REGL AMENTO (UE) No 519/2014 DE LA COMISIÓN 
de 16 de may o de 2014 
que modif ica el Reglament o (CE) no 401/2006 en lo relativ o a los mét odos de mues treo de los lotes 
de gran tama ño, las especias y los complement os alimenticios; las nor mas de referencia para las 
toxinas T-2 y HT-2 y para la citrinina, y los mét odos analíticos de cribado 
(Texto pertinente a efectos del EEE) 
LA COMISIÓN EUR OPEA, 
Visto el Tratado de Funcionamiento de la Unión Europea, 
Visto el Reglamento (CE) no 882/2004 del Parlamento Europeo y del Consejo, de 29 de abril de 2004, sobre los 
controles oficiales efectuados para garantizar la verificación del cumpli miento de la legislación en mater ia de piensos y 
aliment os y la normativa sobre salud animal y bienestar de los animales (1), y, en particular , su artículo 11, apar tado 4, 
Considerando lo siguient e: 
(1)  El Reglamento (CE) no 1881/2006 de la Comisión (2) fija los límites máximos de determinadas micot oxinas en 
algunos productos alimenticios. 
(2)  El muestreo desempeña un papel fundamental en la precisión de la determinación del conte nido de micoto xinas, 
que se distr ibuyen de manera heterogénea en los lotes. Así pues, es necesar io establecer los criterios que deben 
cumpli r los métodos de muestreo. 
(3)  El Reglamento (CE) no 401/2006 de la Comisión (3) establece los criterios de muestreo a efect os del control del 
cont enido de micot oxinas. 
(4) Es necesar io modificar las normas relativas a la toma de muestras de las especias a fin de tener en cuenta las dife­
rencias en el tamaño de las partículas que conducen a la distr ibución heterog énea de la contaminación por mico ­
toxinas. Además, conviene establecer normas para la toma de muestras de los lotes de gran tamaño a fin de 
garantizar un enfoque unif orme de la normativa en toda la Unión. También es necesar io aclarar qué métod o de 
muestreo debe aplicarse para el muestreo del zumo de manzana. 
(5) Las normas de referencia para las toxinas T-2 y HT-2 deben actualizarse a fin de tener en cuenta el progreso cien ­
tífico y tecn ológico. Las normas de referencia para la citrinina deben establecerse teniendo en cuenta el nivel 
máximo fijado para ella en los compl ementos alimenticios a base de arroz fermentado con la levadura roja 
Monascus purpureus. 
(6)  Para analizar las micot oxinas se utilizan cada vez más metodologías de cribado. Conviene establecer los criterios 
que deben cumplir los métod os de cribado para que puedan utilizarse con fines reguladores. 
(7)  Las medidas previstas en el present e Reglamento se ajustan al dictamen del Comité Permanente de la Cadena 
Alimentar ia y de Sanidad Animal. 
HA ADOPT ADO EL PRESENTE REGL AMENTO: 
Artículo 1 
El Reglamento (CE) no 401/2006 queda modifi cado como sigue: 
1)  El anex o I se modifi ca del modo siguiente : 
a)  en la parte B, la nota 1 a pie de página se sustituye por el texto siguiente: 
«(1) La toma de muestras de estos lotes se efectuará con arreglo a lo dispuesto en la parte L. Se facilita rán orien­
taciones sobre la tom a de muestras de lotes de gran tamaño en un documento que estará disponible en: 
http://ec.europa.eu/f ood/f ood/che micalsafety/contaminants/guidance-sam pling-f inal.pdf 17.5.2014 L 147/29 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    
(1)DO L 165 de 30.4.2004, p. 1. 
(2)Reglamento (CE) no 1881/2006 de la Comisión, de 19 de diciembre de 2006, por el que se fija el conten ido máximo de determinados 
contaminantes en los product os alimenticios (DO L 364 de 20.12.2006, p. 5). 
(3)Reglamento (CE) no 401/2006 de la Comisión, de 23 de febrero de 2006, por el que se establecen los métodos de muestreo y de análisis 
para el control oficial del contenido de micoto xinas en los product os alimenticios (DO L 70 de 9.3.2006, p. 12). Las reglas para la toma de muestras con arreglo a la norma EN ISO 24333:2009 o a la norma no 124 de la 
Asociación de Comercio de Granos y Piensos que se aplican a la industr ia alimentar ia para garantizar el 
cumplimient o de las disposiciones legislativas equivalen a las establecidas en la parte L. 
