RÈGLEMENT D’EXÉCUTION (UE) 2022/893 DE LA COMMISSION 
du 7 juin 2022
modifiant l’annexe VI du règlement (CE) no 152/2009 en ce qui concerne les méthodes d’analyse 
applicables en matière de détection des constituants d’invertébrés terrestres pour le contrôle officiel 
des aliments pour animaux 
(Texte présentant de l’intérêt pour l’EEE) 
LA COMMISSION EUROPÉENNE,
vu le traité sur le fonctionnement de l’Union européenne,
vu le règlement (UE) 2017/625 du Parlement européen et du Conseil du 15 mars 2017 concernant les contrôles officiels et 
les autres activités officielles servant à assurer le respect de la législation alimentaire et de la législation relative aux aliments 
pour animaux ainsi que des règles relatives à la santé et au bien-être des animaux, à la santé des végétaux et aux produits 
phytopharmaceutiques, modifiant les règlements du Parlement européen et du Conseil (CE) no 999/2001, (CE) 
no 396/2005, (CE) no 1069/2009, (CE) no 1107/2009, (UE) no 1151/2012, (UE) no 652/2014, (UE) 2016/429 et (UE) 
2016/2031, les règlements du Conseil (CE) no 1/2005 et (CE) no 1099/2009 ainsi que les directives du Conseil 98/58/CE, 
1999/74/CE, 2007/43/CE, 2008/119/CE et 2008/120/CE, et abrogeant les règlements du Parlement européen et du Conseil (CE) n
o 854/2004 et (CE) no 882/2004, les directives du Conseil 89/608/CEE, 89/662/CEE, 90/425/CEE, 
91/496/CEE, 96/23/CE, 96/93/CE et 97/78/CE ainsi que la décision 92/438/CEE du Conseil (règlement sur les contrôles officiels) (
1), et notamment son article 34, paragraphe 6, premier alinéa, point a),
considérant ce qui suit:
(1) Le règlement (CE) no 152/2009 de la Commission (2)établit des méthodes d’essai à l’appui des contrôles officiels 
visant à faire respecter l’interdiction de l’utilisation de protéines animales transformées dans les aliments pour 
animaux destinés aux animaux producteurs de denrées alimentaires. Il s’agit notamment de méthodes d’analyse 
destinées à permettre l’identification des constituants d’origine animale pour le contrôle officiel des aliments pour 
animaux, méthodes qui sont décrites à l’annexe VI dudit règlement et consistent en une microscopie optique ou en 
une amplification en chaîne par polymérase (PCR).
(2) L’utilisation de protéines animales transformées dérivées d’insectes d’élevage a été autorisée dans l’alimentation des 
animaux d’aquaculture par le règlement (UE) 2017/893 de la Commission (3)et dans l’alimentation des porcins et 
des volailles par le règlement (UE) 2021/1372 de la Commission (4), mais elle est toujours interdite en vertu du 
règlement (CE) no 999/2001 du Parlement européen et du Conseil (5)dans certains aliments pour animaux, 
notamment dans l’alimentation des ruminants.
(3) Le laboratoire de référence de l’Union européenne pour les protéines animales dans les aliments pour animaux a 
élaboré et validé un protocole spécial, comprenant une étape consistant en une double sédimentation, qui garantit la 
détection des particules d’invertébrés terrestres, y compris les insectes, si elles sont présentes dans les matières premières pour aliments des animaux, les aliments composés pour animaux et les prémélanges soumis à des essais 
en laboratoire. Avec cette étape supplémentaire, ce protocole devrait être utilisé dans le cadre des contrôles officiels 
afin de vérifier l’application correcte de l’interdiction de l’utilisation de protéines animales transformées d’insectes 
dans certains aliments pour animaux destinés aux animaux producteurs de denrées alimentaires.
(1)JO L 95 du 7.4.2017, p. 1.
(2)Règlement (CE) no 152/2009 de la Commission du 27 janvier 2009 portant fixation des méthodes d’échantillonnage et d’analyse 
destinées au contrôle officiel des aliments pour animaux (JO L 54 du 26.2.2009, p. 1).
(3)Règlement (UE) 2017/893 de la Commission du 24 mai 2017 modifiant les annexes I et IV du règlement (CE) no 999/2001 du 
Parlement européen et du Conseil et les annexes X, XIV et XV du règlement (UE) no 142/2011 de la Commission concernant les 
dispositions relatives aux protéines animales transformées (JO L 138 du 25.5.2017, p. 92).
(4)Règlement (UE) 2021/1372 de la Commission du 17 août 2021 modifiant l’annexe IV du règlement (CE) no 999/2001 du Parlement 
européen et du Conseil en ce qui concerne l’interdiction de l’utilisation des protéines animales dans l’alimentation des animaux 
d’élevage non ruminants autres que les animaux à fourrure (JO L 295 du 18.8.2021, p. 1).
