La présente invention concerne la sulfone d'acide 2p-chlorométhyl-2c-méthylpéname-3aL-carboxyli- que, un sel pharmaceutiquement acceptable ou un ester facilement hydrolysé correspondant qui est utile comme inhibiteur des 3-lactamases. L'association présumée entre la résistance manifestée par les antibiotiques à cycle 3-lactame à l'égard de certaines bactéries et l'aptitude de ces bactéries à produire des 3-lactamases a conduit à une recherche intensive d'inhibiteurs de la 3-lactamase. L'acide clavulanique est un exemple d'un tel composé actuellement étudié en détail. Un autre inhibiteur de la 0-lactamase répond sous forme acide à la formule: H 2 CH -H2H H3 COOH et fait l'objet de la demande de brevet européen 2927 publiée le 11 juillet 1979. Le composé de formule: 277 H2c H N 2 C O *COOH est décrit dans les brevets des Etats-Unis d'Amérique n0 4.036.847, 4.009. 159, 5.995.646, 3.989.685 et 5.954.752. Le brevet des Etats-Unis d'Amérique nO 4.155.912 décrit des dérivés d'acide 2-pénème-3-car- boxylique de la formule: s N o C0OH de même que les esters et les sels, à propos desquels on peut se référer également à Farmdoc Abstracts 82090A, 10336B et 4-43537B. Le composé (portant le n0 CP-45899) de formu- le: Qo. -o +S -t H3 .CH3 COOH, est un inhibiteur de 3-lactamase à action irréversible ayant une excellente stabilité en solution. Il a une activité antibactérienne faible et potentialise les ac- tivités in vitro et in vivo de l'ampicilline à l'égard des souches produisant de la 3-lactamase [A. R. English et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 14, 414-419 (1978), Aswapokee et al., J. Antibiotics 31(12), 1238-1244 (Dec. 1978) et Derwent's Farmdoc Abstracts 89627 et 73866B]. Il a été indiqué par B. Baltzer et al.,"Mutual Pro-Drugs of P-Lactam Antibiotics and P-Lactamase Inhi- bitors, J. Antibiotics, 33(10), 1183-1192 (1980) que le principe de combiner un antibiotique à cycle de P-lac- tame avec un inhibiteur de P-lactamase'dans une molécule unique fonctionnant comme précurseur de médicament pour les deux constituants actifs est illustré par les esters combinés 3 et 4 dans lesquels l'ampicilline et le mécil- liname, respectivement, sont combinés avec la sulfone d'acide pénicillanique qui est un inhibiteur de P-lacta- mase. Il est démontré que chez l'homme ces esters sont absorbés de manière excellente dans le tractus gastro- intestinal et hydrolysés après absorption avec libéra- tion simultanée des principes actifs. En conséquence, on atteint des taux sanguins et tissulaires élevés en antibiotique et en inhibiteur de 0-lactamase qui pré- sentent un rapport équilibré. Les avantages offerts par les"précurseurs de médicaments mutuels"sur les combinaisons simples sont envisagés. Les esters 3 et 4 mentionnés sont ceux répon- dant aux formules: o0 CO CH -0 Co CH CO-O 20..... publié le cerne des générale: o30 Il est indiqué dans le document GB 2044255 octobre 1980 que l'invention décrite con- composés jusqu'à présent inconnus de formule R1-CH-CO-NH Y R2 s s o H H C-O- -CH-A Il I o.3 o R1 représente un radical phényle, 4-hydroxyphényle, 1,4cyclohexadiényle ou 3-thiényle; R2 représente un radical amino primaire ou carboxyle; R3 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur, aryle ou aralkyle et A représente un radical d'un inhibiteur de f-lactamase contenant un cycle de 3-lactame, outre un radical carboxyle, A étant uni par l'intermédiaire du radical carboxyle. Ces nouveaux composés sont utiles pour le traitement des infections bactériennes et sont, en par- ticulier, hautement actifs contre les bactéries produi- sant de la 0-lactamase. On peut se référer à ce propos lO également à Farmdoc Abstracts 60773C et 60776C. L'invention a donc pour objet l'acide de for- mule: O O S CH2C1 3 ou un sel pharmaceutiquement.aceptable de.' acide ou un ester facilement hydrolysé de l'acide. Les sels pharmaceutiquement acceptables men- tionnés ci-dessus comprennent les sels métalliques non toxiques, comme les sels de sodium, de potassium, de calcium et de magnésium, le sel d'ammonium et les sels d'ammonium substitué, comme les sels d'amines non toxi- ques telles que les trialkylamines (par exemple la tri- éthylamine), la procasine, la dibenzylamine, la N-ben- zyl-3-phénéthylamine, la 1-éphénamine, la N,N'-diben- zyléthylènediamine, la déhydroabiétylamine, la N,N'- bis(déhydroabiéthyl)éthylènediamine, les N-alkyl(infé- rieur)pipéridines (par exemple la N-éthylpipéridine) et d'autres amines qui ont été utilisées pour former des sels pharmaceutiquement acceptables de pénicillines et céphalosporines. Les sels spécialement préférés sont les sels de métaux alcalins, c'est-a-dire les sels de sodium et de potassium, outre le sel d'ammonium. Aux fins de l'invention, par "esters physio- logiquement hydrolysés", il convient d'entendre les esters pharmaceutiquement acceptables dont on sait qu'ils s'hydrolysent en acides libres in vivo. Des exem- ples d'esters physiologiquement hydrolysés appropriés sont les esters comprenant un radical phénacyle, acé- toxyméthyle, pivaloyloxymnéthyle, "-acétoxyéthyle, a- acétoxybenzyle, a-pivaloyloxyéthyle, phtalidyl(3-phtali- dyle), indanyl(5-indanyle), méthoxyméthyle, benzoyloxy- méthyle, a-éthylbutyryloxyméthyle, propionyloxyméthyle, lO valéryloxyméthyle, isobutyryloxyméthyle, 6-[(R)-2-amino- 2-phénylacétamido]-3,3-diméthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicy- cloE3.2.0]heptane-2-carbonyloxyméthyle et 6-[(R)-2-ami- no-2-p-hydroxyphénylacétamido]-3,3-diméthyl-7-oxo-4- thia-l-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carbonyloxyméthyle. Les esters préférés sont les esters comprenant un radi- cal acétoxyméthyle, pivaloyloxyméthyle, méthoxyméthyle, phtalidyle, 5-indanyle, 6-[(R)-2-amino-2-phénylacétami- do]-3,3-diméthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3.2.0]hepta- ne-2-carbonyloxyméthyle et 6-[(R)]-2-amino-2-p-hydroxy- phénylacétamido]-3,3-diméthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicy- clo[3.2.0]heptane-2-carbonyloxyméthyle. L'invention a également pour objet le procédé pour produire l'acide recherché de formule: 0 o _. Si CH2C1 00, 2 "CH3 OOH ou un sel pharmaceutiquement acceptable de cet acide, suivant lequel, à des stades successifs, a) on soumet à l'hydrogénation catalytique, par exemple au moyen d'un métal précieux catalytique tel que le palladium, un ester de formule: A o R1 représente un tué; radical benzyle ou benzyle substi- b) on soumet le produit hydrogéné à l'oxydation pour former l'acide recherché ou son sel, puis, si la chose est désirée, c) on estérifie l'acide ou le sel pour produire un ester facilement hydrolysé de l'acide. L'invention a en outre pour objet le procédé pour produire l'acide recherché de formule: Cl ou un sel pharmaceutiquement acceptable de cet acide, suivant lequel, à des stades successifs, a) on oxyde, par exemple au moyen de KMnO4, de H202 ou d'un peroxyde analogue ou bien d'un peracide, un ester de formule: -Br kCH2C1 O C 'C w1C1 C- OCH2CCJ3 O pour former un sulfoxyde d'ester de formule: O O Br s. / CH2 "C H3 O C-OCH2CCL, o puis b) on fait réagir ce sulfoxyde d'ester avec un métal dans un acide, tel que le zinc dans l'acide acéti- que glacialpour produire l'acide désiré ou le sel, puis, si la chose est désirée, c) on estérifie l'acide ou son sel pour produire un ester facilement hydrolysé de l'acide. De nombreux oxydants connus pour l'oxydation des sulfures en sulfones conviennent. Néanmoins, des réactifs particulièrement appropriés sont les permanga- nates de métaux alcalins, comme le permanganate de po- tassium, et les peracides organiques, comme l'acide 3- chloroperbenzoique. Des radicaux protecteurs 1 particulièrement utiles sont le radical benzyle et les radicaux benzyle substitués et spécialement le radical 4-nitrobenzyle. Les radicaux benzyle et benzyle substitués peuvent être éliminés commodément par hydrogénation catalytique. Dans ce cas, une solution du composé de formule A, o 1 - R représente un radical benzyle ou benzyle substitué, dans un solvant inerte est agitée en atmosphère d'hy- drogène ou avec de l'hydrogène en mélange avec un di- luant inerte tel que l'azote ou l'argon, en présence d'une quantité catalytique d'un catalyseur d'hydrogé- nation. Des solvants convenant pour une telle hydrogé- nation sont les alcanols inférieurs, comme le méthanol, les éthers, comme le tétrahydrofuranne et le dioxane; les esters de bas poids moléculaire, comme l'acétate d'éthyle et l'acétate de butyle, l'eau et les mélanges de ces divers solvants. Toutefois, il est habituel de choisir des conditions dans lesquelles le composé de départ est soluble. L'hydrogénation est exécutée d'ha- bitude à une température d'environ 0 à 600C sous une pression d'environ 101 à 10100 kPa. Les catalyseurs utilisés pour cette hydrogénation sont du genre connu pour une telle transformation, des exemples typiques étant les métaux nobles, comme le nickel, le palladium, le platine et le rhodium. Le catalyseur est habituel- lement pris en quantité d'environ 0,01 à 2,5% en poids et de préférence d'environ 0,1 à 1,0% en poids, sur la base du composé de formule A. Il est souvent avantageux de déposer le catalyseur sur un support inerte et un catalyseur particulièrement commode est le palladium déposé sur un support inerte-tel que le carbone. De plus, il est habituel de tamponner le mélange de réac- tion pour travailler à un pH d'environ 4 à 9 et, de préférence, de 6 à 8. les tampons au borate et phos- phate sont d'usage courant. La réaction se fait norma- lement en environ 1 heure. L'invention a en outre pour objet les esters de formule: CH. R- CH--CO -NH M{C I O O 0H3I o R représente: R2 *i. aou Ri o R représente un atome d'hydrogène ou un radical hy- droxyle et R représente un atome d'hydrogène ou de chlore ou un radical hydroxyle, méthyle ou méthoxy, et de préférence l'ester de formule: f tHCO-NHC C H HO CH-CO-NH NH2 2 o OS' \ C C 0 O Il --.