Las reglas para la toma de muestras de lotes con toxinas Fusar ium con arreglo a la norma 
EN ISO 24333:2009 o a la norma no 124 de la Asociación de Comercio de Granos y Piensos que se aplican 
a la industr ia alimentar ia para garantizar el cumplim iento de las disposiciones legislativas equivalen a las esta­
blecidas en la parte B.»; 
b)  el cuadro 1 del punto B.2 se sustituye por el siguient e: 
«Cuadro 1 
Subdivisión de los lotes en sublotes, en función del producto y del peso del lote  
Producto Peso del lote (t) Peso o número de 
sublotes Número de muestras 
elementales Peso de la muestra 
global (kg) 
Cereales y product os 
a base de cereales > 300 y < 1 500 3 sublote s 100 10 
≥ 50 y ≤ 300 100 t 100 10 
< 50 — 3-100 (*) 1-10 
(*)  Según el peso del lote: véase el cuadro 2.»;  
c)  en el punt o B.3, al final del primer guion se añade la frase siguient e: 
«Par a los lotes > 500 t, el número de muestras elementales se prevé en el punto L. 2 del anex o I.»; 
d)  en el punt o D.2, al final de la primera frase se añade la frase siguient e: 
«Este métod o de muestreo es también aplicable al control oficial del contenido máximo establecido de ocrat oxina 
A, aflatoxina B1 y aflatoxinas totales en las especias con un tamaño de partícula relativamente grande (comparable 
a los cacahuet es o mayor, como a la nuez moscada).»; 
e)  en la parte E, la primera frase se sustituye por el texto siguiente : 
«Este métod o de muestreo es aplicable al control oficial del contenido máximo establecido de ocrat oxina A, aflato­
xina B1 y aflatoxinas tota les en las especias, excep to las de un tamaño de partícula relativamente grande (distr ibu­
ción hete rogénea de la contaminación por micoto xinas).»; 
f)  en la parte I, el título y primera frase se sustituyen por el texto siguiente : 
«I.  MÉTODO DE MUESTREO PARA LOS PRODUCTOS SÓLIDOS A BASE DE MANZANA 
Este método de muestreo es aplicable al control oficial de los cont enidos máximos establecidos para la patu ­
lina en los productos sólidos a base de manzana, incluidos los destinados a lactant es y niños de corta edad.»; 
g)  en el punt o I.1, párrafo segundo, se supr imen las frases siguient es: 
«Cuando se trate de productos líquidos, el lote se mezclará lo más posible por medios manuales o mecánicos 
inmediatament e antes de procederse al muestreo. En este caso se supone una distr ibución homog énea de la patu ­
lina en un lote deter minado; por tanto , bastará con tomar tres muestras elementales por lote para formar la 
muestra global.»; 
h)  se añaden las nuevas partes L y M, de acuerdo con lo dispuest o en el anex o I del present e Reglamento. 
2)En el anex o II, los punt os 4.2 («Requisitos generales»), 4.3 «Requisitos específico s» y 4.4 («Estimación de la incer ti­
dumbre de medición, cálculo de la tasa de recuperación y registro de los resultados») se sustituyen por el texto que 
figura en el anex o II del present e Reglamento. 17.5.2014 L 147/30 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    Artículo 2 
El present e Reglamento entrará en vigor el vigésimo día siguient e al de su publicación en el Diar io Oficial de la Unión 
Europea. 
Será aplicable a partir del 1 de julio de 2014. 
El present e Reglamento será oblig ator io en todos sus elementos y directament e aplicable en 
cada Estado miembro. 
Hecho en Bruselas, el 16 de mayo de 2014. 
Por la Comisión 
El Presidente 
José Manuel BARR OSO  17.5.2014 L 147/31 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    ANEX O I 
«L.  MÉTODO DE MUESTREO DE LOTES MUY GRANDES, O TRANSPORT ADOS O ALMA CENADOS DE MODO QUE NO 
PUED AN MUESTREARSE EN SU TOT ALID AD 
L.1.  Principios generales 
Cuando el medio de transpor te o almacenamiento de un lote no permita tomar muestras elementales de su 
totalidad, el muestreo se realizará de preferen cia con el lote en movimient o (muestreo dinámico). 
Los operadores de almacenes de aliment os de grandes dimensiones deben instalar equipos que posibiliten el 
muestreo (auto mático) del conjunt o del lote almacenado. 
Cuando se apliquen los procedimiento s de muestreo previstos en esta parte L, el explotador de la empresa 
alimentar ia o su representante deben ser informados del procedimiento de muestreo. Si el explotador de la 
empresa alimentar ia o su representante cuestionan dicho procedimiento de muestreo, deberán permitir que la 
autori dad compet ente proceda al muestreo de la totali dad del lote, y correrán con los costes. 
Se permite el muestreo de una parte del lote a condición de que la cantidad de la parte de la muestra sea de al 
menos el 10 % de los lotes objeto de muestreo. Si una parte de un lote de aliment os de la misma clase o 
descr ipción ha sido muestreado y se considera que incumple los requisit os de la Unión, se presumirá que la 
totalidad del lote también está afectada, a menos que una nueva evaluación detallada demuestre que el resto del 
lote es satisfact orio. 
Las disposiciones pertinentes, como el peso de la muestra elemental, previstas en las demás partes del present e 
anex o son aplicables al muestreo de grandes lotes o lotes almacenados o transpor tados en un medio para el 
que el muestreo de todo el lote no sea viable. 
L.2.  Número de mues tras elementales que deben tomarse en el caso de grandes lotes 
En el caso de grandes lotes objeto de muestreo (lotes > 500 t), el número de muestras elementales que deben 
tomarse será igual a 100 + √t. No obstante, en caso de que el lote sea infer ior a 1 500 t, que pueda subdivi ­
dirse en sublotes según el cuadro 1 de la parte B y que los sublotes puedan separarse físicamente, se tomar á el 
número de muestras elementales previsto en la parte B. 
L.3.  Lotes grandes transpor tados en buque 
L.3.1.  Muestreo dinámico de lotes grandes transpor tados en buque 
El muestreo de lotes grandes transpor tados en buque se realiza de pref erencia con el lote en movimient o 
(muestreo dinámico). 
El muestreo se realiza por bodega (espacio separable físicamente), pero las bodega s se vacían parcialmente una 
tras otra, con lo cual la separación inicial ya no existe una vez transferido el conte nido al almacén. Por ello, el 
muestreo puede hacerse según la separación inicial o según la separación después de transferido el conte nido al 
almacén. 
La descarga de un buque puede durar varios días. Nor malmente, el muestreo se realiza a inter valos regulares 
durante toda la duración de la descarg a. Sin embargo, no siempr e es factible o adecuado que un inspector 
oficial esté presente para hacer el muestreo durante toda la operación de descarga . Así pues, puede realizarse el 
muestreo de una parte del lote (lote de muestra). El número de muestras elementales se deter mina en función 
del tamaño del lote de muestra. 
