# Effet Larvicide de l'Huile Essentielle d'Eucalyptus globulus Labill. (Myrtaceae) sur Pectinophora gossypiella S. et Thaumatotibia leucotreta M. (Lepidoptera), Ravageurs Carpophages du Cotonnier au Togo

**Nafadjara Abouwaliou Nadio**

Université de Kara, Institut Supérieur des Métiers de l'Agriculture, Laboratoire des Sciences Agronomiques et Biologiques Appliquées, Togo
Université de Lomé, Ecole Supérieure d'Agronomie, Laboratoire de Recherche sur les Agroressources et la Santé Environnementale, Togo

**Bigala Gmasson**

Université de Kara, Institut Supérieur des Métiers de l'Agriculture, Laboratoire des Sciences Agronomiques et Biologiques Appliquées, Togo

**Essolakina Magnim Bokobana**

Université de Kara, Institut Supérieur des Métiers de l'Agriculture, Laboratoire des Sciences Agronomiques et Biologiques Appliquées, Togo

Université de Lomé, Ecole Supérieure d'Agronomie, Laboratoire de Recherche sur les Agroressources et la Santé Environnementale, Togo

**Pikassalé Akantetou Kantetou**

Institut Togolais de Recherche Agronomique, Lomé, Togo

**Wiyao Poutaouli**

Laboratoire de Biologie Animale et de Zoologie, Faculté des Sciences, Université de Lomé, Lomé, Togo

**Koffi Koba**

**Komla Sanda**

Université de Lomé, Ecole Supérieure d'Agronomie, Laboratoire de Recherche sur les Agroressources et la Santé Environnementale, Togo

Doi:10.19044/esj.2023.v19n30p181

Submitted: 29 July 2023

Copyright 2023 Author(s)

Accepted: 17 October 2023

Under Creative Commons CC-BY 4.0

Published: 31 October 2023

OPEN ACCESS

**Cite As:**

Nadio N.A., Gmasson B., Bokobana E.M., Kantetou P.A., Poutaouli W., Koba K. & Sanda K. (2023). *Effet Larvicide de l'Huile Essentielle d'Eucalyptus globulus Labill. (Myrtaceae) sur Pectinophora gossypiella S. et Thaumatotibia leucotreta M. (Lepidoptera), Ravageurs Carpophages du Cotonnier au Togo*. European Scientific Journal, ESJ, 19 (30), 181.
https://doi.org/10.19044/esj.2023.v19n30p181
Résumé

L’usage massif des pesticides chimiques en protection phytosanitaire présente un danger énorme sur la santé publique et sur l’environnement. Il s’impose de trouver des moyens de protection écologique respectueux de l’environnement. Dans cette étude, l’activité insecticide de l’huile essentielle d’Eucalyptus globulus a été évaluée au laboratoire et en milieu réel contre deux ravageurs importants du cotonnier, Pectinophora gossypiella et Thaumatotibia leucotreta. Les larves de ces ravageurs ont été exposées d’abord à l’effet toxique des différentes concentrations de l’huile essentielle par test de contact et par ingestion au laboratoire. Les taux de mortalité enregistrés ont été comparés aux témoins absolus et de référence. Les résultats ont montré que l’huile essentielle d’E. globulus a exercé une activité insecticide importante sur les larves. En effet, l’huile essentielle a entraîné un taux de mortalité de 100 et 99% à la dose 1µl/ml respectivement sur P. gossypiella et T. leucotreta après 24 heures d’exposition au test de contact. Avec le test d’ingestion, les taux de mortalité ont été 36 et 30,78% respectivement sur P. gossypiella et T. leucotreta. En milieu réel, les résultats des traitements à base des formulations d’huile essentielle d’E. globulus en comparaison avec l’insecticide de référence ont montré que les infestations des populations de P. gossypiella et T. leucotreta ont été plus faibles dans les modalités de traitement à base d’huile essentielle de E. globulus à 1µl/ml (TE3). L’analyse sanitaire des capsules vertes a montré une réduction du nombre de ravageurs de 6,25±1,29 T. leucotreta par plant dans les parcelles témoins absolus à 3,29±0,52 dans les parcelles à traitement TE3. Il a été observé également une réduction du nombre de 9,04±1,38 P. gossypiella par plant (témoin absolu) à 4,13±0,39 (TE3). Les rendements moyens élevés en coton graine ont été de 1933,10±0,29Kg et 1927,08±0,12Kg/ha respectivement avec le témoin référence TV et TE3. Il a été faible dans les parcelles témoins absolus avec 1197,92±0,33Kg/ha. L’extrait d’E. globulus possède une activité insecticide potentielle au laboratoire comme au champ.

**Mots-clés:** Larvicide, cotonnier, *Pectinophora gossypiella*, *Thaumatotibia leucotreta*, huile essentielle, *Eucalyptus globulus*, Togo
# Larvicidal Effect of the Essential Oil of *Eucalyptus globulus* Labill. (Myrtaceae) on *Pectinophora gossypiella* S. and *Thaumatotibia leucotreta* M. (Lepidoptera), Carpophagous Pests of Cotton in Togo

**Nafadjara Abouwaliou Nadio**

Université de Kara, Institut Supérieur des Métiers de l'Agriculture,
Laboratoire des Sciences Agronomiques et Biologiques Appliquées, Togo
Université de Lomé, Ecole Supérieure d'Agronomie, Laboratoire de
Recherche sur les Agroressources et la Santé Environnementale, Togo

