Martes 19 de octubre de 2021  DIARIO OFICIAL   
PROYECTO de modificación de los incisos 5.3, 6.7, 7.1, 7.2, 9.1 y 9.5; así como de diversos incisos de los apéndices 
normativos A, B, C, G, H, I y J, de la Norma Oficial Mexicana NOM -210-SSA1 -2014, Productos y servicios. 
Métodos de prueba microbiológicos. Determinación de microorganismos indicadores. Determinación de 
microorganismos patógenos , publicada el 26 de junio de 2015.  
Al margen un sello con el Escudo Nacional, que dice: Estados Unidos Mexicanos. - SALUD. - Secretaría  de 
Salud.  
ALEJANDRO ERNESTO SVARCH PÉREZ, Comisionado Federal para la Protección contra Riesgos 
Sanitarios y Presidente del Comité Consultivo Nacional de Normalización de Regulación y Fomento Sanitario, 
con fundamento en lo dispuesto por los artículos 39 de la Ley Orgánica de la Administración Pública Federal; 
4 de la Ley Federal de Procedimiento Admini strativo; 3o, fracciones XXII y XXIV, 13, apartado A, fracciones I y 
II, 17 bis, fracciones II y III, 194, fracción I, 195, párrafo primero, 197, 199, 201, 210 y 214 de la Ley General 
de Salud; 38, fracción II, 40, fracciones I, III, VII, XI y XIII, 47, fr acción I y 51 de la Ley Federal sobre 
Metrología y Normalización; 28 y 33 del Reglamento de la Ley Federal sobre Metrología y Normalización; 4 y 
15 del Reglamento de Control Sanitario de Productos y Servicios; 3, fracciones I, literal s y II, así como 10, 
fracciones IV y VIII del Reglamento de la Comisión Federal para la Protección contra Riesgos Sanitarios, he 
tenido a bien ordenar la publicación en el Diario Oficial de la Federación, del  
PROYECTO DE MODIFICACIÓN DE LOS INCISOS 5.3, 6.7, 7.1, 7.2, 9.1 y 9. 5; ASÍ COMO DE  DIVERSOS 
INCISOS DE LOS APÉNDICES NORMATIVOS A, B, C, G, H, I Y J, DE LA NORMA OFICIAL MEXICANA 
NOM -210-SSA1 -2014, PRODUCTOS Y SERVICIOS. MÉTODOS DE PRUEBA MICROBIOLÓGICOS. 
DETERMINACIÓN DE MICROORGANISMOS INDICADORES. DETERMINACIÓN DE 
MICRO ORGANISMOS PATÓGENOS , PUBLICADA EN EL DIARIO OFICIAL DE LA  FEDERACIÓN EL 26 
DE JUNIO DE 2015  
El presente Proyecto de Modificación se publica a efecto de que los interesados dentro de los 60 días 
naturales siguientes al de su fecha de publicación en el Diar io Oficial de la Federación, presenten sus 
comentarios por escrito, en medio magnético, en idioma español y con el sustento técnico correspondiente, 
ante el Comité Consultivo Nacional de Normalización de Regulación y Fomento Sanitario, ubicado en 
Oklahoma número 14, planta baja, colonia Nápoles, Código Postal 03810, Ciudad de México, teléfono 
5550805200, extensión 11333, correo electrónico rfs@cofepris.gob.mx.  
Durante el plazo mencionado y de conformidad con lo dispuesto por los artículos 45 y 47, fracción I de la 
Ley Federal sobre Metrología y Normalización, los documentos que sirvieron de base para la elaboración del 
presente Proyecto de Modificación y el Análisis de Impacto Regulatorio, estarán a disposición del público en 
general, en el domicilio del men cionado Comité, para su consulta.  
CONSIDERANDO  
Que el 26 de junio de 2015, se publicó en el Diario Oficial de la Federación la Norma Oficial Mexicana 
NOM -210-SSA1 -2014, Productos y servicios. Métodos de prueba microbiológicos. Determinación de 
microorganis mos indicadores. Determinación de microorganismos patógenos;  
Que dicha Norma entró en vigor a los 180 días naturales, contados a partir del día siguiente al de su 
publicación; salvo sus apéndices C y J; H e I; A, B y F, así como D, E y G, mismos que entrar on en vigor a los 
180, 270, 360 y 460 días naturales posteriores al inicio de su vigencia, respectivamente;  
Que durante la implementación de los métodos previstos en la Norma, se han encontrado diferentes 
errores tipográficos en la descripción de las formu laciones de los medios de cultivo, que pueden generar 
problemas durante la implementación al no encontrar disponibilidad de los componentes que se señalan;  
Que el 15 de mayo de 2015, a través del portal electrónico de la Organización Internacional de 
Estan darización (https://www.iso.org/home.html) se publicó la actualización de la Norma Internacional.  ISO 
16649 -3:2015 Microbiología de los alimentos y alimento de animales. Método horizontal para el recuento de E. 
coli  -glucuro nidasa positivo. Parte 3. Técnica utilizando 5 -bromo -4-cloro -3-indol --D-glucuronido. 2015 
(https://www.iso.org/standard/56824.html), la cual se usa como referencia del apéndice J de esta Norma.  La a 
actualización hace el camb io del medio de cultivo TBGA a TBX, mismo que ya se encontraba descrito  en la  DIARIO OFICIAL  Martes 19 de octubre de 2021  
Norma Oficial Mexicana NOM -210-SSA1 -2014, Productos y servicios. Métodos de prueba microbiológicos. 
Determinación de microorganismos indicadores. Determinación de microorganismos  patógenos;  
Que la referida Norma Internacional ISO 6888 ISO 6888 -1:1999. Microbiología -Guía general para la 
enumeración de S. aureus -técnica de recuento de colonias, 1a. edición (05 -1983), fue publicada en 1983, y 
que en 1999, se emitió una versión actual izada de la misma, publicada en la página de Internet 
https://www.iso.org/standard/23036.html, como Norma Internacional ISO 6888 -1. Microbiología de los 
alimentos y alimentos para animales -Método horizontal para la enumeración de estafilococos coagulasa 
positivo ( S. aureus  y otras especies) -Parte 1 Técnica usando Agar Baird Parker (1999). Y que no presenta 
requisitos adicionales, pero si una explicación más clara de los cálculos que se requieren para la 
interpretación de los resultados y , por lo tanto, la i nclusión de estas modificaciones a la Norma Oficial 
Mexicana NOM -210-SSA1 -2014, Productos y servicios. Métodos de prueba microbiológicos. Determinación de 
microorganismos indicadores. Determinación de microorganismos patógenos, por lo que es necesaria la 
clarificación del cálculo ya descrito.  