Aunque el muestreo oficial sea autom ático, tiene que estar present e un inspect or. No obstante, si el muestreo 
automático se realiza con parámetros predet erminados que no pueden modificarse durante el mismo y las 
muestras elementales se recogen en un recipiente precintado, lo que impide todo posible fraude, el inspect or 
solo tiene que estar presente al comienzo del muestreo, cada vez que se cambia el recipiente y al final del 
muestreo. 
L.3.2.  Muestreo estático de lotes transpor tados en buque 
El muestreo estático seguirá el mismo procedimiento establecido para los almacenes (silos) de carg a super ior 
(véase el punto L.5.1). 
El muestreo se realizará en la parte accesible (super ior) del lote o la bodega. El número de muestras elementales 
se determinará en función del tamaño del lote de muestra. 17.5.2014 L 147/32 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    L.4.  Mues treo de lotes grandes almacenados en depósitos 
El muestreo se realizará en la parte accesible del lote. El número de muestras elementales se determinará en 
función del tamaño del lote de muestra. 
L.5.  Mues treo en almacenes (silos) 
L.5.1.  Muestreo de silos (fácilmente) accesibles por su parte super ior 
El muestreo se realizará en la parte accesible del lote. El número de muestras elementales se determinará en 
función del tamaño del lote de muestra. 
L.5.2.  Muestreo de silos no accesibles por su parte super ior (silos cerrados) 
L.5.2.1.  Silos no accesibles por su par te super ior (silos cer rados) > 100 t 
Los alimentos almacenados en este tipo de silos no pueden someterse a un muestreo estático. Por tanto , si hay 
que tomar una muestra del aliment o de este silo y no es posible desplazarlo, hay que llegar a un acuerdo con 
el operador para que comunique al inspect or cuándo se descarg ará parcial o compl etamente el silo, de modo 
que se proceda entonces a un muestreo dinámico de los aliment os. 
L.5.2.2.  Silos no accesibles por su par te super ior (silos cer rados) < 100 t 
Contrar iament e al muestreo de una parte previsto en el punt o L.1 (par te de al menos el 10 %), el procedi ­
miento de muestreo implica poner en un recipient e una cantidad de 50 a 100 kg y tomar la muestra de él. El 
tamaño de la muestra global corresponde a la totalidad del lote y el número de muestras elementales corres­
ponde a la cantidad de alimento que se ha trasladado del silo al recipiente para el muestreo. 
L.6.  Mues treo de alimentos a granel en grandes contenedores cerrados 
Estos lotes solo suelen poder muestrearse cuando se descargan. En algunos casos no es posible descargar en el 
punto de importación o control, por lo que hay que proceder al muestreo al descargar los conte nedores. El 
operador debe informar a los inspect ores sobre el lugar y el momento de la descarg a de los conte nedores. 
M.  MÉTODO DE MUESTREO DE COMPLEMENTOS ALIMENTICIOS A BASE DE ARR OZ FERMENT ADO CON LEVADURA 
ROJA MONASCUS PURPUREUS 
Este método de muestreo es aplicable al control oficial de los cont enidos máximos establecidos para la citrinina 
en compl ementos alimenticios a base de arroz fermentado con levadura roja Monascus purpureus . 
Procedimiento de muestreo y tamaño de la muestra 
El procedimiento de muestreo parte del supuesto de que los complement os alimenticios a base de arroz 
fermentado con levadura roja Monascus purpureus se comercializan en envases para la venta al por menor que 
contienen generalment e de 30 a 120 cápsulas por paquete. 
Tamaño del lote (envases 
para la venta al por menor) Paquetes que deben formar 
la muestra Tamaño de la muestra 
1-50 1 Todas las cápsulas. 
51-250 2 Todas las cápsulas. 
251-1 000 4 La mitad de las cápsulas de cada paquete. 
> 1 000 4 + 1 por cada 1 000 
envases para la venta al 
por menor , con un 
máximo de 25 paquetes Si el número de paquetes no es super ior a 10: la mitad 
de las cápsulas de cada paquete. 
Si el número de paquetes es super ior a 10: un número 
igual de cápsulas de cada paquete hasta constituir una 
muestra equivalent e al cont enido de 5 paquete s».   17.5.2014 L 147/33 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    ANEX O II 
«4.2.  Requisitos generales 
Los métodos de conf irmación de análisis utilizados para el control de los aliment os se ajustarán a lo dispu ­
esto en los puntos 1 y 2 del anex o III del Reglamento (CE) no 882/2004. 
4.3.  Requisitos específ icos 
4.3.1.  Requi sitos específi cos para métodos de confir mación 
4.3.1.1.  Criterios de funcionamiento 
Se recomienda la utilización de métod os de conf irmación plenamente validados (es decir , validados por 
ensa yos colectivos para las matr ices correspondientes) cuando resulte opor tuno y posible. También pueden 
utilizarse otros métodos de confir mación validados adecuados (como métodos validados intername nte con 
las matr ices correspondientes del grupo de productos pertinente), siempre que cumplan los criterios de 
funcionamient o establecidos en los cuadros siguient es. 
Cuando sea posible, la validación de los métod os validados intern ament e incluirá mater ial de referencia certi­
ficado. 
a)  Criterios de funcionamient o para las aflatoxinas 
Criterio Intervalo de 
concentración Valor recomendado Valor máximo auto rizado 
Blancos Todos Desdeñable —     
Recuperación — Aflato­
xina M1 0,01-0,05 mg/kg de 60 a 120 %   
> 0,05 mg/kg de 70 a 110 %      
Recuperación — Aflato­
xinas B1, B2, G1, G2 < 1,0 mg/kg de 50 a 120 %   
1-10 mg/kg de 70 a 110 %   
> 10 mg/kg de 80 a 110 %      
Reproducibilidad (RSDR) Todos Derivada de la ecuación 
de Hor witz (*) (**) Dos veces el valor deri­
vado de la ecuación de 
Hor witz (*) (**) 
La precisión puede calcularse como 0,66 veces la reproducibilidad RSDR a la concentración que interese.   