**Bigala Gmasson**

Université de Kara, Institut Supérieur des Métiers de l'Agriculture,
Laboratoire des Sciences Agronomiques et Biologiques Appliquées, Togo

**Essolakina Magnim Bokobana**

Université de Kara, Institut Supérieur des Métiers de l'Agriculture,
Laboratoire des Sciences Agronomiques et Biologiques Appliquées, Togo
Université de Lomé, Ecole Supérieure d'Agronomie, Laboratoire de
Recherche sur les Agroressources et la Santé Environnementale, Togo

**Pikassalé Akantetou Kantetou**

Institut Togolais de Recherche Agronomique, Lomé, Togo

**Wiyao Poutaouli**

Laboratoire de Biologie Animale et de Zoologie, Faculté des Sciences,
Université de Lomé, Lomé, Togo

**Koffi Koba**

**Komla Sanda**

Université de Lomé, Ecole Supérieure d'Agronomie, Laboratoire de
Recherche sur les Agroressources et la Santé Environnementale, Togo

## Abstract

The massive use of chemical pesticides in plant protection poses an
enormous threat to public health and the environment. We need to find
ecological protection methods that respect the environment. In this study, the
insecticidal activity of *Eucalyptus globulus* essential oil was evaluated in the
laboratory and in the field against two major cotton pests, *Pectinophora
gossypiella* and *Thaumatotibia leucotreta*. The larvae of these pests were first
exposed to the toxic effect of different concentrations of the essential oil by
contact test and by ingestion in the laboratory. The mortality rates recorded
were compared with absolute and reference controls. The results showed that
the essential oil of *E. globulus* exerted significant insecticidal activity on the
larvae. Indeed, the essential oil caused a mortality rate of 100 and 99% at the
dose of 1µl/ml respectively on *P. gossypiella* and *T. leucotreta* after 24 hours
of exposure to the contact test. With the ingestion test, the mortality rates were
36 and 30.78% respectively on *P. gossypiella* and *T. leucotreta*. In the real
environment, the results of treatments based on formulations of essential oil
of *E. globulus* in comparison with the reference insecticide showed that
infestations of *P. gossypiella* and *T. leucotreta* populations were lower in
treatment modalities based on essential oil of *E. globulus* at 1µl/ml (TE3).
Health analysis of the green bolls showed a reduction in the number of pests
from 6.25±1.29 *T. leucotreta* per plant in the absolute control plots to
3.29±0.52 in the TE3 treatment plots. There was also a reduction in the number
of *P. gossypiella* from 9.04±1.38 per plant (absolute control) to 4.13±0.39
(TE3). High average yields of seed cotton were 1933.10±0.29Kg and
1927.08±0.12Kg/ha respectively with the TV and TE3 reference controls. It
was low in the absolute control plots with 1197.92±0.33Kg/ha. *E. globulus*
extract has potential insecticidal activity both in the laboratory and in the field.

**Keywords:** Larvicide, cotton, *Pectinophora gossypiella*, *Thaumatotibia leucotreta*, essential oil, *Eucalyptus globulus*, *Togo*

**Introduction**

Le coton occupe une place importante dans la formation du produit
intérieur brut (PIB) et le revenu des producteurs (MAEP, 2013). Il a joué un
rôle essentiel dans le développement économique de nombreux pays
d'Afrique de l'Ouest et reste encore aujourd'hui une source importante de
revenus pour de nombreux exploitants agricoles. Le coton est cultivé depuis
plus d'un siècle en Afrique de l'Ouest et cette région compte une industrie
textile traditionnelle non négligeable depuis plus de 50 ans (PR-PICA, 2013).
Malgré les problèmes économiques auxquels ce secteur est confronté sans
cesse, les facteurs écologiques influencent également la productivité
cotonnière. En effet, en culture cotonnière, la faune entomologique constitue
un des facteurs les plus importants dans les baisses de productivité et de
rendement. La maîtrise des arthropodes ravageurs représente donc une
opération importante dans la production cotonnière (Matthews, 1989). Au
Togo, l'entomofaune nuisible du cotonnier est assez diversifiée et dominée
essentiellement par les Lépidoptères carpophages: *Helicoverpa armigera*
Hübner (Noctuidae), *Earias spp* (Noctuidae), *Diparopsis watersi* Rothschild
(Noctuidae), *Thaumatotibia leucotreta* Meyrick (Tortricidae), *Pectinophora
gossypiella* Saunders (Gelechiidae) et phyllophages : Haritalodes (Syllepte)
derogata Fabricius (Crambidae), *Cosmophila flava* Fabricius (Noctuidae),
*Spodoptera littoralis* Boisduval (Noctuidae) (Tozoou et al, 2014). Cependant,
l'extension géographique de cette culture, son alternance ou son association
avec les cultures maraîchères et vivrières et son amélioration génétique ont
pour conséquences, l'évolution de la diversité du faciès parasitaire (Poutouli et Maldès, 2000 ; Poutouli et al., 2011) avec un impact économique de certains ravageurs considérés comme mineurs il y a quelques années. Parmi ces ravageurs, il y a la mouche blanche : *Bemisia tabaci* Gennadius (Aleyrodidae), le puceron : *Aphis gossypii* Glover (Aphididae) et des hétéroptères (punaises) (Akantetou et al., 2014). Ils sont très polyphages (Poutouli, 1992), et mobiles pour passer assez facilement d'une culture à une autre. Plusieurs espèces de Miridae, de Pyrrhocoridae et de Pentatomidae deviennent un facteur entomologique important par rapport à leur densité et aux dégâts qu'ils causent au cotonnier, aux autres plantes cultivées et ceci, à tous les stades de développement. Ce qui entraine une baisse de la productivité cotonnière dans plusieurs zones de production.

