# Sangue e linfa

Il sangue e la linfa sono tessuti fluidi. Quest’ultima si distingue dal sangue per la composizione chimica e per l’assenza gli eritrociti. Nella linfa comunque presenti i linfociti. Su vetrino al microscopio ottico si attua la colorazione di May Granwold giemsa.

## Il sangue

Il sangue (pH 7,2 -7,4) costituisce il 7% del peso corporeo.In un individuo di 70 kg ce ne sono circa 5 litri . Il sangue trasporta:
* i gas respiratori (arterioso e venoso)
* le sostanze di scarto
* gli ormoni e i fattori di crescita
* le cellule del sistema immunitario
* le sostanze nutritive assorbite a livello intestinale al fegato e quindi alle cellule.
Interviene nella termoregolazione come sistema tampone nello stabilizzare il pH determina la pressione oncotica (pres. Osmotica passaggio di endoteli).È formato al 55% da plasma, una matrice amorfa e dal 45% dagli elementi figurati.

### Composizione del plasma

Il plasma è composto al:
* 90% da Acqua
* 7% da Proteine,ovvero
** Albumina: prodotta dal fegato regola la pressione oncotica (la cirrosi provoca l'alterazione della pressione)
** Le globuline, divisibili in
* Alfa globuline, che trasportano ferro e rame
* Beta globuline che trasportano ormoni
* Gamma globuline dette anche anticorpi
* Fibrinogeno, coinvolto nella coagulazione del sangue
* Sistema del complemento : Una serie di proteine, importanti nella difesa dell’organismo. Si tratta di uno dei sistemi di difesa più antichi dal punto di vista evolutivo . Normalmente nel sangue sono inattive.
* 0,1 % da Componenti organici ( glicoproteine, lipoproteine,(Lipoproteine plasmatiche LDL e HDL),urea, amminoacidi, glucosio, grassi )
* 0,9 % da Componenti inorganici Na ,K ,Cl, bicarbonato, Fe, I , F )
* Sono presenti in tracce anche enzimi e vitamine

##### Sistema del complemento

È un sistema di difesa dell'organismo che agisce in alternativa dei leucociti. Sono proteine plasmatiche prodotte dal fegato (pr. per eccellenza albumina che determina la pressione oncotica). Il meccanismo d'azione si attiva per via:
* classica, in cui l’attivazione è dovuta al legame antigene-anticorpo
** IgG anticorpi che attivano il complemento sul fulcro della proteina C3
** IgM
* alternativa, attivata polisaccaridi microbici
C3 attivato ha 3 effetti:
* La produzione di C3 recluta le cellule nella sede dell'infiammazione (leucociti)
* Se avviene una cascata da C3 a C9 e attiva la lisi cellulare
* Si porta sulla parete dell'antigene (microbo o cellula infetta o tumorale) e funge da agente stimolante per la fagocitosi

### Elementi figurati

Gli elementi figurati vengono prodotti dal midollo osseo, attraverso un processo detto emopoiesi.
Tappe dell’emopoiesi:
* Cellule staminali totipotenti:
➢ Mieloide:
* Eritrociti,dal proeritoblasto
* Piastrine , si originano dal megacariocito
* Precurs. Granulociti:
* Neutrofili
* Monociti, che danno origine ai macrofagi
* Cell. dendritiche
* Eosinofili
* Basofilo
* Mastociti
➢ Linfoide:
* Precurs. ->
* B (plasmacell.)
* T
* NK (natural killer)