-et-.1-!ester de formule: i NH 2 de même que le procédé pour produire un tel ester, sui- vant lequel on fait réagir unacide avec une solution d'un composé de formule: C lO R 3-CH N JACfCl ClH2 07X OO oI2 % o c0 o I o R représente: R5 ZYKYO ou R4O. o R représente un atome d'hydrogène ou un radical hy- droxyle et R5 représente un atome d'hydrogène ou de chlore ou un radical hydroxyle, méthyle ou méthoxy; R1 représente un radical alkyle, aralkyle ou aryle; R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, aralkyle ou aryle et R3 représente un radical alkyle, aralkyle, aryle, alcoxy, aralcoxy, aryloxy ou-NR4R5 o R4 et R5 représentent chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, aralkyle ou aryle ou bien,pris en- semble avec l'atome d'azote, représentent un radical pipéridino ou morpholino, laquelle réaction au moyen de l'acide est exécutée, de préférence, dans un solvant organique tel que l'acétone ou le chloroforme ou en une solution aqueuse ou partiellement aqueuse et de préférence à un pH de 1 a 5 à la tem.pérature ambiante. Il est en outre préféré que dans la formule ill du radical protégeant la fonction amino, R1 représente Àt R2 un radical méthyle, R2 représente un atome d'hydrogène et R3 représente un radical méthoxy, éthoxy ou méthyle, ce qui nécessite d'utiliser de l'acétoacétate de méthy- le, de l'acétoacétate d'éthyle ou de l'acétylacétone. Pour l'élimination du radical protecteur de la fonction "-amino, il est préférable d'utiliser un acide minéral fort, comme l'acide chlorhydrique,ou bien l'acide formique. L'invention a en outre pour objet à titre de nouvel intermédiaire un ester de formule: Br S CH2C1 3 -OR o R représente un radical benzyle ou benzyle substitué et de préférence p-nitrobenzyle, de même que le procédé pour préparer cet ester, suivant lequel on chauffe, de préférence au reflux, un composé de formule: Br OC-OR o R représente un radical benzyle ou benzyle substitué et de préférence p-nitrobenzyle,dans un solvant organi- que anhydre inerte, de préférence le dioxanne, en pré- sence d'une quantité importante et de préférence équi- molaire d'une amine tertiaire faible, de préférence la quinoléine, et d'un chlorure d'acide, de préférence le chlorure de benzoyle,jusqu'à achèvement sensible de la réaction. L'invention a de plus pour objet à titre de nouvel intermédiaire un ester de formule: Cl o R représente un radical benzyle ou benzyle substitué et de préférence p-nitrobenzyle, de même que le procédé pour préparer cet ester, suivant lequel on oxyde une solution, dans un solvant inerte, de préférence le chlorure de m6thylène, d'un compos6 de formule: Br CH2C1 CH3 C-OR Il o R représente un radical benzyle ou benzyle substitu6 et de préférence p-nitrobenzyle, à peu près à la tempé- rature ambiante,au moyen d'un peracide, de préférence 1 'acide m-chloroperoxybenzoîque. L'invention a aussi pour objet à titre de nouvel intermédiaire l'ester de formule: O O C1 C-OCX CCl o de même que le procédé pour le préparer, suivant lequel on oxyde une solution dans un solvant inerte, de préfé- rence le chlorure de méthylène, d'un composé de formu- le: Br C H2Cl 0 CHC3 N, , C-OC H2CCl3 o à peu près à la température ambiante au moyen d'un oxy- dant tel que le permanganate de potassium, le peroxyde d'hydrogène ou un peroxyde analogue ou de préférence un peracide, avantageusement l'acide m-chloroperoxybenzol- que. Le "Skellysolve B" est une fraction d'éther de pétrole bouillant de 60 à 68 C et consistant essen- tiellement en n-hexane,vendue par la Société Skelly Oil Co. Des exemples ci-après illustrent la prépara- tion de composés représentatifs faisant l'objet de l'invention sans limiter cette dernière. EXEMPLE.l o- Préparation de la sulfone de 2i-chlorométhyl-2"-méthyl- péname-3a-carboxylate de potassium (BL-P2013) O O 3... Br" v XNO 2 o N ''CO...H N ---_ _ Br Br NO2 Mnn04 (BL-P2013) S-sulfoxyde d'acide 6c-bromop6nicillanique (1) 1. On dissout 50 g (57,5 mmoles) du sel de N,N'- dibenzyléthylènediamine d'acide 6a-bromop6nicillanique [G. Cignarella et al., J. Org. Chem. 27, 2668 (1962) et E. Evrard, Nature 201, 1124 (1964)] dans 330 ml de chlorure de m6thylène. On agite et on refroidit à 0 C. 2. On ajoute dans 13 ml (156 mmoles) d'acide chlorhydrique concentré à la solution de chlorure de m6thylène. La précipitation du chlorhydrate de diben- zyléthylènediamine se fait en 1 minute. On agite la suspension à 0-5 C pendant 10 minutes. 3. On sépare le chlorhydrate d'amine précipité par filtration sur un filtre prégarni de terre de dia- H2 4 1 tomées (de marque "Dicalite"). On lave le gâteau de filtration avec 150 ml de chlorure de méthylène. Il faut achever la filtration aussi rapidement que possi- ble. Il faut éviter de conserver longtemps la solution acide dans le chlorure de méthylène. Quelques diffi- cultés de filtration peuvent résulter de la finesse du précipité. Un auxiliaire de filtration ajouté à la suspension peut se révéler utile. 4. On mélange les filtrats de chlorure de méthy- lène et on les lave avec 60 ml d'eau froide. On agite pendant 5 minutes et on rejette la phase aqueuse. Le pH de l'eau de lavage est de 2,0 à 2,3. 5. On concentre la solution d'acide 6a-bromopé- nicillanique dans le chlorure de méthylène sous pres- sion réduite jusqu'à un volume de 65 à 80 ml. On re- froidit la solution jusqu'à 5 C sous agitation. 6. Sous vive agitation, on ajoute prudemment 13 ml (86,9 mmoles) d'acide peracétique à 40% en 30 mi- nutes. La réaction est exothermique. Par refroidisse- ment au bain de glace, on maintient la température en- tre 15 et 18 C. Le sulfoxyde commence à cristalliser après addition de 10 ml d'acide peracétique. On agite et on refroidit la suspension à 0-5 C pendant 2 heures. 7. On filtre la suspension et on lave le gâteau blanc neige dans l'ordre suivant: 10 ml d'eau à 5 C, ml de chlorure de méthylène à 0-5 C, enfin 15 ml d'heptane. 8. On sèche le gâteau de filtration à 45 C à l'étuve à air jusqu'à poids constant, une durée de 6 à 10 heures devant être suffisante. Un chauffage plus long peut faire apparaître un reflet rose. Le poids du composé 1 est de 16,26 gsoit un rendement de 73,24%. 9. On peut observer l'état du mélange de réac- tion et du produit final par chromatographie en couche mince dans les systèmes 15 toluène/4 acétone/1 aci- de acétique ou bien 8 acétone/8 méthanol/3 toluène/1 acide acétique. On analyse le produit final par spec- troscopie de résonance magnétique nucléaire et spec- troscopie infrarouge. S-sulfoxyde de 6a-bromopénicillinate de p-nitrobenzyle (2) On ajoute 7,5 g (41 mmoles) de 2-éthylhexa- noate de potassium à une solution de 12 g (40 mmoles) de S-sulfoxyde d'acide 6c-bromopénicillanique dans ml d'acétone. On recueille le sel par filtration, on le lave à l'acétone froide et on le sèche à l'air pour en obtenir une quantité totale de 10 g. On dis- sout le sel de potassium cristallin dans 75 ml de dimé- thylacétamide et on ajoute 7,8 g (0,04 mole) de bromure de p-nitrobenzyle à la solution. On agite la solution à 23 C pendant 24 heures. On dilue le mélange avec 500 ml d'eau et on l'extrait à l'acétate d'éthyle. On lave l'extrait dans l'acétate d'éthyle 4 fois à l'eau et on le sèche sur du sulfate de magnésium anhydre. On évapore le solvant à 350 C (2000 Pa) pour obtenir une huile qui cristallise. On disperse les cristaux jau- nâtres clairs du composé 2 dans de l'éther, puis on les recueille par filtration pour en obtenir une quan- tité de 9 g (70/o) RF. 124-125oC avec décomposition. Analyse pour C1515BrN206S Calculé: C, 41,98; H, 3,05; N, 6,52 % Trouvé: C, 42,00; H, 3,48; N, 6,98 % Spectre infrarouge (KBr): 1800(F), 1740(F), 1610(f), 1520(F), 1450(m), 1350(F), 1060(m), 740(m) cm-1. Spectre de résonance magnétique nucléaire H (60 MHz, DMSO): 6 1,22 (s,3H), 1,6 (s,3H), 4,67 (s,lH), 5,2 (d,JVl-5 Hz,lH), 5,45 (s,2H), 5,68 (d,Jvl5Hz,lH), 7,5-8,5 (m,4H). -Chlorométhyl-2x-méthyl-6-bromopéname-3c-carboxylate de p-nitrobenzyle (X) On chauffe au reflux en atmosphère d'azote pendant 4 heures une solution de 5 g (12 mmoles) de S-sulfoxyde de 6x-bromopénicillanate de pnitrobenzyle (2) dans 120 ml de dioxane anhydre en présence de 1,5 g (12 mmole de quinoléine et de 1,6 g (12 mmoles) de chlorure de benzoyle. On dilue la solution avec 600 ml d'eau et on l'extrait à l'acétate d'éthyle. On lave l'extrait dans l'acétate d'éthyle avec une solu- tion à 5% de bicarbonate de sodium, une solution de 5% d'acide phosphorique et enfin de l'eau. On sèche la couche organique sur du sulfate de magnésium et on l'é- vapore à 35 C (2000 Pa) en une huile. L'huile cristal- lise et on recueille les cristaux qu'on lave à l'éther et finalement au toluène froid, pour obtenir 3,5 g (65%) du composé 3 fondant à 130-135 C avec décomposi- tion. Analyse pour C15H15ClBrN2 05S Calculé: C, 40,06; H, 3,14; N, 6,23 % Trouvé: C, 40,19; H, 3,12; N, 6,75 % Spectre infrarouge (KBr): 1792(F), 1740(F), 1610(f), 1520(F), 1353(F), 1280(m), 1025(f), 990(f), 750(f)cm-1 Spectre de résonance magnétique nucléaire (60 MHz,DMSO): S 1,45 (s,3H), 3, 5-4,3 (m,2H), 5,05 (s,lH), 5,42(s,2H), 5,5 (d,J'v1,5 Hz,lH), 5,62 (d,J"ul,5 Hz,lH), 7,5- 8,5 (m,4H). Sulfoxyde de 2 -chlorométhyl-2x-méthylpéname-6a-carboxy- late de p-nitrobenzyle On agite une solution de 1 g (2,2 mmoles) de 3 chlorométhyl-2x-méthyl-6"-bromopéname-3a-c arboxylate de p-nitrobenzyle (3) dans 50 ml de chlorure de méthy- * lène avec 473 mg (2,2 mmoles) d'acide m-chloroperoxy- benzoîque. On agite la solution pendant 3 heures à 23 C. On évapore le chlorure de méthylène jusqu'à 20 ml à 2000 Pa à 335C et on dilue la solution concen- trée avec 50 ml d'heptane ("Skellysolve B"). On dé- cante le solvant et on disperse le résidu dans de l'é- ther pour faire cristalliser rapidement le composé (4) fondant à 136137 C avec décomposition et obtenu en quantité de 250 mg (rendement de 24%). Analyse pour C15H14BrC1N206S Calculé: C, 38,68; H, 3,02; N, 6,02% Trouvé: C, 39,14;-H, 3,13; N, 5,96% Spectre infrarouge (KBr): 1800(F), 1760(F), 1520(F), 1350(F), 1200(F), 1050(m), 830(f), 740(f) cm-1. Spectre de résonance magnétique nucléaire H(60 MHz,DMSO): g 1,32 (s,3H), 3,8-4,5 (m, 2H), 4,97 (s,lH), 5,25 (d,J-vl,5 Hz,lH), 5,45 (s,2H), 5,6 (d,Jrvl,5 Hz,lH) , 7,8-8,5 (m,4H). Sulfone de 23-chlorométhyl-2a-méthylpéname-3"-carboxy- late de potassium (5) (BL-P2013) On ajoute une suspension de 4 g de 30% de palladium sur de la terre de diatomées ("ICelite"l) et 2,8 g de bicarbonate de sodium dans 150 ml d'eau à une solution de 7 g (15 mmoles) de sulfoxyde de 20-chloro- méthyl-2"-méthyl-6"-bromopéname-3a-carboxylate de p-ni- trobenzyle (4) dans 150 ml d'acétate d'éthyle. On hy- drogène le mélange pendant 3 heures sous 345 kPa. On sépare le catalyseur par filtration et on recueille la couche aqueuse & laquelle on ajoute 1,5 g de perman- ganate de potassium dans 50 ml d'eau. On agite le mé- lange pendant 1 heure et on y ajoute 250 mg de bisul- fite de sodium. On filtre le mélange et on ajuste le filtrat à pH 2 avec de l'acide chlorhydrique concentré. On lyophilise la solution pour obtenir une poudre amor- phe blanche. On extrait le solide à l'acétate d'éthy- le, on évapore l'extrait jusqu'à 20 ml et on dilue le résidu avec 100-ml d'heptane ("Skellysolve B"). On re- cueille de la sulfone d'acide 20-chlorométhyl-2acx-mé- thylpéname-3a-carboxylique solide hygroscopique blanche. On dissout l'acide dans de l'acétone et on y ajoute du 2-éthylhexanoate de potassium solide. On obtient un précipité d'un sel cristallin blanc qu'on recueille par filtration pour obtenir 170 mg du composé 5 fondant au-delà de 140 C avec décomposition. Analyse pour C8H. ClKN05S.2H20 Calculé: C, 28,27; Hi 3,24; N, 4,12 % Trouvé: C, 28,27; H, 3,69; N, 3,84% Spectre infrarouge (KBr): 1790(F), 1770(m), 1620(F), 1460(m), 1370(F), 1310(F), 1200(F), 1140(F), 955(m), 740(m) cm-1. Spectre de résonance magnétique nucléaire H(lOOMHz,D20): S 1,68 (s,3H), 3, 2-3,9 (m,J'v2 Hz, J',#4 Hz, Jtv6 Hz,2H), 4,0-4,4 (m,2H), 4,3 (s,lH), 5,02 (d d,J v4 Hz), JT 2 Hz,l 1H). EXIEMPLE 2. - Sulfone de 2B-chlorométhy1-2o-méthylpéname-3a-carboxy- late de pivaloyloxyméthyle On mélange de la sulfone d'acide 23-chloromé- thyl-2a-méthylpéname-3a-carboxylique dans du diméthyl- sulfoxyde avec 1 équivalent de triéthylamine et on agite le tout pour la dissolution. On ajoute ensuite 1 équivalent de pivalate de bromométhyle dans du dimé- thylformamide. On agite le mélange résultant à la température ambiante. On clarifie ensuite le mélange par filtration et on verse le filtrat dans de l'eau glacée. On recueille par filtration le solide préci- pité qu'on lave à l'eau et qu'on sèche pour obtenir l'ester recherché. On prépare les esters à radical acétoxymé- thyle, méthoxyméthyle, acétonyle et phénacyle du même acide en remplaçant,dans le procédé ci-dessus,le piva- late de bromométhyle par une quantité équimolaire d'a- cétate de chlorométhyle, d'éther chlorométhylméthyli- que, de chloroacétoneetcbbromure de phénacyle, respec- tivement. EXEMPLE 3.