i 2013212 Cette invention concerne des nouveaux amides peptidiques de formule générale R-L-méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninamide, abrégée ci-dessous par 5 commodité sous la forme R-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NE^ dans laquelle R représente les radicaux L-aspartyl-31-sulfonyl-L-tyrosyle, L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-31-sulfonyl-L-tyrosyle, ou isoleucyl-L-séryl~L-aspartyl-L-arginyl-L~aspartyl-31-sulfonyl-L-tyrosyle, et les parties peptidiques respectives énumérées sont 10 des résidus d'acides aminés ; et les intermédiaires et leurs sels utilisés dans leur préparation. Les sels peptidiques concernés ci-dessus comprennent des sels d'addition acides acceptables du point de vue pharmaceutique, tels que chlorhydrates, bromhydrates, acétates, fluoroacétates, comme 15 le trifluoroacétate, chloroacétates comme le dichloroacétate, et etc, de même que des sels d'ammonium tels que dicyclohexylammonium, triéthylammonium, morpholinium, pyridinium, etc, et des sels inorganiques, tels que les sels de métaux alcalins ou alcalino-terreux, par exemple, sodium, potassium, calcium, baryum, etc. 20 Les produits finals de cette invention sont des amides pepti diques contenant des résidus d'acides aminés de L-isoleucine (lieu), L-sérine (Sér), L-arginine (Arg), L-tyrosine (Tyr), acide L-aspar-tique (Asp), L-méthionine (Mét), glycine (Gly), L-tryptophane (Trp) et L-phénylalanine (Phé). 25 On a trouvé que ces produits possèdent l'activité de la cholécystokinine. C'est-à-dire, qu'ils ont le pouvoir de stimuler la contraction de la vésicule biliaire. Donc, ils trouvent une utilité comme aide pour faire un diagnostic dans l'examen aux rayons X de la vésicule biliaire de la même manière que la cholécys-30 tokinine. Pour ces besoins, ils peuvent être administrés soit par voie intraveineuse soit par voie sous-cutanée à une espèce animale (par exemple, chats ou chiens) en une seule dose d'environ 0,008 à 0,012 mg/kg de poids du corps. Pour ce besoin ils peuvent être administrés par voie parenté-35 raie par incorporation de la dose appropriée du composé à des véhicules pour former des produits injectables selon la pratique pharmaceutique standard. Les composés de cette invention peuvent être préparés selon le schéma de la réaction suivante dans lequel B représente le radical z 40 benzyle, les résidus d'acides aminés appropriés sont représentés 69 24641 2 201321 par les abréviations indiquées précédemment, et X et Y sont explicités ci-après : o vO OB. X-Asp-Tyr-NHNH-Y Mét-Gly-Trp-Mët-Asp-Phé-NHL N02 OBz 1 jl !z X-Sér-NHNH—Y (X) B_ | , J s X-Arg-Asp-Tyr-NHNH-Y (I) ¥°-> 0B-, i 1 Arg-Asp- 4 -2^. X-Aap-Tyr-NHNH2 (V) Arg-Àsp-Tyr-NHNH-Y (il) OB_ N0o OB i z | 2 -kra-î X-Asp-Tyr-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NH2 (VI) SO-H* I Asp-Tyr-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NH- (VIII) mt X-Asp-Àrg-Asp-Tyr-NHNH-Y (III) Sér-NHNH-Y (XI) X-Asp-Arg-Asp-Tyr-NHNH2 (IV) B 12 Y X-Ileu-Sér-NHNH-Y (XII) X-Ileu-Sér-NHNH2 (XIII) t X-Asp-Arg-Asp-Tyr-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NH2 (VII) f°3 Ni Asp-Ar g-Asp-Tyr - Mé t -Gly-Trp-Mét - Asp- Phé-NH», ( IX) so3H" N/ X-Ileu-Sér-Asp-Arg-Asp-Tyr-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NH., (XIV) * SO-H , , I * Ileu-S ér-Asp-Arg-Asp-Tyr-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NH- (XV) b SO-H i "Dans ces formules Tyr représente l'acide 2-amino-3-(3'sulfonyl-4,-bjraroxy) -phénylpropioniçue. KJ> o> -t* U) ho O UJ K> KJ 69 24641 4 2013212 Deux des substances initiales, à savoir, la butyloxjrearbonyl-0-benzyl.