Que derivado de las publicaciones mencionadas anteriormente, es necesario realizar las modificaciones a 
los siguientes incisos 5.3, 6.7, 7.1, 7.2, 9.1 y 9.5, Apéndice A normativo, Apéndice B normativo, Apéndice C 
norma tivo, Apéndice G normativo, Apéndice H normativo, Apéndice I normativo y Apéndice J normativo.  
ARTÍCULO ÚNICO. - Se MODIFICAN  los incisos 5.3, 6.7, 7.1, 7.2, 9.1 y 9.5; A.6.2.7.1, A.10, A.10.2.4.2, 
A.10.6.1, A.10.6.2 del Apéndice A Normativo; B.2.6, B.5.4, B.6.4, B.6.5, B.6.6, B.6.8.1, B.7.2, B.7.3, B.7.4, 
B.7.5, B.7.7 y B.9.9 del Apéndice B Normativo; C.9.1.1, C.9.1.1.1, C.9.1.1.2, C.9.1.6, C.9.2.1, C.9.3.1.1, 
C.9.4.5.1, C.9.5.1, C.9.6.1 y C.9.7.2 del Apéndice C Normativo; G.7.1.2, G.7.3.1, G.7.4.1 y G.7.5. 2 del 
Apéndice G Normativo; H.7.1.1.1, H.7.1.2, H.8.4.2, H.8.4.6, H.14.8 y H.14.8.1 del Apéndice H Normativo; I.1, 
I.4.2, I.4.3, I.4.4, I.4.5, I.6.1, I.6.14.1, I.7.1, I.7.2, I.7.3, I.8.1, I.8.3, I.8.4, I.13.1, I.13.1.1, I.13.2, I.13.2.1 e I .13.3 
del Apéndi ce I Normativo; así como J.5.1.1 del Apéndice J Normativo; se ADICIONAN  los incisos  B.6.4.1, 
B.6.4.2, B.6.5.1, B.6.5.2, B.6.5.3, B.6.5.4, B.7.2.1, B.7.3.1, B.7.5.1, B.7.7.1 y B.7.7.2 del Apéndice B 
Normativo; así como I.4.6 e I.13.4 del Apéndice I Normativ o, y se ELIMINAN  dos párrafos del inciso A.10  del 
Apéndice A Normativo; así como los incisos H.7.1.4, H.8.4.7 y H.8.4.8  del Apéndice H Normativo  de la 
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM -210-SSA1 -2014, PRODUCTOS Y SERVICIOS. MÉTODOS  DE PRUEBA 
MICROBIOLÓGICOS. DETER MINACIÓN DE MICROORGANISMOS INDICADORES. DETERMINACIÓN DE 
MICROORGANISMOS PATÓGENOS , PUBLICADA EN EL DIARIO OFICIAL DE LA FEDERACIÓN EL 26  DE 
JUNIO DE 2015, para quedar como sigue:  
ÍNDICE  
Apéndice I Normativo.  Método aprobado para la estimación de la densi dad de E. coli  por la técnica  del 
NMP.  
5.3 Para aquellos casos en los que las personas físicas o morales que soliciten la validación de los 
métodos que utilicen para fines de control, inspección o programa específico, la COFEPRIS, los validará 
conforme a l o dispuesto en las "Guías para la aprobación de métodos alternativos", disponibles para su 
consulta en la página de internet https://www.gob.mx/cms/uploads/attachment/file/236920/CCAYAC -CR-02.pdf  
6.7 Los equipos de incubación deberán contar con termómetros  con división mínima no mayor a la mitad 
de la variación requerida en el método de prueba, por ejemplo cuando se indique una variación de ± 1 º C, el 
termómetro deberá tener una división mínima de 0.5 º C.  
7.1 Todos los medios de cultivo deberán usarse has ta haber aprobado el control de calidad adecuado para 
su uso, con excepción de los medios de cultivo que tengan como restricción el tiempo de uso, en esos casos 
los resultados del análisis no podrán ser emitidos hasta haber completado el control de calidad  de los medios 
de cultivo. La caducidad de los medios de cultivo una vez preparados deberá ser demostrada en el laboratorio 
bajo las condiciones de almacenamiento particulares establecidas por el propio laboratorio . 
7.2 Pueden utilizarse medios de cultivo preparados en el laboratorio por ingrediente, medios de cultivo 
preparado en polvo o listo para su uso, siempre que cumplan con la formulación descrita en el método. Las 
cantidades de los componentes, dependiendo de su origen, pueden diferir con lo especif icado en esta Norma, 
en ese caso el fabricante, deberá justificar su equivalencia en la hoja técnica del medio de cultivo.  
9.1 Norma Internacional ISO 16649 -3:2015. Microbiología de los alimentos y alimento de animales. 
Método horizontal para el recuento d e E. coli   -glucuronidasa positivo. Parte 3. Técnica utilizando 5 -bromo -4-
cloro -3-indol --D-glucuronido. Primera edición 2015.  Martes 19 de octubre de 2021  DIARIO OFICIAL   
9.5 Norma Internacional ISO 6888 -1:1999. Microbiología de los alimen tos y alimentos para  animales -
Método horizontal para la enumeración de estafilococos coagulasa positivo ( S. aureus  y otras especies) -Parte 
1 Técnica usando Baird Parker Agar Medium (1999).  
13. Apéndices  
Apéndice A Normativo.  
Método de referencia para el ai slamiento de Salmonella  spp. 
A.6.2.7.1  Huevo en cascarón.  Eliminar cualquier material ajeno adherido a la superficie del cascarón. 
Desinfección del cascarón: Preparar la solución desinfectante (1:3) que consiste en adicionar tres partes de 
una solución de etanol o isopropanol al 70% a una parte de solución de yodo/yoduro de potasio. Preparar una 
solución de alcohol al 70% diluyendo 700mL de etanol al 100% hasta completar un volumen final de 1000mL 
de agua destilada estéril o bien diluir 700mL de alcohol al 95% con agua destilada estéril hasta completar un 
volumen final de 950mL. La solución de yodo/yoduro de potasio se prepara como sigue: Pesar 100g de 
yoduro de potasio y disolver en 200mL -300mL de agua destilada estéril. Adicionar 50g de yodo y calentar 
suavemente con agitación constante hasta disolver el yodo. Disolver esta solución hasta completar un 
volumen final de 1000mL de agua destilada estéril y almacenar en una botella ámbar con tapón de vidrio en la 
oscuridad. Sumergir los huevos en esta solución p or al menos 10s, sacarlos y dejar secar al aire. La muestra 
de laboratorio consiste de 20 huevos, de una muestra de 50 huevos tomados en el punto de muestreo o punto 
de venta. Abrir los huevos en condiciones asépticas con guantes estériles y pasar a un rec ipiente estéril, 
cambiar guantes entre cada muestra. Evitar que fragmentos del cascarón caigan en el contenedor. Mezclar 
completamente las yemas y claras con una cuchara o cualquier otro instrumento estéril. Mantener las 
muestras a temperatura ambiente (20 °C-24°C) por 96h ± 2h. Después de este tiempo, tomar 25mL o 25g de la 
mezcla anterior y 25mL de un CST de prueba (testigo) en un contenedor de 500mL y agregar 225mL de CST 
suplementado con sulfato ferroso (35mg de sulfato ferroso a 1000mL de CST). Mezclar bien por agitación. 
