Quelques remarques à propos de mes recherches
sur la formation du pollen chez les Malvacées.

Par
ZYGMUNT WÓYCICKI.

(Avec la planche I).

Mr Emberger en exposant dans le premier chapitre de son
travail publié sous le titre: „Recherches sur l'origine et l'évolution
des plastides chez les Ptéridophytes" (Paris, 1921) l'histoire des pro-
blèmes concernant les mitochondries et celle des manipulations te-
chniques employées par lui, répète, d'une manière très insuffisante
et incorrecte, les résultats de mes investigations. Il dit: „Woycicki
observe le chondriome des grains de pollen des Malvacées; il ne
constate pas la formation de l'amidon, aux dépens des mitochondries,
et il admet que ces corps naissent directement dans le cytoplasme.
Les mitochondries, aux premiers stades du développement du pollen,
seraient invisibles (forme amicronique). Elles apparaissent ensuite par
suite de l'afflux des matières nutritives" (l. c. p. 25).

Premièrement, il faut remarquer que dans mon travail de l'année
1912') j'ai écrit que „ces corps (grains d'amidon) ne naissent pas
directement dans le cytoplasme“. J'ai dit ensuite: „il ne reste alors
à présent, malgré les résultats de Mr Guilliermond, qu'à soutenir
l'idée de ces botanistes qui affirment avec Mr Belzung que dans
des cas spéciaux l'amidon transitoire naît aux dépens du cytoplasme,
sans aucune part des organites préformés et specialement destinés à ce
travail“. Et j'ai ajouté encore: „...nous pouvons admettre que ces
corps ne sont que les organites qui jouent un rôle actif dans la

<footnote n="1">1) „Sur les corps mitochondrials dans les gonotocontes et les gones des grains du pollen chez *Malva silvestris*. — Comptes Rendus de la Société Scientifique de Varsovie. 1912. Fasc. 3 (en polonais).</footnote>
formation des protubérences internes, ou ne sont que les formations d'une matière de réserve, déstinée à la construction de la membrane fondamentale de la cellule" (I. c., p. 175).

En 1912 j'ai considéré cette idée comme la plus plausible et je l'ai exprimée, dans un autre passage, en ces mots: „Cette dernière hypothèse me semble la plus rationelle, car je n'ai pu nullement observer le rapprochement des mitochondries vers la membrane" (I. c., p. 176). Si ces corps n'étaient que les organites spéciaux dirigeant la formation de cette membrane, ils se seraient rapprochés probablement vers celle-ci". Enfin j'ai ajouté quelques comparaisons que je veux rappeler ici. J'ai écrit: „Avec quoi donc pouvons-nous comparer „les mitochondries" qui existent dans les gonotocontes et dans les gones chez *Malva silvestris* L.? Ayant égard à l'histoire de l'évolution, de la structure, ainsi que de la manière d'agir de ces corps, je suppose qu'une comparaison s'impose immédiatement avec les corps de Hofmeister qui sont connus depuis si longtemps". Dans mon travail de l'année 1899 publié sous le titre: „La fécondation chez les Conifères" j'ai décrit la structure de ces éléments et leur destin dans l'oeuf chez *Larix dahurica*.

Chez les *Abietinées* et *Gingko* ces corps sont très nombreux et apparaissent, comme l'expliquent MMrs M. C. Stopes et K. Fuji<fnref n="1" />), au moment, où l'oeuf est surchargé des matières albuminoïdes provenant de l'assise tapétale<fnref n="2" />). Ils prennent de plus en plus l'aspect des corps épongés, c'est-à-dire leur conduite ou mieux dire la matière d'agir est la même que celle des mitochondries dans les gonotocontes et dans les gones chez *Malva*. Enfin ces corps-là se résorbent totalement au moment où se forme le proembryon. Cependant une différence se fait remarquer ici entre les corps en question et ceux de Hofmeister, à savoir les corps de Hofmeister chez *Larix* et chez les autres *Conifères* sont entourés d'une zone claire, vers laquelle s'étendent les filets qui réunissent le corps central avec le tégument. Mais il faut ajouter que cette différence ne devient profonde qu'aux stades plus avancés de l'évolution, parce que dans les gonotocontes aussi bien que dans les gones de *Malva* nous pouvons trouver les figures semblables pendant les premiers moments de