- Sulfone de 21-chlorométhyl-2c-méthylpéname-3"-carboxy- late de pivaloyloxyméthyle BL-P2024 O O eNs >,CH3 S C30 o -/ JIjaCH2C1 + NaI + H20 + ClCH2-O-C-C(CH3)3 10. O (306) Co2 - (BL-P2013) 0 0 CH acétone I _CH2C1 O C02CH2-0-C-C(CH3)3 (BL-P2024) On ajoute 4 ml d'une solution aqueuse à 10% d'iodure de sodium à une suspension agitée de 14,6 g (48,7 mmoles) de BL-P2013 (5) dans 200 ml d'acétone et on porte le mélange au reflux au bain de vapeur. On ajoute à la suspension bouillant au reflux 14,8 ml (O,1 mole) de pivalate de chlorométhyle redistillé (P.Eb. 34 C à 933 Pa) en une fois. On agite le mélange au reflux pendant 3 heures, puison le refroidit à la température ambiante (22 C). On recueille par filtra- tion les solides cristallins qu'on lave 3 fois avec ml d'acétone, après quoi on combine les filtrats et on les évapore sous vide au-dessous de 22 C en une huile. On reprend alors l'huile en 500 ml d'acétate d'éthyle et on lave la solution 1 fois avec 200 ml d'eau et 1 fois avec du sulfate de sodium saturé, tan- dis qu'on l'agite avec 2 g de charbon décoloré,sous refroidissement au bain de glace. Après 20 minutes, on filtre le mélange sur de la terre de diatomées, (Dicalite) par dépression, après quoi on lave la Dicalite 4 fois avec 100 ml d'acétate d'éthyle. On combine les filtrats et on les concentre à 22 C sous vi- de en une huile. On concentre l'huile davantage à en- viron 22 C au-dessous de 133 Pa pour éliminer la ma- jeure partie du pivalate de chlorométhyle résiduel. On triture l'huile restante alors 2 fois dans 50 ml de n-pentane et on la laisse reposer pendant le week-end en chambre froide (environ 10 C) sous une couche de n-pentane. On concasse alors la masse solide cristal- line résultante en une poudre solide sous 40 ml d'un mélange 4:1 d'éther et de n-pentane. On recueille le produit par filtration, on le lave avec un mélange 1:1 éther-pentane, puis avec du pentane, après quoi on le sèche à l'air. Après séchage sous vide pendant 4 heu- res en présence de P205, on obtient 13,37 g de sulfone de 23-chlorométhyl2"-méthylpéname-35-carboxylate de pivaloyloxyméthyle (rendement d'environ 75%) fondant à 93-95 C. Analyse pour C14H20ClN07S Calculé: C, 44,03; H, 5,27; N, 3,67% Trouvé: C, 44,11; H, 5,08; N, 3,85% EXEMPLE 4.- Recristallisation de la sulfone du 2p-chlorométhyl-2a- méthylDéname-3a-carboxylate de potassium (BL-P2013) On ajoute de l'eau, à raison de 1 ml à la fois, sous agitation à un mélange de 20 ml de n-buta- nol et 1 g de composé BL-P2013 (5) dans une ampoule à décantation jusqu'à formation d'une solution jaune pâle. On filtre la solution limpide sur du papier fil- tre plissé, puis on lave l'ampoule et le papier filtre avec environ 10 ml d'un mélange 9:1 de n-butanol et d'eau, après quoi on combine les filtrats et on les di- lue avec encore 20 ml de n-butanol. On introduit la solution résultantedans le ballon à fond rond d'un éva- porateur rotatif et on l'évapore sous pression réduite à peu près jusqu'à la moitié du volume initial. On re- cueille par filtration les cristaux blanc neige du pro- duit qu'on lave 6 fois avec 10 ml d'acétone et qu'on sèche à l'air. On en obtient ainsi 810 mg. Après 6 heures de séchage sous vide sur du P205 audessous de 133 Pa, on obtient 800 mg (rendement de 80%) du com- posé fondant à 215 0 avec décomposition. Analyse pour C8H9ClN05SK.l SO 8 K.l120 Calculé: C, 29,67; H, 3,39; N, 4, 63; C1, 10,94; K.F.H20, 5,56 % Trouvé: C, 29,23; H, 3,38; N, 4,49; C1, 10,74 K.F.H20, 5,74 % Cette technique de recristallisation donne un monohydrate cristallin qui est différent du composé de départ, lequel est essentiellement anhydre. EXEMPLE 5.- o cHo-i-C C12 'ClCX2-0-C-Cl Cl30-C-Cl umière |C CCC I+CiS03H 1" ClCH2-O-SCl 6 o - Voir Chemical Abstracts 27, 24271 et 22, 3828; outre GB 299064. o C1S03CH2C1(6' S CH%2Cl 3S CHci 2 "CH3 NH N C-OCH Cl I00K 2 z NaI ac étone| 0 W0 ES/ CH2Cl "CH O '-OCH2I o8 8 + H3C C N E la I C+ I." OCH3 o30 9 (brevet E.U.A 3.316.247) ú CH3I \ / CHC0O-NH I "3 Il O.0 2H 0 -0 0o II 1 f.r.t v;U n s C H CO _NHC N1i2 0 C=0 r_ - 110 I1 CH l I2 0C - _---O "- 0 0 /.-CH.C H2 0/ -./,,CH3 II Z491071 a) On ajoute goutte à goutte une solution de chlorosulfate de chlorométhyle (0,115 mmole) dans 40 ml de dichlorométhane, en maintenant la température de ré- action sous 30 C, à une solution du composé 2 (0,1 mo- le) et de bicarbonate de potassium (0,3 mole)dans 200 ml d'un mélange 1:1 de dichlorométhane et d'eau contenant de l'hydrogénosulfate de tétrabutylammonium (0,01 mole). Au terme de l'addition, on agite le mélange à la tempé- rature ambiante pendant 30 minutes, puis on sépare la phase organique et on extrait la phase aqueuse avec du dichlorométhane (50 ml). On combine les phases orga- niques et on les sèche sur du sulfate de sodium, puis on les évapore sous vide pour obtenir un résidu qu'on dissout dans 150 ml d'éther. Après addition de terre de diatomées, on sépare les insolubles par filtration et on évapore le filtrat sous vide pour obtenir le composé 7. b) On ajoute 1,6 g de sulfate de bis-chloromé- thyle à une suspension du composé 5 (1,5 g) dans du diméthylformamide (12 ml) et on agite le mélange pen- dant 45 minutes à la température ambiante. Après di- lution à l'acétate d'éthyle (50 ml),on lave le mélange à l'eau, puisaubicarbonate de sodium aqueux, après quoi on le sèche et on l'évapore sous vide pour obtenir le composé 7 sous la forme d'une huile. c) On ajoute 7 mmoles de triéthylamine et mmoles du chloroiodométhane à une solution de mmoles du composé dans 7,5 ml de diméthylfor- mamide, puis on agite le mélange pendant 4 heures à la température ambiante. Après dilution avec 30 ml d'a- cétate d'éthyle, on lave le mélange 3 fois avec 10 ml d'eau, puis avec 5 ml de chlorure de sodium aqueux sa- turé, après quoi on sèche le mélange et on l'évapore sous vide pour obtenir le composé 7 sous la forme d'une huile. d) On ajoute 1,5 mole de chloroiodométhane à un mélange de 0,15 mole du composé 5, de 0,15 mole de nitrate d'argent et de 7,5 g d'oxyde d'argent dans 750 ml d'acétonitrile. Après 48 heures d'agitation à la température ambiante, on sépare par filtration les sels d'argent et on évapore le filtrat à siccité sous vide. On dissout le résidu dans 200 ml d'acétate d'é- thyle et on lave la solution avec du chlorure de sodium aqueux saturé, on la filtre, on la sèche et on l'éva- pore sous vide pour obtenir le composé 7. On purifie le composé 7 et d'autres composés intermédiaires, de même que les produits finals de l'invention, si la chose est désirée, par chromatogra- phie sur colonne de "Sephadex" LH20 en utilisant un mé- lange chloroforme:hexane 65:35 comme éluant, par exem- ple, ou par chromatographie sur colonne de gel de sili- ce, par exemple Mallinckrodt CC-7,en utilisant des mé- langes hexane-acétate d'éthyle 3:2, acétate d'éthyle- éther de pétrole 8:2, 7:3, 1:9 ou 15:85, acétate d'é- thyle-n-hexane 4:6 ou 3:1, hexane-acétate d'éthyle 3:1, 1:1 ou 1:4 ou cyclohexane-acétate d'éthyle 1:1. La chromatographie en couehe mince est utile aussi. Le "Sephadex" est de l'épichlorhydrine, du chlorhydrate de chlorure d'éther 2-(diéthylamino)éthyl-2- [[2-(diéthylamino)-éthyl]diéthylammonioléthylique de dex- trane réticulé (Merck Index, neuvième édition, n 7337). On agite pendant 18 heures à la température ambiante une solution de 0,2 mole du composé 7 et de 0,3 mole d'iodure de sodium dans 150 ml d'acétone. On refroidit la suspension résultante à environ 0 C et on l'ajuste à peu près à pH 7,2 par addition, sous agita- tion, de bicarbonate de sodium aqueux saturé. Après décoloration par addition ménagée de thiosulfate de so- dium aqueux 0,5 M, on ajoute 150 ml d'eau goutte à goutte au mélange agité pour faire précipiter le com- posé 8 solide qu'on recueille par filtration, puis qu'on lave avec un mélange acétone-eau 1:1 (2 x 20 ml), de l'isopropanol (2 x 20 ml) et de l'éther (2 x 20 ml), puis qu'on sèche. On convertit de l'ampicilline en le composé 9 au moyen d'acétoacétate de méthyle, comme décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique n 3.316. 247. On ajoute alors à5 C 0,5 mole du composé 8 à une solution agitée de 0,57 mole du composé 9 dans 1 litre de dimé- thylformamide. Après 15 minutes d'agitation à 5 C, on verse le mélange de réaction dans un mélange glacé et agité de 4 litres d'acétate d'éthyle et de 2 litres de chlorure de calcium aqueux saturé. On sépare la phase organique, on la lave avec du chlorure de calcium aqueux saturé (2 x 500 ml), on la filtre et on l'éva- pore jusqu'à environ 1 litre sous vide pour obtenir une solution concentrée du composé 10. On ajoute 500 ml d'eau et 500 ml de n-butanol à ce concentré, puis,gout- te à goutte, de l'acide chlorhydrique 4 N sous agitation jusqu'à élimination du radical protégeant la fonction amino, de manière à obtenir une solution du composé 11. Au terme de l'addition d'acide, on ajoute 1 litre d'é- ther et 500 ml d'eau au mélange agité, après quoi on sépare la phase aqueuse et on extrait la phase organi- que avec 800 ml d'eau. On combine les extraits aqueux et on les lave avec 1 litre d'éther, puis on y ajoute 640 g de chlorure de sodium et 2 litres de dichloromé- thane, après quoi on agite le mélange pendant 15 minu- tes. On sépare la phase organique et on extrait la phase aqueuse avec 1 litre de dichlorométhane, après quoi on combine les extraits organiques et on les sè- che sur du sulfate de magnésium, puis on les évapore jusqu'à environ 600 ml sous pression réduite pour ob- tenir une solution concentrée du composé 11. Par addition de 200 ml de 2-butanone au concentré, puis re- froidissement, on fait précipiter à l'état solide la sulfone de 2p-chlorométhyl-2"-méthylpéname-3c-carboxy- late de 6-[(R)-2-amino-2-phénylacétamido]-3,3-diméthyl- 7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3.2.O]heptane-2-carbonyloxy- méthyle (11) qu'on recueille par filtration. Z491071 EXEMPLE 6. Sulfone du 2D-chlorom6thyl-2a-mé6thylpéname-3c-carboxy- late de 6-E(R)-2-amino-2-p-hydroxyph6nylac6tamidoj]-3,3- diméthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo [3.2.0]heptane-2-car- bonyloxyméthyle de formule: S CH3 HO CH-C0 -NH C N MH2 C=0 - 0b o e CH2C1 JIÈ uIICH3 2O- O0 II On obtient ce composé en remplaçant l'ampicilline uti- lisée dans l'exemple 5 par de l'amoxicilline. EXEMPLE 7.- - a) CE / \ + N-Bromosuccinimide O aj -azo-isobutyronitrile A i4 CHBr %12 o Comme indiqué dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique n' 3.860.579, on chauffe au reflux pendant 4,5 heures 50 g (0,375 mole) de phtalide recristallisé et 0,375 mole de N-bromosuccinimide recristallisé en présence d'environ 100 mg d'a-azobutyronitrile dans 1 litre de tétrachlorure de carbone. On refroidit le mélange à environ 15 C et on le filtre pour en séparer le succinimide qu'on lave à son tour avec 100 ml de té- trachlorure de carbone qu'on sépare par filtration. On mélange les solutions dans le tétrachlorure de carbone et les concentre sous vide jusqu'à environ 150 ml pour obtenir le 3-bromophtalide solide qu'on recueille par filtration, qu'on lave avec environ 50 ml de tétrachlo- rure de carbone et qu'on sèche à l'air pour obtenir 54 g du composé dont le poids se ramène à 50 g après recristallisation dans le cyclohexane bouillant, le point de fusion étant de 84-86 Co b) o 0 CHBr >CH2C1 0 H C-OK Il 0o DMF tD4 v25 22 C. o >o S st CH C1 2 j. 