식품의약품안전처 공고제2020-265호
- 2 -식품의약품안전처 공고제2020-265호
식품의기준및규격
을일부개정함에있어국민에게미리알려의견을
수렴하고자그취지,개정이유및주요내용을
행정절차법
제46조에따
라다음과같이공고합니다.
 2020년6월29일
 식품의약품안전처장
식품의기준및규격일부개정고시(안)행정예고
1.개정이유
코로나-19장기화로외식대체가정간편식수요가증가함에따라간편조리
세트(소위밀키트)식품유형을신설하고제품의특성을고려한합리적인
기준·규격신설을통해관련산업을활성화하며식품안전관리를강화하고자함
식품원료의사용기준을명확히하고,식용근거가확인된수산물2종을식품에
사용할수있는원료목록에추가하여식품원료사용의편의성을증진하고,
식품산업활성화에기여하고자함
국내외에서사용되는농약및동물용의약품에대한잔류허용기준을신설·
개정하고,사료등으로인해축산물에비의도적으로잔류되는농약성분의
잔류허용기준및관련시험법을개정하여국민에게안전한식품을공급하고자함
고령친화식품의 물성(경도및점도)시험법을신설하고,이물,비타민및
올리고당시험법의분석조건등을최적화하여시험결과의정확성및신뢰성을
제고하고자함- 3 -
2.주요내용
가.간편조리세트식품유형신설[안제2.4.31),제2.4.32),제5.22.22-2]
1)코로나-19장기화로가정에서간편하게조리하여섭취하는외식대체
가정간편식수요가증가
2)간편조리세트제품에대한식품유형과보존·유통기준,제조·가공기준
및규격을신설
3)제품의특성을고려한합리적기준신설로관련산업활성화및식품
안전관리강화
나.식품원료사용기준개정[안제2.1.1)(24)및제2.3.11)]
1)식품에사용할수없는씨앗이포함된열매및대마씨의식품원료
사용을위해사용기준및조건의명확화필요
2)식품원료중씨앗을사용할수없도록정하고있더라도섭취시씨
앗이제거되는경우,씨앗을포함한열매로식품제조에사용할수
있도록기준신설
3)대마씨앗및대마씨유에칸나비디올(CBD)기준신설
4)식품에사용가능한원료의사용범위확대및명확화로식품원료사
용에따른현장의혼란방지
다.식품원료목록개정[안별표1및별표2]- 4 -1)식품원료목록중품목명,기타명칭,학명,사용부위등이명확하지
않거나,중복등재및식용근거가확인된원료에대한식품원료목록
등재필요
2)매오징어(Wataseniascintillans)와Japaneseseacucumber(Stichopus
japonicus)2품목을「식품의기준및규격」의[별표1]의식품에
사용할수있는원료목록에추가
3)식품원료목록중품목명,기타명칭,학명,사용가능부위등명확화
4)식품에사용가능한원료의품목확대로다양한제품개발등식품
산업활성화에기여하고식품원료사용부위의명확화등식품원료목
록정비를통해사용대상명확화
라.농산물중농약잔류허용기준신설및개정[안별표4중(1)이미
녹타딘,(3)글리포세이트,(9)델타메트린,(21)디클로르보스,(29)디
플루벤주론,(31)마이클로뷰타닐,(46)메틸브로마이드,(50)베나락실,
(54)벤타존,(55)뷰프로페진,(59)비터타놀,(61)비펜트린,(66)사
이퍼메트린,(67)사이플루트린,(68)사이할로트린,(78)알라클로르,
(85)에토펜프록스,(86)에토프로포스,(99)이사-디,(110)카두사포
스,(112)카벤다짐,(114)카보퓨란,(116)카탑,(118)캡탄,(133)테
부코나졸,(135)터부포스,(146)트리클로피르,(149)트리플루미졸,
(161)페녹사프로프-에틸,(162)페니트로티온,(170)펜토에이트,
(171)펜프로파트린,(173)포레이트,(178)폭심,(179)폴펫,(183)플- 5 -루아지포프-뷰틸,(192)프로피코나졸,(200)헥사코나졸,(201)헥시티
아족스,(206)클로르페나피르,(207)테부페노자이드,(208)테부펜피
라드,(212)플루페녹수론,(215)피프로닐,(218)디메토모르프,(221)
디티아논,(225)사이프로디닐,(227)아세타미프리드,(228)아족시스
트로빈,(230)크레속심메틸,(231)클로르플루아주론,(233)펜사이큐론,
(234)펜피록시메이트,(235)포스티아제이트,(237)피메트로진,(238)
플루디옥소닐,(239)플루아지남,(248)아바멕틴,(249)에마멕틴벤조
에이트,(251)에톡사졸,(253)이미벤코나졸,(259)피리메타닐,(265)
디메테나미드,(273)밀베멕틴,(275)뷰타클로르,(283)아시벤졸라-에스
-메틸,(286)에트리디아졸,(290)인독사카브,(299)티플루자마이드,
(301)펜헥사미드,(308)플루설파마이드,(309)플루톨라닐,(321)디
노테퓨란,(323)보스칼리드,(325)사이아조파미드,(326)아세퀴노실,
(332)클로티아니딘,(333)테부피림포스,(335)트리플록시스트로 빈,
(345)피라클로스트로빈,(349)노발루론,(352)메톡시페노자이드,
(353)메트코나졸,(357)디티오카바메이트,(370)벤티아발리카브아이소
프로필,(380)피리달릴,(381)육-비에이,(384)사이플루페나미드 ,
(386)플로니카미드,(393)메트알데하이드,(395)플루오피콜라이드,
(399)사이플루메토펜,(403)메타플루미존,(404)메트라페논,(405)
사이에노피라펜,(408)스피네토람,(416)클로란트라닐리프 롤,(422)
펜티오피라드,(423)피콕시스트로빈,(424)피리플루퀴나존,(427)이
미시아포스,(428)플루오피람,(430)설폭사플로르,(431)아이소피라잠,- 6 -(433)사이안트라닐리프 롤,(435)펜피라자민,(436)플루티아닐,(437)
플룩사피록사드,(441)피리벤카브,(442)플루피라디퓨론,(450)발리
페날레이트,(452)아이소페타미드,(453)만데스트로빈,(454)플루엔
설폰,(458)사이클라닐리프롤,(460)피카뷰트라족스,(467)플룩사메타
마이드,(468)티아페나실,(469)플루트리아폴,(470)비사이클로피론,
(473)피라지플루미드,(499)플루티아셋-메틸,(500)피디플루메토펜,
(501)스트렙토마이신,(502)발리다마이신에이 ,(510)옥시테트라사이
클린,(511)아사이노나피르,(512)아피도피로펜]
1)「농약관리법」에따른등록(예정)농약및수입농산물에잔류허용
기준설정신청에따른농약잔류허용기준신설및개정필요
2)아피도피로펜등128종의농약잔류허용기준신설및개정
3)농산물에농약잔류허용기준을합리적으로신설및개정하여국민에게
안전한식품공급
마.식품중동물용의약품의 잔류허용기준신설및개정[안별표5중
(56)린코마이신,(82)세파세트릴,(127)안티피린,(129)구아이페네
신,(171)요오드퀴놀린설폰산,(172)플루메타손,(173)클라노부틴]
1)「약사법」에사용이허가된동물용의약품의 안전관리에따른관련
기준신설필요
2)린코마이신등7종의동물용의약품잔류허용기준개정
3)식품중동물용의약품잔류허용기준을 합리적으로개정하여국민에- 7 -게안전한식품공급
바.축·수산물중잔류물질잔류허용기준개정[안별표6중(2)글리포
세이트]
1)「농약관리법」에등록된농약을사용한사료로부터이행되어축산물
에잔류되는농약성분의잔류관리를위한잔류허용기준개정필요
2)글리포세이트의잔류물정의및잔류허용기준개정
3)축산물중농약성분의잔류허용기준을 과학적인근거에의해합리
적으로개정함으로써국민에게안전한식품공급
사.일반시험법신설및개정[안제8.1.1.21.2.2,제8.1.1.5,제8.1.1.5
1.5.2,제8.2.2.12.1.52.1.5.4,제8.2.2.22.2.22.2.2.3나,제8.2.2.2
2.2.22.2.2.7,제8.2.2.22.2.22.2.2.9가,제8.2.2.22.2.22.2.2.11,제8.
2.2.22.2.22.2.2.15,제8.3.3.1,제8.3.3.43.4.1가1),제8.3.3.6,제
8.6.6.26.2.1가,제8.6.6.26.2.1나,제8.6.6.26.2.1다,제8.6.6.2
6.2.1라,제8.6.6.26.2.1바,제8.6.6.26.2.1사,제8.6.6.66.6.4
6.6.4.3가.3)가),제8.6.6.66.6.46.6.4.3가.3)다),제8.6.6.66.6.4
6.6.4.3가.5)가)(3),제8.7.7.17.1.47.1.4.233,제8.7.7.17.1.4
7.1.4.234,제8.7.3.2.10,제8.7.3.2.16,제8.8.3.58,제8.9.9.39.3.2,제8.
9.9.49.4.2,제8.9.9.59.5.2,제8.9.9.59.5.4,제8.9.9.17]
1)식품별특성을반영한이물시험법개정- 8 -2)고령친화식품의물성시험법(경도및점도)신설
3)식용유지류에대한지방산시험법중중복된방법을정비하고,시료
의전처리방법개선
4)비타민B2,비타민D,비타민B6,비타민B12,비오틴시험법개정
5)보존료및타르색소시험법적용범위명확화
6)올리고당시험법개정
7)식염의페로시안화이온시험법중이동상명확화
8)농산물중아사이노나피르및아피도피로펜에대한농약시험법신설
9)축산물중글리포세이트의 잔류물의정의개정에따른관련시험법
개정
10)다이옥신및PCBs시험법의독성등가계수및표준물질에대하여
국제적으로통용되는용어로개정및벤조피렌시험법의적용범위
및전처리카트리지의사용가능범위확대
11)칸나비디올(CBD)기준설정에따른시험법신설
12)과학적인시험법개정으로검사신뢰도를제고함으로서국민에게
안전한식품공급
3.의견제출
「식품의기준및규격」일부개정고시(안)에대하여의견이있는단체
또는개인은2020년7월20일까지다음사항을기재한의견서를식품의약
품안전처장(우편번호:28159,주소:충청북도청주시흥덕구오송읍오송- 9 -생명2로187오송보건의료행정타운식품의약품안전처 ,참조:식품기준과,
전화043-719-2420,팩스043-719-2400)에게제출하여주시기바랍니다.
가.예고사항에대한항목별의견(찬․반여부와그이유)
나.성명(단체의경우단체명과그대표자의성명),주소및전화번호
다.기타참고사항- 10 -식품의약품안전처 고시제2020-265호
「식품위생법」제7조제1항에따른「식품의기준및규격」을다음과
같이개정고시합니다.
2020년06월29일
식품의약품안전처장
식품의기준및규격일부개정고시(안)
식품의기준및규격일부를다음과같이개정한다.
제2.1.1)중(24)를다음과같이신설한다.
(24)식품원료중씨앗을사용할수없도록정하고있는열매는섭취시
씨앗이제거되는경우씨앗을포함한열매를식품의제조·가공에사
용할수있다.
제2.3.중11)을다음과같이한다.
11)테트라하이드로칸나비놀 (δ-9-Tetrahydrocannabinol,THC)및칸나비
디올(Cannabidiol,CBD)기준
(1)삼(대마)씨앗∶THC5mg/kg이하,CBD10mg/kg이하
(2)삼(대마)씨유∶THC10mg/kg이하,CBD20mg/kg이하- 11 -제2.4.중31)및32)를각각다음과같이신설한다.
31)식육,기타식육또는수산물을구성재료로포함하는간편조리세트(특
수의료용도식품 중간편조리세트형 제품포함)는냉장또는냉동으로
보존및유통하여야한다.
32)식품제조·가공업영업자가냉동식육또는냉동수산물을단순해동또
는해동후절단하여간편조리세트(특수의료용도식품 중간편조리세
트형제품포함)의재료로구성하는경우로서냉동식육또는냉동수
산물을해동하여사용하였음을표시한경우에는해동된냉동식육또
는냉동수산물을재냉동하지않고냉장으로보존및유통할수있다.
단,식육함량이구성재료함량의60%미만인제품에한한다.
제5.22.22-21)중“즉석조리식품을”을“즉석조리식품,간편조리세트를”로
한다.
제5.22.22-23)중(1)을다음과같이신설한다.
(1)간편조리세트제품은아래의기준을준수하여야한다
①구성재료중가열또는세척하지않고그대로섭취하는과일류또는
채소류는충분히세척한다음식품첨가물로허용된살균제로살균하고
깨끗한물로충분히세척하여야한다.- 12 -②식용란과가금육및가열조리없이섭취하는농·축·수산물은다른재료
와직접접촉하지않도록각각구분포장하여야하고,그외재료의경우
에도비가열섭취재료와가열후섭취재료는서로섞이지않도록구분하
여포장하여야한다.
③식용란을포함하는경우물세척된식용란을사용하여야한다.
④다른제조업자가포장을완료한식품을포장된상태그대로구성재료로
사용하는경우기준및규격에적합한것을사용하여야한다.
제5.22.22-24)중(1)및(2)를각각(2)및(1)로한다.
제5.22.22-24)(2)(종전의(1))중“그대로”와“선식”을각각“그대로또
는단순혼합하여”와“선식,비빔밥”으로한다.
제5.22.22-2)4)중(3)을다음과같이한다
(3)즉석조리식품
동
식물성원료에식품이나식품첨가물을가하여제조
가공한것으로서
단순가열등의가열조리과정을 거치면섭취할수있도록제조된국,탕,
수프,순대등의식품을말한다.다만,간편조리세트에 속하는것은제외
한다.
제5.22.22-24)중(4)를다음과같이신설한다.- 13 -(4)간편조리세트
조리되지않은손질된농
축
수산물과가공식품등조리에필요한정량
의식재료와양념및조리법으로구성되어,제공되는조리법에따라소
비자가가정에서간편하게조리하여섭취할수있도록제조한제품을말
한다.
제5.22.22-2중5)를다음과같이한다.
5)규격
유형
항목신선편의
식품즉석섭취식품즉석조리
식품간편조리세트*1
(1)
세균수n=5,c=0,m=0(멸균제품에한한다) -
(2)
대장균군- -n=5,c=1,m=0,
M=10(살균
제품에한한다)-
(3)
대장균n=5,c=1,m=10,
M=100n=5,c=1,m=0,
M=10n=5,c=1,m=0,
M=10
(살균
제품은제외한다)n=5,c=1,m=0,M=10
(가열조리하여섭취하는
농
축
수산물재료는
제외*2)
(4)
황색포도상구균1g당100이하1g당100이하
(가열조리하여섭취하는
농
축
수산물재료는
제외*2)
(5)
살모넬라n=5,c=0,m=0/25gn=5,c=0,m=0/25g
(가열조리하여섭취하는
농
축
수산물재료는
제외*2)
(6)
장염비브리오1g당100이하
(살균또는멸균처리되지않은해산물함유
제품에한한다.)-1g당100이하
(가열조리하지않고
섭취하는해산물재료에
한함.다만,살균또는
멸균처리된해산물재료는
제외)
(7)
장출혈성대장균n=5,c=0,m=0
/25g- -n=5,c=0,m=0/25g
(가열조리하지않고
섭취하는농
축
수산물
재료에한함)- 14 -*주1.간편조리세트의규격은모든구성재료를혼합하여적용
*주2.간편조리세트구성재료중다른재료와직접접촉하지않도록구분포장된농·축·수산물에
한함
제8.1.1.2중1.2.2를다음과같이한다.
1.2.2식품별이물
가.시험법적용범위
아래의개별시험법[가)∼호)]에제시된식품에적용한다.
나.분석원리
식품의특성에따라시험조작한후1.2.1일반이물에따라시험한다.
다.시험조작
가)라면,국수,두부,유과,건빵,도넛,전분및이유식
검체50∼100g을잘게잘라1L의와일드만플라스크(Wildeman
flask)에넣고석유에테르를검체가잠길정도로가한다.1시간동안
10분간격으로약1분씩흔들어준후플라스크를기울여상층의석유
에테르를제거한다.(이때검체가따라나와석유에테르만제거하기어
려울경우,부흐너깔때기(Buchnerfunnel)또는힐슈깔때기(Hirsch
funnel)에검체가따라오지않게주의하며플라스크를기울여상층의
석유에테르를제거한다.여과지상의검체는세척병의증류수로세척(8)
바실루스세레우스1g당1,000이하 - -
(9)
클로스트리디움
퍼프린젠스1g당100이하 - -- 15 -한후와일드만플라스크로옮겨합친다.)와일드만플라스크에증류
수500mL를가하고인화되지않게주의하며끓는물에서중탕하는
동안,10분마다와일드만플라스크를흔들어검체를잘게부수어주고
남아있는석유에테르를완전히휘발시킨다.중탕이끝난뒤와일드
만플라스크를실온에서방냉한다.와일드만플라스크에염산농도가
약1%가될때까지염산을가하고끓는물에서1시간동안10분간
격으로흔들어주며중탕하여소화시킨다.1.2.1일반이물시험다.및
라.에따라시험한다.
나)간장,식초,소스,청량음료수,유산균음료,주류,유가공품(우유,산
양유,발효유),탈지유,가공유및유음료
(1)검병법
검체가투명한것은광원(태양광선또는전등)을향해백색또는흑
색종이를배경으로병을천천히거꾸로뒤집으며검사한다.이물이
있으면이물이흘러나가지않도록주의하며상등액을기울여버린
다.부흐너깔때기또는힐슈깔때기를이용하여흡인여과할경우침
전물을잘섞은후흡인여과하여여과지상의이물종류를확인하
고,원심침전할경우모세관피펫으로침전물을빨아올려이물의종
류를확인한다.다만,검체가투명하더라도색이진하거나점성이있
어위의방법으로침전물검사가어려울경우에는다음의(2)희석
법에따라시험한다.- 16 -(2)희석법
침전물이있거나혼탁한것은검체를대형비커에옮기고증류수로
희석한다.유리막대등으로저으면서광원을향해백색또는흑색
종이를배경으로이물의유무를검사한다.이물이있을경우이물
종류(광물성,동·식물성)에따라아래의(가)또는(나)의방법에따
라이물을분리한다.
(가)클로로포름에의한분리(주로광물성이물에적용)
비커에있는검체전부를원심침전한후상등액을기울여제거한
다.침전물을다른비커에옮겨건조하고침전물이잠길정도로클
로로포름을가하고섞어준다.유리막대등을이용하여5분간격으
로조심히젓고,30분후상층및클로로포름층을기울여제거한
다.비커에남은침전물을다시클로로포름으로수회세척하고,부
흐너깔때기혹은힐슈깔때기로흡인여과하여여과지상의이물을
검사한다.
(나)염산분해에의한분리(주로동·식물성이물에적용)
비커에있는검체전부를원심침전하고상등액을기울여제거한다.
침전물을삼각플라스크에옮겨약200∼300mL의1%염산용액을
가하고끓는물에서1시간동안중탕한다.삼각플라스크를실온에
서방냉한후부흐너깔때기혹은힐슈깔때기로흡인여과하여여과
지상의이물을검사한다.
다)장류(된장,고추장,춘장),케첩,잼류,커피,차,고춧가루,후춧가루- 17 -및카레
검체50g을1L비커에넣고증류수300mL를가하여유리막대등
으로균질화한다.염산12mL를가하고끓는물에서약5분간중탕
한후방냉한다.1.2.1일반이물시험다.에따라시험하고침전물이
있을경우에는건조등을통해수분을제거한후1.2.1일반이물시험
라.에따라시험한다.(단,토마토제품의경우검체를비커에넣고5%
제3인산나트륨(Na3PO4)용액또는10%염산용액을이용하여pH를
4.5∼5.0으로조정하고,셀룰라아제용액과펙티나아제용액을각각
50mL씩가하여45℃에서2시간소화시키는절차를선행한후시험
을진행한다.)
라)당류(설탕류,포도당,엿류),벌꿀,분말청량음료,인스턴트커피및
인삼차
검체50g을500mL비커에넣고열탕200mL를가한다.검체를완
전히녹이고1.2.1일반이물시험나.에따라시험한다.여과가잘되
지않을경우,열탕을따로준비하여여과지위에부어검체를완전
히녹인후여과지에부착된이물을검사한다(벌꿀의경우꽃가루,
벌집및꿀벌에서유래되는이물은제외한다).
마)버터,식용유지가공품(마가린,쇼트닝),식용유지류(참기름,채종유,
미강유,대두유)및크림
검체100g을1L비커에넣고2%염산(HCl)용액200mL를가하여
섞은후끓는물에서중탕하여검체를완전히녹이고부흐너깔때기- 18 -혹은힐슈깔때기로흡인여과한다.여과지에지방이응고되어잘여과
되지않으면열탕을따로준비하여여과지위에조심히가하면서지
방을완전히녹이고여과지에부착된이물을검사한다.
바)아이스크림분말,무당연유,농축유류(가당연유,가당탈지연유),분
유류(전지분유,탈지분유,가당분유)및조제유류(분말),조제식
검체100g을1L비커에넣고2%EDTA-4Na(Ethylenediamine
tetraaceticacid,tetrasodiumsalt)용액100mL를가하고유리막대
등으로균질화한다.2%EDTA-4Na용액400mL를천천히가하여
유리막대등으로젓고약30분간방치한다.이를부흐너깔때기또는
힐슈깔때기로흡인여과하여여과지상의이물을검사한다.단,전분이
함유되어있어여과가곤란한경우,검체를증류수400mL에녹이고
판크레아틴(Pancreatin)용액20mL를가하여유리막대등으로균질
화한다음항온기등을이용하여40℃에서3시간동안소화시키는과
정을선행한후시험한다.
사)식육가공품,어육가공품류
검체50g을가로,세로각각약7mm의크기로잘라와일드만플라
스크에넣고1%염산용액300mL를가하고끓는물에서1시간동안
중탕한다.수산화나트륨용액,제3인산나트륨(Na3PO4)용액을이용하여
pH를7∼8로조정한후항온기등을이용하여온도를40℃로유지한
다.판크레아틴(Pancreatin)용액50mL를가하고유리막대등으로충
분히저은후항온기등을이용하여40℃에서30분간방치한다.제3- 19 -인산나트륨(Na3PO4)용액을이용하여pH를7∼8로보정하고항온기
등을이용하여40℃에서하룻밤동안소화시킨다.끓는물에서1시간
동안중탕후실온까지방냉하고,미네랄오일(Mineraloil)25mL를
가하여1.2.1일반이물시험다.에따라시험한다.침전물이있을경우
건조등을통해수분을제거한후1.2.1일반이물시험라.에따라시
험한다.
아)소스류(마요네즈)
검체100g을1L비커에넣고인산(Phosphoricacid)50mL를넣은
후유리막대등으로잘저어준다.비커에증류수300mL를가하고
유리막대등으로균질화하고이를부흐너깔때기혹은힐슈깔때기로
흡인여과하여여과지에부착된이물을검사한다.
자)아이스크림류
검체를녹였을때투명한액체가되면나)간장시험법에따르고,팥
등고형물을가하여만든빙과는다)된장시험법에따라시험한다.
그이외의경우에는검체50g을1L비커에넣고증류수를가하여
100mL로한다.4%EDTA-4Na(Ethylenediaminetetraaceticacid
tetrasodiumsalt)용액을가한후바)아이스크림분말시험법에따라
시험한다.
차)캔디류(캐러멜,사탕)
검체100g을500mL비커에넣고250mL의열탕을가한다.80℃
물에서중탕하면서유리막대등으로저으면서완전히녹이고표준망- 20 -체(106μm×106μm)로여과한다.약50℃의온탕을준비하여체에
부어잔류물을잘세척한후이물을검사한다.
카)추잉껌
검체100g을환류플라스크에넣고300∼600mL의중류수또는150
∼600mL의2%염산을가하여끓는물에서10∼12분간(껌베이스가
분리할때까지)중탕한다.환류플라스크를55℃이하가될때까지방
냉하고에틸아세테이트150mL를가한다.환류플라스크에환류냉각
관을연결한후혼합액이균질화될때까지가열하고,따뜻할때표
준망체(106μm×106μm)로여과한후에틸아세테이트로씻는다.체
를통과하지않은잔류물을여과지에옮겨이물을검사한다.
타)초콜릿류
검체50g을1L비커에넣고5∼10%붕산(Boricacid)용액500mL
를가한후끓는물에서15분간중탕한다.이를표준망체(106 μm×
106μm)로여과하고온탕을부어충분히세척한다.에탄올,클로로포
름의순서대로2회반복하여세척하고다시에탄올로세척한후체를
통과하지않은잔류물을여과지에옮겨이물을검사한다.
파)빵류및생과자류
검체중크림부분50g을취하여2%염산용액200mL를가하여끓
인후유리막대로충분히젓고흡인여과한다.여과하기어려울경우
에탄올약100mL를가하여여과하고여과지는뜨거운2%염산용액
으로씻은다음이물을검사한다.- 21 -검체중생지(카스테라및빵부분)부분은별도로60g(빵은100g)
을취한후가)라면시험법에따라시험한다.
하)통조림
검체약350g을깨끗한비커에옮기고통조림내부를증류수로잘
세척한후세척액을비커에합친다.세척병등을이용하여증류수로
검체가부서지지않게주의하면서검체외부를충분히세척한후검
체를부서지지않게주의하며비커에서제거한다.세척액을부흐너깔
때기혹은힐슈깔때기로흡인여과하여여과지상의이물을검사한다.
작은조직이많을때는세척액을와일드만플라스크에옮기고미네랄
오일(Mineraloil)을가하여위의1.2.1일반이물시험다.에따라시
험한다.무거운이물이있을때는1.2.1일반이물시험라.에따라시
험한다.
허)조제유류(영아용조제유,성장기용조제유)중탄화물
검체100g을1L비커에넣고2%EDTA-4Na(Ethylenediamine
tetraaceticacidtetrasodiumsalt)용액100mL를가하고덩어리가
없도록유리막대등으로부수면서균질화한다.비커에2%
EDTA-4Na용액400mL를천천히가하면서유리막대등으로젓고
약30분간방치한다.이를여과필터(MilkSedimentDisk,직경:33
mm)를이용하여흡인여과하고,비커에남아있는잔류물은증류수로
세척하여같은여과필터에흡인여과한다.여과필터에남아있는탄
화물을판정표와비교하여육안으로판정한다.단,전분이함유되어- 22 -있어여과가곤란한경우,검체를증류수400mL에녹이고판크레아
틴(Pancreatin)용액20mL를가하여유리막대등으로균질화한다음
항온기등을이용하여40℃에서3시간동안소화시키는과정을선행
한후시험한다.
[탄화물표준판정표]
호)치즈류
검체100g을가로,세로각각약10mm의크기로잘라비커에넣
고열탕300mL를가한후끓는물에서30분동안유리막대등을이
용하여균질화하면서중탕한다.비커에염산12mL를가하고끓는
물에서검체가녹을때까지중탕한후,뜨거운상태에서검체를와일
드만플라스크로옮긴다.비커를열탕,60%에탄올의순서대로세척하
고세척액을위의와일드만플라스크에합치고실온까지방냉한후
1.2.1일반이물시험다.및라.에따라시험한다.- 23 -제8.1.중1.5를1.5.1로하고,“1.5물성시험법”을신설한다.
제8.1.1.5중1.5.2를다음과같이신설한다.
1.5.2고령친화식품물성시험
고령친화식품중고령자가섭취하기편리하도록경도나점도를조정하여
제조된제품에적용한다.
1.5.2.1경도시험법
제1법에따라시험하는것을원칙으로한다.다만,죽등유동성식품,
밥등형태를특정할수없는식품,면류등제1법으로측정이불가한
제품은제2법에따라시험한다.
가.제1법
1)시험법적용범위
고령친화식품으로서 고령자가씹기편하도록경도를조정하여제조된
고체식품에적용한다(단,제2법적용대상은제외).
2)분석원리
막대기형태의프로브를사용하여일정한속도로검체를뚫어관통할
때의힘값(N)을프로브의밑면적(m2)으로나눈응력(N/m2)의최대값을
측정한다.
3)장치
물성측정기(Textureanalyzer),물성측정용프로브(원형,밑면의직경
5mm)및물성측정용아크릴바닥판(두께10mm,정중앙직경10- 24 -mm구멍)
*물성측정용바닥판(바닥판의가로,세로크기는사용장비에맞게
조절가능)
4)시험조작
가)검체채취
검체는너비20mm이상의크기로하여측정하되가능한절단등의
전처리를하지않고그대로사용한다.특정한형태로절단하여섭취하
도록명시된경우제품의표시사항에따라절단한것을시료로한다.
이때,여러종류의고형물을포함하거나시료의부위별로경도가다른
경우가장단단한부위를측정하며,단순조리과정을거쳐섭취하는제
품의경우제품표시사항의조리방법에따라조리한것을시료로사용
한다.
나)실험
프로브가바닥판구멍의중앙에위치하도록바닥판을고정한다.시료
를올려놓은후표1과같은조건에서프로브가시료를완전히뚫고- 25 -지나가는동안측정되는응력중최대값을측정한다.
표1.5mm프로브사용시물성측정기사용조건
5)판정
가)프로브(probe)로시료를관통할때측정되는힘값(N)중최대값을
측정값으로한다.
나)측정값을프로브의밑넓이로나눈응력(N/m2)을결과값으로한다.
*직경이5mm인프로브의밑넓이:19.6mm2
*응력측정값×항목 제1법
프로브 (Probe) 형태 ◦ 원형(밑면의 직경 5 mm)
천공바닥판◦ 두께 10 mm
◦ 정중앙 직경 10 mm 구멍 
테스트 속도 ◦ 100 mm/min
측정온도 ◦ 20 ± 2℃
측정깊이 ◦ 완전히 관통
- 26 -다)제품1품목당5개의검체를준비하여반복실험을진행하고최대,
최소값을제외한3회평균값을경도(N/m2)로한다.
나.제2법
1)시험법적용범위
고령친화식품으로서 고령자가씹기편하도록경도를조정하여제조된
제품중죽등유동성식품,밥등형태를특정할수없는식품또는면
류등제1법으로측정이불가한제품에적용한다.
2)분석원리
막대기형태의프로브를사용하여일정한속도로검체를압착할때의
힘값(N)을프로브의밑면적(m2)으로나눈응력(N/m2)의최대값을측정
한다.
3)장치
물성측정기(Textureanalyzer),물성측정용프로브(원형,밑면의직경
20mm)및시료용기(직경40mm,높이20mm)
*물성측정용기
- 27 -4)시험조작
가)검체채취
시료를시료용기에15mm높이로충진한다.다만,측정용기에담으면
물성이변화하는것,측정용기로옮겨담을수없는것등은측정에
지장이없음을확인하여클리어런스(최대압착시용기바닥과프로브
사이의거리)를시료두께의30%로하여직접측정할수있다.이때,
여러종류의고형물을포함하는제품은가장단단한고형물을,물등
과혼합하거나가열하는등단순조리과정을거쳐섭취하는제품의경
우제품표시사항의조리방법에따라조리한것을시료로사용한다.
나)실험
시료를담은용기가프로브의중앙에위치하도록한다음표2와같은
조건에서제품을압착할때측정되는응력중최대값을측정한다.
표2.20mm프로브사용시물성측정기사용조건
항목 제2법 
프로브 (Probe) 형태 ◦ 원형(밑면의 직경 20 mm)
시료용기◦ 직경(내경) 40 mm
◦ 높이 20 mm
테스트 속도 ◦ 600 mm/min
측정온도 ◦ 20 ± 2℃
측정깊이◦ 바닥에서 5 mm 까지(또는 직접 측정하는 경우 클리어런스 
30%)- 28 -
5)판정
가)프로브(probe)로압착시측정되는힘값(N)중최대값을측정값으로
한다.
나)측정값을프로브의밑넓이로나눈응력(N/m2)을결과값으로한다.
*직경이20mm프로브의밑넓이:314mm2
*응력측정값×
다)제품1품목당5개의검체를준비하여반복실험을진행하고최대,
최소값을제외한3회평균값을경도(N/m2)로한다.
1.5.2.2점도시험법
가.시험법적용범위
고령친화식품중경도20,000N/m2미만의액상제품에적용한다.
나.분석원리
회전형점도계의스핀들을일정한속도로회전시킬때의점도를측정한
다.
다.장치:회전형점도계(Viscometer)- 29 -표1.점도계사용조건
라.시험조작
가)검체채취
유리비커(600mL,직경90mm)에시료약500mL을채운다.
나)실험
시료용액의중앙에스핀들을위치시키고스핀들의표시지점까지잠기
게한다.이때스핀들하단에기포가발생하지않도록주의한다.시료온
도20±2℃에서회전형점도계의스핀들을12rpm으로회전시켜2분후
의값을측정한다.
마.판정
1)측정된점도값(mPa
s)을결과값으로한다.다만,점도값으로직접표
시되지않는장비를사용하는경우측정된수치에대응하는계수를
곱하여환산한점도값(mPa
s을결과값으로한다.
*점도(mP
s)=측정값×계수항목 시험조건
장비 ◦ 회전형 점도계 (LV형 또는 이와 동등이상의 점도계 )
스핀들 ◦ 점도 측정용 스핀들
용기◦ 유리비커 (직경 90 mm, 부피 600 mL)
◦ 시료량 500 mL
측정온도 ◦ 20 ± 2℃
테스트 속도 ◦ 12 rpm- 30 -2)제품1품목당3개의검체를준비하여각각실험을진행한후3회실
험의평균값을점도(mPa
s)로한다.
제8.2.2.12.1.5중2.1.5.4를다음과같이한다.
2.1.5.4지방산
가.제1법
   1) 시험법 적용범위
식용유지류에적용한다.
2)분석원리
유지를메탄올성수산화나트륨용액으로처리하여알칼리염을만든후
트리플루오로보란메탄올 용액을가하고가열하여에스테르화한다.
생성된지방산에스테르를이소옥탄(isooctane)에녹여분석을행한다.
개별지방산의함량및대표적인지방산의합을계산하여포화지방,
단일불포화지방,다중불포화지방함량을분석한다.
3)장치
가)기체크로마토그래프:불꽃이온화검출기(FlameIonizationDetector,
FID)
나)교반기(vortexmixer)
다)가열기(heatingblock)
라)질소농축기
4)시약및시액- 31 -가)14%트리플루오로보란메탄올 용액(125gBF3/LMeOH)
나)메탄올성수산화나트륨용액(0.5N):수산화나트륨2g을메탄올
100mL로조제한다.장시간방치하는경우흰침전(탄산나트륨)이
생길수있으나이는무시하여도된다.
다)이소옥탄
라)무수황산나트륨
마)포화염화나트륨용액
바)내부표준용액:내부표준용액의농도는지방산표준용액의
감응도(피크의면적또는높이)보다높게조절한다.
(1)지방산사용시:Triundecanoin(C11:0)을이소옥탄에녹여사용한다.
(2)지방산메틸에스테르사용시:Undecanoicacidmethylester를이
소옥탄에녹여사용한다.
사)표준용액의조제
(1)지방산사용시:분석하고자하는지방산0.01g을이소옥탄10
mL에녹여표준원액으로한다(1mg/mL).지방산표준원액을적절
한농도로희석한표준용액1mL를유리튜브에취하고내부표준
용액1mL를첨가한다.(단,표준용액과시험용액의내부표준물질
농도가동일한농도가되도록조절한다.)★이어0.5N메탄올성
수산화나트륨용액1.5mL를가하고질소를불어넣은후즉시뚜껑
을덮고혼합한다.이어100℃heatingblock에서약5분간가온한
다.이를냉각한후14%트리플루오로보란메탄올 용액2mL를가- 32 -하고다시질소를불어넣은후즉시뚜껑을덮고혼합하고100℃에
서30분간가온한다.이어30～40℃로냉각하여이소옥탄1mL를
가하여질소를불어넣은후뚜껑을덮고이온도에서30초간격렬
히진탕한다.다음즉시포화염화나트륨용액5mL를가하고질소
를불어넣은후뚜껑을덮고진탕한다.상온으로냉각한후수층으
로부터분리된이소옥탄층을무수황산나트륨으로탈수하여표준
용액으로한다.
(2)개별지방산메틸에스테르사용시:분석하고자하는지방산메틸
에스테르를이소옥탄에녹여표준원액으로한다(1mg/mL).표준원
액을적절한농도로희석한용액1mL에바)내부표준용액(2)1
mL를첨가하여표준용액으로한다.
(3)혼합지방산메틸에스테르(FAMEmixture37종)사용시:36종지
방산메틸에스테르1)에내부표준물질메틸에스테르가포함된표
준용액을사용한다.
1)C4:0-tetranoicmethylester,
C6:0-hexanoicmethylester,
C8:0-octanoicmethylester,
C10:0-decanoicmethylester,
C12:0-dodecanoicmethylester,
C13:0-tridecanoicmethylester,
C14:0-tetradecanoicmethylester,- 33 -C14:1-9-tetradecenoicmethylester,
C15:0-pentadecanoicmethylester,
C15:1-10-pentadecenoicmethylester,
C16:0-hexadecanoicmethylester,
C16:1-9-hexadecenoicmethylester,
C17:0-heptadecanoicmethylester,
C17:1-10-heptadecenoicmethylester,
C18:0-octadecanoicmethylester,
C18:1-elaidicmethylester,
C18:1-9-octadecenoicmethylester,
C18:2-6-linolelaidicmethylester,
C18:2-9,12-octadecadienoicmethylester,
C18:3-9,12,15-octadecatrienoicmethylester,
C18:3-6,9,12-octadecatrienoicmethylester,
C20:0-eicosanoicmethylester,
C21:0-heneicosanoicmethylester,
C20:1-8-eicosenoicmethylester,
C20:2-11,14-eicosadienoicmethylester,
C20:3-8,11,14-eicosatrienoic methylester,
C20:3-11,14,17-eicosatrienoic methylester,
C20:4-arachidonicmethylester,- 34 -C20:5-eicosapentaenoic methylester,
C22:0-docosanoicmethylester,
C22:1-9-docosaenoicmethylester,
C22:2-docosadienoicmethylester,
C22:6-docosahexaenoicmethylester,
C23:0-tricosanoicmethylester,
C24:0-lignocericmethylester,
C24:1-nervonicmethylester
5)시험용액의조제
검체약25mg을유리튜브에정밀히취하고내부표준용액1mL를첨
가한다.사)표준용액(1)지방산사용시★이하에따라시험하여시험
용액으로한다.
6)시험방법
가)기체크로마토그래프조건
지방산분석시C18:3(Linolenicacid,n3cis)과C20:1(Eicosenicacid)및
C22:1(Docosaenoicacid),C20:3(Eicosatrienoicacid)와C20:4(Arachidonic
acid)의분리도는1.0이상이여야한다.
(1)칼럼:SP-2560(100m⨉ 0.25mm⨉ 0.2μm)또는이와동등한
것
(2)주입부온도:225℃- 35 -(3)칼럼온도:100℃에서4분간유지한후3℃/min의비율로
240℃까지온도를상승시키고이후15분이상유지한다.
(4)검출기온도:285℃
(5)유량:헬륨0.75mL/min
(6)splitratio:200:1
나)지방산표준물질의크로마토그램
C18:1(Elaidicacid)과C18:2(Linolelaidicacid)의트랜스형의이성체의표
준물질을포함한37종의지방산메틸에스테르표준물질의크로마토그
램은그림1과같다.통상적으로트랜스형의이성체는시스형보다먼저
분리된다.C18:3(Linolenicacid,n3,cis)과C20:1(Eicosenicacid)의피크
순서는칼럼의종류및분석온도에따라상이하며트랜스지방산의분
리조건을최적화시키는데에는C20:1(Eicosenicacid)의피크가
C18:3(Linolenicacid,n3,cis)의바로앞에나오는것이좋다(SP-2560의
경우,그림1)- 36 -
그림 1. 37종 지방산 메틸 에스테르의 크로마토그램
다)지방산전환계수
GC-FID상에서의분석은각지방산의메틸에스테르이므로해당지방
산으로전환해야한다.각지방산별전환계수는8)정량시험표1.과같
다.트랜스형의지방산인경우동일한분자량을갖는시스형지방산의
경우와동일한전환계수를사용한다.- 37 -라)부분경화유중트랜스지방크로마토그램
부분경화유의크로마토그램중트랜스지방의검출시간은그림2.와같
다.
그림2.부분경화유의크로마토그램
7)정성시험
시험용액및지방산표준용액을각각1～2μL를주입하여RRT
(RelativeRetentionTime;내부표준물질에대한각지방산들의머무름
시간의비)를사용하여각각의지방산을확인한다.
8)정량시험
정성시험법에의해얻은각지방산의피크면적,내부표준물질의피크면
적으로부터다음과같이정량을한다.
가)개별지방산메틸에스테르의함량계산- 38 -WFAMEi =Pti×Wt C11:0×1.0067
PtC11:0×Ri
WFAMEi:지방산i의메틸에스테르로서의양(mg)
Pti:시험용액중지방산i의피크면적
WtC11:0:시험용액중내부표준물질(C11:0triundecanoin)첨가량
(mg)
1.0067:내부표준물질(C11:0triundecanoin)의트리글리세라이드로
부터지방산메틸에스테르로의전환계수
PtC11:0:시험용액중내부표준물질(undecanoicacidmethylester)
의피크면적
Ri:지방산i의반응계수(responsefactor)
※  Ri=Psi×WC11:0
PsC11:0Wi
Psi:표준용액중지방산메틸에스테르i의피크면적
PsC11:0:표준용액중내부표준물질(undecanoicacidmethyl
ester)의피크면적
WC11:0:표준용액중내부표준물질(undecanoicacidmethyl
ester)의양(mg)
Wi:표준용액중지방산메틸에스테르i의양(mg)
나)개별지방산및지방함량계산
(1)개별지방산- 39 -지방산 (g/100 g)=WFAi × 100
Wspl
WFAi=WFAMEi×fFAi
fFAi:지방산i(메틸에스테르로서)의지방산전환계수(표1.)
Wspl:검체량(mg)
(2)포화지방
포화지방 (g/100 g)=Σ 포화지방산 i × 100
Wspl
포화지방산i:C4:0(Butyricacid),C6:0(Carproicacid),C8:0(Caprylic
acid)등이중결합이없는지방산
(3)단일불포화지방
단일불포화지방 (g/100 g)=Σ 단일불포화지방산 i × 100
Wspl
단일불포화지방산i:C16:1(Palmiticacid),C17:1(Margaroleicacid),
C18:1(Oleicacid)등하나의시스형이중결합이있는지방산
(4)다중불포화지방
다중불포화지방 (g/100 g)=Σ 다중불포화지방산 i × 100
Wspl
다중불포화지방산i:C18:2(Linoleicacid),C18:3(Linolenicacid),
C20:2(Eicosadienoicacid)등시스형이중결합이두개이상인지방산
(5)트랜스지방- 40 -트랜스지방 (g/100 g)=Σ 트랜스지방산 i × 100
Wspl
트랜스지방산i:C18:1(Elaidicacid),C18:2(Linolelaidicacid)등트랜스
구조를1개이상가지고있는모든불포화지방산을말한다.이중결합
이2개이상일때에는메틸렌기에의해분리되거나또는비공액형의
이중결합을가지고있는지방산으로한정한다.
표 1. 각 지방산 Methyl ester의 지방산 전환계수
지방산명 fFAi
C4:0 Butyric acid 0.8627 
C6:0 Caproic acid 0.8923 
C8:0 Caprylic acid 0.9114 
C10:0 Capric acid 0.9247 
C11:0 Undecanoic acid 0.9300 
C12:0 Lauric acid 0.9346 
C13:0 Tridecanoic acid 0.9386 
C14:0 Myristic acid 0.9421 
C14:1 Tetradecenenoic 0.9417 
C15:0 Pentadecanoic acid 0.9453 
C15:1 Pentadecenoic acid 0.9449 
C16:0 Palmitic acid 0.9481 
C16:1 Hexadecenoic acid 0.9477 
C17:0 Margaric acid 0.9507 - 41 -C17:1 Margaroleic acid 0.9503 
C18:0 Stearic acid 0.9530 
C18:1 Octadecenoic acid 0.9527 
C18:2 Octadecadienoic acid 0.9524 
C18:3 Linolenic acid 0.9520 
C20:0 Arachidic acid 0.9570 
C20:1 Eicosenic acid 0.9568 
C20:2 Eicosadienoic acid 0.9565 
C20:3 Eicosatrienoic acid 0.9562 
C20:4 Arachidonic acid 0.9560 
C20:5 Eicosapentaenoic acid 0.9557 
C21:0 Heneicosanoic acid 0.9588 
C22:0 Behenic acid 0.9604 
C22:1 Docosaenoic acid 0.9602 
C22:2 Docosadienoic acid 0.9600 
C22:3 Docosatrienoic acid 0.9598 
C22:4 Docosatetraenoic acid 0.9595 
C22:5 Docosapentaenoic acid 0.9593 
C22:6 Docosahexaenoic acid 0.9590 
C23:0 Tricosanoic acid 0.9620 
C24:0 Lignoceric acid 0.9563 
C24:1 Nervonic acid 0.9632 - 42 -나.제2법
1)시험법적용범위
식품등에적용한다.
2)분석원리
식품중지방및지방산을산분해및염기분해하여에테르로추출하고
트리플루오로보란메탄올 용액으로지방산을메틸에스테르화하여가스
크로마토그래프로분석한다.개별지방산의함량및대표적인지방산의
합을계산하여포화지방,단일불포화지방,다중불포화지방함량을분석
한다.
3)장치
가)기체크로마토그래프:불꽃이온화검출기(FlameIonizationDetector,
FID)
나)교반기(vortexmixer)
다)수조(shakingwaterbath)
라)원심분리기(centrifuge)
마)가열기(heatingblock)
바)질소농축기
사)드라이오븐
4)시약및시액
가)피로갈롤(Pyrogallol)
나)8.3M및12M염산용액:8.3M의염산용액을제조할경우,12M- 43 -염산용액250mL를물110mL에용해하고혼합하여사용한다.
다)수산화암모늄용액:28∼30%(w/w)
라)디에틸에테르
마)무수석유에테르(Petroleumether)
바)에탄올
사)톨루엔
아)클로로포름
자)무수황산나트륨
차)7%트리플루오로보란메탄올 용액:14%트리플루오로보란메탄올 용
액을메탄올로희석하여사용한다.
카)헥산
타)내부표준용액:내부표준용액의농도는지방산표준용액의감응도
(피크의면적또는높이)보다높게조절한다.
(1)지방산사용시:Triundecanoin(C11:0)을클로로포름에녹여사용한
다.
(2)지방산메틸에스테르사용시:Undecanoicacidmethylester를클
로로포름에녹여사용한다.
파)표준용액의조제
(1)지방산사용시:분석하고자하는지방산0.01g을클로로포름10
mL에녹여표준원액으로한다(1mg/mL).지방산표준원액을적절
한농도로희석한표준용액1mL를15mL시험관에취하고내부표- 44 -준용액1mL를첨가한다.(단,표준용액과시험용액의내부표준물
질농도가동일한농도가되도록조절한다.)시험관에2～3mL클
로로포름과2～3mL디에틸에테르를넣어혼합한후★40℃수조
에서질소농축하고2mL7%트리플루오로보란메탄올 용액과1
mL의톨루엔을첨가한다.테프론/실리콘재질의마개로잘밀봉하
여100℃오븐에서45분간가열한후실온으로냉각한다.5mL물,
1mL헥산및약1g무수황산나트륨를첨가한후진탕하여정치
하고분리된상층액을취하여약1g의무수황산나트륨을담은다
른바이알(Vial)에넣고탈수한후표준용액으로한다.
(2)개별지방산메틸에스테르사용시:분석하고자하는지방산메틸
에스테르를클로로포름에녹여표준원액으로한다(1mg/mL).표준
원액을적절한농도로희석한용액1mL에타)내부표준용액(2)1
mL를첨가하여표준용액으로한다.
(3)혼합지방산메틸에스테르(FAMEmixture37종)사용시:36종지
방산메틸에스테르에내부표준물질메틸에스테르가포함된표준
용액을사용한다.
5)지방추출
지방추출에앞서검체를균질화한다.내부표준물질로사용하는
undecanoicacid에대한간섭을확인하기위하여내부표준물질없이시
험용액을조제하여분석하고해당피크가발견되면내부표준물질피크
면적을계산시보정한다.이를위해내부표준용액대신클로로포름1- 45 -mL을사용한다.
가)우유등유제품및치즈를제외한식품
균질화된검체를약50～100mg의지방을포함하는양으로정확히칭
량하여시험관에넣고약50mg의피로갈롤을첨가한후,1mL의내
부표준용액을첨가한다.시험관에끓임쪽을넣고1mL에탄올을첨가
하여혼합한다.8.3M염산용액5mL를넣고혼합한다.시험관의마개
를테프론테이프로밀봉한후,70～80℃의수조에서적당한속도로교
반하면서40분간분해한다.시험관의벽면에붙어있는입자들이잘혼
합될수있도록매10분마다교반기로혼합한다.분해후,실온으로냉
각하고에테르추출시분액이용이하도록에탄올2mL를첨가하여혼
합한다.
나)우유등유제품
균질화된검체를약50～100mg의지방을포함하는양으로정확히칭
량하여시험관에넣고약50mg의피로갈롤을첨가한후,1mL의내
부표준용액을첨가한다.시험관에끓임쪽을넣고1mL에탄올을첨가
하여혼합한다.2mL의물,1mL의수산화암모늄용액을첨가하여교
반하고시험관의마개를테프론테이프로밀봉한후,70～80℃의수조
에서적당한속도로교반하면서10분간분해한다.시험관의벽면에붙
어있는입자들이잘혼합될수있도록매5분마다교반기로혼합한다.
분해후페놀프탈레인용액을몇방울넣고염기성(분홍색)이유지될
수있도록수산화암모늄용액을첨가한다.에테르추출시분액이용이- 46 -하도록에탄올2mL를첨가하여혼합한다.
다)치즈
균질화된검체를약50～100mg의지방을포함하는양으로정확히칭
량하여시험관에넣고약50mg의피로갈롤을첨가한후,1mL의내
부표준용액을첨가한다.시험관에끓임쪽을넣고1mL에탄올을첨가
하여혼합한다.2mL의물,1mL의수산화암모늄용액을첨가하여교
반하고시험관의마개를테프론테이프로밀봉한후,70～80℃의수조
에서적당한속도로교반하면서20분간분해한다.시험관의벽면에붙
어있는입자들이잘혼합될수있도록매5분마다교반기로혼합한다.
12M염산용액5mL를추가하여첨가하고20분간분해한다.시험관의
벽면에붙어있는입자들이잘혼합될수있도록매10분마다교반기로
혼합한다.에테르추출시분액이용이하도록에탄올2mL를첨가하여
혼합한다.
라)에테르추출
가),나)및다)에서준비된시험관의분해물에12.5mL디에틸에테르
를첨가하고5분간진탕하여추출한다.12.5mL의무수석유에테르를
추가하여5분간다시진탕추출하고50⨉ g에서5분간원심분리한다.
원심분리가어려울경우,상층이깨끗해질때까지적어도1시간이상
방치하여분리한다.15mL시험관에에테르층을분액한후질소를사
용하여35～40℃수조에서에테르를천천히증발시킨다.
6)시험용액의조제- 47 -시험관에2～3mL클로로포름과2～3mL디에틸에테르를첨가해추출
한지방을녹인후4)시약및시액파)표준용액(1)지방산사용시★
이하에따라시험하여시험용액으로한다.
7)시험방법
2.1.5.4.가.제1법6)시험방법에따라시험한다.
8)정성시험
2.1.5.4.가.제1법7)정성시험에따라시험한다.
9)정량시험
2.1.5.4.가.제1법8)정량시험에따라시험한다.
제8.2.2.22.2.22.2.2.3중나.를다음과같이한다.
나.액체크로마토그래프에의한정량법
1)장치
액체크로마토그래프:형광검출기를사용한다.
2)시약및시액
가)메탄올：액체크로마토그래프용
나)10mMNaH2PO4용액：1N수산화나트륨용액으로pH5.5로
조정한다.
다)표준용액의조제
(1)리보플라빈표준용액：2.2.2.3비타민B2가.루미플라빈형광법과
동일하게조제하고사용시물로희석하여0.2㎍/mL의용액으로- 48 -만든다.
(2)FMN(Flavinmononucleotide)표준용액：FMN을물에녹여0.2
㎍/mL(리보플라빈으로환산:×0.7868*또는×0.7317**)의용액으로
만든다.
*376.36(리보플라빈분자량)/478.33(FMN무수물분자량)
**376.36(리보플라빈분자량)/514.36(FMN이수화물분자량)
(3)FAD(Flavinadeninedinucleotide)표준용액：FAD를물에0.5
㎍/mL(리보플라빈으로환산:×0.4537*)의용액으로만든다.
*376.36(리보플라빈분자량)/829.51(FAD무수물분자량)
3)시험용액의조제
검체일정량을달아소량의물을가해균질기또는막자사발에서
가능한한미세하게분쇄하고지방이많은경우에는미리탈지한다.이에
물을가해수욕중(70～80℃)에서잘혼합하여12～20분간추출한다.
추출액은식힌후1mL중비타민B20.05～0.5μg이되도록
일정용량으로하여시험용액으로한다.
4)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)칼럼：역상분배형(μ-BondapakC18,Micropak-CH,Cosmosil5C18,
DevelesilODS등)
(2)이동상：메탄올：10mMNaH2PO4용액(pH5.5)(35：65)
(3)유속：0.8mL/분- 49 -(4)검출기：형광검출기(여기파장：445nm,측정파장：530nm)
5)측정및계산
시험용액및각형의표준용액을각10μL씩주입하여앞의조건에서
시험한다.표준용액각형의피크면적또는높이에의해구한검량선을
사용하여시험용액의비타민B2의농도(μg/mL)를구하고,다음식에의해
검체중비타민B2함량(mg/100g)을산출한다.
S：시험용액중의비타민B2의농도(μg/mL)
a：시험용액의전량(mL)
b：시험용액의희석배수
제8.2.2.22.2.2중2.2.2.7을다음과같이한다.
2.2.2.7비타민D
가.액체크로마토그래프(육방전환밸브시스템)/자외부검출기또는액체크
로마토그래프/질량분석기에의한정량
1)시험법적용범위
영아용조제식및성장기용조제식,조제유류등에적용한다.