-L-sérine tertiaire et la butyloxycarbonyl-p-benzyl-L-aspar-tyl-tyrosine benzyloxycarbonyl-hydrazide tertiaire sont bien connues dans la technique. On peut préparer la substance initiale la L-5 méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalanina-mide /faisant réagir le trifluoroacétate du glycyl-L^tryptophyl-L-méthionyl-Iraspartyl-L-phériylalaninamide avec l'ester de butyloxy-carbonyl-L-méthionyl-2,4,5-trichlorophényle tertiaire. Les séries de peptides indiquées dans le schéma réactionnel précédent peuvent 10 être reliées par une quelconque méthode de couplage connue pour la synthèse des peptides pour former 1 Autrement, on peut préparer les peptides de cette invention par addition continue des acides aminés appropriés un par un à la L-nrté-thionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninami-de. 20 On peut réaliser de telles additions, par exemple, en activant les groupements acide carboxylique dans l'acide aminé à ajouter après avoir protégé le groupement aminé dans cet acide aminé, par exemple, en le transformant en son dérivé butyloxycarbonyle tertiaire, en transformant ce dérivé, par exemple, en un ester de nitrophényle 25 et ensuite en faisant agir cet ester actif avec un autre acide aminé ou peptide à volonté. Parmi les groupes activants convenables à utiliser dans le procédé ci-dessus on peut mentionner tout groupe qui provoque un accroissement de la réactivité de la fonction acide, comme les 30 anhydrides mixtes, (qui normalement met en jeu l'acylation d'une aminé par les anhydrides mixtes, par exemple, d'un acide aminé acylé et de l'acide isovalérique), les azides, les chlorures d'acides, les produits de réaction avec les carbodiimides, les composés N-àcylés réactifs, les dérivés de l'hydroxylamine 0-acylés, et les esters 35 actifs, tels que les esters d'alcoyle avec substituants attirant leg électrons (négatifs), les esters de vinyle, les énol esters, les esters de phényle, les esters d'halophényle, les esters de thiophé-nyle, les.esters de nitrophényle, les esters de 2,4-dinitrophényle, et les esters de nitrophénylthiol. 40 Dans la formation des séries de peptides de la manière ci-dessus# BAD ORIGINAL 69 24641 5 2013212 le groupe utilisé pour protéger le radical hydroxyle peut être le groupe benzyle, butyle tertiaire, tétrahydropyranyle, etc, les groupes protecteurs du radical carboxyle peuvent être les groupes méthyle, éthyle, butyle tertiaire, benzyle,etc, les groupes protec-5 teurs du radical guanidine peuvent être les groupes nitro, tosyle, p-nitrobenxyloxycarbonyle, la fixation d'un proton, etc, et les groupes protecteurs des radicaux aminé (X et Y dans les formules précédentes) peuvent être les groupes bensyloxycarbonyle, t-butylo-xycarbonyle, trifluoroacétyle ou jo-nitrophénylsulfényle, sauf que 10 le groupe t-butyloxycarbonyle ne peut pas être utilisé en combinaison avec le groupe o,-nitrophénylsulfényle. Il faut noter "ici que comme le groupe protecteur X dans les formules ci-dessus doit être sélectivement éliminé de manière à ajouter l'acide aminé suivant dans la série, il est nécessaire que 