# Coloração de Field

Coloração de Field é um método histológico para coloração de esfregaços de sangue. É utilizada para a coloração de esfregaços de sangue espesso, a fim de descobrir parasitas da malária. A coloração de Field é uma versão da coloração de Romanowsky, usada para o processamento rápido dos espécimes.
A coloração de Field usa azul de metileno e Azure 1 dissolvidos em solução tampão de fosfato e Eosina Y em solução tampão. A coloração de Field é nomeado devido ao médico John William Field, que a desenvolveu em 1941.

## Soluções corantes
### A partir dos reagentes

Preparação das soluções 1 (ou A) e 2 (ou B) da coloração de Field a partir dos reagentes:

#### Solução de Field 1 (ou A)

* Dissolver 1,6 g de azul de metileno em um litro de água destilada.
* Dissolver 2,6 g de Na$_2$HPO$_4$ (anidro) na solução do passo 1.
* Dissolver 1 g de azure 1 na solução do passo 2.
* Dissolver 2,6 g de KH$_2$PO$_4$ na solução do passo 3.
* Coloque a solução resultante sob aquecimento moderado (sem fervura) com agitação por 45 minutos a 1 hora,
* Deixe a solução descansar em temperatura ambiente por 24 horas.
* Filtre. Envase em frasco de vidro âmbar anotando a data de preparação.

#### Solução de Field 2 (ou B)

* Dissolver 2 g de eosina Y em um litro de água destilada.
* Dissolver 2,6 g de Na$_2$HPO$_4$ (anidro) na solução do passo 1.
* Dissolver 2,6 g de KH$_2$PO$_4$ na solução do passo 2.
* Filtre. Envase em frasco de vidro âmbar anotando a data de preparação.

### A partir de misturas corantes prontas

Preparação da solução corante de Field 1 (ou A) e 2 (ou B) utilizando a mistura corante em pó comercialmente disponível.

#### Solução de Field 1 (ou A)

* Pesa-se corante de Field 1 (ou A) em pó: 5 gramas
* Aquece-se 600 mL de água destilada a 80 ° C ou manteve-se a 60 ° C durante 30 minutos.
* Mistura-se o pó na água quente até se dissolver.
* Filtra-se a solução. Envase em frasco de vidro âmbar anotando a data de preparação.

#### Solução de Field 2 (ou B)

* Pesa-se corante de Field 2 (ou B) em pó: 4,8 gramas
* Aquece-se 600 mL de água destilada a 80 ° C ou manteve-se a 60 ° C durante 30 minutos.
* Mistura-se o pó na água quente até se dissolver.
* Filtra-se a solução. Envase em frasco de vidro âmbar anotando a data de preparação.

### Modificações para Trichomonas e Acanthamoeba
#### Solução A (ingredientes por litro de metanol)

* Fosfato dissódico 2,6 g
* Fosfato monopotássico 2,6 g
* Azul de metileno 1,6 g
* Azure I (Azure B) 1,6 g

#### Solução B (ingredientes por litro de metanol)

* Eosin Y 2,0 g

## Protocolos de coloração
### Protocolo de coloração para esfregaços sanguíneos

* Preencher duas cubas de coloração ou outro frasco de boca larga adequado com, respectivamente:
       1.1.Solução de Field A (corante azul).
       1.2.Solução de Field B (corante vermelho).
* Faça o esfregaço sanguíneo sobre uma lâmina para microscopia e seque ao ar.
* Fixe em metanol por um minuto ou com a aplicação de algum fixador em spray.
* Seque ao ar.
* Mergulhe o esfregaço na solução corante de Field B (corante vermelho) por 5 a 6 segundos (este tempo, com a prática, pode ser ajustado).
* Lavar em água de torneira corrente.
* Mergulhe o esfregaço na solução corante de Field A (corante azul) por 10 a 30 segundos (este tempo, com a prática, pode ser ajustado).
* Lavar novamente em água de torneira corrente.
* Secar ao ar e o esfregaço está pronto para o exame ao microscópio.

### Variação com coloração direta sobre a lâmina

* Fixe o esfregaço em metanol anidro por um minuto. Deixe secar por evaporação.
* Dilua a solução corante de Field B na proporção de 1:5 com água tamponada com pH levemente alcalino.
* Cubra o esfregaço com a solução corante Field B diluída.
* Imediatamente, adicione um volume igual de solução de Field A.
* Misture por meio de inclinações alternadas da lâmina e deixe corar por um minuto.
* Lave a solução corante com água com cuidado.
* Limpe a superfície inferior da lâmina e deixe secar ao ar a preparação.

### Protocolo para protozoários em esfregaços fecais

Prepare uma diluição em pequena quantidade da solução corante B (vermelho) diluída a uma parte para 4 com água (por exemplo, 1 mL de corante para 4 mL de água).
* Prepare um esfregaço fecal fino na lâmina e seque ao ar.
* Fixe em metanol por alguns minutos.
* Remova o metanol e cubra o esfregaço com 1 mL (aproximadamente 20 gotas) da solução corante B diluída recentemente preparada.
* Imediatamente, adicione 1 mL (novamente, aproximadamente 20 gotas) da solução corante A e deixe misturar cuidadosamente os dois corantes.
* Permita que a coloração ocorra por um período de tempo de 1 a 2 minutos e lave cuidadosamente com água e seque ao ar.
Núcleos e flagelos são coloridos de vermelho, citoplasma em azul. Alterações morfológicas de células inflamatórias podem ser também examinadas por aplicação deste mesmo método.

## Imagens adicionais

* Adenocarcinoma colorretal. Coloração de Field.
* Granuloma. Coloração de Field.