# Ecologie de la reproduction et de la dispersion, et structure génétique chez les espèces messicoles : propositions de gestion dans le Parc naturel régional du Luberon

Laurence Affre, Thierry Dutoit, Mathias Jäger, Laurianne Garraud

► To cite this version:

Laurence Affre, Thierry Dutoit, Mathias Jäger, Laurianne Garraud. Ecologie de la reproduction et de la dispersion, et structure génétique chez les espèces messicoles : propositions de gestion dans le Parc naturel régional du Luberon. Actes du BRG, 2003, 4, pp.405-428. hal-05509490

HAL Id: hal-05509490

https://hal.science/hal-05509490v1

Submitted on 13 Feb 2026

HAL is a multi-disciplinary open access
archive for the deposit and dissemination of sci-
entific research documents, whether they are pub-
lished or not. The documents may come from
teaching and research institutions in France or
abroad, or from public or private research centers.

L'archive ouverte pluridisciplinaire HAL, est
destinée au dépôt et à la diffusion de documents
scientifiques de niveau recherche, publiés ou non,
émanant des établissements d'enseignement et de
recherche français ou étrangers, des laboratoires
publics ou privés.

<figure><img src="image_1.png" /></figure>

Distributed under a Creative Commons CC BY 4.0 - Attribution - International License
# Écologie de la reproduction et de la dispersion, et structure génétique chez les espèces messicoles : propositions de gestion dans le Parc naturel régional du Luberon

Laurence AFFRE(1)*, Thierry DUTOIT(1), Matthias JAGËR(2), Laurianne GARRAUD(1)

**Abstract** - Reproductive and dispersion ecology, and genetic structure of segetal species: Management alternatives in the regional natural Park of Luberon. Due to increasingly intense agriculture, segetal species, i.e. herbaceous annuals frequently associated with cereal crops, are experiencing a strong regression within agrosystems. The objectives of this study consist to analyse the seed dispersal by endo- and exo-zoochory on the one hand, and the mating system variation and the genetic structure on the other, for a better understanding of the segetal species dynamics. At the community level, sheep have proven to be poor seed dispersers. At the population level, the three segetal species examined have a wide range of mating systems including preferential selfing, a mixed reproductive system and strict outcrossing. The two outcrossing species exhibit high genetic diversity. For those two species, gene flow is non-negligible only within the agricultural plots, as gene flow diminishes when geographic distance increases. However, no evidence supporting that plot borders can act as gene sources relative to the center of plots could be found given that the spatial distribution of individuals is aggregated. Thus, the goal of maintaining stable populations requires the use of traditional agricultural methods, and especially an orientation of maintenance practices towards cereal harvesting (for re-sowing) without sorting or treatment.

### agroecosystem / genetic structure / threatened species / endo- and exo-zoochory / mating system

**Résumé** - Face à l'intensification des pratiques agricoles, les espèces messicoles, plantes herbacées généralement annuelles, fréquemment associées aux céréales cultivées, sont en très forte régression au sein des agroécosystèmes. Les objectifs de cette étude consistent à analyser, d'une part la dispersion des graines par endo- et exozoochorie, et, d'autre part, la variation du système de reproduction et la structure

<footnote>(1) Institut Méditerranéen d'Écologie et de Paléoécologie, UMR CNRS, Universités d'Aix-Marseille I et III, Faculté S† Jérôme, case 461, 13397 Marseille Cedex 20, France</footnote>

<footnote>(2) Institut de Botanique, Université de Regensburg, 93053 Regensburg, Allemagne.</footnote>

<footnote>* Correspondance et tirés à part : laurence.affre@univ.u-3mrs.fr</footnote>
génétique, dans le but de mieux comprendre la dynamique des espèces messicoles. Au niveau des communautés, cette étude démontre de faibles capacités pour la dispersion des graines par les ovins. Au niveau des populations, les trois espèces messicoles étudiées présentent une variation continue du système de reproduction, de l'autogamie préférentielle à l'allogamie stricte, en passant par un système de reproduction mixte. Les deux espèces plus allogames présentent des niveaux de diversité génétique élevés. Pour ces deux dernières espèces, les flux de gènes restent non négligeables seulement au sein des parcelles agricoles ; les flux de gènes diminuant lorsque la distance géographique augmente. Cependant, il existe peu d'évidence pour que les lisières puissent jouer le rôle de « source » par rapport au centre des parcelles agricoles en raison, notamment, d'une distribution spatiale des individus en aggrégat. Ainsi, soucieux de maintenir des populations stables, il s'avère important de conserver des pratiques agricoles traditionnelles et, notamment, d'orienter les effort de gestion vers le maintien des semis de semences récoltées sur l'exploitation sans triage ni traitement.

agroécosystème / structure génétique / espèce menacée / endo- et exo-zoochorie / système de reproduction

# 1. INTRODUCTION

Les champs cultivés constituent des écosystèmes fortement contraints (pratiques agricoles) et fragmentés dans l'espace (mosaïques) dont la flore et la végétation sont plus discriminées par les perturbations anthropiques que les variables d'habitats (climat, sol). Les techniques de culture intensive (traitements phytosanitaires, mécanisation, utilisation réduite des jachères, tri industriel des graines) ont conduit à une simplification extrême de ces écosystèmes notamment dans les monocultures céréalières du Nord-ouest de l'Europe et de l'Amérique du Nord [5], [12]. Ainsi, depuis les années 60, les espèces messicoles, plantes herbacées généralement annuelles dont le cycle biologique correspond à celui des céréales cultivées [23], sont en très forte régression à l'échelle nationale voire internationale en raison d'une agriculture de plus en plus intensive [1], [2], [11], [14], [22], [29], [31].

Cependant, dans des terroirs aux conditions écologiques marquées où perdure une agriculture extensive (polyculture, élevage), comme dans le territoire du Parc naturel régional du Luberon (départements du Vaucluse et des Alpes de Haute Provence), ces écosystèmes peuvent constituer des refuges pour les espèces messicoles [10], [11]. Face à la régression de ces espèces, une opération locale agri-environnementale « Protection des agro-écosystèmes des messicoles » (1997-2001) a été mise en place par le Parc naturel régional du Luberon en collaboration avec les agriculteurs volontaires et le Groupement d'agriculteurs « Élevage du Vaucluse » [28]. Cette mesure agri-environnementale constitue la première tentative de conservation des espèces messicoles en France en favori-
sant un retour à des pratiques culturales moins intensives [21]. Depuis 1997, différentes parcelles ont été mises en place au sein des sites agricoles : i) des parcelles dites « en contrat », semées en céréales de manière dense, sans désherbage, avec une fertilisation inférieure à 120 unités d'azote et ii) des parcelles dites « en plein », semées en céréales avec une densité diminuée de 30 à 50 %, sans désherbage ni fertilisation.

En complément des recherches menées sur les conséquences de la mise en place de cette mesure sur la dynamique des communautés de messicoles [7], [8], [9], [21], [33], les objectifs de notre projet ont été de mieux appréhender les facteurs environnementaux et les traits biologiques adaptatifs pouvant expliquer l'évolution de la flore messicole comprenant des espèces à haute valeur patrimoniale dans ces écosystèmes [18].

Deux niveaux d'appréhension des systèmes biologiques ont donc plus particulièrement été investis, celui des communautés et des populations.