<footnote n="1">1) „The nutritive relations of the surrounding tissues to the archegonia in Gymnosperms“ — Beihefte z. Bot. Cbl. Bd. XX, H. 1, 1906.</footnote>

<footnote n="2">2) D'après A. Lundegardh nous avons à faire avec „...mehr akzessorischen oder abnormen Erscheinungen...“ Handbuch der Pflanzenanatomie. Berlin. 1922, Bd. I, p. 308.</footnote>
l'évolution des mitochondries. Les corps de Hofmeister se colorent avec l'hématoxyline ferrique de la même manière que les mitochondries, et c'est encore une preuve de la ressemblance qui existe entre ces deux produits de la cellule.

En partant de ce point-là, il est facile de comprendre la manière d'agir des mitochondries dans les cellules mères et dans les cellules dérivées de ces cellules chez les *Malvacées*. Ces corps naissent au moment où l'assise tapétale demeure encore à sa place et se trouve en contact très intime avec les gonotocontes; ils se forment au bord de ceux-ci de la même manière que dans les oeufs chez les plantes examinées par MMrs Stopes et Fuji; ils croissent et se multiplient tant que dure ce contact intime. Quand enfin le moment de la naissance des gones approche, les mitochondries se trouvent dépourvues de ce contact, parce que les gones sont entourées d'une membrane très épaisse. Les corps mitochondrials à ce moment-là croissent encore un peu; ils ne le font plus aux dépens de la manière des cellules tapétales, mais exclusivement aux dépens du cytoplasme sousmembranique des grains du pollen qui deviennent de plus en plus vacuolisés.

Mais c'est dans les cellules du pollen, qui sont déjà dépourvues de la membrane commune de la tétrade, et ne sont entourées que de leur propre et très subtile membrane, que nous trouvons les corps mitochondrials les plus grands en forme de fuseaux ou de bâtonnets très longs et toujours épongés. A ce moment-là, les gones sont suspendues dans une masse claire, reluisante qui remplit le jeune sac pollinique; les cellules tapétales ne possèdent plus à leur sommet aucune membrane, et leurs cytoplasmes croissent au fond du sac en forme de petits mamelons. Cette manière d'agir des mitochondries admet la supposition que, par la subtile membrane des gones dépourvue des pores, a lieu une osmose des substances albuminoïdes produites par l'assise tapétale et pénétrant à l'intérieur du sac.

Telles étaient mes interprétations que j'ai exposées dans ma note de l'année 1912 d'après les faits que j'avais observés pour la première fois. Tous les matériaux sur lesquels se basaient mes hypothèses ont été divisés en plusieurs parties. La première a été fixée par la méthode de Flemming, la seconde — par le liquide de Benda (15 cm³ de l'acide chromique à 1%, 4 cm³ de l'acide osmique à 2% et 3—5 gouttelettes de l'acide acétique glaciale), la troisième — par l'alcool à 96% et enfin la quatrième — par le liquide de Carnoy. J'ai appliqué alors, d'après l'opinion des investigateurs, les fixateurs de deux sortes: d'un côté — les fixateurs mordant les chondriomites,
d'un autre côté — les fixateurs qui les fixent bien. Dans les deux cas les résultats étaient les mêmes et je les ai expliqués plus haut. Il faut encore ajouter que chaque partie des matériaux avait été divisée en deux portions, dont l'une a été colorée par l'hématoxyline ferrique et l'autre restait sans coloration pour les investigations microchimiques.

