식품의약품안전처 공고 제2018-488 호
- 2 -식품의약품안전처 공고 제2018-488 호
식품의기준및규격
(식품의약품안전처고시 제2018-91호,2018.11.14.)을
일부개정함에있어국민에게미리알려의견을수렴하고자그취지,개정
이유및주요내용을
행정절차법
제46조에따라다음과같이공고합니다.
 2018년11월29일
 식품의약품안전처장
식품의 기준 및규격 일부개정고시 (안)행정예고
1.개정 이유
식생활의변화에따라다양한식품이개발·생산될수있도록발효식초
제조시착향의목적으로오크칩(바)을사용할수있도록하고,덱스트린
제조시다양한전분질원료를사용할수있도록개선하고,가열여부와상관
없이갈비부위를주원료로제조하는경우갈비가공품에해당할수있도록
하는등식품별정의및제조·가공기준을합리적으로개정하고자함
발효주의경우과일또는곡류를원료로제조한것을구분하여메탄올
규격을달리정하고있으므로,이를원료로제조하는일반증류주의메탄올
규격을합리적으로개선하여식품산업활성화에 기여하고자함
국제공인기관에서식용근거가확인된미생물7종을식품원료목록에
추가하고,현장에서적용이용이하도록미생물시험법을개선하며유전자
변형식품의추가승인품목에대한시험법을신설하여식품안전관리를강화
하고자함- 3 -식품제조의원료로사용되는제한적사용원료의사용기준을개정하고
수산물3종을식품에사용할수있는원료목록에추가하며학명,이명보완을
통해식품원료사용편의성과식품원료목록사용의편리성을증진하여식
품산업활성화에기여하고자함
또한,국내외에서사용되는식품중옻의우루시올동시시험법분석
대상을확대하여신속한검사및검사의신뢰성을확보하고자함
국내외에서사용되는농약및동물용의약품에 대한잔류허용기준및시
험법을신설·개정하여국민에게안전한식품을공급하고자함
2.주요 내용
가.식품별 정의 및제조 ·가공기준 개정[안제4.4.4-64)(3),제4.4.
4-71),제4.4.7.7-16),제4.7.7-23)(1),제4.12.12-13)(2),제
4.12.12-24),제4.12.12-25),제4.16.16-54)(3)]
1)다양한식품이생산될수있도록식품별정의및제조·가공기준개정
필요
2)동물성유지류의제조시정제공정을거치도록제조·가공기준개정
3)덱스트린제조시전분또는곡분이외에도다양한전분질원료를사용
할수있도록식품유형정의개정
4)당류가공품의원료로벌꿀류등다양한당류를사용할수있도록식
품유형정의개정
5)발효식초제조시착향목적으로오크칩(바)를사용할수있도록제조
- 4 -가공·기준개정
6)수분함량이8%를초과하는고형제품은소스류규격을초과하는경
우라도다른식품유형으로분류될수있도록수분규격은삭제하고,
식품유형정의에수분함량기준추가
7)갈비부위를주원료로양념하거나단순히가열처리한제품도갈비
가공품유형에포함될수있도록식품유형정의개정
8)식품별정의및제조·가공기준의합리적개선으로식품산업활성화에
기여
나.일반증류주의 메탄올 규격 개정[안제4.14.14-95)(2)]
1)과일등을주원료로한일반증류주의메탄올규격개선필요
2)일반증류주의메탄올규격을개정
3)원료의특성을반영한합리적인기준·규격개선을통한식품산업활성
화및소비자의선택기회보장
다.보존 및유통기준 개정[안제2.4.5),제2.4.6),제2.4.13)]
1)보존및유통기준의적용대상명확화필요
2)일반적인냉장또는냉동온도를적용받는식품의범위명확화
3)소비자에게빠른시간내에공급하여야하는즉석섭취편의식품류의
범위명확화
4)냉장보관하여야하는세척란은물로세척한달걀로한정하도록문구- 5 -개정
5)보존및유통기준이적용되는대상을구체적으로명시함으로써해석상의
혼란해소
라.식품에 제한적으로 사용할 수있는 원료 사용기준 개정[안제21]
1)제한적사용원료를다른식품의원료로사용할경우제한적원료
사용기준을적용을받아야하는지여부에대한명확화필요
2)식품에제한적으로사용할수있는원료에“다른식품의원료로
사용하는경우에는‘식품에사용할수있는원료’로사용할수있
다.”는문구를명시
3)민원인의불편해소및식품원료사용에따른혼란을방지
마.식품원료 목록 정비[안별표1및별표2]]
1)식용근거가확인된수산물및미생물의식품원료등재및학명이명확
하지않거나중복등재되어있는식품원료등의목록정비필요
2)지중해담치(Mytilusgalloprovincialis),곳체다슬기(Semisulcospiragottschei),
가시이마쏙(Austinogebiawuhsienweni)수산물3품목을「식품의기준
및규격」의[별표1]2.동물성원료의식품에사용할수있는원료목록에
추가
3)Brevibacterium linens 등미생물7종을[별표2]식품에제한적으로사용
할수있는원료의목록에추가하고,Zym om o nas mobilis 미생물 1종의
- 6 -제한적사용조건을 주류및레반제조로확대
4)대두의이명과단삼의학명수정
5)식품에사용가능한원료의품목확대로다양한제품개발등식품산업
활성화에기여
바.동물용의약품 잔류허용기준 적용 대상 개정[안제2.3.8)①]
1)과학의발달등으로안전성에관한자료가확보됨에따라동물용
의약품의식품중잔류허용기준적용대상개정필요
2)“식품중검출되어서는아니되는물질”의대상물질명과잔류물의
정의명확화
3)안전성등의문제로국내사용이허가되지않은겐티안바이올렛등
동물용의약품5종을식품중검출되어서는아니되는물질에추가
4)“식품중검출되어서는아니되는물질”의적용대상을명확히하여
국민에게안전한식품공급
사.농산물 중농약 잔류허용기준 신설[안별표4중(46)메틸브로마이드]
1)「농약관리법」에신규등록된농약의안전관리를위한잔류허용기준
신설필요
2)메틸브로마이드의농약잔류허용기준신설
3)농산물에농약잔류허용기준을신설하여국민에게안전한식품공급- 7 -아.식품 중동물용의약품의 잔류허용기준 개정[안별표5중(10)디히
드로스트렙토마이신/스트렙토마이신,(11)레바미졸,(16)벤질페니실
린,(33)이버멕틴,(38)클로산텔,(40)타일로신,(43)틸미코신,(44)
페반텔/펜벤다졸/옥스펜다졸,(54)노르플록사신,(55)오플록사신,
(56)페플록사신,(105)프라지콴텔,(116)클로술론]
1)「약사법」에의해동물에사용이허가된동물용의약품의안전관리를
위한잔류허용기준개정필요
2)디히드로스트렙토마이신등13종동물용의약품의잔류허용기준개정
3)안전성등의문제가있는동물용의약품3종(노르플록사신,오플록사신,
페플록사신)을식품중검출되어서는아니되는물질목록으로추가함
에따라현행잔류허용기준을삭제
4)식품중동물용의약품잔류허용기준을합리적으로개정하여국민에게
안전한식품공급
자.일반시험법 개정 등[안제7.4.4.14.1.2라,제7.4.4.3사.6),제7.
4.4.26가5),제7.6.6.96.9.36.9.3.4,제7.8.8.38.3.14,제7.8.8.3
8.3.15,제7.8.8.38.3.24,제7.8.8.38.3.48,제7.8.8.38.3.49,제7.8.
8.38.3.50,제7.8.8.38.3.55,제7.8.8.38.3.69,제7.9.9.16,제7.10.
10.110.1.5,제7.10.10.110.1.11,제7.10.10.110.1.12,제7.10.10.1
10.1.13,제7.10.10.110.1.14]
1)시험결과의정확성제고및기준신설및개정에따른시험법마련필요
- 8 -2)버터와아이스크림류의미생물시험을위한시험용액제조방법개선
3)액란제품의살모넬라검사에분자생물학적시험법활용이가능하도록
개정
4)식품중동물용의약품잔류허용기준개정에따라관련시험법8종
개정
5)식품중우루시올확인시험법개정
6)승인된유전자변형식품의 VCO01981-5(옥수수)등18품목에대한
정성및정량시험법추가
7)과학적인시험법개정으로검사신뢰도를제고함으로서국민에게안전한
식품공급
차.타법령의 개정사항 반영 등용어 및문구정비[안제1.2.9),제1.4.
2),제2.1.1)(16),제2.3.2)(1),제2.3.9)(2)⑨,제4.1.1),제4.
1.4)(4),제4.2.2-13)(1),제4.2.2-23)(1),제4.12.12-25)(6),
제4.17.7-13)(3),제7.2.2.1.12.1.1.1나.2),제7.2.2.1.2다.2)
다),제7.4.4.44.4.124),제7.4.4.44.4.28),제7.5.5.35.3.2가.1),
제7.5.5.35.3.2가.2),제7.5.5.35.3.2가.3),제7.5.5.35.3.2가.
4),제7.5.5.35.3.2나,제7.7.7.37.3.17.3.1.2가,제7.7.7.37.3.1
7.3.1.4가,제7.7.7.37.3.17.3.1.5가,제7.7.7.37.3.17.3.1.7마.1),
제7.7.7.37.3.27.3.2.5마.1),제7.7.7.37.3.27.3.2.25마.1),제7.
7.7.37.3.27.3.2.27마.1),제7.8.8.14),제7.8.8.28.2.28.2.2.1- 9 -8.2.2.1.18),제7.8.8.38.3.238.3.23.21),제7.8.3.1166)라,별표6
중(19),(59),(66),(80)]
1)허용외타르색소의기준·규격적용범위신설
2)
정착성수산동식품생산해역의등급설정기준
(해양수산부고시)이
패류생산해역수질의위생기준
으로변경되어(‘18.5.29)생식용굴을
생산할수있는해역의수질기준에대한관련고시명칭및수질기준개정
3)이물규격적용대상을명확히하도록문구개정
4)식물성유지류중설정되지않은규격에대한시험방법항목삭제
5)‘식품첨가물공전’의마요네즈에대한안식향산등보존료사용기준
반영
6)알가공품제조시물세척하지않은식용란을사용하는경우에만세척
하여사용도록문구개정
7)‘계란’을
축산물위생관리법
에서사용하는‘달걀’로용어개정
3.의견 제출
「식품의기준및규격」일부개정고시(안)에대하여의견이있는단체
또는개인은 2019년1월30일까지다음사항을기재한의견서를식품의약
품안전처장(우편번호:28159,주소:충청북도청주시흥덕구오송읍오송
생명2로187오송보건의료행정타운식품의약품안전처 ,참조:식품기준과,
전화043-719-2420,팩스043-719-2400)에게제출하여주시기바랍니다.
가.예고사항에대한항목별의견(찬․반여부와그이유)
- 10 -나.성명(단체의경우단체명과그대표자의성명),주소및전화번호
다.기타참고사항- 11 -식품의약품안전처 고시 제2018-00 호
「식품위생법」제7조제1항에따른「식품의기준및규격」(식품의약품
안전처고시제2018-91호,‘18.11.14.)을다음과같이개정고시합니다.
2018년0월00일
식품의약품안전처장
식품의 기준 및규격 일부개정고시 (안)
식품의기준및규격일부를다음과같이개정한다.
제1.2.9)∼11)를각각10)∼12)으로하고,9)를다음과같이신설한다.
9)이고시에서정하고있는“허용외타르색소”란상기제1.2.8)에서정한
타르색소중「식품첨가물의기준및규격」에서해당식품유형에허용
되지않은타르색소를말한다.
제1.4.2)중“계란”을“달걀”로한다.
제2.1.1)(16)중“「정착성수산동식물생산해역의등급설정기준」(해양수
산부고시)에따라청정해역의수질기준에”를“「패류생산해역수질의위생
기준」(해양수산부고시)에따라지정해역수준의수질위생기준에”으로한다.
- 12 -제2.1.2)(7)중②를다음과같이한다.
②‘식품에제한적으로사용할수있는원료’로분류된원료는명시된사
용조건을준수하여야하며,별도의사용조건이정하여지지않은원
료는다음의사용기준에따른다.
㉮식품제조시사용되는‘식품에제한적으로사용할수있는원료’는
원료의중량을기준으로50%미만(배합수제외)을사용하여야한다.
㉯식품제조시‘식품에제한적으로사용할수있는원료’를2가지이상
혼합할경우혼합되는총량은원료의중량을기준으로50%미만(배합수
제외)사용하여야한다.
㉰다만,최종소비자에게판매되지아니하고제조업소에공급되는원료
용제품을제조하고자하는경우에는위의㉮,㉯항을적용받지아니할수
있다.
㉱다류,음료수,주류및향신료제조시‘식품에제한적으로사용할수
있는원료’에속하는식물성원료가1가지인경우에는원료의중량을
기준으로100%까지(배합수제외)사용할수있다.
제2.3.2)중(1)을다음과같이한다.
(1)식품은다음의이물을함유하여서는아니된다.
①원료의처리과정에서그이상제거되지아니하는정도이상의이물
②오염된비위생적인이물- 13 -번호식품*1중검출되어서는아니되는물질
물질명 잔류물의정의
1니트로푸란계(Nitrofurans)
-푸라졸리돈(Furazolidone)3-Amino-2-oxazolidinone(AOZ)
-푸랄타돈(Furaltadone)3-Amino-5-morpholinomethyl-2-oxazolidinone
(AMOZ)
-니트로푸라존(Nitrofurazone)-Semicarbazide(SEM):비가열축산물및동
물성수산물(단순절단포함,갑각류제외)의
가식부위에한함
-Nitrofurazone:갑각류에한함
-니트로푸란토인(Nitrofurantoine)1-Aminohydantoin(AHD)
-니트로빈(Nitrovin) Nitrovin
2카바독스(Carbadox) Quinoxaline-2-carboxylicacid(QCA)
3올라퀸독스(Olaquindox)3-methylquinoxaline-2-carboxylicacid(MQCA)③인체에위해를끼치는단단하거나날카로운이물
다만,다른식물이나원료식물의표피또는토사,원료육의털,뼈등과
같이실제에있어정상적인제조․가공상완전히제거되지아니하고
잔존하는경우의이물로서그양이적고위해가능성이낮은경우는
제외한다.
제2.3.8)중①을다음과같이한다.
①관련법령에서안전성및유효성에문제가있는것으로확인되어제조
또는수입품목허가를하지아니하는동물용의약품(대사물질포함)은
검출되어서는아니된다.이에해당되는주요물질은아래와같으며,
아래에명시하지않은물질에대해서도관련법령에근거하여본항을
적용할수있다.
- 14 -번호식품*1중검출되어서는아니되는물질
물질명 잔류물의정의
4클로람페니콜(Chloramphenicol)Chloramphenicol
5클로르프로마진(Chlorpromazine)Chlorpromazine
6클렌부테롤(Clenbuterol) Clenbuterol
7콜치신(Colchicine) Colchicine
8답손(Dapsone) Dapsone,monoacetyldapson의합을dapsone으
로함
9디에틸스틸
베스트롤(Diethylstilbestrol,DES)Diethylstilbestrol
10메드록시프로게스테론아세테이트
(Medroxyprogesteroneacetate,MPA)Medroxyprogesteroneacetate
11티오우라실(Thiouracil) 2-thiouracil,6-methyl-2-thiouracil,6-propyl-
2-thiouracil및6-phenyl-2-thiouracil의합을
thiouracil로함
12겐티안바이올렛
(GentianViolet,Crystalviolet)Gentianviolet과Leuco-gentianviolet의합을
Gentianviolet으로함
13말라카이트그린
(Malachitegreen)Malachitegreen과Leuco-malachitegreen의합
을malachitegreen으로함
14메틸렌블루
(MethyleneBlue)Methyleneblue와AzureB의합을Methylene
Blue로함
15디메트리다졸(Dimetridazole)Dimetridazole과2-hydroxymethyl-1-methyl-
5-nitroimidazole(HMMNI)의합을Dimetridazole로함
16이프로니다졸(Ipronidazole)Ipronidazole과1-methyl-2-(2'-hydroxyisopropyl)
-5-nitroimidazole(Ipronidazole-OH)의합을
Ipronidazole로함
17메트로니다졸(Metronidazole)Metronidazole과1-(2-hydroxyethyl)-2-hydroxymethyl
-5-nitroimidazole(Metronidazole-OH)의합을
Metronidazole로함
18로니다졸(Ronidazole) Ronidazole과2-hydroxymethyl-1-methyl
-5-nitroimidazole(HMMNI)의합을Ronidazole로함
19노르플록사신(Norfloxacin)Norfloxacin
20오플록사신(Ofloxacin) Ofloxacin
21페플록사신(Pefloxacin) Pefloxacin
22피리메타민(Pyrimethamine)Pyrimethamine
23반코마이신(Vancomycin) Vancomycin- 15 -*주1.축산물및동물성수산물과그가공식품에한한다.
제2.3.9)(2)⑨중“계란”을“달걀”로한다.
제2.4.5)중“냉장제품은”을“이고시에서별도로보관온도를정하고있지
않은냉장제품은”으로한다.
제2.4.6)중“즉석섭취편의식품류는 ”을“즉석섭취식품과도시락은”으로한
다.
제2.4.13)중“달걀을세척하는경우”를“달걀을물로세척하는경우”로한
다.
제4.1.1)중“계란”을“달걀”로한다.
제4.1.4)(4)중“계란”을각각“달걀”로한다.
제4.2.2-13)(1)중“계란”을각각“달걀”로한다.
제4.2.2-23)(1)중“계란”을각각“달걀”로한다.
- 16 -제4.4.4-64)(3)중“전분또는곡분을”을“곡분,전분등의전분질원료를”
으로한다.
제4.4.4-71)중“올리고당류를”을“올리고당류,벌꿀류등을”으로한다.
제4.4.7.7-16)중(4),(6),(7)을삭제하고,종전(5)및(8)∼(10)을각각
(4)및(5)∼(7)로한다.
제4.7.7-23)중(1)을다음과같이한다.
(1)원료유지는탈검,탈산,탈색,탈취의정제공정을거치거나이와동등
이상의복합정제공정을 거쳐야한다.(다만,원료우지및원료돈지는
제외)
제4.12.12-13)(2)중“과일또는과즙을주원료로하여제조한발효식초
에”를“발효식초에”로한다.
제4.12.12-24)중(1)및(4)를각각(4)및(1)로하고,(1)중“혼합하여”를
“혼합하여수분함량이8%이하가되도록”으로한다.
제4.12.12-25)중(1)을삭제하고,(2)∼(5)를각각(1)∼(4)로한다.- 17 -안식향산
안식향산나트륨
안식향산칼륨
안식향산칼슘1.0이하(안식향산으로서,마요네즈에한한다.)제4.12.12-25)중(6)을(5)로하고,다음을신설한다.
제4.14.14-95)중(2)를다음과같이한다.
(2)메탄올(mg/mL):1.0이하(다만,곡류를주원료로한제품은0.5이하)
제4.16.16-54)중(3)을다음과같이한다.
(3)갈비가공품:식육의갈비부위(뼈가붙어있는것에한한다)를정형한
것에식품또는식품첨가물을가하여양념한것이거나갈비부위를그대
로또는양념하여훈연하거나가열처리한것을말한다.
제4.17.17-13)(3)중“세척하지”를“물로세척하지”로한다.
제7.2.2.1.12.1.1.1나.2)중“생계란”을“생달걀”로한다.
제7.2.2.1.2다.2)다)중“계란”을“달걀”로한다.
제7.4.4.14.1.2라.중“검사를”을“검사등을”으로한다.
제7.4.4.3사.6)을다음과같이한다.
- 18 -6)버터와아이스크림류:검체일정량(10∼25g)을멸균용기에취해40℃이
하의온탕에서15분내에용해시킨후희석액을가하여100∼250mL로
한것을시험용액으로한다.
제7.4.4.44.4.124)중“계란액”을“달걀액”으로한다.
제7.4.4.44.4.28)중“계란”을각각“달걀”로한다.
제7.4.4.26가.5)를다음과같이한다.
5)결과확인
(1)PCR반응에서증폭곡선이확인되지않는경우살모넬라불검출로
판정할수있다.다만,음성대조군에서증폭곡선이확인되거나양성
대조군에서증폭곡선이확인되지않을경우재시험하여야한다.
(2)증폭곡선이확인되는경우분리배양후생화학적검사등을통하여
살모넬라로동정되면검출로판정한다.
제7.5.5.35.3.2가.1)중“계란”을“달걀”로한다.
제7.5.5.35.3.2가.2)중“계란”을각각“달걀”로한다.
제7.5.5.35.3.2가.3)중“계란”을“달걀”로한다.- 19 -제7.5.5.35.3.2가.4)중“계란”을각각“달걀”로한다.
제7.5.5.35.3.2나.중“계란”을“달걀”로한다.
제7.6.6.96.9.36.9.3.4를다음과같이한다.
6.9.3.4살모넬라
제7.일반시험법4.미생물시험법4.11살모넬라시험법에따라시험한
다.다만,액란제품의경우4.11살모넬라시험법또는4.26식중독균에
대한분자생물학적시험법가.살모넬라시험법에따라시험한다.
제7.7.7.37.3.17.3.1.2가.중“계란”을“달걀”로한다.
제7.7.7.37.3.17.3.1.4가.중“계란”을“달걀”로한다.
제7.7.7.37.3.17.3.1.5가.중“계란”을“달걀”로한다.
제7.7.7.37.3.17.3.1.7마.1)중“계란”을“달걀”로한다.
제7.7.7.37.3.27.3.2.5마.1)중“계란”을“달걀”로한다.
- 20 -제7.7.7.37.3.27.3.2.25마.1)중“계란”을각각“달걀”로한다.
제7.7.7.37.3.27.3.2.27마.1)중“계란”을“달걀”로한다.
제7.8.8.14)중“계란”을“달걀”로한다.
제7.8.8.28.2.28.2.2.18.2.2.1.18)표3중“계란”을“달걀”로한다.
제7.8.8.38.3.14∼8.3.15를다음과같이한다.
8.3.14레바미졸(Levamisole),트리클로르폰(Trichlorfon)
1)시험법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중분석대상물질을 10%초산함유아세토니트릴(가금류고기는아
세토니트릴)로추출한후아세토니트릴포화헥산으로정제하여액체크
로마토그래프/질량분석기로분석한다.
3)측정기기
액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매:액체크로마토그래프용또는이와동등한것- 21 -나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:100mL용량플라스크에표준품을각각정밀히달아메탄올에
녹여100mg/L가되게한다.조제된표준원액은냉동보관한다.
라)혼합표준용액:각물질의표준원액100mg/L농도로부터메탄올로
희석하여필요한농도가되게한다.
마)10%초산(aceticacid)함유아세토니트릴용액:1,000mL용량플라
스크에초산100mL을넣고아세토니트릴로표시선까지채운다.
바)20mM개미산암모늄(ammoniumformate)용액:1,000mL용량플라
스크에개미산암모늄1.26g을넣고물로표시선까지채운다.
사)0.2%개미산(formicacid)함유메탄올용액:1,000mL용량플라스크
에개미산2mL을넣고메탄올로표시선까지채운다.
아)기타시약:특급또는이와동등한것
5)시험용액의조제
균질화한검체2g을50mL원심분리관에취한다.10%초산함유아세
토니트릴(가금류고기는아세토니트릴)10mL을가하여15분간진탕하
고,4℃에서4,700G로10분간원심분리한다.상층액을새로운50mL
원심분리관에옮겨아세토니트릴포화헥산10mL을가하여10분간진
탕한다.4℃에서4,700G로10분간원심분리한후,하층액을취하여4
0℃수욕상에서질소농축한다.잔류물에메탄올용액2mL(소고기,갑
각류,어류는메탄올용액4mL)을가하여재분산하고,0.2μm멤브레
- 22 -인필터(PVDFmembranefilter)로여과하여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그래프의측정조건
(1)칼럼:C18(Xbridge,2.1mmｘ150mm,3.5μm)또는이와동등한것
(2)이동상
(가)이동상A:20mM개미산암모늄용액
(나)이동상B:0.2%개미산함유메탄올용액
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
09010
2.1 9010
4595
8595
109010
119010
(3)유속:0.25mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(Positive)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Capillaryvoltage:0.5kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤)- 23 -(5)분석대상및개별조건(MRM조건)
물질명
(Compound)머무름
시간(분)분자량
(MW)선구이온
(Precursor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
레바미졸
(Levamisole)4.34204.3205.291.1134
123.1524
178.16 20
트리클로르폰
(Trichlorfon)4.78257.4258.079.0228
109.12 18
221.0910
※밑줄표시되어있는것은정량이온이며그외이온들은정성이온임
※각생성이온(Production)에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으
로변경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함
7)정성및확인시험
위의조건으로얻어진크로마토그램상의피크는표준용액피크의머무름
시간과비교하여일치하여야한다.또한표준용액과시험용액의선구이온
(Precursorion)및생성이온(Production)이일치하여야하고,표준용액과
시험용액의생성이온간반응세기의비율(Ionratio)을비교하여그비율은
주1)과일치하여야한다.확인시험의경우,음성검체(Blanksample)에측정
물질을첨가한것을검체와동일하게전처리하여얻은표준용액으로서
비교한다.
주1.생성이온간반응세기의비율허용범위
- 24 -이온간반응세기의 비율 (%) 허용범위
>50% ≤20%
>20%,≤50% ≤25%
>10%,≤20% ≤30%
나)표준품크로마토그램
(1)레바미졸(4.34분)
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
우유 새우
넙치 장어
(2)트리클로르폰(4.78분)- 25 -
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
우유 새우
넙치 장어
8)정량시험
가)정량
조직표준곡선(Tissuestandardcurve)작성을위하여각해당물질이
검출되지않은음성검체(Blanksample)를2g씩준비한후공시료를포
함하여5개이상의농도로전처리하여표준용액을제조한다.확인시험
과똑같은조건에서공시료를포함하여각농도별첨가시료에서얻어
진크로마토그램상의각피크높이또는면적을구하여검량선을작성
한후시험용액의크로마토그램으로부터정량이온(Quantitativeion)의
각피크높이또는피크면적에따라산출된시험용액중검출농도,검
체량과최종시험용액의부피를고려하여정량한다.
나)정량한계
레바미졸:0.01mg/kg(소고기·돼지고기·가금류고기·유0.005mg/kg)
- 26 -트리클로르폰:0.01mg/kg(돼지고기·가금류고기·알·어류0.005mg/kg)
8.3.15.겐티안바이올렛(Gentianviolet),말라카이트그린(Malachitegreen),메
틸렌블루(Methyleneblue)동시시험법
1)시험법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중분석대상물질을 1%초산으로처리후1%초산함유아세토
니트릴로추출하고무수황산나트륨(Na2SO4)과C18,PSA(Primary
secondaryamine)으로정제한후액체크로마토그래프/질량분석기로분
석한다.
3)측정기기
액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매:액체크로마토그래프용또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:100mL용량플라스크에각표준품을정밀히달아메탄- 27 -올에녹여1,000mg/L이되게한다.(류코겐티안바이올렛은5%
DMSO(Dimethylsuloxide)함유메탄올에녹여100mg/L가되게
한다.)