15 X et Y soient différents. Diverses méthodes d'élimination des groupes protecteurs X et Y des peptides de cette invention sont connues dans la technique. Cependant, comme il est nécessaire d'éliminer sélectivement X, la méthode choisie dépendra du groupe protecteur utilisé. Par exemple, 20 dans le cas où X représente le radical jz-butyloxycarbonyle, il peut être élimin* par traitement par un acide, comme par l'acide trifluo-roacétique, ou acides du même genre. Dans le cas où X représente le radical benzyloxycarbonyle, l'élimination peut se faire par hydrogénolyse, par exemple, en présence d'un catalyseur au palladium 25 sur charbon. Dans les cas où X représente le radical trifluoroacétyle, il peut être éliminé par traitement par un réactif nucléophile (par exemple, hydrazine dans le méthanol, soude dans le méthanol ou un alcoylate comme le méthylate de sodium ou l'éthylate de sodium, et analogues). Si X est le radical o-nitrophénylsulfényle, il peut 30 être éliminé soit par traitement par un acide doux ^par exemple, un acide halohydrique (comme les acides bromhydrique ou chlorhydrique) dans un solvant comme l'acétate d'éthyle, l'éther, ou d'autres solvants ester d'alcoyle ou éther d'alcoyle7/ soit par un réactif nucléophile soufré, tel que thiophénoxyde de sodium, nitrothiophéno-35 xyde, et analogues. En procédant de cette manière, on réalise une élimination sélective du groupe protecteur X. L'élimination sélective de Y pour former l'intermédiaire de l'hydrazide de peptide protégé peut être réaliséede la même manière que celle exposée ci-dessus, la méthode d'élimination appropriée étant choisie, en fonction du 40 groupe protecteur utilisé. 69 24641 6 2013212 Les groupes protecteurs des radicaux hydroxyle, carboxyle et guanidine peuvent être éliminés par des réactions connues, telles que hydrogénolyse, traitement par des acides comme l'acide chlorhy-drique, l'acide bromhydrique, l'acide trifluoroacétique, et analo-5 gues, traitement par un alcali, tel que soude ou potasse, et analogues ou par traitement par le sodium dans l'ammoniaque liquide. La suifonation des peptides de cette invention contenant de la tyrosine peut être réalisée par réaction du peptide avec l'acide sulfurique concentré à froid. La réaction est effectuée pendant une 10 durée d'environ 24 à 72 heures à des températures inférieures à 20°C, de préférence inférieures à 0°C. L'invention sera mieux illustrée dans les exemples suivants. Toutes les températures sont en degrés Centigrades sauf indication contraire : 15 Exemple 1 L-Méthionvl-qlvcvl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartvl-L-phénvlala-ninamide A) tert.-Butyloxycarbonyl-L-méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninamide. On dissout du trifluoro- 20 acétate de glycyl-Ir^tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylala-ninamide (3,8 g) dans un mélange de diméthylformamide (45 ml) et de triéthylamine (1,4 ml) et on ajoute de l'ester de tert.-butyloxycar-bonyl-L-méthionine 2,4,5-trichlorophényle (2,5 g).Après avoir agité pendant trois heures à la température ambiante, on dilue le mélange 25 réactionnel avec de l'acétate d'éthyle et on filtre le précipité, on le lave à l'acétate d'éthyle et à l'éther et on le sèche. Le rendement est égal à 3,4 g ; p.f. 180-182°. B) On dissout 1'hexapeptide de A) (3,1 g) protégé dans de l'acide trifluoroacétique froid (20 ml) et on maintient la solution 30 sous azote à la température ambiante pendant 25 minutes. L'addition d'éther (250 ml) fait précipiter le trifluoroacétate qui est filtré, lavé à l'éther et séché. Exemple 2 tert .