Il est bien connu que le sel sodique du sulfate d*oes-trone a une grande importance comme principal constituant des oestrogènes hydrosolubles extraits de l'urine de juments pleines. Il est aussi bien connu que le sulfate sodique d'oestrone, tel qu'il 5 est présent dans les préparations faites à partir d'extraits d'urines de juments pleines, reste stable et conserve sa solubilité dans des conditions normales de stockage. Par ailleurs, on sait également que le sulfate sodique d'oestrone synthétique cristallin se décompose spontanément après 10 une courte période avec une perte de la solubilité dans l'eau, du fait de la libération de sulfate acide de sodium et d'oestrone insoluble dans l'eau. Pour cette raison, on a admis d'une façon générale que le sulfate sodique d'oestrone cristallin ne pouvait pas être utilisé 15 tel quel, et que son accessibilité doit dépendre de celui qui dérive de sources naturelles, c'est-à-dire d'un extrait d'urine de juments pleines. Egalement pour la même raison, on a essayé de remédier à cette instabilité en préparant des sels de bases organiques, mais 20 jusqu'à présent on n'a pas trouvé le moyen d'utiliser le sel de sodium cristallin. Il est donc hautement souhaitable, et c'est là un objet de la présente invention, de trouver un moyen d'empêcher la décomposition spontanée du sulfate sodique d'oestrone synthétique. 25 Selon la présente invention, la demanderesse a déterminé qu'on peut obtenir une préparation stable du sulfate sodique d,oes-trone synthétique en mélangeant le sulfate sodique dtoestrone synthétique avec un extrait d'urine de juments pleines. Tel qu'il est utilisé ici, le terme "extrait d'urine de 30 juments pleines" désigne un extrait soluble dans l'eau et dans l'alcool d'urine de juments pleines contenant ordinairement de 1 à environ 20 $ d'oestrogènes conjugués naturels. De nombreux procédés pour la préparation de tels extraits ont été décrits dans x les brevets et la littérature antérieurs, mais ils peuvent être 35 classées en deux types principaux. Dans l'un des types, l'urine de juments pleines est extraite avec un solvant polaire, le n-butanol 69 41679 2 2073252 étant particulièrement approprié, et l'extrait est soumis à diverses étapes de purification qui peuvent augmenter la terteur en oestrogènes. L'autre type est basé sur l'absorption des oestrogènes sur un absorbant comme le carbone, suivie d'une élution et 5 d'une purification. Pour les extraits envisagés par la présente invention, la purification ne dépasse habituellement pas le point auquel on augmente la teneur en oestrogène au-dessus d'environ 20 ?fi, bien qu'on puisse utiliser des extraits ayant une teneur en oestrogènes allant jusqu'à environ 30 fo. On préfère spécialement utiliser 10 un extrait d'urine de juments pleines ayant une teneur en oestrogènes naturels conjugués comprise entre environ 5 et environ 12 %. Toutefois, on peut utiliser l'une ou l'autre méthode de préparation de l'extrait. Les exemples qui suivent illustrent la fabrication de l'ex-15 trait d'urine de juments pleines. Exemple 1 Schéma Extrait d'urine de juments pleines. 20 25 30 35 22 707 litres d'urine de juments pleines | extraction avec du n-butanol 13 313 litres d'extrait butanolique .. lavage avec 102,5 kg de UaOH en solution 2,0 if et 80,1 kg de HaHCO^ saturé 13 313 litres d'extrait butanolique .. évaporation sous vide (502C), addition lente d'eau au fur et à mesure du départ du n-butanol. Addition d'eau jusqu'à 1 200 litres. 