'CH3 N " * C-O-CH BL-P2056 0 0 3\CI *dl _ On ajoute 1,7 g (8 mmoles) de 3-bromophta- lide (12) à une solution partielle et suspension par- tielle agitée du composé 5 (BL-P2013; 2,3 g, 7,6 mo- les) dans 20 ml de diméthylformamide (séché pendant 3 semaines sur du tamis moléculaire 3A) et on agite le mélange pendant 4 heures à 22 C. On verse le mélange résultant dans un mélange de 200 ml d'eau glacée et de ml d'acétate d'éthyle glacé (en rinçant le ballon avec un peu d'acétate d'éthyle), puis on agite le mé- lange. On sépare alors la phase organique et on la lave 7 fois avec 100 ml d'eau glacée. On lave la phase organique à nouveau avec du sulfate de sodium aqueux saturé, puis on la sèche à froid sur du sulfate de so- dium, on la filtre et on l'évapore à siccité sous vide, pour obtenir, comme résidu, une huile qu'on triture 2 fois dans 25 ml de cyclohexane, 2 fois dans 25 ml de "Skellysolve B"' (P.Eb. 60-68 C, essentiellement du n-hexane) et 4 fois dans 25 ml de n-hexane, pour obte- nir 2,5 g du composé 11 sous la forme d'un solide pres- que blanc après- séchage à l'air. On sèche ensuite le produit sur P205 sous une pression inférieure à 133 Pa pour obtenir 2,5 g du composé 13 fondant à 104 C avec décomposition. La pureté estimée est de 85-95%. Analyse pour C16H14C01NO7S Calculé: C, 50,61; H, 3,79; N, 3,77; Cl, 9,53 % Trouvé: C, 52,59; H, 4,67; N, 3,21; Cl, 7,73;% K.F.H20, 0,27 EXEMPLE 8.- Sulfone ds 2 -chlorométhyl-2O-méthylpéname-3a-carboxy- late de pivaloyloxyméthyle On incorpore par agitation un mélange de 1 g (3,1 mmolea de sulfone de 23-chlorométhyl-2a-méthylpé- * namène-3a-carboxylate de potassium hydraté et de 1 g de tamis moléculaire 3A à 15 ml de diméthylacétamide pendant 2 heures à 23 C. On ajoute à ce mélange 470 mg (3,1 mmoles)de chlorure de pivaloyloxyméthyle et on poursuit l'agitation pendant 18 heures. On sé- 2 4 9 1071 pare le tamis moléculaire et on dilue le filtrat avec ml d'eau, puis on l'extrait à l'acétate d'éthyle. On lave l'extrait dans l'acétate d'éthyle 9 fois à l'eau, puis on le sèche sur du sulfate de magnésium anhydre. On chasse le solvant à 30 C (2000 Pa) pour obtenir une huile qu'on chromatographie sur de la si- lice Silicar CC-7 (chlorure de méthylène 8, acétate d'éthyle 2) donnant une tache dont le Rf est de 0,5. On cristallise le résidu dans de l'heptane ("Skelly- solve B"') pour obtenir 100 mg de sulfone de 20-chloro- méthyl-2a-méthylpéname-3c-carboxylate de pivaloyloxy- méthyle fondant à 94-95 C. Analyse Calculé: C, 44,03; H, 5,27; N, 3,67% Trouvé: C, 44,20; H, 5,24; N, 3,63 % Le spectre de résonance magnétique nucléaire et le spec- spectre infrarouge sont compatibles avec la structure. EXEMPLE 9.- Sulfone de 20-chlorométhyl-2a-méthylpéname-3a-carboxy- late de sodium 0 Q/ bHCl2C CH ci _'Seo cH5 F ' X Nc2 H/C H+ NaEH. C3 N f. (1) (2) 0N Co2K (306) 2 Cs8H9ClNO5SNa (306) (289,67) On ajoute de l'acide chlorhydrique 2 N à une solution agitée de 500 mg de BL-P2013 (sel de potas- sium) dans 5 ml d'eau et 10 ml d'acétate d'éthyle jus- qu'à ce que le pH soit de 1 (on effectue l'opération sous vive agitation au bain de glace). On sature en- suite le mélange de sulfate de sodium, on sépare la couche aqueuse et on sèche la phase organique briève- ment dans de la glace sur du sulfate de sodium, après quoi on la recueille par filtration et on y ajoute goutte à goutte du 2- éthylhexanoate de sodium à 50% dans le n-butanol anhydre jusqu'à neutralité du papier pH humide. Le produit ne cristallise pas lors du grat- tage de la paroi du récipient et on concentre ensuite le mélange sous vide en une huile qu'on dissout dans ml d'acétone, le grattage des parois n'induit pas de cristallisation et un apport d'éther jusqu'au point de trouble n'induit pas non plus la cristallisation. On concentre le mélange sous vide à l'évaporateur rota- tif pour obtenir une huile qu'on dissout dans de l'acé- tate d'éthyle et à laquelle on ajoute une goutte d'eau sans que le grattage fasse apparaître des cristaux. On concentre le mélange sous vide et on triture le ré- sidu avec 5 ml de n-butanol pour obtenir 200 mg d'une poudre blanche amorphe qu'on lave à l'éther, qu'on sè- che à l'air et qu'on sèche sous vide sous P205 pendant 24 heures. On obtient finalement 180 mg de sulfone de 2P-chlorométhyl-2a-méthylpéname-3a-carboxylate de so- dium dont le point de décomposition mal défini est su- périeur à 1000 C. Analyse pour C8H9ClN05SNa Calculé: C, 3355,10; H, 5,153; N, 4,89 % TProuvé: C, 33,20; H, 3,69; N, 4,44; H20 suivant K.F., 4,04 % EXEMPLE 10.- Sulfone du 25-chlorométhyl-2-méthylpname-3-carboxylate - de potassium (BL-P2013) On ajoute 150 g (1,25 mole) d'hydrogénocarbo- nate de sodium et 200 g de palladium à 10%o sur sulfate de baryum à 10 litres d'eau et on dissout 272 g (0,565 mole) de sulfone du 6a-bromo-2p-chlorométhyl-2- méthylpéname-3-carboxylate de p-nitrobenzyle dans 5 li- tres d'acétate d'éthyle. On mélange le tout et on ef- fectue l'hydrogénation à 40 C sous une pression de 101 kPa. Après 5 heures, l'absorption d'hydrogène devient très lente et on ajoute 200 g de palladium à % sur sulfate de baryum, après quoi on poursuit l'hy- drogénation jusqu'à ce que l'absorption d'hydrogène de- vienne imperceptible. On filtre la suspension sur de la terre de diatomées ("Celite"), on lave le gâteau de filtration à l'eau et on lave phase aqueuse avec 3 litres d'acé- tate d'éthyle. On ajoute 3 litres d'acétate d'éthyle à la solution aqueuse et on amène le pH du mélange à 1,5 au moyen de 150 ml d'acide chlorhydrique 12 N à C. On sépare la phase organique et on sature la so- lution aqueuse au moyen de sulfate de sodium décahydra- té, après quoi on exécute l'extraction 2 fois avec 1 litre d'acétate d'éthyle. On combine les extraits et on les sèche sur du sulfate de magnésium. On sépare l'agent desséchant et on ajoute 260 ml de 2-éthylhexa- noate de potassium 2N dans le butanol à 0 C. Après 2 heures d'agitation à 0 C, on recueil- le et on sèche sous vide à la température ambiante la sulfone de 23chlorométhyl-2-méthylpéname-3-carboxylate de potassium (BL-P2013). On obtient ainsi 134,8 g (rendement d'environ 70%) de ce composé. EXEMPLE ll.- Sulfoxyde de 6x-bromopénicillanate de p-nitrobenzyle 0 *BrI ' + TEA + BrCH2 NO N CO2H (101) (22 (216) o2H 3 0 (296) Or Br/- O 0 CH NO 2 2 2 (fz1s PR' -rj'y 7 c-u J On ajoute 44 g (0,148 mole) de sulfoxyde d'acide 6a-bromopénicillanique, puis 20,5 ml (0,148 mo- le) de triéthylamine et 38,2 g (0,177 mole) de bromure de p-nitrobenzyle à 200 ml de N,N-diméthylacétamideo. On agite le mélange à 22 C pendant 20 heures. On verse le mélange de réaction dans 1 litre d'eau qu'on extrait 3 fois avec 300 ml de chlorure de méthylèneo On combine les extraits dans le chlorure de méthylène et on les lave avec 200 ml de solution aqueu- se à 5% de bicarbonate de sodium, après quoi on les sè- che sur du sulfate de sodium à 5 C pendant 30 minutes. On filtre la solution et on l'évapore sous vide pour obtenir un résidu. On dilue le résidu à l'éther et on recueille le solide par filtration pour obtenir, après séchage, 54 g de sulfoxyde de 6O-bromopénicillanate de p-nitrobenzyle. Le rendement est de 85%. Le spectre de résonance magnétique nucléaire est compa- tible avec la structure attribuée. Le rendement atteint à ce stade est le même que pour l'estérification du sel de potassium. L'avantage,est qu'il n'est pas nécessaire de préparer le sel de potassium. (Cette phase opératoire se fait avec un rendement de à 90%). EXEMPLE 12.- Prénaration du sulfoxyde de 6a-bromopénicillanate de p-nitrobenzyle On ajoute 873,0 g (2,95 moles) de sulfoxyde d'acide 6a-bromopénicillanique (S) à 4,375 litres de N,N- diméthylacétamide, puis on ajoute, sous agitation et en maintenant la température du système au-dessous de C, 293 g (2,95 moles) de triéthylamine, puis 764 g (3,54 moles) de bromure de p-nitrobenzyle. On agite le mélange à la température ambiante pendant 5 heures et on le laisse reposer jusqu'au lendemain. On verse le mélange de réaction dans 20 li- tres d'eau qu'on extrait 3 fois avec 7 litres de chlo- rure de méthylène. On combine les extraits organiques et on les lave 5 fois avec 7 litres d'eau, puis i fois avec 7 litres d'une solution aqueuse à 5% de bicarbo- nate de sodium, après quoi on les sèche sur du sulfate de magnésium anhydre. On sépare le sulfate de magnésium par filtra- tion et on évapore la solution pour obtenir un résidu cristallin, on ajoute 4 litres d'éther diéthylique au résidu et on recueille les cristaux pour obtenir, après séchage à la température ambiante, 1171 g (rendement de 92%) de sulfoxyde de 6a-bromopénicillanate de p=-ni- trobenzyle. A l'analyse, le composé révèle une teneur en brome de 18,48% (valeur calculée 18,53%) et un pouvoir rotatoire aD de +162 (0,25% dans le méthanol). EXEMPLE 13.- Préoaration de la sulfone de 6a-bromo-2p-chlorométhyl- 2-méthylpéname-3-carboxylate de p-nitrobenzyle On ajoute 364,6 g (0,812 mole) de 6a-bromo- 2P-chlorométhyl-2-méthylpéname-3-carboxylate de p-ni- trobenzyle à 16 litres d'acide acétique. On agite la solution résultante à la température ambiante et on y ajoute goutte à goutte en 3 heures une solution de 282 g (1,78 mole) de permanganate de potassium dans 26 litres d'eau. On agite ensuite le mélange à la tem- pérature ambiante pendant 1 heure et on y ajoute gout- te à goutte du peroxyde d'hydrogène à 37% jusqu'à obte- nir une solution incolore. On ajoute ensuite 30 litres d'eau, après quoi on agite le mélange pendant 1 heure à la température ambiante et on en sépare le précipité cristallin qu'on lave 5 fois avec 5 litres d'eau et 2 fois avec 2 litres d'éthanol avant de le sécher sous vide à la température ambiante. On obtient ainsi 297 g (rendement de 76%) du composé ayant un pouvoir rotatoire aD de +75,9 (0,5% dans le chlorure de méthylène). EXFViPLE 14l.- Pr&,aration de l'acide libre BL-P2015 i y CH2CI cICY2Cl 113 F04 J c1 0'c2H On ajoute 800 mg (2,61 mmoles) de sel de potas- sium de BL-P2013 à un mélange de 25 ml d'acétate d'é- thyle et de 10 ml d'eau. Après dissolution complète du solide, on ajoute goutte à goutte au mélange, sous vi- ve agitation, de l'acide phosphorique aqueux à 50% jus- qu'à la fin de précipitation à partir de la couche aqueuse. On sépare la phase formée par l'acétate d'é- thyle, puis on la lave avec une solution saturée de chlorure de sodium et on la sèche sur du sulfate de ma- gnésium anhydre. On sépare l'agent desséchant par fil- tration et on le lave avec 10 ml d'acétate d'éthyle. On mélange les liqueurs de lavage avec le filtrat initial. On ajoute alors du "Skellysolve B" à l'acétate d'éthyle jusqu'au point de trouble (environ 10 ml). On ajoute 500 mg de charbon activé ("Darko KB") au mélange et on filtre le tout. On dilue le filtrat avec 15 ml de "Skellysolve B", puis on l'ensemence avec des cristaux de BL-P2013 sous forme d'acide libre. Après environ 3 heures à la température ambiante, on recueille le précipité cristallin d'acide libre qu'on sèche sous vide pendant 15 minutes sur du P205 pour obtenir 323 mg (rendement de 46%) du composé fondant au-delà de 100 C avec décomposition lente. Analyse pour C8HloClNO5S Calculé: C, 35,89; H, 3,77; N, 5,23; Cl, 13,25 % Trouvé: C, 35,88; H, 3,91; N, 5,41; Cl, 13,52 % Ce composé se révèle instable lors de 7 jours de conservation à 23 C. EXEMPLE 15.