# Le chancre citrique à l'île de La Réunion

Bernard Aubert, Jacques Luisetti, E.L. Civerolo, Thérésien Cadet, Etienne Laville

► To cite this version:

Bernard Aubert, Jacques Luisetti, E.L. Civerolo, Thérésien Cadet, Etienne Laville. Le chancre citrique à l'île de La Réunion. Fruits, 1982, 37 (11), pp.705-722. hal-03951265

HAL Id: hal-03951265

https://hal.univ-reunion.fr/hal-03951265

Submitted on 23 Jan 2023

HAL is a multi-disciplinary open access
archive for the deposit and dissemination of sci-
entific research documents, whether they are pub-
lished or not. The documents may come from
teaching and research institutions in France or
abroad, or from public or private research centers.

L'archive ouverte pluridisciplinaire HAL, est
destinée au dépôt et à la diffusion de documents
scientifiques de niveau recherche, publiés ou non,
émanant des établissements d'enseignement et de
recherche français ou étrangers, des laboratoires
publics ou privés.

<figure><img src="image_1.png" /></figure>

Distributed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License
# Le chancre citrique à l'île de la Réunion.

B. AUBERT, J. LUISETTI, E.L. CIVEROLO,
Th. CADET et E. LAVILLE*

## LE CHANCRE CITRIQUE A L'ÎLE DE LA REUNION

B. AUBERT, J. LUISETTI, E.L. CIVEROLO, Th. CADET et E. LAVILLE

Fruits, nov. 1982, vol. 37, n° 11, p. 705-722.

RESUME - L'article rend compte du premier travail de recherche engagé sur la bactérie responsable du chancre citrique : *Xanthomonas campestris* pv. *citri* (HASSE, 1915) DYE 1978, à l'île de la Réunion. Cette maladie est quelquefois très difficile à diagnostiquer par simple observation visuelle en raison des risques de confusion avec diverses affections non bactériennes. C'est pourquoi une clef de détermination est proposée sous forme d'un tableau synoptique.

Les auteurs exposent ensuite les résultats d'isolement et de caractérisation de 5 souches réunionnaises de *X.c.* pv. *citri*. L'une d'elle, la souche XC 163 a fait l'objet d'une série d'inoculations expérimentales sur plusieurs plantes tests appartenant au genre Citrus. L'espèce *Citrus volkameriana* TEN. et PASQ. s'est avérée l'une des plus commodes pour les études d'infection expérimentale.

L'obtention d'un immunosérum a permis de rechercher des germes sur des «porteurs apparemment sains» de Citrus et de Rutacées sauvages par la technique de l'immunofluorescence.

Les méthodes prophylactiques actuellement employées, ou à développer pour lutter efficacement contre cette bactériose sont discutées.

## INTRODUCTION

Le chancre citrique, connu également sous l'appellation de «Citrus canker» dans les pays anglo-saxons, ou «Citrus bacterial canker disease» (CBCD), est une affection bactérienne occasionnée par un germe Gram négatif : *Xanthomonas campestris* pv. *citri* (HASSE, 1915) DYE, 1978.

Cette maladie peut provoquer d'importantes baisses de rendements. Elle freine aussi considérablement les échanges commerciaux en raison des sévères dépréciations de fruits qu'elle occasionne, ainsi que des mesures de quarantaine susceptibles de toucher les pays contaminés.

Le chancre citrique est endémique dans toute l'Asie du Sud-est, jusqu'en Indonésie, aux Philippines et en Polynésie. Dans ces régions sévit la forme A de chancre citrique ou forme commune. Les souches asiatiques sont virulentes et peuvent s'attaquer aux genres Poncirus et Citrus ainsi qu'à leurs hybrides, mais plus rarement au genre Fortunella (PELTIER, 1920). Elles arrivent aussi à se développer sur de nombreuses Rutacées sauvages (PELTIER, 1920 ; JEHLE, 1917 ; JEHLE, 1918 ; CALAVAN, 1956). Leur pouvoir infectieux s'exerce non seulement au niveau des blessures d'épiderme (piqûres, frottements), mais également par pénétration à travers les stomates des jeunes feuilles ou les lenticelles des fruits.

<footnote>* B. AUBERT - IRFA - B.P. 180 - 97455 SAINT PIERRE Cedex
Ile de la Réunion.</footnote>

<footnote>J. LUISETTI - Laboratoire Phytobactériologie - INRA - Domaine du Beaucouzé - route de St-Clément - 49000 ANGERS (France).</footnote>

<footnote>E.L. CIVEROLO - USDA ARS NER - HSI Fruit Laboratory - BARC-WEST - BELTSVILLE Maryland 20707 (USA).</footnote>

<footnote>Th. CADET - Laboratoire de Botanique - Centre Universitaire du Chaudron - 97490 SAINTE CLOTILDE (Ile de la Réunion)</footnote>

<footnote>E. LAVILLE - Laboratoire de Phytopathologie - IRFA-GERDAT, B.P. 5035 - 34032 MONTPELLIER Cedex (France).</footnote>
En Amérique du sud, principalement Argentine, on connaît une forme B de chancre citrique qui se distingue de la forme A par divers caractères pathologiques, biochimiques et sérologiques (DU CHARME, 1951 ; GOTO et al., 1980). Les souches appartenant à la forme B sont moins virulentes, et ne se développent le plus souvent que sur des lésions (blessures diverses, effets abrasifs dus au vent, dégâts de grêle ...). Le citronnier *Citrus lemon* (L.) BURM. est une des espèces les plus sensibles à la forme B, dont la gamme d'hôtes est assez étendue, bien qu'elle n'implique ni le grapefruit ni l'oranger. STALL (comm. pers.) considère les souches B comme des formes atténuées des souches A. Lorsque ces dernières sont présentes il y a peu de chance d'arriver à isoler une forme B. Au Brésil, NAMEKATA (1971 et 1972), a signalé la présence d'une forme C très virulente sur lime mexicaine, *Citrus aurantifolia* TAN., et pouvant attaquer également le bigaradier *Citrus aurantium* L., mais pas les autres agrumes. Cette forme C occasionne des réactions d'hypersensibilité sur tabac.

## Zone Afrique-Océan Indien.

Le chancre citrique a fait son apparition en Afrique australe au début du siècle. Il a été éradiqué d'Afrique du sud et de Rhodésie (actuel Zimbabwe) entre 1916 et 1927 (BRODRICK et LOEST, 1975), mais semble encore présent au Mozambique.

La date exacte à laquelle cette affection serait apparue dans l'Est de Madagascar reste inconnue. Dès 1957 BITANCOURT mentionnait sa présence à l'île Maurice et aux Seychelles. BRUN (1966) puis PRALORAN (1968) la signalait à l'île de Moheli dans l'archipel des Comores, et

MOREIRA l'identifiait à l'île de la Réunion en 1967. D'après JULIEN (1972), l'introduction de cette bactérie a Maurice remonterait aux années 1920, époque où de fortes attaques auraient été enregistrées sur lime mexicaine dans la région de Flacq.

## Cas de l'île de la Réunion.

Au cours de ces quinze dernières années, le chancre citrique n'avait pas montré à la Réunion de virulence particulière. Les attaques en vergers ou dans les jardins restaient surtout limitées au grapefruit *Citrus paradisi* MCF à la lime mexicaine, ou au combava *Citrus hystrix* DC. Les nouvelles lignées SRA de mandariniers, orangers, citronniers ou limettiers, introduites de Corse en 1967, ne s'étaient pas montrées particulièrement sensibles. BOVE et CASSIN (1968) estimaient que l'éradication de cette maladie, en arrachant et brûlant les agrumes de l'île puis en instaurant une sévère quarantaine avant replantation, représentait une opération disproportionnée aux objectifs relativement modestes du développement agrumicole local. Quelques années plus tard, BRUN (1970) observait à son tour la maladie dans l'île mais remarquait sa faible virulence. Une souche réunionnaise de chancre citrique était d'ailleurs envoyée à la collection de référence d'Angers en 1976. Tout au long de la décade 1970-1980 les attaques de *X. campestris* pv. citri sont restées sporadiques, n'apparaissant en général qu'en saison estivale de janvier-février, principalement dans la zone littorale «au vent». L'application de sels de cuivre renouvelée en deux ou trois fois permettait de maîtriser ces attaques sans trop de difficultés.

