식품의약품안전처 공고제2020-427호
- 1 -식품의약품안전처 공고제2020-427호
식품의기준및규격
(식품의약품안전처 고시제2020-70호,2020.8.4.)을일부
개정함에있어국민에게미리알려의견을수렴하고자그취지,개정이유
및주요내용을
행정절차법
제46조에따라다음과같이공고합니다.
 2020년9월28일
 식품의약품안전처장
식품의기준및규격일부개정고시(안)행정예고
1.개정이유
미생물규격의과학적·합리적관리를위하여위해평가를통하여김치류
등의클로스트리디움 퍼프린젠스규격을통계적개념의정량규격으로개
정하고,원료용으로사용하는커피추출농축액의 미생물규격을완화하여불
필요한규제를합리적으로개선하고자함
식용근거가확인된식품원료8종을식품에사용할수있는원료목록에추
가하고식품원료목록중사용부위,학명등을정비하여식품원료사용의
편의성을증진하고자함
어유의비소기준을중금속구성특성반영및국제기준과의조화를위
해무기비소기준으로개정하고,국내외에서사용되는농약및동물용의약
품에대한잔류허용기준을 합리적으로신설및개정하여국민에게안전한- 2 -식품을공급하고자함
잔류허용기준이 신설되는농약과동물용의약품의 시험법을신설하고,올
리고당시험법을개선하고,미생물시험시시험조작의무균여부확인을위
한음성대조군시험을시험법상에명확히하여시험결과의정확성및신뢰
성을제고하고자함
2.주요내용
가.김치류등6종식품의클로스트리디움 퍼프린젠스규격개정[안
제2.3.4)(2)가.다)]
1)미생물규격의과학적·합리적관리를위해통계적개념을확대·도입필요
2)위해평가결과에따라김치,절임식품,당절임,조림류,식초,복합조
미식품,카레의클로스트리디움 퍼프린젠스규격을통계적개념의
정량규격으로개정
3)통계적개념의확대도입을통해미생물검사의대표성과신뢰성확보
나.커피중미생물규격개정[안제5.9.9-2.5)(4),제5.9.9-2.5)(5)]
1)식품제조·가공원료로사용하기위해반가공품도최종제품과동일한
규격이적용되어개선필요
2)최종커피제품에서미생물제어가가능한반가공상태의커피추출물은
세균수와대장균군규격적용을제외
3)제품의특성을고려한합리적규격적용으로식품산업활성화- 3 -다.어유의중금속기준개정[안제2.3.5)(2)④]
1)어유의중금속구성특성및국제기준과의조화를위해중금속기준
개정필요
2)어유의비소기준을무기비소기준으로개정
3)중금속기준에적합한어유의수입
생산및유통이가능함에따라
식품산업의활성화및위해도가큰무기비소기준관리로식품안전
관리및국민건강보호
라.식품원료목록개정[안별표1,별표2,별표3]
1)식용근거가확인된원료를신규등재하고,품목명,기타명칭,학명,
사용부위등이명확하지않은식품원료의정비필요
2)상동나무,노랑코홍어,두점갑오징어,빨강오징어,창끝갑오징어,
Chaceonbiocolor,Idiotrockfish,Northernshrimp등8품목을[별표
1]의식품에사용할수있는원료목록에추가
3)식품원료목록중학명수정(4품목),사용부위명확화(2품목),명칭수
정(7품목)하여식품원료목록을정비
4)식품에사용가능한원료의품목확대로다양한제품개발등식품
산업활성화에기여하고식품원료목록정비를통해식품원료사용
의편의성을증진- 4 -마.농산물중농약잔류허용기준신설및개정[안별표4중(20)다이쾃,
(24)디클로베닐,(79)알루미늄포스파이드 ,(116)카탑,(127)클로르메쾃,
(210)페나자퀸,(225)사이프로디닐,(228)아족시스트로빈,(237)피메트로진,
(239)플루아지남,(248)아바멕틴,(283)아시벤졸라-에스-메틸,(304)
프로베나졸,(317)하이멕사졸,(324)비페나제이트,(349)노발루론,(353)
메트코나졸,(357)디티오카바메이트,(430)설폭사플로르,(437)플룩사피록사드,
(441)피리벤카브,(459)피플루뷰마이드,(500)피디플루메토펜,(509)브로
플라닐라이드,(513)아피도피로펜,(514)가스가마이신,(515)펜피콕사미드]
1)「농약관리법」에따른등록(예정)농약및수입농산물의잔류허용
기준설정신청에따른농약잔류허용기준신설및개정필요
2)다이쾃등27종의농약잔류허용기준신설및개정
3)농산물에농약잔류허용기준을합리적으로신설및개정하여국민에게
안전한식품공급
바.식품중동물용의약품의 잔류허용기준신설및개정[안별표5중
(108)톨트라주릴,(117)설피린,(185)메토밀,(193)루바베그론]
1)「약사법」에사용이허가된동물용의약품의안전관리및수입축산물에
동물용의약품잔류허용기준설정신청에따른관련기준신설필요
2)톨트라주릴등4종의동물용의약품잔류허용기준신설·개정
3)식품중동물용의약품잔류허용기준을합리적으로신설및개정하여
국민에게안전한식품공급- 5 -사.일반시험법개정등[안제5.22.22-25)(3),제8.4.,제8.6.2.1,제8.
7.1.4.234∼235,안제8.8.3.118]
1)잔류허용기준이신설된농약과동물용의약품의관리를위한시험법신설
2)미생물시험시음성대조군시험을하도록시험법개정
3)이소말토올리고당과갈락토올리고당시험법개정
4)즉석조리식품중멸균제품은대장균규격이적용되지않도록문구명확화
5)과학적인시험법신설·개정으로검사신뢰도를제고하고규정의문구를
명확히하여해석상의혼란방지
3.의견제출
「식품의기준및규격」일부개정고시(안)에대하여의견이있는단체
또는개인은2020년11월27일까지다음사항을기재한의견서를식품의
약품안전처장(우편번호:28159,주소:충청북도청주시흥덕구오송읍오
송생명2로187오송보건의료행정타운식품의약품안전처 ,참조:식품기준
과,전화043-719-2417,팩스043-719-2400)에게제출하여주시기바랍니
다.
가.예고사항에대한항목별의견(찬․반여부와그이유)
나.성명(단체의경우단체명과그대표자의성명),주소및전화번호
다.기타참고사항- 6 -식품의약품안전처 고시제2020-00호
「식품위생법」제7조제1항에따른「식품의기준및규격」을다음과
같이개정고시합니다.
2020년0월00일
식품의약품안전처장
식품의기준및규격일부개정고시(안)
식품의기준및규격일부를다음과같이개정한다.
제2.3.4)(2)가.다)를다음과같이한다.
다)클로스트리디움퍼프린젠스(Clostridiumperfringens)
대상식품 규격
①가)의대상식품중햄류,소시
지류,식육추출가공품,알가공품n=5,c=1,m=10,M=100
(멸균제품은n=5,c=0,m=0/25g)
②가)의대상식품중생햄,발효소
시지,자연치즈,가공치즈n=5,c=2,m=10,M=100
(멸균제품은n=5,c=0,m=0/25g)
③가)의대상식품중장류(메주제
외),젓갈류,고춧가루또는실고
추,향신료가공품,김치류,절임
류,조림류,복합조미식품,식초,
카레분및카레(액상제품제외)n=5,c=2,m=100,M=1,000
(멸균제품은n=5,c=0,m=0/25g)
④위①,②,③을제외한가)의
대상식품n=5,c=0,m=0/25g- 7 -제2.3.5)(2)중④를다음과같이한다.
④가공식품
*총비소시험결과무기비소기준초과검출시무기비소로시험하여
기준적용
제5.9.9-2.5)(4)중“액상제품에한하며”를“액상제품중더이상제조,
가공하지않고그대로섭취하는제품에한하며”로한다.
제5.9.9-2.5)(5)중“액상제품에한한다”를“액상제품중더이상제대상식품 납(mg/kg)비소(mg/kg)무기비소(mg/kg)
①식물성유지류,기타동물
성유지,혼합식용유,향미
유,가공유지,쇼트닝,마
가린0.1이하0.1이하 -
②어유 0.1이하 -0.1이하
③영아용조제유,성장기용
조제유,영아용조제식,
성장기용조제식,영
유
아용이유식,영
유아용
특수조제식품0.01이하
[분말제품의경우
희석하여섭취하는
형태(제조사가
제시한섭취방법)를
반영하여기준적용]-0.1이하*
(현미,미강,
쌀눈,톳또는
모자반을사용한
식품에한함)
④특수의료용도등식품 (영
유아용특수조제식품제
외),과자,시리얼류,면류- -0.1이하*
(현미,미강,
쌀눈,톳또는
모자반을사용한
식품에한함)
⑤위②,③,④를제외한
모든식품- -1이하*
(현미,미강,
쌀눈,톳또는
모자반을사용한
식품에한함)- 8 -조,가공하지않고그대로섭취하는제품에한한다”로한다.
제5.22.22-2.5)(3)중“살균제품은제외한다.”를“살균,멸균제품은제외
한다.”로한다.
제8.4.4.1부터4.26까지외의부분중“유지하여야한다.”를“유지하여야
한다.시험시음성대조군을사용하여시험조작의무균여부를확인한다.”
로한다.
제8.4.4.5.4.5.1.나.1)중“일반세균수로한다.”를“일반세균수로한다.
검액을가하지아니한동일희석액1mL를대조시험액으로 하여시험조
작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.6.나.2)중“양성으로한다.”를“양성으로한다.검액을가하지
아니한동일희석액1mL를대조시험액으로 하여시험조작의무균여부를
확인한다.”
제8.4.4.7.4.7.1.가.중“이상씩가한다.”를“이상씩가한다.검액을가하
지아니한동일희석액1mL을각각대조시험액으로 하여시험조작의무
균여부를확인한다.”로한다.- 9 -제8.4.4.7.4.7.1.나.중“배지(배지3)에가한다.”를“배지(배지3)에가한
다.검액을가하지아니한동일희석액1mL를대조시험액으로하여시험
조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.7.4.7.1.다.중“가하여중첩시킨다.”를“가하여중첩시킨다.검액
을가하지아니한동일희석액1mL를대조시험액으로 하여시험조작의
무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.7.4.7.2.가.1)중“두배농도”를“2배농도”로하고“1mL씩사
용한다.”를“1mL씩사용한다.검액을가하지아니한동일희석액을대조
시험액으로하여시험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.7.4.7.2.가.2)중“두배농도”를“2배농도”로하고“1mL씩사
용한다.”를“1mL씩사용한다.검액을가하지아니한동일희석액을대조
시험액으로하여시험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.7.4.7.2.나.중“유무를결정한다.”를“유무를결정한다.검액을
가하지아니한동일희석액1mL를대조시험액으로 하여시험조작의무
균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.7.4.7.2.다.중“24±2시간배양한다.”를“24±2시간배양한다.검- 10 -액을가하지아니한동일희석액1mL를대조시험액으로 하여시험조작
의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.8.4.8.1.가.중“음성으로한다.”를“음성으로한다.검액을가하
지아니한동일희석액1mL를대조시험액으로 하여시험조작의무균여
부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.8.4.8.2.가.1)중“시험용액10mL를첨가할경우2배농도의
배지10mL를이용한다.”를“단,10mL를접종할때에는2배농도EC배
지를사용하고0.1mL이하를접종할필요가있을때에는10배희석단계
액을각각1mL씩사용한다.검액을가하지아니한동일희석액을대조시
험액으로하여시험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.8.4.8.2.가.2)(1)중“시험용액으로사용한다.”를“시험용액으로
사용한다.검체를가하지아니한동일희석액을대조시험액으로하여시험
조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.8.4.8.2.나.중“24∼48시간배양한다.”를“24∼48시간배양한다.
검액을가하지아니한동일희석액1mL를대조시험액으로 하여시험조
작의무균여부를확인한다.”- 11 -제8.4.4.94.9.1.중“균수를산출한다.”를“균수를산출한다.모든시험에
서는검액을가하지아니한동일희석액을대조시험액으로 하여시험조작
의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.11.가.1)중“증균배양한다.”를“증균배양한다.시료를가하지아
니한동일펩톤식염완충액을대조시험액으로 하여시험조작의무균여부를
확인한다.”로한다.
제8.4.4.11.가.2)중“18～24시간배양한다.”를“18～24시간배양한다.시
료를채취하지않은동일멸균가아제나스폰지로대조시험액을제조하고
함께시험하여시험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.11.가.3)중“18～24시간배양한다.”를“18～24시간배양한다.시
료채취시사용한동일BPW또는BPD를대조시험액으로 하여시험조
작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.11.가.4)중“24±2시간동안증균한다.”를“24±2시간동안증균
한다.시료를넣지않은멸균TSB를대조시험액으로 하여시험조작의무
균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.12.4.12.1.가.중“18∼24시간증균배양한다.”를“18∼24시간증- 12 -균배양한다.검체를가하지아니한10%NaCl을첨가한TSB배지를대조
시험액으로하여시험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.12.4.12.2.가.중“집락을계수한다.”를“집락을계수한다.검체를
가하지아니한동일희석액을대조시험액으로 하여시험조작의무균여부
를확인한다.”로한다.
제8.4.4.13.4.13.1.가.중“18～24시간증균배양한다.”를“18～24시간증
균배양한다.검체를가하지아니한Alkaline펩톤수를대조시험액으로 하
여시험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.13.4.13.2.가.중“1mL이되게도말한다.”를“1mL이되게도
말한다.검체를가하지아니한동일희석액을대조시험액으로하여시험조
작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.14.4.14.1.가.중“혐기배양한다.”를“혐기배양한다.검액을가하
지아니한동일희석액1mL를대조시험액으로 하여시험조작의무균여
부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.14.4.14.2.가.중“혐기배양한다.”를“혐기배양한다.검체를가
하지아니한동일희석액1mL을대조시험액으로 하여시험조작의무균여- 13 -부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.15.가.중“2차증균을실시한다.”를“2차증균을실시한다.모든
시험에서는검체를가하지아니한동일증균배지를대조시험액으로 하여
시험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.16.가.중“24시간증균배양한다.”를“24시간증균배양한다.검체
를가하지아니한동일mTSB를대조시험액으로 하여시험조작의무균여
부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.17.가.중“48시간배양한다.”를“48시간배양한다.검체를가하
지아니하고동일한방법으로제조한ITC배지를대조시험액으로하여시
험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.18.4.18.1.가.중“37℃에서24시간배양한다.”를“37℃에서24시
간배양한다.검체를가하지아니한동일희석액을대조시험액으로 하여
시험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.18.4.18.2.가.중“집락을계수한다.”를“집락을계수한다.검체를
가하지아니한동일희석액을대조시험액으로 하여시험조작의무균여부
를확인한다.”로한다.- 14 -제8.4.4.19.가.1)중“첨가하여배양한다.”를“첨가하여배양한다.모든
시험에서는시험용액을가하지아니한동일증균배지를대조시험액으로
하여시험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.19.가.2)중“48±2시간배양한다.”를“48±2시간배양한다.시료
를채취하지않은동일멸균가아제나스폰지로대조시험액을제조하고함
께시험하여시험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.19.가.3)중“48±2시간배양한다.”를“48±2시간배양한다.시료
채취시사용한동일BPW또는BPD를대조시험액으로 하여시험조작의
무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.20.가.중“26℃에서7일간배양한다.”를“26℃에서7일간배양한
다.검체를가하지아니한동일젤라틴인산완충액을대조시험액으로하여
시험조작의무균여부를확인한다.(검체를그대로사용하는액상검체는검
체를가하지아니한동일CookMeat배지와TPGY배지로무균여부를확
인)”로한다.
제8.4.4.21.가.중“2차증균배양한다.”를“2차증균배양한다.검체를
가하지아니한동일멸균증류수를대조시험액으로 하여시험조작의무균- 15 -여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.22.가.중“24시간배양한다.”를“24시간배양한다.검체를가하
지아니한동일희석액을대조시험액으로 하여시험조작의무균여부를확
인한다.”로한다.
제8.4.4.23.가.중“8주간배양한다.”를“8주간배양한다.유제액을제조
하여사용하는경우에는검체를가하지아니한동일희석액을대조시험액
으로하여시험조작의무균여부를확인한다.”로한다.
제8.4.4.24.가.중“도말하여확인한다.”를“도말하여확인한다.검체를
가하지아니한증균배지를대조시험액으로 하여시험조작의무균여부를
확인한다.”로한다.
제8.6.6.2중6.2.1중나.및다.를각각다음과같이한다.
나.이소말토올리고당
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절검출기(RefractiveIndexdetector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
단당류—Glucose- 16 -이당류—Maltose
삼당류—Maltotriose
사당류—Maltotetraose
오당류—Maltopentaose
육당류—Maltohexaose
칠당류—Maltoheptaose
나)물:HPLC용
다)50%에탄올
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당을물로녹여100mg/mL농도가되도록조제한후혼합하
여표준원액으로한다.표준원액을물로희석하여625∼10,000 μg/mL
범위로조제하여표준용액으로한다.
