i 2121713 la présente invention concerne un procédé pour la préparation de certains A^-5.20-dicéto-6.6-difluoro-11 (3,16a, 17a, 21 -tétraiiydroxyprégnène 16,17—cétals qui sont utiles comme agents anti-inflammatoires et glucocorticoïdes. Ces composés sont uti— 5 lisables pour le traitement de troubles allergiques, de maladies du collagène, de maladies de la peau, etc.. Un brevet récent, le brevet des E.U.A. n° 3 219 673 au nom de Boswell, décrit un procédé pour la préparation de 6.6-difluoro-3-céto-/\^-stéroldes, selon lequel un 3-acyloxy-5-10 fluoro-6-cétostéroïde est traité avec du tétrafluorure de soufre; le groupe 3-acyle est hydrolyse; le groupe 3-hydroxyle résultant est oxydé pour donner le groupe 3-céto; et la double liaison A4 est introduite par déshydrofluoration avec une base faible. Ce procédé est illustré dans l'Exemple 3 par la prépa-15 ration de la 6,6-difluoro-4-prégnène-3,20-dione. Aucun des composés décrits dans le brevet de Boswell n'a un groupe 16- ou 21-hydroxyle; il n'est pas décrit non plus de stéroîde ayant un groupe 16,17-cétal quelconque. Il est connu que les cétals sont très sensibles aux acides et on aurait donc pu penser qu'un pro-20 cédé similaire à celui décrit par Boswell dans son brevet ne serait pas applicable aux stéroïdes ayant un groupe 16,17-cétal. Certains A4 -3-céto-6,6-difluoroprégnènes ont été préparés en traitant un A3,A5 -3-alcoxy-6-fluoroprégnadiène avec du fluorure de perchloryle dans un solvant pyridine/tétrahydro-25 furanne aqueux. Ce procédé présente l'inconvénient qu'il donne des rendements extrêmement bas concernant le 6,6-difluoroprégnène dans un mélange difficilement séparable et qu'il utilise du fluorure de perchloryle, qui est un réactif coûteux et potentiellement dangereux. 30 Pourtant, certains stéroïdes ayant le groupe 16,17- cétal sont des agents biologiquement actifs importants. On a donc besoin d'un procédé simple, sûr et peu coûteux pour la préparation de A4-5.20-dicéto-6,6-difluoro-11 [3,16a, 17a,21 -tétraiiydroxyprégnène 16,17-cétals. 35 Selon la présente invention, on a maintenant découvert que la séquence de réactions décrite dans le brevet américain n° 3 219 673 précité peut être sensiblement appliquée à des stéroîde 16,17-cétals sans décomposition de ces groupes sensibles aux acides. On a trouvé aussi que la première étape de cette 72 00653 2 2121713 séquence, la réaction avec NOE, peut être considérablement améliorée par l'utilisation d'un mélange de NOE avec du NOBF^. Ce procédé peut être illustré par le schéma 1 suivant dans lequel le composé provenant de l'Etape 8 est un glucocorticolde actif et peut être utilisé dans les étapes restantes pour donner des composés plus actifs. SCHEMA 1 10 15 0 1 " R CO ou NOE NOE/NOBE. 20 30 0 1 " r'co^ 0 " A CH20CR^ N -NO, A1203.H20 35 72 00653 2121713 10 1 " r'co 0 " A ch-ocr4 t ^ c=o . 0X ,/ R" 0>\ Rc sf, acide de Lewis 15 20 1 " r'co 0 " A chqoœt i *- c=0 0. r' oh" 25 30 35 ch2oh 0 CH^-C. 3 x ch--c' > 1! O 0 dans la pyridine > 5 72 00653 4 2121713 l 0 CHo0-CCH, i 2 3 c=o 10 (a) r°j (b) - HF 15 20 0 ch2o-cch3 0=0 Base aqueuse 25 30 CHLOH i 0=0 R" --X, F F Hydroxylation microbiologique 8 * 72 00653 5 2121713 ' 10 ho O . \ F F O CH20-CCH5 c=o ,R" _ _ 0 IT-bromoaeétamide Pyridine 10 15 20 25 30 35 0 \ F F O CH2O-0CHj C=0 r.3 _.o / -~0\ 2 \r N-bromoacétamide 0 CH20-CCH5 0 CH..O-CCH,, i 0=0 acide perchlorique 11 0 It KOCCH^ 12 Complexe HF-urée 13 72 00653 6 2121713 ' o 10 15 20 25 CHo0-CCH, ! 2 3 0=0 3 0. --o\ NET CHo0H i 0=0 R" R' Dichlorodicyanoquinone 3» 14 KoC0, 2 3 \ ? 15 (1) CH^SOgOl-pyridine ^ (2) LiCl-diméthylformamide 16 30 35 HO 0 X F F CH0C1 « & 0=0 , r- r^v-X, r 72 00653 7 2121713 1 Les caractères de référence utilisés dans le schéma ci-dessus ont la signification suivante : t 4- R et R sont chacun individuellement un groupe alcoyle en Cj à Cp- ; 2 3 5 R et R sont chacun individuellement un groupe alcoyle en C.j à Cg, lin groupe cycloalcoyle en C^-Cg ou un groupe phényle; mais ? **5 * R et R ensemble peuvent être un groupe tétraméthylène ou pentaméthylène, 1O Les groupes méthyle dans les positions C-1O et C-13 sont indiqués par des lignes verticales. Plusieurs produits intermédiaires nouveaux, obtenus à divers stades de ce procédé, sont biologiquement actifs et présentent en eux-mêmes un intérêt considérable. 15 Les matières de départ utilisées dans le procédé de la présente invention peuvent être préparées par des procédés connus à partir de matières facilement disponibles. Par exemple, le 3P,16a,17a,21-tétrahydroxy-5-prégnène-20-one 16,17-acétonide, qui peut être obtenu par le procédé de Crabbe et al. 20 décrit dans le Bull. Sociétés Chimiques Belges. 70. 271-284 (1961), peut être acétylé dans les positions C-3 et C-21 pour 1 2 donner la matière de départ du schéma 1 dans laquelle R , R , R^ et R4 sont chacun un groupe méthyle. Bien que les groupes acyles en C-3 et C-21 puissent 25 être n'importe quels groupes alcanoyles hydrolysables classiques, il est plus commode d'avoir des groupes alcanoyles inférieurs dans ces positions parce qu'on peut les éliminer facilement sans avoir recours à des conditions sévères, R^ et R4 peuvent être ainsi, par exemple, des groupes méthyle, éthyle, 1-propyley 2- 30 propyle, 1-butyle, 2-butyle, sec-butyle. t-butyle, pentyle (tous les isomères), et hexyle (tous les isomères). 2 3 R et R du groupement cétal sont habituellement des groupes méthyle, mais peuvent être individuellement d'autres groupes tels que par exemple éthyle, propyle, isopropyle, butyle, 35 isobutyle, pentyle, hexyle, cyclopentyle ou cyclohexyle et peuvent former ensemble le radical tétraméthylène ou pentaméthylène. Le cétal désiré est préparé à partir de la cétone appropriée et du 16a,17a-dihydroxy stéroïde appropriés en présence d'un catalyseur acide. 72 00653 8 2121713 La première étape du présent procédé, la réaction d'un 3-alcanoyl-A-prégnène 16,17 cétal avec le fluorure de nitrosyle ou avec un mélange de fluorure de nitrosyle et de tétrafluoroborate de nitrosyle, est conduite dans xm solvant inerte, 5 par exemple, un hydrocarbure halogéné, comme du chlorure de méthylène, du chloroforme, du tétrachlorure de carbone, du fluoro-dichlorométhane, du chlorure d'éthylène ou des mélanges de ces composés avec du glyme, de l'acétonitrile ou du sulfolane. Du tétrafluoroborate de nitrosyle peut être ajouté avec le fluo-10 rure de nitrosyle dans cette étape. Un mélange de ces deux matières est bien plus efficace que le fluorure de nitrosyle seul. On obtient de cette manière de plus hauts rendements en 5-fluoro-6-nitriminoprégnane cétals. Le tétrafluoroborate de nitrosyle, qui est une matière solide cristalline, peut aussi être préparé 15 in situ en utilisant un mélange de fluorure de nitrosyle et de trifluorure de bore. Le rapport molaire du fluorure de nitrosyle au tétrafluoroborate de nitrosyle dans le mélange peut varier entre des limites assez larges, par exemple entre 50:1 et 1:50. Habituellement, le rapport optimal est de 1:1. 