2)분석원리
시료를비누화하여헥산으로추출하고그추출물을역상분배형칼
럼을이용한육방전환밸브시스템으로분리하여264nm파장에서자외비타민B2(리보플라빈,FMN,FAD)(mg/100g)＝S×a×b
×100
검체채취량(g)1,000- 50 -부검출기로정량하는방법또는액체크로마토그래프/질량분석기로정
량하는방법이다.
3)장치
가)액체크로마토그래프(육방전환밸브시스템)/자외부검출기(LC/UV)
나)액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)증류수:크로마토그래프용혹은이와동등한것
나)헥산,메탄올:액체크로마토그래프용혹은이와동등한것
다)수산화칼륨,피로갈롤,페놀프탈레인,무수황산나트륨:특급시약
또는이와동등한것
5)표준용액의조제
가)표준원액:비타민D2와비타민D3각각100mg을메탄올100mL에
녹여조제한다.(1,000 μg/mL)
나)표준용액:표준원액을이동상으로적절히희석하여표준용액으로
한다.
6)시험용액의조제
검체가고체인경우에는분쇄기등으로잘게마쇄하여비타민D를2
IU(0.05 μg)이상함유한검체를비누화플라스크에정밀히취한다.고
체시료의경우,물3mL로충분히녹인후,피로갈롤․에탄올(1→10)
용액40mL를가하여약하게진탕혼합한다.수산화칼륨(9→10)10m
L를가하고,환류냉각기를부착하여끓는물에서중탕으로30분간가- 51 -열하여비누화한다.즉시실온으로냉각하고갈색분액깔때기로옮긴
후,헥산50mL를가하여10분간강하게진탕혼합한다.침전이생기
면이것이가라앉을때까지방치하여헥산층을250～300mL새로운
분액깔때기로옮긴다.50mL헥산추출을2회더반복하여이전의추
출용매와합하고1N수산화칼륨용액100mL를가하여15초간강하게
진탕한다.이를방치하여분리하고(헥산층은투명하지않아도된다)
혼탁한물층을버린다.헥산층에0.5N수산화칼륨용액40mL를가하
여진탕한후물층을다시버린다.헥산층을세척하여세척액이페놀
프탈레인시액으로알칼리의반응을나타내지않을때까지수회세척
한다.세척시매회15초간격렬하게진탕한다.수세한헥산층을무수
황산나트륨으로탈수하여갈색플라스크로옮기고무수황산나트륨을
헥산10mL로2회세척한후탈수한헥산용매와합하고이를40℃이
하에서감압농축한다.잔류물에메탄올5mL를가하여녹여이를막
여과지(membranefilter)(PTFE0.45um)로여과하여시험용액으로
한다.
7)시험방법
가)육방전환밸브를이용한액체크로마토그래프조건
(1)칼럼
(가)전처리칼럼:CapcellpakMFC8SG80(4.6mm×150mm,5
μm)또는이와동등한것
(나)농축칼럼:CapcellpakC18UG120V(2.0mm×35mm,5- 52 -μm)또는이와동등한것
(다)분석칼럼:CadenzaHS-C18(1.5mm×250mm,3μm)또는
이와동등한것
(2)이동상
(가)전처리칼럼이동상:80%(v/v)메탄올
(나)분석칼럼이동상:96%(v/v)메탄올
(3)유속
(가)전처리칼럼이동상:300μL/min
(나)분석칼럼이동상:90μL/min
(4)육방전환밸브의조작
전처리칼럼에서비타민D의피크용출시간을확인하고농축을
위한육방전환밸브의조작시간을설정한다.
(5)주입량:100μL
(6)검출기:자외부(UV)검출기(264nm)
나)액체크로마토그래프/질량분석기의측정조건
(1)액체크로마토그래프조건
(가)칼럼:C18(2.1×100mm,1.7µm)또는이와동등한것
(나)이동상:5mM초산암모늄/메탄올(5/95)
(다)이동상유량:0.45mL/min
(라)칼럼온도:40℃
(마)주입량:1μL- 53 -(2)질량분석기조건
(가)Ionization:ESIpositive
(나)Sourcetemperature:120℃
(다)Collisiongas:N2(질소또는비활성기체)
(라)Capillaryvoltage:3.5kV
(마)질량분석기분석을위한이온
다)검량선작성
검량곡선표준용액을액체크로마토그래프또는
액체크로마토그래프/질량분석기에각각주입하여얻어진
크로마토그램상의각피크의넓이를구하여검량선을작성한다.
라)표준용액및시험용액의크로마토그램
(1)액체크로마토그래프(육방전환밸브시스템)/자외부검출기성분Precursor
ion(m/z)Fragment
ion(m/z)
비타민D2397107,105,91
비타민D3385107,105,79
그림1.표준용액및시험용액의크로마토그램.- 54 -(2)액체크로마토그래프/질량분석기
8)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토그램상의피크는어느
측정조건에서도표준용액피크의머무름시간과일치하여야한다.
9)정량시험
정성시험과 똑같은조건에서얻어진시험결과에의해피크
면적법에따라정량한다.
가)계산방법
 
그림2.비타민D3표준용액(100µg/L)및시험용액의크로마토그램  
그림3.비타민D2표준용액(100µg/L)및시험용액의크로마토그램- 55 -C:시험용액중의비타민D의농도(μg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
※비타민D의함량은비타민D2와비타민D3를구분하여계산하고
합한값으로한다.
비타민D1μg=40IU
제8.2.2.22.2.22.2.2.9가.중“액체그로마토그래피”를“액체크로마토그래프”로
한다.
제8.2.2.22.2.22.2.2.9가.1)중“액체그로마토그래피”를
“액체크로마토그래프”로한다.
제8.2.2.22.2.22.2.2.9가.3)중“검체적당량”을“검체0.5∼1.5g”으로하고,
“3,000rpm”을“3,500×g”로한다.
제8.2.2.22.2.22.2.2.9가.4)중“액체그로마토그래피”를비타민D2또는D3함량(µg/100g)=C×(a×b)×100S- 56 -“액체크로마토그래프”로한다.
제8.2.2.22.2.2중2.2.2.11을다음과같이한다.
2.2.2.11비타민B12
가.액체크로마토그래프(육방전환밸브시스템)/자외부검출기또는액체크
로마토그래프/질량분석기에의한정량
1)시험법적용범위
특수용도식품등에적용한다.
2)분석원리
식품중의비타민B12를추출용매로추출한후면역친화성컬럼으로
정제하여자외부검출기또는질량분석기가부착된액체크로마토그래
프로분석한다.
3)장치
가)액체크로마토그래프(육방전환밸브시스템)/자외부검출기
나)액체크로마토그래프/질량분석기
다)정제용컬럼:비타민B12용면역친화성컬럼(Immunoaffinity
column)(회수율및재현성등이검증된것)
4)시약및시액
가)5mM인산이수소칼륨용액:인산이수소칼륨0.68g을증류수에
녹이고전량을1L가되게한다.
나)0.2M초산나트륨용액:초산나트륨16.41g을증류수에용해시킨- 57 -후초산을이용하여pH4로맞춘후증류수에녹여1L로정용한다.
다)1%(w/v)시안화나트륨용액:시안화나트륨1g을증류수에녹여
100mL로정용한다.
라)20mM개미산암모늄:개미산암모늄1.26g을증류수에녹이고
전량을1L가되게한다(질량분석기로분석시사용)
마)표준용액의조제
비타민B12(Cyanocobalamin)을5mM인산이수소칼륨용액에
녹여표준원액(100 μg/mL)을조제하고,표준원액을증류수로
적당량희석하여표준용액을만든다.
바)기타시약:잔류농약시험용또는HPLC용
5)시험용액의조제
가)추출
균질화한검체약1∼5g을달아갈색원심분리관에취하고0.2M
초산나트륨용액49.5mL와1%시안화나트륨0.5mL를넣고
상온에서10분간초음파추출한다음100℃수욕상에서30분간
추출하고상온으로냉각한다.이어서여과지(WhatmanNo.2또는
이와동등한것)로여과한것을추출액으로한다.
나)정제
냉장보관된정제용컬럼은실온에30분방치한후컬럼내부의
완충용액을완전히제거한다.증류수3mL를정제용컬럼에
주입하여활성화시킨후추출액9mL를정제용컬럼에주입하여- 58 -추출액중비타민B12을정제용컬럼에흡착시킨다.이어서증류수로
3mL씩3회주입하여불순물을제거하고공기를주입하여컬럼
내에남아있는용액을제거한다.정제용컬럼에흡착된
비타민B12를메탄올3mL로시험관에용출시킨다.용출액을
70℃에서질소로건고시키고잔류물에증류수0.5mL를가하여
녹인것을시험용액으로한다.
6)시험방법
가)액체크로마토그래프(육방전환밸브시스템)의측정조건
(1)칼럼
(가)전처리컬럼:CapcellpakMFC8(4.6mm×150mm,5μm)
또는이와동등한것
(나)농축컬럼:CapcellpakMGC18(2.0mm×35mm,5μm)
또는이와동등한것
(다)분석컬럼:CapcellpakUGC18(1.5mm×250mm,5μm)
또는이와동등한것
(2)이동상
(가)전처리컬럼이동상:5mM인산이수소칼륨용액
(나)분석컬럼이동상:5mM인산이수소칼륨용액/메탄올(80:20,
v/v)
(3)유속- 59 -(가)전처리컬럼이동상:500μL/min
(나)분석컬럼이동상:120μL/min
(4)육방전환밸브의조작
전처리칼럼에서비타민B12의피크용출시간을확인하고
농축을위한육방전환밸브의조작시간을설정한다.
(5)주입량:400μL
(6)검출기:자외부검출기(550nm)
나)액체크로마토그래프/질량분석기의측정조건
(1)액체크로마토그래프조건
(가)컬럼:ACQUITYUPLCⓇBEH(2.1mmx50mm,1.7µm)
또는이와동등한것
(나)이동상
①이동상A:20mM개미산암모늄
②이동상B:아세토니트릴
     
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
0.0 95 5
0.7 95 5
1.2 80 20
1.6 80 20
1.7 20 80
3.7 20 80
3.8 95 5- 60 -
(다)이동상유속:0.4mL/min
(라)컬럼온도:35℃
(마)주입량:10µL
(2)질량분석기조건
(가)Ionization:ESIpositive
(나)Sourcetemperature:120℃
(다)Collisiongas:N2(질소또는비활성기체)
(라)Capillaryvoltage:3.5kV
(마)질량분석기분석을위한이온
다)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하여액체크로마토그래프(육방전환밸
브시스템)/자외부검출기또는액체크로마토그래프/질량분석기에각각
주입한다.얻어진크로마토그램상의각피크높이또는피크면적을
구하여검량선을작성한다.
7)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토그램상의피크는어느6.0 95 5
성분Precursorion(m/z)Fragmention(m/z)
비타민B12 678 147, 359- 61 -측정조건에서도표준용액피크의머무름시간과일치하여야한다.
8)정량시험
정성시험과똑같은조건에서얻어진시험결과에의해피크면적법에
따라정량한다.
가)계산방법
C:검량곡선에얻은시험용액의농도(μg/mL)
a:시료추출에사용된용액의부피(mL)
V1:정제용컬럼에주입한추출액의부피(mL)
V2:정제후시험용액의최종부피(mL)
b:시험용액의희석배수
S:검체채취량(g)
제8.2.2.22.2.2중2.2.2.15를다음과같이한다.
2.2.2.15비오틴
가.액체크로마토그래프(육방전환밸브시스템)/자외부검출기또는액체크
로마토그래프/질량분석기에의한정량
1)시험법적용범위
영아용조제식,성장기용조제식등에적용한다.
2)분석원리비타민B12함량(µg/100g)=C×(a×V2×b)×100(S×V1)- 62 -식품중의비오틴을추출용매로추출한후면역친화성컬럼으로정제
하여자외부검출기또는질량분석기가부착된액체크로마토그래프로
분석한다.
3)장치
가)액체크로마토그래프(육방전환밸브시스템)/자외부검출기
나)액체크로마토그래프/질량분석기
다)정제용컬럼:비오틴용면역친화성컬럼(Immunoaffinity
column)(회수율및재현성등이검증된것)
라)질소농축기
4)시약및시액
가)0.01M인산이수소칼륨용액(pH4.8):인산이수소칼륨1.36g을
증류수에녹여1L로한다.
나)표준원액:비오틴표준품(99.9%)를0.01M인산이수소칼륨
용액에녹여100mg/L이되도록조제한다.(4℃이하암소보관)
다)표준용액:표준원액을0.01M인산이수소칼륨용액으로적절히
희석하여표준용액으로한다.(사용시제조)
라)0.15M인산나트륨완충액:제일인산나트륨(NaH2PO4·H2O)8.07
g과제이인산나트륨(Na2HPO4·7H2O)18.36g을물에녹인것을2M
수산화나트륨용액을이용하여pH7.0으로조정한후1L로한다.
마)PBS(Phosphatebufferedsaline)용액:시판되는PBS완충제
정제(tablet)또는파우치(pouch)형태를사용하여제조한다.(최종- 63 -완충액0.01Mphosphatebuffersaline,0.138MNaCl,0.0027M
KCl,pH7.4,25℃)
바)0.1%포름산:포름산을200µL를넣은후증류수로녹여200mL
로한다.(질량분석기로분석시사용)
사)0.1%포름산이함유된아세토니트릴:포름산을200µL넣은후아
세토니트릴로녹여200mL로한다.(질량분석기로분석시사용)
아)기타시약:잔류농약시험용또는HPLC용
5)시험용액의조제
가)추출
균질화한검체약1∼5g을달아갈색원심분리관에취하고0.15
M인산나트륨완충액25mL을넣고상온에서5분간초음파추출한
다음100℃수욕상에서30분간추출하고상온으로냉각한다.0.15
M인산나트륨완충액을가하여50mL로정용하고균질화후
0℃에서22,000×g으로20분간원심분리한다.이어서
여과지(WhatmanNo.2또는이와동등한것)로여과한것을
추출액으로한다.
나)정제
냉장보관된정제용컬럼은실온에30분방치한후컬럼내부의
완충용액을완전히제거한다.추출액10mL를정제용컬럼에
주입하여추출액중비오틴을정제용컬럼에흡착시킨다.이어서
PBS용액10mL와증류수10mL주입하여불순물을제거하고- 64 -공기를주입하여컬럼내에남아있는용액을제거한다.정제용
컬럼에흡착된비오틴을메탄올4mL로시험관에용출시킨다.
용출액을70℃에서질소로건고시키고잔류물에0.01M
인산이수소칼륨용액1mL를가하여녹인것을시험용액으로한다.
6)시험방법
가)액체크로마토그래프의측정조건
(1)칼럼
(가)전처리컬럼:CapcellpakMFC8SG80(4.6mm×150mm,5
μm)또는이와동등한것
(나)농축컬럼:CapcellpakC18UG120V(2.0mm×35mm,5μm)
또는이와동등한것
(다)분석컬럼:CapcellpakC18UG120V(1.5mm×250mm,5
μm)또는이와동등한것
(2)이동상
(가)전처리컬럼이동상:0.01M인산이수소칼륨용액
(나)분석컬럼이동상:0.01M인산이수소칼륨용액/메탄올(90:10,
v/v)
(3)유속
(가)전처리컬럼이동상:500μL/min
(나)분석컬럼이동상:100μL/min
(4)육방전환밸브의조작- 65 -전처리칼럼에서비오틴의피크용출시간을확인하고농축을
위한육방전환밸브의조작시간을설정한다.
(5)주입량:200μL
(6)검출기:자외부검출기(200nm)
나)액체크로마토그래프/질량분석기의조건
(1)액체크로마토그래프조건
(가)컬럼:ACQUITYUPLCⓇBEH(2.1mmx100mm,1.7µm)
또는이와동등한것
(나)이동상
①이동상A:0.1%포름산
②이동상B:0.1%포름산이함유된아세토니트릴
(다)이동상유속:0.2mL/min
(라)컬럼온도:40℃
(마)주입량:2µL
(2)질량분석기조건시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
0.0100 0
5.0 80 20
5.2 0100
6.2 0100
7.0100 0
11.0 100 0- 66 -(가)Ionization:ESIpositive
(나)Sourcetemperature:120℃
(다)Collisiongas:N2(질소또는비활성기체)
(라)Capillaryvoltage:3.5kV
(마)질량분석기분석을위한이온
다)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하여액체크로마토그래프또는액
체크로마토그래프/질량분석기에각각주입한다.얻어진크로마토마
토그램상의각피크높이또는피크면적을구하여검량선을작성
한다.
라)표준용액및시험용액의크로마토그램
(1)액체크로마토그래프(육방전환밸브시스템)/자외부검출기
(2)액체크로마토그래프/질량분석기성분Precursorion(m/z)Fragmention(m/z)
비오틴 245 227,166
그림1.표준용액및시험용액의크로마토그램- 67 -7)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토그램상의피크는어느
측정조건에서도표준용액피크의머무름시간과일치하여야한다.
8)정량시험
정성시험과똑같은조건에서얻어진시험결과에의해피크면적법에
따라정량한다.
가)계산방법
C:검량곡선에얻은시험용액의농도(μg/mL)
a:시료추출에사용된용액의부피(mL)
V1:정제용컬럼에주입한추출액의부피(mL)
V2:정제후시험용액의최종부피(mL)
b:시험용액의희석배수
S:검체채취량(g)비오틴함량(µg/100g)=C×(a×V2×b)×100(S×V1)
그림2.표준용액및시험용액의크로마토그램.- 68 -제8.3.3.1중“식육”을“식육가공품”으로한다.
제8.3.3.43.4.1가.1)중“식육”을“식육가공품”으로한다.
제8.3.3.6중“식육”을“식육가공품”으로한다.
제8.6.6.2중6.2.1중가.∼라.를각각다음과같이한다.
가.프락토올리고당
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절검출기(refractiveindexdetector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
1-케스토즈(GF2)
니스토즈(GF3)
1-F프락토퓨라노실니스토즈(GF4)
나)물:HPLC용
다)에탄올:HPLC용
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당을물로녹여20mg/mL농도가되도록조제한후혼합하여- 69 -표준원액으로한다.표준원액을물로희석하여312.5∼5,000 μg/mL범
위로조제하여표준용액으로한다.
4)시험용액의조제
프락토올리고당으로서 0.2∼2g이되도록검체를취해물20mL에용
해한후100mL로정용한다(필요시1,000×g에서10분간원심분리한
다).상등액25mL를취하여50mL메스플라스크에옮겨넣고에탄올
로정용한다.이용액을0.45μm의필터로여과하여시험용액으로사용
한다.
5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)칼럼:AsahipakNH2P-504E(4.6mmi.d.×250mm×5μm)혹
은이와동등한것
(2)온도:40℃
(3)이동상:65%아세토니트릴
(칼럼의종류나상태에따라조성을달리할수있다.아세토니트
릴과물의비율을65∶35에서70∶30정도의차이로조정한다.)
(4)유속:1.0mL/min
(5)검출기:시차굴절검출기(RI)
6)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토그램상의피크는어느측정조건에서도
시험용액과표준용액피크의머무름시간이일치하여야한다.- 70 -7)정량시험
표준용액과시험용액을각각10μL씩주입하여위의조건에서시험한
다.표준용액의피크면적또는높이에의해구한검량선을사용하여
프락토올리고당의 농도(mg/mL)를구하고,다음식에의해프락토올리
고당함량(%)을계산한다.
A:시험용액중의GF2의농도(mg/mL)
B:시험용액중의GF3의농도(mg/mL)
C:시험용액중의GF4의농도(mg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:시험용액의희석배수
나.이소말토올리고당
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절검출기(RefractiveIndexdetector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
단당류—Glucose
이당류—Maltose프락토올리고당함량(%)=(A+B+C)×a×b×100
시료채취량(g) 1,000- 71 -삼당류—Maltotriose
사당류—Maltotetraose
오당류—Maltopentaose
육당류—Maltohexaose
칠당류—Maltoheptaose
나)물:HPLC용
다)50%에탄올
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당을물로녹여100mg/mL농도가되도록조제한후혼합하
여표준원액으로한다.표준원액을물로희석하여625∼10,000 μg/mL
범위로조제하여표준용액으로한다.
4)시험용액의조제
이소말토올리고당으로서 약250mg이되도록검체를취해물또는
50%에탄올(단백질을함유한경우)15mL에용해한후50mL로정용
한다(필요시1,000×g에서10분간원심분리한다).이용액을0.45
μm의필터로여과하여시험용액으로한다.
5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)배제형이온교환계
①칼럼:AsahipakNH2-504E(4.6mmi.d×250mm×5μm)- 72 -혹은이와동등한것
②칼럼온도:30℃
③이동상:65%아세토니트릴
④유속:1.0mL/min
⑤검출기:시차굴절검출기(RI)
(2)역상분배계
①칼럼:RSpakDC-613(6.0mmi.d×150mm×6μm)혹은
이와동등한것
②칼럼온도:50℃
③이동상:70%아세토니트릴
④유속:0.8mL/min
⑤검출기:시차굴절검출기(RI)
6)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토그램상의피크는어느
측정조건에서도시험용액과표준용액피크의머무름시간이
일치하여야한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을각각10μL씩주입하여위의조건에서
시험한다.표준용액의피크면적또는높이를구하여검량선을
작성한다.
가)배제형이온교환계에서분석한피크면적또는높이에의해각- 73 -중합도의함유량(mg/mL)이구해지며그결과는다음과같다.
DP1(단당류):A
DP2(이당류):B
DP3(삼당류):C
DP4(사당류):D
DP5(오당류):E
DP6(육당류):F
DP7(칠당류):G
나)역상분배계에서시료를분석한Data의각당분함유율(%)은다음과
같다.
DP1Glucose A1
DP1Glucose이외의단당류 A2
DP2Maltose B1
DP2Maltose이외의이당류 B2
DP3Maltotriose C1
DP3Maltotriose이외의삼당류 C2
DP4Maltotetraose D1
DP4Maltotetraose이외의사당류 D2
DP5Maltopentaose E1
DP5Maltopentaose이외의오당류 E2
DP6Maltohexaose F1- 74 -DP6Maltohexaose이외의육당류F2
DP7Maltoheptaose G1
DP7Maltoheptaose이외의칠당류 G2
DP1Glucose(mg/mL)A×A＋AA＝a
DP2Maltose(mg/mL)B×B＋BB＝b
DP3Maltotriose(mg/mL)C×C＋CC＝c
DP4Maltotetraose(mg/mL)D×D1
D1＋D2＝d
DP5Maltopentaose(mg/mL)E×E1
E1＋E2＝e
DP6Maltohexaose(mg/mL)F×F1
F1＋F2＝f
DP7Maltoheptaose(mg/mL)G×G1
G1＋G2＝g
이소말토올리고당함량(%)=100-[(a+b+c+d+e+f+g)
×h×i×100
]
시료채취량(g) 1,000
 h:시험용액의전량(mL)
 i:시험용액의희석배수
다.갈락토올리고당(전이갈락토올리고당)- 75 -1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절검출기(RefractiveIndexdetector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
Glucose
Galactose
Lactose
Galactooligosaccharides표준품(순도70%이상)
나)물:HPLC용
다)20%(w/v)설포살리실린산용액:설포살리실산(Sulfosalicylicacid)
20g에물을넣어용해시켜100mL로한다.
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당(Glucose,galactose,lactose는1g씩,galactooligosaccarides는
4g)을물20mL로녹여50mL로정용한후혼합하여표준원액으로
한다.표준원액을이동상으로희석하여gucose,galactose,lactose는
2,000∼10,000 μg/mL,galactooligosaccarides는8,000∼40,000 μg/mL
범위로조제하여표준용액으로한다.
4)시험용액조제
갈락토올리고당으로서 0.1∼1g이되도록검체를취해물20mL에용
해한후50mL로정용한다.단,단백질제거조작이필요한시료에대- 76 -해서는20%설포살리실산용액을여러방울첨가하여생긴불용성단백
질을1,000×g에서10분간원심분리하여제거한다.이용액을0.45μm
의필터로여과하여시험용액으로사용한다.
5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)배제형이온교환계
①칼럼:ShodexSC1011(8.0mmi.d×300mm×6μm)혹은
이와동등한것
②칼럼온도:80℃
③이동상:물
④유속:0.4mL/min
⑤검출기:시차굴절검출기(RI)
(2)역상분배계
①칼럼:TSKGELNH2-100(4.6mmi.d×150mm×3μm)
혹은이와동등한것
②칼럼온도:35℃
③이동상:70%아세토니트릴
④유속:0.8mL/min
⑤검출기:시차굴절검출기(RI)
6)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토그램상의피크는어느- 77 -측정조건에서도시험용액과표준용액피크의머무름시간이
일치하여야한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을배제형이온교환계에서는2μL,역상분배계에
서는10μL씩주입하여위의조건에서시험한다.표준용액의피크면
적또는높이에의해구한검량선을사용하여갈락토올리고당의비율
(%)을구하고,다음식에의해갈락토올리고당함량(%)을계산한다.
A:배제형이온교환계에서구한전체당함량중포도당이차지하는
비율
B:배제형이온교환계에서구한전체당함량중갈락토스가
차지하는비율
C:배제형이온교환계에서구한전체당함량중이당류가차지하는
비율
D:역상분배계에서구한이당류중유당이차지하는비율
라.갈락토올리고당(라피노스,스타치오스)
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절검출기(RefractiveIndexdetector,RI)
2)시약및시액갈락토올리고당함량(%)=100-[A+B+(C×D)]100- 78 -가)표준당
Raffinose
Stachyose
나)물:HPLC용
다)20%(w/v)설포살리실린산용액:설포살리실산(Sulfosalicylicacid)
20g에물을넣어용해시켜100mL로한다.
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당을물로녹여10mg/mL농도가되도록조제한후혼합하여
표준원액으로한다.표준원액을물로희석하여312.5∼5,000 μg/mL범
위로조제하여표준용액으로한다.
4)시험용액조제
각갈락토올리고당으로서 0.01∼0.1g이되도록검체를취해물20mL
에용해한후50mL로정용한다.단,단백질제거조작이필요한시료
에대해서는20%설포살리실산용액을여러방울첨가하여생긴불용성
단백질을1,000×g에서10분간원심분리하여제거한다.이용액을0.45
μm의필터로여과하여시험용액으로한다.
5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)칼럼:AsahipakNH2P-504E(4.6mmi.d×250mm×5μm)
혹은이와동등한것- 79 -(2)칼럼온도:35℃
(3)이동상:65%아세토니트릴
(4)유속:1.0mL/min
(5)검출기:시차굴절검출기(RI)
6)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토그램상의피크는어느
측정조건에서도시험용액과표준용액피크의머무름시간이
일치하여야한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을각각10μL씩주입하여위의조건에서
시험한다.표준용액의피크면적또는높이에의해구한검량선을
사용하여갈락토올리고당의 비율(%)을구하고,다음식에의해
갈락토올리고당함량(%)을계산한다.
갈락토올리고당함량(%)=A+B
×a×b×100
시료채취량(g) 1,000
A:시험용액중의라피노스의농도(mg/mL)
B:시험용액중의스타치오스의농도(mg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:시험용액의희석배수- 80 -제8.6.6.2중6.2.1중바.및사.를각각다음과같이한다.
바.자일로올리고당
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절검출기(refractiveindexdetector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
이당류-xylobiose
삼당류-xylotriose
사당류-xylotetraose
오당류-xylopentaose
육당류–xylohexaose
나)물:HPLC용
다)아세토니트릴(Acetonitrile):HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당을물로녹여100mg/mL농도가되도록조제한후혼합하여
표준원액으로한다.표준원액을물로희석하여1∼5mg/mL범위로조
제하여표준용액으로한다.
4)시험용액의조제
자일로올리고당이 약100mg되도록검체를취해물20mL에용해한
후50mL로정용한다.이용액을0.45μm의필터로여과하여시험용액
으로한다.- 81 -5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)칼럼:RSpakDC613column(6.0mmi.d×150mm×6μm)
혹은이와동등한것
(2)칼럼온도:50℃
(3)이동상:67%아세토니트릴(칼럼의종류나상태에따라조성을
달리할수있다.)
(4)유속:0.8mL/min
(5)검출기:시차굴절검출기(RI)
6)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토그램상의피크는어느
측정조건에서도시험용액과표준용액피크의머무름시간이
일치하여야한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을각각5μL씩주입하여위의조건에서
시험한다.표준용액의피크면적또는높이에의해구한검량선을
사용하여자일로올리고당의 농도(mg/mL)를구하고,다음식에의해
자일로올리고당함량(%)을계산한다.
A:시험용액중의xylobiose의농도(mg/mL)자일로올리고당 함량(%)=(A+B+C+D+E)
×a×b×100
시료채취량(g)- 82 -B:시험용액중의xylotriose의농도(mg/mL)
C:시험용액중의xylotetraose의농도(mg/mL)
D:시험용액중의xylopentaose의농도(mg/mL)
E:시험용액중의xylohexaose의농도(mg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:시험용액의희석배수
사.겐티오올리고당
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절검출기(refractiveindexdetector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
단당류(DP1):Glucose,Fructose
이당류(DP2):Gentiobiose,Cellobiose,Maltose
나)물:HPLC용
다)0.3MSodiumhydroxidesolution
라)0.5MPMP용액(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP):PMP
시약4.36g을메탄올에녹여50mL가되도록한다.
마)0.3MHydrochloridesolution
바)Chloroform
사)0.01MPotassiumphosphatemonobasicbuffer:Potassium- 83 -phosphatemonobasic2.7218g을물에녹여2L가되도록한다.
아)0.01MPotassiumphosphatedibasicbuffer:Potassium
phosphatedibasic3.4836g을물에녹여2L가되도록한다.
자)0.01MPotassiumphosphatebuffer(pH6.7):사)용액에아)용액을
첨가하여pH6.7로조정한다.
차)아세토니트릴:HPLC용
카)Methanol
3)표준용액의조제
가)배제형이온교환계
Glucose,fructose,maltose,gentiobiose,cellobiose를각각물로
녹여50,000 μg/mL농도가되도록조제한후혼합하여표준원액으
로한다.표준원액을물로희석하여500∼4,000 μg/mL범위로조제
하여표준용액으로한다.
나)역상분배계
Glucose,maltose,gentiobiose,cellobiose를각각물로녹여1,000
μg/mL농도가되도록조제한후혼합하여표준원액으로한다.표준
원액을물로희석하여25∼200μg/mL범위로조제하여표준용액으
로한다.
4)시험용액의조제
가)배제형이온교환계
겐티오올리고당으로서 약100mg이되도록검체를취해물10- 84 -mL에용해한후물을사용하여적당한농도로희석한다.이용액을
0.45μm의필터로여과하여이를시험용액으로한다.
나)역상분배계
겐티오올리고당으로서 약10mg이되도록검체를취해물10
mL에용해한다.시료및각농도의표준용액100μL를각각1.5
mLtube에취하고0.3MNaOH100μL를첨가한다.0.5MPMP
100μL를첨가하고혼합하여70℃수조에서1시간유도체화후냉
각한다.0.3MHCl100μL를첨가하여중화한후CHCl31mL를
넣고20,000×g에서5분간원심분리한다.상층액을취해CHCl31
mL를첨가하고혼합하여20,000×g에서5분간원심분리한다(2회
반복).상층액을취해0.45μm의필터로여과하여이를시험용액으
로한다.
5)시험방법
가)배제형이온교환계
(1)칼럼:ShodexKS801Column(8.0mmi.d×300mm×6μm)
혹은이와동등한것
(2)칼럼온도:80℃
(3)이동상:물
(4)유속:0.8mL/min
(5)검출기:시차굴절검출기(RI)
나)역상분배계- 85 -(1)칼럼:ShiseidoUG120C18Column(4.6mmi.d×250mm×5
μm)혹은이와동등한것
(2)칼럼온도:35℃
(3)이동상:A:B=83:17
A:0.01MPotassiumphosphatebuffer(pH6.7)
B:Acetonitrile
(4)유속:0.8mL/min
(5)검출기:PDA
6)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토그램상의피크는어느측정조건에서도
시험용액과표준용액피크의머무름시간이일치하여야한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을각각5μL씩주입하여위의조건에서
시험한다.표준용액의피크면적또는높이를구하여검량선을
작성한다.
가)배제형이온교환계에서분석한피크의면적또는높이에의해각중
합도의함유량(mg)이구해지며그결과는다음과같다.
 DP1(단당류):A
 DP2(이당류):B
 DP3이상(3당류이상):C
나)역상분배계에서시료를분석한Data의각당분함유율(%)은다음- 86 -과같다.
 DP1FructoseA₁
 DP1GlucoseA₂
 DP2MaltoseB₁
 DP2Gentiobiose B₂
 DP2CellobioseB₃
 DP3이상C
 DP2GentiobioseBmg×B2
B1＋B2＋B3=b₂mg
 DP2CellobioseBmg×B3
B1＋B2＋B3=b₃mg
겐티오올리고당함량(%)=b2+b3×d×100
시료채취량(mg)
d:시험용액의희석배수
제8.6.6.66.6.46.6.4.3가.3)중가)를다음과같이한다.
가)이동상:0.2M과염소산나트륨과0.02M수산화나트륨이함유된용
액(과염소산나트륨(순도98%이상)25g과수산화나트륨(순도97%
이상)0.82g을정밀히달아물을가하여1,000mL로한다.다만,시
약의순도에따라첨가량을조정할수있다.)- 87 -제8.6.6.66.6.46.6.4.3가.3)다)중“0.1∼10mg/mL”을“0.1∼10
ug/mL”로한다.
제8.6.6.66.6.46.6.4.3가.5)가)중(3)을다음과같이한다.
(3)이동상：0.2M과염소산나트륨과0.02M수산화나트륨이함유된용
액
제8.7.7.17.1.4중7.1.4.233부터7.1.4.234를다음과같이신설한다.
7.1.4.233아사이노나피르(Acynonapyr)
가.시험법적용범위
곡류,서류,두류,과일류,채소류등의식품에적용한다.
나.분석원리
검체중아사이노나피르및대사산물(AP,
3-endo-[2-pro xy-4-(trifluorometh yl)
phenoxy]-9-azabicyclo[3,3,1]nonane)을아세토니트릴로추출한후
d-SPE(dispersive-solidphaseextraction)로정제하여액체크로마토그래프-
질량분석기로분석한다.
다.장치
1)액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)
라.시약및시액- 88 -1)용매:잔류농약시험용또는특급
2)물:3차증류수또는이와동등한것
3)표준원액:아사이노나피르및대사산물(AP)표준품을각각아세토니트
릴에녹여1,000mg/L가되게한다.
4)표준용액:표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농도로
혼합,희석한다(무처리시료추출물90%이상포함).
5)d-SPE:무수황산마그네슘(MgSO4,Anhydrousmagnesiumsulfate),
1차2차아민(PSA,Primarysecondaryamine)
6)기타시약:잔류농약시험용또는특급
7)특이사항:대사산물(AP)은유리벽면에흡착할가능성이있으므로
모든시험과정은폴리프로필렌으로된용기를사용한다.
마.시험용액의조제
1)추출
검체를분쇄하여균질화한후5g(곡류및두류는약1kg을혼합하여
표준체420μm를통과하도록분쇄한후5g,서류,과일류및채소류는
약1kg을분쇄한후5g)을정밀히달아50mL원심분리관에넣고
(곡류및두류의경우증류수5mL첨가후30분간방치)아세토니트
릴20mL를가하고1N수산화나트륨용액을첨가하여추출용액의
pH를10으로조절한뒤10분간진탕한다.진탕후추출물에염화나트륨
4g을추가하여1분간흔들고4℃,4,000G에서10분간원심분리하여
상층액1mL를취한다.- 89 -2)정제
무수황산마그네슘150mg과1차2차아민25mg이담긴2mL원심
분리관에‘1)추출’로부터얻은아세토니트릴상층액을30초간와류교반기
등을이용하여충분히혼합한후이를4℃,4,000G에서10분간원심
분리한다.정제된상층액을멤브레인필터(PTFE,0.2μm)로여과한
후시험용액으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프분석조건
가)컬럼:C18계역상컬럼또는이와동등한것
나)컬럼온도:40℃
다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함유메탄올
(2)이동상B:0.1%포름산함유물
(3)농도구배조건
시간(분)A(%) B(%)
0.0 50 50
2.0 50 50
4.0 80 20
8.0 100 0
9.0 100 0
9.1 50 50
12.0 50 50
라)이동상유속:0.3mL/분- 90 -마)주입량:2μL
2)질량분석기분석조건
가)이온화방법:ESIpositive-ionmode
나)Capillaryvoltage:1.0kV
다)Collisiongas:아르곤(Ar)
표.액체크로마토그래프-질량분석기분석을위한특성이온
분석성분
(Compound)평균
분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursorion,
[M+H]+,m/z)생성이온
(Production,
m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
아사이노나피르
(Acynonapyr)504.5504.185053421)10
9626
12232
AP343.4343.17344821)32
9632
12424
1)정량이온이며,그외는정성이온임.
※각생성이온에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경하여사용할수있으며,
제시된이외의생성이온도적용이가능함.
3)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하여액체크로마토그래프-질량분석기에
각각주입하여얻은크로마토그램상의각피크높이또는면적값으로
검량선을작성한다.
4)표준품의크로마토그램- 91 -
그림.액체크로마토그래프-질량분석기에서표준품의크로마토그램
A:아사이노나피르(7.5분),B:AP(3.9분)
*분석기기:LC(WatersⓇAcquityUPLC),MS/MS(WatersⓇXevoTQ-S),
컬럼(CapcellPakC18MGⅡ(3.0mmI.D.×150mmL.,3.0μm)
5)정량한계
0.01mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토그램상의피크가표준용액피크의머무름
시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량한다.
*아사이노나피르의잔류량=아사이노나피르의잔류량＋(환산계수×
대사산물(AP)의잔류량)
*환산계수=1.47(아사이노나피르분자량505/AP분자량343)
아.확인시험
액체크로마토그래프-질량분석기상의머무름시간과특성이온으로아사- 92 -이노나피르및대사산물(AP)을확인한다.
7.1.4.234아피도피로펜(Afidopyropen)
가.시험법적용범위
곡류,서류,두류,과일류,채소류등의식품에적용한다.
나.분석원리
검체중아피도피로펜을포름산함유아세토니트릴로추출한후
d-SPE(dispersive-solidphaseextraction)로정제하여액체크로마토그래프-질량
분석기로분석한다.
다.장치
1)액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)
라.시약및시액
1)용매:잔류농약시험용또는특급
2)물:3차증류수또는이와동등한것
3)표준원액:아피도피로펜표준품을아세토니트릴에녹여1,000mg/L가
되게한다.
4)표준용액:표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농도로
혼합,희석한다(무처리시료추출물90%이상포함).
5)d-SPE:무수황산마그네슘(MgSO4,Anhydrousmagnesiumsulfate),
1차2차아민(PSA,Primarysecondaryamine),C18(Octadecyl
bondedsilica)- 93 -6)기타시약:잔류농약시험용또는특급
마.시험용액의조제
1)추출
검체를분쇄하여균질화한후5g(곡류및두류는약1kg을혼합하여
표준체420μm를통과하도록분쇄한후5g,서류,과일류및채소류는
약1kg을분쇄한후5g)을정밀히달아50mL원심분리관에넣고
(곡류및두류의경우증류수5mL첨가후30분간방치)0.1%포름산
함유아세토니트릴20mL를가한뒤10분간진탕한다.진탕후추출물에
무수황산마그네슘4g과염화나트륨1g,구연산이나트륨·1.5수화물
0.5g,구연산삼나트륨·2수화물1g을추가하여1분간흔들고4℃,
4,000G에서10분간원심분리하여상층액1mL를취한다.
2)정제
무수황산마그네슘150mg과1차2차아민25mg,C1825mg이미리
담겨져있는2mL원심분리관에‘1)추출’로부터얻은상층액1mL를
가하고30초간와류교반기등을이용하여충분히혼합한후이를
4℃,4,000G에서10분간원심분리한다.정제된상층액을멤브레인
필터(Nylon,0.2μm)로여과한후시험용액으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프분석조건
가)컬럼:C18계역상컬럼또는이와동등한것
나)컬럼온도:40℃- 94 -다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함유아세토니트릴
(2)이동상B:0.1%포름산함유물
(3)농도구배조건
시간(분)A(%) B(%)
0.0 5 95
1.0 5 95
6.0 90 10
8.0 90 10
8.1 5 95
10.0 5 95
라)이동상유속:0.3mL/분
마)주입량:2μL
2)질량분석기분석조건
가)이온화방법:ESIpositive-ionmode
나)Capillaryvoltage:3.0kV
다)Collisiongas:아르곤(Ar)
표.액체크로마토그래프-질량분석기분석을위한특성이온
분석성분
(Compound)평균
분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursorion,
[M+H]+,m/z)생성이온
(Production,
m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
아피도피로펜
(Afidopyropen)593.7593.265941481)43
20245
10645
1)정량이온이며,그외는정성이온임.
※각생성이온에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경하여사용할수있으며,- 95 -제시된이외의생성이온도적용이가능함.
3)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하여액체크로마토그래프-질량분석기에
각각주입하여얻은크로마토그램상의각피크높이또는면적값으로
검량선을작성한다.
4)표준품의크로마토그램
그림.액체크로마토그래프-질량분석기에서표준품의크로마토그램
아피도피로펜(5.0분)
*분석기기:LC(WatersⓇAcquityUPLC),MS/MS(WatersⓇXevoTQ-S),
컬럼(UnisonUK-C18,2.0mmI.D.×100mmL.,3.0μm)
5)정량한계
0.01mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토그램상의피크가표준용액피크의머무름
시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량한다.
아.확인시험
액체크로마토그래프-질량분석기상의머무름시간과특성이온으로아피- 96 -도피로펜을확인한다.
제8.7.7.37.3.2중7.3.2.10글리포세이트(Glyphosate)를다음과같이한다.
가.시험법의적용범위
소고기,돼지고기,가금류고기,유,알등의축산물에적용한다.
나.분석원리
검체중글리포세이트와 대사산물(N-acetylglyphosate)을1%포름산함
유용액으로추출하여HLB카트리지로정제한후액체크로마토그래프-
질량분석기로분석한다.
다.장치
1)액체크로마토그래프:질량분석기(LC-MS/MS)
라.시약및시액
1)용매:잔류농약시험용또는이와동등한것
2)물:3차증류수또는이와동등한것
3)표준원액:글리포세이트와 대사산물인N-아세틸글리포세이트 표준
품을1%포름산함유용액에녹여1,000mg/L이되게한다.
4)표준용액:표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농도
로혼합,희석한다(무처리시료추출물90%이상포함)
5)기타시약:잔류농약시험용또는특급
마.시험용액의조제
1)추출
검체를분쇄하여균질화한후5g을정밀히달아원심분리관에넣고
1%포름산용액5mL과아세토니트릴15mL을가한뒤1분간심하- 97 -게흔들어추출한후여과지(Whatman6)로여과후10mL아세토니
트릴로여과지를씻어준다(추출액이여과지를통과하지못하는경우는
10,000G이상으로원심분리후상등액전량을취한다).이후40℃이
하에서질소가스를사용하여유기용매층을증발시키고물층만을남긴
후1%포름산함유용액으로10mL정용한다.
2)정제
HLBSPE카트리지(200mg)를0.1%포름산함유용액6mL로활성
화한후,‘1)추출’로부터얻은추출물2mL을카트리지에넣고흘러내
려받는다.카트리지상단이마르기전에0.1%포름산함유용액2
mL을용출하여앞서받은추출액과합하여4mL로만들고멤브레인
필터(nylon,0.2μm)로여과한후시험용액으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프의측정조건
가)컬럼:용매피크의용리시간이1분이내이면서글리포세이트와N-아
세틸글리포세이트의 머무름시간이1.5분이상분리가능한컬럼
나)컬럼온도:35℃
다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함유물
(2)이동상B:0.1%포름산함유메탄올
(3)농도구배조건
시간(분)A(%)B(%)
0.00 90.0 10.0
5.00 10.0 90.0
6.00 10.0 90.0
7.00 90.0 10.0- 98 -라)이동상유속:0.25mL/분
마)주입량:5μL
2)질량분석기분석조건
가)이온화방법:ESInegative-ionmode
나)Capillaryvoltage:3.5kV
다)Collisiongas:아르곤(Ar)또는질소(N2)
표.액체크로마토그래프-질량분석기분석을위한특성이온
분석성분
(Compound)평균
분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursorion,
[NH]+,m/z)생성이온
(Production,
m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
Glyphosate169.1168.1016863
1503
9
N-Acetyl
glyphosate211.1209.86210150
1247
5
※밑줄표시되어있는것은정량이온이며그외이온들은정성이온임
※각생성이온에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변
경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함
3)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하여액체크로마토그래프-질량분석기에
각각주입하여얻은크로마토그램상의각피크높이또는면적을구하
여검량선을작성한다.
4)표준품의크로마토그램10.00 90.0 10.0- 99 -
그림.액체크로마토그래프-질량분석기크로마토그램
Glyphosate(1.9분),N-acetylglyphosate(4.1분)
*분석기기:LC(SHISEIDO®NanospaceNasca2system),MS/MS(ABSCIEXQTRAP4500)
컬럼:HypercarbTM(2.1mmI.D.×100mmL.,5μm),농도:100μg/L
5)정량한계
글리포세이트(Glyphosate):0.05mg/kg
N-아세틸글리포세이트 (N-acetylglyphosate):0.05mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토그램상의피크가표준용액피크의머무름
시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량한다.
*글리포세이트의잔류량=글리포세이트의잔류량＋(환산계수×N-아
세틸글리포세이트의 잔류량)
*환산계수=0.80(글리포세이트의분자량169/N-아세틸글리포세이트의
분자량211
아.확인시험
액체크로마토크래프-질량분석기상의머무름시간과특성이온으로글
리포세이트와N-아세틸글리포세이트를 확인한다.- 100 -제8.7.7.37.3.2중7.3.2.16프로클로라즈(Prochloraz)를다음과같이한다.
가.시험법의적용범위
소고기,돼지고기,가금류고기,유,알등의축산물에적용한다.
나.분석원리
검체중프로클로라즈와대사산물(BTS44595,BTS44596,2,4,6-트리클로로
페놀)를pyridinehydrochloride를사용하여2,4,6-트리클로로페놀로 변환
후기체크로마토그래프-전자포획검출기로분석한다.
다.장치
1)기체크로마토그래프:전자포획검출기(GC-ECD)
라.시약및시액
1)용매:잔류농약시험용또는이와동등한것
2)물:3차증류수또는이와동등한것
3)표준원액:2,4,6-트리클로로페놀(2,4,6-trichlorophenol ;2,4,6-TCP)표
준품을아세톤에녹여100mg/L이되게한다.
4)표준용액:표준원액을에틸아세테이트를이용하여적당한농도로희
석한다.
5)기타시약:잔류농약시험용또는특급
마.시험용액의조제
1)추출
가)고기류등지방많이함유한검체:검체를균질화한시료10g을
정밀히달아아세톤100mL을넣은뒤30분간추출하고흡입여과한다.아- 101 -세톤50mL로잔류물과흡입여과에사용한용기를씻어합한후감압
농축하고‘1%포름산함유된n-헥산:아세토니트릴(1:1,v/v)50mL’을
넣고분배추출을2회반복후아래층을모아감압농축한다.잔류물을
디클로로메탄10mL에녹인후질소가스를사용하여1mL로농축한
뒤,2)의과정으로진행한다.
나)알과유:균질화한시료10g을정밀히달아아세톤20mL을넣고
30분간추출하고3,500rpm으로5분간원심분리한다.상층액을전량
취한후물100mL와포화염화나트륨용액50mL을넣고디클로로메탄
50mL로2회분배추출한후아래층을무수황산나트륨에통과시켜탈
수한다음감압농축한다.잔류물을디클로로메탄10mL에녹여1mL
로질소농축한뒤,2)의과정을거쳐시험용액으로한다.
2)2,4,6-TCP로변환
‘1)추출’과정에서얻은용액에pyridinehydrochloride5g을넣고20
0℃에서2시간동안분해시킨다.이후0.2MHCl20mL을넣고물
100mL과포화염화나트륨용액50mL을넣은뒤,디클로로메탄50
mL로2회분배추출하여아래층을무수황산나트륨을통과시켜탈수후
감압농축한다.유와알은에틸아세테이트10mL에녹여멤브레인필터
(PTFE,0.2μm)로여과한후시험용액으로하고,고기류등지방많은
검체는‘3)정제’과정을따른다.
3)정제
고기류를추출및2,4,6-TCP로변환후감압농축한잔류물을디클로로
메탄6mL로녹여,디클로로메탄10mL로활성화시킨아미노프로필- 102 -카트리지(1g)에넣고1%포름산함유메탄올10mL로용출하여받은
후감압농축한다.잔류물을에틸아세테이트10mL에녹여멤브레인필터
(PTFE,0.2μm)로여과한후시험용액으로한다.
바.시험조작
1)기체크로마토그래프의분석조건
가)컬럼:DB-5capillarycolumn(0.53mmI.D.×30mL.,0.50μm)
또는이와동등한것
나)이동상가스(Carriergas)및유속:질소(N2),7.0mL/분
다)주입부온도:300℃
라)오븐온도
100℃에서시료를주입하고2분간유지한후15℃/분의비율로190℃
까지온도를상승시켜1분간유지하고20℃/분의비율로290℃까지온
도를상승시켜2분이상유지한다.
마)주입량:1μL,splitless
바)검출기온도:300℃
2)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하여기체크로마토그래프-전자포획검출
기에각각주입하여얻은크로마토그램상의각피크높이또는면적값으
로검량선을작성한다.
3)표준품의크로마토그램- 103 -
그림.기체크로마토그래프-전자포획검출기에서표준품의크로마토그램.
2,4,6-트리클로로페놀 (7.3분)
*분석기기:GC(Agilent6890),ECD(Agilent),
컬럼:DB-5capillarycolumn(0.53mmI.D.×30mL.,0.50μm),
:20μg/L
4)정량한계
0.02mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토그램상의피크가표준용액피크의머무
름시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량
한다.
*프로클로라즈의잔류량=환산계수×2,4,6-TCP의잔류량
*환산계수=1.91(프로클로라즈의분자량377/2,4,6-TCP의분자량197)
아.확인시험
기체크로마토그래프-질량분석기상의머무름시간과질량분석스펙트럼
으로대상성분을확인한다.
1)기체크로마토그래프-질량분석기의분석조건
가)칼럼:DB-5MS(Agilent,0.25mmi.d.x30mL.,0.25μm)또는
이와동등한것
나)이동상가스및유속:헬륨,1.0mL/분
다)오븐온도:80℃에서2분간유지한후15℃/분의속도로180℃까지
승온하고10℃/분의속도로250℃까지승온한다.- 104 -라)주입부온도:250℃
마)인터페이스온도:280℃
바)이온화:전자충격(EI),70eV
사)주입모드:splitless
아)주입량:1μL
표.기체크로마토그래프-질량분석기분석을위한특성이온
분석성분
(Compound)평균분자량
(MW)관측이온
(Monitoringion,m/z)
2,4,6-trichlorophenol 197.5 196,132
※관측이온에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경
하여사용할수있으며,제시된이외의관측이온도적용이가능함.
제8.8.8.3.58플로르페니콜(Florfenicol)를다음과같이한다.
1)시험법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중플로르페니콜과플로르페니콜아민을암모니아수(Ammonia
water),아세토니트릴로추출하고PSA,C18MgSO4으로정제하여액
체크로마토그래프/질량분석기로분석한다.
3)측정기기
액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매:액체크로마토그래프용또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동등한것- 105 -다)표준원액:100mL용량플라스크에표준품을정밀히달아아세토
니트릴에각각녹여1,000µg/mL이되게한다.
라)표준용액:표준원액을아세토니트릴로희석하여0.25,0.5,1,2,4
mg/L농도가되게한다.다만,기기의특성등필요에따라농도를
조정하여사용할수있다.
마)0.1%개미산함유용액:1,000mL용량플라스크에개미산(Formic
acid)1mL을넣고물로표시선까지채운다.
바)0.1%개미산함유메탄올용액:1,000mL용량플라스크에개미산
1mL을넣고메탄올로표시선까지채운다.
사)기타시약:특급또는이와동등한것
5)첨가시료의조제
정량을하는경우조직표준곡선(Tissuestandardcurve)작성을위하여
각해당물질이검출되지않은음성대조시료(Negativecontrolsample)
2g씩준비한후Blank를제외하고각표준용액을0.2mL씩가하여
0.025,0.05,0.1,0.2,0.4mg/kg농도가되게한다.
6)시험용액의조제
균질화한검체2g을정밀히달아50mL폴리프로필렌원심분리관에
취한다.아세토니트릴10mL와암모니아수100μL를가하여10분간
진탕한후4,700G,4℃에서10분간원심분리한다.원심분리한상층액
을모두취하여150mgPSA,150mgC18과900mgMgSO4가담겨
진50mL원심분리관에옮기고1분간진탕한후4,700G,4℃에서10
분간원심분리한다.원심분리한상층액중5mL를취하여40℃수욕상
에서질소농축한다.잔류물에아세토니트릴/물(30/70,v/v)1mL을가
하여재용해하고,멤브레인필터(PTFE,0.2µm)로여과하여시험용액
으로한다.
7)시험조작
가)액체크로마토그래프측정조건- 106 -(1)칼럼:C18(X-SELECT-HSS,2.1mmi.d.⨯ 150mm,3.5µm)
또는이와동등한것
(2)이동상
(가)이동상A:0.1%개미산용액
(나)이동상B:0.1%개미산함유메탄올용액
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
1 90 10
3 10 90
5 10 90
5.1 90 10
10 90 10
(3)유속:0.25mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5µL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive,negative)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Capillaryvoltage:3.8kV
(4)Collisiongas:아르곤(Ar)
(5)분석대상물질의조건
물질명
(Compound)머무름
시간(분)이온화
(Ionization
mode)분자량
(Molecular
weight)선구이온
(Precursor
ion,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
Energy,
eV)
플로르페니콜
(Florfenicol)4.23 - 357.00 356336 10
185 19
152 16
플로르페니콜 아민
(Florfenicol amine)1.75 + 247.07 248230 11
130 21
91 48- 107 -※밑줄표시되어있는것은정량이온이며그외이온들은정성이온임
※각생성이온(Production)에대한질량분석기의기기조건은사용기
기의최적값으로변경하여사용할수있으며,제시된이외의생성이
온도적용이가능함
8)정성시험
가)정성
위의조건으로얻어진크로마토그램상의피크는표준용액피크의머
무름시간과비교하여일치하여야한다.또한표준용액과시험용액의
선구이온(Precursorion)및생성이온(Production)이일치하여야하
고,표준용액과시험용액의생성이온간반응세기의비율(Ionratio)을
비교하여그비율은주1)과일치하여야한다.