4)시험용액의조제
이소말토올리고당으로서약0.1∼0.5g이되도록검체를취해물또는
50%에탄올(단백질을함유한경우)15mL에용해한후50mL로정용
한다(필요시1,000×g에서10분간원심분리한다).이용액을0.45
μm의필터로여과하여시험용액으로한다.
5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)배제형이온교환계- 17 -①칼럼:AsahipakNH2P-504E(4.6mmi.d×250mm×5μm)
혹은이와동등한것
②칼럼온도:30℃
③이동상:65%아세토니트릴
④유속:1.0mL/min
⑤검출기:시차굴절검출기(RI)
(2)역상분배계
①칼럼:RSpakDC-613(6.0mmi.d×150mm×6μm)혹은
이와동등한것
②칼럼온도:50℃
③이동상:70%아세토니트릴
④유속:0.8mL/min
⑤검출기:시차굴절검출기(RI)
6)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토그램상의피크는어느
측정조건에서도시험용액과표준용액피크의머무름시간이
일치하여야한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을각각10μL씩주입하여위의조건에서
시험한다.표준용액의피크면적또는높이를구하여검량선을
작성한다.- 18 -가)배제형이온교환계에서분석한피크면적또는높이에의해각
중합도의함유량(mg/mL)이구해지며그결과는다음과같다.
DP1(단당류):A
DP2(이당류):B
DP3(삼당류):C
DP4(사당류):D
DP5(오당류):E
DP6(육당류):F
DP7(칠당류):G
나)역상분배계에서시료를분석한Data의각당분함유율(%)은다음
과같다.
DP1Glucose A1
DP1Glucose이외의단당류 A2
DP2Maltose B1
DP2Maltose이외의이당류 B2
DP3Maltotriose C1
DP3Maltotriose이외의삼당류 C2
DP4Maltotetraose D1
DP4Maltotetraose이외의사당류 D2
DP5Maltopentaose E1
DP5Maltopentaose이외의오당류 E2- 19 -DP6Maltohexaose F1
DP6Maltohexaose이외의육당류F2
DP7Maltoheptaose G1
DP7Maltoheptaose이외의칠당류 G2
DP1Glucose(mg/mL)A×A＋AA＝a
DP2Maltose(mg/mL)B×B＋BB＝b
DP3Maltotriose(mg/mL)C×C＋CC＝c
DP4Maltotetraose(mg/mL)D×D1
D1＋D2＝d
DP5Maltopentaose(mg/mL)E×E1
E1＋E2＝e
DP6Maltohexaose(mg/mL)F×F1
F1＋F2＝f
DP7Maltoheptaose(mg/mL)G×G1
G1＋G2＝g
이소말토올리고당함량(%)=T-(a+b+c+d+e+f+g)
×h×i×100
시료채취량(g) 1,000
T(배제형이온교환계에서분석한당의함유량)=A+B+C+D+E+F+G
h:시험용액의전량(mL)
i:시험용액의희석배수- 20 -다.갈락토올리고당(전이갈락토올리고당)
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절검출기(RefractiveIndexdetector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
Glucose
Galactose
Lactose
Galactooligosaccharides(순도70%이상)
나)물:HPLC용
다)20%(w/v)설포살리실린산용액:설포살리실산(Sulfosalicylicacid)
20g에물을넣어용해시켜100mL로한다.
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
Galactooligosaccharides(GOS)4g을물20mL로녹여50mL로정용한
후혼합하여표준원액으로한다.표준원액을이동상으로희석하여
8,000∼40,000 μg/mL범위로조제하여표준용액으로한다.머무름시간
확인을위해glucose,galactose,lactose는50mg씩10mL의이동상에
녹여(5,000 μg/mL)표준용액으로한다.
4)시험용액조제
갈락토올리고당으로서0.1∼1g이되도록검체를취해물20mL에용- 21 -해한후50mL로정용한다.단,단백질제거조작이필요한시료에대
해서는20%설포살리실산용액을여러방울첨가하여생긴불용성단
백질을1,000×g에서10분간원심분리하여제거한다.이용액을0.45μ
m의필터로여과하여시험용액으로사용한다.
5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)배제형이온교환계
①칼럼:ShodexSC1011(8.0mmi.d×300mm×6μm)혹은
이와동등한것
②칼럼온도:80℃
③이동상:물
④유속:0.4mL/min
⑤검출기:시차굴절검출기(RI)
(2)역상분배계
①칼럼:TSKGELNH2-100(4.6mmi.d×150mm×3μm)
혹은이와동등한것
②칼럼온도:35℃
③이동상:70%아세토니트릴
④유속:0.8mL/min
⑤검출기:시차굴절검출기(RI)
6)정성시험- 22 -위의조건에서얻어진크로마토그램상의피크는어느
측정조건에서도시험용액과표준용액피크의머무름시간이
일치하여야한다.
7)정량시험
가)배제형이온교환계
표준용액과시험용액을각각2μL씩주입하여위의조건에서
시험한다.표준용액의피크면적또는높이를구하여각당류의
함유량(mg/mL)이구해지며그결과는다음과같다.
DP2(이당류):A
DP3(삼당류이상):B
그림1.갈락토올리고당크로마토그램(배제형이온교환계)
나)역상분배계
10,000 μg/mL농도의GOS표준용액,5,000 μg/mL농도의
glucose,galactose,lactose표준용액과시험용액을각각10μL씩
주입하여위의조건에서시험하여각당류의비율(%)을구한다
(단,용액의농도는필요에따라조절가능하다).전체당함량을- 23 -100으로했을때각중합도의당류비율은다음과같다.
DP1(전체당함량중단당류의비율):a
DP2(전체당함량중이당류의비율):b
DP3(전체당함량중삼당류이상의비율):c
(a+b+c=100(%))
그림2.갈락토올리고당크로마토그램(역상분배계)
갈락토올리고당함량(%)=[(A×d/b)+B]
×e×f×100
시료채취량(g)1,000
b:전체당함량중이당류의비율
d:전체당함량중lactose를제외한이당류의비율
e:시험용액의전량(mL)
f:시험용액의희석배수- 24 -제8.7.7.17.1.4중7.1.4.234및7.1.4.235를다음과같이각각신설한다.
7.1.4.234가스가마이신(Kasugamycin)
가.시험법적용범위
곡류,서류,두류,과일류,채소류등의식품에적용한다.
나.분석원리
검체중가스가마이신을메탄올로추출한후HLB카트리지로정제하여
액체크로마토그래프-질량분석기로분석한다.
다.장치
1)액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)
라.시약및시액
1)용매:잔류농약시험용또는특급
2)물:3차증류수또는이와동등한것
3)표준원액:가스가마이신표준품을물에녹여1,000mg/L가되게한다.
4)표준용액:표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농도로
혼합,희석한다(무처리시료추출물90%이상포함).
5)HLB카트리지(Hydrophilic-lipophilic balancecartridge):Divinylbenzene-
N-vinylpyrrolidonecopolymer(500mg)고정상이충전되어있는일회
용카트리지(용량6mL)또는이와동등한것
6)기타시약:잔류농약시험용또는특급
7)특이사항:가스가마이신은유리벽면에흡착할가능성이있으므로모든
시험과정은폴리프로필렌으로된용기를사용하며,시험용액은조제후- 25 -즉시분석한다.
마.시험용액의조제
1)추출
검체를분쇄하여균질화한후5g(곡류및두류는약1kg을혼합하여
표준체420μm를통과하도록분쇄한후5g,서류,과일류및채소류는
약1kg을분쇄한후5g)을정밀히달아50mL원심분리관에넣고메
탄올10mL를가한뒤1분간흔들고1N수산화나트륨용액을첨가하
여추출용액의pH를13으로조절한다.pH조절후10분간진탕하고4℃,
7,000G에서10분간원심분리하여상층액전량을취하는방법으로2회반복
추출한다.취하여진상층액에메탄올을가하여부피를25mL로맞춘다.
2)정제
HLB카트리지에메탄올3mL와물3mL를차례로넣고2∼3방울/초
의속도로유출시켜활성화한다.고정상상단이노출되기전에‘1)추출’로
부터얻은용액5mL를카트리지상단에가하고1∼2방울/초의속도로
용출시켜받고,고정상상단이노출되기전에메탄올5mL를카트리지
상단에가하고1∼2방울/초의속도로용출시켜앞서받은액과합쳐부
피를10mL로맞춘다.정제된용액을멤브레인필터(Nylon,0.2μm)로
여과한후시험용액으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프분석조건
가)칼럼:HILIC(아마이드계)컬럼또는이와동등한것- 26 -나)칼럼온도:40℃
다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함유물
(2)이동상B:0.1%포름산함유아세토니트릴
(3)농도구배조건
시간(분)A(%) B(%)
0.0 10 90
2.0 10 90
2.1 30 70
7.0 90 10
7.5 90 10
8.0 10 90
10.0 10 90
라)이동상유속:0.3mL/분
마)주입량:2μL
2)질량분석기분석조건
가)이온화방법:ESIpositive-ionmode
나)Capillaryvoltage:1.7kV
다)Collisiongas:아르곤(Ar)
표.액체크로마토그래프-질량분석기분석을위한특성이온- 27 -분석성분
(Compound)평균
분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursorion,
[M+H]+,m/z)생성이온
(Production,
m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
가스가마이신
(Kasugamycin)379.4379.163801121)21
15614
20015
1)정량이온이며,그외는정성이온임.
※각생성이온에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경하여사용할수있으며,
제시된이외의생성이온도적용이가능함.
3)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하여액체크로마토그래프-질량분석기에
각각주입하여얻은크로마토그램상의각피크높이또는면적값으로
검량선을작성한다.
4)표준품의크로마토그램
그림.액체크로마토그래프-질량분석기에서표준품의크로마토그램
가스가마이신(3.7분)
*분석기기:LC(ShimadzuⓇNexeraX2),MS/MS(ShimadzuⓇLCMS-8060),
컬럼(XBridgeⓇAmide,2.1mmI.D.×100mmL.,3.5μm)
- 28 -5)정량한계
0.01mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토그램상의피크가표준용액피크의머무름
시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량한다.
아.확인시험
액체크로마토그래프-질량분석기상의머무름시간과특성이온으로가스가
마이신을확인한다.
7.1.4.235펜피콕사미드(Fenpicoxamid)
가.시험법적용범위
곡류,서류,두류,과일류,채소류등의식품에적용한다.
나.분석원리
검체중펜피콕사미드를아세토니트릴로추출한후d-SPE(dispersive-solid
phaseextraction)로정제하여액체크로마토그래프-질량분석기로분석한다.
다.장치
1)액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)
라.시약및시액
1)용매:잔류농약시험용또는특급
2)물:3차증류수또는이와동등한것
3)표준원액:펜피콕사미드표준품을아세토니트릴에녹여1,000mg/L가되게- 29 -한다.
4)표준용액:표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농도로혼
합,희석한다(무처리시료추출물90%이상포함).
5)d-SPE:1차2차아민(PSA,Primarysecondaryamine),C18(Octadecyl
bondedsilica)
6)기타시약:잔류농약시험용또는특급
마.시험용액의조제
1)추출
검체를분쇄하여균질화한후5g(곡류및두류는약1kg을혼합하여표
준체420μm를통과하도록분쇄한후5g,서류,과일류및채소류는약1
kg을분쇄한후5g)을정밀히달아50mL원심분리관에넣는다(곡류및
두류의경우증류수5mL첨가후30분간방치).아세토니트릴20mL를
가한뒤10분간진탕하고4,000G에서5분간원심분리한다.상층액전량을
취한후아세토니트릴20mL를재차가하여위과정을반복한다.앞의상
층액과합하여부피를50mL로맞춘후상층액8mL를취한다.
2)정제
d-SPE(1차 2차 아민 400mg및 C18400mg)가미리담겨져있는15
mL원심분리관에‘1)추출’로부터얻은상층액8mL를가하고30초간와류
교반기등을이용하여충분히혼합한후이를4℃,4,000G에서5분간원
심분리한다.정제된상층액을4mL취하여질소농축한후아세토니트릴
2mL로재용해하고,멤브레인필터(PTFE,0.2μm)로여과하여시험용액- 30 -으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프분석조건
가)칼럼:C18계역상칼럼또는이와동등한것
나)칼럼온도:40℃
다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함유아세토니트릴
(2)이동상B:0.1%포름산함유물
(3)농도구배조건
시간(분)A(%) B(%)
0.0 20 80
3.0 20 80
3.5 90 10
5.0 100 0
7.0 100 0
8.0 20 80
10.0 20 80
라)이동상유속:0.3mL/분
마)주입량:2μL
2)질량분석기분석조건
가)이온화방법:ESIpositive-ionmode
나)Capillaryvoltage:5.5kV
다)Collisiongas:아르곤(Ar)
표.액체크로마토그래프-질량분석기분석을위한특성이온- 31 -분석성분
(Compound)평균
분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursorion,
[M+H]+,m/z)생성이온
(Production,
m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
펜피콕사미드
(Fenpicoxamid)614.6614.256152391)37
51520
58516
1)정량이온이며,그외는정성이온임.
※각생성이온에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경하여사용할수있으며,
제시된이외의생성이온도적용이가능함.
3)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하여액체크로마토그래프-질량분석기에
각각주입하여얻은크로마토그램상의각피크높이또는면적값으로
검량선을작성한다.
4)표준품의크로마토그램
그림.액체크로마토그래프-질량분석기에서표준품의크로마토그램
펜피콕사미드(4.8분)
*분석기기:LC(PerkinElmerⓇQSight™LX50),MS/MS(PerkinElmerⓇQSight™210),
칼럼(CapcellcoreADME,2.1mmI.D.×100mmL.,2.7μm)- 32 -
5)정량한계
0.01mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토그램상의피크가표준용액피크의머무름
시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량한다.
아.확인시험
액체크로마토그래프-질량분석기상의머무름시간과특성이온으로펜피콕사
미드를확인한다.
제8.8.8.3.118루바베그론(Lubabegron)을다음과같이신설한다.
8.3.118루바베그론(Lubabegron)
1)시험법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중분석대상물질을아세트산함유아세토니트릴/메탄올혼합용액
(1:1,v/v)으로추출하고헥산또는일차이차아민(PSA)로정제하여액
체크로마토그래프/질량분석기로분석한다.
3)장치
액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액- 33 -가)용매:잔류농약시험용또는특급
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:루바베그론표준품을메탄올에녹여100mg/L가되게
한다.
라)표준용액:루바베그론표준용액100mg/L농도로부터0.01,0.02,
0.04,0.08,0.16µg/mL농도가되도록메탄올로희석하여혼합한
다.
마)10mM아세테이트완충용액(PH4.6):1,000mL용량플라스크에
아세트산나트륨0.82g을넣고물로표시선까지채운다.아세트산
으로pH4.6이되도록조정하여사용한다.
바)1%아세트산(Aceticacid)함유아세토니트릴/메탄올혼합용액(1:1,
v/v):100mL용량플라스크에아세트산1mL을넣고아세토니트
릴/메탄올1:1,v/v):혼합용액으로표시선까지채운다.
사)0.1mM불화암모늄(Ammoniumfluoride)용액:1,000mL용량플라
스크불화암모늄3.7mg을넣고물로표시선까지채운다.
아)기타시약:잔류농약시험용또는특급
5)첨가시료의조제
정량을하는경우조직표준곡선작성을위하여루바베그론이검출되지
않은음성대조시료2g씩6개를준비한후Blank를제외하고각표준
용액을0.2mL씩가하여0.001,0.002,0.004,0.008,0.016µg/g가되도
록조제한다.- 34 -6)시험용액의조제
균질화한검체2g을50mL원심분리관에취하여10mM아세테이트
완충용액(pH4.6)2mL을넣고2분간초음파처리하여균질화한다.
β-글루쿠로니다제/아릴설파타제(β-Glucuronidase/Arylsufates)20µL
첨가하고65℃에서1시간중탕한후상온에서냉각한다.이용액에1%
아세트산함유아세토니트릴/메탄올혼합용액을12mL가하여10분간
초음파처리후15분간진탕하고–4℃에서9,300G로10분간원심분
리한다.(㉠돼지고기를제외한축수산물의경우,새로운50mL원심분
리관에상층액을취하여헥산12mL을넣고2분간진탕한다.-4℃에
서9,300G로5분간원심분리한후하층액을취하여감압농축한다.㉡
돼지고기의경우,PSA500mg이담겨진50mL원심분리관에상층
액을취하여5분간진탕한다.-4℃에서9,300G로5분간원심분리한
후상층액을취하여감압농축한다.)잔류물에50%메탄올1mL을넣
어녹이고상온에서15,800G로10분간원심분리한후상층액을시험
용액으로한다.