20 La quantité de fluorure de nitrosyle utilisée doit évidemment être au moins stoechiométrique, c'est-à-dire de deux moles par mole du A^-prégnène de départ. Toutefois, il est avantageux d'utiliser un excès de fluorure de nitrosyle. Un rapport ' A. 5 molaire initial du fluorure de nitrosyle au A -prégnène cétal 25 d'environ 3 pour 1 s'est révélé particulièrement pratique, des rendements élevés en 5-fluoro-6-nitriminoprégnane étant obtenus en de courts laps de temps. La réaction est conduite à des températures modérées, de préférence pas plus élevées que 100°C environ, et spéciale-30 ment entre -10 et 30°C environ. Dans cet intervalle, les vitesses de réaction sont satisfaisantes et peuvent être réglées facilement. La pression atmosphérique est suffisante, bien que des pressions plus élevées puissent être nécessaires quelquefois pour maintenir une concentration suffisante des corps en réac-35 tion aux températures de réaction. L'humidité est indésirable dans cette étape en raison du danger d'hydrolyse de N0F et/ou de NOBF^. Le produit d'addition de fluorure de nitrosyle obtenu dans la première étape, le 5-fluoro-6-nitriminoprégnane, peut 72 00653 9 2121713 ! être isolé d'une manière classique quelconque, comme par exemple évaporation du solvant et recristallisation du résidu. Dans la pratique, cette étape d'isolement et de purification n'est pas nécessaire et la solution brute peut être soumise directe-5 ment à l'étape suivante, c'est-à-dire à la transformation du groupe nitrimino en groupe céto. La solution est d'abord mise en contact avec une base faible, comme un bicarbonate de métal alcalin aqueux, pour éliminer le NOi? et/ou le NOBF^ en excès et les produits acides de 10 réactions secondaires. La solution est ensuite chromatographiée sur de l'alumine neutre contenant de 5 à 15îk en poids d'eau (qualité d'activité III). Le 5-fluoro-6-cétoprégnane cétal formé dans cette étape est élué avec un solvant approprié ou une combinaison de solvants, comme des hydrocarbures aliphatiques 15 ou aromatiques. Au lieu de la technique chromatographique, on peut utiliser n'importe quelle autre technique appropriée pour mettre en contact le fluoronitriminoprégnane avec de l'alumine humide; par exemple, agiter énergiquement une suspension d'alumine dans la solution de fluoronitriminoprégnène. En variante, 20 le groupe nitrimino peut être hydrolysé par chauffage au reflux d'une solution du stéroïde dans du dioxanne aqueux. La réaction du 5-fluoro-6-cétoprégnane obtenu dans la deuxième étape avec un mélange tétrafluorure de soufre/aci-de fluorhydrique ou tétrafluorure de soufre/acide de Lewis est 25 conduite dans un solvant inerte du même type que ceux utilisés dans la première étape, c'est-à-dire du chlorure de méthylène, du chloroforme, du tétrachlorure de carbone, du fluorodichloro-méthane, du chlorure d'éthylène, etc.. Le tétrafluorure de soufre peut être remplacé par du tétrafluorure de sélénium ou par 30 un fluorure d'organosoufre, comme du trifluorure de phényl- soufre, mais le tétrafluorure de soufre est le réactif le meilleur marché et le plus facilement disponible. Comme le tétrafluorure de soufre et l'acide fluorhydrique sont tous deux des gaz à la température de réaction, il est commode de conduire 35 cette étape dans un réacteur fermé, comme un aiitoclave secoué. La réaction est conduite de préférence à des températures modérées, au-dessous de 100°C environ, et de préférence entre -10 et 30°C. Habituellement, il n'est pas commode d'abaisser la température au-dessous de -10°C environ parce que les vitesses de 72 00653 2121713 1 réaction sont trop petites pour une opération efficace. Les proportions relatives de tétrafluorure de soufre et d'acide fluorhydrique peuvent varier entre des limites assez larges; la proportion molaire d'acide fluorhydrique en mélange 5 avec le tétrafluorure de soufre peut être aussi "basse que zéro ou aussi élevée que 905*6 environ, l'intervalle de 15 à 20^ étant préféré. Bien que d'autres acides de Lewis fluorés, comme Bï^ et SnPç, puissent être utilisés, on préfère l'acide fluorhydrique, ajouté directement ou produit in situ. On peut produire 10 l'acide fluorhydrique in situ en ajoutant au mélange réaction-nel un composé contenant au moins un hydrogène actif, comme l'eau ou un alcool. La réaction d'un tel composé contenant de l'hydrogène actif avec le tétrafluorure de soufre libère de l'acide fluorhydrique. Le 5,6,6-trifluoroprégnane peut être recueil-15 li par des techniques classiques, comme par évaporation du solvant et recristallisation du résidu ou par chromatographie sur colonne. Le groupe 16a,17a-cétal normalement sensible aux acides est stable tant à N0F qu'aux mélanges SF^/HF. 20 L'hydrolyse des groupes ester en C-3 et C-21 est ef fectuée facilement par mise en contact d'une solution du sté-roïde dans un solvant miscible avec l'eau avec un alcali aqueux, comme du carbonate de sodium ou de potassium ou de l'hydroxyde i de sodium. Cette étape est habituellement conduite à la tempé-25 rature ambiante, mais l'intervalle de température de -10 à 35°C environ peut être commodément utilisé. Les solvants appropriés comprennent des alcools inférieurs, comme les alcools méthyli-que, éthylique, propylique, isopropylique et t-butylique; et des éthers miscibles avec l'eau, comme le tétrahydrofuranne et 30 le dioxanne. Des mélanges alcool méthylique/tétrahydrofuranne sont préférés en raison de leurs bonnes propriétés de solvant en ce qui concerne tant le composé stéroxde que l'alcali aqueux. Le groupe 21-hydroxyle est estérifié sélectivement avec de l'anhydride acétique dans de la pyridine à une tempéra-35 ture qui, de préférence, n'est pas au-dessus de 0°C. Un intervalle de température de -20 à -5°C environ est particulièrement approprié. Dans ces conditions, la réaction demande habituellement plusieurs heures, mais le groupe 3-hydroxyle n'est pas affecté. Le groupe 3-hydroxyle est ensuite oxydé pour donner le 72 00653 2121713 ' groupe 3-céto d'une manière classique quelconque connue de l'homme de l'art, par exemple avec de l'acide chromique. Le réactif préféré est une solution d'acide chromique et d'acide sulfurique dans de l'eau £~I>. F. Fieser et M. Fieser, Reagents for Organic 5 Svnthesis. John Wiley and Sons, page 142 (1967)_7. Le 3-hydroxy-stéroïde est dissous dans un solvant miscible avec l'eau, comme un éther ou une cétone, par exemple le dioxanne, le tétra-hydrofuranne, l'acétone ou la méthyléthylcétone. La réaction est conduite à la température ambiante ou au-dessous, mais une 10 température allant jusqu'à 35°C environ peut être utilisée. La déshydrofluoration du 5-céto-5,6,6-trifluoroprégna-ne pour donner le A4-3-céto-6.6-trifluoroprégnène cétal est effectuée en présence d'une base, comme l'alumine, le carbonate de potassium, l'oxyde d'argent, l'hydroxyde de potassium ou le 15 carbonate de lithium. Bien qu'un milieu non aqueux comme le mé-thanol ou l'éthanol soit avantageux, la réaction peut être conduite quelquefois en présence d'eau. La déshydrofluoration exige parfois un chauffage, même au reflux, mais habituellement elle est réalisée au voisinage de la température ambiante. 