주1.생성이온간반응세기의비율허용범위
이온간 반응세기의 비율 (%) 허용범위
>50% ≤20%
>20%,≤50% ≤25%
>10%,≤20% ≤30%
 나)표준품크로마토그램
그림1.플로르페니콜표준용액(0.1mg/L,4.23분)크로마토그램
- 108 -그림2.플로르페니콜아민표준용액(0.1mg/L,1.75분)크로마토그램
9)정량시험
가)정량
정성및확인시험과똑같은조건에서Blank시료를포함하여각농
도별첨가시료에서얻어진크로마토그램상의각피크높이또는면
적을구하여검량선을작성한후시험용액의크로마토그램으로부터
정량이온(Quantitativeion)의각피크높이또는피크면적에따라
산출된시험용액중검출농도,검체량과최종시험용액의부피와추
출과정에서의사용한추출액의량(희석배수)를고려하여정량한다.
나)정량한계
플로르페니콜(Florfenicol):0.005mg/kg
플로르페니콜아민(Florfenicolamine):0.005mg/kg
제8.9.9.39.3.2를다음과같이한다.
9.3.2기체크로마토그래프/고분해능질량분석기(GC/HRMS)에의한시험
가.시험법적용범위
식육(소고기,돼지고기,닭고기)
나.분석원리
검체중의4∼8염화dibenzo-p-dioxin(CDDs)및dibenzofuran(CDFs)를
측정하기위해전처리과정을통하여지방을추출하고칼럼크로마토그래프
- 109 -로정제한것을기체크로마토그래프/고분해능질량분석기(GC/HRMS)로
분석한다.
다.장치
기체크로마토그래프/고분해능질량분석기(GC/HRMS):분해능10,000
이상을사용한다.
라.시약및시액
시약및시액은다이옥신분석에영향을미치는방해성분을함유하지
않아야한다.
1)용매：잔류농약분석용또는이와동등이상인것.
2)검량용표준물질(Calibrationstandard)：다이옥신의정성및정량에
사용하는검량용표준물질은표1과같이2,3,7,8-치환동족체17종과
13C12동족체(Labeled)및37Cl4동족체를사용한다.
3)회수율측정용표준물질(Labeledcompoundstandard)：시료의추출
과정전에첨가하는정량및회수율측정용내부표준물질은13C12동
족체로된다이옥신중표1과같은화합물을사용한다.
4)내부표준물질(Internalstandardsolution)：기체크로마토그래프/고분
해능질량분석기에주입하기전에첨가하는내부표준물질은
13C12-1,2,3,4-TCDD및13C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD를사용한다.
5)검량선작성용표준물질의조제：정량용표준물질을검출한계부분의
저농도의것과예상검출농도보다높은고농도의것을적어도하나
이상포함시켜5단계이상의농도범위로조제한다.- 110 -단,검량선작성용표준용액들은직선성을유지하여야한다.검량선
작성용표준용액은정량용표준물질의13C12동족체및37Cl4동족체가
동일농도로함유되어야한다.
6)정밀회수용표준물질(Precisionandrecoverystandard)：다이옥신의
회수율을측정하기위해일정농도의정밀회수용표준물질을사용하
여야한다(표1).
7)실리카겔：칼럼크로마토그래피용실리카겔(100～200mesh)을디클
로로메탄으로세척하여180℃에서1시간이상가열한후데시케이터
에서식힌다.
8)산성실리카겔(30%,w/w)：실리카겔100g에황산44.0g을넣어
잘흔들어섞어사용한다.
9)염기성실리카겔：실리카겔100g에1N수산화나트륨30g을넣어
잘흔들어섞어사용한다.
10)염기성알루미나：600℃에서24시간이상가열한후데시케이터에서
식힌다.
11)실리카겔칼럼：안지름11mm,길이177mm의정제용칼럼(중성
실리카겔1.5g,염기성실리카겔2g,산성실리카겔4g의순서로
충전한것)또는이와동등이상의것.
12)알루미나칼럼：안지름11mm,길이177mm의정제용칼럼(염기
성알루미나12.5g을충전한것)또는이와동등이상의것.
13)카본칼럼：안지름11mm,길이10mm의정제용칼럼[8%카본/- 111 -규조토(celite545-AW0.275g을충전한것)]또는이와동등이상의
것.
14)무수황산나트륨：특급이상(400℃에서최소1시간이상구운것)
15)1N수산화나트륨：수산화나트륨45.0g을취하여물로1L로한
것을사용한다.
16)기타：다이옥신분석에적합한것
마.시험용액의조제
1)추출
검체를분쇄하여균질화한시료약15～20g을막자사발에취하여
적당량의무수황산나트륨을가하여수분을제거한다음속슬렛
(Soxhlet)추출장치용원통여과지로옮기고따로시료를넣지않은
원통여과지에각각회수율측정용표준물질을첨가한다음*비등석이
첨가된속슬렛(Soxhlet)추출장치에추출용매(예:클로로메탄․헥산=
3:1,v/v)300mL를넣어18시간이상추출한다.별도로회수율측정
용시료에는정밀회수용표준물질을첨가하여*이후부터동일한방
법을사용한다.
2)조지방함량
속슬렛추출장치의추출액을40℃이하의수욕상에서감압농축한후
질소농축기를이용하여항량이될때까지농축하여조지방함량을구
한다.- 112 -조지방함량(g)=W1-W0
S
W0:플라스크의무게(g)
W1:조지방을추출하여농축한플라스크의무게(g)
S:시료의채취량(g)
3)조지방제거
유리솜이들어있는분액깔때기에유리깔때기를이용하여무수황산나
트륨20g과조지방1g당산성실리카겔10g을첨가한다.헥산3
mL로조지방을충분히용해한다음분액깔때기에묻지않도록산성
실리카겔표면에넓게뿌려서넣는다.이러한조작을2회반복한다음
20분간반응시킨후헥산130～150mL로용출한다.이용출액을40℃
이하의수욕상에서약3mL가되도록감압농축한후다른시험관에
옮기고감압용기를다시헥산3mL씩2회세척하여용액을시험관에
합한다.
4)정제
위의용액을헥산으로활성화된실리카겔칼럼에넣은후헥산으로
용출시키고그용출액을알루미나칼럼에첨가한다음2%디클로로
메탄함유헥산으로방해물질을제거하여50%디클로로메탄함유헥
산으로다시용출시킨다.이알루미나칼럼에서용출한액을카본칼
럼에넣고50%에틸아세테이트함유벤젠으로용출시킨다음다시
헥산으로방해물질을제거한후톨루엔으로역용출한다.이용출액을- 113 -질소농축기를사용하여농축한다음내부표준물질을첨가하여이를
시험용액으로한다.
주1)칼럼크로마토그래피에서사용하는충전제나용매의종류및
양은표준물질등으로분획실험하여최적조건을확립하여야
한다.
바.시험조작
1)기체크로마토그래프의측정조건
가)칼럼：DB-5캐필러리칼럼(길이60m,안지름0.2～0.32mm,두께
0.1～0.25μm)또는이와등등이상의것으로분석하고자하는전
동족체가양호하게분리되어야하며그분리효율을입증할수있
는것이어야한다.
나)오븐온도：각동족체의분리가양호하도록적절한온도조건을설
정한다.
단,2,3,7,8-TCDD와2,3,7,8-TCDF는인접한피크의분리도가봉우리
높이대비25%미만이어야한다.
다)운반기체(carriergas)및유량：헬륨,0.5～5.0mL/분
라)주입부온도：약270℃또는각동족체의분리가양호한온도
마)연결부온도：약290℃또는각동족체의분리가양호한온도
바)이온원온도：약260℃또는각동족체의분리가양호한온도
2)고분해능질량분석기의측정조건
가)튜닝표준물질：PFK(perfluorkerosene)또는이와동등한것- 114 -나)분해능：10,000이상(10%valley기준)
다)이온화방식：전자충격이온화방식(EI)
라)질량설정：측정하고자하는이온의질량은각동족체마다2개이
상의이온을선택이온(selectedion),즉M+,[M+2]+또는[M+4]+
를사용한다.주로사용하는각다이옥신동족체의대표적이온
질량은표1과같다.
마)질량검정：기체크로마토그래프/고분해능질량분석기는시료분석
조건과동일한조건에서분해능10,000이상으로조정한다음,4
염화물에서8염화물의선택이온들을적당한그룹으로나누어튜닝
표준물질에의한질량검정을하여야한다.
바)주기적점검：분석을지속적으로수행하는경우매12시간마다검
량용표준물질중중간농도의표준물질을선택하여분석조건을점
검하여야하며회수율은80%～120%에있어야한다.
사)검출한계：4,5염화물각각의검출한계는0.04pg/g이하이어야한다.
3)검량선작성
검량선작성용표준물질을사.정성시험과같은방법으로기체크로마
토그래프/고분해능질량분석기에주입하여각선택이온에대한크로
마토그램을작성하여각표준물질의피크면적과이에대응하는13C12
동족체의피크면적으로부터다음식에의해상대감응도(Relative
Response：RR)를구한다.상대감응도는5개농도이상의검량선작
성용표준물질을사용하며편차범위는±20%이내이어야한다.- 115 -RR=(A1n+A2n)(Cl)
(A1l+A2l)(Cn)
A1n,A2n：검량선작성용표준물질에첨가된다이옥신의1차또
는2차선택이온의피크면적
A1l,A2l：검량선작성용표준물질에첨가된13C12동족체의1차
또는2차선택이온의피크면적
Cn：검량선작성용표준물질의농도
Cl：검량선작성용표준물질에첨가된13C12동족체의농도
4)감응계수(ResponseFactor)
감응계수(RF)는검량선작성용표준물질로부터얻은크로마토그램으로
내부표준법에따라다음의식으로부터구한다.5개농도의검량선
작성용표준물질을사용한감응계수의편차범위는±35%이내이어야
한다.
RF=(A1s+A2s)(Cis)
(A1is+A2is)(Cs)
A1s,A2s：검량선작성용표준물질의1차또는2차선택이온의
피크면적
A1is,A2is：검량선작성용표준물질에첨가된회수율측정용표
준물질의1차또는2차선택이온의피크면적
Cs：검량선작성용표준물질의농도
Cis：검량선작성용표준물질에첨가된회수율측정용내
부표준물질의농도
5)회수율측정용표준물질의농도및회수율
시료에첨가된회수율측정용표준물질의농도(Cl)및회수율은다음- 116 -식에의해구한다.
Cl(ng/g)=(A1s+A2s)(Cis)
(A1is+A2is)×RF
회수율(%)=Cl(ng/g)×100Cspk(ng/g)
A1s,A2s：회수율측정용표준물질(13C12동족체)의1차또는2차
선택이온의피크면적
A1is,A2is：내부표준물질의1차또는2차선택이온의피크면적
Cis：내부표준물질의농도
RF：반응계수
Cl：검량선작성용표준물질에첨가된13C12동족체의농도
Cspk：첨가한회수율측정용표준물질의농도
사.정성시험
위의조건으로얻어진크로마토그램상의피크는어떠한측정조건에서도
표준용액피크의머무름시간과일치하여야하며,측정한선택이온2개의
이온세기비율은표2～3에나타난이론값에대하여±15%이내이어야
한다.단,모든신호대잡음(S/N)비는2.5보다커야하며,정량용
13C12및37Cl4의경우는10보다커야한다.
아.정량시험
정성시험과동일한조건에서얻어진시험결과에의해검출된각각의다
이옥신에대해이에대응하는검량용13C12동족체및37Cl4동족체표준
물질로상대내부표준법으로 정량한다.또한회수율측정용표준물질
37Cl4-2,3,7,8-TCDD와13C12-2,3,7,8-TCDD등15종의표준물질에대한- 117 -농도를절대내부표준법으로 정량한다.회수율측정용표준물질의회수
율은17%이상185%이하이어야하며,정밀회수용표준물질의회수
율은63%이상170%이하이어야한다.
1)다이옥신농도의계산
시료중다이옥신농도는다음식으로부터구한다.
다이옥신농도
(pg/gfat)=(A1n+A2n)(Cl)
×Vex×1,000(A1l+A2l)(RR)Ws
A1n,A2n：시료에함유된대상물질의1차또는2차선택이온의
피크면적
A1l,A2l：A1n와A2n에대응하는시료에첨가된13C12동족체화
합물의1차또는2차선택이온의피크면적
Cl：시료에첨가된13C12동족체표준물질의농도(pg/mL)
RR：상대감응도
Vex：추출량(mL)
Ws：조지방함량(g)
2)독성등가량(ToxicEquivalents：TEQ)으로환산
산출한다이옥신농도(ng/gfat)의독성등가량환산은각분석대상
동족체에표4에해당하는독성등가계수(ToxicEquivalencyFactors
:TEFs)를곱하여이합계를독성등가량(pgTEQ/gfat)으로한다.
표1.대상물질
PCDDs 대표적 이온 질량 PCDFs 대표적 이온 질량- 118 -
주2)약어의펼친이름은다음과같음.
PCDD=Polychlorodibenzo-p-dioxin
PCDF=Polychlorodibenzofuran
TCDD=Tetrachlorodibenzo-p-dioxin
TCDF=Tetrachlorodibenzofuran
PeCDD=Pentachlorodibenzo-p-dioxin
PeCDF=Pentachlorodibenzofuran
HxCDD=Hexachlorodibenzo-p-dioxin
HxCDF=Hexachlorodibenzofuran
HpCDD=Heptachlorodibenzo-p-dioxin
HpCDF=Heptachlorodibenzofuran
OCDD=Octachlorodibenzo-p-dioxin
OCDF=Octachlorodibenzofuran
표2.염소원자수에의한동족체피크의자연존재비2,3,7,8-
1,2,3,7,8-
1,2,3,4,7,8-
1,2,3,6,7,8-
1,2,3,7,8,9-
1,2,3,4,6,7,8-
1,2,3,4,6,7,8,9-TCDD
PeCDD
HxCDD
HxCDD
HxCDD
HpCDD
OCDD319.8965/321.8936
355.8546/357.8517
389.8157/391.8127
389.8157/391.8127
389.8157/391.8127
423.7767/425.7737
457.7377/459.73482,3,7,8-TCDF
1,2,3,7,8-PeCDF
2,3,4,7,8-PeCDF
1,2,3,4,7,8-HxCDF
1,2,3,6,7,8-HxCDF
1,2,3,7,8,9-HxCDF
2,3,4,6,7,8-HxCDF
1,2,3,4,6,7,8-HpCDF
1,2,3,4,7,8,9-HpCDF
1,2,3,4,6,7,8,9-OCDF303.9016/305.8987
339.8597/341.8568
339.8597/341.8568
373.8207/375.8178
373.8207/375.8178
373.8207/375.8178
373.8207/375.8178
407.7818/409.7788
407.7818/409.7788
441.7428/443.7398- 119 -자연 존재비
M M+2 M+4 M+6 M+8 M+10 M+12 M+14
4 76.5 100 48.7 10.5 0.9
5 61.5 100 65.0 21.1 3.5 0.2
6 51.2 100 81.2 35.2 8.5 1.1 0.06
7 43.2 100 97.5 52.8 17.1 3.3 0.36 0.02
8 33.8 87.9 100.0 65.0 26.4 6.8 1.1 0.10
표3.염소원자에따른선택이온의이론적인이론비
1)：37Cl4-2,3,7,8-TCDD제외
2)：13C12-HxCDF에만적용
3)：13C12-HpCDF에만적용염소원자의수전하대질량(m/z)
생성비이론비이론범위
최소최대
4개1)M/(M+2) 0.77 0.65 0.89
5개 (M+2)/(M+4) 1.55 1.32 1.78
6개 (M+2)/(M+4) 1.24 1.05 1.43
6개2)M/(M+2) 0.51 0.43 0.59
7개 (M+2)/(M+4) 1.05 0.88 1.20
7개3)M/(M+2) 0.44 0.37 0.51
8개 (M+2)/(M+4) 0.89 0.76 1.02- 120 -표4.독성등가계수(ToxicEquivalencyFactors;WHO2005TEFs)
제8.9.9.49.4.2를다음과같이한다.
9.4.2기체크로마토그래프/질량분석기에의한시험
가.시험법적용범위
어류중의폴리염화비페닐7종정량에적용한다.
나.분석원리
어류의가식부를취하여속슬렛추출장치에넣고조지방을추출한후다이옥신 WHO 2005 TEF
2,3,7,8-TCDD
2,3,7,8-TCDF
1,2,3,7,8-PeCDD
1,2,3,7,8-PeCDF
2,3,4,7,8-PeCDF
1,2,3,4,7,8-HxCDD
1,2,3,6,7,8-HxCDD
1,2,3,7,8,9-HxCDD
1,2,3,4,7,8-HxCDF
1,2,3,6,7,8-HxCDF
1,2,3,7,8,9-HxCDF
2,3,4,6,7,8-HxCDF
1,2,3,4,6,7,8-HpCDD
1,2,3,4,6,7,8-HpCDF
1,2,3,4,7,8,9-HpCDF
OCDD
OCDF1
0.
1
0.
0.
0.
0.
0.
0.
0.
0.
0.
0.
0.
0.
0.
0.1
03
3
1
1
1
1
1
1
1
01
01
01
0003
0003- 121 -추출용액을농축하고다층실리카겔칼럼으로정제하여기체크로마토그래
프/질량분석기로폴리염화비페닐7종을분석한다.
다.장치
기체크로마토그래프/질량분석기를사용한다.
라.시약및시액
1)용매：잔류농약분석용또는이와동등이상인것.
2)무수황산나트륨：특급이상(400℃에서최소1시간이상구운것)
3)다층실리카겔칼럼：안지름25mm,길이550mm의정제용칼럼에<그
림1>와같이아래부터무수황산나트륨1g,중성실리카겔1g,염기성실
리카겔3g,중성실리카겔1g,산성실리카겔5g,중성실리카겔2g,무
수황산나트륨2g의순서로충전한것(또는이와동등이상의것)
무수황산나트륨2g
중성실리카겔2g
산성실리카겔5g
중성실리카겔1g
염기성실리카겔3g
중성실리카겔1g
무수황산나트륨1g
그림1.다층실리카겔칼럼
4)중성실리카겔：칼럼크로마토그래피용실리카겔(100～200mesh)을- 122 -유리칼럼에채우고메탄올,헥산과디클로로메탄으로 순으로용리세
척하여180℃에서8시간이상가열한후데시케이터에서방냉한다.
5)산성실리카겔(30%,g/g)：중성실리카겔100g에진한황산44.0g를
넣고균일하게혼합한다.
6)염기성실리카겔(23%,g/g)：중성실리카겔100g에1N수산화나트륨
30.0g를넣고균일하게혼합한다.
7)추출용매:디클로로메탄:헥산(3：1,v/v)
※사용되는시약및시액은폴리염화비페닐분석에영향을미치는
방해성분을함유하지않아야하며,차광용기를사용한다.
8)표준원액：폴리염화비페닐7종표준품을노난에녹여1000㎍/mL가
되게한다<표1>.
표1.분석대상폴리염화비페닐(indicatorPCBs7종)의표준물질
동족체 BZ번호*
3염화비페닐2,4,4'-trichlorobiphenyl 28
4염화비페닐2,2,'5,5‘-tetrachlorobiphen yl52
5염화비페닐2,2',4,5,5'-pentachlorobiphen yl101
2,3',4,4',5-pentachlorobiphen yl118
6염화비페닐2,2',3,4,4',5'-hexachlorobiphenyl138
2,2',4,4',5,5'-hexachlorobiphenyl153
7염화비페닐2,2',3,4,4',5,5'-heptachlorobiphen yl180- 123 -*BallschmiterandZell번호:PCBs의각페닐고리의염소위치를
나타낸번호
9)내부표준원액：13C12동족체로된폴리염화비페닐7종의내부표준품을
노난에녹여50㎍/mL가되게한다.
10)검량선작성용표준용액：표준원액과내부표준원액에노난을가해
<표2>와같이표준용액5단계이상의농도범위(0.01～0.5㎍
/mL)로조제한것을사용한다.단,검량선작성용표준용액들은직
선성을유지하여야한다.
표2.폴리염화비페닐의검량선작성용표준용액
(단위:㎍/mL)
표준액BZ번호CS*
0.01CS
0.05CS
0.1CS
0.2CS
0.5
3염화비페닐280.010.050.10.20.5
28L*0.10.10.10.10.1
4염화비페닐520.010.050.10.20.5
52L*0.10.10.10.10.1
5염화비페닐1010.010.050.10.20.5
1180.10.10.10.10.1
101L*0.010.050.10.20.5
118L*0.10.10.10.10.1
6염화비페닐1380.010.050.10.20.5
1530.10.10.10.10.1
138L*0.010.050.10.20.5
153L*0.10.10.10.10.1
7염화비페닐1800.010.050.10.20.5
180L*0.10.10.10.10.1- 124 -※CS*:검량선작성용표준용액(CalibrationStandardSolution)
※L*:동위원소로치환된(LabeledCompound,13C12)내부표준물질
마.시험용액의조제
1)조지방추출
어류가식부의균질화된시료약10g을막자사발에취한다.무수황
산나트륨을가하여막자로저어수분을제거한다음속슬렛추출장치
용원통형여지로옮긴다.따로시료를넣지않은무수황산나트륨을
대조시료로하여속슬렛추출장치용원통형여지에넣고,각각동일한
농도의내부표준첨가용액을첨가한다음속슬렛추출장치를이용하여
추출용매300mL로18～24시간동안시간당3～4번의환류속도로
추출한다.추출액을35℃이하의수욕상에서10mL까지감압농축
한후질소농축기를이용하여농축한다.
2)정제
유리솜이들어있는분액깔때기에유리깔때기를이용하여무수황산나
트륨20g을넣은다음산성실리카겔30g을넣어준다.농축된조지
방을헥산3mL로용해한다음분액깔때기에묻지않도록산성실리
카겔표면에넓게뿌려서넣는다.이러한조작을2회반복한다음20
분간정치시킨후헥산150mL로용출한다.따로미리제조된다층
실리카겔칼럼을헥산100mL로활성화시킨후앞의용출액을가하고
헥산200mL로용출한다.이용출액을회전감압농축장치로5mL까지
농축하고질소농축기로농축한다음최종부피가1mL되도록하여- 125 -이를시험용액으로한다.
바.시험조작
1)기체크로마토그래프의조건
가)칼럼：DB-1(60m,0.25mmI.D.,0.25μm)또는이와등등이상
의것
나)주입부온도：280℃
다)오븐온도：초기온도100℃에서15℃/분의비율로200℃까지온도를
상승시켜3분간유지하고2℃/분의비율로250℃까지상승시켜5
분간유지한다음5℃/분의비율로300℃까지상승시켜3분간유
지한다.
라)운반기체(carriergas)및유량：헬륨(1.0mL/분)
마)주입방법:splitless
바)주입량:1.0uL
2)질량분석기의조건
가)이온화방법：EI
나)이온화전압:70eV
다)특성이온:<표3>참조
동족체BZ번호특성이온 이론비
(M+/(M+2)+또는
(M+2)+/(M+4)+ M+(M+2)+(M+4)+
3염화비페닐28256.0258.01.0228L*268.0270.0표3.대상물질및이온세기의이론비- 126 -
※L*:동위원소로치환된(LabeledCompound,13C12)내부표준물질
사.정성시험
위의조건에서얻어진시험용액의크로마토그램상의각피크를표준용
액의표준물질및내부표준물질의피크의머무름시간과비교할때일치
하여야하며,측정한선택이온2개의이온세기비율(M/M+2혹은
M+2/M+4)은<표2>에나타난이론비에대하여±20%이내이어야한다.
아.정량시험
검량선작성용표준용액의각각표준물질의피크면적(AS)과내부표준물
질피크면적(AIS)에대한비[AS/AIS]를Y축으로하고표준물질의농도
를X축으로하여검량곡선을작성하고,시험용액에서얻어진폴리염화
비페닐의피크면적과내부표준물질의면적비[ASAM/ASAMIS]를Y축에대
입하여각각의폴리염화비페닐농도를계산한후7종의폴리염화비페닐4염화비페닐52289.9291.90.7752L*301.9303.9
5염화비페닐101 325.9327.9
1.53118 325.9327.9
101L*337.9339.9
118L*337.9339.9
6염화비페닐138 359.8361.8
1.23153 359.8361.8
138L*371.8373.8
153L*371.8373.8
7염화비페닐180 393.8395.81.02180L*405.8407.8- 127 -7종의합을폴리염화비페닐7종(indicatorPCBs7종)농도로한다.
폴리염화비페닐농도(C,ng/g)=P×V
Ms
P:검량선에서구한폴리염화비페닐농도(ng/mL)
V:최종부피(mL)
MS:시료채취량(g)
폴리염화비페닐7종농도(ng/g)=∑Ci
Ci:i동족체의폴리염화비페닐의농도
(i=PCB28,52,101,118,138,153,180)
제8.9.9.59.5.2가.중1)를다음과같이한다.
1)시험법적용범위
식용유지(어유(크릴유)제외)에적용한다.
제8.9.9.59.5.2가.중4)를다음과같이한다.
4)시약및시액
가)용매：잔류농약시험용또는이와동등한것
나)물：3차증류수또는이와동등한것
다)플로리실또는실리카카트리지:플로리실또는실리카1g을함
유한SPE용또는이와동등한것- 128 -라)막여과지(membranefilter)：수용성폴리테트라플루오로에틸 렌또
는이와동등한것
마)표준원액：벤조피렌표준품을아세토니트릴에녹여100μg/mL로한다.
바)내부표준원액：3-메틸콜란트렌표준품을아세토니트릴에녹여100
μg/mL로한다.
사)표준용액：표준원액을아세토니트릴을사용하여적당한농도로희
석한다.
아)내부표준용액：내부표준원액을아세토니트릴을사용하여적당한
농도로희석한다.
자)기타시약：잔류농약시험용또는특급
제8.9.9.59.5.2가.5)중나)를다음과같이한다.
나)정제
카트리지는미리디클로로메탄10mL및헥산20mL를초당2～3방
울의속도로유출시킨후사용한다.이카트리지에위의농축액을1
mL/분의속도로가한다.이어서헥산5mL와헥산/디클로로메탄
(3:1)15mL로각각용출시킨후이용출액을40℃이하의수욕상에서
질소가스하에날려보낸후잔류물을아세토니트릴에녹여전량을1
mL로하고이를0.5μm막여과지(membranefilter)로여과하여시
험용액으로한다.- 129 -제8.9.9.59.5.2나.중1)를다음과같이한다.
1)시험법적용범위
식용유지(어유(크릴유)제외)에적용한다.
제8.9.9.59.5.2나.중4)를다음과같이한다.
4)시약및시액
가)용매:잔류농약시험용또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동등한것
다)플로리실또는실리카카트리지:플로리실또는실리카1g을함
유한SPE용또는이와동등한것
라)막여과지(membranefilter):수용성폴리테트라플루오로에틸 렌
또는이와동등한것
마)표준원액:벤조피렌표준품을디클로로메탄에 녹여100㎍/mL로
한다.
바)내부표준원액:벤조피렌-d12표준품을디클로로메탄에 녹여100
㎍/mL로한다.
사)표준용액:표준원액을디클로로메탄을 사용하여적당한농도로
희석한다.
아)내부표준용액:내부표준원액을디클로로메탄을 사용하여적당한
농도로희석한다.
자)기타시약:잔류농약시험용또는특급- 130 -제8.9.9.59.5.2나.5)중나)를다음과같이한다.
나)정제
카트리지는미리디클로로메탄10mL및헥산20mL를초당2～3방
울의속도로유출시킨후사용한다.이카트리지에위의농축액을넣
고헥산5mL와헥산/디클로로메탄(3:1)15mL로각각용출시킨후
이용출액을40℃이하의수욕상에서질소가스하에날려보낸후잔
류물을디클로로메탄에 녹여전량을200μL로하고이를0.45㎛막
여과지(membranefilter)로여과하여시험용액으로한다.
제8.9.9.59.5.2나.중“(7)정성시험”을“7)정성시험”으로한다.
제8.9.9.59.5.2나.중“(8)정량시험”을“8)정량시험”으로한다.
제8.9.9.59.5.4중“수산물및그가공품,훈제식육가공품및특수용도식
품중벤조피렌”을“수산물및그가공품,훈제식육가공품,특수용도식품
및어유(크릴유)중벤조피렌”으로한다.
제8.9.9.59.5.4중가.를다음과같이한다.
가.시험법적용범위
수산물및그가공품,훈제식육가공품,특수용도식품및어유(크릴유)에- 131 -한한다.
제8.9.중9.17을다음과같이한다.
9.17테트라하이드로칸나비놀 (δ-9-Tetrahydrocannabinol)및칸나비디올
(Cannabidiol)시험법
가.시험법적용범위
대마씨앗,대마씨유에적용한다.
나.분석원리
검체를메탄올로추출하고여과하여액체크로마토그래프/질량분석기
로분석한다.
다.장치
액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)를사용한다.
라.시약및시액
1)용매:액체크로마토그래피용또는이와동등한것
2)표준원액:CBD(Cannabidiol),THC((-)δ-9-Tetrahydrocannabinol)
표준품을각각메탄올에녹여100mg/L가되게한다.
3)표준용액:표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농도
로혼합,희석한다(무처리시료추출물90%이상포함).
4)기타시약:특급또는이와동등한것
마.시험용액의조제
검체를균질화한후1g에메탄올20mL을가하여10분간진탕한후- 132 -10분간초음파추출한다.이를4℃,4,000G에서10분간원심분리하고
상등액을멤브레인필터(PTFE,0.2μm)로여과한후시험용액으로한
다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프의분석조건
가)칼럼:C18계역상칼럼또는이와동등한것
나)칼럼온도:40℃
다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함유물
(2)이동상B:0.1%포름산함유아세토니트릴
(3)농도구배조건
시간(분)A(%) B(%)
0.0 70 30
0.5 70 30
2.5 30 70
10 30 70
10.1 70 30
11.0 70 30
라)이동상유속:0.4mL/min
마)주입량:5μL
2)질량분석기분석조건
가)이온화:ESIpositive-ionmode
나)분자량범위:100～500m/z
표.액체크로마토그래프-질량분석기분석을위한특성이온- 133 -분석성분
(Compound)평균
분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursorion,
[M+H]+,m/z)생성이온
(Production,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
칸나비디올
(Cannabidiol)314.5314.20315193.11)23
259.2 20
테트라하이드로칸나비놀
(Tetrahydrocannabinol)314.5314.22315193.11)25
259.3 14
1)정량이온이며,그외는정성이온임.
※각생성이온에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경하여사용할수
있으며,제시된이외의생성이온도적용이가능함.
3)검량선의작성
표준용액을농도별로일정량취하여액체크로마토그래프-질량분석기
에각각주입하여얻은크로마토그램상의피크높이또는면적을구
하여검량선을작성한다.
4)표준품의크로마토그램- 134 -
그림.액체크로마토그래프-질량분석기에서표준품의크로마토그램
CBD(4.7분),THC(5.7분)
*분석기기:LC(ThermoscientificⓇAccela),MS/MS(Thermo
scientificⓇUS/TSQvantage),칼럼(WatersXSelectⓇHSSC18
SB,2.1mmI.D..×100mmL.,2.5μm)
5)정량한계:0.1mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토그램상의피크가표준용액피크의머무
름시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량- 135 -한다.
[별표1]1.중A가051100을다음과같이한다.
A가051100둥근마 쓴감자마 ,AirPotato Dioscorea bulbifera L./Dioscorea sativa L.덩이뿌리 (덩이열매 )
[별표1]1.중A가060400을다음과같이한다.
A가060400마참마,East Asian
mountain yamDio sco rea batatas Decaisne /Dio sco rea
jap onica Thunberg /Dio sco rea p ok ystachya /
Dio sco rea o ppo sita뿌리,뿌리줄기※
(산약),주아(영여자 )
[별표1]1.중A가075800을다음과같이한다.
A가075800바닐라 타히티 ,Vanilla OrchidVanilla planifolia G.Jackson /
Vanilla tahitensis열매(씨 포함)
[별표1]1.중A가083100을다음과같이한다.
A가083100벼 쌀,현미,백미,미강,Rice Oryza sativa /Oryza glaberrim a씨앗,겨(왕겨 제외),
순
[별표1]1.중A가102200을다음과같이한다.
A가102200석류나무 Dwarf Pomegranate Punica granatum L./Punica florid a Salisb. 열매(열매껍질 제외)
[별표1]1.중A가124700을다음과같이한다.- 136 -A가124700여두 쥐눈이콩 ,서목태 ,약콩 Rhyncho sia volubilis 열매
[별표1]1.중A가130100을다음과같이한다.
A가130100왕느릅나무유백피 ,큰잎느릅나무 ,
Large-fruit elmUlm us m acrocarp a Hance나무껍질※
(유백피 ,유근피 )
[별표1]1.중A가178300을다음과같이한다.
A가178300풍선난초풍선란 ,주걱난초 ,
애기숙갈난초 ,Calypso
Orchid, Fairyslipper
Orchid, Fairy-slipper
orchidCalypso bulbosa (L.)/Calypso bo realis Salisb.덩이줄기
[별표1]1.중A가184000을다음과같이한다.
A가184000호리병박박,바가지 ,바가지박 ,
Bottle gourd, calabash,
Yuugao, White-flowerd
gourd, CalabashLagenaria leucantha Rusby /Lagenaria
siceraria (Molina) Standl. /Laganaria
leucantha var. d epressa H.Hara열매
[별표1]1.중A나014100을다음과같이한다.
A나014100깜장북방대합 Stimpson’s mactra　 Spisula po lynym a /Mactro m eris p olynym a -
[별표1]1.중A나033150을다음과같이신설한다.
A나033150매오징어 Sparking enope squid Watasenia scintillans -- 137 -[별표1]1.중A나055900을다음과같이한다.
A나055900식용달팽이 -Helix po m atia /Nesio helix sam arangae /
Achatina fulica (Bowdich) Achatinidae /
Helix luco rum-
[별표1]1.중A나057700을다음과같이한다.
A나057700아귀Blackmouth angler,
Blackmouth goosefishLo phiom us setigerus /Lo phius gastro physus -
[별표1]1.중A나077900을다음과같이한다.
A나077900캥거루 -Macro pus giganteus /Macro pus rufus /
Macro pus ro bustus정육
[별표1]1.중A나092950을다음과같이신설한다.
A나092950Japanese sea
cucumber- Sticho pus jap onicus /Ap osticho pus japo nicus -
[별표2]1.중B가006950을다음과같이신설한다.
B가006950석류나무 Dwarf PomegranatePunica granatum L./Punica florid a 
Salisb.씨앗어린이 제품에 
사용하여서는 
아니됨
[별표2]1.중B가007300을다음과같이한다.
B가007300소나무 Korean redpinePinus d ensiflo ra Sieb &Zucc. /
Pinus sylvestris L.뿌리,솔방울솔방울은 주류(일반
증류주 )의 원료에 
한함- 138 -[별표2]1.중B가008700을다음과같이한다.
B가008700옻나무 칠목 Rhus verniciflua Stokes 줄기,가지동 공전 제2,1,1),
(10)옻나무의 
사용기준에 따름
[별표2]1.중B다001700을삭제한다.
[별표2]1.중B다001800을삭제한다.
[별표2]1.중B다001900을다음과같이한다.
B다001900 Mo nascus purpureus Mo nascus anka Mo nascus purpureus주류 제조,홍국쌀등 곡류 
제조,콩껍질 (두피)에 
접종하여 발효에 한함
[별표2]1.중B다002000을다음과같이한다.
B다002000 Mo nascus ruberMo nascus p ilo sus
Mo nascus fuligino sis,
Mo nascus vitreus,Mo nascus ruber주류 제조,홍국쌀등 곡류 
제조,콩껍질 (두피)에 
접종하여 발효에 한함
[별표4](1)이미녹타딘(Iminoctadine)중“고구마0.05T”를“고구마0.05”
로한다.- 139 -[별표4](3)글리포세이트(Glyphosate)중다음항목을신설한다.
차 0.8†
[별표4](9)델타메트린(Deltamethrin)중“토란0.05T”를“토란0.05”로한
다.
[별표4](21)디클로르보스(Dichlorvos)중“표고버섯0.05T”를“표고버섯
0.05”로하고,다음항목을각각신설한다.
가지 0.05
무(뿌리)0.05
부추 0.05
브로콜리0.3
순무 0.05
시금치 1.0
[별표4](29)디플루벤주론(Diflubenzuron)중“풋콩1.0”을“풋콩2.0”으로
하고,다음항목을각각신설한다.
건삼 0.5
복분자 1.0
수삼 0.2
키위 0.5- 140 -[별표4](31)마이클로뷰타닐(Myclobutanil)중다음항목을각각신설한
다.
귀리 0.5
메밀 0.15
[별표4](46)메틸브로마이드(Methylbromide)중“체리20T”을삭제하고,
다음항목을신설한다.
핵과류 20†
[별표4](50)베나락실(Benalaxyl)중다음항목을각각신설한다.
갓 0.05
고들빼기0.05
들깻잎 0.05
파 0.05
[별표4](54)벤타존(Bentazone)중다음항목을각각신설한다.
들깨 0.05
풋콩 0.05
[별표4](55)뷰프로페진(Buprofezin)중다음항목을각각신설한다.- 141 -대두 0.05
양파 0.05
풋콩 0.7
[별표4](59)비터타놀(Bitertanol)중“블루베리1.0T”을“블루베리2.0”으로
한다.
[별표4](61)비펜트린(Bifenthrin)중“복분자0.3T”을“복분자0.3”으로
하고,“아로니아0.3T”을“아로니아0.5”로하며,“표고버섯0.05T”를“표고
버섯0.05”로한다.
[별표4](66)사이퍼메트린(Cypermethrin)중“대두0.05T”를“대두0.05”
로하고,다음항목을신설한다.
풋콩 0.07
[별표4](67)사이플루트린(Cyfluthrin)중다음항목을신설한다.
아로니아2.0
[별표4](68)사이할로트린(Cyhalothrin)중다음항목을신설한다.
아로니아2.0- 142 -[별표4](78)알라클로르(Alachlor)중“배추0.05T”를“배추0.05”로하고,
다음항목을각각신설한다.
양배추0.05
엇갈이배추0.05
[별표4](85)에토펜프록스(Etofenprox)중“시금치0.5”를삭제하고,“아로니
아1.0T”을“아로니아15”로한다.
[별표4](86)에토프로포스(Ethoprophos)중“더덕0.05T”를“더덕0.05”로
하고,“생강0.02T”를“생강0.05”로하며,“셀러리0.05T”를“셀러리0.05”로
하고,“수수0.005T”를“수수0.05”로하며,“아스파라거스0.05T”를“아스파라
거스0.05”로하고,“참나물0.05T”를“참나물0.05”로한다.
[별표4](99)이사-디(2,4-D,2,4-dichlorophenoxyaceticacid)중다음항
목을신설한다.
율무 0.05
[별표4](110)카두사포스(Cadusafos)중“더덕0.05T”를“더덕0.05”로하고,
“오미자0.05T”를“오미자0.05”로하며,다음항목을각각신설한다.
들깨 0.05
오미자(건조)0.05- 143 -[별표4](112)카벤다짐(Carbendazim)중“구기자2.0T”을“구기자2.0”으로
하고,“마0.05T”를“마0.05”로하며,“아스파라거스0.2T”를“아스파라거스
0.7”로하고,“조0.05T”를“조0.7”로하며,다음항목을각각신설한다.
구기자(건조)2.0
마(건조)0.05
[별표4](114)카보퓨란(Carbofuran)중다음항목을신설한다.
풋콩 0.05
[별표4](116)카탑(Cartap)중“녹두0.05T”를“녹두0.05”로하고,“팥
0.05T”를“팥0.05”로하며,“무(뿌리)1.0T”을“무(뿌리)1.0”으로하고,“무(잎)
1.0T”을“무(잎)10”으로하며,다음항목을각각신설한다.
강낭콩 0.05
당근 0.05
대두 0.05
동부 0.05
부추 1.5
브로콜리0.3
완두 0.05
풋콩 2.0- 144 -호박 0.07
호박잎 3.0
[별표4](118)캡탄(Captan)중“자두5.0T”을“자두5.0”으로한다.
[별표4](133)테부코나졸(Tebuconazole)중“녹두0.05T”를“녹두0.2”로하
고,“복분자0.5T”를“복분자1.0”으로하며,“우엉0.05T”를“우엉0.07”로하
고,다음항목을신설한다.
우엉(잎)5.0
[별표4](135)터부포스(Terbufos)중다음항목을각각신설한다.
다채 0.2
청경채0.3
[별표4](146)트리클로피르(Triclopyr)중다음항목을각각신설한다.
배 0.05
복숭아0.05
[별표4](149)트리플루미졸(Triflumizole)중다음항목을신설한다.
풋콩 0.05- 145 -[별표4](161)페녹사프로프-에틸(Fenoxaprop-ethyl)중다음항목을신설한
다.
들깨 0.05
[별표4](162)페니트로티온(Fenitrothion)중“호프0.05T”를“호프30”으로
한다.
[별표4](170)펜토에이트(Phenthoate)중“복분자0.5T”를“복분자1.0”으로
하고,“아로니아0.5T”를“아로니아3.0”으로한다.
[별표4](171)펜프로파트린(Fenpropathrin)중“갯기름나물5.0T”을“갯기름나
물5.0”으로한다.
[별표4](173)포레이트(Phorate)중“콜라비0.05T”를“콜라비0.05”로한다.
[별표4](178)폭심(Phoxim)중다음항목을각각신설한다.
건삼 3.0
고구마0.05
고구마줄기0.05
수삼 0.7- 146 -[별표4](179)폴펫(Folpet)중“체리2.0T”을“체리3.0”으로하고,다음항목
을각각신설한다.
대추 3.0
대추(건조)5.0
[별표4](183)플루아지포프-뷰틸(Fluazifop-butyl)중“취나물0.05T”를“취나
물0.05”로하고,다음항목을각각신설한다.
산마늘잎1.0
생강 0.05
[별표4](192)프로피코나졸(Propiconazole)중“땅콩0.05T”를“땅콩0.05”로
한다.
[별표4](200)헥사코나졸(Hexaconazole)중“귀리0.2T”를“귀리0.2”로하고,
“마0.05T”를“마0.05”로하며,“생강0.05T”를“생강0.3”으로하고,다음항목
을각각신설한다.
당귀(잎)2.0
마(건조)0.05
엇갈이배추0.05
배추 0.05- 147 -쑥 2.0
우엉 0.05
[별표4](201)헥시티아족스(Hexythiazox)중“갯기름나물5.0T”을“갯기름나
물5.0”으로한다.
[별표4](206)클로르페나피르(Chlorfenapyr)중“고구마0.05T”를“고구마
0.05”로하고,“녹두0.05T”를“녹두0.05”로하며,“대두0.05T”를“대두0.05”로
하고,“땅콩0.05T”를“땅콩0.05”로하며,“풋콩0.5T”를“풋콩2.0”으로하고,
다음항목을각각신설한다.
강낭콩 0.05
동부 0.05
완두 0.05
[별표4](207)테부페노자이드(Tebufenozide)중“앵두1.0T”을“앵두2.0”으로
한다.
[별표4](208)테부펜피라드(Tebufenpyrad)중“토란0.05T”를“토란0.05”로
한다.
[별표4](212)플루페녹수론(Flufenoxuron)중“브로콜리0.07”을“브로콜리- 148 -0.1”로하고,“토란0.05T”를“토란0.05”로하며,다음항목을신설한다.
토마토 0.05
[별표4](215)피프로닐(Fipronil)중다음항목을신설한다.
고구마줄기0.05
[별표4](218)디메토모르프(Dimethomorph) 중“녹두0.05T”를“녹두0.5”로
하고,“도라지0.05T”를“도라지0.05”로하며,다음항목을각각신설한다.
귀리 0.5
밀 0.2
[별표4](221)디티아논(Dithianon)중“녹두0.05T”를“녹두0.2”로한다.
[별표4](225)사이프로디닐(Cyprodinil)중“아로니아1.0T”을“아로니아7.0”
으로하고,“복분자1.0T”을“복분자10†”으로하며,다음항목을각각신설한
다.
강낭콩 0.2†
완두 0.3†
[별표4](227)아세타미프리드(Acetamiprid)중다음항목을신설한다.
잣 0.5- 149 -[별표4](228)아족시스트로빈(Azoxystrobin)중“사탕무0.1T”을“사탕무4.0†”
으로하고,“크랜베리0.5T”를“크랜베리0.5†”로하며,“홍화씨0.1T”을“홍화
씨0.2”로하고,다음항목을신설한다.
귀리 0.3
[별표4](230)크레속심메틸(Kresoxim-methyl)중“블루베리1.0T”을“블루베
리2.0”으로한다.
[별표4](231)클로르플루아주론(Chlorfluazuron)중“땅콩0.05T”를“땅콩
0.05”로하고,다음항목을신설한다.
앵두 0.4
[별표4](233)펜사이큐론(Pencycuron)중다음항목을각각신설한다.
도라지 0.05
우엉 0.05
참나물 30
[별표4](234)펜피록시메이트(Fenpyroximate)중“대추0.1T”을“대추1.0”으
로하고,“살구0.1T”을“살구0.6”으로하며,다음항목을각각신설한다.
대추(건조)1.5- 150 -매실 0.6
아로니아0.3
[별표4](235)포스티아제이트(Fosthiazate)중“더덕0.05T”를“더덕0.05”로
하고,“무(뿌리)0.05T”를“무(뿌리)0.05”로한다.
[별표4](237)피메트로진(Pymetrozine)중“토란(줄기)0.05T”를“토란(줄기)
0.1”로한다.
[별표4](238)플루디옥소닐(Fludioxonil)중“복분자2.0”을“복분자5.0†”
으로하고,다음항목을각각신설한다.
도라지 2.0
배추 3.0
사탕무 4.0†
엇갈이배추7.0
완두 0.3†
[별표4](239)플루아지남(Fluazinam)중“녹두0.07T”을“녹두0.1”로하고,“참나
물0.05T”를“참나물30”으로하며,다음항목을각각신설한다.
우엉 0.05
우엉잎 3.0- 151 -[별표4](248)아바멕틴(Abamectin)중다음항목을신설한다.
망고 0.05
[별표4](249)에마멕틴벤조에이트(Emamectinbenzoate)중“땅콩0.05T”
를“땅콩0.05”로하고,“토란0.05T”를“토란0.05”로하며,다음항목을각
각신설한다.
잣 0.05
토란(줄기)0.2
[별표4](251)에톡사졸(Etoxazole)중“들깻잎0.1T”을“들깻잎7.0”으로한다.
[별표4](253)이미벤코나졸(Imibenconazole)중다음항목을각각신설한다.
감 0.5
배 0.1
[별표4](259)피리메타닐(Pyrimethanil)중다음항목을각각신설한다.
갯기름나물20
고수(잎)2.0
방아잎20
상추 30- 152 -섬쑥부쟁이20
쑥갓 20
아욱 20
양배추1.0
참나물 20
[별표4](265)디메테나미드(Dimethenamid)중“호프0.05T”를“호프0.05†”로
한다.
[별표4](273)밀베멕틴(Milbemectin)중“블루베리0.05T”를“블루베리0.05”로
하고,“아로니아0.05T”를“아로니아0.05”로하며,다음항목을각각신설한다.
매실 0.2
살구 0.2
자두 0.2
잣 0.05
[별표4](275)뷰타클로르(Butachlor)중다음항목을각각신설한다.
배추 0.05
양배추0.05
엇갈이배추0.05- 153 -[별표4](283)아시벤졸라-에스-메틸(Acibenzolar-S-methyl)중“대추
0.2T”를“대추0.2”로하고,다음항목을각각신설한다.
대추(건조)0.3
체리 0.07
[별표4](286)에트리디아졸(Etridiazole)중다음항목을신설한다.
비름나물0.05
[별표4](290)인독사카브(Indoxacarb)중“땅콩0.02T”를“땅콩0.05”로
하고,“무(잎)3.0”을“무(잎)7.0”으로하며,“표고버섯0.05T”를“표고버섯
0.2”로한다.
[별표4](299)티플루자마이드(Thifluzamide)중“생강0.05T”를“생강
0.2”로하고,다음항목을각각신설한다.
도라지 0.07
우엉 0.05
[별표4](301)펜헥사미드(Fenhexamid)중다음항목을신설한다.
양배추1.0
[별표4](308)플루설파마이드(Flusulfamide)중다음항목을각각신설한다.- 154 -감자 0.05
갓 0.05
무(뿌리)0.05
무(잎)0.05
브로콜리0.05
양배추0.05
청경채0.05
케일 0.05
콜라비 0.05
[별표4](309)플루톨라닐(Flutolanil)중다음항목을각각신설한다.
도라지 0.05
배추 0.5
엇갈이배추1.5
[별표4](321)디노테퓨란(Dinotefuran)중“고구마줄기0.05T”를“고구마줄기
0.05”로하고,“딸기2.0”을“딸기3.0”으로하며,“무(잎)0.7”을“무(잎)1.5”로하
고,“풋마늘0.05”를“풋마늘0.7”로하며,다음항목을각각신설한다.
신선초 10
유채 10- 155 -[별표4](323)보스칼리드(Boscalid)중“대두0.05T”를“대두0.05”로하고,“브로
콜리0.05T”를“브로콜리0.05”로하며,“비트(뿌리)0.05T”를“비트(뿌리)0.3”으로
하고,“비트(잎)0.3T”을“비트(잎)3.0”으로하며,“아로니아5.0T”을“아로니아10”
으로하고,“양배추0.05T”를“양배추0.05”로하며,다음항목을각각신설한다.
땅콩 0.05
루꼴라0.05
순무유채0.05
신선초 0.05
우엉 0.05
우엉잎 0.05
[별표4](325)사이아조파미드(Cyazofamid)중“토마토0.5”를“토마토2.0”으로하고,
다음항목을각각신설한다.
부추 10
사과 0.7
호박 0.05
[별표4](326)아세퀴노실(Acequinocyl)중다음항목을신설한다.
들깨 0.3
[별표4](332)클로티아니딘(Clothianidin)중“도라지0.05T”를“도라지- 156 -0.07”로한다.
[별표4](333)테부피림포스(Tebupirimfos)중“다채0.05T”를“다채0.05”로
하고,“청경채0.05T”를“청경채0.05”로한다.
[별표4](335)트리플록시스트로 빈(Trifloxystrobin)중“아로니아0.7T”을
“아로니아2.0”으로하고,다음항목을신설한다.
생강 0.2
[별표4](345)피라클로스트로빈(Pyraclostrobin)중“녹두0.05T”를“녹두
0.05”로하고,다음항목을각각신설한다.
고수(잎)3.0
쌀 0.05
[별표4](349)노발루론(Novaluron)중“수삼0.05T”를“수삼0.5”로하고,다음
항목을신설한다.
건삼 1.5
[별표4](352)메톡시페노자이드(Methoxyfenozide)중“아로니아0.5T”를
“아로니아1.5”로하고,다음항목을각각신설한다.
도라지 0.05- 157 -들깨 0.3
우엉 0.07
[별표4](353)메트코나졸(Metconazole)중“키위0.7T”을“키위1.5”로하고,다음
항목을각각신설한다.
도라지 0.05
우엉 0.05
[별표4](357)디티오카바메이트(Dithiocarbamates) 중“녹두0.05T”를“녹두0.05”로
하고,“무(잎)5.0T”을“무(잎)15”로하며,“양배추2.0T”을“양배추3.0”으로하고,
“우엉(잎)5.0T”을“우엉(잎)5.0”으로하며,다음항목을각각신설한다.
브로콜리5.0
아스파라거스0.5
키위 3.0
[별표4](370)벤티아발리카브아이소프로필(Benthiavalicarb-isopropyl)중“복분자
0.1T”을“복분자0.3”으로하고,“콜라비0.05T”를“콜라비0.2”로하며,다음항목을각
각신설한다.
부추 0.3
파 0.05- 158 -[별표4](380)피리달릴(Pyridalyl)중“땅콩0.05T”를“땅콩0.05”로하고,다음
항목을각각신설한다.
감 0.1
호박 0.2
[별표4](381)육-비에이(Benzyladenine,6-Benzylaminopurine)중다음항
목을각각신설한다.
대추 0.05
대추(건조)0.05
[별표4](384)사이플루페나미드(Cyflufenamid)중다음항목을각각신설한다.
당귀(잎)10
쑥 5.0
[별표4](386)플로니카미드(Flonicamid)중“감0.3”을“감1.0”으로하고,다음
항목을신설한다.
팥 0.1
[별표4](393)메트알데하이드(Metaldehyde)중“더덕0.05T”를“더덕0.2”로하고,
“땅콩0.05T”를“땅콩0.05”로하며,“생강0.05T”를“생강0.2”로하고,다음항목을
각각신설한다.- 159 -갯기름나물1.0
무(뿌리)0.05
참나물 0.05
취나물 0.5
[별표4](395)플루오피콜라이드(Fluopicolide)중“토마토0.2”를“토마토1.5”로하
고,다음항목을각각신설한다.
사과 0.5
파 1.5
[별표4](399)사이플루메토펜(Cyflumetofen)중“아로니아0.6T”을“아로니아1.0”
으로하고,“토란(줄기)0.2T”를“토란(줄기)0.5”로하며,다음항목을신설한다.
블루베리 1.0
[별표4](403)메타플루미존(Metaflumizone)중“녹두0.05T”를“녹두0.2”
로하고,“대두0.05”를“대두0.2†”로하며,“커피원두0.05T”를“커피원두
0.1†”로하고,다음항목을신설한다.
달래 5.0
[별표4](404)메트라페논(Metrafenone)중“오미자0.3T”을“오미자0.7”로
하고,다음항목을신설한다.- 160 -오미자(건조)5.0
[별표4](405)사이에노피라펜(Cyenopyrafen)중“유자0.5T”를“유자0.5”
로하고,“토란0.05T”를“토란0.05”로하며,“토란(줄기)0.05T”를“토란(줄
기)0.05”로한다.
[별표4](408)스피네토람(Spinetoram)중“느타리버섯0.05T”를“느타리버섯0.05”
로하고,“토란0.05T”를“토란0.05”로한다.