- Sulfoxyde d'acide 6"-bromopénicillanique "' 0 J (C6H5dH25 1cH2) 2- > C0 2 PM 800,64 PM 296 14 On ajoute 300 g (0,75 mole) de sel de N,N'- dibenzyléthylènediamine d'acide 6c-bromopénicillanique à 3 litres de chlorure de méthylène et on refroidit la suspension à 5 C. On y ajoute ensuite, goutte à goutte et sous vive agitation, en 15 minutes, 130 ml d'acide chlorhydrique concentré. On agite la suspension à 5 C pendant 2 heures. On la filtre ensuite sur de la ter- re de diatomées ("Celite"), puis on lave le gâteau de filtration 3 fois avec 250 ml de chlorure de méthylène. On combine les solutions dans le chlorure de méthylène et on les lave 2 fois avec 500 ml d'eau, puis on les sèche sur du sulfate de sodium pendant 15 minutes. On sépare le sulfate de sodium par filtration et on évapore le filtrat sous pression réduite jusqu'à environ 750 ml. On refroidit la solution à 5 C et sous vive agitation, on y ajoute goutte à goutte 130 ml d'acide peracétique à 40% en maintenant la température entre et 12 C. L'addition est fort exothermique. Au terme de l'addition, on agite la suspension à 5 C pendant 2 heures, puis on isole le produit par filtration et on le lave avec 5 ml d'eau froide (5 C) et 100 ml de chlo- rure de méthylène froid (5 C). On obtient ainsi 126 g (rendement de 57%) de sulfoxyde d'acide 6a-bromopéni- cillanique fondant à 129 C. Le spectre infrarouge et le spectre de résonance magnétique nucléaire sont com- patibles avec la structure du produit désiré. Analyse pour C8H10BrNO4S Calculé: C, 32,44; H, 5,40; N, 4,73 % Trouvé: C, 32,30; H, 3,35; N, 4,71 % H20, 2,18 Sulforxyde de 6a-bromopénicillanate de potassium O O Br + Br, s "C0 H0 02H 2K PM 334,24 On ajoute 126 g (0,43 mole) de sulfoxyde d'a- cide 6a-bromopénicillanique et 162 ml de 2-éthylhexa- noate de potassium à 50% en poids dans du butanol à 3 litres d'acétone. Après 1 heure d'agitation à 22 C, on recueille le produit par filtration, on le lave 2 fois avec 250 ml d'acétone et on le sèche. On obtient ainsi 127 g (rendement de 90%) de sulfoxyde de 6c-bro- mopénicillanate de potassium fondant à 185 C. Le spec- tre infrarouge et le spectre de résonance magnétique nucléaire sont compatibles avec la structure désirÉe. Analyse pour C8H9BrKN0OS Calculé: C, 28i75; H, 2,71; N, 4,19 % Trouvé: C, 29,03; H, 2,78; N, 4,04 % Sulfoxyde de 6a-bromopénicillanate de pnitrobenzyle 0 0 + Br + F AC 0K Y C 2CH2 N2 PM 431,28 On ajoute 145 g (0,43 mole) de sulfoxyde de 6a-bromopénicillanate de potassium à 1 litre de N,N- diméthylacétamidepuis, sous agitation, 115 g (0,53 mo- le) de bromure de p-nitrobenzyle à 22 C. On agite le mélange à 22 C pendant 20 heures. On verse le mélange de réaction dans 3 litres d'eau qu'on extrait 3 fois avec 1500 ml d'acétate d'é- thyle. On combine les extraits à l'acétate d'éthyle et on les lave 2 fois avec 500 ml de solution aqueuse à 5% de bicarbonate de sodium, puis on les sèche pen- dant 30 minutes sur du sulfate de sodium. On sépare le sulfate de sodium par filtration et on évapore le filtrat sous pression réduite pour obtenir un résidu auquel on ajoute 1 litre d'éther diéthylique pour faire cristalliser le produit. On recueille les cristaux par filtration, on les lave 2 fois avec 100 ml d'éther di- éthylique et on les sèche pour obtenir 162 g (87%) de sulfoxyde de 6abromopénicillanate de p-nitrobenzyle fondant à 1110 C. Le spectre infrarouge et le spectre de résonance magnétique nucléaire sont compatibles avec la structure désirée. Analyse pour C15H16BrN206S Calculé: C, 41,78; H, 3,51; N, 6,50 Trouvé: C, 41,66; H, 3,45; N, 6,85; H20 suivant K.F. 0,69 6a-Bromo-2 P- chlorométhyl2-m éthylp éname -3-carboxylate de D-nitrobenzyle Br S-CH2C1 Br C NO2 NO2 35... EM Li 43j,71 On ajoute 70 g (0,16 mole) de sulfoxyde de 6cbrominopénicillanate de p-nitrobenzyle, puis 21,2 ml (0,10 mole) de chlorure de benzoyle et 21,8 ml (0,19 mo- le) de quinoléine à 1 litre de p-dioxanrs. On chauffe le mélange de réaction au reflux pendant 4 heures, puis on le refroidit à 220 C, on le verse dans 2500 ml d'eau et on extrait le tout 3 fois avec 800 ml d'acétate d'éthyle. On combine les extraits à l'acétate d'éthy- le et on les lave avec 300 ml de solution aqueuse à 5% de bicarbonate de sodium, 300 ml d'acide phosphorique aqueux à 5% et 300 ml d'eau. On sèche la solution dans l'acétate d'éthyle pendant 30 minutes sur du sulfate de sodium, puis on sépare le sulfate de sodium par filtration. On évapore le filtrat sous pression rédui- te pour obtenir un résidu qu'on redissout dans 1 litre d'acétate d'éthyle, après quoi on évapore la solution à nouveau sous pression réduite pour obtenir un résidu. On ajoute 1 litre d'éther diéthylique au résidu et on recueille le produit par filtration pour obtenir 41 g (rendement de 57%) de 6m-bromo-23-chlorométhyl-2-méthyl- péname-3-carboxylate de p-nitrobenzyle fondant à 1320 C. Le spectre infrarouge et le spectre de résonance magné- tique nucléaire sont compatibles avec la structure dé- sirée. Analyse pour C15H14BrClN205S Calculé: C, 40,06; H, 3,14; N, 6,23 % Trouvé: C, 40,62; H, 3,11; N, 6,13 % I1 Sulfoxyde de 6m-bromo-23-chlorom6thyl-2-m&thylp6name- 3-carboxylate de p-nitrobenzyle O CH ci Br S HC1 Br S CH2C N' N NuIIIC NO NO2 C02CH2 NO2 PM 465,71 On ajoute 51 g (0,11 mole) de 6a-bromo-23- chlorométhyl-2-méthylpéname-3-carboxylate de p-nitro- benzyle, puis 23 g (0,12 mole) d'acide m-chloroperoxy- benzoîque à 1200 ml de chlorure de méthylène. On agite la solution à 22 C pendant 2 heures et on l'évapore sous pression réduite pour obtenir un résidu humide. On agite celui-ci avec 4 litres d'éther diéthylique pen- dant i heure, puis on le laisse reposer à 10 C pendant heures. On recueille par filtration le produit cristallisé qu'on lave 2 fois avec 200 ml d'éther di- éthylique et qu'on sèche pour obtenir 39 g (rendement de 75%) de sulfoxyde de 6x-bromo-23-chlorométhyl-2- méthylpéname-3-carboxylate de p-nitrobenzyle fondant à 132 C. Le spectre infrarouge et le spectre de résonan- ce magnétique nucléaire sont compatibles avec la struc- ture désirée. Analyse pour C15H14BrCN206S Calculé: C, 38,69; H, 3,03; N, 6,07 % Trouvé: C, 38,98; H, 3,04; N, 5,84 % H20, 0,35 Sulfone de 20-chlorométhyl-2-méthylpéname-3-carboxy- late de potassium (BL-P2013) 0 0 --0 By. C2 H2C1 - j"" CH3 o0Có ' N02 -CO K BL-P2013 PM 305,77 On ajoute 8 g de palladium à 30% sur "Celite" et 16 g (0,19 mole) de bicarbonate de sodium à 600 ml d'eau. On dissout ensuite 32 g (0,069 mole) de sul- foxyde de 6a-bromo-2p-chlorométhyl-2-méthylpéname-3- carboxylate de p-nitrobenzyle.dans 400 ml d'acétate d'éthyle et on ajoute la solution à la dispersion aqueu- se. On hydrogène le mélange dans un appareil de Parr sous 345 kPa à 220 C pendant 4 heures. On filtre la suspension sur une fine couche de "Celite" dans un filtre en verre fritté, puis on lave le gâteau de filtration 2 fois avec 50 ml d'eau, après quoi on sépare la couche aqueuse du mélange des filtrats et des liqueurs de la- vage. On lave la couche aqueuse avec 200 ml d'éther di- éthylique, puis on la refroidit à 5 C et sous agitation, on y ajoute goutte à goutte en 30 minutes, une solution de 12 g (0,076 mole) de permanganate de potassium dans ml d'eau en maintenant le pHI entre 7,5 et 8,0 par addition d'acide phosphorique à 40%o. Lorsque la colo- ration rose persiste pendant 5 minutes, on interrompt l'addition de la solution de permanganate de potassium. On agite le mélange de réaction avec une petite quan- tité (environ 50 mg) de bisulfite de sodium pendant 30 minutes, puis on filtre la suspension sur une couche de "Celite". On lave le gâteau de filtration 2 fois avec ml d'eau. On combine les filtres et liqueurs de la- vage qu'on recouvre de 500 ml d'acétate d'éthyle et, sous agitation, on ajuste le pH à 1,5 au moyen d'a- cide chlorhydrique 2 N. On sépare les couches et on sature la couche aqueuse de sulfate de sodium. On * l'extrait en retour avec 2 fois 400 ml d'acétate d'é- thyle, puis on combine les extraits dans l'acétate d'éthyle et on les sèche sur du sulfate de sodium pen- dant 30 minutes à 5 C. On sépare le sulfate de sodium par filtration et on évapore le filtrat sous pression réduite pour obtenir un résidu. On dissout ce résidu dans 160 ml d'acétone et 160 ml d'éther diéthylique, puis on ajoute une solution à 50% en poids de 2-éthyl- hexanoate de potassium dans le n-butanol jusqu'à neu- tralité de la solution au papier pH humide. On fait cristalliser le sel de potassium du BL-P2013, on le recueille par filtration, on le lave à l'éther diéthy- lique et on le sèche. On obtient ainsi 16 g (rende- ment de 76%) de sulfone de 2p-chlorométhyl-2-méthyl- péname-3-carboxylate de potassium fondant à 202 C. Le spectre infrarouge et le spectre de résonance ma- gnétique nucléaire sont compatibles avec la structure désirée. Analyse pour C8H9ClKN05S Calculé: C, 31,42; H, 2,97; N, 4,58 % Trouvé: C, 31,18; H, 2,98; N, 4,51 % H20, 0,93 EXEMPLE 16.- Sulfone de 23-chlorométhyl-2-méthylpéname-3-carboxylate de Divaloyloxyméthyle (BL-P202,4) 0 - 0 0 S CH C H2C1 3H35CCH3 o "2 Co2CH CCcCH3). BL-P2024 PM 381 83 On ajoute 4 ml d'une solution aqueuse à 10% d'iodure de sodium à une suspension agitée de 14,6 g (48,7 mmoles)de sulfone de 2 -chlorométhyl-2-méthylpé- name-3-carboxylate de potassium (BL-P2013) dans 200 ml d'acétone et on porte le mélange au reflux au bain ma- rie. On ajoute à la suspension bouillant au reflux 14,8 ml (0,1 mole) de pivalate de chlorométhyle redis- tillé (P.Eb.34 C sous 933 Pa) en une fois. On agite le mélange au reflux pendant 3 heures, puis on le re- froidit jusqu'à la température ambiante (22 C). On recueille par filtration les solides cristallins, qu'on lave 3 fois avec 30 ml d'acétone, après quoi on évapore le mélange des filtrats sous pression réduite au-dessous de 22 C pour obtenir une huile. On reprend l'huile dans 500 ml d'acétate d'éthyle et on lave la solution 1 fois avec 200 ml d'eau et 1 fois avec 200 ml de solution sa- turée de sulfate de sodium. On sèche la solution en- suite brièvement sur du sulfate de sodium,tout en l'a- gitant avec 2 g de charbon décolorant sous refroidisse- ment au bain de glace. Après 20 minutes, on filtre le mélange sur une couche de "Celite" et on lave le gâteau de filtration avec 4 fois 100 ml d'acétate d'éthyle. On concentre le mélange des filtrats à 22 C sous pression réduite pour obtenir une huile. On concentre l'huile davantage à environ 22 C au-dessous de 133:Pa pour éliminer la majeure partie du pivalate de chlorométhyle résiduel. On triture ensuite l'huile résiduelle 2 fois avec 50 ml de n-pentane, après quoi on la laisse repo- ser pendant le week-end à environ 100 C sous une couche de n-pentane. On concasse la masse cristalline solide résultante en une poudre sous 40 ml d'un mélange 4:1 d'éther diéthylique et de n-pentaneo On recueille le produit par filtration, on le lave avec un mélange 1:1 d'éther diéthylique et n-pentane, puis avec du n-penta- ne, après quoi on le sèche à l'airo Après séchage sous vide poussé pendant 4 heures sur du P205, on obtient 13,37 g (rendement d'environ 75%) de sulfone de 20-chlo- rométhyl-2-méthylpéname-3-carboxylate de pivaloyloxy- méthyle (BL-P2024) fondant à 93-95 C. Purification du BL-P2024 On dissout environ 3 g de BL-P2024 brut (obtenu comme décrit ci-dessus) dans 5 ml d'acétate d'éthyle, puis on verse la solution sur une colonne de 4,5 cm x cm de gel de silice (Mallinckrodt CC7) qu'on élue avec un mélange 4:1 en volume de chlorure de méthylène et d'acétate d'éthyle. On combine les fractions don- nant une tache unique d'un Rf de 0,84 (chromatographie en couche minche sur plaques de gel de silice éluées avec un mélange 4:1 de chlorure de méthylène et d'acé- tate d'éthyle, détection par I2) et on les concentre sous pression réduite pour obtenir 1,38 g d'un solide cristallin. On dissout une fraction de 900 mg de ce solide dans 5 ml d'acétate d'éthyle et on filtre la solution, puis on la dilue à peu près jusqu'au point de trouble avec de l'éther de pétrole ("Skellysolve B"), après quoi on la conserve à la température ambiante pendant 3 jours. On recueille par filtration les cristaux qui se sont formés et on les lave à l'éther de pétrole, puis on les sèche pour obtenir 560 mg de BL-P2024 purifié fondant à 100-101 C. Analyse pour C14H20ClN07S Calculé: C, 44,03; H, 5,27; N, 3,67 % - Trouvé: C, 44,11; H, 5,08; N, 3,85 % EXEMPLE 17.