(5)Règlement (CE) no 999/2001 du Parlement européen et du Conseil du 22 mai 2001 fixant les règles pour la prévention, le contrôle et 
l’éradication de certaines encéphalopathies spongiformes transmissibles (JO L 147 du 31.5.2001, p. 1).FR Journal officiel de l’Union européenne L 155/24 8.6.2022  (4) Il convient donc d’adapter la description de la méthode de la microscopie optique figurant à l’annexe VI du règlement 
(CE) no 152/2009 afin d’y insérer une étape consistant en une double sédimentation dans le protocole de préparation 
des échantillons à tester pour la détection de constituants d’invertébrés terrestres.
(5) Il convient dès lors de modifier l’annexe VI du règlement (CE) no 152/2009 en conséquence.
(6) Les mesures prévues dans le présent règlement sont conformes à l’avis du comité permanent des végétaux, des animaux, des denrées alimentaires et des aliments pour animaux,
A ADOPTÉ LE PRÉSENT RÈGLEMENT:
Article premier
L’annexe VI du règlement (CE) no 152/2009 est modifiée conformément à l’annexe du présent règlement.
Article 2
Le présent règlement entre en vigueur le vingtième jour suivant celui de sa publication au Journal officiel de l’Union européenne.
Le présent règlement est obligatoire dans tous ses éléments et directement applicable dans tout État membre.
Fait à Bruxelles, le 7 juin 2022.
Par la Commission
La présidente
Ursula VON DER LEYENFR Journal officiel de l’Union européenne 8.6.2022 L 155/25  ANNEXE 
L’annexe VI du règlement (CE) no 152/2009 est modifiée comme suit:
1)Le point 1 est remplacé par le texte suivant:
«1. OBJET ET CHAMP D’APPLICATION
L’identification des constituants d’origine animale dans les aliments pour animaux doit être effectuée à l’aide de la 
microscopie optique ou d’une réaction d’amplification en chaîne par polymérase (PCR), conformément aux 
dispositions prévues dans la présente annexe.
Ces deux méthodes permettent de détecter la présence de constituants d’origine animale dans les prémélanges, dans 
les matières premières pour aliments des animaux et dans les aliments composés pour animaux. Toutefois, elles ne 
permettent pas de calculer la quantité de ces constituants dans les prémélanges, dans les matières premières pour 
aliments des animaux et dans les aliments composés pour animaux. La limite de détection des deux méthodes est 
inférieure à 0,1 % (p/p).
L’amplification en chaîne par polymérase permet d’identifier le groupe taxinomique des constituants d’origine 
animale présents dans les prémélanges, dans les matières premières pour aliments des animaux et dans les aliments 
composés pour animaux.
Ces méthodes s’appliquent au contrôle de l’application des interdictions prévues à l’article 7, paragraphe 1, du 
règlement (CE) no 999/2001 du Parlement européen et du Conseil (*), à l’annexe IV dudit règlement et à l’article 11, 
paragraphe 1, du règlement (CE) no 1069/2009 du Parlement européen et du Conseil (**).
En fonction du type d’aliment pour animaux soumis aux essais, ces méthodes peuvent être utilisées, suivant un 
protocole opérationnel unique, individuellement ou conjointement conformément aux modes opératoires 
normalisés (MON) établis par le laboratoire de référence de l’Union européenne pour la détection de protéines 
animales dans les aliments pour animaux (EURL-AP) et publiées sur son site web (***).
_____________
(*) Règlement (CE) no 999/2001 du Parlement européen et du Conseil du 22 mai 2001 fixant les règles pour la 
prévention, le contrôle et l’éradication de certaines encéphalopathies spongiformes transmissibles (JO L 147 du 
31.5.2001, p. 1).
(**) Règlement (CE) no 1069/2009 du Parlement européen et du Conseil du 21 octobre 2009 établissant des règles 
sanitaires applicables aux sous-produits animaux et produits dérivés non destinés à la consommation humaine et abrogeant le règlement (CE) n
o 1774/2002 (règlement relatif aux sous-produits animaux) (JO L 300 du 
14.11.2009, p. 1).
(***) https://www.eurl.craw.eu/legal-sources-and-sops/method-of-reference-and-sops/».
2)Le point 2.1 est remplacé par le texte suivant:
«2.1. Microscopie optique
2.1.1. Principe
Les constituants d’origine animale susceptibles d’être présents dans les prémélanges, dans les matières 
premières pour aliments des animaux et dans les aliments composés pour animaux envoyés pour analyse 
sont identifiés sur la base de caractéristiques typiques et identifiables au microscope, telles que les fibres 
musculaires et autres particules de viande, les cartilages, les os, la corne, les poils, les soies, les fragments de 
cuticules d’invertébrés, les structures trachéales d’insectes, les produits sanguins, les globules de lait, les 
cristaux de lactose, les plumes, les coquilles d’œuf, les arêtes et les écailles de poisson.
Les examens microscopiques sont effectués après la préparation des échantillons par sédimentation.