라)혼합표준용액:각물질의표준원액을100mg/L농도로부터50%
아세토니트릴로희석하여필요한농도가되게한다.
마)1%초산수용액:1,000mL용량플라스크에초산10mL를넣고물
로표시선까지채운다.
바)1%초산함유아세토니트릴용액:1,000mL용량플라스크에초산
10mL를넣고아세토니트릴로표시선까지채운다.
사)10mM초산암모늄,0.1%개미산수용액:1,000mL용량플라스크에초산
암모늄0.7708g과개미산1mL을넣고물로표시선까지채운다.
아)0.1%개미산을함유한아세토니트릴:1,000mL용량플라스크에
개미산1mL를넣고아세토니트릴로표시선까지채운다.
자)기타시약:특급또는이와동등한것
5)시험용액의조제
각각의시료를균질화하여2g을정밀히달아50mL폴리프로필렌재질의
튜브에취하고1%초산수용액1mL를넣은후강하게진탕한다.1%
초산함유아세토니트릴용액10mL을가하고무수황산나트륨2g을
넣어5분간진탕한후4,700G,4℃에서10분간원심분리한다.상층액을
C18100mg,PSA(primarysecondaryamine)100mg이담겨진폴리프
- 28 -로필렌재질의튜브에취한후5분간진탕한다.4,700G,4℃에서10분간
원심분리한뒤,추출액중1mL을취하여0.2μm멤브레인필터(PTFE
membranefilter)로여과하여유리바이알에담아시험용액으로사용한
다.
6)시험조작
가)액체크로마토그래프측정조건
(1)칼럼:C18(ImtaktCadenzaCD-C18UP,2.0mmｘ150mm,3µm)
또는이와동등한것
(2)이동상
(가)이동상A:10mM초산암모늄,0.1%개미산함유수용액
(나)이동상B:0.1%개미산함유아세토니트릴
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
095 5
195 5
510 90
810 90
8.1 95 5
12 95 5
(3)유속:0.3mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:2μL- 29 -물질명
(Compound)머무름
시간 (분)분자량선구이온
(Precusor
ion, m/z)생성이온
(Product
ion, m/z)충돌에너지
(Collision
energy, eV)
겐티안바이올렛
(Gentian violet)6.1 372.5 372.1235.1 55
340.2 55
356.2 39
류코겐티안 바이올렛
(Leucogentian violet)7.9 373.5 374.1238.2 28
239.2 35
358.3 32
류코말라카이트 그린
(Leucomalachite green)7.9 330.5 331.0223.1 55
239.2 31
316.2 21
말라카이트 그린
(Malachite green)5.5 329.5 329.1165.2 55
208.2 34
313.2 36
메틸렌블루
(Methylene blue)4.6 284.4 284.0240.1 33
252.1 52
268.1 34
아주르 B
(Azure B)4.4 270.4 269.9212.1 52
228.1 34
254.1 33나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(Positive)
(2)Capillarytemperature:300℃
(3)Collisiongas:아르곤(Ar)
(4)분석대상물질의조건
※밑줄표시되어있는것은정량이온이며그외이온들은정성이온임
※각생성이온(Production)에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값
- 30 -으로변경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함
7)정성및확인시험
위의조건으로얻어진크로마토그램상의피크는표준용액피크의머무
름시간과비교하여일치하여야한다.또한표준용액과시험용액의선구
이온(Precursorion)및생성이온(Production)이일치하여야하고,표준
용액과시험용액의생성이온간반응세기의비율(Ionratio)을비교하여
그비율이허용범위(±20∼30%)이내에서일치하여야한다주1).확인시
험의경우,음성검체(Blanksample)에측정물질을첨가한것을검체와
동일하게전처리하여얻은표준용액으로서비교한다.
주1.생성이온간반응세기의비율허용범위
이온간반응세기의 비율 (%) 허용범위
>50% ±20%
>20%,≤50% ±25%
>10%,≤20% ±30%
나)표준용액크로마토그램- 31 -
그림1.아주르B(4.4분),메틸렌블루(4.6분),말라카이트그린(5.6분),겐티안바이
올렛(6.1분),류코말라카이트그린(7.9분),류코겐티안바이올렛(7.9분)
표준품의크로마토그램(0.001mg/L)
8)정량시험
가)정량
조직표준곡선(Tissuestandardcurve)작성을위하여각해당물질이검출
되지않은음성검체(Blanksample)를2g씩준비한후공시료를포함
하여5개이상의농도로전처리하여표준용액을제조한다.확인시험과같
은조건에서공시료를포함하여각농도별첨가시료에서얻어진크
로마토그램상의각피크높이또는면적을구하여검량선을작성한후
시험용액의크로마토그램으로부터정량이온(Quantitativeion)의각
피크높이또는피크면적에따라산출된시험용액중검출농도,검
체량과시험용액농축액의부피를고려하여정량한다.
나)정량한계
- 32 -말라카이트그린:0.002mg/kg
류코말라카이트그린:0.002mg/kg
메틸렌블루:0.002mg/kg
아주르B:0.002mg/kg
겐티안바이올렛:0.002mg/kg
류코겐티안바이올렛:0.002mg/kg
제7.8.8.38.3.238.3.23.21)중“계란”을“달걀”로한다.
제7.8.8.3.24를다음과같이한다.
8.3.24스피라마이신(Spiramycin),타일로신(Tylosin),키타사마이신(Kitasamycin)
1)시험법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중분석대상물질을 메탄올/아세토니트릴(25:75,v/v)용액(가금류고
기,돼지고기는100%아세토니트릴)으로추출하고아세토니트릴포화헥
산으로정제한후액체크로마토그래프/질량분석기로분석한다.
3)측정기기
액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그래프용또는이와동등한것- 33 -나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:100mL용량플라스크에표준품을각각정밀히달아메탄올
에녹여100mg/L가되게한다.조제된표준원액은냉동보관한다.
라)혼합표준용액:각물질의표준원액100mg/L농도로부터메탄올로
희석하여필요한농도가되게한다.
마)0.1%개미산(Formicacid)용액:1,000mL용량플라스크에개미산1
mL을넣고물로표시선까지채운다.
바)0.1%개미산함유아세토니트릴용액:1,000mL용량플라스크에개미
산1mL을넣고아세토니트릴로표시선까지채운다.
사)기타시약：특급또는이와동등한것
5)시험용액의조제
가)가금류고기와돼지고기를제외한식품
균질화한검체2g을50mL원심분리관에취한다.메탄올/아세토니트
릴(25:75,v/v)용액10mL를가하여30초간진탕하고10분간초음파처
리한후상온에서4,700G로10분간원심분리한다.상층액을취하여50
mL원심분리관에옮기고아세토니트릴포화헥산10mL를가한다.10
분간진탕한후하층액을취하여15mL원심분리관으로옮긴다.이를
40℃수욕상에서5mL가될때까지질소농축한다.농축액을1분간진
탕한후,0.2μm멤브레인필터(PVDFmembranefilter)로여과하여시
험용액으로한다.
- 34 -나)가금류고기,돼지고기
균질화한검체2g을50mL원심분리관에취한다.ⓐ 100% 아세토니
트릴용액10mL를가하여10분간진탕한후,상온에서4,700G로10
분간원심분리하여상층액을취한다.ⓑ 100% 아세토니트릴용액10
mL를가하여10분간진탕한후,상온에서4,700G로10분간원심분리
한다.무수황산마그네슘1g을미리넣어둔50mL원심분리관에 ⓐ와
ⓑ의상층액을합한다.아세토니트릴포화헥산10mL을가한후10분
간진탕하고4,700G에서10분간원심분리한다.상층액(헥산층)을제거
한다.하층(아세토니트릴층)의약1/2을새로운15mL원심분리관으로
옮긴후40℃수욕상에서2.5mL가될때까지질소농축한다음나머지
하층을옮겨시료용액이5mL가될때까지질소농축한다.농축액을1
분간진탕한후,0.2μm멤브레인필터(PVDFmembranefilter)로여과
하여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그래프의측정조건
(1)칼럼:C18(Xbridge,2.1mmｘ150mm,3.5μm)또는이와동등
한것
(2)이동상
(가)이동상A:0.1%개미산용액- 35 -(나)이동상B:0.1%개미산함유아세토니트릴용액
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
08515
115050
11.1 8515
168515
(3)유속:0.25mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(Positive)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Capillaryvoltage:3.8kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤)
(5)분석대상및개별조건(MRM조건)
물질명
(Compound)머무름
시간(분)분자량
(MW)선구이온
(Precursor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
스피라마이신
(Spiramycin)4.46842.5843.983.050
141.928
174.030
타일로신
(Tylosin)7.93915.5916.888.170
101.145
174.135
키타사마이신
(Kitasamycin)8.63771.4772.683.050
109.140
174.130
※밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그외이온들은 정성이온임
※각생성이온 (Product ion)에대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 
- 36 -변경하여 사용할 수있으며 ,제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함
7)정성및확인시험
위의조건으로얻어진크로마토그램상의피크는표준용액피크의머무름
시간과비교하여일치하여야한다.또한표준용액과시험용액의선구이온
(Precursorion)및생성이온(Production)이일치하여야하고,표준용액과
시험용액의생성이온간반응세기의비율(Ionratio)을비교하여그비율은
주1)과일치하여야한다.확인시험의경우,음성검체(Blanksample)에측정
물질을첨가한것을검체와동일하게전처리하여얻은표준용액으로서
비교한다.
주1.생성이온간반응세기의비율허용범위
이온간반응세기의 비율 (%) 허용범위
>50% ≤20%
>20%,≤50% ≤25%
>10%,≤20% ≤30%
나)표준품크로마토그램
(1)스피라마이신(4.71분)- 37 -
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
유 새우
넙치 장어
(2)타일로신(7.93분)
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
유 새우
넙치 장어
(3)키타사마이신(8.63분)
- 38 -
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
유 새우
넙치 장어
8)정량시험
가)정량
조직표준곡선(Tissuestandardcurve)작성을위하여각해당물질이
검출되지않은음성검체(Blanksample)2g씩준비한후공시료를포
함하여5개이상의농도로전처리하여표준용액을제조한다.확인시험
과똑같은조건에서공시료를포함하여각농도별첨가시료에서얻어
진크로마토그램상의각피크높이또는면적을구하여검량선을작성
한후시험용액의크로마토그램으로부터정량이온(Quantitativeion)의
각피크높이또는피크면적에따라산출된시험용액중검출농도,검
체량과시험용액농축액의부피를고려하여정량한다.
나)정량한계
스피라마이신:0.05mg/kg(알0.005mg/kg)- 39 -타일로신:0.001mg/kg(어류0.005mg/kg,소고기․알0.05mg/kg)
키타사마이신:0.005mg/kg(소고기․알․갑각류0.05mg/kg)
제7.8.8.3.48을다음과같이한다.
8.3.48.클로산텔(Closantel),클로술론(Clorsulon),니트록시닐(Nitroxynil)
동시시험법
1)시험법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중분석대상물질을 개미산암모늄이포함된아세토니트릴과물혼
합용액(5:1,v/v)으로추출하고무수황산마그네슘(MgSO4)와
PSA(Primarysecondaryamine)로정제한후액체크로마토그래프/질량
분석기로분석한다.
3)측정기기
액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그래프용또는이와동등한것
- 40 -나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)표준원액:100mL용량플라스크에표준품을각각정밀히달아아세토니
트릴에녹여200mg/L가되게한다.조제된표준원액은냉동보관한다.
라)혼합표준용액:각물질의표준원액200mg/L농도로부터아세토니
트릴로희석하여필요한농도가되게한다.
마)200mM개미산암모늄:100mL용량플라스크에개미산암모늄1.26
g을넣고물로표시선까지채운다.
바)기타시약：특급또는이와동등한것
5)시험용액의조제
균질화한검체2g을50mL원심분리관에취하고200mM개미산암모
늄0.1mL과물2mL을가하여1분간균질화한다.아세토니트릴10
mL을가하여10분간진탕하고-4℃에서4,700G로10분간원심분리한
후,상층액을취한다.900mg무수황산마그네슘과150mgPSA를미리
넣어둔50mL원심분리관에상층액을합한후10분간진탕하고-4℃
에서4,700G로10분간원심분리한다.상층액을15mL원심분리관에취
한뒤,50℃수욕상에서4mL가되도록질소농축한다.농축액을1분간
진탕한후,0.2μm멤브레인필터(PVDFmembranefilter)로여과하여
시험용액으로한다.
6)시험조작- 41 -가)액체크로마토그래프의측정조건
(1)칼럼:C18(Xselect,2.1mmｘ150mm,3.5μm)또는이와동등한것
(2)이동상
(가)이동상A:5%초산함유10mM초산암모늄용액
(나)이동상B:아세토니트릴
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
0 90 10
2.1 90 10
4. 5 95
8 5 95
10 90 10
(3)유속:0.25mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(Negative)
(2)Capillarytemperature:500℃
(3)Capillaryvoltage:1.5kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤)
(5)분석대상및개별조건(MRM조건)
- 42 -물질명
(Compound)머무름
시간(분)분자량
(MW)선구이온
(Precursor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
클로산텔
(Closantel)5.92663.1661127-50
279 -42
344-34
클로술론
(Clorsulon)4.73380.6378142-26
242-22
342 -10
니트록시닐
(Nitroxynil)4.77290.0289116-34
127 -26
162-20
※밑줄표시되어있는것은정량이온이며그외이온들은정성이온임
※각생성이온(Production)에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으
로변경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함
7)정성및확인시험
위의조건으로얻어진크로마토그램상의피크는표준용액피크의머무름
시간과비교하여일치하여야한다.또한표준용액과시험용액의선구이온
(Precursorion)및생성이온(Production)이일치하여야하고,표준용액과
시험용액의생성이온간반응세기의비율(Ionratio)을비교하여그비율은
주1)과일치하여야한다.확인시험의경우,음성검체(Blanksample)에측정
물질을첨가한것을검체와동일하게전처리하여얻은표준용액으로서
비교한다.- 43 -주1.생성이온간반응세기의비율허용범위
이온간반응세기의비율(%) 허용범위
>50% ≤20%
>20%,≤50% ≤25%
>10%,≤20% ≤30%
나)표준품크로마토그램
(1)클로산텔(5.92분)
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
우유 새우
넙치 장어
(2)클로술론(4.73분)
- 44 -
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
우유 새우
넙치 장어
(3)니트록시닐(4.77분)
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
우유 새우
넙치 장어
8)정량시험
가)정량
조직표준곡선(Tissuestandardcurve)작성을위하여각해당물질이
검출되지않은음성검체(Blanksample)를2g씩준비한후공시료를- 45 -포함하여5개이상의농도로전처리하여표준용액을제조한다.확인시
험과똑같은조건에서공시료를포함하여각농도별첨가시료에서얻
어진크로마토그램상의각피크높이또는면적을구하여검량선을작
성한후시험용액의크로마토그램으로부터정량이온(Quantitativeion)
의각피크높이또는피크면적에따라산출된시험용액중검출농도,
검체량과최종시험용액의부피를고려하여정량한다.
나)정량한계
클로산텔:0.01mg/kg
클로술론:0.01mg/kg
니트록시닐:0.01mg/kg
제7.8.8.38.3.49타일로신(Tylosin)∼8.3.50트리클로르폰(Trichlorfon,
Metrifonate)을삭제한다.
제7.8.8.38.3.51∼8.3.54를각각8.3.49∼8.3.52로한다.
제7.8.8.38.3.55키타사마이신(Kitasamycin)을삭제한다.
제7.8.8.38.3.56∼8.3.68을각각8.3.53∼8.3.65로한다.
- 46 -제7.8.8.38.3.69니트록시닐(Nitroxynil),클로술론(Clorsulon을삭제한다.
제7.8.8.3중8.3.70∼8.3.120을각각8.3.66∼8.3.116로한다.
제7.8.8.38.3.116(종전8.3.120)6)라.중“계란”을“달걀”로한다.
제7.9.9.16을다음과같이한다.
9.16우루시올
가.시험법의적용범위
옻나무를원료로사용한식품에적용한다.
나.분석원리
식품내에존재하는우루시올을아세토니트릴로추출한후dSPE
(dispersiveSPE)로정제하여액체크로마토그래프-질량분석기로분석한다.
다.장치
액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)
라.시약및시액
1)용매:액체크로마토그래프용또는이와동등한것
2)물:3차증류수또는이와동등한것
3)표준원액:우루시올표준품을메탄올에녹여1,000 μg/mL가되게한
다음-70°C에서차광보관한다.- 47 -성분명 CAS No. 분자식 화학구조
우루시올Ⅰ
(C15:0)492-89-7 C21H36O2
우루시올Ⅱ
(C15:1)35237-02-6 C21H34O2
우루시올Ⅲ
(C15:2)83258-37-1 C21H32O2
우루시올Ⅴ
(C15:3)83543-37-7 C21H30O2
라콜
(C17:0)5862-27-1C23H40O2
4)혼합표준용액:각표준원액을메탄올에적당한농도로희석하여검량선
작성을위한표준용액으로한다.조제한용액은물질의안정성문제로
-70°C에서30일동안차광보관및사용한다.
표1.우루시올표준품정보
5)추출용액(50mM아세트산암모늄(ammoniumacetate)버퍼(pH4.1)+
0.1MEDTA):500mL용량플라스크에아세트산암모늄1,927mg을
적당량의물에녹여표시선을맞추고(정용하고)pH가4정도되는지
확인한다.여기에EDTA14.6g을넣고충분히녹을때까지1시간초
음파처리한다.EDTA가완전히녹지않으므로상온에서보관하며상
층액만사용하고,필요하다면원심분리후사용한다.
- 48 -6)정제용시약(dSPE카트리지):QuEChERS정제용또는이와동등한
것
가)물추출물등액상검체:PSA(Primarysecondaryamine):C18:황산마
그네슘이1:1:6의비율(6.25mg:6.25mg:37.5mg)로혼합된시약
나)장류등고상검체:PSA:황산마그네슘이1:6(50mg:300mg)의비율
로혼합된시약
7)0.1%개미산(Formicacid)용액:1,000mL용량플라스크에개미산1
mL을넣고물로표시선까지채운다(정용한다).
8)기타시약:특급또는이와동등한것
마.시험용액의조제
1)추출
균질화된시료2g(된장의경우1g)을정밀히달아50mL원심분리관에
취하고추출용액5mL를가한후교반기(vortexmixer)로1분간혼합
한다.아세토니트릴5mL과염화나트륨1g을가하고,교반기로1분간
추출한다음,4℃,2,700G에서10분간원심분리한다.
2)정제
15mL원심분리관에정제용시약(dSPE카트리지)50mg(액상검체)또
는350mg(고상검체)을취하고분리된상층액전량을넣는다.교반기로
1분간혼합하고,4℃,2,700G에서10분간원심분리한뒤,상층액전량
을새로운15mL원심분리관에옮긴다.40°C수용액상에서질소건고한- 49 -후,메탄올1mL를가하고교반기로1분간혼합한후5분간초음파
처리하여용해시킨다.이액을4℃,13,500G에서3분간원심분리한후,
상층액을최종시험용액으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프측정조건
가)칼럼:C18(2.0×150mm,5μm)또는이와동등한것
나)칼럼온도:40°C
다)이동상
(1)이동상A:0.1%개미산용액
(2)이동상B:메탄올
(3)농도구배조건
시간 (분)이동상 A(%) 이동상 B(%)
0.0 20 80
1.0 20 80
3.0 0 100
10.0 0 100
10.5 20 80
15 20 80
라)유속:0.25mL/min
마)주입량:10μL
2)질량분석기측정조건
- 50 -가)Ionization:ESInegative-ionmode
나)Ionsourcetemperature:350℃
다)Ionsprayvoltage:-4.5kV
라)Curtaingas:6psi
마)Collisiongas(N2):10psi
바)Ionsourcegas1:10psi
사)Ionsourcegas2:20psi
표2.액체크로마토그래프-질량분석기분석을위한MRM조건
연
번성분명
(Compound)머무름시간
(분)분자량
(g/mol)선구이온
(Precursor
ion,m/ z)생성이온
(Product
ion,m/ z)충돌에너지
(Collision
Energy, eV)
1UrushiolⅠ 8.98 320.5 319.1122.2
136.1-48
-46
2UrushiolⅡ 8.41 318.5 317.1122.0
135.0-42
-56
3UrushiolⅢ 8.00 316.5 315.3122.0
135.2-44
-50
4UrushiolⅤ 7.65 314.5 313.3135.1
122.0-48
-44
5 Laccol 9.82 348.6 347.4121.9
135.0-52
-60
※밑줄표시되어있는것은정량이온이며그외이온들은정성이온임
※각생성이온(Production)에대한질량분석기의기기조건은사용기기의
최적값으로변경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이온도적용- 51 -이가능함
3)검량선작성
우루시올의특성(산화반응에따른폴리머형성등)을고려하여다음의
Matrix-matchedstandard(MMS)조제법에따라처리한혼합표준용액
을농도별로취하여액체크로마토그래프-질량분석기에주입한다.얻어진크
로마토그램상의정량이온의각피크높이또는면적을구하여검량선
(Matrix-matchedcalibrationcurve)을작성한다.
가)Matrix-matchedstandard(MMS)조제법
음성검체(Blanksample)2g(된장의경우1g)을정밀히달아50mL원
심분리관에취하고추출용액5mL를가한후교반기(vortexmixer)로
1분간혼합한다.아세토니트릴5mL와염화나트륨1g을첨가하고,교
반기로1분간추출한다음,4℃,2,700G에서10분간원심분리한다.15
mL원심분리관에정제용시약(dSPE카트리지)50mg(액상검체)또는
350mg(고상검체)을취하고분리된상층액전량을넣는다.교반기로1분
간혼합하고,4℃,2,700G에서10분간원심분리한뒤,상층액전량을
새로운15mL원심분리관에옮긴다.각검량선농도[표3]에맞는혼합
표준용액0.2mL(된장의경우0.1mL)을가하고,40°C수용액상에서질
소건고한다.메탄올1mL을가하고교반기로1분간혼합한후5분간
초음파처리하여용해시킨다.이액을4℃,13,500G에서3분간원심분
리한후,상층액을최종표준용액으로한다.
- 52 -표3.Matrix-matchedstandard조제에사용한표준용액농도및부피
검량선농도 혼합표준용액 농도 첨가부피
10ng/mL 100 ng/mL
0.2mL
(된장의경우
0.1mL)20ng/mL 200 ng/mL
30ng/mL 300 ng/mL
40ng/mL 400 ng/mL
50ng/mL 500 ng/mL
4)혼합표준용액의크로마토그램
그림1.액체크로마토그래프-질량분석기에서표준용액의크로마토그램
5)정량한계는우루시올Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅴ,라콜각각에대하여10μg/kg을적용
한다.
사.정성시험- 53 -목적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열
구조
유전자VCO-01981-5
(85bp)VCO-01981-5
primerF5'-CCACTGAACGTCACCAAGAAGA-3'
VCO-01981-5
primerR5'-GCCGCTACTCGAGGGATTTA-3'우루시올의 함량 (μg/kg)=CxD위의조건으로얻어진표준용액크로마토그램상의피크머무름시간과
특성이온으로시험용액의우루시올을확인한다.
아.정량시험
정성시험과동일한조건에서얻어진시험용액크로마토그램상의피크
머무름시간과특성이온이표준용액과일치할때정량이온에대한피크
높이또는면적을검량선에대입하여정량한다.단,이때우루시올함량
은우루시올Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅴ,라콜의합으로한다.
1)계산
C:검량선에서구한우루시올의함량(μg/kg)
D:희석배수
제7.10.10.110.1.5다.2)표1.중*를다음과같이신설한다.
*후대교배종은후대교배종을구성하는이벤트의프라이머/프로브를사용
하여검사한다.
제7.10.10.110.1.5다.2)표2.중다음을신설한다.
- 54 -목적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열
VCO-01981-5
(85bp)VCO-01981-5
primerF5'-CCACTGAACGTCACCAAGAAGA-3'
VCO-01981-5
primerR5'-GCCGCTACTCGAGGGATTTA-3'
VCO-01981-5
probe5'-FAM-CAGTACTCAAACACTGAT
AG-MGB-3'
*후대교배종은후대교배종을구성하는이벤트의프라이머/프로브를사용
하여검사한다.
제7.10.10.110.1.5라.①중“MZHG0JG(이상옥수수)”를“MZHG0JG,
VCO01981-5(이상옥수수)”로한다.
제7.10.10.110.1.5라.②중“MON87403(이상옥수수)”를“MON87403,
VCO01981-5(이상옥수수)”로한다.
제7.10.10.110.1.5라.③중“MON87403(이상옥수수)”를“MON87403,
VCO01981-5(이상옥수수)”로한다.
제7.10.10.110.1.5라.④중“MON87403(이상옥수수)”를“MON87403,
VCO01981-5(이상옥수수)”로한다.
제7.10.10.110.1.11을다음과같이한다.
10.1.11유전자변형면화- 55 -면화씨(cottonseed)또는그가공식품에대하여실시간PCR장치를사용
하여유전자변형면화를검출하기위한정성및정량분석법이다.
가.DNA의추출
10.1.3DNA의추출․정제법에따라2회반복추출하여얻은DNA용
액을사용한다.
나.시약및시액
1)프라이머와프로브
유전자변형면화분석에사용되는프라이머와프로브는표9와같으
며,이와동등한결과를얻을수있는프라이머와프로브를사용할수
도있다.