20 Ces étapes d'hydrolyse du groupe 3-alcanoyle, d'oxy dation du groupe 3-hydroxy en groupe 3-céto et de déshydrohalo-génation du composé 5-halogéné sont bien connues de l'homme de l'art. De telles réactions sont décrites notamment dans "Steroids", par Fieser et Fieser, Reinhold Publishing Corp., 25 New York, 1959. Avant 1 ' introduction du groupe 11 j3-hydroxyle, le groupe 21-hydroxyle doit être régénéré. Le groupe acétyle est hydro-lysé avec une base aqueuse, comme du carbonate de potassium dans un mélange de méthanol, de tétrahydrofuranne et d'eau. Le pro-30 duit de l'étape 7 est ainsi un produit intermédiaire important dans la préparation des agents anti-inflammatoires stéroïdes par ce procédé. La dernière étape dans le schéma 1, 1'hydroxylation microbiologique dans la position C-11, est effectuée commodément 35 en présence d'un microorganisme approprié appartenant par exemple à la famille Curvularia. par exemple Curvularia lunata ou Curvularia pallescens. Les produits finaux de la séquence ci-dessus sont des agents anti-inflammatoires puissants qui ont aussi une activité 72 00653 2121713 ' 10 de glucocorticoïde. Le groupe 11 p-hydroxyle peut être % si on le désire, oxydé pour donner le groupe 11-céto par des procédés "bien connus de l'homme de l'art. Ces 11-cétostéroïdes sont également des agents anti-inflammatoires et glucocorticoïdes. Une double liaison A1 peut être introduite soit dans le 11P-hydroxy-, soit dans le 11-céto-stéroïde. Les produits résultants ont souvent des activités biologiques améliorées. L'introduction de la double liaison peut aussi être effectuée microbiologiquement, par exemple par le microorganisme Arthro-bacter simplex. La classe des composés pouvant ainsi être préparés par ces procédés peut être représentée par la formule générale (1) ci-dessous : 15 20 ch2orc (1) F F 0 6 "4 dans laquelle R est l'hydrogène ou -C-R ; la signification de 25 R 3 4 5 R et R est la même que dans le Schéma 1 ; et R est un atome d'oxygène ou un a-hydrogène et un {3-hydroxyle. Ces composés sont utiles dans le traitement de troubles allergiques, de maladies du collagène, de maladies de la peau et de maladies des muscles du squelette. Ils peuvent être 30 administrés par voie orale, parentérale ou topique, à des doses comprises généralement entre 0,0001 et 1 mg par kg de poids du corps et par jour. Des produits intermédiaires nouveaux, qui sont obtenus à divers stades du procédé ci-dessus, peuvent être représen-35 tés par la formule (2) suivante : 72 00653 13 2121713 1 CH20RC c=o ja., >1 r" , R- ^Z.'0>( -I r (2) 10 n dans laquelle Z est l'oxygène ou un a-hydrogène et un (3-OR , 0 7 m 1 R étant l'hydrogène ou le groupe -C-R ; Y est le groupe nitrimino, l'oxygène ou deux atomes de fluor; et la signification de 15 R , R , R et R est la même que ci-dessus. Une classe supplémentaire de nouveaux produits intermédiaires est représentée par 1t. formule (2b) 20 25 CHo0RL t c=o _ X. R- r^ (2b) dans laquelle b est une double liaison ou un groupe p-époxy entre les atomes de carbone 9 et 11 et les groupes R sont tels 30 que spécifiés ci-dessus. Certains de ces nouveaux composés stéroïdes sont bio-logiquement actifs comme agents progestatifs, anti-oestrogènes et anti-androgènes. L'invention est illustrée par les exemples non limi-35 tatifs suivants montrant quelques séquences de réaction possibles. Toutes les températures sont rapportées en °C. Le symbole Ac dans les formules représente le groupe acétyle, CH^-C0-. Les groupes méthyle dans les positions 10 et 13 sont indiqués 72 00653 2121713 par des lignes verticales. Le symbole Py représente la pyridine. L'abréviation MeOH désigne l'alcool méthylique et THF désigne le tétrahydrofuranne. EXEMPLE 1 5 6.6-diflu.oro-1 6a. 1 7k.21 -trihydroxy-4-prégnèn-3 .20- dione 16.17-acétonide (11) et 6.6.9a-trifluoro-21-chloro-11 B. 16a. 1 7a-trihvdroxy-1 .4-prégnadièn-3.20-dione 16.17-acétonide (20) A. Du 3|3,16a, 1 7k,21 -tétrahydroxy-5-prégnèn-20-one 16,1 7— 10 acétonide /"obtenu par le procédé de Crabbe et al., Bull. Sociétés Chimiques Belges, 70, 271-284 (1961)_7, qui est un produit intermédiaire dans la synthèse industrielle du fluocinolone acétonide (6a,9k-difluoro-11p,16k,17k,21-tétrahydroxy-1,4-prégnadiène-3,20-dione 16,1 7-acétonide), est acétylé dans les 15 positions C-3 et C-21 avec de l'anhydride acétique en présence de pyridine. Le produit, 3, obtenu avec un rendement de 97,5 a un point de fusion de 173-175°C. 25 B. 5 q-fluoro-3 B.16k.21-tétrahydroxyprégna-6.20-dione 16.17-acétonide 3.21-diacétate (5) 20 AcO W-N0, 30 55 AlgO-.HgO OAc (qualité d'activité III f AcO 72 00653 2121713 Un mélange de 3P, 16a, 1 7cc,21 -tétrahydroxy-5-prégnèn-20-one 3,21-diacétate 16,17-acétonide (20,78 g), de fluorure de sodium (7,3 g) et de 100 cm^ de chlorure de méthylène, refroidi dans un bain de glace, est traité avec 7 g de fluorure de 5 nitrosyle pendant une période de 3 heures, le mélange de réaction est ensuite versé dans de l'eau, la couche au chlorure de méthylène est séparée et lavée avec des volumes égaux d'une solution saturée de bicarbonate de sodium, d'eau et d'une solution saturée de chlorure de sodium; séchée (MgSO^) et évaporée pour 10 donner line huile bleuâtre, 4. IR : 5,70 et 5,80/U (C=0 en C2Q et d'acétate), 5,85/u (Cg=N-), 6,20 et 7,69/u (-N02), 8,60/u (C-F). KMN H1 : H-18 (0,75 ppm), H-1 9 (1,33 ppm), méthyles de 16,17-acétonide (1,25 et 1,53 ppm), méthyle de C-3 acétate (1,97 ppm), 15 méthyle de C-21 acétate (2,03 ppm), H-21 (multiplet à 5,0 ppm). La chromâtographie sur de l'alumine de qualité d'activité III et l'élution avec de l'hexane et des mélanges benzène-hexane donnent, avec un mélange 1:1 benzène-hexane, 7,26 g (32,5$) de matière (pure par chromâtographie sur couche mince en utilisant 20 du gel de silice G- et 15?» d'acétate d'éthyle dans" du chloroforme); point de fusion 225-228°C (à partir d1acétone-hexane). Une petite portion de la matière est sublimée pour donner un échantillon pur pour analyse du composé j?. Analyse. Calculé pour ^28^40^8^ : ^ : 64,52; H : 7,70; F : 3,63 25 Trouvé : C : 64,75; H : 7,77; F : 4,79 r Infrarouge : A 5*75 , 5,80yu (C=0 d'acétate, de C2q et de Cg), 8,15yu (C—0 d'acétate), 8,65^u (C^-F). EMN : H-18 (0,63 ppm), H-19 (0,83 ppm), méthyles de 16,17— 30 acétonide (1,25 et 1,51 ppm), méthyle de C-3 acétate (2,02 ppm), méthyle de C-21 acétate (2,17 ppm), H-21 (multiplet à 4,95 ppm). HMH F19 : F-5 (doublet à +8181. 