Le brevet de la République Fédérale d'Allemagne ïï° 851 398 a fait connaître un procédé de préparation de substances douées d'activité antibiotique, procédé caractérisé par le fait qu'or. fait croître des streptomyeètes, notamment Streptomyces purpura scer.s nov. spec., dans des conditions aérobies sur ou dans ies milieux nutritifs connus pour le développement de strep;o-mycètes, et on extrait les rhodcmycines des cultures ainsi obtenues, par la conduite d'opérations classiques. Les rhodomycines sont des bases azotées étroitement apparentées les unes aux autres et existant généralement sous la forme de mélanges. Ce sont des matières colorantes rouges. Le brevet de la République Fédérale d'Allemagne K° 913 813 a pour objet la préparation d'un chlorhydrate de rhodomycine cristallisé, qui est appelé, dans ce brevet, chlorhydrate de rhodomycine A. La présente invention concerne une nouvelle (3-rhodomycine, qui est appelée {3-rhodomycine V, et qui répond à la formule: O-Rhodosamine dans laquelle R est un tétraglucoside qui se compose de deux moles de rhodinose, une mole de 2-désoxy-fuoose et une mole de rhodosamine. Cette nouvelle rhodomycine se distingue des rhodomycines 30 connues, par le fait qu'elle contient cinq restes de sucrôs, tandis que les rhodomycines connues, qui sont appelées à l*lueare aotuelle {3-rhodomycine I et P-rhodomycine II, ne comportent qu'un et respectivement deux restes de sucres ["Tetrahedron letters", 1969, pages 415 à 419]-35 La nouvelle rhodomycine s'obtient conformément à l'in 71 09601 2 2085720 vention en cultivant l'organisme Streptomyces purpurascens, en procédant à 1'extraction neutre du filtrat de culture et du mycélium et en isolant des extraits la P-rhodomycine Y, d'une manière connue en soi. 5 Le procédé de préparation conforme à l'invention se distingue donc des procédés de préparation des rhodomycines connues par le fait que l'extraction selon l'invention est conduite en milieu neutre tandis.que,dans les brevets susmentionnés, l'extraction est conduite en milieu acide* 10 II convient d'utiliser comme matière première pour le prooédé de l'invention toutes les espèces de Streptomyces.» lia souche de Streptomyces purpurascens Ist 313 est particulièrement convenable. Dans le présent mémoire, on entend par extraction neutre, une extraction qui est conduite à un pH de 6,5 à 7,5« 15 La (3—rhodomycine Y déploie une excellente activité ohimiotherapique, notamment antibactérienne, comme le montrent les résultats suivants d'expériences conduites in vitro« La détermination de la concentration inïilbitrice minimale pour les organismes G-ram-positifs et Grain-négatifs est 20 effectuée dans le milieu de EZLein (extrait de viande, peptone, dextrose, pH 7,1) à une température d'incubation de 37°C, pendant 24 heures j le milieu est ensemencé avec 10^ germes par mlj pour des mycoplasmes, on opère dans le bouillon PPLO (substrat de base PPLO, dextrose, sérum de cheval, pH 7,6) à une tempé- 25 rature d'inoubation de 37°C pendant 48 à 72 heure8| le bouillon 7 est ensemencé avec 10 germes par ml. T A BLE AÏÏ ConcentrâtIon lnhibitrioe minimale ( y /ml de milieu nutritif) de la p-rhodomyoine Y Germe spécifique Nombre de souch.es Oonoentration inhlbitrice V /ml Streptocoques de diverses espèoee 5 0,015 à 1,00 Staphylocooous aureua 4 0,050 à 0,12 Sarcines 2 0,060 à 1,00 Corynebao terium pyogenes 2 0,060 à 0,12 Paeudomonas aeruginoea 2 100 E. coll 2 50 Klebslella pneumoniae 1 25 Salmonella apec. 2 50 à 200 pasteurella multocida 2 6,25 Bordetella bronchlseptica 1 50 Alaaligenes façoalia 1 25 Wyooplaatn.es Myaoplasmes aviaires 4 0,001 à 0,002 Myaoplasmes bovins 2 0,030 à 0,060 Mycoplasmes porcins 2 0,001 à 0,002 O ■O o \J) K> O 00 Cn -«4 K> O 71 09601 4 2085720 les valeurs reproduites sur le tableau montrent que la fî—rhodomycine Y a une excellente activité antibactérienne ,de spectre extrêmement large, notamment dans le cas dos mycoplasmes et des bactéries G-ram-positives. 5 L'excellente activité antibactérienne à large spectre de cette substance permet de l'utiliser tant en médecine humaine qu'en médecine vétérinaire, et elle peut servir à la prophylaxie d'infections bactériennes, mais aussi au traitement d'infections bactériennes déjà établies. 10 Comme indications pour le domaine de la médecine vété rinaire, on mentionne, par exemple, des infections dues à des mycoplasmes et des infections intestinales. Du point de vue prophylactique, la ^-rhodomycine Y peut être utilisée comme addition à la nourriture. 