Dans ma publication de l'année 1917 j'ai vérifié mes premières observations et j'ai modifié quelques-unes de mes hypothèses, parce que je me suis persuadé que les corps dans lesquels je n'avais d'abord trouvé que les vacuoles, se manifestaient comme des corps d'une qualité spécifique. Je les ai nommés „plastosomes“ d'après une idée de Mr Meves que j'ai un peu modifiée. Ces corps-ci sont disposés, comme nous le voyons dans la figure 6, planche II, le long des filets spécifiques du protoplasme et ont l'aspect de très petites granules isolées ou assemblées en groupes. Au moment où le noyau de la cellule mère du pollen entre à l'état de synapsis, on trouve au bord de la dite cellule les conglomérations de ces granules plongées dans une trame qui se colore par les colorants propres au protoplasme, tandis que les granules elles-mêmes absorbent fortement les colorants spécifiques au noyau, p. ex. l'hématoxyline ferrique. Le nombre de granules de chacune de ces conglomérations est très variable. Les plus petites se composent de quatre ou cinq granules, les plus grandes en contiennent 8-12 ou même encore davantage. Cependant, non seulement le nombre de grains, c'est-à-dire l'étendue de ces conglomérations, varie dans les limites très difficiles à déterminer, mais encore la trame elle-même est aussi très variable. Quelques-uns de ces corps ont l'aspect de chromosomes (fig. 7, pl. II), les autres sont ovales ou un peu allongés et plus gros à un bout qu'à l'autre (fig. 7, 8, 9, pl. II). Dans bien de cas, ces corps sont entourés d'une zone plus ou moins claire (fig. 8, 9, pl. II), par laquelle passent les filets protoplasmiques; ces filets réunissent la trame du corps avec le cytoplasme qui l'entoure. D'après mon interprétation, ces filets témoignent qu'il existe à ce moment-là un échange très vif de la matière entre les plastosomes et le protoplasme. La même chose se manifeste aussi dans la structure du cytoplasme de la cellule mère du pollen (fig. 7, pl. II), où nous voyons d'innombrables ruisseaux qui ont l'aspect de filets s'étendant des bords du protoplaste vers le noyau. Dans le voisinage de ce dernier, ils se divisent en quelques branches ou se détournent de leur première direction (fig. 7, pl. II).
Quels sont les destins de ces corps pendant la division de la
cellule mère du pollen — je ne peux le dire, car malgré les maté-
riaux très abondants que j'ai ramassés pendant les différentes heures
de la journée et de la nuit, je n'ai pas trouvé de phases décisives.
Nous pouvons, au contraire, rencontrer très facilement les tétrades.
Ces dernières sont entourées de la couche commune de la membrane,
qui est extraordinairement épaisse. Dans le cytoplasme des gones
les corps en question sont très nombreux. Ils ressemblent à ceux des
cellules mères, mais avec une différence qui se manifeste dans les
contours variables de la trame ainsi que dans le nombre et la forme
variables des granulations fortement colorées par l'hématoxyline ferrique.

Dans les jeunes gones nous trouvons les plastosomes (proplasti-
des) dans le cytoplasme, qui est situé derrière le péricarioplasme. Ce
sont des corps d'une forme irrégulière mais possédant une trame
bien formée. Dans quelques-uns des corps cette trame est plus ou
moins uniforme, dans d'autres elle est spongieuse ou granuleuse
(fig. 13, pl. II). La substance, qui se colore fortement par les colo-
rants caractéristiques pour le noyau, est suspendue dans cette trame
sous la forme des granules de dimensions et de contours très diffé-
rents (fig. 13, pl. II). Aux premiers moments ces granules sont peu
nombreuses, parce que, comme je le suppose, la trame les sépare
pendant sa croissance ou bien peut-être les granules elles-mêmes se
collent les unes avec les autres. Dans les gones plus avancées,
c'est-à-dire dans celles dont les noyaux sont en repos, ces
corps ont l'aspect différent, dépendant des réactions chimiques qui
se passent dans le cytoplasme de la cellule. Ces choses-là se mar-
quent dans le péricaryoplasme. Dans ces gones alors, dans lesquelles
nous ne voyons plus la limite du péricaryoplasme (fig. 12, pl. II et
fig. 14, pl. III), les corps qui étaient si bien formés quelque temps
auparavant, perdent leur netteté, tandis que dans les gones munies
du péricaryoplasme (fig. 15, pl. II), la trame de ces corps croît et
forme des produits ovales, globoïdes ou longs et irréguliers, dans
lesquels le nombre de granules fortement colorées se multiplie d'une
manière extraordinaire.

La structure de ces corps se manifeste avec toute leur finesse
au moment, où les gones perdent leur membrane commune. A ce
moment-là, nous voyons dans les cellules un amas de corps très
différents en nombre et en forme (fig. 16, 17, 18 et 19, pl. III) <fnref n="1" />).