Dejar en reposo durante 60 min ± 5min a temperatura ambiente. Mezclar nuevamente por agitación y 
determinar pH con papel indicador. Ajustar el pH, si es necesario, a 6.8 ± 0.2. Incubar 24h ± 2h a 36°C ± 1°C. 
Continuar como se indica en el inciso A.7.2. de esta Norma.  
A.10 FORMULACIONES Y PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO.  
A.10.2.4.2 Preparación:  Agregar 1000mL de la solución A, 100mL de la solución B y 10mL de la solución 
C. Ajustar el pH, si es necesario, de tal manera que después de la esterilización sea de 5.2 ± 0.2. Antes de su 
uso, distribuir porciones de 10mL a cada tubo. Esterilizar a 115°C por 15 min. Almacenar el medio preparado 
a 3°C ± 2°C, utilizar el medio el mismo día de su preparación.  
Nota: La composición final del medio com pleto será de: Digerido enzimático de soya, 4.5g/L; NaCl, 7.2g/L; 
KH2PO 4 + K 2HPO 4, 1.44g/L; MgCl 2, 13.4g/L o MgCl 2.6H 2O, 28.6g/L; oxalato de verde malaquita, 0.036g/L. 
Siempre que sea posible, este medio debe prepararse por sus componentes individuales. Cu ando se usen 
medios formulados comercialmente, los usuarios deben observar que hay formulaciones y condiciones de 
incubación diferentes a las descritas en esta Norma. Se deberá considerar que el uso de medios de cultivo 
con formulaciones diferentes y/o con diciones de incubación diferentes a las descritas en esta Norma serán 
considerados como métodos alternativos a los establecidos en esta Norma, por lo tanto deberán cumplir con 
lo indicado en el inciso 5.3 de esta Norma.  
A.10.6.1 Fórmulas.  
Fórmula 1   DIARIO OFICIAL  Martes 19 de octubre de 2021  
Extract o de carne  
Extracto de levadura  
Peptona  
NaCl  
Lactosa  
Sacarosa  
Glucosa  
Citrato de fierro (III)  
Tiosulfato de sodio  
Rojo de fenol  
Agar  
Agua  3.0g 
3.0g 
20.0g  
5.0g 
10.0g  
10.0g  
1.0g 
0.3g 
0.3g 
0.024g  
9g a 18g  
1000mL  
pH final 7.4 ± 0.2 
Fórmula 2  
Extracto de carne  
Extracto de levadura  
Peptona  
Proteosa peptona  
NaCl  
Lactosa  
Sacarosa  
Glucosa  
FeSO 4 
Tiosulfato de sodio  
Rojo de fenol  
Agar  
Agua  3.0g 
3.0g 
15.0g  
5.0g 
5.0g 
10.0g  
10.0g  
1.0g 
0.3g 
0.3g 
0.024g  
12.0g  
1000mL  
pH final 7.3 ± 0.2  
Fórmula 3  Martes 19 de octubre de 2021  DIARIO OFICIAL   
Extracto de carne  
Extracto  de levadura  
Peptona de caseina  
Proteosa peptona  
NaCl  
Lactosa  
Sacarosa  
Glucosa  
FeSO 4 
Tiosulfato de sodio  
Rojo de fenol  
Agar  
Agua  3.0g 
3.0g 
15.0g  
5.0g 
5.0g 
10.0g  
10.0g  
1.0g 
0.2g 
0.3g 
0.024g  
12.0g  
1000mL  
pH final 7.4 ± 0.2  
A.10.6.2.  De cualquiera de las 3 f órmulas disolver los ingredientes o seguir las instrucciones de 
preparación del fabricante.  
Apéndice B Normativo.  
Método de referencia para la estimación de la cuenta de S. aureus.  
B.2.6  Baño de agua capaz de operar a 36°C ± 1°C.  
B.5.4  Productos de la pesc a 
Dependiendo de la muestra seguir lo indicado en el inciso I.6 de esta Norma.  
B.6.4.  Invertir las placas e incubar por 24h ± 2h a 36°C ± 1°C, marcar en la base de la placa la posición de 
las colonias típicas y atípicas, re -incubar por 24h ± 2h 36°C ± 1°C,  marcar en la base de la placa la posición 
de las nuevas colonias típicas y atípicas.  
B.6.4.1  Colonias Típicas:  Son colonias negras o grises, circulares, brillantes, convexas, lisas, de diámetro 
de 1mm a 1.5 mm a las 24h de incubación y 1.5 mm a 2.5 mm des pués de 48h de incubación, rodeadas por 
una zona clara que puede ser parcialmente opaca. Después de 24h de incubación, en esa zona clara, se 
puede observar un halo opalescente en la periferia de las colonias.  
B.6.4.2 Colonias Atípicas: Son colonias de las mismas dimensiones de las colonias típicas, pueden ser 
negras brillantes con o sin un pequeño borde blanco, la zona clara es muy pequeña o no visible, y el halo 
opalescente no está presente o es apenas visible. También son colonias atípicas las colonias gr ises sin zona 
clara, del mismo tamaño que las colonias típicas. Hay bacterias de géneros distintos al Staphylococcus, que 
pueden dar la morfología colonial típica o atípica, por lo que la observación microscópica usando una tinción 
de Gram puede ayudar en la distinción del género.  
B.6.5 Seleccionar la dilución adecuada  
B.6.5.1  En la mayoría de los casos seleccionar las placas que tengan menos de 300 colonias en total y 
menos de 150 colonias sospechosas (típicas y atípicas) de S. aureus ; si no es posible, se leccionar las placas 
de las diluciones más altas no obstante tengan más de las colonias indicadas. Seleccionar por placa un 
número de colonias para confirmar. (Si solo están presentes colonias típicas en general seleccionar 5 colonias 
típicas “ts”. Si solo  están presentes colonias atípicas en general seleccionar 5 colonias atípicas “as”. Si hay de 
ambos tipos de colonias seleccionar colonias tanto típicas “ts” como atípicas “as”, por lo general seleccionar 
solo 5 colonias en total). Realizar la tinción de G ram, en el caso de no observar cocos Gram positivos,  la 
colonia se tomará como negativa para S. aureus , por lo contrario si se observan cocos se seguirá con  su 
confirmación.  
