
12
15
17
16
16
16
16
160.9
1.1
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5220
300
360
400
400
400
400
400
4001.3
1.7
2.3
2.7
2.4
2.4
2.4
2.4
2.4
여 자  6～8(세)
     9～11
     12～14
     15～18
     19～29
     30～49
     50～64
     65～74
     75이 상25
40
50
50
55
50
50
45
451,700
1,900
2,000
2,000
2,100
2,000
1,900
1,800
1,80020
20
20
20
20
20
20
20
20400
550
650
600
650
650
600
550
5505
5
10
10
10
10
10
15
157
9
10
11
12
12
12
12
1245
55
65
65
65
65
65
65
6560
80
100
95
100
100
100
100
1000.7
0.9
1.1
1.2
1.1
1.1
1.1
1.1
1.10.8
1.0
1.2
1.2
1.2
1.2
1.2
1.2
1.29
12
15
14
14
14
14
14
140.9
1.1
1.4
1.4
1.4
1.4
1.4
1.4
1.4220
300
360
400
400
400
400
400
4001.3
1.7
2.3
2.4
2.4
2.4
2.4
2.4
2.4
임 신 부+ 15/
+ 30+ 200 + 5+ 70 + 0 + 0 + 0+ 10 + 0.4 + 0.4 + 4 + 0.8 + 220 + 0.2
수 유 부 + 25 + 700 + 5+ 49
0+ 0 + 3 + 0+ 40 + 0.4 + 0.5 + 3 + 0.8 + 150 + 0.4
〔사단법인 〕 보건복지부 , 한국영양학회 : 한국인 영양소 섭취기준 (2015)- 131 -연     령판 토 텐 산
(m g)비 오 틴
(μg)칼 슘
(m g)인
(m g)나 트 륨
(g)염 소
(g)칼 륨
(g)마 그 네 슘
(m g)철
(m g)아 연
(m g)구 리
(μg)불 소
(m g)망 간
(m g)요 오 드
(μg)셀 레 늄
(μg)몰 리 브 덴
(μg)크 롬
(μg)
권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량권 장
섭 취 량충 분
섭 취 량
영 아  0～5(개 월)
     6～111.7
1.95
7210
300100
3000.12
0.370.18
0.560.4
0.730
5560.3
32 240
3100.01
0.50.01
0.8130
1709
110.2
5.0
유 아  1～2(세)
     3～52
29
11500
600450
5500.9
1.01.3
1.52.0
2.380
1006
63
4280
3200.6
0.81.5
2.080
9023
2512
12
남 자  6～8(세)
     9～11
     12～14
     15～18
     19～29
     30～49
     50～64
     65～74
     75 이 상3
4
5
5
5
5
5
5
515
20
25
30
30
30
30
30
30700
800
1,000
900
800
800
750
700
700600
1,200
1,200
1,200
700
700
700
700
7001.2
1.4
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.3
1.11.9
2.1
2.3
2.3
2.3
2.3
2.3
2.0
1.72.6
3.0
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5160
230
320
400
350
370
370
370
3709
10
14
14
10
10
10
9
96
8
8
10
10
10
9
9
9440
580
740
840
800
800
800
800
8001.0
2.0
2.5
3.0
3.5
3.0
3.0
3.0
3.02.5
3.0
4.0
4.0
4.0
4.0
4.0
4.0
4.0100
110
130
130
150
150
150
150
15035
45
60
65
60
60
60
60
6030
25
25
25
2520
25
35
40
35
35
35
35
35
여 자  6～8(세)
     9～11
     12～14
     15～18
     19～29
     30～49
     50～64
     65～74
     75이 상3
4
5
5
5
5
5
5
515
20
25
30
30
30
30
30
30700
800
900
800
700
700
800
800
800550
1,200
1,200
1,200
700
700
700
700
7001.2
1.4
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.3
1.11.9
2.1
2.3
2.3
2.3
2.3
2.3
2.0
1.72.6
3.0
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5150
210
290
340
280
280
280
280
2808
10
16
14
14
14
8
8
75
8
8
9
8
8
7
7
7440
580
740
840
800
800
800
800
8001.0
2.0
2.5
2.5
3.0
2.5
2.5
2.5
2.52.5
3.0
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5100
110
130
130
150
150
150
150
15035
45
60
65
60
60
60
60
6025
25
25
25
2515
20
25
25
25
25
25
25
25
임 신 부 + 1 + 0+ 0 + 0 + 1.5 + 2.3 + 0+ 40 + 10 + 2.5 + 130 + 0 + 0+ 90 + 4 + 5
수 유 부 + 2 + 5+ 0 + 0 + 1.5 + 2.3 + 0.4 + 0 + 0 + 5.0 + 480 + 0 + 0+ 190 + 10 + 20
*권장섭취량:1일연령별로권장되는영양소섭취량으로서평균필요량을근거로하여산출
*충분섭취량:권장섭취량을산출할수없는경우역학조사결과를토대로건강인의영양소섭취수준을기준으로산출
*임신부단백질권장섭취량:임신2,3분기별부가량