7)시험조작
가)액체크로마토그래프측정조건
(1)칼럼:C18(Xbridge,2.1mm×100mm,3.5μm)또는이와동
등한것
(2)칼럼온도:40℃
(가)이동상A:0.1mM불화암모늄용액- 35 -(나)이동상B:메탄올
시간 (분) A(%) B(%)
0.0 50 50
4.0 0 100
7.0 0 100
7.01 50 50
10.0 50 50
(3)이동상유량:0.3mL/분
(4)주입량:5μL
나)질량분석기측정조건
(1)이온화:ESIpositive-ionmode
(2)Capillarytemperature:300℃
(3)Capillaryvoltage:3.6kV(Positive),2.8kV(Negative)
(4)Collisiongas:아르곤(Ar)
(5)분석대상및개별조건(MRM조건)
분석성분이온화
(Ionization
mode)분자량
(molecular
weight)선구이온
(Precursor
ion,,m/z)생성이온
(Production,
m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
루바베그론
(Lubabegron)+ 499.19 500215 29
250 20
251 25
※밑줄표시되어있는것은정량이온이며그외이온들은정성이온임
※각생성이온(Production)에대한질량분석기의기기조건은사용기기의
최적값으로변경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이온도적
용이가능함- 36 -8)정성및확인시험
가)정성및확인
위의조건으로얻어진크로마토그램상의피크는표준용액피크의머
무름시간과비교하여일치하여야한다.또한표준용액과시험용액의
선구이온(Precursorion)및생성이온(Production)이일치하여야하
고,표준용액과시험용액의생성이온간반응세기의비율(Ionratio)을
비교하여그비율은주1)과일치하여야한다.
주1.생성이온간반응세기의비율허용범위
이온간반응세기의비율 (%)허용범위
>50% ≤20%
>20%,≤50% ≤25%
>10%,≤20% ≤30%
나)표준품의크로마토그램
루바베그론 (3.3분)
그림1.루바베그론표준용액(0.004 μg/mL)의크로마토그램
9)정량시험
가)정량
정성및확인시험과똑같은조건에서Blank시료를포함하여각농
도별첨가시료에서얻어진크로마토그램상의각피크높이또는면- 37 -적을구하여검량선을작성한후시험용액의크로마토그램으로부터
정량이온(Quantitativeion)의각피크높이또는피크면적에따라
산출된시험용액중검출농도,검체량과최종시험용액의부피를고
려하여정량한다.
나)정량한계:0.0002mg/kg
[별표1]1.중A가014950을다음과같이신설한다.
A가014950겨자무호스래디쉬 (Horseradish),
서양고추냉이Arm oracia rusticana L. 뿌리
[별표1]1.중A가015600을다음과같이한다.
A가015600고들빼기Sonchus-leaf
crepidiastrumCrep id iastrum so nchifo lium (Bunge) Pak&
Kawano /Yo ungia sonchifo lia (Bunge)
Maxim. /Crep id iastrum so nchifo lium 
(Maxim.) Pak&Kawano뿌리,잎
[별표1]1.중A가019200을다음과같이한다.
A가019200과라나 Guarana Paullinia cupana Kunth 열매,씨앗
[별표1]1.중A가043000을다음과같이한다.
A가043000닥풀딱나무 ,금화규 ,Aibika,
Aurea helianthusHibiscus m anihot L./Bro usso netia k aem p feri
Siebold /Abelm oschus m aniho t잎- 38 -[별표1]1.중A가075400을다음과같이한다.
A가075400바나나 BananaMusa parad isiaca L./Musa sap ientum L.
/Musaacum inata Colla꽃,열매
[별표1]1.중A가099850을다음과같이신설한다.
A가099850상동나무 - Sageretia thea(Osbeck) M.C.Johnst. 열매
[별표1]1.중A가101000을삭제한다.
[별표1]1.중A가101500을다음과같이한다.
A가101500서양산사자산사나무 ,아그배나무 ,
Maybush, Maytree,
Mayblossom, Mayflower,
Thorn-appletree,
Whitethorn, Hawthorn
berryCrataegus oxyacantha L. 잎
[별표1]1.중A가104800을다음과같이한다.
A가104800셀러리셀러리악 (Celeriac),
Celery, Smallage, Garden
celery, Wild celeryApium graveolens var.d ulcePers뿌리,잎,씨앗,줄기
[별표1]1.중A가112900을다음과같이한다.
A가112900신양벚나무양앵두 ,큰양벗나무 ,
신양벚 ,신벗나무 ,Sour
Cherry, Tart CherryPrunus cerasus L./Cerasus acid aP.Gaertn.
&al.열매(씨앗제외)- 39 -[별표1]1.중A가128400을다음과같이한다.
A가128400오크리프잎상추 ,Oak leaflettuce,
파게로Lactuca sativa L.var.crispa 잎
[별표1]1.중A가148550을다음과같이신설한다.
A가148550쥐오줌풀 Valerian Root Valeriana fauriei Briq. 어린잎 -
[별표1]2.중A나019350을다음과같이신설한다.
A나019350노랑코홍어 Yellownose skate Zearaja chilensis -
[별표1]2.중A나029750을다음과같이신설한다.
A나029750두점갑오징어 애기갑오징어 Sep ia ko biensis -
[별표1]2.중A나050150을다음과같이신설한다.
A나050150빨강오징어 Neon flying squid Om m astrephes bartram ii -
[별표1]2.중A나055900을다음과같이한다.
A나055900식용달팽이 -Helix po m atia /Nesio helix sam arangae /
Achatina fulica (Bowdich) Achatinidae /
Helix aspersa-- 40 -[별표1]2.중A나074350을다음과같이신설한다.
A나074350창끝갑오징어 - Sep ia stellifera -
[별표1]2.중A나092850을다음과같이신설한다.
A나092850 Idiot rockfish Longspine thoryhead Sebastolobus altirelis -
[별표1]2.중A나093505을다음과같이신설한다.
A나093505 Northern shrimp - Pand alus borealis -
[별표1]2.중A나093510을다음과같이신설한다.
A나093510Pacific golden
crab- Chaceo n bico lo r -
[별표2]1.중B가006700을다음과같이한다.
B가006700서양산사자산사나무 ,아그배나무 ,
Maybush, Maytree,
Mayblossom,
Mayflower,
Thorn-appletree,
Whitethorn, Hawthorn
berryCrataegus oxyacantha L.열매,꽃,씨앗 -- 41 -[별표3]중C000100을다음과같이한다.
C000100갈색거저리
유충밀웜,Mealworm,고소애 Tenebrio m o lito r L. -
[별표3]중C000400을다음과같이한다.
C000400흰점박이꽃
무지유충굼뱅이 ,꽃뱅이 Protaetia brevitarsis -
[별표4](20)다이쾃(Diquat)중“완두0.1T”을삭제하고,“두류0.5T”를“두
류0.9†”로한다.
[별표4](24)디클로베닐(Dichlobenil)중다음항목을신설한다.
쌀 0.05
[별표4](79)알루미늄포스파이드 [AluminiumPhosphide(Hydrogen
phosphide)]중다음항목을신설한다.
감귤 0.05
[별표4](116)카탑(Cartap)중다음항목을신설한다.
가지 0.05
[별표4](127)클로르메쾃(Chlormequat)중다음항목을신설한다.- 42 -트리티케일5.0†
[별표4](210)페나자퀸(Fenazaquin)중“호프30T”을“호프30†”으로한다.
[별표4](225)사이프로디닐(Cyprodinil)중다음항목을신설한다.
석류 5.0†
[별표4](228)아족시스트로빈(Azoxystrobin)중“취나물3.0”을“취나물7.0”으로
한다.
[별표4](237)피메트로진(Pymetrozine)중“상추1.0”을“상추15”로한다.
[별표4](239)플루아지남(Fluazinam)중다음항목을신설한다.
땅콩 0.01†
[별표4](248)아바멕틴(Abamectin)중“감귤0.02”를“감귤0.07”로한다.
[별표4](283)아시벤졸라-에스-메틸(Acibenzolar-S-methyl)중다음항
목을각각신설한다.
무(뿌리)0.3
무(잎)1.0- 43 -[별표4](304)프로베나졸(Probenazole)중다음항목을신설한다.
토마토 0.05
[별표4](317)하이멕사졸(Hymexazol)중다음항목을신설한다.
파 0.05
[별표4](324)비페나제이트(Bifenazate)중“호프20T”을“호프20†”으로한다.
[별표4](349)노발루론(Novaluron)중“블루베리7.0T”을“블루베리7.0†”
으로한다.
[별표4](353)메트코나졸(Metconazole)중“파1.0”을“파5.0”으로한다.
[별표4](357)디티오카바메이트(Dithiocarbamates)중“블루베리5.0T”을“블루베리
5.0”으로한다.
[별표4](430)설폭사플로르(Sulfoxaflor)중“고수(잎)0.05T”를“고수(잎)10”으로
하고,“수수0.08T”을“수수0.3†”으로한다.
[별표4](437)플룩사피록사드(Fluxapyroxad)중“딸기2.0”을“딸기4.0†”으로한다.- 44 -[별표4](441)피리벤카브(Pyribencarb)중“딸기0.5”를“딸기2.0”으로한
다.
[별표4](459)피플루뷰마이드(Pyflubumide)중다음항목을신설한다.
가지 0.07
[별표4](500)피디플루메토펜(Pydiflumetofen)중다음항목을신설한다.
수수 3.0†
[별표4](509)브로플라닐라이드(Broflanilide)중“무(잎)2.0”을“무(잎)5.0”
으로하고,“수박0.05”를“수박0.07”로하며,“토마토0.3”을“토마토1.0”으
로한다.
[별표4]중(513)∼(515)를다음과같이신설한다.
(513)아피도피로펜(Afidopyropen)
◎잔류물의정의:Afidopyropen
가지 0.05
딸기 0.2
무(뿌리)0.05
무(잎)0.1- 45 -(514)가스가마이신(Kasugamycin)
◎잔류물의정의:Kasugamycin
가지 0.3
감귤 0.2
감자 0.05
갓 8.0
건삼 0.05
고수(잎)2.0
고추 1.5
근대 8.0
냉이 8.0
당근 0.2
들깻잎 5.0
딸기 0.3
마 0.05
마(건조)0.05
마늘 0.05
머위 0.05
멜론 0.2
무(뿌리)0.05- 46 -무(잎)2.0
미나리 0.5
배추 0.1
부추 0.7
브로콜리0.2
비트 0.15
상추 10
셀러리0.5
수박 0.05
수삼 0.05
시금치 3.0
쌀 0.07
쑥갓 8.0
양배추0.2
양상추 10
양파 0.05
엇갈이배추0.3
오이 0.2
참외 0.3
청경채 8.0
취나물 8.0- 47 -치커리 8.0
키위 0.05
토마토 0.5
파 0.3
풋마늘 0.05
피망 1.5
(515)펜피콕사미드(Fenpicoxamid)
◎잔류물의정의:Fenpicoxamid
바나나 0.15†
[별표4]주3.중“24.생약시험법”을“29.생약시험법”으로한다.
[별표5](108)톨트라주릴(Toltrazuril)중다음항목을신설한다.
염소근육 0.1
염소지방 0.15
염소간 0.5
염소신장 0.25
[별표5](117)설피린(Sulpyrine,Dipyrone,Metamizole)중다음항목을
신설한다.- 48 -양근육 0.1
양지방 0.1
양간 0.1
양신장 0.1
염소근육 0.1
염소지방 0.1
염소간 0.1
염소신장 0.1
[별표5](185)메토밀(Methomyl)중“닭근육0.01”을“가금근육0.01”로
하고,다음항목을각각신설한다.
양근육 0.02
염소근육 0.02
[별표5]중(193)을다음과같이신설한다.
(193)루바베그론(Lubabegron):성장보조제
◎잔류물의정의:Lubabegron
소근육 0.002†
소지방 0.002†
소간 0.007†
소신장 0.007†- 49 -[별표5]중주3.을다음과같이신설한다.
주3.상기†표시된기준은수출국의요청으로설정된잔류허용기준을
의미하며,기준적용시에는국내및수입식품에동일하게적용한다.
부칙
제1조(시행일)이고시는고시한날부터시행한다.다만,제8.8.3.118과[별
표5]의개정규정은2021년1월1일부터시행한다.
제2조(적용례)이고시는이고시시행이후최초로제조·가공또는수입한
식품(선적일기준)부터적용한다.
제3조(경과조치)이고시는이고시시행당시제조․가공․판매또는수입
되어검사가진행중인사항에대하여는종전의규정에따른다.
제4조(다른고시의개정)식품등의자가품질검사항목지정일부를다음과
같이개정한다.
별표1중제9호9-2.커피의검사항목란을다음과같이한다.
납,허용외타르색소,세균수(액상제품중더이상제조,가공하지않고
그대로섭취하는제품에한한다),대장균군(액상제품중더이상제조,
가공하지않고그대로섭취하는제품에한한다)
별표1의제22호22-2.즉석섭취·편의식품류의즉석조리식품의검사항목
란중“대장균(살균제품은제외한다)”를“대장균(살균,멸균제품은제외한- 50 -다)”로한다.- 51 -
현행 개정(안)
제1.(생략) 제1.(현행과같음)
제2.식품일반에대한공통기준및규격
1.〜2.(생략)
3.식품일반의기준및규격
1)〜3)(생략)
4)위생지표균및식중독균
(1)(생략)
(2)식중독균
가.(생략)
가)～나)(생략)
다)클로스트리디움 퍼프린젠스
(Clostridiumperfringens)
대상식품 규격
①가)의대상식품중김치류,
절임류,조림류,복합조미식
품,식초,카레분및카레(액
상제품제외)g당100이하
(멸균제품은음성이어야한다)
②(생략) (생략)
③(생략) (생략)
④가)의대상식품중장류(메주
제외),젓갈류,고춧가루또
는실고추,향신료가공품n=5,c=2,m=100,M=1,000
(멸균제품은n=5,c=0,m=0/25g)
⑤위①,②,③,④를제외한
가)의대상식품
라)(생략)제2.식품일반에대한공통기준및규격
1.〜2.(현행과같음)
3.식품일반의기준및규격
1)〜3)(현행과같음)
4)위생지표균및식중독균
(1)(현행과같음)
(2)식중독균
가.(현행과같음)
가)～나)(현행과같음)
다)클로스트리디움 퍼프린젠스
(Clostridiumperfringens)
대상식품 규격
<삭제> <삭제>
①(생략) (현행과같음)
②(생략) (현행과같음)
③가)의대상식품중장류(메주
제외),젓갈류,고춧가루또는
실고추,향신료가공품,김치류,
절임류,조림류,복합조미식품,
식초,카레분및카레(액상제
품제외)(현행과같음)
④위①,②,③을제외한가)
의대상식품(현행과같음)
라)(현행과같음)- 52 -현행 개정(안)
나.～바.(생략) 나.～바.(현행과같음)
5)오염물질
(1)(생략)
(2)중금속기준
①∼③(생략)
④가공식품
대상식품납(mg/
kg)비소(m
g/kg)무기비소
(mg/kg)
◦식물성유지류,어
유,기타동물성유
지,혼합식용유,향
미유,가공유지,쇼
트닝,마가린0.1
이하0.1
이하
(크릴유는
제외한다)0.1이하
(크릴유에
한한다)
◦영아용조제유,성
장기용조제유,영
아용조제식,성장
기용조제식,영
유
아용이유식,영
유
아용특수조제식품(생략)-(생략)
◦특수의료용도등식
품(영
유아용특수
조제식품제외),과
자,시리얼류,면류--(생략)
◦기타식품**--(생략)
*(생략)
**기타식품은영아용조제유,성
장기용조제유,영아용조제식,
성장기용조제식,영
유아용이
유식,특수의료용도등식품 ,과
자,시리얼류,면류를제외한모
든식품을말한다.5)오염물질
(1)(현행과같음)
(2)중금속기준
①∼③(현행과같음)
④가공식품
대상식품납(mg/
kg)비소(m
g/kg)무기비소
(mg/kg)
①식물성유지류,기타
동물성유지,혼합
식용유,향미유,가공
유지,쇼트닝,마가린0.1
이하0.1
이하-
②어유0.1
이하-0.1이하
③영아용조제유,성
장기용조제유,영
아용조제식,성장
기용조제식,영
유
아용이유식,영
유
아용특수조제식품(현행과
같음)-(현행과
같음)
④특수의료용도등식품
(영
유아용특수조제
식품제외),과자,
시리얼류,면류--(현행과
같음)
⑤위②,③,④를
제외한모든식품--(현행과
같음)
*(현행과같음)
<삭제>
⑤(생략) ⑤(현행과같음)- 53 -현행 개정(안)
(3)∼(10)(생략)
5)∼17)(생략)
4.(생략)(3)∼(10)(현행과같음)
5)∼17)(현행과같음)
4.(현행과같음)
제3.∼제4.(생략)제3.∼제4.(현행과같음)
제5.식품별기준및규격
1.～8.(생략)
9.음료류
9-1.(생략)
9-2.커피
1)～4)(생략)
5)규격
(1)～(3)(생략)
(4)세균수∶n=5,c=1,m=100,
M=1,000(액상제품에한하며,
무지유고형분4%이상의제
품은n=5,c=2,m=10,000,
M=50,000으로한다.다만,멸
균제품은n=5,c=0,m=0이어
야한다.)
(5)대장균군∶n=5,c=1,m=0,
M=10(액상제품에한한다).