Nota: 
—  Valores aplicables tanto a B1 como a la suma de B1 + B2 + G1 + G2. 
—  Si debe notificarse la suma de cada aflatoxina B1 + B2 + G1 + G2, la respuesta de cada una al sistema 
analítico tiene que ser conocida o equivalente.  
b)  Criterios de funcionamient o para la ocrato xina A 
Contenido 
(μg/kg) Ocrat oxina A 
RSDr % RSDR % Recuperación % 
< 1 ≤ 40 ≤ 60 de 50 a 120 
≥ 1 ≤ 20 ≤ 30 de 70 a 110   17.5.2014 L 147/34 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    c)  Criterios de funcionamient o para la patulina 
Contenido 
(μg/kg) Patulina 
RSDr % RSDR % Recuperación % 
< 20 ≤ 30 ≤ 40 de 50 a 120 
20–50 ≤ 20 ≤ 30 de 70 a 105 
> 50 ≤ 15 ≤ 25 de 75 a 105   
d)  Criterios de funcionamient o para el deoxinivalenol 
Contenido 
(μg/kg) Deo xinivalenol 
RSDr % RSDR % Recuperación % 
> 100 y ≤ 500 ≤ 20 ≤ 40 de 60 a 110 
> 500 ≤ 20 ≤ 40 de 70 a 120   
e)  Criterios de funcionamient o para la zearalenona 
Contenido 
(μg/kg) Zearalenona 
RSDr % RSDR % Recuperación % 
≤ 50 ≤ 40 ≤ 50 de 60 a 120 
> 50 ≤ 25 ≤ 40 de 70 a 120   
f)  Criterios de funcionamient o para las fumonisinas B1 o B2 por separado 
Contenido 
(μg/kg) Fumonisinas B1 o B2 
RSDr % RSDR % Recuperación % 
≤ 500 ≤ 30 ≤ 60 de 60 a 120 
> 500 ≤ 20 ≤ 30 de 70 a 110   
g)  Criterios de funcionamient o para las toxinas T-2 o HT-2 por separado 
Contenido 
(μg/kg) Toxinas T-2 o HT-2 
RSDr % RSDR % Recuperación % 
15-250 ≤ 30 ≤ 50 de 60 a 130 
> 250 ≤ 25 ≤ 40 de 60 a 130   
h)  Criterios de funcionamient o para la citrinina 
Contenido 
(μg/kg) Citrinina 
RSDr % RSDR % recomendado RSDR % máximo auto rizado Recuperación 
% 
Todos 0,66 × RSDR Derivada de la ecuación de 
Hor witz (*) (**) Dos veces el valor derivado 
de la ecuación de Hor witz 
(*) (**) de 70 a 120   17.5.2014 L 147/35 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    i)  Obser vaciones sobre los criterios de funcionamient o para las micot oxinas: 
—  No se indican los límites de detección de los métod os utilizados, puesto que se dan los valores de 
precisión para las concentraciones que presentan inter és. 
—Los valores de precisión se calculan a partir de la ecuación de Hor witz: la original para concentra ­
ciones 1,2 × 10–7 ≤ C ≤ 0,138 (*) y la modificada para concentraciones C < (1,2 × 10–7) (**). 
(*)  Ecuación de Hor witz para concentraciones 1,2 × 10–7 ≤ C ≤ 0,138: 
RSDR = 2(1–0,5logC) 
(ref.: W. Horwitz, L.R. Kamps, K.W . Boyer , J. Assoc. Off. Analy . Chem., 1980, 63, 1344) 
(**)  Ecuación de Hor witz (*) modific ada para concentraciones C < 1,2 × 10–7: 
RSDR = 22 % 
(ref.: M. Thompson, Analyst, 2000, 125, pp. 385-386) 
donde: 
—RSDR es la desviación estándar relativa calculada a partir de los resultados obtenid os en condi ­
ciones de reproducibilidad [(sR) × 100]; 
—  C es el cociente de concentración (a saber , 1 = 100 g/100 g, 0,001 = 1 000 mg/kg). 
Se trata de una ecuación de precisión generalizada, independiente del análito y de la matr iz, y 
dependiente únicament e de la concentración en la mayoría de los métodos habituales de análisis. 
4.3.1.2.  Enf oque de la adecuación a los objetivos 
Para los métodos validados internamente puede utilizarse como alternati va el enfoque de la adecuación a los 
objetivos (***) a fin de evaluar su adecuación al control oficial. Los métodos adecuados para el control oficial 
deben arrojar resultados con una incer tidumbre estándar de medida (U) inferior a la incer tidumbre estándar 
máxima de medida calculada con la siguient e fórmula: 
Uf¼ffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffiffi ffi
ðLOD=2Þ2þðα�CÞ2q
donde: 
—  Uf es la incer tidumbre estándar máxima de medida (µg/kg), 
—  LOD es el límite de detección del método (µg/kg), 
—  α es una constante numér ica que se utilizará en función del valor de C; los valores que se utilizarán se 
establecen en el cuadro siguient e, 
—  C es la concentración de interés (µg/kg). 
Si el método analítico proporciona resultados con mediciones de la incer tidumbre infer iores a la incer ti­
dumbre estándar máxima, el método se considerará igual de adecuado que uno que se ajust e a los criterios 
de funcionamient o señalados en el punto 4.3.1.1. 