[별표4](416)클로란트라닐리프롤(Chlorantraniliprole) 중“고구마0.05T”를“고구마
0.05”로하고,“녹두0.05T”를“녹두0.05”로하며,“수수0.05T”를“수수3.0”으로하
고,다음항목을각각신설한다.
강낭콩 0.05
고구마줄기0.2
동부 0.05
오미자(건조)1.5
완두 0.05
풋콩 1.0
[별표4](422)펜티오피라드(Penthiopyrad)중“오미자0.2T”를“오미자0.5”로하고,
“콜라비0.3T”을“콜라비1.0”으로하며,다음항목을각각신설한다.- 161 -귀리 0.2
도라지 0.05
메밀 1.0
방아잎15
오미자(건조)1.5
[별표4](423)피콕시스트로빈(Picoxystrobin)중다음항목을각각신설한다.
고수(잎)5.0
복분자 2.0
[별표4](424)피리플루퀴나존(Pyrifluquinazon)중“고수(잎)0.05T”를“고수(잎)
0.2”로하고,“옥수수0.05T”를“옥수수0.05”로하며,“토란0.05T”를“토란0.05”로
하고,“토란(줄기)0.05T”를“토란(줄기)0.05”로하며,다음항목을각각신설한다.
꾸지뽕(열매)0.05
꾸지뽕(잎)0.05
[별표4](427)이미시아포스(Imicyafos)중“더덕0.05T”를“더덕0.05”로한다.
[별표4](428)플루오피람(Fluopyram)중“수삼0.07T”을“수삼0.7”로하고,다음
항목을각각신설한다.
건삼 3.0- 162 -배추 0.05
[별표4](430)설폭사플로르(Sulfoxaflor)중“도라지0.05T”를“도라지0.05”로하고,
다음항목을각각신설한다.
들깨 0.2
토란 0.05
[별표4](431)아이소피라잠(Isopyrazam)중다음항목을각각신설한다.
배추 0.2
엇갈이배추0.5
[별표4](433)사이안트라닐리프 롤(Cyantraniliprole)중“고구마0.05T”를“고
구마0.05”로하고,“살구0.5T”를“살구0.5”로하며,“토란0.05T”를“토란
0.05”로하고,다음항목을신설한다.
포도 1.0
[별표4](435)펜피라자민(Fenpyrazamine)중다음항목을신설한다.
양배추1.5
[별표4](436)플루티아닐(Flutianil)중다음항목을각각신설한다.
배추 0.3- 163 -비트(뿌리)0.05
비트(잎)1.5
[별표4](437)플룩사피록사드(Fluxapyroxad)중“유채씨0.8†”을삭제하고,
“배추0.05”를“배추1.0”으로하며,“엇갈이배추0.05”를“엇갈이배추3.0”으로
하고,“파2.0”을“파3.0”으로하며,다음항목을각각신설한다.
유지종실류 0.8†
키위 2.0
풋콩 0.15
[별표4](441)피리벤카브(Pyribencarb)중“참외0.07”을“참외0.7”로하
고,다음항목을신설한다.
고수(잎)5.0
[별표4](442)플루피라디퓨론(Flupyradifurone)중“토란0.05T”를“토란
0.05”로하고,다음항목을각각신설한다.
꾸지뽕(열매)0.5
꾸지뽕(잎)10
[별표4](450)발리페날레이트(Valifenalate)중“쑥갓1.0T”을“쑥갓10”으
로하고,다음항목을각각신설한다.- 164 -갓 10
고들빼기10
냉이 10
들깻잎 20
루꼴라10
배암차즈기10
상추 20
순무유채10
양상추 20
케일 10
[별표4](452)아이소페타미드(Isofetamid)중다음항목을각각신설한다.
감 0.2
부추 7.0
[별표4](453)만데스트로빈(Mandestrobin)중다음항목을각각신설한다.
배추 1.0
엇갈이배추3.0
양배추0.05
키위 0.05- 165 -[별표4](454)플루엔설폰(Fluensulfone)중다음항목을신설한다.
오이 0.05
[별표4](458)사이클라닐리프롤(Cyclaniliprole)중“◎잔류물의정의:
Cyclaniliprole과NK-1375의합을cyclaniliprole로함”을“◎잔류물의정의:
Cyclaniliprole”로하고,다음항목을각각신설한다.
가지 0.2
쌀 0.05
[별표4](460)피카뷰트라족스(Picarbutrazox)중다음항목을신설한다.
시금치 15
[별표4](467)플룩사메타마이드(Fluxametamide)중다음항목을각각신설
한다.
강낭콩 0.1
녹두 0.1
다채 7.0
동부 0.1
루꼴라7.0
모과 0.3
무화과 0.2- 166 -블루베리 1.5
석류 0.3
아로니아1.5
완두 0.3
유채 7.0
차 1.0
키위 1.5
팥 0.1
풋콩 2.0
[별표4](468)티아페나실(Tiafenacil)중다음항목을각각신설한다.
생강 0.05
양배추0.05
[별표4](469)플루트리아폴(Flutriafol)중다음항목을신설한다.
키위 3.0
[별표4](470)비사이클로피론(Bicyclopyrone)중다음항목을신설한다.
사탕수수0.02†
[별표4](473)피라지플루미드(Pyraziflumid)중다음항목을각각신설한다.- 167 -감 0.5
포도 3.0
[별표4](499)플루티아셋-메틸(Fluthiacet-methyl)중다음항목을각각
신설한다.
감 0.05
건삼 0.05
대추 0.05
대추(건조)0.05
매실 0.05
무(뿌리)0.05
무(잎)0.05
복숭아0.05
수삼 0.05
옥수수 0.05
유자 0.05
자두 0.05
[별표4](500)피디플루메토펜(Pydiflumetofen)중“양파0.05”를“양파0.2†”
로하고,다음항목을각각신설한다.
감귤류1.0†- 168 -겨자채50†
견과류 0.05†
결구엽채류3.0†
근채류0.3†
복숭아0.7†
블루베리 5.0†
자두 0.6†
체리 2.0†
파 2.0†
풋콩 1.0†
해바라기씨0.5†
[별표4](501)스트렙토마이신(Streptomycin)중다음항목을각각신설한다.
상추 0.5
양상추 0.5
[별표4](502)발리다마이신에이 (ValidamycinA)중“무(잎)0.05”를“무(잎)
0.3”으로하고,“상추5.0”을“상추7.0”으로하며,“양상추5.0”을“양상추
7.0”으로하고,다음항목을각각신설한다.
비트(잎)3.0
참외 0.5- 169 -토마토 0.05
[별표4]중(510)∼(512)를다음과같이신설한다.
(510)옥시테트라사이클린(Oxytetracycline)
◎잔류물의정의:Oxytetracycline
부추 0.5
비트(뿌리)0.05
비트(잎)0.05
참외 0.05
파 0.5
피망 1.0
(511)아사이노나피르(Acynonapyr)
◎잔류물의 정의:Acynonapyr와
AP(3-endo-[2-pro xy-4-(trifluorometh yl)
phenoxy]-9-azabicyclo[3,3,1]nonane) 의합을acynonapyr로함
감 0.7
감귤 1.0
고추 2.0
대추 2.0
대추(건조)5.0- 170 -딸기 3.0
배 1.5
복숭아3.0
사과 1.0
수박 0.3
유자 0.7
참외 0.3
포도 2.0
피망 2.0
(512)아피도피로펜(Afidopyropen)
◎잔류물의정의:Afidopyropen
감귤류0.15†
감자 0.01†
견과류 0.01†
고추 0.07
대두 0.01†
딸기 0.05
멜론 0.05†
면실 0.08†
배 0.05- 171 -배추 0.2
복숭아0.05
사과 0.05
셀러리3.0†
수박 0.05
엇갈이배추0.5
오이 0.7†
자두 0.05
참외 0.05
체리 0.03†
토마토 0.15†
피망 0.07
호박 0.06†
[별표5](56)린코마이신(Lincomycin)중다음항목을각각신설한다.
양근육0.1
양간 0.5
양지방 0.05
양신장 1.0
염소근육0.1
염소간0.5- 172 -염소지방0.05
염소신장1.0
[별표5](82)세파세트릴(Cefacetrile)중다음항목을신설한다.
소근육0.03
[별표5](127)안티피린(Antipyrine)을안티피린(Antipyrine,Phenazone)으
로한다.
[별표5](129)구아이페네신(Guaifenesin)중다음항목을신설한다.
말근육0.01
[별표5](171)요오드퀴놀린설폰산(Iodo hydroxy quinoline sulfonic acid) 
중다음항목을각각신설한다.
말근육0.01
유 0.01
[별표5](172)플루메타손(Flumethasone)중다음항목을신설한다.
유 0.001
[별표5](173)클라노부틴(Clanobutin)중다음항목을신설한다.- 173 -유 0.01
[별표6](2)글리포세이트(Glyphosate)중“◎잔류물의정의:
Glyphosate"를“◎잔류물의정의:Glyphosate와N-acetylglyphosate의
합을Glyphosate로함”으로하고,“우유”를“유”로하며,“소고기0.1”,
“돼지고기0.1”및“소부산물2.0”을삭제하고다음항목을각각신설한
다.
가금류부산물 0.5
포유류고기 0.1
포유류부산물(돼지부산물제외)5.0
부칙
제1조(시행일)①이고시는고시한날부터시행한다.
②제1항에도불구하고다음각호의구분에따른개정사항은다음각목
에서정한날부터시행한다.
1.시행일:고시후2개월이경과한날
가.별표5및별표6
2.시행일:2022년1월1일
가.제2.4.31)및32)
나.제5.22.22-2- 174 -제2조(적용례)①이고시는이고시시행이후최초로제조·가공또는수
입한식품(선적일기준)부터적용한다.
②제1항에도불구하고이고시시행전제1조제2항제2호각목의개정규
정에대하여이고시를적용받고자하는자는「식품위생법」,「축산
물위생관리법」또는「수입식품안전관리특별법 」에따라이고시의
개정된식품유형으로품목제조보고또는변경하거나수입신고하는경
우개정규정을미리적용받을수있다.
제3조(경과조치)이고시는이고시시행당시제조․가공․판매또는수
입되어검사가진행중인사항에대하여는종전의규정에따른다.- 175 -신․구조문대비표
현행 개정(안)
제1.(생략)
제2.식품일반에대한공통기준및
규격
1.식품원료기준
1)원료등의구비요건
(1)∼(23)(생략)
<신설>
2)(생략)
2.(생략)
3.식품일반의기준및규격
1)∼10)(생략)
11)테트라하이드로칸나비놀 (δ-9-Tetra
hydrocannabinol)기준
(1)대마씨앗∶5mg/kg이하
(2)대마씨유∶10mg/kg이하
12)∼17)(생략)제1.(현행과같음)
제2.식품일반에대한공통기준및
규격
1.식품원료기준
1)원료등의구비요건
(1)∼(23)(현행과같음)
(24)식품원료중씨앗을사용할
수없도록정하고있는열매
는섭취시씨앗이제거되는
경우씨앗을포함한열매를
식품의제조·가공에사용할
수있다.
2)(현행과같음)
2.(현행과같음)
3.식품일반의기준및규격
1)∼10)(현행과같음)
11)테트라하이드로칸나비놀 (δ-9-Tetra
hydrocannabinol,THC)및칸나
비디올(Cannabidiol,CBD)기준
(1)삼(대마)씨앗∶THC5mg/kg
이하,CBD10mg/kg이하
(2)삼(대마)씨유∶THC10mg/kg
이하,CBD20mg/kg이하
12)∼17)(현행과같음)- 176 -현행 개정(안)
4.보존및유통기준
1)∼30)(생략)
<신설>
<신설>4.보존및유통기준
1)∼30)(현행과같음)
31)식육,기타식육또는수산물을
구성재료로포함하는간편조리
세트(특수의료용도식품 중간
편조리세트형제품포함)는냉
장또는냉동으로보존및유
통하여야한다.
32)식품제조·가공업영업자가냉
동식육또는냉동수산물을단
순해동또는해동후절단하여
간편조리세트(특수의료용도식
품중간편조리세트형제품포
함)의재료로구성하는경우로
서냉동식육또는냉동수산물
을해동하여사용하였음을표
시한경우에는해동된냉동식
육또는냉동수산물을재냉동
하지않고냉장으로보존및
유통할수있다.단,식육함량
이구성재료함량의60%미만
인제품에한한다.
제3.∼제4.(생략)제3.∼제4.(현행과같음)
제5.식품별기준및규격
1.∼21.(생략)제5.식품별기준및규격
1.∼21.(현행과같음)- 177 -현행 개정(안)
22.즉석식품류
(생략)
22-1(생략)
22-2즉석섭취·편의식품류
1)정의
즉석섭취
편의식품류라함은소비
자가별도의조리과정없이그대
로또는단순조리과정을거쳐섭
취할수있도록제조
가공
포장
한즉석섭취식품,신선편의식품,
즉석조리식품을말한다.다만,따
로기준및규격이정하여져있
는것은제외한다.
2)(생략)
3)제조·가공기준
<신설>22.즉석식품류
(현행과같음)
22-1(현행과같음)
22-2즉석섭취·편의식품류
1)정의
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
--------------------------
즉석조리식품,간편조리세트를--
-------------------------
--------------.
2)(현행과같음)
3)제조·가공기준
(1)간편조리세트제품은아래의기
준을준수하여야한다
①구성재료중가열또는세척하
지않고그대로섭취하는과일
류또는채소류는충분히세척
한다음식품첨가물로허용된
살균제로살균하고깨끗한물
로충분히세척하여야한다.
②식용란과가금육및가열조리
없이섭취하는농·축·수산물은- 178 -현행 개정(안)
4)식품유형
(1)즉석섭취식품
동
식물성원료를식품이나식
품첨가물을가하여제조
가공한
것으로서더이상의가열,조리
과정없이그대로섭취할수
있는도시락,김밥,햄버거,선식
등의식품을말한다.
(2)신선편의식품
(생략)
(3)즉석조리식품다른재료와직접접촉하지않
도록각각구분포장하여야하
고,그외재료의경우에도비
가열섭취재료와가열후섭취
재료는서로섞이지않도록구
분하여포장하여야한다.
③식용란을포함하는경우물세
척된식용란을사용하여야한
다.
④다른제조업자가포장을완료
한식품을포장된상태그대로
구성재료로사용하는경우기
준및규격에적합한것을사용
하여야한다.
4)식품유형
(2)즉석섭취식품
-------------------------
-------------------------
-------------------------
---그대로또는단순혼합하여
------------------- 선식,
비빔밥---------------.
(1)신선편의식품
(현행과같음)
(3)즉석조리식품- 179 -현행 개정(안)
동
식물성원료를식품이나식품
첨가물을가하여제조
가공한것
으로서단순가열등의조리과정
을거치거나이와동등한방법을
거쳐섭취할수있는국,탕,수
프,순대등의식품을말한다.
<신설>
5)규격
(1)세균수∶n=5,c=0,m=0(멸균
제품에한한다)
(2)대장균군∶n=5,c=1,m=0,
M=10(즉석조리식품중살균
제품에한한다)
(3)대장균∶n=5,c=1,m=0,
M=10(즉석섭취식품,즉석조
리식품에한하며,즉석조리
식품의살균제품은제외한동
식물성원료에식품이나식품
첨가물을가하여제조
가공한것
으로서단순가열등의가열조리
과정을거치면섭취할수있도록
제조된국,탕,수프,순대등의
식품을말한다.다만,간편조리세
트에속하는것은제외한다.
(4)간편조리세트
조리되지않은손질된농
축
수
산물과가공식품등조리에필요
한정량의식재료와양념및조
리법으로구성되어,제공되는조
리법에따라소비자가가정에서
간편하게조리하여섭취할수있
도록제조한제품을말한다.
5)규격
유형
항목신선편의
식품즉석섭취
식품즉석조리
식품간편조리세트*1
(1)
세균수n=5,c=0,m=0(멸균제품에한한다)-
(2)
대장균군--n=5,c=1,
m=0,
M=10
(살균
제품에
한한다)-
(3)
대장균n=5,c=1,
m=10,
M=100n=5,c=1,
m=0,
M=10n=5,c=1,
m=0,
M=10
(살균
제품은
제외한다)n=5,c=1,m=0,
M=10
(가열조리하여
섭취하는
농
축
수산물
재료는제외*2)
(4)
황색포도
상구균1g당100이하1g당100이하
(가열조리하여
섭취하는
농
축
수산물
재료는제외*2)- 180 -현행 개정(안)
다)
n=5,c=1,m=10,M=100(신
선편의식품에한한다)
(4)황색포도상구균∶1g당100
이하
(5)살모넬라:n=5,c=0,m=0/25g
(6)장염비브리오∶1g당100이
하(즉석섭취식품,신선편의식
품중살균또는멸균처리되
지않은해산물함유제품에
한한다.)
(7)바실루스세레우스∶1g당
1,000이하(즉석섭취식품,신
선편의식품에한한다)
(8)장출혈성대장균∶n=5,c=0,
m=0/25g(신선편의식품에한
한다)
(9)클로스트리디움퍼프린젠스∶
1g당100이하(즉석섭취식
품,신선편의식품에한한다).
6)(생략)
22-3(생략)
23.(생략)
*주1.간편조리세트의 규격은모든
구성재료를혼합하여적용
*주2.간편조리세트구성재료중다
른재료와직접접촉하지않도록
구분포장된농·축·수산물에한함
6)(현행과같음)
22-3(현행과같음)
23.(현행과같음)(5)
살모넬라n=5,c=0,m=0/25gn=5,c=0,
m=0/25g
(가열조리하여
섭취하는
농
축
수산물
재료는제외*2)
(6)
장염
비브리오1g당100이하
(살균또는멸균처리
되지않은해산물함유
제품에한한다.)-1g당100이하
(가열조리하지
않고섭취하는
해산물재료에
한함)
(7)
장출혈성
대장균n=5,c=0,
m=0
/25g--n=5,c=0,m=0/25
g(가열조리하지
않고섭취하는
해산물재료에
한함.다만,살균
또는멸균처리된
해산물재료는
제외)
(8)
바실루스
세레우스1g당1,000이하--
(9)
클로스트
리디움
퍼프린젠
스1g당100이하--
제6.∼제7.(생략)제6.∼제7.(현행과같음)
제8.일반시험법 제8.일반시험법- 181 -현행 개정(안)
1.식품일반시험법
1.1(생략)
1.2이물
1.2.1(생략)
1.2.2식품별이물
가.시험법적용범위
아래의개별시험법에예시된식품
에적용한다.
나.분석원리
식품의특성에따라검체를전처
리한후1.2.1일반이물을활용하
여검사한다.
다.시험조작
가)식빵,라면,국수,두부,건과,
유과,건빵,도나스,전분및
이유식
검체50~100g을잘게하여1L의
와일드만플라스크(Wildemanflask)
에넣고석유에테르를검체가담
겨질정도로부어때때로흔들어
섞으면서1시간방치한후부흐
너깔때기로흡인여과해서가능
한한석유에테르를제거하고깔
때기위의검체를물로와일드만
플라스크(Wildemanflask)에씻1.식품일반시험법
1.1(현행과같음)
1.2이물
1.2.1(현행과같음)
1.2.2식품별이물
가.시험법적용범위
아래의개별시험법[가)∼호)]에제
시된식품에적용한다.
나.분석원리
식품의특성에따라시험조작한
후1.2.1일반이물에따라시험한
다.
다.시험조작
가)라면,국수,두부,유과,건빵,
도넛,전분및이유식
검체50~100g을잘게잘라1L의
와일드만플라스크(Wildemanflask)
에넣고석유에테르를검체가잠
길정도로가한다.1시간동안10
분간격으로약1분씩흔들어준
후플라스크를기울여상층의석
유에테르를제거한다.(이때검체
가따라나와석유에테르만제거
하기어려울경우,부흐너깔때기- 182 -현행 개정(안)
어넣고물을가하여전량을500
mL로하고수욕상에서가열한
다.
이때때때로흔들면서검체덩
어리를더욱잘게하면서남아
있는석유에테르를제거한후식
히면염산을1%가될정도로가
하여약1시간끓여소화시킨다.
이때될수있는대로검체를
더잘게한후위의1.2.1일반
이물시험다.및라.에따라시험
한다.
나)간장,식초,소스,청량음료수,
유산균음료,주류,우유,살균(Buchnerfunnel)또는힐슈깔때
기(Hirschfunnel)에검체가따라
오지않게주의하며플라스크를
기울여상층의석유에테르를제
거한다.여과지상의검체는세
척병의증류수로세척한후와일
드만플라스크로옮겨합친다.)
와일드만플라스크에증류수500
mL를가하고인화되지않게주
의하며끓는물에서중탕하는동
안,10분마다와일드만플라스크
를흔들어검체를잘게부수어주
고남아있는석유에테르를완전
히휘발시킨다.중탕이끝난뒤
와일드만플라스크를실온에서
방냉한다.와일드만플라스크에
염산농도가약1%가될때까지
염산을가하고끓는물에서1시
간동안10분간격으로흔들어주
며중탕하여소화시킨다.1.2.1
일반이물시험다.및라.에따라
시험한다.
나)간장,식초,소스,청량음료수,
유산균음료,주류,유가공품- 183 -현행 개정(안)
산양유,탈지유,가공유,발효
유및유음료
(1)검병법
검체가투명한것은광원(태양
광선또는전등)을향하여백색
또는흑색지를배경으로하여
병을조용히거꾸로하여투시
한다.이물이있으면상등액을
이물이흘러나가지않게기울여
버리고잔사(residue)를잘섞어
서흡인여과하거나원심침전하
여여과지상의잔류물또는원
심침전한경우는병밑의침전물
을모세관피펫으로빨아올려
이물의종류를확인한다.또한
투명한것일지라도색이진한
것이나점조성으로인하여위의
방법으로침전물의검사가되지
않는것은다음의(2)희석법에
따른다.
(2)희석법
침전물이있는것및혼탁된것
은검체를대형비이커에옮기고(우유,산양유,발효유),탈지
유,가공유및유음료
(1)검병법
검체가투명한것은광원(태양
광선또는전등)을향해백색
또는흑색종이를배경으로병
을천천히거꾸로뒤집으며검
사한다.이물이있으면이물이
흘러나가지않도록주의하며상
등액을기울여버린다.부흐너
깔때기또는힐슈깔때기를이용
하여흡인여과할경우침전물
을잘섞은후흡인여과하여
여과지상의이물종류를확인
하고,원심침전할경우모세관
피펫으로침전물을빨아올려이
물의종류를확인한다.다만,검
체가투명하더라도색이진하거
나점성이있어위의방법으로
침전물검사가어려울경우에는
다음의(2)희석법에따라시험
한다.
(2)희석법
침전물이있거나혼탁한것은
검체를대형비커에옮기고증- 184 -현행 개정(안)
물을가하여적당히희석하고
조용히저으면서광원을향해
이물의유무를검사한다.
이물이있을때는다음(3)분
리법의(가)또는(나)의방법에
의하여분리한다.
(3)분리법
(가)클로로포름에의한분리(주
로광물성이물)
병속에검체전부를원심침전
하여상등액을기울여버리고
침전을비이커에옮겨건조하
고클로로포름을가하여잘섞
는다.다음에30분간때때로
침전을유리봉으로조용히저
어정치한후상층및클로로
포름층을기울여버리고비이
커에남은이물을다시클로로
포름으로수회씻고클로로포
름으로부흐너깔때기혹은힐
슈깔때기로흡인여과하여여
과지상의이물을검사한다.류수로희석한다.유리막대등
으로저으면서광원을향해백
색또는흑색종이를배경으로
이물의유무를검사한다.이물
이있을경우이물종류(광물성,
동·식물성)에따라아래의(가)
또는(나)의방법에따라이물
을분리한다.
<삭제>
(가)클로로포름에의한분리(주
로광물성이물에적용)
비커에있는검체전부를원심
침전한후상등액을기울여제
거한다.침전물을다른비커에
옮겨건조하고침전물이잠길
정도로클로로포름을가하고
섞어준다.유리막대등을이용
하여5분간격으로조심히젓
고,30분후상층및클로로포
름층을기울여제거한다.비
커에남은침전물을다시클로
로포름으로수회세척하고,부
흐너깔때기혹은힐슈깔때기로
흡인여과하여여과지상의이
물을검사한다.- 185 -현행 개정(안)
(나)염산분해에의한분리(주로
동․식물성이물)
검체전부를원심침전하고상
등액을기울여버리고침전을
삼각플라스크에옮겨1%염산
용액약200～300mL를가하
여약1시간끓인다.식힌후
부흐너깔때기혹은힐슈깔때기
로흡인여과하여여과지상의
이물을검사한다.
다)된장,고추장,춘장,케첩,
쨈,커피,차,고추가루,후
추가루및카레
검체50g을500mL의비커에
넣고물300mL를가하여잘
저어균일하게한다음염산
12mL를가하고약5분간조
용히끓인후식히고위의
1.2.1일반이물시험다.에따
라시험하고침전물이있을때
는수분을제거한후1.2.1일
반이물시험라.에따라시험
한다.(나)염산분해에의한분리(주로
동·식물성이물에적용)
비커에있는검체전부를원심
침전하고상등액을기울여제
거한다.침전물을삼각플라스
크에옮겨약200∼300mL의
1%염산용액을가하고끓는
물에서1시간동안중탕한다.
삼각플라스크를실온에서방냉
한후부흐너깔때기혹은힐슈
깔때기로흡인여과하여여과지
상의이물을검사한다.
다)장류(된장,고추장,춘장),
케첩,잼류,커피,차,고춧
가루,후춧가루및카레
검체50g을1L비커에넣고
증류수300mL를가하여유리
막대등으로균질화한다.염
산12mL를가하고끓는물에
서약5분간중탕한후방냉한
다.1.2.1일반이물시험다.에
따라시험하고침전물이있을
경우에는건조등을통해수분
을제거한후1.2.1일반이물
시험라.에따라시험한다.(단,- 186 -현행 개정(안)
라)설탕,포도당,물엿,벌꿀,
분말청량음료,인스탄트커
피및인삼차
검체50g을취하여물200
mL에녹여위의1.2.1일반이
물시험나.에따라시험한다(다
만,벌꿀에있어서는꽃가루,
벌집및꿀벌에서유래되는이
물을제외한다).
마)버터,마아가린,쇼트닝,참
기름,채종유,미강유,대두토마토제품의경우검체를비
커에넣고5%제3인산나트륨
(Na3PO4)용액또는10%염
산용액을이용하여pH를4.5
∼5.0으로조정하고,셀룰라아
제용액과펙티나아제용액을
각각50mL씩가하여45℃에
서2시간소화시키는절차를
선행한후시험을진행한다.)
라)당류(설탕류,포도당,엿류),
벌꿀,분말청량음료,인스턴
트커피및인삼차
검체50g을500mL비커에
넣고열탕200mL를가한다.
검체를완전히녹이고1.2.1일
반이물시험나.에따라시험
한다.여과가잘되지않을경
우,열탕을따로준비하여여
과지위에부어검체를완전히
녹인후여과지에부착된이물
을검사한다(벌꿀의경우꽃가
루,벌집및꿀벌에서유래되
는이물은제외한다).
마)버터,식용유지가공품(마가
린,쇼트닝),식용유지류(참- 187 -현행 개정(안)
유및크림
검체100g을1L의비이커에
넣고2%염산용액200mL를
가하여섞은후가열하여검체
가완전히녹으면여과지로여
과한다.따로열탕을준비하여
여과지에지방이응고되어잘
여과되지아니할때,이열탕
으로완전히녹여여과한후
여과지에부착된이물을검사
한다.
바)아이스크림분말,무당연유,
가당연유,가당탈지연유,
전지분유,탈지분유,가당
분유및조제유류(분말),
조제식
검체100g을1L의비커에
넣고2%EDTA(ethylene
diaminetetraaceticacid)용액
100mL를가하여잘섞어서
덩어리가없도록한후저으면
서2%EDTA(ethylene기름,채종유,미강유,대두
유)및크림
검체100g을1L비커에넣
고2%염산(HCl)용액200mL
를가하여섞은후끓는물에
서중탕하여검체를완전히녹
이고부흐너깔때기혹은힐슈
깔때기로흡인여과한다.여과
지에지방이응고되어잘여과
되지않으면열탕을따로준비
하여여과지위에조심히가하
면서지방을완전히녹이고여
과지에부착된이물을검사한
다.
바)아이스크림분말,무당연유,
농축유류(가당연유,가당탈
지연유),분유류(전지분유,
탈지분유,가당분유)및조
제유류(분말),조제식
검체100g을1L비커에넣
고2%EDTA-4Na(Ethylene
diaminetetraaceticacid,
tetrasodiumsalt)용액100mL
를가하고유리막대등으로균
질화한다.2%EDTA-4Na용- 188 -현행 개정(안)
diaminetetraaceticacid)용액
400mL를천천히가한다.
저어섞는동안에차차황색의
반투명한액체가되며약30분
방치하면완전히녹는다.이를
부흐너깔때기또는힐슈깔때기
로흡인여과하여여과지상의
이물을검사한다.
사)식육제품,어육제품
검체50g을사방약7mm의
크기로잘라서와일드만플라스
크(Wildemanflask)에넣고
1%염산용액300mL를가하
여끓인다음수산화나트름용
액으로pH6으로하고다시
제3인산나트륨용액으로pH를
7～8로하여온도를40℃로한
후판크레아틴용액50mL를
가하여충분히섞어40℃에서액400mL를천천히가하여
유리막대등으로젓고약30분
간방치한다.이를부흐너깔때
기또는힐슈깔때기로흡인여
과하여여과지상의이물을검
사한다.단,전분이함유되어
있어여과가곤란한경우,검
체를증류수400mL에녹이고
판크레아틴(Pancreatin)용액20
mL를가하여유리막대등으로
균질화한다음항온기등을이
용하여40℃에서3시간동안
소화시키는과정을선행한후
시험한다.
사)식육가공품,어육가공품류
검체50g을가로,세로각각
약7mm의크기로잘라와일
드만플라스크에넣고1%염산
용액300mL를가하고끓는
물에서1시간동안중탕한다.
수산화나트륨용액,제3인산나
트륨(Na3PO4)용액을이용하여
pH를7∼8로조정한후항온
기등을이용하여온도를40℃
로유지한다.판크레아틴- 189 -현행 개정(안)
30분간방치한다.
다음에pH를7～8로조정하고
하룻밤40℃항온기에넣어소
화시킨다.
소화후일단끓이고식혀서
휘발유25mL를가하여위의
1.2.1일반이물시험다.에따
라시험하고침전물이있을때
는수분을제거한후1.2.1일
반이물시험라.에따라시험
한다.
판크레아틴용액∶판크레아틴5
g에물50mL를가하여5～15
분간저어섞은후가볍게물
로적신탈지면으로여과하여
여액을쓴다.사용직전에만
든다.
아)마요네즈
검체100g을1L의비커에
넣고인산50mL를넣어잘
섞고물300mL를가하여다
시잘섞어서이를부흐너깔때
기혹은힐슈깔때기로흡인여
과하여여과지에부착된이물
을검사한다.(Pancreatin)용액50mL를가
하고유리막대등으로충분히
저은후항온기등을이용하여
40℃에서30분간방치한다.제
3인산나트륨(Na3PO4)용액을
이용하여pH를7∼8로보정하
고항온기등을이용하여40℃
에서하룻밤동안소화시킨다.
끓는물에서1시간동안중탕
후실온까지방냉하고,미네랄
오일(Mineraloil)25mL를가
하여1.2.1일반이물시험다.
에따라시험한다.침전물이
있을경우건조등을통해수
분을제거한후1.2.1일반이
물시험라.에따라시험한다.
아)소스류(마요네즈)
검체100g을1L비커에넣
고인산(Phosphoricacid)50
mL를넣은후유리막대등으
로잘저어준다.비커에증류
수300mL를가하고유리막대
등으로균질화하고이를부흐
너깔때기혹은힐슈깔때기로- 190 -현행 개정(안)
자)아이스크림류
녹였을때투명한액체일때는
청량음료수에따르고아이스크
림의경우에는검체50g에물
을가하여100mL로하고이
에4%EDTA(ethylene
diaminetetraaceticacid)용액
을가하여이하아이스크림분
말시험법에따른다.팥등식
물을가하여만든빙과는된장
에따라시험한다.
차)캐러멜및알사탕류
검체100g을(필요하면분쇄한
다)500mL의비커에넣고
250mL의열탕을가하여약
80℃의수욕중에서30분간저
어녹여150메쉬(mesh)체로
여과하고약50℃의온탕으로
잘씻은후잔류물에대하여
이물을검사한다.흡인여과하여여과지에부착
된이물을검사한다.
자)아이스크림류
검체를녹였을때투명한액체
가되면나)간장시험법에따
르고,팥등고형물을가하여
만든빙과는다)된장시험법
에따라시험한다.그이외의
경우에는검체50g을1L비
커에넣고증류수를가하여
100mL로한다.4%
EDTA-4Na(Ethylenediamine
tetraaceticacidtetrasodium
salt)용액을가한후바)아이
스크림분말시험법에따라시
험한다.
차)캔디류(캐러멜,사탕)
검체100g을500mL비커에
넣고250mL의열탕을가한
다.80℃물에서중탕하면서
유리막대등으로저으면서완
전히녹이고표준망체(106 μm
×106μm)로여과한다.약5
0℃의온탕을준비하여체에
부어잔류물을잘세척한후- 191 -현행 개정(안)
카)껌
검체100g을150～600mL의
물또는300～600mL의2%
염산중에가하여10～12분간
(껌베이스가분리할때까지)
끓이고즉시가열을그친다.
혼합액을55℃이하로식히고
삼각플라스크에옮겨초산에
틸150mL를가하고환류냉각
관를달아혼액이고르게될
때까지끓인다.따뜻할때110
메쉬(mesh)체로여과하여에
틸아세테이트로씻고여과지에
옮겨이물을검사한다.
타)초콜릿류
검체50g을1L의비커에넣
고5～10%붕산용액500mL
를가하여15분간끓인다.이
를140메쉬(mesh)체로여과하
고온탕을강하게부어충분히
씻고에탄올및클로로포름으이물을검사한다.
카)추잉껌
검체100g을환류플라스크에
넣고300∼600mL의중류수
또는150∼600mL의2%염산
을가하여끓는물에서10∼12
분간(껌베이스가분리할때까
지)중탕한다.환류플라스크를
55℃이하가될때까지방냉하
고에틸아세테이트150mL를
가한다.환류플라스크에환류
냉각관을연결한후혼합액이
균질화될때까지가열하고,
따뜻할때표준망체(106μm×
106μm)로여과한후에틸아
세테이트로씻는다.체를통과
하지않은잔류물을여과지에
옮겨이물을검사한다.
타)초콜릿류
검체50g을1L비커에넣고
5∼10%붕산(Boricacid)용액
500mL를가한후끓는물에서
15분간중탕한다.이를표준망
체(106μm×106μm)로여과
하고온탕을부어충분히세척- 192 -현행 개정(안)
로2회교대로씻고최후에에
탄올로씻은후여과지에옮겨
이물을검사한다.
파)빵류및생과자류
검체의크림부분50g에2%
염산용액200mL를가하여끓
이고저어섞어곧흡인여과한
다.여과하기어려울때는에
탄올약100mL를가하여여
과하고여과지는2%뜨거운
염산용액으로씻은다음이물
을검사한다.
또생지(즉카스테라및빵부
분)부분은별도로60g을취
하여(빵은100g)1L의와일
드만플라스크(Wildemanflask)
에넣어석유에테르를침윤될
정도로가하고때때로흔들어
주면서1～2시간방치한다.
다음에부흐너깔때기로흡인하
여가급적석유에테르를제거
하고(이때빵의조직물은가
급적여과지상에따라오지않한다.에탄올,클로로포름의순
서대로2회반복하여세척하고
다시에탄올로세척한후체를
통과하지않은잔류물을여과
지에옮겨이물을검사한다.
파)빵류및생과자류
검체중크림부분50g을취
하여2%염산용액200mL를
가하여끓인후유리막대로충
분히젓고흡인여과한다.여
과하기어려울경우에탄올약
100mL를가하여여과하고여
과지는뜨거운2%염산용액으
로씻은다음이물을검사한
다.
검체중생지(카스테라및빵
부분)부분은별도로60g(빵
은100g)을취한후가)라면
시험법에따라시험한다.- 193 -현행 개정(안)
게한다)여과지상에남아있
는소량의조직물을물로먼저
의와일드만플라스크(Wildeman
flask)에씻어넣어600mL로
하고수욕상에서인화되지않
게주의하면서가열한다.이
때가끔저어주면서덩어리를
부셔주면서석유에테르를완전
히날려보내고식힌후염산
을1%정도가되도록넣어약
1시간끓이면서가끔부수어
주며소화시킨다.
식힌후에휘발유25mL를넣
어위의1.2.1일반이물시험
중의다.에따라시험한다.
무거운이물은조작후의상등
액을기울여버리고60%알코
올로잔류물을비커에옮겨수
분을제거하고클로로포름을
가하여위의1.2.1일반이물
중의라.에따라시험한다.
하)통조림
검체약350g을깨끗한용기
에옮겨관내면을물로잘씻
고다시물로내용물이부서지하)통조림
검체약350g을깨끗한비커
에옮기고통조림내부를증류
수로잘세척한후세척액을- 194 -현행 개정(안)
지않게주의해서충분히씻어
이씻은액을부흐너깔때기혹
은힐슈깔때기로흡인여과하여
여과지상의이물을검사한다.
만일작은조직이많을때는
씻은액을와일드만플라스크
(Wildemanflask)에옮겨휘발
유를가하여위의1.2.1일반
이물중의다.에따라시험하
고무거운이물이있을때는
1.2.1일반이물중의라.에따
라시험한다.
허)영아용조제유,성장기용조
제유(탄화물)
(1)분석원리
조제유류를2%EDTA용액
에녹인후MilkSediment
Disk를통과시켜서Disk상에
남아있는이물이나탄화물의
존재여부를관찰한다.
(2)장치비커에합친다.세척병등을
이용하여증류수로검체가부
서지지않게주의하면서검체
외부를충분히세척한후검체
를부서지지않게주의하며비
커에서제거한다.세척액을부
흐너깔때기혹은힐슈깔때기로
흡인여과하여여과지상의이
물을검사한다.작은조직이
많을때는세척액을와일드만
플라스크에옮기고미네랄오
일(Mineraloil)을가하여위의
1.2.1일반이물시험다.에따
라시험한다.무거운이물이
있을때는1.2.1일반이물시험
라.에따라시험한다.
허)조제유류(영아용조제유,성
장기용조제유)중탄화물
검체100g을1L비커에넣
고2%EDTA-4Na(Ethylene
diaminetetraaceticacid
tetrasodiumsalt)용액100
mL를가하고덩어리가없도록
유리막대등으로부수면서균
질화한다.비커에2%- 195 -현행 개정(안)
(가)MilkSedimentDisk:33
mm
(나)Filterationapparatus
(다)브후나깔때기또는힐슈
깔때기
(라)진공펌프
(3)시약및시액
2%EDTA(Ethylene-diamine
-tetraaceticacid)solution:
EDTA20g을증류수980
mL에넣고40℃항온수조에
넣어잘용해시킨후사용한다.
(4)시험방법
검사시료100g을1L의비
이커에넣고2%EDTA용액
100mL를가하여잘섞어서
덩어리가없도록한후저으
면서2%EDTA용액400mL
를천천히가한다.
저어섞는동안에차차황색
의반투명한액체가되며약
30분간방치하면완전히녹는
다.
브후나깔때기또는힐슈깔
때기에MilkSedimentDiskEDTA-4Na용액400mL를천
천히가하면서유리막대등으
로젓고약30분간방치한다.
이를여과필터(MilkSediment
Disk,직경:33mm)를이용하
여흡인여과하고,비커에남
아있는잔류물은증류수로세
척하여같은여과필터에흡인
여과한다.여과필터에남아있
는탄화물을판정표와비교하
여육안으로판정한다.단,전
분이함유되어있어여과가곤
란한경우,검체를증류수400
mL에녹이고판크레아틴
(Pancreatin)용액20mL를가
하여유리막대등으로균질화
한다음항온기등을이용하여
40℃에서3시간동안소화시키
는과정을선행한후시험한
다.- 196 -현행 개정(안)
를갈고시료용액을흡인여
과하고,비이커에남아있는
잔류물을증류수로씻어내어
흡인여과한다.
MilkSedimentDisk상에남
아있는탄화물을판정표와비
교하여육안으로판정한다.
[탄화물표준판정표]
<신설>
[탄화물표준판정표]
호)치즈류
검체100g을가로,세로각각
약10mm의크기로잘라비
커에넣고열탕300mL를가
한후끓는물에서30분동안
유리막대등을이용하여균질
화하면서중탕한다.비커에염
산12mL를가하고끓는물에
서검체가녹을때까지중탕한
후,뜨거운상태에서검체를
와일드만플라스크로옮긴다.
비커를열탕,60%에탄올의순
서대로세척하고세척액을위
의와일드만플라스크에합치- 197 -현행 개정(안)
1.3∼1.4(생략)고실온까지방냉한후1.2.1
일반이물시험다.및라.에따
라시험한다.
1.3∼1.4(현행과같음)
<신설>
1.5(생략)
<신설>1.5물성시험법
1.5.1(현행1.5와같음)
1.5.2고령친화식품물성시험
고령친화식품중고령자가섭취하
기편리하도록경도나점도를조정
하여제조된제품에적용한다.
1.5.2.1경도시험법
제1법에따라시험하는것을원칙
으로한다.다만,죽등유동성식
품,밥등형태를특정할수없는
식품,면류등제1법으로측정이
불가한제품은제2법에따라시험
한다.
가.제1법
1)시험법적용범위
고령친화식품으로서 고령자가씹
기편하도록경도를조정하여제
조된고체식품에적용한다(단,
제2법적용대상은제외).
2)분석원리
막대기형태의프로브를사용하- 198 -현행 개정(안)
여일정한속도로검체를뚫어
관통할때의힘값(N)을프로브의
밑면적(m2)으로나눈응력(N/m2)
의최대값을측정한다.
3)장치
물성측정기(Textureanalyzer),
물성측정용프로브(원형,밑면의
직경5mm)및물성측정용아크
릴바닥판(두께10mm,정중앙
직경10mm구멍)
*물성측정용바닥판(바닥판의
가로,세로크기는사용장비에
맞게조절가능)
4)시험조작
가)검체채취
검체는너비20mm이상의크
기로하여측정하되가능한절
단등의전처리를하지않고그
대로사용한다.특정한형태로
절단하여섭취하도록명시된
경우제품의표시사항에따라- 199 -현행 개정(안)
절단한것을시료로한다.이때,
여러종류의고형물을포함하거
나시료의부위별로경도가다
른경우가장단단한부위를측
정하며,단순조리과정을거쳐
섭취하는제품의경우제품표
시사항의조리방법에따라조리
한것을시료로사용한다.
나)실험
프로브가바닥판구멍의중앙에
위치하도록바닥판을고정한다.
시료를올려놓은후표1과같
은조건에서프로브가시료를
완전히뚫고지나가는동안측
정되는응력중최대값을측정
한다.
표1.5mm프로브사용시물성
측정기사용조건
항목 제1법
프로브 (Prob
e) 형태◦ 원형(밑면의 직경 5 mm)
천공바닥판◦ 두께 10 mm
◦ 정중앙 직경 10 mm 구멍 
테스트 속도 ◦ 100 mm/min
측정온도 ◦ 20 ± 2℃
측정깊이 ◦ 완전히 관통- 200 -현행 개정(안)
5)판정
가)프로브(probe)로시료를관통
할때측정되는힘값(N)중
최대값을측정값으로한다.
나)측정값을프로브의밑넓이로
나눈응력(N/m2)을결과값
으로한다.
*직경이5mm인프로브의밑
넓이:19.6mm2
*응력측정값×
다)제품1품목당5개의검체를
준비하여반복실험을진행
하고최대,최소값을제외한
3회평균값을경도(N/m2)로
한다.
나.제2법
1)시험법적용범위
고령친화식품으로서 고령자가씹
기편하도록경도를조정하여제
조된제품중죽등유동성식품,
- 201 -현행 개정(안)
밥등형태를특정할수없는식
품또는면류등제1법으로측정
이불가한제품에적용한다.
2)분석원리
막대기형태의프로브를사용하
여일정한속도로검체를압착할
때의힘값(N)을프로브의밑면적
(m2)으로나눈응력(N/m2)의최
대값을측정한다.
3)장치
물성측정기(Textureanalyzer),
물성측정용프로브(원형,밑면의
직경20mm)및시료용기(직경
40mm,높이20mm)
*물성측정용기
4)시험조작
가)검체채취
시료를시료용기에15mm높
이로충진한다.다만,측정용기
에담으면물성이변화하는것,
측정용기로옮겨담을수없는
- 202 -현행 개정(안)
것등은측정에지장이없음을
확인하여클리어런스(최대압착
시용기바닥과프로브사이의
거리)를시료두께의30%로하
여직접측정할수있다.이때,
여러종류의고형물을포함하는
제품은가장단단한고형물을,
물등과혼합하거나가열하는
등단순조리과정을거쳐섭취하
는제품의경우제품표시사항
의조리방법에따라조리한것
을시료로사용한다.
나)실험
시료를담은용기가프로브의
중앙에위치하도록한다음표2
와같은조건에서제품을압착
할때측정되는응력중최대값
을측정한다.
표2.20mm프로브사용시물
성측정기사용조건
항목 제2법 
프로브 (Pro
be) 형태◦ 원형(밑면의 직경 20 mm)
시료용기◦ 직경(내경) 40 mm
◦ 높이 20 mm
테스트 
속도◦ 600 mm/min
측정온도 ◦ 20 ± 2℃- 203 -현행 개정(안)
5)판정
가)프로브(probe)로압착시측정
되는힘값(N)중최대값을
측정값으로한다.
나)측정값을프로브의밑넓이로
나눈응력(N/m2)을결과값
으로한다.
*직경이20mm프로브의밑
넓이:314mm2
*응력측정값×
다)제품1품목당5개의검체를
준비하여반복실험을진행
하고최대,최소값을제외한
3회평균값을경도(N/m2)로
한다.
1.5.2.2점도시험법
가.시험법적용범위
고령친화식품중경도20,000측정깊이◦ 바닥에서 5 mm 까지(또는 
직접 측정하는 경우 클리어런스 
30%)- 204 -현행 개정(안)
N/m2미만의액상제품에적용한다.
나.분석원리
회전형점도계의스핀들을일정한
속도로회전시킬때의점도를측
정한다.
다.장치:회전형점도계
(Viscometer)
표1.점도계사용조건
라.시험조작
가)검체채취
유리비커(600mL,직경90mm)
에시료약500mL을채운다.
나)실험
시료용액의중앙에스핀들을위
치시키고스핀들의표시지점까
지잠기게한다.이때스핀들하
단에기포가발생하지않도록주항목 시험조건
장비◦ 회전형 점도계 (LV형 또는 이와 
동등이상의 점도계 )
스핀들 ◦ 점도 측정용 스핀들
용기◦ 유리비커 (직경 90 mm, 부피 600 
mL)
◦ 시료량 500 mL
측정온
도◦ 20 ± 2℃
테스트 
속도◦ 12 rpm- 205 -현행 개정(안)
1.6∼1.7(생략)의한다.시료온도20±2℃에서
회전형점도계의스핀들을12
rpm으로회전시켜2분후의값을
측정한다.
마.판정
1)측정된점도값(mPa
s)을결과
값으로한다.다만,점도값으로
직접표시되지않는장비를사
용하는경우측정된수치에대
응하는계수를곱하여환산한
점도값(mPa
s을결과값으로
한다.
*점도(mP
s)=측정값×계수
2)제품1품목당3개의검체를준
비하여각각실험을진행한후
3회실험의평균값을점도
(mPa
s)로한다.
1.6∼1.7(현행과같음)
2.식품성분시험법
2.1∼2.1.5.3(생략)
2.1.5.4지방산
가.제1법
1)∼2)(생략)2.식품성분시험법
2.1∼2.1.5.3(현행과같음)
2.1.5.4지방산
가.제1법
1)∼2)(현행과같음)- 206 -현행 개정(안)
3)장치
가)∼나)(생략)
<신설>
4)시약및시액
가)시약
(1)14%트리플루오로보란메탄
올용액(125gBF3/L
MeOH)
(2)메탄올성수산화나트륨용액
(0.5N):수산화나트륨2g
을메탄올100mL로조제
한다.장시간방치하는경우
흰침전(탄산나트륨)이생길
수있으나이는무시하여도
된다.
(3)이소옥탄(Isooctane)：기체크
로마토그래프용
<신설>
<신설>
(4) 내부표준용액：
triundecanoin(C11:0)0.01g을
이소옥탄(Isooctane)용액에녹
여10mL가되게한다(1
mg/mL).3)장치
가)∼나)(현행과같음)
다)가열기(heatingblock)
라)질소농축기
4)시약및시액
<삭제>
가)14%트리플루오로보란메탄올
용액(125gBF3/LMeOH)
나)메탄올성수산화나트륨용액
(0.5N):수산화나트륨2g을
메탄올100mL로조제한다.
장시간방치하는경우흰침
전(탄산나트륨)이생길수있
으나이는무시하여도된다.
다)이소옥탄
라)무수황산나트륨
마)포화염화나트륨용액
바)내부표준용액:내부표준용액
의농도는지방산표준용액의
감응도(피크의면적또는높
이)보다높게조절한다.
(1)지방산사용시:
Triundecanoin(C11:0)을이소
옥탄에녹여사용한다.- 207 -현행 개정(안)
(5)표준용액:각지방산메틸
에스테르와내부표준물질
undecanoicacid메틸에스
테르를이소옥탄(Isooctane)
에녹여각각0.5mg/mL이
되도록조제한다.(2)지방산메틸에스테르사용
시:Undecanoicacidmethyl
ester를이소옥탄에녹여사
용한다.
사)표준용액의조제
(1)지방산사용시:분석하고자
하는지방산0.01g을이소옥
탄10mL에녹여표준원액
으로한다(1mg/mL).지방
산표준원액을적절한농도
로희석한표준용액1mL를
유리튜브에취하고내부표
준용액1mL를첨가한다.
(단,표준용액과시험용액의
내부표준물질농도가동일한
농도가되도록조절한다.)★
이어0.5N메탄올성수산화
나트륨용액1.5mL를가하고
질소를불어넣은후즉시뚜
껑을덮고혼합한다.이어
100℃heatingblock에서약
5분간가온한다.이를냉각한
후14%트리플루오로보란메
탄올용액2mL를가하고
다시질소를불어넣은후즉- 208 -현행 개정(안)
시뚜껑을덮고혼합하고
100℃에서30분간가온한다.
이어30～40℃로냉각하여
이소옥탄1mL를가하여질
소를불어넣은후뚜껑을덮
고이온도에서30초간격렬
히진탕한다.다음즉시포화
염화나트륨용액5mL를가
하고질소를불어넣은후뚜
껑을덮고진탕한다.상온으
로냉각한후수층으로부터
분리된이소옥탄층을무수황
산나트륨으로탈수하여표
준용액으로한다.
(2)개별지방산메틸에스테르
사용시:분석하고자하는
지방산메틸에스테르를이
소옥탄에녹여표준원액으로
한다(1mg/mL).표준원액을
적절한농도로희석한용액
1mL에바)내부표준용액
(2)1mL를첨가하여표준용
액으로한다.
(3)혼합지방산메틸에스테르
(FAMEmixture37종)사용- 209 -현행 개정(안)
시:36종지방산메틸에스
테르1)에내부표준물질메틸
에스테르가포함된표준용액
을사용한다.
1)C4:0-tetranoicmethylester,
C6:0-hexanoicmethyl
ester,
C8:0-octanoicmethyl
ester,
C10:0-decanoicmethyl
ester,
C12:0-dodecanoicmethyl
ester,
C13:0-tridecanoicmethyl
ester,
C14:0-tetradecanoicmethyl
ester,
C14:1-9-tetradecenoic
methylester,
C15:0-pentadecanoic
methylester,
C15:1-10-pentadecenoic
methylester,
C16:0-hexadecanoic
methylester,- 210 -현행 개정(안)
C16:1-9-hexadecenoic
methylester,
C17:0-heptadecanoic
methylester,
C17:1-10-heptadecenoic
methylester,
C18:0-octadecanoicmethyl
ester,
C18:1-elaidicmethylester,
C18:1-9-octadecenoic
methylester,
C18:2-6-linolelaidicmethyl
ester,
C18:2-9,12-octadecadienoic
methylester,
C18:3-9,12,15-octadecatrien
oicmethylester,
C18:3-6,9,12-octadecatrien
oicmethylester,
C20:0-eicosanoicmethyl
ester,
C21:0-heneicosanoic
methylester,
C20:1-8-eicosenoicmethyl
ester,- 211 -현행 개정(안)
5)시험용액의조제C20:2-11,14-eicosadienoic
methylester,
C20:3-8,11,14-eicosatrienoi
cmethylester,
C20:3-11,14,17-eicosatrieno
icmethylester,
C20:4-arachidonicmethyl
ester,
C20:5-eicosapentaenoic
methylester,
C22:0-docosanoicmethyl
ester,
C22:1-9-docosaenoic
methylester,
C22:2-docosadienoic
methylester,
C22:6-docosahexaenoic
methylester,
C23:0-tricosanoicmethyl
ester,
C24:0-lignocericmethyl
ester,
C24:1-nervonicmethyl
ester
5)시험용액의조제- 212 -현행 개정(안)
가)지방및유지
검체약25mg을유리튜브에
정밀히취하고내부표준용액1
mL를첨가한다.이어0.5N메
탄올성수산화나트륨용액1.5
mL를가하고질소를불어넣은
후즉시뚜껑을덮고혼합한다.