9002 H ) C. 5a.6.6-trifluoro-3l3.1 6a. 1 7a. 21 -tétrahydroxyprégna-20- one 16.17-acétonide 3.21-diacétate (6) 72 00653 2121713 Une solution de 2,00 g de 5a~fluoro-3f3,16cx,17af21- tétrahydroxy-prégnan-6,20-dione 3,21 -diacétate 16,17-acétonide, 3 3 de 1,40 cm d'eau, de 7,0 cm de tétrahydrofuranne, de 92 g 15 de tétrafluorure de soufre et de 20 cm de chlorure de méthylène est secouée pendant 10 heures à 20+2° dans un réacteur fermé. Le mélange de réaction est versé dans de l'eau. On ajoute du chlorure de méthylène supplémentaire et la couche au chlorure de méthylène est séparée et lavée avec une solution saturée de 20 bicarbonate de sodium, de l'eau et une solution saturée de chlorure de sodium; séchée (MgSO^) et concentrée pour donner une masse semi-solide incolore. Cette matière est chromâtographiée sur 100 g de Plorisil (marque déposée) et éluée avec de l'hexane et des mélanges acétone-hexane. On obtient un produit pur 25 (1,035 g) avec 3 à 3,5$ d'acétone-hexane. La recristallisation à partir d'acétone-hexane donne 0,829 g de touffes d'aiguilles blanches, point de fusion 206-209°C (la matière est pure par chromâtographie sur couche mince en utilisant des plaques de gel de silice G- et 15$ d'acétate d'éthyle/chloroforme). Un deu-30 xième essai donne une matière ayant un point de fusion de 212-214°C. Analyse. Calculé pour C^H^O^ : C: 61,75; H; 7,22; P: 10,48 Trouvé : C: 62,08; H: 7,43; P: 11,48 61,99 7,20 35 + 30° (c 1,27 CHC1,) \ "PTR-p 2 Infrarouge Amax 5,75yu (C=0 d'acétate et de C20), 8,15yu (C-O-C d'acétate), 8,50, 8,65, 8,85/U (C-F). RMN : H-18 (0,67 ppm), H-19 (triplet à 1,08 ppm, J"v^3 Hz), méthyles de 16,17-acétonide (1,27 et 1,51 ppm), méthyle de C-3 72 00653 17 2121713 acétate (2,05 ppm), méthyle de C-21 acétate (2,18 ppm), H-21 (multiplet à 5,0 ppm). BMN F19 : F-5 (doublet à +9471 et 9513 Hz), F-6a et F-6p (multiplet à +6024, 6035 et 6046). 5 Ce composé présente une faible activité corticoïde. D. 5a.6.6-trifluoro-36.16a.17a.21-tétrahydroxyprégnan- 20-one 16,17-acétonide (7) 10 15 ÏL-.C0,, -2-2—> 20 25 30 35 A une solution de 1,00 g de 3(3,16a, 17a,21-tétrahydroxy-5a,6,6-trifluoroprégnan-20-one 3,21 diacétate 16,1.7-acétonide, 6, dans 100 cm de méthanol désaéré et 20 cm de tétrahydro-furanne désaéré, on ajoute 0,530 g de carbonate de potassium dissous dans 14 cm^ d'eau désaérée. La solution claire résultante est agitée, sous azote, toute une nuit à la température ambiante. Le mélange de réaction est ensuite dilué avec précaution à l'aide d'environ 1 litre d'eau et la matière solide blanche est recueillie et séchée dans une étuve à vide pour donner 0,610 g de 2 (72,5$). Le spectre de EMN indique qu'il n'y a pas de groupements acétate présents et que le groupe cétal est resté intact. Le filtrat aqueux obtenu ci-dessus est traité par extraction au chlorure de méthylène pour donner 68 mg supplémentaire d'une huile claire. Infrarouge : A^jo1 2,75/u (0-H), 5,80/u (C9rV=0), 8,50, 8,65, / / 20" 8,85yu (C-F). RMN H1 : H-18 (0,57 ppm), H-19 (triplet à 1,05 ppm, J ^2 Hz), méthyles de 16,17-acétonide (1,15 et 1,47 ppm), H-21 (quartet AB à 3,97, 4,30, 4,58 et 4,92 ppm), H-16 et H-3 (multiplet à 5,07 ppm) 72 00653 18 2121713 EMT F19 : F-5 (doublet à +9425 Hz), F-6a et F-6p (multiplet à +6025 Hz). E. 5 10 1 15 A une solution de 411 mg (0,817 millimole) de 3|3,16a, 1 7a,21 -tétrahydroxy-5a,6,6-trifluoroprégnan-20-one 16,17 acéto- 3 nide dans 5 cm de pyridine anhydre refroidie à 0°C, on ajoute 94,3 mg (0,923 millimole) d'anhydride acétique fraîchement distillé. la solution est ensuite abandonnée à elle-même entre -10 20 et -15°C pendant 24 heures. Elle est ensuite versée-dans de l'eau glacée. Une huile se sépare, qui est traitée par extraction au chlorure de méthylène (3 x 50 cm^). la couche au chlo- -z rure de méthylène est lavée à l'eau (10 x 100 cm ), avec une solution saturée de chlorure de sodium, séchée (Na2S0^) et éva-25 porée pour donner 413 mg d'une huile claire, la chromatographie sur 20 g de Florisil (marque déposée) et l'élution avec de l'hexane et des mélanges acétone-hexane donne, avec 7-10$ d'acétone/hexane, 230 mg d'une huile claire, 8, qui est identifiée comme étant du 5a,6,6-trifluoro-3P,16a,17a-trihydroxy-21 -acétoxy-30 prégnan-20-one 16,17-diacétonide. Infrarouge : A ^13 2,80/u (0-H), 5,74 et 5,79/u (acétate et C2Q = 0), 8,22/U (C-O-C d'acétate), 8,50, 8,65, 8,85/U (C-F). RMN H1 s H-18 (0,67 ppm), H-19 (triplet à 1 ,07 ppm, J~2,5 Hz), méthyles de 16,17-acétonide (1,25 et 1,50 ppm), méthyle de C-21 35 acétate (2,17 ppm), H-21 (multiplet à 4,95 ppm). F. 6.6-difluoro-16a.17a.21-trihydroxy-4-prégnèn-3.20- dione 16.17-acétonide 21-acétate (10) Acétylation de 2 Ac20, Py -15e F x2 72 00653 19 2121713 cro^ 8 H •+ > AI2O5 «HgO (qualité d'activité III) 10 15 20 A une solution de 3(3,1 6a, 1 7 •2» *z ajoute 0,15 cm de réactif de Jones (3,90 méq/cm ). On agite le mélange pendant 15 minutes après la fin de l'addition. On ajoute quelques gouttes de méthanol pour décomposer le réactif en excès et on agite le mélange dans un bain de glace pendant 30 15 minutes supplémentaires. On filtre le mélange et on lave bien le précipité avec de l'acétone. On ajoute une solution de 0,5 g de bicarbonate de sodium dans 20 cm d'eau. On complète la pré-cipitation du produit en diluant avec précaution avec 75 cm d'eau pour obtenir 187 mg (81 ,5/î) d'une matière solide blanche, 35 0 PTTfH Infrarouge : Xmax 3 5,75 et 5,83/u (acétate, 0~ et C2Q = 0), 8,20yu (C-O-C d'acétate), 8,50, 8,65, 8,85yu (C-F). La matièrç ci-dessus, £, est cliromatographiée sur 10 g d'alumine III et éluée avec de l'hexane et des mélanges benzène- 72 00653 2121713 15 hexane pour donner 165 mg d'un composé cristallin, pur par chromatographie sur couche mince (gel de silice G- avec du chloroforme). La cristallisation à partir de chlorure de méthylène-hexane donne 137 mg d'aiguilles blanches émoussées du composé 10. point de fusion 207-208°C. Analyse : Calculé pour C26^34^)6'P2 : ^4,99; H: 7,13; F: 7,92 Trouvé : C: 64,96; H: 7,33; F: 6,71 65,22 7,42 Ultraviolet ; \ ■ max 10 228 nyu ( £ 12 700), 296 nyu ( £ 125), 303 nyu ( £ 120), 315 nyu (£ 82). Infrarouge : ^ max 5,80^u (C2q=0) , 5,70 et 8,0yU (21-acétate), 5,95/u (C3=0), 8,55, 8,70, 8,85(C-F). EMU H' H-18 (0,70 ppm), H-19 ,(multiplet partiellement métMes .da 1,6,17-acétonide Tl,22 e.t 1.45 ppi masqué 20 .de, 1,6,17-acétonide X1 >22 e/c 1.45 ppm) » " a environ 1,23 ppm) ,/methyle de C-21 acétate (2,13 ppm;, H-21 (multiplet à 4,95 ppm), H-4 (doublet à 6,25 ppm, J = 4 Hz). BMN F^9 : F-6a et F-6f3 (modèle global AB avec raies vers les champs faibles encore divisés : 4737 et 4772, 4994 et 5025, 5643, 5899 Hz). Ce composé a des activités progestative, anti-andro- gène et anti-oestrogène. G-. 