15 Exemple 1 On fait incuber à 26°C, en submersion pendant 24 heures, une culture préalable de 10 litres de Streptomyces purpurasoens Ist 313 dans une solutioi^utritive additionnée de 2 $> de farine de soja et de 2 i» de mannltol, puis on l'utilise pour ensemencer 20 350 litres d'une solution nutritive de même composition, qu*on fait fermenter pendant 96 heures à 26°C sous agitation et aération. Après arrêt de la fermentation, on délaie le bouillon de culture de couleur brun-rouge avec 20 kg de kieselguhr et on filtre. On traite séparément le filtrat de la culture et le 25 mycélium. On extrait ce dernier trois fois avec, à chaque fois, 60 litres d'acétone, on concentre sous vide à 30 litres, à une teai^r^ture de 50°C, les extraits aoétoiiiquee rassemblés, de couleur rouge—orangé, on les extrait troiB fois avec, à chaque fois, 15 litres de butanol et on concentre les extraits butanoliques 30 ras semblés ,s eus vide à 50°C, jusqu'à ce qu'il, reste environ troiB litres. l'huile brun—rouge résiduelle est reprise dans 10 litres de chloroforme (solution A). le filtrat de culture (350 litres, pH rJf0 à 7,5) est extrait avec 150 litres de butanol et le phase butanolique de 35 couleur rouge intense estkoncentrée soub vide à 50°C jusqu*à environ 3 litres d'une huile résiduelle de couleur rouge intense 5 qu'on reprend dans 10 litres de chloroforme (solution B), 71 09601 5 2085720 les solutions chloroformiques A et B rassemblées sont réparties entre six colonnes de 100 x 10 cm, de carboxyméthyl-oellulose (mise en suspension avec de 1*acide chlorhydrique 2H ; lavée i 1.) avec de l'eau jusqu*à réaction neutre 2.) avec de l*acétone, et 3») avec du chloroforme). TJn lavage ultérieur avec 5 à 10 litres de chloroforme par colonne fait passer les graisses, les anthraoyclinones et les anthracyclinea non basiques dans le filtrat. la fraction restant sur la colonne est éluée avec une solution aqueuse à 10 % de phosphate acide de potassium et l'é— luat de couleur rouge intense, dont le pH est ajusté à 8,0 avec de l'ammoniaque diluée (5 litres d*éluat par colonne) est extrait trois fois avec,à chaque fois .trois litres de chloroforme, les phases chloroformiques rassemblées sont évaporées à seo sous vide, le résidu est repris dans un peu de chloroforme et la P—rhodosycine Y de couleur rouge est précipitée avec de l*éther de pétrole (40 à 50°0)« le rendement est de 150 à 170 mg par litre de bouillon de culture. On chromâtographie sur une colonne de oeilni ose de 100 z 4 cm, 2 g de la p—rhodomycine Y préparée comme indiqué si—dessus, dans le système formé de butanol (0,7 M) et de tampon au phosphate à un pE de 5,3 (1:1). la zone principale (qui _a la plus grande vitesse de migration) est amenée à passer dans le filtrat par lavage ultérieur avec la phase supérieure, le filtrat est additionné d*ammoniaque diluée jusqu,à un pH de 8,0, puis il est extrait au chloroforme par secousses et la phase chlor-iormique déshydratée sur du sulfate de sodium est évaporée à sec sous vide* la J3-rhodomycine Y obtenue comme résidu,se présentant sous la forme d*une laque rouge,est reprise dans du chloroforme et précipitée à l,ébullition avec du cyclohexane sous la forme d'une poudre rouge ou aussi d*aiguilles rouges. Point de fusion : 173-175°C (décomposition) j ^ -40 ± 2°C = 0,2 dans le chloroforme. 71 09601 6 2085720 Analysa t C $ H fo H fo Calculé pour C^E^O^ (1059,2) 61,14 7,36 2,61 Trouvé * ; 61,30 7*40 2,65 * séchage sous vide poussé à 100°C pendant 15 heures. 5 Spectre infrarouge (pastilles comprimées de EBr) 3450, 2910, 1730, 1595 cm""1, La P—rhodomycine Y est très aolubie dans le méthanol, le butanol, 1*acétone, le chloroforme, un tampon au phosphate 0,7 M à un pH de 5,8, les acides dilués, elle est peu soluble 10 dans le benzène, très peu soluble dans lïeau, et pratiquement Insoluble dans le cycloîuexane» 71 09601 2085720 i BEYEHDICATIONS 1* P-Ehodomycine V, caractérisée par le fait qu*elle répond à la formule : 5 O-Ehodoeamine dans laquelle H désigne un reste tétraglucosiàe qui se aompose 10 de deux moles de rh.odinose, une mole de 2-désoxy-fucôse et une mole de riiodosamine. 2. Procédé de préparation de p-rhodomycine Y, caractérisé par le fait quîon cultive Streptomyces purpurascens, on extrait en milieu neutre le filtrat de culture et le mycélium 15 et on isole la ,3—r&odoziysia© Y les extraits- ■ïîhïis manière connue en soi. 3. Utilisation de Streptomyces purpurascens pour 1* détention de g-riLodomycins 7. 4. Utilisation do la p-rliodcmyaine Y cornus addition à 20 des produits nutritifs.