Les échantillons sont soumis à une étape de sédimentation de la manière suivante:
a)pour la détection des constituants d’origine animale provenant d’animaux autres que les invertébrés 
terrestres, une étape de sédimentation unique dans du tétrachloréthylène (TCE), comme indiqué au 
point 2.1.3.4.3;
b)pour la détection des constituants d’invertébrés terrestres, une étape de double sédimentation dans de 
l’éther de pétrole et du tétrachloréthylène (EP/TCE), comme indiqué au point 2.1.3.4.4.
2.1.2. Réactifs et appareillage
2.1.2.1. Réactifs
2.1.2.1.1. Agent de concentration
— Tétrachloréthylène (densité relative 1,62).
— Éther de pétrole (EP) point d’ébullition: 40-60 °C (densité relative: 0,65).FR Journal officiel de l’Union européenne L 155/26 8.6.2022  2.1.2.1.2. Réactif de coloration
— Solution de rouge d’alizarine (diluer 2,5 ml d’acide chlorhydrique 1 M dans 100 ml d’eau et ajouter 
200 mg de rouge d’alizarine à cette solution).
2.1.2.1.3. Milieux de montage
— Lessive de soude et de potasse (NaOH à 2,5 % p/v ou KOH à 2,5 % p/v).
— Glycérol (non dilué, viscosité: 1 490 cP) ou un milieu de montage ayant des propriétés équivalentes pour 
la préparation de lames non permanentes.
— Norland ® Adhésive optique 65 (viscosité: 1 200 cP) ou un milieu de montage ayant des propriétés 
équivalentes pour la préparation de lames non permanentes.
2.1.2.1.4. Milieux de montage avec propriétés de coloration
— Solution de lugol (dissoudre 2 g d’iodure de potassium dans 100 ml d’eau et ajouter 1 g d’iode en agitant 
fréquemment).
— Réactif cystinique (2 g d’acétate de plomb, 10 g NaOH/100 ml d’eau).
— Liqueur de Fehling [préparée avant l’utilisation à partir de parts égales (1/1) de deux solutions-mères A et 
B. Solution A: dissoudre 6,9 g de sulfate de cuivre (II) pentahydraté dans 100 ml d’eau. Solution B: 
dissoudre 34,6 g de tartrate double de sodium et de potassium tétrahydraté et 12 g de NaOH dans 
100 ml d’eau].
— Tétraméthylbenzidine/peroxyde d’hydrogène [dissoudre 1 g de 3,3’, 5,5’ tétraméthylbenzidine (TMB) 
dans 100 ml d’acide acétique glacial et 150 ml d’eau. Avant l’utilisation, mélanger 4 parts de cette 
solution de TMB avec 1 part de peroxyde d’hydrogène à 3 %].
2.1.2.1.5. Agents de rinçage
— Éthanol ≥ 96 % (qualité technique).
— Acétone (qualité technique).
2.1.2.1.6. Réactif de blanchiment
— Solution commerciale d’hypochlorite de sodium (9-14 % de chlore actif).
2.1.2.2. Appareillage— Balance de précision à 0,001 g.
— Équipement de broyage: broyeur à couteaux ou à rotors. Si un broyeur à rotors est utilisé, les tamis pour 
broyeur ≤ 0,5 mm sont interdits.
— Tamis à mailles carrées de 0,25 mm et 1 mm de largeur. À l’exception du prétamisage des échantillons, le 
diamètre des tamis ne doit pas dépasser 10 cm pour éviter la perte de matières. L’étalonnage des tamis 
n’est pas requis.
— Ampoule à décanter conique en verre d’une capacité de 250 ml munie d’un robinet en téflon ou en verre 
rodé à la base du cône. Le diamètre de l’ouverture du robinet doit être supérieur ou égal à 4 mm. Pour la sédimentation unique TCE uniquement, un bécher de décantation à fond conique peut également être 
utilisé, à condition que le laboratoire ait démontré que les niveaux de détection sont équivalents à ceux 
obtenus en utilisant l’ampoule à décanter conique en verre.
Ampoule à décanterFR Journal officiel de l’Union européenne 8.6.2022 L 155/27  — Microscope stéréoscopique couvrant une plage de grossissement final allant de 6,5 à 40 fois au 
minimum.
— Microscope composé à fond clair par éclairage à transmission couvrant une plage de grossissement final 
allant de 100 à 400 fois au minimum. Un microscope en lumière polarisée, à contraste interférentiel 
différentiel peut également être utilisé.
— Verrerie courante de laboratoire.
— Matériel pour la préparation sur lame: lames de microscope classiques, lames creuses, lamelles (20 × 
20 mm), brucelles, spatule fine.
— Étuve de laboratoire.
— Centrifugeuse.
— Papier filtre: filtre qualitatif en cellulose (taille des pores: 4-11 μm).
2.1.3. Échantillonnage et préparation des échantillons
2.1.3.1. ÉchantillonnageUtiliser un échantillon représentatif prélevé conformément à l’annexe I.