-Butvloxvcarbonvlnitro-L-arqinyl'-g-benzvl-L-aspartvl-L-tvrosine 35 benzyloxvcarbonylhvdrazide (I) On a dissous du trifluoroacétate d'aspartyl L-tyrosine benzy-loxycarbonylhydrazide (1,25 g) dans du diméthylformamide (5 ml) et on a refroidi la solution dans un bain de glace. On a ajouté de la triéthylamine (0,28 ml) et de l'ester de tert.-butyloxycarbonylnitro-40 L-arginine N-hydroxysuccinimide (915 mg). On a maintenu le mélange BAD ORIGINAL 69 24641 ' 2013212 réactionnel à la température ambiante et après 2, 3 et 6 heures on a ajouté trois autres portions (83 mg chacune) d'ester actif. Après un temps de réaction total de 24 heures, on a ajouté de l'acétate d'éthyle (200 ml) et on a lavé la solution avec une solution aqueuse 5 d'acide citrique à 20 % et de l'eau. Après séchage (MgSO^) , on a éliminé le solvant sous vide et on a fait cristalliser le résidu dans un mélange acétate d*éthyle-éther. Rendement 1,31 g. Exemple 3 Trifluoroacétate de nitro-L-arginvl-3-bengyl-L-aspartvl--L-tvrosine 10 benzvloxycarbonvlhvdrazide (II) On a dissous I (1,11 g) dans de l'acide trifluoroacétique (7 ml) et on a maintenu la solution à la température ambiante pendant 15 minutes. On a éliminé le solvant sous vide et on a trituré le résidu ' avec de l'éther. Rendement 1,04 g. 15 Exemple 4 tert.-Butyloxycarbonvl-g-benzyl-L-aspartyl-nitro-L-arcrinyl- On a ajouté de la triéthylamine (0,17 ml) à une solution glacée de (II)(1,04 g) dans le diméthylformamide (5 ml), puis de 20 l'ester de p-nitrophényle de l'acide tert,-butyloxycarbonyl-/3-benzyl-L-aspartique (650 mg). Après l'avoir laissé 3 heures à la température ambiante, on a dilué le mélange avec de l'acétate d'éthyle (100 ml) et on a lavé la solution avec une solution aqueuse d'acide citrique à 20 % et de l'eau. Après séchage (MgSO^) on a 25 éliminé le solvant sous vide et on 'a trituré le résidu avec un mélange acétate d'éthyle-hexane. Rendement 1,08 g. Exemple 5 tert.-Butyloxycarbonvl-L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-L-tyrosine hydrazide (IV) 30 On a hydrogéné une solution de (III) (900 mg) danis un mélange (2:1:1) de méthanol, d'acide acétique, d'eau pendant 24 heures sur du palladium à 10 % sur charbon (150 mg). On a filtré le catalyseur et on a concentré le filtrat à sec. On a désagrégé le résidu avec de l'éthanol et on l'a filtré. Rendement 402 mg. 35 Exemple 6 tert,-Butyloxvcarbonvl-L-aspartvl-L-tvrosine hydrazide (V) On a hydrogéné pendant 4,5 heures sur du palladium à 10 % sur charbon (800 mg) une solution de tert.--butyloxycarbony 1-/3-benzyl-L-aspartyl-Ir4:yrosine benzyloxycarbonylhydrazide (5 g) dans un mélange 40 de méthanol, d'acide acétique et d'eau (2:1:1:). On a filtré le ....—P BM' MîfelNAL 69 24^-41 2013212 catalyseur et on a concentré le filtrat à sec sous vide. On a trituré le résidu avec de l'acétate d'éthyle. Rendement 3,1 g. Exemple 7 tert.