6)(생략)제5.식품별기준및규격
1.～8.(현행과같음)
9.음료류
9-1.(현행과같음)
9-2.커피
1)～4)(현행과같음)
5)규격
(1)～(3)(현행과같음)
(4)세균수∶------------------
------(액상제품중더이상
제조,가공하지않고그대로
섭취하는제품에한하며,
-----------------------
-----------------------
-----------------------
--------)
(5)대장균군∶---------------
-----(액상제품중더이상
제조,가공하지않고그대로
섭취하는제품에한한다).
6)(현행과같음)- 54 -현행 개정(안)
10.～21.(생략)
22.즉석식품류
22-1.(생략)
22-2즉석섭취․편의식품류
1)～4)(생략)
5)규격
(1)～(2)(생략)
(3)대장균∶n=5,c=1,m=0,
M=10(즉석섭취식품,즉석조
리식품에한하며,즉석조리식
품의살균제품은제외한다)
n=5,c=1,m=10,M=100(신
선편의식품에한한다)
(4)～(9)(생략)
6)(생략)
23.(생략)10.～21.(현행과같음)
22.즉석식품류
22-1.(현행과같음)
22-2즉석섭취․편의식품류
1)～4)(현행과같음)
5)규격
(1)～(2)(현행과같음)
(3)대장균∶--------------
-----------------------
-----------,즉석조리식품
중살균,멸균제품은제외한다)
------------------(----
----------------)
(4)～(9)(현행과같음)
6)(현행과같음)
23.(현행과같음)
제6.∼제7.(생략)제6.∼제7.(현행과같음)
제8.일반시험법
1.∼3.(생략)제8.일반시험법
1.∼3.(현행과같음)
4.미생물시험법
미생물학적검사를위해서는반드
시모든과정이무균적으로수행되
어야하며동시에시험과정중의
교차오염을방지하기위해실험실
내는항상청결을유지하여야한다.4.미생물시험법
---------------------------
----------------------------
----------------------------
----------------------------
-------------- 유지하여야한다.- 55 -현행 개정(안)
시험시음성대조군을사용하여시
험조작의무균여부를확인한다.
4.1～4.4(생략) 4.1～4.4(현행과같음)
4.5세균수
(생략)
4.5.1일반세균수
가.(생략)4.5세균수
(현행과같음)
4.5.1일반세균수
가.(현행과같음)
나.건조필름법
1)시험조작
4.3제조법에따른시험용액1
mL와각10배단계희석액1
mL를세균수건조필름배지(배
지53또는69)에각2매이상
씩접종한후잘흡수시키고
35±1℃에서48±2시간배양한
후생성된붉은집락수를계산
하고그평균집락수에희석배수
를곱하여일반세균수로한다.
균수산출및기재보고는4.5.1
일반세균수에따라한다.
다.(생략)
4.5.2(생략)나.건조필름법
1)시험조작
-----------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
---------일반세균수로한다.
검액을가하지아니한동일희
석액1mL를대조시험액으로
하여시험조작의무균여부를확
인한다.-------------------
----------------.
다.(현행과같음)
4.5.2(현행과같음)- 56 -현행 개정(안)
4.6세균발육시험
(생략)
가.(생략)
나.세균시험
1)(생략)
2)시험법
시험용액을1mL씩5개의티오
글리콜린산염배지(배지13)에
접종하여35∼37℃에서48±3시
간배양한후,5관중어느하
나라도세균증식이확인되면세
균발육양성으로한다.4.6세균발육시험
(현행과같음)
가.(현행과같음)
나.세균시험
1)(현행과같음)
2)시험법
------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------양성으로한다.검액을
가하지아니한동일희석액1
mL를대조시험액으로 하여시
험조작의무균여부를확인한다.
4.7대장균군
(생략)
4.7.1정성시험
가.유당배지법
유당배지를이용한대장균군의
정성시험은추정시험,확정시험,
완전시험의3단계로나눈다.
4.3제조법에따른시험용액
10mL를2배농도의유당배지
(배지2)에,시험용액1mL및4.7대장균군
(현행과같음)
4.7.1정성시험
가.유당배지법
------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 57 -현행 개정(안)
0.1mL를유당배지(배지2)에
각각3개이상씩가한다.
1)～3)(생략)
나.BGLB배지법
4.3제조법에따른시험용액1
mL와0.1mL를2개씩BGLB
배지(배지3)에가한다.대량의
시험용액을가할필요가있을
때에는대량의배지를넣은발
효관을사용한다.시험용액을
넣은BGLB배지(배지3)을35
∼37℃에서48±3시간배양한
후가스발생을인정하였을때
에는(배지를흔들때거품모
양의가스의존재를인정하였
을때에도)Endo한천배지(배
지5)또는EMB한천배지(배
지6)에분리배양한다.이하의
조작은가.유당배지법의확정
시험또는완전시험때와같이
행하여대장균군의유무를확-------------------------
------이상씩가한다.검액을
가하지아니한동일희석액1
mL을각각대조시험액으로 하
여시험조작의무균여부를확인
한다.
1)～3)(현행과같음)
나.BGLB배지법
------------------------
------------------------
배지(배지3)에가한다.검액을
가하지아니한동일희석액1
mL을대조시험액으로 하여시
험조작의무균여부를확인한
다.---------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------- 58 -현행 개정(안)
인한다.
다.데스옥시콜레이트유당한천배지법
4.3제조법에따른시험용액1
mL와10배단계희석액1mL
씩을멸균페트리접시2매이상
씩에무균적으로취하고약4
3～45℃로유지한데스옥시콜레
이트유당한천배지(배지9)또
는VRBA평판배지(배지96)
약15mL를무균적으로분주하
고페트리접시뚜껑에부착하지
않도록주의하면서회전하여검
체와배지를잘혼합한후응고
시킨다.그리고그표면에동일
한배지또는보통한천배지를
3～5mL를가하여중첩시킨다.
이것을35～37℃에서24±2시간
배양한후전형적인암적색의
집락을인정하였을때에는1개
이상의집락을,의심스러운집
락일경우에는2개이상을
Endo한천배지(배지5)또는
EMB한천배지(배지6)또는
MacConkey배지(배지30)에서------------------------
-------
다.데스옥시콜레이트유당한천배지법
------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
---------가하여중첩시킨다.
검액을가하지아니한동일희
석액1mL를대조시험액으로
하여시험조작의무균여부를확
인한다.------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 59 -현행 개정(안)
분리배양한다.이하의조작은
가.유당배지법의확정시험또
는완전시험때와같이행하고
대장균군의유무를시험한다.
4.7.2정량시험
가.최확수법
(생략)
1)유당배지법
4.3제조법에따른연속한3단
계이상의희석시료(10,1,0.1
또는1,0.1,0.01또는0.1,
0.01,0.001)를5개또는3개씩
의유당배지(배지2)에접종한
다.단,10mL를접종할때에
는두배농도유당배지를사용
하고0.1mL이하를접종할
필요가있을때에는10배희석
단계액을각각1mL씩사용한
다.가스발생발효관각각에
대하여추정,확정,완전시험을
행하고대장균군의유무를확
인한다음최확수표로부터검
체1mL또는1g중의대장균
군수를구한다.이때시험용액-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------
4.7.2정량시험
가.최확수법
(현행과같음)
1)유당배지법
-----------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
-----2배농도------------
------------------------
------------------------
-------------- 1mL씩사
용한다.검액을가하지아니한
동일희석액을대조시험액으로
하여시험조작의무균여부를
확인한다.----------------
------------------------
------------------------- 60 -현행 개정(안)
을가한배지의전부또는대
부분에서가스발생이인정되거
나또최소량을가한배지의
전부또는대부분이가스가발
생되지않도록접종량과희석
도를고려하여야한다.
2)BGLB배지법
4.3제조법에따른연속한3단
계이상의희석시료(10,1,0.1
또는1,0.1,0.01또는0.1,
0.01,0.001)를5개또는3개씩
BGLB배지(배지3)에각각접
종한다.단,10mL를접종할
때에는두배농도BGLB배지
를사용하고0.1mL이하를
접종할필요가있을때에는10
배희석단계액을각각1mL씩
사용한다.이때시험용액을가
한배지의전부또는대부분에
서가스발생이인정되거나또
최소량을가한배지의전부또
는대부분이가스가발생되지
않도록접종량과희석도를고
려하여야한다.이하의조작은
각발효관에대하여BGLB배------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
---------------------
2)BGLB배지법
-----------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
-------2배농도----------
------------------------
------------------------
----------------- 1mL씩
사용한다.검액을가하지아니
한동일희석액을대조시험액
으로하여시험조작의무균여
부를확인한다.----------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------- 61 -현행 개정(안)
지에의한정성시험법에따라
하고대장균군의유무를확인
한다음최확수표로부터검체
1mL또는1g중의대장균군
수를산출한다.
나.데스옥시콜레이트유당한천배지법
4.3제조법에따른시험용액1
mL와각10배단계희석액1
mL에대하여이배지에의한
정성시험법과같은조작으로
35~37℃에서24±2시간배양한
후생성된집락중전형적인집
락또는의심스러운집락에대
하여정성시험때와같은조작
으로대장균군의유무를결정한
다.균수산출은4.5.1일반세균
수에따라한다.
다.건조필름법
4.3제조법에따른시험용액1
mL와각10배단계희석액1
mL를2매이상씩대장균군건
조필름배지Ⅰ(배지54)또는대------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
-----------
나.데스옥시콜레이트유당한천배지법
------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
------------ 유무를결정한
다.검액을가하지아니한동일
희석액1mL를대조시험액으로
하여시험조작의무균여부를확
인한다.-------------------
------------------
다.건조필름법
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 62 -현행 개정(안)
장균군건조필름배지Ⅱ(배지
70)에접종한후,35±1℃에서
24±2시간배양한다.대장균군
건조필름배지Ⅰ에서는붉은집
락중주위에기포를형성한집
락수를계산하고,대장균군건
조필름배지Ⅱ에서는청색및청
녹색의집락수를계산하여그
평균집락수에희석배수를곱하
여대장균군수를산출한다.균
수산출및기재보고는4.5.1일
반세균수에따라한다.
라.(생략)-------------------------
----------------------
24±2시간배양한다.검액을가
하지아니한동일희석액1mL
를대조시험액으로 하여시험조
작의무균여부를확인한다.---
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
라.(현행과같음)
4.8대장균
(생략)
4.8.1정성시험
가.한도시험
4.3제조법에따른시험용액1
mL를3개의EC배지에접종
하고44±1℃에서24±2시간배
양후가스발생을인정한발효
관은추정시험양성으로하고
가스발생이인정되지않을때4.8대장균
(현행과같음)
4.8.1정성시험
가.한도시험
-----------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------- 63 -현행 개정(안)
에는추정시험음성으로한다.
추정시험이양성일때에는해
당EC발효관으로부터EMB
배지에접종하여35~37℃에서
24±2시간배양한후전형적인
집락을보통한천배지에접종하
여35∼37℃에서24±2시간배
양한다.보통한천배지에서배
양된집락을취하여그람염색
을실시하여그람음성,무아포
성간균을확인한후생화학
시험을실시하여대장균양성
으로판정한다.
4.8.2정량시험
가.최확수법
1)제1법
4.3제조법에따른연속한3단
계이상의희석시료(10,1,0.1
또는1,0.1,0.01또는0.1,
0.01,0.001)를각각5개또는3
개의EC배지(배지10)발효관
에접종한다음44.±1℃에서
24±2시간배양한다.시험용액-----------음성으로한다.
검액을가하지아니한동일희
석액1mL를대조시험액으로
하여시험조작의무균여부를
확인한다.----------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
4.8.2정량시험
가.최확수법
1)제1법
-----------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
-------------- 단,10mL를- 64 -현행 개정(안)
10mL를첨가할경우2배농
도의배지10mL를이용한다.
가스발생을인정한발효관을
대장균(E.coli)양성이라고판
정하고별표1또는별표2최
확수표에따라검체1mL또
는1g중의대장균수를산출
한다.
2)제2법
(1)시험용액의제조
패각을제거한검체200g에
0.1%peptonesolution(시액9)
200mL을첨가하여마쇄한후
마쇄액20mL과동일한희석
액(시액9)80mL을혼합하여
최종10배희석한것을시험용
액으로사용한다.시험용액은
필요에따라100배,1,000배등
으로희석하여사용할수있
다.접종할때에는2배농도EC
배지를사용하고0.1mL이하
를접종할필요가있을때에는
10배희석단계액을각각1mL
씩사용한다.검액을가하지
아니한동일희석액을대조시
험액으로하여시험조작의무
균여부를확인한다.---------
---------------------
------------------------
------------------------
--------------------
2)제2법
(1)시험용액의제조
-----------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------ 시험용
액으로사용한다.검체를가하
지아니한동일희석액을대조
시험액으로하여시험조작의
무균여부를확인한다.------
------------------------- 65 -현행 개정(안)
(2)～(3)(생략)
3)(생략)
나.건조필름법
4.3제조법에따른시험용액1
mL와각단계희석액1mL를
2매이상씩대장균건조필름배
지Ⅰ(배지55)또는대장균건
조필름배지Ⅱ(배지71)에접종
한후,35±1℃에서24∼48시간
배양한다.대장균건조필름배지
Ⅰ에서는푸른집락중주위에
기포를형성한집락수를계산하
고,대장균건조필름배지Ⅱ에서
는남색및보라색의집락수를
계산하여그평균집락수에희석
배수를곱하여대장균수를산
출한다.균수산출및기재보고
는4.5.1일반세균수에따라한
다.
다.(생략)
별표1.～2.(생략)------------------------
------
(2)～(3)(현행과같음)
3)(현행과같음)
나.건조필름법
------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
--------------- 24∼48시간
배양한다.검액을가하지아니
한동일희석액1mL를대조시
험액으로하여시험조작의무균
여부를확인한다.-----------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-----------------
다.(현행과같음)
별표1.～2.(현행과같음)
4.9유산균수 4.9유산균수- 66 -현행 개정(안)
4.9.1유산균수
유산균수측정방법은MRS배
지(배지87),BL한천배지(배지
15)또는BCP첨가평판측정용
배지(배지11)를사용하여유산
균의집락을계수한다.시험용
액제조희석액은멸균생리식염
수(시액2)또는펩톤식염완충
액(시액7)을사용한다.검사시
료10〜25g(mL)에9배희석액
을가하여100〜250mL가되게
하고균질화한다(10-1용액).시
험용액(10-1용액)1mL에희석
액을가하여10mL가되게하
고10-2시험용액을만든후동
일하게조작하여희석한다.
MRS배지(배지87)와BCP첨가
평판측정용배지(배지11)는일
반세균수의표준평판법에준하
여시험하고,BL한천배지(배지
15)는각희석시험용액0.1mL
씩을BL한천배지(배지15)2매
이상에접종하여멸균초자봉으
로도말한다.시료가접종된페
트리디쉬는35〜37℃에서48〜4.9.1유산균수
-----------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
----------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 67 -현행 개정(안)
72±3시간혐기배양(발효유류의
경우호기배양가능)한다.배양
후생성된집락수를측정하고
희석배수를곱하여검사시료g
당균수를산출한다.
4.9.2(생략)
4.10(생략)-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
--균수를산출한다.모든시험
에서는검액을가하지아니한
동일희석액을대조시험액으로
하여시험조작의무균여부를확
인한다.
4.9.2(현행과같음)
4.10(현행과같음)
4.11살모넬라(Salmonellaspp.)
가.증균배양
1)식품및식육:시료25mL(g)
에225mL의펩톤식염완충액
(BufferedPeptoneWater)을첨
가하여36±1℃에서18～24시간
배양한후이배양액을2종류의
증균배지,즉10mL의
Tetrathionate배지(배지88)에
1mL를첨가함과동시에10
mL의RV배지(배지57)또는
RVS배지(배지89)에0.1mL를
첨가하여각각36±1℃
(Tetrathionate배지)및41.5±4.11살모넬라(Salmonellaspp.)
가.증균배양
1)------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 68 -현행 개정(안)
1℃(RV배지또는RVS배지)
에서20～24시간동안증균배양
한다.
2)소,돼지도체:제8.일반시험
법5.원유·식육·식용란의시험
법5.2.식육시험법5.2.3.세균
학적시험법가.시료채취및
방법1)도체가)소및나)돼지
의시료채취방법에따라멸균
가아제나스폰지로시료를채취
한후멸균백에넣고50mL
BPW를넣은다음균질화시킨
후36±1℃에서18～24시간배양
한다.1차배양액은1)식품및
식육의2차증균과정을따라증
균시킨다.
3)닭,오리도체:제8.일반시험
법5.원유·식육·식용란의시험-------------------------
----------------- 증균배양
한다.시료를가하지아니한동
일펩톤식염완충액을대조시험
액으로하여시험조작의무균여
부를확인한다.
2)-----------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
----------18～24시간배양
한다.시료를채취하지않은동
일멸균가아제나스폰지로대조
시험액을제조하고함께시험하
여시험조작의무균여부를확인
한다.-------------------
-------------------------
-------
3)----------------------
-------------------------- 69 -현행 개정(안)
법5.2.식육시험법5.2.3.세균
학적시험법가.시료채취및
방법1)도체다)닭의시료채
취방법에따라채취한시료30
mL을취하여30mLBPW에
넣은다음균질화시키고36±
1℃에서18～24시간배양한다.