<footnote n="1">1) Comparez le dessin N. 8 de Mr Dangeard dans Comptes Rendus Acad. Sc. T. 171, N. 2, 1920. (Note intitulée: „Vacuome, plastidome et sphérome dans l'Asparagus verticillatus").</footnote>
Malgré tout, es corps ne nous rappellent pas les figures observées par Mr Lundegardh, c'est-à-dire qu'ils ne rappellent pas les chromosomes mais bien les réseaux chromidials chez les *Protozoaires*.

Dans la trame nous pouvons distinguer une granulation irrégulièrement répandue sous la forme de globules, de bâtons ou de bâtonnets ou enfin sous la forme de grains très inégaux (fig. 16, 17, 18 et 19, pl. III). Ça et là la substance fortement colorée forme des filets ou des rameaux qui réunissent les globules, les bâtons etc.; dans ces cas-là, nous observons dans la trame des rets ayant les noeuds bien distincts.

Il faut remarquer que toute la finesse de la structure expliquée plus haut a été perdue dans la reproductions de mes dessins. Ainsi nous voyons sur la fig. 17 la trame et la granulation, tandis que les filets des rets ne sont visibles qu'au centre du corps situé sur le côté droit du noyau. Au moment, où la structure des corps mitochondrials possède ces signes caractéristiques, ces corps-ci s'approchent du noyau (fig. 16, 17, 18, pl. III); alors parmi les cellules nous en trouvons dans lesquelles „les corps mitochondrials“ entourent les noyaux ou même les enveloppent (fig. 17, 18, pl. III). Cette position des corps mitochondrials indique que la supposition de Mr Lundegardh est très plausible et qu'il existe entre les noyaux et les corps mitochondrials des rapports qui ne sont pas encore éclaircis; ces rapports provoquent le phénomène de leur rapprochement vers les noyaux.

En 1912 j'ai déjà expliqué que la trame des corps mitochondrials, qui nous rappellent dans beaucoup de cas les noyaux de *Chara foetida* d'après John, est formée par les matières albuminoïdes, parce qu'elle donne presque toutes les réactions caractéristiques pour ces composés chimiques. Mes investigations présentes confirment parfaitement les résultats de l'année 1912.

Parmi les formations qu'on trouve dans les cellules des plantes, il en existe quelques-unes dont la constitution et la structure se rapporte beaucoup de celles des corps mitochondrials chez les *Malvacées*. Ce sont les corps irisés chez les *Algues* que nous connaissons grâce aux travaux de MMrs Berthold et Faber. Ces corps irisés ont l'aspect très variable et leurs contours sont extraordinairement flexibles. Ils produisent plutôt l'impression de conglomérations composées de très petites granules que celle de gouttes. A un groississement considérable nous pouvons distinguer, comme le dit Mr Berthold, la structure granuleuse de ces corps qui sont formés de matières albuminoïdes appartenant aux substances de réserve de la cellule. D'après Mr Faber les organes irisés chez les *Algues*, ainsi que les
chromoplastes des mêmes plantes, prennent naissance des leucites et pendant leur vie ne présentent aucune structure. Ce n'est qu'après la fixation qu'ils montrent une subtile granulation.

Quand nous observons les corps mitochondrials pendant la troisième phase de l'évolution du grain de pollen, nous pouvons constater qu'à ce moment-là les dits corps perdent leurs contours si distincts auparavant. Au moment, où les cellules forment leurs membranes, quand il existe déjà dans le cytoplasme une vacuole centrale et quelques vacuoles plus petites (fig. 21, 22, pl. IV), les corps mitochondrials sont moins distincts; ils ont les contours irréguliers, leur trame perd plus ou moins sa structure subtile et porte des grains solitaires ou assemblés en petits groupes, tous colorés fortement par l'hématoxyline ferrique (fig. 21, 23, pl. IV). Dans les gones anormales, décrites en 1912, les corps mitochondrials ont un aspect très intéressant. Ils se développent sous la forme de corps irréguliers, longs et épais (fig. 24, pl. V). La substance qui jusqu'ici se colorait fortement ne forme plus de gouttelettes ni de granules, mais produit des bâtons, des bâtonnets ou enfin des poils irréguliers (fig. 24, pl. V). A l'extrémité d'un corps mitochondrial la substance fortement colorée se fond en masse qui a la forme de boules ou de demiboules reliées entre elles par des filets subtiles (fig. 24, pl. V).