2)실시간PCR용반응액의조제
표9의프라이머와프로브를사용하면서PCR반응액의총량을25μL
로할경우조성은표10과같다.다만,PCR반응액조성은프라이머
와프로브또는실시간PCR기기에따라다를수있으므로시약이나
기기의사용매뉴얼을참고하여적용한다.각PCR반응시에는음성
대조군으로서주형DNA대신멸균증류수를사용한것(NTC,no
templatecontrol)을,양성대조군으로비유전자변형(non-GMO)DNA
를함유한것(동일작물로서0%(w/w)표준시료에서추출한DNA
등)과검출하고자하는재조합DNA를함유한것(동일작물로서분
석대상GMO를포함하는표준시료에서추출한DNA등)을시료와
함께PCR시험을한다.PCR에서생길수있는오차를감소시키기위
- 56 -목적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열 농도(nM)
내재성
유전자면화
(76bp)acp1primer1-5'5'-ATTGTGATGGGACTTGAGGAAGA-3'150
acp1primer2-3'5'-CTTGAACAGTTGTGATGGATTGTG-3'150
acp1probe-Taq5'-FAM-ATTGTCCTCTTCCACCGTGATTCC
GAA-TAMRA-3'50
구조
유전자5311)
(72bp)531primer1-5'5'-TCCCATTCGAGTTTCTCACGT-3' 150
531primer2-3'5'-AACCAATGCCACCCCACTGA-3' 150
531probe-Taq5'-FAM-TTGTCCCTCCACTTCTTC
TC-TAMRA-3'50
1445
(87bp)1445primer1-5'5'-GGAGTAAGACGATTCAGATCAAAC
AC-3'150
1445primer2-3'5'-ATCGACCTGCAGCCCAAGCT-3' 150
1445probe-Taq5'-FAM-ATCAGATTGTCGTTTCCCGCCTTC
AGTTT-TAMRA-3'50
15985
(82bp)15985primer1-5'5'-GTTACTAGATCGGGGATATCC-3' 150
15985primer2-3'5'-AAGGTTGCTAAATGGATGGGA-3'150
15985probe-Taq5'-FAM-CCGCTCTAGAACTAGTGGATCTGC
ACTGAA-TAMRA-3'50
MON88913
(94bp)MON88913primer1-5'5'-GGCTTTGGCTACCTTAAGAGAGTC-3'500
MON88913primer2-3'5'-CAAATTACCCATTAAGTAGCCAAATTA
C-3'500
MON88913probe-Taq5'-FAM-AACTATCAGTGTTTGACTACAT-
MGBNFQ2)-3'100
LLCotton25
(79bp)KVM1561-5'5'-CAAGGAACTATTCAACTGAG-3' 400
KVM1552-3'5'-CAGATTTTTGTGGGATTGGAATTC-3'400
TM018probe-Taq5'-FAM-CTTAACAGTACTCGGCCGTCGACC
GC-TAMRA-3'200
281/3006
(111bp)281f1-5' 5'-CTCATTGCTGATCCATGTAGATTTC-3'350
281r2-3' 5'-GGACAATGCTGGGCTTTGTG-3' 450
281s2probe-Taq5'-FAM-TTGGGTTAATAAAGTCAGATT
AGAGGGAGACAA-TAMRA-3'175
GHB614
(120bp)SHA007-5‘ 5'-CAAATACACTTGGAACGACTTCGT-3'400
SHA008-3' 5'-GCAGGCATGCAAGCTTTTAAA-3' 400
TM072-Taq5'-FAM-CTCCATGGCGATCGCTACGTTCTA
GAATT-TAMRA-3'200
T304-40
(79bp)T304-40-5' 5'-AGCGCGCAAACTAGGATAAATT-3'400
T304-40-3' 5'-CCTAGATCTTGGGATAACTTGAAA
AGA-3'400
T304-40-Taq5'-FAM-TCGCGCGCGGTGTCATCTATC
TC-TAMRA-3'200해하나의DNA시료액에대하여3반복시험(3웰(well)분량의PCR
반응액을잉여분을고려하여한번에조제하여동일플레이트에서시
험)을실시하여측정한다.
표9.유전자변형면화의PCR검사에사용되는프라이머와프로브- 57 -목적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열 농도(nM)
GHB119
(90bp)GHB119-5' 5'-CCAGTACTAAAATCCAGATCATGCA-3'400
GHB119-3' 5'-GAAATTGCGTGACTCAAATTCC-3'400
GHB119-Taq5'-FAM-CCTGCAGGTCGACGGCCGAGT
AC-TAMRA-3'200
COT102
(101bp)COT102_3_89F5'-TCTCCGCTCATGATCAGATTGTC-3'600
COT102_3_181R5'-CAGTAACAGTACAGTCGGTGTAGGG-3'600
COT102_3_115T5'-FAM-TCCCGCCTTCAGTTTAAACTATCA
GTGTTTAAT-TAMRA-3'150
MON88701
(84bp)MON88701primer15'-CATACTCATTGCTGATCCATGTAGA-3'300
MON88701primer25'-AGTGTTAAACAAGTTATGTTCTAG
AGC-3'300
MON88701probe5'-FAM-TTCCCGGACATGAAGCCTTAATTC
AAT-TAMRA-3'250
DAS81910-
7
(120bp)1706-f2 5'-AAGCTTAGGTGATTTCGATGATG-3'300
1706-r3
5'-GACCTCAATTGCGAGCTTTC-3' 300
1706-p3 5'-FAM-CACACCAAAAGTTAGGCC
CG-TAMRA-3'150
*후대교배종은후대교배종을구성하는이벤트의프라이머/프로브를사용하여검사한다.
1)면화531검출용PCR검사결과양성인경우별도로15985PCR검사결과를확인하여15985
양성인경우“15985검출”로판정하고15985음성인경우“531검출”로판정한다.
2)MGBNFQ:Minorgroovebindingnon-fluorescentquencher
표10.유전자변형면화검사용실시간PCR반응액조성
성 분 최종 농도(well) 1회 분량(μL) 
Universal Master Mix (2 X)1)1 X 12.5
프라이머 (각 10 μM) 150 nM ~ 600 nM 0.375~1.5
Probe (10 μM)  50 nM ~ 350 nM 0.125~0.875
주형 DNA (20 ng/μL) 100 ng 5
멸균증류수 반응 총액이 25 μL가 되도록 첨가
전체량 25             
1)Universal Master Mix 또는 이와 동등한 시약을 사용할 수 있다. 
다.시험조작(실시간PCR장치에의한정성분석)
실시간PCR은기기에플레이트나캐필러리를장착하고분석프로그램
- 58 -온도 시간 결과수집 cycle 수
전 반응
(Pre-PCR incubation)50℃ 2분 No 1 cycle
초기 변성
(Initial denaturation)95℃ 10분 No 1 cycle
증폭
(Amplification)95℃ 15초 No
45 cycles
55℃ 1분 Yes을작동시켜시료의정보를입력한후장치의덮개온도(cover
temperature)가105℃정도인것이확인되면반응을개시한다.96웰
(well)플레이트방식의PCR반응조건은표11,12와같으며,PCR반
응종료후실험결과를해석한다.PCR반응조건은사용하는실시간
PCR기기에따라최적조건으로변형하여사용할수있으며,기기제
조사에별도문의하여적용한다.
표11.유전자변형면화검사에사용되는실시간-PCR반응조건(531제외)
온도 시간 결과수집 cycle 수
전 반응
(Pre-PCR incubation)50℃ 2분 No 1 cycle
초기 변성
(Initial denaturation)95℃ 10분 No 1 cycle
증폭
(Amplification)95℃ 15초 No
45 cycles
60℃ 1분 Yes
표12.유전자변형면화531검사에사용되는실시간-PCR반응조건
라.정성분석결과의판정
PCR결과를해석하기위하여다음과같은절차를수행한다.㉮PCR이
완료되면PCR반응횟수(PCRcycle)에대해형광시그널의증가량(Δ- 59 -Rn)을표시한유전자증폭곡선에서3cycles부터15cycles까지를
baseline의범위로지정하며,㉯분석하고자하는유전자의양성대조군
의증폭곡선이지수함수적으로 증가하는부분의가운데에threshold
line(Th.line)이위치하도록하고(이때선택된Th.line은NTC에서나
타날수있는비특이적증폭곡선과교차하지않아야함),㉰분석하고
자하는시료의Ct값(설정된Th.line과시료의증폭곡선과의교차점
에서구해진PCRcycle)을구한다.㉱다른유전자의양성대조군증폭
곡선들에대해서도각각㉯-㉰항의작업을반복하여Ct값을구한다.
이때NTC의경우모든웰(well)에서Ct값이45여야한다.추출DNA
시료액별로3반복시험한결과,2개이상의웰(well)에서Ct값이45
미만이면서지수함수적인증폭이확인되는경우해당DNA시료액이
양성이라고판정한다.
하나의시료에대한2회반복추출DNA의PCR결과,하나이상의추
출DNA에서내재성유전자와재조합유전자가양성인경우‘유전자변
형면화검출’로판정한다.2회반복추출DNA에서모두내재성유전
자는양성이지만모든재조합유전자가음성인경우‘불검출’로판정한
다.다만,2회반복추출DNA에서모두내재성유전자가음성인경우
에는DNA추출과정부터다시반복시험한다.반복시험에서도동일한
결과인경우‘검사불능’으로판정한다(표13).
표13.결과판정의흐름도(예시)
- 60 -사례 추출 DNA결과 분석
GMO 여부 판정
내재성유전자 재조합유전자
사례 1추출 1 + +
검출
추출 2 + +
사례 2추출 1 + +
검출
추출 2 + -
사례 3추출 1 + +
검출
추출 2 - /
사례 4추출 1 + -
불검출
추출 2 + -
사례 5추출 1 + -
불검출
추출 2 - /
사례 6추출 1 - /
검사 불능*
추출 2 - /
+:목적유전자의증폭이확인됨
-:목적유전자의증폭이확인되지않음
/:실험이불필요함
*사례6의경우DNA추출1회를추가로실시하여PCR을한다.
마.실시간PCR장치에의한정량분석및분석결과의판정
유전자변형면화의혼입판별을위한정량분석및분석결과의판정은
10.1.6정량시험에따른다.
제7.10.10.110.1.12를다음과같이한다.
10.1.12유전자변형카놀라
카놀라또는그가공식품에대하여실시간PCR장치를사용하여유전
자변형카놀라를검출하기위한정성및정량분석법이다.
가.DNA의추출
10.1.3DNA의추출․정제법에따라2회반복추출하여얻은DNA용
액을사용한다.- 61 -목적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열농도
(nM)
내재성
유전자카놀라
(101bp)BncruA1-5'5'-GGCCAGGGTTTCCGTGAT-3‘ 200
BncruA2-3'5'-CCGTCGTTGTAGAACCATTGG-3‘ 200
BncruA-Taq5'-FAM-AGTCCTTATGTGCTCCACTTTCTGGTG
CA-TAMRA-3‘200
구조
유전자T45
(123bp)KVM172-5'5'-CAATGGACACATGAATTATGC-3‘ 400
MDB599-3'5'-GACTCTGTATGAACTGTTCGC-3‘ 400
TM026probe-Taq5'-FAM-TAGAGGACCTAACAGAACTCGCCG
T-TAMRA-3‘200
GT73
(108bp)GT73primer1-5'5'-CCATATTGACCATCATACTCATTGCT-3‘ 150
GT73primer2-3'5'-GCTTATACGAAGGCAAGAAAAGGA-3‘ 150
GT73pribe-Taq5'-FAM-TTCCCGGACATGAAGATCATCCTC
CTT-TAMRA-3‘50
Ms8
(130bp)KVM085-5'5'-GTTAGAAAAAGTAAACAATTAATATAGCCG
G-3‘400나.시약및시액
1)프라이머와프로브(probe)
유전자변형카놀라검출에사용되는프라이머와프로브(probe)는표
14와같으며,이와동등한결과를얻을수있는프라이머와프로브
(probe)를사용할수도있다.
2)실시간PCR용반응액의조제
표14의프라이머와프로브(probe)를사용하면서PCR반응액의총
량을25μL로할경우PCR반응액조성은표15와같다.다만,PCR
반응액조성은프라이머와프로브(probe)또는실시간PCR기기에따
라다를수있으므로시약이나기기의사용매뉴얼을참고하여적용한
다.각PCR반응시에사용하여야하는음성대조군과양성대조군등
그외사항은10.1.11유전자변형면화나.시약및시액2)실시간
PCR용반응액의조제에따른다.
표14.유전자변형카놀라의PCR검사에사용되는프라이머와프로브
- 62 -목적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열농도
(nM)
HCA048-3'5'-GGAGGGTGTTTTTGGTTATC-3‘ 400
TM011probe-Taq5'-FAM-AATATAATCGACGGATCCCCGGGAATT
C-TAMRA-3‘200
Rf3
(139bp)DPA165-5'5'-CATAAAGGAAGATGGAGACTTGAG-3‘ 400
KVM084-3'5'-AGCATTTAGCATGTACCATCAGACA-3‘ 400
TM010probe-Taq5'-FAM-CGCACGCTTATCGACCATAAGCCC
A-TAMRA-3‘200
MON88302
(101bp)88302QF 5'-TCCTTGAACCTTATTTTATAGTGCACA-3‘ 450
88302QR 5'-TCAGATTGTCGTTTCCCGCCTTCA-3‘ 450
88302QP 5'-FAM-TAGTCATCATGTTGTACCACTTCAAAC
ACT-TAMRA-3‘200
DP-073496-4
(84bp)09-0-2824 5'-GTTCTTCTCTTCATAGCTCATTACAGTTTT-3‘600
09-0-2825 5'-CAAACCTCCATAGAGTTCAACATCTTAA-3‘600
09-QP83probe5'-FAM-TTAGTTAGATCAGGATATTCTTG-MGB*-3‘250
*후대교배종은후대교배종을구성하는이벤트의프라이머/프로브를사용하여검사한다.
표15.유전자변형카놀라검사용실시간PCR반응액조성
성분 최종농도(well) 1회분량(μL)
UniversalMasterMix(2X)1)1X 12.5
프라이머(각10μM) 150nM~600nM 0.375~1.5
Probe(10μM) 50nM~250nM 0.125~0.625
주형DNA(40ng/μL) 200ng 5
멸균증류수 반응총액이25μL가되도록첨가
전체량 25
1)UniversalMasterMix또는이와동등한시약을사용할수있다.
다.시험조작(실시간PCR장치에의한정성및정량분석)
카놀라PCR반응조건은표16과같으며,그외사항은10.1.11유전자
변형면화다.시험조작(실시간PCR장치에의한정성분석)및10.1.6
정량시험에따른다.
표16.유전자변형카놀라검사에사용되는실시간PCR반응조건- 63 -온도시간결과수집cycle수
전반응
(Pre-PCRincubation)50℃2분No1cycle
초기변성
(Initialdenaturation)95℃10분No1cycle
증폭
(Amplification)95℃15초No
45cycles
60℃1분Yes
라.분석결과의판정
유전자변형카놀라에대한분석결과의판정은10.1.11유전자변형면
화라.정성분석결과의판정및10.1.6정량시험사.결과의판정에따른
다.
제7.10.10.110.1.13을다음과같이한다.
10.1.13유전자변형사탕무,알팔파(alfalfa)
사탕무,알팔파또는그가공식품에대하여실시간PCR장치를사용하
여유전자변형사탕무와알팔파를검출하기위한정성및정량분석법이
다.
가.DNA의추출
10.1.3DNA의추출․정제법에따르며,알팔파의경우10.1.3.3알팔파
DNA추출법에따라2회반복추출하여얻은DNA용액을사용한다.
나.시약및시액
1)프라이머와프로브
유전자변형사탕무와알팔파검출에사용되는프라이머와프로브는
표17과같으며,이와동등한결과를얻을수있는프라이머와프로브
- 64 -목
적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열농도
(nM)
내
재
성
유
전
자사탕무
(121bp)GruA3F-5'5'-GACCTCCATATTACTGAAAGGAAG-3' 150
GruA3R-3'5'-GAGTAATTGCTCCATCCTGTTCA-3' 150
GruD1probe-Taq5'-FAM-CTACGAAGTTTAAAGTATGTGCCG
CTC-TAMRA-3'100
알팔파
(127bp)pef1-85F-5'5'-TACGTCCAATCCCAACGCC-3' 450
pef1-211R-3'5'-GGCCTTTTGCTGGTAATCTACAAAC-3' 450
pef1-110P-Taq5'-FAM-ACCGTGACTGCAGCATCTCTGGCA-TAMRA-3'210
구
조
유
전
자사탕무H7-1
(110bp)H7PLT1-5'5'-TGGGATCTGGGTGGCTCTAACT-3' 400
ZRH7-R2-3'5'-AATGCTGCTAAATCCTGAG-3' 400
ZRH7-probe-Taq5'-FAM-AAGGCGGGAAACGACAATCT-TAMRA-3'200
알팔파J101
(121bp)J101-F12-5'5'-CTGATCTTGTGTCATAGTTTCAAACACTG-3'450
J101-R11-3'5'-GCTTTGGACTGAGAATTAGCTTCCA-3' 600
J101-P11-Taq5'-FAM-AACTGAAGGCGGGAAACGACAATC
TG-TAMRA-3'200
알팔파J163
(105bp)J163-F1-5'5'-GAGGCTTTGGACTGAGAATTAGCTT-3' 450
J163-R3-3'5'-CAAGGTCATCCAAACTGAAGTGTTC-3' 450
J163-P1-Taq5'-FAM-CACTCGAGCAGGACCTGCAGAAGC
TT-TAMRA-3'180
알팔파KK179
(88bp)KK179primer15'-GAAGCTAGCTTGATGGGGATCAGA-3' 450
KK179primer25'-AAAGTAACTAGGCTAAAGTAAGATATCGAA
GA-3'450
KK179probe5'-FAM-AAGAGGTTTTGAAGGCGGGAAACG
ACA-TAMRA-3'100를사용할수도있다.
2)실시간PCR용반응액의조제
표17의프라이머와프로브를사용하면서PCR반응액의총량을25
μL로할경우PCR반응액조성은표18,19와같다.다만,PCR반응
액조성은프라이머와프로브또는실시간PCR기기에따라다를수
있으므로시약이나기기의사용매뉴얼을참고하여적용한다.각PCR
반응시에사용하여야하는음성대조군과양성대조군등그외사항은
10.1.11유전자변형면화나.시약및시액2)실시간PCR용반응액의
조제에따른다.
표17.유전자변형사탕무,알팔파의PCR검사에사용되는프라이머와프로브
*후대교배종은후대교배종을구성하는이벤트의프라이머/프로브를사용하여검사한다.- 65 -표18.유전자변형사탕무검사용실시간PCR반응액조성
성분 최종농도(well) 1회분량(μL)
UniversalMasterMix(2X)1)1X 12.5
프라이머(각10μM) 150nM~400nM 0.375~1
Probe(10μM) 100nM~200nM 0.25~0.5
주형DNA(10ng/μL) 50ng 5
멸균증류수 반응총액이25μL가되도록첨가
전체량 25
1)Universal Master Mix 또는 이와 동등한 시약을 사용할 수 있다. 
표19.유전자변형알팔파검사용실시간PCR반응액조성
성분 최종농도(well) 1회분량(μL)
UniversalMasterMix(2X)1)1X 12.5
프라이머(각10μM) 450nM~600nM 1.125~1.5
Probe(10μM) 100nM~210nM 0.25~0.525
주형DNA(20ng/μL) 100ng 5
멸균증류수 반응총액이25μL가되도록첨가
전체량 25
1)UniversalMasterMix또는이와동등한시약을사용할수있다.
다.시험조작(실시간PCR장치에의한정성및정량분석)
사탕무의PCR반응조건은표20과같고알팔파의PCR반응조건은표
21과같으며,그외사항은10.1.11유전자변형면화다.시험조작(실시
간PCR장치에의한정성분석)및10.1.6정량시험에따른다.
표20.유전자변형사탕무검사에사용되는실시간PCR반응조건
- 66 -온도시간결과수집cycle수
전반응
(Pre-PCRincubation)50℃2분No1cycle
초기변성
(Initialdenaturation)95℃10분No1cycle
증폭
(Amplification)95℃15초No
50cycles
60℃1분Yes
온도시간결과수집cycle수
전반응
(Pre-PCRincubation)50℃2분 No1cycle
초기변성
(Initialdenaturation)95℃10분No1cycle
증폭
(Amplification)95℃15초No
45cycles
60℃1분Yes표21.유전자변형알팔파검사에사용되는실시간PCR반응조건
라.분석결과의판정
유전자변형사탕무및알팔파에대한분석결과의판정은10.1.11유전
자변형면화라.정성분석결과의판정및10.1.6정량시험사.결과의판
정에따른다.다만,사탕무의경우PCRcycle수가50이므로모든NTC
의Ct값이50이어야하며,추출DNA시료액별로3반복시험한결
과,2개이상의웰(well)에서Ct값이50미만이면서지수함수적인증폭
이확인되는경우해당DNA시료액이양성이라고판정한다.
제7.10.10.110.1.14를다음과같이한다.
10.1.14미승인유전자변형밀
밀또는그가공식품에대하여PCR또는실시간PCR장치를사용하여- 67 -제초제내성미승인유전자변형밀을검출하기위한정성분석방법이다 .
가.DNA의추출
10.1.3DNA의추출․정제법에따라2회반복추출하여얻은DNA용
액을사용한다.
나.시약및시액
1)프라이머와프로브(probe)
미승인유전자변형밀검출에사용하는프라이머와프로브(probe)는
표22와같으며,이와동등한결과를얻을수있는프라이머와프로브
(probe)를사용할수도있다.
2)반응액의조제
표22의프라이머와프로브(probe)를사용하면서PCR반응액의총
량을25μL로할경우PCR반응액조성은표23〜25와같다.다만,
PCR반응액조성은프라이머와프로브(probe)또는PCR기기에따라
다를수있으므로시약이나기기의사용매뉴얼을참고하여적용한다.
목
적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열 농도(nM)
내
재
성
유
전
자밀
(102bp)WACC-KF
WACC-KR5'-GGAGGCATGCTTCGCTGTCT-3'
5'-CTGCTGCCATTCCATTGTTC-3'400
400
(94bp)WACC-Rf
WACC-KR
WACC-p5'-GCTTCGCTGTCTAAGGTTGT-3'
5'-CTGCTGCCATTCCATTGTTC-3'
5'-FAM-CGGCAAAACACCAATTCACA-TAMRA-3'500
500
300
구
조
유
전
자M71800
(156bp)M71800-KF
M71800-KR5'-CTCCGATGAAGTGTGAGTAG-3'
5'-CCCCATTTGGACGTGAATGT-3'400
400
(90bp)M71800-Rf
M71800-Rr
M71800-p5'-CTTCTCTCTCTTTGAATCTCAATAC-3'
5'-CCATTTGGACGTGAATGTAGACAC-3'
5'-FAM-CCCTCTCTAATTCGGAAATC-TAMRA-3'500
500
500표22.미승인유전자변형밀검사용프라이머와프로브(probe)
- 68 -성 분 최종 농도(well) 1회 분량(μL) 
Gold Taq polymerase(5 U/μL) 0.5U 0.1
PCR Buffer(10X) 1X 2.5
MgCl2(25mM) 1.5 mM 1.5
dNTPs(2.5mM) 200 μM 2.0
프라이머 (각 25 μM) 각 400 nM 각 0.4
주형 DNA(20 ng/μL)    50 ng 2.5
멸균증류수 반응 총액이 25 μL가 되도록 첨가 15.6
전체량 25 표 23. 밀 내재유 전자 및 미승인 유전자변형 밀 검사용 PCR 반응액 조성 
성 분 최종 농도(well) 1회 분량(μL) 
Universal Master Mix(2 X) 1 X 12.5
프라이머 (각 25 μM) 각 500 nM 각 0.5
프로브 (10 μM)    300 nM   0.75
주형 DNA(20 ng/μL)    50 ng 2.5
멸균증류수 반응 총액이 25 μL가 되도록 첨가 8.25
전체량 25표 24. 밀 내재유전자 검사용 실시간 PCR 반응액 조성 
성 분 최종 농도(well) 1회 분량(μL) 
Universal Master Mix(2 X) 1 X 12.5
프라이머 (각 25 μM) 각 500 nM 각 0.5
프로브 (10 μM)    500 nM 1.25
주형 DNA(20 ng/μL)    50 ng 2.5
멸균증류수 반응 총액이 25 μL가 되도록 첨가 7.75
전체량 25             표 25. 미승인 유전자변형 밀 검사용 실시간 PCR 반응액 조성 
다.시험조작
미승인유전자변형밀검사를위한PCR반응조건은표26∼27과같다.- 69 -온도 시간 cycle 수
 초기변성
(Initial denaturation)95℃ 5분 1 cycle
 변성(denaturation)
 결합(annealing)
 신장(extension)95℃
59℃
72℃30초
30초
30초40 cycles
 최종신장
(elongation)72℃ 7분 1 cycle표 26. 미승인  유전자변형 밀 검사용 PCR 반응 조건
온도 시간 결과수집 cycle 수
전 반응
(Pre-PCR incubation)50℃ 2분 No 1 cycle
초기 변성
(Initial denaturation)95℃ 10분 No 1 cycle
증폭
(Amplification)95℃ 15초 No
45 cycles
59℃ 1분 Yes표 27. 미승인 유전자변형 밀 검사용 실시간 PCR 반응 조건
라.분석결과의판정
1)PCR에따른결과의판정
10.1.5정성시험마.전기영동에따른결과의판정에따라아가로스
겔(agarosegel)또는폴리아크릴아마이드겔(polyacrylamidegel)을이
용한전기영동등으로PCR증폭결과를확인하며,바.분석결과의판
정및처리에따라결과를판정한다.
2회반복추출DNA에대한PCR결과,하나이상의추출DNA에서
확인시험에의해내재성유전자와도입된재조합유전자특이증폭산물
이모두확인된경우‘미승인유전자변형밀검출’로판정하고,2회반
복추출DNA에대하여내재성유전자의증폭산물은모두확인되나도
- 70 -입유전자특이증폭산물이확인되지않은경우에는‘불검출’로판정한
다.
다만,2회반복추출DNA에서모두내재성유전자의증폭산물이확인
되지않은경우에는DNA추출과정부터다시반복시험하고,반복시
험후에도동일하게내재성유전자의 증폭산물이확인되지않는경우
‘검사불능’으로판정한다.
2)실시간PCR에따른결과의판정
10.1.11유전자재조합면화라.분석결과의판정에따르며,추출
DNA시료액별로3반복시험한결과,2개이상의웰(well)에서Ct값
이45미만이면서지수함수적인증폭이확인되는경우해당DNA시
료액이양성이라고판정한다.
[별표1]1.중A가014300을삭제한다.
[별표1]1.중A가043100을다음과같이한다.
A가043100단삼 Dan-shen Salvia miltiorrhiza Bunge 씨앗
[별표1]1.중A가045200을다음과같이한다.
A가045200 대두콩,백태 ,청태 ,노란콩 ,
검정콩 ,흑두 (黑豆 ),
서리태 ,Soybean,
Black BeansGlycine m ax (L.) Merr. /Dolichos soja
L./Glycine hispida (Moench) Maxim.잎,씨앗- 71 -B다003200 Brevibacterium linens Brevibacterium linens유가공품 제조에 한
함
B다003300Corynebacterium
am m oniagenes- Corynebacterium amm oniagenes유가공품 제조에 한
함
B다003400 Dekkera bruxellensis - Dekkera bruxellensis 주류제조에한함
B다003500Gluconacetobacter
hanseni- Gluconacetobacter hanseni 식초제조에한함B다003100 Zymom onas mobilisAchromobacter anaerobium,
Pseudomonas lindneri,
Saccharomonas lindneri,
Thermobacterium mobile,
Zymomonas anaerobiaZymomonas mobilis주류및
레반 (Levan) 제조에
한함[별표1]2.중A나002050을다음과같이신설한다.
A나002050 가시이마쏙 Chinese mud shrimpAustinogebia wuhsienweni
/ Upogebia wuhsienweni-
[별표1]2.중A나011350을다음과같이신설한다.
A나011350 곳체다슬기 Martens Semisulcospira gottschei -
[별표1]2.중A나072150을다음과같이신설한다.
A나072150 지중해담치 - Mytilus galloprovincialis -
[별표2]3.중B다003100을다음과같이한다.
[별표2]3.중B다003200∼B다003800을다음과같이신설한다.