6.6-dif luoro-16 a. 1 7a. 21 -trihydroxy-4-prégnèn-3.20- dione 16,17-acétonide (11) 25 30 KoC0, 10 —2- 0H =0 aX 1 1 35 Une solution de 1 ,00 g de 2., de 100 cm^ de méthanol désaéré, de 20 cm^ de tétrahydrofuranne désaéré, de 0,224 g de 'Z carbonate de potassium anhydre et de 7 cnr d'eau est agitée sous azote pendant toute une nuit à la température ambiante. Elle est ensuite diluée avec précaution avec de l'eau et la matière 72 00653 21 2121713 solide blanche précipitée est recueillie et séchée à l'air. Elle est cristallisée à partir d1acétone-hexane pour donner 622 mg de produit, point de fusion 280-284°C (cap. fermée). Analyse. Calculée pour (-!24^32^5"^2 : ^5,75; H: 7,35; Fs 8,67 5 Trouvée : C: 65»89; H: 7,43; Es 8,71. Infrarouge 2,87/U (O-H), 5,84 et 5,91 ,u (C=0), 8,0/u IUdJC - / OA O / * (C-O-C), 8,5 à 9,0/u (C-F). Z"a_7^4 + 43° (c 0,76 CHCl^). Ce dernier composé (Ijj présente une activité gluco-corticoïde faible [_ Voir, par Dorfman, "Methods in Hormone 10 Research", Vol. II, pages 325-367, Academic Press (1962)_7. H. 6.6-difluoro-11-6.1 6a. 1 7a.21-tétrahydroxv-4-prégnèn- 3.20-dione 16.17-acétonide (13) Les composés 10 et 1J_ sont hydroxylés microbiologiquement dans la position C-11 pour donner du 6,6-difluoro-11 (3,1 6a, 15 17a,21 -tétrahydroxy-4-prégnèn-3,20-dione 16,17-acétonide 21 - acétate et le 21-hydroxycorticoïde correspondant, respectivement Ce dernier a une activité anti-inflammatoire. L1hydroxylation microbiologique peut aussi donner du 6,6-dif luoro-11 (3,16a, 1 la, 21 tétrahydroxy-4-prégnèn-3,20-dione 16,17-acétonide qui peut être 20 transformé en 9a-fluoro-11 p-hydroxy stéroïde correspondant. Par exemple, le composé 1J_ subit une hydroxylation biologique selon la mode opératoire suivant ; Curvularia pallescens est maintenu à 23-25°C pendant 14 à 16 jours sur un milieu incliné ayant la composition ; 25 Extrait de malt 20 g Peptone 1 g Dextrose 20 g Gélose 15g Eau distillée 1 000 cm^ 30 Un milieu à base de farine de soja et de Cerelose contenant Farine de soja 5g Cerelose (dextrose) 20 g Extrait de levures 5 g Chlorure de sodium 5 g 35 Phosphate dibasique de potassium 5 g Eau distillée 1 000 cm^ est réglé au pH 6,5 par addition d'acide chlorhydrique et le microorganisme y est„transféré à partir du milieu incliné et cultivé pendant 28 heures dans des fioles d'Erlenmeyer de 72 00653 2121713 •7. ^ 250 cm contenant chacune 100 cm du milieu à hase de farine de soja et de Cerelose sur un secoueur rotatif. Une fiole de •5 la culture en cours de croissance inocule 400 cm du même milieu dans un ballon de 2 litres, la culture est développée pen-5 dant 18 heures sur un appareil à secouer et 2,4 g de composé 11 dissous dans 60 cm de diméthylformamide sont distribués également dans 30 ballons de 2 litres et on continue l'incubation pendant 120 heures, les produits combinés sont acidifiés avec de l'acide acétique à pH 4 et extraits successivement avec 8,5, 10 4,8 et 1,6 litres de chloroforme, l'extrait est lavé à l'eau, séché sur du sulfate de sodium anhydre et le solvant est éliminé par évaporation. le résidu est chromatographié sur une colonne de gel de silice ea utilisant un éluant benzène/acétate d'é-thyle (70/30) pour donner un rendement de 13f» environ en 6,6-15 difluoro-11 p,16a,17a,21 -tétrahydroxy-4-prégnèn-3,20-dione 16,17-acétonide, (^2), point de fusion 260-264°C. Une déshydrogénation microbiologique dans la position 1,2 du stéroïde résultant est effectuée par Arthrobacter simplex qui était maintenu sur un milieu incliné formé à partir de 1 g 20 d'extrait de levures, 2 g de gélose et 96 cm d'eau, l'organisme est transféré à un bouillon nutritif (disponible dans le commerce en provenance de Difco). le développement, l'inoculation, l'incubation, l'extraction et l'isolement sont effectués selon les modes opératoires généraux utilisés pour 1'hydroxylation 25 en JJ_. la chromatographie avec un mélange chloroforme/acétone donne du 6,6-difluoro-11p,16a,17a,21-tétrahydroxy-1,4-prégnadièn-3,20-dione 1 6,1 7-acétonide, ( 1J5.), point de fusion 258-262,5°C, avec un rendement de 50fi. I. 21-chloro-6.6-difluoro-11 P.16a.17a-trihydroxy-1 .4- 30 prégnadièn-3.20-dione 1 6.17-acétonide (14) A une solution refroidie (0°C) du stéroïde précédent *z (170 mg, 0,376 millimole) dans 3 cm de pyridine, on ajoute 90,5 mg (0,795 millimole) de chlorure de méthanesuifonyle redistillé (CBJSO2CI). la solution est agitée pendant toute une 35 nuit à 25°C et ensuite versée dans 40 cm^ d'eau glacée, le précipité résultant est recueilli et séché à l'air. Il est ensuite repris dans du chlorure de méthylène (25 cm^) et séché avec du sulfate de magnésium. Cette solution est ajoutée à un mélange bouillant de 60 mg de chlorure de lithium et de 8 cm^ de diméthyl- 72 00653 « 2121713 formamide. On chasse par ébullition le chlorure de méthylène durant l'addition, qui demande 1 heure. Le mélange est chauffé au reflux pendant 30 minutes supplémentaires après la fin de l'addition. Il est ensuite versé dans de l'eau et le précipité 5 est recueilli et séché à l'air. La cristallisation à partir d1 acétone-hexane donne 94 mg de 21 -chloro-6,6-dif luoro-11 (3,1 6a, 1 7ct-trihydroxy-1 ,4-prégnadiène-3,20-dione 16,1 7-acétonide (1_4), point de fusion 285-286°C. Spectre de masse : Calculé pour * 470,1672 10 Trouvé : 470,1648 W : 240 nyu ( £ 14 200) J. 6.6-difluoro-11B.16a.17a.21-tétrahydroxy-4-prégnèn- 5.20-dione 21-acétate 16.17-acétonide (15) A une solution refroidie de 6,6-difluoro-11 p, 1 6a,1 la, 15 21-tétrahydroxy-4-prégnèn-3, 20-dione 16,17-acétonide (0,674 g) •z *2 (12) dans 4 cm de pyridine, on ajoute 3 cm d'anhydride acétique. On agite pendant 16 heures, puis on dilue avec de l'eau et le précipité résultant est séparé par filtration et séché à l'air La cristallisation à partir d'acétone-hexane donne 0,710 g de 20 6,6-difluoro-11 p, 1 6a, 17a, 21 -tétrahydroxy-4-prégnè'n-3,20-dione 16,17-acétonide 21-acétate (15), point de fusion 256-258°C. K. 6.6-difluoro-1 6a. 1 7a.21 -trihydroxy-4.9(11)-urégnadièn- 5.20-dione 21-acétate 16.17-acétonide (16) Du 6,6-difluoro-11 p, 16a, 1 7a,21 -tétrahydroxy-4-prégnèn-25 3,20-dione 16,17-acétonide 21-acétate (Jjj) (2,0 g, 4,02 milli-moles) dans 5 cm^ de pyridine à 25°C est traité avec 0,640 g (4,42 millimoles) de N-bromoacétamide. le mélange de réaction est agité pendant 15 minutes, puis refroidi à 10°C e^6n y fait barboter de l'anhydride sulfureux jusqu'à ce que le mélange de 30 réaction soit négatif au papier iodo-amidonné acidifié. On ajou- rz 'z te de l'eau (15 cm ), puis un mélange de 30 cm d'acide chlor-hydrique concentré et de 40 g de glace. La matière solide est recueillie, lavée à l'eau et séchée à l'air. La chromatographie sur du Florisil et l'élution avec 5d'acétone/hexane don-35 nent, après recristallisation à partir d'acétone-hexane, 1,46 g de 6,6-difluoro-16a,17a,21-trihydroxy-4,9(11)-prégnadièn-3,20-dione 21-acétate 16,17-acétonide (16). 