La présente invention a pour objet un vaccin contre la rhino-pneumonite du cheval (avortement viral de la Jument). Elle concerne également un procédé de préparation de ce vaccin. Le virus de la rhino-pneumonite (Tortor equae, virus 5 de l'avortement des Juments) provoque, surtout chez le poulain, une maladie du système respiratoire et, chez la Jument gravide, entraîne souvent 1'avortement. Le germe appartient au groupe des virus herpétiques et il est répandu dans le monde entier. Le virus peut être, dans un haras, la cause de pertes finan-10 clères considérables. Jusqu'à présent, 11 n'était pas possible d*éviter, grâce à une vaccination, les avortements épidénlqueff d'étiologie virale dans les élevages de chevaux. Tous les essais ▼lsant à produire, à partir de virus inactivés ou atténués, un vaccin efficace contre 1'avortement de la Jument, ont donné 15 des résultats décevants, car, ou bien 11 n'apparaissait aucune Immunité, ou bien le virus du vaccin conservait toujours une virulence trop forte. C'est ainsi qu'un vaccin vivant obtenu par passages sur le hamster doré provoque encore des avortement* vaccinaux. 20i : Or, la Demanderesse a trouvé un vaccin contre l'in- I !faction par le virus de la rhino-pneumonite des équldés (avortaient viral de la Jwent), et un procédé pour la préparation de ce vaccin, caractérisé en ce qu'après primo-culture, on atténue, par passages en série sur des cultures de cellules 25 de première explantation, faites & partir de tissus ne provenant pas d'équldés (pérlssodactyles), le virus de la rhino-pneunonlte. Jusqu'à ce qu'il ait complètement perdu ses propriétés pathogènes pour l'organisme du cheval, on ajoute éventuellement un adjuvant aux produits récoltés contenant le virus y> et, le cas échéant, on lyophilise. Dans la présente invention, on envisage, comme agent de la rhlno-pneumonlte (avortement viral de la Jument), le virus herpétique équin I, qui est le virus rhlno-pneumonltique vrai. Comme exemples de souches de ce virus, on peut citer les 55 souches RAC-H, Hannover 1835, Army 183 et Ky-D. On recueille le virus dfe la rhino-pneumonite, par exemple, au moyen de prélèvements du mucus nasal de poulains, ou par homogénéisation d'organes d'un foetus de cheval expulsé avant terme. La primo-culture du virus peut s'effectuer, de ma-40 nlère connue, en culture de tissus (cf. Dulbecco et Vogt, J. 69 Q6217 2 2003343 exp. Med. Biol. Med. 85, (195^)# P- 202) ou sur l'animal. Elle a pour but l'isolement et la multiplication du virus, de façon qu'on dispose d'un matériel suffisant pour des études ultérieures, 5 telles que passages, titrages et épreuves de neutralisation. En général, on fait suivre l'isolement de 3 à 10 passages en vue de la multiplication. Comme matériel de départ pour la réalisation de cultures de cellules, destinées à la primo-culture et à la 10 multiplication du virus, on pense surtout à des organes, comne le rein, la rate, le testicule, la peau d'équldés, de bovidés, de suidés, d'ovidés, de capridés, de simiens, ainsi que de petits anlvaux de laboratoire, comme le hamster doré et le lapin, et également à des lignées cellulaires continues, comme 15 les cultures de cellules BHK-21, AMD, Hela, PK 15 et HK 13. La primo-culture du virus peut aussi être réalisée sur des anima ut de laboratoire, par exemple le hagrster doré. On donne généralement la préférence aux reins de chevaux ou de porcelets, ainsi qu'au hamster doré. 20 On réalise l'atténuation en cultures de cellules ne provenant pas d1équldés. Comme exemples de cultures de cellules de première explantation, on citera celles faites, de préférence, à partir d'organes d'ongulés-à l'exception d'organes d'équldés - en particulier à partir de reins de moutons et 25 de porcs, de préférence de reins de porcelets. On peut également mettre en Jeu, pour 1'atténuation, des cultures de cellules faites à partir de lignées stables. Le nombre des passages à effectuer Jusqu'à ce que le virus de la rhinopneumonlte ait complètement perdu son pouvoir 30 pathogène pour l'organisme de 1'hôte, c'est-à-dire du cheval, dépend dans une grande mesure du