# Estimation des paramètres diagnostiques de tests évaluant un état inflammatoire chez les bovins adultes au chevet du malade et au cabinet vétérinaire

Hélène Carré, Thibaut Lurier

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Hélène Carré, Thibaut Lurier. Estimation des paramètres diagnostiques de tests évaluant un état inflammatoire chez les bovins adultes au chevet du malade et au cabinet vétérinaire. Journées nationales des GTV, GTV, May 2024, Tours, France. hal-04981961

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# Estimation des paramètres diagnostiques de tests evaluant un état inflammatoire chez les bovins adultes au chevet du malade et au cabinet veterinaire

Hélène Carré¹, Thibaut Lurier ²,³

Affiliation à renseigner :

1- SHAR (Service d'hospitalisation des animaux de rentes), département élevage et santé publique, VetAgro Sup

2- Université de Lyon, INRAE, VetAgro Sup, UMR EPIA, F-69280 Marcy l'Etoile, France

## Résumé

Un taureau Aubrac de 3 ans a été présenté au service d'hospitalisation des animaux de rente de VetAgro Sup pour une augmentation de la taille des testicules (52cm de circonférence), sans atteinte de l'état général, remarqué par l'éleveur 15 jours avant. La présence d'une orchite bilatérale a été confirmée par échographie des testicules et quelques-unes des maladies infectieuses d'intérêt, potentiellement responsable d'orchite, ont été élimées par sérologies (brucellose, chlamydiose, besnoitiose et Fièvre Q). L'examen cytobactériologique des urines (prélevées par miction naturelle) réalisé est en faveur d'une absence d'infections urinaires (peu ou pas de cellule inflammatoire au culot urinaire et pousse peu abondantes d'entérocoques et de staphylocoques à coagulase négative en bactériologie probablement liées à une contamination lors de la miction). Un traitement antibiotique (florfénicol 20mg/kg, intramusculaires, toutes les 48h) mis en place pendant 3 semaines et a été associé à une diminution de la circonférence du scrotum (45cm 10jours après le début du traitement). Malgré l'amélioration clinique, l'absence de réussite à la saillie constatée sur une génisse du troupeau 4 mois après le début des symptômes laisse supposer une infertilité ou a minima une hypofertilité. Le contrôle de la qualité du sperme n'a pas pu être réalisé en raison du refus de la saillie du taureau lors de la tentative de récolte réalisée à la ferme.

## Mots clés

Orchite, taureau, échographie, fertilité
L'inflammation est un mécanisme de défense de l'organisme face à des agents agresseurs exogènes ou endogènes. La présence d'une inflammation est un élément important de la démarche diagnostic et thérapeutique du vétérinaire afin de l'orienter soit vers des af
<figure><img src="image_2.png" /></figure>
A. MECANISME GENERAUX DE L'INFLAMMATION

L'inflammation est un processus vital qui constitue la première ligne de défense de l'organisme contre les agressions extérieures, telles que les infections, les traumatismes ou les agents chimiques. Son déclenchement est une réponse immédiate à la perturbation de l'homéostasie, c'est-à-dire à la capacité de l'organisme à maintenir un équilibre stable de son milieu interne malgré les perturbations externes.

Lorsque des protéines particulières, appelées PAMPs (Pathogen Associated Molecular Patterns) ou DAMPs (Damage Associated Molecular Patterns), sont libérées en cas de lésion tissulaire ou d'infection, elles sont reconnues par des cellules sentinelles telles que les macrophages et les monocytes. Cette reconnaissance déclenche la synthèse de médiateurs inflammatoires tels que les cytokines, les chimiokines et les eicosanoïdes, qui orchestrent une cascade inflammatoire.

Le processus inflammatoire se déroule en trois phases[15] :

1. **Phase vasculaire** : Elle est caractérisée par des changements dans la microcirculation locale, notamment une vasodilatation, une augmentation de la perméabilité vasculaire et un afflux de cellules sanguines vers la zone lésée.