B.6.5.2  Cuando en la primera dilución se cuenten menos de 15 colonias sospechosas por placa. 
Seleccionar por cada placa 5 colonias típicas, 5 colonias atípicas o todas las colonias típicas y todas las 
colonias atípicas, lo que sea menor. A las colonias seleccionadas realizar tinción de Gram, en el caso de 
observar una morfología diferen te a cocos Gram positivos, la colonia se tomará como negativa para S. aureus , 
si se observan cocos Gram positivos se seguirá con su confirmación.   DIARIO OFICIAL  Martes 19 de octubre de 2021  
B.6.5.3 . Si hay menos de 15 colonias típicas o atípicas en la dilución más baja seleccionar: 5 colonias 
típica s o todas las existentes en la placa, lo que sea menor y 5 colonias atípicas o todas las existentes en la 
placa, lo que sea menor. A las colonias seleccionadas realizar tinción de Gram, en el caso de observar una 
morfología diferente a cocos Gram positivos , la colonia se tomará como negativa para S. aureus , si se 
observan cocos Gram positivos se seguirá con su confirmación y seguir para el cálculo lo indicado en el  inciso 
B.7.5 de esta Norma.  
B.6.5.4 Cuando se siembre un 1mL dividido en 3 placas (0.3mL, 0.3 mL y 0.4mL), considerar las tres 
placas como una sola placa. Si la cuenta es mayor que 15 UFC seleccionar 5 colonias sospechosas entre las 
3 placas, es decir, cuando solo existan colonias típicas, seleccionar 5 colonias típicas, cuando solo existan 
colonia s atípicas, seleccionar 5 colonias atípicas, cuando existan colonias típicas y atípicas seleccionar en 
total 5 colonias incluyendo típicas y atípicas. A las colonias seleccionadas realizar tinción de Gram, en el caso 
de observar una morfología diferente a cocos Gram positivos, la colonia se tomará como negativa para  S. 
aureus , si se observan cocos Gram positivos se seguirá con su confirmación.  Si la cuenta de las 3 placas es 
menor que 15 UFC considerar las tres placas como una sola y seguir lo indicado en e l inciso B.6.5.2, de esta 
Norma.  
B.6.6  Cuando las placas de la dilución más baja tengan menos de 15 colonias sospechosas (típicas y/o 
atípicas) se debe agregar la nota de "valor estimado" al reporte de los resultados.  
B.6.8.1 Prueba de coagulasa.  Seguir la s instrucciones del proveedor del plasma. En general, sembrar 
cada colonia seleccionada (coco Gram positivo) en tubos con 0.5mL de BHI y en tubos con AST. Utilizar 
simultáneamente un control positivo de S. aureus  y un control negativo de S. epidermidis . Incubar a  36°C ± 
1°C, durante 20h a 24h. Mantener los cultivos en AST a no más de 27°C para pruebas posteriores. Mezclar 
0.1mL del cultivo en BHI con 0.3mL de plasma de conejo con EDTA. Incubar a 36°C ± 1°C y observar 
periódicamente a intervalos de 1h durant e las primeras 4h a 6h; si no hay formación de coágulo, observar 
hasta las 24h. Considerar la prueba positiva cuando el coágulo se forma completamente y es firme al invertir 
el tubo. Cuando los resultados de la coagulasa o la termonucleasa no permitan conc luir la confirmación de  S. 
aureus , se deberán realizar las pruebas auxiliares, descritas en el inciso B.6.9, de esta Norma.  
B.7.2  Cálculo del número “a” de S. aureus  confirmado por placa.  
B.7.2.1  Calcule el número de colonias confirmadas de S. aureus  por p laca “a” utilizando la  fórmula 
siguiente:  
 
ts es el número de colonias típicas seleccionadas a confirmar  
as es el número de colonias atípicas seleccionadas a confirmar  
tc es el número de colonias típicas confirmadas  
ac es el número de colonias atípicas co nfirmadas  
t es el número de colonias típicas contadas en la placa  
a es el número de colonias atípicas contadas en la placa  
Redondear los resultados a un número entero.  
B.7.3 Cálculo del número de S. aureus  confirmado por muestra “N”.  
B.7.3.1  Para las placa s con menos de 300 colonias, de las cuales existan menos de 150 colonias típicas 
y/o atípicas en dos diluciones consecutivas, calcular el número de S. aureus  por placa como se indica en el 
inciso B.7.2 de esta Norma y calcular el número N como una media po nderada de las dos diluciones 
sucesivas, usando la ecuación siguiente:  
 
 a es la suma de las cuentas encontradas en las placas.  
V es el número de mL en cada placa, en mL.  
n1 es el número de placas seleccionado en la primer dilución.  
n2 es el número de pl acas seleccionado en la segunda dilución.  
d es el factor de dilución seleccionado en la primer dilución.  Martes 19 de octubre de 2021  DIARIO OFICIAL   
Redondear los resultados utilizando dos cifras significativas.  
B.7.4  Reportar los resultados como el número de S. aureus por mL o g  de producto.  
B.7.5 Estimación del cuentas bajas “Ne”.  
B.7.5.1  Si las dos placas de la muestra directa o de la primera dilución contiene menos de 15 colonias, 
reportar los resultados como sigue:  
a) Para productos líquidos, estime el número de S. aureus por mL.  
 
Ne es el núme ro estimado de colonias confirmadas de S. aureus . 
a es el número de colonias confirmadas en las dos placas.  
V es el volumen inoculado en las placas.  
b) Para otros productos, estime el número de S. aureus por g.  
 
Ne es el número estimado de colonias conf irmadas de S. aureus . 
a es el número de colonias confirmadas en las dos placas.  
V es el volumen inoculado en las placas.  
d es el factor de dilución en la primer dilución.  
B.7.7  Ejemplos para el cálculo de S. aureus . 
B.7.7.1 Se analizaron 25g de una muest ra, se realizaron 3 diluciones decimales.  
De cada dilución se inoculó 0.1mL por duplicado.  
Después de la incubación se cuentan las siguientes colonias por placa:  
 Total de colonias  Colonias Típicas  Colonias Atípicas  
Dilución 10-1 Incontable  No aplica  No a plica 
Dilución 10-2 201 / 198  68 / 85  35 / 56  
Dilución 10-3 20 / 22  6 / 4 3 / 4 
En general se seleccionan 5 colonias por placa para confirmar y se obtienen los siguientes resultados:  
Dilución seleccionada  Total de colonias 
sospechosas  Colonias 
seleccion adas  Colonias 
confirmadas  
10-2 Típicas  65 / 85  2 / 3 2 / 1 
Atípicas  35 / 56  3 / 2 1 / 0 
10-3 Típicas  3 / 7 3 / 5 3 / 5 
Atípicas  0 / 0 No aplica  No aplica  
 
Se calcula el total de colonias en cada placa.  