type de cultures de cellules utilisées. C'est ainsi qu'on peut arriver à l'atténuation avec de 20 à 40, et, mieux, 2 5 à 30 passages sur cultures de cellules de rein de mouton, et avec de 240 à 300, et, mieux, 250 à 280, 35 passages sur cultures de cellules rénales de porcelet." Pour que l'on puisse affirmer qu'il y a vraiment atténuation, le produit doit satisfaire aux critères suivants ï a) Le titre infectieux pour le hamster doré, par inoculation en intra-péritonéale, doit présenter, par rapport 40 à la valeur initiale, une régression qui soit au moins de l'or- 69 06217 3 2003343 dre de 10^. Pour le titrage, on utilise des dilutions en série suivant les puissances de 10 ; on injecte, pour chaque dilution, à 4 hamsters dorés, 0,2 ml par animal, par vole intrapérito-néale ; l'évaluation s'effectue selon le procédé de Behrens, 5 B., Arch. exp. Path. Pharmak. l40, 237 (1929) et Karber, G., Arch. exp. Path. Pharmak. 162. 480 (1931). b) La conservation des propriétés immunisantes (pouvoir antigénique) pour le hamster doré, par comparaison avec le virus initial, doit être assurée. A cette fin, on inocule 10 au hamster doré le virus atténué (0,5 ml* par voie parentérale) et, trois semaines plus tard, on infecte l'animal avec le virus initial virulent (10.000 DL^g/ml), par voie intrapéritonéale. Plus de 70 % des animaux soumis à l'essai doivent survivre à l'infection d'épreuve. 15 c) Des juments à un stade avancé de gravidité, au 7ème, 8ème ou 9ème mois de celle-ci, qui sont sensibles au virus de 1'avortement, ne doivent ni tomber malades ni avorter après avoir reçu, par injection intra-musculaire ou sous-cu- 6 S tanée, le virus atténué (5 ml, titre viral compris entre 10 20 et 10^'^ DlC^g/ml ;DICT-0 désigne la DI^Q pour des cultures de tissus). La vaccination ne doit pas provoquer de réaction locale. Uhe poussée de fièvre diphasique, lors de la première injection, entre la l8ème et la 48ème heure, d'une part, et aux 8ème et 9ème Jours, d'autre part, ne présente 25 aucune importance. On ne doit plus observer de réaction fébrile lors de la deuxième injection. d) Des poulains âgés de 2 à 3 mois, qui ne contiennent pas d'anticorps spécifiques contre le virus de la rhino-pneumonite, ne doivent pas présenter de signes pathologiques après 30 injection par voie parentérale du virus atténué (5 ml# titre ^ C y c viral compris entre 10 et 10 DICT^g/ml). Une montée passagère de la température ne présente aucune importance (cf. paragraphe c ). Si l'on ajoute un adjuvant, on peut utiliser, à ce 35 titre, par exemple, des adjuvants minéraux (de préférence l'hydroxyde d'aluminium ou le phosphate d'aluminium). On peut également ajouter d'autres additifs et auxiliaires, couramment utilisés pour la production de vaccins, par exemple des stabilisants. 40 Les vaccins doivent présenter un titre de 10^'°® à 69 06217 11 2003343 10^'DICT^0/nil, de préférence égal à 10^' . Si on le désire, les vaccins peuvent également être lyophilisés. L'activité des vaccins conformes à l'invention est 5 déterminée sur la jument gravide. Pour ce faire, on inocule 5 ml du vaccin de l'invention à chacune de trois juments gravides qui se trouvent dans la période allant du 2ème au 3ème mois de la gravidité et/ou dans la période allant du Jème au 8ème mois de la gravidité, tandis qu'on laisse un témoin sans inoculation. 10 Pendant la période allant de 9ème au 11ème mois de la gravidité (c'est dans le dernier tiers du temps de gravidité que se produit l'avortement viral des juments), on infecte les animaux d'épreuve à l'aide d'une injection sous-cutanée de 10 ml de virus de la rhino-pneumonite Infectieux (souche Hannover 1835). 