Cuadr o 
Valores numér icos que deben darse a α como const ante de la fórmula establecida en el presente 
punto, en función de la concentración de interés 
C (µg/kg) α 
≤ 50 0,2 
51-500 0,18 
501-1 000 0,15 
1 001-10 000 0,12 
> 10 000 0,1  
(***) Ref.: M. Thompson and R. Wood, Accred. Qual. Assur ., 2006, 10, pp. 471-478.  17.5.2014 L 147/36 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    4.3.2.  Requi sitos específi cos para métodos semicuantitativos de cribado 
4.3.2.1.  Ámbito de aplicación 
Estos requisit os se aplican a los métodos bioanalíticos basados en el inmunor reconocimiento o en la unión a 
los recep tores (por ejemplo, ELISA, medidas de nivel, dispositivos de flujo latera l, inmunosensores) y a los 
métod os fisicoquímicos basados en la cromatografía o en la detec ción directa por espectrometría de masas 
(por ejemplo, espectrografía de masas ambient e). No se excluy en otros métod os (por ejemplo, cromat ografía 
de capa fina), siempr e que las señales generadas se refieran directament e a las micoto xinas de interés y 
permitan aplicar el principio descr ito a continuación. 
Los requisit os específicos se aplican a los métodos cuyo resultado de medición es un valor numér ico, por 
ejemplo una respuesta (relativa) de un lector de nivel, una señal de cromatografía líquida acoplada a espectro ­
grafía de masas, etc., y que se somet en a las estadísticas normales. 
Los requisitos no se aplican a los métodos que no dan valores numér icos (por ejemplo, únicamente una línea 
present e o ausente), que requieren diferentes plant eamientos de validación. Los requisit os específi cos para 
estos métodos figuran en el punt o 4.3.3. 
El presente documento descr ibe los procedimiento s de validación de los métodos de cribado mediante una 
validación inter laboratori os, la verificación de la eficacia de un método validado mediante un ejercicio interla­
boratorios y la validación por un solo laborat orio de un método de cribado. 
4.3.2.2.  Terminología 
“Concentración para cribado selectiv o (CCS)”: la concentración de interés para detec tar la micoto xina en una 
muestra. Cuando el objetivo es comprobar que se cumplen los límites reglamentar ios, la CCS equivale al nivel 
máximo aplicable. Para otros fines, o en caso de que no se haya establecido un nivel máximo, la CCS se fija 
de anteman o por el laboratori o. 
“Método de cribado”: método utilizado para seleccionar con una certeza deter minada las muestras con niveles 
de micoto xinas que superan la CCS. A efect os de la selección de micoto xinas, una certeza del 95 % se consi ­
dera adecuada a su objetivo. El resultado de un análisis de cribado ha de ser “nega tivo” o “sospech oso”. Los 
métod os de cribado permiten analizar un elevado número de muestras en poco tiempo con una buena rela­
ción coste-e ficacia, aumentando así la posibilidad de descubr ir nuev os incident es con alta exposición y riesgo 
para la salud de los consumidores. Deben basarse en métod os bioanalíticos, de cromatografía líquida 
acoplada a espectrografía de masas o de cromat ografía líquida de alta resolución. Los resultados de las mues ­
tras que superen el valor de corte se verificarán con un nuevo análisis complet o de la muestra original 
mediante un método de conf irmación. 
“Muestra nega tiva” signif ica que el conte nido de micot oxinas en la muestra es infer ior a la CCS con una 
certeza del 95 % (es decir , hay un 5 % de probabilidades de que las muestras se calif iquen incor rectamente 
como negat ivas). 
“Muestra de falso negativ o” significa que el conte nido de micoto xinas en la muestra es super ior a la CCS, pero 
que se ha calificad o como negativa. 
“Muestra sospec hosa” (muestra positiva) signif ica que la muestra supera el valor de corte (véase más adelante) 
y puede contener micot oxinas a un nivel más elevado que en la CCS. Cualquier resultado sospechos o activa 
un análisis de conf irmación para identif icar y cuantificar de forma inequív oca las micoto xinas. 
“Muestra de falsa sospecha” es una muestra negativa que ha sido calif icada de sospec hosa. 
“Métodos de conf irmación” son los que proporcionan información total o compl ementar ia que permite iden ­
tificar y cuantifi car de manera inequívoca la micoto xina al nivel de interés. 
“Valor de corte”: respuesta, señal o concentración, obtenid a por el método de cribado, cuya superación hace 
que la muestra deba clasificarse como “sospech osa”. El corte se deter mina durant e la validación y tiene en 
cuenta la variabilidad de la medición. 17.5.2014 L 147/37 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    “Muestra de control negativo (matr iz en blanco)”: muestra identif icada como exen ta (1) de micot oxinas desti ­
nada al cribado para utilizarla, por ejemplo, en deter minaciones previas de un métod o de conf irmación de 
precisión suficiente . Si no pueden obtenerse estas muestras puede utilizarse el mater ial con el que pueda 
obteners e el nivel más bajo, siempr e que permita llegar a la conclusión de que el método de cribado es 
adecuado para su objetivo. 
“Muestra de control positiv o”: muestra que contiene la micoto xina en la CCS, como un mater ial de referencia 
certificado o un mat erial de contenido conocido (por ejemplo, mate rial para ensa yos de aptitud) u otro sufi­
cientem ente caracter izado por un método de confir mación. En ausencia de cualquiera de las mencionadas, 
puede utilizarse una mezcla de muestras con diferentes niveles de contaminación o una muestra enriquecida 
elaborada en laboratori o y suficie ntemente caracte rizada, siempre que pueda demostrarse que el nivel de 
contaminación ha sido comprobad o. 