Au niveau des communautés, nous nous sommes particulièrement intéressés aux processus de dispersion et conservation des graines. Peu d'études ont été consacrées aux processus de dissémination des messicoles par le vent (anémochorie) ou les animaux (zoochorie) [30]. Des résultats préalables à notre projet ont montré que très peu de messicoles stricto sensu étaient disséminées par le vent [16] et, que pour trois d'entre elles (Roemeria hybrida, Garidella nigellastrum, Legousia speculum-veneris) la dissémination par les fourmis (myrmécochorie) était anecdotique [3], [15]. En conséquence, nos objectifs, au niveau des communautés, ont particulièrement porté sur le transport des graines par les troupeaux de moutons que ce soit dans la laine (exozoochorie) ou dans le système digestif (endozoochorie) ; car dans le territoire du Parc naturel régional du Luberon, perdure encore la pratique de la vaine pâture sur les chaumes après la moisson [17].

Au niveau des populations, notre intérêt s'est porté sur la variation du système de reproduction et de la structure génétique des populations chez trois espèces messicoles. Aucune étude, à notre connaissance, n'a analysé les effets de l'intensification des pratiques agricoles sur la dynamique et la structure des populations des espèces messicoles. L'étude de l'intensité des flux de gènes au sein et entre les différentes parcelles agricoles permettra, notamment, de savoir si les parcelles « en plein » peuvent constituer des populations « sources » pour les parcelles « en contrat » considérées alors comme des populations « puits ». Ainsi, nos objectifs ont consisté à étudier d'une part, les modalités de reproduction et d'autre part, les niveaux de diversité génétique et sa structuration au sein et entre les parcelles agricoles.

La confrontation des deux approches permettra d'envisager différentes stratégies de gestion des espèces messicoles au sein du Parc naturel régional du Luberon.
## 2. MATÉRIELS ET MÉTHODES

### 2.1. Sites d'étude et espèces étudiées

Les processus de dispersion des graines ont été étudiés au sein d'une exploitation agricole située sur la commune de Rustrel (figure 1, site 4). La surface agricole utile de l'exploitation étudiée est de 60 ha dont une surface toujours en herbe de 27 ha. Cette exploitation familiale est de type polyculture-élevage (céréales, luzerne et élevage ovin de 150 têtes). Le circuit de pâturage mis en place durant l'année d'échantillonnage (2001) est stabilisé et ne présente de variations inter-annuelles qu'en présence de conditions climatiques exceptionnelles. La conduite du troupeau s'organise en un seul quartier de pâturage mixte (surfaces cultivées et de parcours) regroupé autour des bâtiments de l'exploitation. Ce quartier comprend des parcelles écologiquement contrastées (pelouses sèches, prairies humides, friches post-culturales, etc...) où les parcelles moisonnées sont parcourues en fin du circuit de pâturage journalier de 18 h à 20 h entre la mi-juillet et la fin octobre.

La variation des traits reproducteurs et génétiques ont été étudiés plus particulièrement chez trois espèces messicoles annuelles, présentant des distributions géographiques contrastées en France [22], et sélectionnées dans trois sites agricoles particuliers (figure 1) faisant l'objet d'une contractualisation dans le cadre de l'opération locale agri-environnementale.

* *Garidella nigellastrum* L. (Ranunculaceae), espèce diploïde, a été étudiée dans le site de Mérindol (figure 1, site 1), unique site régulièrement observé en France, au sein d'une seule parcelle agricole « en plein » cultivée en un mélange d'orge et d'avoine. Cette espèce, considérée très rare [22], est protégée au niveau national. Au cours de la floraison (juin - juillet), les fleurs hermaphrodites présentent une corolle de 1-2 cm de diamètre, à 5 pétales violacés ou rose, à la base desquels se situe un nectaire. Les étabmines se décomposent en 5 grandes orientées vers l'extérieur de la corolle et 5 petites orientées vers l'intérieur, toutes entourant 2-3 gynécées. Le fruit, formé par la soudure des 2-3 gynécées, s'ouvre longitudinale-ment pour libérer 5-15 grosses graines.
<figure><img src="image_2.png" /></figure>

**Figure 1** : Localisation des sites d'étude dans le territoire du Parc naturel régional du Luberon sur les départements du Vaucluse et des Alpes-de-Haute-Provence.
* *Roemeria hybrida* (L.) D.C. (Papaveraceae), espèce polyploïde, considérée également très rare [22], a été étudiée dans le site de La Bastidonne (figure 1, site 2) au sein d'une parcelle « en plein » juxtaposée à une parcelle « en contrat », toutes deux cultivées en blé dur. De début mai à fin juin, les fleurs hermaphrodites présentent une corolle violette de 5 cm de diamètre, à 4 pétales fragiles. Les 30 étamines, décomposées en deux séries de longueur différente, entourent un seul gynécée. Le fruit développe à maturité un géotropisme positif et libère, au travers d'une déhiscence longitudinale, de nombreuses petites graines.

* *Legousia speculum veneris* L. (Campanulaceae), espèce diploïde, considérée plus commune [22], a été étudiée dans le site de La Garde d'Apt (figure 1, site 3) au sein d'une parcelle « en plein » juxtaposée à une parcelle « en contrat » 1, toutes deux cultivées en triticale et éloignées de plus de 400 mètres d'une deuxième parcelle « en contrat » 2 cultivée en orge. Quatre autres parcelles agricoles, dont trois sont distantes de 1 km et la dernière distante de 7 km par rapport à la parcelle « en plein », ont été aussi prises en compte seulement pour les analyses génétiques. De début mai à fin juillet, les fleurs hermaphrodites, disposées en corymbes, présentent une corolle rose de 1-2 cm de diamètre, à 5 pétales réunis, à la base en tube. Les 5 étamines entourent un seul gynécée. Le fruit libère de nombreuses petites graines au travers de pores en son sommet.

Contrairement à *Garidella nigellastrum*, ces deux dernières espèces possèdent encore des populations importantes dans le territoire du Parc naturel régional du Luberon [10], [11].

## 2.2. Dispersion des graines

### 2.2.1. Exozoochorie

Le transport des graines de messicoles dans la laine des moutons a été suivi en utilisant un animal supportant la proximité de l'homme mais dont le comportement reste identique à celui des autres animaux composant le troupeau. Sa toison a été marquée pour y faire figurer des quadrats de (20 x 10 cm) sur les différentes parties de l'animal (tête, cou, flancs, dos, ventre, etc.), soit 24 quadrats au total [13]. Les graines ont été échantillonnées dans la toison après que l'animal soit resté présent au minimum deux heures par jour dans les chaumes et après 3 jours de présence dans la même parcelle pour le même circuit de pâturage. La récolte des graines a été réalisée le soir du troisième jour après immobilisation du mouton. L'exploration de chaque quadrat sur le mouton a été fixée à un temps maximum de 15 minutes. Les graines ont été ensuite identifiées par rapport à une collection de référence (granothèque de l'Institut Méditerranéen d'Ecologie et de Paléoécologie, Marseille).
### 2.2.2. Endozoochorie

15 boulettes correspondant à 300 g de fèces frais ont été récoltées après que le troupeau ait quitté les chaumes sur une surface de 400 m² au centre du champ. Les échantillons ont été ensuite immédiatement déstructurés pendant 30 minutes sous colonne d'eau et mélangés avec du terreau et du sable stérile [34]. Après obtention d'un mélange homogène, celui-ci a été appliqué en une couche la plus fine possible sur une gaze stérile, elle-même disposée sur une couche de 3 cm de vermiculite hydrophile dans des terrines de semis (45 x 30 cm) placées en serre (photopériode de 14 heures de jour pour 10 heures de nuit et températures respectives de 25 °C et 15 °C). Les terrines ont été arrosées à saturation de la vermiculite. Après deux mois, les échantillons ont été stratifiés à 4 °C pendant six semaines et placés à nouveau dans les conditions précédentes pendant deux mois. Les plantules identifiées ont été immédiatement retirées, les autres transplantées dans des pots pour identification ultérieure [9].