15 Au temps normal de parturition, les trois animaux immunisés mettent au monde des poulains en bonne santé, tandis que l'animal témoin présente un avortement dû à l'infection virale. La préparation des cultures de cellules et l'exécution des passages s'effectuent de manière connue. Une forme de 20 réalisation particulièrement intéressante du procédé de l'invention va être exposée de façon plus détaillée. On broie mécaniquement des reins de moutons ou de porcelets et on digère la substance intercellulaire à l'aide d'une solution à 0,25 % de trypsine dans un tampon phosphate à 25 piï 7,6. Les cellules se dégagent alors individuellement de la structure tissulaire, mais ne subissent pas l'action de la trypsine et conservent leur aptitude à se multiplier. On sépare par centrifugation les cellules qui sont en suspension dans la solution de trypsine, on]es lave à plusieurs reprises, par 30 exemple à l'aide d'une solution à 0,85 % de chlorure de sodium tamponnée au phosphate, puis on les remet en suspension dans un milieu de culture liquide. Comme milieux de culture liquides, conviennent par exemple la solution de Hanks, la solution d'Earle et le milieu 35 d'Eagle, le milieu pour culture de tissus 199 (TCM 199) à. l'hy-drolysat de lactalbumine, du sérum de veau et du liquide amniotique, de préférence le liquide amniotique de bovidés ainsi que le milieu pour virus VM2a Un milieu de culture liquide préféré est une solution 40 de Hanks ou d'Earle contenant 0,5 % d'hydrolysat de lactalbu- 69 06217 5 2003343 mine, 10 % de sérum de veau, des antibiotiques, par exemple 100 UI de pénicilline et 50 y de streptomycine ou 100 y de dihydrostreptomycine/ml, ainsi que 0,01 % de rouge phénol, comme indicateur. On règle entre 7,0 et 7,5» de préférence à 5 7,3» le pH du milieu de culture liquide, en ajoutant du bicarbonate de sodium ou en faisant passer 5 % d'anhydride carbonique . On introduit dans des récipients de verre le3 cellules en suspension dans le milieu et on les met à l'étuve à environ 10 37°• Les cellules rénales se déposent alors au fond du récipient, se multiplient par mitose et forment bient3t un épais tapis de cellules étroitement serrées les unes contre les autres. Au bout d'environ 3 à 4 Jours, on remplace le milieu de culture usé par du milieu frais. Lorsque le tapis de culture 15 de cellules a achevé sa croissance généralement au bout d'enoore deux ou trois Jours, on lui inocule la suspension de virus correspondante, à raison, par exemple, de 0,5 ml pour une culture en boîte de Roux et de 0,1 ml pour une culture en tube. 20 La culture et la multiplication du virus se font généralement à 37°• Le virus se multiplie à l'intérieur des cellules de la culture et les particules virales néoformées passent dans le milieu nutritif environnant. Le milieu, contenant du virus, d'une culture de tissus sert à l'inoculation 25 de la culture suivante et on peut ainsi effectuer les passages qui ont pour résultat l'atténuation. Si le virus obtenu par passages satisfait aux critères d'atténuation qui ont été indiqués, on peut utiliser sa suspension comme vaccin. Pour cela, on utilise comme milieu de 30 culture le milieu VMga ou un autre milieu synthétique ne contenant pas de sérum. Il peut également être utile d'ajouter un adjuvant, par exemple de l'hydroxyde d'aluminium, et de réaliser une forme de présentation sèche par lyophilisation. Ce vaccin (lyophilisé) convient parfaitement, après remise en 35 solution dans un solvant, par exemple dans l'eau distillée additionnée d'un taapon, pour l'immunisation des équidés contre la rhino-pneumonite du cheval (avortement viral de la-Jument ). Les exemples qui suivent ont pour but d'illustrer 40 la présente invention. Les températures y sont indiquées en 69 06217 6 2003343 degrés Celsius. EXEMPLE 1 A l'aide d'un tampon d'ouate stérile, on fait un prélèvement de mucus nasal d'un poulain infecté. On rince le 5 tampon d'ouate dans 5 ml de milieu de Hanks. On centrifuge le liquide de rinçage pendant 15 minutes à vitesse modérée (3000 t.p.m.). On fait incuber le surnageant (4,5 ml) pendant une demi-heure avec 0,5 ml d'une solution de streptomycine-péni-cilline, puis on en inocule 2 ml à des cultures de reins de 10 cheval, disposées dan3 des erlenmeyers de 100 ml et recouvertes de 10 ml de milieu de culture liquide. Après un temps d'adsorption allant jusqu'à 24 heures, on lave une culture ainsi ensemencée, on la recouvre d'un milieu d'entretien (solution de Hanks, additionnée de 0,5 % d'hydrolysat de lactal-15 bumine et de 2,0 % de sérum de veau, ainsi que