2.1.3.1.1. Dessiccation des échantillonsLes échantillons présentant une teneur en humidité supérieure à 14 % doivent être desséchés avant le 
traitement conformément à l’annexe III.
2.1.3.1.2. Prétamisage des échantillons
Afin de recueillir des informations sur une éventuelle contamination de l’environnement des aliments pour 
animaux, il est recommandé de prétamiser les aliments pour animaux en granulés et les bouchons à l’aide 
d’un tamis à mailles de 1 mm, puis de préparer et d’analyser les deux fractions obtenues et d’en rendre 
compte séparément, car elles doivent être considérées comme deux échantillons distincts.
2.1.3.2. Précautions à prendre
Afin d’éviter une contamination croisée en laboratoire, tous les équipements recyclables doivent être 
soigneusement nettoyés avant l’emploi. Les éléments de l’ampoule à décanter doivent être démontés avant le 
nettoyage. Les éléments de l’ampoule à décanter et la verrerie doivent être prélavés manuellement puis lavés 
en machine. Les tamis doivent être nettoyés à l’aide d’une brosse à poils synthétiques durs. Un dernier nettoyage des tamis avec de l’acétone et de l’air comprimé est recommandé après le tamisage de matières 
grasses telles que des farines de poisson.
2.1.3.3. Préparation des échantillons constitués de matières grasses ou d’huiles
Le protocole suivant doit être respecté pour la préparation des échantillons constitués de matières grasses:— S’il s’agit de graisse solide, chauffer celle-ci dans un four jusqu’à ce qu’elle devienne liquide.
— Au moyen d’une pipette, transvaser 40 ml de graisse du fond de l’échantillon dans un tube de 
centrifugation.
— L’échantillon doit être centrifugé pendant 10 minutes à 4 000 tours/min.
— Si la graisse s’est solidifiée pendant la centrifugation, la réchauffer au four jusqu’à ce qu’elle redevienne 
liquide.
— La centrifugation doit être répétée pendant 5 minutes à 4 000 tours/min.
— À l’aide d’une petite cuillère ou d’une spatule, transvaser une moitié des impuretés obtenues sur des lames 
microscopiques pour examen. Il est recommandé d’utiliser du glycérol comme milieu de montage.
— Utiliser les impuretés restantes pour la préparation du résidu, comme décrit au point 2.1.3.4.3, premier 
tiret.
Le même protocole, à l’exception des premier et quatrième tirets, doit être appliqué à la préparation des 
échantillons constitués d’huile.
2.1.3.4. Préparation des échantillons autres que les matières grasses ou les huiles
2.1.3.4.1. Sous-échantillonnage et broyage: au moins 50 g de l’échantillon doivent être séparés en sous-échantillons 
destinés à être analysés puis broyés.FR Journal officiel de l’Union européenne L 155/28 8.6.2022  2.1.3.4.2. Préparation des matières premières: une portion d’au moins 5 g du sous-échantillon broyé doit être préparée. 
Elle est tamisée à 0,25 mm et les deux fractions qui en résultent sont examinées.
2.1.3.4.3. Sédimentation unique TCE pour la détection de constituants d’origine animale provenant d’animaux autres que les invertébrés terrestres.
— Extraction et préparation du résidu:
Transvaser une portion de 10 g (exactitude de 0,01 g) du sous-échantillon broyé dans l’ampoule à 
décanter ou le bécher de décantation à fond conique et ajouter 50 ml de tétrachloréthylène. La portion 
transvasée dans l’ampoule est limitée à 3 g dans le cas des farines de poissons ou d’autres produits 
d’origine animale purs, d’ingrédients minéraux ou de prémélanges générant plus de 10 % de résidu. 
Agiter vigoureusement le mélange pendant au moins 30 secondes et ajouter avec précaution 50 ml de 
tétrachloréthylène en lavant la surface intérieure de l’ampoule pour éliminer les particules adhérentes. 
Laisser le mélange obtenu se décanter pendant au moins 5 minutes avant de séparer le résidu en ouvrant 
le robinet.
Si un bécher de décantation à fond conique est utilisé, agiter vigoureusement le mélange pendant au 
moins 15 secondes et laver soigneusement la surface intérieure avec au moins 10 ml de tétrachlo ­
réthylène propre pour éliminer les particules adhérant aux parois du bécher. Laisser le mélange se 
décanter pendant 3 minutes et agiter à nouveau pendant 15 secondes puis laver soigneusement la 
surface intérieure avec au moins 10 ml de tétrachloréthylène propre pour éliminer les particules 
adhérant aux parois du bécher. Laisser le mélange obtenu se décanter pendant au moins 5 minutes puis 
retirer la fraction liquide, l’éliminer en la laissant soigneusement se décanter et en prenant soin de ne 
rien perdre du résidu.