- 72 -B다003600Lachancea
therm otolerans- Lachancea thermotolerans 주류제조에한함
B다003700Lactobacillus
corynifo rmis subsp.
corynifo rmis-Lactobacillus coryniform is subsp.
coryniform is유가공품 제조에
한함
B다003800 Leuconostoc carnosum - Leuconostoc carnosum발효육류 제조에
한함
[별표4](46)메틸브로마이드(Methylbromide)중다음항목을신설한다.
인과류 20
[별표5](10)디히드로스트렙토마이신/스트렙토마이신(Dihydrostreptomycin
/Streptomycin)중“닭근육0.6”을,“가금근육0.6”으로하고,“닭간0.6”
을“가금간0.6”으로하며,“닭지방0.6”을“가금지방0.6”으로하고,“닭
신장1.0”을“가금신장1.0”으로하며,다음항목을신설한다.
염소근육 0.5
염소간 0.6
염소지방 0.6
염소신장 1.0
말근육 0.5
말간 0.6
말지방 0.6
말신장 1.0- 73 -[별표5](11)레바미졸(Levamisole)중다음항목을신설한다.
유 0.01
[별표5](16)벤질페니실린(Benzylpenicillin,PenicillinG,Procaine
benzylpenicillin)중다음항목을신설한다.
양근육 0.05
양간 0.05
양신장 0.05
염소근육 0.05
염소간 0.05
염소신장 0.05
말근육 0.05
말간 0.05
말신장 0.05
[별표5](33)이버멕틴(Ivermectin)중“소간0.1”을“소간0.8”로하고,“소
지방0.04”를“소지방0.4”로하며다음항목을신설한다.
소근육 0.03
소신장 0.1
염소근육 0.03
염소간 0.8
- 74 -염소지방 0.4
염소신장 0.1
말근육 0.03
말간 0.8
말지방 0.4
말신장 0.1
[별표5](38)클로산텔(Closantel)중다음항목을신설한다.
돼지근육 2.0
돼지간 2.0
돼지지방 2.0
돼지신장 5.0
유 0.05
[별표5](40)타일로신(Tylosin)중"◎잔류물의정의:Tylosin"을“◎잔
류물의정의:TylosinA"로하고,다음항목을신설한다.
양근육 0.1
양간 0.1
양지방 0.1
양신장 0.1
염소근육 0.1- 75 -염소간 0.1
염소지방 0.1
염소신장 0.1
[별표5](43)틸미코신(Tilmicosin)중다음항목을신설한다.
닭근육 0.15
닭간 2.4
닭지방/피부0.25
닭신장 0.6
[별표5](44)페반텔/펜벤다졸/옥스펜다졸(Febantel/Fenbendazole/Oxfendazole)
중다음항목을신설한다.
사슴근육 0.1
사슴간 0.5
사슴지방 0.1
사슴신장 0.1
닭근육 0.05
닭간 0.5
닭지방 0.05
닭신장 0.05
알 1.3
- 76 -[별표5](54)노르플록사신∼(56)페플록사신을삭제한다.
[별표5](57)∼(104)를각각(54)∼(101)로한다.
[별표5](105)프라지콴텔(Praziquantel)을(102)프라지콴텔(Praziquantel)로
하고,그내용중“조피볼락0.02”를“어류0.02”로하며,다음항목을
신설한다.
말근육 0.3
말간 4
말지방 0.2
말신장 4
[별표5](106)∼(115)를각각(103)∼(112)로한다.
[별표5](116)클로술론(Clorsulon)을(113)클로술론(Clorsulon)으로하고,
그내용중다음항목을신설한다.
양근육 0.035
양간 0.1
양신장 0.2
염소근육 0.035- 77 -염소간 0.1
염소신장 0.2
유 0.02
[별표5](117)∼(194)를각각(114)∼(191)로한다.
[별표6](19)중“계란”을“달걀로한다.
[별표6](59)중“계란”을“달걀로한다.
[별표6](68)중“계란”을“달걀로한다.
[별표6](80)중“계란”을“달걀로한다.
부칙
제1조(시행일)①이고시는고시한날부터시행한다.
②제1조제1항에도불구하고다음각호의구분에따른개정규정은다음
각호에서정한날부터시행한다.
1.고시후1년이경과한날
가.제2.3.8)①의개정규정
나.[별표5]중(54)노르플록사신,(55)오플록사신,(56)페플록사
- 78 -신의개정규정
2.고시후6개월이경과한날
가.[별표5]중(10)디히드로스트렙토마이신/스트렙토마이신,(11)레
바미졸,(16)벤질페니실린,(33)이버멕틴,(38)클로산텔,(40)타
일로신,(43)틸미코신,(44)페반텔/펜벤다졸/옥스펜다졸,(105)
프라지콴텔,(116)클로술론의개정규정
제2조(적용례)이고시는이고시시행이후최초로제조·가공또는수입
한식품(선적일기준)부터적용한다.
제3조(경과조치)이고시는이고시시행당시제조․가공․판매또는수
입되어검사가진행중인사항에대하여는종전의규정에따른다.- 79 -현 행 개 정(안)
제1.총칙
1.(생략)제1.총칙
1.(현행과같음)
대분류 중분류 소분류 품   목
축
산
물- (생략 ) (생략)
- (생략 ) (생략)
-알류계란,오리알 ,
메추리알등
(생략)(생략)(생략 ) (생략)
(생략 ) (생략)
(생략 )(생략)
- (생략 ) (생략)
(생략)(생략) (생략)
(생략) (생략)2.기준및규격의적용
1)～8)(생략)
<신설>
9)～11)(생략)
3.(생략)
4.식품원료분류
1)(생략)
2)동물성원료
대분류 중분류 소분류 품   목
축
산
물- (현 행 과같 음) (현행과같음 )
- (현 행 과같 음) (현행과같음 )
-알류달걀,오리알 ,
메추리알등
(현행과
같음 )(현행
과
같음 )(현 행 과같 음) (현행과같음 )
(현 행 과같 음) (현행과같음 )
(현 행 과같 음)(현행과같음 )
- (현 행 과같 음) (현행과같음 )
(현행
과(현 행 과같 음) (현행과같음 )
(현 행 과같 음) (현행과같음 )2.기준및규격의적용
1)～8)(현행과같음)
9)이고시에서정하고있는“허
용외타르색소”란상기제1.2.
8)에서정한타르색소중「식
품첨가물의기준및규격」에
서해당식품유형에허용되지
않은타르색소를말한다.
10)～12)(현행9)～11)과같음)
3.(현행과같음)
4.식품원료분류
1)(현행과같음)
2)동물성원료
- 80 -현 행 개 정(안)
대분류 중분류 소분류 품   목
(생략) (생략)
(생략) (생략)
(생략)- (생략) (생략)
- - (생략)
대분류 중분류 소분류 품   목
같음 )(현 행 과같 음) (현행과같음 )
(현 행 과같 음) (현행과같음 )
(현행과
같음 )- (현 행 과같 음) (현행과같음 )
- - (현행과같음 )
제2.식품일반에 대한 공통기준 및규격
1.식품원료기준
1)원료등의구비요건
(1)～(15)(생략)
(16)생식용굴은「정착성수산
동식물생산해역의등급설정
기준」(해양수산부고시)에
따라청정해역의수질기준에
적합한해역에서생산된것
이거나자연정화*또는인공
정화**작업을통해청정해
역의기준에적합하도록처
리된것이어야한다.
(이하생략)
(17)～(23)(생략)제2.식품일반에 대한 공통기준 및규격
1.식품원료기준
1)원료등의구비요건
(1)～(15)(생략)
(16)---------「패류생산해
역수질의위생기준」(해양수
산부고시)에따라지정해역
수준의수질위생기준에----
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
--------------.
(이하현행과같음)
(17)～(23)(현행과같음)
2)식품원료판단기준
(1)∼(6)(생략)
(7)식품에제한적으로사용할2)식품원료판단기준
(1)∼(6)(현행과같음)
(7)식품에제한적으로사용할- 81 -현 행 개 정(안)
수있는원료
①(생략)
②(생략)
㉮‘식품에제한적으로사용할
수있는원료’로명시되어
있는동
식물등은가공전
원료의중량을기준으로원
료배합시50%미만(배합수
제외한다)사용하여야한
다.
㉯‘식품에제한적으로사용할
수있는원료’에속하는원
료를혼합할경우,원료의
가공전중량을기준으로
총량이제품의50%미만(배
합수는제외한다)이어야한
다.
<신설>
㉰다만,다류,음료수,주류및
향신료제조시에는제품의수있는원료
①(현행과같음)
②(현행과같음)
㉮식품제조시사용되는‘식
품에제한적으로사용할수
있는원료’는원료의중량
을기준으로50%미만(배
합수제외)을사용하여야
한다.
㉯식품제조시‘식품에제한
적으로사용할수있는원
료’를2가지이상혼합할
경우혼합되는총량은원료
의중량을기준으로50%미
만(배합수제외)사용하여
야한다.
㉰다만,최종소비자에게판매
되지아니하고제조업소에
공급되는원료용제품을제
조하고자하는경우에는위
의㉮,㉯항을적용받지아
니할수있다.
㉱다류,음료수,주류및향신
료제조시‘식품에제한적
- 82 -현 행 개 정(안)
구성원료중‘식품에제한적
으로사용할수있는원료’
에속하는식물성원료가1
가지인경우에는‘식품에사
용할수있는원료’로사용
할수있다.으로사용할수있는원료’
에속하는식물성원료가1가
지인경우에는원료의중량
을기준으로100%까지(배
합수제외)사용할수있다.
2.(생략) 2.(현행과같음)
3.식품일반의기준및규격
1)(생략)
2)이물
(1)식품은원료의처리과정에서
①그이상제거되지아니하
는정도이상의이물,②오
염된비위생적인이물,③인
체에위해를끼치는단단하
거나날카로운이물을함유
하여서는아니된다.다만,
다른식물이나원료식물의
표피또는토사,원료육의
털,뼈등과같이실제에있
어정상적인제조․가공상
완전히제거되지아니하고
잔존하는경우의이물로서
그양이적고위해가능성이
낮은경우는제외한다.3.식품일반의기준및규격
1)(현행과같음)
2)이물
(1)식품은다음의이물을함유
하여서는아니된다.
①원료의처리과정에서그이
상제거되지아니하는정도
이상의이물
②오염된비위생적인이물
③인체에위해를끼치는단단
하거나날카로운이물
다만,다른식물이나원료식물
의표피또는토사,원료육의
털,뼈등과같이실제에있어
정상적인제조․가공상완전히
제거되지아니하고잔존하는경
우의이물로서그양이적고위
해가능성이낮은경우는제외- 83 -현 행 개 정(안)
(2)(생략)
3)～7)(생략)한다.
(2)(현행과같음)
3)～7)(현행과같음
번호 식품 *1중검출되어서는 아니 되는 물질
 1니트로푸란 {푸라졸리돈 (Furazolidone),
푸랄타돈 (Furaltadone),
니트로푸라존 (Nitrofurazone),
니트로푸란토인 (Nitrofurantoine),
니트로빈 (Nitrovin) 등}제제및대사물질
◎ 잔류물의 정의 :
3-amino-2-oxazolidinone(AOZ),
3-amino-5-morpholinomethyl-
2-oxazolidinone(AMOZ),
semicarbazide(SEM)*2,nitrofurazone*3,
1-aminohydantoin(AHD), nitrovin
2클로람페니콜 (Chloramphenicol)
◎ 잔류물의 정의 :Chloramphenicol
3말라카이트 그린 (Malachite green)및
대사물질
◎ 잔류물의 정의 :Malachite green과
Leucomalachite green의합을 m alachite
green으로함
4디에틸스틸베스트롤 (Diethylstilbestrol, DES)
◎ 잔류물의 정의 :Diethylstilbestrol
5디메트리다졸 (Dimetridazole)
◎ 잔류물의 정의 :Dimetridazole 과
2-hydroxymethyl-1-methyl-5-nitroimidazole(
HMMNI)의합을 Dimetridazole 로함
6클렌부테롤 (Clenbuterol)
◎ 잔류물의 정의 :Clenbuterol
7반코마이신 (Vancomycin)
◎ 잔류물의 정의 :Vancomycin
8 클로르프로마진 (Chlorpromazine)8)동물용의약품의잔류허용기준
(1)식품중잔류동물용의약품 기
준적용
①(생략)
번
호식품*1 중 검출되어서는 아니 되는 물질
물질명 잔류물의 정의
1니트로푸란계 (Nitrofurans)
-푸라졸리돈 (Furazolidone) 3-Amino-2-oxazoli
dinone(AOZ)
-푸랄타돈 (Furaltadone) 3-Amino-5-morpho
linomethyl-2-oxazo
lidinone (AMOZ)
-니트로푸라존 (Nitrofurazone) -
Semicarbazide(SE
M):비가열
축산물및
동물성
수산물 (단순절단
포함 ,갑각류
제외 )의
가식부위에 한함
-Nitrofurazone :
갑각류에 한함
-니트로푸란토인 (N itro furan toine) 1-Aminohydantoin(
AHD)
-니트로빈 (Nitrovin) Nitrovin
2카바독스 (Carbadox) Quinoxaline-2-carb
oxylic acid (QCA)
3올라퀸독스 (Olaquindox) 3-methyl
quinoxaline-2-carb
oxylic acid
(MQCA)
4클로람페니콜 (Chlorampheni Chloramphenicol8)동물용의약품의잔류허용기준
(1)식품중잔류동물용의약품 기
준적용
①(현행과같음)
- 84 -현 행 개 정(안)
번호 식품 *1중검출되어서는 아니 되는 물질
◎ 잔류물의 정의 :Chlorpromazine
9티오우라실 (Thiouracil)
◎ 잔류물의 정의 :2-thiouracil,
6-methyl-2-thiouracil, 6-propyl-
2-thiouracil 및6-phenyl-2-thiouracil 의
합을 thiouracil 로함
10콜치신 (Colchicine)
◎ 잔류물의 정의 :Colchicine
11피리메타민 (Pyrimethamine)
◎ 잔류물의 정의 :Pyrimethamine
12메드록시프로게스테론 아세테이트
(Medroxyprogesterone acetate, MPA)
◎ 잔류물의 정의 :Medroxyprogesterone
acetate
13카바독스 (Carbadox)
◎ 잔류물의 정의 :Quinoxaline-2-
carboxylic acid (QCA)
14답손 (Dapsone)
◎ 잔류물의 정의 :Dapsone, monoacetyl
dapson의합을 dapsone으로함
15올라퀸독스 (Olaquindox)
◎ 잔류물의 정의 :3-methyl quinoxaline-
2-carboxylic acid (MQCA)
16로니다졸 (Ronidazole)
◎ 잔류물의 정의 :Ronidazole 과
2-hydroxymethyl-1-methyl-5-nitroimidazole
(HMMNI) 의합을 Ronidazole 로함
17메트로니다졸 (Metronidazole)
◎ 잔류물의 정의 :Metronidazole 과
1-(2-hydroxyethyl)-2-hydroxymethyl-5-nitro
imidazole (Metronidazole-OH) 의합을
Metronidazole 로함
18이프로니다졸 (Ipronidazole)
◎ 잔류물의 정의 :Ipronidazole 과
1-methyl-2- (2'-hydroxyisopropyl)
-5-nitroimidazole (Ipronidazole-OH) 의
합을 Ipronidazole 로함
*주1.축산물및동물성수산물과 그가공식품
에한한다 .
*주2.니트로푸라존의 대사물질인 세미카바자번
호식품*1 중 검출되어서는 아니 되는 물질
물질명 잔류물의 정의
col)
5클로르프로마진 (Chlorproma
zine)Chlorpromazine
6클렌부테롤 (Clenbuterol) Clenbuterol
7콜치신 (Colchicine) Colchicine
8답손 (Dapsone) Dapsone,
monoacetyl
dapson의합을
dapsone으로함
9디에틸스틸
베스트롤 (Diethylstilbestrol,
DES)Diethylstilbestrol
10메드록시프로게스테론
아세테이트
(Medroxyprogesterone
acetate, MPA)Medroxyprogestero
neacetate
11티오우라실 (Thiouracil) 2-thiouracil,
6-methyl-2-thioura
cil,6-propyl-
2-thiouracil 및
6-phenyl-
2-thiouracil 의
합을
thiouracil로함
12겐티안바이올렛
(GentianViolet, Crystal
violet)Gentian violet과
Leuco -gentian
violet의합을
Gentian violet으로
함
13말라카이트 그린
(Malachite green)Malachite green과
Leuco-malachite
green의합을
malachite
green으로함
14메틸렌블루
(Methylene Blue)Methylene blue와
Azure B의합을
Methylene Blue로
함
15디메트리다졸 (Dimetridazole) Dimetridazole 과- 85 -현 행 개 정(안)
이드 (semicarbazide, SEM)는비가열축
산물및동물성수산물 (단순절단 포함 ,
갑각류제외 )의가식부위에 한하여적용
한다 .
*주3.갑각류에 한해적용한다 .번
호식품*1 중 검출되어서는 아니 되는 물질
물질명 잔류물의 정의
2-hydroxymethyl-1
-methyl-
5-nitroimidazole(H
MMNI)의합을
Dimetridazole 로
함
16이프로니다졸 (Ipronidazole) Ipronidazole 과
1-methyl-2-(2'-hyd
roxyisopropyl)
-5-nitroimidazole
(Ipronidazole-OH)
의합을
Ipronidazole 로함
17메트로니다졸 (Metronidazole) Metronidazole 과
1-(2-hydroxyethyl)
-2-hydroxymethyl
-5-nitroimidazole(
Metronidazole-OH)
의합을
Metronidazole 로
함
18로니다졸 (Ronidazole) Ronidazole 과
2-hydroxymethyl-1
-methyl
-5-nitroimidazole(
HMMNI)의합을
Ronidazole 로함
19노르플록사신 (Norfloxacin) Norfloxacin
20오플록사신 (Ofloxacin) Ofloxacin
21페플록사신 (Pefloxacin) Pefloxacin
22피리메타민 (Pyrimethamine) Pyrimethamine
23반코마이신 (Vancomycin) Vancomycin
*주1.축산물및동물성수산물과 그가공식품
에한한다
②∼⑤(생략)
(2)∼(3)(생략)②∼⑤(현행과같음)
(2)∼(3)(현행과같음)
- 86 -현 행 개 정(안)
9)축·수산물의잔류물질잔류허
용기준
①∼⑧(생략)
⑨알:가금류로부터생산된계
란,오리알,메추리알등으로
껍질을제거한부위를말한
다.
10)∼18)(생략)9)축·수산물의잔류물질잔류허
용기준
①∼⑧(현행과같음)
⑨알:가금류로부터생산된달
걀,오리알,메추리알등으로
껍질을제거한부위를말한
다.
10)∼18)(현행과같음)
4.보존및유통기준
1)～4)(생략)
5)냉장제품은0〜10℃에서냉동
제품은-18℃이하에서보관
및유통하여야한다.
6)즉석섭취편의식품류는 제조된
식품을가장짧은시간내에소
비자에게공급하도록하고운
반및유통시에는냉장,온장,
실온및일정한온도관리를
위하여온도조절이가능한설
비등을이용하여야하며이때
냉장은0〜10℃,온장은60℃이
상을유지할수있어야한다.
7)∼12)(생략)
13)달걀을세척하는경우30℃이
상이면서품온보다5℃이상의4.보존및유통기준
1)～4)(현행과같음)
5)이고시에서별도로보관온도
를정하고있지않은냉장제품
은-------------.
6)즉석섭취식품과도시락은---
-----------------------------
-----------------------------
-----------------------------
-----------------------------
-----------------------------
-----------------------------
-----------------------------
-----------------------------
7)∼12)(현행과같음)
13)달걀을물로세척하는경우--
------------------------------ 87 -현 행 개 정(안)
깨끗한물(100～200ppm차아
염소산나트륨함유또는이와
동등이상의살균효력이있는
방법)로세척하여야하고,세척
한달걀은냉장으로보존․유
통하여야한다.
14)∼30)(생략)-----------------------------
-----------------------------
-----------------------------
-----------------------------
-----------------------------
--------------.
14)∼30)(현행과같음)
제4.식품별 기준 및규격
1.과자류,빵류또는떡류
1)정의
과자류,빵류또는떡류라함은
곡분,설탕,계란,유제품등을주
원료로하여가공한과자,캔디
류,추잉껌,빵류,떡류를말한다.
2)∼3)(생략)
4)식품유형
(1)∼(3)(생략)
(4)빵류
밀가루또는기타곡분,설탕,
유지,계란등을주원료로하
여이를발효시키거나발효하
지않고반죽한것또는크림,
설탕,계란등을주원료로하
여반죽하여냉동한것과 이를
익힌것으로서식빵,케이크,제4.식품별 기준 및규격
1.과자류,빵류또는떡류
1)정의
과자류,빵류또는떡류라함은
곡분,설탕,달걀,유제품등을주
원료로하여가공한과자,캔디
류,추잉껌,빵류,떡류를말한다.
2)∼3)(현행과같음)
4)식품유형
(1)∼(3)(현행과같음)
(4)빵류
밀가루또는기타곡분,설탕,
유지,달걀등을주원료로하
여이를발효시키거나발효하
지않고반죽한것또는크림,
설탕,달걀등을주원료로하
여반죽하여냉동한것과 이를
익힌것으로서식빵,케이크,
- 88 -현 행 개 정(안)
카스텔라,도넛,피자,파이,핫
도그,티라미스,무스케익등을
말한다.
(5)(생략)
5)∼6)(생략)
2.빙과류
2-1아이스크림류
1)∼2)(생략)
3)제조·가공기준
(1)계란을사용할경우에는사
용전에계란표면을세척
소독하여야한다.
(2)∼(5)(생략)
4)∼6)(생략)
2-2아이스크림믹스류
1)∼2)(생략)
3)제조·가공기준
(1)계란을사용할경우에는사
용전에계란표면을세척
소독하여야한다.
(2)∼(4)(생략)
4)∼6)(생략)
3.(생략)
4.당류
4-1∼4-5(생략)카스텔라,도넛,피자,파이,핫
도그,티라미스,무스케익등을
말한다.
(5)(현행과같음)
5)∼6)(현행과같음)
2.빙과류
2-1아이스크림류
1)∼2)(현행과같음)
3)제조·가공기준
(1)달걀을사용할경우에는사
용전에달걀표면을세척
소독하여야한다.
(2)∼(5)(현행과같음)
4)∼6)(현행과같음)
2-2아이스크림믹스류
1)∼2)(현행과같음)
3)제조·가공기준
(1)달걀을사용할경우에는사
용전에달걀표면을세척
소독하여야한다.
(2)∼(4)(현행과같음)
4)∼6)(현행과같음)
3.(현행과같음)
4.당류
4-1∼4-5(현행과같음)- 89 -현 행 개 정(안)
4-6엿류
1)∼3)(생략)
4)식품유형
(1)∼(2)(생략)
(3)덱스트린
전분또는곡분을산이나효소
로가수분해시켜얻은생성물을
가공한것을말한다.
5)∼6)(생략)4-6엿류
1)∼3)(현행과같음)
4)식품유형
(1)∼(2)(현행과같음)
(3)덱스트린
곡분,전분등전분질원료를--
-------------------------
-----------------.
5)∼6)(현행과같음)
4-7당류가공품
1)정의
당류가공품이라 함은설탕류,
포도당,과당류,엿류,당시럽류,
올리고당류를주원료로하여가
공한것을말한다.다만,따로
기준및규격이정하여져있는
것은그기준․규격에의한다.
2)∼6)(생략)
5.∼6.(생략)4-7당류가공품
1)정의
------------------------
-------------------------
올리고당류,벌꿀류등을----
-------------------------
-------------------------
----------------------.
2)∼6)(현행과같음)
5.∼6.(현행과같음)
7.식용유지류
7-1식물성유지류
1)∼5)(생략)
6)시험방법
(1)∼(3)(생략)
(4)조지방7.식용유지류
7-1식물성유지류
1)∼5)(현행과같음)
6)시험방법
(1)∼(3)(현행과같음)
<삭제>
- 90 -현 행 개 정(안)
제7.일반시험법6.3.1.2조지
방에따라시험한다.
(5)(생략)
(6)타르색소
제7.일반시험법3.4착색료에
따라시험한다.
(7)보존료
제7.일반시험법3.1보존료에
따라시험한다.
(8)∼(10)(생략)(4)(현행(5)와같음)
<삭제>
<삭제>
(5)∼(7)(현행(8)～(10)과같음)
7-2동물성유지류
1)∼2)(생략)
3)제조・가공기준
(1)식용우지와식용돈지는탈검,
탈산,탈색,탈취의정제공정
을거치거나이와동등이상
의복합정제공정을 거쳐야
한다.
(2)(생략)
4)∼6)(생략)
7-3∼11.(생략)7-2동물성유지류
1)∼2)(현행과같음)
3)제조・가공기준
(1)원료유지는탈검,탈산,탈색,
탈취의정제공정을거치거나
이와동등이상의복합정제공
정을거쳐야한다.(다만,원
료우지및원료돈지는제외)
(2)(현행과같음)
4)∼6)(현행과같음)
7-3∼11.(현행과같음)
12.조미식품
12-1식초
1)∼2)(생략)12.조미식품
12-1식초
1)∼2)(현행과같음)- 91 -현 행 개 정(안)
3)제조・가공기준
(1)(생략)
(2)참나무속(Quercusspp.)나무
로만든오크칩(바)은과일
또는과즙을주원료로하여
제조한발효식초에착향의
목적으로사용할수있으나,
최종제품의완성전에제거
하여야한다.단,오크칩(바)
에가열(로스팅)이외의어떠
한화학적처리도하여서는
아니된다.
4)∼6)(생략)3)제조・가공기준
(1)(현행과같음)
(2)--------------------------
-------------------- 발효
식초에-----------------
-----------------------
----------------------,
-----------------------
----------.-----------
-----------------------
-----------------------
--------.
4)∼6)(현행과같음)
12-2소스류
1)∼3)(생략)
4)식품유형
(1)소스
(2)∼(3)(생략)
(4)복합조미식품
식품에당류,식염,향신료,단
백가수분해물,효모또는그
추출물,식품첨가물등을혼합
하여분말,과립또는고형상
등으로가공한것으로식품에12-2소스류
1)∼3)(현행과같음)
4)식품유형
(4)(현행1)과같음)
(2)∼(3)(현행과같음)
(1)복합조미식품
-------------------------
-------------------------
--------------------- 혼합
하여수분함량이8%이하가되
도록---------------------
- 92 -현 행 개 정(안)
파라옥시안식향산메틸
파라옥시안식향산에틸(생략)
소브산
소브산칼륨
소브산칼슘(생략)
(생략)
<신설>특유의맛과향을부여하기위
해사용하는것을말한다.
5)규격
(1)(생략)
(2)∼(5)(생략)
(6)보존료(g/kg)∶다음에서정하는
것이외의보존료가검출되
어서는아니된다.
