# Hexokinase

Die Hexokinasen sind Enzyme aus dem Kohlenhydratstoffwechsel, die Hexosen (Zucker mit sechs Kohlenstoffatomen) phosphorylieren und damit jeweils in ein Hexose-Phosphat überführen, etwa Glucose in Glucose-6-phosphat. Hexokinasen gehören zu den Phosphotransferasen (EC 2.7).

## Eigenschaften

Als Kinasen führen die Hexokinasen zu einer Phosphorylierung von Hexosen, meistens entsteht aus Glucose Glucose-6-phosphat unter Verwendung von Adenosintriphosphat. Das Glucose-6-Phosphat wird anschließend im Zuge der Glykolyse oder des Pentosephosphatwegs verstoffwechselt.

### Typen von Hexokinasen

Hexokinasen kommen in allen Reichen der Lebewesen vor und gehören zu den ATPasen mit actin fold. Hexokinasen kommen oftmals in mehreren Isoformen vor. In Säugetieren kommen vier Isoformen der Hexokinase vor (I, II, III und IV, oder A, B, C und D). Die Glucokinase in Säugetieren ist eine Isoform der Hexokinase in der Leber (Hexokinase IV), die jedoch nur Glucose phosphoryliert. Während bakterielle Hexokinasen eine Molmasse um 50 kDa besitzen, sind eukaryotische Hexokinasen um 100 kDa und aus zwei einander ähnlichen Teilen aufgebaut, die vermutlich evolutionär durch Genduplikation aus einer Vorläufer-Hexokinase entstanden sind. Nur in der Hexokinase II sind beide Teile enzymatisch aktiv.
In einigen Tumoren werden Hexokinasen überexprimiert.
| Typ | Beschreibung | Gen | Phänotypen |
| I (A) | kommt in allen Geweben von Säugetieren vor und gilt als „Haushaltsenzym“, das von den meisten physiologischen, hormonellen und metabolischen Veränderungen nicht betroffen ist | HK1 | Morbus Charcot-Marie-Tooth Typ 4G, Retinopathia pigmentosa |
| II (B) | stellt bei vielen Zelltypen die hauptsächliche regulierte Isoform dar und ist bei vielen Krebsarten erhöht. Es ist die Hexokinase, die in Muskel und Herz vorkommt. Hexokinase II befindet sich auch an der äußeren Mitochondrienmembran, sodass ein direkter Zugang zu ATP möglich ist. | HK2 | hochexprimiert in mehreren Krebsarten, einschließlich Brustkrebs und Dickdarmkrebs |
| III (C) | ist in physiologischen Konzentrationen durch Glucose substrathemmend | HK3 | überexprimiert im malignen follikulären Schilddrüsenknoten |
| IV (D) | kommt in Leber, Bauchspeicheldrüse, Hypothalamus, Dünndarm und möglicherweise in bestimmten anderen neuroendokrinen Zellen vor und spielt eine wichtige regulatorische Rolle im Kohlenhydratstoffwechsel. In den Beta-Zellen der Pankreasinseln dient es als Glucosesensor zur Steuerung der Insulinfreisetzung und in ähnlicher Weise zur Steuerung der Glukagonfreisetzung in den Alpha-Zellen. In Hepatozyten der Leber reagiert die Glucokinase auf Änderungen des Umgebungsglucosespiegels durch Erhöhen oder Verringern der Glykogensynthese. | GCK | Maturity Onset Diabetes of the Young Typ 2, neonatale Hypoglykämie, hyperinsulinämische Hypoglykämie |