Dilución seleccionada  Cálculo  Colonias confirma das por 
placa. “a”  Redondear a 
números enteros  
10-2 Placa 1  (2/2*68)+(1/3*35)=  79.67  80 
Placa 2  (1/3*85)+(0/2*56)=  28.33  28 
10-3 Placa 1  (3/3*3)=  3 3 
Placa 2  (5/5*7)=  7 7 
 
Entonces  
N=(80+28+3+7) / 0.1 (2+ 0.1 (2)) 10-2  DIARIO OFICIAL  Martes 19 de octubre de 2021  
N=118 / 0.0022  
N=53 636.36  
El resultado después del redondeo a dos cifras significativas quedaría como: 5.4 x 104 UFC/g  
B.7.7.2 Se analizaron 25g de una muestra, se realizaron 3 diluciones decimales.  
De cada dilución se inoculó 0.1mL por duplicado  
Después de la incubación se cuentan l as siguientes colonias por placa:  
  Total de 
colonias  Colonias 
Contadas  
Típicas / Atípicas  Colonias 
seleccionadas  
Típicas / Atípicas  Colonias 
confirmadas  
Típicas / Atípicas  
Dilución 10-1 Placa 1  209 10 / 4  5 / 4 4 / 3 
Placa 2  208 12 / 2  5 / 2 2 / 2 
Dilución 10-2 Placa 1  22 1 / 2 1/2 1/1 
Placa 2  24 1 / 1 1/1 0/0 
Dilución 10-3 Placa 1  1 / 2 No aplica  No aplica  No aplica  
Placa 2  0 / 0 No aplica  No aplica  No aplica  
 
Se calcula el total de colonias en cada placa.  
Dilución seleccionada  Cálculo  Colonias 
confirmadas 
por placa. “a”  Redondear 
a números 
enteros  
10-1 Placa 1  (4/5*10)+(3/4*4) =  11 11 
Placa 2  (2/5*12)+(2/2*2) =  6.8 7 
10-2 Placa 1  (1/1*1)+(1/2*2) =  2 2 
Placa 2  (0/1*1)+ (0/1*1) =  0 0 
Entonces  
Ne=(11+7+2+0) / 0.1 (2+0.1(2)) 10-1 
N= 20 / 0.02 2 
N=909.09  
El resultado después del redondeo a dos cifras significativas quedaría como: 910 UFC/g Valor estimado.  
B.9.9 Caldo para fermentación de carbohidratos  
Seguir las instrucciones de preparación conforme se describe en el inciso C.9.8 de esta Norma, 
sustituyendo ramnosa o xilosa por manitol o glucosa, según se requiera.  
Apéndice C Normativo.  
Método de referencia para el aislamiento de L. monocytogenes . 
C.9.1.1 Medio Base.  
C.9.1.1.1 Fórmula.  
Peptona de Carne  
Triptona  
Extracto de Carne de Res  
Extracto d e Levadura  
Cloruro de Sodio  
Fosfato dibásico de sodio dihidratado  
Fosfato dihidrogenado de potasio  
Esculina  
Agua  5.0g 
5.0g 
5.0g 
5.0g 
20.0g  
12.0g  
1.35g  
1.0g 
1000mL  Martes 19 de octubre de 2021  DIARIO OFICIAL   
C.9.1.1.2 Preparación:  Disolver los componentes de la base en agua, calentando si es necesar io. Ajustar 
el pH, si se requiere para que después de la esterilización el pH se encuentre entre 7.2 ± 0.2 a 25°C. Distribuir 
la base en matraces con capacidad apropiada para la prueba. Esterilizar por 15 min en la autoclave a 121°C.  
C.9.1.6 Medio Completo . 
C.9.2.1 Medio Base.  
C.9.3.1.1 Fórmula.  
Peptonas  
Almidón  
Cloruro de sodio  
Agar  
Esculina  
Citrato de amonio, hierro III  
Cloruro de Litio  
Agua  23.0g  
1.0g 
5.0g 
De 9 a 18g(1) 
1.0g 
0.5g 
15.0g  
960mL  
(1) Dependiendo de la fuerza gel del agar.   
C.9.4.5.1 Fórmula . 
Base Agar PALCAM  
Solución de Sulfato de Polimixina B  
Solución de Clorhidrato de acriflavina  
Solución de Ceftazidima sódica pentahidratada  960mL  
10mL  
10mL  
20mL  
C.9.5.1 Fórmula.  
Extracto de levadura  
Agar  
Agua  6.0g 
de 9 a 18g(2) 
1000mL  
Triptona  
Peptona de  Soya  
Cloruro de sodio  
Fosfato dipotá sico 
Glucosa  
(2) Dependiendo de la fuerza del agar  17.0g  
3.0g 
5.0g 
2.5g 
2.5g 
C.9.6.1 Fórmula.  
Extracto de levadura  
Agua  6.0g 
1000mL  
Triptona  
Peptona de Soya  
Cloruro de sodio  
Fosfato dipotásico  
Glucosa  17.0g  
3.0g 
5.0g 
2.5g 
2.5g 
C.9.7.2 Preparación:  Disuelva los componentes en agua hirviendo con excepción de la sangre. Ajustar  el 
pH si es necesario a modo que después de la esterilización sea de 7.2 ± 0.2 a 25°C, vierta el medio en 
matraces de capacidad apropiada, para las pruebas. Esterilice por 15 min en autoclave a 121°C. Agregar  5-7 
mL de sangre de carnero  desfibrinada por cada 100mL del medio base previamente atemperada a 47°C, 
mezclar bien. Vierta el medio en cajas Petri en proporciones adecuadas para las pruebas, permita solidificar. 
Existen pres entaciones listas para su uso, é stas deberán estar elaboradas con un medio nutritivo y 
suplementadas con sangre de cordero desfibrinada.   DIARIO OFICIAL  Martes 19 de octubre de 2021  
Apéndice G Normativo.  
Método aprobado para el monitoreo de Enterococos fecales recomen dado para el monitoreo de 
aguas para uso recreativo.  
G.7.1.2 Preparación:  Disolver los ingredientes o 37.0g del medio deshidratado en un matraz con 1L de 
agua destilada, distribuir volúmenes de 10mL en tubos de ensaye con tapón de rosca. Esterilizar en aut oclave 
a 121°C por 15 min. El pH final del medio deberá ser de 7.4 ± 0.2. Si el medio no se va a utilizar el mismo día 
de su preparación y esterilización, justo antes de la inoculación se deberá calentar en baño de agua a 
ebullición por varios minutos para  eliminar el oxígeno absorbido y enfriar rápidamente . 