2. **Phase cellulaire** : Sous l'action des cytokines pro-inflammatoires, principalement l'interleukine 1 (IL-1), l'interleukine 6 (IL-6) et le facteur de nécrose tumorale α (TNFα), les neutrophiles sont mobilisés vers la zone lésée pour éliminer les agents pathogènes et les tissus endommagés. Les neutrophiles libèrent des substances bactéricides et des enzymes lysosomales pour détruire les agents agresseurs.

3. **Phase de réparation** : Après l'élimination des agents agresseurs, cette phase permet la reconstruction des tissus sous l'action des macrophages et des fibroblastes. Les cytokines anti-inflammatoires modulent l'activité des cytokines pro-inflammatoires.

En cas d'échec de l'inflammation aigüe à éliminer l'agent agresseur, le processus inflammatoire perdure et acquière de nouvelles caractéristiques. Les neutrophiles infiltrés dans les tissus sont peu-à-peu remplacés par les macrophages et, en cas d'infection, l'immunité adaptative se met en place avec arrivée des lymphocytes T dans les tissus. Enfin, en cas de persistance de l'agent agresseur malgré l'action combinée des cellules immunitaires, ou lors d'auto-entretien de l'inflammation par l'organisme, un statut inflammatoire chronique s'installe [8].

Le passage à la chronicité se caractérise par de nombreux remodelages tissulaires sous l'influence des macrophages et d'autres cellules de réparations tissulaires tels les fibroblastes. Ces remodelages peuvent se présenter sous formes fibrineuse, purulente (abcès) ou encore granulomateuse pour lesquelles l'agent est isolé mais non détruit, autorisant le maintien d'un foyer inflammatoire chronique.

Concernant les analyses hématologiques, l'inflammation chronique peut engendrer une anémie inflammatoire modérée normocytaire et normochrome (ou microcytaire et hypochrome dans 50% des cas), inconstante, chez plusieurs espèces animales dont les bovins, et chez l'homme [13]. Cette anémie est due à la rétention de fer dans les macrophages, auquel s'ajoute son utilisation par les bactéries. Les protéines de la phase aigüe de l'inflammation (PPA) peuvent être également augmentées, mais les valeurs sont plus basses que lors de cas aigus. Certaines d'entre elles, comme le SAA et l'Hp seraient des marqueurs intéressants pour
évaluer le passage à la chronicité et distinguer ainsi les deux types d'inflammation, car comme
nous le verrons plus loin, elles diminuent rapidement lors de passage à la chronicité [6].

<figure><img src="image_3.png" /><figcaption>Figure 1 : Mécanisme de l'inflammation et phase de la réaction inflammatoire aigüe. Fb : fibrinogène, Hp : haptoglobine, SAA : Sérum Amyloïde A. D'après [10].</figcaption></figure>

A. Marqueurs utilisables pour mettre en évidence une inflammations

Lors d'une cascade inflammatoire généralisée, les cytokines pro-inflammatoires initient ce qu'on appelle la « réponse de phase aigüe », caractérisée cliniquement par une fièvre accompagnée de variations hématologiques et de modifications des protéines sériques.

I. <u>Paramètres hématologiques cellulaires</u>:
a. **Lignée blanche (leucocytes):**

* **Granulocytes:** Composés de neutrophiles, éosinophiles et basophiles, ils jouent un rôle essentiel dans la défense immunitaire. Les neutrophiles, en particulier, sont mobilisés lors d'un processus inflammatoire pour la phagocytose des agents infectieux [16].

* **Monocytes et macrophages:** Les monocytes, activés par la reconnaissance de PAMPs et DAMPs, se différencient en macrophages qui phagocytent les agents infectieux et débris cellulaires. Ils participent également à la stimulation de la réponse immunitaire adaptative en stimulant la prolifération de lymphocytes Th-1 [16].

* **Lymphocytes:** Responsables de la réponse immunitaire adaptative, ils se différencient en lymphocytes B produisant des anticorps et en lymphocytes T ayant une action cytotoxique et immunomodulatrice.

b. **Lignée rouge:**

Les érythrocytes, ou globules rouges, ne subissent que peu de variation lors d'une inflammation, bien qu'une légère anémie par carence en fer puisse être observée lors d'une inflammation chronique [13].

c. **Plaquettes:**

Les plaquettes entrent en jeu lors de saignements et de la formation de caillots. Leur production peut être stimulée par l'IL-6 lors d'une inflammation, mais leur rôle en tant que marqueur inflammatoire reste discuté.