-Butyloxvcarbonvl-L-aspartvl-L-tvrosvl-L-méthionvl-glvcyl-L-5 tryptophvl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninamide (VI) On a ajouté de l'acide chlorhydrique concentré (0,12 ml) à une solution de V (100 mg) dans le diméthylformamide (4 ml), on l'a refroidie dans un bain de carboglace et d'acétone à -20°. On a laissé la température du bain monter à -15° et on a ajouté une 10 solution aqueuse de nitrite de sodium à 14 % (0,125 ml). Au tout de 5 minutes la température du bain était descendue à -25° et on a ajouté de la N-éthylpipéridine (0,26 ml) puis 180 mg de trifluoroacétate de L-méthionyl-glycyl~L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninamide dissous dans du diméthylformamide (1 ml). On a 15 maintenu le mélange réactionnel à 5e et après 24 heures on a ajouté une seconde portion de tert.-butyloxycarbonyl-L-aspartyl-L-tyrosine azide (à partir de 40 mg de V). Après une autre période de 24 heures à 5°, on a versé le mélange réactionnel dans 30 ml d'eau contenant 1 % d'acide acétique. On a séché le précipité. Rendement 200 ng. 20 , Exemple 8 tert«-Butvloxycarbonvl-L-aspartyl-L-arqinvl-L-aspartvl-L-tvrosvl-L-méthionvl-qlvcvl-L-trvptophvl-L-méthionyl-L-aspartvl-L-phénylalani-namide (VII) On a ajouté de 1*acide chlorhydrique concentré (0,12 ml) à une 25 solution de (IV) (170 mg) dans le diméthylformamide (1,2 ml) et on a refroidi dans un bain de carboglace et d'acétone à -20°. On a laissé monter la température du bain à -15° et on a ajouté une solution aqueuse de nitrite de sodium à 14 % (0,125 ml). Après 5 minutes la température du bain était descendue à -25° et on a ajouté 30 de la N-éthylpipéridine (0,26 ml), puis 180 mg de L-méthiony1-glycy1-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninamide dissous dans du diméthylformamide (1 ml) . On a-niaintenu le mélange réactionnel à 5° pendant 24 heures et on a ajouté une seconde portion du tétra-peptide azide (à partir de 68 mg de IV). Après 24 heures on a versé 35 le mélange réactionnel dans 30 ml d'eau. On a filtré le précipité et on l'a séché. Rendement 250 mg. 69 24641 9 2013212 Exemple 9 A) 3 ' -Sulfonvl-L-tvrosvl-L-méthionvl-qlvcvl-L-tryptophyl-L-méthionvl-L-a spartyl-L-phénylalaninamide On a dissous du L-tyrosyl-L-méthionyl gLycyl-L-tryptophyl-L-5 méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninaatide (100 mg) dans de l'acide sulfurique (6 ml) prérefroidi à -20° dans un bain de carboglace et d'acétone. On a maintenu la solution à -20° pendant 72 heures et on l'a versée dans de l'éther froid (250 ml). On a filtré le précipité, on l'a lavé avec de l'éther froid et on l'a séché. Rendement 92 mg. 10 Ce produit peut être purifié par chromatographie par échange d'ions sur DEAE sephadex /"tampon de (N^) 2C03-^ ou Par partage à contre courant (système n-butanol., pyridine, acide acétique, eau). B) L-Aspartvl-3 ' -sulfonvl-L-tvrosvl-L-métliionvl-qlvcvl-L-15 tryptophvl-L-méthionvl-L-aspartvl-L-phénvlalaninamide(VIII) Selon la méthode de l'Exemple 9A), mais en remplaçant le L-tyrosyl-L-méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninamide par le L-aspartyl-L-tyrosyl-L-méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninamide, 20 on obtient le produit désiré. Exemple 10 L-Aspartvl-L-arginvl-L-aspartvl-3'-su1fonvl-L-tvro svl-L-méthionvl-glvcvl-L-trvptophvl-L-méthionvl-L-aspartvl-L-phénvlalaninamide (IX) 25 Selon la méthode de l'Exemple 9A), mais en remplaçant le L-tyrosyl-L-méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-mêthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninamide par le L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-L-tyrosyl-L-méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylala-ninamide on obtient le produit désiré. Exemple 11 tert. -Butvloxvcarbonvl-O-benzyl-Ii-sérine benzvloxvcarbonvlhvdrazide (X) On a refroidi dans un bain d'eau glacée une solution de tert.