Les changements qui s'accentuent dans la matière fortement colorée par l'hématoxyline sont accompagnés par les changements qui ont lieu dans la trame des corps mitochondrials. Cette trame, comme nous l'avons déjà vu auparavant, est plus condensée çà et là, mais entre les parties qui se colorent plus fortement nous en apercevons d'autres où la trame se clarifie. En même temps, cette trame accuse partout des ruisseaux qui lui donnent un aspect spongieux (fig. 24, pl. V).

Dans les autres gones anormales nous pouvons constater quelques figures différentes. Ainsi, près du noyau (fig. 25, pl. V), dans lequel la caryotine forme les caryosomes et les filets granulaires, nous trouvons des corps sphériques ou ovales, soit plus grands, soit plus petits, isolés ou en groupes. Les uns sont plongés dans le cytoplasme de la cellule, les autres sont entourés d'une zone spéciale caractérisée par une structure subtile, granulaire; cette zone est très nette dans les cas où les dits corps se trouvent en plus grand nombre (fig. 25, pl. V). Ces deux figures (fig. 24 et 25, pl. V) nous procurent des documents qui permettent d'en tirer quelques conclusions intéressantes. La première et la plus importante est celle qui démontre que les corps sphériques ou ovales colorés si fortement par l'hématoxyline ferrique, se forment aux dépens des corps mitochon-
Absorbé par ces idées, Mr Guilliermond oublie que chez Spirogyra c'est le pyrénoïde (organe qui d'après Chmielewski [1897-1899] a une structure extraordinairement compliquée) est destiné à produire les grains d'amidon. Nous savons encore que cet organe, qui chez Zygnema, contient la chlorophylle, forme les grains d'amidon au fond de sa trame, c'est-à-dire dans les terrains du champ destiné à la formation de l'amidon. Si nous comparons maintenant les pyrenoïdes de Spirogyra avec ceux d'Anthoceros, nous pourrons constater entre eux une différence énorme. D'après Mr Scherrer <fnref n="1" />) les pyrénoïdes chez Anthoceros Husnoti et A. punctatus sont composés de plusieurs grains séparés. Tous ces grains forment ensemble ce que l'auteur considère comme „des pyrénoïdes nus“. Mr Scherrer expose que les „pyrénoïdes nus“ appartiennent aux organes que nous devons considérer comme des organes transitoires, c'est-à-dire comme des corps intermédiaires entre les chloroplastes possédant de vrais pyrénoïdes et ceux dépourvus des pyrénoïdes. D'un autre côté, MMrs Arnoldi et Derschau affirment que d'après leurs recherches les pyrénoïdes avec amylozones se forment du cytoplasme qui ne possédait auparavant ni plastides ni chromatophores <fnref n="2" />). Encore plus: aussi bien Mr Arnoldi que Mr Derschau accentuent que les pyrénoïdes naissent aux dépens du noyau. Ce dernier représente la source de laquelle les pyrénoïdes émigrent vers le cytoplasme et ici se forment définitivement. Nous voyons alors que l'ontogénie de ces deux éléments (des pyrénoïdes chez les Algues et des plastides chez les plantes supérieures), leur structure et leur manière de réaction sur les diverses méthodes de coloration sont presque identiques. Ce sont les causes qui me font penser, qu'il faut dès lors changer de point de vue, en traitant la question de phylogénie des plastides chez les Cryptogames vasculaires et les Phanérogames. A mon avis, il faut, peut-être, revenir à l'idée de Mr Boubier qui considérait les pyrénoïdes comme les ancêtres

<footnote n="1">¹) Scherrer, A. Die Chromatophoren und Chondriosomen von Anthoceros. — Ber. d. Deutsch. Bot. Ges. Bd. 31, H. 8, 1913.</footnote>