Parmi les cellules sanguines, les neutrophiles et les lymphocytes sont considérés comme de bons marqueurs de l'inflammation en raison de leurs modifications significatives lors d'un processus inflammatoire. En revanche, les cellules de la lignée rouge restent relativement stables et ne sont pas considérées comme des marqueurs fiables de l'inflammation.

## II. Protéines de l'inflammation

a. **Albumine et globulines**

Les protéines sériques, telles que l'albumine et les globulines, sont synthétisées principalement par le foie et jouent un rôle crucial dans divers processus biologiques, y compris la défense immunitaire et la coagulation sanguine. 'électrophorèses des protéines sériques permettent de distinguer différentes fractions protéiques, avec l'albumine représentant la part la plus importante des protéines sériques figure 2.
<figure><img src="image_4.png" /><figcaption>Figure 2: Profil de migration électrophorétique des protéines sériques de bovin sain, d'après [14].</figcaption></figure>

Les principales protéines de la phase aiguë (PPA) appartenant aux α-globulines incluent l'haptoglobine et la céruléoplasmine, tandis que celles appartenant aux β-globulines comprennent le fibrinogène, la transferrine et la protéine C réactive (CRP). Les γ-globulines correspondent aux immunoglobulines, dont l'augmentation est observée en réponse à la reconnaissance d'antigènes par les cellules du système immunitaire adaptatif.

<table><caption>Tableau 1: Variation du protéogramme et quelques maladies associées, d'après [14]. En gras les modifications rencontrées lors d'un processus inflammatoire aigu ou chronique.</caption><thead><tr><th>Fraction protéique</th><th>Variation</th><th>Pathologie/ maladie associée</th></tr></thead><tbody><tr><td rowspan="4"><u>Albumine</u></td><td>Augmentation</td><td>Déshydratation</td></tr><tr><td rowspan="3">Diminution</td><td>Maladie hépatique, hépatite chronique, cirrhose</td></tr><tr><td>Malnutrition chronique</td></tr><tr><td>Maladie gastro-intestinale, entéropathie avec perte de protéines, parasitisme</td></tr><tr><td></td><td><strong>Inflammation aiguë</strong></td></tr><tr><td><u>α1-globulines :</u><br>α1-glycoprotéine acide</td><td>Augmentation</td><td><strong>Inflammation active</strong></td></tr><tr><td></td><td>Diminution</td><td>Malnutrition, insuffisance hépatique</td></tr><tr><td><u>α2-globulines :</u><br>Haptoglobine, céruléoplasmine</td><td>Augmentation</td><td><strong>Maladies inflammatoires, infections</strong><br>Syndrome néphrotique</td></tr><tr><td></td><td>Diminution</td><td>Anémie hémolytique</td></tr><tr><td><u>β-globulines :</u></td><td>Augmentation</td><td><strong>Maladies inflammatoires, infections</strong><br>Hépatite aiguë, cirrhose</td></tr></tbody></table>
<table><tr><td rowspan="3">CRP, fibrinogène, transferrine</td><td></td><td>Syndrome néphrotique<br/>Hypercholestérolémie<br/>Anémie ferriprive</td></tr><tr><td>Diminution</td><td>Malnutrition<br/>Insuffisance hépatique</td></tr><tr><td>Augmentation</td><td>Monoclonal : myélome, leucémie, lymphosarcome, lymphome<br/>Polyclonal : inflammation chronique, infections sévères, désordre à médiation immune</td></tr><tr><td>γ-globulines :<br/>Immunoglobulines<br/>(IgA,IgG,IgE,IgD,IgM)</td><td>Diminution</td><td>Sérum fœtal ou pré-colostral<br/>Infections récurrentes, déficit immunitaire<br/>Maladies héréditaires à déficit immunitaire</td></tr></table>

### b. Protéines de la phase aiguë (PPA)

Les PPA sont des protéines dont les concentrations augmentent considérablement en cas d'inflammation. Elles sont sécrétées principalement par le foie et certains tissus périphériques. On les classe généralement en PPA majeures, modérées, mineures et négatives en fonction de leur cinétique en cas d'inflammation et de leur sensibilité à répondre à un épisode inflammatoire.