1차배양액은1)식품및식육
의2차증균과정을따라증균시
킨다.
4)식용란:식용란20개를채취
하여제8.일반시험법5.원유·
식육·식용란의시험법5.3.식용
란의시험법5.3.3.세균학적시
험법가.시료채취및조제에
따라소독한후말린식용란을
깨서4L용량의멸균비커또는
멸균비닐백등적정한용량의
멸균용기에넣어서준비한다음
(달걀을깰때는위생장갑을껴
야하며샘플마다위생장갑을바
꾸어준다.)멸균도구등을이용-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
------18～24시간배양한다.
시료채취시사용한동일
BPW또는BPD를대조시험액
으로하여시험조작의무균여부
를확인한다.--------------
-------------------------
-----------------
4)-----------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 70 -현행 개정(안)
하여난황과난백이섞이도록
균질화를시킨다.준비된시료
에2L의멸균TSB를섞어3
5℃에서24±2시간동안증균한
다.1차배양액은1)식품및식
육의2차증균과정을따라증균
시킨다.
나.～다.(생략)-------------------------
-------------------------
-------------------------
------24±2시간동안증균한
다.시료를넣지않은멸균
TSB를대조시험액으로 하여시
험조작의무균여부를확인한다.
-------------------------
-------------------------
----------.
나.～다.(현행과같음)
4.12황색포도상구균(Staphylococcus
aureus)
4.12.1정성시험
가.증균배양
검체25g또는25mL를취하여
225mL의10%NaCl을첨가한
TSB배지(배지23)에가한후35
∼37℃에서18∼24시간증균배양
한다.
나.～다.(생략)
4.12.2정량시험4.12황색포도상구균(Staphylococcus
aureus)
4.12.1정성시험
가.증균배양
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------18∼24시간증균배양
한다.검체를가하지아니한10%
NaCl을첨가한TSB배지를대조
시험액으로하여시험조작의무
균여부를확인한다.
나.～다.(현행과같음)
4.12.2정량시험- 71 -현행 개정(안)
가.균수측정
검체25g또는25mL를취한
후,225mL의희석액을가하여2
분간고속으로균질화하여시험
용액으로하여10배단계희석액
을만든다음각단계별희석액
을Baird-Parker한천배지(배지
63)3장에0.3mL,0.4mL,0.3
mL씩총접종액이1mL이되게
도말한다.사용된배지는완전히
건조시켜사용하고접종액이배
지에완전히흡수되도록도말한
후10분간실내에서방치시킨후
35~37℃에서48±3시간배양한
다음투명한띠로둘러싸인광택
의검정색집락을계수한다.
나.～다.(생략)가.균수측정
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
----------집락을계수한다.
검체를가하지아니한동일희석
액을대조시험액으로하여시험
조작의무균여부를확인한다.
나.～다.(현행과같음)
4.13.장염비브리오(Vibrioparahaemolyticus)
4.13.1정성시험
가.증균배양
검체25g또는25mL를취하
여225mL의Alkaline펩톤수4.13.장염비브리오(Vibrioparahaemolyticus)
4.13.1정성시험
가.증균배양
-------------------------
-------------------------- 72 -현행 개정(안)
(배지16)를가한후35~37℃에
서18～24시간증균배양한다.
나.～다.(생략)
4.13.2정량시험
가.균수측정
검체25g또는25mL를취한
후,225mL의희석액을가하여
2분간고속으로균질화하여시
험용액으로하여10배단계희
석액을만든다음각단계별희
석액을TCBS한천배지(배지
17)3장에0.3mL,0.4mL,0.3
mL씩총접종액이1mL이되
게도말한다.사용된배지는완
전히건조시켜사용하고접종액
이배지에완전히흡수되도록
도말한후10분간실내에서방
치시킨후35～37℃에서18～
24시간배양한다음청록색의
서당(sucrose)비분해집락을계
수한다.-------------------------
----18～24시간증균배양한다.
검체를가하지아니한Alkaline
펩톤수를대조시험액으로 하여
시험조작의무균여부를확인한
다.
나.～다.(현행과같음)
4.13.2정량시험
가.균수측정
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
--------------- 1mL이되
게도말한다.검체를가하지아
니한동일희석액을대조시험액
으로하여시험조작의무균여부
를확인한다.--------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 73 -현행 개정(안)
나.～다.(생략)-------------------------
-------------------------
----------
나.～다.(현행과같음)
4.14클로스트리디움 퍼프린젠스
(Clostridiumperfringens)
4.14.1정성시험법
가.증균배양
4.3제조법에따른시험용액1
mL를CookedMeat배지(배지
33)의아랫부분에접종하여3
5～37℃에서18～24시간동안
혐기배양한다.
나.～다.(생략)
4.14.2정량시험법
가.균수측정
검체25g또는25mL를취하
여225mL의희석액을가한후
1∼2분간저속으로균질화한
후10배단계희석액을만든다.
시험용액및단계별희석액1
mL씩을2매이상의멸균페트4.14클로스트리디움 퍼프린젠스
(Clostridiumperfringens)
4.14.1정성시험법
가.증균배양
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
혐기배양한다.검액을가하지
아니한동일희석액1mL를대
조시험액으로하여시험조작의
무균여부를확인한다.
나.～다.(현행과같음)
4.14.2정량시험법
가.균수측정
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------- 74 -현행 개정(안)
리접시에무균적으로분주하고,
43～45℃로유지한난황을첨
가하지않은TSC한천배지(배
지41)10∼15mL를가하여좌
우로돌리면서잘혼합한후응
고시킨다.응고된배지위에다
시동일한배지10mL를가하
여중첩시킨후35∼37℃에서
24±2시간혐기배양한다.150
개이하의전형적인검은색집
락이확인된평판을선별하여
각집락수를계수한다.
나.～다.(생략)------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------혐기배양한다.검체를
가하지아니한동일희석액
1mL을대조시험액으로 하여
시험조작의무균여부를확인한
다.---------------------
------------------------
------------------
나.～다.(현행과같음)
4.15리스테리아모노사이토제네스
(Listeriamonocytogenes)
가.증균배양
가공식품및수산물에대해서는
증균배지로Listeria증균배지(배
지35)를사용하며,검체25
g(mL)를취하여225mL의
Listeria증균배지를가한후3
0℃에서48시간배양한다.유가4.15리스테리아모노사이토제네스
(Listeriamonocytogenes)
가.증균배양
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 75 -현행 개정(안)
공품,식육가공품,알가공품,식
육및가금류는25g(mL)을
Listeria증균배지(배지35)
PALCAMBroth또는
UVM-modifiedListeria증균배
지(배지36)225mL에접종하여
30℃에서24±2시간동안증균
배양한후,배양액0.1ml을
10ml의Fraserbroth에접종하여
35∼37℃에서24∼48시간2차증
균을실시한다.
나.～다.(생략)-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
------------------- 2차증
균을실시한다.모든시험에서는
검체를가하지아니한동일증균
배지를대조시험액으로 하여시
험조작의무균여부를확인한다.
나.～다.(현행과같음)
4.16장출혈성대장균(생략)
가.증균배양
검체25g(25mL)을취하여225
mLmTSB(배지74)를가한후
35～37℃에서24시간증균배양
한다.
나.～마.(생략)4.16장출혈성대장균(생략)
가.증균배양
------------------------
-------------------------
-----------24시간증균배양
한다.검체를가하지아니한동
일mTSB를대조시험액으로 하
여시험조작의무균여부를확인
한다.
나.～마.(현행과같음)- 76 -현행 개정(안)
4.17여시니아엔테로콜리티카
(Yersiniaenterocolitica)
가.증균배양
검체25g또는25mL를취하여
PSBB배지(배지44)225mL을
가하고,동시에PSBB배지를가
한검액10mL를취해ITC배지
(배지97)90mL에가한다.각각
의검액을25℃에서48시간배양
한다.
나.～다.(생략)4.17여시니아엔테로콜리티카
(Yersiniaenterocolitica)
가.증균배양
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
--------------- 48시간배양
한다.검체를가하지아니하고
동일한방법으로제조한ITC배
지를대조시험액으로 하여시험
조작의무균여부를확인한다.
나.～다.(현행과같음)
4.18바실루스세레우스(Bacillus
cereus)
4.18.1정성시험
가.분리배양
검체25g또는25mL를취하
여225mL의희석액을가하여
균질화한검액을MYP한천배지
(배지46)에접종하여30℃,24
시간배양하거나PEMBA한천
배지(배지98)에접종하여37℃
에서24시간배양한다.배양후4.18바실루스세레우스(Bacillus
cereus)
4.18.1정성시험
가.분리배양
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
-------------------- 37℃
에서24시간배양한다.검체를- 77 -현행 개정(안)
MYP한천배지에서는혼탁한환
을갖는분홍색집락또는
PEMBA한천배지에서는혼탁한
환을갖는청녹색집락을선별
한다.이때명확하지않을경
우24시간더배양하여관찰한
다.
나.(생략)
4.18.2정량시험
가.균수측정
검체25g또는25mL를취한
후,225mL의희석액을가하여
2분간고속으로균질화하여시
험용액으로한다.희석액을사
용하여10배단계희석액을만
든다.MYP한천평판배지(배지
46)에단계별희석용액총접종
액이1mL이되도록3∼5장을
도말하여30℃에서24±2시간
배양한후집락주변에
lecithinase를생성하는혼탁한
환이있는분홍색집락을계수가하지아니한동일희석액을
대조시험액으로 하여시험조작
의무균여부를확인한다.----
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
---------------
나.(현행과같음)
4.18.2정량시험
가.균수측정
-----------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------- 집락을계수- 78 -현행 개정(안)
한다.
나.～다.(생략)한다.검체를가하지아니한동
일희석액을대조시험액으로하
여시험조작의무균여부를확인
한다.
나.～다.(현행과같음)
4.19캠필로박터제주니/콜리
(Campylobacterjejuni/coli)
가.증균배양
1)식품및식육:검체25g(mL)
를Campylobactersupplement
(A)(유가공품의 경우는
Campylobactersupplement(B))
가첨가된HUNT(CEB)배지(배
지47),Bolton배지(배지68)또
는Preston배지(배지78)100
mL에넣고균질화한후35∼3
7℃에서4～5시간동안미호기적
(5%O2,10%CO2,85%N2)으로
1차증균하고42±1℃에서44±
4시간미호기적으로2차증균한
다.다만,HUNT배지를사용할
경우,2차증균시일반식품은
Cefoperazone용액(0.8g/100
mL)0.4mL를첨가하고유제품
은Rifampicin용액(0.125g/1004.19캠필로박터제주니/콜리
(Campylobacterjejuni/coli)
가.증균배양
1)---------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 79 -현행 개정(안)
mL)0.4mL를첨가하여배양한
다.
2)소,돼지도체:제8.일반시험
법5.원유·식육·식용란의시험
법5.2.식육시험법5.2.3.세균
학적시험법가.시료채취및방
법1)도체가)소및나)돼지의
시료채취방법에따라멸균가아
제나스폰지로시료를채취한
후멸균백에넣고25mLBPW
를넣은다음균질화를시킨후
혈액을첨가하지않는
2XBolton배지(2XBF-BEB)25
mL를넣고미호기적조건으로
42±1℃에서48±2시간배양한다.
3)닭,오리도체:제8.일반시험
법5.원유·식육·식용란의시험
법5.2.식육시험법5.2.3.세균---------첨가하여배양한다.
모든시험에서는시험용액을가
하지아니한동일증균배지를대
조시험액으로하여시험조작의
무균여부를확인한다.
2)-----------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
--------48±2시간배양한다.
시료를채취하지않은동일멸균
가아제나스폰지로대조시험액
을제조하고함께시험하여시험
조작의무균여부를확인한다.
3)----------------------
-------------------------
-------------------------- 80 -현행 개정(안)
학적시험법가.시료채취및방
법1)도체다)닭의시료채취방
법에따라채취한시료30mL에
혈액을첨가하지않는2XBolton
배지(2XBF-BEB)30mL를넣
고균질화한후미호기적조건
에서42±1℃48±2시간배양한
다.
나.～다.(생략)-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
------------48±2시간배양
한다.시료채취시사용한동일
BPW또는BPD를대조시험액으
로하여시험조작의무균여부를
확인한다.
나.～다.(현행과같음)
4.20클로스트리디움 보툴리눔
(Clostridiumbotulinum)
가.증균배양
고형또는반고형물검체는동량
의젤라틴인산완충액(시액5)을
첨가하고균질화하여시험용액
으로하며,액상검체는그대로
사용한다.1～2g또는1～2mL
의검체를2개의CookedMeat
배지(배지33)15mL에접종하
여35∼37℃에서7일간배양하고
또2개의TPGY배지(배지50)에
같은방법으로접종하여26℃에4.20클로스트리디움 보툴리눔
(Clostridiumbotulinum)
가.증균배양
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
------------------- 26℃에- 81 -현행 개정(안)
서7일간배양한다.다만,접종
전각배지는10～15분간중탕하
여탈산소한후신속히냉각하여
사용하며,검체는배지아래부분
에천천히접종하고교반하지않
는다.배양7일후검경하여전형
적인클로스트리디움이 관찰되
면다음의분리배양을실시하고,
관찰되지않는경우에는추가적
으로10일간더배양한다.
나.～라.(생략)서7일간배양한다.검체를가하
지아니한동일젤라틴인산완충
액을대조시험액으로 하여시험
조작의무균여부를확인한다.
(검체를그대로사용하는액상
검체는검체를가하지아니한동
일CookMeat배지와TPGY배
지로무균여부를확인)-------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
나.～라.(현행과같음)
4.21크로노박터(Cronobacterspp.)
가.증균배양
검체5관에서검체각60g을무
균적으로채취하여540mL의멸
균증류수에가한후35~37℃에서
18∼24시간증균배양한다.증균
배양액10mL를90mL의EE4.21크로노박터(Cronobacterspp.)
가.증균배양
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 82 -현행 개정(안)
배지(배지59)에첨가하여35∼
37℃에서18∼24시간2차증균
배양한다.
나.～다.(생략)-------------------------
----------------- 2차증균
배양한다.검체를가하지아니한
동일멸균증류수를대조시험액
으로하여시험조작의무균여부
를확인한다.
나.～다.(현행과같음)
4.22탄저균(Bacillusanthracis)
가.배양및균분리
검체25g또는25mL에희석액
50mL을가하여분쇄혼합한뒤,
62.5±0.5℃항온수조에서30～60
분간가열처리한다.배양된유제
를10배단계희석하여각희석액
으로부터100μL를취하여혈액
한천배지(배지79)에도말하여3
7℃에서24시간배양한다.탄저균
은그균의특이한회백색의축모
상혹은곰보유리모양의집락을
형성하며혈액한천배지에서는용
혈성이거의없고액체배지에서
는침전하여발육하며상층부는
투명하고균막을형성하지않는
다.의심되는집락을도말하여염
색하면그람양성의대간균으로서4.22탄저균(Bacillusanthracis)
가.배양및균분리
-------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
-----24시간배양한다.검체를
가하지아니한동일희석액을대
조시험액으로하여시험조작의
무균여부를확인한다. -------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------- 83 -현행 개정(안)
양단이직각으로갈라져있고낚
시대모양의연쇄상을나타낸다.
나.～다.(생략)--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
------------
나.～다.(생략)
4.23결핵균
가.배양전확인법및균배양후
균분리검사
우유와같은액상의검체는그대
로사용하고,식육및식육가공
품은검체25g에희석액225
mL을가한후유제액을제조하
여사용한다.액상검체또는유
제액25mL를3,000rpm에서30
분간원심분리하여상층부를새
로운시험관에취하고침전물에
서1백금이를취하여도말표본
을만들고Ziel-Neelsen법으로
항산성염색을실시하여항산성
균을검경으로확인한다.상층부
에는동량의8%NaOH액을,침
전물에는그의약10배량의4%
NaOH액을가하여잘혼합한후
각각0.1mL씩을4.23결핵균
가.배양전확인법및균배양후
균분리검사
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 84 -현행 개정(안)
Lowenstein-Jensen사면배지(배
지80)또는Middlebrook7H10
한천배지(배지81)에접종한후
37℃에서8주간배양한다.배양
기간동안배양유무를육안으로
관찰한다.배양이육안으로관찰
되면slideglass에균를도말하
여Ziehl-Neelsen법으로항산성
염색을실시하여항산성균을검
경으로확인한다.결핵균의성장
은일반적으로3∼6주배양동안
관찰된다.특이적으로느린성장
패턴과균모양으로결핵균을잠
정적으로진단할수있다.
나.～다.(생략)-------------------------
-------------------------
-------------------------
----8주간배양한다.유제액을
제조하여사용하는경우에는검
체를가하지아니한동일희석액
을대조시험액으로 하여시험조
작의무균여부를확인한다.---
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-----------
나.～다.(현행과같음)
4.24브루셀라(Brucellaspp.)