D'après la Direction de la Nouvelle Société Cotonnière du Togo (NSCT), « la campagne cotonnière 2020-2021 a été un coup dur pour le Togo, qui n'a produit que 67 000 tonnes de coton, soit une baisse de 43 % par rapport à l'année précédente (116 000 tonnes) et l'un des facteurs importants de cette baisse est lié aux attaques des ravageurs ». Pour remédier à ce problème depuis des années les pesticides chimiques de synthèse ont été utilisés, et ces derniers ont des conséquences néfastes sur l'environnement, la santé humaine, appauvrissent également les sols et ont un effet néfaste sur les insectes pollinisateurs. Ce qui nous amène à opter pour une approche intégrée qui consiste à l'utilisation des pesticides biologiques dans la lutte contre ces nuisibles de culture comme *Pectinophora gossypiella* et *Thaumatotibia leucotreta* qui représentent des ravageurs carpophages redoutables du cotonnier au Togo. Cette étude vise à évaluer les activités larvicides de l'huile essentielle d'Eucalyptus globulus sur *Pectinophora gossypiella* et *Thaumatotibia leucotreta* au laboratoire et en milieu réel. Spécifiquement, il s'agit d'évaluer au laboratoire les sensibilités de *P. gossypiella* et de *T. leucotreta* à l'huile essentielle d'E. globulus et de déterminer au champ l'efficacité biocontrôle des formulations insecticides à base de l'huile essentielle de E. globulus sur ces chenilles endocarpiques.

## Matériel et Méthodes

### Cadre de l'étude

Les travaux de bioessais ont été réalisés au Laboratoire des Sciences Agronomiques et Biologiques Appliquées (LaSABA) de l'Institut Supérieur des Métiers de l'Agriculture (ISMA) de l'Université de Kara. Les tests expérimentaux en culture cotonnière ont été réalisés à la Station d'Expérimentation Agronomique de Kabou de coordonnées géographiques 9°27'0" N et 0°49'0" E (Figure 1). Avec un sol de type ferrugineux tropical, la zone Kabou jouit d'un climat sub-sahélien avec une saison pluvieuse (de mai à octobre) et une saison sèche (de novembre à avril). La pluviométrie moyenne
annuelle est de 1180 mm d'eau (Données de la Station météorologique de la région de la Kara).

<figure><img src="image_1.png" /><figcaption>Figure 1. Carte de la zone d'expérimentation Source : Carte originale élaborée</figcaption></figure>

## Matériel végétal

Les feuilles fraîches d'E. globulus ont été récoltées et utilisées pour l'extraction de leur huile essentielle. Les essais ont été faits sur *Gossypium hirsutum*, variété STAM 190 vulgarisée par les institutions agronomiques en milieu paysan.

## Matériel entomologique

Les larves de P. gossypiella et de T. leucotreta ont été utilisées pour les essais au laboratoire et l'infestation d'une parcelle expérimentale a été faite de manière naturelle sans aucune action humaine. L'élevage en masse des larves de P. gossypiella et de T. leucotreta a été réalisé. Les masses d'œufs des papillons ont été collectées et maintenues sur leur support naturel (organe du plant). Ces derniers ont été incubés dans les boites d'élevage de dimensions 9 cm de diamètre sur 5,5 cm de hauteur. Après éclosion, les larves du premier stade des deux papillons ont été nourries de feuilles fraîches et tendres du
cotonnier. Ces feuilles ont été d'abord lavées à l'eau potable puis laissées sécher avant d'être servies aux larves.

## Produits insecticides utilisés

Les traitements phytosanitaires ont été faits avec des formulations à base d'huile essentielle d'E. globulus et des insecticides chimiques de synthèse à formulations binaires lambdacyhalothrin 30g/l + abamectine 28g/l EC et acétamiprid 32g/l + lambdacyhalothrin 30g/l utilisées à 0,5L par hectare (doses vulgarisées).

## Méthodologie

### Extraction de l'huile essentielle d'E. globulus

L'huile essentielle d'E. globulus utilisée pour le bioessais a été obtenue par la technique d'extraction par entrainement à la vapeur d'eau de la biomasse séchée à l'ombre pendant 2 semaines.

### Tests biologiques

#### Test de contact

Des tests préliminaires de stabilisation de l'émulsion aqueuse de l'huile essentielle de d'E. globulus ont été réalisés et le mélange ayant présenté une stabilité ou une homogénéité parfaite a constitué la solution mère à partir de laquelle nous avons fait les différentes dilutions pour les tests insecticides. La dose zéro, constituée de l'eau distillée et de l'émulsifiant (savon) sert de témoin absolu et le témoin positif, un insecticide chimique de synthèse, lambdacyhalothrin 30g/l + abamectine 28g/l EC et acétamiprid 32g/l + lambdacyhalothrin 30g/l.

L'activité insecticide de ces préparations a été déterminée par la méthode de contact direct entre substance et les insectes traités. A cet effet, une gamme de doses d'émulsions aqueuses des préparations de 0,2 ; 0,4 ; 0,6 ; 0,8 et 1µl.ml⁻¹ a été établie. Un lot de 20 larves (P. gossypiella et de T. leucotra) a été placé dans chaque boîte de Pétri en présence d'organes florofructifères et de morceaux de feuilles de cotonnier mouillés pour les maintenir au frais. A l'aide d'une micro seringue, 40 µl de chaque concentration a été déposé sur chaque larve ; les boîtes ont été aussitôt refermées puis laissées à la température du laboratoire (Température ambiante : 28 °C ; humidité relative 80%) pour les différentes observations.

