GB xxxx—xxxx 
 
xxxx -xx-xx发布  
 xxxx -xx-xx实施  
食品安全国家标准  
食品营养强化剂 全反式视黄醇 
（征求意见稿） 
 
 
 
GB xxxx—xxxx  
食品安全国家标准 
食品营养强化剂  全反式视黄醇 
1   范围 
本标准适用于以 β-紫罗兰酮为主要原料， 经化学合成制得的食品营养强化剂全反式视黄
醇。  
2   分子式、结构式和相对分子质量  
2.1  分子式 
C20H30O 
2.2  结构式 
 
 
 
 
 
2.3  相对分子质量  
 286.46（按 2018年国际相对原子质量）  
3   技术要求 
3.1  感官要求  
感官要求应符合表1 的规定。  
表1 感官要求  
项    目  要    求  检验方法 
色泽 淡黄色 
将适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘中，在
自然光线下，观察其色泽、状态，嗅其气味。  气味 无酸败味 
状态 油状液体/ 冷冻可呈固体 
 
3.2  理化指标  
理化指标应符合表 2的规定。  
 
 
 
GB xxxx—xxxx  
表2 理化指标  
项    目  指    标  检验方法 
全反式视黄醇含量a/（IU/g）                ≥ 2.5×106 附录 A.4 
酸价（以 KOH计） /（mg/g）              ≤ 2.0 附录 A.5 
过氧化值/ （mmol/kg ）                   ≤  10.0 附录 A.6 
铅（Pb）/（mg/kg）                     ≤  2.0 GB 5009.75 或GB 5009.12  
总砷 （以 As计）/（mg/kg）                   ≤    2.0 GB 5009.76 或GB 5009.1 1 
a 全反式视黄醇含量以国际单位（IU ）表示，1IU=0.300 μg全反式视黄醇；全反式视黄醇实际含量为标
签标示值的 95.0%~110% 。 
注：商品化的全反式视黄醇产品应以符合本标准的全反式视黄醇为原料，添加工艺所必需的食品原料和
/或食品添加剂作为辅料，其质量、范围和使用量应符合相应的食品安全国家标准。  
 
 
 
 
  
 
  
 
   
 
  
 
  
 
    
 
 GB xxxx—xxxx  
0=llRf附 录 A 
检验方法  
A.1 警告  
试样应在密闭、避光和冷冻条件下贮存。配制的试样溶液应尽快使用。测定过程中，应
最小程度地接触光、空气及其他氧化剂，建议使用棕色玻璃器皿。  
A.2 一般规定  
除另有说明外，本标准所用试剂均为分析纯，实验用水为 GB/T 6682 规定的三级水。试
验方法中所用的标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品在没有注明其他要求时，
应按 GB/T 601 、GB/T 602、GB/T 603的规定制备。  
A.3 鉴别试验  
A.3.1 试剂和材料 
A.3.1.1 三氯甲烷 。 
A.3.1.2 三氯化锑溶液：称取三氯化锑适量，加三氯甲烷溶解并定容，制成250  g/L的三氯化
锑溶液。  
A.3.1.3 展开剂：环己烷＋乙醚=4 ＋1。 
A.3.1.4 全反式视黄醇标准品（C 20H30O，CAS号： 68-26-8）：纯度≥ 95%或经国家认证并授
予标准物质证书的标准物质。  
A.3.2 仪器和设备 
A.3.2.1 电子天平：感量为 0.0001 g。 
A.3.2.2 色谱用硅胶板。 
A.3.2.3 展开缸：200×200 mm。 
A.3.3 鉴别方法 
A.3.3.1 呈色试验  
A.3.3.1.1 方法原理 
全反式视黄醇和亲电试剂三氯化锑作用形成不稳定的蓝色碳鎓离子。  
A.3.3.1.2 分析步骤 
称取适量全反式视黄醇试样，加入三氯甲烷制成浓度为6 μ g/ mL的样品溶液。取出1 mL
样品溶液，加入 10 mL的三氯化锑溶液（ A.3.1.2），摇匀后静置，观察其颜色变化。  
呈色要求：试样溶液立即显蓝色，并慢慢变成红色。符合呈色要求的试样再按照A.3.3.2
的步骤进行薄层色谱分析。 
A.3.3.2 薄层色谱分析  
分别称取约 5 mg的全反式视黄醇标准品和试样，加三氯甲烷溶解并定容至10 mL ，然后
各取0.01 mL进行薄层色谱分析，在展开剂（ A.3.1.3）中展开。当展开剂的最前端上升到距
离点样点原线约 10 cm时，停止展开，风干色谱用硅胶板。均匀喷洒三氯化锑溶液，观察试
样溶液斑点和标准品溶液斑点的颜色，并按式（ A.1）计算 Rf值。  
                     ……………… （A.1） 
 式中： GB xxxx—xxxx  
l  ——原点到斑点中心的距离；  
l0  ——原点到溶剂前沿的距离。  
结果判断：试样溶液斑点和标准品溶液斑点均显蓝色且 Rf值相同。  
 