G.7.3.1  Fórmula:  El agar BHI contiene los mismos ingredientes que el caldo BHI pero adicionando 15 g de 
agar por cada L de medio.  
G.7.4.1 Fórmula.  
Extracto de carne  3.0g 
Peptona  5.0g 
Sales biliares  40.0g 
Esculina  1.0g 
Citrato férrico  0.5g 
Agar  15.0g  
Agua destilada  1.0L 
G.7.5.2 Preparación: Reactivos que se agregan después de esterilizar: Mezclar 0.24g de ácido nalidíxico 
en 5mL de agua destilada, agregar unas gotas de NaOH 0.1N hasta disolución y agregar al medio mEI y 
mezclar. Agregar 0.02g de cloruro de trifenil tetrazolio (TTC).  
Alternativamente se pueden agregar las siguientes soluciones:  
a) Ácido nalidíxico. Agregar 0.48g de ácido nalidíxico y 0.4mL de NaOH 10N a 10mL de agua destilada y 
mezcl ar. Esterilizar la solución por filtración y adicione 5.2mL por cada L de medio.  
b) Cloruro de trifeniltetrazolium (TTC): Agregar 0.1g de TTC a 10mL de agua destilada y calentar para 
disolver. Esterilizar la solución por filtración y adicione 2mL por cada L de medio.  
c) Vaciar en cajas de 9mm x 50mm aproximadamente de 4mL a 6mL y dejar solidificar. El pH final del 
medio deberá estar entre 7.1 ± 0.2. Conservar en refrigeración.  
Apéndice H Normativo.  
Método aprobado para la estimación de la densidad de Colifo rmes totales, fecales y E. coli  por la 
técnica del NMP presentes en muestras de alimentos para consumo humano y agua.  
H.7.1.1.1  Agua para uso y consumo humano y envasada. Transferir 5 porciones de 20mL, 10 porciones de 
10 mL o una porción de 100mL. Consult ar la tabla H.14.2.2, de esta Norma, para seleccionar las diferentes 
concentraciones de caldo lauril de acuerdo a los diferentes volúmenes de muestra a inocular.  
H.7.1.2  Prueba confirmativa. De cada tubo que muestre formación de gas, tomar una asada y semb rar en 
un número igual de tubos de EC (Coliformes Fecales) o Caldo verde brillante (Coliformes Totales) para la 
prueba confirmativa; inocular en tubos de EC un control positivo de E. coli  cuantificado a < 30 UFC y un 
control negativo de Enterobacter aeroge nes e incubar con las muestras.  
H.7.1.4. Se elimina  
H.8.4.2 Tabla 2. NMP para 100 g o mL de muestra cuando se usan 5 tubos o  porciones en cada una 
de tres diluciones con series geométricas.   
No. de Tubos positivos  No. de Tubos positivos  No. de Tubos positi vos No. de Tubos positivos  No. de Tubos positivos  No. de Tubos positivos  
10 
mL 1 
mL 0.1 
mL NMP  10 
mL 1 
mL 0.1 
mL NMP  10 
mL 1 
mL 0.1 
mL NMP  10 
mL 1 
mL 0.1 
mL NMP  10 
mL 1 
mL 0.1 
mL NMP  10 
mL 1 
mL 0.1 
mL NMP  
0 0 0 <1.8 1 0 0 2.0 2 0 0 4.5 3 0 0 7.8 4 0 0 13 5 0 0 23 
0 0 1 1.8 1 0 1 4.0 2 0 1 6.8 3 0 1 11 4 0 1 17 5 0 1 31 
0 0 2 3.6 1 0 2 6.0 2 0 2 9.1 3 0 2 13 4 0 2 21 5 0 2 43 
0 0 3 5.4 1 0 3 8.0 2 0 3 12 3 0 3 16 4 0 3 25 5 0 3 58 Martes 19 de octubre de 2021  DIARIO OFICIAL   
0 0 4 7.2 1 0 4 10 2 0 4 14 3 0 4 20 4 0 4 30 5 0 4 76 
0 0 5 9.0 1 0 5 12 2 0 5 16 3 0 5 23 4 0 5 36 5 0 5 95 
0 1 0 1.8 1 1 0 4.0 2 1 0 6.8 3 1 0 11 4 1 0 17 5 1 0 33 
0 1 1 3.6 1 1 1 6.1 2 1 1 9.2 3 1 1 14 4 1 1 21 5 1 1 46 
0 1 2 5.5 1 1 2 8.1 2 1 2 12 3 1 2 17 4 1 2 26 5 1 2 63 
0 1 3 7.3 1 1 3 10 2 1 3 14 3 1 3 20 4 1 3 31 5 1 3 84 
0 1 4 9.1 1 1 4 12 2 1 4 17 3 1 4 23 4 1 4 36 5 1 4 110 
0 1 5 11 1 1 5 14 2 1 5 19 3 1 5 27 4 1 5 42 5 1 5 130 
0 2 0 3.7 1 2 0 6.1 2 2 0 9.3 3 2 0 14 4 2 0 22 5 2 0 49 
0 2 1 5.5 1 2 1 8.2 2 2 1 12 3 2 1 17 4 2 1 26 5 2 1 70 
0 2 2 7.4 1 2 2 10 2 2 2 14 3 2 2 20 4 2 2 32 5 2 2 94 
0 2 3 9.2 1 2 3 12 2 2 3 17 3 2 3 24 4 2 3 38 5 2 3 120 
 
0 2 4 11 1 2 4 15 2 2 4 19 3 2 4 27 4 2 4 44 5 2 4 150 
0 2 5 13 1 2 5 17 2 2 5 22 3 2 5 31 4 2 5 50 5 2 5 180 
0 3 0 5.6 1 3 0 8.3 2 3 0 12 3 3 0 17 4 3 0 27 5 3 0 79 
0 3 1 7.4 1 3 1 10 2 3 1 14 3 3 1 21 4 3 1 33 5 3 1 110 
0 3 2 9.3 1 3 2 13 2 3 2 17 3 3 2 24 4 3 2 39 5 3 2 140 
0 3 3 11 1 3 3 15 2 3 3 20 3 3 3 28 4 3 3 45 5 3 3 180 
0 3 4 13 1 3 4 17 2 3 4 22 3 3 4 31 4 3 4 52 5 3 4 210 
0 3 5 15 1 3 5 19 2 3 5 25 3 3 5 35 4 3 5 59 5 3 5 250 
0 4 0 7.5 1 4 0 11 2 4 0 15 3 4 0 21 4 4 0 34 5 4 0 130 
0 4 1 9.4 1 4 1 13 2 4 1 17 3 4 1 24 4 4 1 40 5 4 1 170 
0 4 2 11 1 4 2 15 2 4 2 20 3 4 2 28 4 4 2 47 5 4 2 220 
0 4 3 13 1 4 3 17 2 4 3 23 3 4 3 32 4 4 3 54 5 4 3 280 
0 4 4 15 1 4 4 19 2 4 4 25 3 4 4 36 4 4 4 62 5 4 4 350 
0 4 5 17 1 4 5 22 2 4 5 28 3 4 5 40 4 4 5 69 5 4 5 430 
0 5 0 9.4 1 5 0 13 2 5 0 17 3 5 0 25 4 5 0 41 5 5 0 240 
0 5 1 11 1 5 1 15 2 5 1 20 3 5 1 29 4 5 1 48 5 5 1 350 
0 5 2 13 1 5 2 17 2 5 2 23 3 5 2 32 4 5 2 56 5 5 2 540 
0 5 3 15 1 5 3 19 2 5 3 26 3 5 3 37 4 5 3 64 5 5 3 920 
0 5 4 17 1 5 4 22 2 5 4 29 3 5 4 41 4 5 4 72 5 5 4 1600  
0 5 5 19 1 5 5 24 2 5 5 32 3 5 5 45 4 5 5 81 5 5 5 >1600  
Referencia: Recommended Procedures for the examinati on of sea water and shellfish. 4th. Ed. 1970. APHA  
H.8.4.6 Tabla 6. NMP por g de muestra e intervalos de confianza del 95%, utilizando cinco tubos con 
0.1g, 0.01g y 0.001g de muestra.  