Les principales PPA chez les bovins comprennent [11]:

* **Le sérum amyloïde A (SAA):** Synthétisé sous l'influence de l'IL-6 et du TNFα, il joue un rôle dans la modulation de l'inflammation et le transport du cholestérol.

* **L'haptoglobine (Hp):** Forme un complexe avec l'hémoglobine, limitant sa toxicité et la disponibilité en fer pour les bactéries.

* **Le fibrinogène (Fb):** Impliqué dans la coagulation sanguine et la réparation tissulaire.

* **L'α1-glycoprotéine acide (AGP):** Possède des activités immunomodulatrices et anti-inflammatoires.

* **La protéine de liaison au liposaccharide (LBP):** Impliquée dans la réponse immunitaire aux infections bactériennes (encore peu étudiée).

L'évolution des concentrations de ces PPA peut varier en fonction de l'espèce étudiée et du stimulus inflammatoire. Chez les bovins, l'augmentation de ces PPA est observée en réponse à diverses conditions inflammatoires, ce qui en fait des marqueurs précieux pour évaluer l'état inflammatoire de l'organisme bovin.

### III. Cinétique des marqueurs de l'inflammation

La Figure 9 synthétise la cinétique des marqueurs au cours d'un processus inflammatoire. Les délais de réponse peuvent différer de ceux décrit ici en fonction de la sévérité de l'inflammation et de sa résolution ou non (passage à la chronicité).
Figure 2: Cinétique des différents marqueurs lors d'inflammation. L'éclair noir représente le début de l'inflammation[1].

# B. METHODE UTILISABLE EN CLIENTELE VETERINAIRE CHEZ LES BOVINS ET VALEUR DE REFERENCE

## I. Valeurs usuelles

Les valeurs usuelles des paramètres hématologiques et des protéines de phase aigüe sont exposées dans les paragraphes suivants.

a) Paramètres hématologiques

La Numération Formule Sanguine (NFS) et le frottis sanguin sont deux examens complémentaires dont les valeurs usuelles et la morphologie des cellules en condition physiologique sont présentées ici.

### i. La Numération Formule Sanguine (NFS)

Dans le Tableau IV sont représentées les valeurs usuelles des paramètres hématologiques chez les bovins, définies lors d'une étude récente de 2018 [5] sur 156 bovins (50% allaitant, 50% laitier), et comparées ici avec les valeurs de Schalm (62 bovins) éditées en 1965, encore largement utilisées comme valeurs de référence. Dans l'étude de 2018, les animaux ont été considérés comme sains après exclusion d'anomalies à l'examen clinique, dans la prise de commémoratifs et après analyse urinaire.
<caption>Tableau II: Valeurs et intervalles de référence de la NFS pour deux études : une de 2018 [5] et une de 1965 [16]. VGM : Volume globulaire moyen ; CCMH : Concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine ; TCMH : Teneur corpusculaire moyenne en hémoglobine ; VPM : Volume plaquettaire.</caption>