Le résidu doit être recueilli sur du papier-filtre placé dans un entonnoir afin de permettre la séparation du 
tétrachloréthylène restant tout en évitant le dépôt de matières grasses dans le résidu. Le résidu doit être 
séché. Il est recommandé de peser ensuite le résidu (avec une exactitude de 0,001 g) pour contrôler 
l’étape de sédimentation. Enfin, le résidu doit être passé à travers un tamis à mailles de 0,25 mm et les 
deux fractions obtenues doivent être examinées, sauf si le tamisage n’est pas jugé nécessaire.
— Extraction et préparation des matières flottantes:
Après récupération du résidu au moyen de la méthode décrite ci-dessus, deux phases restent dans l’ampoule à décanter: une phase liquide constituée de tétrachloréthylène et une phase solide constituée de matières flottantes. Cette phase solide (les matières flottantes) est récupérée par le versement complet 
du tétrachloréthylène hors de l’ampoule en ouvrant le robinet. L’ampoule à décanter doit être retournée, 
et les matières flottantes doivent être transvasées dans une grande boîte de Pétri et séchées à l’air dans 
une hotte de laboratoire. Elle est tamisée à 0,25 mm et les deux fractions qui en résultent sont examinées.
— Utilisation de réactifs de coloration
Pour faciliter l’identification correcte des constituants d’origine animale, l’opérateur peut utiliser des réactifs de coloration au cours de la préparation de l’échantillon, conformément aux orientations 
formulées par le laboratoire de référence de l’Union européenne pour la détection de protéines animales 
dans les aliments pour animaux et publiées sur son site web.
Si la solution de rouge d’alizarine est utilisée pour la coloration du résidu, le protocole suivant doit être 
appliqué:
— Transvaser le résidu séché dans une éprouvette en verre et le rincer deux fois avec environ 5 ml 
d’éthanol (agiter chaque fois au vortex pendant 30 secondes, laisser le solvant se décanter pendant 
environ 1 minute 30 secondes puis l’éliminer).
— Blanchir le résidu avec au moins 1 ml de solution d’hypochlorite de sodium. Laisser réagir pendant 
10 minutes; remplir l’éprouvette d’eau, laisser le résidu se décanter pendant 2 à 3 minutes puis 
éliminer doucement l’eau et les particules en suspension.
— Rincer deux fois le résidu avec environ 10 ml d’eau (agiter au vortex pendant 30 secondes, laisser se 
décanter et, chaque fois, éliminer l’eau).
— Ajouter 2 à 10 gouttes de solution de rouge d’alizarine et agiter le mélange au vortex. Laisser réagir 
pendant 30 secondes et rincer deux fois le résidu coloré avec environ 5 ml d’éthanol, puis une 
nouvelle fois avec de l’acétone (agiter chaque fois au vortex pendant 30 secondes, laisser le solvant se 
décanter environ une minute puis l’éliminer).
— Sécher le résidu coloré.FR Journal officiel de l’Union européenne 8.6.2022 L 155/29  2.1.3.4.4. Double sédimentation EP/TCE pour la détection de constituants d’invertébrés terrestres.
Toutes les étapes doivent être réalisées dans une ampoule à décanter conique en verre de 250 ml, comme 
décrit au point 2.1.2.2, quatrième tiret.
— Une portion de 10 g (précision à 0,01 g) du sous-échantillon broyé est transférée dans l’ampoule à 
décanter et soumise d’abord à une sédimentation unique TCE, comme décrit au point 2.1.3.4.3, avec 
récupération du résidu sur un papier-filtre placé sur un entonnoir. Ce résidu peut être utilisé comme 
indiqué au point 2.1.3.4.3.
— Le petit volume de TCE qui s’est écoulé avec le résidu doit être transféré dans une éprouvette graduée. En 
ouvrant le robinet de l’ampoule à décanter, remplir l’éprouvette graduée jusqu’à obtention de 30 ml de TCE. Une fois ce volume atteint, le robinet d’arrêt est fermé.
— Ce volume de TCE collecté est remplacé en ajoutant un volume de 30 ml d’éther de pétrole dont le point 
d’ébullition est compris entre 40 °C et 60 °C dans l’ampoule à décanter. Le contenu de l’ampoule à décanter doit être soigneusement mélangé pour obtenir un mélange 30 % EP/70 % TCE (avec une 
densité d’environ 1,26 g.cm
-3). Laisser reposer la matière pendant 10 min. Deux nouvelles fractions se 
formeront: un deuxième résidu et les matières flottantes finales (< 1,26 g.cm-3). Le deuxième résidu doit 
être récupéré dans une boîte de Petri (ou un papier-filtre placé sur un entonnoir) en ouvrant le robinet 
jusqu’à ce que seul un peu de mélange des solvants et les matières flottantes finales restent dans 
l’ampoule à décanter. Le liquide restant et les matières flottantes finales sont collectés séparément sur un 
papier-filtre placé sur un entonnoir. La paroi de l’ampoule à décanter doit être rincée avec de l’éther de pétrole afin de recueillir toutes les matières flottantes finales. On laisse sécher les matières flottantes 
finales. Enfin, les matières flottantes finales doivent être passées à travers un tamis à mailles de 0,25 mm 
et les deux fractions obtenues doivent être examinées aux fins de la détection de constituants d’invertébrés terrestres, sauf si le tamisage n’est pas jugé nécessaire.