A.4 全反式视黄醇含量的测定 
A.4.1 方法原理 
试样中的全反式视黄醇加正己烷溶解后，正相液相色谱柱分离，紫外检测器检测，外标
法计算试样中全反式视黄醇的含量。  
A.4.2 试剂和材料 
A.4.2.1 正己烷：色谱纯 。 
A.4.2.2 异丙醇：色谱纯 。 
A.4.2.3 二丁基羟基甲苯（ BHT）。 
A.4.2.4 全反式视黄醇标准品（C 20H30O，CAS号： 68-26-8）纯度≥ 95%，或经国家认证并授
予标准物质证书的标准物质。  
A.4.2.5 9- 顺式视黄醇（C 20H30O，CAS号： 22737- 97-9）纯度≥ 95%，或经国家认证并授予标
准物质证书的标准物质。  
A.4.2.6 水： GB/T 6682规定的 一级水。 
A.4.3 仪器和设备 
A.4.3.1 电子天平：感量为 0.0001 g。  
A.4.3.2 高效液相色谱仪，配紫外检测器。  
A.4.4 参考色谱条件 
A.4.4.1 色谱柱： 多孔球形硅胶色谱 柱（250 mm×4 .6 mm，粒径 5 μm，或同等性能色谱柱）。  
A.4.4.2 柱温： 25℃。 
A.4.4.3 流动相：正己烷＋异丙醇 =99＋1。 
A.4.4.4 流速： 1.0 mL/min 。 
A.4.4.5 检测波长： 325 nm。 
A.4.4.6 进样量：2 0 μL。 
A.4.5 分析步骤 
A.4.5.1 标准溶液的制备 
标准储备溶液：称取 25.0 mg的全反式视黄醇标准品，精确至0.0001 g，置于小烧杯中，
加入25.0 mg二丁基羟基甲苯（ BHT），加入适量正己烷，振摇使之完全溶解，转移至50.0 mL
棕色容量瓶中，用正己烷定容至刻度，摇匀，得到标准储备液。将此溶液转移至棕色试剂瓶
中，密封后在- 20 ℃下避光保存 1个月。临用前将溶液回温至 20 ℃，并进行浓度校正（校正
方法参见附录B ）。移取一定量标准储备液，按照需要用正己烷稀释，制备标准曲线溶液，
临用前配制。  
A.4.5.2 系统适用性溶液的制备  
称取9-顺式视黄醇标准品10.0 mg,精确至 0.0001 g，置于小烧杯中 ，加入适量正己烷，
振摇使之完全溶解 ，转移至 100 mL的棕色容量瓶中，用正己烷定容至刻度，摇匀，得到 9-
顺式视黄醇的标准储备液。根据上机浓度，移取一定量的全反式视黄醇和 9-顺式视黄醇标准
储备液，用正己烷稀释，配制成浓度比为全反式视黄醇： 9-顺式视黄醇= 10：1的混合标准溶
液，经 0.22 μm有机相滤膜过滤后供高效液相色谱测定。 
A.4.5.3 试样溶液的制备 GB xxxx—xxxx  
称取适量的试样（约相当于全反式视黄醇 15 mg），精确至 0.0001 g，置于小烧杯中，加
入0.1 g二丁基羟基甲苯（ BHT），加入适量正己烷，振摇使之完全溶解，转移至100.0 mL
棕色容量瓶中，用正己烷定容至刻度，摇匀，得到试样储备液。根据试样浓度，用正己烷稀
释，经 0.22 μm有机相滤膜过滤后供高效液相色谱测定。  
A.4.6 测定 
A.4.6.1 系统适用性试验 
在A.4.4 参考色谱条件下，系统适用性试验溶液经高效液相色谱仪分析，计算全反式视
黄醇色谱峰与9- 顺式视黄醇色谱峰的分离度 R≥1.5。 
A.4.6.2 试样测定  
在A.4.4参考色谱条件下，试样溶液和标准溶液经高效液相色谱仪分析，记录相应的峰
面积。 以峰面积为纵坐标， 以标准工作液的浓度为横坐标绘制标准曲线， 计算直线回归方程。
采用外标法通过标准曲线计算试样中全反式视黄醇的浓度，再按结果计算中式（A. 2）计算
试样中全反式视黄醇的含量。  
A.4.7 空白试验 
除不加试样外，均按上述步骤进行。  
A.4.8 结果计算 
全反式视黄醇的含量1ω以国际单位每克（IU/g ）计，按式（ A.2）计算： 
 