## 2.3. Modalités de reproduction

### 2.3.1. Pollinisations contrôlées

Au sein de chaque parcelle agricole, 15 à 25 individus par espèce ont été sélectionnés et soumis aux quatre traitements de pollinisations contrôlées suivants :

(i) un premier bouton floral n'a subi aucune manipulation afin d'analyser la production de graines en conditions naturelles (traitement 1 : libre pollinisation);

(ii) un deuxième bouton floral a été ensaché puis n'a subi aucune manipulation afin de tester l'auto-fertilité des individus, c'est-à-dire leur capacité à produire des graines en l'absence d'agents pollinisateurs (traitement 2 : autogamie spontanée);

(iii) un troisième bouton floral a été ensaché et, dès l'ouverture de la fleur, le stigmate réceptif a été saturé manuellement avec de l'autopollen afin de tester l'autocompatibilité des individus, c'est-à-dire leur capacité à produire des graines en auto-fécondation (traitement 3 : autogamie manuelle);

(iv) un quatrième bouton floral a subi le sectionnement, à la base, de toutes les étamines puis a été ensaché et, dès l'ouverture de la fleur, le stigmate réceptif a été saturé manuellement avec de l'allopollen afin de tester la capacité des individus à produire des graines en allofécondation (traitement 4 : allogamie manuelle).

L'ensachage des fleurs a été réalisé en utilisant un voile de mailles 0,5 mm × 0,5 mm ce qui permet d'éviter la visite des agents pollinisateurs sans pour autant exclure le vent et la lumière. En raison d'un trop faible
nombre de boutons floraux par individu (≤ à 3), seuls les trois premiers traitements ont été réalisés chez *Roemeria hybrida*.

Pour chaque espèce et chaque traitement de pollinisation, le pourcentage de fruits initiés et matures a été quantifié et utilisé dans le calcul de deux indices d'autofertilité et d'autocompatibilité [24] chez *Garidella nigellastrum* et *Legousia speculum veneris* :

- l'indice d'autofertilité, qui traduit la capacité des individus à produire des graines en l'absence d'agents pollinisateurs, est égal au rapport de la performance en autogamie spontanée / la performance en allogamie manuelle ;

- l'indice d'autocompatibilité, qui traduit la capacité des individus à produire des graines en autofécondation, est égal au rapport de la performance en autogamie manuelle / la performance en allogamie manuelle.

Pour les deux indices, des valeurs se rapprochant de « 0 » indiquent une diminution de l'autofertilité et l'autocompatibilité, et des valeurs se rapprochant ou dépassant « 1 » indiquent une autofertilité et une autocompatibilité de plus en plus grande.

Le nombre total de graines viables / fruit et le poids moyen (en mg) d'une graine viable ont été ensuite quantifiés. Les différences de production et de biomasse des graines ont été ensuite analysées en utilisant des analyses de variance (ANOVA) en bloc incomplet : i) à deux facteurs fixes (parcelles agricoles et traitements de pollinisation) et un facteur aléatoire (individu) chez *Roemeria hybrida* et *Legousia speculum veneris* et ii) à un seul facteur fixe (traitements de pollinisation) et un facteur aléatoire (individu) chez *Garidella nigellastrum*. Les ANOVAs ont été suivies d'un test de Scheffé lorsque les différences se sont révélées significatives.

### 2.3.2. Variation des caractères floraux

Pour chacune des trois espèces, un autre échantillon de 20 individus a été sélectionné au sein de chaque parcelle agricole. Pour chaque individu, un bouton floral a été récolté afin d'estimer le ratio pollen / ovule (p/o) calculé selon le rapport du nombre de grains de pollen / le nombre d'ovules pour chaque bouton floral. Trois étamines par bouton floral ont été prélevées. Les grains de pollen ont été extraits dans des solutions successives d'acide sulfurique, de Triton (x 100) et d'éthanol (95 %) et quantifiés sur une cellule de Mallassez à l'aide d'un microscope (x 40). Le nombre total de grains de pollen par bouton floral a été ensuite extrapolé pour le nombre total d'éta mines par bouton floral. Le nombre total d'ovules par bouton floral a été compté à l'aide d'une loupe binoculaire (x 50). Pour chacun de ces 20 indivi dus, une fleur mature a été ensuite récoltée et la (ou les deux) séparation(s) spatiale(s) entre le stigmate et les anthères (en mm) a été mesurée à l'aide
d'un pied à coulisse (0,01 mm). Des analyses de variance (ANOVA) à un facteur fixe (parcelle agricole ou situation intra-parcelle) et des tests de Scheffé ont été successivement réalisés afin de quantifier les différences entre les parcelles agricoles chez *Roemeria hybrida* et *Legousia speculum veneris* et entre la lisière et le centre de la parcelle « en plein » chez *Garidella nigellastrum*.

Les différentes analyses de variance (ANOVA) et les tests de Scheffé ont été réalisés à l'aide du logiciel STATISTICA [35].

## 2.4. Diversité et structure génétique

Chez *Garidella nigellastrum*, une vingtaine d'individus ont été échantillonnés : i) au centre et ii) le long de deux lisières opposées de l'unique parcelle « en plein ». Chez *Legousia speculum-veneris*, 15 à 30 individus ont été échantillonnés : i) au centre et en lisière des deux parcelles « en plein » et « en contrat » 1 et, aléatoirement, ii) au sein de la parcelle « en contrat » 2 et iii) au sein des quatre autres parcelles agricoles distantes de 1 à 7 km. L'extraction des protéines enzymatiques a été réalisée en broyant le matériel foliaire dans un tampon d'extraction Tris-HCl [27] et en centrifugeant le broyat (20 min à 15 000 g). Le surnageant a été ensuite absorbé sur des papiers Whatman, chargé dans les gels et soumis à une électrophorèse horizontale à 4 °C sur gel d'amidon (11-12 %).

Parmi les neuf systèmes enzymatiques analysés, six loci ont été interprétés : glutamate oxalo-transférase (GOT, E.C.2.6.1.1), malate déshydrogénase (MDH, E.C.1.1.1.37), leucine aminopeptidase (LAP, E.C.3.4.11.1), phosphoglucose isomérase (PGI, E.C.5.3.1.9), α estérase (αEST, E.C.3.1.1.2), isocitrate déshydrogénase (IDH, E.C. 1.1.1.42). Divers paramètres de diversité génétique ont été en-suite calculés : pourcentage de loci polymorphes (99 %), nombre moyen d'allèles par locus, hétérozygotie moyenne attendue sous la panmixie et hétérozygotie moyenne observée. La structure génétique des populations a été analysée en utilisant les statistiques F de Wright [37]. L'ensemble des analyses génétiques ont été réalisées en utilisant GENETIX 4.0 [4].