Depuis le début de l'année 1980, époque du passage dans l'île du cyclone HYACINTHE, on a assisté à une importante

<figure><img src="image_2.png" /><figcaption>Fig. 1 • LISTE DES PAYS HEBERGEANT OU AYANT HEBERGE LE CHANCRE CITRIQUE.</figcaption></figure>
<table><caption>Fig. 2 • SYMPTOMES DE CHANCRE CITRIQUE COMPARES A D'AUTRES MALADIES BACTERIENNES OU FONGIQUES.</caption><thead><tr><th rowspan="2">Agent causal</th><th colspan="2">Carcéristiques</th><th rowspan="2">sur feuilles</th><th rowspan="2">sur rameaux</th><th rowspan="2">sur fruits</th><th rowspan="2">traitement</th></tr><tr><th>1</th><th>2</th></tr></thead><tbody><tr><td>Chancre citrique (bactérie)<br>Xanthomonas campestris pv. citri</td><td></td><td></td><td>Pas de déformation des feuilles en général.<br>Attaques souvent alignées. En coupe :<br>1. Jeune attaque sur variétés très sensibles:<br>citron Gallet, combiva, Hamlin.<br>2. Vielles attaques sur variétés sensibles.<br>3. Jeunes attaques sur variétés sensibles.<br>Auréole jaune autour de la pustule pour la plupart des citrus.</td><td>chancre sur bois et sur épines sou- vent alignées le long d'une blessure</td><td>pustules chancrauses souvent alignées</td><td>boullies cupriques à appliquer juste après la poussée végétative au stade chute des pétales</td></tr><tr><td>Scab du bigaradier (champignon)<br>Forne parfaite :<br>Elsinoe fucetti JENK.<br>Forne conièrnièe:<br>Sphaceloma fucetti JENK.</td><td></td><td></td><td>- En général pas d'auréole jaune autour de la nécrose.<br>- Attaques plus fréquentes sur la face inférieure du limbe. Le côté du limbe oppose à l'attaque se déprime.<br>- Déformations de feuilles.</td><td>petites pustules discrètes</td><td>formation de verrues liegeses qui deven- nent coa- lescentes</td><td>comme pour le chancre citrique ou Benomyl ou Captafol</td></tr><tr><td>Cercospora (champignon)<br>Cercospora angolense</td><td></td><td></td><td>- Pustules soulevant l'épiderme des 2 faces du limbe vers la périphérie entourées d'une auréole jaune.<br>- Centre de la nécrose déprimé et se dessé- chant.<br>- Aspect voisin de chancre citrique.</td><td></td><td>groses pustules déformant le fruit</td><td>boullies cupriques ou Benomyl ou Captafol</td></tr><tr><td>Mélanose (champignon)<br>Diaporthe citri (FAW)</td><td></td><td></td><td>- Cellules de l'épiderme remplies de gomme, qui se soulèvent.<br>- La feuille donne la sensation de papier de verre au toucher.</td><td>attaques sur discrètes sur rameaux</td><td>attaques sur jeunes fruits occasion- nant des é- clatementes</td><td>boullies cupriques ou Benomyl ou Captafol</td></tr><tr><td>Anthrac nose<br>Colletotrichum gloeosporioides PENZ (parasite de blessure)<br>Colletotrichum linieticolum qui est spécifique du limettier (attaques sur jeunes feuilles avec ou sans blessures)</td><td></td><td></td><td>- Attaques sur limes, citronniers, bigaradiers, mandariniers, déformant les feuilles.<br>- Auréole jaune autour des nécroses qui dépriment le limbe.<br>- Attaques sur jeunes feuilles.</td><td>nécrose des branchettes</td><td>groses taches apparaissant souvent d'un même côté du fruit</td><td>boullies cupriques à appliquer au stade chute des pétales (comme pour traitement chancre) ou Benomyl</td></tr><tr><td>Greasy spot (champignon)<br>Mycosphaerella citri</td><td></td><td></td><td></td><td>Taches noires sur le limbe, lisses au toucher.</td><td>taches noires sur fruit</td><td>attaques juste après les pluies Cuivre ou Benomyl, Zinèbe, Ferbame</td></tr><tr><td>Cephalouros virescens (algue)<br>Lichens</td><td></td><td></td><td></td><td>Taches rondes couleur rouille.</td><td>quelques taches rondes couleur rouille</td><td>Cuivre</td></tr><tr><td>Botrytis cinerea</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td>chute de fruits à la rouaïson.<br>Déformation des fruits restant en place</td><td>traitement au Zinèbe au stade pleine floraison</td></tr><tr><td>Black spot (champignon)<br>Gugardis citricarpe<br>Phoma citricarpe</td><td></td><td></td><td>Petites taches noires à la faces inférieure des feuilles.</td><td></td><td>taches noires en depression sur le fruit</td><td>boullies cupriques au stade fruits de la grosseur d'une balle de ping pong ou Mancozèbe</td></tr></tbody></table>

<figure><img src="image_3.png" /></figure>

<figure><img src="image_4.png" /></figure>

<figure><img src="image_5.png" /></figure>

<figure><img src="image_6.png" /></figure>

<figure><img src="image_7.png" /></figure>

<figure><img src="image_8.png" /></figure>

<figure><img src="image_9.png" /></figure>

<figure><img src="image_10.png" /></figure>

<figure><img src="image_11.png" /></figure>

<figure><img src="image_12.png" /></figure>

<figure><img src="image_13.png" /></figure>

<figure><img src="image_14.png" /></figure>

<figure><img src="image_15.png" /></figure>

<figure><img src="image_16.png" /></figure>

<figure><img src="image_17.png" /></figure>

<figure><img src="image_18.png" /></figure>

<figure><img src="image_19.png" /></figure>

<figure><img src="image_20.png" /></figure>

<figure><img src="image_21.png" /></figure>

<figure><img src="image_22.png" /></figure>

<figure><img src="image_23.png" /></figure>

<figure><img src="image_24.png" /></figure>

<figure><img src="image_25.png" /></figure>

<figure><img src="image_26.png" /></figure>

<figure><img src="image_27.png" /></figure>

<figure><img src="image_28.png" /></figure>

<figure><img src="image_29.png" /></figure>

<figure><img src="image_30.png" /></figure>

<figure><img src="image_31.png" /></figure>

<figure><img src="image_32.png" /></figure>

<figure><img src="image_33.png" /></figure>

<figure><img src="image_34.png" /></figure>

<figure><img src="image_35.png" /></figure>
recrudescence de cette maladie. Les germes bactériens se sont développés à la faveur des blessures de feuilles, de fruits ou de rameaux, entraînant une augmentation brutale du taux d'inoculum dans certains vergers. Les pépinières n'ayant pas été épargnées par ces attaques, la bactérie s'est trouvée disséminée dans des secteurs encore peu atteints, à la suite des transports de plants précocement contaminés. Des foyers particulièrement redoutables se sont constitués sur des parcelles de limes mexicaines installées dans des expositions très ventées, sans protection de brise-vent.

* * *

Nous nous proposons ici de décrire les différentes manifestations pathologiques du chancre citrique observées à l'île de la Réunion. On insistera tout d'abord sur la difficulté du diagnostic par simple observation visuelle. Les risques de confusion sont assez fréquents avec d'autres affections non bactériennes. L'isolement et la caractérisation de plusieurs souches réunionnaises de X.c. pv. citri seront ensuite exposés, ainsi que les résultats d'inoculations expérimentales effectuées sur plusieurs espèces appartenant au genre Citrus. On discutera également du problème posé dans l'île par les populations de Rutacées sauvages qui peuvent héberger X.c. pv. citri. Enfin seront abordées les méthodes prophylactiques actuellement employées, ou à développer pour lutter efficacement contre cette bactériaise.