Le comptage des larves mortes a été fait après 24 h d'exposition. Cette opération est répétée cinq (5) fois pour chaque concentration. Les taux moyens de mortalité ont été déterminés et corrigés par la formule d'Abbott (Abbott, 1925).
$$Mc = \frac{(Mo-Mt)}{(100-Mt)} \times 100$$

Où : Mc = mortalité corrigée en % ; Mt = mortalité observée dans la boîte témoin ; Mo = mortalité observée dans l'essai

## Test d'ingestion

Les tests d'ingestion in vitro ont été effectués selon la méthode Insecticide Resistance Action Committee (Porter, 2009) adaptée. Les jeunes capsules et feuilles fraîches saines de cotonniers collectées ont été trempées pendant 5 secondes dans les différentes doses d'émulsions aqueuses de l'huile essentielle de E. globulus (0,2 ; 0,4 ; 0,6 ; 0,8 et 1µl.ml⁻¹). Les capsules et feuilles saines de cotonniers trempées ont été séchées à l'air libre 5 à 10 minutes avant de les introduire dans des boîtes contenant vingt (20) larves de P. gossypiella ou de T. leucotra pendant 24 heures. Les boîtes avec leurs contenus ont été placées dans les conditions de laboratoire (Température ambiante : 28 °C ; humidité relative 80%) pour les différentes observations. Le comptage des larves mortes a été fait également après 24 h d'exposition comme dans le cas des tests de contact. Cette opération est répétée aussi cinq (5) fois pour chaque concentration. Les taux moyens de mortalité ont été également déterminés par la formule d'Abbott (1925).

## Test en station expérimentale

### Dispositif expérimental

C'est un dispositif en bloc de Fisher à 4 répétitions comportant chacune 5 traitements (objets) : trois (3) traitements (TE1, TE2 et TE3) correspondent à différentes concentrations d'insecticide biologique à base d'huile essentielle d'E. globulus; un (1) traitement avec l'insecticide commercial vulgarisé (TV) et le dernier traitement qui constitue le témoin absolu (ST) ne reçoit aucun traitement insecticide. Le traitement TE1 correspond à la concentration faible d'émulsions aqueuses d'E. globulus (0,6ml/L), TE2 à la concentration moyenne (0,8ml/L) et TE3 à la forte concentration (1ml/L). L'insecticide commercial est lambdacyhalothrin 30g/l + abamectine 28g/l EC et acétamiprid 32g/l + lambdacyhalothrin 30g/l. Chaque traitement (objet) est composé de 5 lignes de 6 m de long et dont les 3 lignes centrales seules ont été traitées. Une répétition ou une parcelle élémentaire de superficie 24m² a été séparée de sa voisine par une distance de 1,5 m. Les lignes ont été séparées de 0,8m.

### Conduite de l'essai

Le nettoyage et le labour sur la parcelle ont été effectués environ 3 semaines avant le semis. Le schéma de semis adopté est celui qui a été
recommandé jusqu'alors en milieu paysan (0,8m x 0,3 m). La dose de semis exécutée a été de 5 graines par poquet. Le démariage a eu lieu trois semaines après le semis pour avoir 2 plants par poquet.

Deux types de fumure minérale ont été apportés : le NPKSB (12-20-18-5-1) et l'Urée (46 % d'azote) aux doses respectives de 150 et 50 kilogrammes à l'hectare. Le premier apport de fumure a lieu au moment du démariage (21<sup>ème</sup> jour après le semis) et le deuxième au moment du buttage (41<sup>ème</sup> jour après semis).

## Observation et collecte des données

Les observations et collectes des données ont consisté à la récolte hebdomadaire des capsules des lignes centrales de chaque traitement élémentaire pour l'analyse sanitaire des capsules. Cette activité s'est déroulée sur une période de 12 semaines. Deux (2) des 3 lignes centrales traitées de chaque parcelle élémentaire ont été utilisée pour faire l'analyse sanitaire des capsules vertes (ASCV) (Figure 1). Le dénombrement de *P. gossypiella* et de *T. leucotreta* par traitement a été fait au laboratoire après analyse sanitaire de ces organes fructifères récoltés.

La récolte a été faite sur la 3ème ligne centrale restante de chaque parcelle élémentaire traitée. Le coton-graine a été regroupé par objet à la fin des récoltes puis pesé. Ces échantillons de coton issus des capsules mures à la récolte ont été répartis en coton blanc et en coton jaune. Ces différents échantillons ont été pesés et le pourcentage moyen du coton jaune (indice de jaune) a été évalué.

<figure><img src="image_2.png" /><figcaption>**Figure 1.** Analyse sanitaire des capsules vertes (Source : Photos originales des travaux)</figcaption></figure>
## Traitement des données

L'analyse statistique des moyennes des taux de mortalité, du nombre moyen de *P. gossypiella* et de *T. leucotreta* et des capsules vertes a été réalisée à l'aide du logiciel STATISTICA 6.0. Les rendements à l'hectare et l'indice de jaune ont été calculés et comparés statistiquement au niveau de chaque essai. Le test de Duncan au seuil de 5 % a permis de discriminer les groupes homogènes de moyennes des différentes données.