# 3. RÉSULTATS

## 3.1. Dispersion des graines

### 3.1.1. Exozoochorie

183 graines appartenant à 16 espèces ont été récoltées dans la toison du mouton (figure 2). Toutes les graines récoltées ont pu être identifiées à l'aide d'une granothèque (référentiel). 124 graines soit 64 % appartiennent à l'espèce *Vulpia alopecurus*, suivi de *Medicago minima* pour 11 %. L'indice de similitude de
Sorensen<fnref n="1" /> calculé avec les espèces fructifiant et disséminant à la même époque dans les chaumes est de 17,6 % avec seulement quatre espèces (*Lolium rigidum*, *Melilotus officinalis*, *Polygonum aviculare* et *Ranunculus arvensis*) en commun. Les graines avec des crochets et des poils raides/durs représentent 98,9 % des graines récoltées et 87,5 % des espèces identifiées. La seule espèce récoltée avec des graines lisses dans la toison est *Trigonella esculenta* avec une contribution de 1,1 % à l'ensemble des graines récoltées. Le maximum de graines a été trouvé sur les flancs (56 %), suivi de l'arrière de la tête (17 %), le ventre (16 %) et les pattes (11 %). Parmi les espèces identifiées, seules *Ranunculus arvensis* et *Caucalis platycarpos* peuvent être considérées comme des messicoles *stricto sensu* dans le territoire du Parc [18]. Pour ces deux espèces, les graines possèdent des crochets.

### 3.1.2. Endozoochorie

Au total, 273 germinations ont été identifiées appartenant à 28 espèces à partir de 1 200 g de fèces frais soit en moyenne 44,3 graines pour 100 g de fèces sec avec un minimum de 6,2 et un maximum de 72,4. Seulement 3,67 % des graines n'ont pu être identifiées. Les 3 espèces les plus fréquentes sont *Anthemis cotula*, *Chenopodium vulvaria* et *Plantago intermedia* qui représentent 71,5 % des germinations totales (figure 3). L'indice de Sorensen calculé entre la composition spécifique des graines transportées par endozoochorie et exozoochorie est seulement de 9,7 %. La plupart des espèces (79 %) contribuent pour moins de 5 % au nombre total de germinations. Cependant, si seules quelques germinations sont identifiées pour chaque espèce, 1/3 des espèces ingérées et présentes dans les chaumes restent cependant viables après leur passage dans le système digestif des ovins et peuvent donc être disséminées par cette voie mais aucune espèce appartenant au groupe des messicoles du Parc naturel régional du Luberon [18] n'a été identifiée.

<footnote n="1">¹ L'indice de Sorensen (Cs) est un indice permettant de calculer la similitude entre deux listes d'espèces selon la formule $(Cs = 2 J/(A + B))$, A est le nombre d'espèces de la première liste, B est le nombre d'espèces de la deuxième liste et J est le nombre d'espèces communes aux listes A et B).</footnote>
<figure><img src="image_3.png" /></figure>

**Figure 2 :** Nombre total de graines identifiées dans la toison du mouton domestiqué (exozoochorie).

<figure><img src="image_4.png" /></figure>

**Figure 3 :** Nombre total de germinations pour chaque espèce identifiée pour l'endozoochorie.
**3.2. Modalités de reproduction**

**3.2.1. Pollinisations contrôlées**

*Garidella nigellastrum* présente une performance maximale pour les deux indices d'autofertilité égal à 1,11 et d'autocompatibilité égal à 1,21. Inversement, *Legousia speculum veneris* présente une capacité nulle à s'autoféconder spontanément en l'absence d'agents pollinisateurs (indice d'auto-fertilité = 0 pour les trois parcelles agricoles) et une capacité faible à nulle en autogamie manuelle (indice d'autocompatibilité = 0,15 pour la parcelle « en plein », 0 pour la parcelle « en contrat » 1, 0,33 pour la parcelle « en contrat » 2).

Les moyennes (± écart-types) du nombre total de graines viables par fruit et du poids moyen d'une graine viable (en mg) pour chaque parcelle agricole et chaque traitement de pollinisation sont reportées sur la figure 4 pour les trois espèces étudiées. Les résultats des analyses de variance montrent, chez *Garidella nigellastrum*, des différences significatives entre les différents traitements de pollinisation seulement pour la biomasse des graines viables (F = 5,09, ddl = 3, p < 0,01). Le test de Scheffé révèle alors que la biomasse des graines viables est significativement (p < 0,05) supérieure pour le traitement « autogamie spontanée » par rapport au traitement « autogamie manuelle ». Chez *Roemeria hybrida*, la production et la biomasse des graines viables varient de manière significative (F = 13,00, ddl = 2, p < 0,001 et F = 13,63, ddl = 2, p < 0,001, respectivement) seulement entre les différents traitements de pollinisation. Le test de Scheffé révèle alors que la production et la biomasse des graines viables sont significativement (p < 0,01) plus importantes pour le traitement « libre pollinisation » par rapport au traitement « autogamie spontanée ». Seule la production de graines viables varie de manière significative entre les parcelles agricoles (F = 7,24, ddl = 2, p < 0,01) et les traitements de pollinisation (F = 55,87, ddl = 3, p < 0,001) chez *Legousia speculum veneris*. Le test de Scheffé montre alors que la production de graines viables est significativement (p < 0,05) plus importante : i) au sein des parcelles « en plein » et « en contrat » 2, pour les traitements « libre pollinisation » et « allogamie manuelle » par rapport aux traitements « autogamie spontanée » et « autogamie manuelle » et ii) au sein de la parcelle « en contrat » 1, pour le traitement « libre pollinisation » par rapport aux trois autres traitements de pollinisation.
### Garidella nigellastrum

Site 1 : Mérindol

<figure><img src="image_5.png" /></figure>

### Roemeria hybrida

Site 2 : La Bastidonne

<figure><img src="image_6.png" /></figure>

### Legousia speculum veneris

Site 3 : La Garde d'Apt

<figure><img src="image_7.png" /></figure>

☐ Parcelle "en plein"

■ Parcelle "en contrat" 1

■ Parcelle "en contrat" 2

**Figure 4** : Moyenne (et écart-type) du nombre total de graines viables par fruit et du poids moyen d'une graine viable (mg) pour chaque traitement de pollinisation et chaque parcelle agricole chez les trois espèces étudiées.
### 3.2.2. Variation des caractères floraux

Les moyennes (± écart-types) du ratio pollen / ovule et des séparations spatiales stigmate-anthères (en mm) sont respectivement représentées pour chaque parcelle agricole et chaque espèce messicole dans les figures 5 et 6. Les résultats des analyses de variance mettent en évidence des différences significatives entre les parcelles agricoles uniquement pour la séparation spatiale stigmate-anthères chez *Legousia speculum veneris* (F = 7,77, ddl = 2, p < 0,01). Le test de Scheffé montre alors une séparation spatiale stigmate-anthères significativement (p < 0,05) plus importante dans la parcelle « en contrat » 1 par rapport aux deux parcelles « en plein » et « en contrat » 2.