## DEGATS OCCASIONNES PAR XANTHOMONAS CAMPESTRIS PV. CITRI COMPARES A CEUX D'AUTRES AFFECTIONS

Les pustules chancreuses peuvent prendre des aspects très divers, notamment au niveau des feuilles et des fruits, selon les différentes espèces ou variétés d'agrumes. Par ailleurs l'intensité des attaques dépend en grande partie des conditions climatiques (vent, humidité, température). Le vieillissement des feuilles enfin peut entraîner des modifications dans l'aspect des nécroses.

L'isolement de l'agent causal, puis sa réinoculation expérimentale sont donc indispensables si l'on veut éviter des confusions avec divers symptômes d'attaques non bactériennes.

Dans le cas du chancre citrique cette démarche s'avère particulièrement importante. En effet, les pustules chancreuses sur feuilles et sur fruits occasionnés par X.c. pv. citri ressemblent quelquefois d'assez près à ceux du Scab ou du Cercospora. On trouvera sur la figure 2 plusieurs clefs de détermination pouvant faciliter le diagnostic de l'une ou de l'autre affection. En zone humide il arrive de confondre des colonies d'algues bien incrustées sur le limbe, avec des attaques de chancre citrique.

Par ailleurs, il est fréquent d'isoler d'une même lésion non seulement des germes bactériens, mais aussi un ou plusieurs champignons pathogènes. Ainsi, dans les conditions de l'île de la Réunion on a trouvé sur feuilles d'oranger ou

de limettier des nécroses atypiques qui ont fourni des germes de X.c. pv. citri en même temps que le *Mycosphaerella* du greasy-spot ou le *Colletotrichum* de l'anthracnose. L'isolement de *Colletotrichum gloeosporioides* ne surprend guère puisqu'il s'agit d'un champignon de blessure. Il ne semble pas modifier sensiblement l'aspect des nécroses chancreuses. Par contre, le faciès greasy-spot + X.c. pv. citri est apparu très différent de celui de X.c. pv. citri seul, comme on le verra plus loin.

Il faut mentionner aussi l'action de certains ravageurs s'attaquant aux fruits. Les piqûres d'acariens par exemple peuvent contribuer à la dissémination de X.c. pv. citri sur les citrons, et provoquer l'apparition d'un type d'encroûtement particulier.

Les confusions avec des attaques non bactériennes sont d'ailleurs plus fréquentes dans le cas des fruits que dans celui des feuilles ou des rameaux. Au Brésil les dégâts de la léprose transmise par *Brevipalpus odoratus* DON. sur les oranges ou les citrons peuvent ressembler à des attaques de X.c. pv. citri (ROSSETTI, 1981). Pour toutes ces raisons, la prudence s'impose lorsqu'on cherche à identifier le chancre citrique par simple observation visuelle.

## ISOLEMENT DE XANTHOMONAS CAMPESTRIS PV. CITRI ET TRANSMISSION EXPERIMENTALE

### Isolement.

Plusieurs souches réunionnaises de X.c. pv. citri ont été isolées à partir des lésions observées sur orangers, combavas, citronniers, limettiers, mandariniers et pomelos. Après grattage des pustules chancreuses dans 2 à 3 ml d'eau distillée stérile, on a étalé une goutte de suspension sur milieu LPGA coulé en boîte de Pétri. Il a été souvent difficile de cloning les colonies jaunes qui apparaissaient après environ 72 heures d'incubation à 28°C, en raison de la présence très fréquente de bactéries saprophytes comme *Enterobacter agglomerans* (Erwinia herbicola). On a vérifié que ce germe donnant des colonies blanches et dont la croissance est beaucoup plus rapide que celle de X.c. pv. citri, n'occasionne pas de lésions pustuleuses après réinoculation sur feuilles d'agrumes.

Plusieurs souches réunionnaises de X.c. pv. citri sont entrées à la collection de référence de l'INRA d'Angers. On mentionnera notamment les 5 suivantes : JA 143, JA 151.1, JA 151.5, JA 162.5 et JA 163. Elles ont été envoyées à la collection du HSI de Beltsville (USA). Plus récemment, LAVILLE (1982), a isolé 23 autres souches réunionnaises, et étudié leurs caractères physiologiques, biochimiques, sérologiques et lysotypiques.

On a constaté que certaines souches réunionnaises réagisaient sérologiquement avec la souche A de chancre citrique NCPPB XC 62 isolée au Japon, cela aussi bien au test d'immunoagglutination, en observation par immunofluorescence, qu'au test ELISA. Ces parentés sérologiques sont en outre complétées d'une similitude du DNA plasmidial analysé par la technique de l'électrophorèse, du moins pour
les souches JA 143, JA 151.5 et JA 162.5 (CIVEROLO, 1982).

Aucune des souches réunionnaises isolées jusqu'ici ne présente de parenté avec la forme B de chancre citrique (souches NCPPB XC 64 ou CX 69). Par contre, un troisième groupe de souches réunionnaises se trouve apparentement sérologiquement au chancre C (souche NCPPB XC 70 isolée au Brésil). Elles partagent avec XC 70 une analogie de contenu plasmidial ainsi qu'une sensibilité comparable aux bactériophages CP1, CP2 et CP3 (CIVEROLO, 1982).

Dans les essais d'inoculation expérimentale qui sont décrits ci-dessous, on a utilisé la souche JA 143 dont les caractères sont très voisins de la forme A. Cette souche est insensible aux phages CP1 et CP3 mais réagit au phage CP2.

## Matériel et méthode d'inoculation.

Trois techniques d'inoculation expérimentale sur feuilles ont été comparées : les blessures par frottement avec un abrasif (le carborandum), les piqûres et l'injection à la seringue.

Des semis de *Citrus volkameriana* TEN et PASQ âgés de 18 mois ont servi de plantes tests. La culture a été effectuée à l'abri des contaminations de *X.c.* pv. *citri* dans des pots contenant 1/3 de sable, 1/3 de tourbe et 1/3 de billes de polystyrène. On a utilisé pour les inoculations la souche X 143 isolée du combava et avec laquelle des suspensions ont été réalisées dans l'eau distillée stérile de façon à obtenir des gammes de concentration allant de $10^4$ à $10^9$ germes par ml.

Les plantes inoculées étaient maintenues en ombrïère sous une humidité relative voisine de la saturation et une température moyenne de 28°C le jour et 20,8°C la nuit. Dans le cas de l'inoculation par carborandum, on a saupoudré la feuille avec cet abrasif préalablement autoclavé, puis on a étalé une goutte de suspension sur la face supérieure en frottant avec une pipette Pasteur stérile. Les piqûres ont été réalisées avec l'appareil présenté sur la photo 3 planche I, qui permet d'effectuer 35 piqûres en une seule application. Les épingles étaient préalablement flambées dans l'alcool, puis refroidies et trempées dans la solution bactérienne.

Dans l'injection à la seringue, l'aiguille a été plantée du côté de la face inférieure près de la nervure centrale, en exerçant une pression avec le doigt de l'autre côté de la feuille au niveau de la perforation. Dans ces conditions, on arrive à faire diffuser le liquide entre deux nervures secondaires.

Toutes ces inoculations expérimentales ont été conduites sur des feuilles nouvellement matures âgées de 2 à 10 mois.

En dehors de *C. volkameriana* qui a été utilisé pour les inoculations de routine, d'autres agrumes cultivés dans les mêmes conditions, ont fait l'objet de transmissions expérimentales : notamment le combava *Citrus hystrix* D.C., la lime mexicaine *Citrus aurantifolia* TAN, le bigaradier *Citrus aurantium* L., le Poncirus trifoliata (L.) RAF, et le cédratier *Citrus medica* L.