Tubos Positivos  NMP/g  Intervalo de 
confianza  Tubos Positivos  NMP/g  Intervalo de 
confianza  
0.1 0.01 0.001  Bajo  Alto 0.1 0.01 0.001  Bajo  Alto 
0 0 0 <1.8 – 6.8 4 0 2 21 6.8 40 
0 0 1 1.8 0.09 6.8 4 0 3 25 9.8 70 
0 1 0 1.8 0.09 6.9 4 1 0 17 6 40 
0 1 1 3.6 0.7 10 4 1 1 21 6.8 42 
0 2 0 3.7 0.7 10 4 1 2 26 9.8 70 
0 2 1 5.5 1.8 15 4 1 3 31 10 70 
0 3 0 5.6 1.8 15 4 2 0 22 6.8 50 
1 0 0 2 0.1 10 4 2 1 26 9.8 70 
1 0 1 4 0.7 10 4 2 2 32 10 70 
1 0 2 6 1.8 15 4 2 3 38 14 100  DIARIO OFICIAL  Martes 19 de octubre de 2021  
1 1 0 4 0.7 12 4 3 0 27 9.9 70 
1 1 1 6.1 1.8 15 4 3 1 33 10 70 
1 1 2 8.1 3.4 22 4 3 2 39 14 100 
1 2 0 6.1 1.8 15 4 4 0 34 14 100 
1 2 1 8.2 3.4 22 4 4 1 40 14 100 
1 3 0 8.3 3.4 22 4 4 2 47 15 120 
1 3 1 10 3.5 22 4 5 0 41 14 100 
1 4 0 11 3.5 22 4 5 1 48 15 120 
2 0 0 4.5 0.79 15 5 0 0 23 6.8 70 
2 0 1 6.8 1.8 15 5 0 1 31 10 70 
2 0 2 9.1 3.4 22 5 0 2 43 14 100 
2 1 0 6.8 1.8 17 5 0 3 58 22 150 
2 1 1 9.2 3.4 22 5 1 0 33 10 100 
2 1 2 12 4.1 26 5 1 1 46 14 120 
 
2 2 0 9.3 3.4 22 5 1 2 63 22 150 
2 2 1 12 4.1 26 5 1 3 84 34 220 
2 2 2 14 5.9 36 5 2 0 49 15 150 
2 3 0 12 4.1 26 5 2 1 70 22 170 
2 3 1 14 5.9 36 5 2 2 94 34 230 
2 4 0 15 5.9 36 5 2 3 120 36 250 
3 0 0 7.8 2.1 22 5 2 4 150 58 400 
3 0 1 11 3.5 23 5 3 0 79 22 220 
3 0 2 13 5.6 35 5 3 1 110 34 250 
3 1 0 11 3.5 26 5 3 2 140 52 400 
3 1 1 14 5.6 36 5 3 3 180 70 400 
3 1 2 17 6 36 5 3 4 210 70 400 
3 2 0 14 5.7 36 5 4 0 130 36 400 
3 2 1 17 6.8 40 5 4 1 170 58 400 
3 2 2 20 6.8 40 5 4 2 220 70 440 
3 3 0 17 6.8 40 5 4 3 280 100 710 
3 3 1 21 6.8 40 5 4 4 350 100 710 
3 3 2 24 9.8 70 5 4 5 430 150 1,100  
3 4 0 21 6.8 40 5 5 0 240 70 710 
3 4 1 24 9.8 70 5 5 1 350 100 1100  
3 5 0 25 9.8 70 5 5 2 540 150 1700  
4 0 0 13 4.1 35 5 5 3 920 220 2600  
4 0 1 17 5.9 36 5 5 4 1600  400 4600  
 5 5 5 >1600  700 – 
Referencia Bacterilogical analitical manual . FDA 8va. Ed actualización 2015.  
H.8.4.7  Se elimina.  
H.8.4 .8 Se elimina.  
H.14.8 Citrato de Simmons.  
H.14.8.1 Fórmula.  
NH 4HPO 4 4H2O 1.0g a 1.5g  
K2HPO 4 1.0g 
MgSO 4 7H2O 0.2g 
Citrato de sódio 2H 2O 2.0g a 3.0g  
NaCl  5.0g 
Agar 13g-15g 
Azul de bromotimol  0.08g  Martes 19 de octubre de 2021  DIARIO OFICIAL   
Agua destilada  1000 mL  
H.14.14.2 Iodo  
Apéndice I norm ativo.  
Método aprobado para la estimación de la densidad de E. coli  por la técnica del NMP.  
I.1 Este método consta de dos etapas. La primera es un enriquecimiento mediante la inoculación  de la 
muestra previamente homogeneizada y diluida en cinco tubos por dilución, en caldo glutamato  con minerales 
modificado e incubado a 37 °C ± 1°C por 24h. La segunda es la confirmación de la  presencia  de E. coli  
mediante la resiembra de tubos en los que se observe producción de ácido en agar que contenga  5-bromo -4-
cloro -3-indol -beta-D glucuronido y detectar la actividad de beta -glucuronidasa incubado  a 44°C ± 1°C por 22h 
±2h. 