6)(생략)
12-3∼13.(생략)파라옥시안식향산메틸
파라옥시안식향산에틸(현행과같음 )
소브산
소브산칼륨
소브산칼슘(현행과같음 )
(현행과같음 )
안식향산
안식향산나트륨
안식향산칼륨
안식향산칼슘1.0이하 (안식향산으로서 ,마요네즈에 한한다 .)-------------------------
---------------------.
5)규격
<삭제>
(1)∼(4)(현행(2)～(5)와같음)
(5)보존료(g/kg)∶다음에서정하는
것이외의보존료가검출되
어서는아니된다.
6)(현행과같음)
12-3∼13.(현행과같음)
14.주류
14-1∼14-8(생략)
14-9일반증류주
1)∼4)(생략)
5)규격
(1)(생략)
(2)메탄올(mg/mL):0.5이하
(다만,용설란(Agaveteuilana)을
주원료로한제품에한하여14.주류
14-1∼14-8(현행과같음)
14-9일반증류주
1)∼4)(현행과같음)
5)규격
(1)(현행과같음)
(2)메탄올(mg/mL):1.0이하
(다만,곡류를주원료로한제
품은0.5이하)- 93 -현 행 개 정(안)
1.0이하)
(3)(생략)
6)∼15.(생략)(3)(현행과같음)
6)∼15.(현행과같음)
16.식육가공품
16-1∼16-4(생략)
16-5양념육류
1)∼3)(생략)
4)식품유형
(1)∼(2)(생략)
(3)갈비가공품:식육의갈비부
위(뼈가붙어있는것에한
한다)를정형하여식품또
는식품첨가물을가하여양
념하고훈연하거나열처리
한것을말한다.
(4)(생략)
5)∼6)(생략)
16-6(생략)
17.알가공품류
17-1알가공품
1)∼2)(생략)
3)제조·가공기준16.식육가공품
16-1∼16-4(현행과같음)
16-5양념육류
1)∼3)(현행과같음)
4)식품유형
(1)∼(2)(현행과같음)
(3)갈비가공품:식육의갈비부
위(뼈가붙어있는것에한
한다)를정형한것에식품
또는식품첨가물을가하여
양념한것이거나갈비부위
를그대로또는양념하여
훈연하거나가열처리한것
을말한다.
(4)(현행과같음)
5)∼6)(현행과같음)
16-6(생략)
17.알가공품류
17-1알가공품
1)∼2)(현행과같음)
3)제조·가공기준
- 94 -현 행 개 정(안)
(1)∼(2)(생략)
(3)세척하지않은식용란을사
용하는경우에는30℃이상
이면서품온보다5℃이상의
깨끗한물(100～200ppm
차아염소산나트륨함유또
는이와동등이상의살균
효력이있는방법)로세척
하여야한다.
(4)∼(12)(생략)
4)∼23.(생략)(1)∼(2)(현행과같음)
(3)물로세척하지----------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
-----.
(4)∼(12)(현행과같음)
4)∼23.(현행과같음)
제5.∼제6.(생략) 제5.∼제6.(현행과 같음)
제7.일반시험법
1.(생략)
2.식품성분시험법
2.1일반성분시험법
2.1.1수분
2.1.1.1건조감량법
가.(생략)
나.감압가열건조법
1)(생략)
2)시험방법
(전단생략).다만,국수,식빵등
은미리건조하여가루로한다제7.일반시험법
1.(현행과같음)
2.식품성분시험법
2.1일반성분시험법
2.1.1수분
2.1.1.1건조감량법
가.(현행과같음)
나.감압가열건조법
1)(현행과같음)
2)시험방법
(현행과같음).-------------
------------------------- 95 -현 행 개 정(안)
음실시한다.연유,생계란등은
해사와유리봉을넣은칭량병을
미리건조한다음실시한다.(이
하생략)
2.1.1.2∼2.1.1.3(생략)
2.1.2회분
가.∼나.(생략)
다.시험방법
1)(생략)
2)검체의전처리
가)∼나)(생략)
다)예비탄화시켜야할검체
회화할때팽창하는검체로서
당류및당함량이많은식품,
정제전분,계란의흰자위및일
부의어육이속한다.(이하생
략)
라)(생략)
2.1.3∼3.(생략)
4.미생물시험법
4.1일반사항
4.1.1검체의채취
4.1.2확인시험--------------- 생달걀---
------------------------
---------------------. (이
하현행과같음)
2.1.1.2∼2.1.1.3(현행과같음)
2.1.2회분
가.∼나.(현행과같음)
다.시험방법
1)(현행과같음)
2)검체의전처리
가)∼나)(생략)
다)예비탄화시켜야할검체
------------------------
------------------------
------,달걀------------
--------------. (이하현행
과같음)
라)(현행과같음)
2.1.3∼3.(현행과같음)
4.미생물시험법
4.1일반사항
4.1.1(현행과같음)
4.1.2확인시험
- 96 -현 행 개 정(안)
가.∼다.(생략)
라.식품의약품안전처장이 필요하다
고인정하는경우에는식중독균
증균배양후PCR등분자생물
학적시험법을활용한스크리닝
시험을통하여불검출로판정할
수있다.다만,유전자가확인된
경우분리배양후생화학적검사
를통하여해당식중독균으로
동정되면검출로판정한다.
4.2(생략)가.∼다.(현행과같음)
라.-----------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
-------------------- ----
------------------- 검사
등을----------------------
----------------------.
4.2(현행과같음)
4.3.시험용액의제조
가.∼바.(생략)
사.실험을실시하기직전에잘균질
화하고검사검체에따라다음
과같이시험용액을제조한다.
1)∼5)(생략)
6)버터와아이스크림류：버터와
아이스크림류는40℃이하의
온탕에서15분내에용해시켜
10∼25mL를취한후희석액
을가하여100∼225mL로한
것을시험용액으로한다.
7)∼9)(생략)
4.4배지및시액4.3.시험용액의제조
가.∼바.(현행과같음)
사.------------------------
------------------------
-----------------------.
1)∼5)(현행과같음)
6)-------------- :검체일정
량(10∼25g)을멸균용기에취
해40℃이하의온탕에서15분
내에용해시킨후희석액을가
하여100∼250mL로-------
-------------------.
7)∼9)(현행과같음)
4.4배지및시액- 97 -현 행 개 정(안)
4.4.1배지
1)∼23)(생략)
24)3%Ogawa배지
(생략)
50℃로냉각시킨후계란액
(Egg-Homogenate)200mL을넣
고충분히혼합하여5mL씩멸균
시험관에분주한다음85~90℃에
서60분간가열한다.
25)∼99)(생략)
4.4.2시액
1)∼7)(생략)
8)난황액
계란을1시간가량0.1%
MercuryChloride(HgCl2)에담
근후꺼내70%ethanol에30분
가량담궈놓는다.계란을꺼내
노른자만취한후동량의멸균생
리식염수를가하여사용한다.
9)∼12)(생략)
4.5∼4.25(생략)4.4.1배지
1)∼23)(현행과같음)
24)3%Ogawa배지
(현행과같음)
-------------------- 달걀액
--------------------------
--------------------------
--------------------------
---------------.
25)∼99)(현행과같음)
4.4.2시액
1)∼7)(현행과같음)
8)난황액
달걀을1시간가량0.1%
MercuryChloride(HgCl2)에담
근후꺼내70%ethanol에30분
가량담궈놓는다.달걀을꺼내
노른자만취한후동량의멸균생
리식염수를가하여사용한다.
9)∼12)(현행과같음)
4.5∼4.25(현행과같음)
4.26.식중독균에대한분자생물학적
시험법
가.살모넬라시험법
1)∼4)(생략)4.26.식중독균에대한분자생물학적
시험법
가.살모넬라시험법
1)∼4)(현행과같음)
- 98 -현 행 개 정(안)
5)결과확인
PCR반응에서증폭곡선이확인
되는경우살모넬라가검출된것
으로판정한다.다만,음성대조
군에서증폭곡선이확인되거나
양성대조군에서증폭곡선이확인
되지않을경우재시험하여야
한다.
<신설>
나.(생략)5)결과확인
(1)PCR반응에서증폭곡선이
확인되지않는경우살모넬
라불검출로판정할수있
다.------------------
----------------------
----------------------
--.
(2)증폭곡선이확인되는경우
분리배양후생화학적검사
등을통하여살모넬라로동
정되면검출로판정한다.
나.(현행과같음)
5.원유·식육·식용란의시험법
5.1∼5.3.1(생략)
5.3.2관능검사법
가.외부검사법
1)외관
시료에대해서먼저오염도및
파손의유무를검사한다.신선알
껍질은광택이없고거칠며오래
된계란은표면에광택이있고
거칠다.
2)진음
계란을흔들어볼때신선알은5.원유·식육·식용란의시험법
5.1∼5.3.1(현행과같음)
5.3.2관능검사법
가.외부검사법
1)외관
-------------------------
-------------------------
-------------------------
--달걀------------------
-----.
2)진음
달걀--------------------- 99 -현 행 개 정(안)
아주소리가없으나묵은계란은
진음이있다.
3)투시
검란기나검란상자에넣고투시
하면신선알은내용이균일하며
홍색을보이고기실이깨끗하게
보이나묵은계란은기실이보다
넓고내용이어둡게보이며난황
의자리가동요되고특히부패란
은암흑색을보인다.
4)자외선조사법
계란에자외선을조사하면신선
란은붉은형광색을나타내나수
주일지난계란은푸른색의형광
을나타낸다.
나.내용검사법
<난황계수 >농후난
백
깨끗한유리판에계란의내용물
을옮기고그색깔,난황의위치,------------------- 달걀--
-----------.
3)투시
-------------------------
-------------------------
-------------------------
--------달걀-------------
-------------------------
-------------------------
---------------.
4)자외선조사법
달걀----------------------
-------------------------
-------달걀-------------
----------.
나.내용검사법
<난황계수 >농후난
백
-----------달걀----------
-------------------------
- 100 -현 행 개 정(안)
배반의배자발육유무및혈관형
성여부를관찰한다.(이하생략)
다.∼라.(생략)
5.3.3(생략)-------------------------
----------.(이하현행과같음)
다.∼라.(현행과같음)
5.3.3(현행과같음)
6.식품별규격확인시험법
6.1∼6.8(생략)
6.9식육및알가공품
6.9.1∼6.9.2(생략)
6.9.3알가공품
6.9.3.1∼6.9.3.3(생략)
6.9.3.4살모넬라
제7.일반시험법4.미생물시험법
4.11살모넬라시험법에따라
시험한다.
6.9.4.(생략)
6.10∼6.14(생략)6.식품별규격확인시험법
6.1∼6.8(현행과같음)
6.9식육및알가공품
6.9.1∼6.9.2(현행과같음)
6.9.3알가공품
6.9.3.1∼6.9.3.3(현행과같음)
6.9.3.4살모넬라
-------------------------
4.11살모넬라시험법에따라
시험한다.다만,액란제품의경우
4.11살모넬라시험법또는4.26
식중독균에대한분자생물학적
시험법가.살모넬라시험법에
따라시험한다.
6.9.4.(현행과같음)
6.10∼6.14(현행과같음)
7.식품중잔류농약분석법
7.1∼7.3.1.1(생략)
7.3.1.2클로르피리포스(Chlorpyrifos),
다이아지논(Diazinon),에치
온(Ethion),페니트로치온7.식품중잔류농약분석법
7.1∼7.3.1.1(생략)
7.3.1.2클로르피리포스(Chlorpyrifos),
다이아지논(Diazinon),에치
온(Ethion),페니트로치온- 101 -현 행 개 정(안)
(Fenitrothion),메티다치온
(Methidathion),클로르펜빈
포스(Chlorfenvinphos),디크
로보스(Dichlovos)및펜설포
티온(Fensulfothion)
가.시험법적용범위
가금류고기,가금류부산물,가금
류지방,계란,닭고기,닭부산물,
돼지고기,돼지부산물,돼지지방,
말고기,사슴고기,소부산물,소지
방,소고기,양고기,양부산물,양
지방,염소고기,염소부산물,알,
유,포유류고기등에적용한다.
나.∼마.(생략)
7.3.1.3(생략)
7.3.1.4클로르단(Chlordane),싸이
퍼메쓰린(Cypermethrin),
델타메쓰린(Deltamethrin),
에트림포스(Etrimfos),펜
발러레이트(Fenvalerlate),
퍼메쓰린(Permethrin),포
사론(Phosalone),피리미포
스메틸(Pirimiphos
methyl),프로파자이트
(Propargite),빈클로졸린(Fenitrothion),메티다치온
(Methidathion),클로르펜빈
포스(Chlorfenvinphos),디크
로보스(Dichlovos)및펜설포
티온(Fensulfothion)
가.시험법적용범위
--------------------------
-----,달걀---------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
----------------------.
나.∼마.(현행과같음)
7.3.1.3(현행과같음)
7.3.1.4클로르단(Chlordane),싸이
퍼메쓰린(Cypermethrin),
델타메쓰린(Deltamethrin),
에트림포스(Etrimfos),펜
발러레이트(Fenvalerlate),
퍼메쓰린(Permethrin),포
사론(Phosalone),피리미포
스메틸(Pirimiphos
methyl),프로파자이트
(Propargite),빈클로졸린
- 102 -현 행 개 정(안)
(Vinclozolin)
가.시험법적용범위
가금류고기,가금류부산물,계
란,닭고기,소고기,알,양고기,
우유,유,포유류고기,포유류부
산물등에적용한다.
나.∼아.(생략)
7.3.1.5푸루실라졸(Flusilazole),메
카밤(Mecarbam),메타크
리포스(Methacrifos),메타
미 도 포 스
(Methamidophos),모노크
로토포 스
(Monocrotophos),아세페
이트(Acephate),에디펜포
스(Edifenfos),이소펜포스
(Isofenphos),클로르피리
포 스 메 틸
(Chlorpyifos-methyl),터
브포스(Terbufos),트리클
로폰(Trichlorfon),펜치온
(Fenthion),펜토에이트
(Phenthoate),폭심
(Phoxim)및포스메트(Vinclozolin)
가.시험법적용범위
---------------------, 달
걀,----------------------
------------------------
----------------.
나.∼아.(현행과같음)
7.3.1.5푸루실라졸(Flusilazole),메
카밤(Mecarbam),메타크
리포스(Methacrifos),메타
미 도 포 스
(Methamidophos),모노크
로토포 스
(Monocrotophos),아세페
이트(Acephate),에디펜포
스(Edifenfos),이소펜포스
(Isofenphos),클로르피리
포 스 메 틸
(Chlorpyifos-methyl),터
브포스(Terbufos),트리클
로폰(Trichlorfon),펜치온
(Fenthion),펜토에이트
(Phenthoate),폭심
(Phoxim)및포스메트- 103 -현 행 개 정(안)
(Phosmet)
가.시험법적용범위
가금류고기,가금류지방,계란,닭
고기,닭부산물,닭지방,돼지고기,
돼지고기지방,말고기,소부산물,
소지방,소고기,알,양고기,양지
방,염소고기,염소지방,우유,유
등에적용한다.
나.∼아.(생략)
7.3.1.6(생략)
7.3.1.7아바멕틴등27종동시다성
분시험법
가.∼라.(생략)
마.시험용액의조제
1)추출
검체(닭의경우피부와뼈,내장
제거한근육부위100g,알의
경우계란,오리알은10개,메추
리알20개또는이와동등한
양)를균질화한후5g을정확
히달아50mL용량원심분리
관에넣고1%아세트산이함유
된아세토니트릴15mL를가하(Phosmet)
가.시험법적용범위
------------------- 달걀,-
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
-----------.
나.∼아.(현행과같음)
7.3.1.6(현행과같음)
7.3.1.7아바멕틴등27종동시다성
분시험법
가.∼라.(현행과같음)
마.시험용액의조제
1)추출
-------------------------
-------------------------
----달걀,---------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
- 104 -현 행 개 정(안)
여1분간격렬하게진탕한다.
(이하생략).
2)(생략)
바.∼아.(생략)
7.3.2단성분분석법(individualresidue
method)
7.3.2.1∼7.3.2.4(생략)
7.3.2.5싸이로마진(Cyromazine)
가.∼라.(생략)
마.시험용액의조제
1)추출
검체를잘게썰거나갈은후
20g을달아아세토니트릴․물
(9：1)의혼합용액(동물조직의
경우)또는메탄올․물(9：1)의
혼합용액(계란의경우)을200
mL를1분간균질화한다(계란
의경우에는10분간원심분리
한다).(이하생략).
2)(생략)
바.∼아.(생략)
7.3.2.6∼7.3.2.24(생략)
7.3.2.25이미다클로프리드(Imidacloprid)
가.∼라.(생략)------------------------.
(이하현행과같음).
2)(현행과같음)
바.∼아.(현행과같음)
7.3.2단성분분석법(individualresidue
method)
7.3.2.1∼7.3.2.4(현행과같음)
7.3.2.5싸이로마진(Cyromazine)
가.∼라.(현행과같음)
마.시험용액의조제
1)추출
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
------(달걀------)-------
-------------------( 달걀
-----------------------
---).(이하현행과같음)
2)(현행과같음)
바.∼아.(현행과같음)
7.3.2.6∼7.3.2.24(현행과같음)
7.3.2.25이미다클로프리드(Imidacloprid)
가.∼라.(현행과같음)- 105 -현 행 개 정(안)
마.시험용액의조제
1)추출
검체(닭의경우피부와뼈,내장
제거한근육부위100g,알의
경우계란,오리알은10개,메추
리알20개또는이와동등한
양)를균질화한후5g을50
mL용량의원심분리관에정확
히달아넣고1%아세트산이
함유된아세토니트릴15mL를
가하여10분간격렬하게진탕한
후4℃,4,000G에서10분간원
심분리한다.
2)(생략)
바.∼아.(생략)
7.3.2.26(생략)
7.3.2.27클로르페나피르(Chlorfenapyr)
가.∼라.(생략)
마.시험용액의조제
1)추출
검체(닭의경우피부와뼈,내장
제거한근육부위100g,알의
경우계란,오리알은10개,메추
리알20개또는이와동등한
양)를균질화한후5g을정확마.시험용액의조제
1)추출
-------------------------
-------------------------
---달걀------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-------------------------
---------.
2)(현행과같음)
바.∼아.(현행과같음)
7.3.2.26(현행과같음)
7.3.2.27클로르페나피르(Chlorfenapyr)
가.∼라.(현행과같음)
마.시험용액의조제
1)추출
-------------------------
-------------------------
---달걀.----------------
-------------------------
-------------------------
- 106 -현 행 개 정(안)
히달아50mL용량원심분리
관에넣고1%아세트산이함유
된아세토니트릴15mL를가하
여1분간격렬하게진탕한다.
(이하생략).
2)(생략)
바.∼아.(생략)
7.3.2.28(생략)-------------------------
-------------------------
-------------------------
------------------------.
(이하현행과같음).
2)(현행과같음)
바.∼아.(현행과같음)
7.3.2.28(현행과같음)
식 품 검 체 최소요구량
(생략)
알류
계란,오리알
메추리알등(생략)(생략)
(생략)8.식품중잔류동물용의약품 시험법
8.1일반사항
1)∼3)(생략)
4)검체
(생략)
8.2정성시험법
8.2.1∼8.2.1.3(생략)
8.2.2물리·화학적시험법
8.2.2.1축산물중동물용의약품동
시다성분시험법
8.2.2.1.1축산물중항균제동시다
성분시험법
1)∼7)(생략)식 품 검 체 최소요구량
(현행과같음)
알류
달걀,오리알
메추리알등(현행과같음)(현행과
같음)
(현행과같음)8.식품중잔류동물용의약품 시험법
8.1일반사항
1)∼3)(현행과같음)
4)검체
(현행과같음)
8.2정성시험법
8.2.1∼8.2.1.3(현행과같음)
8.2.2물리·화학적시험법
8.2.2.1축산물중동물용의약품동
시다성분시험법
8.2.2.1.1축산물중항균제동시다
성분시험법
1)∼7)(현행과같음)- 107 -현 행 개 정(안)
구분 정량한계
계열 동물용의약품 소 돼지 닭 계란 유
(생략)8)정량시험
가)∼나)(생략)
표3.정량이가능한동물용의약
품목록(단위:mg/kg)
8.2.2.1.2 ∼8.2.2.2(생략)
8.3정량시험법
8.3.1∼8.3.13(생략)
8.3.14레바미졸(Levamisole)
1)시험법적용범위
축산물등에적용한다.
2)분석원리
검체를액체-액체역추출법과고체
상추출법으로추출하고칼럼을이
용하여레바미졸을분리한후액체크
로마토그래프/질량분석기로정량하는
방법이다.
3)장치
액체크로마토그래프/질량분석기
(LC-APCI)구분 정량한계
계열 동물용의약품 소 돼지 닭 달걀 유
(현행과같음)8)정량시험
가)∼나)(현행과같음)
표3.정량이가능한동물용의약
품목록(단위:mg/kg)
8.2.2.1.2 ∼8.2.2.2(현행과같음)
8.3정량시험법
8.3.1∼8.3.13(현행과같음)
8.3.14레바미졸(Levamisole),트리
클로르폰(Trichlorfon)
1)시험법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중분석대상물질을 10%초
산함유아세토니트릴(가금류고기
는아세토니트릴)로추출한후아
세토니트릴포화헥산으로정제하
여액체크로마토그래프/질량분석
기로분석한다.
3)측정기기
액체크로마토그래프/질량분석기
(LC-MS/MS)
- 108 -현 행 개 정(안)
4)시약및시액
가)표준용액：레바미졸1,000 μg/mL
을메탄올에녹여영하20℃에
보관하며원액으로사용한다.실
제사용할때는물로적절한농
도로희석하여사용한다.내부표
준물질인메틸레바미졸도같은
농도로보관하며사용한다.
나)기타시약：특급4)시약및시액
가)용매:액체크로마토그래프용또는
이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동
등한것
다)표준원액:100mL용량플라스크
에표준품을각각정밀히달아
메탄올에녹여100mg/L가되
게한다.조제된표준원액은냉
동보관한다.
라)혼합표준용액:각물질의표준
원액100mg/L농도로부터메
탄올로희석하여필요한농도
가되게한다.
마)10%초산(aceticacid)함유아
세토니트릴용액:1,000mL용
량플라스크에초산100mL을
넣고아세토니트릴로표시선까
지채운다.
바)20mM개미산암모늄(ammonium
formate)용액:1,000mL용량
플라스크에개미산암모늄1.26g을
넣고물로표시선까지채운다.
사)0.2%개미산(formicacid)함유
메탄올용액:1,000mL용량플- 109 -현 행 개 정(안)
5)시험용액의조제
가)추출
균질화한검체5g을50mL원심
분리관에담아내부표준물질인메
틸레바미졸의표준용액50μL을
첨가한다.15초동안혼합한후20
mL헥산：이소아밀알콜
(isoamylalcohol)(95：5)용액을가
한다.15초동안혼합하고10mL1
M수산화나트륨용액을가한다.
다시15초동안혼합하고시험관
을초음파장치에5분동안놓는다.
5,000rpm,10분동안원심분리한
후에윗부분의유기용매층을15
mL0.05M황산용액이담겨져
있는새로운시험관에옮겨담는
다.다시한번10분동안원심분
리하여유기용매에해당하는상층
액을제거하고아래층의수용액을
취한다.라스크에개미산2mL을넣고
메탄올로표시선까지채운다.
아)기타시약:특급또는이와동
등한것
5)시험용액의조제
균질화한검체2g을50mL원심
분리관에취한다.10%초산함유
아세토니트릴(가금류고기는아세
토니트릴)10mL을가하여15분
간진탕하고,4℃에서4,700G로
10분간원심분리한다.상층액을
새로운50mL원심분리관에옮겨
아세토니트릴포화헥산10mL울
가하여10분간진탕한다.4℃에서
4,700G로10분간원심분리한후,
하층액을취하여40℃수욕상에서
질소농축한다.잔류물에메탄올
용액2mL(소고기,갑각류,어류
는메탄올용액4mL)을가하여
재분산하고,0.2μm멤브레인필
터(PVDFmembranefilter)로여
과하여시험용액으로한다.
- 110 -현 행 개 정(안)
나)정제
SCX칼럼(500mg,10㏄,strong
cationexchange,benzene
sulphonicacid)을vacuum-
manifold에설치한후에3mL메
탄올,3mL물과1mL0.05M황산
용액을미리흘려활성화시킨다.
액체상의추출액을천천히칼럼을
통과시킨다.통과시킨후다시3mL
물,1mL0.05M황산용액,그리고
3mL메탄올로씻어준다.마지막
으로3mL농축된암모니아：메
탄올(25：75)로용출시킨다음용
출액을60℃,질소가스농축으로
건조시킨다.잔류물은액체크로마
토그래프이동상A250μL에다시
녹여15초동안혼합한후여과하
여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그래프측정조건
(1)칼럼：LiChrospher60RP-selectB
(HP사,4×125mm,5μm)또는
이와동등한것
(2)이동상A：7.7%테트라하이드
로퓨란(tetrahydrofuran)과6)시험조작
가)액체크로마토그래프의측정조건
(1)칼럼:C18(Xbridge,2.1mmｘ
150mm,3.5μm)또는이와
동등한것
(2)이동상
(가)이동상A:20mM개미산- 111 -현 행 개 정(안)
0.3%트리에틸아민을포함하는
0.1M초산암모늄수용액
(3)이동상B：아세토니트릴
프로그램단계시간%A%B
1단계0～7분6535
2단계9분5050
3단계9～14분5050
4단계15～20분6535
(4)유속：1.0mL/분
나)질량분석기(Massspectrometer)
측정조건
APCIionsource를갖춘질량분석
기를이용한다.처음2분간의액체
크로마토그래프칼럼용출액은버
리고2분에서6분동안의용출액만
질량분석기에직접통과되게한다.암모늄용액
(나)이동상B:0.2%개미산
함유메탄올용액
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
09010
2.19010
4595
8595
109010
119010
(3)유속:0.25mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(Positive)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Capillaryvoltage:0.5kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤)
(5)분석대상및개별조건
(MRM조건)
물질명
(Compound)머무름
시간(분)분자량
(MW)선구이온
(Precursor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,
eV)
레바미졸
(Levamisole)4.34204.3205.291.1134
123.1524
178.16 20
트리클로르폰
(Trichlorfon)4.78257.4258.079.0228
109.12 18
221.0910
- 112 -현 행 개 정(안)
7)정량시험
시험용액및표준용액100μL를위
의조건에따라액체크로마토그래프
에주입한다.내부표준물질인메틸
레바미졸피크의면적또는높이와
비교해서레바미졸에대한검량선을
작성한후검체중레바미졸의함량
을구한다.※밑줄표시되어있는것은정량이온이며
그외이온들은정성이온임
※각생성이온(Production)에대한질량분석기
의기기조건은사용기기의최적값으로변경
하여사용할수있으며,제시된이외의생
성이온도적용이가능함
7)정성및확인시험
위의조건으로얻어진크로마토그
램상의피크는표준용액피크의머
무름시간과비교하여일치하여야
한다.또한표준용액과시험용액의
선구이온(Precursorion)및생성이
온(Production)이일치하여야하
고,표준용액과시험용액의생성이
온간반응세기의비율(Ionratio)을
비교하여그비율은주1)과일치하
여야한다.확인시험의경우,음성
검체(Blanksample)에측정물질을
첨가한것을검체와동일하게전
처리하여얻은표준용액으로서비
교한다.