2.1.4. Examen microscopique
2.1.4.1. Préparation des lames
Les lames microscopiques sont préparées à partir du résidu et, selon le choix de l’opérateur, à partir des 
matières flottantes ou de la matière première. Le cas échéant, pour la détection des constituants 
d’invertébrés terrestres uniquement, des lames doivent également être préparées à partir des matières flottantes finales obtenues conformément au point 2.1.3.4.4. Les deux fractions obtenues (la fine et la 
grossière) doivent être préparées. Les prises d’essai des fractions étalées sur les lames doivent être 
représentatives de la fraction entière.
Un nombre suffisant de lames doit être préparé afin de garantir la réalisation d’un protocole d’examen 
complet, tel que prévu au point 2.1.4.2.
Les lames microscopiques doivent être montées avec le milieu de montage adéquat, conformément au MON 
établi par l’EURL-AP et publié sur son site web. Elles sont recouvertes de lamelles.
2.1.4.2. Protocoles d’observation pour la détection de particules animales dans les aliments composés pour animaux, 
les matières premières pour aliments des animaux et les prémélanges
Les lames microscopiques préparées doivent être observées conformément aux protocoles d’observation 
établis dans les schémas 1 et 2.
Le résidu et, selon le choix de l’opérateur, les matières flottantes ou la matière première doivent être observés 
au microscope composé. En outre, pour la détection des constituants d’invertébrés terrestres, les matières 
flottantes finales obtenues conformément au point 2.1.3.4.4 doivent être observées conformément au schéma 3. Les fractions grossières peuvent en outre être examinées au microscope stéréoscopique. Chaque 
lame doit être observée entièrement à différents grossissements. Des explications précises sur la manière 
d’utiliser les protocoles sont détaillées dans un mode opératoire normalisé (MON) établi par l’EURL-AP et publié sur son site web.
Le nombre minimal de lames à observer à chaque étape des protocoles d’observation doit être strictement 
respecté, à moins que l’ensemble des matières de la fraction ne permette pas d’atteindre le nombre de lames 
prescrit, par exemple lorsque aucun résidu n’est obtenu. Il ne peut pas être utilisé plus de 6 lames par 
détermination pour l’enregistrement du nombre de particules.FR Journal officiel de l’Union européenne L 155/30 8.6.2022  Lorsque des lames supplémentaires sont préparées avec un milieu de montage plus spécifique ayant des 
propriétés de coloration, comme indiqué au point 2.1.2.1.4, pour les matières flottantes ou la matière 
première afin de caractériser davantage les structures (par ex. plumes, poils, particules musculaires ou 
sanguines) qui ont été détectées sur des lames préparées avec d’autres milieux de montage, comme indiqué 
au point 2.1.2.1.3, le nombre de particules doit être compté sur la base d’un nombre de lames par 
détermination ne dépassant pas 6, les lames supplémentaires avec un milieu de montage plus spécifique 
étant comprises dans ce nombre. Les lames supplémentaires préparées à partir des matières flottantes 
finales obtenues, comme indiqué au point 2.1.3.4.4, pour la détection des constituants d’invertébrés 
terrestres ne sont pas prises en considération pour l’identification d’autres natures (vertébrés terrestres et 
poissons).
Afin de déterminer plus facilement la nature et l’origine des particules, l’opérateur peut utiliser des outils 
d’aide tels que des systèmes d’aide à la décision, des bibliothèques d’images et des échantillons de référence.
Schéma 1
Protocole d’observation après sédimentation unique TCE pour la détection de particules d’animaux autres que les 
invertébrés terrestres dans les aliments composés pour animaux, les matières premières pour aliments des 
animaux et les prémélanges aux fins de la première détermination
FR Journal officiel de l’Union européenne 8.6.2022 L 155/31  Schéma 2
Protocole d’observation après sédimentation unique TCE pour la détection de particules d’animaux autres que les 
invertébrés terrestres dans les aliments composés pour animaux, les matières premières pour aliments des 
animaux et les prémélanges aux fins de la seconde détermination
FR Journal officiel de l’Union européenne L 155/32 8.6.2022  Schéma 3
Protocole d’observation après double sédimentation EP/TCE pour la détection de constituants d’invertébrés 
terrestres dans les aliments composés pour animaux, les matières premières pour aliments des animaux et les 
prémélanges
2.1.4.3. Nombre de déterminations
Les déterminations doivent être effectuées sur différents sous-échantillons de 50 g chacun.