## Mechanismus
### Bindung der Glucose

Aus röntgenkristallographischen Untersuchungen der Hexokinase aus Hefe hat man gezeigt, dass die Bindung von Glucose am aktiven Zentrum eine starke Konformationsänderung des Enzyms induziert. Die Hexokinase besteht aus zwei Lappen und bei Bindung der Glucose bewegen sich die Lappen aufeinander zu. Dabei dreht sich ein Lappen um zwölf Grad relativ zum anderen, was zu Bewegungen des Polypeptidrückgrats von 0,8 nm führt. Die durch Induced Fit hervorgerufene Schließung des Spaltes in der Hexokinase sorgt für die Umhüllung der Glucose, außer der Hydroxygruppe am C6-Atom, auf der anschließend eine Phosphorylgruppe vom ATP übertragen wird. Die durch die Glucose induzierten Strukturveränderungen haben zwei Vorteile:
* Die Umgebung der Glucose wird unpolarer, was die Reaktion mit der hydrophilen Hydroxygruppe der Glucose und der terminalen Phosphatgruppe des ATP begünstigt.
* Die Hexokinase drängt Wasser aus dem aktiven Zentrum heraus und sorgt dafür, dass Wasser nicht die γ-Phosphatgruppe des ATP angreift. Falls es doch zur Hydrolyse von ATP kommen sollte, entstünden ADP und P$_i$.
Die Hexokinase ist nur dann aktiv, wenn Mg$^{2+}$-Ionen (oder andere zweiwertige Metallionen wie Mn$^{2+}$) vorhanden sind.

### Reaktion am aktiven Zentrum

Die Hexokinase führt einen willkürlichen „bi-bi“-Reaktionsmechanismus aus, bei dem das Enzym vor der Reaktion einen ternären Komplex (Proteinkomplex aus drei verschiedenen Molekülen, die miteinander in Verbindung stehen) mit Glucose und Mg$^{2+}$–ATP bildet. Dabei führt die Hydroxygruppe am C6-Atom der Glucose einen nukleophilen Angriff auf die γ-Phosphatgruppe von ATP aus und bildet als Abgangsgruppe das ADP. Dieser Mechanismus ist auch als S$_N$2-Mechanismus bekannt. Als Produkt entsteht Glucose-6-phosphat. Die Komplexierung des Mg$^{2+}$-Ions mit ATP dient vermutlich dafür, dass durch die Abschmirmung der negativen Ladungen der Sauerstoffatome der nukleophile Angriff am Phosphoratom erleichtert wird. Die genaue(n) Position(en) des Mg$^{2+}$-Ions im Komplex mit ATP während der Reaktion konnte(n) noch nicht endgültig ermittelt werden.

## Regulation

Glucose-6-phosphat ist ein potenter Inhibitor der Hexokinasen 1–3 mit einer Inhibitionskonstante (K$_i$) von 10–30 mM. Es existieren zwei Modelle, welche die inhibitorische Wirkung von Glucose-6-phosphat darstellen:
* Glucose-6-phosphat bindet sich als allosterischer Inhibitor fest an die N-terminale Domäne, um so die geschlossene Konformation der N-terminalen Domäne zu stabilisieren. Die geschlossene N-terminale Domäne stabilisiert vermutlich die flexible Unterdomäne der C-terminalen Hälfte des Enzyms (wo sich auch das aktive Zentrum befindet), und zwar so, dass die Bindung zu ATP unterbunden wird.
* Glucose-6-phosphat wirkt als kompetitiver Inhibitor, der mit ATP um die C-terminale Domäne als Bindungsstelle konkurriert.
Bei Hexokinase 1 kann die Hemmung durch Glucose-6-phosphat durch physiologische Konzentrationen an P$_i$ wieder aufgehoben werden. Fang et al. (1998) beschrieben zwei mögliche Mechanismen zur Aufhebung der Hemmung durch P$_i$:
* P$_i$ konkurriert mit Glucose-6-phosphat um die allosterische Bindungsstelle in der N-terminalen Hälfte des Enzyms.
* P$_i$ bindet sich an die N-terminale Hälfte des Enzyms und verdrängt somit Glucose-6-phosphat aus dem aktiven Zentrum in der C-terminalen Hälfte über einen indirekten Mechanismus.
In beiden Fällen wird durch Bindung an der N-terminalen Domäne durch P$_i$ die Katalyse in der C-terminalen Region durch einen allosterischen Mechanismus reguliert. Fang et al. zeigten ebenfalls, dass die regulatorische Bindungsstelle für P$_i$ sich in der N-terminalen Domäne befindet, die auch die niederaffine Bindungsstelle für Glucose-6-phosphat enthält.
Glucokinase wird nicht durch Glucose-6-phosphat gehemmt. Dies ermöglicht eine fortgesetzte Signalausgabe (z. B. um die Insulinfreisetzung auszulösen) unter signifikanten Mengen an G6P.

## Stoffwechsel

Gene, Proteine und Metaboliten sind zu den jeweiligen Artikeln in Wikipedia, WikiPathways oder Entrez Gene verlinkt.