가.배양및균분리
검체25g또는25mL을
amphotericinB1㎍/mL,
vancomycin20㎍/mL가첨가된4.24브루셀라(Brucellaspp.)
가.배양및균분리
-------------------------
-------------------------
-------------------------- 85 -현행 개정(안)
serumdextrose배지(배지82),
TSB배지(배지23)또는
Brucella배지(배지85)225mL
에넣은후균질화한다음5～
10%의CO2가스주입이되는
37℃배양기에서6주동안배양
하면서주마다배지에도말하여
확인한다.다만,검체가심하게
오염되었거나브루셀라균이매
우낮은농도로오염되었을가능
성이클경우에동물실험을할
수있다.
나.～다.(생략)
4.25∼4.26(생략)-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
------------------ 도말하여
확인한다.검체를가하지아니한
증균배지를대조시험액으로 하
여시험조작의무균여부를확인
한다.--------------------
-------------------------
-------------------------
-----------------------.
나.～다.(생략)
4.25∼4.26(현행과같음)
5.(생략) 5.(현행과같음)
6.식품별규격확인시험법
6.1(생략)
6.2당류
6.2.1올리고당
가.(생략)
나.이소말토올리고당
1)장치
고속액체크로마토그래프6.식품별규격확인시험법
6.1(현행과같음)
6.2당류
6.2.1올리고당
가.(현행과같음)
나.이소말토올리고당
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절- 86 -현행 개정(안)
2)시약
(가)50%알코올
(나)활성탄∶청주용또는당액
탈색용
(다)이온교환수지∶강산성형(H
형)및강알칼리형(OH형)
(라)퍼라이트(Perlite)
(마)아세토니트릴∶HPLC용
(바)표준당
단당류—Glucose,Fructose
이당류—Maltose,*Isomaltose,
Sucrose,*Kojibiose,
*Nigerose
삼당류—Maltotriose,*Pannose,
*Isomaltotriose
사당류—Maltotetraose,
*Isomaltotetraose
오당류—Maltopentaose,
*Isomaltopentaose
육당류―Maltohexaose,
*Isomaltohexaose
칠당류―Maltoheptaose,
*Isomaltoheptaose
(*는이소말토올리고당의분기
당성분)검출기(RefractiveIndex
detector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
단당류—Glucose
이당류—Maltose
삼당류—Maltotriose
사당류—Maltotetraose
오당류—Maltopentaose
육당류—Maltohexaose
칠당류—Maltoheptaose
나)물:HPLC용
다)50%에탄올
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당을물로녹여100
mg/mL농도가되도록조제한
후혼합하여표준원액으로한
다.표준원액을물로희석하여
625∼10,000 μg/mL범위로조
제하여표준용액으로한다.
4)시험용액의조제
이소말토올리고당으로서 약0.1
∼0.5g이되도록검체를취해
물또는50%에탄올(단백질을- 87 -현행 개정(안)
3)표준용제의조제
(가)배제형이온교환계∶각중합
도의직쇄당을정확하게50
mg씩달아탈기한증류수
50mL에녹이고,용해되기
어려울때는가온하여녹이
고냉각후증류수100mL
로채워표준용액으로한다.
(나)역상분배계∶각분기당의표
준액100mg을증류수1mL
에용해한것을표준용액으
로한다.
4)시험용액조제
(가)유지를거의함유하지않은
검체인경우이소말토올리고
당이약500mg이되도록
시료를적당량(0.5~5g)을정
확히달아여기에물또는
50%알코올(단백질을함유
한경우)을30mL넣어서
가열하여용해,혹은추출한
다.추출액은약0.5g의활
성탄과이온교환수지(양이온
및음이온을1∶2로혼합한
것약1.5g)을사용하여정함유한경우)15mL에용해한
후50mL로정용한다(필요시
1,000×g에서10분간원심분
리한다).이용액을0.45μm의
필터로여과하여시험용액으로
한다.
5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)배제형이온교환계
①칼럼:Asahipak
NH2P-504E(4.6mmi.d
×250mm×5μm)혹은
이와동등한것
②칼럼온도:30℃
③이동상:65%
아세토니트릴
④유속:1.0mL/min
⑤ 검출기:
시차굴절검출기(RI)
(2)역상분배계
①칼럼:RSpak
DC-613(6.0mmi.d×150
mm×6μm)혹은이와
동등한것
②칼럼온도:50℃- 88 -현행 개정(안)
제하고,전량을500mL로
하여시험용액으로한다.
(나)유지를많이함유한검체인
경우
이소말토올리고당적당량(0.5~5
g)을정확히달아분말인경우
에는그대로추출기에넣고,시
료가액체인경우에는필요하다
면(pH4~10이외)중화한후퍼
라이트를부석부석하게될때까
지넣어서잘분산시켜8~16시
간탈지한다.탈지후원통여과
지안의전량을꺼내어위의
(가)와같이추출이후의조작
을한다.
주1.중합도2~5와거의같은
분자량인설탕,유당,프락토올
리고당,Couplingsugar및갈
락토올리고당이혼재할경우에
는각각의측정법으로따로분
석한다.그러나이성화당,포도
당,물엿등의전분당이혼재할
경우에는이소말토올리고당의
분석을방해하지않는다.
5)시험조작③이동상:70%
아세토니트릴
④유속:0.8mL/min
⑤ 검출기:
시차굴절검출기(RI)
6)정성시험
위의조건에서얻어진
크로마토그램상의피크는
어느측정조건에서도
시험용액과표준용액피크의
머무름시간이일치하여야
한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을각각
10 μL씩주입하여위의
조건에서 시험한다.
표준용액의피크면적또는
높이를구하여검량선을
작성한다.
가)배제형이온교환계에서
분석한피크면적또는
높이에의해각중합도의
함유량(mg/mL)이구해지며
그결과는다음과같다.
DP1(단당류):A- 89 -현행 개정(안)
(가)고속액체크로마토그래피조
건
①배제형이온교환계
—칼럼∶∮8mm×200mm
MCIGELCKO4S상당품
—가드칼럼∶∮8mm×50
mmMCIGELCKO8S상
당품
—칼럼온도∶65℃
—이동상∶물
—유속∶0.4mL/min
—검출기∶시차굴절계(RI)
②역상분배계
—칼럼∶∮4.6mm×250mm
TSKGELNH2-60상당
품
—칼럼온도∶35℃
—이동상∶아세토니트릴∶물
(63∶37)
—유속∶0.8mL/min
—검출기∶시차굴절
(RefractiveIndex)계
(나)정량시험
①검량선의작성∶표준용액을
5,10,15,20,25mL씩을넣DP2(이당류):B
DP3(삼당류):C
DP4(사당류):D
DP5(오당류):E
DP6(육당류):F
DP7(칠당류):G
나)역상분배계에서시료를분
석한Data의각당분함유율(%)
은다음과같다.
DP1Glucose
A1
DP1Glucose이외의단당류
A2
DP2Maltose
B1
DP2Maltose이외의이당류
B2
DP3Maltotriose
C1
DP3Maltotriose이외의삼
당류C2
DP4Maltotetraose
D1
DP4Maltotetraose이외의
사당류D2- 90 -현행 개정(안)
고증류수로각각50mL로
(이농도는25,50,75,100,
125mg/50mL가된다)한다
음10μL씩주입한후상당
하는직쇄상의피크에따라
서면적또는높이를읽어내
어검량선을작성한다.
②계산
㉮배제형이온교환계에서분
석한피크의면적또는높
이에의해구해진각중합
도의검량선에서각각의
중합도의함유량이구해지
며그결과는다음과같
다.
중합도DP1(단당류)∶A
중합도DP2(이당류)∶B
중합도DP3(삼당류)∶C
중합도DP4(사당류)∶D
중합도DP5(오당류)∶E
중합도DP6(오당류)∶F
중합도DP7(오당류)∶G
③역상분배계에서시료를분석
한Data의각당분함유율
(%)은다음과같다.DP5Maltopentaose
E1
DP5Maltopentaose이외의
오당류E2
DP6Maltohexaose
F1
DP6Maltohexaose이외의
육당류F2
DP7Maltoheptaose
G1
DP7Maltoheptaose이외의
칠당류G2
DP1Glucose(mg/mL)
A×A＋AA＝a
DP2Maltose(mg/mL)
B×B＋BB＝b
DP3Maltotriose(mg/mL)
C×C＋CC＝c
D P 4
Maltotetraose(m g/mL)
D×D1
D1＋D2＝d
D P 5- 91 -현행 개정(안)
DP1FructoseA1
DP1GlucoseA2
DP2Maltose B1
DP2Sucrose B2
DP2Isomaltose B3
DP2NigeroseB4
DP2Gojibiose B5
DP3Maltotriose C1
DP3Pannose C2
DP3Isomaltotriose C3
DP3불명(분기당)C4
DP4Maltotetraose D1
DP4Isomaltotetraose D2
DP5Maltopentaose E1
DP5Isomaltopentaose E2
DP6이상 F
DP6IsomaltohexaoseF2
DP7Maltoheptaose G1
DP7Isomaltoheptaose G2
DP8이상 H
(주∶이소말토올리고당에는
DP4이상의직쇄당및DP8이상
의성분을포함하지않는다)
<계산>
DP1FructoseAMaltopentaose(m g/mL)
E×E1
E1＋E2＝e
D P 6
Maltohexaose(mg/mL)
F×F1
F1＋F2＝f
D P 7
Maltoheptaose(m g/mL)
G×G1
G1＋G2＝g
이소말토올리고당함량(%)
=T-(a+b+c+d+e+f+g)
×h×i×100
시료채취량(g) 1,000
T(배제형이온교환계에서분석한
당의함유량)=
A+B+C+D+E+F+G
h:시험용액의전량(mL)
i:시험용액의희석배수- 92 -현행 개정(안)
mg×A1
A1＋A2＝a1mg
DP1GlucoseA
mg×A2
A1＋A2＝a2mg
DP2MaltoseB
mg×B1
B1＋B2＋B3＋B4＋B5＝
b1mg
DP2SucroseB
mg×B2
B1＋B2＋B3＋B4＋B5＝
b2mg
DP2Isomaltose B
mg×B3
B1＋B2＋B3＋B4＋B5＝
b3mg※
DP2NegeroseB
mg×B4
B1＋B2＋B3＋B4＋B5＝
b4mg※
DP2KojibioseB
mg×B5
B1＋B2＋B3＋B4＋B5＝
b5mg※
DP3MaltotrioseCmg
×C1
C1＋C2＋C3＋C4＝c1mg
DP3PannoseCmg- 93 -현행 개정(안)
×C2
C1＋C2＋C3＋C4＝c2mg
※
DP3Isomaltotriose C
mg×C3
C1＋C2＋C3＋C4＝c3
mg※
DP3불명(분기당)Cmg
×C4
C1＋C2＋C3＋C4＝c4mg
※
DP4Maltotetraose D
mg×D1
D1＋D2＝d1mg
DP4Isomaltotetraose D
mg×D2
D1＋D2＝d2mg※
DP5Maltopentaose E
mg×E1
E1＋E2＝e1mg
DP5Isomaltopentaose E
mg×E2
E1＋E2＝e2mg※
DP6이상F
mg＝fmg
DP6MaltohexaoseF
mg×F1
F1＋F2＝f1mg
DP6IsomaltohexaoseF- 94 -현행 개정(안)
mg×F2
F1＋F2＝f2mg※
DP7Maltoheptaose G
mg×G1
G1＋G2＝g1mg
DP7Isomaltoheptaose G
mg×G2
G1＋G2＝g2mg※
DP8이상H
mg＝hmg
결국시료채취량을Img으로하
고희석배수를Ｌ로하면,위의
※은모두분기당이므로분기당
함유량(%)＝(b3＋b4＋b5＋c2＋
c3＋c4＋d2＋e2＋f2＋g2)
×L÷I×100으로한다.
다.갈락토올리고당(전이갈락토올리
고당)
1)장치
고속액체크로마토그래프
2)시약
(가)20%(w/v)설포살리실린산용
액(Sulfosalicylicacid)∶시
약특급의설포살리실린산20
g에물을넣어용해시켜100
mL로한다.다.갈락토올리고당(전이갈락토올리
고당)
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절
검출기(RefractiveIndex
detector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
Glucose
Galactose- 95 -현행 개정(안)
(나)Ribose∶시약특급
(다)Arabinose∶시약특급
3)표준용액의조제
갈락토올리고당2g을정확히달
아물에녹여50mL로한다.
4)시험용액조제
갈락토올리고당이약0.1~1g포
함되도록검체적당량을정확히
달아물을가해용해시킨후50
mL로한다.이용액을0.45μm의
필터로여과시켜이를시험용액으
로한다.
주1.단백질제거조작이필요한
시료에대해서는설포살리실린산
을여러방울첨가하여생긴불용
성단백질을원심분리로제거하든
가SeppakC18cartridge를통과
시키든가한다.이들의제작을요
하는경우에는내부표준으로서
Ribose또는Arabinose를사용한
다.
주2.유지를많이함유한시료의
경우시료의전처리는프락토올리
고당의분석법의전처리방법에준
한다.Lactose
Galactooligosaccharides(순
도70%이상)
나)물:HPLC용
다)20%(w/v)설포살리실린산
용액:설포살리실산
(Sulfosalicylicacid)20g에
물을넣어용해시켜100mL
로한다.
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
Galactooligosaccharides(GOS)
4g을물20mL로녹여50mL
로정용한후혼합하여표준원
액으로한다.표준원액을이동
상으로희석하여8,000∼40,000
μg/mL범위로조제하여표준용
액으로한다.머무름시간확인
을위해glucose,galactose,
lactose는50mg씩10mL의이
동상에녹여(5,000 μg/mL)표준
용액으로한다.
4)시험용액조제
갈락토올리고당으로서0.1∼1g
이되도록검체를취해물20- 96 -현행 개정(안)
주3.시료중에갈락토올리고당이
외의3~6당류인올리고당이존
재할경우에는해당하는올리고당
분해효소에의해단당류,2당류로
분해하고나서분석한다.그러나
이성화당,설탕이나다당류의존
재는갈락토올리고당의분석을방
해하지않는다.
5)시험조작
(가)고속액체크로마토그래프조
건
—칼럼∶ShodexIonpak
KS-802상당품및역상
aminocolumn
—칼럼온도∶80℃
—이동상∶물
—유속∶0.4mL/min
—검출기∶시차굴절계(RI)
(나)정량시험
갈락토올리고당표준용액을2,4,
6,8및10mL를20mL용메스
플라스크에정확하게취하여물
로눈금을맞춘다음,각각10μ
L씩고속액체크로마토그래프에
주입시켜피크의면적또는높이mL에용해한후50mL로정용
한다.단,단백질제거조작이
필요한시료에대해서는20%
설포살리실산용액을여러방울
첨가하여생긴불용성단백질을
1,000×g에서10분간원심분리
하여제거한다.이용액을0.45
μm의필터로여과하여시험용
액으로사용한다.
5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)배제형이온교환계
①칼럼:Shodex
SC1011(8.0mmi.d×
300mm×6μm)혹은
이와동등한것
②칼럼온도:80℃
③이동상:물
④유속:0.4mL/min
⑤검 출 기 :
시차굴절검출기(RI)
(2)역상분배계
①칼럼:TSKGELNH2
-100(4.6mmi.d×150
mm×3μm)혹은이와- 97 -현행 개정(안)
를읽어내어검량선을작성한다.
검체중의갈락토올리고당의함
량(%)은다음식으로구한다.
갈락토올리고당(%)
Bmg/mL×50mL
Ag×100
1000
A∶시료채취량(g)
B∶검량선에서구한갈락토올
리고당의농도(mg/mL)동등한것
②칼럼온도:35℃
③이동상:70%
아세토니트릴
④유속:0.8mL/min
⑤검출기:
시차굴절검출기(RI)
6)정성시험
위의조건에서얻어진
크로마토그램상의피크는
어느측정조건에서도
시험용액과표준용액피크의
머무름시간이일치하여야
한다.
7)정량시험
가)배제형이온교환계
표준용액과시험용액을
각각2μL씩주입하여
위의조건에서시험한다.
표준용액의피크면적
또는높이를구하여각
당류의함유량(mg/mL)이
구해지며그결과는
다음과같다.
DP2(이당류):A- 98 -현행 개정(안)
DP3(삼당류이상):B
그림1.갈락토올리고당크로마토그램
(배제형이온교환계)
나)역상분배계
10,000 μg/mL농도의GOS
표준용액,5,000 μg/mL농
도의glucose,galactose,
lactose표준용액과시험용
액을각각10μL씩주입하
여위의조건에서시험하여
각당류의비율(%)을구한
다(단,용액의농도는필요
에따라조절가능하다).전
체당함량을100으로했을
때각중합도의당류비율
은다음과같다.