Si, à l’issue de la première détermination effectuée conformément au protocole d’observation établi dans le 
schéma 1, ou le schéma 3 selon le cas, aucune particule animale n’est détectée, il n’est pas nécessaire de 
procéder à une détermination supplémentaire, et le résultat de l’analyse doit être rapporté selon les libellés 
prévus au point 2.1.5.1.
Si, à l’issue de la première détermination effectuée conformément au protocole d’observation établi dans le 
schéma 1, une ou plusieurs particules animales d’une nature donnée (c’est-à-dire provenant d’un vertébré 
terrestre ou d’un poisson) sont détectées et si la nature de la ou des particules mises en évidence confirme le 
contenu déclaré de l’échantillon, il n’est pas nécessaire de procéder à une seconde détermination. Si le 
nombre de particules animales d’une nature donnée détectées au cours de cette première détermination est 
supérieur à 5, le résultat de l’analyse doit être rapporté par nature de l’animal selon les libellés prévus au 
point 2.1.5.3. Dans le cas contraire, le résultat de l’analyse doit être rapporté par nature de l’animal selon les 
libellés prévus au point 2.1.5.2.
Si, à l’issue de la première détermination effectuée conformément au protocole d’observation établi dans le 
schéma 3, plus de 5 particules d’invertébrés terrestres sont détectées, il n’est pas nécessaire de procéder à 
une seconde détermination, et le résultat de l’analyse doit être rapporté selon les libellés prévus au 
point 2.1.5.3 pour cette nature.
Dans tous les autres cas, y compris lorsque aucune déclaration du contenu n’a été fournie au laboratoire, une 
seconde détermination doit être effectuée à partir d’un nouveau sous-échantillon. Si, à l’issue de la deuxième 
détermination effectuée conformément au protocole d’observation établi dans le schéma 2, ou le schéma 3 
selon le cas, la somme des particules animales d’une nature donnée détectées sur l’ensemble des deux 
déterminations est supérieure à 10, le résultat de l’analyse doit être rapporté par nature de l’animal selon les 
libellés prévus au point 2.1.5.3. Dans le cas contraire, le résultat de l’analyse doit être rapporté par nature de 
l’animal selon les libellés prévus au point 2.1.5.2.FR Journal officiel de l’Union européenne 8.6.2022 L 155/33  2.1.5. Expression des résultats
Lorsqu’il rapporte les résultats, le laboratoire doit indiquer le type de matière sur lequel l’analyse a porté 
(résidu, matières flottantes, matières flottantes finales ou matière première). Le rapport doit indiquer clairement le nombre de déterminations qui ont été effectuées et si le tamisage des fractions avant la 
préparation des lames, conformément au point 2.1.3.4.3., premier tiret, troisième alinéa, ou au 
point 2.1.3.4.4, troisième tiret, n’a pas été effectué.
Le rapport du laboratoire doit contenir au minimum des informations concernant la présence de 
constituants dérivés de vertébrés terrestres et de poissons.
Les différents cas doivent être présentés de la façon suivante:
2.1.5.1. Aucune particule animale d’une nature donnée n’a été détectée:— “L’échantillon soumis à l’analyse ne contient aucune particule dérivée de vertébrés terrestres détectable au 
microscope optique.”
— “L’échantillon soumis à l’analyse ne contient aucune particule dérivée de poisson détectable au 
microscope optique.”
— “L’échantillon soumis à l’analyse ne contient aucune particule dérivée d’invertébrés terrestres détectable 
au microscope optique.”
2.1.5.2. Entre 1 et 5 particules animales d’une nature donnée ont été détectées alors qu’une seule détermination a été 
effectuée, ou entre 1 et 10 particules d’une nature donnée ont été détectées à la suite de deux déterminations 
[le nombre de particules détectées est inférieur à la limite de décision fixée dans le MON de l’EURL-AP et publiée sur son site web]:
Lorsqu’une seule détermination a été effectuée:
— “L’échantillon soumis à l’analyse ne contient pas plus de 5 particules dérivées de vertébrés terrestres 
détectables au microscope optique. Les particules ont été identifiées comme étant... [de l’os, du cartilage, 
du muscle, des poils, de la corne, autre chose (préciser de quoi il s’agit)]. Cette présence faible est 
inférieure à la limite de décision fixée pour cette méthode d’examen au microscope.”
— “L’échantillon soumis à l’analyse ne contient pas plus de 5 particules dérivées de poisson détectables au 
microscope optique. Les particules ont été identifiées comme étant... [des arêtes, des écailles de poisson, du cartilage, du muscle, des otolithes, des branchies, autre chose (préciser de quoi il s’agit)]. Cette 
présence faible est inférieure à la limite de décision fixée pour cette méthode d’examen au microscope.”
Lorsque deux déterminations ont été effectuées:
— “L’échantillon soumis à l’analyse dans le cadre de deux déterminations ne contient pas plus de 10 
particules dérivées de vertébrés terrestres détectables au microscope optique. Les particules ont été 
identifiées comme étant... [de l’os, du cartilage, du muscle, des poils, de la corne, autre chose (préciser de 
quoi il s’agit)]. Cette présence faible est inférieure à la limite de décision fixée pour cette méthode 
d’examen au microscope.”