4.3.2.3.  Procedimiento de validación 
El objetivo de la validación es demostrar la adecuación al objetivo del método de cribado. Se hace mediante 
la deter minación del valor de corte y la deter minación del porcentaje de falsos negativ os y falsas sospecha s. 
Estos dos parámetros incor poran las caract erísticas de funcionamient o, como la sensibilidad, la selectividad y 
la precisión. 
Los métodos de cribado pueden somet erse a una validación interlaborat orios o ser validados por un solo 
laboratorio. Si ya están disponibles los datos de la validación interlaborat orios para una determinada combi ­
nación micoto xina/matr iz/CCS, basta una verificació n del funcionamient o del método en un laborat orio que 
lo aplique. 
4.3.2.3.1.  Validación inicial por un solo laborat orio 
Micoto xinas 
La validación se llevará a cabo para cada micoto xina en el ámbito de aplicación. En el caso de métodos bioa ­
nalíticos que ofrezcan una respuesta combinada para un deter minado grupo de micoto xinas (como las aflato­
xinas B1, B2, G1 y G2, o las fumonisinas B1 y B2), deberá demostrarse la aplicabilidad y las limitaciones del 
ensa yo mencionado en el ámbito de aplicación del métod o. No se considera que la reactividad cruzada no 
deseada (como el deoxinivalenol-3-g licósido, el 3- o el 15-acetil-deo xinivalenol en métodos inmunológicos 
para el deoxinivalenol) incremente el porcentaje de falsos negativ os de las micoto xinas en cuestión, pero 
puede incrementar el de falsas sospec has. Este incremento no deseado se verá reducido por un análisis de 
conf irmación, con el fin de identif icar y cuantificar inequívocament e las micot oxinas. 
Matr ices 
Debe efectuarse una validación inicial para cada producto o, si se sabe que el método es aplicable a varios 
product os, para cada grupo de product os. En este último caso se selecciona de dicho grupo un producto 
representativ o y pertinente (véase el cuadro A). 
Conjunto de la muestra 
El número mínimo de muestras diferentes para la validación es de 20 muestras homog éneas de control nega ­
tivo y 20 muestras homog éneas de control positiv o que conteng an las micot oxinas en la CCS, analizadas en 
condiciones de precisión intermedia (RSDRi) en 5 días diferent es. Con caráct er facultativo, podrá añadirse una 
unidad suplementar ia de 20 muestras que conteng an la micoto xina en otros cont enidos al conjunt o de vali­
dación para averiguar en qué medida el método puede distinguir entre diferentes concentraciones de micoto ­
xinas. 
Concentración 
Se validará cada CCS que se utilice sistemáticament e. 
4.3.2.3.2.  Validación inicial a través de ensa yos en colaboración 
La validación a través de ensa yos en colaboración debe hacerse siguiendo un protocolo reconocido intern a­
cionalmente sobre estos ensa yos (como ISO 5725:1994 o el prot ocolo armonizado internacional de la 
IUPAC), lo que requiere incluir datos válidos de al menos ocho laboratorio s diferent es. Apar te de eso, la única 
diferencia en comparación con las validaciones en un laboratori o único es que un número no inferior a 20 
muestras por producto/cont enido puede dividirse entre los laborat orios participantes, con un mínimo de dos 
muestras por laborat orio. 17.5.2014 L 147/38 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    
(1)Las muestras se consideran exenta s del análit o si la cantidad presente en la muestra no supera la CCS en más de 1/5. Si el nivel puede cuan ­
tificarse gracias a un método de confir mación, ese nivel se tendrá en cuenta para evaluar la validación. 4.3.2.4.  Det erminación del valor de cor te y del porcentaje de falsas sospechas de las muestras en blanco 
Las respuestas (relativas) relativas a las muestras de control negativas y positivas se toman como base de 
cálculo de los parámetros requer idos. 
Métodos de cribado con una respuesta proporcional a la concentración de micoto xinas 
Para los métodos de cribado con una respuesta proporcional a la concentración de micot oxinas se aplica la 
fórmula siguient e: 
Corte = RCCS — valor t0,05 * SDCCS 
RCCS =  respuestas de muestras de control positivas (en la CCS), 
valor t =  un valor t unicaudal para un porcentaje de falsos negativ os del 5 % (véase el cuadro B), 
SDCCS = desviación estándar .Mét odos de cribado con una respuesta inversament e proporcional a la concen ­
tración de micot oxinas 
Análogam ente, para los métodos de cribado con una respuesta inve rsamente proporcional a la concentración 
de micoto xinas, el valor de corte se deter mina del modo siguient e: 
Corte = RCCS — valor t0,05 * SDCCS 
Con este valor t específico para establecer el valor de corte, el porcentaje de falsos nega tivos se fija por 
defect o en el 5 %. 
Evaluación de la adaptación al objetivo 
Los resultados de las muestras de control negativas se utilizan para calcular el porcentaje de falsas sospech as. 
El valor t se calcula en correspondencia con el caso de que el resultado de una muestra de control nega tiva 
esté por encima del valor de corte y se clasifique erróneamente como sospec hosa. 
valor t  =(cor te — mediaen blanco )/SDen blanco para los métodos de cribado con una respuesta proporcional a la 
concentración de micoto xinas 
o 
valor t  =(mediaen blanco — corte)/SDen blanco para los métodos de cribado con una respuesta inversament e 
proporcional a la concentración de micoto xinas. 
Para una distr ibución unicaudal, a partir del valor t obtenido sobre la base de los grados de liber tad calcu ­
lados en función del número de exper imentos se puede, bien calcular la probabilidad de muestras falsamente 
sospechos as (por ejemplo, con la función TDIST de la hoja de cálculo), o bien tomar la de un cuadro de distr i­
bución de t. 