이어100℃heatingblock에서
약5분간가온한다.이를냉각한
후14%트리플루오로보란메탄
올용액2mL를가하고다시질
소를불어넣은후즉시뚜껑을
덮고혼합하고100℃에서30분간
가온한다.이어30～40℃로냉각
하여이소옥탄(Isooctane)용액1
mL를가하여질소를불어넣은
후뚜껑을덮고이온도에서30
초간격렬히진탕한다.다음즉
시포화염화나트륨용액5mL를
가하고질소를불어넣은후뚜껑
을덮고진탕한다.상온으로냉
각한후수층으로부터분리된이
소옥탄(Isooctane)층을무수황산
나트륨으로탈수하여시험용액
으로한다.검체약25mg을유리튜브에정
밀히취하고내부표준용액1mL
를첨가한다.사)표준용액의조
제(1)지방산사용시★이하에
따라시험하여시험용액으로한
다.- 213 -현행 개정(안)
6)∼8)(생략)
나.제2법
1)∼2)(생략)
3)장치
기체크로마토그래프：불꽃이온화
검출기(Flame Ionization
Detector,FID)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
4)시약및시액
가)시약
(1)피로갈롤
(2)8.3M및12M염산용액
(3)수산화암모늄용액:
58%(w/w)
(4)디에틸에테르:지방추출용
(5)무수석유에테르
(6)에탄올:95%(v/v)
(7)톨루엔
(8)클로로포름6)∼8)(현행과같음)
나.제2법
1)∼2)(현행과같음)
3)장치
가)기체크로마토그래프：불꽃이
온화검출기(Flame
IonizationDetector,FID)
나)교반기(vortexmixer)
다)수조(shakingwaterbath)
라)원심분리기(centrifuge)
마)가열기(heatingblock)
바)질소농축기
사)드라이오븐
4)시약및시액
가)피로갈롤(Pyrogallol)
나)8.3M및12M염산용액:
8.3M의염산용액을제조할
경우,12M염산용액250
mL를물110mL에용해하고
혼합하여사용한다.
다)수산화암모늄용액:28∼
30%(w/w)
라)디에틸에테르
마)무수석유에테르(Petroleum- 214 -현행 개정(안)
(9)무수황산나트륨(Na2SO4)
(10)7%트리플루오로보란메탄
올용액:14%트리플루오
로보란메탄올용액을메탄
올로희석하여사용한다.
(11)에테르혼합추출용매:디에
틸에테르와무수석유에테
르(1:1)혼합용매(v/v)
(12) 내부표준용액：
triundecanoin(C11:0)0.05g을
클로로포름에녹여10mL가
되게한다(5mg/mL).
(13)표준용액의조제:36종지방
산메틸에스테르1)와내부표
준물질(undecanoicacid
methylester)를헥산에녹여ether)
바)에탄올
사)톨루엔
아)클로로포름
자)무수황산나트륨
차)7%트리플루오로보란메탄올
용액:14%트리플루오로보
란메탄올용액을메탄올로
희석하여사용한다.
카)헥산
타)내부표준용액:내부표준용액
의농도는지방산표준용액
의감응도(피크의면적또는
높이)보다높게조절한다.
(1)지방산사용시:
Triundecanoin(C11:0)을클로
로포름에녹여사용한다.
(2)지방산메틸에스테르사용
시:Undecanoicacidmethyl
ester를클로로포름에녹여
사용한다.
파)표준용액의조제
(1)지방산사용시:분석하고자
하는지방산0.01g을클로로
포름10mL에녹여표준원- 215 -현행 개정(안)
각각1mg/mL가되도록조
제한다.액으로한다(1mg/mL).지
방산표준원액을적절한농
도로희석한표준용액1mL
를15mL시험관에취하고
내부표준용액1mL를첨가
한다.(단,표준용액과시험
용액의내부표준물질농도가
동일한농도가되도록조절
한다.)시험관에2～3mL클
로로포름과2～3mL디에틸
에테르를넣어혼합한후★
40℃수조에서질소농축하
고2mL7%트리플루오로
보란메탄올용액과1mL의
톨루엔을첨가한다.테프론/
실리콘재질의마개로잘밀
봉하여100℃오븐에서45분
간가열한후실온으로냉각
한다.5mL물,1mL헥산
및약1g무수황산나트륨
을첨가한후진탕하여정치
하고분리된상층액을취하
여약1g의무수황산나트
륨을담은다른바이알(Vial)
에넣고탈수한후표준용액- 216 -현행 개정(안)
1)C4:0-tetranoicmethylester,
C6:0-hexanoicmethylester,
C8:0-octanoicmethylester,
C10:0-decanoicmethylester,
C12:0-dodecanoicmethylester,
C13:0-tridecanoicmethylester,
C14:0-tetradecanoicmethyl
ester,C14:1-9-tetradecenoic
methyl ester,으로한다.
(2)개별지방산메틸에스테르
사용시:분석하고자하는
지방산메틸에스테르를클
로로포름에녹여표준원액
으로한다(1mg/mL).표준
원액을적절한농도로희석
한용액1mL에타)내부표
준용액(2)1mL를첨가하여
표준용액으로한다.
(3)혼합지방산메틸에스
테르(FAMEmixture37종)
사용시:36종지방산메
틸에스테르에내부표준물
질메틸에스테르가포함된
표준용액을사용한다.
<삭제>- 217 -현행 개정(안)
C15:0-pentadecanoicmethyl
ester,C15:1-10-pentadecenoic
methyl ester,
C16:0-hexadecanoicmethyl
ester,C16:1-9-hexadecenoic
methyl ester,
C17:0-heptadecanoicmethyl
ester,C17:1-10-heptadecenoic
methyl ester,
C18:0-octadecanoicmethyl
ester,C18:1-elaidicmethyl
ester,C18:1-9-octadecenoic
methyl ester,
C18:2-6-linolelaidicmethyl
e s t e r ,
C18:2-9,12-octadecadienoic
methyl ester,
C18:3-9,12,15-octadecatrienoic
methyl ester,
C18:3-6,9,12-octadecatrienoic
methylester,C20:0-eicosanoic
methyl ester,
C21:0-heneicosanoic methyl
ester,C20:1-8-eicosenoic
methyl ester,- 218 -현행 개정(안)
C20:2-11,14-eicosa dienoic
methyl ester,
C20:3-8,11,14-eicosatrienoic
methyl ester,
C20:3-11,14,17-eicosatrienoic
methylester,C20:4-arachidonic
methyl ester,
C20:5-eicosapentaenoic methyl
ester,C22:0-docosanoicmethyl
ester,C22:1-9-docosaenoic
methyl ester,
C22:2-docosadienoicmethyl
ester,C22:6-docosahexaenoic
methylester,C23:0-tricosanoic
methylester,C24:0-lignoceric
methylester,C24:1-nervonic
methylester
5)지방추출
지방추출에앞서검체를균질화
한다.내부표준물질로사용하는
undecanoicacid에대한간섭을
확인하기위하여내부표준물질없
이시험용액을조제하여분석하고
해당피크가발견되면내부표준물5)지방추출
지방추출에앞서검체를균질화
한다.내부표준물질로사용하는
undecanoicacid에대한간섭을
확인하기위하여내부표준물질없
이시험용액을조제하여분석하고
해당피크가발견되면내부표준물- 219 -현행 개정(안)
질피크면적을계산시보정한다.
이를위해내부표준용액대신클
로로포름2mL을사용한다.
가)우유등유제품및치즈를제
외한식품
균질화된검체를약100～200
mg의지방을포함하는양으로
정확히칭량하여마조니어
(Mojonnier)관에넣고약100
mg의피로갈롤을첨가한후,2
mL의내부표준용액을첨가한다.
마조니어(Mojonnier)관에끓임
쪽을넣고2mL에탄올을첨가
하여전체검체가잘섞일때까
지혼합한다.8.3M염산용액10
mL을넣고잘섞는다.마조니어
(Mojonnier)관의마개를고무줄
혹은테프론테이프등으로밀봉
한후,70～80℃의수조에서적
당한속도로교반하면서40분간
분해한다.마조니어(Mojonnier)
관의벽면에붙어있는입자들이
잘혼합될수있도록매10분마
다교반기로혼합한다.분해후,
실온으로냉각하고에테르추출질피크면적을계산시보정한다.
이를위해내부표준용액대신클
로로포름1mL를사용한다.
가)우유등유제품및치즈를제
외한식품
균질화된검체를약50～100mg
의지방을포함하는양으로정확
히칭량하여시험관에넣고약
50mg의피로갈롤을첨가한후,
1mL의내부표준용액을첨가한
다.시험관에끓임쪽을넣고1
mL에탄올을첨가하여혼합한
다.8.3M염산용액5mL를넣
고혼합한다.시험관의마개를
테프론테이프로밀봉한후,70～
80℃의수조에서적당한속도로
교반하면서40분간분해한다.시
험관의벽면에붙어있는입자들
이잘혼합될수있도록매10분
마다교반기로혼합한다.분해
후,실온으로냉각하고에테르
추출시분액이용이하도록에탄
올2mL를첨가하여혼합한다.- 220 -현행 개정(안)
시분액이용이하도록마조니어
(Mojonnier)관의아래부분을에
탄올을첨가하여채운후부드럽
게섞어준다.
나)우유등유제품
균질화된검체를약100～200
mg의지방을포함하는양으로
정확히칭량하여마조니어
(Mojonnier)관에넣고약100
mg의피로갈롤을첨가한후,2
mL의내부표준용액을첨가한다.
마조니어(Mojonnier)관에끓임
쪽을넣고2mL에탄올을첨가
하여전체검체가잘섞일때까
지혼합한다.4mL의물을첨가
하여잘섞은후2mL의수산화
암모늄을첨가하여교반하고마
조니어(Mojonnier)관의마개를
고무줄혹은테프론테이프등으
로밀봉한후,70～80℃의수조
에서적당한속도로교반하면서
10분간분해한다.마조니어
(Mojonnier)관의벽면에붙어있
는입자들이잘혼합될수있도
록매5분마다교반기로혼합한나)우유등유제품
균질화된검체를약50～100mg
의지방을포함하는양으로정확
히칭량하여시험관에넣고약
50mg의피로갈롤을첨가한후,
1mL의내부표준용액을첨가한
다.시험관에끓임쪽을넣고1
mL에탄올을첨가하여혼합한
다.2mL의물,1mL의수산화
암모늄용액을첨가하여교반하
고시험관의마개를테프론테이
프로밀봉한후,70～80℃의수
조에서적당한속도로교반하면
서10분간분해한다.시험관의
벽면에붙어있는입자들이잘혼
합될수있도록매5분마다교반
기로혼합한다.분해후페놀프
탈레인용액을몇방울넣고염
기성(분홍색)이유지될수있도
록수산화암모늄용액을첨가한
다.에테르추출시분액이용이- 221 -현행 개정(안)
다.분해후페놀프탈레인용액
을몇방울넣고염기성(분홍색)
이유지될수있도록수산화암모
늄을첨가한다.에테르추출시
분액이용이하도록마조니어
(Mojonnier)관의아래부분을에
탄올을첨가하여채운후부드럽
게섞어준다.
다)치즈
균질화된검체를약100～200
mg의지방을포함하는양으로
정확히칭량하여마조니어
(Mojonnier)관에넣고약100
mg의피로갈롤을첨가한다.그
리고2mL의내부표준용액을첨
가한다.마조니어(Mojonnier)관
에끓임쪽을넣고2mL에탄올
을첨가하여전체검체가잘섞
일때까지혼합한다.4mL의물
을첨가하여잘섞은후2mL의
수산화암모늄을첨가하여교반
하고마조니어(Mojonnier)관의
마개를고무줄혹은테프론테이
프등으로밀봉한후,70～80℃
의수조에서적당한속도로교반하도록에탄올2mL를첨가하여
혼합한다.
다)치즈
균질화된검체를약50～100mg
의지방을포함하는양으로정확
히칭량하여시험관에넣고약
50mg의피로갈롤을첨가한후,
1mL의내부표준용액을첨가한
다.시험관에끓임쪽을넣고1
mL에탄올을첨가하여혼합한
다.2mL의물,1mL의수산화
암모늄용액을첨가하여교반하
고시험관의마개를테프론테이
프로밀봉한후,70～80℃의수
조에서적당한속도로교반하면
서20분간분해한다.시험관의
벽면에붙어있는입자들이잘혼
합될수있도록매5분마다교반
기로혼합한다.12M염산용액5- 222 -현행 개정(안)
하면서20분간분해한다.마조니
어(Mojonnier)관의벽면에붙어
있는입자들이잘혼합될수있
도록매5분마다교반기로혼합
한다.12M염산용액10mL을
추가하여첨가하고20분간분해
한다.마조니어(Mojonnier)관의
벽면에붙어있는입자들이잘혼
합될수있도록매10분마다교
반기로혼합한다.에테르추출
시분액이용이하도록마조니어
(Mojonnier)관의아래부분을에
탄올을첨가하여채운후부드럽
게섞어준다.
라)에테르추출
가),나)및다)에서준비된마조
니어(Mojonnier)관의분해물에
25mL디에틸에테르를첨가하고
마개를한후5분간진탕하여추
출한다.에테르혼합추출용매로
마개를씻고25mL의무수석유
에테르를추가하여5분간다시
진탕추출하고600rpm에서5분
간원심분리한다.원심분리가어
려울경우,상층이깨끗해질때mL를추가하여첨가하고20분간
분해한다.시험관의벽면에붙어
있는입자들이잘혼합될수있
도록매10분마다교반기로혼합
한다.에테르추출시분액이용
이하도록에탄올2mL를첨가하
여혼합한다.
라)에테르추출
가),나)및다)에서준비된시험
관의분해물에12.5mL디에틸
에테르를첨가하고5분간진탕하
여추출한다.12.5mL의무수석
유에테르를추가하여5분간다시
진탕추출하고50⨉ g에서5분
간원심분리한다.원심분리가어
려울경우,상층이깨끗해질때
까지적어도1시간이상방치하
여분리한다.15mL시험관에- 223 -현행 개정(안)
까지적어도1시간이상방치하
여분리한다.에테르혼합추출
용매로마개를씻고150mL비
커에에테르층을분액한후증
발시키기위해질소를사용하여
35～40℃수조에서에테르를천
천히증발시킨다.
6)시험용액의조제
2～3mL클로로포름과2～3mL
디에틸에테르로추출한지방을녹
여15mL시험관으로옮긴후,4
0℃수조에서질소농축하고2.0
mL7%트리플루오로보란메탄올
용액과1mL의톨루엔을첨가한
다.테프론/실리콘재질의마개로
잘밀봉하여100℃오븐에서45분
간가열한후실온으로냉각한다.
5.0mL증류수,1.0mL헥산및
약1.0g무수황산나트륨를첨가
한후진탕하여정치하고분리된
상층액을취하여약1.0g의무수
황산나트륨을담은다른바이알
(Vial)에넣고탈수한후시험용
액으로한다.
7)∼9)(생략)에테르층을분액한후질소를
사용하여35～40℃수조에서에
테르를천천히증발시킨다.
6)시험용액의조제
시험관에2～3mL클로로포름과
2～3mL디에틸에테르를첨가해
추출한지방을녹인후4)시약
및시액파)표준용액(1)지방산
사용시★이하에따라시험하여
시험용액으로한다.
7)∼9)(현행과같음)- 224 -현행 개정(안)
다.제3법(생략) <삭제>
2.1.5.5∼2.2.2.2(생략)2.1.5.5∼2.2.2.2(현행과같음)
2.2.2.3비타민B2
가.(생략)
나.고속액체크로마토그래프에의한
정량법
1)(생략)
2)시약및시액
가)메탄올：고속액체크로마토그
래프피용
나)(생략)
다)표준용액의조제
(1)(생략)
(2)FMN(Flavinmononucleotid
e)표준용액：FMN을물에
녹여0.2㎍/mL(리보플라빈
으로환산)의용액으로만든
다.
<신설>2.2.2.3비타민B2
가.(현행과같음)
나.액체크로마토그래프에의한정
량법
1)(현행과같음)
2)시약및시액
가)-----：액체크로마토그래프
용
나)(현행과같음)
다)표준용액의조제
(1)(현행과같음)
(2)----------------------
----------------------
------------( 리보플라빈
으로환산:×0.7868*또는×
0.7317**)--.
*376.36(리보플라빈분자량)
/478.33(FMN무수물분자
량)
**376.36(리보플라빈분자량)/
514.36(FMN이수화물분자
량)- 225 -현행 개정(안)
(3)FAD(Flavinadeninedinucleot
ide)표준용액：FAD를물에0.
5㎍/mL(리보플라빈으로환산)
의용액으로만든다.
<신설>
3)∼5)(생략)
2.2.2.4(생략)
2.2.2.5나이아신
가.∼나.(생략)
다.액체크로마토그래프에의한정량
1)∼6)(생략)
7)정량시험
(1)(생략)
(2)특수의료용도등식품
나이아
신(mg)*=시험용액의농도
(μg/mL)×시험용액의
부피(mL)
×1
×1회
섭취량(mg)
시료량(mg)1000
*특수의료용도등식품 의단위는표
시사항에따라변동될수있음.
2.2.2.6(생략)
2.2.2.7 비타민 D
가.액체크로마토그래프에의한정량
(제1법)(3)-----------------------
----------------------
-----(리보플라빈으로환산:
×0.4537*)---------.
*376.36(리보플라빈분자량)
/829.51(FAD무수물분자량)
3)∼5)(현행과같음)
2.2.2.4(현행과같음)
2.2.2.5나이아신
가.∼나.(현행과같음)
다.액체크로마토그래프에의한정량
1)∼6)(현행과같음)
7)정량시험
(1)(현행과같음)
(2)특수의료용도식품
나이아
신(mg)*=시험용액의농도
(μg/mL)×시험용액의
부피(mL)
×1
×1회
섭취량(mg)
시료량(mg)1000
*특수의료용도식품 -----------
--------------------.
2.2.2.6(현행과같음)
2.2.2.7비타민D
가.액체크로마토그래프(육방전환밸브
시스템)/자외부검출기또는액체- 226 -현행 개정(안)
1)(생략)
2)분석원리
시료를비누화하여헥산으로추출
하고그추출물을역상분배형칼
럼을이용한육방전환밸브시스템
으로분리하여254nm파장에서
자외선흡광검출기(UVphotometri
cdetector)로정량하는방법이다.
3)(생략)
액체크로마토그래프/자외선흡광검
출기(UVphotometricdetector)
<신설>
4)(생략)
가)(생략)
나)헥산,메탄올,에탄올：액체크
로마토그래프용혹은이와동
등한것
다)이동상:메탄올900mL에에크로마토그래프/질량분석기에
의한정량
1)(현행과같음)
2)분석원리
-------------------------
-------------------------
-------------------------
-----------264nm파장에서
자외부검출기로정량하는방법또
는액체크로마토그래프/질량분석
기로-----------------.
3)(현행과같음)
<삭제>
가)액체크로마토그래프(육방전환
밸브시스템)/자외부검출기(L
C/UV)
나)액체크로마토그래프/질량분
석기(LC-MS/MS)
4)(현행과같음)
가)(현행과같음)
나)헥산,메탄올:------------
-----------------------
-----
다)수산화칼륨,피로갈롤,페놀프- 227 -현행 개정(안)
탄올100mL을혼합한용액
을830mL취하여물로1L
가되도록조제하고탈기하여
사용한다.(메탄올/에탄올/물:
74.7/8.3/17(v/v/v))
5)(생략)
가)표준원액:비타민D2또는비
타민D3100mg을메탄올100
mL에녹여조제한다.(1,000u
g/mL)
나)검량곡선표준용액:표준원액
을각각10,50,100ng/mL이
되도록이동상으로희석하여
조제한다.
6)(생략)
7)(생략)
가)(생략)
(1)(생략)
(가)∼(나)(생략)
(다)분석칼럼：CapcellpakC18
UG120V(4.6mm×250m
m,5μm)또는이와동등
한것
(2)(생략)
(가)전처리칼럼이동상：4)시탈레인,무수황산나트륨:특급
시약또는이와동등한것
5)(현행과같음)
가)-------:비타민D2와비타민D3
각각-------------------
-----------.(1,000 μg/mL)
나)표준용액:--------이동상
으로적절히희석하여표준용
액으로한다.
6)(현행과같음)
7)(현행과같음)
가)(현행과같음)
(1)(현행과같음)
(가)∼(나)(현행과같음)
(다)-------:CadenzaHS-C18
(1.5mm×250mm,3μm)
---------------------
-------
(2)(현행과같음)
(가)---------------- 80%- 228 -현행 개정(안)
약및시액중다)이동상
참조.
(나)분석칼럼이동상：메탄올
/에탄올(9:1,v/v)혼합용
액
(3)(생략)
(가)(생략)
(나)분석칼럼이동상：500μL/
min
(4)(생략)
전처리칼럼에서비타민D의피
크용출시간을그림1.과같이
확인하고농축을위한육방전환
밸브의조작시간을설정한다.
그림1.전처리칼럼에서2mg/L농도의
비타민D표준용액의크로마토그램(유속
:300uL/min)
(5)주입량:210μL
(6)검출기：자외부(UV)검출기(254(v/v)메탄올---------
------
(나)-----------96%(v/v)
메탄올-------------
---
(3)(현행과같음)
(가)(현행과같음)
(나)-------------- 90μL/
min
(4)(현행과같음)
------------------------ 
--용출시간을확인하고----
-------------------------
---------------------.
<삭제>
(5)------100μL
(6)------------------ (264- 229 -현행 개정(안)
nm)
나)검량선작성
검량곡선표준용액을액체크로마
토그래프에210μL씩각각주입
하여얻어진크로마토그램상의각
피크의넓이를구하여검량선을
작성한다.nm)
나)액체크로마토그래프/질량분석
기의측정조건
(1)액체크로마토그래프조건
(가)칼럼:C18(2.1×100mm,1.7µ
m)또는이와동등한것
(나)이동상:5mM초산암모늄
/메탄올(5/95)
(다)이동상유량:0.45mL/min
(라)칼럼온도:40℃
(마)주입량:1μL
(2)질량분석기조건
(가)Ionization:ESIpositive
(나)Sourcetemperature:120
℃
(다)Collisiongas:N2(질소또
는비활성기체)
(라)Capillaryvoltage:3.5kV
(마)질량분석기분석을위한
이온
다)검량선작성성분Precursor
ion(m/z)Fragment
ion(m/z)
비타민D2397107,105,91
비타민D3385107,105,79- 230 -현행 개정(안)
다)표준용액및시험용액의크로마
토그램
그림2.표준용액및시험용액의크로
마토그램
라)정량한계:25μg/kg검량곡선표준용액을액체크로마토
그래프또는액체크로마토그래프/
질량분석기에각각주입하여얻어
진크로마토그램상의각피크의
넓이를구하여검량선을작성한
다.
라)표준용액및시험용액의크로마
토그램
(1)액체크로마토그래프(육방전환
밸브시스템)/자외부검
출기
- 231 -현행 개정(안)
8)(생략)
9)(생략)
가)(생략)그림1.표준용액및시험용액의크로
마토그램.
(2)액체크로마토그래프/질량분
석기
8)(현행과같음)
9)(현행과같음)
가)(현행과같음)
 
그림2.비타민D3표준용액(100
µg/L)및시험용액의크로마토그
램   
그림3.비타민D2표준용액(100
µg/L)및시험용액의크로마토그
램
비타민D2또는C×(a×b)×100- 232 -현행 개정(안)
비타민 D 함량
(IU/100 g) =Y' × KV×100
S 1,000
Y'=검량곡선에대입하여얻은
시험용액의농도(ug/L)
K=비타민D의무게전환계수
(40IU/ug)
V=최종용액의부피(mL)
S=시료의무게(g)
※비타민D의함량은비타민D2
또는비타민D3를구분하여
계산하고합한값으로한다.
나.고속액체크로마토그래프를이
용한정량(제2법)
1)시험법적용범위:난황과같이
지질함량이많은시료를제외
한축산물에적용한다.
2)시약및시액
가)에탄올:에탄올(특급)1ℓ에
50%수산화나트륨용액5m
L및아연분말5g을가해
약2시간환류
나)헥산,아세토니트릴,메탄올:
고속액체크로마토그래프용
또는이와동등한것C:시험용액중의비타민D의
농도(μg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:희석배수
S:시료채취량(g)
※-------------- 비타민D2
와-------------------
---------------- 한다.
비타민D1μg=40IU
<삭제>D3함량(µg/100g)=S- 233 -현행 개정(안)
다)비타민D표준용액:비타민D2및
D3가1mL중4IU(0.1㎍)함
유되도록무알데히드에탄올
에녹인다.
라)이동상:(1단계:아세토니트
릴․메탄올(1:1))
(2단계:0.4%이소프로파놀․헥산
용액)
마)고속액체크로마토그래프용
칼람충진제:역상분배형및
순상분배형충진제
3)기구및장치
가)고속액체크로마토그래프:25
4㎚또는그부근파장의자
외부흡수검출기가부착된2
대의고속액체크로마토그래
프를사용한다.이중1대는
제1단계(분취용)에,다른1대
는제2단계(분석용)에사용한
다.
나)고속액체크로마토그래프용칼
럼:내경7.5㎜,길이300㎜
와내경4.6㎜,길이250㎜의
칼람에각각역상형및순상
형충진제를채운것.- 234 -현행 개정(안)
다)분획포집기(Fractioncollecto
r)
4)시험용액의조제
가.액체크로마토그래프에의한정
량(제1법)6)시험용액의조제에
따라조제후감압건고된최종
잔류물에아세토니트릴:메탄올(1:
1)500μL를정확히가하여녹여
검액으로한다.
5)시험방법
가)고속액체크로마토그래프조건
(1)제1단계(분취용)고속액체크로
마토그래프
-칼럼:역상형칼럼(내경7.5
㎜,길이300㎜)
-이동상:아세토니트릴:메탄
올(1:1)
-유속:2mL/분
-검출기:자외선(UV)검출기(25
4㎚)
(2)제2단계(분석용)고속액체크로
마토크래피
-칼럼:순상형칼럼(내경4.6
㎜,길이250㎜)
-이동상:0.4%이소프로판- 235 -현행 개정(안)
올․헥산용액
-유속:1.6mL/분
-검출기:자외선(UV)검출기(254
㎚)
나)정량시험
(1)제1단계(분취용)고속액체크
로마토그래프
시험용액200μL를정확히취해
제1단계고속액체크로마토그래프
에주입하여분획포집기로비타
민D분획을분취한다(비타민D
표준용액의크로마토그램으로
비타민D가검출기에도달하는
시간을측정하여피크가검출기
에도달하는전후30초동안분
액을받을수있도록예비실험
으로분석조건을준비한다.
(2)제2단계(분석용)고속액체크
로마토그래프
제1단계에서얻은비타민D획분
의용매를감압농축하여잔류물
에0.4%이소프로판올
헥산200
μL를정확히가하여녹인다.이
용액100μL를정확히취하여제
2단계고속액체크로마토그래프- 236 -현행 개정(안)
에주입하여얻어진크로마토
그램에나타난비타민D의피크
의높이또는면적을측정한다.
(3)비타민D표준용액에대한조
작
별도로비타민D표준용액1mL
에대하여상기의시험용액의조
제및시험방법제1단계,제2단
계의조작에따라실행한후비타
민D의피크의높이또는면적을
측정한다.
 <계산>
검사시료 100 g
중의비타민 D(IU) =Psa
×S
×100
Pst검사시료채취량 (g )
Pst:검사시료채취량(g)
S:비타민D표준용액의농도(IU
/mL)
Pst:비타민D표준용액의피크의
높이또는면적
Psa:검사시료에대한피크의높이
또는면적
※비타민D의함량은비타민D2또
는비타민D3를구분하여계산
하고합한값으로한다
다.고속액체크로마토그래프를이<삭제>- 237 -현행 개정(안)
용한정량(제3법)
1)시험법적용범위
조제유류에적용한다.
2)분석원리
시료중의비타민D3를수산화칼륨에
탄올용액으로비누화시키고헥산
추출및고체상카트리지로정제하
여역상칼럼으로분리한후고속액
체크로마토그래프/자외부흡광검출
기를이용하여정량하는방법이다.
3)장치및기구
가)장치
고속액체크로마토그래프/자외
부흡광검출기(HPLC/UV)
나)기구
(1)환류냉각장치
(2)감압농축기
(3)용매여과장치
(4)고체상추출장치
(5)진공펌프
(6)실리카카트리지(500mg,6m
L)또는이와동등한것
(7)초자기구:분액깔대기,농축
플라스크(갈색,125mL또는
250mL)- 238 -현행 개정(안)
(8)분석저울:0.1mg까지측정
이가능한것
4)시약및시액
가)아세트산,아세토나이트릴,에
틸아세테이트,디클로르메탄,
에탄올,이소프로판올,헥산,
메탄올:액체크로마토그래프
용또는이와동등한것
나)수산화칼륨,페놀프탈레인,
무수황산나트륨:특급시약
또는이와동등한것
다)증류수:3차증류수로18M
Ω 이상인것
라)10%아세트산용액:아세
트산10mL를100mL용
량플라스크에넣은후증류수
로용량을맞춘다.
마)이소프로판올용액A:이소프
로판올용액2mL를1L용량
플라스크에넣은후디클로르
메탄으로용량을맞추고잘
혼합한다.
바)이소프로판올용액B:이소프로
판올용액200mL를1L용량플
라스크에넣은후디클로르메- 239 -현행 개정(안)
탄으로용량을맞추고잘혼합
한다.
사)에탄올수산화칼륨용액:에탄
올310mL에수산화칼륨140
g을녹인후증류수50mL을
넣고혼합한다.
아)1%페놀프탈레인용액:페놀프
탈레인1g을100mL용량플라
스크에넣은후에탄올로용량
을맞춘다.
5)표준용액조제
가)표준원액:비타민D2(내부표준
물질)및D3를각각30㎎을채
취하여200mL용량플라스크
에넣고에탄올로용해하면서
용량을맞춘다.
나)표준용액:표준원액을각각4
mL취하여에탄올로200mL
까지채워3㎍/mL이되도록
조제한다.
다)검량곡선표준용액:표준용액
을각각4mL를취하여에탄올
로200mL까지채워0.06㎍/m
L이되도록조제한다.
6)시험용액조제- 240 -현행 개정(안)
가)비누화및추출
액체크로마토그래프에의한정량
(제1법)6)시험용액의조제에따
라조제후감압건고된최종잔류
물을이소프로판올용액A2mL에
녹인다.
나)정제
실리카카트리지에이소프로판올
용액B4mL를흘려주고,뒤이어
이소프로판올용액A5mL를흘
려카트리지를활성화시킨후가)
의추출용액을통과시킨다.농축
플라스크의잔류물을이소프로판
올용액A1mL로세척하고카트리
지에통과시킨후이소프로판올용
액A2mL로카트리지를세척하
고,이소프로판올용액A7mL로
용출하여질소로건조한다.건조
잔류물에아세토나이트릴1mL
를가하여용해시키고0.45μm나일
론멤브레인필터로여과하여시
험용액으로한다.
7)시험방법
가)고속액체크로마토그래프조건
-분석칼럼:C18(6×250mm,5μ- 241 -현행 개정(안)
m)또는이와동등한것
-가드칼럼:C18(4.6×10mm,5μ
m)또는이와동등한것
-칼럼온도:30℃
-검출파장:UV265nm
-주입량:250μL
-이동상:아세토나이트릴(A),
메탄올(B),에틸아세테이트
(C)
시간(분)유속(mL/min) A(%) B(%) C(%)
0 0.7 91 9 0
33 0.7 91 9 0
33.5 1.5 0 0 100
36 1.5 0 0 100
36.5 1.5 91 9 0
38 1.5 91 9 0
45 0.7 91 9 0
＊이동상A와B를각각또는91:9
로혼합하여사용한다.
나)정량시험
표준용액과시험용액을각각
주입하여피크의머무름시간
을비교하고동일물질인지정
성확인후검량선을사용하여
시험용액중의비타민D2및D3
의농도(㎍/mL)를구하고,검
사시료중비타민D2및D3의
함량(㎍/100g)을산출한다.- 242 -현행 개정(안)
비타민D함량(㎍/100g)=C×V
/S×100
C:검량선에서구한비타민D2
및D3의농도(㎍/mL)
V:시험용액의최종부피(mL)
S:시료채취량(g)
100:단위환산
※비타민D의함량은비타민D2
와비타민D3를합하여계산
라.액체크로마토그래프-질량분석기
에의한정량
1)시험법적용범위
영아용조제식및성장기용조제
식,조제유류등에적용한다.
2)분석원리
시료중의비타민D2와비타민D3
를수산화칼륨용액으로비누화
시키고BHT·헥산용액으로추출
한후액체그로마토그래프-질량
분석기(LC-MS/MS)를이용하여
비타민D2와D3를동시분석및정
량하는방법이다.
3)장치
액체크로마토그래프-질량분석기
(LC-MS/MS)<삭제>- 243 -현행 개정(안)
4)시약및시액
가)증류수:18.0mΩ/cm이상
으로정제된것
나)에탄올,헥산,메탄올:액체
크로마토그래프용또는이와
동등한것
다)비타민D표준원액:비타민
D2(Ergocalciferol)와D3(Cholec
alciferol)표준물질을메탄올로
용해하여1,000mg/L로제조
한다.
라)표준용액:표준원액을메탄
올에녹여1mg/L로제조한
다.
마)검량곡선표준용액:표준용
액을메탄올로B희석하여10
∼200µg/L가되도록제조한
다.
바)수산화칼륨,피로갈롤,BHT,
페놀프탈레인,무수황산나트
륨:특급시약또는이와동
등한것
사)피로갈롤·에탄올용액:피로
갈롤을100g취하여에탄올
에녹여1L로조제한다.사- 244 -현행 개정(안)
용시제조하며,암소에보관한
다.
아)90%수산화칼륨:수산화칼
륨을90g취하여증류수에
녹여100mL로조제한다.
자)헥산추출용매:BHT(dibu
tylhydroxytoluene)를0.0
1%함유하도록0.1g을취하
여헥산에녹여1L로조제
한다.
5)시험용액의조제
균질화된시료1g을비누화플
라스크에정밀히취한후,피로
갈롤·에탄올용액40mL를가하
여약하게진탕혼합한다.수산화
칼륨10mL을가하고,환류냉각
기를부착하여비등수욕중에서
60분간가열하여비누화한다.
즉시실온으로냉각하고갈색분
액깔때기로옮긴후,0.01%BHT
를함유하는헥산50mL을가하
여10분간강하게진탕혼합한다.
침전이생기면이것이가라앉을
때까지방치하여헥산층을250∼
300mL새로운분액깔때기로옮- 245 -현행 개정(안)
긴다(층분리가원활하지않을
때는0℃,6,000rpm에서10분간
원심분리).남은하층에추출용매 
50 mL를 넣어 2회 더 반복하여 
이전의 추출용매와 합하고 1 N 
수산화칼륨용액  100 mL를 가하
여 15초간 강하게  진탕한다 . 이를 
방치하여 분리하고 혼탁한  물층
을 버린다 . 헥산층에 0.5 N 수산화
칼륨용액  40 mL를 가하여 진탕한  
후 물층을 다시 버린다 . 
   헥산층을 수세하여 세척액이 페
놀프탈레인 시액으로 알칼리의 
반응을 나타내지  않을 때까지 수
회 수세한다 . 수세 시 매회 15초
간 격렬하게 진탕한다 . 수세한 헥
산층을 무수황산나트륨 으로 탈수하
여 갈색 플라스크로 옮기고  무수황
산나트륨을  헥산 10 mL로 2회 
세척한  후 탈수한 헥산용매와 합
하고 이를 40℃ 이하에서 감압농
축한다 . 
   잔류물에  메탄올 2 mL를 가해 녹
이고, 이를 멤브레인 필터(PTFE, 
0.45 µm)로 여과하여 기기분석- 246 -현행 개정(안)
을 위한 시험용액으로 사용한다 . 
6)시험방법
가)액체크로마토그래프-질량분
석기조건
(1)컬럼:C18(2.1×100mm,1.7
µm)또는이와동등한것
(2)이동상:5mMAmmoniu
mAcetate/MeOH(5/95)
(3)이동상유량:0.45mL/min
(4)컬럼온도:40℃
(5)주입량:1µL
(6)이온화:ESIpositive
(7)분자량범위:200∼500
m/z
표1.질량분석기분석을위한이온
나)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취
하여액체크로마토그래프-질량
분석기에각각주입한다.얻어
진크로마토그램상의m/z107
이온의피크높이또는면적을성분Precursor
ion(m/z)Fragment
ion(m/z)
비 타 민 D2 397 107, 105, 91
비 타 민 D3 385 107, 105, 79- 247 -현행 개정(안)
구하여검량선을작성한다.
다)표준용액및시험용액의크
로마토그램
라)정량한계:　3µg/kg
7)정성실험
위의조건에서얻어진크로마토
그램상의피크는어느측정조건
에서도표준용액피크의머무름
시간과일치하여야한다.
8)정량시험
 
그림1.비타민D3표준용액(100
µg/L)및시험용액의크로마토그
램   
그림2.비타민D2표준용액(100
µg/L)및시험용액의크로마토그
램- 248 -현행 개정(안)
위조건으로얻어진크로마토그램
상의피크가표준용액피크의머무
름시간과일치할때피크높이
또는면적을검량선에대입하여
시험용액의비타민D2와D3농도(µ
g/mL)를구하고,다음식에의하
여검체중비타민D2와D3의함량
(µg/100g)을구한다.
비타민 D2 또는 D3 함량(µg/100 g) = 
××
C:검량곡선에얻은시험용액의
농도(µg/mL)
S:시료채취량(g)
V:시험용액의부피(mL)
100:단위환산계수
※비타민D의함량은비타민D2
와비타민D3를합하여계산
2.2.2.8(생략)
2.2.2.9비타민B6(피리독신)
 가. 액체그로마토그래피 에 의한 정
량
1)장치
액체그로마토그래프:형광검출기
를사용한다.2.2.2.8(현행과같음)
2.2.2.9비타민B6(피리독신)
가.액체크로마토그래프-------
--
1)장치
액체크로마토그래프:--------
---------.
2)(현행과같음)- 249 -현행 개정(안)
2)(생략)
3)시험용액의조제
검체적당량을취하여잘게부순
후,증류수25mL를가하여30분
동안초음파로추출하고,3,000
rpm에서원심분리하여상등액을
여과한다.잔류물에증류수25
mL를다시가하여30분동안초
음파로추출하고,원심분리하여
상등액을여과하여앞의여액과
합하여50mL로맞춘다.이액을
0.45 μm막여과지(membrane
filter)로여과하여시험용액으로
한다.
4)시험방법
가)액체그로마토그래프의조건
(1)∼(4)(생략)
5)(생략)
2.2.2.10(생략)
2.2.2.11비타민B12
가.액체크로마토그래프(육방전환밸브
시스템)에의한정량
1)장치3)시험용액의조제
검체0.5∼1.5g을---------
--------------------------
--------------------- 3,500
×g에서------------------
---------------------------
---------------------------
---------------------------
---------------------------
---------------------------
---------------------------
---------------------------
----.
4)시험방법
가)액체크로마토그래프------
(1)∼(4)(현행과같음)
5)(현행과같음)
2.2.2.10(현행과같음)
2.2.2.11비타민B12
가.액체크로마토그래프 (육방전환밸브시
스템)/자외부검출기 또는 액체크로
마토그래프 /질량분석기에  의한 정
량
1)시험법적용범위
특수용도식품등에적용한다.- 250 -현행 개정(안)
액체크로마토그래프(육방전환밸
브시스템):자외부검출기를사용
한다.
2)시약및시액
가)5mMKH2PO4：KH2PO40.6
8g을증류수에녹이고전량
을1L가되게한다.
나)표준용액의조제
비타민B12(Cyanocobalamin)을5
mMKH2PO4에녹여표준원액(10
0μg/mL)을조제하고,표준원액
을증류수로적당량희석하여표
준용액을만든다.
3)시험용액의조제
검체적당량을취하여분쇄기를
이용하여잘게부순후5mM인
산완충용액을가하여10분간초음
파장치로추출한후50mL로맞
추고,21,000rpm에서원심분리한
다.분리후중간층을취해서21,0
00rpm에서다시원심분리하고,
중간층을시험관에옮겨클로르포
름3mL을첨가하여지방층을제
거(2,000rpm)한물층을다시21,0
00rpm에서10분간원심분리한2)분석원리
식품중의비타민B12를추출용매
로추출한후면역친화성컬럼으로
정제하여자외부검출기또는질량
분석기가부착된액체크로마토그래프
로분석한다.
3)장치
가)액체크로마토그래프(육방전
환밸브시스템)/자외부검출
기
나)액체크로마토그래프/질량분
석기
다)정제용컬럼:비타민B12용면
역친화성컬럼(Immunoaffinit
ycolumn)(회수율및재현성
등이검증된것)
4)시약및시액
가)5mM인산이수소칼륨용액:
인산이수소칼륨0.68g을증
류수에녹이고전량을1L가
되게한다.
나)0.2M초산나트륨용액:초산
나트륨16.41g을증류수에
용해시킨후초산을이용하여
pH4로맞춘후증류수에녹- 251 -현행 개정(안)
다.마지막으로맑은액층을0.45
μm막여과지(membranefilter)
로여과하여시험용액으로한다.
4)시험방법
가)액체크로마토그래프(육방전환
밸브시스템)의조건
(1)칼럼
(가)전처리컬럼：Capcellpak
MFC8(4.6mm×150m
m,5μm)또는이와동
등한것
(나)농축컬럼：CapcellpakMG
C18(2.0mm×35mm,5μ
m)또는이와동등한것
(다)분석컬럼：CapcellpakUG
C18(1.5mm×250mm,5μ
m)또는이와동등한것
(2)이동상
(가)전처리컬럼이동상：5m
MKH2PO4
(나)분석컬럼이동상:5mMKH2
PO4/Methanol(80/20)
(3)유속
(가)전처리컬럼이동상：500μL/
min여1L로정용한다.
다)1%(w/v)시안화나트륨용
액:시안화나트륨1g을증
류수에녹여100mL로정용한
다.
라)20mM개미산암모늄:개미산
암모늄1.26g을증류수에녹
이고전량을1L가되게한
다(질량분석기로분석시사
용)
마)표준용액의조제
비타민B12(Cyanocobalamin)을5m
M인산이수소칼륨용액에녹여
표준원액(100 μg/mL)을조제하
고,표준원액을증류수로적당량
희석하여표준용액을만든다.
바)기타시약:잔류농약시험용
또는HPLC용
5)시험용액의조제
가)추출
균질화한검체약1∼5g을달아
갈색원심분리관에취하고0.2M
초산나트륨용액49.5mL와1%
시안화나트륨0.5mL를넣고상
온에서10분간초음파추출한다- 252 -현행 개정(안)
(나)분석컬럼이동상：120μL/
min
(4)검출기：자외부(UV)검출기(550
nm)
5)정량시험
시험용액및표준용액을각각400
μL씩주입하여앞의조건에서시
험한다.표준용액피크의넓이또
는높이에의해구한검량선을사
용하여시험용액의비타민B12의
농도(ng/mL)를구하고,다음의
식에의하여검체중비타민B12의
함량(μg/100g)을구한다.
가)계산방법
비타민 B12
(μg/100 g) =S × a×b
×100
검체량 (g) 1,000
S：시험용액중의비타민B12의
농도(ng/mL)
a：시험용액의전량(mL)
b：시험용액의희석배수음100℃수욕상에서30분간추
출하고상온으로냉각한다.이어
서여과지(WhatmanNo.2또는
이와동등한것)로여과한것을
추출액으로한다.
나)정제
냉장보관된정제용컬럼은실온
에30분방치한후컬럼내부의
완충용액을완전히제거한다.증
류수3mL를정제용컬럼에주
입하여활성화시킨후추출액9
mL를정제용컬럼에주입하여추
출액중비타민B12을정제용컬
럼에흡착시킨다.이어서증류수
로3mL씩3회주입하여불순물
을제거하고공기를주입하여컬럼
내에남아있는용액을제거한다.
정제용컬럼에흡착된비타민B12
를메탄올3mL로시험관에용
출시킨다.용출액을70℃에서
질소로건고시키고잔류물에증
류수0.5mL를가하여녹인것을
시험용액으로한다.
6)시험방법
가)액체크로마토그래프(육방전환- 253 -현행 개정(안)
밸브시스템)의측정조건
(1)칼럼
(가)전처리컬럼:CapcellpakM
FC8(4.6mm×150mm,5
μm)또는이와동등한것
(나)농축컬럼:CapcellpakMG
C18(2.0mm×35mm,5μ
m)또는이와동등한것
(다)분석컬럼:CapcellpakUG
C18(1.5mm×250mm,5
μm)또는이와동등한것
(2)이동상
(가)전처리컬럼이동상:5mM
인산이수소칼륨용액
(나)분석컬럼이동상:5mM
인산이수소칼륨용액/메
탄올(80:20,v/v)
(3)유속
(가)전처리컬럼이동상:500μL/
min
(나)분석컬럼이동상:120μL/
min
(4)육방전환밸브의조작
전처리칼럼에서비타민B12의
피크용출시간을확인하고농축- 254 -현행 개정(안)
을위한육방전환밸브의조작시
간을설정한다.
(5)주입량:400μL
(6)검출기:자외부검출기(550n
m)
나)액체크로마토그래프/질량분석
기의측정조건
(1)액체크로마토그래프조건
(가)컬럼:ACQUITYUPLCⓇB
EH(2.1mmx50mm,1.7
µm)또는이와동등한것
(나)이동상
①이동상A:20mM개미산
암모늄
②이동상B:아세토니트릴
(다)이동상유속:0.4mL/min
(라)컬럼온도:35℃
(마)주입량:10µL시간(분)이동상
A(%)이동상
B(%)
0.0955
0.7955
1.28020
1.68020
1.72080
3.72080
3.8955
6.0955- 255 -현행 개정(안)
(2)질량분석기조건
(가)Ionization:ESIpositive
(나)Sourcetemperature:120
℃
(다)Collisiongas:N2(질소또
는비활성기체)
(라)Capillaryvoltage:3.5kV
(마)질량분석기분석을위한
이온
다)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하
여액체크로마토그래프(육방전환
밸브시스템)/자외부검출기또는액
체크로마토그래프/질량분석기에
각각주입한다.얻어진크로마토
그램상의각피크높이또는피크
면적을구하여검량선을작성한다.
7)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토
그램상의피크는어느측정조건에
서도표준용액피크의머무름시
간과일치하여야한다.성분Precursor
ion(m/z)Fragment
ion(m/z)
비타민B12 678147, 
359- 256 -현행 개정(안)
나.액체크로마토그래프/질량분석기
에의한정량
1)시험법적용범위
영아용조제식및성장기용조제
식,조제유류등에적용한다.
2)장치및기구8)정량시험
정성시험과 똑같은조건에서
얻어진시험결과에의해
피크면적법에따라정량한다.
가)계산방법
C:검량곡선에얻은시험용액의
농도(μg/mL)
a:시료추출에사용된용액의
부피(mL)
V1:정제용컬럼에주입한추출액
의부피(mL)
V2:정제후시험용액의최종부피
(mL)
b:시험용액의희석배수
S:검체채취량(g)
<삭제>비타민B12
함량(µg/100g)=C×(a×V2×b)
×100
(S×V1)- 257 -현행 개정(안)
가)장치
액체크로마토그래프/질량분석
기(LC/MS/MS)
나)기구
(1)질소농축기
(2)용매여과장치
(3)진공펌프
(4)HLB카트리지(200mg,6mL)
또는이와동등한것
(5)초자기구:시험관
(6)분석저울:0.1mg까지측정이
가능한것
3)시약및시액
가)증류수:3차증류수로18ΜΩ 이상
인것
나)클로로포름,메탄올,아세토나이
트릴:액체크로마토그래프용
또는이와동등한것
다)암모늄포메이트,아세트산:특
급시약또는이와동등한것
라)20mM암모늄포메이트(HCO2
NH4):HCO2NH41.261g을증류
수에녹이고전량을1L가되게
한다.
4)표준용액의조제- 258 -현행 개정(안)
가)표준원액:비타민B12(Cyanocobal
amin)100mg을100mL용량플
라스크에넣은후증류수로녹
여조제한다.
나)표준용액:표준원액을증류수로
단계별희석하여조제한다.
5)시험용액의조제
가)추출
고체시료는약1g,액체시료는약
10g을원심분리관에정밀히달아
(고체시료는증류수10mL로용
해한다)클로로포름10mL을가
하여실온에서5분간진탕한다.
4℃에서9,000rpm으로15분간원
심분리한다.상등액을멤브레인
필터로여과하여고체시료는정
제과정을수행하고,액체시료의
경우는시험용액으로한다.
나)정제
HLB카트리지에메탄올5mL을
흘려주고,뒤이어물(아세트산으
로pH4.2로조정)5mL를흘려
카트리지를활성화시킨후①의추
출용액5mL을통과시킨다.5%
메탄올5mL을흘려주어세척- 259 -현행 개정(안)
하고시험관에메탄올5mL로
용출하여질소하건조한다.건
조잔류물에물1mL을가하여
용해시키고시험용액으로한
다.
6)시험방법
가)액체크로마토그래프/질량분석
기의조건
-칼럼:C18(2.1mm×50mm,1.7
㎛)또는이와동등한것
-칼럼온도:35℃
-이동상:20mM암모늄포메이
트:아세토니트릴(80:20)에서(2
0:80)으로농도균배한다.
-유속:0.4mL/min
-질량분석기조건
(1)Ionization:ESIpositive
(2)Capillarytemperature:500℃
(3)Collisiongas:Ar등
(4)Nebulizergas:N2
(5)질량분석기분석을위한이온
성분Precursor
ion(m/z)Fragment
ion(m/z)
비타민 B12 678 147, 359- 260 -현행 개정(안)
나)정량시험
표준용액과시험용액을각각주
입하여피크의머무름시간등을
비교하고동일물질인지정성확
인후표준용액피크의넓이또는
높이에의해구한검량선을사용
하여시험용액의비타민B12농도
(ng/mL)를구하고,다음식에의
하여검체중비타민B12의함량(μ
g/100kcal)을구한다.
비타민 B12
(μg/100 kcal) =S × a × b
×100
×100
검체량 (g) 1,0001g당 
kcal
S:시험용액중의비타민B12의농
도(ng/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:시험용액의희석배수
2.2.2.12∼2.2.2.14(생략)
2.2.2.15비오틴
가.액체크로마토그래프법
1)시험법적용범위
영아용조제식,성장기용조제식
등에적용한다.2.2.2.12∼2.2.2.14(현행과같음)
2.2.2.15비오틴
가.액체크로마토그래프(육방전환밸
브시스템)/자외부검출기또는
액체크로마토그래프/질량분석기
에의한정량
1)시험법적용범위- 261 -현행 개정(안)
2)분석원리
식품에함유된비오틴을0.01M
인산이수소칼륨(pH4.8)용액으
로추출하고,역상분배형칼럼
을이용한액체크로마토그라프
(육방전환밸브시스템)로UV200
nm에서분석한다.
3)장치
액체크로마토그래프(육방전환밸
브시스템)/자외선흡광검출기(UV
photometricdetector)
4)시약및시액
가)0.01M인산이수소칼륨용액
(pH4.8)：인산이수소이칼륨
1.35g을증류수에녹여1L
로한다.
나)표준원액:비오틴표준품
(99.9%)를증류수에녹여
1,000mg/L이되도록조제
한다.(4℃이하암소보관)
다)표준용액:표준원액을0.01
M인산이수소칼륨용액(pH
4.8)으로희석하여10mg/L
로조제한다.(사용시제조)
라)검량곡선표준용액:표준용액영아용조제식,성장기용조제식
등에적용한다.
2)분석원리
식품중의비오틴을추출용매로
추출한후면역친화성컬럼으로
정제하여자외부검출기또는질
량분석기가부착된액체크로마토
그래프로분석한다.
3)장치
가)액체크로마토그래프(육방전
환밸브시스템)/자외부검출
기
나)액체크로마토그래프/질량분
석기
다)정제용컬럼:비오틴용면역
친화성컬럼(Immunoaffinity
column)(회수율및재현성
등이검증된것)
라)질소농축기
4)시약및시액
가)0.01M인산이수소칼륨용액
(pH4.8):인산이수소칼륨
1.36g을증류수에녹여1L
로한다.
나)표준원액:비오틴표준품- 262 -현행 개정(안)
을0.01M인산이수소칼륨용
액으로희석하여정량하기에
적합한농도로3개이상조
제한다.(사용시제조)
마)기타시약:잔류농약시험용
또는HPLC용
5)시험용액의조제
균질화한검체(약5g)을50mL
갈색플라스크에정확히칭량하
고,0.01M인산이수소칼륨용액
을첨가하여50mL로정용하고
30분간초음파추출한후원심분
리관으로옮겨10분간shaker에
서격렬하게흔들어준다음,영
아용및성장기용조제식은0℃
에서14,000rpm으로90분간원
심분리한후중간층을취하여
0.22 μm의여과지(membrane
filter)로여과한후시험용액으로
사용하고비오틴첨가된식품은
0℃에서9,000rpm으로30분간
원심분리한후상층액을취하여
검량곡선표준용액농도범위에맞
도록0.01M인산이수소칼륨용액
으로희석하여시험용액으로사(99.9%)를0.01M인산이수
소칼륨용액에녹여100
mg/L이되도록조제한다.
(4℃이하암소보관)
다)표준용액:표준원액을0.01
M인산이수소칼륨용액으로
적절히희석하여표준용액
으로한다.(사용시제조)
라)0.15M인산나트륨완충액:
제 일 인 산 나 트 륨
(NaH2PO4·H2O)8.07g과
제 이 인 산 나 트 륨
(Na2HPO4·7H2O)18.36g을
물에녹인것을2M수산화
나트륨용액을이용하여pH
7.0으로조정한후1L로한
다.
마)PBS(Phosphatebuffered
saline)용액:시판되는
PBS완충제정제(tablet)
또는파우치(pouch)형태
를사용하여제조한다.(최
종완충액0.01M
phosphatebuffersaline,
0.138MNaCl,0.0027M- 263 -현행 개정(안)
용한다.
6)시험방법
가)고속액체크로마토그래프의
측정조건
(1)칼럼
(가)전처리컬럼：Capcellpak
MFSCX,SG80(4.6
mm×150mm,5μm)
또는이와동등한것]
(나)농축컬럼：Capcellpak
C18UG120V(2.0
mm×35mm,5μm)
또는이와동등한것
(다)분석컬럼：Capcellpak
C18UG120V(1.5
mm×250mm,5μm)
또는이와동등한것
(2)이동상
(가)전처리컬럼이동상：0.01
M인산이수소칼륨용액
(나)분석컬럼이동상：0.01M
인산이수소칼륨용액/메탄
올(80/20)
(3)유속
(가)전처리컬럼이동상：500KCl,pH7.4,25℃)
바)0.1%포름산:포름산을200
µL를넣은후증류수로녹
여200mL로한다.(질량분
석기로분석시사용)
사)0.1%포름산이함유된아세
토니트릴:포름산을200µL
넣은후아세토니트릴로녹
여200mL로한다.(질량분석
기로분석시사용)
아)기타시약:잔류농약시험용
또는HPLC용
5)시험용액의조제
가)추출
균질화한검체약1∼5g을달
아갈색원심분리관에취하고
0.15M인산나트륨완충액25
mL을넣고상온에서5분간초
음파추출한다음100℃수욕
상에서30분간추출하고상온으
로냉각한다.0.15M인산나트
륨완충액을가하여50mL로
정용하고균질화후0℃에서
22,000×g으로20분간원심분
리한다.이어서여과지- 264 -현행 개정(안)
μL/min
(나)분석컬럼이동상：100μ
L/min
(4)육방전환밸브의조작
전처리칼럼에서비오틴의피
크용출시간을확인하고농축
을위한육방전환밸브의조작
시간을설정한다.