*C. volkameriana* a été l'espèce la plus utilisée dans ces essais car elle présente une surface foliaire suffisamment grande (environ $30 \text{ cm}^2$) et produit des lésions caractéristiques, soulevant l'épiderme foliaire, avec formation d'un halo jaune. *C. volkameriana* offre en outre l'avantage de présenter une croissance rapide et régulière, c'est une plante qui se cultive facilement en serre. Elle est moins sensible que le combava ou la lime mexicaine aux pénétrations du pathogène par les stomates. Il y a donc moins de risques d'inoculations indésirables lors des manipulations de suspensions bactériennes.

Résultats des inoculations expérimentales : les délais d'apparition des symptômes ont varié de 6 à 20 jours selon les techniques expérimentales utilisées et les espèces ou variétés testées.

## Résultats obtenus avec la technique d'infiltration.

L'emploi de concentration $\text{à } 10^9$ ou $10^8$ cellules bactériennes par ml provoque, dès le sixième jour qui suit l'inoculation, l'apparition d'une plage huileuse vert foncé et faisant légèrement saillie sur la face inférieure du limbe. Sur l'autre face, le secteur de limbe infiltré montre une coloration jaune pâle. Aux concentrations de $10^7$, $10^6$ et $10^5$ cellules par ml, on constate une réaction analogue, mais elle n'apparaît que vers le huitième jour. Deux semaines après la date d'inoculation, les symptômes se stabilisent comme suit :

- $10^9$ et $10^8$ cellules/ml : nécrose généralisée de couleur brun foncé sur les deux faces du limbe, avec soulèvement de l'épiderme inférieur.

- $10^7$ et $10^6$ cellules/ml : épiderme vert foncé d'aspect huileux et bombé sur les deux faces du limbe.

- $10^5$ et $10^4$ cellules/ml : épiderme vert foncé et légèrement soulevé sur la face inférieure seulement. Du côté de la face supérieure, le secteur infiltré apparaît jaunâtre.

La technique d'infiltration ne donne pas de réactions très différentes selon les cultivars. On constate quelquefois sur la partie nécrosée du limbe, de petites pustules en relief qui semblent se former au niveau des stomates.

## Résultats obtenus avec la technique des piqûres.

Lorsque les aiguilles sont trempées dans une suspension à $10^9$ cellules par ml, on obtient une réaction sur toutes les espèces citées précédemment dès le sixième jour qui suit la blessure. Si les concentrations n'atteignent que $10^7$ germes par ml on constate quelquefois d'importantes différences selon ces mêmes espèces (tableau 1).

On trouvera sur la photo 4 de la planche I l'aspect d'une feuille ayant réagi totalement à l'incubation, comparé à celui d'une feuille blessée mais non inoculée. Le cliché a été pris 20 jours après l'inoculation.

Sur Poncirus et lime mexicaine, les chancres qui se forment au niveau des piqûres n'entraînent pas de destruction de chlorophylle sur le pourtour de la nécrose. Dans le cas du combava, l'inoculation à $10^9$ germes par ml se traduit dès le 7e jour par une auréole pâle autour de la piqûre, laquelle
## PLANCHE I - METHODES D'INOCULATION

<figure><img src="image_36.png" /></figure>

**Photo 1** - Solutions contenant $10^7 \ 10^6 \ 10^5$ germes par ml frottées sur la face supérieure de *C. volkameriana* avec du carborandum stérile. As-pect des nécroses 22 jours après inoculation.

<figure><img src="image_37.png" /></figure>

**Photo 3** - Appareil pour inoculation artificielle par piqûre.

**Photo 2** - Les mêmes nécroses que sur la photo 1 vue du côté de la face inférieure.

<figure><img src="image_38.png" /></figure>

<figure><img src="image_39.png" /></figure>

**Photo 4** - Feuilles de *C. volkameriana*. A gauche : inoculée avec X. citri, l'appa-reil a été trempé dans une solution à $10^9$ germes par ml. A droite : feuille blessée non inoculée.

<figure><img src="image_40.png" /></figure>

**Photo 5** - Inoculation par infiltration.

**Photo 6** - Jeune fruit d'oranger 'Hamlin', inoculation naturelle en verger.

<figure><img src="image_41.png" /></figure>

(Photos B. AUBERT)
<table><caption>TABLEAU 1 - Evolution du pourcentage de pustules chancreuses s'étant formées sur 280 piqûres d'inoculation effectuées pour chaque espèce (8 feuilles à raison de 35 piqûres par feuille). Les aiguilles ont été trempées dans une solution de 10⁷ germes/ml.</caption><thead><tr><th>Espèces</th><th>délais</th><th>J +8</th><th>J +12</th><th>J +15</th><th>J +20</th><th>J +25</th></tr></thead><tbody><tr><td>Poncirus trifoliata</td><td></td><td>2,8</td><td>16,7</td><td>21,0</td><td>22,0</td><td>22</td></tr><tr><td>Lime mexicaine</td><td></td><td>7,1</td><td>9,6</td><td>16,2</td><td>22,8</td><td>23</td></tr><tr><td>Bigaradier</td><td></td><td>0,7</td><td>1,4</td><td>3,9</td><td>24,6</td><td>25</td></tr><tr><td>Combava</td><td></td><td>6,5</td><td>14,6</td><td>22,8</td><td>29,6</td><td>30</td></tr><tr><td>C. volkameriana</td><td></td><td>1,4</td><td>20,0</td><td>26,4</td><td>42,5</td><td>45</td></tr></tbody></table>

coïncide avec le début de la réaction chancreuse. *C. volkameriana* donne également des pustules largement auréolées de jaune. Les espèces réagissant par une destruction de la chlorophylle autour des nécroses subissent une chute de feuilles deux à trois mois après l'inoculation. Sur Poncirus et lime mexicaine, les feuilles chancrées arrivent à se maintenir sur la plante plus de six mois après l'inoculation.

### Transmission par frottis au carborandum.

Il faut attendre 13 jours pour voir apparaître les premiers symptômes de chancre sur les feuilles de *C. volkameriana* contaminées par frottis au carborandum. Les inoculations effectuées avec des suspensions bactériennes contenant 10⁹ et 10⁸ germes par ml entraînent un brunissement généralisé du limbe dès le 15e jour qui suit l'inoculation. A 10⁷ germes/ml, on observe la formation de colonies bien individuées, mais la concentration est trop dense pour qu'elle puisse faire l'objet d'un comptage. On dénombre en général 500 à 600 colonies sur les feuilles inoculées avec une concentration de 10⁶ germes/ml et 40 à 80 colonies à 10⁵/ml (photo 2 de la planche I). Il existe également quelques réactions visibles à 10⁴.

Le protocole expérimental ayant prévu l'inoculation sur la face supérieure du limbe, c'est d'abord de ce côté qu'on a constaté un soulèvement d'épiderme formant des petits points pustuleux. Ceux-ci se développent quelques jours plus tard sur l'autre face.

La symptomatologie observée après inoculation expérimentale, prend on le voit un faciès différent selon les modes de transmission utilisées et selon les cultivars ou espèces d'agrumes. Les techniques de piqûres d'épingle et de frottis au carborandum simulent les piqûres d'épine ou les effets abrasifs dus au vent.

Lorsque l'inoculation avait lieu par blessure, on n'a pas remarqué de grosses différences de réaction selon l'âge des feuilles. On verra plus loin que ce n'est pas le cas si la bactérie pénètre par les stomates.

### SYMPTOMATOLOGIE OBSERVEE EN VERGER

Dans ce chapitre, on décritra les principaux types de lé-

sions dont on a pu isoler *X.c. pv. citri* en employant la technique de l'étalement sur milieu LPGA. Les différents faciès observés «in situ» correspondent à plusieurs modes d'inoculation. Ces derniers varient considérablement selon les espèces botaniques. On peut schématiquement classer les agrumes cultivés à la Réunion en trois catégories du point de vue de leur sensibilité au chancre citrique : ceux pour lesquels la contamination a lieu principalement sur blessure, ceux pouvant être inoculés massivement par pénétration de la bactérie au niveau des stomates, et enfin ceux pour lesquels le mode d'inoculation reste encore indéterminé.