- Préparation du sel d'ammonium de BL-P2013 1. On filtre une solution de 250 mg de la forme acide libre de BL-P2013 dans 20 ml d'un mélange 1:1 en volume d'acétone et de méthanol pour obtenir une solu- tion limpide. 2. On prépare une solution d'ammonium anhydre en ajoutant 1 ml d'hydroxyde d'ammonium (30%, pour travaux de laboratoire) à 10 ml d'un mélange 1:1 en vo- lume d'acétone et de méthanol, puis en ajoutant à cette solution 1 g de sulfate de magnésium anhydre sous agita- tion mod-ré, après quoi on filtre le mélange sur du papier filtre, le filtrat étant appelé ci-après "solu- tion d'ammonium anhydre". 3. On ajoute graduellement et on mélange soigneu- sement environ 2 ml de la "solution d'ammonium anhydre" au filtrat obtenu en 1. 4. On mélange 100 ml d'éther diéthylique avec le mélange obtenu en 3 pour faire précipiter le sel d'ammonium de BL-P2013. 5. On isole le sel d'ammonium blanc hors du sol- vant et on le lave 2 fois avec 50 ml d'éther diéthyli- que à chaque reprise. 6. On sèche la poudre résultante à 35 C à l'étu- ve à vide jusqu'au lendemain. 7. Analyse Calculé: C, 33,7; H, 4,6; N, 9,8 % Trouvé: C, 33,66; H, 4,63; N, 10,12 % Anhydre suivant K.F. Aspect microscopique: substance cristalline. EXEMPIE 18.- Préparation du sel de sodium de BL-P2013 non hygrosco- pique 1. On dissout 50 ng de la forme acide libre de BL-P2013 dans 4 ml d'un mélange 1:1 en volume d'acétone et de méthanol. On filtre le mélange pour obtenir une solution limpide. 2. On prépare une solution de 2-éthylhexanoate de sodium en dissolvant 40 mg de 2-éthylhexanoate de sodium dans 10 ml d'un mélange 1:1 en volume d'acétone et de méthanol. 3. On ajoute les 10 ml de solution obtenue en 2 au filtrat obtenu en 1 et on mélange soigneusement le tout. 4. On mélange 10 ml d'éther diéthylique au mé- lange obtenu en 3 pour faire précipiter le sel de so- dium de BL-P2013. 5. On met le sel blanc à reposer dans de l'éther diéthylique pendant 1 à 2 heures, puis on le sépare du solvant et on le lave 3 fois avec 5 ml d'éther diéthy- lique à chaque reprise. 6. On sèche la poudre résultante à 30 C à l'étu- ve à vide jusqu'au lendemain. EXEIMPLE 19.- Recristallisation du BL-P2013 0 O O ' O \\S CH2Cl recristal- CH cl lisation % CH l | D H20-acétone r -., cK2 O 02K.H2 On dissout 400 mg de BL-P2013 dans une quan- tité minimale d'un mélange 1:1 en volume d'acétone et d'eau et on dilue la solution avec 10 ml d'acétone, puis on la filtre et on la dilue à nouveau avec de l'a- cétone jusqu'à environ 25 ml, après quoi on gratte la paroi du récipient et, après 30 minutes, on recueille par filtration l'hydrate cristallin qu'on lave soigneu- sement à l'acétone, puis qu'on sèche à l'air et ensuite sous vide audessous de 133 Pa jusqu'au lendemain. On obtient 280 mg du composé. Analyse pour C8H9C1NOSK.H20 Calculé: C, 29,67; H, 3,39; N, 4,63; C1, 10, 94; H20, 5,55 % Trouvé: C, 29,32; H, 3,32; N, 4,44; Cl, 11,31; H20, 5,90 % 3o EXEMPLE 20.- Sel de N;N'-dibenzyléthylènediamine de BL-P2013 BL-P2013 + 1/2 Diacétate de N,N'-dibenzyléthylènediamine recristallisation % 0 CH2C1 acétone-éther CH3 an e t h C 02H. C6H5CH2NH-CH2 2 On dissout 306 mg (1 mmole) de BL-P2013 dans 7 ml d'eau et on ajoute la solution à une solution de mg (0,5 mmole) de diacétate de N,N'-dibenzyléthy- l1nediamine dans 7 ml d'eau. On agite le mélange dans lequel le sel cristallise et aprèsenviron 10 à 15 minutes d'agitation, on recueille le sel par filtration, puis on le sèche à l'air pour obtenir 300 mg de sel de N,N'- dibenzyl6thylènediamine de BL-P2013. On recristallise le sel en le dissolvant dans environ 10 ml d'acétone en ébullition et en diluant la solution avec de l'éther jusqu'au point de trouble. On obtient ainsi 260 mg du composé séché à l'air et s6ch6 sous vide. Analyse Calculé: C, 51,69; H, 5,42; N. 7,53; Cl, 9,55 % Trouv6: C, 49,359; H, 5,49; N. 7,05; Cl, 8,96 % H20 suivant K.F., 1,23 EXEMPLE 21.- Ester chlorométhyliaue de BL-P2015 0 0o o \\St / CH2C1 + CC012-O-SO2Cl {T rJ CH3+ (CH3CH2CH2CH2) A&SO O " COOK + 3 KHC03 (305/7) CH2C12 H20 0 0 i H' C-OCH2C o (316,17) 7 On ajoute goutte à goutte une solution de 9,5 g (57,5 mmoles)de C1CH2-O-S02C1 dans 40 ml de chlo- rure de méthylène à un mélange vivement agité de ,25 g (50 mmoles) de BLP2013 (2), de 15 g (0,15 mole) de KHCO3 et de 1,7 g (5 mmoles) d'hydrogénosulfate de tétrabutylammonium (Société Aldrich Chem. Co.) dans un mélange de 50 ml d'eau et de 50 ml de chlorure de mé- thylène. La température s'élève jusqu'à 26 C et, au terme de l'addition (qui se fait en environ 15 minutes), on agite le mélange pendant encore 30 minutes. Du fait que le produit cristallise, on ajoute un supplément d'environ 400 ml de chlorure de méthylène pour obtenir une solution. On sépare la couche formée par le chlo- rure de méthylène et on la mélange avec 50 ml d'une li- queur de lavage comprenant du chlorure de méthylène, puis on sèche le tout par agitation avec du sulfate de magnésium et on ajoute 2 g de charbon décolorant ("Darco KB"). Après environ 50 minutes, on filtre le mélange, on le concentre jusqu'à environ 50 ml et on y ajoute 150 ml d'isopropanol. On chasse le reste du chlorure de méthylène sous pression réduite. On re- cueille par filtration le précipité cristallin résul- tant qu'on lave soigneusement à l'isopropanol et qu'on sèche à l'air. Après séchage sous vide au-dessous de 133 Pa, on obtient 8,5 g de sulfone de 2p-chlorométhyl- 2-méthylpéname-3-carboxylate de chlorométhyle (7) fon- dant à 116 C (avec décomposition et assombrissement au- delà de 100 C). Analyse pour C9HllC12NO5S Calculé: C, 34,18; H, 3,51; N, 4,43; Ci, 22,43 % Trouvé: C, 34,16; H, 3,45; N, 4,47; Cl, 22,46;% H20 suivant K.F., 0,33 La pureté estimée est de 90 à 95%. Ester iodométhylique de BL-P2013 O O C C1201 CH Cl S Na I CH, 'CH3 // CH2/1 0o 6-OCH2C1 0 8 C-OCH2 o,/ ' c-cHc o/ c-c2, 7 o - o On ajoute 3 g (20 mmoles) d'iodure de sodium à un méelange agité de 5 g (15,9 mmoles) d'ester chlo- rométhylique de BL-P2013 (7) dans 25 ml d'acétone. On agite la suspension résultante pendant 17 heures, puis on la refroidit à environ 0 C. On ajoute 2 gouttes de solution aqueuse saturée de bicarbonate de potassium, puis on dilue le mélange lentement goutte à goutte avec de l'eau en 10 minutes jusqu'à un apport de 50 ml. La suspension vire soudainement du jaune au gris et au pourpre, puis au noir et on recueille dès lors les cristaux immédiatement par filtration et on les lave avec un mélange froid 1:2 d'acétone et d'eau, 3 fois ml d'isopropanol, de l'éther diéthylique et enfin du n-pentane, avant de les sécher à l'air pour obtenir 5,55 g (rendement de 91 %) de l'ester iodométhylique de BL-P2015 (8) fondant à 118-119 C avec décomposition. La pureté estimée est d'environ 90 %. Sulfone de 2 -chlorom6thyl-2m-méthylpéname-35-carboxy- late de 6-[(R)-2-amino-2-ph6nylac6tamido]-3,3-diméthyl- 7-oxo-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carbonyloxy- méthyle (11) N il I OCH3 (Sel de Dane d'ampicilli- ne; voir brevet EoU.A n0 3.316.247) CH-CO -NH I N H3C-C.N - H C/ !1H o0 o O0 1 z, SC H2C1 JCH3 I' 2 Il H+ H3C OC3 C0E * ILI j ri Q C0t C H -CO 0CN lO-O * 11 0 -O 0. -** I-I0 - - ' /,-eCHICl CH2 0Jj "CH3 -o On ajoute 4,08 g (10 mmoles) d'ester iodomé- thylique de BL-P2013 à un mélange agité et refroidi au bain de glace de 5, 46 g (10 mmoles) du sel de Dane d'ampicilline ci-dessus 9 (solvaté par 1 molécule d'i- sopropanol) dans 60 ml d'acétone et on agite la solu- tion presque limpide résultante pendant 5 heures en re- tirant le bain de glace après 30 minutes. On chasse alors la majeure partie de l'acétone sous vide à l'éva- porateur rotatif, puis on dissout la solution concentrée résultante dans 200 ml d'acétate d'éthyle froid, après quoi on lave cette solution 2 fois avec 50 ml d'eau glacée et 2 fois avec 100 ml de sulfate de sodium aqueux saturé. On sèche la solution dans l'acétate d'éthyle sur du sulfate de sodium, on la filtre et on chasse la majeure partie de l'acétate d'éthyle sous vide à l'é- vaporateur rotatif. On triture le résidu 2 fois avec 200 ml d'éther diéthylique sec,' puis on recueille les solides résultants par filtration pour obtenir 5,5 g du composé 10 sous forme de poudre rose. On incorpore cett poudre à un mélange agité de 50 ml d'eau, de 50 ml de n- butanol et de 20 ml d'acétate d'éthyle auquel on ajoute goutte à goutte de l'acide chlorhydrique 6 N jusqu'à ce que le pH soit de 2,5.0n ajoute occasionnellement 1 ou 2gocttes d'acide chlorhydrique pour maintenir le pH à 2,2-2,5 pendant 45 minutes. Lorsque le pH cesse de s'élever, on ajoute au mélange 100 ml d'éther diéthylique sous bonne agitation. On sépare la phase aqueuse et on la mélange avec un second extrait aqueux de 25 ml de la O10 phase organique. On extrait la solution aqueuse 1 fois avec 50 ml d'éther diéthylique et on rejette l'extrait éthéré. On agite la couche aqueuse ensuite vivement sous une couche de 100 ml de 2-butanone(méthyléthyl- cétone), tandis qu'on ajoute du sulfate de sodium pour saturer la couche aqueuse. On sépare la couche de 2-butanone,on la sèche pendant 30 minutes sur du sul- fate de sodium au bain de glace, on la filtre et on la concentre sous vide presque à siccité. On triture l'huile résiduelle en un solide sous du n-butanol, puis on lave le solide soigneusement à l'éther et ensuite au n- pentane, après quoi on le sèche d'abord à l'air, puis sous vide sur du P205 au-dessous de 133 Pa pour obte- nir 1,6 g de sulfone de 2fp-chlorométhyl-2-méthylpéname- 3m-carboxylate de 6-[(R)-2-amino-2-phénylacétamido]- 3,3-diméthyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo [3.2.0]heptane-2- carbonylméthyle sous forme brute. Le spectre infra- rouge et le spectre de résonance magnétique nucléaire sont compatibles avec la structure du composé (11) qui n'est toutefois pas de haute pureté. On estime que ce solide contient au moins 40% en poids et peut être jusqu'à 80%, en poids de sulfone de 2p-chlorométhyl-2a- méthylpéname-3"-carboxylate de 6-[(R)-2-amino-2-phényl- acétamido]-3,3-diméthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo- [3.2.0]heptane-2-carbonyloxyméthyleo EXEMPLE 22.