<figure><img src="image_8.png" /><figcaption>**Figure 5 :** Moyenne (et écart-type) du ratio pollen / ovule chez les trois espèces étudiées.</figcaption></figure>

<figure><img src="image_9.png" /><figcaption>**Figure 6 :** Moyenne (et écart-type) des séparations spatiales stigmate-anthères (en mm) chez les trois espèces étudiées.</figcaption></figure>
3.3. Diversité et structure génétique

Cinq loci enzymatiques (GOT-1, MDH-1, IDH-1, αEST-1, LAP-1) se sont ré-
vélés polymorphes chez *Garidella nigellastrum* et six (GOT-1, MDH-1, IDH-1,
αEST-1, LAP-1, PGI-1) chez *Legousia speculum veneris*. Aucun des loci interprétés ne
se sont révélés monomorphes.

En ce qui concerne, les paramètres de diversité génétique tels que le pourcentage
de loci polymorphes (P) et le nombre moyen d'allèles par locus (A), ils sont plus
élevés chez *Garidella nigellastrum* (respectivement 100 % et 2,40) comparé à *Legousia
speculum veneris* (91,9 % et 2,20) alors que l'hétérozygotie moyenne observée $H_o$ et
attendue $H_c$ sont plus faibles chez *Garidella nigellastrum* (respectivement 0,058 et
0,439) comparé à *Legousia speculum veneris* (0,186 et 0,456) (tableau I).

Les valeurs plus élevées du F<sub>is</sub> chez *Garidella nigellastrum* (F<sub>is</sub> = 0,903) comparé à celles observées chez *Legousia speculum veneris* (F<sub>is</sub> = 0,556) indiquent un excès d'ho-
mozygotes plus important et, ainsi, des croisements consanguins plus fréquents chez *Garidella nigellastrum* (tableau II).

Au sein de l'unique parcelle agricole de *Garidella nigellastrum*, la différenciation génétique entre le centre et les deux lisières est très faible (F<sub>st</sub> = 0,064) (tableau II). Cependant, la différenciation génétique entre le centre de la parcelle et la lisière 1 (F<sub>st</sub> = 0,123) est plus importante que celles observées : i) entre la lisière 1 et la lisière 2 (F<sub>st</sub> = 0,041) et ii) entre le centre et la lisière 2 (F<sub>st</sub> = 0,035). Chez *Legousia speculum veneris*, la différenciation génétique entre les 7 parcelles agricoles est relativement importante (F<sub>st</sub> = 0,133) (tableau II). La différenciation génétique augmente progressivement en relation avec la distance géographique : i) elle est très faible entre le centre et la lisière au sein, respectivement, de la parcelle agricole « en plein » (F<sub>st</sub> = 0,00003) et « en contrat 1 » (F<sub>st</sub> = 0,087), ii) elle augmente entre les 3 parcelles agricoles situées proches géographiquement (F<sub>st</sub> plein-contrat 1 = 0,084 ; F<sub>st</sub> plein-contrat 2 = 0,272 ; F<sub>st</sub> contrat 1-contrat 2 = 0,162) et iii) elle ne cesse d'augmenter, d'une manière générale, entre les 7 parcelles agricoles plus la distance géographique augmente avec une valeur moyenne de F<sub>st</sub> égale à 0,138.

4. DISCUSSION

4.1. Dispersion des graines

Un premier point important de nos résultats concerne la mise en évi-
dence du transport des graines par les ovins au travers de l'endozoochorie et
de l'exozoochorie pour les espèces présentes dans les chaumes mais aussi
dans les friches et le long des talus parcourus par les moutons au cours du
circuit de pâturage journalier sur l'exploitation.
<table><caption>**Tableau I :** Paramètres de diversité génétique (pourcentage de loci polymorphes, P ; nombre moyen d'allèles par locus, A ; hétérozygoties moyennes observée H₀ et attendue H₁) chez *Garidella nigellastrum* et *Legousia speculum* veneris.</caption><thead><tr><th>Sites / Espèces</th><th>Parcelles agricoles</th><th>P<sup>a</sup></th><th>A</th><th>Hétérozygotie observée (H<sub>0</sub>)</th><th>Hétérozygotie attendue<sup>b</sup> (H<sub>1</sub>)</th></tr></thead><tbody><tr><td>Mérindol</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td><i>Garidella nigellastrum</i></td><td>Plein</td><td>100,00</td><td>2,40</td><td>0,058 (0,131)</td><td>0,439 (0,200)</td></tr><tr><td>La Garde d'Apt</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td rowspan="6"><i>Legousia speculum veneris</i></td><td>Plein</td><td>100,00</td><td>2,33</td><td>0,210 (0,223)</td><td>0,520 (0,052)</td></tr><tr><td>Contrat 1</td><td>100,00</td><td>2,50</td><td>0,296 (0,213)</td><td>0,539 (0,111)</td></tr><tr><td>Contrat 2</td><td>60,00</td><td>1,60</td><td>0,133 (0,233)</td><td>0,259 (0,245)</td></tr><tr><td>Population 3</td><td>100,00</td><td>2,33</td><td>0,186 (0,210)</td><td>0,487 (0,061)</td></tr><tr><td>Population 4</td><td>83,33</td><td>2,00</td><td>0,171 (0,206)</td><td>0,389 (0,246)</td></tr><tr><td>Population 5</td><td>100,00</td><td>2,33</td><td>0,136 (0,177)</td><td>0,484 (0,059)</td></tr><tr><td></td><td>Population 6</td><td>100,00</td><td>2,33</td><td>0,174 (0,222)</td><td>0,475 (0,107)</td></tr><tr><td></td><td>Moyenne (± SE)</td><td>91,90</td><td>2,20 (0,304)</td><td>0,186 (0,055)</td><td>0,450 (0,096)</td></tr></tbody></table>

<footnote><sup>a</sup> Un locus est considéré polymorphe si la fréquence de l'allèle le plus commun n'excède pas 0,99 ; <sup>b</sup> Estimation non biaisée de l'hétérozygotie attendue</footnote>
<table><caption>Tableau II : Résumé des F-statistiques chez *Garidella nigellastrum* et *Legousia speculum* veneris.</caption><thead><tr><th>Sites / Espèces</th><th>Locus</th><th>F<sub>is</sub></th><th>F<sub>it</sub></th><th>F<sub>st</sub></th></tr></thead><tbody><tr><td colspan="5" style="text-align: left; font-weight: bold;">Mérindol</td></tr><tr><td colspan="5" style="text-align: left; font-style: italic;">Garidella nigellastrum</td></tr><tr><td></td><td>LAP-1</td><td>0,841</td><td>0,852</td><td>0,070</td></tr><tr><td></td><td>MDH-1</td><td>0,835</td><td>0,834</td><td>-0,008</td></tr><tr><td></td><td>GOT-1</td><td>1,000</td><td>1,000</td><td>0,075</td></tr><tr><td></td><td>αEST-1</td><td>0,796</td><td>0,818</td><td>0,110</td></tr><tr><td></td><td>IDH-1</td><td>0,844</td><td>0,856</td><td>0,083</td></tr><tr><td></td><td>Moyenne (± SE)</td><td>0,852*** (0,141)</td><td>0,861*** (0,130)</td><td>0,064*** (0,079)</td></tr><tr><td colspan="5" style="text-align: left; font-style: italic;">La Garde d'Apt</td></tr><tr><td colspan="5" style="text-align: left; font-style: italic;">Legousia speculum veneris</td></tr><tr><td></td><td>LAP-1</td><td>0,591</td><td>0,653</td><td>0,151</td></tr><tr><td></td><td>MDH-1</td><td>0,514</td><td>0,572</td><td>0,120</td></tr><tr><td></td><td>GOT-1</td><td>0,490</td><td>0,563</td><td>0,142</td></tr><tr><td></td><td>αEST-1</td><td>0,602</td><td>0,659</td><td>0,144</td></tr><tr><td></td><td>IDH-1</td><td>0,573</td><td>0,611</td><td>0,087</td></tr><tr><td></td><td>PGI-1</td><td>0,692</td><td>0,741</td><td>0,160</td></tr><tr><td></td><td>Moyenne (± SE)</td><td>0,573*** (0,146)</td><td>0,633*** (0,135)</td><td>0,133*** (0,054)</td></tr></tbody></table>

