# Quel est l'impact de la congélation lente sur les paramètres morphométriques tridimensionnels (3D) des noyaux spermatiques humains ?

Oriana Carcy, Sophie Desset, Tristan Dubos, Chloé Puceat, Maïssa Andrieux, Gilles Sireta, Bruno Pereira, Aline V. Probst, Christophe Tatout, Florence Brugnon, et al.

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## To cite this version:

Oriana Carcy, Sophie Desset, Tristan Dubos, Chloé Puceat, Maïssa Andrieux, et al. Quel est l'impact de la congélation lente sur les paramètres morphométriques tridimensionnels (3D) des noyaux spermatiques humains?. 40ème congrès de la SALF, Société d'Andrologie de Langue Française, Jun 2024, Marseille, France. **hal-05248012**

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Submitted on 10 Sep 2025

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UNIVERSITÉ
Clermont
Auvergne

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Inserm

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CLERMONT-FERRAND

CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE

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# Quel est l'impact de la congélation lente sur les paramètres morphométriques tridimensionnels (3D) des noyaux spermatiques humains ?

Oriana CARCY - doctorante 2ème année

IMoST UMR 1240 INSERM : Equipe 2 dirigée par Florent CACHIN (PU-PH)
Directrice de thèse : Florence Brugnon (PU-PH), co-encadrante Hanae Pons (MCU-PH) - Task group Fertilité et Cancer
# Quel est l'impact de la congélation lente sur les paramètres morphométriques tridimensionnels (3D) des noyaux spermatiques humains ?

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La cryoconservation altère les paramètres spermatiques<fnref n="1" /> mais aussi nucléaires...

⇒ Augmentation de la fragmentation de l'ADN², décondensation de la chromatine³

⇒ Augmentation du stress oxydatif⁴, formation de cristaux de glace intracellulaires et déshydratation cellulaire⁵

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## Conséquences sur la structure de la chromatine?

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Alladin *et al.*, 2013

<footnote n="1">¹Agarwal *et al.*, 2008; ²Grunewald *et al.*, 2009, Lusignan *et al.*, 2018; ³Boitrelle *et al.*, 2012, Fortunato *et al.*, 2012; ⁴Aitken *et al.*, 2010; ⁵Gao & Crister, 2000, Gilmore *et al.*, 2000, Watson, 2000</footnote>
Quel est l'impact de la congélation lente sur les paramètres morphométriques tridimensionnels (3D) des noyaux spermatiques humains ?

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La cryoconservation altère les paramètres spermatiques<fnref n="1" /> mais aussi nucléaires...

⇒ Augmentation de la fragmentation de l'ADN², décondensation de la chromatine³

⇒ Augmentation du stress oxydatif⁴, formation de cristaux de glace intracellulaires et déshydratation cellulaire⁵

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Conséquences sur la structure de la chromatine?

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<footnote n="1">¹Agarwal et al., 2008; ²Grunewald et al., 2009, Lusignan et al., 2018; ³Boitrelle et al., 2012, Fortunato et al., 2012; ⁴Aitken et al., 2010; ⁵Gao & Crister, 2000, Gilmore et al., 2000, Watson, 2000</footnote>
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70 acquisitions selon l'axe Z (0,2µm)
## Paramètres spermatiques et nucléaires

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Vitalité (Vit.) ↓↓↓

Mobilité totale et progressive (MT et MP) ↓↓

Fragmentation ADN (Frag.) ↑

## Paramètres morphométriques 3D

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350-850 noyaux/patient

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Volume (Vol.) : Impact signifiatif pour 50% des patients

Volume total de la Chromatine Hypercondensée (VCHT) ↓↓↓

Nombre de parties constitutives de la Chromatine Hypercondensée (NbCH) ↑↑

<footnote>*, ** et *** indiquent p<0,05, <0,01 et <0,001</footnote>

<footnote>Modèle mixte</footnote>

<footnote>Vit. = Vitalité; MT = Mobilité Totale; MP = Mobilité Progressive; Frag. = Fragmentation ADN; Décond. = Décondensation ADN; LTS = Longueur des Télomères Spermatiques</footnote>

<footnote>Vol. = Volume; Aplat = Aplatissement; Elong. = Elongation;</footnote>

<footnote>VCHT = Volume de la Chromatine Hyoercondensée Total; NbCH = Nombre de parties de la Chromatine Hypercondensée</footnote>
# Résultats

## Paramètres spermatiques et nucléaires

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Vitalité (Vit.) ↓↓↓

Mobilité totale et progressive (MT et MP) ↓↓

Fragmentation ADN (Frag.) ↑

Modèle mixte

Vit. = Vitalité; MT = Mobilité Totale; MP = Mobilité Progressive; Frag. = Fragmentation ADN; Décond. = Décondensation ADN; LTS = Longueur des Télomères Spermatiques

## Paramètres morphométriques 3D

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350-850 noyaux/patient

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Vol. = Volume; Aplat = Aplatissement; Elong. = Elongation;

VCHT = Volume de la Chromatine Hyoercondensée Total; NbCH = Nombre de parties de la Chromatine Hypercondensée

<footnote>*, ** et *** indiquent p<0,05, <0,01 et <0,001</footnote>
## Paramètres morphométriques 3D

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Modèle mixte

Vol. = Volume; Aplat = Aplatissement; Elong. = Elongation;

VCHT = Volume de la Chromatine Hyoercondensée Total; NbCH = Nombre de parties de la Chromatine Hypercondensée

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<footnote>\*, \*\* et \*\*\* indiquent p<0,05, <0,01 et <0,001</footnote>
1

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Première étude à
réaliser des mesures
exactes du noyau
spermatique

2

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Décondensation de la chromatine hypercondensée
Impact sur spermatozoides vivants >>> morts

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Iannou et Tempest 2019

⇒ Les changements dans les domaines hétérochromatiques peuvent avoir un effet sur l'expression des gènes pendant la fécondation <fnref n="5" />

⇒ Perspectives : Identifier les parties chromosomiques impliquées dans la chromatine hypercondensée

<footnote n="5">⁵ Zalenskaya et al., 2000, Zalensky et al., 2007, Champroux et al., 2016, Jung et al., 2017</footnote>
UNIVERSITÉ
Clermont
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CLERMONT-FERRAND

CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE

IMOST
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Merci à tous nos collaborateurs :

IMoST UMR 1240

Service AMP CECOS

Task group recherche Cancer et Fertilité

Pr. F. BRUGNON ; Dr. H. PONS ; Dr G. MARTEIL ; Dr L. CHAPUT

S. CARLET-DOLLET ; C. RORDIGUES

A. POITRINAL ; M. FIOT ; C. PUCEAT ; L. DUPONT

Service de Cytogénétique

Plateforme de cytométrie en flux Hématologie

Plateforme de microscopie confocale CLIC iGred

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CLIC
CLermont-Ferrand Imagerie Confocale
Microscopie - Imagerie

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I-SITE
CLERMONT
Clermont Auvergne Project

agence de la
Biomédecine

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Contact : oriana.carcy@hotmail.fr