### Espèces et variétés contaminées surtout par blessure.

Des cas typiques de ce mode dominant d'inoculation peuvent être rencontrés sur le Poncirus, les citranges et la lime mexicaine. Il s'agit d'espèces très épineuses subissant d'innombrables microblessures de rameaux de feuilles ou de fruits sous l'effet du vent. L'épiderme foliaire de ce groupe d'agrumes est caractérisé par une forte densité des stomates (jusqu'à 500 par mm²), ces derniers étant en général de petite taille. Plutôt que d'être disséminées au hasard sur la surface du limbe (cas d'une contamination par les stomates), les pustules chancreuses sont le plus souvent alignées dans le sens des piqûres et des frottements (planche II photo 1). L'observation des feuilles à la loupe binoculaire montre que le développement chancreux a lieu autour des blessures d'épines avant que la cicatrisation ne puisse intervenir. On trouvera un exemple de ce phénomène sur la planche II photo 5).

De véritables encroûtements chancreux s'installent sur les brindilles vertes ce qui favorise le maintien d'un taux d'inoculum très élevé d'une saison à l'autre.

Ce type d'infection est tout spécialement à redouter sur les porte-greffes cultivés en pépinière.

### Cas d'attaques sur épiderme apparemment non blessé mécaniquement.

Il faut distinguer dans cette catégorie les symptômes observés sur fruits et ceux observés sur feuilles.
● Les symptômes sur fruits :

A la Réunion d'importants encroûtements sont constatés
sur la peau des oranges, des citrons et des pomelos.

Dans le cas de l'orange, les pustules chancreuses sont
quelquefois alignées sur un arc de méridien du moins en
début d'attaque. Ces formes sont le résultat d'une inocula-
tion par des gouttes de pluie ou de rosée infectées, la bacté-
rie ayant la possibilité de pénétrer par les lenticelles des
jeunes fruits. Cette sensibilité du fruit peut d'ailleurs se
prolonger jusqu'au moment de la récolte. En cas de forte
attaque, l'ensemble de la surface du fruit se couvre de ver-
rues chancreuses bien avant le stade normal de maturité
(planche I photo 6). La peau attaquée se colore prématuré-
ment en jaune par suite d'une perte de chlorophylle.

Sur les citrons, on a isolé X.c. pv. citri à partir de fruits
présentant de larges secteurs encroûtés. La totalité de la
peau est souvent concernée sans qu'il y ait apparition de
formes pustuleuses bien individualisées. Il semble, dans ce
cas extrême, que la bactérie puisse être disséminée par les
blessures d'acariens. Cette hypothèse est basée sur le fait
que des traitements acaricides combinés aux traitements
cupriques permettent d'enrayer ce type de dégât. Si le citron
subit simplement une attaque d'acariens, la peau se «plom-
be» sans développer d'encroûtement brun soulevant l'épi-
derme. Par ailleurs en absence d'acarien X.c. pv. citri se
manifeste sur citron par l'apparition de pustules chancreuses
brunes, de formes arrondies, en relief sur la peau du fruit.

Les chancres observés sur pomelo se développent dans les
mêmes conditions que ceux décrits pour l'orange avec toute-
fois formation de pustules de plus grande taille.

Dans la région du Tremblay, des encroûtements de feuil-
les et de fruits ont été signalés sur vangassaye, une mandari-
ne locale. Les recherches effectuées sur cette espèce n'ont
pas abouti à l'isolement de X.c. pv. citri. L'hypothèse d'une
attaque de Scab dans ce cas est probable puisqu'il y a
déformation des feuilles, avec soulèvement de l'épiderme
d'un seul côté, au niveau des pustules.

● Les symptômes sur feuilles.

Les feuilles du pomelo, du combava, de la lime de Tahiti
et de diverses variétés d'agrumes comme Hamlin ou certaines
lignées de Navel, présentent une sensibilité «directe» aux
attaques de X.c. pv. citri. La contamination a lieu en
l'absence de blessure d'épiderme par simple pénétration de
bactérie pathogène à travers les stomates.C'est généralement
dans la période comprise entre le dixième et le trentième
jour qui suit son apparition sur le rameau, que le limbe se
trouve le plus exposé à ce type d'attaque. Avec l'âge, la
feuille devient résistante à l'infection, mais les chancres
formés pendant la phase juvénile continuent à s'élargir jus-
qu'à atteindre quelquefois la taille de 15 mm de diamètre
(planche I photo 4).

On trouvera sur la planche II plusieurs exemples de chan-
cres foliaires attribués à une contamination au niveau de la
chambre stomatique. Comme pour les fruits, les pustules se

<figure><img src="image_42.png" /></figure>

Attaque sur vangassaye provoquant une déformation des
feuilles et un encroûtement des fruits, attribués à *Elsinoe
fawcetti*.

répartissent à la surface de l'épiderme au hasard des écoule-
ments de gouttes d'eau infectées. Il y a quelquefois concen-
tration des points chancreux d'un seul côté du limbe (plan-
che II photo 3). Dans d'autres cas, la densité des pustules est
plus grande vers la marge ou encore le long de la nervure cen-
trale. Tout dépend de l'orientation que présente la face
inférieure du limbe par rapport à la source d'inoculum. Ce
mode d'infection n'intéresse pas la face supérieure puisque
celle-ci est exempte de stomates. Contrairement à ce qui sè
passe dans le cas d'une inoculation par blessure, les chancres
soulèvent d'abord l'épiderme de la face inférieure avant
d'apparaître environ 7 à 10 jours plus tard du côté opposé.

Les relations de cause à effet entre la structure de l'appa-
reil stomatique et la sensibilité aux attaques de X.c. pv. citri
n'ont pu être jusqu'ici complètement élucidées. Certains
auteurs ont invoqué à ce sujet la taille de l'ostiole. Les deux
clichés ci-après font ressortir les différences observées
entre la lime mexicaine et le pomélo par exemple. L'épider-
me de la face inférieure du limbe a été arraché après trempa-
ge du limbe dans une solution d'hypochlorite de sodium
à 1,2º chloré pendant 5 heures, puis photographié sous
microscope.

Il n'est pas certain que la sensibilité à X.c. pv. citri dé-
pende uniquement de l'aire des stomates. La couche de cuti-
ne qui tapisse plus ou moins profondément la chambre
stomatique, peut assurer un rôle de protection du canal
ostiolaire (figure 2). Cette particularité mise en évidence par
TURREL (1947) puis reconfirmée par GOTO (1962) et plus
tard AUBERT et DE PARCEVAUX (1967), semble corres-
pondre à un caractère génétique. Toutefois pour un même
cultivar, elle sera plus accentuée avec le vieillissement de la
feuille. Sur les limbes de plus d'un an d'âge, il est fréquent
par ailleurs de trouver des bouchons de résine qui encom-
## PLANCHE II - INOCULATION EN CONDITIONS NATURELLES.

<figure><img src="image_43.png" /></figure>

**Photo 1** - Symptômes de chancre sur feuilles et rameaux de C. Carrizo. Les épines sont infectées et transmettent la maladie à l'occasion des blessures. Noter sur les feuilles les pustules en relief : vue prise sur la face inférieure.

<figure><img src="image_44.png" /></figure>

J + 20

Station IRFA Bassin-Martin (octobre 1981)

<figure><img src="image_45.png" /></figure>

**Photo 2** - Pustules occasionnées par X. citri sur la face inférieure de lime de Tahiti (verger LES-PORT, Etang-Salé, octobre 1981).

**Photo 3** - Attaque de X. citri en conditions naturelles sur la face inférieure de feuilles de combava C. hystrix DC. Pénétration au niveau des stomates.

<figure><img src="image_46.png" /></figure>

**Photo 4** - Pustule chancreuse très élargie sur feuille de pomelo 'Marsh'.

<figure><img src="image_47.png" /></figure>

(Photos B. AUBERT)
### ASPECT DE DEUX EPIDERMES FOLIAIRES (face inférieure)

Echelle : 10µ

brent le pore du stomate (TURREL, 1932). Ces formations sont visibles lorsque les sections de limbe sont observées à l'état frais dans un montage à l'eau ou à la glycérine.