<footnote>— Untersuchungen über Bau und Vermehrung der Chromatophoren und das Vorkommen von Chondriosomen bei Anthoceros. — Flora. Bd. 107, H. 1, 1914.</footnote>

<footnote n="2">²) A. Lundegardh dit: „Die an sich recht verdächtigen und vielfach schon direkt widerlegten Ansichten über die Emanation der Chondriosomen bezw. Chromidien aus dem Kern, über die cytoplasmatische Herkunft der Chromatophoren usw. beweisen zur Genüge, dass man unkritisch verfahren ist, auch wenn solche grobe Täuschungen, denen z. B. Altmann betreffs seiner Granula zum Opfer gefallen ist, heutzutage wohl zu den Seltenheiten gehören“. — Handbuch der Pflanzenanatomie. Berlin. 1922. Bd. 1, p. 299.</footnote>
des leucites de différents genres. Cette idée a été combattue par
Mr Timberlake<fnref n="1" />). Mais si nous comparons d'un côté les phases
de l'évolution des leucites constatées par Mr Guilliermond,
Mr Sapehin et moi-même, et d'un autre côté les résultats des re-
cherches de Mr Chmielewski et de Mr Scherrer, les arguments
de Mr Timberlake perdent leur fondement. D'après mes investi-
gations le pyrénoïde, qui chez Spirogyra ne forme qu'une petite partie
du leucite, se transforme peu à peu en organe indépendant. Cepen-
dant cet organe conserve dans sa consistance, dans la manière de
sa naissance et dans son destin quelques signes qui nous rappellent
les Algues.

Au cours de ces dernières années la question de l'origine et de
l'évolution des leucites a été fortement discutée. Parmi les auteurs
français les points de vue les plus différents se manifestent entre
Mr Guilliermond et Mr Dangeard. Ce dernier distingue dans
la cellule végétale trois catégories d'éléments qui forment le plasti-
dome, le sphérome et le vacuome.

Quand j'ai envoyé mes préparations à Mr Guilliermond, il
m'a repondu: „Dans votre préparation.... je n'ai trouvé dans
aucune cellule ni mitochondries ni plastides. Quant aux figures
très nettes qui se trouvent dans le cytoplasme du grain du
pollen, je suis un peu hésitant pour l'interprétation, qu'il faut leur
donner. Tout d'abord, il serait étonnant que les plasti-
des ne se trouvent que dans ces cellules. En outre ces
figures ne ressemblent en rien à des plastides, qui
sont en général dans ces cellules beaucoup plus pe-
tits et plus nombreux. Évidemment ce pourrait être
des plastides déformés par les fixateurs, dilatés et
fusionnés entre eux. Cependant il est rare que les
altérations des plastides donnent des figures sem-
blables... Mon opinion est que ces figures se rapportent plutôt
au système vacuolaire, qui est connu depuis très peu de temps. Ce
système vacuolaire se différencie parfois irrégulièrement dans les
jeunes cellules traitées par les méthodes mitochondriales et donne
parfois des figures qui rappellent beaucoup les vôtres"...

Mr Guilliermond est étonné que les plastides ne se retrou-
vent que dans ces cellules. Mais j'ai déjà expliqué que, d'après

<footnote n="1">¹) Timberlake, W. G. Starch-formation in Hydrodictyon utriculatum. — Annals of Botany. Vol. 15, 1901.</footnote>
mes recherches, les proplastides se trouvent aussi dans les cellules mères du pollen. Leur constitution cependant est telle, que nous ne pouvons bien les éliminer du protoplasme : „ils se trouvent probablement sous la forme amicronique“, comme je l’ai dit dans ma publication de l’année 1917. Que la structure et la consistance des organes de la cellule peuvent changer au cours de leur ontogénie, c’est une chose bien connue. Seulement il faut ajouter que les corps étoilés dans les grains du pollen chez les *Malvacées* ne sont, d’après mes recherches, que des leucites inactifs. Je suppose alors, que les plastides ne restent pas toujours les mêmes, mais qu’ils changent leur consistance pendant l’évolution de la cellule et se retrouvent dans sa forme la plus connue au moment de leur travail proéminent. Mr Guilliermond dit encore que les figures ne ressemblent en rien à des plastides. Il n’y a rien d’étonnant, puisque les plastides sont beaucoup plus petits après leur émancipation définitive, au moment où ils commencent leur travail énergique.