DP1(전체당함량중단당
류의비율):a
DP2(전체당함량중이당
류의비율):b
DP3(전체당함량중삼당- 99 -현행 개정(안)
류이상의비율):c
(a+b+c=100(%))
그림2.갈락토올리고당크로마토그램
(역상분배계)
갈락토올리고당함량(%)
=[(A×d/b)+B]×e×f×100
시료채취량(g)1,000
b:전체당함량중이당류
의비율
d:전체당함량중lactose
를제외한이당류의비율
e:시험용액의전량(mL)
f:시험용액의희석배수
라.∼사.(생략)
6.2.2∼6.14(생략)라.∼사.(현행과같음)
6.2.2∼6.14(현행과같음)
7.식품중잔류농약분석법
7.1∼7.1.4.233(생략)
<신설>7.식품중잔류농약분석법
7.1∼7.1.4.233(현행과같음)
7.1.4.234가스가마이신(Kasugamycin)
가.시험법적용범위
곡류,서류,두류,과일류,채소- 100 -현행 개정(안)
류등의식품에적용한다.
나.분석원리
검체중가스가마이신을메탄올
로추출한후HLB카트리지로
정제하여액체크로마토그래프-
질량분석기로분석한다.
다.장치
1)액체크로마토그래프-질량분석기
(LC-MS/MS)
라.시약및시액
1)용매:잔류농약시험용또는
특급
2)물:3차증류수또는이와
동등한것
3)표준원액:가스가마이신표준
품을물에녹여1,000mg/L가
되게한다.
4)표준용액:표준원액을무처리
시료추출물을이용하여적당한
농도로혼합,희석한다(무처리
시료추출물90%이상포함).
5)HLB카트리지(Hydrophilic
-lipophilicbalancecartridge):
Divinylbenzene-N-vinylpyrrolid
onecopolymer(500mg)고정상- 101 -현행 개정(안)
이충전되어있는일회용카트
리지(용량6mL)또는이와동
등한것
6)기타시약:잔류농약시험용
또는특급
7)특이사항:가스가마이신은유
리벽면에흡착할가능성이있
으므로모든시험과정은폴리프
로필렌으로된용기를사용하며,
시험용액은조제후즉시분석
한다.
마.시험용액의조제
1)추출
검체를분쇄하여균질화한후5
g(곡류및두류는약1kg을혼
합하여표준체420μm를통과
하도록분쇄한후5g,서류,과
일류및채소류는약1kg을분
쇄한후5g)을정밀히달아50
mL원심분리관에넣고메탄올
10mL를가한뒤1분간흔들고
1N수산화나트륨용액을첨가
하여추출용액의pH를13으로
조절한다.pH조절후10분간
진탕하고4℃,7,000G에서10분- 102 -현행 개정(안)
간원심분리하여상층액전량을
취하는방법으로2회반복추출
한다.취하여진상층액에메탄올
을가하여부피를25mL로맞
춘다.
2)정제
HLB카트리지에메탄올3mL
와물3mL를차례로넣고2∼
3방울/초의속도로유출시켜
활성화한다.고정상상단이노출
되기전에‘1)추출’로부터얻은
용액5mL를카트리지상단에
가하고1∼2방울/초의속도로
용출시켜받고,고정상상단이
노출되기전에메탄올5mL를
카트리지상단에가하고1∼2
방울/초의속도로용출시켜앞
서받은액과합쳐부피를10mL
로맞춘다.정제된용액을멤브
레인필터(Nylon,0.2μm)로여
과한후시험용액으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프분석조건
가)칼럼:HILIC(아마이드계)칼
럼또는이와동등한것- 103 -현행 개정(안)
나)칼럼온도:40℃
다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함유
물
(2)이동상B:0.1%포름산함유
아세토니트릴
(3)농도구배조건
시간(분)A(%)B(%)
0.01090
2.01090
2.13070
7.09010
7.59010
8.01090
10.01090
라)이동상유속:0.3mL/분
마)주입량:2μL
2)질량분석기분석조건
가)이온화방법:ESIpositive-ion
mode
나)Capillaryvoltage:1.7kV
다)Collisiongas:아르곤(Ar)
표.액체크로마토그래프-질량분석기
분석을위한특성이온- 104 -현행 개정(안)
분석성분
(Compound)평균
분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursorion,
[M+H]+,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
가스가마이신
(Kasugamycin)379.4379.163801121)21
15614
20015
1)정량이온이며,그외는정성이온임.
※각생성이온에대한질량분석기의기기조건은
사용기기의최적값으로변경하여사용할수
있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함.
3)검량선작성
표준용액을농도별로일정량
취하여액체크로마토그래프-질량
분석기에각각주입하여얻은
크로마토그램상의각피크높이
또는면적값으로검량선을작성
한다.
4)표준품의크로마토그램
그림.
액체크로마토그래프-질량분석기에서
표준품의크로마토그램
가스가마이신(3.7분)- 105 -현행 개정(안)
<신설>*분석기기:LC(ShimadzuⓇNexeraX2),
MS/MS(ShimadzuⓇLCMS-8060),
컬럼(XBridgeⓇAmide,2.1mmI.D.×100mmL.,3.5μm)
5)정량한계
0.01mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토
그램상의피크가표준용액피크의
머무름시간과일치할때피크
높이또는면적을검량선에대입
하여정량한다.
아.확인시험
액체크로마토그래프-질량분석기
상의머무름시간과특성이온으
로가스가마이신을확인한다.
7.1.4.235펜피콕사미드(Fenpicoxamid)
가.시험법적용범위
곡류,서류,두류,과일류,채소
류등의식품에적용한다.
나.분석원리
검체중펜피콕사미드를아세토
니트릴로추출한후d-SPE(disp
ersive-solidphaseextraction)로
정제하여액체크로마토그래프-
질량분석기로분석한다.- 106 -현행 개정(안)
다.장치
1)액체크로마토그래프-질량분석기
(LC-MS/MS)
라.시약및시액
1)용매:잔류농약시험용또는
특급
2)물:3차증류수또는이와
동등한것
3)표준원액:펜피콕사미드표준
품을아세토니트릴에녹여1,000
mg/L가되게한다.
4)표준용액:표준원액을무처리
시료추출물을이용하여적당한
농도로혼합,희석한다(무처리
시료추출물90%이상포함).
5)d-SPE:1차2차아민(PSA,
Primarysecondaryamine),
C18(Octadecylbondedsilica)
6)기타시약:잔류농약시험용
또는특급
마.시험용액의조제
1)추출
검체를분쇄하여균질화한후5
g(곡류및두류는약1kg을혼
합하여표준체420μm를통과- 107 -현행 개정(안)
하도록분쇄한후5g,서류,과
일류및채소류는약1kg을분
쇄한후5g)을정밀히달아50
mL원심분리관에넣는다(곡류
및두류의경우증류수5mL
첨가후30분간방치).아세토니
트릴20mL를가한뒤10분간
진탕하고4,000G에서5분간원
심분리한다.상층액전량을취한
후아세토니트릴20mL를재차
가하여위과정을반복한다.앞
의상층액과합하여부피를50
mL로맞춘후상층액8mL를
취한다.
2)정제
d-SPE(1차2차아민400mg
및C18400mg)가미리담겨져
있는15mL원심분리관에‘1)추
출’로부터얻은상층액8mL를
가하고30초간와류교반기등을
이용하여충분히혼합한후이
를4℃,4,000G에서5분간원심
분리한다.정제된상층액을4m
L취하여질소농축한후아세
토니트릴2mL로재용해하고,- 108 -현행 개정(안)
멤브레인필터(PTFE,0.2μm)
로여과하여시험용액으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프분석조건
가)칼럼:C18계역상칼럼또는
이와동등한것
나)칼럼온도:40℃
다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함유
아세토니트릴
(2)이동상B:0.1%포름산함유
물
(3)농도구배조건
시간(분)A(%)B(%)
0.02080
3.02080
3.59010
5.01000
7.01000
8.02080
10.02080
라)이동상유속:0.3mL/분
마)주입량:2μL
2)질량분석기분석조건
가)이온화방법:ESIpositive-ion
mode
나)Capillaryvoltage:5.5kV
다)Collisiongas:아르곤(Ar)
표.액체크로마토그래프-질량분석기- 109 -현행 개정(안)
분석을위한특성이온
분석성분
(Compound)평균
분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursor
ion,[M+H]+,
m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
펜피콕사미드
(Fenpicoxamid)614.6614.256152391)37
51520
58516
1)정량이온이며,그외는정성이온임.
※각생성이온에대한질량분석기의기기조건은
사용기기의최적값으로변경하여사용할수
있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함.
3)검량선작성
표준용액을농도별로일정량
취하여액체크로마토그래프-질량
분석기에각각주입하여얻은
크로마토그램상의각피크높이
또는면적값으로검량선을작성
한다.
4)표준품의크로마토그램
그림.
액체크로마토그래프-질량분석기에서- 110 -현행 개정(안)
표준품의크로마토그램
펜피콕사미드(4.8분)
*분석기기:LC(PerkinElmerⓇQSight™LX50),
MS/MS(PerkinElmerⓇQSight™210),
칼럼(CapcellcoreADME,2.1mmI.D.×100mmL.,2.7μm)
5)정량한계
0.01mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토
그램상의피크가표준용액피크의
머무름시간과일치할때피크
높이또는면적을검량선에대입
하여정량한다.
아.확인시험
액체크로마토그래프-질량분석기
상의머무름시간과특성이온으
로펜피콕사미드를확인한다.
8.식품중잔류동물용의약품시험법
8.1∼8.2(생략)
8.3.정량시험법
8.3.1∼8.3.117(생략)
<신설>
8.식품중잔류동물용의약품시험법
8.1∼8.2(현행과같음)
8.3.정량시험법
8.3.1∼8.3.117(현행과같음)
8.3.118루바베그론(Lubabegron)
1)분석법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리- 111 -현행 개정(안)
검체중분석대상물질을아세트산함유
아세토니트릴/메탄올혼합용액(1:1,
v/v)으로추출하고헥산또는일차이
차아민(PSA)로정제하여액체크로마
토그래프/질량분석기로분석한다.
3)장치
액체크로마토그래프-질량분석기
(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매:잔류농약시험용또는특급
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:루바베그론표준품을
메탄올에녹여100mg/L가되
게한다.
라)표준용액:루바베그론표준용액
100mg/L농도로부터0.01,
0.02,0.04,0.08,0.16µg/mL농
도가되도록메탄올로희석하
여혼합한다.
마)10mM아세테이트완충용액(PH
4.6):1,000mL용량플라스크에
아세트산나트륨0.82g을넣고
물로표시선까지채운다.아세
트산으로pH4.6이되도록조
정하여사용한다.- 112 -현행 개정(안)
바)1%아세트산(Aceticacid)함유
아세토니트릴/메탄올혼합용액
(1:1,v/v):100mL용량플라스
크에아세트산1mL을넣고
아세토니트릴/메탄올1:1,v/v):
혼합용액으로표시선까지채운
다.
사)0.1mM불화암모늄(Ammonium
fluoride)용액:1,000mL용량
플라스크불화암모늄3.7mg을
넣고물로표시선까지채운다.
아)기타시약:잔류농약시험용또는특급
5)첨가시료의조제
정량을하는경우조직표준곡선작
성을위하여루바베그론이검출되
지않은음성대조시료2g씩6개를
준비한후Blank를제외하고각표
준용액을0.2mL씩가하여0.001,
0.002,0.004,0.008,0.016µg/g가
되도록조제한다.
6)시험용액의조제
균질화한검체2g을50mL원심
분리관에취하여10mM아세테이
트완충용액(pH4.6)2mL을넣
고2분간초음파처리하여균질화- 113 -현행 개정(안)
한다.β-글루쿠로니다제/아릴설파
타제(β-Glucuronidase/Arylsufates)
20µL첨가하고65℃에서1시간중
탕한후상온에서냉각한다.이용액
에1%아세트산함유아세토니트릴/
메탄올혼합용액을12mL가하여
10분간초음파처리후15분간진
탕하고–4℃에서9,300G로10분간
원심분리한다.(㉠돼지고기를제외한
축수산물의경우,새로운50mL원
심분리관에상층액을취하여헥산
12mL을넣고2분간진탕한다.-
4℃에서9,300G로5분간원심분리
한후하층액을취하여감압농축한
다.㉡돼지고기의경우,PSA500
mg이담겨진50mL원심분리관
에상층액을취하여5분간진탕한
다.-4℃에서9,300G로5분간원
심분리한후상층액을취하여감압
농축한다.)잔류물에50%메탄올1
mL을넣어녹이고상온에서
15,800G로10분간원심분리한후
상층액을시험용액으로한다.
7)시험조작
가)액체크로마토그래프측정조건
(1)칼럼:C18(Xbridge,2.1mm- 114 -현행 개정(안)
×100mm,3.5μm)또는이와
동등한것
(2)칼럼온도:40℃
(가)이동상A:0.1mM불화
암모늄용액
(나)이동상B:메탄올
시간 (분) A(%) B(%)
0.0 50 50
4.0 0 100
7.0 0 100
7.01 50 50
10.0 50 50
(3)이동상유량:0.3mL/분
(4)주입량:5μL
나)질량분석기측정조건
(1)이온화:ESIpositive-ion
mode
(2)Capillarytemperature:300℃
(3)Capillaryvoltage:3.6kV
(Positive),2.8kV(Negative)
(4)Collisiongas:아르곤(Ar)
(5)분석대상및개별조건(MRM조건)
분석성분이온화
(Ionizati
on
mode)분자량
(molecul
ar
weight)선구이온
(Precurs
or ion,,
m/z)생성이온
(Product
ion,
m/z)충돌에너지
(Collision
energy,
eV)
루바베그론
(Lubabegron)+ 499.19 500215 29
250 20
251 25
※밑줄표시되어있는것은정량이- 115 -현행 개정(안)
온이며그외이온들은정성이온임
※각생성이온(Production)에대한
질량분석기의기기조건은사용기
기의최적값으로변경하여사용
할수있으며,제시된이외의생
성이온도적용이가능함
8)정성및확인시험
가)정성및확인
위의조건으로얻어진크로마토
그램상의피크는표준용액피크
의머무름시간과비교하여일치
하여야한다.또한표준용액과
시험용액의선구이온(Precursor
ion)및생성이온(Production)이
일치하여야하고,표준용액과시
험용액의생성이온간반응세기의
비율(Ionratio)을비교하여그
비율은주1)과일치하여야한다.
주1.생성이온간반응세기의비율허용범위
이온간 반응세기의 비율(%) 허용범위
> 50 % ≤ 20 %
> 20 %, ≤ 50 % ≤ 25 %
> 10 %, ≤ 20 % ≤ 30 %
나)표준품의크로마토그램- 116 -현행 개정(안)
루바베그론 (3.3분)
그림1.루바베그론(0.004 μg/mL)의
크로마토그램
9)정량시험
가)정량
정성및확인시험과똑같은조건
에서Blank시료를포함하여각
농도별첨가시료에서얻어진크
로마토그램상의각피크높이또
는면적을구하여검량선을작성
한후시험용액의크로마토그램
으로부터정량이온(Quantitative
ion)의각피크높이또는피크면
적에따라산출된시험용액중검
출농도,검체량과최종시험용액
의부피를고려하여정량한다.
나)정량한계:0.0002mg/kg
9.∼12.(생략) 9.∼12.(현행과같음)
[별표1]“식품에사용할수있는원료”의목록
1.식물성[별표1]“식품에사용할수있는원료”의목록
1.식물성- 117 -현행 개정(안)
고유
번호명칭기타
명칭
또는
시장
명칭학명또는특성사용부위
(생약명 )
A가000100
〜
A가014900(생략)
<신설:명칭변경에따라 A가101000에서이동>
A가015000
〜
A가015500(생략)
A가015600고들빼기씀바귀 ,
Sonchus-l
eaf
crepidiast
rumCrepid iastrum
so nchifolium (Bunge)
Pak&Kawano /
Yo ungia so nchifo lia
(Bunge) Maxim. /
Crepid iastrum
so nchifolium 
(Maxim.) Pak&
Kawano뿌리,잎
A가015700
〜
A가019100(생략)
A가019200과라나 GuaranaPaullinia cupana 
H.B. & K.열매,
씨앗
A가019300
〜
A가042900(생략)
A가043000닥풀딱나무 ,
금화규 ,
Aibika,
Aurea
helianthu
sHibiscus m aniho t
Siebold ./
Bro usso netia
k aem pferi Siebold /
Abelm o schus m aniho t잎
A가043100
〜
A가075300(생략)
A가075400바나나 BananaMusa p arad isiaca L.
/Musa sapientum
L./<신설>꽃,열매
A가075500
〜
A가099800(생략)고유
번호명칭기타
명칭
또는
시장
명칭학명또는특성사용부위
(생약명 )
A가000100
〜
A가014900(현행과같음)
A가014950겨자무호스래디
쉬(Horse
radish),
서양고추
냉이Arm o racia rusticana 
L.뿌리
A가015000
〜
A가015500(현행과같음)
A가015600고들빼
기Sonchus-l
eaf
crepidiast
rumCrepid iastrum
so nchifolium (Bunge)
Pak&Kawano /
Yo ungia so nchifo lia
(Bunge) Maxim. /
Crepid iastrum
so nchifolium 
(Maxim.) Pak&
Kawano뿌리,잎
A가015700
〜
A가019100(현행과같음)
A가019200과라나 GuaranaPaullinia cupana 
Kunth열매,
씨앗
A가019300
〜
A가042900(현행과같음)
A가043000닥풀딱나무 ,
금화규 ,
Aibika,
Aurea
helianthu
sHibiscus m aniho t L.