1 200 litres de concentré aqueux » *... lavage avec du dichlorure d'éthylène (120 litres), pH ajusté à 4,5 par de l'acide chlorhydrique (9 litres), lavage au dichlorure d'éthylène - 3 fois (120 1 ; 60 1 ; 60 litres), pH alcalin (25,3 kg de NaHCO^) 1 200 litres d'extrait- aqueux purifié , . extraction avec âii. 11-butanol 208 litres 3 x .400 litres 400 litres » ® » 0 •. 69 41679 3 2073252 1 008 litres à'extrait butanolique évaporation sous vide (502C). i r Extrait concentré (34,95 kg) à 8 % d'oestrogène dissolution dans le méthanol, filtration ▼ 5 108 litres de solution méthanolique d'extrait concentré (102,5 kg) Titre : 2049 g (exprimé en oestrone) ou 2827 g (exprimé en sulfate sodique d'oestrone). 22 707 litres d'urine de juments pleines sont extraits avec du n-butanol et les 13 313 litres d'extrait sont, lavés avec 10 102,5 kg de NaOH sous la forme d'une solution 2N et 80,1 kg de NaHGO^ sous la forme d'une solution saturée. L'extrait butanolique est évaporé sous vide à 50^0, de l'eau étant ajoutée lentement pour remplacer le butanol qui part. Le concentré aqueux est dilué à 1200 litres et lavé avec 120 litres de dichlorure d'éthylène. On 15 ajuste le pH à 4,5 avec de l'acide chlorhydrique concentré et on lave le concentré aqueux avec 120, 60 et 60 litres de dichlorure d'éthylène. Le pH est ajusté à une valeur supérieure à 7,5 par addition de NaHCO^ (25»3 kg) et le concentré aqueux est extrait trois fois avec du n-butanol (volume total 1008 litres). L'extrait buta-20 nolique est évaporé sous vide, donnant un extrait concentré (34,95 kg) qui est dissous dans le méthanol et filtré9 donnant une solution méthanolique de 1'extrait dans lequel les oestrogènes naturels conjugués constituent environ 8 fo de l'extrait. Solution méthanolique ci© 3.. sm trait d'oes-25 trogènes conjugués naturel® 102,5 kg extrait concentré - 34,95 kg oestrogènes conjugués 2,82 kg Exemple 2 28 030 litres d'urine «le juments pleines sont traités par 30 un procédé sensiblement analogue à celui décrit dans l'exemple 1. Les 43»5 kg d'extrait titrent 7,S 5» d'oestrogènes conjugués natu-, rels, ce qui représente 3»385 kg d'oestrogènes conjugués naturels$ exprimés en sulfate sodique d'oestrone, calculés d'après la méthode de titrage AOAC définie ci-après. BAD ORiQlNAL 69 41679 4 2073252 Exemple 3 127 233 litres d'urine de juments pleines sont traités selon les exemples 1 et 2. Les oestrogènes conjugués naturels constituent 7 f° de 11 extrait (méthode AOAC ). 5 Exemple 4 91 350 litres d'urine de juments pleines sont traités selon les exemples 1 et 2. Les oestrogènes conjugués naturels constituent 7 f° de 11 extrait (méthode AOAO ). On peut utiliser diverses méthodes pour mesurer la concen-10 tration en oestrogènes conjugués et évaluer la teneur en oestrogène du sulfate sodique d'oestrone et ces méthodes sont décrites dans la documentation technique. Une méthode "bien connue est une méthode colorimétrique qui consiste à comparer 1'absorbance d'un échantillon d'une substance inconnue avec une solution benzénique 15 d'une oestrone Standard (normes américaines) dans l'intervalle de 400 à 700 mu. Le total des oestrogènes sous forme de sulfate sodique d'oestrone en mg/g est donné par l'équation : (Ag/S^) x (C^/W) x 138 + d/2 dans laquelle Ag = absorbance dans baseline de la solution de l'échantillon ; S^= absorbance dans 20 baseline de la solution standard, = mg d'oestrone dans Tin ali-quote standard, V = g.d'échantillon et d = sulfate sodique d'équiline en mg/g déterminée colorimétriquement séparément par-rapport à une équiline standard de référence après traitement d'une autre avec le réactif Ee - Kober. Cette méthode est visée dans le 25 présent mémoire soiis la forme abrégée : méthode AOAC. Une composition selon la présente invention comprend