<table><thead><tr><th colspan="3">Numération formule sanguine</th></tr><tr><th colspan="3">Formule érythrocytaire</th></tr><tr><th>Paramètres</th><th>Intervalle de référence de 2018 (moyenne)</th><th>Ancien intervalle de référence (1965) [16]</th></tr></thead><tbody><tr><td>Numération érythrocytaire (x10<sup>6</sup>/µL)</td><td>4.8-7.6 (6.2)</td><td>4.9-7.5</td></tr><tr><td>Taux d'hémoglobine (g/dL)</td><td>8.2-13 (10.5)</td><td>8.4-12</td></tr><tr><td>Hématocrite (%)</td><td>22-36 (30)</td><td>21-30</td></tr><tr><td>VGM (fL)</td><td>41.2-58.7 (50.2)</td><td>36-50</td></tr><tr><td>TCMH (pg)</td><td>14.3-19.6 (17)</td><td>14-19</td></tr><tr><td>CCMH (g/L)</td><td>324-358 (344)</td><td>380-430</td></tr><tr><td>Numération réticulocytaire (x10<sup>9</sup>/L)</td><td>0-6.8 (2.7)</td><td>0</td></tr></tbody><thead><tr><th colspan="3">Formule leucocytaire</th></tr><tr><th>Paramètre (nombre/µL)</th><th>Intervalle de référence (moyenne)</th><th>Pourcentage de la population leucocytaire (%) <sup>1</sup></th><th>Ancien intervalle de référence (1965) [16]</th></tr></thead><tbody><tr><td>Numération leucocytaire</td><td>4400-10800 (7200)</td><td></td><td>5100-13300</td></tr><tr><td>Neutrophiles</td><td>800-5000 (2700)</td><td>15-45</td><td>600-4000</td></tr><tr><td>Eosinophiles</td><td>100-2100 (700)</td><td>0-20</td><td>0-2400</td></tr><tr><td>Basophiles</td><td>0-100 (100)</td><td>0-2</td><td>0-200</td></tr><tr><td>Monocytes</td><td>300-1200 (200)</td><td>2-7</td><td>25-840</td></tr><tr><td>Lymphocytes</td><td>1800-4900 (3100)</td><td>45-75</td><td>2500-7500</td></tr><tr><td>Ratio neutrophiles/lymphocytes <sup>1</sup></td><td>0.40-2.34 (1.17)</td><td></td><td>ND</td></tr></tbody><thead><tr><th colspan="3">Autres</th></tr><tr><th>Numération thrombocytaire</th><td>193.000-637.000 (315 000)</td><td></td><td>100.000-800.000</td></tr></thead></table>

<footnote n="1">¹: valeurs obtenus d'après [4]</footnote>
# I <u>Objectifs de l'étude</u>

L'objectif de l'étude expérimentale présentée ici est dans un premier temps de recueillir des données quantitatives et qualitatives sur deux groupes d'animaux au statut inflammatoire supposé différent : un groupe de bovins « sains » et un groupe de bovins « suspects », afin de comparer les données entre ces deux groupes. L'évolution des variables les unes par rapport aux autres est observée dans le but de choisir plusieurs marqueurs de l'inflammation et de déterminer pour chacun leurs intérêts diagnostiques chez les bovins adultes. Ceci nous permettra de choisir les tests les mieux adaptés à la détection d'un état inflammatoire en cas de signes cliniques peu spécifiques, comme cela peut être le cas en consultation.

# II <u>Matériel et méthodes</u>

Le protocole d'étude a reçu un avis favorable du comité d'éthique de VetAgro Sup (n°2008 du 20/02/2020).

## 1. <u>Population d'étude et critère d'inclusion</u>

L'étude a été réalisée entre septembre 2019 et juin 2020. Deux types d'animaux ont été inclus dans l'étude :

- Des animaux « suspects » :

Bovin de plus d'un an, présenté en consultation à l'unité clinique rurale de l'Arbresle (UCRA, clientèle vétérinaire rurale de Vetagrosup) ou lors de l'admission au service d'hospitalisation des animaux de rentes de Vetagrosup (SHAR). Pour être inclus dans l'étude, les bovins devaient présenter un examen clinique anormal, sans qu'aucun diagnostic de certitude n'ait pu être posé par le vétérinaire à l'issue de l'examen clinique et du recueil des commémoratifs.

- Des animaux apparemment sains :

Bovin de plus d'un an, sélectionné aléatoirement dans un élevage parmi les vaches en lactation lors d'une visite de suivi de reproduction réalisée au sein de l'UCRA.

## 2. <u>Collecte des données et échantillon</u>

Sur chaque animal, un examen clinique générale était réalisé et des prélèvements sanguins sur tube EDTA (numération formule, temps de coagulation au glutaraldéhyde et protéine totale), sec (dosage de l'haptoglobine) et citraté (dosage du fibrinogène).