#### Eritrociti

* Origine:
a. Eritroblasto (cellula mononucleata nel midollo) b. Perdita del nucleo (in prossimità dei macrofagi che distruggono i nuclei) e diventano reticolocita (poiché contiene ancora gli organuli) c. ERIROCITA : i. Forma biconcava e con membrana plasmatica (attraverso la lisi ipotonica la cellula scoppia facendo un lavaggio degli organuli e creando una cell. fantasma che ha solo la m. plasmatica) elastica che permette il passaggio anche attraverso i capillari.
Ha dimensione di 8 μm (micron). Gli eritrociti sono per il 30% formata da Hb (emoglobina), ciò caratterizza la cromatina dell'eritrocita. La densità è di 4,5 e 5 milioni per millilitro (5*106/vl) la forma biconcava aumenta la superficie del 30% e la flessibilità è elevata. La superficie di tutti gli eritrociti è 2000 volte superiore del corpo. MALFORMAZIONE sono forme sporadiche: eritrociti dentellati, falciforme. L'Emoglobina lega ad alta affinità l'Ossigeno reversibile: - ossiemoglobina (lega l'O$_2$) – carbossiemoglobina (lega la CO$_2$). Il Tetramero è formato da 4 catene polipeptiche suddivise in globine (alfa, beta, gamma, delta) ogni gruppo prostatico (EME) legato alla parte proteica. Il gruppo EME contiene Fe2+ ed è in grado di legare reversibilmente O$_2$ a livello del fegato. La quantità di EME è variabile a seconda se si è anemici o per la statura. Poiché le globine sono divise ci sono vari tipi di EME:
* 2alfa - 2gamma (fetale)
* 2alfa – 2beta (adulto)
* 2alfa – 2delta (Rara)
dopo 6 mesi la gamma scompare HbF poiché è utilizzato dal feto per poter respirare dalla madre, gamma infatti ha una maggiore affinità dell'Ossigeno che lo sottrae alla madre, questo va bene fino alla nascita e può essere fisiologica fino a 6 mesi perché dopo non è più conveniente, diventando patologica creando disagi che non danno aspettative di vita, poiché ha molta affinità con l'O$_2$ ha anche poca capacità di rilasciare l'O$_2$ ai tessuti.Sulla membrana degli eritrociti sono presenti Glicoforine A,B,C. Esse sono glicoproteine ricche di acido sialico, un oligosaccaride carico negativamente. Grazie alla carica negativa, è impedita l’agglutinazione dei globuli rossi, che si respingono per ragioni elettrostatiche. Quando invecchiano, però, perdono le cariche negative e vengono riconosciuti dagli organi emocateretici, dove vengono fagocitati.

##### Gruppi Sanguigni

Sistema A B 0
Si basa sulla presenza di antigeni sulla superficie dell'eritrocita. [Gli antigeni: sono sostanze prodotte dal nostro organismo in questo caso è una glicoproteina di membrana espressa sulle superfici, il processo avviene tramite l'enzima glicosìtrasferasi]. Il sistema AB0 è formato da una semplice aggiunta di materiale che differenzia i tre antigeni detti A,B,0. Nel fenotipo 0 non sono presenti antigeni sulla superficie degli erotrociti. Lo 0 è detto donatore universale poiché è capace di dare sangue a sia a 0 che A che B. L'A solo allo 0 e all'A. Il B solo allo 0 che al B. Puó anche verificarsi però codominanza nel fenotipo AB, in cui negli eritrociti di un individuo sono presenti entrambi gli antigeni. Gli AB possono ricevere sangue da tutti gli altri gruppi sanguini, ma non sono donatori universali.
Sistema Rh
Chiamato anche fattore Rhesus, si basa anch’esso sulla presenza di antigeni sulla superficie degli eritrociti. È presente nell’85% circa della popolazione umana. Se un uomo possiede questo fattore è Rh positivo, al contrario se non lo possiede, quindi l’antigene è assente è Rh negativo. Se una madre è Rh negativo e il feto è Rh positivo , gli anticorpi materni possono attaccare il feto provocando l’eritroblastosi fetale.
RETE FIBRILLARE CONTINUA
La rete fibrillare continua è formata da proteine citoscheletriche perché hanno bisogno di cambiare la loro forma proteica RFC. intrecciate e collegate alla membrana plasmidica, glicoproteina di membrana plasmidica legate con la fibrillina tra loro. La spettrina è la proteina principale collegata con le altre tramite il complesso proteico di actina-tropomiosina che sono proteine di legame. (si spiegherà meglio con la spiegazione del metodo per classificare le proteine della rete).
* I° metodo: il gel di elettroforesi: si prendono i fantasmi e si distruggono (lisi) poste sul gel e si vede quali scendono e quali no. (ordine di peso)
* II° metodo: grigliato: si crea un reticolo artificiale con differenza di cariche si separano le proteine in base alla grandezza:
** Banda 1 più leggere
** Banda 2
** Banda 3
** Banda 4 più pesanti
Come è strutturato la rete: i. Proteine trasmembrana: a. Glicoforina b. Pr. della banda 3 (così è il nome) ii. Proteine d'attacco: a. Proteina dal peso 4.1 -> si lega alla Glicoforinaa b. Anchirina -> si lega alla banda 3 iii. Proteina di legame: a. Actina e tropomiosina: a loro volta fa da giunzione alla spettrina b. La catena Beta della spettrina: è direttamente collegata all'anchirina [la spettrina ha una forma ad elica formata da una catena alfa e beta]
IMMUNITÀ 1) Innata ( non specifica) a) Macrofagi b) Granulociti c) Sistema del complemento 2) Acquisita: a) Immunità umorale: i) anticorpi prodotti da linfociti B b) Cellulo mediata: i) Linfociti T citotossici ii) MHC o complesso maggiore d'istocompatibilità.