## Résultats

### Sensibilité de *P. gossypiella* et de *T. leucotreta* à l'huile essentielle d'E. globulus

### Test de contact

Les taux moyens de mortalités cumulés et corrigés des insectes en fonction de la concentration des substances testées sont présentés dans le tableau 1. Il apparaît dans tous les cas de figure, une augmentation de ces taux moyens. La toxicité des solutions a augmenté avec l'élévation de la concentration, il s'agit d'un effet dose-réponse. Par contact, le taux moyen de mortalité de *P. gossypiella* a évolué de 0% (témoin absolu) à 100% (1µL.ml⁻¹) avec l'huile essentielle et l'insecticide de synthèse.

L'analyse de la variance (ANOVA) a montré une différence significative en fonction des différentes concentrations des produits testés au seuil de 5 % selon le test de Duncan (p=0,00002). En revanche pour les concentrations de 0,8 et 1µl.ml⁻¹ de l'huile essentielle et l'insecticide vulgarisé, il n'y a pas eu de différence significative entre leur taux de mortalité sur *P. gossypiella*.

Les taux moyens de mortalité de *T. leucotreta* ont varié en fonction des différentes concentrations de l'huile essentielle et de l'insecticide vulgarisé testés. Après l'analyse de ces résultats, l'ANOVA a montré une différence significative en fonction des différentes concentrations des produits testés au seuil de 5 % selon le test de Duncan (p=0,00000014). A 1µl.ml⁻¹, il n'y a pas de différence significative entre les taux de mortalité de l'huile essentielle d'eucalyptus et de l'insecticide de synthèse (IS) et également aux concentrations de 0 et 0,2 µl.ml⁻¹ de l'huile essentielle.

L'huile essentielle d'E. globulus a entraîné une augmentation significative de la mortalité des ravageurs. On a remarqué qu'à une même concentration de l'huile essentielle, le taux moyen de mortalité a été plus élevé sur *P. gossypiella* que sur *T. leucotreta*. En effet, la concentration de 0,2µl.ml⁻¹ a induit un taux moyen de mortalité de 16,31 % et 9,15% respectivement sur *P. gossypiella* et *T. leucotreta* (Tableau 1) après 24h d'exposition. On peut déduire que *P. gossypiella* a été plus sensible à l'extrait aqueux d'E. globulus que *T. leucotreta*.
<table><caption>**Tableau 1.** Taux moyen de mortalité de *P. gossypiella* et de *T. leucotreta* après le test de contact</caption><thead><tr><th rowspan="2">Concentrations des produits<br/>µL.mL<sup>-1</sup></th><th colspan="2">Taux de mortalité (%)</th></tr><tr><th><i>T. leucotreta</i></th><th><i>P. gossypiella</i></th></tr></thead><tbody><tr><td>0</td><td>0,00 ± 0,00 a</td><td>0,00±0,00 a</td></tr><tr><td>0,2</td><td>9,15 ± 4,15 a</td><td>16,31±4,27 b</td></tr><tr><td>0,4</td><td>48,84 ±8,99 b</td><td>50,36±5,00 c</td></tr><tr><td>0,6</td><td>61,15 ±9,45 c</td><td>73,78±7,00 d</td></tr><tr><td>0,8</td><td>84,52 ± 5,00 d</td><td>93,94±8,20 e</td></tr><tr><td>1</td><td>99 ± 2,23e</td><td>100±0,00 e</td></tr><tr><td>IS</td><td>99 ± 2,23e</td><td>100±0,00 e</td></tr></tbody></table>

A l'intérieur d'une même colonne, les moyennes affectées d'une même lettre ne diffèrent pas statistiquement entre elles (test de Duncan, p ≤ 0,05)

## Test d'ingestion

L'analyse des résultats montre que la mortalité des larves des deux ravageurs a augmenté avec la concentration en huile essentielle (Tableau 2). Il ressort de l'ensemble des résultats que l'huile essentielle d'E. globulus a induit un pourcentage moyen de mortalité allant de 4,05 à 30,78% sur *T. leucotreta* contre 9 à 36% sur *P. gossypiella* pendant 24h d'exposition respectivement à 0,2µL.mL⁻¹ et à 1µL.mL⁻¹. Avec l'insecticide de synthèse, les taux moyens de mortalité ont été de 32,84% et 38% respectivement sur *T. leucotreta* et sur *P. gossypiella*.

La comparaison des taux moyens de mortalités des ravageurs a montré que l'huile essentielle a augmenté de façon significative la mortalité des insectes par rapport au témoin absolu. Pour toutes les concentrations d'huile essentielle utilisées, le taux moyen de mortalité a été plus élevé dans le cas de *P. gossypiella* que dans celui de *T. leucotreta* (Tableau 2). Donc *P. gossypiella* a été plus sensible également à l'huile essentielle au test d'ingestion.