## 3. <u>Analyses de laboratoire</u>

### Test au glutaraldéhyde

Le test a été réalisé directement en ferme ou au laboratoire de pathologie du bétail lors d'impossibilité de la part du vétérinaire traitant de le réaliser sur place. Le protocole suivi était celui décrit par Metzner et al. en 2007 [9] :

1 ml de sang prélevé sur tube EDTA est mélangé avec 1 ml de réactif (50ml de glutaraldéhyde 25%, 1g d'EDTA, 9g de NaCl dans 1000ml d'eau distillée) dans un tube et retourné délicatement une dizaine de fois. Le temps de formation du caillot était ensuite déterminé en plaçant le tube horizontalement toutes les minutes.
Le glutaraldéhyde est un réactif qui se lie au groupement NH₂ des acides aminés présent dans les protéine sanguine entrainant la coagulation, plus le temps de coagulation du mélange sang total et glutaraldéhyde est rapide, plus la concentration en protéine sanguine est importante [9]. D'après Metzer et coll. un temps de coagulation inférieure à 3 minutes est associé à une inflammation sévère, un temps compris entre 3 et 6 minutes à une inflammation modérée, entre 6 et 15 minutes à une inflammation discrète et à l'absence d'inflammation lorsque le temps de coagulation est supérieur à 15 minute.

Dans notre étude, nous avons considéré le test au glutaraldéhyde positif si le temps de coagulation était inférieur ou égale à 3 minutes.

* **Numération formule sanguine (NFS) et comptage manuel**

La numération sanguine a été réalisée à partir d'un prélèvement sur tube EDTA par l'analyseur MS4s (MELET SCHLOESING Laboratoires, Osny, France), selon le protocole indiqué par le fabricant.

Les résultats inclus dans la suite de l'analyse étaient ceux les plus susceptibles de varier en fonction de l'état inflammatoire des bovins, à savoir :

- Nombres de leucocytes totaux : considéré positif si supérieur à 10 000 cellules/µL [5]

- Nombre de neutrophiles : considéré positif si supérieur à 5 000 cellules/µL[5]

- Ratio neutrophile / lymphocyte : considéré positif si supérieur à 2.35 [4]

* **Dosage du fibrinogène**

Le fibrinogène a été dosé à partir des échantillons prélevés sur tube citraté selon la méthodes chronométrique de Clauss [2] basée sur le temps de formation d'un caillot de thrombine. Le résultat était considéré comme positif si la concentration en fibrinogène était supérieure à 5g/L.

* **Dosage des protéine totales**

La concentration en protéine totale a été mesurée au refractomètre en g/L sur le plasma obtenue après centrifugation du tube EDTA. Une protéinémie supérieure à 80g/L étaient considérée comme en faveur d'une inflammation.

* **Dosage de l'haptoglobine**

Le dosage de l'haptoglobine a été réalisé sur sérum (après centrifugation à 724 G pendant 10min) grâce au test rapide SmartStrips™ anciennement commercialisé par BioX Diagnostics (Rochefort, Belgique), selon les recommandations du fabricant. Ce test rapide est un test ELISA dont le résultat est lu par colorimétrie à l'aide d'une application smartphone.

L'haptoglobinémie était considérée comme positive si sa valeur était supérieure à 150µg/mL.

## 4. Analyse statistique

En l'absence de gold standard, les sensibilité et spécificités des sept tests diagnostiques d'inflammation précédemment décris et de la température rectales pour détecter une inflammation systémique et les prévalences de bovins présentant une inflammation systémique dans chaque population ont été évaluées simultanément, à l'aide d'un modèle à classes latentes[7] à huit tests et deux population (bovins suspect et apparemment sein).

Le modèle à classe latente a été généré à l'aide de la fonction template_huiwalter du package runjags[3] et l'estimation des paramètre du modèle a été réalisée en inférence bayésienne sur le logiciel R[12]. Le statut latent modélisé par le modèle correspond à l'accord entre les différents tests inclus et peut être interprété comme la présence, ou non, d'une inflammation systémique chez le
bovin considéré. Les tests inclus étaient considérés comme indépendant conditionnellement au statut latent modélisé et les sensibilité et spécificité de chaque test ont été supposé constante dans les deux populations évaluées. Des distributions à priori non informative (distribution beta(1,1)) ont été utilisée pour l'ensemble des paramètres évaluées.