-butyloxycarbonyl-O-benzyl-L-sérine (3 g) et de benzyloxycar-bonylhydrazide (1,7 g) dans le dichlorométhane (20 ml). On a ajouté c du dicyclohexylcarbodiimide (2,06 g) et on a agité le mélange 2 heures dans le bain froid et 4 heures à la température ambiante. On a filtré le précipité formé et on a lavé le filtrat avec de l'acide citrique à 20%, de l'eau, du bicarbonate de sodium saturé et de l'eau. Après séchage (MgSO^) on a éliminé le solvant sous 40 vide pour obtenir un résidu huileux : 4,3 g. 69 24641 10 2013212 Exemple 12 Trifluoroacétate de O-Benzvl-L-sérine-benzvloxvcarbonvlhvdrazide (XI) On a maintenu une solution de (X) (4,3 g) dans l'acide trifluoroacétique (20 ml) à la température ambiante pendant 5 15 minutes. On a éliminé l'acide trifluoroacétique sous vide et on a cristallisé le résidu dans un mélange éther-hexane. Rendement 3,9 g. Exemple 13 tert.-Butvloxvcarbonvl-L-isoleucvl-O-benzvl-L-sérine-10 benzvloxvcarbonvlhvdrazide (XII) On a ajouté de la triéthylamine (1,4 ml) à une solution glacée de (XI) (4,5 g) dans le diméthylformamide (20 ml), puis de l'ester de tert.-butyloxycarbonyl-L-isoleucine N-hydroxysuccinimide (4,18 g). On a maintenu le mélange réactionnel pendant 6 heures à 15 la température ambiante et on l*a dilué avec de l'acétate d'éthyle (200 ml). On a lavé cette solution avec de l'acide citrique à 20%, de l'eau, du bicarbonate de sodium saturé et de l'eau. Après séchage (MgSO^) on a éliminé le solvant sous vide et on a.recristallisé le résidu dans un mélange éther-hexane. Rendement 5,2 g. 20 Exemple 14 tert.-Butvloxvcarbonvl-L-isoleucvl-sérine hydrazide (XIII) On a hydrogéné une solution de (XII) (2,8 g) dans un mélange (2:1:1) de méthanol, d'acide acétique et d'eau pendant 6 heures sur du palladium sur charbon (280 mg). On a filtré le catalyseur, on a 25 concentré le filtrat à sec et on cristallisé le résidu dans l'éther. Rendement 1,5 g. Exemple 15 L-Isoleueyl-L-sérvl-L-aspartyl-L-ayginvl-L-aspartvl-31-sulfonvl-L-tyrosvl-L-méthionvl-qlvcvl-L-trvptophvl-L-méthionyl-L-aspartvl-30 L-phénvlalaninamide (XV) On a ajouté de l'acide chlorhydrique concentré (0,48 ml) à une solution de tert.-butyloxycarbonyl-L-isoleucyl-L-sérine hydrazide (340 mg) dans le diméthylformamide (2 ml)refroidie dans un bain de carboglace et d'acétone à -20°. On a laissé la température du 35 bain monter à -15° et on a ajouté une solution aqueuse de nitrite de sodium à 14% (0,50 ml). Après 5 minutes la température était descendus à -25° et on a ajouté de la N-éthylpipéridine (0,6 ml), puis une solution de (IX) (1 g) dans le diméthylformamide (4 ml). Après l'avoir laissé 24 heures ù 5°, on a concentré le mélange réactionnel 40 à sec et on a dissous le tertrbutyloxycarbonyl dodécapeptide (XIV) 69 24641 ii 2013212 résultant dans de l'acide trifluoroacétique froid (6 ml). On a maintenu la solution sous azote pendant 15 minutes. On a ajouté de l'éther et on a filtré le précipité, on l'a lavé avec de l'éther et on l'a séché. On a isolé le doc^capeptide sulfonate désiré par 5 chromatographie par échange d'ions sur DEAE sephadex. Rendement 50 mg. Exemple 16 tert.