주1.생성이온간반응세기의비율
허용범위- 113 -현 행 개 정(안)
이온간반응세기의 비율 (%)허용범위
>50% ≤20%
>20%,≤50% ≤25%
>10%,≤20% ≤30%
나)표준품크로마토그램
(1)레바미졸(4.34분)
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
우유 새우
넙치 장어
(2)트리클로르폰(4.78분)
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
우유 새우
넙치 장어
8)정량시험
가)정량
- 114 -현 행 개 정(안)
조직표준곡선(Tissuestandard
curve)작성을위하여각해당
물질이검출되지않은음성검체
(Blanksample)를2g씩준비한
후공시료를포함하여5개이상
의농도로전처리하여표준용액
을제조한다.확인시험과똑같은
조건에서공시료를포함하여각
농도별첨가시료에서얻어진크
로마토그램상의각피크높이또
는면적을구하여검량선을작성
한후시험용액의크로마토그램
으로부터정량이온(Quantitative
ion)의각피크높이또는피크
면적에따라산출된시험용액중
검출농도,검체량과최종시험용액
의부피를고려하여정량한다.
나)정량한계
레바미졸:0.01mg/kg(소고기·돼
지고기·가금류고기·유0.005mg/kg)
트리클로르폰:0.01mg/kg(돼지고기·
가금류고기·알·어류0.005mg/kg)
8.3.15말라카이트그린(MalachiteGreen),
크리스탈바이올렛(CrystalViolet)8.3.15.겐티안바이올렛(Gentianviolet),
말라카이트그린(Malachitegreen),- 115 -현 행 개 정(안)
1)시험법적용범위
축․수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체를아세토니트릴과디클로로메
탄으로추출하고감압농축한후,
2,3-디클로로-5,6-디시아노-1,4-벤
조퀴논(2,3-dichloro-5,6-dicyano
-1,4-benzoquinone,DDQ)을이용하
여류코말라카이트그린(Leuco
-malachitegreen)및류코크리스탈
바이올렛(Leuco-crystalviolet)을각
각말라카이트그린및크리스탈바
이올렛으로산화시키고SPE(Solid
PhaseExtraction)칼럼으로정제하
여액체크로마토그래프/가시선흡광
검출기로분석한다.
3)장치
액체크로마토그래프/가시선흡광검출
기(UVphotometricdetector)메틸렌블루(Methyleneblue)
동시시험법
1)시험법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중분석대상물질을 1%초산
으로처리후1%초산함유아
세토니트릴로추출하고무수황
산나트륨(Na2SO4)과C18,PSA으
로정제한후액체크로마토그래프
/질량분석기로분석한다.
3)측정기기
액체크로마토그래프/질량분석기
(LC-MS/MS)
- 116 -현 행 개 정(안)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그래프용또
는이와동등한것
나)물：3차증류수또는이와동등
한것
다)표준원액：말라카이트그린및
크리스탈바이올렛표준품을정
밀히달아메탄올에녹여100μ
g/mL로하고갈색유리병에보
관한다.
라)표준용액：표준원액을이동상A
에적당한농도로희석하여사용
한다.
마)1mM2,3-디클로로-5,6-디시아노-1,4-
벤조퀴논(2,3-dichloro-5,6-dicyano
-1,4-benzoquinone,DDQ)용액：2,3-디
클로로-5,6-디시아노-1,4-벤조퀴논
(2,3-dichloro-5,6-dicyano-1,4-benzoquino
ne,DDQ)0.227g을100mL메스
플라스크에취하고아세토니트릴
로녹여표시선까지채워10mM
DDQ용액을만들어냉장보관한
다.사용직전에10mMDDQ용
액을아세토니트릴로10배희석
하여사용한다.4)시약및시액
가)용매:액체크로마토그래프용또
는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동등
한것
다)표준원액:100mL용량플라
스크에각표준품을정밀히
달아메탄올에녹여1000
mg/L이되게한다.(류코겐
티안바이올렛은5%DMSO
함유메탄올에녹여100
mg/L가되게한다.)
라)혼합표준용액:각물질의표준
원액을100mg/L농도로부터
50%아세토니트릴로희석하
여필요한농도가되게한다.
마)1%초산수용액:1,000mL
용량플라스크에초산10mL를
넣고물로표시선까지채운다.
바)1%초산함유아세토니트릴
용액:1,000mL용량플라스
크에초산10mL를넣고아세
토니트릴로표시선까지채운다.
사)10mM초산암모늄,0.1%개미
산수용액:1,000mL용량플라스- 117 -현 행 개 정(안)
바)25%염산수산화아민용액
(Hydroxylamine
hydrochloride,HAH)：염산수
산화아민25g을100mL메스
플라스크에취하고물로녹여
표시선까지채운다.
사)1Mp-톨루엔설폰산(p-Toluene
sulfonicacid,p-TSA)용액：p-
톨루엔설폰산9.5g을50mL메
스플라스크에취하고물로녹여
표시선까지채운다.
아)5mMp-톨루엔설폰산/0.1M초
산암모늄완충용액：7.7g초산암
모늄을1L메스플라스크에취하
고물로녹여표시선까지채운다.
초산8mL와1Mp-톨루엔설폰
산5mL를넣어pH4.5로조정
한다.이액은이동상A용액조
제시사용한다.
자)알루미나(충진제Alumina,중성)
카트리지또는이와동등한것
차)프로필설폰산(충진제Propylsulfonic
acid,PRS)카트리지또는이와
동등한것
카)기타시약：특급크에초산암모늄0.7708g과개
미산1mL을넣고물로표시선
까지채운다.
아)0.1%개미산을함유한아세토
니트릴:1,000mL용량플라
스크에개미산1mL를넣고
아세토니트릴로표시선까지
채운다.
자)기타시약:특급또는이와동
등한것
- 118 -현 행 개 정(안)
5)시험용액의조제
균질화한검체5g을50mL원심
분리관에취하고5mMp-톨루엔
설폰산/0.1M초산암모늄완충용액
5mL,25%염산수산화아민(HAH)
용액1mL,1Mp-톨루엔설폰산
(p-TSA)용액100μL를넣어30
초간강하게균질화한다.여기에
아세토니트릴25mL를넣어30초
간강하게진탕하고다시알루미나
(80~200메쉬(mesh))10g을넣어
15초간완전히혼합한후0℃,
2,000G에서5분간원심분리하고
상등액은미리물50mL와디에틸
렌글리콜2mL를넣은250mL분
액깔때기에옮긴다.다시아세토니
트릴25mL를넣어1분간강하게
진탕하고0℃,2,000G에서5분간
원심분리한후상등액을앞의액과
합한다.디클로로메탄25mL를넣
고분액깔때기를30초간흔들어섞
은후정치하여디클로로메탄층(아
래층)을취한다.다시디클로로메
탄25mL를넣어이과정을한번
반복하고40℃수욕중에서감압농5)시험용액의조제
각각의시료를균질화하여2g을
정밀히달아50mL폴리프로필렌
재질의튜브에취하고1%초산
수용액1mL를넣은후강하게
진탕한다.1%초산함유아세토
니트릴용액10mL을가하고무
수황산나트륨2g을넣어5분간
진탕한후4,700G,4℃에서10분
간원심분리한다.상층액을C18
100mg,PSA(primary
secondaryamine)100mg이담겨
진폴리프로필렌재질의튜브에취
한후5분간진탕한다.4,700G,
4℃에서10분간원심분리한뒤,
추출액중1mL을취하여0.2μm
멤브레인필터(PTFEmembrane
filter)로여과하여유리바이알에
담아시험용액으로사용한다.- 119 -현 행 개 정(안)
축한후잔류물을아세토니트릴3
mL에녹이고1mM2,3-디클로로
-5,6-디시아노-1,4-벤조퀴논
(2,3-dichloro-5,6-dicyano-1,4-ben
zoquinone,DDQ)용액3mL를넣
어30분간반응시킨다.알루미나
카트리지(충진제1g)및프로필설
폰산(Propylsulfonicacid,PRS)카
트리지(충진제500mg)를미리메
탄올5mL와아세토니트릴5mL
로활성화시키고,프로필설폰산카
트리지에아세토니트릴5mL를넣
은후알루미나카트리지를그위
에연결한다.검체를추출한액과
추출액이담겨있던플라스크를아
세토니트릴5mL로2회세척한액
을알루미나카트리지에흡착시키
고감압하여분당4mL로용출하
고알루미나카트리지를제거한다.
프로필설폰산카트리지를아세토
니트릴5mL로세척하고감압하여
건조시킨후15mL원심분리관에
이동상A용액4mL로용출한액
을받아이동상A용액으로5mL
눈금에맞춘후0.2μm막여과지
- 120 -현 행 개 정(안)
(membranefilter)로여과하여시
험용액으로한다.
6)시험조작
가)측정조건
(1)칼럼：C18(4.6×250mm,5μm)
또는이와동등한것
(2)이동상
(가)이동상A(95%)：5mMp-
톨루엔설폰산/0.1M초산암
모늄완충용액：아세토니트
릴(50:50)
(나)이동상B(5%)：아세토니트
릴
(3)유속：1.0mL/분
(4)측정파장：618nm(말라카이트그린)
588nm(크리스탈바
이올렛)
7)정량시험
가)시험용액및표준용액을위의조
건에따라액체크로마토그래프에
주입한다.얻어진각피크의머무
름시간을비교하여피크의높이
또는면적으로검량선을작성하
여검체중말라카이트그린및
크리스탈바이올렛의함량을각6)시험조작
가)액체크로마토그래프측정조건
(1)칼럼:C18(ImtaktCadenza
CD-C18UP,2.0mmｘ150
mm,3µm)또는이와동등한
것
(2)이동상
(가)이동상A:10mM초산
암모늄,0.1%개미산함유
수용액
(나)이동상B:0.1%개미산
함유아세토니트릴
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
0955
1955
51090
81090
8.1955
12955
(3)유속:0.3mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:2μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(Positive)- 121 -현 행 개 정(안)
각구한다.
나)정량한계：2μg/kg
8)확인시험
액체크로마토그래프/질량분석기
(LC-MS/MS)로정성시험과동일한
조건에서얻어진시험결과에의해
피크높이법또는피크면적법에따
라확인한다.
가)액체크로마토그래프조건
(1)칼럼：C18(2.0×100mm,3μm)
또는이와동등한것
(2)이동상
(가)이동상A：0.1%개미산수용액
(나)이동상B：0.1%개미산메탄올
용액
시간(분)이동상 A(%) 이동상 B(%)
0.0 80 20
1.5 80 20
6.0 0 100
8.0 0 100
8.5 80 20
10.0 80 20
(3)유속：0.3mL/분
나)질량분석기조건
(1)Ionization：ESI(positive)
(2)CapillaryTemperature：450℃
(3)Collisiongas：질소물질명
(Compound)머무름
시간
(분)분자
량선구이온
(Precusor
ion,
m /z)생성이온
(Product
ion,
m/z)충돌
에너지
(Collision
energy,
eV)
겐티안
바이올렛
(Gentian
violet)6.1 372.5 372.1235.1 55
340.2 55
356.2 39
류코겐티안
바이올렛
(Leucogentian 
violet)7.9 373.5 374.1238.2 28
239.2 35
358.3 32
류코말라카
이트그린
(L eu co m a lach ite 
green)7.9 330.5 331.0223.1 55
239.2 31
316.2 21
말라카이트
그린
(Malachite
green)5.5 329.5 329.1165.2 55
208.2 34
313.2 36
메틸렌블루
(Methylene
blue)4.6 284.4 284.0240.1 33
252.1 52
268.1 34
아주르 B
(Azure B)4.4 270.4 269.9212.1 52
228.1 34
254.1 33(2)Capillarytemperature:300℃
(3)Collisiongas:아르곤(Ar)
(4)분석대상물질의조건
※밑줄표시되어있는것은정량이온이
며그외이온들은정성이온임
※각생성이온(Production)에대한질량
분석기의기기조건은사용기기의최적
값으로변경하여사용할수있으며,제
시된이외의생성이온도적용이가능함
- 122 -현 행 개 정(안)
Compound선구이온
(Precursor
ion, m/z)생성이온
(Product
ion, m/z)Collision
Energy (V)
Malachite
green329 313 51
329 208 51
329 165 91
Crystal
violet372 356 55
372 340 757)정성및확인시험
위의조건으로얻어진크로마토그
램상의피크는표준용액피크의
머무름시간과비교하여일치하여
야한다.또한표준용액과시험용
액의선구이온(Precursorion)및
생성이온(Production)이일치하여
야하고,표준용액과시험용액의
생성이온간반응세기의비율(Ion
ratio)을비교하여그비율이허용
범위(±20∼30%)이내에서일치
하여야한다주1).확인시험의경우,
음성검체(Blanksample)에측정물
질을첨가한것을검체와동일하
게전처리하여얻은표준용액으로
서비교한다.
주1.생성이온간반응세기의비율
허용범위
이온간반응세기의
비율 (%)허용범위
>50%±20%
>20%,≤50%±25%
>10%,≤20%±30%- 123 -현 행 개 정(안)
나)표준용액크로마토그램
그림1.아주르B(4.4분),메틸렌블루
(4.6분),말라카이트그린(5.6분),겐티안
바이올렛(6.1분),류코말라카이트그린
(7.9분),류코겐티안바이올렛(7.9분)
표준품의크로마토그램(0.001mg/L)
8)정량시험
가)정량
조직표준곡선(Tissuestandard
curve)작성을위하여각해당물
질이검출되지않은음성검체
(Blanksample)를2g씩준비한
후공시료를포함하여5개이상
의농도로전처리하여표준용액
을제조한다.확인시험과같은
조건에서공시료를포함하여각
농도별첨가시료에서얻어진크
로마토그램상의각피크높이또
는면적을구하여검량선을작성
한후시험용액의크로마토그램
으로부터정량이온(Quantitative
- 124 -현 행 개 정(안)
ion)의각피크높이또는피크
면적에따라산출된시험용액
중검출농도,검체량과시험용
액농축액의부피를고려하여
정량한다.
나)정량한계
말라카이트그린:0.002mg/kg
류코말라카이트그린:0.002
mg/kg
메틸렌블루:0.002mg/kg
아주르B:0.002mg/kg
겐티안바이올렛:0.002mg/kg
류코겐티안바이올렛:0.002
mg/kg
8.3.16∼8.3.23.1(생략)
8.3.23.2제2법
1)시험법적용범위
계란,메추리알등알(卵)류등에
적용한다.
2)∼7)(생략)
8.3.24스피라마이신(Spiramycin)
8.3.24.1제1법
1)시험법적용범위8.3.16∼8.3.23.1(현행과같음)
8.3.23.2제2법
1)시험법적용범위
달걀,---------------------
---------.
2)∼7)(현행과같음)
8.3.24스피라마이신(Spiramycin),타
일로신(Tylosin),키타사마이신
(Kitasamycin)
1)시험법적용범위- 125 -현 행 개 정(안)
우유,산양유등유(乳)류등에적용
한다.
2)분석원리
검체에서클로로포름으로스피라마
이신을추출하여디올카트리지
(diol-cartridge)로정제한후액체크
로마토그래프/자외선흡광검출기(UV
photometricdetector)로측정한다.
3)장치
액체크로마토그래프/자외선흡광검출
기(UVphotometricdetector)
4)시약및시액
가)표준원액：스피라마이신25mg을
5mL메탄올에녹인후물로25mL
까지채운다.
나)표준용액：물로희석해서사용하
며4℃에서보관한다.
다)디올카트리지：ChromabondC18ec
(500mg,45μmparticlesize)또
는이와동등한것
라)기타시약：특급축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중분석대상물질을 메탄올/
아세토니트릴(25:75,v/v)용액(닭
고기,돼지고기는100%아세토니
트릴)으로추출하고아세토니트릴
포화헥산으로정제한후액체크로
마토그래프/질량분석기로분석한
다.
3)측정기기
액체크로마토그래프/질량분석기
(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그래프용
또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동
등한것
다)표준원액:100mL용량플라스
크에표준품을각각정밀히달
아메탄올에녹여100mg/L가
되게한다.조제된표준원액은
냉동보관한다.
라)혼합표준용액:각물질의표
준원액100mg/L농도로부터
- 126 -현 행 개 정(안)
5)시험용액의조제
가)추출
10℃에서5분동안원심분리(4,000
G)한우유수층1mL을유리시험관
에취하여2mL클로로포름을가하
고3분동안50rpm으로혼합한후
10℃에서15분동안원심분리(4,000
G)한다음클로로포름층1mL를취
하여정제한다.
나)정제
디올카트리지를활성화시키기위메탄올로희석하여필요한농
도가되게한다.
마)0.1%개미산(Formicacid)용액
:1,000mL용량플라스크에개
미산1mL을넣고물로표시
선까지채운다.
바)0.1%개미산함유아세토니트릴
용액:1,000mL용량플라스크
에개미산1mL을넣고아세
토니트릴로표시선까지채운
다.
사)기타시약：특급또는이와동
등한것
5)시험용액의조제
가)가금류고기와돼지고기를제외
한식품
균질화한검체2g을50mL원
심분리관에취한다.메탄올/아세
토니트릴(25:75,v/v)용액10mL
를가하여30초간진탕하고10분
간초음파처리한후상온에서
4,700G로10분간원심분리한다.
상층액을취하여50mL원심분
리관에옮기고아세토니트릴포- 127 -현 행 개 정(안)
하여1mL아세토니트릴:0.25%인
산(1:2),1mL아세토니트릴:물
(19:1),1mLTHF,1mL아세토니
트릴,1mL클로로포름순으로흘려
주고위의추출액1mL을넣고0.5
mL클로로포름으로씻어준후0.5
mL물：아세토니트릴(19：1)로용
출한다.이용출액을여과하여시험
용액으로한다.화헥산10mL를가한다.10분간
진탕한후하층액을취하여15
mL원심분리관으로옮긴다.이를
40℃수욕상에서5mL가될때
까지질소농축한다.농축액을1
분간진탕한후,0.2μm멤브레
인필터(PVDFmembranefilter)
로여과하여시험용액으로한다.
나)가금류고기와돼지고기
균질화한검체2g을50mL원
심분리관에취한다.ⓐ 100% 아
세토니트릴용액10mL를가하
여10분간진탕한후,상온에서
4,700G로10분간원심분리하여
상층액을취한다.ⓑ 100% 아세
토니트릴용액10mL를가하여
10분간진탕한후,상온에서
4,700G로10분간원심분리한다.
무수황산마그네슘1g을미리넣
어둔50mL원심분리관에 ⓐ와
ⓑ의상층액을합한다.아세토니
트릴포화헥산10mL을가한
후10분간진탕하고4,700G에서
10분간원심분리한다.상층액(헥
- 128 -현 행 개 정(안)
6)시험조작
가)측정조건
(1)칼럼：LiChrospher100RP-18(HP
사,4×125mm)또는이와동등
한것
(2)이동상：0.25%황산:아세토니트
릴(78:22)
(3)유속：1.0mL/분
(4)측정파장：UV231nm
7)정량시험
시험용액및표준용액50μL를위의
조건에따라액체크로마토그래프에
주입한다.얻어진각피크의머무름
시간(retentiontime)을비교해서피산층)을제거한다.하층(아세토
니트릴층)의약1/2을새로운15mL
원심분리관으로옮긴후40℃수
욕상에서2.5mL가될때까지질
소농축한다음나머지하층을옮
겨시료용액이5mL가될때까
지질소농축한다.농축액을1분
간진탕한후,0.2μm멤브레인
필터(PVDFmembranefilter)로
여과하여시험용액으로한다.
6)시험조작
가)액체크로마토그래프의측정조건
(1)칼럼:C18(Xbridge,2.1mmｘ
150mm,3.5μm)또는이와
동등한것
(2)이동상
(가)이동상A:0.1%개미산
용액
(나)이동상B:0.1%개미산
함유아세토니트릴용액
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
08515
115050
11.1 8515
168515- 129 -현 행 개 정(안)
크의높이또는면적으로검량선을
작성하여검체중스피라마이신의
함량을구한다.
8.3.24.2제2법
1)시험법적용범위
유(乳)를제외한축․수산물등에적
용한다.
2)분석원리
검체중스피라마이신을아세토니트
릴로추출하고헥산으로지방을제
거한후액체크로마토그래프/자외선
흡광검출기(UVphotometricdetector)
로분석한다.
3)장치
액체크로마토그래프/자외선흡광검출
기(UVphotometricdetector)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그래프용또
는이와동등한것
나)물：3차증류수또는이와동등
한것
다)표준원액：스피라마이신표준품
을정밀히달아100mL메스플
라스크에취하고메탄올로표시(3)유속:0.25mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(Positive)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Capillaryvoltage:3.8kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤)
(5)분석대상및개별조건(MRM조건)
물질명
(Compoun
d)머무름
시간
(분)분자량
(MW)선구이온
(Precursor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,
eV)
스피라마이신
(Spiramycin)4.46842.5843.983.050
141.928
174.030
타일로신
(Tylosin)7.93915.5916.888.170
101.145
174.135
키타사마이신
(Kitasamycin)8.63771.4772.683.050
109.140
174.130
※밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이
며그외이온들은 정성이온임
※각생성이온 (Product ion)에대한 질량분
석기의 기기조건은 사용기기의 최적값
으로 변경하여 사용할 수있으며 ,제시
된이외의 생성이온도 적용이 가능함
7)정성및확인시험
위의조건으로얻어진크로마토그
램상의피크는표준용액피크의머
무름시간과비교하여일치하여야
- 130 -현 행 개 정(안)
선까지채워100μg/mL농도가
되게한다.
라)표준용액：표준원액을0.05M인
산완충용액(pH4.5)과아세토니
트릴혼합액(70:30)에적당한농
도로희석하여사용한다.
마)0.05M인산완충용액(pH4.5)：1L
메스플라스크에인산이수소나트
륨․2수화물(NaH2PO4․2H2O)
3.9g을넣고물800mL로용해
시킨후물로표시선까지채운다.
pH는인산으로조정한다.
바)0.025M인산완충용액(pH2.5)：
1L메스플라스크에인산이수소
나트륨․2수화물(NaH2PO4․
2H2O)2.0g을넣고물800mL로
용해시킨후물로표시선까지채
운다.pH는인산으로조정한다.
사)기타시약：특급
5)시험용액의조제
균질화한검체1g을50mL원심
분리관에취하고아세토니트릴20
mL를가하여20분간균질화한다.
균질액을2,500G에서10분간원
심분리한후상층액을여과지로한다.또한표준용액과시험용액의
선구이온(Precursorion)및생성이
온(Production)이일치하여야하
고,표준용액과시험용액의생성이
온간반응세기의비율(Ionratio)을
비교하여그비율은주1)과일치하
여야한다.확인시험의경우,음성
검체(Blanksample)에측정물질을
첨가한것을검체와동일하게전
처리하여얻은표준용액으로서비
교한다.
주1.생성이온간반응세기의비율
허용범위
이온간반응세기의
비율 (%)허용범위
>50% ≤20%
>20%,≤50% ≤25%
>10%,≤20% ≤30%
나)표준품크로마토그램
(1)스피라마이신(4.71분)- 131 -현 행 개 정(안)
여과하여분액깔때기에옮긴다.
위의과정을2회반복하여상층액
을합한후아세토니트릴포화헥산
10mL를넣고진탕한다.층이분
리될때까지정치하여헥산층을
버리고추출된용액을무수황산나
트륨에통과시키고45℃이하의
수욕중에서감압하여농축한다.
잔류물은0.05M인산완충용액
(pH4.5)과아세토니트릴혼합액
(70:30)1mL에녹인후막여과지
(membranefilter)로여과하여시
험용액으로한다.
6)시험조작
가)측정조건
(1)칼럼：C18(4.6×250mm,5μm)
또는이와동등한것
(2)이동상
(가)이동상A：0.025M인산완
충용액(pH2.5)
(나)이동상B：이동상A와아세
토니트릴혼합액(60:40)
시간 (분) A(%) B(%)
0.00 60 40
20.00 0 100
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
유 새우
넙치 장어
(2)타일로신(7.93분)
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
유 새우
넙치 장어
(3)키타사마이신(8.63분)
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
유 새우
넙치 장어
- 132 -현 행 개 정(안)
(3)유속：1.0mL/분
(4)측정파장：232nm
7)정량시험
시험용액및표준용액을위의조건
에따라액체크로마토그래프에주입
한다.얻어진각피크의머무름시간
을비교하여피크의높이또는면적
으로검량선을작성하여검체중스
피라마이신의함량을각각구한다.8)정량시험
가)정량
조직표준곡선(Tissuestandard
curve)작성을위하여각해당
물질이검출되지않은음성검체
(Blanksample)2g씩준비한후
공시료를포함하여5개이상의
농도로전처리하여표준용액을
제조한다.확인시험과똑같은조
건에서공시료를포함하여각농
도별첨가시료에서얻어진크로
마토그램상의각피크높이또는
면적을구하여검량선을작성한
후시험용액의크로마토그램으로
부터정량이온(Quantitativeion)
의각피크높이또는피크면적
에따라산출된시험용액중검
출농도,검체량과시험용액농축
액의부피를고려하여정량한다.
나)정량한계
스피라마이신:0.05mg/kg(알
0.005mg/kg)
타일로신:0.001mg/kg(어류0.005
mg/kg,소고기․알0.05mg/kg)- 133 -현 행 개 정(안)
키타사마이신:0.005mg/kg(소고기․
알․갑각류0.05mg/kg)
8.3.25∼8.3.47(생략)
8.3.48클로산텔(Closantel)
1)시험법적용범위
축산물등에적용한다.
2)분석원리
근육등가식부위에존재하는클로산
텔을아세토니트릴로추출하고추출
액을C18카트리지에적용하여정제
한다음아세토니트릴로용출하여
액체크로마토그래프에서역상칼럼으
로분리하고자외선흡광검출기(UV
photometricdetector)를이용하여
정량한다.
3)장치
액체크로마토그래프/자외선흡광검출
기(UVphotometricdetector)
4)시약및시액
가)표준용액：클로산텔을메탄올에
녹여10ppm으로조정하여표준
용액으로사용한다.8.3.25∼8.3.47(현행과같음)
8.3.48.클로산텔(Closantel),클로술론
(Clorsulon),니트록시닐(Nitroxynil)
동시시험법
1)시험법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중분석대상물질을 개미산
암모늄이포함된아세토니트릴과
물혼합용액(5:1,v/v)으로추출하
고MgSO4와PSA로정제한후
액체크로마토그래프/질량분석기로
분석한다.
3)측정기기
액체크로마토그래프/질량분석기
(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매：액체크로마토그래프용또는
이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동
- 134 -현 행 개 정(안)
나)기타시약：특급
5)시험용액의조제
가)추출
검체5g을원심분리관에취하여아
세토니트릴30mL을가한다.약30
초간강렬하게흔든다음진탕기에
서15분가량진탕한다(300회/분).