- Voie de synthèse améliorée du BL-P2013 Ce mode opératoire simplifie la préparation du BL-P2013 en supprimant la réduction catalytique exé- cutée antérieurement. Stade 1 Br + CH2CC13 + Dicyclohexyl- O COOH." Ocarbodiimide 0---N OH COOH Pyridine CHC12 X -OC-C C o (Voir page 633 de Cephalosporins and Penicillins de Edwin H. Flynn, Academic Press, New York, 1972). On dissout 30 g (0,1 mole) de sulfoxyde d'a- cide 6a-bromopénicillanique (1) dans 1000 ml de chloru- re de méthylène sec, puis on ajoute à la solution 16,2 ml (0,2 mole) de pyridine et 29,8 g (0,2 mole) de trichloroéthanol. On ajoute ensuite 20 g (0,1 mole) de dicyclohexylcarbodiimide et on agite le mélange à 22 C pendant 16 heures. La dicyclohexylurée commence à précipiter et on l'élimine finalement par filtration. On lave le filtrat avec 200 ml de bicarbonate de so- dium aqueux à 5%, 200 ml d'acide phosphorique à 10% et 100 ml de sulfate de sodium aqueux saturé. On sèche la phase organique à 50 C pendant 30 minutes sur du sul- fate de sodium qu'on sépare par filtration, après quoi on évapore la phase organique en une huile. On ajoute de l'éther diéthylique et, par grattage, on fait cris- talliser le produit 2 (obtenu en quantité de 27 g, soit avec un rendement de 27%). Stade 2 2 Ol lO CC1 Quinoléine Br C 2Cl N C- OCH-CCl3 0 On dissout 26,5 g (62 mmoles) du composé 2 dans 500 ml de p-dioxanne et on ajoute à la solution 8,5 ml (78 mmoles) de chlorure de benzoyle et 8, 75 ml (78 mmoles) de quinoléine. On chauffe la solution au reflux pendant 4 heures, puis on la verse dans ll00 ml d'eau, après quoi on extrait le produit 3 dans 2 fois 300 ml d'acétate d'éthyle. On mélange les extraits dans l'acétate d'éthyle,on les lave successivement avec 200 ml de bicarbonate de sodium aqueux à 5%, ml d'acide phosphorique à 5% et 200 ml de sulfate de sodium aqueux saturé, après quoi on les sèche sur du sulfate de sodium à 5eC pendant 30 minutes et on les évapore en une huile(3)qu'on utilise telle quelle pour la réaction suivante. Stade 3 3 + KMnO4+H22 dans acide acétique glacial \ o B \\A CH Cl O 2 lO X O C-OCH2CC13 o On dissout le composé 3 obtenu au stade pré- cédent dans 1000 ml d'acide acétique glacial et sous agitation à 22 0, on ajoute goutte à goutte une solu- tion aqueuse saturée de permanganate de potassium jus- qu'à coloration rose persistante (c'est-à-dire qu'une goutte déposée sur un morceau de papier filtre donne une tache rose). Sous refroidissement,.on ajoute ensuite gout- te à goutte du peroxyde d'hydrogène à 30%o jusqu'à ob- tention d'une solution limpide contenant un peu de pré- cipité blanc. On verse la solution dans 2500 ml d'eau et on extrait le produit 4 dans 3 fois 500 ml d'acéta- te d'éthyle. On lave l'extrait dans l'acétate d'éthyle avec du bicarbonate de sodium aqueux à 5% jusqu'à neu- tralité (c'est-à-dire jusqu'à fin d'effervescence), * puis on le sèche sur du sulfate de sodium et on l'éva- pore pour obtenir le composé 4 sous forme de résidu. On laisse reposer le résidu à 100C pendant 1 jour, puis on le triture avec du "Skellysolve B" pour obtenir 9,1 g du solide 4. Le rendement est de 28% de la valeur théorique aux stades 2 et 3 considérés ensemble. q 6 Stade 4 4 + (D Zn dans acide acétique + 0 2-éthylhexanoate de potassium o / \\ // 2- iI 5 (BL-P2013) O COOK (Voir brevet E.U.A n0 4.164.497) On disperse 3,75 g de poussière de zinc dans ml d'acide acétique glacial et on refroidit la dis- persion à 50C. On ajoute à ce mélange une solution de 3 g du composé 4 (5,7 mmoles) dans 15 ml de diméthyl- formamide et on agite la suspension résultante à 5 C pendant 2 heures et 30 minutes. On sépare le zinc par filtration et on verse la solution jaune pâle dans 80 ml d'acide chlorhydrique aqueux à 5%. On extrait le mélange 3 fois avec 25 ml d'acétate d'éthyle. On mélange les extraits dans l'a- cétate d'éthyle et on les extrait, à leur tour, avec 3 fois 20 ml de bicarbonate de sodium aqueux à 5% en conservant la phase d'acétate d'éthyle après la sépara- tion. On combine les extraits bicarboniques, on les recouvre d'une couche d'acétate d'éthyle, on les amène à un pH 1,5 par addition d'acide chlorhydrique 2 N et on les sature de sulfate de sodium. On sépare la phase d'acétate d'éthyle et on extrait la phase aqueuse 2 fois avec 30 ml d'acétate d'éthyle. On mélange tous les extraits dans l'acétate d'éthyle, on les sèche sur du sulfate de sodium et on les évapore en une huile (qui est la forme acide li- bre du BL-P2013) qu'on dissout dans environ 20 ml d'a- cétone, solution à laquelle on ajoute 20 ml d'éther di- éthylique. On ajoute alors du 2-éthylhexanoate de potas- tassium à 50% dans le n-butanol sec jusqu'à neutralité. Le produit 5 (BLP2013)se dépose en cristaux. Après minutes d'agitation à 22 C, on recueille les cris- taux par filtration pour obtenir 650 mg du composé 5 (rendement de 37%). On dissout 50 mg du composé 5 dans 0,5 ml d'eau et on ajoute 20 mg de diacétate de N,N'-dibenzyl- éthylènediamine. Le sel de dibenzyléthylènediamine du composé se dépose en cristaux qu'on recueille par fil- tration, puis qu'on lave à l'eau et qu'on sèche sur du P205 sous vide pour obtenir la sulfone de 20-chloromé- thyl-2-méthylpéname-3-carboxylate de N,N'-dibenzyléthy- lènediamine (sel de N,N'-dibenzyléthylènediamine de l'acide libre). On dissout un autre échantillon de 450 mg du composé 5 dans 3 ml d'eau et on ajoute à la solution 270 mg de diacétate de N,N'dibenzyléthylènediamine dans 2 ml d'eau. Par grattage, on fait cristalliser 430 mg du sel de N,N'-dibenzyléthylènediamine du com- posé 5. Par recristallisation dans 100 ml d'acétone bouillante, on isole 270 mg du composé. EXEMPLE 23 Sulfone de 20-chlorométhyl-2c-méthylpéname-3a-carboxy- late de 6-[(R)-2-amino-2-p-hydroxyphénylacétamido]- 3, 3-diméthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3.2.0]heptane- 2-carbonyloxyméthyle de formule: CH S. HO CH CO - NH'- j CH3 N NH2 " --0 2O 154 0 0 0 o o :s CH2Cl JjCH, C2 c3 ID On prépare ce composé en remplaçant l'ampicilline dans le procédé de l'exemple 21 par le sel de Dane corres- pondant d'amoxicilline. Données biologiques Le composé de l'exemple 1 ou composé 5 ré- pondant à la formule: o c1 CH2C1 "'CH N 0K est appelé ci-après composé BL-P2013. Bien qu'il soit au mieux par lui-même un agent antibactérien très faible, le composé BL-P2013 inhibe les 3-lactamases et protège le céforanide et l'amoxicilline contre la destruction in vitro et in vivo par les bactéries produisant de la P-lactamase lorsqu'il est associ6 à ces deux agents. T A B L E A U I Activité antibactérienne de la nouvelle sulfone. CIM (/ug/ml) Organisme B gi BL-P2013 Ampicilline S. S. S. S. S. S. S. E. E. K. K. P. P. P. P. S. E. E. P. P. pneumoniae A-9585 pyogenes A-960> aureus A-9537 aureus+ 501 serum A-9537 aureus Pen- Res A-9606 aureus MethRes A15097 faecalis A20688 coli A15119 coli A20341-1 pneumoniae A15130 pneumoniae A20+68 mirabilis A-9900 vulgaris A21559 morganii A15153 rettgeriî A21203 marcescens A20019 clcacae A-9659 cloacae A-9656 aeruginosa A-9843A aeruginosa A21213 >125 )125 )125 >125 >125 >) 125 )125 >125 >)125 >125 > 125 >125 >125 >125 >125 >125 >125 >125 0,00+ 0,004 0,16 0,06 >125 0,13 >125 )125 0,13 )>125 ) 125 ) 125 >125 TABLEAU II Activité antibactérienne du céforamide et de l'amoxicilline isolément et en combinaison avec le composé BL-P2013 Beta- CIM (/ug/ml) e Organisme lact- ____ arnase C6fo- Céforanide Anoxi- ranide +BL-P2013 BL-P cilline Amoxi- (1:1) 2013 +BL-P cilline (1:1) B. fragilis A21916 A22053 A22021 A21875 A22534 A22697 A22693 A22694 A22695 A22696 A22533 A22535 A22792 A22793 A22794 A22795 A22797 A22798 B. thêtaio- taomicron A22277 A22279 Bacteroides species A20934 A21959 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + )125 )125 >125 )125 > 125 > 125 k 32- 4- 4- >125 2 8 3.. 1+ 4- 4. >125 > 125 >125 63 2 16 63 4 16 32 2 8 32 2 16 3o i i II T A B L E A U II (suite) Activité antibactérienne du céforamide et de l'amoxicilline isolenent et en combinaison avec le composé BL-P2013 bonne synergie --- synergie marginale t La concentration inhibitrice minimale (CIM) est détermi- née par dilution sur gélose au moyen de cultures de 2+hEures diluées 50 fois déposées avec l'inoculateur de Steer. Le milieu d'épreuve est formé de gélose Brucella addtionnée de 5% de sang de mouton laqué et de 10/ug/ml de vitamine K. 3o Beta- _ CIM (/ug/ml)' Organisme lact- _ __ amase Céfo- Céforanide Amoxi- ranide +BL-P2013 BL-P cilline Amoxi- (1:1) 2013 +BL-P cilline (1:1) Dacteroides species A20929 + 63 _4 32 2 16 A21954 + 63 16 63 2 16 A20933 + 63 16 63 __ 8 A20930 + 125 8 125 4 32 A20931 + 63 4 32 2 16 A20927-1 - 0, 5 1 63 0,13 0,13 A20935 - 2 2 125 0,13 0,13 T A B L E A U III Efficacité thérapeutique de l'amoxicilline en combinaison avec le composé BL-P2013 chez la souris infectée expérimen- talement par une souche de staphylococcus aureus produisant de la plactamase. Posologie: administration du médicament O et 2 heures après l'infection. Infection DP50/traitement (mg/kg) Organisme (nombre (nombre. d'organisas) Amoxicil-licine (A) BL-P2013 (B) A+B (1:1) IM PO IM PO IM PO S. aureus 5 x 108 >800 >800 >50 >200 6.3 44 A-9606 5 x 108 >800 >800 >50 > 200 19 77 7 x 108 >800 - >50 - 9.6 - T AB L E A U IV Taux sanguins du composé BL-P2013 et de son ester pivaloyloxyméthylique (BL-P2024) après administration par voie orale à la souris. _ _,_ Taux sanguin (/ug/ml) Demi- Composé Dose 15 30 60 90 120 150 vie Organisme (mg/kg) Minutes après administration (mn) d'épreuve 4,5 5,1 3,9 2,3 1,5 0,8 50A 9675 A-9675 BL-P2013 100 4,6 4,1 3 A-9606 7,+ 9,8 7,1 4,1 2,8 A-9606 12,8 12,9 9,7 7,2 5,5 4,2 70 E. coli A-9675 BL-P2024 100 13,1 12 8 5,7 3,8 A-96060 14,7 1,4 9,8 8,7 5,1 A-9606 Ces résultats sont les moyennes de deux essais sur quatre Ces résultats sont lea moyennes de deux essais sur quatre a% N o -S O T A B L E A U V Taux sanguins et demi-vie du composé BL-P2024 après administration par voie orale en diverses doses à la souris. Le composé BL-P2024 est en suspension dans un mélange Tween-CMC - eau. Les valeurs sont les moyennes de 2 épreuves pour les doses de 50 mg/kg de 5 ou 6 épreuves pour la dose de 100 mg/kg et de 2 ou 3 épreuves pour la dose de 200 mg/kg Organisme d'épreuve: E. coli A9675 pour toutes les doses sauf 200 mg/kg de BL-P2024 (S. aureus A9606). Taux sanguin (/ug/ml) Composé Dose 15 30 60 go90 120 150 vie (mg/kg)vi (mg/kg> Minutes après administration (mn) 5,9 6,2 3,6 1,9 1,3 0,7 40 BL-P2024 50 7,7 9,5 6,3 4,7 3,5 2,3 60 12,3 12,2 9,4 7,2 5,7 4,6 85 14,7 14,4 9,8 8,7 5,1 (2,5 60 ru %0 o C> T A B L E A U VI Efficacité thérapeutique de l'amoxicilline en combinaison avec le composé BL-P2013 chez la souris infectée expérimentalement par des souches de S. aureus et E. coli produisant de la P-lactamase Infection....DP o/traitement (mg/kg) Infection _ _0 Organisme (nombre d'orAmoxicilline:BL-P2013 BLP ganismes) Amoxicilline 4:l 2:1 1:1 1:2 l:4 2013 S. aureus 7 x 108 >)200 >200:>50 44:22 33:33 38:76 25:10)200 A9606 2 x 109 >800 33:17 14:14 10:20 >200 S. aureus 4 x l08 >200 132:66 78:39 4LF:44 >200 A15091 5 x 108)800 114:57 100:100 66:132 >200 S. aureus 6 x 10O8)200 174:44+ 44+:22 25:25 22:44 19:76 174+ A20379 5 x 108 >200 50:25 43:43 35:70)200 E. coli 5 x 105 > 200 25:6.3 11:5.5 11:11 >200 A20649 6 x 105)200 20:5 8:4 6:6 10:20 63:25)200 E. coli 7 x 105 >200 6:1.5 6:3 5:5) 200 A21223 6 x 105 > 200 8:2 6:3 6:6 4:8 3.5:1 >200 7 x 105 >200 7:3.5 > 200 ru N o c:, -. T A 3 L E A U VI (suite) Eficacité theérapeutique de l'amoxicilline en combna-son avec le co,7posé 3L-?2013 chezls-a-our ise lneto6poe - '2_ 1.3 chez la souris inrectée experimentaJ.ement par 6es souches de S. aureus et. col produisant de la 3-lactamrase infectionLDP0o/traitemern t mg/kg) Organisme(nombre d'orAmoxiciiline:BL- F2013 ganismes) BL-P ganisrnes)Amoxicilline4:12:1 1:1 1:2 1:4 2013 E. coli 8 x 1o5 >200 8:2 6:3 3:3 4:8 +4:16>200 A9675 j 7 x 105 >100 10:2, 56:3 7:7 2,5:5 >100 6 x 105 >400 13:3,36:3 5:5 5:10 >200 Posologie: Les médicaments sont administrés par voie orale O et 2 heures après l'infection Les médicaments sont en suspension dans un mélange Tween aqueux carboxyméthycellulose. ru -h. Nc T A B L E A U VII Ef'icacité thérapeutique de l'amoxicilline en diverses combinaisons avec l'ester pivaloyloxyméthylique (BL-P2024) de BL-P2013 chez la souris infectée expérimentalement par des souches de S. aureus et E. coli produisant de la P-lactamase DP50/traitement (mg/kg) a Infection 5 Organisme (nombre Excipient b d oanisme (nombre Excipient AmoxiAmoxicilline:BL-P202)+ BL-P d'organismes) cilline 4:1 2:1 1:1 2024 S. aureus 5 x 10 TCMC >800 66:33 57:57 >200 A15091 S. aureus 5 x 108 TCMC >800 12:6 9:9 200 A20379 E. coli 9 x 105 DMSO à >100 12:12 6:3 3:3 >25 A9675 50% E. coli 7 x 105 DMSO à > 100 10:2,5 7:3,5 4:4 > 25 A9675 50% E. coli 7 x 105 TCMC >100 8:2 6:3 5:5 25 A9675 E. coli 6 x 105 TCMC >400 9,2:2,4 7:3,5 7:7 >200 A9675 a Administration par voie orale O et 2 heures après l'infection b Les combinaisons amoxicilline:BL-P2024+ sont solubles dans le diméthylsulfoxYde à 50%. L'amoxicilline est soluble dans le TCMC (mélange Tween aqueuxcarboxyméthYlcellulose) et le composé BL-P2024 est administré à l'état de suspension dans cet exciplent. cI co N -à T A B L E A U VIII Taux sanguins per os chez la souris des composés BL-P2036 et BL-P2013 ou BL-P2024 Epreuve n l Taux sanguins (/ug/ml) Composé Dose 15 30 60 90 120 150 (mg/kg) (mg/kg) Minutes après administration BL-P2026 25 1,7 2,3 0,9 (1,3-2,3) (2-2,6) (0,6-1,3) BL-P2036 50 2 8 3,3 2,5 1,3 0,8 _ (1,6 4,8) (2-5,3) (1,2-5,3) (0,7-2,4) (0,5-1,5) 0,6 BL-P2036 100 3 6 3,9 3,2 2 1,5 0,8 (2,6 4,9) (2,9-5,1.) (2,4-4,4) (1,5-2,7) (1,1-2,1) (0,7-1,0) BL-P2013 25 1,3 1, 1,0 0 (1,1-1,6) (1,2-1,6) (0,8-12) BL-P2013 50 2,2 2,6 1;9 1, 5 1 1 0,8 (1,8-2,7) (2,1-3,2 (1,4-2,6) (1,1-2,1) (0,à-1,4) (0,5-1,3) BL-P2013 100 3,4 4,5 3,9 3,6 2,7 2,1 (2,1-5,4) (3,6-5,7) (3,4-4,6) (2,5-5) (1,7-4,3) (1,4-3,2) Les composés sont présentés dans le mélange Tween-CMC-H20 Les valeurs entre parenthèses sont les limites de fiabilité à 95% Organisme d'épreuve: E. coli A9675 (pH - 6,6,inoculum de 0,1%) ru> NO o -4 Epreuve n 2 Taux sanguins (/ug/ml) Composé Dose 15 30 60 90 120 150 (mg/kg) Minutes après administration .