du sulfate sodique d'oestrone synthétique en mélange avec un extrait préparé à partir de l'urine de juments pleines dans lequel les oestrogènes conjugués naturels constituent d'environ 1 f» a environ 30 30 fo dudit extrait et le sulfate sodique d'oestrone synthétique constitue d'environ 10 f> à environ 90 fo des oestrogènes totaux dans le mélange. On emploie d'ordinaire un extrait d'urine de juments pleines dans lequel la teneur en oestrogènes est dans l'intervalle d'environ 1 fo à environ 20 fo et de préférence dans l'intervalle d'en-35 viron 5 f> à environ (2 fo. Alors que la teneur du composant sulfate sodique d8 oestrone synthétique peut varier d1 environ 10 fo à environ 69 41679 5 2073252 90 io de la teneur totale en oestrogènes, l'intervalle préféré est d'environ 40 $ à environ 75 Cette composition peut aussi contenir d'autres substances thérapeutiques, par exemple d'autres produits hormonaux, antibiotiques, tranquillisants, relaxants museu-5 laires et analogues ainsi que des supports pharmacologiquement acceptables comme du phosphate tricalcique, du carbonate de calcium, du carbonate de magnésium, de la célite, du gel de silice, de la cellulose ea poudre, du lactose, de l'amidon, du bicarbonate de sodium, etc. 10 II est surprenant de trouver qu'un extrait des conjugués oestrogéniques dérivés de l'urine de juments pleines possède les facteurs requis pour stabiliser non seulement la quantité de sulfate d'oestrone naturel mais aussi une quantité beaucoup plus grande de sulfate sodique d'oestrone synthétique normalement ins-15 table. Exemple 5 Une solution méthanolique de 1,887 g d'un extrait préparé à partir d'urine de juments pleines est mélangée avec une solution méthanolique contenant 0,663 g de sulfate sodique d'oestrone syn-20 thétique. Le méthanol est chassé sous vide à 40-502C pour donner une poudre hygroscopique brune coulant facilement. La stabilité du sulfate sodique d'oestrone synthétique dans la poudre, comparée à celle d'un échantillon témoin du type sulfate sodique d'oestrone cristallin est indiquée dans le Tableau, 25 dans lequel on a tenu compte des oestrogènes naturels présents dans la poudre : 69 41679 S 2073252 TAB1E1ÏÏ Echantillon Conditions de stockage % de récupération d'oestrogènes conjugués. ■ - Sulfate sodique d'oestrone pour faire la poudre 70 jours temp. ambiante 80 do. 2 semaines à 452C 42 Poudre 1 mois à temp. ambiante ' 100 do. 2 mois à temp. ambiante 100,6 do. 3 mois à temp» ambiante 94,4 do. " 4 mois à temp. ambiante 103,0 £ do. 4 mois à temp. ambiante plus 1 mois à 45 aC 99,0 Echantillon séché à nouveau dans le vide avant titration Exemple 6 On réalise line charge de fabrication contenant au total 108,72 kg de poudre en mélangeant 95,75 kg de phosphate trical-cique avec 26,594 litres d'une solution méthanolique d'un extrait 5 d'urine de juments pleines pesant 10,3 kg préparé selon les méthodes des exemples 1 à 4, contenant 37,966 mg/ml (9,7%) d'oestrogènes conjugués naturels et 48,7 litres d'une solution méthanolique de sulfate sodique d'oestrone synthétique contenant 39,5 mg/ml - (66 i<> des oestrogènes totaux) et la préparation est séchée sous 10 vide à 40^0 pour éliminer le solvant et donner une poudre coulante. Des études de stabilité effectuées pendant une période de trente mois à la température ambiante n'ont montré aucun change 69 41679 7 2073252 ment dans la teneur en sulfate sodique d'oestrone de cette préparation, telle que déterminée par la méthode AOAC. Exemple 7 D'autres charges de fabrications de poudre préparées comme dans l'exemple 6 ont été essayées pour la stabilité et les résultats sont donnés ci-après