     …………………… （A. 2） 
 
式中： 
c     ——试样中全反式视黄醇的质量浓度，单位为微克每毫升（μ g/mL）； 
V     ——试样定容体积，单位为毫升（ mL）； 
m1     ——试样的称样量，单位为克（ g）；  
f      ——稀释倍数； 
0.300 ——换算系数(1IU=0.300 μ g全反式视黄醇) 。 
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示， 结果保留三位有
效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的 5%。 
 
A.5 酸价的测定 
A.5.1 试剂和材料 
A.5.1.1 异丙醇。 
A.5.1.2 乙醚。 
A.5.1.3 氢氧化钾标准滴定水溶液：c （KOH）=0.1 mol/L 。 
A.5.1.4 酚酞指示液：10 g/L 乙醇溶液。  
A.5.1.5 乙醚与异丙醇混合液（1 +1） ：将乙醚与 异丙醇等体积互溶混合，用时 现配。  
A.5.2 仪器和设备 
A.5.2.1 碘量瓶：250 mL 。 
A.5.2.2 滴定管：10 mL ，最小刻度为 0.05 mL。 
A.5.2.3 电子天平：感量为 0.001 g。 
A.5.3 分析步骤 
A.5.3.1 试样测定  
称取 5.0 g试样，精确至 0.001 g，置于碘量瓶中，加入 50 mL乙醚与异丙醇混合液，盖3000×××=
11. mfVcωGB xxxx—xxxx  
上盖子振摇溶解并混匀。加入 3滴~5滴酚酞指示液，用 0.1 mol/L 氢氧化钾标准滴定溶液滴
定至微显粉红色，且 15 s无明显褪色即为终点。立刻停止滴定，记录此滴定所消耗的氢氧
化钾标准滴定溶液的毫升数。  
A.5.3.2 空白试验  
除不加试样外，均按 A.5.3.1进行。 
A.5.4 结果计算 
酸价（以 KOH计）ω2以毫克每克（ mg/g）计，按式（ A.3）计算： 
 
………………… （A.3） 
式中： 
V   ——试样所消耗氢氧化钾及标准滴定溶液的体积，单位为毫升（mL ）； 
V0   ——空白所消耗氢氧化钾及标准滴定溶液的体积，单位为毫升（mL ）； 
c    ——氢氧化钾标准滴定溶液的摩尔浓度，单位为摩尔每升（mol/L ）； 
56.1 —— 氢氧化钾的摩尔质量，单位为克每摩尔（ g/mol）； 
m2  ——试样的质量，单位为克（ g）。  
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示， 结果保留两位有
效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的 10%。 
 