El valor correspondiente de una distr ibución de t indica el porcentaje de falsas sospechas . 
Este concep to se descr ibe en detalle con un ejemplo en Analytical and Bioanalytical Chemistr y: DOI 10.1007/ 
s00216-013-6922-1. 
4.3.2.5.  Extensión del ámbito de aplicación del método 
4.3.2.5.1.  Exten sión del ámbito de aplicación a otras micoto xinas 
Cuando se añaden nuevas micoto xinas en el ámbito de aplicación de un método de cribado existent e se 
requiere una plena validación para demostrar la aptitud del método. 
4.3.2.5.2.  Exten sión a otros product os 
Si se sabe o se prevé que el métod o de cribado puede ser aplicable a otros productos, será preciso verificar la 
validez de esos otros productos. Si el nuevo product o pertenece a un grupo de productos (véase el cuadro A) 
para el que ya se ha realizado una validación inicial, bastará con una validación adicional limitada. Para ello, 
deberá analizarse un mínimo de 10 muestras homog éneas con control negat ivo y 10 muestras homog éneas 
con control positiv o (en la CCS) en condiciones de precisión interm edia. Las muestras con control positivo 
deberán superar el valor de corte. En caso de que este criterio no se cumpla, se requer irá la plena validación. 17.5.2014 L 147/39 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    4.3.2.6.  Verificación de métodos ya validados mediant e ensa yos en colaboración 
En los métodos de cribado ya validados mediante un ensa yo de laboratorio en colaboración, deberá verifi­
carse el funcionamient o del método. Para ello deberá analizarse un mínimo de 6 muestras con control nega ­
tivo y 6 muestras con control positiv o (en la CCS). Las muestras con control positivo deberán superar el 
valor de corte. Si no se cumple este requisito, el laborat orio deberá realizar un análisis de las causas suby a­
cent es para deter minar los motivos por los que no puede cumplir las especifi caciones obteni das en el ensa yo 
en colaboración. Solo después de tomar medidas correctoras volverá a verificarse el funcionamient o del 
métod o en el laboratori o. Si su laborat orio no está capacitado para verificar los resultados del ensa yo en cola ­
boración, deberá establecer su propio valor de corte en una validación compl eta en un único laborat orio. 
4.3.2.7.  Verificación continua del métod o/V alidación per manente del mét odo 
Tras la validación inicial, los datos de validación adicional se obtienen incluy endo al menos dos de las mues ­
tras con control positiv o en cada lote de muestras controladas. Una muestra con control positivo es una 
muestra conocida (por ejem plo, utilizada en la validación inicial), y la otra es un producto diferente del 
mismo grupo de productos (en caso de que solo se analice un product o, se utilizará una muestra diferente de 
este product o). La inclusión de una muestra con control negativ o es facultat iva. Los resultados obteni dos de 
las dos muestras con control positiv o se añaden al conjunt o ya existen te de validación. 
Al menos una vez al año volverá a determinarse el valor de corte y a evaluarse la validez del método. La veri­
ficación continua del método responde a varios objetivos: 
—  control de calidad del lote de muestras controlado, 
—  obte nción de información sobre la solidez del métod o en las condiciones del laboratori o que lo aplica, 
—  justificación de la aplicabilidad del método a distintos product os, 
—  posibilidad de ajus tar los valores de corte en caso de deriva gradual a lo largo del tiempo. 
4.3.2.8.  Informe de validación 
El informe de validación deberá incluir los siguient es datos: 
—  una declaración sobre la CCS, 
—  una declaración sobre el valor de corte obtenid o, 
Nota: El valor de corte deberá tener el mismo número de cifras signif icativas que la CCS. Los valores numé ­
ricos utilizados para calcular el valor de corte deberán tener al menos una cifra signif icativa más que la 
CCS. 
—  una declaración sobre el porcentaje estimado de falsas sospechas , 
—  una declaración sobre el modo en el que se ha generado el porcenta je de falsas sospechas. 
Nota: La declaración sobre el porcentaje estimado de falsas sospech as indica si el método es adecuado para 
su objetivo, ya que indica el número de muestras en blanco (o con poca contaminación) que serán 
objeto de verificación. 
Cuadro A 
Grupos de producto s para validar los métodos de cribado 
Grupos de product os Categorías de productos Productos típicos representativos 
incluidos en la categoría 
Alto contenido de agua Zumos de fruta Zumo de manzana, mosto 
Bebidas alcohólicas Vino, cerveza, sidra 
Raíces, bulbos y tubérculos Jengibre fresco 
Purés a base de cereales o frutos Papillas para bebés y niños 
pequeños 17.5.2014 L 147/40 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    Grupos de product os Categorías de productos Productos típicos representativos 
incluidos en la categoría 
Alto contenido de aceit e Frutos con cáscara Nueces, avellanas, castañas 
Semillas oleaginosas y sus 
product os Semillas de colza, girasol, algodón 
o soja, cacahuete s, sésamo, etc. 
Frutos oleaginosos y sus 
product os Aceites y pasta (como manteca de 
cacahuet e o tahina) 
Alto cont enido de almidón o 
prote ína y bajo conte nido de agua 
y grasa Semillas de cereales y sus 
product os Grano de trigo, cent eno, cebada, 
maíz, arroz, avena Pan integral, 
pan blanco, galleta s, cereales para 
el desa yuno, pasta 
Productos dietéticos Polvos para preparar comida para 
bebés y niños pequeños 
Alto contenido de ácido y de agua 
(*) Cítricos  
Productos raros o únicos (**)  Granos de cacao y sus product os, 
copra y sus productos 
Café, té 
Especias, regali z 
Alto conteni do de azúcar y bajo 
conte nido de agua Frutos secos Higos secos, pasas, pasas de 
Corinto y sultaninas 
Leche y productos lácteos Leche Leche de vaca, cabra y búfala 
Queso Queso de vaca y de cabra 
Láct eos (como leche en polv o) Yogur , nata 
(*)  Si se utiliza una disolución amor tiguadora para estabilizar el pH en la fase de extracción, este grupo de product os 
puede fusionarse en un solo grupo de productos de “alto contenido de agua”. 