d'antibiotiques et de rouge phénol) et on maintient à 37°. Le virus récolté subit encore 5 passages sur cultures de cellules rénales de cheval, puis des passages sur cultures de cellules rénales de mouton. Pour chaque ensemencement, on utilise 2 ml du liquide du pas-20 sage précédent, mais, à partir du 20ème passage, il suffit de 1 ml. Ici encore, on utilise comme milieu d'entretien la solution de Hanks avec 0,5 % d'hydrolysat de lactalbumine et 2,0 % de sérum de veau, ainsi que des antibiotiques et du rouge de phénol. Les cultures sont examinées quotidiennement au micros-25 cope pendant 6 à 10 jours. A chaque 5ème passage, on opère avec un milieu ne contenant pas de sérum et on examine, par inoculation au hamster doré , si le virus est atténué. Ce résultat est obtenu au bout de 25 passages sur cultures de cellules rénales de mouton. Le produit du 25ème passage, contenant du 30 virus, est recueilli et on y ajoute 0,1 % d'hydroxyde d'alumi- les poumons, la rate et les reins d'ion foetus de cheval expulsé 35 avant terme, puis on broie les différents organes dans un mortier avec une solution de chlorure de sodium tamponnée au phosphate (pH : 1,2), 100 UI par ml de pénicilline et 100 y par ml de dihydrostreptomycine, ainsi qu'avec du sable de mer, après quoi on centrifuge pendant 20 minutes à 3000 t.p.m. On fait 40 adsorber le surnageant de la centrifugation, en portions de nium. La teneur de ce vaccin en virus EXEMPLE 2 : Dans des conditions de stérilité, on prélève le foie, 69 06217 7 2003343 chacune 0,5 ml, sur au moins 4 cultures en tubes à essais de cellules rénales de porcelet (sans milieu d'entretien). Après adsorption pendant 2 heures, à 37°, à l'étuve, on retire de la culture de cellules le matériel d'inoculation et on recouvre 5 les cultures de chacune 2,0 ml de milieu d'entretien (liquide amniotique stérile de bovidés, antibiotiques et rouge de phénol). On examine les cultures quotidiennement au microscope. Dès qu'un effet cytopathogène spécifique s'est manifesté, on transfère le surnageant de la culture, suivant le procédé d'adsorp-10 tion, sur une nouvelle culture, puis on continue les passages de la même manière. Après environ 5 passages, il suffit de 0,1 ml du surnageant de la culture précédente pour effectuer le passage suivant. Après 100 passages, on ne transfère plus que 100 Ul/ml. A chaque 20ème passage, on effectue une épreuve 15 sur le hamster doré. Au 255ème passage, le titre infectieux pour le hamster doré a régressé de 10^. On ajoute au liquide de ce passage 0,1 % d'hydroxyde d'aluminium. La teneur en virus est de 8 2003343 REVENDICATIONS 1.- Un vaccin contre l'infection par le virus de la rhino-pneumonite du cheval (avortement viral de la jument), caractérisé en ce qu'il contient un virus de la rhino-pneumo- 5 nite atténué par des passages en série sur des cultures de cellules de première explantation, faites à partir de tissus ne provenant pas d'équidés, jusqu'à perte de son pouvoir pathogène pour l'organisme du cheval. 2.- Un vaccin tel que spécifié à la revendication 1, 10 caractérisé en ce qu'il contient un adjuvant. 3.- Un vaccin tel que spécifié aux revendications 1 et 2, caractérisé en ce qu'il a été lyophilisé. 4.- Un procédé de préparation d'un vaccin contre l'infection par le virus de la rhino-pneumonite du cheval 15 (avortement viral de la jument), caractérisé en ce que l'on atténue le virus de la rhino-pneumonite, après primo-culture, par des passages en série sur des cultures de cellules de première explantation, faites à partir de tissus ne provenant pas' d'équidés, jusqu'à perte de son pouvoir pathogène pour l'orga-20 nisme du cheval, on ajoute éventuellement un adjuvant au produit récolté, contenant du virus et, le cas échéant, on lyophilise le produit en question. 5.- Un procédé tel que spécifié à la revendication 4, caractérisé en ce que l'on réalise 1'atténuation sur des cul- 25 tures de cellules rénales de mouton ou de porcelet. 6.- Un procédé tel que spécifié aux revendications 4 et 5, caractérisé en ce que l'on effectue l'atténuation sur des cultures de lignées cellulaires continues.