-1 - La présente invention concerne un nouveau dé- rivé de l'antibiotique tylosine Plus particulièrement, l'invention concerne un composé de formule CH CH OH N( O H 13)2 t O 5 OX O CH OH H C O o O R 2 A C 3 1 HCO O Ci 3 ( 1) o R 1 et R 2 représentent un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxyle, o l'un des radicaux R 1 et R 2 est au moins un atome d'hydrogène, ou un de ses sels. Son sel est un sel pharmaceutiquement accep- table Comme exemple de sels on peut citer les sels d'acides inorganiques comme le chlorhydrate, le sulfate ou le phosphate et les sels d'acides organiques comme l'acétate, le propionate, le tartrate, le citrate, le succinate, le malate, l'aspartate ou le glutamate. D'autres sels non toxiques peuvent être inclus. Le nouveau composé ( 1) possède contre les bactéries gram-positives une activité antibactérienne équivalente à celle de l'érythromycine, et possède une activité anti-bactérienne plus forte contre les bacté- ries gram-positives par comparaison avec le tylosine et la desmycosine de départ l 4 '-démycarosyl-tylosine (Anti- -2- biotics and Chemotherapy, 11 ( 5), 528 334 ( 1961)l Le composé antibiotique ( 1) présente également une forte activité antibactérienne contre les bactéries du groupe A résistantes aux macrolides (résistance d'isolats cli- niques contre l'érythromycine, l'oléandomycine et les antibiotiques macrolides ayant un noyau à 16 chaînons). Le composé ( 1) est stable in vivo, possède un niveau sanguin élevé et une toxicité tout à fait fai- ble, et peut donc être utile pour le traitement des ma- ladies infectieuses de l'homme et des animaux par admi- nistration orale, et est également utile pour les addi- tifs alimentaires. Dans la description, le produit ( 1) et ses intermédiaires sont désignés selon un numérotage des positions de la formule ( 1). Un composé ( 1) de l'invention est produit par les procédés suivants. (A) Composé ( 1) o R 1 est un atome d'hydrogène et o R 2 est ur Wroupe hydroxyle, à savoir la 19-déformyl- 4 '-désoxy-desmycosin llal: On peut préparer un composé (la) par des for- mulations de la 4 '-désoxy-desmycosine avec l(C 6 H 5)3 Pl 3 Rh Cl dans un solvant organique inerte en chauffant. On peut obtenir le produit de départ 4-désoxy- desmycosine en démycarosylant en position 4 ' de la 2 '-0- acétyltylosine avec de i'acide dilué, en acétylant le groupe 4 " 1hydroxyle de la 2 '-O-acétyl-desmycosine ainsi obtenue, en trifluorométhanesulfonylant le groupe 4 '- hydroxyle de la 2 ',4 " 1-di-O-acétyl-desmycosine obtenue, en iodant en position 4 ' de la 2 ',4 "-di-O-acétyl-4 '-O- trifluorométhanesulfonyl-desmycosine ainsi préparée, en désacétylant en position 4 " de la 2 ',4 "-di-0-acétyl-41- désoxy-4 '-iodo-desmycosine ainsi obtenue, puis en désio- dant et en désacétylant en position 2 ' de la 2 '-0-acé- -3- tyl-4 '-désoxy-4 '-iodo-desmycosine ainsi produite (de- mande de brevet japonais n 56-38375). La réaction de défornylation ci-dessus est conduite généralement au reflux du solvant de la réac- tion L'exemple préférable de solvant organique inerte dans la réaction est le benzène On peut vérifier la réaction par chromatographie en couche mince (CCII) sur gel de silice, et on la termine en vérifiant la dispa- rition de la 4 '-désoxy-desmycosine. On peut conduire l'isolement du produit à partir du mélange réactionnel en extrayant avec un acide dilué comme l'acide chlorhydrique dilué, en ajustant l'extrait avec une base aqueuse comme l'ammoniaque à p H i 9-10, en extrayant avec l'eau le solvant organique non miscible à l'eau comme le chloroforme et en retirant le solvant. La purification plus poussée peut s'effectuer par des procédés classiques d'isolement et de purifica- tion pour les antibiotiques macrolides, par exemple la chromatographie d'adsorption utilisant le gel de si- lice, l'alumine active et la résine. (B) Composé ( 1) o R 1 est un groupe hydroxyle et R 2 est un atome d'hydrogène, à savoir 19-déformyl-4 "- désoxy-desmycosinellbl: On peut préparer un composé (lb) en déformy- lant la 4 "-désoxy-desnycosine avec l(C 6 H 5)3 Pl 3 Rh Cl dans un solvant organique inerte en chauffant. On peut préparer la 4 "-désoxy-desmycosine de départ en diacétylant le groupe 2 ',4 "-hydroxyle de la desmycosine, en trifluorométhanesulfonylant le groupe 4 "-hydroxyle de la 2 ',4 '-di-0-acétyl-desmycosine obte- nue, en halogénant en position 4 " de la 2 ',4 '-di-O- acétyl-4 "-O-trifluorométhanesulfonyl-desmycosine ainsi préparée, en déshalogénant en position 4 " de la 2 ',4 '- di-O-acétyl-4 "-désoxy-4 "-halogéno-desmycosine et en dé- diacétylant la 2 ',4 '-di-0-acétyl-4 "-désoxy-desmycosine ainsi obtenue (demande de brevet japonais n 56-3 & 375). On peut conduire la réaction de déformylation de la m 9 me manière que dans le procédé (A). On