<table><caption>**Tableau 2.** Taux moyen de mortalité de *P. gossypiella* et de *T. leucotreta* après le test d'ingestion</caption><thead><tr><th rowspan="2">Concentrations des produits<br/>µL.mL<sup>-1</sup></th><th colspan="2">Taux de mortalité (%)</th></tr><tr><th><i>T. leucotreta</i></th><th><i>P. gossypiella</i></th></tr></thead><tbody><tr><td>0</td><td>0 a</td><td>0 a</td></tr><tr><td>0,2</td><td>4,05 ab</td><td>9 ab</td></tr><tr><td>0,4</td><td>10,26 b</td><td>20 bc</td></tr><tr><td>0,6</td><td>18,524 c</td><td>23 bc</td></tr><tr><td>0,8</td><td>24,52 cd</td><td>31 c</td></tr><tr><td>1</td><td>30,78 d</td><td>36 c</td></tr><tr><td>IS</td><td>32,84 d</td><td>38 c</td></tr></tbody></table>

A l'intérieur d'une même colonne, les moyennes affectées d'une même lettre ne diffèrent pas statistiquement entre elles (test de Duncan, p ≤ 0,05%) (p=0,00085 avec *P. gossypiella* et P=0,00064 avec *T. leucotreta*).
## Test de biocontrôle des formulations insecticides à base de l'huile essentielle d'E. globulus en station expérimentale

Les résultats ont montré que le nombre moyen de *P. gossypiella* et *T. leucotreta* par plant varie en fonction des différents traitements (Tableau 3). Avec les traitements ST, TE1, TE2, TE3, et TV, le nombre moyen de chenilles a été respectivement 9,04 ; 7,54 ; 6,63 ; 4,13 et 3,08 chenilles/plant pour *T. leucotreta*. Les traitements qui ont permis d'obtenir un nombre moyen faible de *T. leucotreta* ont été TE3 (4,13 chenilles/plant) et TV (3,08 chenilles/plant). Avec *P. gossypiella*, le nombre moyen de chenilles par plant en fonction des différents traitements a été de 6,25 ; 5,67 ; 6,63 ; 3,29 et 2,71 chenilles/plant respectivement avec ST, TE1, TE2, TE3 et TV. Egalement les traitements TE3 et TV ont réduit le nombre de *P. gossypiella* sur les plants.

A chaque dose d'huile essentielle d'eucalyptus traité, le nombre moyen de ravageur obtenu a été plus faible avec *P. gossypiella* qu'avec *T. leucotreta*. Statistiquement sur les deux ravageurs, le traitement TE3 a démontré un potentiel insecticide identique que TV. Ils ont permis d'avoir un nombre moyen faible de chenilles par plant dans toutes les parcelles élémentaires.

<table><caption>**Tableau 3.** Nombre moyen de *P. gossypiella* et *T. leucotreta* par plant en fonction des traitements</caption><thead><tr><th rowspan="2">Traitements</th><th colspan="2">Nombre moyen d'insectes par plant</th></tr><tr><th><i>T. leucotreta</i></th><th><i>P. gossypiella</i></th></tr></thead><tbody><tr><td>ST</td><td>9,04±1,38a</td><td>6,25±1,29a</td></tr><tr><td>TE1</td><td>7,54±0,88b</td><td>5,67±0,65a</td></tr><tr><td>TE2</td><td>6,63±0,21b</td><td>6,63±0,21a</td></tr><tr><td>TE3</td><td>4,13±0,39c</td><td>3,29±0,52b</td></tr><tr><td>TV</td><td>3,08±0,56c</td><td>2,71±0,81b</td></tr></tbody></table>

A l'intérieur d'une même colonne, les moyennes affectées d'une même lettre ne diffèrent pas statistiquement entre elles (test de Duncan, p ≤ 0,05)

## Analyse sanitaire des capsules vertes

Les pourcentages moyens des capsules vertes saines et des capsules percées en fonction des différents traitements ont été présentés dans la figure 2. Les pourcentages moyens des capsules saines ont été faibles dans les parcelles du témoin absolu (2,5%) et ont augmenté en fonction de la concentration dans les parcelles à traitements de formulations d'huile essentielle. En effet, ce pourcentage moyen a été de 19,5 ; 32 et 46 % respectivement avec TE1 ; TE2 et TE3. Dans le cas de TV, ce pourcentage moyen de capsules saines a été élevé (49,5%). L'analyse de ces résultats par ANOVA a montré une différence significative entre les différents traitements utilisés. Par contre les effets des traitements TE3 et TV ont été statistiquement similaires. Le pourcentage moyen des capsules percées a été élevé dans le témoin absolu (71,9%). Avec les traitements TE3 à l'essence d'E. globulus, ce pourcentage moyen a diminué (23%). Dans le traitement TV, ce
pourcentage moyen de capsules percées a été faible (19,5%) et statistiquement similaire à celui de TE3 (23%) (Figure 2).

<figure><img src="image_3.png" /><figcaption>**Figure 2.** Pourcentages moyens des capsules saines et des capsules percées en fonction des différents traitements</figcaption></figure>

Les histogrammes portant une lettre commune ne sont pas significativement différents selon le test de Duncan au seuil de 5% à l'intérieur de chaque type de données (capsules saines et des capsules percées)
Rendement moyen en coton-graine et indice de jaune

Les rendements moyens en coton-graine et le pourcentage moyen du coton jaune (indice de jaune) sont présentés dans le tableau 4. Les rendements moyens en coton graine obtenus dans les différentes parcelles ont varié en fonction des divers traitements. Avec les traitements à base des émulsions à l'huile essentielle, l'augmentation de la dose a amélioré le rendement moyen en coton graine. En effet, avec les traitements TE1, TE2, TE3 les rendements moyens ont été respectivement de 1427,08 ; 1864,58 et 1927,08 Kg par hectare tandis qu'il a été de 1197,92 Kg/ha avec le témoin absolu. Le rendement du témoin de référence (1933,10 Kg/ha) a été statistiquement identique à celui du traitement à la dose élevée TE3 de la formulation aqueuse d'E. globulus. Les pourcentages de coton jaune dans les parcelles traitées au biopesticide à base d'E. globulus ont été faibles par rapport au pourcentage du témoin absolu ST (Tableau 4). Au niveau du témoin de référence cet indice jaune reste également faible (2,7%) et sans différence significative avec celui de TE3 (3,24%).