Ces particularités anatomiques pourraient expliquer les différences de sensibilité aux attaques de chancre citrique, en fonction de l'âge des feuilles. Toutefois, il y a toutes les chances pour que les germes bactériens arrivent à pénétrer également par les stomates ou les lenticelles des espèces tolérantes. Mais dans ce cas ils peuvent avoir à franchir d'autres obstacles avant de proliférer sous l'épiderme. On ignore encore la nature des mécanismes de défense de certai- nes plantes hôtes peu sensibles. La tolérance s'étend le plus souvent aux attaques par blessures, mais elle est quelquefois spécifique d'un type d'organe.

A l'île de la Réunion par exemple plusieurs mandariniers comme Dancy, Kara, Beauty, Fairchild, ou hybrides de mandariniers comme Ortanique présentent une relative tolérance aussi bien sur feuilles que sur fruits. Les feuilles du clémentinier sont très sensibles à X.c. pv. citri mais ses fruits présentent rarement des symptômes même lorsqu'ils

sont soumis à une forte pression d'inoculum. Pour les orangers et les pomelos, on note par contre une assez grande sensibilité des feuilles et une très grande sensibilité des fruits. Enfin, le combava montre quelquefois de très fortes attaques sur feuilles alors que ses fruits restent indemnes de pustules il n'est pas impossible ici que la forte teneur en huile essen- tielle puisse jouer un rôle d'antiseptique.

### Modes d'inoculation atypiques.

Sur les photos 1B, 3 et 4 de la planche III on peut apercevoir des nécroses ne soulevant que très légèrement l'épiderme et auréolées d'un cerne plus ou moins foncé. Dans le cas de la lime de Tahiti le pourtour de la pustule chancreuse est noir et d'aspect graisseux. On a isolé de ces nécroses à relief peu accusé le champignon du greasy-spot : *Mycosphaerella citri* ainsi que des germes de X.c. pv. citri. Sur les feuilles de clémentinier les plages arrondies grisâtres auréolées d'un cerne brun clair (photo 3), n'ont fourni pour le moment que des germes de X.c. pv. citri. Enfin sur oran- ger Valencia late, on a isolé d'un faciès analogue (photo 4)

<figure><img src="image_48.png" /><figcaption>Pomelo</figcaption></figure>

<figure><img src="image_49.png" /></figure>

<figure><img src="image_50.png" /><figcaption>Fig. 3 • ASPECTS DE STOMATES DE CITRUS VUS EN COUPE TRANSVERSALE.</figcaption></figure>
un champignon du genre *Colletotrichum* ainsi que *X.c.* pv. *citri*. on ignore encore la nature des interférences qui peuvent s'établir entre les deux types de pathogènes au sein de la plante hôte.

## RECHERCHE DE GERMES BACTERIENS A LA SURFACE DES FEUILLES PAR LA TECHNIQUE DE L'IMMUNOFLUORESCENCE

L'obtention d'un immunosérum avec la souche réunionnaise JA 143, a permis de rechercher la présence de germes de X.c. pv. *citri* à la surface de feuilles de Citrus ou de Rutacées sauvages. Dans la plupart des cas, les limbes ne présentaient aucun type de nécrose visible à l'oeil nu.

### Matériel et méthode.

Sur des lames spécialement équipées pour l'immunofluorescence, on dépose une dizaine de gouttes d'une suspension contenant l'antigène bactérien. La suspension est obtenue en faisant macérer sous agitation pendant une heure une vingtaine de feuilles dans un bocal rempli d'eau stérile.

On laisse sécher l'antigène qui est ensuite fixé avec une goutte d'alcool à 90°C. Puis on dépose successivement en «sandwich» :

- une goutte de sérum de lapin anti-JA 143 dilué au 1/4.000, qui est mise à sécher pendant 20 minutes, et lavée avec du tampon phosphate ;

- une goutte de sérum de chèvre fluorescent antigammaglobuline de lapin dilué au 1/300e, goutte qui est également mise à sécher pendant 20 minutes et lavée au tampon phosphate ;

- de la glycerine tamponnée.

Le tout est recouvert d'une lamelle puis observé sous un microscope à épifluorescence avec un objectif à immersion. On compte le nombre de germes fluorescents apparaissant dans une centaine de champs oculaires.

Les échantillons de feuilles de Citrus ont été prélevés en vergers d'agrumes (station IRFA de Bassin-Plat, verger Fontaine de Petite-Ile) dans des parcelles ayant subi ou non des attaques de chancre citrique. On a également échantillonné des feuilles de vangassayes et de bigaradiers sur des arbres trouvés dans le sous-bois de la forêt de Saint-Philippe.

La recherche de germes fluorescents a été également entreprise sur plusieurs Rutacées sauvages. A Basse-Vallée, des feuilles juvéniles ou adultes de *Zantoxylum heterophyllum* (LAM.) SMITH, et de *Murraya paniculata* L. JACK ont été échantillonnées. Dans la région de Cilaos, on a également effectué des prélèvements sur *Vepris lanceolata* (LAM.) G. DON et *Toddalia asiatica* (L.) LAM.

Au total treize lots de feuilles ont été observés en période d'été austral.

**Résultats :** les dénombrements de germes fluorescents

sont donnés au tableau 2, accompagnés d'un descriptif sommaire des arbres échantillonnés. L'échantillon n° 7 prélevé sur une jeune parcelle de combavas fortement attaqués, a fourni le nombre de germes le plus élevé. En tenant compte des dilutions, le chiffre de 215 équivaut approximativement à 4.10⁶ germes par feuille. Les échantillons 5 et 6 prélevés sur une parcelle de combavas âgée de 8 ans et située à quelques dizaines de mètres seulement de la précédente, mais protégée par une haie de brise-vent n'ont, comparativement, révélé que de faibles pullulations. De même, sur des limitiers, orangers ou clémentiniers très atteints quelques mois auparavant, mais ayant subi une taille sévère de rabattage, on a enregistré de faibles quantités de germes fluorescents à la surface des feuilles nouvellement émises.

On a constaté par ailleurs que tous les genres observés, autres que Citrus, hébergeaient des germes fluorescents. Mais seul *Poncirus trifoliata* montrait des pustules chancreuses sur feuilles et sur rameaux. Dans les conditions de la Réunion, aucun symptôme n'a pu être détecté sur *Fortunella*, *Zantoxylum*, *Murraya*, *Vepris* ou *Toddalia*.

Le dénombrement des germes fluorescents sur des feuilles sans symptômes apparentes, donne une indication de la population bactérienne épiphylle. Il est à noter que la fluorescence peut être conservée par des germes qui ne sont plus en vie. Ainsi les comptages effectués sur des agrumes cultivés ayant reçu un traitement au cuivre ne peuvent aucunement donner une appréciation des germes «épiphylles vivants».

L'absence de symptômes sur les Rutacées autres que les Citrus et le Poncirus est à remarquer. PELLETIER par exemple, dès 1920, a fait état de pustules chancreuses sur *Fortunella* et JEHLE 1918 sur *Zantoxylum*. Aucune de ces espèces n'a manifesté de symptômes dans les conditions prévalant à l'île de la Réunion.

## CONCLUSION

Le développement pris par l'agriculture réunionnaise au cours des dix dernières années a été principalement redév applicable des efforts engagés contre deux maladies de dégénérescence : le «Greening» et la «Tristeza». Le «chancre citrique» est subitement passé au premier rang des préoccupations d'ordre phytosanitaire dès qu'on a pu mettre à nouveau en culture des arbres vigoureux et productifs.

L'apparence bénigne de cette bactériose, telle qu'elle a été décrite par divers auteurs avant les années 1970 était impitable en grande partie au rachitisme dont souffraient la plupart des agrumes de l'île. En l'absence de fortes poussées végétatives ou d'une production fruitière abondante, X.c. pv. *citri* avait bien moins de chances de pouvoir proliférer. Le nombre de vergers demeurait alors limité, et les agrumes étaient assez rarement établis en culture pure. Ils figuraient plutôt en association avec d'autres espèces fruitières qui leur assuraient une protection contre les vents.