-Butvloxvcarbonvl-L-arcTinvl-L-aspartvl-L-tvrosine hydrazide(XVI) On a hydrogéné une solution de I (300 mg) dans un mélange (2:1:1) de méthanol, d'acide acétique et d'eau pendant 24 heures 10 sur palladium à 10% sur charbon (50 mg). On a filtré le catalyseur et on a concentré le filtrat à sec. On a désagrégé le résidu avec de l'acétate d'éthyle et on l'a filtré. Rendement 150 mg. Exemple 17 tert.-Butvloxycarbonyl-L-arqinvl-L-aspartvl-L-tyrosyl-L-méthionyl-15 qlycvl-L-trvptophyl-L-méthionvl-L-aspartvl-L-phénvlalaninamide(XVIl) On a ajouté de l'acide chlorhydrique concentré (0,12 ml) à une solution de (XVI) (138 mg) dans le diméthylformamide (1,2 ml) et on l'a refroidie dans un bain de carboglace et d'acétone à -20°. On a laissé monter la température du bain à-15° et on a ajouté une 20 solution aqueuse de nitrite de sodium à 14% (0,125 ml). Après 5 minutes la température du bain était descendue à -25° et on a ajouté de la N-éthylpipéridine (0,26 ml), puis 180 mg de L-méthio-nyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninamide dissous dans le diméthylformamide (1 ml). On a maintenu le mélange 25 réactionnel à 5° pendant 24 heures et on a ajouté une seconde portion du tétrapeptide azide (à partir de 51 mg de XV). Après 24 heures on a versé le mélange réactionnel dans 30 ml d'eau. On a filtré le précipité et on l'a séché. Rendement 235 mg. Exemple 18 30 L-Arginvl-L-aspartvl-3'-sulfonvl-L-tvrosyl-L-méthionvl-glvcvl-L-tryptophvl-L-méthionvl-L-aspartvl-L-phényl alaninamide (XVIII) Selon la méthode de l'Exemple 9A), mais en remplaçant le L-tyrosyl-L-méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspp.riyl-L-phénylalaninamida par 235 mg de L-arginyl-L-aspartyl-L-tyrosyl-L-35 méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-mêthionyl-glycyi-L-phénylalaninamide on obtient le produit ci-dessus. Rendement 140 mg. Exemple 19 tert.-Butvloxycarbonvl-L-sérvl-L-aspartyl-L-arcrinvl-L-aspartyl-3'-sulfonvl-L-tvrosvl-I»-méthionvl-qlvcvl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-40 aspartvl-L-phénvlalaninamide (XIX) bad original 69 24641 2013212 On a ajouté de l'acide chlorhydrique concentré (0,24 ml) à une solution de tert*- butyloxycarbonyl-L-sérine hydrazide (115 mg) dans le diméthylformamide (1 ml) refroidie dans un bain de carboglace et d'acétone à -20°. On a laissé monter la température du bain à -15° 5 et on ajouté une solution aqueuse de nitrite de sodium à 14% (0,25 ml). Après 5 minutes la température était descendue à -25° et on ajouté de la N-éthylpipéridine (0,6 ml), puis une solution de IX (500 mg) dans le diméthylformamide (2 ml). Après l'avoir laissé 24 heures à 5° on a concentré le mélange réactionnel à sec 10 et on a trituré le résidu avec de l'eau et ensuite on a filtré et lavé avec de l'éthanol. Rendement 290 mg. Exemple 20 L-Sérvl-L-aspartvl-L-arginvl-L-aspartvl-3'-sulfonvl-L-tyrosvl-L-méthionvl-qlvcvl-L-trvptophvl-L-méthionvl-L-aspartvl-L-phénvlalani-15 namide On a dissous le produit XIX (290 mg) dans de l'acide trifluoroacétique (3 ml) et on a maintenu la solution à la température ambiante sous azote pendant 15 minutes. On a ajouté de l'éther (100 ml) et on filtré le précipité, on l'a lavé avec de l'éther et 20 on l'a séché. La chromatographie sur DEAE sephadex a donné l'ester du sulfate d'hendécapeptide désiré. Rendement 200 mg. / - BâD