Evidemment — continue Mr Guilliermond — ce pourrait être des plastides déformés par les fixateurs, dilatés et fusionnés par eux. Mais quelles sont ces déformations ? Mr Guilliermond répond lui-même que cependant il est rare que les altérations des plastides donnent des figures semblables. Examinons les photogrammes joints à ce mémoire (pl. I). Ce sont les images de la même cellule prises à deux niveaux différents. Ni l’une, ni l’autre ne nous montre aucune perturbation que nous puissions remarquer dans le cytoplasme : ni vacuolisation, ni précipitation anormale. Si c’était un effet produit par le fixateur, il se ferait remarquer aussi dans le cytoplasme, au moins sous forme d’une zone spéciale autour des leucites et peut-être également autour du noyau. Rien de pareil. Le cytoplasme est granuleux, comme il l’est toujours, quand il et bien fixé, et les éléments en question sont immédiatement entourés par les ruisseaux protoplasmiques; et encore plus : ils sont réunis au cytoplasme par des filets très délicats. Si nous comparons les figures du texte ou des planches de Mr Lundegardh de l’année 1910, nous verrons tout de suite les différences très profondes entre les leucites déformés par les agents fixateurs, appliqués par Mr Lundegardh et les corps observés par moi dans les gones chez *Malva*. Et Mr Guilliermond a raison, quand il dit : „...qu’il est rare que les altérations des plastides donnent des figures semblables“, parce qu’à mon avis nous avons à faire chez *Malva* à des plastides presque ou même tout à fait normaux. Pourquoi dis-je „normaux“ ? Les raisons sont les mêmes que celles qu’indique Mr Lundegardh. Il
dit: „on peut dire que les fixateurs qui fixent bien le cytoplasme et les autres parties de la cellule, fixent aussi bien les leucites“ (L. c., p. 346). Et un peu plus loin: „Das Protoplasma bei *Vicia Faba* ist im Leben emulsionsartig oder wabig. In den fixierten Präparaten ist es fädig gerinnselig“. (L. c., p. 452). Mes photogrammes montrent bien, comme je l’espère, que la fixation était bonne et que nous avons à faire avec des figures normales et non pathologiques. Acceptant la plupart de remarques de Mr Lundegardh à propos de l’effet de la fixation sur le contenu de la cellule, je ne peux pas ne pas accentuer que les généralisations exposées par l’auteur dans la page 352 sont un peu exagérées. Grâce aux recherches de Mr Guilliermond et à celles de ses élèves nous savons déjà que les vacuoles donnent des figures extraordinairement originales, non seulement après la fixation, mais aussi dans la cellule intacte.

Enfin suivant l'opinion de Mr Guilliermond, „ces figures se rapportent plutôt au système vacuolaire, qui est connu depuis très peu de temps“. J'indiquais déjà plus haut que d'après ma première idée, dans ces éléments je ne voyais rien de plus que des vacuoles, connus chez les *Gymnospermes* sous le nom „des corps de Hofmeister“. Mais, après un nouvel examen très scrupuleux des préparations anciennes, ainsi que des préparations que j'ai obtenues par des méthodes spéciales, j'ai changé d'opinion sur la manière de voir exposée dans ma publication de l'année 1917. Et pourquoi? Premièrement, parce que le cycle de l'évolution de ces corps me prouvait que la vacuolisation du cytoplasme est indépendante de ces éléments. Deuxièmement parce que la structure de ces corps et tout à fait différente de celle des vacuoles auxquelles pense Mr Guilliermond. Dans tous les dessins de Mr Guilliermond ainsi que dans ceux de ses élèves, nous ne trouvons rien de semblable aux éléments que j'ai décrits. Au contraire, tous les dessins en question montrent que nous pouvons, à chaque moment de l'évolution de la cellule, déterminer très facilement ses vacuoles, ainsi que les autres éléments figurés. Nous avons partout un signe presque infaillible dans une zone claire qui entoure de tous les côtés le contenu fortement coloré de la vacuole. Ce contenu ne nous montre aucune structure visible. Il forme une boule ou un corps irrégulier, parfois d'une forme assez originale (voyez les figures de Mr Guilliermond ou celles de son élève, Mr Emberger), mais dépourvu de structure externe ou interne.

