中华人民共和国国家标准  
 
GB XXXXX—XXXX 
食品安全国家标准  
食品添加剂   磷脂(牛乳来源 ) 
 
（征求意见稿 ） 
20×× -××-××发布  20×× -××-××实施  
GB XXXXX —XXXX 
1 食品安全国家标准  
食品添加剂   磷脂(牛乳来源 ) 
1 范围 
本标准适用于 以生乳和 /或稀奶油和 /或乳清为原料 ，经分离、超滤等工序制成的 食品添加剂磷脂 (牛
乳来源 )。 
2 技术要求  
2.1 感官要求  
感官要求 应符合表 1的规定。 
表1 感官要求  
项目 要求 检验方法  
色泽 白色至浅黄色 
取适量试样置于洁净的白色盘 （瓷盘或同类容器 ）中，在自然光下
观察色泽和状态 。闻其气味 ，用温开水漱口 ，品其滋味  滋味、气味 具有产品特有的滋味 、气
味，无异味 
状态 干燥均匀的粉末状产品 ，
无结块，无正常视力可见
杂质 
2.2 理化指标  
理化指标应符合表 2的规定。 
表2    理化指标  
项目 指标 检验方法  
蛋白质 /(g/100g)                   ≥ 20.0 GB 5009. 5凯氏定氮法  
脂肪/（g/100g）              ≥ 12.0 GB 5009.6 碱水解法  
总磷脂 /(g/100g )               ≥ 5.0 附录 A中A.3 
水分 /(g/100g )                    ≤ 5.0 GB 5009.3 直接干燥法  
铅(Pb) /( mg/kg)                   ≤ 0.1 GB 5009.12  
砷(As)/( mg/kg)                   ≤ 0.1 GB 5009.11  GB XXXXX —XXXX 
2 2.3 微生物限量  
微生物限量应符合表 3的规定。 
表3  微生物限量  
项目  采样方案a及限量（若非指定 ，均以 CFU/g表示） 
检验方法  
n c m M 
菌落总数  5 2 30000  50000  GB 4789.2  
大肠菌群  5 2 10 100 GB 4789.3 平板计数法  
金黄色葡萄球菌  5 2 10 100 GB 4789.10 平板计数法  
沙门氏菌  5 0 0/25g  - GB 4789.4  
a样品的分析及处理按 GB 4789.1 和GB 4789.18 执行。 
 
2.4 其他 
磷脂(牛乳来源 )也可以称为 “乳磷脂”。 
 GB XXXXX —XXXX 
3 附录A  
检验方法  
A.1 一般规定  
本标准所用试剂和水 ，在没有注明其他要求时 ，均指分析纯试剂和 GB/T  6682中规定的一级水 。 
A.2 磷脂(牛乳来源 )的鉴别试验  
按照 A.3方法对磷脂 （牛乳来源 ）的含量进行测定 ，如鞘磷脂含量比例符合表 A.1的要求，则判定为
牛乳来源 的磷脂。 
表A.1鞘磷脂成分含量比  
成分  比例区间  
鞘磷脂：磷酸酰胆碱  0.6：1 ~ 1.2：1 
鞘磷脂：总磷脂  0.15 ：1~ 0.3：1 
 
A.3 总磷脂的 测定 
A.3.1 方法提要  
经二氯甲烷与甲醇的混合溶液提取 ，通过硅胶色谱柱分离 ，采用高效液相色谱串联质谱 /质谱法进
行检测，外标法定量 。 
A.3.2 试剂和材料  
A.3.2.1 水：符合 GB/T 6682 规定的一级水 。 
A.3.2.2 乙腈（CH 3CN） ：色谱纯。 
A.3.2.3 氯化钾（KCl）：优级纯。 
A.3.2.4 甲酸铵（HCOONH 4）：色谱纯。 
A.3.2.5 三氯甲烷 （CHCl 3）：色谱纯。 
A.3.2.6 甲醇（CH 3OH）：色谱纯。 
A.3.2.7 三氯甲烷 ：甲醇 =1：2（V/V） 。 
A.3.2.8 0.01mol/L 氯化钾溶液 。 
A.3.2.9 磷酸酰丝氨酸 ：纯度≥99%。 
A.3.2.10  鞘磷脂：纯度≥99%。 
A.3.2.11  磷酸酰胆碱 ：纯度≥99%。 
A.3.2.12  磷酸酰乙醇胺 ：纯度≥99%。 
A.3.2.13  磷酸酰肌醇 ：纯度≥99%。 GB XXXXX —XXXX 
4 A.3.2.14  磷脂（牛乳来源 ）标准储备溶液 ：称取一定量的 （精确至 0.1mg）磷酸酰丝氨酸 、鞘磷脂、
磷酸酰胆碱 、磷酸酰乙醇胺 、磷酸酰肌醇标准物质于 10 mL容量瓶中 ，用三氯甲烷甲醇溶液 （1：2，V/V）
溶解并定容 ，折算纯度后达到 1mg/mL。 
A.3.2.15  标准工作溶液 ：分别准确吸取磷酸酰丝氨酸 、鞘磷脂、磷酸酰胆碱 、磷酸酰乙醇胺和磷酸酰
肌醇标准储备溶液 1.0mL到10mL容量瓶中用三氯甲烷甲醇溶液 （1：2，V/V）溶解并定容 ，摇匀后再吸
取0.0 mL、0.05mL、0.1 mL、0.5 mL、1.0mL、2.0 mL至10 mL容量瓶中 ，用三氯甲烷甲醇溶液 （1：2，
V/V）溶解并定容 。磷酸酰丝氨酸 、鞘磷脂、磷酸酰胆碱 、磷酸酰乙醇胺 、磷酸酰肌醇标准工作溶液浓
度分别为 0.0μg/mL、0.5μg mL、1.0μg /mL、5.0μg /mL、10μg /mL，20μg /mL，临用前配制 。 
A.3.3 仪器和设备  
A.3.3.1 高效液相色谱串联质谱 /质谱仪：配有三重四极杆质谱检测器 。 
A.3.3.2 离心机：转速 5000 rpm 。 
A.3.4 参考色谱条件  
A.3.4.1 色谱柱：填料 SIL， 2.7μm，150 mm×2.1 mm（内径） 。 
A.3.4.2 柱温：30℃。 
A.3.4.3 进样体积 ：5μL。 
A.3.4.4 流速： 0.5mL/min。 
A.3.4.5 流动相：0.01mol/L甲酸铵溶液和乙腈 ，梯度洗脱参数见表 A.2。 
 