<footnote>*** signifie que les statistiques de F sont significativement (P < 0,001) différent de zéro.</footnote>
Cependant, la quasi-absence des graines des espèces messicoles *stricto sensu* transportées par les ovins est à relier avec leur morphologie, plutôt lisse et leurs périodes de dispersion qui commence pour la majorité des espèces avant la moisson. Elles sont ainsi peu aptes à être transportées dans la laine des moutons. La taille réduite des individus d'espèces messicoles après la moisson (passage de la moissonneuse-batteuse) explique également l'absence de transport de ces graines dans la laine du mouton. Fisher *et al.* [13] ont effectivement montré que la majorité des semences transportées dans la laine des moutons provenaient de plantes d'une hauteur supérieure à 80 cm. En outre, la dispersion des graines des espèces messicoles *stricto sensu* par les fourmis reste très anecdotique [3]. Ainsi, il apparaît que l'anémochorie à tige projettante représente une modalité de dispersion des graines d'espèces messicoles plus importante comparée à la myrméchocorie et à l'exo- et endozoochoorie. Il est à noter que cette modalité de dispersion engendre de faibles distances de dispersion, par exemple de l'ordre de 50 à 60 cm chez *Garidella nigellastrum* (L. Affre, communication personnelle). À noter aussi que la perturbation occasionnée par le passage des machines agricoles représente une part importante de la dispersion des graines d'espèces messicoles sur pieds, et ce sur de plus grandes distances au sein des parcelles agricoles.

Actuellement, il nous paraît important de nous intéresser aux possibilités
de transport des graines d'espèces messicoles entre les différentes parcelles
agricoles après récolte et pendant le semis de l'année suivante (Speirocho-
rie). En effet, le semis d'une partie des semences de blés non triées en coo-
pérative est encore autorisé à hauteur de 30 % de la récolte. C'est une prati-
que courante des agriculteurs du Parc naturel régional du Luberon [28]. Les
premiers résultats obtenus (M. Jaëger, communication personnelle) mon-
trent que, après passage de la moissonneuse-batteuse, 64,5 % des graines
d'espèces adventices sont récoltées en même temps que les graines de blé.
Pour une récolte annuelle de 1 500 kg de blé sur l'exploitation, les quantités
de graines de messicoles récoltées seraient de 42,576 x 10⁶/ha. Ce résultat
est comparable à ceux de Petzoldt [32] avec 36 à 38 x 10⁶/ha graines récol-
tées pour des champs de maïs en intensif. Ainsi, si 30 % de ce mélange peut
être semé à nouveau sur l'exploitation sans triage ni aucun traitement, c'est
environ 1,986 x 10⁶ graines/ha qui seront ré-introduites dans les parcelles
agricoles l'année suivante.

4.2. Système de reproduction et structuration génétique

Il existe des corrélations entre les traits d'histoire de vie des espèces végéta-
les et la structuration génétique de leurs populations [19], [20], [26]. Les espè-
ces allogames maintiennent généralement une forte variation génétique au sein
des populations et une faible différenciation génétique entre les populations
et, inversement, chez les espèces autogames. Ainsi, un deuxième point impor-
tant de nos résultats concerne la mise en évidence, parmi les trois espèces messicoles étudiées, d'une variation continue du système de reproduction et d'une structuration génétique différente.

Premièrement, *Roemeria hybrida* présente la capacité de produire spontanément des fruits/graines en l'absence d'agents pollinisateurs. Cependant, la production des grains de pollen par fleur (valeur moyenne du logarithme p/o = 2,60) est caractéristique des espèces facultativement autogames [6]. En fait, la série d'étamines plus courte (séparation stigmate-anthères < à 1,5 mm) favorise les autopollinisations spontanées assurant ainsi la reproduction de cette espèce en l'absence d'agents pollinisateurs [36] alors que la série d'étamines plus longue (séparation stigmate-anthères > à 1,5 mm) favorise les autopollinisations facilitées par les agents pollinisateurs. Compte tenu d'une durée de floraison très courte (quelques heures) et d'un temps de visite par fleur important (45 sec en moyenne), l'activité des agents pollinisateurs (principalement des Coléoptères) facilite plutôt les autopollinisations [3]. Ainsi, la dispersion de poudres fluorescentes (assimilation à la dispersion des grains de pollen) a mis en évidence une très faible dispersion des grains de pollen, sur des distances inférieures à 1 m, uniquement en lisière au sein des deux parcelles agricoles et aucune dispersion des grains de pollen entre les parcelles agricoles [3]. *Roemeria hybrida*, espèce très rare, présenterait donc un système de reproduction préférentiellement autogame selon un compromis entre les autofécondations spontanées et facilitées par les agents pollinisateurs.

Deuxièmement, *Garidella nigellastrum* est une espèce autocompatible capable de s'autoféconder spontanément en l'absence d'agents pollinisateurs. Cependant, la production des grains de pollen par fleur (valeur moyenne du logarithme p/o = 3,07) est caractéristique des espèces facultativement allogames [6]. La dispersion de poudres fluorescentes sur des distances atteignant 10 à 20 m au sein de la parcelle agricole suggère une participation des agents pollinisateurs, principalement des hyménoptères, aux allopollinisations. En fait, la série d'étamines située vers l'extérieur de la fleur est plus longue (séparation stigmate-anthères > à 1,5 mm) et présente une maturité précoce par rapport à la série d'étamines plus courtes (séparation stigmate-anthères < à 1,5 mm) située vers l'intérieur de la fleur. Ainsi, les grains de pollen des longues étamines extérieures sont d'abord disponibles pour les allopollinisations facilitées par les agents pollinisateurs alors que les grains de pollen des courtes étamines intérieures participent aux auto-pollinisations spontanées et/ou facilitées [3], [36]. En outre, il n'existe aucune évidence de dépression de consanguinité au travers du pourcentage de fruits matures et de la production et de la biomasse des graines [3]. Il semble donc que *Garidella nigellastrum*, espèce très rare, présente un système de reproduction mixte. Cependant, le système de reproduction mixte de *Garidella nigellastrum* reposerait sur de forts taux de croi-
sements consanguins ($F_{is}$) en raison de la morphologie florale et de l'activité des agents pollinisateurs. Il est important de noter que les niveaux de diversité génétique tels que le pourcentage de loci polymorphes et le nombre moyen d'allèles par locus demeurent très élevés chez cette espèce, supérieurs aux moyennes observées chez les espèces pérennes allogames ; supériorité moins évidente au niveau de l'hétérozygotie moyenne observée [19]. En outre, les valeurs faibles de différenciation génétique ($F_{st}$) suggèrent des flux de gènes relativement importants au sein de la parcelle agricole. Cependant, la dispersion des poudres fluorescentes a révélé une dispersion exclusive depuis le centre de la parcelle vers toutes les directions intra-parcelles, ce qui ne permet pas de valider l'hypothèse selon laquelle les lisières de la parcelle agricole pourraient jouer un rôle « source » pour les flux de gènes [3].