(5)주입량:200μL
(6)검출기：자외부(UV)검출기
(200nm)
나)검량선작성
검량곡선표준용액을액체크로마
토그래프에200μL씩각각주입
하여얻어진크로마토그램상의
각피크의넓이를구하여검량
선을작성한다.
다)표준용액및시험용액의크
로마토그램
(WhatmanNo.2또는이와동
등한것)로여과한것을추출액
으로한다.
나)정제
냉장보관된정제용컬럼은실
온에30분방치한후컬럼내부
의완충용액을완전히제거한
다.추출액10mL를정제용컬
럼에주입하여추출액중비오
틴을정제용컬럼에흡착시킨
다.이어서PBS용액10mL와
증류수10mL주입하여불순물
을제거하고공기를주입하여
컬럼내에남아있는용액을제
거한다.정제용컬럼에흡착된
비오틴을메탄올4mL로시험
관에용출시킨다.용출액을7
0℃에서질소로건고시키고잔
류물에0.01M인산이수소칼륨
용액1mL를가하여녹인것을
시험용액으로한다.
6)시험방법
가)액체크로마토그래프의측정
조건
(1)칼럼- 265 -현행 개정(안)
그림1.표준용액및시험용액의크
로마토그램
라)정량한계:0.1mg/kg
7)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토
그램상의피크는어느측정조건
에서도표준용액피크의머무름
시간과일치하여야한다.
8)정량시험
정성시험과 똑같은조건에서
얻어진시험결과에의해피크면
적법에따라정량한다.
가)계산방법
비오틴 함량
(μg/100 kcal) =Y' ×V
×100
S 검체 1 g 당 kcal
Y'=검량곡선에대입하여얻은(가)전처리컬럼:Capcellpak
MFC8SG80(4.6mm×
150mm,5μm)또는이
와동등한것
(나)농축컬럼:CapcellpakC18
UG120V(2.0mm×35
mm,5μm)또는이와동
등한것
(다)분석컬럼:CapcellpakC18
UG120V(1.5mm×250
mm,5μm)또는이와동
등한것
(2)이동상
(가)전처리컬럼이동상:0.01
M인산이수소칼륨용액
(나)분석컬럼이동상:0.01M
인산이수소칼륨용액/메탄
올(90:10,v/v)
(3)유속
(가)전처리컬럼이동상:500μ
L/min
(나)분석컬럼이동상:100μ
L/min
(4)육방전환밸브의조작
전처리칼럼에서비오틴의피- 266 -현행 개정(안)
시험용액의농도(μg/mL)
V=시료추출에사용된용액의
부피(mL)
S=추출시료의무게(g)
크용출시간을확인하고농축
을위한육방전환밸브의조작
시간을설정한다.
(5)주입량:200μL
(6)검출기:자외부검출기(200
nm)
나)액체크로마토그래프/질량분
석기의조건
(1)액체크로마토그래프조건
(가)컬럼:ACQUITYUPLCⓇ
BEH(2.1mmx100
mm,1.7µm)또는이와
동등한것
(나)이동상
①이동상A:0.1%포름산
②이동상B:0.1%포름산이
함유된아세토니트릴
(다)이동상유속:0.2mL/min
(라)컬럼온도:40℃
(마)주입량:2µL시간(분)이동상
A(%)이동상
B(%)
0.01000
5.08020
5.20100
6.20100
7.01000
11.01000- 267 -현행 개정(안)
(2)질량분석기조건
(가)Ionization:ESIpositive
(나)Sourcetemperature:
120℃
(다)Collisiongas:N2(질소
또는비활성기체)
(라)Capillaryvoltage:3.5
kV
(마)질량분석기분석을위
한이온
다)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취
하여액체크로마토그래프또는
액체크로마토그래프/질량분석기
에각각주입한다.얻어진크로
마토마토그램상의각피크높
이또는피크면적을구하여검
량선을작성한다.
라)표준용액및시험용액의크로
마토그램
(1)액체크로마토그래프(육방전환
밸브시스템)/자외부검출기성분Precursor
ion(m/z)Fragment
ion(m/z)
비오틴 245 227, 166- 268 -현행 개정(안)
그림1.표준용액및시험용액의크
로마토그램.
(2)액체크로마토그래프/질량분석
기
그림2.표준용액및시험용액의크
로마토그램.
7)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토
그램상의피크는어느측정조건
에서도표준용액피크의머무름
시간과일치하여야한다.
8)정량시험
정성시험과똑같은조건에서얻
어진시험결과에의해피크면적
법에따라정량한다.
- 269 -현행 개정(안)
나.액체크로마토그래프-질량분석
기법
1)시험법적용범위
영아용조제식및성장기용조제
식,조제유류등에적용한다.
2)분석원리
시료에함유된비오틴을0.01M
인산이수소칼륨(pH4.8)용액으
로추출하고,역상컬럼으로분리가)계산방법
C:검량곡선에얻은시험용액의
농도(μg/mL)
a:시료추출에사용된용액의
부피(mL)
V1:정제용컬럼에주입한추출
액의부피(mL)
V2:정제후시험용액의최종부피
(mL)
b:시험용액의희석배수
S:검체채취량(g)
<삭제>비오틴함량
(µg/100g)=C×(a×V2×b)
×100
(S×V1)- 270 -현행 개정(안)
한후액체크로마토그래프/질량
분석기(LC-MS/MS)를이용하여
분석한다.
3)장치
액체크로마토그래프/질량분석기
(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)0.01M인산이수소칼륨용액
(KH2PO4):인산이수소칼륨
1.35g을증류수로녹여1L
로한다.(pH4.8)
나)표준원액:비오틴표준품
(99.9%)를증류수에녹여
100mg/L가되도록조제한
다.(4℃이하암소보관)
다)표준용액:표준원액을0.01
M인산이수소칼륨용액(pH
4.8)으로희석하여100µg/L
로조제한다.(사용시제조)
라)검량곡선표준용액:표준용액
을0.01M인산이수소칼륨용
액으로희석하여5,15,30,
45,60µg/L가되도록조제
한다.
마)기타시약:잔류농약시험용- 271 -현행 개정(안)
또는HPLC용
바)이동상
(1)0.1%포름산:포름산을
200µL를넣은후증류수
로녹여200mL로한다.
(2)0.1%포름산이함유된아세
토니트릴:포름산을200
µL넣은후아세토니트릴로
녹여200mL로한다.
5)시험용액의조제
시료약5g을정밀히달아50
mL갈색플라스크에넣고0.01
M인산이수소칼륨용액을첨가
하여시료를녹인후정용한다.
초음파추출기를이용하여30분
간추출한후,원심분리관으로
옮겨10분간진탕기에서격렬하
게흔들어준다.원심분리관에
추출액10mL과클로로포름10
mL를취하여10분간진탕기를
이용하여흔든후0℃에서
9,000rpm으로30분간원심분
리한다.상층액의일부를취하
여0.2µm나일론멤브레인필
터로여과하여시험용액으로한- 272 -현행 개정(안)
다.
6)시험방법
가)액체크로마토그래프/질량분
석기의조건
(1)컬럼:C18(2.1mmx100
mm,1.7µm)또는이와
동등한것
(2)이동상:
(가)이동상A:0.1%포름산
(나)이동상B:0.1%포름산
이함유된아세토니트릴
(3)이동상유량:0.2mL/min
(4)컬럼온도:40℃
(5)주입량:2µL
(6)이온화:ESIpositive
(7)분자량범위:100∼500
m/z시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
0.0100 0
5.08020
5.20100
6.20100
7.0100 0
11.0100 0
성분Precursor Fragment- 273 -현행 개정(안)
표1.액체크로마토그래프-질량분
석기분석을위한특성이온
나)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취
하여액체크로마토그래프-질량
분석기에각각주입한다.얻어
진크로마토그램상의m/z227
이온의피크높이또는면적을
구하여검량선을작성한다.
다)표준용액및시험용액의크
로마토그램
라)정량한계:3µg/kg
7)정성실험
위의조건에서얻어진크로마토
그램상의피크는어느측정조건ion(m/z)ion(m/z)
비오틴 245 227, 166
그림2.표준용액(30µg/L)및시험용액의
크로마토그램- 274 -현행 개정(안)
에서도표준용액피크의머무름
시간과일치하여야한다.
8)정량시험
위조건으로얻어진크로마토그
램상의피크가표준용액피크의
머무름시간과일치할때피크
높이또는면적을검량선에대입
하여정량한다.
비오틴함량(µg/100g)=C×SV×
C:검량곡선에얻은시험용액의
농도(µg/L)
V:시험용액의부피(L)
S:시료채취량(g)
100:단위환산계수
2.2.2.16∼2.2.2.17(생략)2.2.2.16∼2.2.2.17(현행과같음)
3.식품중식품첨가물시험법
3.1보존료
빵또는떡류,잼류,식육또는알
가공품,어육가공품,유가공품,식용
유지류,면류,음료류등식품에적
용한다.
3.1.1∼3.3(생략)
3.4착색료
3.4.1타르색소3.식품중식품첨가물시험법
3.1보존료
--------------- 식육가공품--
---------------------------
---------------------------
------.
3.1.1∼3..3(현행과같음)
3.4착색료
3.4.1타르색소- 275 -현행 개정(안)
가.모사염색법에의한분리․정성
법
1)시험법적용범위
과자류,빵또는떡류,잼류,식육
또는알가공품,어육가공품,두부
류또는묵류,면류,다류,음료
류,장류등식품에적용한다.
2)∼3.5(생략)
3.6발색제
식육또는알가공품,어육가공품
등식품에적용한다.
3.6.1(생략)가.모사염색법에의한분리․정성
법
1)시험법적용범위
---------------------- 식육
가공품--------------------
--------------------------
---------------------.
2)∼3.5(현행과같음)
3.6발색제
식육가공품또는알가공품,어육가
공품등식품에적용한다.
3.6.1(현행과같음)
4.∼5.(생략) 4.∼5.(현행과같음)
6.식품별규격확인시험법
6.1(생략)
6.2당류
6.2.1올리고당
가.프락토올리고당
1)장치
고속액체크로마토그래프
2)시약
(가)아세토니트릴∶HPLC용
(나)글리세롤∶특급
(다)에탄올∶특급(99.5%)
(라)규조토∶여과조제용(정제품)6.식품별규격확인시험법
6.1(현행과같음)
6.2당류
6.2.1올리고당
가.프락토올리고당
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절
검출기(refractiveindexdetector,
RI)
2)시약및시액
가)표준당
1-케스토즈(GF2)- 276 -현행 개정(안)
(마)80%에탄올∶99.5%에탄올
과물을80∶20(v/v)으로혼
합한다.
(바)5%글리세롤∶글리세롤5g
을취하여100mL메스플라
스크에넣고에탄올50mL
를넣어용해시킨후물로
표선까지채워내부표준물질
로사용한다(글리세롤외에
아라비노스도내부표준물질
로서사용할수있다).
3)표준용액의조제
1-케스토즈(GF2),니스토즈(GF3),
1-F프락토퓨라노실니스토즈
(GF4)를0.4g씩달아각각20
mL의메스플라스크에넣고약10
mL의물을넣어용해시킨후증
류수로표선까지채운것을표준
원액으로한다.표준원액1,2,3,
4,및5mL를정확히취하여각각
10mL용메스플라스크에옮겨넣
고,이에5%글리세롤1mL를넣
은뒤물로표선까지채운것을
표준용액으로한다.
4)시험용액조제니스토즈(GF3)
1-F프락토퓨라노실니스토
즈(GF4)
나)물:HPLC용
다)에탄올:HPLC용
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당을물로녹여20
mg/mL농도가되도록조제한
후혼합하여표준원액으로한
다.표준원액을물로희석하여
312.5∼5,000 μg/mL범위로조
제하여표준용액으로한다.
4)시험용액의조제
프락토올리고당으로서 0.2∼2g
이되도록검체를취해물20
mL에용해한후100mL로정
용한다(필요시1,000×g에서
10분간원심분리한다).상등액
25mL를취하여50mL메스플
라스크에옮겨넣고에탄올로
정용한다.이용액을0.45μm의
필터로여과하여시험용액으로
사용한다.
5)시험방법- 277 -현행 개정(안)
(가)유지를거의함유하지않은
시료의경우
프락토올리고당으로서 0.2~2g이
함유되도록적당량의검체를정
확히달아100mL용메스플라스
크에넣고이에물20mL를가
하여용해또는추출한다(가열하
면서혼합하던지초음파처리를
한다).용해되지않는물질이거
의없을때에는5%글리세롤용
액20mL를가한후증류수로
표선까지채운다.필요하면여과
(No.5B)하여사용한다.얻어진
액체25mL를정확히취하여50
mL용메스플라스크에옮겨넣고
표선까지에탄올로채워희석한
다.침전또는탁한것이생겼을
경우에는여과(No.5B)하고여
과액을시험용액으로한다.
주1.용해되지않는물질이많을
때에는추출액을여과(No.
5B)하면서100mL메스플
라스크에전가용물을옮겨
넣고이하똑같이처리한다.
(나)유지를많이함유한시료의가)액체크로마토그래프조건
(1)칼럼:Asahipak
NH2P-504E(4.6mmi.d.×
250mm×5μm)혹은이와
동등한것
(2)온도:40℃
(3)이동상:65%아세토니트
릴
(칼럼의종류나상태에따
라조성을달리할수있
다.아세토니트릴과물의
비율을65∶35에서70∶
30정도의차이로조정한
다.)
(4)유속:1.0mL/min
(5)검출기:시차굴절검출기
(RI)
6)정성시험
위의조건에서얻어진크로마토
그램상의피크는어느측정조
건에서도시험용액과표준용액
피크의머무름시간이일치하여
야한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을각각10- 278 -현행 개정(안)
경우
검체가액체인경우에는프락토
올리고당으로서0.2~2g함유되
도록적당량의검체를비커에
정확히달아필요하다면중화한
다(산성인채로가열조작하면
프락토올리고당류가 가수분해
되어버릴염려가있다).
여기에규조토를넣어잘혼합
한다(규조토의양은혼합한후
의상태가바슬바슬한정도).이
것은60±2℃에서2~4시간감압
건조한다.건조한뒤전량을원
통여과지에옮겨놓고,석유에테
르를사용하여속시렛지방추출
기로8~16시간탈지한다.탈지
후원통여과지안의전량을꺼
내서이하는위의(가)와같이
물로추출한다.시료가분말상
태인경우에는규조토를넣지
않고직접여과지에넣고이하
똑같이조작한다.
5)시험조작
(가)고속액체크로마토그래피조
건μL씩주입하여위의조건에서
시험한다.표준용액의피크면
적또는높이에의해구한검량
선을사용하여프락토올리고당
의농도(mg/mL)를구하고,다
음식에의해프락토올리고당
함량(%)을계산한다.
A:시험용액중의GF2의
농도(mg/mL)
B:시험용액중의GF3의농도
(mg/mL)
C:시험용액중의GF4의농도
(mg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:시험용액의희석배수프락토올리고당
함량(%)=(A+B+C)
×a×b×100
시료채취량(g) 1,000- 279 -현행 개정(안)
-칼럼∶μ-BondapakCH.
PNH2-10상당품(BiosilAmino
5S,ShodexRSpakDC-613,
NueleosilNH2,Lichrosorb
NH2등)
-이동상∶아세토니트릴∶물(65
∶35)(칼럼의종류나상태에
따라조성을달리할수있다.
아세토니트릴과물의비율을
65∶35에서70∶30정도의차
이로조정한다.소량의에틸
알코올을넣어조정할수도
있다)
-유속∶1.0mL/min
-검출기∶시차굴절계(RI)
(나)정량시험
프락토올리고당 표준용액을각
각10μL씩주입하여각프락토
올리고당과내부표준물질의크
로마토그램을얻어각프락토올
리고당과내부표준물질의피크
면적또는높이를구하고검량선
을작성한다.시험용액10μL를
주입하여프락토올리고당과 내
부표준물질의크로마토그램을- 280 -현행 개정(안)
얻은후각피크면적또는높이
를구하고다음식에의하여검
체중총프락토올리고당(GF2＋
GF3＋GF4)의함유량을구한다.
<계산>
총프락토올리고당 함량(%)＝(A＋B
＋C)×D×100
E×100
1000
A∶검량선에서구해진시험용액중
의GF2의농도(mg/mL)
B∶검량선에서구해진시험용액중
의GF3의농도(mg/mL)
C∶검량선에서구해진시험용액중
의GF4의농도(mg/mL)
D∶희석배수
E∶시료채취량(g)
나.이소말토올리고당
1)장치
고속액체크로마토그래프
2)시약
(가)50%알코올
(나)활성탄∶청주용또는당액
탈색용
(다)이온교환수지∶강산성형(H
형)및강알칼리형(OH형)나.이소말토올리고당
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절
검출기(RefractiveIndex
detector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
단당류—Glucose
이당류—Maltose- 281 -현행 개정(안)
(라)퍼라이트(Perlite)
(마)아세토니트릴∶HPLC용
(바)표준당
단당류—Glucose,Fructose
이당류—Maltose,*Isomaltose,
Sucrose,*Kojibiose,
*Nigerose
삼당류—Maltotriose,*Pannose,
*Isomaltotriose
사당류—Maltotetraose,
*Isomaltotetraose
오당류—Maltopentaose,
*Isomaltopentaose
육당류―Maltohexaose,
*Isomaltohexaose
칠당류―Maltoheptaose,
*Isomaltoheptaose
(*는이소말토올리고당의분기
당성분)
3)표준용제의조제
(가)배제형이온교환계∶각중합
도의직쇄당을정확하게50
mg씩달아탈기한증류수
50mL에녹이고,용해되기
어려울때는가온하여녹이삼당류—Maltotriose
사당류—Maltotetraose
오당류—Maltopentaose
육당류—Maltohexaose
칠당류—Maltoheptaose
나)물:HPLC용
다)50%에탄올
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당을물로녹여100
mg/mL농도가되도록조제한
후혼합하여표준원액으로한
다.표준원액을물로희석하여
625∼10,000 μg/mL범위로조
제하여표준용액으로한다.
4)시험용액의조제
이소말토올리고당으로서 약250
mg이되도록검체를취해물
또는50%에탄올(단백질을함
유한경우)15mL에용해한후
50mL로정용한다(필요시
1,000×g에서10분간원심분
리한다).이용액을0.45μm의
필터로여과하여시험용액으로
한다.- 282 -현행 개정(안)
고냉각후증류수100mL
로채워표준용액으로한다.
(나)역상분배계∶각분기당의표
준액100mg을증류수1mL
에용해한것을표준용액으
로한다.
4)시험용액조제
(가)유지를거의함유하지않은
검체인경우이소말토올리고
당이약500mg이되도록
시료를적당량(0.5~5g)을정
확히달아여기에물또는
50%알코올(단백질을함유
한경우)을30mL넣어서
가열하여용해,혹은추출한
다.추출액은약0.5g의활
성탄과이온교환수지(양이온
및음이온을1∶2로혼합한
것약1.5g)을사용하여정
제하고,전량을500mL로
하여시험용액으로한다.
(나)유지를많이함유한검체인
경우
이소말토올리고당적당량(0.5~5
g)을정확히달아분말인경우5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)배제형이온교환계
①칼럼:Asahipak
NH2-504E(4.6mmi.d×
250mm×5μm)혹은
이와동등한것
②칼럼온도:30℃
③이동상:65%
아세토니트릴
④유속:1.0mL/min
⑤ 검출기:
시차굴절검출기(RI)
(2)역상분배계
①칼럼:RSpak
DC-613(6.0mmi.d×150
mm×6μm)혹은이와
동등한것
②칼럼온도:50℃
③이동상:70%
아세토니트릴
④유속:0.8mL/min
⑤ 검출기:
시차굴절검출기(RI)
6)정성시험- 283 -현행 개정(안)
에는그대로추출기에넣고,시
료가액체인경우에는필요하다
면(pH4~10이외)중화한후퍼
라이트를부석부석하게될때까
지넣어서잘분산시켜8~16시
간탈지한다.탈지후원통여과
지안의전량을꺼내어위의
(가)와같이추출이후의조작
을한다.
주1.중합도2~5와거의같은
분자량인설탕,유당,프락토올
리고당,Couplingsugar및갈
락토올리고당이 혼재할경우에
는각각의측정법으로따로분
석한다.그러나이성화당,포도
당,물엿등의전분당이혼재할
경우에는이소말토올리고당의
분석을방해하지않는다.
5)시험조작
(가)고속액체크로마토그래피조
건
①배제형이온교환계
—칼럼∶∮8mm×200mm
MCIGELCKO4S상당품
—가드칼럼∶∮8mm×50위의조건에서 얻어진
크로마토그램상의피크는
어느측정조건에서도
시험용액과표준용액피크의
머무름시간이일치하여야
한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을각각
10 μL씩주입하여위의
조건에서 시험한다.
표준용액의피크면적또는
높이를구하여검량선을
작성한다.
가)배제형이온교환계에서
분석한피크면적또는
높이에의해각중합도의
함유량(mg/mL)이구해지며
그결과는다음과같다.
DP1(단당류):A
DP2(이당류):B
DP3(삼당류):C
DP4(사당류):D
DP5(오당류):E
DP6(육당류):F
DP7(칠당류):G- 284 -현행 개정(안)
mmMCIGELCKO8S상
당품
—칼럼온도∶65℃
—이동상∶물
—유속∶0.4mL/min
—검출기∶시차굴절계(RI)
②역상분배계
—칼럼∶∮4.6mm×250mm
TSKGELNH2-60상당
품
—칼럼온도∶35℃
—이동상∶아세토니트릴∶물
(63∶37)
—유속∶0.8mL/min
—검출기∶시차굴절
(RefractiveIndex)계
(나)정량시험
①검량선의작성∶표준용액을
5,10,15,20,25mL씩을넣
고증류수로각각50mL로
(이농도는25,50,75,100,
125mg/50mL가된다)한다
음10μL씩주입한후상당
하는직쇄상의피크에따라
서면적또는높이를읽어내나)역상분배계에서시료를분
석한Data의각당분함유율(%)
은다음과같다.
DP1Glucose
 A1
DP1Glucose이외의단당류
A2
DP2Maltose
B1
DP2Maltose이외의이당류
 B2
DP3Maltotriose
 C1
DP3Maltotriose이외의삼
당류 C2
DP4Maltotetraose
D1
DP4Maltotetraose이외의
사당류 D2
DP5Maltopentaose
 E1
DP5Maltopentaose이외의
오당류 E2
DP6Maltohexaose
 F1- 285 -현행 개정(안)
어검량선을작성한다.
②계산
㉮배제형이온교환계에서분
석한피크의면적또는높
이에의해구해진각중합
도의검량선에서각각의
중합도의함유량이구해지
며그결과는다음과같
다.
중합도DP1(단당류)∶A
중합도DP2(이당류)∶B
중합도DP3(삼당류)∶C
중합도DP4(사당류)∶D
중합도DP5(오당류)∶E
중합도DP6(오당류)∶F
중합도DP7(오당류)∶G
③역상분배계에서시료를분석
한Data의각당분함유율
(%)은다음과같다.
DP1Fructose A1
DP1Glucose A2
DP2Maltose B1
DP2Sucrose B2
DP2Isomaltose B3
DP2NigeroseB4DP6Maltohexaose이외의
육당류F2
DP7Maltoheptaose
 G1
DP7Maltoheptaose이외의
칠당류 G2
DP1Glucose(mg/mL)
A×A＋AA＝a
DP2Maltose(mg/mL)
B×B＋BB＝b
DP3Maltotriose(mg/mL)
C×C＋CC＝c
DP4
Maltotetraose(m g/mL)
D×D1
D1＋D2＝d
DP5
Maltopentaose(m g/mL)
E×E1
E1＋E2＝e
DP6
Maltohexaose(mg/mL)
F×F1
F1＋F2＝f- 286 -현행 개정(안)
DP2Gojibiose B5
DP3Maltotriose C1
DP3Pannose C2
DP3Isomaltotriose C3
DP3불명(분기당)C4
DP4Maltotetraose D1
DP4Isomaltotetraose D2
DP5Maltopentaose E1
DP5Isomaltopentaose E2
DP6이상 F
DP6IsomaltohexaoseF2
DP7Maltoheptaose G1
DP7Isomaltoheptaose G2
DP8이상 H
(주∶이소말토올리고당에는
DP4이상의직쇄당및DP8이상
의성분을포함하지않는다)
<계산>
DP1FructoseA
mg×A1
A1＋A2＝a1mg
DP1GlucoseA
mg×A2
A1＋A2＝a2mg
DP2MaltoseB
mg×B1
B1＋B2＋B3＋B4＋B5＝DP7
Maltoheptaose(m g/mL)
G×G1
G1＋G2＝g
이소말토올리고당
함량(%)=100-[(a+b+c+d+e+f+g)
×h×i×100
]
시료채취량(g) 1,000
h:시험용액의전량(mL)
i:시험용액의희석배수- 287 -현행 개정(안)
b1mg
DP2SucroseB
mg×B2
B1＋B2＋B3＋B4＋B5＝
b2mg
DP2Isomaltose B
mg×B3
B1＋B2＋B3＋B4＋B5＝
b3mg※
DP2NegeroseB
mg×B4
B1＋B2＋B3＋B4＋B5＝
b4mg※
DP2Kojibiose B
mg×B5
B1＋B2＋B3＋B4＋B5＝
b5mg※
DP3MaltotrioseCmg
×C1
C1＋C2＋C3＋C4＝c1mg
DP3PannoseCmg
×C2
C1＋C2＋C3＋C4＝c2mg
※
DP3Isomaltotriose C
mg×C3
C1＋C2＋C3＋C4＝c3
mg※
DP3불명(분기당)Cmg- 288 -현행 개정(안)
×C4
C1＋C2＋C3＋C4＝c4mg
※
DP4Maltotetraose D
mg×D1
D1＋D2＝d1mg
DP4Isomaltotetraose D
mg×D2
D1＋D2＝d2mg※
DP5Maltopentaose E
mg×E1
E1＋E2＝e1mg
DP5Isomaltopentaose E
mg×E2
E1＋E2＝e2mg※
DP6이상F
mg＝fmg
DP6MaltohexaoseF
mg×F1
F1＋F2＝f1mg
DP6IsomaltohexaoseF
mg×F2
F1＋F2＝f2mg※
DP7Maltoheptaose G
mg×G1
G1＋G2＝g1mg
DP7Isomaltoheptaose G
mg×G2
G1＋G2＝g2mg※
DP8이상H- 289 -현행 개정(안)
mg＝hmg
결국시료채취량을Img으로하
고희석배수를Ｌ로하면,위의
※은모두분기당이므로분기당
함유량(%)＝(b3＋b4＋b5＋c2＋
c3＋c4＋d2＋e2＋f2＋g2)
×L÷I×100으로한다.
다.갈락토올리고당(전이갈락토올리
고당)
1)장치
고속액체크로마토그래프
2)시약
(가)20%(w/v)설포살리실린산용
액(Sulfosalicylicacid)∶시
약특급의설포살리실린산20
g에물을넣어용해시켜100
mL로한다.
(나)Ribose∶시약특급
(다)Arabinose∶시약특급
3)표준용액의조제
갈락토올리고당2g을정확히달
아물에녹여50mL로한다.
4)시험용액조제
갈락토올리고당이 약0.1~1g포
함되도록검체적당량을정확히다.갈락토올리고당(전이갈락토올리
고당)
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절
검출기(RefractiveIndex
detector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
Glucose
Galactose
Lactose
Galactooligosaccharides표
준품(순도70%이상)
나)물:HPLC용
다)20%(w/v)설포살리실린산
용액:설포살리실산
(Sulfosalicylicacid)20g에- 290 -현행 개정(안)
달아물을가해용해시킨후50
mL로한다.이용액을0.45μm의
필터로여과시켜이를시험용액으
로한다.
주1.단백질제거조작이필요한
시료에대해서는설포살리실린산
을여러방울첨가하여생긴불용
성단백질을원심분리로제거하든
가SeppakC18cartridge를통과
시키든가한다.이들의제작을요
하는경우에는내부표준으로서
Ribose또는Arabinose를사용한
다.
주2.유지를많이함유한시료의
경우시료의전처리는프락토올리
고당의분석법의전처리방법에준
한다.
주3.시료중에갈락토올리고당이
외의3~6당류인올리고당이존
재할경우에는해당하는올리고당
분해효소에의해단당류,2당류로
분해하고나서분석한다.그러나
이성화당,설탕이나다당류의존
재는갈락토올리고당의분석을방
해하지않는다.물을넣어용해시켜100mL
로한다.
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당(Glucose,galactose,
lactose는 1g씩,
galactooligosaccarides는4g)을
물20mL로녹여50mL로정
용한후혼합하여표준원액으로
한다.표준원액을이동상으로
희석하여gucose,galactose,
lactose는2,000∼10,000 μg/mL,
galactooligosaccarides는8,000
∼40,000 μg/mL범위로조제하
여표준용액으로한다.
4)시험용액조제
갈락토올리고당으로서 0.1∼1g
이되도록검체를취해물20
mL에용해한후50mL로정용
한다.단,단백질제거조작이
필요한시료에대해서는20%
설포살리실산용액을여러방울
첨가하여생긴불용성단백질을
1,000×g에서10분간원심분리
하여제거한다.이용액을0.45- 291 -현행 개정(안)
5)시험조작
(가)고속액체크로마토그래프조
건
—칼럼∶ShodexIonpak
KS-802상당품및역상
aminocolumn
—칼럼온도∶80℃
—이동상∶물
—유속∶0.4mL/min
—검출기∶시차굴절계(RI)
(나)정량시험
갈락토올리고당표준용액을2,4,
6,8및10mL를20mL용메스
플라스크에정확하게취하여물
로눈금을맞춘다음,각각10μ
L씩고속액체크로마토그래프에
주입시켜피크의면적또는높이
를읽어내어검량선을작성한다.
검체중의갈락토올리고당의 함
량(%)은다음식으로구한다.
갈락토올리고당(%)
Bmg/mL×50mL
Ag×100
1000
A∶시료채취량(g)
B∶검량선에서구한갈락토올
리고당의농도(mg/mL)μm의필터로여과하여시험용
액으로사용한다.
5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)배제형이온교환계
①칼럼:Shodex
SC1011(8.0mmi.d×
300mm×6μm)혹은
이와동등한것
②칼럼온도:80℃
③이동상:물
④유속:0.4mL/min
⑤검 출기:
시차굴절검출기(RI)
(2)역상분배계
①칼럼:TSKGELNH2
-100(4.6mmi.d×150
mm×3μm)혹은이와
동등한것
②칼럼온도:35℃
③이동상:70%
아세토니트릴
④유속:0.8mL/min
⑤검출기:
시차굴절검출기(RI)- 292 -현행 개정(안)
6)정성시험
위의조건에서 얻어진
크로마토그램상의피크는
어느측정조건에서도
시험용액과표준용액피크의
머무름시간이일치하여야
한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을배제형
이온교환계에서는2μL,역상분
배계에서는10μL씩주입하여
위의조건에서시험한다.표준
용액의피크면적또는높이에
의해구한검량선을사용하여
갈락토올리고당의 비율(%)을
구하고,다음식에의해갈락토
올리고당함량(%)을계산한다.
A:배제형이온교환계에서
구한전체당함량중
포도당이차지하는비율
B:배제형이온교환계에서
구한전체당함량중
갈락토스가차지하는비율갈락토올리고당함량(%)=100-[A+B+(C×D)]100- 293 -현행 개정(안)
라.갈락토올리고당(라피노스,스타
치오스)
1)시약
(가)설포살리실린산(Sulfosalicylic
acid)
(나)락토올리고당(Raffinose,
Stachyose)표준용액
각갈락토올리고당을각각0.6g
씩정확하게취하여물에넣고
용해시켜20mL로한다.
2)시험용액조제
(가)유지를거의함유하지않은
시료인경우
검체적당량(각갈락토올리고당
0.07~0.7g함유한양)을정확히
달아물을가하여용해혹은추
출하여50mL로한다.이용액
을0.45μm의필터로여과한다.
(나)유지를많이함유한시료인
경우C:배제형이온교환계에서
구한전체당함량중
이당류가차지하는비율
D:역상분배계에서구한
이당류중유당이차지하는
비율
라.갈락토올리고당(라피노스,스타
치오스)
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절
검출기(RefractiveIndex
detector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
Raffinose
Stachyose
나)물:HPLC용
다)20%(w/v)설포살리실린산
용액:설포살리실산
(Sulfosalicylicacid)20g에
물을넣어용해시켜100mL
로한다.
라)아세토니트릴:HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당을물로녹여10- 294 -현행 개정(안)
검체가액체인경우에는그적
당량(위의(가)와같음)을정확
히재고,필요하다면중화한다.
여기에규조토를넣고잘혼합
한다.60±2℃에서2~4시간감압
건조한다.건조후전량을원통
여과지에옮겨넣고석유에테르
를사용하여속시렛지방추출
기로8~16시간탈지한다.탈지
후원통여과지안의전량을꺼내
서이하상기(가)와같이조작
한다.시료가분말상태인경우
에는규조토를넣지않고직접
원통여과지에넣어이하똑같이
조작한다.
주1.시료에단백질이함유된
경우0.2g/mL설포살리실린산
수용액을수방울가해단백질을
제거한다.또한덱스트린이검
체중에혼재하는경우는글루코
아밀라제(Glucoamylase)로분
해한다.
3)시험조작
(가)고속액체크로마토그래피조
건mg/mL농도가되도록조제한
후혼합하여표준원액으로한다.
표준원액을물로희석하여312.5
∼5,000 μg/mL범위로조제하여
표준용액으로한다.
4)시험용액조제
각갈락토올리고당으로서 0.01∼
0.1g이되도록검체를취해물
20mL에용해한후50mL로정
용한다.단,단백질제거조작이
필요한시료에대해서는20%설
포살리실산용액을여러방울첨
가하여생긴불용성단백질을
1,000×g에서10분간원심분리
하여제거한다.이용액을0.45μ
m의필터로여과하여시험용액
으로한다.
5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)칼럼:Asahipak
NH2P-504E(4.6mmi.d
×250mm×5μm)혹은
이와동등한것
(2)칼럼온도:35℃
(3)이동상:65%- 295 -현행 개정(안)
—칼럼∶ShodexIonpak
KS-802상당품
—칼럼온도∶70℃
—이동상∶물
—유속∶1.0mL/min
—검출기∶시차굴절계(RI)
(나)정량시험
갈락토올리고당표준용액을1,
2,3,4및5mL를10mL용메
스플라스크에정확하게취하여
물로눈금을맞춘다음,각각
10μL씩고속액체크로마토그래
프에주입시켜피크의높이또
는면적을읽어내어검량선을
작성한다.검체중의갈락토올리
고당의함량(%)은다음식으로
구한다.
갈락토올리고당(%)＝(A＋B)×
50
C×100
1000
A∶검량선에서구한갈락토올리
고당의농도(mg/mL)
B∶검량선에서구한시험용액중
의갈락토올리고당의 농도
(mg/mL)
C∶시료채취량(g)아세토니트릴
(4)유속:1.0mL/min
(5) 검출기:
시차굴절검출기(RI)
6)정성시험
위의조건에서 얻어진
크로마토그램상의피크는
어느측정조건에서도
시험용액과표준용액피크의
머무름시간이일치하여야
한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을각각
10 μL씩주입하여위의
조건에서 시험한다.
표준용액의피크면적또는
높이에의해구한검량선을
사용하여 갈락토올리고당의
비율(%)을구하고,다음식에
의해 갈락토올리고당
함량(%)을계산한다.
갈락토올리고당
함량(%)=A+B×a×b×100
시료채취량(g)1,000
A:시험용액중의라피노스의
농도(mg/mL)- 296 -현행 개정(안)
마.(생략)
바.자일로올리고당
1)장치
고속액체크로마토그래프
2)시약
(가)물:HPLC용
(나)아세토니트릴:HPLC용
(다)퍼라이트(Perlite)
(라)표준당
이당류-xylobiose
삼당류-xylotriose
사당류-xylotetraose
오당류-xylopentaose
육당류-xylohexaose
3)표준용액의제조
각중합도의자일로올리고당이 약
50~100mg포함되도록검체적당
량을정확히달아탈기한물50
mL에녹이고이용액을0.45μm
의필터로여과시켜이를표준용
액으로한다.B:시험용액중의스타치오스
의농도(mg/mL)
a:시험용액의전량(mL)
b:시험용액의희석배수
마.(현행과같음)
바.자일로올리고당
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절
검출기(refractiveindexdetector,RI)
2)시약및시액
가)표준당
이당류-xylobiose
삼당류-xylotriose
사당류-xylotetraose
오당류-xylopentaose
육당류–xylohexaose
나)물:HPLC용
다)아세토니트릴
(Acetonitrile):HPLC용
3)표준용액의조제
각표준당을물로녹여100
mg/mL농도가되도록조제한
후혼합하여표준원액으로한다.
표준원액을물로희석하여1∼5- 297 -현행 개정(안)
4)시험용액의제조
(가)유지를거의함유하지않은
시료의경우
시료3g을정확히담아물을가
해용해하여30mL가되게한
다.이용액을0.45μm의필터로
여과시켜이를시험용액으로한
다.
(나)유지를많이함유한시료의
경우
시료3g을정확히달아분말인
경우에는그대로추출기에넣고,
시료가액체인경우에는필요하
다면중화후퍼라이트를부석부
석할때까지넣고분산시켜8~16
시간동안탈지한다.탈지후원
통여과지내의전량을회수하여
(가)와같이이하똑같이조작한
다.
5)시험조작
(가)고속액체크로마토그래피조
건
—칼럼:Carbohydratecolumn
4.6×250mm또는이에상응
하는칼럼mg/mL범위로조제하여표준용
액으로한다.
4)시험용액의조제
자일로올리고당이 약100mg
되도록검체를취해물20mL
에용해한후50mL로정용한
다.이용액을0.45μm의필터
로여과하여시험용액으로한
다.
5)시험방법
가)액체크로마토그래프조건
(1)칼럼:RSpakDC613
column(6.0mmi.d×
150mm×6μm)혹은
이와동등한것
(2)칼럼온도:50℃
(3)이동상:67%아세토니트릴
(칼럼의종류나상태에따
라조성을달리할수있
다.)
(4)유속:0.8mL/min
(5)검출기:시차굴절검출기(RI)
6)정성시험
위의조건에서 얻어진
크로마토그램상의피크는- 298 -현행 개정(안)
—칼럼온도:상온
—이동상:아세토니트릴:물
(75：25)(칼럼의종류나상태
에따라조성을달리할수
있다)
—유속:1.2mL/min
—검출기:시차굴절계(RI
detector)
(나)정량시험
각농도의표준용액을10μL씩
주입하여분석한후검량선의횡
축은자일로올리고당(mg),종축
은크로마토그램피크의면적을
읽어검량선을작성한다.시료중
의자일로올리고당의 함량(%)은
다음식으로구한다.
자일로올리고당 함량(%)=
(A＋B＋C＋D＋E)mɡ
시료채취량(mɡ)×희석배수×100
xylobioseAmg
xylotrioseBmg
xylotetraoseCmg
xylopentaoseDmg
xylohexaoseEmg
사.겐티오올리고당
1)장치어느측정조건에서도
시험용액과표준용액피크의
머무름시간이일치하여야
한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을각각5
μL씩주입하여위의조건에서
시험한다.표준용액의피크
면적또는높이에의해구한
검량선을사용하여
자 일 로 올 리 고 당 의
농도(mg/mL)를구하고,다음
식에의해자일로올리고당
함량(%)을계산한다.
자일로올리고당함량(%)=(A+B+C+D+E)
×a×b×100
시료채취량(g)
A:시험용액중의xylobiose의
농도(mg/mL)
B:시험용액중의xylotriose의
농도(mg/mL)
C:시험용액중의xylotetraose의
농도(mg/mL)
D:시험용액중의xylopentaose의
농도(mg/mL)
E:시험용액중의xylohexaose의
농도(mg/mL)- 299 -현행 개정(안)
고속액체크로마토그래프
2)시약
(가)물:HPLC용
(나)SodiumHydroxide
(다)Sodiumacetate
(라)퍼라이트(Perlite)
(마)표준당
이당류Gentiobiose,Cellobiose
3)표준용액의조제
Gentiobiose와Cellobiose가약
50~100mg포함되도록검체적
당량을정확히달아탈기한물1
L에녹이고이용액을0.45㎛의
필터로여과시켜이를표준용액
으로한다.
4)시험용액의조제
(가)유지를거의함유하지않은
검체인경우
시료100mg을정확히담아물
을가해용해하여1L가되게
한다.이용액을0.45㎛의필터
로여과시켜이를시험용액으로
한다.
(나)유지를많이함유한검체인
경우a:시험용액의전량(mL)
b:시험용액의희석배수
사.겐티오올리고당
1)장치
액체크로마토그래프-시차굴절검
출기(refractiveindexdetector,
RI)
2)시약및시액
가)표준당
단당류(DP1):Glucose,Fructose
이당류(DP2):Gentiobiose,
Cellobiose,Maltose
나)물:HPLC용
다)0.3MSodiumhydroxide
solution
라)0.5MPMP용액
(1-phenyl-3-methyl-5-py
razolone,PMP):PMP시약
4.36g을메탄올에녹여50
mL가되도록한다.
마)0.3MHydrochloridesolution
바)Chloroform
사)0.01MPotassiumphosphate
monobasicbuffer:Potassium- 300 -현행 개정(안)
시료100mg을정확히달아분
말인경우에는그대로추출기에
넣고시료가액체인경우에는필
요하다면중화후퍼라이트를부
석부석할때까지넣고8~16시간
동안탈지한다.탈지후원통여
과지내의전량을회수하여(가)
와같이이하똑같이조작한다.
5)시험조작
(가)고속액체크로마토그래피조
건(1)
—칼럼:PA-1Column4.6×
250mm또는이에상응하는
칼럼
—칼럼온도:상온
—이동상:
A:150mMSodiumHydroxide
B:150mMSodiumHydroxise
+600mMSodiumAcetate
—유속:1.0mL/min
—검출기:Pulsed
AmperometricDetecter
(나)고속액체크로마토그래피조
건(2)
—칼럼:AminexHPX-42Aphosphatemonobasic2.7218
g을물에녹여2L가되도록
한다.
아)0.01MPotassiumphosphate
dibasicbuffer:Potassium
phosphatedibasic3.4836g을
물에녹여2L가되도록한다.
자)0.01MPotassiumphosphate
buffer(pH6.7):사)용액에아)
용액을첨가하여pH6.7로조
정한다.
차)아세토니트릴:HPLC용
카)Methanol
3)표준용액의조제
가)배제형이온교환계
Glucose,fructose,maltose,
gentiobiose,cellobiose를각각
물로녹여50,000 μg/mL농도가
되도록조제한후혼합하여표준
원액으로한다.표준원액을물로
희석하여500∼4,000 μg/mL범
위로조제하여표준용액으로한
다.
나)역상분배계
Glucose,maltose,gentiobiose,- 301 -현행 개정(안)
Column7.8×300mm또
는이에상응하는배제형
이온교환계
—칼럼온도:85℃
—이동상:물
—유속:0.6mL/min
—검출기:시차굴절계(RI)
(다)정량시험
①검량선작성
각농도의표준용액을10μL
씩주입하여분석한후검량
선의횡축은겐티오올리고당
(mg),종축은크로마토그램
피크의면적을읽어검량선을
작성한다.
②계산
배제형이온교환계에서분석
한피크의면적또는높이에
의해구해진각중합도의검
량선에서각각의중합도의함
유량이구해지며그결과는
다음과같다.
중합도DP1(단당류):A
중합도DP2(이당류):B
중합도DP3이상(3당류이상):Ccellobiose를각각물로녹여
1,000 μg/mL농도가되도록조
제한후혼합하여표준원액으로
한다.표준원액을물로희석하여
25∼200μg/mL범위로조제하
여표준용액으로한다.
4)시험용액의조제
가)배제형이온교환계
겐티오올리고당으로서 약
100mg이되도록검체를
취해물10mL에용해한후
물을사용하여적당한농도
로희석한다.이용액을
0.45μm의필터로여과하여
이를시험용액으로한다.
나)역상분배계
겐티오올리고당으로서 약
10mg이되도록검체를취
해물10mL에용해한다.
시료및각농도의표준용
액100μL를각각1.5mL
tube에취하고0.3M
NaOH100μL를첨가한다.
0.5MPMP100μL를첨가
하고혼합하여70℃수조에- 302 -현행 개정(안)
PA-1칼럼에서시료를분석한
Data의각당분함유율(%)은다
음과같다.
DP1Fructose A₁
DP1Glucose A₂
DP2Maltose B₁
DP2Gentiobiose B₂
DP2Cellobiose B₃
DP3이상 C
<계산>
DP1FructoseAmg×
A1
A1＋A2=a₁mg
DP1GlucoseAmg×
A2
A1＋A2=a₂mg
DP2MaltoseBmg×
B1
B1＋B2＋B3=b₁mg
DP2GentiobioseBmg×
B2
B1＋B2＋B3=b₂mg
DP2CellobioseBmg×
B3
B1＋B2＋B3=b₃mg
겐티오올리고당의함량(%)=(b
₂+b₃)mg÷시료채취량mg
×희석배수×100서1시간유도체화후냉각
한다.0.3MHCl100μL를
첨가하여중화한후CHCl3
1mL를넣고20,000×g에
서5분간원심분리한다.상
층액을취해CHCl31mL를
첨가하고혼합하여20,000
×g에서5분간원심분리한
다(2회반복).상층액을취
해0.45μm의필터로여과
하여이를시험용액으로한
다.
5)시험방법
가)배제형이온교환계
(1)칼럼:ShodexKS801
Column(8.0mmi.d×
300mm×6μm)혹은
이와동등한것
(2)칼럼온도:80℃
(3)이동상:물
(4)유속:0.8mL/min
(5)검출기:시차굴절검출기
(RI)
나)역상분배계
(1)칼럼:ShiseidoUG120C18- 303 -현행 개정(안)
Column(4.6mmi.d×250
mm×5μm)혹은이와동
등한것
(2)칼럼온도:35℃
(3)이동상:A:B=83:17
A:0.01MPotassium
phosphatebuffer(pH6.7)
B:Acetonitrile
(4)유속:0.8mL/min
(5)검출기:PDA
6)정성시험
위의조건에서 얻어진
크로마토그램상의피크는
어느측정조건에서도
시험용액과표준용액피크의
머무름시간이일치하여야
한다.
7)정량시험
표준용액과시험용액을각각5
μL씩주입하여위의조건에서
시험한다.표준용액의피크
면적또는높이를구하여
검량선을작성한다.
가)배제형이온교환계에서분석
한피크의면적또는높이에- 304 -현행 개정(안)
의해각중합도의함유량
(mg)이구해지며그결과는
다음과같다.
DP1(단당류):A
DP2(이당류):B
DP3이상(3당류이상):C
나)역상분배계에서시료를분석
한Data의각당분함유율
(%)은다음과같다.
DP1FructoseA₁
DP1GlucoseA₂
DP2MaltoseB₁
DP2Gentiobiose B₂
DP2CellobioseB₃
DP3이상C
DP2GentiobioseBmg×
B2
B1＋B2＋B3=b₂mg
DP2CellobioseBmg×
B3
B1＋B2＋B3=b₃mg
겐티오올리고당
함량(%)=b2+b3×d×100시료채취량(mg)
d:시험용액의희석배수- 305 -현행 개정(안)
6.2.2∼6.6.4.2(생략)
6.6.4.3페로시안화이온
가.액체크로마토그래피에의한정
성및정량
1)∼2)(생략)
3)시약및시액
가)이동상:0.2M과염소산나
트륨(NaClO4)/0.02M수산
화나트륨(NaOH)용액
나)(생략)
다)표준용액：페로시안화칼륨,
페로시안화나트륨또는페로
시안화칼슘의일정량을0.02
M수산화나트륨용액에녹
여표준원액(페로시안화이온
으로서1mg/mL)을조제하
고,표준원액을0.02M수산
화나트륨용액으로희석하여6.2.2∼6.6.4.2(현행과같음)
6.6.4.3페로시안화이온
가.액체크로마토그래피에의한정
성및정량
1)∼2)(현행과같음)
3)시약및시액
가)이동상:0.2M과염소산나
트륨과0.02M수산화나트
륨이함유된용액(과염소산
나트륨(순도98%이상)25
g과수산화나트륨(순도97%
이상)0.82g을정밀히달아
물을가하여1,000mL로한
다.다만,시약의순도에따
라첨가량을조정할수있
다.)
나)(현행과같음)
다)-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
-----------------------
------------------------ 306 -현행 개정(안)
0.1～10mg/mL(페로시안화
이온으로서)로조제한다.
4)(생략)
5)시험조작
가)액체크로마토그래프의측정
조건
(1)～(2)(생략)
(3)이동상：0.2M과염소산나
트륨(NaClO4)/0.02M수산화
나트륨(NaOH)용액
(4)∼(5)(생략)
6)∼7)(생략)
6.7∼6.14(생략)-----------------------
0.1～10ug/mL----------
-------------------.
4)(현행과같음)
5)시험조작
가)액체크로마토그래프의측정
조건
(1)～(2)(현행과같음)
(3)이동상：0.2M과염소산나
트륨과0.02M수산화나트
륨이함유된용액
(4)∼(5)(현행과같음)
6)∼7)(현행과같음)
6.7∼6.14(현행과같음)
7.식품중잔류농약분석법
7.1∼7.1.4.232(생략)
<신설>7.식품중잔류농약분석법
7.1∼7.1.4.232(현행과같음)
7.1.4.233아사이노나피르(Acynonapyr)
가.시험법적용범위
곡류,서류,두류,과일류,채소
류등의식품에적용한다.
나.분석원리
검체중아사이노나피르및대
사산물(AP,3-endo-[2-proxy-4
-(trifluoromethyl)phenoxy]-9-
azabicyclo[3,3,1]nonane)을아세- 307 -현행 개정(안)
토니트릴로추출한후d-SPE(di
spersive-solidphaseextraction)
로정제하여액체크로마토그래
프-질량분석기로분석한다.
다.장치
1)액체크로마토그래프-질량분석기
(LC-MS/MS)
라.시약및시액
1)용매:잔류농약시험용또는
특급
2)물:3차증류수또는이와
동등한것
3)표준원액:아사이노나피르
및대사산물(AP)표준품을각
각아세토니트릴에녹여1,000
mg/L가되게한다.
4)표준용액:표준원액을무처
리시료추출물을이용하여적
당한농도로혼합,희석한다(무
처리시료추출물90%이상
포함).
5)d-SPE:무수황산마그네슘
(MgSO4,Anhydrousmagnesium
sulfate),1차2차아민(PSA,
Primarysecondaryamine)- 308 -현행 개정(안)
6)기타시약:잔류농약시험용
또는특급
7)특이사항:대사산물(AP)은
유리벽면에흡착할가능성이
있으므로모든시험과정은폴
리프로필렌으로된용기를사
용한다.
마.시험용액의조제
1)추출
검체를분쇄하여균질화한후
5g(곡류및두류는약1kg을
혼합하여표준체420μm를통
과하도록분쇄한후5g,서류,
과일류및채소류는약1kg을
분쇄한후5g)을정밀히달아
50mL원심분리관에넣고(곡
류및두류의경우증류수5
mL첨가후30분간방치)아
세토니트릴20mL를가한뒤
1N수산화나트륨용액을첨가
하여추출용액의pH를10으로
조절한뒤10분간진탕한다.진
탕후추출물에염화나트륨4
g을추가하여1분간흔들고
4℃,4,000G에서10분간원심- 309 -현행 개정(안)
분리하여상층액1mL를취한
다.
2)정제
무수황산마그네슘150mg과1
차2차아민25mg이담긴2
mL원심분리관에‘1)추출’로부
터얻은아세토니트릴상층액
을30초간와류교반기등을이
용하여충분히혼합한후이를
4℃,4,000G에서10분간원심
분리한다.정제된상층액을멤
브레인필터(PTFE,0.2μm)로
여과한후시험용액으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프분석조건
가)컬럼:C18계역상컬럼또는
이와동등한것
나)컬럼온도:40℃
다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함유
메탄올
(2)이동상B:0.1%포름산함유
물
(3)농도구배조건- 310 -현행 개정(안)
시간(분)A(%)B(%)
0.05050
2.05050
4.08020
8.01000
9.01000
9.15050
12.05050
라)이동상유속:0.3mL/분
마)주입량:2μL
2)질량분석기분석조건
가)이온화방법:ESIpositive-ion
mode
나)Capillaryvoltage:1.0kV
다)Collisiongas:아르곤(Ar)
표.액체크로마토그래프-질량분석기
분석을위한특성이온
분석성분
(Compound)평균
분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursorion,
[M+H]+,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
아사이노나피르
(Acynonapyr)504.5504.185053421)10
9626
12232
AP343.4343.17344821)32
9632
12424
1)정량이온이며,그외는정성이온
임.
※각생성이온에대한질량분석기의
기기조건은사용기기의최적값으
로변경하여사용할수있으며,제시
된이외의생성이온도적용이가능함.- 311 -현행 개정(안)
3)검량선작성
표준용액을농도별로일정량
취하여액체크로마토그래프-질량
분석기에각각주입하여얻은
크로마토그램상의각피크높이
또는면적값으로검량선을작성
한다.
4)표준품의크로마토그램
그림.
액체크로마토그래프-질량분석기에서
표준품의크로마토그램
A:아사이노나피르(7.5분),
B:AP(3.9분)
*분석기기:LC(WatersⓇAcquity
UPLC),
MS/MS(WatersⓇXevoTQ-S),
컬럼(CapcellPakC18MGⅡ(3.0mmI.D.×
150mmL.,3.0μm)- 312 -현행 개정(안)
<신설>5)정량한계
0.01mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토
그램상의피크가표준용액피크의
머무름시간과일치할때피크
높이또는면적을검량선에대입
하여정량한다.