원심분리한다음상층액을100mL
농축플라스크에취한다.처음의원등한것
다)표준원액:100mL용량플라스크
에표준품을각각정밀히달아
아세토니트릴에녹여200mg/L
가되게한다.조제된표준원액은
냉동보관한다.
라)혼합표준용액:각물질의표
준원액200mg/L농도로부터
아세토니트릴로희석하여필요
한농도가되게한다.
마)200mM개미산암모늄:100mL
용량플라스크에개미산암모늄
1.26g을넣고물로표시선까
지채운다.
바)기타시약：특급또는이와동
등한것
5)시험용액의조제
균질화한검체2g을50mL원심
분리관에취하고200mM개미산
암모늄0.1mL과물2mL을가
하여1분간균질화한다.아세토니
트릴10mL을가하여10분간진
탕하고-4℃에서4,700G로10분
간원심분리한후,상층액을취한- 135 -현 행 개 정(안)
심분리관에다시아세토니트릴10
mL을가하여잘혼합한후진탕기
에서약10분간진탕한다음원심분
리하여상층액을농축플라스크에
합한다.진공증발기에서약2mL가
될때까지증발건조한다음6mL
원심분리관에취한다.농축플라스
크에아세토니트릴1mL씩3회가
하여잘닦은다음원심분리관에합
하여증발건조기에서3mL가되도
록증발건조한다.0.4%개미산3
mL을가하여혼합한후원심분리
한다.
나)정제
역상C18카트리지에메탄올2mL
과물3mL을가하여칼럼을활성
화시킨다.검체추출과정에서얻어
진상층액을칼럼에가한후통과시
킨다음칼럼을약3분간흡인하여
충분히말린다.검체가담긴원심분
리관에아세토니트릴3mL를가하
여혼합하여,원심분리과정을거친
후칼럼에가한다.용출액을12mL
원심분리관에취한다.다시원심분
리관에아세토니트릴3mL를가하다.900mgMgSO4와150mg
PSA를미리넣어둔50mL원심
분리관에상층액을합한후10분
간진탕하고-4℃에서4,700G로
10분간원심분리한다.상층액을
15mL원심분리관에취한뒤,5
0℃수욕상에서4mL가되도록
질소농축한다.농축액을1분간진
탕한후,0.2μm멤브레인필터
(PVDFmembranefilter)로여과
하여시험용액으로한다.
- 136 -현 행 개 정(안)
여혼합하여원심분리한후칼럼에
가하여용출하여합한다.Speed
Vac(40℃,260mbar)에서건조한
다음잔류물에메탄올500μL를가
하여녹인후여과하여시험용액으
로한다.
6)시험조작
가)측정조건
(1)칼럼：LiChroCART250-4LiChrospher
100RP-18endcapped(4×250mm,
5μm)또는이와동등한것
(2)칼럼온도：40℃
(3)이동상A：초산완충용액pH5.0
(4)이동상B：아세토니트릴
시간(분)08.51516
이동상농도(%A)80101080
이동상농도(%B)20909020
(5)유속：1mL/분
(6)측정파장：UV370nm6)시험조작
가)액체크로마토그래프의측정조건
(1)칼럼:C18(Xselect,2.1mmｘ
150mm,3.5μm)또는이와
동등한것
(2)이동상
(가)이동상A:5%초산함유
10mM초산암모늄용액
(나)이동상B:아세토니트릴
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
09010
2.1 9010
4. 595
8595
109010
(3)유속:0.25mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5μL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(Negative)
(2)Capillarytemperature:500℃- 137 -현 행 개 정(안)
(3)Capillaryvoltage:1.5kV
(4)Collisiongas:Ar(아르곤)
(5)분석대상및개별조건(MRM조건)
물질명
(Compound)머무름
시간
(분)분자량
(MW)선구이온
(Precursor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,
eV)
클로산텔
(Closantel)5.92663.1661127-50
279 -42
344-34
클로술론
(Clorsulon)4.73380.6378142-26
242-22
342 -10
니트록시닐
(Nitroxynil)4.77290.0289116-34
127 -26
162-20
※밑줄표시되어있는것은정량이온이
며그외이온들은정성이온임
※각생성이온(Production)에대한질량
분석기의기기조건은사용기기의최적
값으로변경하여사용할수있으며,
제시된이외의생성이온도적용이가
능함
7)정성및확인시험
위의조건으로얻어진크로마토그
램상의피크는표준용액피크의머
무름시간과비교하여일치하여야
한다.또한표준용액과시험용액의
선구이온(Precursorion)및생성이
온(Production)이일치하여야하
고,표준용액과시험용액의생성이
- 138 -현 행 개 정(안)
온간반응세기의비율(Ionratio)을
비교하여그비율은주1)과일치하
여야한다.확인시험의경우,음성
검체(Blanksample)에측정물질을
첨가한것을검체와동일하게전
처리하여얻은표준용액으로서비
교한다.
주1.생성이온간반응세기의비율
허용범위
이온간반응세기의
비율(%)허용범위
>50% ≤20%
>20%,≤50% ≤25%
>10%,≤20% ≤30%
나)표준품크로마토그램
(1)클로산텔(5.92분)
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
우유 새우
넙치 장어
(2)클로술론(4.73분)- 139 -현 행 개 정(안)
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
우유 새우
넙치 장어
(3)니트록시닐(4.77분)
소고기 돼지고기
닭고기 달걀
우유 새우
넙치 장어
8)정량시험
가)정량
조직표준곡선(Tissuestandard
curve)작성을위하여각해당
물질이검출되지않은음성검체
(Blanksample)를2g씩준비한
후공시료를포함하여5개이상
의농도로전처리하여표준용액
을제조한다.확인시험과똑같은
- 140 -현 행 개 정(안)
조건에서공시료를포함하여각
농도별첨가시료에서얻어진크
로마토그램상의각피크높이또
는면적을구하여검량선을작성
한후시험용액의크로마토그램
으로부터정량이온(Quantitative
ion)의각피크높이또는피크
면적에따라산출된시험용액중
검출농도,검체량과최종시험용액
의부피를고려하여정량한다.
나)정량한계
클로산텔:0.01mg/kg
클로술론:0.01mg/kg
니트록시닐:0.01mg/kg
8.3.49타일로신(Tylosin)
8.3.50트리클로르폰(Trichlorfon,Metrifonate)
8.3.51∼8.3.54(생략)
8.3.55키타사마이신(Kitasamycin)
8.3.56∼8.3.68(생략)<삭제>
<삭제>
8.3.49∼8.3.52(현행8.3.51∼
8.3.54과같음)
<삭제>
8.3.53∼8.3.65(현행8.3.56∼
8.3.68과같음)- 141 -현 행 개 정(안)
닭고기(7.15분)
계란(7.15분)
그림.표준용액의크로마토그램(각0.01mg/L)8.3.69니트록시닐(Nitroxynil),클로
술론(Clorsulon)
8.3.70∼8.3.119(생략)
8.3.120
1)∼5)(생략)
6)시험조작
가)∼다)(생략)
라)표준품의크로마토그램
마)(생략)
7)∼8)(생략)
닭고기(7.15분)
달걀(7.15분)
그림.표준용액의크로마토그램(각0.01mg/L)<삭제>
8.3.66∼8.3.115(현행8.3.70∼
8.3.119와같음)
8.3.116
1)∼5)(현행과같음)
6)시험조작
가)∼다)(현행과같음)
라)표준품의크로마토그램
마)(현행과같음)
7)∼8)(현행과같음)
9.식품중유해물질
9.1∼9.15(생략)9.식품중유해물질
9.1∼9.15(현행과같음)
9.16우루시올확인시험
가.시험법적용범위9.16우루시올
가.시험법적용범위
- 142 -현 행 개 정(안)
옻나무를원료로사용한식품에
적용한다.
나.분석원리
식품내에존재하는우루시올을
에탄올로교반추출한후액체크
로마토그래프를이용하여분석한
다.또한,액체크로마토그래프-질
량분석기를이용하여우루시올
성분을재확인한다.
다.장치
액체크로마토그래프-자외선흡광
검출기(UVphotometricdetector)
및액체크로마토그래프-질량분석
기(LC-MS/MS)를사용한다.
라.시약및시액
1)용매：특급또는이와동등한것
2)물：증류수또는이와동등한것
3)표준원액：우루시올(I,II)표준품
을아세토니트릴에녹여500μ
g/mL가되도록한다.
4)표준용액：표준원액을각각아세
토니트릴에녹여적당한농도로(현행과같음)
나.분석원리
식품내에존재하는우루시올을
아세토니트릴로추출한후dSPE
(dispersiveSPE)로정제하여액
체크로마토그래프-질량분석기로
분석한다.
다.장치
액체크로마토그래프-질량분석기
(LC-MS/MS)
라.시약및시액
1)용매:액체크로마토그래프용또는
이와동등한것
2)물:3차증류수또는이와동등
한것
3)표준원액:우루시올표준품을메
탄올에녹여1,000 μg/mL가되게
한다음-70°C에서차광보관한
다.
4)혼합표준용액:각표준원액을메
탄올에적당한농도로희석하여- 143 -현 행 개 정(안)
각각혼합,희석한다.
<신설>
5)기타시약：특급또는이와동등
한것성분명CAS
No.분자
식화학구조
우루시올
Ⅰ
(C15:0)492-8
9-7C21H3
6O2
우루시올
Ⅱ
(C15:1)35237
-02-6C21H3
4O2
우루시올
Ⅲ
(C15:2)83258
-37-1C21H3
2O2
우루시올
Ⅴ
(C15:3)83543
-37-7C21H3
0O2
라콜
(C17:0)5862-
27-1C23H4
0O2
검량선작성을위한표준용액으
로한다.조제한용액은물질의
안정성문제로-70°C에서30일
동안차광보관및사용한다.
표1.우루시올표준품정보
5)추출용액(50mM아세트산암모
늄(ammoniumacetate)버퍼(pH
4.1)+0.1MEDTA):500mL
용량플라스크에아세트산암모늄
1,927mg을적당량의물에녹여
표시선을맞추고(정용하고)pH가
4정도되는지확인한다.여기에
- 144 -현 행 개 정(안)
<신설>
<신설>
<신설>
마.시험용액의조제
검체20g을취하여에탄올(95%)
100mL를첨가한후3시간이상
교반추출한다.이를부흐너깔때기
로흡인여과후에탄올로잔사EDTA14.6g을넣고충분히녹
을때까지1시간초음파처리한
다.EDTA가완전히녹지않으므
로상온에서보관하며상층액만
사용하고,필요하다면원심분리
후사용한다.
6)정제용시약(dSPE카트리지):QuEChERS
정제용또는이와동등한것
가)물추출물등액상검체:PSA(Primary
secondaryamine):C18:황산마그네슘이
1:1:6의비율(6.25mg:6.25mg:37.5
mg)로혼합된시약
나)장류등고상검체:PSA:황산마그
네슘이1:6(50mg:300mg)의
비율로혼합된시약
7)0.1%개미산(Formicacid)용액:1,000
mL용량플라스크에개미산1mL을넣고
물로표시선까지채운다(정용한다).
8)기타시약:특급또는이와동등한것
마.시험용액의조제
1)추출
균질화된시료2g(된장의경우
1g)을정밀히달아50mL원심
분리관에취하고추출용액5mL- 145 -현 행 개 정(안)
(residue)및용기를세척하여여
액을모아40℃이하의수욕중에
서감압농축한다.잔류물을아세
토니트릴2mL에녹여0.2μm시
린지필터로여과한후시험용액으
로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프측정조건
가)칼럼:C18(2.1×100mm,1.7μm)를가한후교반기(vortex
mixer)로1분간혼합한다.아세
토니트릴5mL와염화나트륨1
g을가하고,교반기로1분간추
출한다음,4℃,2,700G에서10
분간원심분리한다.
2)정제
15mL원심분리관에정제용시
약(dSPE카트리지)50mg(액상
검체)또는350mg(고상검체)을
취하고분리된상층액전량을넣
는다.교반기로1분간혼합하고,
4℃,2,700G에서10분간원심분
리한뒤,상층액전량을새로운
15mL원심분리관에옮긴다.
40°C수용액상에서질소건고한
후,메탄올1mL를가하고교반
기로1분간혼합한후5분간초
음파처리하여용해시킨다.이
액을4℃,13,500G에서3분간
원심분리한후,상층액을최종
시험용액으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프측정조건
가)칼럼:C18(2.0×150mm,5μm)
- 146 -현 행 개 정(안)
또는이와동등한것
나)이동상
-A:0.1%트리플루오로초산용액
-B:아세토니트릴
TimeA(%)B(%)
0.09010
5.09010
20.0595
27.0595
29.09010
30.09010
다)유속：0.2mL/min
라)검출기：자외선흡광검출기
(UVphotometricdetector)(276nm)
마)컬럼온도：60℃
바)시험용액주입량：10µL
2)검량선작성또는이와동등한것
나)칼럼온도:40°C
다)이동상
(1)이동상A:0.1%개미산용액
(2)이동상B:메탄올
(3)농도구배조건
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
0.02080
1.02080
3.00100
10.00100
10.52080
152080
라)유속:0.25mL/min
마)주입량:10μL
<삭제>
2)질량분석기측정조건- 147 -현 행 개 정(안)
표준용액을농도별로일정량을취
하여액체크로마토그래프에각각
주입한다.얻어진크로마토그램상
의각피크높이또는면적을구하
여검량선을작성한다.
<신설>
3)표준품의크로마토그램가)Ionization:ESInegative-ionmode
나)Ionsourcetemperature:350℃
다)Ionsprayvoltage:-4.5kV
라)Curtaingas:6psi
마)Collisiongas(N2):10psi
바)Ionsourcegas1:10psi
사)Ionsourcegas2:20psi
표2.액체크로마토그래프-질량분석
기분석을위한MRM조건
연번성분명
(Compound)머무름
시간
(분)분자량
(g/mol)선구이
온
(Precu
rsor
ion,m/
z)생성이
온
(Produ
ct
ion,m/
z)충돌에
너지
(Collisi
on
Energy
,eV)
1UrushiolⅠ8.98320.5319.1122.2
136.1-48
-46
2UrushiolⅡ8.41318.5317.1122.0
135.0-42
-56
3UrushiolⅢ8.00316.5315.3122.0
135.2-44
-50
4UrushiolⅤ7.65314.5313.3135.1
122.0-48
-44
5Laccol9.82348.6347.4121.9
135.0-52
-60
※밑줄표시되어있는것은정량이온
이며그외이온들은정성이온임
※각생성이온(Production)에대한
질량분석기의기기조건은사용
기기의최적값으로변경하여사
용할수있으며,제시된이외의
생성이온도적용이가능함
3)검량선작성
- 148 -현 행 개 정(안)Urushiol1 - 23.701
Urushiol2 - 25.124AU
0.0000.0050.0100.0150.0200.0250.0300.0350.0400.0450.050
Minutes0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00 30.00
<신설>우루시올의특성(산화반응에따른
폴리머형성등)을고려하여다음의
Matrix-matchedstandard(MMS)
조제법에따라처리한혼합표준용
액을농도별로취하여액체크로마
토그래프-질량분석기에주입한다.
얻어진크로마토그램상의정량이
온의각피크높이또는면적을구하
여검량선(Matrix-matched
calibrationcurve)을작성한다.
가)Matrix-matchedstandard(MMS)
조제법
음성검체(Blanksample)2g(된장
의경우1g)을정밀히달아50
mL원심분리관에취하고추출용
액5mL를가한후교반기(vortex
mixer)로1분간혼합한다.아세토
니트릴5mL과염화나트륨1g을
첨가하고,교반기로1분간추출한
다음,4℃,2,700G에서10분간원
심분리한다.15mL원심분리관에
정제용시약(dSPE카트리지)50
mg(액상검체)또는350mg(고상
검체)을취하고분리된상층액전
량을넣는다.교반기로1분간혼합- 149 -현 행 개 정(안)
4)정량한계:1.0mg/kg(우루시올I
과II의합으로써)하고,4℃,2,700G에서10분간원
심분리한뒤,상층액전량을새로
운15mL원심분리관에옮긴다.
각검량선농도[표3]에맞는혼합
표준용액0.2mL(된장의경우
0.1mL)을가하고,40°C수용액상
에서질소건고한다.메탄올1mL
을가하고교반기로1분간혼합한
후5분간초음파처리하여용해시
킨다.이액을4℃,13,500G에서3
분간원심분리한후,상층액을최
종표준용액으로한다.
표3.Matrix-matchedstandard조
제에사용한표준용액농도및
부피
검량선
농도혼합표준용액 농도첨가
부피
10ng/mL 100 ng/mL0.2mL
(된장의
경우
0.1mL)20ng/mL 200 ng/mL
30ng/mL 300 ng/mL
40ng/mL 400 ng/mL
50ng/mL 500 ng/mL
4)혼합표준용액의크로마토그램
- 150 -현 행 개 정(안)
<신설>
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토그램
상의피크가표준용액피크의머
무름시간과일치할때피크높이
또는면적을검량선에대입하여
정량한다.우루시올함량은I및II
그림1.액체크로마토그래프-질량
분석기에서표준용액의크로마토
그램
5)정량한계는우루시올Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅴ,
라콜각각에대하여10μg/kg을
적용한다.
사.정성시험
위의조건으로얻어진표준용액크
로마토그램상의피크머무름시간
과특성이온으로시험용액의우루시
올을확인한다.
아.정량시험
정성시험과동일한조건에서얻어
진시험용액크로마토그램상의피
크머무름시간과특성이온이표준
용액과일치할때정량이온에대한
피크높이또는면적을검량선에대- 151 -현 행 개 정(안)
의합으로계산한다.
1)계산
우루시올함량(mg/kg)=C×V/M×
D
C:검량선에서구한우루시올I
및II의각농도(μg/mL)
V:최종부피(mL)
M:시료채취량(g)
D:희석배수
아.확인시험
1)액체크로마토그래프-질량분석기
측정조건
가)칼럼:C18(2×100mm,3μm)
또는이와동등한것
나)이동상
-A:0.1%포름산용액
-B:메탄올
TimeA(%)B(%)
0.07030
1.17030
5.00100
13.00100
13.17030
20.07030
다)유속：0.2mL/min
라)이온화모드:ESI(negative)우루시올의함량(μg/kg)=CxD입하여정량한다.단,이때우루시올
함량은우루시올Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅴ,라콜의
합으로한다.
1)계산
C:검량선에서구한우루시올의함량
(μg/kg)
D:희석배수
<삭제>
- 152 -현 행 개 정(안)
마)컬럼온도：40℃
바)시험용액주입량：2µL
사)분자량범위:100∼500m/z
표1.액체크로마토그래프-질량분석기
분석을위한특성이온
성분머무
름
시간(
분)Precur
sor
ion(m/
z)Fragme
nt
ion(m/
z)Collisio
n
energy(
eV)
우루시
올I10.6319.2121.944
135.154
우루시
올II11.7347.2121.948
134.954
나)표준품의크로마토그램
우루시올 I
319.2 →121.9
우루시올 I
319.2 →135.1- 153 -현 행 개 정(안)
우루시올 II
347.2 →121.9
우루시올 II
347.2 →134.
9
9.17(생략)9.17(현행과같음)
10.식품표시관련시험법
10.1유전자변형식품의 시험법
(생략)
10.1.1∼10.1.4(생략)
10.1.5정성시험
가.∼나.(생략)
다.시약및시액
1)∼2)(생략)
표1.유전자변형콩의PCR검사에10.식품표시관련시험법
10.1유전자변형식품의 시험법
(현행과같음)
10.1.1∼10.1.4(현행과같음)
10.1.5정성시험
가.∼나.(현행과같음)
다.시약및시액
1)∼2)(현행과같음)
표1.유전자변형콩의PCR검사에
- 154 -현 행 개 정(안)
목적이벤트
(증폭산물크기 )프라이머 /
프로브염기서열
(생 략)
목적이벤트
(증폭산물크기 )프라이머 /
프로브염기서열
내재성 
유전자옥 수 수 
SSIIb1
(151 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
옥 수 수 
SSIIb3
(114 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
옥수수 adh1
(135 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
옥수수 hmg
(79 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
스크
리닝CaMV P35S
(101 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
NOS
(151 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
구조
유전자Bt176
(100 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
Bt11
(127 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
GA21
(133 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
T25
(149 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON810
(113 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
NK603
(143 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
NK603
(108 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)사용되는프라이머와프로브
<신설>
표2.유전자변형옥수수의PCR
검사에사용되는프라이머와
프로브목적이벤트
(증폭산물크기 )프라이머 /
프로브염기서열
(현행과 같음)
목적이벤트
(증폭산물크기 )프라이머 /
프로브염기서열
내재성 
유전자옥 수 수 
SSIIb1
(151 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
옥 수 수 
SSIIb3
(114 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
옥수수 adh1
(135 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
옥수수 hmg
(79 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
스크
리닝CaMV P35S
(101 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
NOS
(151 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
구조
유전자Bt176
(100 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
Bt11
(127 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
GA21
(133 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
T25
(149 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON810
(113 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
NK603
(143 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
NK603
(108 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)사용되는프라이머와프로브
*후대교배종은후대교배종을구성하는이벤트
의프라이머/프로브를사용하여검사한다.
표2.유전자변형옥수수의PCR
검사에사용되는프라이머와
프로브- 155 -현 행 개 정(안)
목적이벤트
(증폭산물크기 )프라이머 /
프로브염기서열
(생 략) (생 략)
TC1507
(103 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
TC1507
(58 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON863
(152 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON863
(84 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
DAS59122-7
(141 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
DAS59122-7
(84 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON88017
(100 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON88017
(95 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MIR604
(142 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MIR604
(76 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON89034
(112 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MIR162
(149 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MIR162
(92 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
DP098140-6 
(147 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
DP098140-6
(80 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
3272
(141 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
3272
(95 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON87460
(85 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON87460
(82 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
5307
(149 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
5307
(107 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON87427
(152 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON87427
(95 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)목적이벤트
(증폭산물크기 )프라이머 /
프로브염기서열
(현행과 같음) (현행과 같음)
TC1507
(103 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
TC1507
(58 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON863
(152 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON863
(84 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
DAS59122-7
(141 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
DAS59122-7
(84 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON88017
(100 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON88017
(95 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MIR604
(142 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MIR604
(76 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON89034
(112 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MIR162
(149 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MIR162
(92 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
DP098140-6 
(147 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
DP098140-6
(80 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
3272
(141 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
3272
(95 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON87460
(85 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON87460
(82 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
5307
(149 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
5307
(107 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON87427
(152 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON87427
(95 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
- 156 -현 행 개 정(안)
목적이벤트
(증폭산물크기 )프라이머 /
프로브염기서열
DAS40278-9
(144 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
DAS40278-9
(98 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
DP004114-3
(118 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
DP004114-3
(90 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON87411
(112 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON87411
(109 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON 87419
(184 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON87419
(97bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON 87403
(175 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MON87403
(88bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MZHG0JG
(154 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
MZHG0JG
(81 bp)(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
(생 략) (생 략)
<신  설><신  설> <신  설>
<신  설> <신  설>
<신  설><신  설> <신  설>
<신  설> <신  설>
<신  설> <신  설>
<신설>
표3.∼표4.(생략)
라.시험조작(PCR)
(본문생략)
①35S프로모터와NOS종결목적이벤트
(증폭산물크기 )프라이머 /
프로브염기서열
DAS40278-9
(144 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
DAS40278-9
(98 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
DP004114-3
(118 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
DP004114-3
(90 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON87411
(112 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON87411
(109 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON 87419
(184 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON87419
(97bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON 87403
(175 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MON87403
(88bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MZHG0JG
(154 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
MZHG0JG
(81 bp)(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
(현행과 같음) (현행과 같음)
VCO-01981-
5
(85 bp)VCO-01981
-5 primer 
F5'-CCA CTG AAC 
GTC ACC AAG 
AAG A-3'
VCO-01981
-5 primer 
R5'-GCC GCT ACT 
CGA GGG ATT 
TA-3'
VCO-01981-
5
(85 bp)VCO-0198
1-5 primer 
F5'-CCA CTG AAC 
GTC ACC AAG 
AAG A-3'
VCO-0198
1-5 primer 
R5'-GCC GCT ACT 
CGA GGG ATT 
TA-3'
VCO-0198
1-5 probe5'-FAM-CAG TAC 
TCA AAC ACT 
GAT AG-MGB-3'
*후대교배종은후대교배종을구성하는이벤트
의프라이머/프로브를사용하여검사한다.
표3.∼표4.(현행과같음)
라.시험조작(PCR)
(본문생략)
①----------------------- 157 -현 행 개 정(안)
인자(terminator)특이PCR
산물이모두확인된경우:
RRS,　MON89788,
A2704-12,DP356043-5,
DP305423-1,A5547-127,
MON87701,CV127,MON87705,
MON87708,MON87769,FG72,
DAS-44406-6,DAS-68416-4,
SYHTOH2,DAS81419-2,
MON87751(이상콩),Bt176,
Bt11,GA21,T25,MON810,
NK603,TC1507,MON863,
DAS59122-7,MON88017,
MIR604,MON89034,
MIR162,DP098140-6,3272,
MON87460,5307,MON87427,
DAS-40278-9,DP004114-3,
MON87411,MON87419,
MON87403,MZHG0JG(이상
옥수수)
②35S프로모터특이PCR산물
만확인된경우:MON89788,
A2704-12,DP356043-5,
DP305423-1,A5547-127,
MON87701, CV127,----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
------------- MZHG0JG,
VCO01981-5(이상옥수수)
②----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
- 158 -현 행 개 정(안)
MON87705,MON87708,
MON87769,DAS-44406-6,
DAS-68416-4,DAS81419-2,
MON87751(이상콩),Bt176,
T25,MON810,TC1507,
DAS59122-7,DP098140-6,
DAS-40278-9,DP004114-3,
MON87411,MON87419,
MON87403(이상옥수수)
③NOS종결인자(terminator)특
이PCR산물만확인된경우:
MON89788,DP356043-5,
DP305423-1,MON87701,
CV127,MON87705,
MON87708,MON87769,
FG72,DAS-44406-6,
DAS-68416-4,DAS81419-2,
MON87751(이상콩),GA21,
MIR604, MIR162,
DP098140-6,3272,5307,
DAS-40278-9,MON87419,
MON87403(이상옥수수)
④35S프로모터와NOS종결인----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
MON87403,VCO01981-5(이
상옥수수)
③----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
------------ MON87403,
VCO01981-5(이상옥수수)
④----------------------- 159 -현 행 개 정(안)
자(terminator)특이PCR산
물이모두확인되지않은경
우:MON89788,DP356043-5,
DP305423-1,MON87701,
CV127,MON87705,
MON87708,MON87769,
D AS - 4 4 4 0 6 - 6 ,
D AS - 6 8 4 1 6 - 4 ,
DAS-81419-2,MON87751
(이상콩),DP098140-6,
DAS-40278-9,MON87419,
MON87403(이상옥수수)
1)∼3)(생략)
마.∼바.(생략)
10.1.6∼10.1.10(생략)
10.1.11유전자변형면화
면화씨(cottonseed)또는그가공
식품에대하여실시간PCR장치
를사용하여해충저항성또는제
초제내성유전자변형면화를검
출하기위한정성분석법이다.