Troisièmement, *Legousia speculum veneris* présente des capacités d'auto-
compatibilité et d'autofertilité extrêmement faibles voire nulles selon les
parcelles agricoles. La production de graines est d'ailleurs, de manière géné-
rale, supérieure en « libre pollinisation » et « allogamie manuelle » par rap-
port en « autogamie spontanée » et « autogamie manuelle ». En outre, cette
espèce présente : i) une production des grains de pollen par fleur (valeur
moyenne du logarithme p/o = 3,00) caractéristique des espèces végétales
facultativement allogames [6], ii) une séparation spatiale stigmate-anthères,
largement supérieure à 1,5 mm empêchant, ainsi, les autopollinisations
spontanées [36], iii) une dichogamie protandre favorisant les alloféconda-
tions [25] et iv) une fréquence importante des agents pollinisateurs, principa-
lement des hyménoptères [3]. L'estimation multiplicative de la dépression de
consanguinité s'est révélée très élevée au travers du pourcentage de fruits
matures et de la production et de la biomasse des graines [3]. *Legousia specu-
lum veneris*, espèce plus commune, présenterait donc un système de repro-
duction allogame strict ; les taux de consanguinité ($F_{is}$) moyennement élevés
pourraient alors résulter de la méthode d'échantillonnage (effet Walhund).
*Legousia speculum veneris*, espèce allogame stricte, présente, ainsi, des niveaux
de diversité génétique très élevés, aussi bien pour le pourcentage de loci
polymorphes, le nombre moyen d'allèles par locus et l'hétérozygotie moy-
enne observée, supérieurs aux moyennes observées chez les espèces péren-
nes allogames [19]. Il est important de noter que la différenciation génétique
augmente avec la distance géographique des parcelles agricoles ; les valeurs
de $F_{st}$ étant très faibles au sein des parcelles agricoles (entre la lisière et le
centre) et augmentant, de manière générale, lorsque les parcelles agricoles
sont de plus en plus éloignées. Les flux de gènes semblent donc plus
fréquents sur des distances peu importantes. L'expérimentation sur la
dispersion des poudres fluorescentes n'ayant pu être réalisée, il est impossi-
ble de déterminer si la parcelle agricole « en plein » peut jouer un rôle
« source » pour les parcelles agricoles « en contrat ».
4.3. Stratégies de gestion des espèces messicoles

En résumé, seules les deux espèces caractérisées par un système de re-
production plus allogame, *Garidella nigellastrum* et *Legousia speculum veneris*,
présentent des flux de pollen non négligeables, mais principalement au sein
des parcelles agricoles. Du point de vue des flux de graines (anémochorie à
tige projettante, myrmécochorie, endo- et exozoochorie), les taux de disper-
sion sont très faibles voire nuls.

Premièrement, au vu de nos résultats, les flux de pollen se réalisent prin-
cipalement au sein de chaque parcelle agricole, qu’elles que soient les prati-
ques agricoles. Cependant, les distances de dispersion du pollen et des grai-
nes ne peuvent pas valider l’hypothèse du rôle de « source » pour les parcel-
les agricoles « en plein ». En outre, en raison d’une distribution spatiale des
individus en aggrégats, qu’elle que soit leur situation au sein des parcelles
agricoles, en lisière ou au centre, (L. Affre, communication personnelle), les
lisières ne semblent pas, non plus, pouvoir jouer le rôle de « source » par
rapport au centre des parcelles agricoles.

Deuxièmement, la richesse en espèces messicoles au sein du Parc du Lu-
beron ne peut pas s'expliquer par leurs potentialités de dispersion des grai-
nes au sein d'une mosaïque paysagère hétérogène (temporellement et spatia-
lement). De même, la faible viabilité des graines des espèces messicoles,
dans le sol des champs cultivés ou réaffectés (abandon, prairies, etc.), ne
permet pas d'expliquer leur réapparition après remise en culture [16]. Cette
richesse pourrait alors résulter d'une part, de l'absence de traitements herbi-
cides et d'autre part, des semis (année après année) de semences de blés non
triées et récoltées sur l'exploitation. De véritables connections par cette voie
existeraient ainsi entre les parcelles agricoles, permettant : i) le maintien des
populations messicoles, mais aussi, ii) la production de mélanges de graines
entre les parcelles agricoles selon la provenance des graines récoltées l'année
précédente. La composition et la richesse des communautés de messicoles
ne seraient donc pas essentiellement expliquées par les pratiques agricoles
actuelles ou passées mais aussi, par l'origine des mélanges récoltés sur
l'ensemble du territoire de l'exploitation agricole.

Ainsi, la mise en place de la mesure agri-environnementale depuis 1997,
avec notamment un semis moins dense au niveau des lisières, s'avère de peu
d'utilité pour le renforcement des populations au centre des parcelles. En
effet, en l'absence d'une forte densité de blé, les messicoles stricto sensu sont
éliminées, en lisière, par des espèces rudérales mésophiles plus aptes à : i) se
disséminer (anémochorie) à partir des bordures herbeuses et ii) se dévelop-
per entre les semis de blé en raison, notamment, d'une plus forte compéti-
tion pour exploiter la lumière arrivant au sol [7], [21].
En conclusion, pour une meilleure gestion des espèces messicoles au sein du Parc du Luberon, il est d'abord primordial de maintenir les pratiques agricoles traditionnelles ayant permis le maintien de leurs populations (poly-culture-élevage, faible niveau d'intrants, etc). Mais, dans un soucis de renforcement et de restauration des communautés de messicoles, les interventions devront particulièrement être orientées vers le maintien des semis, d'année en année, de semences récoltées sur l'exploitation, sans triage ni traitement, bien que cette pratique aille complètement à l'encontre des pressions actuelles des sélectionneurs de semences. De même, nos résultats justifient éthiquement les pratiques de semis de mélanges de messicoles menées par les gestionnaires d'espaces naturels (parcs naturels régionaux, conservatoires régionaux d'espaces naturels, conservatoires botaniques nationaux, etc.) en l'absence de sources de graines messicoles dans le sol et les parcelles voisiennes. En effet, bien que ces mesures aient souvent fait l'objet de critiques par rapport à leur artificialité, elles constituent cependant un palliatif incontournable face à la disparition programmée du semis traditionnel de mélanges « blé + messicoles » produites sur l'exploitation.

## REMERCIEMENTS

Nous remercions particulièrement J.-P. Hébrard, P. Ponel, P. Frapa, R. Fonfria, M.-C. Andrei-Ruiz et B. Gereys pour la détermination des agents pollinisateurs ; les agriculteurs du Parc naturel régional du Luberon, Mr. Bonnet, Mr. Brunet, Mr. Perrin et Mr. Armand pour l'autorisation d'accès à leur exploitation agricole et leur collaboration sur le terrain. Nous remercions également E. Gerbaud et A. Barroit pour leur aide technique. Ce projet a été financé par le Bureau des Ressources Génétiques.

## RÉFÉRENCES

[1] Aymonin G., L'appauvrissement du patrimoine floristique en France, Rev. Féd. Franç. Soc. Sci. Nat. 49 (1973) 127-136.