Qu'apercevons-nous dans les éléments de mes préparations? Nous voyons dans les gones des corps d'une forme aussi très irrégulière et parfois extrêmement fantasque (comparez les figures de
la planche I qui représente les gones de *Malva silvestris* photographiées avec l'objectif apochromatique Zeiss d. f. 2 mm ap. num. 1.30, l'oculaire de projection 9 et la distance de la plaque à l'oculaire égale à 110 cm). Mais dans tous les cas ils sont entourés immédiatement du cytoplasme, comme je l'ai déjà expliqué. Nous ne voyons aucune zone que nous puissions comparer avec la zone si bien marquée dans les vacuoles. Dans ma publication de l'année 1912 je discutais déjà les ressemblances et les différences entre les éléments que j'ai trouvés et les „corps de Hofmeister“; et dans la note présente je ne m'en tiendrai qu'à ce que j'ai dit dans les pages 2-me et quelques autres encore. Ici je ne veux qu'attirer l'attention du lecteur sur le travaux de MMº Derschau, Sapehin et Famintzin afin de comparer leurs résultats avec les miens.

Mr Derschau dans son travail sous le titre : „Der Austritt ungelöster Substanz aus dem Zellkerne“ (Archiv für Zellforschung. Bd. 14, H. 2, 1915) poursuit l'idée que les plastides dérivent du noyau et nous montre quelques moments de cette action. Mais tous ces moments ne nous intéressent pas maintenant. Je veux seulement insister sur la structure des chloroleucites qui p. ex. sont représentés par Mr Derschau dans la fig. 10 de la planche XIII. Nous y voyons des corps assez petits, colorés en vert et possédant une trame dans laquelle sont disséminés des grains noirs. Nous constatons la même chose dans la figure 12 de la planche XVII d'un autre mémoire publié par Mr Derschau sous le titre : „Zum Chromatindualismus der Pflanzenzelle“ (Archiv. f. Zellforschung. Bd. 12, H. 2, 1914). D'après l'auteur nous avons dans les chloroplastes deux substances; la plastine qui forme la trame et la nucleine qui produit des petits grains. Mr Derschau explique que la première substance est homologue à celle qui se trouve dans les pyrénoïdes. Chez *Physcomitrium pyriforme* d'après Mr Sapehin („Untersuchungen über die Individualität der Plastide“. Archiv f. Zellforschung, Bd. 13, H. 3, 1915) le leucite a l'aspect et la structure qui rappellent d'une manière extraordinaire les fig. 16, 17, 18 et 19 de la planche III de mon travail. Il faut encore ajouter que déjà Hofmeister (1851) et plus recemment (1900) Mr Fitting ont décrit les leucites comme des corps formés du cytoplasme et composés de grains assez grands. Enfin Famintzin dans un mémoire publié en 1893 a mis en évidence que chez *Helianthus annuus* les chloroleucites se développent à l'intérieur de la masse des grains composés des matières albuminoïdes. L'auteur a trouvé des figures comformes à son interprétation dans le matériel fixé par la méthode de Zimmer-
mann et traité par l'acide acétique à 1%. Cette opinion de l'auteur russe était complètement oubliée; je ne l'ai retrouvée que dans le travail d'un américain, Mr Miller ("The origin of the chloroplasts in the cotyledons of Helianthus annuus". Botanical Gazette, 1911) qui rejette absolument l'idée de Famintzin. A mon avis, il faut répéter les recherches de Famintzin, parce que quelques-unes de ses figures se rapportent peut-être au moment que j'ai observé.

Pour le moment je m'astreins à cela en faisant remarquer que le but de cet article était d'attirer l'attention du lecteur sur les éléments que je considère comme les premiers stades de l'évolution des plastides dans les gonotocontes et dans les gones chez *Malva*. J'espère qu'un avenir prochain nous apportera là-dessus un éclaircissement décisif.

Varsovie. Institut de Botanique Générale de l'Université.
(Wpłynęło do redakcji 30 listopada 1922).