L'action engagée aujourd'hui en matière de production
<table><caption>TABLEAU 2 - Germes fluorescents dénombrés en observant une centaine de champs oculaires.</caption><thead><tr><th>Genre</th><th>Nº échantillon</th><th>Espèces</th><th>Lieu</th><th>Caractéristiques</th><th>Nb. de germes fluorescents</th></tr></thead><tbody><tr><td rowspan="7">Citrus</td><td>1</td><td>Citrus sinensis (oranger)</td><td>Bassin-Martin</td><td>orangers Pineapple de 7 ans fortement attaqués six mois auparavant. Arbres échantillonnés sur jeunes pousses émises après taille de rabattage.</td><td>8</td></tr><tr><td>2</td><td>Citrus sinensis (oranger)</td><td>Petite-Ile</td><td>arbre de 5 ans présentant des symptômes</td><td>27</td></tr><tr><td>3</td><td>Citrus clementina HORT ex TAN (clémentinier)</td><td>Bassin-Martin</td><td>clémentiniers de 4 ans fortement attaqués six mois auparavant. Arbres échantillonnés sur jeunes pousses émises après taille de rabattage</td><td>12</td></tr><tr><td>4</td><td>Citrus latifolia HORT ex TAN lime de Tahiti</td><td>Bassin-Martin</td><td>limettiers de 4 ans fortement attaqués six mois auparavant. Arbres échantillonnés sur jeunes pousses émises après une taille de rabattage</td><td>21</td></tr><tr><td>5</td><td>Citrus hystrix DC (combava)</td><td>Bassin-Martin</td><td>arbres de 8 ans n'ayant jamais montré d'attaques de chancre</td><td>22</td></tr><tr><td>6</td><td>Citrus hystrix DC (combava)</td><td>Bassin-Martin</td><td>arbre de 8 ans fortement attaqué six mois auparavant ; échantillonné sur jeunes pousses émises après une taille de rabattage</td><td>27</td></tr><tr><td>7</td><td>Citrus hystrix DC (combava)</td><td>Bassin-Martin</td><td>jeunes arbres de 18 mois, présentant des symptômes de chancres citriques sur feuilles. On a échantillonné uniquement des jeunes feuilles sans symptômes apparentes</td><td>215</td></tr><tr><td>Fortunella</td><td>8</td><td>Fortunella margarita LAUR. (SWING) Kumquat ovale Nagami</td><td>Bassin-Martin</td><td>arbres de 5 ans indemnes de symptômes foliaires</td><td>10</td></tr><tr><td>Poncirus</td><td>9</td><td>Poncirus trifoliata RAF</td><td>Bassin-Martin</td><td>arbre semencier de 11 ans</td><td>41</td></tr><tr><td>Zantoxylum</td><td>10</td><td>Zantoxylum heterophyllum («Bois de poivrier»)</td><td>forêt de Basse-Vallée</td><td>jeunes feuilles feuilles adultes</td><td>14 3</td></tr><tr><td>Murraya</td><td>11</td><td>Murraya paniculata «Bois de buis»</td><td>Saint-Philippe</td><td>feuilles adultes</td><td>33</td></tr><tr><td>Vepris</td><td>12</td><td>Vepris lanceolata (LAM) («Bois de patte de poule»)</td><td>Pavillon route de Cilaos</td><td>feuilles adultes</td><td>29</td></tr><tr><td>Toddalia</td><td>13</td><td>Toddalia asiatica (L.) LAM («Liane patte de poule»)</td><td>Parc à Dennemont</td><td>feuilles adultes</td><td>10</td></tr></tbody></table>
PLANCHE IV - Rutacées sauvages trouvées porteuses de germes bactériens fluorescents.

<figure><img src="image_51.png" /><figcaption>*Zanthoxylum heterophyllum*
(LAM.) SMITH</figcaption></figure>

<figure><img src="image_52.png" /><figcaption>*Murraya paniculata* (L.). JACK.</figcaption></figure>

<figure><img src="image_53.png" /><figcaption>*Vepris lanceolata* (LAM.) G. DON.</figcaption></figure>

<figure><img src="image_54.png" /><figcaption>*Toddalia asiatica* (L.) LAM.</figcaption></figure>
<figure><img src="image_55.png" /></figure>

Installer des haies de brise-vent pour protéger les vergers d'agrumes.

<figure><img src="image_56.png" /></figure>

Traiter avec des produits à base de cuivre dès le stade chute des pétales.

Renouveler les traitements surtout en janvier et février au moment des cyclones.

<figure><img src="image_57.png" /></figure>

Refuser à la plantation tout jeune arbre présentant la moindre attaque de chancre.

Sur les arbres adultes tailler les parties malades, brûler les bois de taille.

Surgreffer les variétés trop sensibles avec des variétés tolérantes.

Fig. 4 • MESURES PROPHYLLACTIQUES A APPLIQUER EN VERGERS.

agrumicole oblige à suivre attentivement l'épidémiologie du chancre citrique dans les vergers nouvellement créés. En effet, le climat de l'île de la Réunion expose les agrumes à des attaques subites et massives de X.c. pv. citri, principalement lors des passages de cyclones. Il ne s'agit pas là d'une particularité propre à l'île. Ce phénomène a été signalé aussi dans plusieurs pays d'Asie, plus spécialement dans le sud de l'archipel nippon (KUHARA, 1978).

Au cours des recherches préliminaires engagées sur X.c. pv. citri à la Réunion, on a pu dresser un premier bilan de l'implantation de cette bactérie (ou de germes très apparen-tés), dans l'île. Les organismes fluorescents épiphylles détectés sur diverses Rutacées sauvages en forêt de basse et moyenne altitude, ont révélé une ubiquité encore insoup-çonnée de ces germes. Au niveau des vergers proprement dits, des symptômes de chancre citrique ont été trouvés jusque vers 1.000 m d'altitude, aussi bien en zone «au vent» qu'en zone «sous le vent», ainsi que dans des vallées encais-sées difficiles d'accès. Les souches isolées figurent parmi les plus virulentes connues aujourd'hui dans le monde.

En dépit de la modeste superficie de l'île, laquelle ne couvre que 2.500 km², il existe tout un ensemble de raisons économiques, sociales, voire techniques, s'opposant à un programme d'éradication généralisée du chancre citri-que. La gamme des plantes hôtes déborde largement le cadre des espèces cultivées, puisqu'elle englobe des Rutacées endémiques, et diverses espèces de Citrus devenues prati-quement subspontanées depuis le début de leur introduction aux Mascareignes vers la fin du XVIe siècle par les naviga-teurs hollandais. S'il est aisé de commencer une campagne d'éradication, on ne voit pas très bien dans un tel contexte jusqu'où la mener.

Il apparaît plus raisonnable d'envisager un assainissement par étapes et par secteurs du verger réunionnais en respec-tant plusieurs règles de prophylaxie qui, à l'expérience, se sont montrées efficaces.

- Le vent est le principal agent de dissémination de la bactérie du chancre citrique dès qu'il dépasse des vitesses de 8 mètres/seconde. Il importe de protéger les vergers sur-tout lorsqu'il s'agit de variétés sensibles, par un quadrillage soigné de haies de brise-vent, chaque 20 ou 30 mètres. Cette protection doit être encore plus rigoureuse lorsqu'il s'agit des pépinières.

- Il existe pour les agrumes, d'importantes différences de sensibilité selon les espèces ou les variétés. On devra s'abste-nir de planter des variétés sensibles sur des versants trop exposés aux vents.

- En cas d'infection subite, la taille de rabattage et si nécessaire le surgreffage constituent d'excellents moyens préventifs.

- Les applications de sels de cuivre enfin, principalement en période printanière, contribuent à protéger les jeunes feuilles ou fruits qui viennent juste d'atteindre le stade de la sensibilité.
On parvient à maintenir les vergers en bon état sanitaire
si toutes ces règles sont correctement appliquées. Les cas de
fortes pullulations de X.c. pv. citri sont presque toujours le
fait d'erreurs ou de négligences au moment de la plantation
ou juste après des accidents météorologiques comme les
tornades tropicales ou les cyclones.