##### MHC (Complesso maggiore di istocompatibilità)

MHC I È espresso su tutte le cellule dell'organismo. È un recettore di superficie.
Meccanismo d’azione
Serve a garantire l'azione del sistema immunitario dove vengono espressi i peptidi estranei se la cell. è infettata, cioè espone la particella virale sulla MHC I cell. che riconoscono: linfociti Tcitotossici (TCR-CD8)
MHC II
È espresso sulle cellule di langherans, dendritiche, linfociti B e sui Macrofagi.
Meccanismo d’azione
Viene complessato ai peptidi nei lisosomi (grazie ai lisosomi i MHC II vengono rinnovati con i peptidi estranei) Cell. che riconoscono: linfociti Thelper (TCR-CD4) questi linfociti stimolano il sistema immunitario e i linfociti B che producono anticorpi per quel peptide.
Cellule Dendritiche
Hanno un ruolo di difesa: non hanno capacità fagocitare e presentano i prolungamenti che aumentano la superficie di contatto con l'antigene tramite l'MHC II. Producono l'interleuchina (come le langherans).

#### Leucociti

Detti anche globuli bianchi, poiché mancano di pigmento perciò risultano incolori a fresco. Il nucleo è detto regolare. Vengono suddivisi in:
* Monomorfonucleari: regolari (nuclei abbastanza grandi)
** Linfociti ( T, a loro volta divisi in Ts,Th,Tc)
** Monociti
* Polimorfonucleari: il nucleo è diviso in più lobi (stretto al centro)
** Granulociti: presentano granuli citoplasmatici
Tutti e due i gruppi hanno forma tondeggiante nel sangue: nel tessuto cambiano forma per poter permettere movimenti ameboidi.
FORMULA LEUCOCITARIA
Percentuale dei diversi tipi di globuli bianchi:
* 50-70% granulociti neutrofii
* 20-30% linfociti
* 3-8% macrofagi
* 2-3% g. eosinofili
* o,5-1% g. basofilo
I leucociti circolanti nel sangue passato nel t. attraverso l'uso di passaggi: a) i g. bianchi migrano poiché attirati dal fattore chemiotattico b) si attaccano sulle pareti delle cell. epiteliali del vaso interessato c) passano le cell. epiteliali d) prendono forma amegoide: come l'ameba nei m. ondulatori
FATTORI CHEMITATTICI Il TnFalfa viene rilasciato dalla cell. per dare avvio al processo di infiammazione. L'interlochina viene prodotta dai macrofagi e cell. di langherans in risposta all'antigene, questa si diffonde per creare il gradiente chemiotattico. Il meccanismo di legame dei leucociti (soprattutto linfociti e monociti) con l'endotelio avviene con l'integrina (pr. di membrana) che è una glicoproteina che permette l'adesione dei leucociti con endotelio.