72 00653 24 2121713 L. 6.6-d if luoro-9 a-brome»-11 B. 16a. 17a. 21 -tétrahydroxy-4- prégnèn-3.20-dione 21 -acétate 16.1 7-acétonide (17) A 1,46 g (3,05 millimoles) de 6,6-difluoro-16a, 1 7a, 21-trihydroxy-4,9(11)-prégnadièn-3,20-dione 21-acétate 16,17- •7. 5 acétonide (16) dans 50 cm d'acétone à 15°C, on ajoute 0,922 g •z (6,7 millimoles) de F-bromoacétamide dans 21 cm d'eau. On ajou- 7 te lentement une solution d'acide perchlorique 0,8N (2,3 cm ). Après 15 minutes, on ajoute une solution aqueuse saturée de sulfite de sodium pour faire disparaître la couleur jaune. lie 10 précipité résultant, après dilution du mélange de réaction avec de l'eau, est séparé par filtration, lavé à l'eau et séché à l'air pour donner 0,8 g de 6,6-difluoro-9a-bromo-11p,16a,17a, 21-tétrahydroxy-4-prégnèn-3,20-dione 21-acétate 16,1 7-acétonide (H). 15 M. 6.6-difluoro-9.11-époxy-16a. 1 7a.21 -trihvdroxv-4- prégnèn-3.20-dione 21-acétate 16.17-acétonide (18) Du 616-difluoro-9a-bromo-11p,16a, 1 7a,21 -tétrahydroxy-4-prégnèn-3,20-dione 21-acétate 16,17-acétonide (12) (0,8 g, •z 1,39 millimole), 50 cm d'éthanol et 0,768 g d'acétate de potas-20 sium (7,82 millimoles) sont chauffés au reflux pendant 1 heure. On laisse distiller le solvant (25 cm^), puis on refroidit le mélange de réaction, on le dilue avec de l'eau et le précipité est recueilli par filtration, lavé à l'eau et séché à l'air. La chromatographie sur du Florisil et l'élution avec 2fo d'acé-25 tone/hexane donnent 0,677 g de 6,6-difluoro-9,11-époxy-16a,17a, 21-trihydroxy-4-prégnèn-3,20-dione 21-acétate 16,17-acétonide (18). N. 6.6.9a-trifluoro-11 B.16a.17a.21 -tétrahydroxy-4- prégnèn-3.20-dione 21-acétate 16.17-acétonide (19) 30 Du 6,6-difluoro-9,11-époxy-1 6a, 1 7a,21 -trihydroxy-4- prégnèn-3,20-dione 21-acétate 16,17-acétonide (18) (0,677 g) est ajouté à 20 cm de complexe acide fluorhydrique-urée à 10°C. On continue l'agitation sous azote pendant 30 minutes, puis le mélange de réaction est ajouté lentement à une solution aqueuse 35 saturée de bicarbonate de sodium. La matière solide résultante est recueillie par filtration, lavée à l'eau et séchée à l'air. La chromatographie sur du Plorisil et l'élution avec 2 à 5°/° d1acétone/hexane donnent 0,3 g de 6,6,9a-trifluoro-11 p, 16a, 1 7a, 21-tétrahydroxy-4-prégnèn-3,20-dione 16,17-acétonide 21-acétate, 72 00653 25 2121713 (12). point de fusion 284-286°C. 0. 6.6.9a-trifluoro-11 B.16a.1 7a.21 -tétrahvdroxy-1.4- prégnadièn-3.20-dione 21-acétate 16.17-acétonide ( 20 ) Un mélange de 6,6,9a-trifluoro-11 p, 16a,17a,21-tétra-5 hydroxy-4-prégnèn-3,20-dione 16,17-acétonide 21-acétate (254 mg) (11). de 110 mg de dichlorodicyanoquinone, de 119 mg d'acide rz "benzoïque et de 15 cm de chlorobenzène est chauffé au reflux sous azote pendant 24 heures. On ajoute une quantité supplémentaire de 110 mg de dichlorodicyanoquinone et on continue le chauf-10 fage au reflux pendant 8 heures. Le mélange est ensuite filtré et dilué avec du benzène. La portion organique est lavée avec une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, de l'eau et de la saumure. Elle est séchée avec du sulfate de magnésium anhydre et le solvant est évaporé pour donner 144 mg de (20) 15 qui est recristallisé à partir d'un mélange méthanol-chlorure de méthylène, point de fusion 284-286°C. P. 21-chloro-6.6.9a-trifluoro-11B.16a. 1 7a-trihvdroxv- 1.4-prégnadièn-3.20-dione 16.17-acétonide (22) Le 21-acétate (20) est hydrolysé avec du carbonate 20 de potassium et de l'eau dans une solution tétrahydrofuranne-méthanol. Le 6,6,9a-trifluoro-11p,16a,17a,21-tétrahydroxy-1,4- prégnadièn-3,20-dione 16,17-acétonide brut (100 mg), (21). dans •5 3 cm de pyridine à 0°C est traité avec 34^ul de chlorure de méthanesulfonyle. On laisse réchauffer la solution à 25°C et 25 on l'agite pendant 24 heures. On la verse ensuite dans de l'eau et le précipité résultant est séparé par filtration. Cette ma- x 3 tière solide est reprise dans 15 cm de chlorure de méthylène, séchée (sulfate de magnésium anhydre) et la solution est ensuite ajoutée lentement à un mélange chauffé au reflux de 70 mg •2 30 de chlorure de lithium dans 6 cm de diméthylformamide. Le mélange de réaction est chauffé au reflux pendant 1 heure après la fin de l'addition et ensuite abandonné à lui-même à 25°C pendant 24 heures. On le verse dans de l'eau glacée et on filtre le précipité. La cristallisation à partir d'acétone-hexane 35 donne 60 mg de 6,6,9a-trifluoro-21 -chloro-11p,16a,17a-tri-hydroxy-1,4-prégnadièn-3,20-dione 16,17-acétonide (22), point de fusion 285-287°C. Spectre de masse : .calculé pour 02^200^^01 : 488,1576 mesuré : 488,1582. 72 00653 as 2121713 W ! 234/u (£: 16 100) 297px ( Ki 0,49) eyeimpt.f 2 6.6-difluoro-11 g.16a.17a.21 -tétrahydroxy-1.4-5 prégnadièn-3.20-dione 16.17-acétonide 21-acétate (23) Quand du 6,6-dif luoro-11 (3,16a, 17a, 21 -tétrahydroxy-4-prégnèn-3,20-dione 16,17-acétonide 21-acétate (pour la préparation. voir "H" de l'Exemple 1) est mis à réagir avec de la di dichlorgcyanoquinone selon le mode opératoire général de l'Exem-10 pie 1, partie "0", on obtient du 6,6-difluoro-11P, 1 6a, 1 7a,21-tétrahydroxy-1,4-prégnadièn-3,20 dione 16,17-acétonide 21-acétate (23), point de fusion 251-253°C. Spectre de masse : Calculé pour ® 26% 2? 2® 7 : 494,2116 Trouvé : 494,2131 15 W : ^mSf 238 m/u ( £ : 14 000) 297 nyu (l;fc. : t .1§0» EXEMPLE 3 21 -chloro-6.6-dif luoro-11 3.16a. 1 7a-trih.ydroxy-4-•prégnèn-3.20-dione 16.1 7-acétonide ( 24 ) 20 Quand du 6,6-difluoro-11p,16a,17a,21-tétrahydroxy-4- prégnèn-3,20-dione 16,17-acétonide (voir 1_2 de la partie "H" de l'Exemple 1) est traité de la manière décrite dans l'Exemple 1 "I" ou 1 "P", on obtient du 21-chloro-6,6-difluoro-11P,16a, 17a-trihydroxy-4-prégnèn-3,20-dione 16,17-acétonide correspon-25 dant, 2£, point de fusion 225-230°C. Ces corticoïdes possèdent une activité anti-inflammatoire topique bonne à excellente comme montré par le mode opératoire suivant : Essai anti-inflammatoire topique (essai sur des orein.es de rats) 30 Des rats mâles entiers âgés de 21 jours (60-70 g) sont anesthésiés et le composé à essayer dans un véhicule (20fo de pyridine, 57° d'eau distillée, 74°/° d'oxyde d1 éthyle et Y/o d'huile de croton, en volume) est appliqué sur l'oreille gauche, 0,05 cm3 à l'intérieur de l'oreille et 0,05 cm3 à l'extérieur. 