i Oestrones conjugués*par gramme venant de l'urine de juments pleines par titrage. Oestrones conjugués * par gramme provenant du sulfate sodique d'oestrone synthétique par titrage Oestrones totaux initiaux conjugués par gramme. Mois de stockage température ord. Teneur en oestrones conjugués trouvée par titrage . f> de la teneur initiale 6,66 16,34 23,00 29 23,10 100,4 4,86 17,33 22,19 27 22,00 99,1 6,72 17,75 24,47 24 24,60 100,5 6,30 16,75 23,05 23 23,00 99,7 (* initiaux) 69 41679 8 2073252 Revendications 1. Composition comprenant du sulfate sodique d'oestrone synthétique en mélange avec un extrait soluble dans l'eau et dans l'alcool d'urine de juments pleines contenant des oestrogènes 5 conjugués naturels. 2. Composition comprenant du sulfate sodique d'oestrone synthétique en mélange avec un extrait soluble dans l'eau et dans l'alcool d'urine de juments pleines contenant des oestrogènes conjugués naturels en quantité constituant d'environ 1 fo à en- 10 viron 30 # dudit extrait, et caractérisée en ce que le sulfate sodique d'oestrone synthétique constitue d'environ 10 % à environ 90 fo de la teneur en oestrogènes totaux. 3. Composition contenant du sulfate sodique d'oestrone synthétique en mélange avec un extrait d'urine de juments pleines carac- 15 térisée en ce que ledit extrait est soluble dans l'eau et dans l'alcool et contient d'environ 5 f> à environ 12 fo d'oestrogènes conjugués naturels et que le sulfate sodique d'oestrone synthétique constitue d'environ 40 f> à environ 75 % de la teneur en oestrogènes totaux de ladite composition. 20 4. Composition comprenant du sulfate sodique d'oestrone synthétique en mélange avec un extrait d'urine de juments pleines, ledit extrait étant caractérisé en ce qu'il est soluble dans l'eau et dans l'alcool et qu'il contient environ 8 f> d'oestrogènes conjugués naturels ; et la proportion de sulfata sodique d'oestrone 25 synthétique dans ladite composition étant d'environ 65 f° de la teneur en oestrogènes totaux. 5. Composition comprenant du sulfate sodique d'oestrone synthétique en mélange avec un extrait d'urine de juments pleines, ledit extrait étant caractérisé en ce qu'il est soluble dans l'eau et 30 dans l'alcool et qu'il contient approximativement 10 f> d'oestrogènes conjugués naturels et que la proportion de sulfate sodique d'oestrone synthétique est approximativement 60 f> de la teneur en oestrogènes totaux. 6. Composition comprenant du sulfate sodique d'oestrone synthé- 35 tique en mélange avec un support pharmacologiquement acceptable et un extrait d'urine de juments pleines soluble dans l'eau 69 41679 3 2073252 et dans l'alcool contenant des oestrogènes conjugués naturels 7. Composition comprenant du sulfate sodique d'oestrone synthétique en mélange avec un support pharmacologiquement acceptable et un extrait d'urine de juments pleines soluble dans l'eau et dans l'alcool contenant des oestrogènes conjugués naturels en quantité constituant environ 1 $ à environ 30 f dudit extrait et caractérisée en ce que le sulfate sodique d'oestrone synthétique constitue d'environ 10 fo à environ 90 $> de la teneur en oestrogènes totaux de ladite composition 8. Composition comprenant du sulfate sodique d'oestrone synthétique en mélange avec un support pharmacologiquement acceptable et un extrait d'urine de juments pleines caractérisée en ce que ledit extrait est soluble dans l'eau et dans l'alcool et contient d'environ 5 f° à environ 12 fo d'oestrogènes conjugués naturels et que le sulfate sodique d'oestrone synthétique constitue d'environ 40 fo à environ 75 f> de la teneur en oestrogènes totaux de ladite composition.