peut également produire le composé (lb) par le procédé suivant. On diacétyle le groupe hydroxyle en position 2 ' et 4 ' de la 19-déformyldesmycosine (brevet japonais non soumis à l'inspection publique n 5655399); on trifluorométhanesulfonyle le groupe 4 "-hydroxyle de la 2 ',4 '-di-0-acétyl-19-déformyl-desmycosine obtenue; on halogène en position 4 " la 2 ',4 '-di-0-acétyl-4 "-0-tri- fluorométhanesulfonyl-19-déformyl-desmycosine ainsi obtenue; on déshalogène la 2 ',4 '-di-0-acétyl-19-défor- myl-4 "-halogéno-4 "-désoxy-desmycosine préparée; et on dé-diacétyle alors la 2 ',4 '-di-0-acétyl-19-déformyl-4 "- désoxy-desmycosine ainsi préparée. On conduit la diacétylation en faisant réagir la 19-déformyl-desmycosine avecde l'anhydride acétique dans un solvant organique inerte Les solvants organi- ques inertes préférés sont par exemple le dichloromé- thane, le chloroforme, le dichloroéthane et l'acétone. La réaction se poursuit à la température ambiante et peut être vérifiée par CCM sur gel de silice, et on y met fin en vérifiant la disparition de la 19-déformyl- desmycosine Selon la condition réactionnelle d'acéty- lation ci-dessus, on obtient l'acétylation sélective du groupe hydroxyle en position 2 ' et 4 " dans les quatre groupes hydroxyle de la 19-déformyl-desmycosine en po- sition 3, 2 ', 4 ' et 4 ". On peut conduire la réaction de trifluoro- méthanesulfonylation en faisant réagir la 2 ',4 '-di-0- acétyl-19-déformyl-desmycosine avec de l'acide trifluo- rométhanesulfonique anhydre l(F 3 C 502)20 l dans un sol- vant organique inerte en présence d'une amine organique -5- tertiaire Le solvant organique inerte préféré est le dichlorométhane, le chloroforme, le dichloroéthane ou l'acétone On peut citer comme exemples d'amines orga- niques tertiaires les suivantes: pyridine, picoline, collidine, Nméthylmorpholine, N-méthylpipéridine et diméthylaniline et de préférence pyridine La réaction se poursuit à une température plus basse inférieure à la température ambiante On peut vérifier l'évolution de la réaction par CCMI et y mettre fin en vérifiant la disparition de la 2 ',4 '-di-O-acétyl-19-déformyl-desmyco- sine. On conduit la 4 "-halogénation ci-dessus en faisant réagir la 2 ',4 '-di-O-acétyl-4 "-O-trifluoro- méthanesulfonyl-19-déformyl-desmycosine avec un halogé- nure alcalin dans un solvant organique inerte L'exemple préféré d'acide organique inerte est le diméthoxyéthane ou l'acétone Comme exemples d'halogénures alcalins on peut citer les iodures alcalins, les bromures alcalins, les chlorures alcalins et les fluorures alcalins, et on préfère les iodures alcalins comme Na I, KI et Li I On peut conduire la réaction en chauffant en-dessous du point d'ébullition On peut vérifier l'évolution de la réaction par CCM sur gel de silice et y mettre fin en vérifiant la disparition de la 2 ',4 '-di-O-acétyl-4 "-O- trifluorométhanesulfonyl-19-déformyl-desmycosine. On conduit la deshalogénation en position 4 " en faisant réagir la 2 ',4 '-di-O-acétyl-19-déformyl-4 "- halogéno-4 l'-désoxy-desmycosine avec de l'hydrure de tri- butylétain et une quantité catalytique d'azobisisobuty- ronitrile dans un solvant organique inerte Le solvant organique inerte préféré est le benzène ou le toluène. On poursuit habituellement la réaction en chauffant en- dessous du point d'ébullition d'un solvant organique dans le courant de gaz inerte comme l'argon On peut vérifier l'évolution de la réaction par CCM sur gel de -5- silice et y mettre fin en vérifiant la disparition de la 2 ',4 '-di-0-acétyl-19-déformyl-4 " -halogéno-4 "-désoxy- desmycosine. On peut conduire la dé-diacétylation en chauf- fant la 2 ',4 '-di-0-acétyl-19-déformyl-4 "-désoxy-desmyco- sine dans le méthanol On peut vérifier l'évolution de la réaction par CCM sur gel de silice et y mettre fin en observant la disparition de la 2 ',4 '-di-O-acétyl-19- déformyl-4 "-désoxy-desmycosine. On peut réaliser l'isolement d'un intermédiai- re lors de la production du composé (lb) à partir du mélange réactionnel en versant le mélange réactionnel dans l'eau, en ajustant à p H 9 environ avec une base comme l'ammoniaque, en extrayant avec un solvant orga- nique non miscible à l'eau comme le chloroforme, en la- vant et en concentrant On peut conduire une purifica- tion plus poussée par chromatographie sur colonne en utilisant du gel de silice, de l'alumine active ou une résine d'adsorption. On peut en outre purifier le -composé (lb) par le même procédé comme par chromatographie sur colonne. (C) Composé ( 1) o R 1 et R 2 sont des atomes d'hy- drogène, à savoir la 4 ',4 "-désoxy-19-déformyl-desmyco- sinellcl: On peut produire le composé (lc) ci-dessus en déformylant la 4 ',4 "-didésoxy-desmycosine avec l(C 6 H 5)3 Pl 3 Rh C 11 en présence d'un solvant organique inerte en