##### Granulociti

Granulociti neutrofili
Hanno una dimensione di 12 μm, con un citoscheletro molto sviluppato, che consente i movimenti ameboidi, il nucleo può avere fino a 5 lobi. I granuli possono essere:
* Primari o Azzurrofili: identici ai lisosomi (idrolisi acida, fosfatasi perossidasi, sostanze batteriostatiche, lisozima)
* Secondari o Specifici: collagenasi, lattoferrina (distruggono le fibre collaggene e permettono alle cell. di spostarsi)
* Terziari: gelatinasi
NEUTROFILI IN FAGOCITOSI Batteri digeriti:
* Attirati da fattori chemiotattico
* Riconoscono con le sostanze estranee poiché rivestiti dal complemento e dagli anticorpi
* Distruzione:
** Enzimi (proteine cationiche e …)
** Ioni superossidi (H$_2$O$_2$)
* Producono dei mediatori chimici dell'infiammazione: LEUCOTRIENI (= MACROFAGI) a partire dall'acido arachidilico (bo) a livello di membrana. I leucotrieni sono agenti chemiotattico che aumentano la permeabilità delle vene, l'adesione delle cell. endoteliali, contraggono la m. liscia dei bronchi (reazione riflessa)
Granulociti eosinofili
Hanno il compito di ridimensionare l'azione dei basofili. La forma del nucleo è bilobata, il citoplasma contiene dei granuli acidofili con proteine basiche: 1) Perossidi 2) Arilsulfatasi: disattiva il fattore anafilattico di mastociti 3) Istaminasi: distrugge l'istamina 4) Fosfolipiasi: disattiva il fattore di aggregazione piastrinica
Possiedono un recettore di Fe per gli anticorpi. Si trovano nel midollo e si trovano in tessuti chemiotattici dove vi sono monociti (per limitare l'efficace).
Granulociti basofili
Ha un nucleo bilobata con citoplasma basofilo, perciò i granuli sono acidi:
* Istamina
* Perossidasi
* Fosfatasi acida
* arilsulfatasi
I recettori si connettono per la porzione fe delle IGE e si muovono per chemiotassi, poiché contengono le sostanze dei neutrofili.

##### Linfociti

Sono responsabili dell’immunità Cellulo mediata (timo). Si suddividono in
* Linfociti T [rigetto degli organi dovuti agli antigeni] ed anche coadiuvante [(penso linfociti Thelper riconoscono MHC]. A loro volta suddivisi in
** Linfociti T citotossici
** Linfociti T helper
** Linfociti T soppressori
* Linfociti B: e allora si trasforma in plasmacellula che si trovano nelle equivalenti borsali.

## Anticorpi o Immunoglobuline

Sono prodotti dai linfociti B e riconoscono specifici antigeni. Sono fondamentali nell’immunitá adattativa. È proprio sulla produzione di anticorpi che si basa la vaccinazione. Sono costituiti da quattro catene polipeptidiche , due pesanti e due leggere. Si suddividono in cinque classi:

#### IgG

Sono le Immunoglobuline più abbondanti. Si dividono in IgG 1,2,3 o 4 in base al frammento variabile. L'80% passano la barriera della placenta.Hanno un’emivita di circa 23 giorni.
Fe: costante Fab: variabile -> regione ipervariabile dove ognuno è capace di legami agli antigeni

#### IgA

Si tratta di dimeri. Sono dette secretorio poiché sono presenti nelle secrezioni come lacrime, salive, colostro (primo secreto delle ghiandole mammarie) ecc. Hanno un’Emivita di 6 giorni.

#### IgM

Sono pentameri. Organi primari: timo e midollo Org. Secondari: linfonodi
Nel sangue e t. connettivi Sono i primi ad essere prodotti poiche sono quelli senza memoria (agiscono contro la prima mononucleosi) Prima si fa la IGG poi si attiva

#### IgD

Sono presenti in bassa percentuale nel sangue. Si trovano sulla superficie dei linfociti B.

#### IgE

Sono coinvolti nelle allergie. Sono fondamentali nella difesa contro parassiti unicellulari ( come Plasmodium malariae) e pluricellulari( Ad esempio Taenia solium).
Attuano la degranulazione di basofili e mastociti Si legano alla Fe
Fagocitosi attivata da anticorpi Rivestita dagli anticorpi specifici dalla regione variabile in cui Fe attiva i leucociti che effettuano la fagocitosi
(come detto già) il megacariocita (che si trova sempre nel midollo osseo vascolarizzato) ha dei prolungamenti che passano le cellule endoteliali e perdono l'estremità distale del megacariocita (piastrine)