<table><caption>**Tableau 4.** Rendement moyen en coton graine et indice de jaune</caption><thead><tr><td>Traitements</td><td>Rendement (en Kg/ha)</td><td>Indice de jaune (en %)</td></tr></thead><tbody><tr><td>ST</td><td>1197,92±0,33a</td><td>8,03 d</td></tr><tr><td>TV</td><td>1933,10±0,29cd</td><td>2,70 a</td></tr><tr><td>TE1</td><td>1427,08±0,15b</td><td>6,09 bc</td></tr><tr><td>TE2</td><td>1864,58±0,46c</td><td>4,47 b</td></tr><tr><td>TE3</td><td>1927,08±0,12cd</td><td>3,24 a</td></tr></tbody></table>

A l'intérieur d'une même colonne, les moyennes affectées d'une même lettre ne diffèrent pas statistiquement entre elles.
## Discussion

L'activité insecticide de l'huile essentielle d'E. globulus a été évaluée à travers les taux moyens de mortalités de P. gossypiella et T. leucotreta. L'huile essentielle à des concentrations de 0,8 et 1µl.ml⁻¹ a eu des effets similaires que l'insecticide de synthèse. Les résultats de l'analyse de variance ont indiqué que la mortalité de P. gossypiella et T. leucotreta a été significativement dépendante de la concentration (p=0,00002). En effet, l'évolution de la mortalité des larves des insectes a été faite suivant l'augmentation de la concentration de l'huile essentielle. Ainsi, après 24 heures d'exposition des larves au test de contact à la concentration de 0,4µl.ml⁻¹, une mortalité moyenne d'environ 50% a été obtenue sur P. gossypiella et sur T. leucotreta. Par contre au test d'ingestion, tous les taux moyens de mortalité induisent par les concentrations n'ont pas atteint les 50% de mortalité sur P. gossypiella et T. leucotreta. Le potentiel insecticide de l'huile essentielle d'E. globulus a été plus élevé avec le test de contact. Ces faibles taux de mortalité remarqué au niveau du test d'ingestion pourraient s'expliquer par le refus de certaines larves de se nourrir et le stress de changement de milieu de vie. Au test de terrain en station expérimentale, la densité des populations de P. gossypiella et T. leucotreta dans les capsules des cotonniers a été réduit par tous les traitements des formulations d'émulsions aqueuses de l'huile essentielle d'E. globulus et de l'insecticide de synthèse permettant ainsi, l'augmentation du rendement en coton-graine dans toutes les parcelles traitées (TE1=1427,08Kg/ha; TE2=1864,58Kg/ha; TE3=1927,08Kg/ha et TV=1933,10Kg/ha par à rapport au témoin absolu ST =1197,92Kg/ha). La réduction des attaques sur les capsules par plant est compensée par la diminution du nombre de chute de ces capsules, si bien que les rendements et la qualité (réductions des indices jaunes) du coton graine ont été améliorés.

L'activité insecticide de l'huile essentielle d'E. globulus a été démontré par plusieurs études comme les travaux de Taleb-Toudert (2015) où l'essence d'E. globulus a induit 100% de mortalité sur les adultes de *Callosobrucus maculatus* (Coleoptera), après 96 heures d'exposition à la dose de 4µl/l. Cette toxicité de l'huile essentielle a été révélée également par les travaux de Bokobana et al. (2022) sur *Sitophilus zeamais* et *Tribolium castaneum* après 24 heures d'exposition. Les résultats sont en accord avec ceux des travaux de Aiboud (2011) qui ont indiqué le potentiel insecticide des huiles essentielles de Myrte, Eucalyptus, Origan et clous de girofle sur *C. maculatus*. Selon ces travaux un taux de mortalité de 100% a été obtenu chez les jeunes larves de 12 jours exposés à ces huiles à la dose de 0,4µl/L et les larves de plus de 18 jours résistent mieux aux traitements que les larves de 12 jours. De plus, les travaux de Taib (2015) sur l'huile essentielle d'E. globulus et de *Rosmarinus officinalis* contre la bruche du haricot, *Acanthoscelides*
*obtectus* Say (Coleoptera, Bruchidae) ont indiqué le pouvoir insecticide de ces deux plantes. En effet, l'ingestion de ces huiles essentielles a entraîné une mortalité de 100% à la dose de 8µL après 12 heures d'exposition. Les mêmes travaux ont montré que ces huiles ont aussi une activité répulsive sur les adultes d'A. *obtectus* avec un taux de 99% à l'Eucalyptus et un taux de 77% à l'huile de romarin. L'étude sur l'efficacité de l'huile essentielle d'eucalyptus réalisée par Tunc et al. (2000) a montré que l'huile essentielle a provoqué une mortalité de 18% sur *Tribolium confusum* après 96 heures d'exposition. Il en est de même avec les travaux de Benazzeddine (2010) qui ont démontré que cette huile essentielle a exercé une mortalité de 72,63% sur *T. confusum*. Les travaux de Russo et al., (2018) ont montré que l'huile essentielle d'E. globulus a été plus toxique sur *Gynaikothrips ficonum* M. (CL50= 0,031µL) et *Aphis nerii* B. (CL50= 0,099µL) sur des disques filtrants après 12 heures d'exposition. D'autres travaux comme ceux de Boukeroui (2020) ont montré que l'huile essentielle d'E. globulus a des effets insecticides sur le xylophage de cèdre de l'Atlas (Scolytus numidicus Bris) qui est un insecte de forêt. L'effet insecticide d'E. globulus et de *Globularia alypum* par contact a été également révélé dans les travaux de Abid (2019) sur *Tribolum castaneum*. Selon cet auteur une mortalité de 22 ; 30 ; 51 et 67 % des adultes a été obtenue après 24 heures d'exposition à l'HE d'E. globulus par contact respectivement aux doses de 2, 4, 8 et 16µL. Cette toxicité à ces doses a démontré une efficacité insecticide de l'huile essentielle d'E. globulus.