chauffant. On peut préparer la 4 ',4 "-didésoxy-desmyco- sine en démycarosylant en position 4 ' de la 2 '-O-acétyl- tylosine avec un acide dilué, en acétylant le groupe hydroxyle en position 4 " de la 2 '-O-acétyl-desmycosine ainsi obtenue, en trifluorométhane-sulfonylant le grou- pe hydroxyle en position 4 ' de la 2 ',4 "-di-O-acétyl- desmycosine obtenue, en iodant en position 4 ' de la -7- 2 ',4 "-di-O-acétyl-4 '-O-trifluorométhanesulfonyl-desmy- cosine préparée, en désacétylant en position 4 " de la 2 ',4 "-di-0acétyl-4 '-désoxy-4 '-iodo-desmycosine ainsi préparée, en trifluorométhanesulfonylant le groupe hy- droxyle en position 4 " de la 2 '-O-acétyl-4 '-désoxy-4 '- iododesmycosine obtenue, en iodant en position 4 " de la 2 '-O-acétyl-4 '-désoxy-4 '-iodo-4 "-O-trifluorométhane- sulfonyl-desmycosine obtenue, et en désiodant et en désacétylant en position-2 ' de la 2 '-O-acétyl-4 ',4 "- di-désoxy-4 ',4 "-diiodo-desmycosine. On peut conduire la démycarosylation en posi- tion 4 ' par hydrolyse avec un acide dilué comme H Cl 0,3-0,5 N La réaction se déroule à la température am- biante et peut être suivie par CCM et on y met fin en vérifiant la disparition de la 2 '-acétyltylosine. On conduit l'acétylation ci-dessus du groupe hydroxyle en position 4 " en faisant réagir avec un halogénure d'acétyle dans un solvant organique inerte en présence d'une amine organique tertiaire Comme exemples d'amines organiques tertiaires on peut citer les suivantes pyridine, picoline, collidine, N-méthyl- morpholine, N-méthylpipéridine ou diméthylaniline, et la pyridine est celle qui est préférable pour jouer le rôle de solvant Comme exemple d'halogénure d'acétyle on peut citer le chlorure d'acétyle La réaction se déroule à la température ambiante et peut être suivie par CCM sur gel de silice, puis on y met fin en vérifiant la disparition de la 2 '-O-acétyldesmycosine Dans les trois groupes hydroxyles en position 3, 4 ' et 4 " de la 21-O-acétyl- desmycosine, on peut sélectivement introduire un groupe acétyle dans le groupe hydroxyle en position 4 " dans la condition d'acétylation ci-dessus. On réalise la 4 '-trifluorométhanesulfonyla- tion ci-dessus en faisant réagir la 2 ',4 "-di-O-acétyl- desmycosine avec un halogénure de trifluorométhane- sulfonyle dans un solvant organique inerte en présence d'une amine organique tertiaire Comme exemples d'a- mines organiques inertes on peut citer le dichloro- méthane, le chloroforme ou le dichloroéthane Comme exemples d'amines organiques tertiaires on peut citer la pyridine, la picoline, la collidine, la N-méthyl- morpholine, la N-méthylpipéridine, la diméthylaniline, la triéthylamine ou la diméthylaminopyridine, et on préfère la pyridine pour jouer le rôle de solvant. L'halogénure de trifluorométhanesulfonyle est le chlo- rure de trifluorométhanesulfonyle classique (CF 3502 C 1). La réaction se déroule à une température inférieure à la température ambiante et peut être suivie par CCM sur gel de silice, et on y met fin en vérifiant la dispari- tion de la 2 ',4 "-di-0-acétyl-desmycosine. On peut réaliser la 4 '-iodation ci-dessus en faisant réagir la 2 ',4 "-di-0-acétyl-4 '-0-trifluoro- méthanesulfonyl-desmycosine avec un iodure alcalin dans un solvant organique inerte Le solvant organique pré- féré est l'hexaméthylènephosphoramide (HMPA) ou le diméthylformamide Comme exemples d'iodures alcalins il faut citer Na I, KI ou Li I La réaction est conduite généralement en chauffant, de préférence à 50-10 C C. On peut suivre le déroulement de la réaction par CCM sur gel de silice et y mettre fin en vérifiant la dispa- rition de la 2 ',4 "-di-0-acétyl-4 '-O-trifluorométhane- sulfonyl-desmycosine. On peut conduire la désacétylation ci-dessus en position-4 " de la 2 ',4 "-di-0-acétyl-4 '-désoxy-4 '- iodo-desmycosine en traitant avec une solution diluée - dans le méthanol de Na OCH 3 La concentration de la so- lution méthanolique de Na OHC 3 est d'environ 0,05-0,3 %. La réaction se déroule à la température ambiante, et on peut la suivre par CCM sur gel de silice, et y mettre fin en observant la disparition de la 2 ',4 "-di-0-acétyl- 4 '-désoxy-4 '-iodo-desmycosine On peut arrêter la réac- tion en ajoutant de l'eau. On peut conduire la 4 "-trifluorométhanesulfo- nylation en faisant réagir la 2 '-0-acétyl-4 '-désoxy-4 '- iododesmycosine avec de l'acide trifluorométhanesulfo- nique anhydre l(F 3 C 502)20 l dans un solvant organique inerte en présence d'une amine organique tertiaire Les solvants organiques inertes préférés sont le dichloro- méthane, le chloroforme, le dichloroéthane ou l'acétone. Comme exemples d'amines organiques tertiaires on peut citer la pyridine, la picoline, la collidine, la N- méthylmorpholine, la N-méthylpipéridine et la diméthyl- aniline, et on préfère la pyridine