A.6 过氧化值的测定 
A.6.1 试剂和材料 
A.6.1.1 冰乙酸。  
A.6.1.2 三氯甲烷。 
A.6.1.3 三氯甲烷- 冰乙酸混合液 （ 体积比 40+60）：量取 40 mL三氯甲烷， 加 60 mL冰乙酸，
混匀 。 
A.6.1.4 碘化钾饱和溶液： 现配现用，确保溶液中有结晶存在，存放于避光处。 
A.6.1.5 硫代硫酸钠标准溶液（ 0.1 mol/L）：称取 26 g硫代硫酸钠（ Na2S2O3⋅5H2O）， 加 入 0.2 
g无水碳酸钠，溶于 1 L水中，缓缓煮沸 10 min，冷却。放置两周后过滤、标定。  
A.6.1.6硫代硫酸钠标准溶液（0. 002 mol/L）：用新煮沸冷却的水稀释 0.1 mol/L的硫代硫酸
钠标准溶液 至0.002 mol/L 。临用前配制。  
A.6.1.7淀粉指示剂 （ 1 %）：称 取 0.5 g可溶性淀粉， 加少量水调成糊状， 边搅拌边倒入 50 mL
沸水，煮沸搅匀后，放冷备用。临用前配制。  
A.6.2 仪器和设备  
A.6.2.1 碘量瓶：250 mL 。 
A.6.2.2 滴定管：10 mL ，最小刻度为 0.05 mL。 
A.6.2.3 电子天平：感量为 0.001 g。 
A.6.3 分析步骤 
A.6.3.1 试样测定  
准确称取 5.0 g试样，精确至 0.001 g，置于碘量瓶中，加入 30 mL三氯甲烷- 冰乙酸混
合液（ A.6.1.3） ，盖上盖子振摇溶解并混匀。迅速准确加入 1.00 mL 饱和碘化钾溶液，塞紧
瓶盖，轻轻振摇混匀，置于暗处反应 1 min，然后加入 100 mL水和 1 mL淀粉指示剂，用
0.002 mol/L 硫代硫酸钠标准溶液进行滴定，边滴定边摇动碘量瓶， 连续滴定至蓝色消失即
为终点。立刻停止滴定，记录此滴定所消耗的 硫代硫酸钠标准滴定溶液 的毫升数。  
A.6.3.2 空白试验  20
2156××=m. c V-Vω）（GB xxxx—xxxx  
除不加试样外，均按 A.6.3.1进行。 
A.6.4 结果计算 
过氧化值ω3以毫摩尔每千克（ mmol/kg）计，按式（A. 4）计算：  
 
………………… （A.4） 
式中： 
V     ——试样所消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液 的体积，单位为毫升（mL ）； 
V0    ——空白所消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液 的体积，单位为毫升（mL ）； 
c     ——硫代硫酸钠标准滴定溶液 的摩尔浓度，单位为摩尔每升（mol/L ）； 
m3   ——试样的质量，单位为克（ g）；  
1000  ——换算系数； 
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示， 结果保留两位 有
效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的 10%。 
 
 
  
 
  
 
 
 
  
 
 
 30
3×21000××=mc V-Vω）（GB xxxx—xxxx  
附 录 B 
全反式视黄醇标准溶液浓度校正方法  
B.1 试剂和材料 
B.1.1 无水乙醇。 
B.2 仪器和设备 
B.2.1 紫外分光光度计。 
B.2.2 1 cm石英比色杯。  
B.3 分析步骤  
取全反式视黄醇标准储备溶液50 μL于10 mL的棕色容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，
混匀。用1 cm 石英比色杯，以无水乙醇为空白参比，在325 nm 处测定其吸光度。  
B.4 结果计算  
全反式视黄醇的浓度按式（B .1）计算：  
…………………（B .1） 
式中：  
X     ——全反式视黄醇标准稀释液的浓度 ，单位为微克每毫升（ μg/mL）； 
A     ——全反式视黄醇稀释液的紫外吸光度；  
104   ——换算系数； 
E     ——1835，全反式视黄醇 1%比色吸光系数。 
 
 
    
  
  EAX410×=GB xxxx—xxxx  
附 录 C 
全反式视黄醇标准品色谱图 
 
图C.1 全反式视黄醇标准品色谱图  （50.0 mg/L ）