表A.2 流动相梯度洗脱程序表  
时间  
（min） 乙腈  
（%） 0.01mol/L甲酸铵溶液  
（%） 
0 95 5 
1.5 95 5 
9 50 50 
12 50 50 
13 95 5 
16 95 5 
A.3.5 参考质谱条件  
A.3.5.1 电喷雾模式 ：ESI+； 
A.3.5.2 毛细管电压 ：3.0kV； 
A.3.5.3 锥孔电压 ：150 v； GB XXXXX —XXXX 
5 A.3.5.4 脱溶剂温度 ：450； 
A.3.5.5 脱溶剂气流量：900L/h； 
A.3.5.6 其他质谱参数见表 A.3。 
 
表A.3主要参考质谱参数  
参数  化合物  
鞘磷脂  磷酸酰乙酰胺  磷酸酰胆碱  磷酸酰肌醇  磷酸酰丝氨酸  
扫描模式  母离子  中性丢失  母离子  中性丢失  中性丢失  
质荷比 (M/Z)  184 141 184 277 185 
扫描范围  650-850 730-830 650-850 800-1000  650-850 
碰撞能 (V) 30 40 10 20 30 
锥孔电压 (V) 170 160 170 150 200 
 
A.3.6 分析步骤  
A.3.6.1提取 
称取试样 1.0g，加入一级水 50mL超声溶解 ，转移并用一级水定容 100mL， 摇匀后准确吸取 0.5mL
样品溶液并加入 0.5mL一级水和 4mL三氯甲烷甲醇溶液 (1:2)溶液于 10mL带盖玻璃管中涡旋混合 ，在混摇
振荡器上振荡 10min；取出在 4000 rpm 下离心 10 min，移取上清液于另一带盖玻璃管中 ，剩余沉淀物加
0.5mL去离子水 ，混匀后再加 2mL三氯甲烷甲醇溶液 (1:2)，涡旋混合后在混摇振荡器上振荡 10min；取出
在4000 rpm 下离心 10 min移出上清液 ； 合并的上清液中加入 1.3mL一级水，涡旋混合后在 4000 rpm 下离
心10min，去除上层水相层 ；再于下层有机层中加入 0.5mL0.01M 氯化钾水溶液和 0.75mL纯甲醇，涡旋混
合后在 4000 rpm 下离心 10min，去除上层水相层 ，取下层有机溶液用氯仿 /甲醇 (1:2)溶液转移定容至 5mL，
混匀后在 10000 rpm 下离心 5min，上机测定 。 
A.3.6.2 测定 
将磷脂 (牛乳来源 )混合标准系列工作液分别注入高效液相色谱 串联质谱 /质谱仪中，测定相应的峰面
积，以标准工作液的浓度为横坐标 ，以峰面积为纵坐标 ，绘制标准曲线 。再将试样提取液注入高效液相
色谱串联质谱 /质谱仪中，得到相对应的峰面积 ，根据标准曲线得到 试样磷脂 (牛乳来源 )成分的浓度。 
A.3.7 结果计算  
    试样中磷脂 (牛乳来源 )各成分的含量Xi，单位为克每百克 （g/100g）,按式（A.1）计算： 
.........................................................(A.1)  
式中： 
C—从标准工作曲线中得到的 磷脂 (牛乳来源 )成分的浓度，单位为微克每毫升 （µg/mL） ； 
V—样品溶液定容体积 5mL，单位为毫升 （mL） ； 
m—试样的质量 ，单位为克 （g） ； GB XXXXX —XXXX 
6 f—稀释倍数 为200。 
试样中磷脂 (牛乳来源 )的含量X，单位为克每百克 （g/100g），按式（A.2）计算： 
X =∑Xi...........................................................................................(A.2)  
Xi—试样中磷脂 (牛乳来源 )各成分的含量，单位为克每百克 （g/100g） 。 
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示 ，结果保留三位有效数字 。 
在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 15 %。 
 
A.3.8 结果判定  
    试样中鞘磷脂成分含量比例应符合表 A.1的要求。 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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7 附录B 
食品添加剂 磷脂(牛乳来源 )成分参考色谱图  
 
B.1 食品添加剂磷脂 (牛乳来源 )成分总离子色谱图  
食品添加剂磷脂 (牛乳来源 )成分总离子色谱图见图 B.1 
 
图B.1磷脂(牛乳来源 )成分总离子色谱  
B.2  食品添加剂磷脂 (牛乳来源 )各成分选择离子色谱图  
食品添加剂磷脂 (牛乳来源 )各成分选择离子色谱图见图 B.2 
 
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图B.2食品添加剂 磷脂(牛乳来源 )各成分选择离子色谱图  
 
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