가.(생략)
나.시약및시액
1)(생략)----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
MON87403,VCO01981-5(이
상옥수수)
1)∼3)(현행과같음)
마.∼바.(현행과같음)
10.1.6∼10.1.10(현행과같음)
10.1.11유전자변형면화
-------------------------
-------------------------
--------유전자변형면화를검
출하기위한정성및정량분석법
--------------------.
가.(현행과같음)
나.시약및시액
1)(현행과같음)
- 160 -현 행 개 정(안)
목적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열<신설>
내재성
유전자면화
(76bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
구조
유전자531*
(72bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
1445
(87bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
15985
(82bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
MON88913
(94bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략)5'-FAM
-AAC
TAT
CAG
TGT
TTG
ACT
ACAT-
MGBNF
Q**-3'<신설>
LLCotton25
(79bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
281/3006
(111bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
GHB614
(120bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
T304-40
(79bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>2)실시간PCR용반응액의조제
표9의프라이머와프로브
(probe)를사용하면서PCR반
응액의총량을25μL로할경
우조성은표10,11,12,13,
14,15와같다.(이하생략)
표9.유전자변형면화의PCR검사에
사용되는프라이머와프로브
목적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열농도(nM)
내재성
유전자면화
(76bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)50
구조
유전자5311)
(72bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)50
1445
(87bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)50
15985
(82bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)50
MON88913
(94bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)500
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)500
(현 행 과  같 음)5'-FAM
-AAC
TAT
CAG
TGT
TTG
ACT
ACAT-
MGBNF
Q2)-3'100
LLCotton25
(79bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)200
281/3006
(111bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)350
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)450
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)175
GHB614
(120bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)200
T304-40
(79bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)4002)----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
-------표10과-------
-----.(이하현행과같음)
표9.유전자변형면화의PCR검사에
사용되는프라이머와프로브- 161 -현 행 개 정(안)
목적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
GHB119
(90bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
COT102
(101bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
MON88701
(84bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
DAS81910-7
(120bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
성 분 최종 농도(well) 1회 분량(μL) 
Universal Master 
Mix (2 X)1 X 12.5
프라이머 (각 10 
μM)각 150 nM 각 0.375
Probe (5 μM) 50 nM 0.25
주형 DNA(50 
ng/μL)100 ng 2
멸균증류수반응 총액이 25 
μL가 되도록 첨가9.5
전체량 25<신설>
*(생략)
**(생략)
표10.면화의내재성유전자와면
화531,1445,15985검사용
PCR반응액조성
표11.∼표15.(생략)
다.시험조작(실시간PCR장치
에의한정성분석)목적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열농도(nM)
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)200
GHB119
(90bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)200
COT102
(101bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)600
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)600
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
MON88701
(84bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)300
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)300
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)250
DAS81910-7
(120bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)300
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)300
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
성 분 최종 농도(well) 1회 분량(μL) 
Universal Master 
Mix (2 X)1)1 X 12.5
프라이머 (각 10 
μM)150 nM ~ 600 
nM0.375~1.5
Probe (10 μM) 50 nM ~ 350 
nM0.125~0.875
주형 DNA (20 
ng/μL)100 ng 5
멸균증류수 반응 총액이 25 μL가 되도록 첨가
전체량 25*후대교배종은후대교배종을구성하는이벤트
의프라이머/프로브를사용하여검사한다.
1)(현행과같음)
2)(현행과같음)
표10.유전자변형면화검사용실
시간PCR반응액조성
1)UniversalMasterMix또는이와동등한시약
을사용할수있다.
<삭제>
다.---------------------
----------------------
- 162 -현 행 개 정(안)
실시간PCR은기기에플레
이트나캐필러리를장착하고
분석프로그램을작동시켜
시료의정보를입력한후장
치의덮개온도(cover
temperature)가105℃정도
인것이확인되면반응을개
시한다.96웰(well)플레이
트방식의PCR반응조건은
표16,17과같으며,PCR반
응종료후실험결과를해석
한다.PCR반응조건은사용
하는실시간PCR기기에따라
최적조건으로변형하여사
용할수있으며,기기제조사
에별도문의하여적용한다.
표16.∼표17.(생략)
라.분석결과의판정
(생략)(표18).
표18.(생략)
<신설>----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
표11,12와-------------
-----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
----------------------
---------------------.
표11.∼표12.(현행표16.∼표
17.과같음)
라.정성분석--------
(현행과같음)(표13).
표13.(현행표18.과같음)
마.실시간PCR장치에의한정- 163 -현 행 개 정(안)
10.1.12유전자변형카놀라
(생략)
가.(생략)
나.시약및시액
1)프라이머와프로브(probe)
유전자변형카놀라검출에사
용되는프라이머와프로브
(probe)는표19와같으며,이
와동등한결과를얻을수있
는프라이머와프로브(probe)
를사용할수도있다.
2)실시간PCR용반응액의조제
표19의프라이머와프로브
(probe)를사용하면서PCR
반응액의총량을25μL로할
경우PCR반응액조성은표
20,21,22와같다.(이하생략)
표19.유전자변형카놀라의PCR검사량분석및분석결과의판정
유전자변형면화의혼입판별
을위한정량분석및분석결과
의판정은10.1.6정량시험에
따른다.
10.1.12유전자변형카놀라
(현행과같음)
가.(현행과같음)
나.시약및시액
1)프라이머와프로브(probe)
-----------------------
-----------------------
--------표14--------
-----------------------
-----------------------
---------.
2)실시간PCR용반응액의조제
표14------------------
-----------------------
-----------------------
-------------------- 표
15----.(이하현행과같음)
표14.유전자변형카놀라의PCR검사
- 164 -현 행 개 정(안)
목적이벤트
(증폭산물크기 )프라이머 /
프로브염기서열<신설>
내재성 
유전자카놀라
(101 bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
구조
유전자T45
(123 bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
GT73
(108 bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
Ms8
(130 bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
Rf3
(139 bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
MON88302
(101 bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
DP-073496-4
(84 bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
성 분 최종 농도(well) 1회 분량(μL) 
Universal Master 
Mix (2 X)1 X 12.5
프라이머 (각 10 
μM)각 200 nM 각 0.5
Probe (10 μM)    200 nM 0.5
주형 DNA(50 
ng/μL)  100 ng 2
멸균증류수반응 총액이 25 
μL가 되도록 첨가9
전체량 25        에사용되는프라이머와프로브
<신설>
표20.카놀라내재유전자검사용
PCR반응액조성목적이벤트
(증폭산물크기 )프라이머 /
프로브염기서열농도(nM)
내재성 
유전자카놀라
(101 bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)200
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)200
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)200
구조
유전자T45
(123 bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)200
GT73
(108 bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)50
Ms8
(130 bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)200
Rf3
(139 bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)200
MON88302
(101 bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)450
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)450
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)200
DP-073496-4
(84 bp)(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)600
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)600
(현 행 과  같 음)(현 행 과  같 음)250
성분최종농도(well)1회분량(μL)
UniversalMaster
Mix(2X)1)1X12.5
프라이머(각10
μM)150nM~600
nM0.375~1.5
Probe(10μM)50nM~250
nM0.125~0.625
주형DNA(40
ng/μL)200ng 5
멸균증류수반응총액이25μL가되도록첨가
전체량 25에사용되는프라이머와프로브
*후대교배종은후대교배종을구성하는이벤트
의프라이머/프로브를사용하여검사한다.
표15.유전자변형카놀라검사용실
시간PCR반응액조성
1)UniversalMasterMix또는이와동등한시약
을사용할수있다.- 165 -현 행 개 정(안)
표21.카놀라T45,Ms8,Rf3검사용
PCR반응액조성
(생략)
표22.카놀라GT73,MON88302,
DP-073496-4검사용PCR반응
액조성
(생략)
다.시험조작(실시간PCR장치
에의한정성및정량분석)
카놀라PCR반응조건은표23
과같으며,그외사항은
10.1.11유전자변형면화다.시
험조작(실시간PCR장치에의
한정성분석)및10.1.6정량시
험에따른다.
표23.(생략)
라.분석결과의판정
10.1.11유전자변형면화라.분
석결과의판정및10.1.6정량시험
사.결과의판정에따른다.
10.1.13유전자변형사탕무,알팔파
(alfalfa)<삭제>
<삭제>
다.시험조작(실시간PCR장치
에의한정성및정량분석)
------------------- 표16
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
--------.
표16.(현행표23과같음)
라.분석결과의판정
유전자변형카놀라에대한분석
결과의판정은10.1.11유전자변
형면화라.정성분석결과의판
정및10.1.6정량시험사.결과
의판정에따른다
10.1.13유전자변형사탕무,알팔파
(alfalfa)
-------------------------
- 166 -현 행 개 정(안)
사탕무,알팔파(alfalfa)또는그
가공식품에대하여실시간PCR
장치를사용하여제초제내성유
전자변형사탕무와알팔파
(alfalfa)를검출하기위한정성분
석방법이다.
가.(생략)
나.시약및시액
1)프라이머와프로브(probe)
유전자변형사탕무와알팔파
(alfalfa)검출에사용되는프라
이머와프로브(probe)는표24와
같으며,이와동등한결과를
얻을수있는프라이머와프로
브(probe)를사용할수도있다.
2)실시간PCR용반응액의조제
표24의프라이머와프로브
(probe)를사용하면서PCR
반응액의총량을25μL로할
경우PCR반응액조성은표
25,26,27,28,29,30과같다.
(이하생략)
표24.유전자변형사탕무,알팔파
(alfalfa)의PCR검사에사
용되는프라이머와프로브-------------------------
------------- 유전자변형사
탕무와알팔파를검출하기위한
정성및정량---------------
--------.
가.(현행과같음)
나.시약및시액
1)프라이머와프로브(probe)
-----------------------
-----------------------
----------------- 표17과
-----------------------
-----------------------
---------------------.
2)실시간PCR용반응액의조제
표17------------------
-----------------------
-----------------------
-------------------- 표
18,19와--------.(이하현
행과같음)
표17.유전자변형사탕무,알팔파
(alfalfa)의PCR검사에사
용되는프라이머와프로브
(probe)- 167 -현 행 개 정(안)
목
적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열<신설>
내
재
성
유
전
자사탕무
(121bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
알팔파
(127bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
구
조
유
전
자사탕무H7-1
(110bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
알팔파J101
(121bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
알팔파J163
(105bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
알팔파
KK179
(88bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
성 분 최종 농도(well) 1회 분량(μL) 
Universal Master 
Mix (2 X)1 X 12.5
프라이머 (각 10 
μM)각 150 nM 각 0.375
Probe (10 μM)    100 nM   0.25
주형 DNA(25 
ng/μL)   50 ng 2
멸균증류수반응 총액이 25 
μL가 되도록 첨가9.5
전체량 25             (probe)
<신설>
표25.사탕무내재유전자검사용
PCR반응액조성목
적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열농도
(nM)
내
재
성
유
전
자사탕무
(121bp)(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)150
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)100
알팔파
(127bp)(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)450
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)450
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)210
구
조
유
전
자사탕무H7-1
(110bp)(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)200
알팔파J101
(121bp)(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)450
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)600
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)200
알팔파J163
(105bp)(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)450
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)450
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)180
알팔파
KK179
(88bp)(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)450
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)450
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)100
성분최종농도(well)1회분량(μL)
UniversalMaster
Mix(2X)1)1X12.5
프라이머(각10
μM)150nM~400nM0.375~1
Probe(10μM)100nM~200
nM0.25~0.5
주형DNA(10
ng/μL)50ng 5
멸균증류수반응총액이25μL가되도록첨가
전체량 25*후대교배종은후대교배종을구성하는이벤트
의프라이머/프로브를사용하여검사한다.
표18.유전자변형사탕무검사용
실시간PCR반응액조성
1)UniversalMasterMix또는이와동등한시약
을사용할수있다.
<삭제>
- 168 -현 행 개 정(안)
성 분 최종 농도(well) 1회 분량(μL) 
Universal Master 
Mix (2 X)1 X 12.5
프라이머 (각 10 
μM)각 450 nM 각 1.125
Probe (10 μM)    210 nM    0.525
주형 DNA(50 
ng/μL)  100 ng 2
멸균증류수반응 총액이 25 
μL가 되도록 첨가   7.725
전체량 25     표26.(생략)
표27.알팔파(alfalfa)내재유전자검
사용PCR반응액조성
<신설>
표28.∼표30.(생략)
다.시험조작(실시간PCR장치
에의한정성분석)
사탕무의PCR반응조건은표31
과같고알팔파(alfalfa)의PCR
반응조건은표32와같으며,그
외사항은10.1.11유전자변형면
화다.시험조작(실시간PCR장
치에의한정성분석)에따른다.
표31.∼표32.(생략)
라.분석결과의판정
10.1.11유전자변형면화라.분
석결과의판정에따른다.다만,성분최종농도(well)1회분량(μL)
UniversalMaster
Mix(2X)1)1X12.5
프라이머(각10
μM)450nM~600nM1.125~1.5
Probe(10μM)100nM~210
nM0.25~0.525
주형DNA(20
ng/μL)100ng5
멸균증류수반응총액이25μL가되도록첨가
전체량 25표19.유전자변형알팔파검사용실
시간PCR반응액조성
1)UniversalMasterMix또는이와동등한시약
을사용할수있다.
<삭제>
다.시험조작(실시간PCR장치
에의한정성및정량분석)
-------------------- 표20
------------------------
----------표21과------
------------------------
------------------------
----------------------.
표20.∼표21.(현행표31.∼표
32.와같음)
라.분석결과의판정
유전자변형사탕무및알팔파에
대한분석결과의판정은10.1.11- 169 -현 행 개 정(안)
사탕무의경우PCRcycle수가
50이므로모든NTC의Ct값이
50이어야하며,추출DNA시료
액별로3반복시험한결과,2
개이상의웰(well)에서Ct값
이50미만이면서지수함수적인
증폭이확인되는경우해당
DNA시료액이양성이라고판
정한다.
10.1.14미승인유전자변형밀
(생략)
가.(생략)
나.시약및시액
1)프라이머와프로브(probe)
미승인유전자변형밀검출에
사용하는프라이머와프로브
(probe)는표33과같으며,이
와동등한결과를얻을수있
는프라이머와프로브(probe)
를사용할수도있다.
2)반응액의조제
표33의프라이머와프로브
(probe)를사용하면서PCR반
응액의총량을25μL로할경유전자변형면화라.정성분석
결과의판정및10.1.6정량시험
사.결과의판정에따른다.---
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
-----.
10.1.14미승인유전자변형밀
(현행과같음)
가.(현행과같음)
나.시약및시액
1)프라이머와프로브(probe)
-----------------------
------------------------
----표22와------------
------------------------
------------------------
----------------.
2)반응액의조제
표22------------------
------------------------
------------------------
------------------- 표23
- 170 -현 행 개 정(안)
목
적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열<신설>
내
재
성
유
전
자밀
(102bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(94bp) (생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
구
조
유
전
자M71800
(156bp)(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(90bp) (생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>
(생  략) (생  략)<신설>우PCR반응액조성은표34
〜36과같다.다만,PCR반응
액조성은프라이머와프로브
(probe)또는PCR기기에따
라다를수있으므로시약이나
기기의사용매뉴얼을참고하
여적용한다.
표33.미승인유전자변형밀검사용
프라이머와프로브(probe)
표34.∼표36.(생략)
다.시험조작
미승인유전자변형밀검사를
위한PCR반응조건은표37∼
38과같다.
표37.∼표38.(생략)
라.(생략)
10.2∼10.5(생략)목
적이벤트
(증폭산물크기)프라이머/
프로브염기서열농도(nM)
내
재
성
유
전
자밀
(102bp)(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)400
(94bp) (현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)500
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)500
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)300
구
조
유
전
자M71800
(156bp)(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)400
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)400
(90bp) (현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)500
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)500
(현 행 과  같 음) (현 행 과  같 음)500∼25와-----------------
------------------------
------------------------
------------------------
------------------------
----------.
표22.미승인유전자변형밀검사용
프라이머와프로브(probe)
표23.∼표25.(현행표34.∼
표36.과같음)
다.시험조작
-----------------------
----------------- 표26∼
27-----.
표26.∼표27.(현행표37.∼표
38.과같음)
라.(현행과같음)
10.2∼10.5(현행과같음)- 171 -현 행 개 정(안)
11.∼12.(생략) 11.∼12.(현행과같음)
품목
번호품목
명이명
또는
영명학명또는특성사용부
위
(생약명 )
A가000100
〜
A가014200(생  략)
A가014300 대두백태, 
청태, 
노란콩 , 
검정콩 , 
흑두(黑
豆), 
서리태 , 
Black 
BeansGlycine max (L.) 
Merr. / Dolichos 
soja L. / 
Glycine hispida  
(Moench) 
Maxim.잎, 씨앗
A가014400
〜
A가043000(생  략)
A가043100 단삼Dan-Sh
enSalvia 
multiorrhiza  
Bunge씨앗
A가043200
〜
A가045100(생  략)
A가045200 대두콩, Soy 
beanGlycine max (L.) 
Merr. / Dolichos 
soja L. / 
Glycine hispida  
(Moench) 
Maxim.잎, 씨앗
A가045300
〜
A가367400(생  략)[별표1]“식품에사용할수있는원료”의목록
1.식물성
2.동물성품목
번호품목
명이명
또는
영명학명또는특성사용부
위
(생약명 )
A가000100
〜
A가014200(현행과 같음)
(삭제 : A가045200 으로 통합)
A가014400
〜
A가043000(현행과 같음)
A가043100 단삼Dan-Sh
enSalvia 
miltiorrhiza  
Bunge씨앗
A가043200
〜
A가045100(현행과 같음)
A가045200 대두콩, 
백태, 
청태, 
노란콩 , 
검정콩 , 
흑두(黑
豆), 
서리태 , 
Soy 
bean, 
Black 
BeansGlycine max (L.) 
Merr. / Dolichos 
soja L. / 
Glycine hispida  
(Moench) 
Maxim.잎, 씨앗
A가045300
〜
A가367400(현행과 같음)[별표1]“식품에사용할수있는원료”의목록
1.식물성
2.동물성
- 172 -현 행 개 정(안)
품목
번호품목
명이명
또는
영명학명또는특성사용부
위
(생약명 )
A나000100
〜
A나002000(생  략)
<신  설>
A나002100
〜
A나011300(생  략)
<신  설>
A나011400
〜
A나072100(생  략)
<신  설>
A나072200
〜
A나095600(생  략)
3.～4.(생략)품목
번호품목
명이명
또는
영명학명또는특성사용부
위
(생약명 )
A나000100
〜
A나002000(현행과 같음)
A나002050가시이
마쏙Chinese 
mud 
shrimpAustinogebia 
wuhsienweni
/ Upogebia 
wuhsienweni-
A나002100
〜
A나011300(현행과 같음)
A나011350곳체다
슬기MartensSemisulcospira 
gottschei-
A나011400
〜
A나072100(현행과 같음)
A나072150지중해 
담치 -Mytilus 
galloprovincialis-
A나072200
〜
A나095600(현행과 같음)
3.～4.(현행과같음)
고유번
호품목명이명 또는 
영명학명 또는 
특성사용
조건
B다0001
00
∼
B다0030
00(생 략)
B다0031 Zymom ona (생략) (생략)주류[별표2]“식품에제한적으로사용할수있는원료”
1.∼2.(생략)
3.미생물
고유번
호품목명이명 또는 
영명학명 또는 
특성사용
조건
B다0001
00
∼
B다0030
00(현행과 같음)
B다0031 Zym omona (현행과 (현행과 주류[별표2]“식품에제한적으로사용할수있는원료”
1.∼2.(현행과같음)
3.미생물- 173 -현 행 개 정(안)
00 smobilis제조에
한함
<신설>
(생 략)
4.(생략)
[별표3](생략)00 smobilis 같음 )같음 )및
레반 (Le
van)
제조에
한함
B다0032
00Brevibacteri
umlinensBrevibacterium
linens유 가 공
품제조
에한함
B다0033
00Corynebacte
rium
amm oniagen
es-Corynebacteriu
m
amm oniagenes유 가 공
품제조
에한함
B다0034
00Dek kera
bruxellensis-Dekk era
bruxellensis주류제
조에한
함
B다0035
00Gluconaceto
bacter
hanseni-Gluco nacetoba
cter hanseni식초제
조에한
함
B다0036
00Lachancea
therm otolera
ns-Lachancea
thermo tolerans주류제
조에한
함
B다0037
00Lactobacillu
s
coryniform is
subsp.
coryniform is-Lactobacillus
coryniform is
subsp.
coryniform is유 가 공
품제조
에한함
B다0038
00Leuconostoc
carnosum-Leuconostoc
carnosum발 효 육
류제조
에한함
(현행과 같음)
4.(현행과같음)
[별표3](현행과같음)
[별표4]농산물의농약잔류허용기준
(1)∼(45)(생략)
(46)메틸브로마이드(Methylbromide)
(생략)
<신설>[별표4]농산물의농약잔류허용기준
(1)∼(45)(현행과같음)
(46)메틸브로마이드(Methylbromide)
(현행과같음)
인과류 20
- 174 -현 행 개 정(안)
(47)∼(498)(생략)(47)∼(498)(현행과같음)
[별표5]식품중동물용의약품의잔류
허용기준
(1)∼(9)(생략)
(10)디히드로스트렙토마이신/스트렙토
마이신(Dihydrostreptomycin
/Streptomycin):항균제
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
닭근육0.6
닭간0.6
닭지방0.6
닭신장1.0
(11)레바미졸(Levamisole):구충제
(생략)
<신설>[별표5]식품중동물용의약품의잔류
허용기준
(1)∼(9)(현행과같음)
(10)디히드로스트렙토마이신/스트렙토
마이신(Dihydrostreptomycin
/Streptomycin):항균제
(현행과같음)
염소근육0.5
염소간0.6
염소지방0.6
염소신장1.0
말근육0.5
말간0.6
말지방0.6
말신장1.0
가금근육0.6
가금간0.6
가금지방0.6
가금신장1.0
(11)레바미졸(Levamisole):구충제
(생략)
유 0.01- 175 -현 행 개 정(안)
(12)∼(15)(생략)
(16)벤질페니실린(Benzylpenicillin,Penicillin
G,Procainebenzylpenicillin):항균제
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(17)∼(32)(생략)
(33)이버멕틴(Ivermectin):구충제
<신설>
소간 0.1
소지방 0.04
<신설>
(생략)
<신설>
<신설>(12)∼(15)(현행과같음)
(16)벤질페니실린(Benzylpenicillin,Penicillin
G,Procainebenzylpenicillin):항균제
(생략)
양근육0.05
양간 0.05
양신장 0.05
염소근육0.05
염소간0.05
염소신장0.05
말근육0.05
말간0.05
말신장0.05
(17)∼(32)(현행과같음)
(33)이버멕틴(Ivermectin):구충제
소근육0.03
소간 0.8
소지방 0.4
소신장 0.1
(현행과같음)
염소근육0.03
염소간0.8
- 176 -현 행 개 정(안)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(34)∼(37)(생략)
(38)클로산텔(Closantel):구충제
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(39)(생략)
(40)타일로신(Tylosin):항균제
◎잔류물의정의:Tylosin
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>염소지방0.4
염소신장0.1
말근육0.03
말간0.8
말지방0.4
말신장0.1
(34)∼(37)(현행과같음)
(38)클로산텔(Closantel):구충제
(현행과같음)
돼지근육2.0
돼지간2.0
돼지지방2.0
돼지신장5.0
유 0.05
(39)(현행과같음)
(40)타일로신(Tylosin):항균제
◎잔류물의정의:TylosinA
(현행과같음)
양근육0.1
양간 0.1
양지방 0.1
양신장 0.1- 177 -현 행 개 정(안)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(41)∼(42)(생략)
(43)틸미코신(Tilmicosin):항균제
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(44)페반텔/펜벤다졸/옥스펜다졸(Febantel
/Fenbendazole/Oxfendazole):구충제
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>염소근육0.1.
염소간0.1
염소지방0.1
염소신장0.1
(41)∼(42)(현행과같음)
(43)틸미코신(Tilmicosin):항균제
(현행과같음)
닭근육0.15
닭간2.4
닭지방/피부0.25
닭신장0.6
(44)페반텔/펜벤다졸/옥스펜다졸(Febantel
/Fenbendazole/Oxfendazole):구충제
(현행과같음)
사슴근육0.1
사슴간0.5
사슴지방0.1
사슴신장0.1
닭근육0.05
닭간0.5
닭지방0.05
닭신장0.05
알 1.3
- 178 -현 행 개 정(안)
(45)∼(53)(생략)
(54)노르플록사신
(55)오플록사신
(56)페플록사신)
(57)∼(104)(생략)
(105)프라지콴텔(Praziquantel):구충제
(생략)
조피볼락0.02
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(106)∼(115)(생략)
(116)클로술론(Clorsulon):구충제
(생략)
<신설>(45)∼(53)(현행과같음)
<삭제>
<삭제>
<삭제>
(54)∼(101)(현행(57)∼(104)과
같음)
(102)프라지콴텔(Praziquantel):구충제
(현행과같음)
어류 0.02
말근육0.3
말간4
말지방0.2
말신장4
(103)∼(112)(현행(106)∼(115)
과같음)
(113)클로술론(Clorsulon):구충제
(현행과같음)
양근육0.035- 179 -현 행 개 정(안)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(117)∼(194)(생략)양간 0.1
양신장 0.2
염소근육0.035
염소간0.1
염소신장0.2
유 0.02
(114)∼(191)(현행(117)∼(194)
과같음)
[별표6]축·수산물의잔류물질잔류허용기준
(1)∼(18)(생략)
(19)빈클로졸린(Viclozolin)
(생략)
계란0.05
(생략)
(20)∼(58)(생략)
(59)플루실라졸(Flusilazole)
(생략)
계란0.01
(생략)
(60)∼(67)(생략)[별표6]축·수산물의잔류물질잔류허용기준
(1)∼(18)(생략)
(19)빈클로졸린(Viclozolin)
(현행과같음)
달걀0.05
(현행과같음)
(20)∼(58)(현행과같음)
(59)플루실라졸(Flusilazole)
(현행과같음)
달걀0.01
(현행과같음)
(60)∼(67)(현행과같음)
- 180 -현 행 개 정(안)
(68)디설포톤(Disulfoton)
(생략)
계란0.02
(생략)
(69)∼(79)(생략)
(80)페코나졸(Penconazole)
(생략)
계란0.05
(생략)
(81)∼(99)(생략)(68)디설포톤(Disulfoton)
(현행과같음)
달걀0.02
(현행과같음)
(69)∼(79)(현행과같음)
(80)페코나졸(Penconazole)
(현행과같음)
달걀0.05
(현행과같음)
(81)∼(99)(현행과같음)
[별표7](생략) [별표7](현행과같음)