[2] Aymonin G., Quelques raréfactions ou disparitions d'espèces végétales en France. Causes possibles et conséquences chorologiques, C. R. Soc. Biogéo., Paris, 430 (1973) 49-64.

[3] Barroit A., Gerbaud E., Affre L., Raquet V., Stratégies de reproduction et de dispersion des graines chez les espèces messicoles : implications pour leur conservation dans le Parc naturel régional du Luberon. Courrier Scientifique du P.N.R. du Luberon 4 (2000) 128-142.

[4] Belkhir, K., GENETIX. Release 4.0. Laboratoire Génome et Populations, Montpellier, 1999.
[5] Cousens R., Mortimer M., Dynamics of weed populations, Cambridge University Press, Cambridge, 1995.

[6] Cruden R.W., Pollen-ovule ratios: a conservative indicator of breeding systems in flowering plants, Evolution 31 (1977) 32-46.

[7] Dutoit T., Gerbaud E., Ourcival J.M., Field boundary effects on soil seed banks and weed vegetation distribution in an arable field without weed control (Vaucluse, France), Agronomie 19 (1999) 579-590.

[8] Dutoit T., Hill B., Mahieu P., Gerbaud E., Restauration et conservation de communautés d'espèces ségétales *in situ* : des coteaux de la basse vallée de Seine aux cultures extensives du Parc naturel régional du Luberon, Bull. Soc. Bot. Centre-Ouest 19 (1999) 303-316.

[9] Dutoit T., Roche Ph., Alard D., Influence de perturbations anthropiques sur la composition et la diversité botanique des pelouses calcicoles de la vallée de Seine en Haute-Normandie (France). Canadian Journal of Botany 77 (1999) 377-388.

[10] Filosa D., Situation de quelques espèces végétales messicoles en Haute-Provence occidentale, Bull. Soc. Bot. Centre-Ouest 16 (1985) 61-79.

[11] Filosa D., La régression des messicoles dans le Sud-Est de la France, in : Dalmas J.P. (éds), Faut-il sauver les mauvaises herbes ? Conservatoire Botanique de Gap-Charance, Gap, 1997, pp. 67-74.

[12] Firbank L.G., Carter N., Darbyshire J.F., Potts G.R., The ecology of temperate cereal fields, Blackwell Scientific Publications, Oxford, 1991.

[13] Fisher S.F., Poschlod P., Beinlich B., Experimental studies on the dispersal of plants and animals on sheep in calcareous grasslands, J. Appl. Ecol. 33 (1996) 1206-1222.

[14] Gasquez J., Variabilité et évolution génétique chez les adventices, in : Dalmas J.P. (éds), Faut-il sauver les mauvaises herbes ? Conservatoire Botanique de Gap-Charance, Gap, 1997, pp.147-148.

[15] Gerbaud, E., Dynamique des communautés végétales en écosystèmes perturbés : Le cas des espèces adventices des cultures extensives du Parc naturel régional du Luberon. Thèse de Doctorat de l'université d'Aix-Marseille I, 2002.

[16] Gerbaud E., Dutoit T., Rôles de la pluie de graines, du stock semencier et de la zoochorie dans la distribution des adventices des grandes cultures (Vaucluse, France). Ecologie 32 (sous presse).

[17] Gerbaud E., Dutoit T., Barroit A., Toussaint B., Teneurs en minéraux des fourrages de chaumes : L'exemple d'une exploitation agricole du sud-est de la France (Vaucluse), Animal Research 50 (2001) 495-505.

[18] Guende G., Olivier L., Les mesures de sauvegarde et de gestion des plantes messicoles du Parc naturel régional du Luberon, in : Dalmas J.P. (éds), Faut-il sauver les mauvaises herbes ? Conservatoire Botanique de Gap-Charance, Gap, 1997, pp.179-188.

[19] Hamrick J.L., Godt M.J.W., Allozyme diversity in plant species, in : Brown A.H.D., Clegg M.T., Kahler A.L., Weir B.S. (éds.), Plant Population Genetics, Breeding and Genetic Resources, Sinauer, Sunderland, MA, 1989, pp. 43-63.

[20] Harper J.L., Population Biology of plants, Academic Press, London & New York, 1977.
[21] Hill B., Roche P., Suivi scientifique et technique de l'opération locale agriculture-environnement «protection in situ des agrosystèmes à messicoles». Rapport d'activité 1998-1999, PNR du Luberon / Université d'aix-Marseille III, 1999.

[22] Jauzein P., Flore des champs cultivés, Ed. INRA, 1995.

[23] Jauzein, P., La notion de messicole : tentative de définition et de classification, Le Monde des Plantes 458 (1997) 19-23.

[24] Lloyd D.G., Schoen D.J., Self- and cross-fertilization in plants. I. Functional dimensions, Int. J. Pl. Sci. 153 (1992) 358-369.

[25] Lloyd D.G., Webb C.J., The avoidance of interference between the presentation of pollen and stigmas in angiosperms, I. Dichogamy, New Zeal. J. Bot. 24 (1986) 135-162.

[26] Loveless M.D., Hamrick J.L., Ecological determinants of genetic structure in plant populations, Ann. Rev. Ecol. Syst. 15 (1984) 65-95.

[27] Lumaret R., Structure génétique d'un complexe polyploïde : *Dactylis glomerata* L. (Graminées). Relations entre le polymorphisme enzymatique et certains aspects de la biologie, de l'écologie et de l'évolution de l'espèce. Thèse doc. Etat. Université des Sciences et Techniques, 1981.

[28] Mahieu P., Suivi agronomique d'une opération locale agri-environnementale de protection in situ des plantes messicoles dans le Luberon. Mémoire de DAA agri-environnement, IMEP-ENSA Montpellier, 1997.

[29] Maillet J., Godron M., Caractéristiques bionomiques des messicoles et incidence sur leurs capacités de maintien dans les agrosystèmes, in : Dalmas J.P. (éds), Faut-il sauver les mauvaises herbes ? Conservatoire Botanique de Gap-Charance, Gap, 1997, pp. 125-138.

[30] Molinier R., Muller P., La dissémination des espèces végétales, Revue Générale de Botanique, 1938.

[31] Olivereau F., Les plantes messicoles des plaines françaises, Courrier de l'environnement de l'INRA 28 (1996) 5-18.

[32] Petzold, K., Wirkung des Maehdruschverfahrens auf die Verunkrautung. Zeitschr. Acker-Pflanzenbau 109 (1957) 49-78.

[33] Roche P., Suivi scientifique de l'opération locale agriculture-environnement - Protection in situ des agrosystèmes à messicoles : rapport final 1997-2001. PNR du Luberon / Université d'Aix-Marseille III, 2001.

[34] Seoane J., Hervas I., Suarez F., Endozoochorous dispersal of *Amaranthus albus* by sheep: digestion effects on seed losses and germination patterns, In: Proceedings of the 6th EWRS Mediterranean Symposium, Montpellier, France 1998, pp. 53-54.

[35] Statsoft france, STATISTICA pour Windows (manuel du programme). Release 5.1. StatSoft France, Paris, 1997.

[36] Tremayne M., Richards A.J., Homostyly and herchogamous variation in *Primula* L. *section muscaroides* Balf.f. Evol.Trends Plants 7 (1993) 67-72.

[37] Wright W., The interpretation of population structure by F-statistics with special regard to systems of mating, Evolution 19 (1965) 395-420.