La réaction se dé- roule en-dessous de la température ambiante On peut suivre le déroulement de la réaction par CCM sur gel de silice et y mettre fin en vérifiant la disparition de la 2 '-0-acétyl-4 '-désoxy-4 '-iodo-desmycosine. On peut conduire l'iodation en 4 " en faisant réagir la 2 '-0-acétyl-4 '-desoxy-4 ' -iodo-4 "-0-trifluoro- méthanesulfonyl-desmycosine avec un iodure alcalin dans un solvant organique inerte Comme exemples de solvants organiques inertes on peut citer le diméthoxyéthane ou l'acétone Les iodures alcalins préférés sont Na I, KI ou Li I On conduit habituellement la réaction en chauf- fant en-dessous du point d'ébullition du solvant orga- nique On peut suivre le déroulement de la réaction par CCM sur gel de silice et y mettre fin en observant la disparition du composé ci-dessus Il est préférable de retirer, de préférence avant la désiodation, le groupe 2 '-acétyle et le groupe 4 ',4 "-diiodo de la 2 '-O-acétyl- 4 ',4 "-di-désoxy-4 ',4 "-diiodo-desmycosine ainsi obtenue. On réalise la dé-4 ',4 "-diiodation en faisant réagir la 2 '-O-acétyl-4 ',4 "-didésoxy-4 ',4 "-diiodo- desmycosine avec de l'hydrure de tributylétain et une quantité catalytique d'azobis(isobutyronitrile) dans un -10- solvant organique inerte Le solvant organique préféré est le benzène ou le toluène La réaction se déroule sous une atmosphère de gaz inerte comme l'argon, et en- dessous du point d'ébullition du solvant organique On peut suivre le déroulement de la réaction par C Cl sur gel de silice et y mettre fin en observant la dispari- tion de la 2 '-O-acétyl-4 ',4 "-didésoxy-4 ',4 "-diiodo- desmycosine. On conduit la dé-2 '-acétylation en chauffant dans le méthanol On peut suivre le déroulement de la réaction par CCM sur gel de silice, et y mettre fin en vérifiant la disparition de la 2 '-O-acétyl-4 ',4 "-didéso- xy-desmycosine. On conduit la déformylation dans les condi- tions de reflux du solvant organique inerte Le solvant organique inerte préféré est le benzène On peut suivre le déroulement de la réaction par CCM sur gel de silice et y mettre fin en observant la 4 ',4 "-didésoxy-desmyco- sine. On peut réaliser l'isolement de l'intermédiai- re dans la production du composé ( 1 c) en versant le mé- lange réactionnel dans l'eau, en ajustant à pli 9 environ avec une base comme l'ammoniaque, en extrayant avec un solvant organique non miscible à l'eau comme le chloro- forme, en lavant et en concentrant On effectue une pu- rification plus poussée par chromatographie sur colonne en utilisant du gel de silice, de l'alunine active ou une résine d'adsorption. On peut également purifier le produit ( 1 c), si on le désire, par chromatographie sur colonne. La concentration minimale inhibitrice du com- posé ( 1) de l'invention est donnée au Tableau 1. Les exemples suivants précisent l'invention. Dans les exemples, les valeurs de Rf sont me- * surées, sinon spécifiées, par CCM en utilisant un sup- -11 - port et des agents de développement donnés ci-dessous. Support: Mlerck, DC-Fertigplatten Kiesel Gel 6 CF 254, Art 5715. Agent de développement: a: chloroforme méthanol ammoniaque ( 150: 10: 1) b: chloroformre méthanol -acide acétique eau ( 80:7:7: 1) c: benzène acétone ( 4: 1) d: benzène -acétone ( 8: 1) e: hexane benzène acétone acétate d'éthyle - méthanol ( 90: 80: 25: 60: 50) Tableau 1 CMI (,ug/ml) Echantillons Composé lil Témoin = H OH desco érythro,josa- Organismes expérimentauximyne mrne yce Staphy Jlococcus aureus ATCC 6538 P 60,05 0,1 0,8, 1-0,O 5 0,4 115353 O,5 O O,O 05 0,8 0,1 0,8 M 5335 A O * 0,8 25 > 100 > 100 > 100 0116 '* 0,8 5,1 3,1 > 100 > 100 0119 * > 100 12,5 > 100 > 100 > 100 0127 * > 100 6,3 > 100 > 100 > 100 Streptococcus pyogenes N Y 5 ià 0,O 5 0,05 4 o 0,05 O O,05 40,O 5 1022 > 100 25 > 100 > 100 > 100 *Souche du groupe A résistante aux antibiotiques macrolides (isolats cliniques de souche résistante à 1 'érythromycine, à 1 'oléandomycine et au macrolide à noyau com- portant 16 chaînons). ru Ln ru Co ( O -13- Exemple 1 19-déformyl-4 '-désoxy-desmycosine: On ajoute l(C 6 H 5)3 Pl 3 Rh Cl ( 3,9 g) dans le 4 '- désoxy-desmycosine ( 3 g) dissoute dans le benzène sec ( 73 ml) et on fait réagir à 80 C pendant 6 heures On retire le benzène sous vide, on ajoute une faible quan- tité d'acétone au résidu et on filtre le précipité On concentre sous vide la solution filtrée, on dissout le résidu dans le benzène ( 20 ml) et on l'extrait 3 fois avec H Cl 0,2 N ( 40 ml) On ajuste la couche aqueuse à p H 9 avec de l'ammoniaque dilué et on extrait 3 fois avec du chloroforme ( 40 ml) On sèche la couche de chloroforme en ajoutant du sulfate de magnésium anhydre, et on sèche sous vide pour obtenir la 19-déformyl-4 '- désoxy-desmycosine ( 2 g). CCM: Rfa = 0,53, Rfb = 0,25 Masse (CI) m/e: 728 (Mi+), 710, 