I.4.2 Solución Peptona Salina;  
I.4.3 MMGB;  
I.4.4 TBX;  
I.4.5 Tween 80, y  
I.4.6 Agua peptonada amortiguada.  
I.6.1 Procedimientos generales. Todas las pr eparaciones de las muestras deben llevarse a cabo en 
condiciones asépticas con materiales estériles y evitar contaminaciones de fuentes externas. Como medio de 
dilución puede utilizarse, Solución Peptona Salina o Agua peptonada amortiguada.  
I.6.14.1  Bivalv os. Lavar y cepillar cada concha con agua potable corriente, especialmente del músculo 
abductor o bisagra. Colocar los bivalvos en una charola con un papel absorbente. Con un cuchillo 
desconchador estéril, insertar la punta entre las valvas y hacer palanca  para cortar el músculo abductor y abrir 
la concha. Penetrar sobre la concha superior y drenar el licor y la carne en un vaso de precipitados estéril. 
Adicionar una parte de carne y licor (agua intervalvar) y dos partes de diluyente y homogeneizar en 
homog eneizador rotatorio por 30s a 2 min. De esta manera se obtiene una suspensión 1 de muestra + 2 de 
diluyente, puede adicionarse la cantidad necesaria para obtener una dilución 1 porción de muestra + 9 
porciones de diluyente.  
I.7.1 Solución de peptona salina ; 
I.7.2 MMGB , y 
I.7.3 TBX.  
I.8.1 En caso general inocular tres tubos por cada dilución. Para moluscos vivos, u otros productos 
especiales y/o cuando sea necesario obtener resultados más exactos es necesario inocular series de cinco 
tubos por dilución. Toma r tres tubos de medios de enriquecimiento selectivo. Con una pipeta estéril transferir 
10mL de la muestra líquida o 10mL de la suspensión original en caso de otros productos a tubos con MMGA 
doble concentración. Tomar tres tubos de concentración simple de medios de enriquecimiento selectivo, 
usando otra pipeta estéril, transferir a cada uno de estos tubos 1mL de la muestra líquida o 1mL de la 
suspensión en caso de otros productos. Realizar diluciones decimales y repetir los incisos anteriores para 
cada dilu ción. Mezclar cuidadosamente el inóculo y el medio.  
I.8.3 Para cada tubo inoculado que muestre presencia coloración amarilla estriar con un asa a una placa 
de TBX para obtener colonias aisladas.  
I.8.4 Incubar las placas a 44°C ± 1°C por 22h ± 2h.  
I.13.1  Solución Peptona Salina.  
Digerido enzimático de caseína  1.0g 
Cloruro de sodio  
Agua deionizada  8.5g 
1L 
pH  7.0 ± 0.2  
I.13.1.1 Preparación:  Suspender los ingredientes en 1L de agua destilada. Dejar en reposo durante 5 min 
a 10 min. Mezclar bien, agitando fr ecuentemente, hasta completar la disolución. Si es necesario ajustar el pH, 
para que después de la esterilización sea de 7.2±0.2 a 25°C, esterilizar 15 min/121°C.  
I.13.2  MMGB.  
Ingredientes  Doble concentración  Concentración simple  
Glutamato de sodio  12.7g  6.35g  
Lactosa  20.0g  10.0g   DIARIO OFICIAL  Martes 19 de octubre de 2021  
Formato de sodio  0.5g 0.25g  
L-Cisteína  0.04g  0.02g  
L(-) Acido aspártico  0.048g  0.024g  
L(+)–Arginina  0.04g  0.02g  
Tiamina  0.002g  0.001g  
Ácido nicotínico  0.002g  0.001g  
Ácido pantogénico  0.002g  0.001g  
Sulfato de magnesio sep tahidratado  0.2g 0.1g 
Citrato de fierro III  0.02g  0.01g  
Cloruro de calcio dihidratado  0.02g  0.01g  
Fosfato dipotásico  1.8g 0.9g 
Púrpura de bromocresol  0.02g  0.01g  
Cloruro de amonio  5.0g 2.5g 
Agua destilada  1000mL  1000mL  
 
I.13.2.1 Preparación:  Disolv er el cloruro de amonio en agua. Adicionar el resto de los componentes hasta 
su completa disolución y calentar si es necesario. Para mejorar la estabilidad del almacenamiento del medio. 
Adicionar el glutamato de sodio por separado. Ajustar el pH si es nece sario, así como después de la 
esterilización el cual debe de ser de 6.7 ± 0.1 a 25°C. Distribuir el medio en volúmenes de 10mL en caso de 
concentración simple y tubos de 22mm x 175mm para el caso de concentración doble de medio. Esterilizar en 
autoclave a 116°C por 10 min (si se utilizan fó rmulas preparadas seguir las indicaciones del fabricante).  
I.13.3 TBX.  
Para la preparación de este medio de cultivo seguir lo indicado en el inciso J.8.1.0  
I.13.4 Agua Pepetonada amortiguada.  
Para la preparación de esta s olución seguir lo indicado en el inciso A.10.1  
Apéndice J Normativo.  
Método para la Enumeración de E. coli -glucuronidasa a 44°C utilizando 5 -Bromo -4-cloro -3-Indol  
-D-Glucurónido.  
J.5.1.1  Tomar diferentes porciones del alimento, transferir 25g o mL a frascos de dilución conteniendo 
225mL de diluyente. Realizar diluciones seriadas si es necesario. En una situación atípica y justificada, si la 
porción de muestra utilizada en el ensayo es distinta a  25g o mL, se deberá utilizar la cantidad necesaria de 
diluyente para obtener una dilución 1:10. (Como medio de dilución puede utilizarse Solución Peptona Salina o 
Agua peptonada amortiguada.)  
TRANSITORIOS  
PRIMERO. - La presente Modificación entrará en vigo r al día siguiente de su publicación en el Diario Oficial 
de la Federación.  
SEGUNDO. - Con la entrada en vigor de la presente Modificación se dejará sin efecto el inciso A.8. 
Determinación de Salmonella  en alimentos, de la Norma Oficial Mexicana NOM -186-SSA1/SCFI -2013. Cacao, 
chocolate y productos similares, y derivados del cacao. Especificaciones sanitarias. Denominación comercial. 
Métodos de prueba, publicada en el Diario Oficial de la Federación el 28 de marzo de 2014.  
Ciudad de México, a 25 de agosto de 2021. - El Comisionado Federal para la Protección contra Riesgos 
Sanitarios y Presidente del Comité Consultivo Nacional de  Normalización de Regulación y Fomento Sanitario, 
Alejandro Ernesto Svarch Pérez .- Rúbrica.