(**)  Los productos raros o únicos solo deben ser totalmente validados si se analizan con frecuencia. Si solo se analizan de 
manera ocasional, la validación podrá reducirse a comprobar los niveles declarados utilizando matr ices en blanco.  
Cuadr o B 
Valor de t unicaudal para un porcenta je de falsos negativ os del 5 % 
Grados de liber tad Número de repeticiones valor t (5 %) 
10 11 1,812 
11 12 1,796 
12 13 1,782 
13 14 1,771 
14 15 1,761 
15 16 1,753 
16 17 1,746 
17 18 1,74 
18 19 1,734 17.5.2014 L 147/41 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    Grados de liber tad Número de repeticiones valor t (5 %) 
19 20 1,729 
20 21 1,725 
21 22 1,721 
22 23 1,717 
23 24 1,714 
24 25 1,711 
25 26 1,708 
26 27 1,706 
27 28 1,703 
28 29 1,701 
29 30 1,699 
30 31 1,697 
40 41 1,684 
60 61 1,671 
120 121 1,658 
∞ ∞ 1,645  
4.3.3.  Requi sitos para métodos cualitativo s de cribado (que no dan valor es numér icos) 
La elaboración de directr ices para la validación de métod os de ensa yo binar ios depende actualmente de 
diversos organismos de normalización (como la AOAC o la ISO). Hace muy poco, la AOAC ha elaborado 
una directr iz sobre la mate ria que puede considerarse como la más avanzada en su campo. Así pues, los 
métod os que ofrecen resultados binar ios (como la inspección visual de análisis de nivel) deben validarse con 
arreglo a esta directr iz: 
http://www .aoac.org/imis15_prod/A OAC_Docs/ISP AM/Qual_Chem_Guideline_Final_Appro ved_031412.pdf 
4.4.  Estimación de la incer tidumbre de medición, cálculo de la recuperación y registro de los resultado s (1) 
4.4.1.  Métodos de confir mación 
El resultado analítico deberá expresarse como sigue: 
a)  Corregido en función de la recuperación, indicando su nivel. Dicha corrección no será necesar ia si el 
porcentaje de recuperación se sitúa entre el 90 % y el 110 %. 
b)  Como “x ± U”, donde x es el resultado analítico y U la incer tidumbre de medida expandida, utilizando un 
factor de cober tura de 2, que da un nivel de confianza apro ximado del 95 %. 
Para los product os alimenticios de origen animal también puede tenerse en cuenta la incer tidumbre de medi ­
ción estableciendo el límite de decisión (CCα) con arreglo a la Decisión 2002/657/CE de la Comisión (2) 
(punto 3.1.2.5 de su anex o I: caso de sustancias para las que no se ha establecido un límite permitido). 
Sin embargo, si el resultado del análisis fuera notablemente inferior (> 50 %) al nivel máximo o muy super ior 
a él (por ejem plo, quintuplicándolo), podría comunicarse sin corrección en función de la recuperación, y 
omitirse la tasa de recuperación y la incer tidumbre de medición, siempre que se aplicaran los procedimiento s 
de calidad apropiados y que el análisis sirviera excl usivamente para compr obar el cumpli miento de las dispo ­
siciones legales. 17.5.2014 L 147/42 Diar io Oficial de la Unión Europea ES    
(1)El documento Repor t on the relationship betwe en analytical results, measurement uncer tainty , recover y factors and the provisions of EU food and feed 
legislation (Informe sobre la relación entre resultados analíticos, incer tidumbre de medición, factores de recuperación y disposiciones de 
la UE sobre alimentos y piensos) se encuentra en la dirección siguiente: http://ec.europa.eu/f ood/f ood/chemicalsaf ety/contaminants/ 
repor t-sampling_analysis_2004_en.pdf 
(2)Decisión 2002/657/CE de la Comisión, de 14 de agost o de 2002, por la que se aplica la Directiva 96/23/CE del Consejo en cuanto al 
funcionamiento de los métodos analíticos y la inter pretación de los resultados (DO L 221 de 17.8.2002, p. 8). Las present es normas de interpr etación del resultado del análisis en vista de la aceptació n o el rechazo del 
lote son aplicables al resultado del análisis de la muestra destinada al control oficial. En caso de análisis con 
fines de defensa del comercio o de arbitraje, se aplicarán las normas nacionales. 
4.4.2.  Métodos de cribado 
El resultado del cribado se expresará como “conf orme” o como “sospechoso” de no conf ormidad. 
“Sospechoso” signif ica que la muestra supera el valor de corte y puede cont ener micot oxinas a un nivel más 
elevado que en la CCS. Cualquier resultado sospechoso activa un análisis de confir mación para identificar y 
cuantificar de forma inequív oca las micoto xinas. 
“Conf orme” significa que el conteni do de micot oxinas en la muestra es inferior a la CCS con una certeza del 
95 % (es decir , hay un 5 % de probabilidades de que las muestras se calif iquen incor rectamente como nega ­
tivas). El resultado del análisis se comunicará como “< nivel de CCS” en el nivel de CCS especificado.»  17.5.2014 L 147/43 Diar io Oficial de la Unión Europea ES