original 69 24641 13 2013212 REVENDICATIONS 1. Un composé thérapeutiquement actif de formule : R-Mét-Gly-Trp-Mét-A sp-Phé-NH^ et ses sels pharmaceutiquement acceptables, où R est choisi dans 5 le groupe des radicaux : 31-sulfonyl-L-tyrosyle, L-aspartyl-3•-sulfonyl-L-tyrosyle, L-arginyl-L-aspartyl-3'-sulfonyl-L-tyrosyle, L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-31-sulfonyl-L-tyrosyle, 10 L-séryl-L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl 3'-sulfonyl- L-tyrosyle, protégé, L-séryl-L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-3'-sulfonyl-L-tyrosyle, isoleucyl-L-séryl-L-aspartyl-L-arginyl-L-3'-sulfonyl-L-15 tyrosyle, protégé, isoleucyl-L-séryl-L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-3'-sulfonyl-L-tyrosyle. 2. Le 3'-sulfonyl-L-tyrosyl-L-méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylalaninamide. 20 3. Le L-aspartyl-3'-sulfonyl-L-tyrosyl-L-méthionyl-glycyl-L- tryptophyl-L-méthionyl-L-a sparty1-L-phénylalaninamide. 4?^L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-31-sulfonyl-L-tyrosyl-L-méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-aspartyl-L-phénylala-minamide. 25 S^^benzyloxycarbonyl-L-isoleucyl-L-séryl-L-aspartyl-L-arginyl- L-aspartyl-3 *-suifonyl-L-tyrosyl-L-méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-asparty1-L-phénylalaninamide. 6^L-isoleucyl-L-séryl-L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-3 ' -sulfonyl-L-tyrosyl-L-méthionyl-glycyl-L-tryptophyl-L-méthionyl-L-30 aspartyl-L-phénylalaninamide. 7. Un procédé pour préparer un composé thérapeutiquement actif de formule : R-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phe-Nl^ et ses sels pharmaceutiquement acceptables où R est choisi dans le 35 groupe des radicaux : 3'-sulfonyl-L-tyrosyle, L-aspartyl-3'-sulfonyl-L-tyrosyle, L-arginyl-L-aspartyl-3'-sulfonyl-L-tyrosyle, L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-31-sulfonyl-L-tyrosyle, 40 L-séryl-L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-31-sulfonyl-L- 69 24641 14 2013212 tyrosyle, protégé, L-séryl-L-aspartyl-L-arginyl-L-asparty 1-3'-sulfonyl-L-tyrosyle, isoleucyl-L-séryl-L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-31-sulfonyl-L-tyrosyle protégé, 5 isoleucyl-L-séryl-L-aspartyl-L-arginyl-L-aspartyl-31- sulfonyl-L-tyrosyle, caractérisé par la réaction suivante : o OB. X-Asp-Tyr-NHNH-Y Mé t-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NHj B. X-Sér X-Sér-NHNH—Y (X) B lz v Sér-NHNH-Y (XX) B. NO~ OB, | | X-Arg-Asp-Tyr-NHNH-Y (I) JO„ OB„ X-Asp~Tyr-NHNH2 (v) X-Asp-Tyr-Mât-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NH2 (VI) N0o 01 i 1 Arcr-Aî ?°3 Arg-Àsp-Tyr-NHNH-Y (II) OB NO- OB I | z t 2 za X-Asp-Arg-Asp-Tyr-NHNH-Y (III) Asp-Tyr-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NH2 (VIII) X-Asp-Arg-Asp-Tyr-NHNH2 (IV) r X-Ileu-Sér-NHNH-Y (XII) X-Ileu-Sér-NHNH2 (XIII) r X-Asp-Arg-Asp-Tyr-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NH2 (VII) S03h v Asp-Arg-Asp-Tyr-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NEL (IX) _ .. . .. ... ... / * S03Ha X-Ileu-Sér-Asp-Arg-Asp-Tyr-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NH2 (XIV) S03Ha Ileu-Sér-Asp-Arg-Asp-Tyr-Mét-Gly-Trp-Mét-Asp-Phé-NH (XV) M S03h hO 42k O -fc* ut *Dans ces formules Tyr représente l'acide 2-amino-3-(3,sulfonyl-4,-hyaroxy)-phénylpropionique. K> O LU K>