35 Un groupe de 9 rats reçoit le véhicule seulement, 3 groupes (6-7 rats par groupe) reçoivent des doses croissantes 3X du composé dans le véhicule, et 3 groupes (6-7 rats par groupe) reçoivent des doses croissantes 3X de fluocinolone acétonide ou des doses croissantes 4X d'hydrocortisone, les étalons de 72 00653 2121713 comparaison, dans le véhicule. Six heures plus tard, les rats sont sacrifiés et des morceaux d'oreille de grosseur uniforme sont prélevés avec un perce-bouchon n° 4. Les morceaux d'oreille sont pesés et on calcule les poids moyens pour les groupes 5 témoins et pour les groupes traités avec l^éubstance essayée. On représente graphiquement la réduction par rapport au témoin en fonction du logarithme de la dose et les doses du composé et de l'étalon de comparaison (en mg par kg de poids du corps) qui provoquent une réduction de poids de 30$ par rapport aux 10 morceaux d'oreille des témoins sont déterminées d'après des courbes dose-réponse tracées à vue. Les valeurs DE 30$ sont comparées pour donner des rapports d'activité des composés par comparaison avec le fluocinolone acétonide. Tableau de l'activité anti-ir»f1 ammatoire topique 15 DE 50$ (mg/kg) Rapport d'activité du composé Composé Fluocinolone Compose essayé au fluocinolone n° acétonide essayé acétonide 20 35 20 0,0047 0,013 0,34 12 0,0059 0,022 0,24 15 0,012 >0,46 23 0,0046 0,0086 0,53 13 0,0069 0,012 0,58 24 0,0071 0,028 0,24 14 0,0079 22 0,010 0,015 0,79 25 Quand on utilise le mode opératoire ci-dessus, à ceci près qu'on utilise l'hydrocortisone comme étalon au lieu du fluocinolone acétonide, on obtient les résultats suivants. Rapport d'activité du composé Jw Composé Hydro* Composé essayé à 1'hydrocortisone ■' W O rt Vl4" ^ F"* M/KMtvA DE 30$ (mg/kg) Composé n° Hydro* cortisone Composé essayé. 19 0,35 0,0060 20 0,43 0,0095 5 0,69 6 0,69 1,7 59 46 Une activité pharmacologique supplémentaire est montrée aussi par l'essai suivant : 72 00653 2121713 Eaaai vaso-constricteur chez les humains (Stouafaton-McKenzie) On utilise la méthode de Place et al., Arch. Derm. (Chicago), 101 531-7 (1970). On dissout les corticostéroïdes dans 100 cm de méthanol à une concentration normale de 0,5 ou 5 0,05 mg par cm , suivant leur solubilité dans l'alcool. Des por-tions de 5 cnr sont ensuite placées à 3a pipette dans des fioles identiques et évaporées sous azote. On utilise plusieurs fioles pour des essais de récupération à partir des fioles desséchées, pour des essais de solubilité dans l'éthanol à et pour ser-10 vir d'échantillonso à conserver pour stabilité et identité. La préparation d'un grand nombre de fioles de cette manière fournit des échantillons préparés de manière identiques qui permettent des essais répétés. Chaque fiole marquée de corticostéroïde cristallin 15 est suffisante pour un essai complet. On prépare des dilutions en progression géométrique de raison 0,1 allant de 1 X 10"*3 (0,1?S) à 1 x 10~® (0,000001%) dans l'éthanol. On les utilise en l'espace d'une semaine. On utilise des sujets adultes de race blanche. Chaque sujet reçoit toutes les dilutions de la série 20 au hasard sur un bras. Pour contrôle de l'essai, on effectue des applications identiques réparties au hasard de manière différente sur le bras opposé. Le nombre d'emplacements dans chaque étude est égal au nombre de préparations à essayer, de sorte que chaque emplacement d'essai reçoit chaque préparation. 25 On prépare la peau de l'avant-bras en la lavant avec de l'eau et du savon. Les emplacements d'essai sont marqués par une couche mince de graisse de silicone appliquée en utilisant un tampon en caoutchouc. Il y a 3 ou 4 rangées horizontales et 6 ou 8 rangées verticales donnant 18 à 32 carrés uniformes de 30 7x7 mm. Le dessin en carré réduit le problème de reconnaissance des emplacements d'essai. La grille est dessinée au violet de gentiane pour aider à l'identification des emplacements individuels . 35 On effectue une application rapide et précise sans contamination de la verrerie en utilisant pour chaque application une pipette individuelle de 10 lambda à jeter après emploi. Après évaporation du diluant, la surface est recouverte de Saran (marque déposée) et protégée par de la gaze tubulaire. Après 72 00653 « 2121713 16 à 18 heures d'occlusion, on enlève les pansements et deux heures plus tard on examine les emplacements. Deux examinateurs observent et notent la présence ou l'absence de vaso-consiziction à chaque emplacement d'essai. 5 Des valeurs DE50 (la dose de composé en ^ug/cm qui produit 50?» de réponse) sont obtenues à partir de représentations graphiques log-unité de probabilité de la dose en fonction du fi de réponses de blanchissement et sont indiquées ci-dessous. Tableau d'activité dans l'essai vaso-constricteur chez 10 les humains (Stoughton McKenzie) Composé DE50 ( /ug/cm2) Rapport d'activité n° ' (fluocinolone acétonide - 1.00) Fluocinolone acétonide 0,046 o o * 15 19 0,39 0,12 12 0,27 0,17 15 0,36 0,13 23 0,19 0,24 13 0,095 0,48 20 14 0,020 '2,30 22 0,016 2,88 Les composés préparés par le procédé de la présente invention sont administrés sous les formes pharmaceutiquement 25 acceptables usuelles. Par exemple, ils peuvent être administrés oralement à l'état solide sous la forme de pilules, de comprimés, de poudres (libres ou encapsulées), etc.; ou à l'état liquide sous la forme de solutions, de suspensions, de sirops,. etc.; ces composés sont habituellement administrés par voie pa-30 rentérale sous la forme de liquides dans des suspensions ou des solutions. Les doses pour administration orale ou parentérale sont comprises entre 0,001 et 1 mg environ par kilogramme de poids du corps et par jour. Topiquement, ces composés sont administrés sous la forme de poudres, de crèmes, de pommades, de 35 solutions, de suspensions, d'aérosols, de mousses, etc., contenant de 0,001^ à 1?o environ du stéroïde, le reste étant -un véhicule pharmaceutiquement acceptable ou des combinaisons de véhicules inertes. 72 00653 30 2121713 Par voie orale, parentérale ou topique, les stéroïdes préparés par le procédé de la présente invention sont administrés seuls ou en combinaison avec un ou plusieurs agents thérapeutiques pharmaceutiquement acceptés, comme des antibiotiques. 