Les valeurs prédictive positive (VPP : probabilité qu'un animal testé positif par un test donné ait effectivement une inflammation systémique) et négative (VPN : probabilité qu'un individu testé négatif par un test donné n'ai pas d'inflammation systémique) ont été calculés selon la formule suivante à partir de la prévalence de bovins présentant une inflammation systémique dans la population des bovins suspect correspondant à la population cible sur laquelle pourraient être réalisés les tests d'inflammation en clientèles.

$$VPP = \frac{Se \times P}{Se \times P + (1 - Sp) \times (1 - P)}$$

$$VPN = \frac{Sp \times (1 - P)}{(1 - Se) \times P + Sp \times (1 - P)}$$

### III Résultats

#### 1. Population d'étude

Nous avons pu inclure 29 bovins dans le groupe « suspect » et 10 dans le groupe « sain ». Parmi ces bovins, on a recensé en grande majorité des femelles (38 animaux, 97%), avec une prédominance des races laitières (n= 31) sur les races allaitantes (n= 8), dont 19 Holsteins, 12 montbéliardes, 5 charolaises, 2 limousines et une race « autre ». Le groupe « sain » était composé uniquement de vaches de race Holstein.

L'âge moyen des individus était de 6 ans (de 1 à 16 ans), les stades de gestation étaient compris entre 0 et 7 mois, et pour les laitières, le stade de lactation moyen était de 2.8 mois (de 0 à 8.5 mois).

Les motifs d'appel du vétérinaire pour les animaux du groupe « suspect » étaient variés : décubitus, anorexie, amaigrissement, abattement, boiterie, vache qui « bricole », arrêt de rumination. Pour 2 animaux le motif d'appel était la présence d'une plaie. Pour plusieurs d'entre eux, le motif d'appel comprenait plusieurs des éléments cités ci-dessus (anorexie + abattement par exemple).

#### 2. Estimation du modèle

La prévalence de bovin inflammé dans la population des bovins « sains » a été estimée à 6.2% [0 ; 24,6]. La prévalence de bovin inflammé dans la population des bovins « supects » a été estimée à 77,7% [57,2 ; 94,8]. Les sensibilités, spécificité et valeur prédictive positive et négative de chacun des 8 tests d'inflammation sont présentées dans le tableau 1.

<table><caption>Tableau 3 : Sensibilité, spécificité et valeur prédictive positive et négatives des différents biomarqueurs d'inflammation systémique estimés (en % [intervalle de crédibilité à 95%])</caption><thead><tr><td>Biomarqueur</td><td>Sensibilité</td><td>Spécificité</td><td>Valeur prédictive positive</td><td>Valeur prédictive négative</td></tr></thead><tbody><tr><td>Température réctale > 39,4°C</td><td>8.8 [2.1; 23.1]</td><td>97.4 [88.7; 99.9]</td><td>91.9 [68.7; 99.7]</td><td>23.4 [8.1; 48.4]</td></tr></tbody></table>
<table><thead><tr><th>Biomarqueur</th><th>Sensibilité</th><th>Spécificité</th><th>Valeur prédictive positive</th><th>Valeur prédictive négative</th></tr></thead><tbody><tr><td>Temps glutaraldéhyde &lt; 3 min</td><td>29.4<br>[16.1; 46.1]</td><td>76.8<br>[61.4; 88.9]</td><td>81.5<br>[58.6; 94.6]</td><td>23.7<br>[8.3; 48.8]</td></tr><tr><td>Leucocytes &gt; 10 000 C/µL</td><td>54<br>[34.3; 74.3]</td><td>86.4<br>[64.2; 98]</td><td>93.5<br>[74.1; 99.3]</td><td>34.6<br>[12.2; 67.4]</td></tr><tr><td>Neutrophiles &gt; 5 000 C/µL</td><td>67.1<br>[46.3; 87.5]</td><td>87<br>[64.9; 98]</td><td>94.9<br>[79.9; 99.4]</td><td>42.4<br>[15; 81.4]</td></tr><tr><td>Ratio Neutro/Lympho &gt; 2.5</td><td>56.2<br>[35.8; 77.1]</td><td>94.8<br>[77; 99.8]</td><td>97.5<br>[83.9; 99.9]</td><td>37.9<br>[13.6; 71.7]</td></tr><tr><td>Proteines totale &gt; 80 g/L</td><td>51.3<br>[33.5; 70]</td><td>69.6<br>[49.6; 87.6]</td><td>85.9<br>[62.6; 96.5]</td><td>29.2<br>[10; 57.3]</td></tr><tr><td>Haptoglobinémie sérique &gt; 150 mg/L</td><td>84.9<br>[66.4; 96.2]</td><td>90.2<br>[61.7; 99.6]</td><td>97.1<br>[76.7; 99.9]</td><td>63<br>[26.4; 90.3]</td></tr><tr><td>Fibrinogénémie &gt; 5g/L</td><td>64.4<br>[44; 82.6]</td><td>89.7<br>[66.6; 99.3]</td><td>95.8<br>[76.9; 99.8]</td><td>41.6<br>[15.7; 73.3]</td></tr></tbody></table>