379, 363, 176, 158. RMN ( 100 M Hz CDC 13) ô ppm: 1,77 (s, 3 H), 2,28 (s, 6 H), 3,48 (s, 3 H), 3,61 (s, 3 H), 4,24 (d, 1 H), 4,55 (d, 1 H), 4,94 ( 1 H), 5,85 (d, 1 H), 6,29 (d, 1 H), 7,28 (d, 1 H) Exemple de référence I 4 '-désoxydesmycosine: ( 1) 2 ',4 "-di-O-acétyl-desmycosine: On ajoute de l'anhydride acétique ( 25 ml) à de la tylosine ( 60 g) dissoute dans l'acétone ( 500 ml), et on agite à la température ambiante pendant I heure 1/2 On verse le mélange réactionnel dans de l'eau gla- cée ( 5 litres), on ajuste à p H 9 en ajoutant de l'ammo- niaque et on filtre la 2 '-O-acétyl-tyrosine précipitée que l'on dissout dans HC 1 0,4 N ( 50 ml) et on agite à la température ambiante pendant 1 heure On ajuste le mélange réactionnel à p H 9 en ajoutant de l'ammoniaque et on extrait avec du chloroforme ( 500 ml) On lave la couche de chloroforme avec de l'eau, on sèche en ajou- -14- tant du sulfate de magnésium anhydre, on sèche sous vide pour obtenir une poudre brute de 2 '-O-acétyl- desmycosine ( 53 g), que l'on dissout dans le dichloro- éthane sec ( 250 ml), on ajoute de la pyridine ( 13 ml) et du chlorure d'acétyle ( 9,3 ml), puis on agite à la température ambiante pendant 1 heure On verse le m 6- lange réactionnel dans de l'eau glacée ( 2,5 litres), on ajuste à p H 9 avec de l'ammoniaque, et on extrait avec du chloroforme ( 250 ml) On lave la couche de chloro- forme avec de l'eau, on sèche en ajoutant du sulfate de magnésium anhydre, on concentre sous vide, puis on purifie le résidu par chromatographie sur colonne sur gel de silice ( 1,5 kg) en utilisant du benzène-acétone ( 5:1) On recueille les fractions présentant un Rfe = 0,42 et on sèche sous vide pour obtenir la 2 ',4 '-di-O- acétyl-desmycosine sous la forme d'une poudre blanche ( 15,2 g). CCM: Rfc = 0,07, Rfd = 0,01, Rfe = 0,42 Masse (CI): 856 (MH+), 858, 622, 390, 235, 218, 217. RMN ( 100 M Hz, CDC 15) ôppm: 1,79 (s, 3 H), 2,07 (s, 3 H), 2,11 (s, 5 H), 2,40 (s, 6 H), 3,48 (s, 3 H), 3,52 (s, 3 H), 4,32 (d, 1 H), 4,45 (d d, 1 H), 4,63 (d, 1 H), 4,8-5,2 ( 2 H), 5,90 (d, 1 H), 6,29 (d, 1 H), 7,32 (d, 1 H), 9,68 (s, 1 H). ( 2) 2 ',4 "-di-0-acétyl-4 '-0-trifluorométhanesulfonyl- desmycosine: On ajoute de la triéthylamine ( 1 ml), de la diméthylaminopyridine ( 83 mg) et CF 3502 Cl ( 0,72 ml) à de la 2 ',4 "di-0-acétyl-desmycosine ( 2,52 g, 2,71 m M) dissoute dans la pyridine sèche ( 9 ml), et on agite à 0 C pendant 2 heures On verse le mélange réactionnel dans de l'eau glacée ( 300 ml), on ajuste à p H 9 et on filtre le précipité On dissout le précipité dans le chloroforme ( 100 ml), on le lave avec H Cl 0,1 N, de l'eau et de l'ammoniaque dilué et on sèche sous vide -15- pour obtenir une poudre brute de 2 ',4 "-di-O-acétyl-4 '- O-trifluorométhanesulfonyl-desmycosine ( 2,6 g). CCM: Rfc = 0,53, Rfd = 0,17, Rfe = 0,78. Analyse élémentaire lC 44 H 68018 ESF 3 l: C% H/o N S% FS Trouvé: 53,49 6, 94 1,42 5,77 3,24 Calculé: 53,77 7,15 1,16 5,26 3,13 RMN ( 100 M Hz, CEC 13) 6 ppm: 1,80 (s, 3 H), 2,10 (s, 3 H), 2,11 (s, 3 H), 2,43 (s, 6 H), 3, 48 (s, 3 H), 3,54 (s, 3 H), 4,36 (d, 1 H), 4,45 (d d, 1 H), 4,63 (d, 1 H), 4,8-5,2 ( 3 H), 5,90 (d, 1 H), 6,29 (d, 1 H), 7,32 (d, 1 H), 9,67 (s, 1 H). ( 3) 2 ',411-di-C-acétyl-4 '-désoxy-4 '-iodo-desmycosine: On ajoute du Na I ( 1,52 g) à de la 2 ',4 "-di-0- acétyl-4 '-0-trifluorométhanesulfonyl-desmycosine ( 2,0 g) dissoute dans de l'hexaméthylphosphorotriamide ( 8 ml), et on fait réagir à 70 C pendant 40 heures On verse le mélange réactionnel dans de l'eau glacée ( 200 ml), on ajuste à p H 9 en ajoutant de l'ammoniaque diluée et on recueille le précipité par filtration On dissout le filtrat dans le chloroforme ( 50 ml), on le lave à l'eau, on sèche avec du sulfate de magnésium anhydre et on con- centre sous vide On purifie le résidu par chromatogra- phie sur colonne sur gel de silice ( 70 g) en utilisant du benzèneacétone ( 9:1) On recueille les fractions présentant un Rfc = 0,59 et on concentre sous vide pour obtenir la 2 ',4 "-di-O-acétyl-4 '-iododesmycosine ( 260 mg). CCM Rfc = 0,59, Rfd = 0,22, Rfe = 0,80. Réaction de Beilstein: positive. Masse (CI): 966 (MH+), 948, 650, 623, 605, 407, 389, 371, 344, 326, 217, 198. ( 4) 2 ' -0-acétyl-4 ' -désoxy-4 '-iodo-desmycosine. On ajoute de la 2 ',4 "-di-0-acétyl-4-désoxy-4 '- iodo-desmycosine ( 130 mg) dans une solution de Na OCH 3 à -16- 0,15 ' méthanol ( 1,5 ml) et on agite à la temperature ambiante pendant I heure On arrête la réaction en ajoutant de l'eau ( 20 ml) et on extrait avec du chloro- forme ( 20 ml) On lave la couche de chloroforme avec de l'eau, on sèche avec du sulfate de magnésium anhydre et on sèche sous vide pour obtenir la 2 '-O 0-acétyl-4 '- désoxy-4 '-iodo-desmycosine ( 110 mg). CCM: Rfc = 0,27, Rfd = 0,07, Rfe = 0,61. ( 5) 4 '-désoxy-desmycosine: On ajoute une quantité catalytique d'azobis- isobutyronitrile et d'hydrure de tributylétain ( 37,8 l) à de la 2 '-O-acétyl-4-désoxy-4 '-iodo-desmycosine dis- soute dans le benzène sec ( 2,2 ml), et on fait réagir à C pendant 3 heures sous une atmosphère d'argon On ajoute du chloroforme ( 20 ml) au mélange réactionnel, on lave avec de l'ammoniaque dilué, on sèche avec du sulfate de magnésium anhydre et on concentre sous vide. On purifie le résidu par chromatographie sur colonne sur gel de silice ( 5 g) en utilisant du benzène-acétone ( 2:1) On recueille les fractions présentant un Rfe = 0,17 et on concentre sous vide On ajoute du méthanol ( 10 ml) au résidu et on fait refluer pendant 16 heures. On sèche le mélange réactionnel sous vide pour obtenir la 4 '-désoxy-desmycosine ( 37 mg). CCM: Rfa = 0,38, Rfb = 0,15. Masse (CI): 756 (I'h+), 738, 582, 564, 547, 407, 391, 389, 175, 174, 158. RMN ( 100 M Ez, CDC 13) 6 ppm: 1,77 (s, 3 H), 2,26 (s, 6 H), 3,49 (s, 3 H) , 3,61 (s, 3 H), 4,20 (d, 1 H), 4,56 (d, 1 HO, 4,98 ( 1 H), 5,92 (d, 1 H), 6,28 (d, 1 H), 7,34 (d, 1 H), 9,70 (s, IH). Exemple 2 19-déformyl-4 "-désoxy-desmycosine On ajoute dul(C 6 H 5)3 Pl 3 Rh Cl ( 4, 6 g) à de la 4 "-déAsoxy-desmycosine ( 3,5 g) dissoute dans du benzène 17- sec ( 85 ml), et on fait réagir à 800 C pendant 6 heureu On enlève le benzène par distillation sous vide On ajoute au résidu une faible quantité d'acétone et on filtre le précipité On concentre le filtrat sous vide. On extrait 3 fois le résidu dissous dans le benzène ( 20 ml) avec H Cl 0, 2 N ( 40 nml) On ajuste la couche aqueuse à p H 9 en ajoutant de l'ammoniaque dilué et on extrait 3 fois avec du chloroforme ( 40 ml) On sèche la couche de chloroforme avec du sulfate de magnésium an- hydre, on sèche sous vide pour donner la 19-déformyl- 4 "-désoxy-desmycosine ( 2,3 g). CCM: Rfa 0,44, Rfb = 0,27. Masse (CI) m/e: 728 (MH+), 710, 553, 190, 174, 159, 127. RPN ( 100 M Hz CDC 13) bppm: 1,78 (s, 3 H), 2,50 (s, 6 H), 3,40 (s, 3 H), 3,48 (s, 3 H), 4,29 (d, 1 H), 4,64 (a, 1 H), 5,00 ( 1 H), 5,85 (d, 1 H), 6,24 (d, 1 H), 7,25 (d, 1 H). Exemple de référence 2 ( 1) 2 ',4 '-di-0-acétyldesmycosine On ajoute de l'anhydride acétique ( 5,0 ml) à de la desmycosine ( 5,0 g, 6,48 m M) dissoute dans le di- chloroéthane sec ( 25 ml), et on agite à la température ambiante pendant I heure On agite le mélange reaction- nel en ajoutant de l'ammoniaque dilué jusqu'à p H 9 On sèche la couche de dichloroéthane avec du sulfate de magnésium anhydre et on sèche sous vide pour obtenir la 2 ',4 '-di-O-acétyl-desmycosine ( 4,6 g). CCM: Rfc = 0,14, Rfd = 0,04, Rfe = 0,48. Masse (CI): 856 (Ie H+), 838, 666, 664, 407, 391, 276, 258, 216, 175. RMN ( 100 M Hz, CDC 15) 6 ppm: 1,79 (s, 3 H), 2,04 (s, 3 H), 2,05 (s, 3 H) , 2,34 (s, 6 H), 3,49 (s, 3 H), 3,61 (s, H 11), 4,51 (d, 1 H), 4,56 (d, 1 H), 4,75 (d d, 1 H), 4,88 (d d, 1 H), 5,00 ( 1 H), 5,91 (d, 1 H), 6,29 (d, 1 H), 7,33 -18- (d, 1 IH), 9,67 (s, 1 H). ( 2) 2 ',4 '-di-0-acétyl-4 "-O-trifluorométhanesulfonyl- desmycosine: On ajoute de la pyridine ( 1,08 ml) et du (CF 3502)20 ( 1,81 ml) à de la 2 ',4 '-di-O-acétyl-desmyco- sine ( 4,6 g) dissoute dans le dichloroéthane ( 25 ml) et on agite à O C pendant I heure On verse le mélange ré- actionnel dans de l'eau glacée ( 100 ml) et on extrait avec du chloroforme On lave la couche de chloroforme avec de l'eau et de l'ammoniaque dilué, dans cet ordre, on sèche avec du sulfate de magnésium anhydre, et on sèche sous vide pour obtenir une poudre brute de 2 ',4 '- di-O-acétyl-4 "-O-trifluorométhanesulfonyl-desmycosine ( 4,6 g). CCM: Rfc = 0,41 Analyse élémentaire lC 44 H 68 NO 185 F 3 l: C% HOD % N% Fo% O SO Trouvé: 53,49 6,94 1,42 5,77 3,24 Calculé: 53,43 7,13 1,14 5,22 3,40 REN ( 100 M Hz, CDC 13) 8 ppm: 1,79 (s, 3 HO, 2,06 (s, 6 H), 2,38 (s, 6 H), 3,51 (s, 3 H), 3,60 (s, 3 H), 4,52 (d, 1 H), 4,41 ( 1 H), 4,63 (d, IH), 4,75 (d d, 1 H), 4,89 (d.d, 1 H), 5,00 (IH), 5,91 (d, 1 H), 6,30 (d, 1 H), 7,32 (d, 1 H), 9,67 (s, 1 H). ( 3) 2 ',4 '-di-0-acétyl-4 "-désoxy-4 "-iodo-desnycosine: On ajoute du Na I ( 1,67 g) à de la 2 ',4 '-di-0- acétyl-4 "-0-trifluorométhanesulfonyl-desmycosine ( 2,2 g) dissoute dans le diméthoxyéthane sec ( 11 ml) et on fait réagir à 70 O C pendant 6 heures On verse le mélange ré- actionnel dans l'eau ( 100 ml) et on extrait avec du chloroforme On lave la couche de chloroforme avec de l'ammoniaque dilué et de l'eau dans cet ordre, on sèche avec du sulfate de magnésium anhydre et on concentre - sous vide On dissout le résidu dans une petite quanti- té de benzène et on purifie par chromatographie sur co- lonne sur gel de silice ( 75 g) en utilisant du benzène- acétone ( 10:1) On recueille les fractions présentant un Rfc = 0,43 et on sèche sous vide pour donner la 2 ',4 '-di-C-acétyl-4 "-désoxy-4 "-iododesmycosine ( 3359 mg). CCM: Rfc = 0,45, Rfd = 0,15, Rfe = 0,74 Réaction de Beilstein: positive Masse (CI): 966 (Mi H+), 948, 840, 852, 710, 692, 682, 664, 409, 407, 591, 389, 373, 371, 285, 276, 274, 258. ( 4) 2 ',4 '-di-C-acétyl-4 "-désoxy-desmycosine: On ajoute une quantité catalytique d'azobis- isobutyronitrile et d'hydrure de tributylétain ( 33 l) à de la 2 ',4 '-diC-acétyl-4 "-désoxy-4 "-iodo-desmycosine ( 100 mg, 0,104 mri) dissoute dans le benzène sec ( 2 ml), et on fait réagir à 60 C pendant 5 heures sous une at- mosphère d'argon On ajoute de l'eau ( 20 ml) au mélange réactionnel et on extrait avec du chloroforme ( 20 ml). On sèche la couche de chloroforme avec du sulfate de 2 c magnésium anhydre et on concentre sous vide On purifie le résidu par chromatographie sur colonne sur gel de silice ( 5 g) en utilisant du benzèneacétone ( 6:1) On recueille les fractions présentant un Rfc = 0,22 et on sèche sous vide pour donner la 2 ',4 '-di-O-acétyl-4 "- désoxy-desmycosine. CCM: Rfc = 0,22, Rfd = 0,05, Rfe = 0,59. Masse (CI): 840 (MH+), 822, 276, 258, 159, 127. ( 5) 4 "-désoxy-desmycosine: On ajoute du méthanol ( 10 ml) à de la 2 ',4 '- di-0-acétyl-4 "-désoxy-desmycosine obtenue ci-dessus et on fait refluer pendant 16 heures On sèche le mélange réactionnel sous vide pour obtenir la 4 "-désoxy-des- mycosine ( 41 mg). CCM: Rfa = 0,29, Rfb = 0,18. iasse (CI): 756 (MH+), 738, 597, 581, 565, 407, -2 C - 391, 389, 192, 174, 159, 127. RPN ( 100 1 M Hz, CDC 13) b ppm: 1,80 (s, 3 H), 2,50 (s, 6 H), 3,40 (s, 3 H), 3,49 (s, 5 H), 4,25 (d, 1 H), 4,64 (d, 1 H), 5,02 ( 1 H), 5,93 (d, 1 H), 6,25 (d, 1 H), 7,32 (d, 1 H), 9,69 (s, IH). Exemple 3 19-déformyl-4 "-désoxy-desmycosine: ( 1) 2 ',4 '-di-0-acétyl-19-déformyldesmycosine: On ajoute de l'anhydride acétique ( 2,5 ml) à de la 19déformyl-desmycosine ( 3,9 g) lbrevet japonais non soumis à l'inspection publique n 56-55399 l dissous dans le dichloroéthane sec ( 20 ml), et on agite à la. température ambiante pendant I heure On agite le mélan- ge réactionnel en ajoutant de l'ammoniaque diluée jus- qu'à p H 9 On sèche la couche de dichloroéthane avec du sulfate de magnésium anhydre et on sèche sous vide pour obtenir la 2 ',4 '-di-0acétyl-19-déformyl-desmycosine ( 4,15 g). CCM: Rfc = 0,26 Masse (CI) m/e: 828 (MC+), 810, 379, 276, 258, 175, 129. ( 2) 2 ',4 '-di-0-acétyl-19-déformyl-4 "-0-trifluorométhane- sulfonyl-desmycosine: On ajoute du (CF 3502)20 ( 1,7 ml) à O C à de la 2 ',4 '-di-0-acétyl-19-déformyl-desmycosine ( 4,15 g) dissoute dans la pyridine sèche ( 16 ml) et on agite à 0 C pendant I heure On verse le mélange réactionnel dans de l'eau glacée ( 100 ml) et on extrait avec du chloroforme On lave la couche de chloroforme avec de l'eau, H Cl dilué et de l'ammoniaque diluée, dans cet ordre, on sèche avec du sulfate de magnésium anhydre et on concentre sous vide pour donner la poudre brute de 2 ',4 '-di-0-acétyl-19-déformyl-4 "-O-trifluorométhane- sulfonyl-desmycosine ( 4,45 g). CCM: Rfc 0,59 -21- Analyse élémentaire lC 43 H 68 N 017 SF 3 l C% H 7 % N% FO s% Calculé: 53,80 7,14 1,46 5,94 3,34 Trouvé: 53,91 7,29 1,28 5,50 3,58 ( 3) 2 ',4 '-di-O-acétyl-19-déformyl-4 "-désoxy-4 "-iodo- desmycosine: On ajoute du Na I ( 3,0 g) à de la 2 ',4 '-di-0- acétyl-19-défornyl-4 "-O-trifluorométhanesulfonyl-desmy- cosine ( 4,0 g) dissoute dans le diméthoxyéthane sec ( 20 ml), et on fait réagir à 70 C pendant 2 heures 1/2. On verse le mélange réactionnel dans l'eau ( 200 ml) et on extrait avec du chloroforme On lave la couche de chloroforme avec de l'ammoniaque diluée et de l'eau, on sèche avec du sulfate de magnésium anhydre et on con- centre sous vide On dissout le résidu dans une faible quantité de benzène et on purifie par chromatographie sur colonne sur gel de silice ( 150 g) en utilisant du benzène-acétone ( 16:1) On recueille les fractions pré- sentant un Rfc = 0,62 et on concentre sous vide pour obtenir la 2 ',4 '-di-0-acétyl-19-déformyl-4 "-désoxy-4 "- iodo-desmycosine ( 559 mg). CCM': Rfç = 0,62 Masse (CI) m/e: 938 (MH+), 920, 879, 812, 682, 654, 636, 379, 363, 345, 285, 276, 258. ( 4) 2 ',4 '-di-O-acétyl-19-déformyl-4 "-désoxy-desmycosine: On ajoute une quantité catalytique d'azobis- isobutyronitrile et d'hydrure de tributylétain ( 1881) à de la 2 ',4 '-di-O-acétyl-19-déformyl-4 "-désoxy 4 "- iodo-desmycosine ( 555 mg) dissoute dans du benzène sec ( 11 ml), et on fait réagir à 600 C pendant 3 heures sous une atmosphère d'argon On ajoute de l'eau ( 50 ml) au mélange réactionnel et on extrait avec du chloroforme ( 25 ml) On sèche la couche de chloroforme avec du sul- fate de magnésium anhydre et on concentre sous vide On purifie le résidu par chromatographie sur colonne sur -22- gel de silice ( 20 g) en utilisant du benzène-acétone ( 