— “L’échantillon soumis à l’analyse dans le cadre de deux déterminations ne contient pas plus de 10 
particules dérivées de poisson détectables au microscope optique. Les particules ont été identifiées comme étant... [des arêtes, des écailles de poisson, du cartilage, du muscle, des otolithes, des branchies, 
autre chose (préciser de quoi il s’agit)]. Cette présence faible est inférieure à la limite de décision fixée 
pour cette méthode d’examen au microscope.”
— “L’échantillon soumis à l’analyse dans le cadre de deux déterminations ne contient pas plus de 10 
particules dérivées d’invertébrés terrestres détectables au microscope optique. Les particules ont été identifiées comme étant... [des fragments de cuticules, des parties de bouche, du muscle, des structures 
trachéales, autre chose (préciser de quoi il s’agit)]. Cette présence faible est inférieure à la limite de 
décision fixée pour cette méthode d’examen au microscope.”
Par ailleurs:
— En cas de prétamisage de l’échantillon, le rapport de laboratoire doit mentionner la fraction (fraction 
tamisée, fraction de granulés ou de bouchons) dans laquelle les particules animales ont été détectées, 
dans la mesure où seule la détection de particules animales dans la fraction tamisée peut être le signe 
d’une contamination de l’environnement.FR Journal officiel de l’Union européenne L 155/34 8.6.2022  — Lorsque seules sont détectées des particules animales qui ne peuvent pas être classées comme provenant 
de vertébrés terrestres ou de poissons (par exemple, des fibres musculaires), le rapport doit indiquer que 
seules de telles particules animales ont été détectées et qu’il ne peut être exclu qu’elles proviennent de 
vertébrés terrestres.
2.1.5.3. Plus de 5 particules animales d’une nature donnée ont été détectées alors qu’une seule détermination a été effectuée, ou plus de 10 particules d’une nature donnée ont été détectées à la suite de deux déterminations:
Lorsqu’une seule détermination a été effectuée:
— “L’échantillon soumis à l’analyse contient plus de 5 particules dérivées de vertébrés terrestres détectables 
au microscope optique. Les particules ont été identifiées comme étant... [de l’os, du cartilage, du muscle, 
des poils, de la corne, autre chose (préciser de quoi il s’agit)].”
— “L’échantillon soumis à l’analyse contient plus de 5 particules dérivées de poisson détectables au 
microscope optique. Les particules ont été identifiées comme étant... [des arêtes, des écailles de poisson, du cartilage, du muscle, des otolithes, des branchies, autre chose (préciser de quoi il s’agit)].”
— “L’échantillon soumis à l’analyse contient plus de 5 particules dérivées d’invertébrés terrestres détectables 
au microscope optique. Les particules ont été identifiées comme étant... [des fragments de cuticules, des 
parties de bouche, du muscle, des structures trachéales, autre chose (préciser de quoi il s’agit)].”
Lorsque deux déterminations ont été effectuées:
— “L’échantillon soumis à l’analyse dans le cadre de deux déterminations contient plus de 10 particules 
dérivées de vertébrés terrestres détectables au microscope optique. Les particules ont été identifiées 
comme étant... [de l’os, du cartilage, du muscle, des poils, de la corne, autre chose (préciser de quoi il 
s’agit)].”
— “L’échantillon soumis à l’analyse dans le cadre de deux déterminations contient plus de 10 particules 
dérivées de poisson détectables au microscope optique. Les particules ont été identifiées comme étant... [des arêtes, des écailles de poisson, du cartilage, du muscle, des otolithes, des branchies, autre chose 
(préciser de quoi il s’agit)].”
— “L’échantillon soumis à l’analyse dans le cadre de deux déterminations contient plus de 10 particules 
dérivées d’invertébrés terrestres détectables au microscope optique. Les particules ont été identifiées 
comme étant... [des fragments de cuticules, des parties de bouche, du muscle, des structures trachéales, 
autre chose (préciser de quoi il s’agit)].”
Par ailleurs:
— En cas de prétamisage de l’échantillon, le rapport de laboratoire doit mentionner la fraction (fraction 
tamisée, fraction de granulés ou de bouchons) dans laquelle les particules animales ont été détectées, 
dans la mesure où seule la détection de particules animales dans la fraction tamisée peut être le signe 
d’une contamination de l’environnement.
— Lorsque seules sont détectées des particules animales qui ne peuvent pas être classées comme provenant 
de vertébrés terrestres ou de poissons (par exemple, des fibres musculaires), le rapport doit indiquer que seules de telles particules animales ont été détectées et qu’il ne peut être exclu qu’elles proviennent de 
vertébrés terrestres.».FR Journal officiel de l’Union européenne 8.6.2022 L 155/35