## IV Discussion et implication clinique

Bien que réalisée sur un nombre limité d'individus, cette étude permet d'obtenir une première estimation des performances diagnostiques des principaux tests réalisables en clientèle vétérinaire pour évaluer la présence d'un état inflammatoire ou pas chez un bovin.

### 1. Atout et limite de l'étude

Les forces de ces études sont qu'elle repose sur un échantillon d'individu représentatif de la population cible sur laquelle pourraient être réalisée en clientèle à savoir des bovins issus d'élevage dont la majorité présente un tableau clinique non spécifique d'une affection particulière et pour laquelle la présence d'une inflammation systémique peut orienter le vétérinaire praticien dans sa prise en charge. L'inclusion du groupe d'animaux apparemment sein, permet d'améliorer la convergence du modèle à classe latente. Par ailleurs, les estimation de Se et Sp ont été réalisée en l'absence de gold standard ce qui nous permet d'éviter la comparaison à un test de référence imparfait ou l'exclusion des cas clinique incertains, deux des écueils majeurs des études diagnostiques classiquement réalisés[17].

Ses limites sont principalement le faible nombre d'animaux inclus qui limite la puissance de l'étude et entraine des estimations parfois imprécises des performances diagnostiques des tests. La population d'étude est exclusivement composée d'animaux de plus d'un an et
principalement de bovins laitiers. Même si ces résultats sont intéressants, ils devraient donc être
confortés sur un nombre plus important d'animaux avant d'être extrapolé à d'autres contexte.

2. Implication pour la prise en charge des animaux en clientèles

Le premier résultat intéressant de cette étude concerne l’estimation de la prévalence de bovins présentant une inflammation systémique parmi les bovins suspect. Cette prévalence est estimée à 77,7% avec un intervalle de crédibilité à 95% compris entre 57,2 et 94,8. On peut donc affirmer que plus de la moitié des bovins du groupe suspect présentaient une inflammation systémique. Même si toutes les inflammations systémiques ne sont pas forcément d’origine infectieuse, cela souligne l’importance du questionnement du vétérinaire pour prendre en charge cette inflammation potentielle chez les bovins présentant un tableau clinique peu spécifique. Pour guider son choix, le vétérinaire praticien, peut s’appuyer sur différentes méthodes diagnostiques dont les performances ont été évaluées dans cette étude.

Parmi les huit tests évalués, deux sont réalisable au chevet du patient, la prise de la température rectale et le mesure du temps de coagulation au glutaraldéhyde.

Le choix de la méthode repose sur plusieurs aspects comprenant des considérations pratiques, économiques et sur l'apport de la méthode pour confirmer ou infirmer une hypothèse (ici, la présence d'une inflammation). Concernant ce dernier point, étant donné qu'aucun des tests évalués n'est parfait (avec une Se et une Sp proche de 100%), un compromis devrait être trouvé entre un test sensible qui permettra d'identifier correctement la plupart des individus présentant une inflammation systémique et un test spécifique qui permet d'identifier correctement la plupart des individus n'en présentant pas.
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