-,= I..DTD: BL-P2024 25,307 43 2,3 0,8 0,6 >0,6 (2,6-5,5) (3-6,2),0,9-5,8) O,4-i,8) BL-P2024 50 5 4,5 4,9 3,6 2 6 17 (0,8-33,3) (1,5-13,1+) 2,4-9,8) 3,1-4,1) (1,5-4,3) (0,9-3,1) _. _,, BL-P2024 100 8,3 9,5 7,8 4,8 3,9 3 7 (5,5-12,6) (5,2-17,5) 4,2-14+,3) 3,4-6,7) (2,2-6,8) (2,A-5) BL-P2036 25 3,6 3,3 2,1 1,4 0,8 (2,2-5,9) (2,2-4,7) 1,6-2,8) 0,7-2,8) (0,-1,7) BL-P2036 50 4,0 3,6 2,2 2,1 1,5 1,0 (3-5,3) (1,4-9) (1,4-3,7) 1,3-3,6) (0,6-3,6) (0,5-2,+4) ,,,._...,,J,,,,, BL-P2036 100 4,9 6,5 4, 5 2,8 1,9 1,3 __ (3,7-6,5) (3,7-11,5)(3, 4-5,9) (2,2-3,6) (1-3,7) (0,4-4) 0)-)+ Les composés sont présentés dans le propylèneglycol à 5% dans le Les valeurs entre parenthèses sont les limites de fiabilité à 95% Organisme d'épreuve: E. coli A9675 (pH = 6,6 inoculum de 0,1%) mélange Tween-CMC-H20 O N O> -- Epreuve n 3 Taux sanguins (/ug/ml) Composé Dose 15 30 60 90 120 50 (mg/kg) Minutes après administration BL-P2013 25 1,4 2A0 1, 4 1,2 |(1,1-1,9) (1,5-2,6) (0,9-2,1) (0,6-2,3) 1,2 (1,2 BL-P2013 50 4, 6. 5, 5 3,6 3,1 2 1,1 (3-6,9) (3-10,1) (2-6,4) (1,7-5,7) (0,8-5) (0,8-1,5) BL-P2013 100 6,8 11,5 6,4 4,2 3,3 2,5 (14,8-9,6) 1(7,3-1) (3,2-12,8)(2,1-8,6) (1,4-7;6) (0,7-8,9) BL-P2036 25 4,3 4, 5 3,5 2, 5 2,2 2,0 2,9-6,5) (2,2-9,2) (1,7-7,2) (1,3-4,8) (1-4,9) (1-3,7) i BL-P2036 50 4,6 4,8 3,5 2, 2 1,9 1,8 2,3-9, 2) (3,3-7,1) (1,8-7) (1, 2-4) (1,2-3) (0,3-4,6) BL-P2036 100 7,1 6,7 5,8 4,3 4 2,7 (3,1-16, 2) (3,6-12,3) (3,9-8,5) (3-6) (2,8-5, 6) (1,8-4) Les composés sont présentés dans le propylèneglycol à 5% dans le mélange Tween-CMC-HI 20 Les valeurs entre parenthèses sont les limites de fiabilité à 95% Organisme d'épreuve: E. coli k9675 (pH = 6,6 inoculum de 0,1%) -J N c, o -4 Les composés de l'invention sont donc utiles, à l'administration orale ou parentérale,pour améliorer l'efficacité des antibiotiques à cycle de 0-lactame contre les bactéries produisant de la P-lactamase. Sur base pondérale, la dose est du cinquième au quintuple de celle des antibiotiques à cycle de 3-lactame et est de préférence égale à cette dernière. Par exemple, les composés de l'invention, comme illustré ci-dessus, ad- ministrés dans un rapport l:l, améliorent nettement lO l'activité du céforanide et de l'amoxicilline contre les souches produisant de la flactamase de Bacteroides anaérobies, comme B. fragilis et B. thetaiotaomicron, outre d'autres espèces de ce genre, de même que contre les formes résistantes de Staphylococcus aureus. Les composés de l'invention sont administrés en mélange avec l'antibiotique à cycle de 3lactame ou en même temps que celui-ci en une dose établissant le rapport indiqué avec la dose connue et habituelle de l'antibio- tique. Par conséquent, l'aptitude des composés de l'invention à améliorer l'efficacité d'un antibiotique à cycle de 3-lactame contre certaines bactéries produisant de la P-lactamase les rend intéressants pour l'adminis- tration simultanée avec certains antibiotiques à cycle de 3-lactame dans le traitement des infections par des bactéries chez les mammifères et, en particulier, l'homme. Pour le traitement d'une infection par des bactéries, un composé de l'invention peut être mélangé avec l'antibiotique à cycle de 3-lactame et les deux agents peuvent être administrés ainsi simultanément. En variante, un composé de l'invention peut être adminis- tré séparément au cours d'un traitement au moyen d'un antibiotique à cycle de P-lactame. Lorsqu'un composé de l'invention ou un de ses sels est utilisé pour améliorer l'effet antibacté- rien d'un antibiotique à cycle de P-lactame, il peut être administré tel quel ou, de préférence, avec des diluants ou excipients pharmaceutiques classiques. Un composé de l'invention sous forme d'acide ou de sel pharmaceutiquement acceptable peut être administré par voie orale ou parentérale et un composé de l'invention sous forme d'ester qui est hydrolysé aisément in vivo est administré le plus favorablement par voie orale. Par administration parentérale, il y a lieu d'entendre l'administration intramusculaire, sous-cutanée, intra- péritonéale ou intraveineuse. Lorsqu'un composé de l'invention est utilisé avec un diluant ou excipient, celui-ci est choisi en fonction du mode d'administration prévu. Par exemple, pour l'administration par voie orale, le composé peut être présenté sous forme de comprimés, de capsules, de pastilles à sucer, de tablettes, de poudres, de sirops, d'élixirs, de solutions ou de suspensies aqu3uses,etc. suivant la pratique pharmaceutique courante. Le rapport entre les constituants actifs et l'excipient dépend évidem- ment de la nature chimique, de la solubilité, de la stabilité et de l'efficacité des principes actifs, ainsi que de la dose envisagée. Néanmoins, ces compo- sitions pharmaceutiques sont susceptibles de contenir environ 5 à 80ò d'excipient. Dans le cas des comprimés à usage oral, des excipients d'usage courant sont no- tamment le lactose, le citrate de sodium et les phos- phates. Divers agents de désagrégation, comme l'ami- don et agents lubrifiants, comme le stéarate de magné- siu.m, le laurylsulfate de sodium et le talc,sont uti- lisés fréquemment dans les comprimés. Pour l'adminis- tration par voie orale sous forme de capsules,des di- * luants utiles sont le lactose et les polyéthylènegly- cols de poids moléculaire élevé. Dans les suspensions aqueuses administrées par voie orale, les principes actifs sont combinés avec des agents émulsionnants et de mise en suspension. Si la chose est désirée, cer- tains agents édulcorants et/ou aromatisants peuvent être ajoutés. Pour l'administration par voie parenté- rale, notamment intramusculaire, intrapéritonéale, sous-cutanée ou intraveineuse, les principes actifs sont d'habitude présentés sous forme de solutions sté- riles dont le pH est avantageusement ajusté au moyen d'un tampon. Pour l'administration intraveineuse, la concentration totale en solutés doit rendre la compo- sition isotonique. Bien que le médecin décide en dernier ressort de la dose administrée à son patient, le rapport entre la dose quotidienne d'un composé de l'invention ou son sel et la dose quotidienne d'un antibiotique à cyle de P-lactame est normalement d'environ 1:5 à 5:1 et, de préférence, d'environ 1:1. En outre, la dose quoti- dienne de chaque principe actif est normalement d'en- viron 10 à 200 mg par kg de poids du corps en adminis- tration par voie orale et d'environ 10 à 100 mg par kg de poids du corps en administration par voie parenté- rale. Ces valeurs ne sont toutefois qu'indicatives et il peut être parfois nécessaire d'administrer des doses tombant en dehors de ces limites. L'invention est susceptible d'une application industrielle. REVENDICATIONS 1- Ester de formule: CH3 R-CH-CO -Nil NH2 Il' C H2C1 C=O CH Il o0 o R représente: R2 o R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyle et R représente un atome d'hydrogène ou de chlore ou un radical hydroxyle, méthyle ou méthoxy. 2. Esters selon la revendication 1 de l'acide de formule: o o a$N OOH -d (NH2 caractérisés en ce que la partie alcoolique est re- présentée par des radicaux 6-[(R)-2-amino-2-phényl- acétamidoj-3,3-diméthyl-7-oxo-4-thia-l-aza-bicyclo[3.2.03 heptane-2-carbonyl-oxnéthyle ou 6-[(R)-2-amino-2-p- hydroxyphénylac6tamniido]-3,3-diméthyl-7-oxo-4-thia-l-aza- bicyclo[3.2.0] heptane-2-carbonyloxym6thyle. 3. Procédé de préparation des composés suivant les revendications 1 ou2, caractérisé en ce que, à des stades successifs, a) on soumet à l'hydrogénation catalytique un ester de formule: CHCl JJ 2 ""CH3 CO2R o R représente un radical benzyle ou benzyle substitué; b) on soumet le produit hydrogéné à l'oxydation pour former l'acide recherché ou son sel, puis, si la chose est désirée, c) on estérifie l'acide ou le sel pour produire un ester facilement hydrolysé de l'acide. 4. Procédé suivant la revendication 3, caracté- risé en ce qu'on exécute l'hydrogénation à l'aide d'un catalyseur au palladium. 5. Procédé suivant la revendication 3, caracté- risé en ce qu'on exécute l'oxydation à l'aide d'un permanganate de métal alcalin ou d'un peracide organique. 6. Procédé de préparation des composés suivant les revendications 1 ou2, caractérisé en ce que, à des stades successifs, a) on oxyde, par exemple au moyen de KMnO4, de H202 ou d'un peroxyde analogue ou bien d'un peracide, un ester de formule: 2491C71 CHCl -3 C- OCHLC Il pour former un sulfoxyde d'ester de formule: 0 0 I puis, b) on fait réagir ce sulfoxyde d'ester avec un métal dans un acide, tel que le zinc dans l'acide acétique glacial, pour produire l'acide désiré ou le sel, puis, si la chose est désirée, c) on estérifie l'acide ou son sel pour produire un ester facilement hydrolysé de l'acide. 7. Procédé de préparation des composés suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on fait réagir un acide avec une solution d'un composé de formule: CH3 R- CH CO-NH N R- C H Il Ri-c/N o0 C=O 1=0 CH2C1 1 CH3 CH2 C... 0 Il o R représente: R5 9'X'emeU.4 o R représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyle et R5 représente un atome d'hydrogène ou de chlore ou un radical hydroxyle, méthyle ou méthoxy; R1 représente un radical alkyle, aralkyle ou aryle; R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, aralkyle ou aryle et R3 représente un radical alkyle, aralkyle, aryle, alcoxy, 4 5 4 5 aralcoxy ou aryloxy ou -NR4R5, o R et R représentent chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, aralkyle ou aryle, ou bien, pris ensemble avec l'atome d'azote, représen- tent un radical pipéridino ou morpholino, laquelle réaction avec l'acide est exécutée dans un solvant organique ou en solution aqueuse ou partiellement aqueuse à la température ambiante. 8. Procédé suivant la revendication 7, caractérisé en ce que R1 représente un radical méthyle, R2 représente un atome d'hydrogène et R3 représente un radical méthoxy, éthoxy ou méthyle. 9. Procédé suivant la revendication 7, caractérisé en ce qu'on exécute la réaction dans l'acétone ou le chloroforme. 10. Procédé suivgant les revendications 7 à 9, caractérisé en ce qu'on exécute la réaction à un pH de 1 à 5. 11. Composition antibactérienne, caractérisée en ce qu'elle comprend comme principe actif, un ester suivant l'une des revendications 1 ou 2.