Bittner et al. (2008) ont testé l'efficacité des huiles essentielles de cinq plantes aromatiques sur les *Acanthoscelides obtectus* et *Sitophilus zeamais*. Les résultats issus de ces travaux ont prouvé que l'huile extraite d'E. globulus et de *Thymus vulgaris* (Lamiacées) ont été toxiques sur S. zeamais. Ghenaiet et Aouidet (2016) ont réalisé des tests de toxicité appliqués sur les adultes de *Rhyzopertha dominica* avec des différentes concentrations d'E. globulus 25, 50, 75, 100 et 125 µl/L. Après 24 heures d'exposition, ils ont obtenu une mortalité de 41% jusqu'à 100% avec une relation dose-réponse, donc un pouvoir insecticide puissant avec une concentration létale CL50 qui est de 33,39µl/L. Les résultats des travaux obtenus corroborent également avec ceux de Kumar et al. (2012). En effet ces auteurs ont mis des larves et des pupes des mouches domestiques en présence de l'huile essentielle d'E. globulus et ils ont constaté que la mortalité des larves et pupes a augmenté en fonction de la concentration.

D'autres chercheurs ont effectué des tests de toxicité avec des composés isolés à partir des huiles essentielles d'E. globulus sur les œufs, larves et adultes d'insectes. Yang et al. (2004) ont prouvé une activité ovicide et aldulticide des terpénoides contre *Pediculus humanus capitis* (Anoplura, Peticulidae). Ces résultats ont été prouvés par les travaux de Regnault-Roger (1997) signalant que plusieurs monoterpénoides sont aphicides, utiles contre
*Rhopalosipum padi* (Homoptera, Aphicidae). Les travaux de Koziol (2015) indiquant que la présence de 1,8-cinéole dans l'huile essentielle d'E. globulus va lui conférer des propriétés mucolytique, antibactérienne, répulsives et insecticides. Ainsi on peut en déduire que les activités larvicides observées dans nos travaux pourraient être dues aux molécules bioactives de plusieurs monoterpénoides. Les résultats de nos travaux de recherches sur les propriétés insecticides de l'huile essentielle d'E. globulus sont confirmés par plusieurs études et cela constitue un pas de plus dans la lutte phytosanitaire durable contre les ravageurs de cultures.

## Conclusion

L'utilisation non rationnelle des pesticides chimiques de synthèse dans la protection phytosanitaire du cotonnier au Togo constitue une menace pour l'environnement et le système de production agricole. En effet une fois libérées dans la nature, ces molécules chimiques de synthèse ont un impact négatif sur la santé de l'utilisateur et des consommateurs, sur la biodiversité du sol et constituent une menace pour les auxiliaires. Cette étude réalisée au laboratoire et en milieu réel contre deux ravageurs carpophages majeurs du cotonnier a montré que l'huile essentielle d'E. globulus possède une potentielle activité insecticide permettant une augmentation du rendement en coton graine.

Au test de contact et d'ingestion, les fortes concentrations de l'huile essentielle d'E. globulus ont induit de forts taux moyens de mortalité similaires à ceux de l'insecticide de synthèse vulgarisé. Au champ expérimental, comparativement aux nombres de chenilles par plant dans les témoins absolus (9,04±1,38 de *T. leucotreta* et 6,25±1,29 de *P. gossypiella*), le traitement TE3 a permis de réduire la présence de ces ravageurs sur les cotonniers absolus (4,13±0,39 de *T. leucotreta* et 3,29±0,52 de *P. gossypiella*) et donc de diminuer les dégâts sur les plants de cotonniers. La réduction du nombre moyen de ravageurs par plant a été compensée par la diminution du nombre moyen des capsules trouées, si bien que les rendements moyens ont été améliorés avec des indices jaunes faibles. Les résultats obtenus dans la présente étude pourraient contribuer à l'amélioration quantitative et qualitative de la production du coton. Au vu de ces résultats, cette huile essentielle peut être utilisée dans des formulations phytosanitaires contre les ravageurs en culture cotonnière dans une optique de protection durable de culture.

**Conflits d'intérêt** : Nous, auteurs, déclarons que nous n'avons pas de conflit d'intérêt.
**Disponibilité des données** : Toutes les données sont incluses dans le contenu de l'article.

**Déclaration de financement** : Les auteurs n'ont obtenu aucun financement pour cette recherche.

**Paternité** : Nafadjara Abouwaliou NADIO, Bigala GMASSON, Essolakina Magnim BOKOBANA, Pikassalé AKANTETOU, Wiyao POUTOULI, Koffi KOBA, Komla SANDA ont contribué à part égale aux travaux et à la rédaction de cette publication.

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