9:1) On recueille les fractions présentant un Rfc = 0,40 et on concentre sous vide pour donner la 2 ',4 '-di- 0-acétyl-19-déformyl-4 "-désoxy-desmycosine ( 490 mng). ( 5) 19-déformyl-4 "-désoxy-desmycosine: On ajoute du méthanol ( 20 ml) à de la 2 ',4 '- di-0-acétyl-19-déformyl-4 "-désoxy-désmycosine ( 490 mg) et on fait refluer pendant 16 heures On concentre le mélange réactionnel sous vide pour donner la 19-défor- myl-4 "-désoxy-desmycosine ( 450 mg). CCM: Rfa = 0,44, Rfb = 0,27 Masse (CI) m/e: 728 (SE+), 710, 553, 190, 174, 159, 127. Exemple 4 4 ',4 "-di-désoxy-19-déformyl-desmycosine: ( 1) 2 '-0-acétyl-4 ',4 "-di-désoxy-4 ',4 "-diiodo-desmyco- sine: On ajoute de la pyridine ( 0,59 ml) et du CF 3502 C 1 ( 0,99 ml) à O C à de la 2 '-O-acétyl-4 '-désoxy- 4 '-iodo-desmycosine ( 2,72 g) obtenue dans l'exemple de référence I ( 4) ci-dessus, on dissout dans le dichloro- éthane sec ( 14 ml) et on agite à O C pendant 1 heure. On verse le mélange réactionnel dans de l'eau glacée ( 60 ml) et on extrait avec du chloroforme On lave la couche de chloroforme avec de l'eau et de l'ammoniaque diluée, on sèche avec du sulfate de magnésium anhydre et on concentre sous vide pour obtenir la 2 '-0-acétyl- 4 '-désoxy-4 '-iodo-4 "-0-trifluorométhanesulfonyl-desmy- cosine que l'on dissout dans le diméthoxyéthane sec ( 10 ml), on y ajoute du Na I ( 2,2 g) et on fait réagir à 60 pendant 4 heures On verse le mélange réactionnel dans de l'eau glacée ( 100 ml), on ajuste & p H 9 en ajoutant de l'ammoniaque diluée et on extrait avec du chloroforme On lave la couche de chloroforme avec de l'eau, on sèche avec du sulfate de magnésium anhydre, 12822 -23- on concentre sous vide et on purifie par chromatogra- phie sur colonne sur gel de silice ( 150 g) en utili- sant du benzène-acétone ( 20:1) On recueille les frac- tions présentant un Rfc = 0,80 et on concentre sous vide pour donner la 2 '-0-acétyl-4 ',4 "-di-désoxy-4 ',4 "-di- iodo-desmycosine ( 439 mg). CCM: Rfc = 0,80, Rfd = 0,50, Rfe = 0,88. ( 2) 4 ',4 "-di-désoxy-desmycosine: On ajoute une quantité catalytique d'azobis- isobutyronitrile et d'hydrure de tributylétain ( 0,32 ml) à de la 2 '-O-acétyl-4 ',4 "-di-désoxy-4 ',4 "-diiodo-desmy- cosine dissoute dans le benzène sec ( 10 ml) et on fait réagir à 60 C sous une atmosphère d'argon On ajoute de l'eau ( 100 ml) au mélange réactionnel et on extrait avec du chloroforme ( 100 ml) On sèche la couche de chloro- forme avec du sulfate de magnésium anhydre et on con- centre sous vide On purifie le résidu par chromatogra- phie sur colonne sur gel de silice ( 20 g) en utilisant du benzèneacétone ( 3:1) On recueille les fractions présentant un Rfe = 0,24 et on concentre sous vide pour donner la 2 '-0-acétyl-4 ',4 "-di-désoxydesmycosine On y ajoute du méthanol ( 40 ml) et on fait refluer pendant 16 heures On concentre le mélange réactionnel sous vide pour donner la 4 ',4 "-di-désoxy-desmycosine ( 198 mg). CCM: Rfa = 0,49, Rfb = 0,19. Masse (CI) 740 (IH+), 722, 608, 606, 582, 565, 407, 591, 573, 175, 174, 159, 158, 127. PJRN ( 100 M Hz, CDCI 5) 6 ppm: 1,78 (s-, 3 H), 226 (s, 6 H), 3,40 (s, 5 H), 5,48 (s, 3 H), 4,20 (d, 1 H), 4,64 (d, 1 H), 5,00 ( 1 H), 5,95 (d, 1 H), 6,28 (d, 1 H), 7,33 (d, 1 H), 9,70 (s, 1 H). ( 3) 4 ',4 "-di-désoxy-19-déformyl-desmycosine: On ajoute du l(C 6 H 5)3 Pl 3 Rh Cl ( 156 mg) à de la 4 ',4 "-di-désoxy-desmycosine ( 100 mg) dissoute dans le benzène sec ( 2,5 ml), et on agite à 80 C pendant heures On concentre le mélange réactionnel sous vide. On introduit le résidu sur une plaque de CCM de gel de silice (Merck A G, Art 5717) que l'onr développe avec du chloroforme méthanol-ammoniaque concentrée ( 150:10:1) et on détache une bande à Rf = 0,60. On extrait le gel de silice détaché avec du chloroforme-méthanol ( 1:1) et on concentre l'extrait sous vide pour donner la 4 ',4 "-di-désoxy-19-déformyl- desmycosine ( 78 mg). CCM: Rfa = 0,60 RMN ( 100 M Hz, CD C 13) ô ppm: 1,78 (s, 3 H), 2,27 (s, 6 H), 3,40 (s, 3 H), 3,48 (s, 3 H), 4,24 (d, 1 H, 7,3 Hz), 4,64 (d, 1 H, 7, 9 Hz), 4,98 (m, 1 H), 5,89 (d, 1 H, 10,3 Hz), 6,29 (d, 1 H, 15,7 Hz), 7, 29 (d, 1 H, 15,7 Hz) Masse (CI, isobutane): 712 (MH+), 694, 363, 159, 158, 127. -25- it EVENDICATIONI - I Composé de formule CH 3 OH OH N(CH 3)2 CH 3 H 3 CO OCH 3 o R 1 et R 2 représentent un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxyle o l'un des radicaux R 1 et R 2 est au moins un'atome d'hydrogène, ou un de ses sels. 2 19-Déformyl-4 '-désoxy-desmycosine ou son sel. 3 19-Défornyl-4 "-désoxydesmycosine ou son sel. 4 4 ',4 "-Désoxy-19-déformyl-desmycosine ou son sel. A titre de médicament, un composé selon l'une des revendications 1 à 4. 6 Composition pharmaceutique comprenant à titre de principe actif un composé selon l'une des re- vendications I à 4. CH 3 R 2