*아사이노나피르의잔류량=아
사이노나피르의잔류량＋(환
산계수×대사산물(AP)의잔류
량)
*환산계수=1.47(아사이노나피
르분자량505/AP분자량343)
아.확인시험
액체크로마토그래프-질량분석기
상의머무름시간과특성이온으로
아사이노나피르및대사산물(AP)
을확인한다.
7.1.4.234아피도피로펜(Afidopyropen)
가.시험법적용범위
곡류,서류,두류,과일류,채소
류등의식품에적용한다.- 313 -현행 개정(안)
나.분석원리
검체중아피도피로펜을포름산함
유아세토니트릴로추출한후d-S
PE(dispersive-solidphaseextracti
on)로정제하여액체크로마토그래
프-질량분석기로분석한다.
다.장치
1)액체크로마토그래프-질량분석기
(LC-MS/MS)
라.시약및시액
1)용매:잔류농약시험용또는
특급
2)물:3차증류수또는이와
동등한것
3)표준원액:아피도피로펜표준품을
아세토니트릴에녹여1,000mg/L가
되게한다.
4)표준용액:표준원액을무처리
시료추출물을이용하여적당한
농도로혼합,희석한다(무처리시
료추출물90%이상포함).
5)d-SPE:무수황산마그네슘
(MgSO4,Anhydrousmagnesium
sulfate),1차2차아민(PSA,
Primarysecondaryamine),C18- 314 -현행 개정(안)
(Octadecylbondedsilica)
6)기타시약:잔류농약시험용
또는특급
마.시험용액의조제
1)추출
검체를분쇄하여균질화한후
5g(곡류및두류는약1kg을
혼합하여표준체420μm를통
과하도록분쇄한후5g,서류,
과일류및채소류는약1kg을
분쇄한후5g)을정밀히달아
50mL원심분리관에넣고(곡류
및두류의경우증류수5mL
첨가후30분간방치)0.1%포
름산함유아세토니트릴20
mL를가한뒤10분간진탕한
다.진탕후추출물에무수황산
마그네슘4g과염화나트륨1g,
구연산이나트륨·1.5수화물0.5
g,구연산삼나트륨·2수화물1g
을추가하여1분간흔들고4℃,
4,000G에서10분간원심분리
하여상층액1mL를취한다.
2)정제
무수황산마그네슘150mg과1차- 315 -현행 개정(안)
2차아민25mg,C1825mg이
미리담겨져있는2mL원심
분리관에‘1)추출’로부터얻은
상층액1mL를가하고30초간
와류교반기등을이용하여충
분히혼합한후이를4℃,4,00
0G에서10분간원심분리한다.
정제된상층액을멤브레인필
터(Nylon,0.2μm)로여과한
후시험용액으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프분석조건
가)컬럼:C18계역상컬럼또는
이와동등한것
나)컬럼온도:40℃
다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함유
아세토니트릴
(2)이동상B:0.1%포름산함유
물
(3)농도구배조건
시간(분)A(%)B(%)
0.0595
1.0595
6.09010
8.09010
8.1595
10.0595- 316 -현행 개정(안)
라)이동상유속:0.3mL/분
마)주입량:2μL
2)질량분석기분석조건
가)이온화방법:ESIpositive-ion
mode
나)Capillaryvoltage:3.0kV
다)Collisiongas:아르곤(Ar)
표.액체크로마토그래프-질량분석기
분석을위한특성이온
분석성분
(Compound)평균
분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursor
ion,[M+H]+,
m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
아피도피로펜
(Afidopyropen)593.7593.265941481)43
20245
10645
1)정량이온이며,그외는정성이온
임.
※각생성이온에대한질량분석기의
기기조건은사용기기의최적값으
로변경하여사용할수있으며,제시
된이외의생성이온도적용이가능함.
3)검량선작성
표준용액을농도별로일정량
취하여액체크로마토그래프-질량
분석기에각각주입하여얻은
크로마토그램상의각피크높이
또는면적값으로검량선을작성- 317 -현행 개정(안)
한다.
4)표준품의크로마토그램
그림.
액체크로마토그래프-질량분석기에서
표준품의크로마토그램
아피도피로펜(5.0분)
*분석기기:LC(WatersⓇAcquity
UPLC),
MS/MS(WatersⓇXevoTQ-S),
컬럼(UnisonUK-C18,2.0mmI.D.×
100mmL.,3.0μm)
5)정량한계
0.01mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토
그램상의피크가표준용액피크의
머무름시간과일치할때피크
높이또는면적을검량선에대입
하여정량한다.
아.확인시험
액체크로마토그래프-질량분석기상의- 318 -현행 개정(안)
7.2(생략)
7.3축·수산물의잔류물질
7.3.1(생략)
7.3.2단성분분석법(Individual
residuemethod)
7.3.2.1∼7.3.2.9(생략)
7.3.2.10글리포세이트(Glyphosate)
가.시험법적용범위
가금류고기,돼지고기,돼지고기부
산물,소부산물,소고기,알,우유
등에적용한다.
나.분석원리
검체를메탄올및클로로포름으로
추출한후이온교환수지및후로
리실칼럼크로마토그래피로정제
하여기체크로마토그래프로측정
한다.
다.장치
1)기체크로마토그래프：불꽃광도검출
기(GC/FPD：간섭필터(interference머무름시간과특성이온으로아피도
피로펜을확인한다.
7.2(현행과같음)
7.3축·수산물의잔류물질
7.3.1(현행과같음)
7.3.2단성분분석법(Individual
residuemethod)
7.3.2.1∼7.3.2.9(현행과같음)
7.3.2.10글리포세이트(Glyphosate)
가.시험법의적용범위
소고기,돼지고기,가금류고기,유,
알등의축산물에적용한다.
나.분석원리
검체중글리포세이트와 대사산물
(N-acetylglyphosate)을1%포름
산함유용액으로추출하여HLB
카트리지로정제한후액체크로마
토그래프-질량분석기로분석한다
다.장치
1)액체크로마토그래프:질량분석
기(LC-MS/MS)- 319 -현행 개정(안)
filter),파장526nm)를사용한다.
라.시약및시액
1)유기용매：잔류농약시험용
2)물증류수또는이와동등한물
3)이온교환수지
(1)양이온교환수지：AG500W-X8,
분석용200～400메쉬(mesh),수
소형태를사용한다.수지를반을
나누어0.5kg의용기에나누어
넣고각각을물500mL로3회세
척한다.사용전까지수지를물에
저장한다.
(2)음이온교환수지：DuoliteA-101D,
20～50메쉬(mesh),염소형태를사
용한다.수지에물을섞어크로마토
그래프용관에넣고물50mL로3
회유출시키고눈에보이는잔류물
이없을때까지1M중탄산암모늄
용액을흘려보낸다.일반적으로수
지1lb당1M중탄산암모늄용액이
13～15L가사용된다.수지량의4
배의물로수지를세척하고과량의
물은버리고사용할때까지이상
태로저장한다.
4)후로리실：60～100메쉬(mesh)라.시약및시액
1)용매:--------또는이와동등한것
2)물:3차증류수또는이와동등한것
3)표준원액:글리포세이트와대
사산물인N-아세틸글리포세이
트표준품을1%포름산함유
용액에녹여1,000mg/L이되
게한다.
4)표준용액:표준원액을무처리
시료추출물을이용하여적당
한농도로혼합,희석한다(무
처리시료추출물90%이상
포함)
5)기타시약:잔류농약시험용또
는특급
- 320 -현행 개정(안)
5)알루미나：흡착형태중성,
Brockman활성도I,80～200메쉬
(mesh)
6)디아조메탄：에테르과함께증
류(N-니트로조메틸우레아로부
터준비,'95식품공전926쪽참
조)
7)표준용액：글리포세이트(글리
포세이트의N-TFA트리메틸
에스터)∶건조관이달린냉각
관과25mL둥근바닥플라스크
가부착된환류플라스크를사
용하며가열과증발조작은통
풍이잘되는후드에서한다.
글리포세이트0.005g을둥근
바닥플라스크에넣고트리플루
오로초산5mL를가하여가열
판상에서약하게가열하여용
해한다음무수트리플루오로초
산(anhydroustrifluoroacetate)
5mL를가하여환류건조장치
를부착하여15분간약하게환
류시킨다.둥근바닥플라스크를
떼어내고약한질소의흐름으
로증발,건고시킨다음메탄올- 321 -현행 개정(안)
5mL로잔류물을다시용해시
킨다.디아조메탄및에테르용
액5mL를가하여실온에서
30분간방치하고증기욕상에서
약한가열로총량이2～3mL
가되도록디아조메탄및에테
르용액을제거한후5mL메
스플라스크로옮기고환류플라
스크에남아있는잔류물을메
탄올로씻어5mL메스플라스
크에합하여표선까지채운다.
농축된용액은1mL당글리포
세이트1,000 μg에해당하는
N-TFA를함유한다.이용액
을0.10,0.25,0.50mL를취하
여디클로로메탄으로 10mL로
희석하면1mL당10,25,50μ
g의글리포세이트를 함유하는
용액이된다.이용액은4～
6℃에서저장한다.
마.시험용액의조제
1)추출
검체적당량을드라이아이스를
넣고얼려서균질화한후냉장
고에서드라이아이스를승화시마.시험용액의조제
1)추출
검체를분쇄하여균질화한후5
g을정밀히달아원심분리관에
넣고1%포름산용액5mL과
아세토니트릴15mL을가한뒤
1분간심하게흔들어추출한후- 322 -현행 개정(안)
켜서50g을교반기에취하여
이에메탄올및클로로포름(2
＋1)300mL를넣고1분간균
질화한후여과지를깔은흡인
여과기로여과하고여액을1L
둥근바닥플라스크에받는다.
메탄올및클로로포름(2＋1)
2～3mL로교반기를세척하고
잔사(residue)를통과시켜여액
을1L플라스크에합치고버
리고잔사(residue)는15분간
감압건조시킨다.잔사
(residue)에물을적당량가하
여1분간혼합한후냉장하거
나원심분리한다.원심분리기
의데스크톱에whatmanNo.
2의원통여과지(Strip)를부착
하여현탁액을서서히부어원
심분리한다음유출된여액으
로교반기를씻어같은여과지
로재여과한다.물로잔사
(residue)를씻어내리는조작
을반복하여총여액이1,800
mL가되도록한다.250mL폴
리프로필렌용기2～3개에추여과지(Whatman6)로여과후
10mL아세토니트릴로여과지를
씻어준다(추출액이여과지를통과
하지못하는경우는10,000G이
상으로원심분리후상등액전량
을취한다).이후40℃이하에서
질소가스를사용하여유기용매층
을증발시키고물층만을남긴후
1%포름산함유용액으로10mL
정용한다.- 323 -현행 개정(안)
출물을나누어넣고물50～75
mL로교반기를세척하여원심
분리용용기에나누어넣는데
이때각용기간의용량차이가
3g이하가되도록하여12,500
rpm에서30분간원심분리하고
상등액은유리솜이있는프러
그가달린깔때기(Power
funnel)를통과시킨다.2～3
mL의물로유리솜과깔때기를
씻어1,800mL가되도록희석
하여A-101D칼럼정제를한
다.
2)정제(A-101D중탄산형태)
유리여과기(Glassfilter)가달
린안지름22mm의칼럼에
물7～8cm를넣고A-101D
수지25mL를가한다음1M
중탄산암모늄용액100mL로
세척하고이어물100mL로
3회세척한다.위의검체용액
을칼럼에넣고시간당600～
800mL의속도로유출시키고
물100mL로3회통과시킨다
음모든유출액은버린다.이2)정제
HLBSPE카트리지(200mg)를
0.1%포름산함유용액6mL로
활성화한후,‘1)추출’로부터얻
은추출물2mL을카트리지에
넣고흘러내려받는다.카트리
지상단이마르기전에0.1%포
름산함유용액2mL을용출하
여앞서받은추출액과합하여
4mL로만들고멤브레인필터
(nylon,0.2μm)로여과한후시
험용액으로한다.- 324 -현행 개정(안)
어서0.5M중탄산암모늄용액
으로글리포세이트와 대사물
을유출시켜150mL가되도
록플라스크에받는다.
3)활성탄처리
유출액에활성탄2.0g을넣고
15분간진탕한다음유리여과기
로흡착여과하여500mL둥근
바닥플라스크에받고0.5M중
탄산암모늄용액10mL로플라
스크와잔사(residue)를씻어
여과하는조작을2회반복한
후여과액을합한다.
4)증류
5)500mL둥근바닥플라스크에
있는여액을50℃의항온수조
에서증발,건고시킨다음기
벽을물50mL로씻어내려
증발,건고시키는조작을3회
반복한다.잔류물을물5mL
에녹여AG50WX-8칼럼정
제에따라시험한다.
6)정제(AG50W-X8수소형태)
바깥지름이12mm인유리솜
프러그가채워진칼럼에물을<삭제>
<삭제>
<삭제>
<삭제>- 325 -현행 개정(안)
5～10cm채우고미리물세척
한수지12.0mL를가한다.수
지가가라앉으면싸이폰을이
용하여물75mL로칼럼벽에
붙은수지를씻어내린다(싸이
폰장치는칼럼보다8cm이
상높게두고물이통과되는
관은안지름0.157cm인폴리
에틸렌용기을사용한다.수지
는피펫을사용하여옮기고수
지칼럼길이는14.5cm가적당
하다).500mL둥근바닥플라
스크에있는잔류물을칼럼에
옮기고물5mL로2회용기를
세척하여칼럼에넣고유출하
여버리고이어서다시물10
mL를칼럼에넣어용출시켜
40℃의수욕중에서농축시키고
플라스크에있는잔류물중에
남아있는미량의수분을제거
하기위하여질소가스를약하
게통과시키면서증발,건고시
킨다.트리플루오로초산1mL
를가하고마개을닫은후5
0℃의항온수조에서10분간방- 326 -현행 개정(안)
치하며가열하는동안3～4분
간격으로반응물을흔들어준
다.플라스크를제거한후마
개을열어실온으로냉각하고
약한질소의흐름으로증발,
건고시킨다.메탄올1mL를
가하여기벽에묻은반응물을
용해시키고5분동안정치한다
음충분한양(정상적으로는
3～5mL가적당)의디아조메
탄및에테르용액을황색이될
때까지가하고가끔흔들어주
면서30분간방치한다.후드내
에서약하게증기욕조로가열
함으로써과량의디아조메탄
및에테르용액을제거하여0.5
mL정도되게증류한다음미
량의메탄올을이용하여첫번
째원심분리관으로옮겨1mL
가되도록한다.이중0.5mL
를취하여두번째원심분리관
에넣고5%황산나트륨2.5
mL를가한후다시디클로로
메탄2mL를가하여2분간진
탕한다.하층부(디클로로메탄- 327 -현행 개정(안)
층)를취하여위와같은조작을
반복한후세번째원심분리관
에염화추출물을모은다.약한
질소의흐름으로추출물을0.5
mL로증류시켜시험용액으로
한다.
7)추가정제
기체크로마토그래피법에의한
측정시방해인자가있으면다
음과같은정제과정을따른다.
바깥지름이75mm이고유리
솜여과깔때기가달린관에후
로리실을6cm넣고그위에
무수황산나트륨을1cm넣는
다.칼럼을메탄올5mL로세
척하고디클로로메탄및아세
톤(3：1)5mL로세척한후세
액은버린다.칼럼에에스테르
화된용액을0.5mL씩나누어
넣고위의용기를디클로로메
탄및아세톤(3：1)의혼합액
1mL로세척하여칼럼을통과
시키는조작을3회반복한다.
계속하여디클로로메탄및아
세톤(3：1)의혼합액2mL를<삭제>- 328 -현행 개정(안)
통과시킨다음용출액을모아
약한질소의흐름으로0.5mL
되게증류시켜시험용액으로
한다.
바.시험조작
1)가스크로마트그라프의측정조건
가)충전칼럼(Packedcolumn)
(1)고정상담체：기체크로마토그래
프용크로모솔브W(AW-DMCS,
HP80～100메쉬(mesh))및가스
크롬Q(80～100메쉬(mesh))또는
이와동등한것
(2)고정상액체：100%Methyl
siloxane을ChromosorbW
에10%로,또는50%
Phenyl50%Methyl
siloxane을GasChromQ
에3.8%로입힌것
(3)칼럼：안지름2～3mm,
길이100～200cm의유리
관
나)시험용액주입부및검출기
의온도：각각230℃,250℃
다)칼럼온도：180℃(100%
Methylsiloxane코팅칼럼)항바.시험조작
1)액체크로마토그래프의측정조건
가)컬럼:용매피크의용리시간
이1분이내이면서글리포세
이트와N-아세틸글리포세이
트의머무름시간이1.5분이
상분리가능한컬럼
나)컬럼온도:35℃
다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함유
물
(2)이동상B:0.1%포름산함유
메탄올
(3)농도구배조건
시간(분)A(%)B(%)
0.0090.010.0
5.0010.090.0
6.0010.090.0
7.0090.010.0
10.00 90.010.0
라)이동상유속:0.25mL/분
마)주입량:5μL- 329 -현행 개정(안)
온,150℃(50%Phenyl50%
Methylsiloxane코팅칼럼)항
온
라)운반기체(carriergas)및유
량：질소또는헬륨을적절하게
조절한다.
<신설>2)질량분석기분석조건
가)이온화방법:ESI
negative-ionmode
나)Capillaryvoltage:3.5kV
다)Collisiongas:아르곤(Ar)
또는질소(N2)
표.액체크로마토그래프-질량분
석기분석을위한특성이온
분석성분
(Compound)평균
분자량
(MW)관측질량
(Exact
mass)선구이온
(Precursorion,
[NH]+,m/z)생성이온
(Product
ion,m/z)충돌에너지
(Collision
energy,eV)
Glyphosate169.1168.1016863
1503
9
N-Acetyl
glyphosate211.1209.86210150
1247
5
※밑줄표시되어있는것은정량
이온이며그외이온들은정성
이온임
※각생성이온에대한질량분석기
의기기조건은사용기기의최적
값으로변경하여사용할수있
으며,제시된이외의생성이
온도적용이가능함.- 330 -현행 개정(안)
3)검량선의작성
표준용액을농도별로일정량취
하여기체크로마토그래프에각
각주입한다.얻어진크로마토그
램상의각피이크높이또는면
적을구하여검량선을작성한다.3)검량선작성
------------------------
---액체크로마토그래프-질량
분석기에각각주입하여얻은
크로마토그램상의각피크
------------------------
-
4)표준품의크로마토그램
그림.
액체크로마토그래프-질량분석
기크로마토그램
Glyphosate(1.9분),N-acetyl
Glyphosate(4.1분)
*분석기기:LC(SHISEIDO®
NanospaceNasca2system),
MS/MS(ABSCIEXQTRAP
4500)
컬럼:HypercarbTM(2.1mmI.D.×
100mmL.,5μm),농도:100
μg/L
5)정량한계
글리포세이트(Glyphosate):0.05- 331 -현행 개정(안)
4)정량한계
0.05mg/kg
사.정성시험
위조건으로얻어진크로마토그
램상의피이크는어느측정조건
에서도표준용액피이크의머무
름시간(retentiontime)과일치
하여야한다.
아.정량시험
정성시험과똑같은조건에서얻
어진시험결과에의해피이크높
이법또는피이크면적법에따라
정량한다.
주1)액체크로마토그래피에의한글리
포세이트의측정조건은제8.일반시험법
7.식품중잔류농약분석법7.1.4.18글
리포세이트(Glyphosate)를참조할것
<신설>mg/kg
N-아세틸글리포세이트 (N-acetyl
Glyphosate):0.05mg/kg
<삭제>
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토그
램상의피크가표준용액피크의
머무름시간과일치할때피크
높이또는면적을검량선에대
입하여정량한다.
*글리포세이트의 잔류량=글리
포세이트의잔류량＋(환산계
수×N-아세틸글리포세이트의
잔류량)
*환산계수=0.80(글리포세이트
의분자량169/N-아세틸글리
포세이트의분자량211
아.확인시험
액체크로마토크래프-질량분석기
상의머무름시간과특성이온으- 332 -현행 개정(안)
7.3.2.1∼7.3.2.15(생략)
7.3.2.16프로클로라즈(Prochloraz)
가.시험법적용범위
소부산물,소지방,소고기,유등에
적용한다.
나.분석원리
검체를아세톤으로추출한후C18
칼럼크로마토그래피로정제하여
기체크로마토그래프로측정한다.
다.장치
1)기체크로마토그래프：전자포획
검출기(electron capture
detector)를사용한다.
라.시약및시액
1)용매：잔류농약시험용
2)물：증류수또는이와동등한
물및액체크로마토그래프용
3)기타시약：특급
4)표준원액：프로클로라즈표준품
을아세톤에녹여100mg/kg이
되게한다.로글리포세이트와 N-아세틸글
리포세이트를확인한다.
7.3.2.1∼7.3.2.9(현행과같음)
7.3.2.16프로클로라즈(Prochloraz)
가.시험법의적용범위
소고기,돼지고기,가금류고기,유,
알등의축산물에적용한다.
나.분석원리
검체중프로클로라즈와대사산물
(BTS44595,BTS44596,2,4,6-트리
클로로페놀)를pyridinehydrochloride
를사용하여2,4,6-트리클로로페놀
로변환후기체크로마토그래프-
전자포획검출기로분석한다.
다.장치
1)기체크로마토그래프:전자포획
검출기(GC-ECD)
라.시약및시액
1)용매:잔류농약시험용또는이
와동등한것
2)물:3차증류수또는이와동등
한것
3)표준원액:2,4,6-트리클로로페놀
(2,4,6-trichlorophenol ;- 333 -현행 개정(안)
5)표준용액：표준원액적당량을
플라스크에넣고질소가스를통
과시켜건고한후마.시험용액
의조제2)분해이후의실험을
한후헥산으로희석하여적당한
농도로하여표준용액으로한다
(2,4,6-Trichlorophenol의경우
는바로아세톤을사용하여적당
한농도로희석하여사용한다).
마.시험용액의조제
1)추출
검체를잘게썰거나갈은후10g
을달아아세톤150mL및2%
디에틸렌글리콜아세톤용액1
mL를넣고속슬렛추출장치에서
6시간추출하고여과한후여액
에아세톤을넣어150mL로한
다.2,4,6-TCP)표준품을아세톤에
녹여100mg/L이되게한다.
4)표준용액:표준원액을에틸아세
테이트를이용하여적당한농도
로희석한다.
5)기타시약:잔류농약시험용또
는특급
마.시험용액의조제
1)추출
가)고기류등지방많이함유한
검체:검체를균질화한시료
10g을정밀히달아아세톤100
mL을넣은뒤30분간추출하고
흡입여과한다.아세톤50mL로
잔류물과흡입여과에사용한
용기를씻어합한후감압농축
하고‘1%포름산함유된n-헥
산:아세토니트릴(1:1,v/v)50
mL’을넣고분배추출을2회
반복후아래층을모아감압농
축한다.잔류물을디클로로메
탄10mL에녹인후질소가스
를사용하여1mL로농축한
뒤,2)의과정으로진행한다.
나)알과유:균질화한시료10g을- 334 -현행 개정(안)
2)분해
위의용액중15mL(검체1g에
해당)를취하여질소를통과하면
서증발건조시키고 잔류물에피
리딘염산염5g및비등석몇개
를넣고냉각관을달아1시간동
안가열환류시키고냉각한다.이
에0.2M염산용액20mL를넣어
반응물을용해한다.정밀히달아아세톤20mL을
넣고30분간추출하고3,500
rpm으로5분간원심분리한다.
상층액을전량취한후물100
mL와포화염화나트륨용액50
mL을넣고디클로로메탄50mL
로2회분배추출한후아래층
을무수황산나트륨에통과시
켜탈수한다음감압농축한
다.잔류물을디클로로메탄10
mL에녹여1mL로질소농축
한뒤,2)의과정을거쳐시험
용액으로한다.
2)2,4,6-TCP로변환
‘1)추출’과정에서얻은용액에
pyridinehydrochloride5g을넣
고200℃에서2시간동안분해시
킨다.이후0.2MHCl20mL을
넣고물100mL과포화염화나트
륨용액50mL을넣은뒤,디클로
로메탄50mL로2회분배추출하
여아래층을무수황산나트륨을
통과시켜탈수후감압농축한다.
유와알은에틸아세테이트10
mL에녹여멤브레인필터- 335 -현행 개정(안)
3)정제
미리메탄올5mL및물5mL를
유출시켜활성화한C18카트리지
(1g)에위의반응액을넣고유출
하여버린다.이카트리지를물
10mL와메탄올및물(50：50)의
혼합액10mL및물5mL를차
례로씻어버린다.C18카트리지
아래무수황산나트륨을충전한
칼럼과플로리실카트리지
(Florisilcartridge)를연결하고
C18카트리지에헥산10mL를
넣어프로클로라즈분해물인
TCP를C18카트리지에서용출시
켜플로리실카트리지(Florisil
cartridge)에흡착시킨다.이어서
무수황산칼럼을제거하고플로리
실카트리지(Florisilcartridge)에
에틸아세테이트8mL를넣어유
출시켜버리고이어서메탄올및(PTFE,0.2μm)로여과한후시
험용액으로하고,고기류등지방
많은검체는‘3)정제’과정을따
른다.
3)정제
고기류를추출및2,4,6-TCP로
변환후감압농축한잔류물을
디클로로메탄6mL로녹여,디
클로로메탄10mL로활성화시
킨아미노프로필카트리지(1g)
에넣고1%포름산함유메탄올
10mL로용출하여받은후감압
농축한다.잔류물을에틸아세테이트
10mL에녹여멤브레인필터(PTFE,
0.2μm)로여과한후시험용액으
로한다.
바.시험조작
1)기체크로마토그래프의분석조건
가)컬럼:DB-5capillary
column(0.53mmI.D.×30
mL.,0.50μm)또는이와동
등한것
나)이동상가스(Carriergas)및
유속:질소(N2),7.0mL/분
다)주입부온도:300℃- 336 -현행 개정(안)
아세톤(1：9)의혼합액20mL로
용출하고용출액을농축,증발건
조시키고잔류물을헥산일정량
에녹여시험용액으로한다.
바.시험조작
1)기체크로마토그래프의측정조건
가)모세관컬럼(capillarycolum
n)：0.2～0.32또는0.53mm의
안지름을가지는30m의모세
관유리칼럼에Neutra
Bond-1을화학결합또는
Cross-link코팅한것또는이
와동등한것(7.식품중잔류
농약분석법,7.1.2.1의바.시
험조작중
사용이가능한동
등한칼럼
참조)
나)시험용액주입부및검출기의
온도：각각250℃,280℃
다)칼럼온도：150℃항온(필요에
따라서적절히조절한다)
라)운반기체(carriergas)및유
량：질소를적절하게조절한
다.
2)검량선의작성
표준용액을농도별로일정량취하라)오븐온도
100℃에서시료를주입하고2분
간유지한후15℃/분의비율로
190℃까지온도를상승시켜1분
간유지하고20℃/분의비율로
290℃까지온도를상승시켜2분
이상유지한다.
마)주입량:1μL,splitless
바)검출기온도:300℃
2)검량선작성
표준용액을농도별로일정량취하
여기체크로마토그래프-전자포획
검출기에각각주입하여얻은크
로마토그램상의각피크높이또
는면적값으로검량선을작성한
다.
3)표준품의크로마토그램
그림.
기체크로마토그래프-전자포획검출
기에서표준품의크로마토그램
2,4,6-트리클로로페놀(7.3분)
*분석기기:GC(Agilent6890),- 337 -현행 개정(안)
여기체크로마토그래프에각각주
입한다.얻어진크로마토그램상의
각피이크높이또는면적을구하
여검량선을작성한다.
3)정량한계
0.05mg/kg
사.정성시험
위조건으로얻어진크로마토그램
상의피이크는어느측정조건에서
도표준용액피이크의머무름시간
(retentiontime)과일치하여야한
다.
아.정량시험
정성시험과똑같은조건에서얻어
진시험결과에의해피이크높이법
또는피이크면적법에따라정량한
다.ECD(Agilent),
컬럼:DB-5capillarycolumn
(0.53mmI.D.×30mL.,0.50
μm),농도:20μg/L
4)정량한계
0.02mg/kg
사.정량시험
위조건으로얻어진크로마토그램상
의피크가표준용액피크의머무름
시간과일치할때피크높이또는
면적을검량선에대입하여정량한
다.
*프로클로라즈의잔류량=환산
계수×2,4,6-TCP의잔류량
*환산계수=1.91(프로클로라
즈의분자량377/2,4,6-TCP의
분자량197)
아.확인시험
기체크로마토그래프-질량분석기상
의머무름시간과질량분석스펙트
럼으로대상성분을확인한다.
1)기체크로마토그래프-질량분석
기의분석조건
가)칼럼:DB-5MS(Agilent,- 338 -현행 개정(안)
0.25mmi.d.x30mL.,
0.25μm)또는이와동등한
것
나)이동상가스및유속:헬륨,
1.0mL/분
다)오븐온도:80℃에서2분간
유지한후15℃/분의속도로
180℃까지승온하고10℃/분
의속도로250℃까지승온한
다.
라)주입부온도:250℃
마)인터페이스온도:280℃
바)이온화:전자충격(EI),70eV
사)주입모드:splitless
아)주입량:1μL
표.기체크로마토그래프-질량분석기분석을위한
특성이온
분석성분
(Compound)평균분자량
(MW)관측이온
(Monitoringion,
m/z)
2,4,6-trichlorophenol 197.5196,132
※관측이온에대한질량분석기의
기기조건은사용기기의최적값
으로변경하여사용할수있으
며,제시된이외의관측이온
도적용이가능함.- 339 -현행 개정(안)
7.3.2.17∼7.3.2.30(생략)7.3.2.17∼7.3.2.30(현행과같음)
8.식품중잔류동물용의약품시험법
8.1∼8.2(생략)
8.3.정량시험법
8.3.1∼8.3.57(생략)
8.3.58플로르페니콜(Florfenicol)
1)시험법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중플로르페니콜과대사물
질인플로르페니콜아민을에틸
아세테이트로추출하고헥산으로
지방을제거한후,산을가해플
로르페니콜을대사물질인플로르
페니콜아민으로전환시켜양이
온교환카트리지로정제하고액
체크로마토그래프/자외선흡광검
출기(UVphotometricdetector)
로분석한다.플로르페니콜양은
플로르페니콜아민으로서정량한
다.
3)측정기기
액체크로마토그래프/자외선흡광
검출기(UVphotometric8.식품중잔류동물용의약품시험법
8.1∼8.2(현행과같음)
8.3.정량시험법
8.3.1∼8.3.57(현행과같음)
8.3.58플로르페니콜(Florfenicol)
1)시험법적용범위
축·수산물등에적용한다.
2)분석원리
검체중플로르페니콜과플로르페
니콜아민을 암모니아수
(Ammoniawater),아세토니트릴
로추출하고PSA,C18MgSO4
으로정제하여액체크로마토그래
프/질량분석기로분석한다.
3)측정기기
액체크로마토그래프/질량분석기
(LC-MS/MS)
4)시약및시액
가)용매:액체크로마토그래프용
또는이와동등한것
나)물:3차증류수또는이와동
등한것
다)표준원액:100mL용량플라- 340 -현행 개정(안)
detector)
4)시약및시액
가)용매:고속액체크로마토그래
프용또는이와동등한것
나)표준원액:플로르페니콜아민
표준품을정밀히달아아세토니
트릴에녹여100mg/L로한다.
다)표준용액:표준원액을0.01
M제이인산나트륨(Na2HPO4):메
탄올(8:2)혼합용액으로희석하여
플로르페니콜아민이0.5,1.0,
2.0,3.0및4.0mg/L가되게한
다.
라)0.01M제이인산나트륨용액
:제이인산나트륨(Na2HPO4)
3.58g을물에녹여1L로한다.
마)0.02M헵탄설폰산
(heptanesulphonate)-0.025 M제
삼인 산 나 트 륨
(trisodiumphosphate)
(pH3.85)혼합용액:1L메스
플라스크에헵탄설포네이트
(sodium-1-heptanesulphonate)
4.05g과제삼인산나트륨
(Na3PO4․12H2O)9.50g을넣스크에표준품을정밀히달아아
세토니트릴에각각녹여1,000
µg/mL이되게한다.
라)표준용액:표준원액을아세토
니트릴로희석하여0.25,0.5,1,
2,4mg/L농도가되게한다.다
만,기기의특성등필요에따라
농도를조정하여사용할수있
다.
마)0.1%개미산함유용액:
1,000mL용량플라스크에개미
산(Formicacid)1mL을넣고
물로표시선까지채운다.
바)0.1%개미산함유메탄올용
액:1,000mL용량플라스크에
개미산1mL을넣고메탄올로
표시선까지채운다.
사)기타시약:특급또는이와동
등한것
5)첨가시료의조제
정량을하는경우조직표준곡선
(Tissuestandardcurve)작성을
위하여각해당물질이검출되지
않은음성대조시료(Negative
controlsample)2g씩준비한- 341 -현행 개정(안)
고물에녹이고인산으로pH
3.85로조정한후물로표시선까
지채운다.
바)양이온교환카트리지:
MCX(MixedModeCation
Exchange)카트리지(60mg)또
는이와동등한것
5)시험용액의조제
균질화한검체5g을50mL원
심분리관에취하고제이인산칼륨
(K2HPO4)1g과에틸아세테이
트10mL를가하여균질화한후
1,200G에서10분간원심분리하
여상층액을취한다.남은액에
에틸아세테이트10mL과물4
mL를가하여앞의조작을2회
더반복한후상층액을합한다.
모아진상층액을35℃에서감압
농축하여1mL가되도록한다.
이농축액에아세토니트릴3mL
를가하여녹이고,헥산5mL를
가하여격렬히흔들어섞은후
원심분리하여층을분리한다.헥
산층을버리고헥산5mL를가
한후,이과정을2회더반복하후Blank를제외하고각표준용
액을0.2mL씩가하여0.025,
0.05,0.1,0.2,0.4mg/kg농도가
되게한다.
6)시험용액의조제
균질화한검체2g을정밀히달아
50mL폴리프로필렌원심분리관
에취한다.아세토니트릴10mL
와암모니아수100μL를가하여
10분간진탕한후4,700G,4℃
에서10분간원심분리한다.원심
분리한상층액을모두취하여
150mgPSA,150mgC18과
900mgMgSO4가담겨진50
mL원심분리관에옮기고1분간
진탕한후4,700G,4℃에서10
분간원심분리한다.원심분리한
상층액중5mL를취하여40℃
수욕상에서질소농축한다.잔류
물에아세토니트릴/물(30/70,
v/v)1mL을가하여재용해하
고,멤브레인필터(PTFE,0.2
µm)로여과하여시험용액으로
한다.
7)시험조작- 342 -현행 개정(안)
고분리된아세토니트릴층(하층)
을50℃에서감압농축한다.잔류
물에12N염산2mL를가하고
100℃에서1시간동안반응시킨
다.미리메탄올3mL와물3
mL로활성화시킨양이온교환카
트리지에반응액을흡착시키고
물3mL로세척한다.카트리지
를감압하여건조시킨후,흡착
된성분을아세토니트릴:수산화
암모늄:클로르포름(8:1:1)혼합용
액6mL로용출시킨다.용출액
을50℃에서감압농축한후잔류
물에이동상용액300µL를가
하여녹이고막여과지
(membranefilter)로여과하여시
험용액으로한다.
6)시험조작
가)측정조건
(1)칼럼:C18(4.6×150mm,5
μm)또는이와동등한것
(2)칼럼온도:35℃
(3)이동상
-이동상A:0.1%개미산을함
유한10%아세토니트릴용액가)액체크로마토그래프측정조건
(1)칼럼:
C18(X-SELECT-HSS,2.1mm
i.d.⨯ 150mm,3.5µm)또는
이와동등한것
(2)이동상
(가)이동상A:0.1%개미산
용액
(나)이동상B:0.1%개미산
함유메탄올용액
시간(분)이동상A(%)이동상B(%)
1 90 10
3 10 90
5 10 90
5.1 90 10
10 90 10
(3)유속:0.25mL/분
(4)칼럼온도:40℃
(5)주입량:5µL
나)질량분석기조건
(1)Ionization:ESI(positive,
negative)
(2)Capillarytemperature:350℃
(3)Capillaryvoltage:3.8kV
(4)Collisiongas:아르곤(Ar)
(5)분석대상물질의조건- 343 -현행 개정(안)
-이동상B:0.02M헵탄설폰
산(heptanesulphonate) -0.025M
제삼인산나트륨(pH3.85):0.1%
트리에틸아민메탄올용액(82:18)
(4)유속:1.5mL/분
(5)측정파장:224nm
(6)주입량:30μL
7)정량시험
가)표준용액및시험용액을각각
액체크로마토그래프에주입한다.
얻어진피크머무름시간을비교
하여플로르페니콜아민의피크
면적으로검량선을작성하고시
험용액중플로프페니콜함량을
구한다.
나)정량한계
(1)어류:0.05mg/kg
(2)갑각류:0.01mg/kg
(3)어류및갑각류외식품:0.1
mg/kg물질명
(Compoun
d)머무
름
시간
(분)이온
화
(Ioniz
ation
mode)분자량
(Molec
ular
weight
)선구
이온
(Pre
curs
or
ion,
m/z)생성
이온
(Pro
duct
ion,
m/z)충돌에
너지
(Collisi
on
Energy,
eV)
플로르페
니콜
(Florfenic
ol)4.23 - 357.00 356336 10
185 19
152 16
플로르페
니콜아민
(Florfenic
olamine)1.75 + 247.07 248230 11
130 21
91 48
※밑줄표시되어있는것은정
량이온이며그외이온들은정성
이온임
※각생성이온(Production)에
대한질량분석기의기기조건은
사용기기의최적값으로변경하여
사용할수있으며,제시된이외
의생성이온도적용이가능함
8)정성시험
가)정성
위의조건으로얻어진크로마토
그램상의피크는표준용액피크
의머무름시간과비교하여일치
하여야한다.또한표준용액과
시험용액의선구이온(Precursor
ion)및생성이온(Production)이
일치하여야하고,표준용액과시
험용액의생성이온간반응세기의- 344 -현행 개정(안)
비율(Ionratio)을비교하여그
비율은주1)과일치하여야한다.
주1.생성이온간반응세기의비율
허용범위
이온간 반응세기의 비율 (%) 허용범위
>50% ≤20%
>20%,≤50% ≤25%
>10%,≤20% ≤30%
나)표준품크로마토그램
그림1.플로르페니콜표준용액(0.1
mg/L,4.23분)크로마토그램
그림2.플로르페니콜아민표준용
액(0.1mg/L,1.75분)크로마토그램
9)정량시험
가)정량
정성및확인시험과똑같은조
건에서Blank시료를포함하여
각농도별첨가시료에서얻어진
크로마토그램상의각피크높이
또는면적을구하여검량선을작
- 345 -현행 개정(안)
8.3.59∼8.3.117(생략)성한후시험용액의크로마토그
램으로부터 정량이온
(Quantitativeion)의각피크높
이또는피크면적에따라산출
된시험용액중검출농도,검체
량과최종시험용액의부피와추
출과정에서의사용한추출액의
량(희석배수)를고려하여정량한다.
나)정량한계
플로르페니콜(Florfenicol):
0.005mg/kg
플로르페니콜아민(Florfenicol
amine):0.005mg/kg
8.3.59∼8.3.117(현행과같음)
9.식품중유해물질시험법
9.1∼9.2(생략)
9.3다이옥신
9.3.1(생략)
9.3.2고분해능기체크로마토그래프/
고분해능 질량분석기
(HRGC/HRMS)에의한시험
가.(생략)
나.분석원리9.식품중유해물질시험법
9.1∼9.2(현행과같음)
9.3다이옥신
9.3.1(현행과같음)
9.3.2기체크로마토그래프/고분해능
질량분석기(GC/HRMS)에의한
시험
가.(현행과같음)
나.분석원리- 346 -현행 개정(안)
--------------- 4염화~8염화
dibenzo-p-dioxin(CDDs)----
-------------------------
-------------------------
-------------------------
--------고분해능기체크로마
토그래프/고분해능질량분석기
(HRGC/HRMS)로분석한다.
다.장치
고분해능기체크로마토그래프/고
분해능질량분석기(HRGC/HRMS)
:분해능이10,000이상을사용한다.
라.시약및시액
(생략)
1)(생략)
2)------------------ 17종과,
13C12동족체(Labeled)및37Cl4
동족체(또는이와동등한효
과를갖는것)를사용한다.
3)------------------------
표1과같은화합물(또는이와
동등한효과를갖는것)을사
용한다.
4)------------------------
13C12-1,2,3,4-TCDD(또는이와----------------- 4∼8염
화dibenzo-p-dioxin(CDDs)--
-------------------------
-------------------------
-------------------------
--------기체크로마토그래프/
고분해능 질량분석기
(GC/HRMS)로분석한다.
다.장치
기체크로마토그래프/고분해능
질량분석기(GC/HRMS):분해
능10,000이상을사용한다.
라.시약및시액
(현행과같음)
1)(현행과같음)
2)----------------- 17종과
13C12동족체(Labeled)및37Cl4
동족체를사용한다.
3)------------------------
표1과같은화합물을사용한
다.
4)------------------------
13C12-1,2,3,4-TCDD및- 347 -현행 개정(안)
동등한효과를갖는것)및
13C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD(또는
이와동등한효과를갖는것)
를사용한다.
5)------------------------
농도범위로조제한것(또는
이와동등한효과를갖는것을
사용한다.)
(생략)
6)～16)(생략)
마.시험용액의조제
1)추출
------------------------
---속슬레(Soxhlet)추출장치용
-------------------------
---속슬레(Soxhlet)추출장치에
-------------------------
----시료에는------.
2)조지방함량
속실렛추출장치------------
-----------------.
(생략)
3)∼4)(생략)
바.시험조작
1)(생략)13C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD를사
용한다.
5)------------------------
농도범위로조제한다.
(현행과같음)
6)～16)(현행과같음)
마.시험용액의조제
1)추출
-------------------------
--속슬렛(Soxhlet)추출장치용
------------------------ -
--속슬렛(Soxhlet)추출장치에
-------------------------
----시료에는------.
2)조지방함량
속슬렛추출장치----------
-----------------.
(현행과같음)
3)∼4)(현행과같음)
바.시험조작
1)(현행과같음)- 348 -현행 개정(안)
2)고분해능질량분석기의측정조건
가)튜닝표준물질：PFK또는
이와동등한것
나)∼다)(생략)
라)질량설정：(생략)
마)∼바)(생략)
사)검출한계：4～5염화물의--
---------.
3)검량선작성
------------------------
-------상대감응도(Relation
Response：RR)를구한다.---
---------------------.
(생략)
4)반응계수
반응계수(RF)는-----------
--------반응계수의-----.
(생략)
5)회수율측정용표준물질의검출
농도및회수율
-----------검출농도(Cl)및
-----------------------.
(생략)
사.(생략)
아.정량시험2)고분해능질량분석기의측정조건
가)튜닝표준물질：PFK(perfluorkerosene)
또는이와동등한것
나)∼다)(현행과같음)
라)질량설정：(현행과같음)
마)∼바)(현행과같음)
사)검출한계：4,5염화물각각의
----------.
3)검량선작성
------------------------
-------상대감응도(Relative
Response：RR)를구한다.---
---------------------.
(현행과같음)
4)감응계수(ResponseFactor)
감응계수(RF)는-----------
--------감응계수의-----.
(현행과같음)
5)회수율측정용표준물질의농도
및회수율
-----------농도(Cl)및---
-----------------------.
(현행과같음)
사.(현행과같음)
아.정량시험- 349 -현행 개정(안)
(생략)
1)다이옥신농도의계산
(생략)
다이옥신
농도
(ng/gfat)=(A1n+A2n)(Cl)
×Vex
(A1l+A2l)(RR)Ws
A1n,A2n：시료에함유된대상물질의1차
또는2차선택이온의피크면적
A1l,A2l：A1n와A2n에대응하는시료에
첨가된13C12동족체화합물의
1차또는2차선택이온의피크
면적
Cl：시료에첨가된13C12동족체
표준물질의농도(ng/mL)
RR：상대감응도
Vex:추출량(mL)
Ws：조지방함량(g)
2)(생략)
표1.∼표3(생략)
표4.독성등가계수(ToxicEquivalency
Factors;WHO-TEFs)
다이옥신WHO-TEF
2,3,7,8-TCDD
-----------
1,2,3,7,8-PeCDD
(생략)1.
--.
1.
(생0
--
0
략)
9.4폴리염화비페닐(PCBs)
9.4.1(생략)(현행과같음)
1)다이옥신농도의계산
(현행과같음)
다이옥신
농도
(pg/gfat)=(A1n+A2n)(Cl)
×Vex
×1,000(A1l+A2l)(RR)Ws
A1n,A2n：시료에함유된대상물질의1차
또는2차선택이온의피크면적
A1l,A2l：A1n와A2n에대응하는시료에
첨가된13C12동족체화합물의
1차또는2차선택이온의피크
면적
Cl：시료에첨가된13C12동족체
표준물질의농도(pg/mL)
RR：상대감응도
Vex:추출량(mL)
Ws：조지방함량(g)
2)(현행과같음)
표1.∼표3(현행과같음)
표4.독성등가계수(ToxicEquivalency
Factors;WHO2005TEFs)
다이옥신WHO2005TEF
2,3,7,8-TCDD
-----------
1,2,3,7,8-PeCDD
(현행과같음)1
--.
1
(현행과--
같음)
9.4폴리염화비페닐(PCBs)
9.4.1(현행과같음)- 350 -현행 개정(안)
9.4.2기체크로마토그래프/질량분석기에
의한시험
가.(생략)
나.분석원리
--------------- 속실렛---
----------------------.
다.(생략)
라.시약및시액
1)～2)(생략)
3)다층실리카겔칼럼：-------
----무수황산나트륨1g,중성실
리카겔1g,염기성실리카겔3g,
중성실리카겔1g,산성실리카겔5
g,중성실리카겔2g,무수황산나트
륨2g의순서로--------.
무수황산나트륨2g
중성실리카겔2g
산성실리카겔5g
중성실리카겔1g
염기성실리카겔3g
중성실리카겔1g
무수황산나트륨1g
<그림1>다층실리카겔칼럼
4)～8)(생략)
<표1>분석대상폴리염화비페닐9.4.2기체크로마토그래프/질량분석기에
의한시험
가.(현행과같음)
나.분석원리
--------------- 속슬렛---
----------------------.
다.(현행과같음)
라.시약및시액
1)～2)(현행과같음)
3)다층실리카겔칼럼：-------
----무수황산나트륨1g,중성실
리카겔1g,염기성실리카겔3g,
중성실리카겔1g,산성실리카겔5
g,중성실리카겔2g,무수황산나
트륨2g의순서로--------.
무수황산나트륨2g
중성실리카겔2g
산성실리카겔5g
중성실리카겔1g
염기성실리카겔3g
중성실리카겔1g
무수황산나트륨1g
그림1.다층실리카겔칼럼
4)～8)(현행과같음)
표1.분석대상폴리염화비페닐- 351 -현행 개정(안)
(indicatorPCBs7종)의표준물질
동족체IUPAC
번호
(생략)(생략)(생략)
<신설>
9)～10)(생략)
<표2>폴리염화비페닐의검량선작성용
표준용액
 (단위:㎍/mL)
표준액IUPAC
번호(생략)
(생략)(생략)(생략)
(생략)
마.시험용액의조제
1)조지방추출
-------------------------
------속실렛추출장치용---
-------------------------
-----속실렛추출장치용---
-------------------------
-----속실렛추출장치를---
------.
2)(생략)(indicatorPCBs7종)의표준물질
동족체BZ번호*
(현행과
같음)(현행과같음)(현행과
같음)
*BallschmiterandZell번호:PCBs의
각페닐고리의염소위치를나타낸
번호
9)～10)(현행과같음)
표2.폴리염화비페닐의검량선작성용
표준용액
 (단위:㎍/mL)
표준액BZ번호(현행과같음)
(현행과
같음)(현행과
같음)(현행과같음)
(현행과같음)
마.시험용액의조제
1)조지방추출
-------------------------
------속슬렛추출장치용---
-------------------------
-----속슬렛추출장치용---
-------------------------
-----속슬렛추출장치를---
------.
2)(현행과같음)- 352 -현행 개정(안)
바.(생략)
<표3>대상물질및이온세기의이
론비
동족체IUPAC
번호(생략)
(생략)(생략)(생략)
(생략)
사.～아.(생략)
9.5벤조피렌
9.5.1(생략)
9.5.2식용유지중벤조피렌
가.제1법
1)시험법적용범위
식용유지에적용한다.
2)～3)(생략)
4)시약및시액
가)～나)(생략)
다)플로리실카트리지(Florisil
cartridge)：SPE용또는이
와동등한것
라)～자)(생략)
5)시험용액의조제
가)(생략)바.(현행과같음)
표3.대상물질및이온세기의이론비
동족체BZ번호(현행과같음)
(현행과
같음)(현행과
같음)(현행과같음)
(현행과같음)
사.～아.(현행과같음)
9.5벤조피렌
9.5.1(현행과같음)
9.5.2식용유지중벤조피렌
가.제1법
1)시험법적용범위
식용유지(어유(크릴유)제외)에적
용한다.
2)～3)(현행과같음)
4)시약및시액
가)～나)(현행과같음)
다)플로리실또는실리카카트
리지:플로리실또는실리
카1g을함유한SPE용또
는이와동등한것
라)～자)(현행과같음)
5)시험용액의조제
가)(현행과같음)- 353 -현행 개정(안)
나)정제
후로리실카트리지는 -------.
6)～8)(생략)
나.제2법
1)시험법적용범위
식용유지에적용한다.
2)～3)(생략)
4)시약및시액
가)～나)(생략)
다)실리카카트리지:SPE용
또는이와동등한것
라)～자)(생략)
5)시험용액의조제
가)(생략)
나)정제
실리카카트리지는-------.
6)(생략)
(7)(생략)
(8)(생략)
9.5.3(생략)
9.5.4수산물및그가공품,훈제식나)정제
카트리지는--------------.
6)～8)(현행과같음)
나.제2법
1)시험법적용범위
식용유지(어유(크릴유)제외)에적
용한다.
2)～3)(현행과같음)
4)시약및시액
가)～나)(현행과같음)
다)플로리실또는실리카카트
리지:플로리실또는실리
카1g을함유한SPE용또
는이와동등한것
라)～자)(현행과같음)
5)시험용액의조제
가)(현행과같음)
나)정제
카트리지는--------------.
6)(현행과같음)
7)(현행과같음)
8)(현행과같음)
9.5.3(현행과같음)
9.5.4수산물및그가공품,훈제식- 354 -현행 개정(안)
육가공품및특수용도식품중
벤조피렌
가.시험법적용범위
수산물및그가공품,훈제식육
가공품및특수용도식품에한한다.
나.～아.(생략)
9.6.∼9.16(생략)육가공품,특수용도식품및
어유(크릴유)중벤조피렌
가.시험법적용범위
수산물및그가공품,훈제식육
가공품,특수용도식품및어유(크릴
유)에한한다.
나.～아.(현행과같음)
9.6.∼9.16(현행과같음)
9.17테트라하이드로칸나비놀 (δ
-9-Tetrahydrocannabinol)
가.(생략)
(생략)
나.(생략)
검체를헥산으로추출하고여과하
여질량분석기가부착된기체크로
마토그래프로분석한다.
다.장치
기체크로마토그래프/질량분석기
(GC/MS)를사용한다.
라.시약및시액
1)용매:기체크로마토그래피용
또는이와동등한것
2)내부표준용액및용매
테스토스테론(Testosterone)표준9.17테트라하이드로칸나비놀 (δ
-9-Tetrahydrocannabinol)및칸나
비디올(Cannabidiol)시험법
가.(현행과같음)
(현행과같음)
나.(현행과같음)
----메탄올로--------------
--액체크로마토그래프/질량분석
기----------.
다.장치
액체크로마토그래프-질량분석기
(LC-MS/MS)-------.
라.시약및시액
1)----:액체크로마토그래피용
---------------
2)표준원액:CBD(Cannabidiol),
T HC ( ( - ) δ- 355 -현행 개정(안)
품을노말헥산(n-hexane)에녹여
10mg/kg이되도록조제한다.
이때,표준품및용매는모두무
게를재서농도를맞춘다.
3)표준원액:THC(δ
-9-Tetrahydrocannabiol) 1
mg/mL(알코올)로서시판되는
원액이다.
4)(생략)
마.시험용액의조제
뚜껑이달린유리시험관에검체
(대마씨앗은500g을잘혼합하여
분쇄,액체검체의경우분취전
에충분히혼합된검체)10g을
정밀히달고,내부표준용액200g
을첨가하여20분간초음파세척기
로균질화한다.대마씨앗의경우,
24시간동안방치하고,대마씨유는
5분간진탕혼합기를이용하여강
하게흔들어준뒤,상등액을취
하여멤브레인필터로정제한후
시험용액으로한다.
바.시험조작
1)기체크로마토그래프/질량분석-9-Tetrahydrocannabinol)표
준품을각각메탄올에녹여
100mg/L가되게한다.
3)표준용액:표준원액을무처리
시료추출물을이용하여적당
한농도로혼합,희석한다(무
처리시료추출물90%이상
포함).
4)(현행과같음)
마.시험용액의조제
검체를균질화한후1g에메탄올
20mL을가하여10분간진탕한
후10분간초음파추출한다.이를
4℃,4,000G에서10분간원심분
리하고상등액을멤브레인필터
(PTFE,0.2μm)로여과한후시
험용액으로한다.
바.시험조작
1)액체크로마토그래프의분석조- 356 -현행 개정(안)
기(GC/MS)의측정조건
가)칼럼:DB-5MS(30m×
0.25mm,고정상두께0.25
㎛)또는이와동등한것
나)운반기체및흐름속도:헬륨
1.2mL/분
다)칼럼오븐온도:65℃에서검
체를주입하고40℃/분의비
율로250℃까지온도를상승
시키고,250℃부터320℃까
지는10℃/분비율로상승시
킨후,10분이상유지한다.