72 00653 31 2121713 REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation d'un A^-3.20-dicéto-6,6-difluoro-16a,17a,21-trihydroxyprégnène 16,17-cétal ayant la formule générale : 10 CH„0H i c=o 15 20 2 3 dans laquelle R et R sont chacun individuellement un groupe alcoyle en C^-Cg, un groupe cycloalcoyle en C^-Cg ou un groupe phényle; R2 et R3 ensemble pouvant être un groupe tétraméthylène ou pentaméthylène; ce procédé étant caractérisé en ce qu'il comprend les étapes successives suivantes : (a) mise en contact d'un stéroïde de la formule 25 0 " à. CH^OCR ! £- c=o 30 1 " R1 CO 2 3 1 dans laquelle R et R sont tels que définis ci-dessus, et R et R^" sont chacun individuellement un groupe alcoyle en C^-C^, 35 avec du N0F ou un mélange N0F_K0BP^ dans un solvant inerte à une température de -10 à 100°C, dans des conditions sensiblement anhydres, la quantité de fluorure de nitrosyle étant d'au moins environ 2 moles par mole du A^-stéroïde de départ, et le rapport molaire de 1T0F à ïfOBF^ étant compris entre 50:1 et 1 :50 72 00653 2121713 environ, de façon à produire le 5a-fluoro-6-nitrimino-stéroïde correspondant; (b) mise en contact de la solution de l'étape (a) ci-dessus avec une "base faible pour élimination du réactif 5 en excès et des produits acides de réactions secondaires, et mise en contact de la solution avec de l'alumine neutre contenant de 5 à 15$ en poids d'eau pour produire le 5a-fluoro-6-cétostéroïde correspondant; (c) mise en contact du produit de l'étape (b) 10 ci-dessus avec un agent de fluoration choisi parmi le tétrafluorure de soufre, le tétrafluorure de sélénium et le trifluorure de phénylsoufre en présence d'un acide de Lewis choisi parmi HF, BF^ et SbF^ à une température comprise entre -10 et 100°C dans un solvant inerte et dans des conditions sensiblement 15 anhydres ; avec la condition que quand on utilise du tétrafluorure de soufre et du HF, la proportion molaire de HF dans le mélange ne dépasse pas 90fo environ; de façon à produire le 5«,6,6-trifluorostéroïde 20 correspondant; (d) mise en contact du produit de l'étape (c) ci-dessus, dissous dans un solvant miscible avec l'eau, avec un agent alcalin aqueux entre -10 et 35°C pour élimination des groupes acyles en 0-1 et en C-21 ; 25 (e) acylation sélective du groupe 21-hydroxyle par mise en contact du produit de l'étape (d) ci-dessus avec une solution d'anhydride acétique dans de la pyridine à une température ne dépassant pas 0°C environ; (f) oxydation du groupe 3-hydroxyle en groupe 30 3-cétone par mise en contact du produit de l'étape (e) ci-dessus en solution dans un solvant miscible avec l'eau, avec de l'acide chromique aqueux à une température ne dépassant pas 35°C environ; et (g) déshydrofluoration du produit de l'étape 35 (f) ci-dessus dans les positions C-4 - C-5 par mise en contact de ce produit avec une base choisie parmi l'alumine neutre anhydre, le carbonate de potassium, l'oxyde d'argent, l'hydroxy-de de potassium et le carbonate de lithium, dans un solvant choi si parmi le méthanol et l'éthanol à une température allant 72 00653 33 2121713 jusqu'au voisinage de la température de reflux du solvant. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la température maximale dans l'étape (a) ci-dessus est de 30°C environ et on utilise un mélange sensiblement équi- 5 molaire de NOF avec NOBF^; la température maximale dans l'étape (c) ci-dessus est d'environ 30°C et on utilise un mélange de SF^ avec HF; et l'agent de déshydrofluoration dans l'étape (g) ci-dessus est de l'alumine neutre anhydre. 3. les stéroïdes, caractérisés en ce qu'ils répon-10 dent à la formule 2 3 dans laquelle R et R sont chacun individuellement un groupe alcoyle en C^ - Cg, un groupe cycloalcoyle en C^-Cg ou un groupe phényle; R2 et R3 ensemble pouvant être un groupe tétraméthy-25 lène ou pentaméthylène; Z est l'oxygène ou un a-hydrogène et un 0 7 7 "11 (3-0R , R' étant l'hydrogène ou le groupe -C-R , R étant un grou pe alcoyle en C^-C^; Y est le groupe nitrimino, l'oxygène ou 0 6 11 A 4. 30 deux atomes de fluor; et R est l'hydrogène ou -C-R , R étant un groupe alcoyle en C^-C^. 4. Le 5a-fluoro-3P,16a,17oc,21-tétrahydroxyprégna-6,20-dione 16,17-acétonide 3,21-diacétate, le composé de la revendication 3 dans lequel Z est un a-hydrogène et un (3-acétyle; 2 3 6 35 Y est l'oxygène; R et R sont chacun un groupe méthyle; et R est un groupe acétyle. 5. Le 5a,6,6-trifluoro-3f3,16a,1 7a,21-tétrahydroxy-prégna-20-one 16,17r-acétonide 3,21-diacétate, le composé de la revendication 3 dans lequel Z est un a-hydrogène et un {3-acétyle 72 00653 2121713 10 15 20 25 2 *5 Y est deux atomes de fluor; R et R^ sont chacun un groupe mé- g thyle; et R est un groupe acétyle. 6. Le 5a,6,6-trifluoro-3(3,l6a,17a,21-tétrahydroxy-prégnan-20-one 16,17-acétonide, le composé de la revendication 3 dans lequel Z est un a-halogène et un (3-hydroxyle ; Yr est deux p *r ^ /r atomes de fluor; R et R sont chacun un groupe méthyle; et R est l'hydrogène. 7. Le 5a,6,6-trifluoro-3f3,l6a,17a,21-tétrahydroxy-prégnan-20-one 16,17-acétonide 21-acétate, le composé de la revendication 3 dans lequel Z est m a-hydrogène et un (3-hydroxyle ; 2 *5 Y est deux atomes de fluor; R et R^ sont chacun un groupe méthyle; et R^ est un groupe acétyle. 8. Le 5a,6,6-trifluoro-16a,17a,21-trihydroxyprégnan-3,20-dione 16,17-acétonide 21-acétate, le composé de la revendication 3 dans lequel Z est de l'oxygène; Y est deux atomes 2 3 fi de fluor; R et R sont chacun un groupe méthyle et R est un groupe acétyle. 9. Les stéroïdes caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule oh2orc 0=0 30 35 2 *5 dans laquelle R et R sont chacun individuellement un groupe alcoyle en C^-Cg, un groupe cycloalcoyle en C^-Cg ou un groupe phényle; R2 et R3 ensemble pouvant être un groupe tétraméthylène 0 ,n ou pentaméthylène; R^ est -C-R^, VC5 R étant un groupe alcoyle en et b est une double liaison ou un groupe p-époxy entre les atomes de carbone en positions 9 et 11. 10. Le 6,6-difluoro-l6a,17a,21-trihydroxy-4,9(l1)-prégnadièn—3,20-dione 21—acétate 16,17—acétonide, le composé de 72 00653 2121713 2 3 la revendication 9 dans lequel R et R sont chacun un groupe méthyle; R^ est un groupe acétyle; et b est une double liaison. 11. Le 6,6-dif luoro-1 6a, 1 la, 21 -trihydroxy-9 (3,11 (3- époxy-4-prégnèn-3,20-dione 21-acétate 16,17-acétonide, le compo- 2 3 5 sé de la revendication 9 dans lequel R et R sont chacun un C groupe méthyle; R est un groupe acétyle; et b est un groupe époxy. 12. Le 6,6-difluoro-9a-bromo-11(3,16a,1 la,21-tétra-hydroxy-4-prégnèn-3,20-dione 21-acétate 16,17-acétonide. 10 13. Une composition pharmaceutique topique caracté risée en ce qu'elle comprend de 0,001$ à 190 d'un stéroïde selon l'une quelconque des revendications 3 à 12, le reste étant un véhicule inerte pharmaceutiquement acceptable ou une combinaison de véhicules inertes. 15 14. Une composition pharmaceutique orale ou parentéra- le caractérisée en ce qu'elle comprend un stéroïde selon l'une quelconque des revendications 3 à 12 dans -un véhicule inerte non toxique pharmaceutiquement acceptable ou une combinaison de véhicules inertes.