Il n'en reste pas moins que le chancre citrique constitue,
pour l'économie réunionnaise, une menace à ne pas sous-es-
timer. Les recherches doivent se poursuivre afin de dresser
un inventaire aussi complet que possible des différentes

souches de X.c. pv. citri présentes à la Réunion, d'étudier
leur pathogénicité ainsi que leur mode de dissémination.

Du côté de la plante hôte, il convient également d’élucider les mécanismes de la résistance variétale, afin de pouvoir mieux orienter le travail des sélectionneurs.

L'expérience de la production agrumicole japonaise
montre qu'un choix variétal judicieux peut maintenir un
bon niveau de compétitivité, même en pays contaminé, et
en dépit d'accidents météorologiques graves comme les
tornades ou cyclones tropicaux.

BIBLIOGRAPHIE

AUBERT (B.) et PARCEVAUX (S.). 1969.

Résistance à la diffusion gazeuse au niveau de l'épiderme foliaire de quelques plantes fruitières tropicales et subtropicales.
Fruits, vol. 24, n° 4, p. 177-190.

BITANCOURT (A.A.). 1957.

O cancro citrico.
O Biologico, 23, p. 101-111.

BITANCOURT (A.A.). 1968.

Panorama mundial do cancro citrico.
In: *Reuniao do Comite Interamericao de Protecao agricola, 7-11 de Outubro, Sao Paulo, Instituto Biologico,*
Miméo. 4 p.

BOSSER (J.), CADET (Th.), JULIEN (H.R.) et MARAIS (W.). 1979.

Flore des Mascareignes, la Réunion, Maurice, Rodrigues.
64. Balsaminacées à 68. Burseracées.
préparée sous la Direction de R. ANTOINE, J.P.M. BRENAN et G. MANGENOT.

BOVE (J.M.) et CASSIN (P.J.) 1968.

Problèmes de l'agriculture réunionnaise.
Compte-rendu de mission, Doc. IRFA, 12 p.

BRODRICK (H.T.) et LOEST (F.C.). 1975.

Citrus canker Citrus series H 21,
Farming in South Africa,

BRUN (J.). 1970.

Rapport de mission effectué à Madagascar, à la Réunion et à l'île
Maurice.
Doc. IRFA, R.A. 71.

BRUN (J.). 1966.

Rapport de mission effectué aux Comores du 9 au 17 novembre 1966.
Doc. IRFA.

BRUN (J.). 1971.

Le chancre bactérien des Citrus.
Fruits, vol. 26, n° 7-8, p. 533-540.

CALAVAN (E.C.). 1956.

Citrus canker, a bacterial disease caused by Xanthomonas citri.
Calif. State Dept. Agr., Bull. 45 (4), 259-262.

CIVEROLO (E.L.). et FAN (F.). 1982.

Xanthomonas campestris pv. citri detection and identification by enzyme-linked immunosorbant assay.
Plant Disease, n° 3, p. 231-236.

CIVEROLO (E.L.). 1982.

Comparative evaluation of provisional strains of Xanthomonas campestris pv. citri from Reunion Island.
Rapport de Recherche, 20 p.

DU CHARME (E.P.). 1951.

Cancrosis B of lemons.
Citrus Magazine, 13 (a) 18-20.

DYE (D.W.), BRADBURY (J.F.), GOTO (M.), HAYWARD (A.C.),
LELIOTT (R.A.) et SCHROTH (M.N.). 1980.

International standards for naming pathovars of phytopathogenic bacteria and a list of pathovar names and pathotype strains.
*Review of Plant Pathology*, vol. 55, n° 4, p. 153-167.

GOTO (M.). 1962.

Studies on Citrus canker. I.
Bulletin of the Faculty of Agriculture. Shizuoka University,
Iwata Japon, 72 p.

GOTO (M.), TAKAHASHI (T.) et MESSINA (H.). 1980.

A comparative study of the strains of Xanthomonas campestris pv citri isolated from Citrus canker in Japan and Cancrosis B in Argentina.
Ann. Phytopath. Soc. Japan 46, 329-338.

HASSE (C.M.). 1915.

Pseudomonas citri, the cause of citrus canker.
I. Agro. Res., 4, 97-100.

JEHLE (R.A.). 1917.

Susceptibility of non-citrus plants to Bacterium citri.
Phytopathology, vol. 7, n° 5, p. 339-344.

JEHLE (R.A.). 1918.

Susceptibility of Zantoxylum CLAVA-HERCULES to Bacterium citri.
Phytopathology, vol. 8, n° 1, p. 34-35.

JULIEN 1972.

Notes sur l'agriculture mauricienne présentées au VIe Congrès
de l'IOCV, 20 p.

KUHARA (S.). 1978.

Present epidemic status and control of the Citrus canker disease (Xanthomonas citri (HASSE) DOWSON) in Japan.
Review of Plant Protection Research, vol. II, 1978, p. 132-142.

LAVILLE (J.). 1982.

Caractérisation des souches de Xanthomonas campestris pv. citri
(HASSE, 1915) DYE, 1978 isolées de l'île de la Réunion.
Rapport de maîtrise, 16 p. INRA et Université d'Angers.

LOPEZ (M.M.). et NAVARRO (L.). 1981.

A method for diagnosis of Citrus canker using plants growing
*in vitro*.
Proc. Int. Soc. Citriculture (sous presse).

GARNSEY (S.M.), DU CHARME (E.P.), LIGHTFIELD (J.W.) et
SEYMOOR (G.P.). 1979.

Citrus canker, preventive action to protect the US Citrus Industry.
The Citrus Industry, Jan. 1979, n° 5, p. 6-13.

MOREIRA (S.). 1967.

Iles Maurice et de la Réunion. Enquête sur les maladies des agrumes.
Bull. Phyto. san. FAO, 15, 59-60.
NAMEKATA (J.). 1971.

Estudios comparativos entre *Xanthomonas citri* (HASSE) DOW. agente causal do «cancro citrico» *Xanthomonas citri* HASSE

DOW N.F. *Sp. aurantifolia*, agente causal da «cancrose do limeiro Galego».

Tese apresentada a Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiros, p. 65.

NAMEKATA (J.) et OLIVEIRA (A.R.). 1972.

Comparative serological studies between *Xanthomonas citri* and a bacterium causing canker on Mexican lime.

Proc. 3rd Intern. Conf. Plant Path. Wageningen, 14-21 april 1971, p. 151-152.

PELTIER (G.L.) et FREDERICH (W.J.). 1920.

Relative susceptibility to citrus-canker of different species and hybrids of the genus Citrus including the wild relatives.

*Journal of Agricultural Research*, vol. XIX, nº 8, p. 339-387.

PRALORAN (J.C.). 1968.

L'amélioration des cultures fruitières dans l'archipel des Comores.
*Rapport interne IRFA*, 58 p.

ROSSETTI (V.). 1977.

Citrus canker in Latin America ; a review.

Proc. Int. Sc. Citriculture, p. 918-924.

ROSSETTI (V.). 1981.

Divulgação técnica : Identificação do Cancro citrico biológico.

Sao Paulo, 47 (5) 145-153.

STALL (R.E.), MILLER (J.W.), MARCO (G.M.) et DE ECHENIQUE (B.I.C.). 1980.

Population dynamics of *Xanthomonas citri* causing caniosis of citrus in Argentina.

Proc. Fla. State Hort. Soc., 93, 10-14.

TANG CHENG YAO. 1958.

The epidermal structure of citrus in relation to its susceptibility to canker infection.

*Acta phytopath. Sinica*, vol. 4, pat. 1, p. 69-80.

TURREL (F.M.).

Citrus leaf stomata : structure, composition and pore size in relation to penetration of liquids.

Bot. Gaz., vol. 108, nº 4.

<figure><img src="image_58.png" /></figure>