/Broussonetia
k aem pferi Siebold /
Abelm o schus m aniho t잎
A가043100
〜
A가075300(현행과같음)
A가075400바나나 BananaMusa p arad isiaca L.
/Musa sapientum
L./Musaacum inata 
Colla꽃,열매
A가075500
〜
A가099800(현행과같음)- 118 -현행 개정(안)
<신설>
A가099900
〜
A가100900(생략)
A가101000서양고추
냉이호스래디
쉬(Horse
radish),
겨자무Arm o racia rusticana 
L.뿌리
A가101100
〜
A가101400(생략)
A가101500서양산사
자산사나무 ,
아그배나
무,
Maybush
,
Maytree,
Maybloss
om,
Mayflow
er,
Thorn-ap
pletree,
Whitetho
rn,
Howthorn
berryCrataegus
oxyacantha L.잎
A가101600
〜
A가104700(생략)
A가104800셀러리셀러리악 (
Celeriac),
Celery,
Smallage,
Garden
celery,
Wild
celeryApium graveo lens 
var.d ulcePers뿌리,잎,
씨앗
A가104900
〜
A가112800(생략)A가099850상동나
무-Sageretia thea
(Osbeck) M.C.
Johnst.열매
A가099900
〜
A가100900(현행과같음)
<삭제:　A가014950으로이동>
A가101100
〜
A가101400(현행과같음)
A가101500서양산
사자산사나무 ,
아그배나
무,
Maybush
,
Maytree,
Maybloss
om,
Mayflow
er,
Thorn-ap
pletree,
Whitetho
rn,
Hawthor
nberryCrataegus
oxyacantha L.잎
A가178400
〜
A가104700(현행과같음)
A가104800셀러리셀러리악 (
Celeriac),
Celery,
Smallage,
Garden
celery,
Wild
celeryApium graveo lens 
var.d ulcePers뿌리,잎,
씨앗,
줄기
A가104900
〜
A가112800(현행과같음)- 119 -현행 개정(안)
A가112900신양벚나
무양앵두 ,
큰양벗나
무,
신양벚 ,
신벗나무 ,
Sour
Cherry,
<신설>Prunus cerasus L./
Cerasus acid a
P.Gaertn. &al.열매(씨앗
제외)
A가113000
〜
A가128300(생략)
A가128400오크리프잎상추 ,
Oak leaf
lettuce,
<신설>Lactuca sativa L.
var.crispa잎
A가128500
〜
A가148500(생략)
<신설>
A가148600
〜
A가367400(생략)A가112900신양벚
나무양앵두 ,
큰양벗나
무,
신양벚 ,
신벗나무 ,
Sour
Cherry,
Tart
CherryPrunus cerasus L./
Cerasus acid a
P.Gaertn. &al.열매(씨앗
제외)
A가113000
〜
A가128300(현행과같음)
A가128400오크리
프잎상추 ,
Oak leaf
lettuce,
파게로Lactuca sativa L.
var.crispa잎
A가128500
〜
A가148500(현행과같음)
A가148550쥐오줌
풀Valerian
RootValeriana fauriei
Briq.어린잎
A가148600
〜
A가367400(현행과같음)
2.동물성
고유
번호명칭기타명칭 
또는
시장명칭학명또는특성사용부위
(생약명 )
A나000100
〜
A나019300(생략)
<신설>
A나019400
〜
A나029700(생략)
<신설>
A나029800
〜
A나050100(생략)2.동물성
고유
번호명칭기타명칭 
또는
시장명칭학명또는특성사용부위
(생약명 )
A나000100
〜
A나019300(현행과같음)
A나019350노랑코홍
어Yellowno
seskateZearaja chilensis -
A나019400
〜
A나029700(현행과같음)
A나029750두점갑오
징어애기갑오
징어Sepia k obiensis -
A나029800
〜
A나050100(현행과같음)- 120 -현행 개정(안)
<신설>
A나050200
〜
A나055800(생략)
A나055900식용달팽
이-Helix po m atia /
Nesio helix
sam arangae /
Achatina fulica 
(Bowdich)
Achatinidae /
<신설>-
A나056000
〜
A나074300(생략)
<신설>
A나074400
〜
A나092200(생략)
<신설>
A나092900
〜
A나093400(생략)
<신설>
<신설>
A나093520
〜
A나095600(생략)A나050150빨강오징
어Neon
flying
squidOm m astrephes
bartram ii-
A나050200
〜
A나055800(현행과같음)
A나055900식용달팽
이-Helix p om atia /
Nesio helix
sam arangae /
Achatina fulica 
(Bowdich)
Achatinidae /
Helix asp ersa-
A나056000
〜
A나074300(현행과같음)
A나074350창끝갑오
징어- Sepia stellifera -
A나074400
〜
A나092800(현행과같음)
A나092850Idiot
rockfishLongspin
e
thoryhea
dSebasto lo bus
altirelis-
A나092900
〜
A나093500(현행과같음)
A나093505Northern
shrimp- Pand alus bo realis -
A나093510Pacific
golden
crab- Chaceo n bicolor -
A나093520
〜
A나095600(현행과같음)
3.∼4.(생략) 3.∼4.(현행과같음)
[별표2]“식품에제한적으로사용할
수있는원료”의목록
1.식물성[별표2]“식품에제한적으로사용할
수있는원료”의목록
1.식물성- 121 -현행 개정(안)
고유
번호명칭기타명칭 
또는
시장명칭학명또는
특성사용부위
(생약명 )사용
조건
B가000100
∼
B가006600(생략)
B가006700서양
산사
자산사나무 ,
아그배나
무,
Maybush
,
Maytree,
Maybloss
om,
Mayflow
er,
Thorn-ap
pletree,
Whitetho
rn,
Howthornb
erryCrataegus
oxyacantha
L.열매,꽃,
씨앗-
B가006800
∼
B가014900(생략)고유
번호명칭기타명칭 
또는
시장명칭학명또는
특성사용부위
(생약명 )사용
조건
B가000100
∼
B가006600(현행과같음)
B가006700서양
산사
자산사나
무,
아그배
나무,
Maybus
h,
Maytree,
Mayblos
som,
Mayflo
wer,
Thorn-a
ppletree,
Whiteth
orn,
Hawtho
rnberryCrataegus
oxyacantha
L.열매,꽃,
씨앗-
B가006800
∼
B가014900(현행과같음)
2.∼4.(생략) 2.∼4.(현행과같음)
[별표3]“한시적기준․규격에서전
환된원료”의목록
고유
번호명칭기타명칭  
또는
시장명칭학명또는
특성사용
부위제조/
사용
조건
C000100갈색
거저
리
유충밀웜,
Mealwor
m,
<신설>Tenebrio
m olitor L.- -
C000200
∼
C000300(생략)
C000400흰점
박이
꽃
무지
유충-Protaetia
brevitarsis- -[별표3]“한시적기준․규격에서전
환된원료”의목록
고유
번호명칭기타명칭  
또는
시장명칭학명또는
특성사용
부위제조/
사용
조건
C000100갈색
거저
리
유충밀웜,
Mealwor
m,
고소애Tenebrio
m olitor L.- -
C000200
∼
C000300(현행과같음)
C000400흰점
박이
꽃
무지
유충굼뱅이 ,
꽃뱅이Protaetia
brevitarsis- -- 122 -현행 개정(안)
C000500
∼
C000700(생략)C000500
∼
C000700(현행과같음)
[별표4]농산물의농약잔류허용기준
(1)∼(19)(생략)
(20)다이쾃(Diquat)
(생략)
완두 0.1T
두류 0.5T
(21)∼(23)(생략)
(24)디클로베닐(Dichlobenil)
(생략)
<신설>
(25)∼(78)(생략)
(79)알루미늄포스파이드 [Aluminium
Phosphide(Hydrogenphosphide)]
(생략)
<신설>
(80)∼(115)(생략)[별표4]농산물의농약잔류허용기준
(1)∼(19)(현행과같음)
(20)다이쾃(Diquat)
(현행과같음)
<삭제>
두류 0.9†
(21)∼(23)(현행과같음)
(24)디클로베닐(Dichlobenil)
(현행과같음)
쌀 0.05
(25)∼(78)(현행과같음)
(79)알루미늄포스파이드 [Aluminium
Phosphide(Hydrogenphosphide)]
(현행과같음)
감귤 0.05
(80)∼(115)(현행과같음)- 123 -현행 개정(안)
(116)카탑(Cartap)
(생략)
<신설>
(117)∼(126)(생략)
(127)클로르메쾃(Chlormequat)
(생략)
<신설>
(128)∼(209)(생략)
(210)페나자퀸(Fenazaquin)
(생략)
호프 30T
(211)∼(224)(생략)
(225)사이프로디닐(Cyprodinil)
(생략)
<신설>
(226)∼(227)(생략)(116)카탑(Cartap)
(현행과같음)
가지 0.05
(117)∼(126)(현행과같음)
(127)클로르메쾃(Chlormequat)
(현행과같음)
트리티케일5.0†
(128)∼(209)(현행과같음)
(210)페나자퀸(Fenazaquin)
(현행과같음)
호프 30†
(211)∼(224)(현행과같음)
(225)사이프로디닐(Cyprodinil)
(현행과같음)
석류5.0†
(226)∼(227)(현행과같음)- 124 -현행 개정(안)
(228)아족시스트로빈(Azoxystrobin)
(생략)
취나물 3.0
(229)∼(236)(생략)
(237)피메트로진(Pymetrozine)
(생략)
상추 1.0
(238)(생략)
(239)플루아지남(Fluazinam)
(생략)
<신설>
(240)∼(247)(생략)
(248)아바멕틴(Abamectin)
(생략)
감귤 0.02
(249)∼(282)(생략)
(283)아시벤졸라-에스-메틸(228)아족시스트로빈(Azoxystrobin)
(현행과같음)
취나물 7.0
(229)∼(236)(현행과같음)
(237)피메트로진(Pymetrozine)
(현행과같음)
상추 15
(238)(현행과같음)
(239)플루아지남(Fluazinam)
(현행과같음)
땅콩 0.01†
(240)∼(247)(현행과같음)
(248)아바멕틴(Abamectin)
(현행과같음)
감귤 0.07
(249)∼(282)(현행과같음)
(283)아시벤졸라-에스-메틸- 125 -현행 개정(안)
(Acibenzolar-S-methyl)
(생략)
<신설>
<신설>
(284)∼(303)(생략)
(304)프로베나졸(Probenazole)
(생략)
<신설>
(305)∼(316)(생략)
(317)하이멕사졸(Hymexazol)
(생략)
<신설>
(318)∼(323)(생략)
(324)비페나제이트(Bifenazate)
(생략)
호프 20T
(325)∼(348)(생략)(Acibenzolar-S-methyl)
(현행과같음)
무(뿌리)0.3
무(잎)1.0
(284)∼(303)(현행과같음)
(304)프로베나졸(Probenazole)
(현행과같음)
토마토 0.05
(305)∼(316)(현행과같음)
(317)하이멕사졸(Hymexazol)
(현행과같음)
파 0.05
(318)∼(323)(현행과같음)
(324)비페나제이트(Bifenazate)
(현행과같음)
호프 20†
(325)∼(348)(현행과같음)- 126 -현행 개정(안)
(349)노발루론(Novaluron)
(생략)
블루베리7.0T
(350)∼(352)(생략)
(353)메트코나졸(Metconazole)
(생략)
파 1.0
(354)∼(356)(생략)
(357)디티오카바메이트
(Dithiocarbamates)
(생략)
블루베리5.0T
(358)∼(429)(생략)
(430)설폭사플로르(Sulfoxaflor)
(생략)
고수(잎)0.05T
수수 0.08T
(431)∼(436)(생략)(349)노발루론(Novaluron)
(현행과같음)
블루베리7.0†
(350)∼(352)(현행과같음)
(353)메트코나졸(Metconazole)
(현행과같음)
파 5.0
(354)∼(356)(현행과같음)
(357)디티오카바메이트
(Dithiocarbamates)
(현행과같음)
블루베리5.0
(358)∼(429)(현행과같음)
(430)설폭사플로르(Sulfoxaflor)
(현행과같음)
고수(잎)10
수수 0.3†
(431)∼(436)(현행과같음)- 127 -현행 개정(안)
(437)플룩사피록사드(Fluxapyroxad)
(생략)
딸기2.0
(438)∼(440)(생략)
(441)피리벤카브(Pyribencarb)
(생략)
딸기0.5
(442)∼(458)(생략)
(459)피플루뷰마이드(Pyflubumide)
(생략)
<신설>
(460)∼(499)(생략)
(500)피디플루메토펜(Pydiflumetofen)
(생략)
<신설>
(501)∼(508)(생략)(437)플룩사피록사드(Fluxapyroxad)
(현행과같음)
딸기4.0†
(438)∼(440)(현행과같음)
(441)피리벤카브(Pyribencarb)
(현행과같음)
딸기2.0
(442)∼(458)(현행과같음)
(459)피플루뷰마이드(Pyflubumide)
(현행과같음)
가지 0.07
(460)∼(499)(현행과같음)
(500)피디플루메토펜(Pydiflumetofen)
(현행과같음)
수수 3.0†
(501)∼(508)(현행과같음)- 128 -현행 개정(안)
(509)브로플라닐라이드(Broflanilide)
(생략)
무(잎)2.0
수박0.05
토마토 0.3
(510)∼(512)(생략)
<신설>
<신설>(509)브로플라닐라이드(Broflanilide)
(현행과같음)
무(잎)5.0
수박0.07
토마토 1.0
(510)∼(512)(현행과같음)
(513)아피도피로펜(Afidopyropen)
◎잔류물의정의:Afidopyropen
가지 0.05
딸기0.2
무(뿌리)0.05
무(잎)0.1
(514)가스가마이신(Kasugamycin)
◎잔류물의정의:Kasugamycin
가지 0.3
감귤 0.2
감자0.05
갓 8.0
건삼0.05
고수(잎)2.0
고추 1.5
근대 8.0- 129 -현행 개정(안)
냉이8.0
당근 0.2
들깻잎 5.0
딸기0.3
마 0.05
마(건조)0.05
마늘 0.05
머위0.05
멜론 0.2
무(뿌리)0.05
무(잎)2.0
미나리 0.5
배추0.1
부추 0.7
브로콜리0.2
비트 0.15
상추 10
셀러리0.5
수박0.05
수삼0.05
시금치 3.0
쌀 0.07
쑥갓 8.0
양배추0.2
양상추 10- 130 -현행 개정(안)
<신설>
주1.∼주2.(생략)
주3.------------------------
---------------------- 중“24.
생약시험법”에따른다.
주4.∼주9.(생략)양파 0.05
엇갈이배추0.3
오이 0.2
참외0.3
청경채 8.0
취나물 8.0
치커리 8.0
키위0.05
토마토 0.5
파 0.3
풋마늘 0.05
피망1.5
(515)펜피콕사미드(Fenpicoxamid)
◎잔류물의정의:Fenpicoxamid
바나나 0.15†
주1.∼주2.(현행과같음)
주3.------------------------
---------------------- 중“29.
생약시험법”에따른다.
주4.∼주9.(현행과같음)
[별표5]식품중동물용의약품의잔류[별표5]식품중동물용의약품의잔류- 131 -현행 개정(안)
허용기준
(1)∼(107)(생략)
(108)톨트라주릴(Toltrazuril):항원충제
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(109)∼(116)(생략)
(117)설피린(Sulpyrine,Dipyrone,
Metamizole):항염증제
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(118)∼(184)(생략)허용기준
(1)∼(107)(현행과같음)
(108)톨트라주릴(Toltrazuril):항원충제
(현행과같음)
염소근육0.1
염소지방0.15
염소간0.5
염소신장0.25
(109)∼(116)(현행과같음)
(117)설피린(Sulpyrine,Dipyrone,
Metamizole):항염증제
(현행과같음)
양근육0.1
양지방0.1
양간0.1
양신장 0.1
염소근육0.1
염소지방0.1
염소간0.1
염소신장0.1
(118)∼(184)(현행과같음)- 132 -현행 개정(안)
(185)메토밀(Methomyl):살충제
(생략)
닭근육0.01
<신설>
<신설>
(186)∼(192)(생략)
<신설>
＊주1∼주2(생략)
<신설>(185)메토밀(Methomyl):살충제
(현행과같음)
가금근육0.01
양근육0.02
염소근육0.02
(186)∼(192)(현행과같음)
(193)루바베그론(Lubabegron)
:성장보조제
◎잔류물의정의:Lubabegron
소근육0.002†
소지방0.002†
소간0.007†
소신장 0.007†
＊주1∼주2(현행과같음)
주3.상기†표시된기준은수출국의
요청으로설정된잔류허용기준을
의미하며,기준적용시에는국내
및수입식품에동일하게적용한다.
[별표6]∼[별표8](생략)[별표6]∼[별표8](현행과같음)