라)주입부:Splitless모드(32
0℃)
마)주입량:1μL
바)검출기:질량분석기온도
(300℃),인터페이스온도
(320℃)
사)선택이온조건(Selected-ion
mode):THC(m/z=299),건
가)칼럼:C18계역상칼럼또는
이와동등한것
나)칼럼온도:40℃
다)이동상
(1)이동상A:0.1%포름산함
유물
(2)이동상B:0.1%포름산함
유아세토니트릴
(3)농도구배조건
시간(분)A(%)B(%)
0.0 7030
0.5 7030
2.5 3070
10 3070
10.1 7030
11.0 7030
라)이동상유속:0.4mL/min
마)주입량:5μL- 357 -현행 개정(안)
Testosterone(m/z=124)
2)검량선의작성
표준용액을농도별로일정량취
하여기체크로마토그래프에각각
주입한다.얻어진크로마토그램
상의각분석물질과내부표준물
질의면적비와농도비를이용하
여검량선을작성한다.이때,표
준품,내부표준물질및용매는
모두무게를재서농도를구한
다.2)질량분석기분석조건
가)이온화:ESIpositive-ion
mode
나)분자량범위:100～500
m/z
표.액체크로마토그래프-질량분석기
분석을위한특성이온
분석
성분
(Compou
nd)평균
분자량
(MW)관측
질량
(Exact
mass)선구
이온
(Precurso
rion,
[M+H]+,
m/z)생성
이온
(Product
ion,
m/z)충돌
에너지
(Collision
energy,
eV)
칸나
비디올
(Canna
bidiol)314.5314.20315193.11)23
259.220
테트라
하이드로
칸나비놀
(Tetra
hydro
canna
binol)314.5314.22315193.11)25
259.314
1)정량이온이며,그외는정성이온
임.
※각생성이온에대한질량분석기
의기기조건은사용기기의최적
값으로변경하여사용할수있으
며,제시된이외의생성이온도
적용이가능함.- 358 -현행 개정(안)
3)표준품의크로마토그램
THC 5 ppmTestosterone(Interna
l Standard) 10 ppm
THC fragmentation 
spectrumTestosterone 
fragmentation 
spectrum
라)정량한계:대마씨앗및대마씨
유(0.1mg/kg)
사.정성시험3)검량선의작성
표준용액을농도별로일정량취
하여액체크로마토그래프-질량
분석기에각각주입하여얻은
크로마토그램상의피크높이또
는면적을구하여검량선을작
성한다.
4)표준품의크로마토그램
그림.액체크로마토그래프-질량분석
기에서표준품의크로마토그
램
CBD(4.7분),THC(5.7분)
*분석기기:LC(ThermoscientificⓇAccela),
MS/MS(ThermoscientificⓇUS/TSQ
vantage),칼럼(WatersXSelectⓇHSSC18SB,
2.1mmI.D..×100mmL.,2.5μm)
5)정량한계:0.1mg/kg
사.정량시험- 359 -현행 개정(안)
위의조건에서얻어진크로마토그
램상의피크는동일한측정조건에
서표준용액피크의머무름시간
과일치하여야하며질량분석기의
딸이온의분포를이용하여표준용
액과시험용액이동일한질량스펙
트럼을보여야한다.
아.정량시험
정성시험에의해얻은THC피크
면적,내부표준물질의피크면적으
로부터다음과같이정량을한다.
가)계산방법
R =ASIS×CS THC
ASTHC×CS IS
AR =AATHC
AAIS
CTHC =AR×R×CA IS×SA
WA----------------------------
-----피크가표준용액피크의머
무름시간과일치할때피크높이
또는면적을검량선에대입하여정
량한다.- 360 -현행 개정(안)
R
ASTHC
ASIS
CSTHC
CSIS
AR
AATHC
AAIS
CAIS
SA
WA
CTHC:반응계수(표준용액내THC와Testosterone의피크면적및
농도비간비율)
:표준용액중THC의피크면적
:표준용액중Testosterone의피크면적
:표준용액중THC의농도(mg/kg)
:표준용액중Testosterone의농도(mg/kg)
:시험용액중THC와Testosterone의피크면적비
:시험용액중THC의피크면적
:시험용액중Testosterone의피크면적
:시험용액중Testosterone의농도(mg/kg)
:검체용해내부표준용액무게(mg)
:검체무게(mg)
:검체의THC농도(mg/kg)
9.18.∼12.(생략) 9.18.∼12(현행과같음)
[별표1]“식품에사용할수있는원료”의목록
1.식물성
고유
번호명 칭기타
명칭 
또는 
시장
명칭학명 또는 특성사용부위
(생약명)
A가000100
〜
A가051000(생  략)
A가051100둥근마쓴감자마 ,
Air
PotatoDioscorea bulbifera
L./Dioscorea
sativa L.덩이뿌리
A가051200
〜
A가060300(생  략)
A가060400마참마,
East
Asian
mountain
yamDio sco rea batatas 
Decaisne /
Dio sco rea jap onica 
Thunberg /
Dio sco rea
po kystachya /
<신설>뿌리,
뿌리줄기
※
(산약),
주아(영
여자)
A가060500
〜
A가075700(생  략)[별표1]“식품에사용할수있는원료”의목록
1.식물성
고유
번호명 칭기타
명칭 
또는 
시장
명칭학명 또는 특성사용부위
(생약명)
A가000100
〜
A가051000(현행과 같음)
A가051100둥근마쓴감자마 ,
Air
PotatoDioscorea bulbifera
L./Dioscorea
sativa L.덩이뿌리
(덩이열매 )
A가051200
〜
A가060300(현행과 같음)
A가060400마참마,
East
Asian
mountain
yamDio sco rea batatas 
Decaisne /
Dio sco rea jap onica 
Thunberg /
Dio sco rea
po kystachya /
Dio sco rea o pp osita 뿌리,
뿌리줄기
※
(산약),
주아(영여
자)
A가060500
〜
A가075700(현행과 같음)- 361 -현행 개정(안)
A가075800바닐라<신설>,
Vanilla
OrchidVanilla p lanifo lia G.
Jackson /
<신설>열매(씨 
포함)
A가075900
〜
A가083000(생  략)
A가083100벼쌀,현미,
백미,
미강,
RiceOryza sativa /
Oryza glaberrim a씨앗,
겨(속껍질
,왕겨 
제외),순
A가083200
〜
A가102100(생  략)
A가102200석류나무Dwarf
Pomegra
natePunica granatum L.
/Punica flo rid a
Salisb.열매(열매
껍질,
씨앗 
제외)
A가102300
〜
A가124600(생  략)
A가124700여두쥐눈이콩 ,
서목태Rhynchosia vo lubilis 열매
A가124800
〜
A가130000(생  략)
A가130100왕느릅나
무유백피 ,
큰잎느릅
나무,
Large-fru
itelmUlm us m acro carpa
Hance나무껍질
※
(유백피 )
A가130200
〜
A가178200(생  략)
A가178300풍선난초풍선란 ,
주걱난초 ,
애기숙갈
난초,
풍선란 ,
Calypso
Orchid,
Fairyslip
per
Orchid,
Fairy-slip
per
orchidCalyp so bulbo sa (L.)
/Calypso borealis 
Salisb.덩이줄기
A가178400
〜
A가183900(생  략)A가075800바닐라타히티 ,
Vanilla
OrchidVanilla p lanifo lia G.
Jackson /
Vanilla tahitensis 열매(씨 
포함)
A가075900
〜
A가083000(현행과 같음)
A가083100벼쌀,현미,
백미,
미강,
RiceOryza sativa /
Oryza glaberrim a씨앗,
겨(왕겨 
제외),순
A가083200
〜
A가102100(현행과 같음)
A가102200석류나
무Dwarf
Pomegra
natePunica granatum L.
/Punica flo rid a
Salisb.열매(열매
껍질
제외)
A가102300
〜
A가124600(현행과 같음)
A가124700여두쥐눈이콩 ,
서목태 ,
약콩Rhynchosia vo lubilis 열매
A가124800
〜
A가130000(현행과 같음)
A가130100왕느릅
나무유백피 ,
큰잎느릅
나무,
Large-fru
itelmUlm us m acrocarp a
Hance나무껍질
※
(유백피 ,
유근피 )
A가130200
〜
A가178200(현행과 같음)
A가178300풍선난
초풍선란 ,
주걱난초 ,
애기숙갈
난초,
Calypso
Orchid, 
Fairyslip
per
Orchid,
Fairy-slip
per
orchidCalyp so bulbo sa (L.)
/Calypso borealis 
Salisb.덩이줄기
A가178400
〜
A가183900(현행과 같음)- 362 -현행 개정(안)
A가184000호리병박박,
바가지 ,
바가지박 ,
Bottle
gourd,
calabash,
Yuugao,
White-flo
werd
gourd,
CalabashLagenaria leucantha 
Rusby /Lagenaria
siceraria (Molina)
Standl. /aganaria
leucantha var.
d ep ressa H.Hara열매
A가184100
〜
A가367400(생  략)A가184000호리병
박박,
바가지 ,
바가지박 ,
Bottle
gourd,
calabash,
Yuugao,
White-flo
werd
gourd,
CalabashLagenaria leucantha 
Rusby /Lagenaria
siceraria (Molina)
Standl. /Laganaria
leucantha var.
d ep ressa H.Hara열매
A가184100
〜
A가367400(현행과 같음)
2.동물성
고유
번호명칭기타명칭 
또는 
시장명칭학명 또는 특성사용부위
(생약명 )
A나000100
〜
A나014000(생  략)
A나014100깜장북방
대합 Stimpson
’smactra　Sp isula po lynym a -
A나014200
〜
A나033100(생  략)
<신  설>
A나033200
〜
A나055800(생  략)
A나055900식용달팽
이-Helix p om atia /
Nesio helix
sam arangae /
Achatina fulica
(Bowdich) 
Achatinidae-
A나056000
〜
A나057600(생  략)
A나057700아귀Blackmo
uth
angler,
Blackmo
uth
goosefishLo phio m us setigerus -2.동물성
고유
번호명칭기타명칭 
또는 
시장명칭학명 또는 특성사용부위
(생약명 )
A나000100
〜
A나014000(현행과 같음)
A나014100깜장북방
대합 Stimpson’
smactra　Spisula p olynym a
/Mactrom eris
po lynym a-
A나014200
〜
A나033100(현행과 같음)
A나033150매오징어Sparking
enope
squidWatasenia
scintillans-
A나033200
〜
A나055800(현행과 같음)
A나055900식용달팽
이-Helix po m atia /
Nesiohelix
sam arangae /
Achatina fulica
(Bowdich) 
Achatinidae /
Helix luco rum-
A나056000
〜
A나057600(현행과 같음)
A나057700아귀Blackmou
thangler,
Blackmou
th
goosefishLo phiom us
setigerus /Lo phius
gastrop hysus-- 363 -현행 개정(안)
3∼4.(생략)A나057800
〜
A나077800(생  략)
A나077900캥거루 - Macro pus giganteus 정육
A나078000
〜
A나092900(생  략)
<신  설>
A나093000
〜
A나095600(생  략)
3∼4.(현행과같음)A나057800
〜
A나077800(현행과 같음)
A나077900캥거루 -Macro pus
giganteus /
Macro pus rufus /
Macro pus ro bustus정육
A나078000
〜
A나092900(현행과 같음)
A나092950Japanese
sea
cucumbe
r-Stichop us japo nicus
/Apo sticho pus
japo nicus-
A나09030
〜
A나095600(현행과 같음)
[별표2]“식품에제한적으로사용할
수있는원료”의목록
1.식물성
고유
번호명칭기타명칭 
또는 
시장명칭학명 또는 
특성사용부위
(생약명 )사용
조건
B가000100
∼
B가006900(생  략)
<신  설>
B가007000
∼
B가007200(생  략)
B가007300소나
무Korean
redpinePinus
d ensiflora Sieb
&Zucc. /
Pinus
sylvestris L.뿌리 -[별표2]“식품에제한적으로사용할
수있는원료”의목록
1.식물성
고유
번호명칭기타명칭 
또는 
시장명칭학명 또는 
특성사용부위
(생약명 )사용
조건
B가000100
∼
B가006900(현행과 같음)
B가006950석류
나무Dwarf
Pomegra
natePunica
granatum L.
/Punica
flo rid a Salisb.씨앗어린이 
제품에 
사용하여
서는 
아니됨
B가007000
∼
B가007200(현행과 같음)
B가007300소나
무Korean
redpinePinus
d ensiflo ra 
Sieb &
Zucc. /
Pinus
sylvestris L.뿌리,
솔방울솔방울은 
주류(일반
증류주 )의
원료에 
한함- 364 -현행 개정(안)
2.(생략)
3.미생물B가007400
∼
B가008600(생  략)
B가008700옻나
무칠목, 
Chinese
SumacRhus
verniciflua
Stokes줄기,
가지동 공전 
제2,1,
1),(10)
옻나무의 
사용기준
에 따름
B가008800
∼
B가014900(생  략)
고유
번호명칭기타명칭 
또는 
시장명칭학명 또는 
특성사용
조건
B다000100
∼
B다001600(생  략)
B다001700Mo nascus
ank aMonascus
purp ureusMo nascus
anka주류 제조,
홍국쌀 등 
곡류 제조,
콩껍질
(두피)에 
접종하여 
발효에 한함
B다001800Mo nascus
pilosus-Mo nascus
p ilo sus주류 제조,
홍국쌀 등 
곡류 제조,
콩껍질
(두피)에 
접종하여 
발효에 한함
B다001900Mo nascus
purpureusMonascus
ank aMo nascus
p urpureus주류 제조,
콩껍질
(두피)에 
접종하여 
발효에 한함
B다002000Mo nascus
ruberMonascus
fuligino sis,
Monascus
vitreusMo nascus
rube주류 제조에 
한함
2.(현행과같음)
3.미생물B가007400
∼
B가008600(현행과 같음)
B가008700옻나
무칠목Rhus
verniciflua
Stokes줄기,
가지동 공전 
제2,1,
1),(10)
옻나무의 
사용기준
에 따름
B가008800
∼
B가014900(현행과 같음)
고유
번호명칭기타명칭 
또는 
시장명칭학명 또는 
특성사용
조건
B다000100
∼
B다001600(현행과 같음)
<삭  제 >
<삭  제 >
B다001900Mo nascus
purpureusMo nascus
ank aMo nascus
p urpureus주류 제조,
홍국쌀등 곡류 
제조,
콩껍질 (두피)에 
접종하여 
발효에 한함
B다002000Mo nascus
ruberMonascus
p ilo sus,
Monascus
fuligino sis,
Monascus
vitreus,Mo nascus
rube주류 제조,
홍국쌀등 곡류 
제조,
콩껍질 (두피)에 
접종하여 
발효에 한함- 365 -현행 개정(안)
B다002100
∼
B다004100(생  략)B다002100
∼
B다004100(생  략)
[별표3](생략) [별표3](현행과같음)
[별표4]농산물의농약잔류허용기준
(1)이미녹타딘(Iminoctadine)
(생략)
고구마0.05T
(2)(생략)
(3)글리포세이트(Glyphosate)
(생략)
<신설>
(4)∼(8)(생략)
(9)델타메트린(Deltamethrin)
(생략)
토란 0.05T
(10)∼(20)(생략)
(21)디클로르보스(Dichlorvos)
(생략)[별표4]농산물의농약잔류허용기준
(1)이미녹타딘(Iminoctadine)
(현행과같음)
고구마0.05
(2)(현행과같음)
(3)글리포세이트(Glyphosate)
(현행과같음)
차 0.8†
(4)∼(8)(현행과같음)
(9)델타메트린(Deltamethrin)
(현행과같음)
토란 0.05
(10)∼(20)(현행과같음)
(21)디클로르보스(Dichlorvos)
(현행과같음)- 366 -현행 개정(안)
표고버섯0.05T
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(22)∼(28)(생략)
(29)디플루벤주론(Diflubenzuron)
(생략)
풋콩 1.0
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(30)(생략)
(31)마이클로뷰타닐(Myclobutanil)
(생략)
<신설>
<신설>표고버섯0.05
가지 0.05
무(뿌리)0.05
부추 0.05
브로콜리0.3
순무 0.05
시금치1.0
(22)∼(28)(현행과같음)
(29)디플루벤주론(Diflubenzuron)
(현행과같음)
풋콩 2.0
건삼0.5
복분자 1.0
수삼0.2
키위 0.5
(30)(현행과같음)
(31)마이클로뷰타닐(Myclobutanil)
(현행과같음)
귀리0.5
메밀 0.15- 367 -현행 개정(안)
(32)∼(45)(생략)
(46)메틸브로마이드(Methylbromide)
(생략)
체리 20T
<신설>
(47)∼(49)(생략)
(50)베나락실(Benalaxyl)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(51)∼(53)(생략)
(54)벤타존(Bentazone)
(생략)
<신설>
<신설>
(55)뷰프로페진(Buprofezin)
(생략)(32)∼(45)(현행과같음)
(46)메틸브로마이드(Methylbromide)
(현행과같음)
<삭제>
핵과류20†
(47)∼(49)(현행과같음)
(50)베나락실(Benalaxyl)
(현행과같음)
갓 0.05
고들빼기0.05
들깻잎0.05
파 0.05
(51)∼(53)(현행과같음)
(54)벤타존(Bentazone)
(현행과같음)
들깨 0.05
풋콩 0.05
(55)뷰프로페진(Buprofezin)
(현행과같음)- 368 -현행 개정(안)
<신설>
<신설>
<신설>
(56)∼(58)(생략)
(59)비터타놀(Bitertanol)
(생략)
블루베리1.0T
(60)(생략)
(61)비펜트린(Bifenthrin)
(생략)
복분자 0.3T
아로니아0.3T
표고버섯0.05T
(62)∼(65)(생략)
(66)사이퍼메트린(Cypermethrin)
(생략)
대두 0.05T
<신설>대두 0.05
양파0.05
풋콩 0.7
(56)∼(58)(현행과같음)
(59)비터타놀(Bitertanol)
(현행과같음)
블루베리2.0
(60)(현행과같음)
(61)비펜트린(Bifenthrin)
(현행과같음)
복분자 0.3
아로니아0.5
표고버섯0.05
(62)∼(65)(현행과같음)
(66)사이퍼메트린(Cypermethrin)
(현행과같음)
대두 0.05
풋콩 0.07- 369 -현행 개정(안)
(67)사이플루트린(Cyfluthrin)
(생략)
<신설>
(68)사이할로트린(Cyhalothrin)
(생략)
<신설>
(69)∼(77)(생략)
(78)알라클로르(Alachlor)
(생략)
배추0.05T
<신설>
<신설>
(79)∼(84)(생략)
(85)에토펜프록스(Etofenprox)
(생략)
시금치0.5
아로니아1.0T
(86)에토프로포스(Ethoprophos)
(생략)(67)사이플루트린(Cyfluthrin)
(현행과같음)
아로니아2.0
(68)사이할로트린(Cyhalothrin)
(현행과같음)
아로니아2.0
(69)∼(77)(현행과같음)
(78)알라클로르(Alachlor)
(현행과같음)
배추0.05
양배추0.05
엇갈이배추0.05
(79)∼(84)(현행과같음)
(85)에토펜프록스(Etofenprox)
(현행과같음)
<삭제>
아로니아15
(86)에토프로포스(Ethoprophos)
(현행과같음)- 370 -현행 개정(안)
더덕0.05T
생강0.02T
셀러리0.05T
수수 0.005T
아스파라거스0.05T
참나물0.05T
(87)∼(98)(생략)
(99)이사-디(2,4-D,
2,4-dichlorophenoxyaceticacid)
(생략)
<신설>
(100)∼(109)(생략)
(110)카두사포스(Cadusafos)
(생략)
더덕0.05T
오미자 0.05T
<신설>
<신설>
(111)(생략)더덕0.05
생강0.05
셀러리0.05
수수 0.05
아스파라거스0.05
참나물0.05
(87)∼(98)(현행과같음)
(99)이사-디(2,4-D,
2,4-dichlorophenoxyaceticacid)
(현행과같음)
율무0.05
(100)∼(109)(현행과같음)
(110)카두사포스(Cadusafos)
(현행과같음)
더덕0.05
오미자 0.05
들깨 0.05
오미자(건조)0.05
(111)(현행과같음)- 371 -현행 개정(안)
(112)카벤다짐(Carbendazim)
(생략)
구기자2.0T
마 0.05T
아스파라거스0.2T
조 0.05T
<신설>
<신설>
(113)(생략)
(114)카보퓨란(Carbofuran)
(생략)
<신설>
(115)(생략)
(116)카탑(Cartap)
(생략)
녹두 0.05T
팥 0.05T
무(뿌리)1.0T
무(잎)1.0T
<신설>
<신설>(112)카벤다짐(Carbendazim)
(현행과같음)
구기자2.0
마 0.05
아스파라거스0.7
조 0.7
구기자(건조)2.0
마(건조)0.05
(113)(현행과같음)
(114)카보퓨란(Carbofuran)
(현행과같음)
풋콩 0.05
(115)(현행과같음)
(116)카탑(Cartap)
(현행과같음)
녹두 0.05
팥 0.05
무(뿌리)1.0
무(잎)10
강낭콩0.05
당근 0.05- 372 -현행 개정(안)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(117)(생략)
(118)캡탄(Captan)
(생략)
자두 5.0T
(119)∼(132)(생략)
(133)테부코나졸(Tebuconazole)
(생략)
녹두 0.05T
복분자 0.5T
우엉0.05T
<신설>
(134)(생략)대두 0.05
동부 0.05
부추 1.5
브로콜리0.3
완두0.05
풋콩 2.0
호박0.07
호박잎3.0
(117)(현행과같음)
(118)캡탄(Captan)
(현행과같음)
자두 5.0
(119)∼(132)(현행과같음)
(133)테부코나졸(Tebuconazole)
(현행과같음)
녹두 0.2
복분자 1.0
우엉0.07
우엉(잎)5.0
(134)(현행과같음)- 373 -현행 개정(안)
(135)터부포스(Terbufos)
(생략)
<신설>
<신설>
(136)∼(145)(생략)
(146)트리클로피르(Triclopyr)
(생략)
<신설>
<신설>
(147)∼(148)(생략)
(149)트리플루미졸(Triflumizole)
(생략)
<신설>
(150)∼(160)(생략)
(161)페녹사프로프-에틸
(Fenoxaprop-ethyl)
(생략)
<신설>(135)터부포스(Terbufos)
(현행과같음)
다채0.2
청경채0.3
(136)∼(145)(현행과같음)
(146)트리클로피르(Triclopyr)
(현행과같음)
배 0.05
복숭아0.05
(147)∼(148)(현행과같음)
(149)트리플루미졸(Triflumizole)
(현행과같음)
풋콩 0.05
(150)∼(160)(현행과같음)
(161)페녹사프로프-에틸
(Fenoxaprop-ethyl)
(현행과같음)
들깨 0.05- 374 -현행 개정(안)
(162)페니트로티온(Fenitrothion)
(생략)
호프0.05T
(163)∼(169)(생략)
(170)펜토에이트(Phenthoate)
(생략)
복분자 0.5T
아로니아0.5T
(171)펜프로파트린(Fenpropathrin)
(생략)
갯기름나물5.0T
(172)(생략)
(173)포레이트(Phorate)
(생략)
콜라비0.05T
(174)∼(177)(생략)
(178)폭심(Phoxim)(162)페니트로티온(Fenitrothion)
(현행과같음)
호프30
(163)∼(169)(현행과같음)
(170)펜토에이트(Phenthoate)
(현행과같음)
복분자 1.0
아로니아3.0
(171)펜프로파트린(Fenpropathrin)
(현행과같음)
갯기름나물5.0
(172)(현행과같음)
(173)포레이트(Phorate)
(현행과같음)
콜라비0.05
(174)∼(177)(현행과같음)
(178)폭심(Phoxim)- 375 -현행 개정(안)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(179)폴펫(Folpet)
(생략)
체리 2.0T
<신설>
<신설>
(180)∼(182)(생략)
(183)플루아지포프-뷰틸(Fluazifop-butyl)
(생략)
취나물 0.05T
<신설>
<신설>
(184)∼(191)(생략)
(192)프로피코나졸(Propiconazole)
(생략)
땅콩 0.05T(현행과같음)
건삼3.0
고구마0.05
고구마줄기0.05
수삼0.7
(179)폴펫(Folpet)
(현행과같음)
체리 3.0
대추 3.0
대추(건조)5.0
(180)∼(182)(현행과같음)
(183)플루아지포프-뷰틸(Fluazifop-butyl)
(현행과같음)
취나물 0.05
산마늘잎1.0
생강0.05
(184)∼(191)(현행과같음)
(192)프로피코나졸(Propiconazole)
(현행과같음)
땅콩 0.05- 376 -현행 개정(안)
(193)∼(199)(생략)
(200)헥사코나졸(Hexaconazole)
(생략)
귀리0.2T
마 0.05T
생강0.05T
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(201)헥시티아족스(Hexythiazox)
(생략)
갯기름나물5.0T
(202)∼(205)(생략)
(206)클로르페나피르(Chlorfenapyr)
(생략)
고구마0.05T
녹두 0.05T(193)∼(199)(현행과같음)
(200)헥사코나졸(Hexaconazole)
(현행과같음)
귀리0.2
마 0.05
생강0.3
당귀(잎)2.0
마(건조)0.05
엇갈이배추0.05
배추0.05
쑥 2.0
우엉0.05
(201)헥시티아족스(Hexythiazox)
(현행과같음)
갯기름나물5.0
(202)∼(205)(현행과같음)
(206)클로르페나피르(Chlorfenapyr)
(현행과같음)
고구마0.05
녹두 0.05- 377 -현행 개정(안)
대두 0.05T
땅콩 0.05T
풋콩 0.5T
<신설>
<신설>
<신설>
(207)테부페노자이드(Tebufenozide)
(생략)
앵두1.0T
(208)테부펜피라드(Tebufenpyrad)
(생략)
토란 0.05T
(209)∼(211)(생략)
(212)플루페녹수론(Flufenoxuron)
(생략)
브로콜리0.07
토란 0.05T
<신설>
(213)∼(214)(생략)대두 0.05
땅콩 0.05
풋콩 2.0
강낭콩0.05
동부 0.05
완두0.05
(207)테부페노자이드(Tebufenozide)
(현행과같음)
앵두2.0
(208)테부펜피라드(Tebufenpyrad)
(현행과같음)
토란 0.05
(209)∼(211)(현행과같음)
(212)플루페녹수론(Flufenoxuron)
(현행과같음)
브로콜리0.1
토란 0.05
토마토 0.05
(213)∼(214)(현행과같음)- 378 -현행 개정(안)
(215)피프로닐(Fipronil)
(생략)
<신설>
(216)∼(217)(생략)
(218)디메토모르프(Dimethomorph)
(생략)
녹두 0.05T
도라지 0.05T
<신설>
<신설>
(219)∼(220)(생략)
(221)디티아논(Dithianon)
(생략)
녹두 0.05T
(222)∼(224)(생략)
(225)사이프로디닐(Cyprodinil)
(생략)
아로니아1.0T
복분자 1.0T(215)피프로닐(Fipronil)
(현행과같음)
고구마줄기0.05
(216)∼(217)(현행과같음)
(218)디메토모르프(Dimethomorph)
(현행과같음)
녹두 0.5
도라지 0.05
귀리0.5
밀 0.2
(219)∼(220)(현행과같음)
(221)디티아논(Dithianon)
(현행과같음)
녹두 0.2
(222)∼(224)(현행과같음)
(225)사이프로디닐(Cyprodinil)
(현행과같음)
아로니아7.0
복분자 10†- 379 -현행 개정(안)
<신설>
<신설>
(226)(생략)
(227)아세타미프리드(Acetamiprid)
(생략)
<신설>
(228)아족시스트로빈(Azoxystrobin)
(생략)
사탕무0.1T
크랜베리0.5T
홍화씨0.1T
<신설>
(229)(생략)
(230)크레속심메틸(Kresoxim-methyl)
(생략)
블루베리1.0T
(231)클로르플루아주론(Chlorfluazuron)
(생략)
땅콩 0.05T강낭콩0.2†
완두0.3†
(226)(현행과같음)
(227)아세타미프리드(Acetamiprid)
(현행과같음)
잣 0.5
(228)아족시스트로빈(Azoxystrobin)
(현행과같음)
사탕무4.0†
크랜베리0.5†
홍화씨0.2
귀리0.3
(229)(현행과같음)
(230)크레속심메틸(Kresoxim-methyl)
(현행과같음)
블루베리2.0
(231)클로르플루아주론(Chlorfluazuron)
(현행과같음)
땅콩 0.05- 380 -현행 개정(안)
<신설>
(232)(생략)
(233)펜사이큐론(Pencycuron)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
(234)펜피록시메이트(Fenpyroximate)
(생략)
대추 0.1T
살구 0.1T
<신설>
<신설>
<신설>
(235)포스티아제이트(Fosthiazate)
(생략)
더덕0.05T
무(뿌리)0.05T
(236)(생략)앵두0.4
(232)(현행과같음)
(233)펜사이큐론(Pencycuron)
(현행과같음)
도라지 0.05
우엉0.05
참나물30
(234)펜피록시메이트(Fenpyroximate)
(현행과같음)
대추 1.0
살구 0.6
대추(건조)1.5
매실 0.6
아로니아0.3
(235)포스티아제이트(Fosthiazate)
(현행과같음)
더덕0.05
무(뿌리)0.05
(236)(현행과같음)- 381 -현행 개정(안)
(237)피메트로진(Pymetrozine)
(생략)
토란(줄기)0.05T
(238)플루디옥소닐(Fludioxonil)
(생략)
복분자 2.0
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(239)플루아지남(Fluazinam)
(생략)
녹두 0.07T
참나물0.05T
<신설>
<신설>
(240)∼(247)(생략)
(248)아바멕틴(Abamectin)
(생략)
<신설>(237)피메트로진(Pymetrozine)
(현행과같음)
토란(줄기)0.1
(238)플루디옥소닐(Fludioxonil)
(현행과같음)
복분자 5.0†
도라지 2.0
배추3.0
사탕무4.0†
엇갈이배추7.0
완두0.3†
(239)플루아지남(Fluazinam)
(현행과같음)
녹두 0.1
참나물30
우엉0.05
우엉잎3.0
(240)∼(247)(현행과같음)
(248)아바멕틴(Abamectin)
(현행과같음)
망고0.05- 382 -현행 개정(안)
(249)에마멕틴벤조에이트
(Emamectinbenzoate)
(생략)
땅콩 0.05T
토란 0.05T
<신설>
<신설>
(250)(생략)
(251)에톡사졸(Etoxazole)
(생략)
들깻잎0.1T
(252)(생략)
(253)이미벤코나졸(Imibenconazole)
(생략)
<신설>
<신설>
(254)∼(258)(생략)
(259)피리메타닐(Pyrimethanil)(249)에마멕틴벤조에이트
(Emamectinbenzoate)
(현행과같음)
땅콩 0.05
토란 0.05
잣 0.05
토란(줄기)0.2
(250)(현행과같음)
(251)에톡사졸(Etoxazole)
(현행과같음)
들깻잎7.0
(252)(현행과같음)
(253)이미벤코나졸(Imibenconazole)
(현행과같음)
감 0.5
배 0.1
(254)∼(258)(현행과같음)
(259)피리메타닐(Pyrimethanil)- 383 -현행 개정(안)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(260)∼(264)(생략)
(265)디메테나미드(Dimethenamid)
(생략)
호프0.05T
(266)∼(272)(생략)
(273)밀베멕틴(Milbemectin)
(생략)
블루베리0.05T
아로니아0.05T
<신설>
<신설>(현행과같음)
갯기름나물20
고수(잎)2.0
방아잎20
상추 30
섬쑥부쟁이20
쑥갓 20
아욱20
양배추1.0
참나물20
(260)∼(264)(현행과같음)
(265)디메테나미드(Dimethenamid)
(현행과같음)
호프0.05†
(266)∼(272)(현행과같음)
(273)밀베멕틴(Milbemectin)
(현행과같음)
블루베리0.05
아로니아0.05
매실 0.2
살구 0.2- 384 -현행 개정(안)
<신설>
<신설>
(274)(생략)
(275)뷰타클로르(Butachlor)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
(276)∼(282)(생략)
(283)아시벤졸라-에스-메틸
(Acibenzolar-S-methyl)
(생략)
대추 0.2T
<신설>
<신설>
(284)∼(285)(생략)
(286)에트리디아졸(Etridiazole)
(생략)
<신설>자두 0.2
잣 0.05
(274)(현행과같음)
(275)뷰타클로르(Butachlor)
(현행과같음)
배추0.05
양배추0.05
엇갈이배추0.05
(276)∼(282)(현행과같음)
(283)아시벤졸라-에스-메틸
(Acibenzolar-S-methyl)
(현행과같음)
대추 0.2
대추(건조)0.3
체리 0.07
(284)∼(285)(현행과같음)
(286)에트리디아졸(Etridiazole)
(현행과같음)
비름나물0.05- 385 -현행 개정(안)
(287)∼(289)(생략)
(290)인독사카브(Indoxacarb)
(생략)
땅콩 0.02T
무(잎)3.0
표고버섯0.05T
(291)∼(298)(생략)
(299)티플루자마이드(Thifluzamide)
(생략)
생강0.05T
<신설>
<신설>
(300)(생략)
(301)펜헥사미드(Fenhexamid)
(생략)
<신설>
(302)∼(307)(생략)(287)∼(289)(현행과같음)
(290)인독사카브(Indoxacarb)
(현행과같음)
땅콩 0.05
무(잎)7.0
표고버섯0.2
(291)∼(298)(현행과같음)
(299)티플루자마이드(Thifluzamide)
(현행과같음)
생강0.2
도라지 0.07
우엉0.05
(300)(현행과같음)
(301)펜헥사미드(Fenhexamid)
(현행과같음)
양배추1.0
(302)∼(307)(현행과같음)- 386 -현행 개정(안)
(308)플루설파마이드(Flusulfamide)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(309)플루톨라닐(Flutolanil)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
(310)∼(320)(생략)
(321)디노테퓨란(Dinotefuran)
(생략)
고구마줄기0.05T
딸기2.0
무(잎)0.7(308)플루설파마이드(Flusulfamide)
(현행과같음)
감자0.05
갓 0.05
무(뿌리)0.05
무(잎)0.05
브로콜리0.05
양배추0.05
청경채0.05
케일0.05
콜라비0.05
(309)플루톨라닐(Flutolanil)
(현행과같음)
도라지 0.05
배추0.5
엇갈이배추1.5
(310)∼(320)(현행과같음)
(321)디노테퓨란(Dinotefuran)
(현행과같음)
고구마줄기0.05
딸기3.0
무(잎)1.5- 387 -현행 개정(안)
풋마늘0.05
<신설>
<신설>
(322)(생략)
(323)보스칼리드(Boscalid)
(생략)
대두 0.05T
브로콜리0.05T
비트(뿌리)0.05T
비트(잎)0.3T
아로니아5.0T
양배추0.05T
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(324)(생략)
(325)사이아조파미드(Cyazofamid)
(생략)풋마늘0.7
신선초10
유채10
(322)(현행과같음)
(323)보스칼리드(Boscalid)
(현행과같음)
대두 0.05
브로콜리0.05
비트(뿌리)0.3
비트(잎)3.0
아로니아10
양배추0.05
땅콩 0.05
루꼴라0.05
순무유채0.05
신선초0.05
우엉0.05
우엉잎0.05
(324)(현행과같음)
(325)사이아조파미드(Cyazofamid)
(현행과같음)- 388 -현행 개정(안)
토마토 0.5
<신설>
<신설>
<신설>
(326)아세퀴노실(Acequinocyl)
(생략)
<신설>
(327)∼(331)(생략)
(332)클로티아니딘(Clothianidin)
(생략)
도라지 0.05T
(333)테부피림포스(Tebupirimfos)
(생략)
다채0.05T
청경채0.05T
(334)(생략)
(335)트리플록시스트로 빈
(Trifloxystrobin)
(생략)토마토 2.0
부추 10
사과 0.7
호박0.05
(326)아세퀴노실(Acequinocyl)
(현행과같음)
들깨 0.3
(327)∼(331)(현행과같음)
(332)클로티아니딘(Clothianidin)
(현행과같음)
도라지 0.07
(333)테부피림포스(Tebupirimfos)
(현행과같음)
다채0.05
청경채0.05
(334)(현행과같음)
(335)트리플록시스트로 빈
(Trifloxystrobin)
(현행과같음)- 389 -현행 개정(안)
아로니아0.7T
<신설>
(336)∼(344)(생략)
(345)피라클로스트로빈(Pyraclostrobin)
(생략)
녹두 0.05T
<신설>
<신설>
(346)∼(348)(생략)
(349)노발루론(Novaluron)
(생략)
수삼0.05T
<신설>
(350)∼(351)(생략)
(352)메톡시페노자이드(Methoxyfenozide)
(생략)
아로니아0.5T
<신설>
<신설>아로니아2.0
생강0.2
(336)∼(344)(현행과같음)
(345)피라클로스트로빈(Pyraclostrobin)
(현행과같음)
녹두 0.05
고수(잎)3.0
쌀 0.05
(346)∼(348)(현행과같음)
(349)노발루론(Novaluron)
(현행과같음)
수삼0.5
건삼1.5
(350)∼(351)(현행과같음)
(352)메톡시페노자이드(Methoxyfenozide)
(현행과같음)
아로니아1.5
도라지 0.05
들깨 0.3- 390 -현행 개정(안)
<신설>
(353)메트코나졸(Metconazole)
(생략)
키위 0.7T
<신설>
<신설>
(354)∼(356)(생략)
(357)디티오카바메이트(Dithiocarbamates)
(생략)
녹두 0.05T
무(잎)5.0T
양배추2.0T
우엉(잎)5.0T
<신설>
<신설>
<신설>
(358)∼(369)(생략)
(370)벤티아발리카브아이소프로필
(Benthiavalicarb-isopropyl)
(생략)우엉0.07
(353)메트코나졸(Metconazole)
(현행과같음)
키위 1.5
도라지 0.05
우엉0.05
(354)∼(356)(현행과같음)
(357)디티오카바메이트(Dithiocarbamates)
(현행과같음)
녹두 0.05
무(잎)15
양배추3.0
우엉(잎)5.0
브로콜리5.0
아스파라거스0.5
키위 3.0
(358)∼(369)(현행과같음)
(370)벤티아발리카브아이소프로필
(Benthiavalicarb-isopropyl)
(현행과같음)- 391 -현행 개정(안)
복분자 0.1T
콜라비0.05T
<신설>
<신설>
(371)∼(379)(생략)
(380)피리달릴(Pyridalyl)
(생략)
땅콩 0.05T
<신설>
<신설>
(381)육-비에이(Benzyladenine,
6-Benzylaminopurine)
(생략)
<신설>
<신설>
(382)∼(383)(생략)
(384)사이플루페나미드(Cyflufenamid)
(생략)
<신설>
<신설>복분자 0.3
콜라비0.2
부추 0.3
파 0.05
(371)∼(379)(현행과같음)
(380)피리달릴(Pyridalyl)
(현행과같음)
땅콩 0.05
감 0.1
호박0.2
(381)육-비에이(Benzyladenine,
6-Benzylaminopurine)
(현행과같음)
대추 0.05
대추(건조)0.05
(382)∼(383)(현행과같음)
(384)사이플루페나미드(Cyflufenamid)
(현행과같음)
당귀(잎)10
쑥 5.0- 392 -현행 개정(안)
(385)(생략)
(386)플로니카미드(Flonicamid)
(생략)
감 0.3
<신설>
(387)∼(392)(생략)
(393)메트알데하이드(Metaldehyde)
(생략)
더덕0.05T
땅콩 0.05T
생강0.05T
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(394)(생략)
(395)플루오피콜라이드(Fluopicolide)
(생략)
토마토 0.2(385)(현행과같음)
(386)플로니카미드(Flonicamid)
(현행과같음)
감 1.0
팥 0.1
(387)∼(392)(현행과같음)
(393)메트알데하이드(Metaldehyde)
(현행과같음)
더덕0.2
땅콩 0.05
생강0.2
갯기름나물1.0
무(뿌리)0.05
참나물0.05
취나물 0.5
(394)(현행과같음)
(395)플루오피콜라이드(Fluopicolide)
(현행과같음)
토마토 1.5- 393 -현행 개정(안)
<신설>
<신설>
(396)∼(398)(생략)
(399)사이플루메토펜(Cyflumetofen)
(생략)
아로니아0.6T
토란(줄기)0.2T
<신설>
(400)∼(402)(생략)
(403)메타플루미존(Metaflumizone)
(생략)
녹두 0.05T
대두 0.05
커피원두0.05T
<신설>
(404)메트라페논(Metrafenone)
(생략)
오미자 0.3T
<신설>사과 0.5
파 1.5
(396)∼(398)(현행과같음)
(399)사이플루메토펜(Cyflumetofen)
(현행과같음)
아로니아1.0
토란(줄기)0.5
블루베리1.0
(400)∼(402)(현행과같음)
(403)메타플루미존(Metaflumizone)
(현행과같음)
녹두 0.2
대두 0.2†
커피원두0.1†
달래 5.0
(404)메트라페논(Metrafenone)
(현행과같음)
오미자 0.7
오미자(건조)5.0- 394 -현행 개정(안)
(405)사이에노피라펜(Cyenopyrafen)
(생략)
유자 0.5T
토란 0.05T
토란(줄기)0.05T
(406)∼(407)(생략)
(408)스피네토람(Spinetoram)
(생략)
느타리버섯0.05T
토란 0.05T
(409)∼(415)(생략)
(416)클로란트라닐리프롤(Chlorantraniliprole)
(생략)
고구마0.05T
녹두 0.05T
수수 0.05T
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>(405)사이에노피라펜(Cyenopyrafen)
(현행과같음)
유자 0.5
토란 0.05
토란(줄기)0.05
(406)∼(407)(현행과같음)
(408)스피네토람(Spinetoram)
(현행과같음)
느타리버섯0.05
토란 0.05
(409)∼(415)(현행과같음)
(416)클로란트라닐리프롤(Chlorantraniliprole)
(현행과같음)
고구마0.05
녹두 0.05
수수 3.0
강낭콩0.05
고구마줄기0.2
동부 0.05
오미자(건조)1.5
완두0.05- 395 -현행 개정(안)
<신설>
(417)∼(421)(생략)
(422)펜티오피라드(Penthiopyrad)
(생략)
오미자 0.2T
콜라비0.3T
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(423)피콕시스트로빈(Picoxystrobin)
(생략)
<신설>
<신설>
(424)피리플루퀴나존(Pyrifluquinazon)
(생략)
고수(잎)0.05T
옥수수0.05T
토란 0.05T
토란(줄기)0.05T풋콩 1.0
(417)∼(421)(현행과같음)
(422)펜티오피라드(Penthiopyrad)
(현행과같음)
오미자 0.5
콜라비1.0
귀리0.2
도라지 0.05
메밀 1.0
방아잎15
오미자(건조)1.5
(423)피콕시스트로빈(Picoxystrobin)
(현행과같음)
고수(잎)5.0
복분자 2.0
(424)피리플루퀴나존(Pyrifluquinazon)
(현행과같음)
고수(잎)0.2
옥수수0.05
토란 0.05
토란(줄기)0.05- 396 -현행 개정(안)
<신설>
<신설>
(425)∼(426)(생략)
(427)이미시아포스(Imicyafos)
(생략)
더덕0.05T
(428)플루오피람(Fluopyram)
(생략)
수삼0.07T
<신설>
<신설>
(429)(생략)
(430)설폭사플로르(Sulfoxaflor)
(생략)
도라지 0.05T
<신설>
<신설>
(431)아이소피라잠(Isopyrazam)
(생략)꾸지뽕(열매)0.05
꾸지뽕(잎)0.05
(425)∼(426)(현행과같음)
(427)이미시아포스(Imicyafos)
(현행과같음)
더덕0.05
(428)플루오피람(Fluopyram)
(현행과같음)
수삼0.7
건삼3.0
배추0.05
(429)(현행과같음)
(430)설폭사플로르(Sulfoxaflor)
(현행과같음)
도라지 0.05
들깨 0.2
토란 0.05
(431)아이소피라잠(Isopyrazam)
(현행과같음)- 397 -현행 개정(안)
<신설>
<신설>
(432)(생략)
(433)사이안트라닐리프롤(Cyantraniliprole)
(생략)
고구마0.05T
살구 0.5T
토란 0.05T
<신설>
(434)(생략)
(435)펜피라자민(Fenpyrazamine)
(생략)
<신설>
(436)플루티아닐(Flutianil)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
(437)플룩사피록사드(Fluxapyroxad)배추0.2
엇갈이배추0.5
(432)(현행과같음)
(433)사이안트라닐리프롤(Cyantraniliprole)
(현행과같음)
고구마0.05
살구 0.5
토란 0.05
포도 1.0
(434)(현행과같음)
(435)펜피라자민(Fenpyrazamine)
(현행과같음)
양배추1.5
(436)플루티아닐(Flutianil)
(현행과같음)
배추0.3
비트(뿌리)0.05
비트(잎)1.5
(437)플룩사피록사드(Fluxapyroxad)- 398 -현행 개정(안)
(생략)
유채씨0.8†
배추0.05
엇갈이배추0.05
파 2.0
<신설>
<신설>
<신설>
(438)∼(440)(생략)
(441)피리벤카브(Pyribencarb)
(생략)
참외0.07
<신설>
(442)플루피라디퓨론(Flupyradifurone)
(생략)
토란 0.05T
<신설>
<신설>
(443)∼(449)(생략)
(450)발리페날레이트(Valifenalate)(현행과같음)
<삭제>
배추1.0
엇갈이배추3.0
파 3.0
유지종실류 0.8†
키위 2.0
풋콩 0.15
(438)∼(440)(현행과같음)
(441)피리벤카브(Pyribencarb)
(현행과같음)
참외0.7
고수(잎)5.0
(442)플루피라디퓨론(Flupyradifurone)
(현행과같음)
토란 0.05
꾸지뽕(열매)0.5
꾸지뽕(잎)10
(443)∼(449)(현행과같음)
(450)발리페날레이트(Valifenalate)- 399 -현행 개정(안)
(생략)
쑥갓 1.0T
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(451)(생략)
(452)아이소페타미드(Isofetamid)
(생략)
<신설>
<신설>
(453)만데스트로빈(Mandestrobin)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>(현행과같음)
쑥갓 10
갓 10
고들빼기10
냉이10
들깻잎20
루꼴라10
배암차즈기10
상추 20
순무유채10
양상추 20
케일10
(451)(현행과같음)
(452)아이소페타미드(Isofetamid)
(현행과같음)
감 0.2
부추 7.0
(453)만데스트로빈(Mandestrobin)
(현행과같음)
배추1.0
엇갈이배추3.0
양배추0.05- 400 -현행 개정(안)
<신설>
(454)플루엔설폰(Fluensulfone)
(생략)
<신설>
(455)∼(457)(생략)
(458)사이클라닐리프롤(Cyclaniliprole)
◎잔류물의정의:Cyclaniliprole과
NK-1375의합을cyclaniliprole로함
(생략)
<신설>
<신설>
(459)(생략)
(460)피카뷰트라족스(Picarbutrazox)
(생략)
<신설>
(461)∼(466)(생략)
(467)플룩사메타마이드(Fluxametamide)
(생략)키위 0.05
(454)플루엔설폰(Fluensulfone)
(현행과같음)
오이 0.05
(455)∼(457)(현행과같음)
(458)사이클라닐리프롤(Cyclaniliprole)
◎잔류물의정의:Cyclaniliprole
(현행과같음)
가지 0.2
쌀 0.05
(459)(현행과같음)
(460)피카뷰트라족스(Picarbutrazox)
(현행과같음)
시금치15
(461)∼(466)(현행과같음)
(467)플룩사메타마이드(Fluxametamide)
(현행과같음)- 401 -현행 개정(안)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(468)티아페나실(Tiafenacil)
(생략)
<신설>
<신설>
(469)플루트리아폴(Flutriafol)
(생략)
<신설>강낭콩0.1
녹두 0.1
다채7.0
동부 0.1
루꼴라7.0
모과0.3
무화과0.2
블루베리1.5
석류 0.3
아로니아1.5
완두0.3
유채7.0
차 1.0
키위 1.5
팥 0.1
풋콩 2.0
(468)티아페나실(Tiafenacil)
(현행과같음)
생강0.05
양배추0.05
(469)플루트리아폴(Flutriafol)
(현행과같음)
키위 3.0- 402 -현행 개정(안)
(470)비사이클로피론(Bicyclopyrone)
(생략)
<신설>
(471)∼(472)(생략)
(473)피라지플루미드(Pyraziflumid)
(생략)
<신설>
<신설>
(474)∼(498)(생략)
(499)플루티아셋-메틸(Fluthiacet-methyl)
(생략)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>(470)비사이클로피론(Bicyclopyrone)
(현행과같음)
사탕수수0.02†
(471)∼(472)(현행과같음)
(473)피라지플루미드(Pyraziflumid)
(현행과같음)
감 0.5
포도 3.0
(474)∼(498)(현행과같음)
(499)플루티아셋-메틸(Fluthiacet-methyl)
(현행과같음)
감 0.05
건삼0.05
대추 0.05
대추(건조)0.05
매실 0.05
무(뿌리)0.05
무(잎)0.05
복숭아0.05
수삼0.05- 403 -현행 개정(안)
<신설>
<신설>
<신설>
(500)피디플루메토펜(Pydiflumetofen)
(생략)
양파0.05
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(501)스트렙토마이신(Streptomycin)
(생략)
<신설>
<신설>옥수수0.05
유자 0.05
자두 0.05
(500)피디플루메토펜(Pydiflumetofen)
(현행과같음)
양파0.2†
감귤류1.0†
겨자채50†
견과류 0.05†
결구엽채류3.0†
근채류0.3†
복숭아0.7†
블루베리5.0†
자두 0.6†
체리 2.0†
파 2.0†
풋콩 1.0†
해바라기씨0.5†
(501)스트렙토마이신(Streptomycin)
(현행과같음)
상추 0.5
양상추 0.5- 404 -현행 개정(안)
(502)발리다마이신에이(ValidamycinA)
(생략)
무(잎)0.05
상추 5.0
양상추 5.0
<신설>
<신설>
<신설>
(503)∼(509)(생략)
<신설>
<신설>(502)발리다마이신에이(ValidamycinA)
(현행과같음)
무(잎)0.3
상추 7.0
양상추 7.0
비트(잎)3.0
참외0.5
토마토 0.05
(503)∼(509)(현행과같음)
(510)옥시테트라사이클린
(Oxytetracycline)
◎잔류물의정의:Oxytetracycline
부추 0.5
비트(뿌리)0.05
비트(잎)0.05
참외0.05
파 0.5
피망 1.0
(511)아사이노나피르(Acynonapyr)
◎잔류물의정의:Acynonapyr와
AP(3-endo-[2-proxy-4-(trifluorome
thyl)phenoxy]-9-azabicyclo[3,3,1]no- 405 -현행 개정(안)
<신설>nane)의합을acynonapyr로함
감 0.7
감귤 1.0
고추 2.0
대추 2.0
대추(건조)5.0
딸기3.0
배 1.5
복숭아3.0
사과 1.0
수박0.3
유자 0.7
참외0.3
포도 2.0
피망 2.0
(512)아피도피로펜(Afidopyropen)
◎잔류물의정의:Afidopyropen
감귤류0.15†
감자0.01†
견과류 0.01†
고추 0.07
대두 0.01†
딸기0.05
멜론0.05†- 406 -현행 개정(안)
주1.∼주9.(생략)면실0.08†
배 0.05
배추0.2
복숭아0.05
사과 0.05
셀러리3.0†
수박0.05
엇갈이배추0.5
오이 0.7†
자두 0.05
참외0.05
체리 0.03†
토마토 0.15†
피망 0.07
호박0.06†
주1.∼주9.(현행과같음)
[별표5]식품중동물용의약품의잔류허용
기준
(1)∼(55)(생략)
(56)린코마이신(Lincomycin):항균제
(생략)
<신설>
<신설>[별표5]식품중동물용의약품의잔류허
용기준
(1)∼(55)(현행과같음)
(56)린코마이신(Lincomycin):항균제
(현행과같음)
양근육0.1
양간0.5- 407 -현행 개정(안)
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
<신설>
(57)∼(81)(생략)
(82)세파세트릴(Cefacetrile):항균제
(생략)
<신설>
(83)∼(126)(생략)
(127)안티피린(Antipyrine):항염증제
(생략)
(128)(생략)
(129)구아이페네신(Guaifenesin):기타
(생략)
<신설>양지방0.05
양신장1.0
염소근육0.1
염소간0.5
염소지방0.05
염소신장1.0
(57)∼(81)(현행과같음)
(82)세파세트릴(Cefacetrile):항균제
(현행과같음)
소근육0.03
(83)∼(126)(현행과같음)
(127)안티피린(Antipyrine,Phenazone)
:항염증제
(현행과같음)
(128)(현행과같음)
(129)구아이페네신(Guaifenesin):기타
(현행과같음)
말근육0.01- 408 -현행 개정(안)
(130)∼(170)(생략)
(171)요오드퀴놀린설폰산(Iodohydroxy
quinolinesulfonicacid):항염증제
(생략)
<신설>
<신설>
(172)플루메타손(Flumethasone)
:항염증제
(생략)
<신설>
(173)클라노부틴(Clanobutin):기
타
(생략)
<신설>
(174)∼(192)(생략)(130)∼(170)(현행과같음)
(171)요오드퀴놀린설폰산(Iodohydroxy
quinolinesulfonicacid):항염증제
(현행과같음)
말근육0.01
유0.01
(172)플루메타손(Flumethasone)
:항염증제
(현행과같음)
유0.001
(173)클라노부틴(Clanobutin):기
타
(현행과같음)
유0.01
(174)∼(192)(현행과같음)
[별표6]축·수산물의잔류물질잔류허용기준
(1)(생략)
(2)글리포세이트(Glyphosate)
◎잔류물의정의:Glyphosate[별표6]축·수산물의잔류물질잔류허용기준
(1)(현행과같음)
(2)글리포세이트(Glyphosate)
◎잔류물의정의:Glyphosate와
N-acetylglyphosate의합을- 409 -현행 개정(안)
(생략)
소고기 0.1
돼지고기 0.1
소부산물 2.0
<신설>
<신설>
<신설>
우유 0.1
(3)∼(100)(생략)Glyphosate로함
(현행과같음)
<삭제>
<삭제>
<삭제>
가금류부산물 0.5
포유류고기 0.1
포유류부산물 5.0
(돼지부산물제외)
유 0.1
(3)∼(100)(현행과같음)
[별표7]∼[별표8](생략)[별표7]∼[별표8](현행과같음)