Conservação in vitro e ex situ e valorização de endemismos ibéricos das Apiaceae portuguesas

Palavras-chave: Apiaceae,Óleos essenciais,Quimiotaxonomia

As ameaças crescentes à perda de biodiversidade impõem medidas que invertam essa tendência. A fitodiversidade é a base da vida na Terra e indispensável ao funcionamento dos ecossistemas pelo que a sua conservação é urgente, particularmente a de espécies raras e em maior risco, como as endémicas, de habitats e características muito peculiares. O conhecimento de propriedades intrínsecas a estes taxa promove a sua valorização e interesse e o recurso a técnicas de micropropagação in vitro permite a sua preservação pela utilização e aplicação sustentáveis. Neste contexto, propusemo-nos estudar as Apiaceae ibéricas endémicas com representação em Portugal, identificando catorze taxa pertencentes a onze géneros (Angelica, Bunium, Conopodium, Daucus, Distichoselinum, Eryngium, Ferula, Ferulago, Laserpitium, Seseli, Thapsia), 13 endemismos de Portugal e Espanha e um endemismo exclusivamente português, Daucus carota subsp. halophilus. Este taxon e Angelica pachycarpa, Distichoselinum tenuifolium e Seseli montanum subsp. peixotoanum têm uma área geográfica de distribuição mais restrita. Priorizando a colheita sustentada das espécies mais ameaçadas, pelo estudo de Floras, exemplares de Herbário e outra informação disponível, procedeu-se à localização, identificação, conservação e valorização de treze dos taxa, estando apenas Bunium macuca subsp. macuca por localizar. Para isso, foi feito o reconhecimento das localidades e representação em Portugal, em mais de 150 saídas de campo de norte a sul e os respetivos exemplares voucher depositados no Herbário COI. A avaliação do ciclo de vida e fenologia é determinante para a colheita sustentada, tendo-se recolhido 11 taxa para o banco de sementes, dos quais seis foram novidade e integrados pela primeira vez no banco de sementes do Jardim Botânico de Coimbra, Banco de Germoplasma de Braga e do Millenium Seed Bank, em Kew. A reserva no Jardim Botânico foi implementada para a conservação ex situ (sementes e coleções vivas) e in vitro e in situ das plantas, com recurso à micropropagação dos quatro taxa prioritários e respetiva aclimatização em condições naturais. Para a caraterização morfológica dos taxa, e dada a grande complexidade taxonómica da família, recorreu-se a metodologias complementares, como a morfometria, microscopia ótica e de scanning, citometria de fluxo e caracterização de óleos essenciais, para distinguir Daucus carota subsp. maximus das outras três subespécies nativas de Portugal (D. carota subsp. carota; D. carota subsp. halophilus; D. carota subsp. gummifer). Estudos similares permitiram distinguir duas subespécies de Eryngium duriaei, nomeadamente, Eryngium duriaei subsp. duriaei e Eryngium duriaei subsp. juresianum. Nos quatro taxa mais vulneráveis estabeleceram-se protocolos de micropropagação com vista à multiplicação em larga escala. Foram testados diferentes tipos de explantes (ápices caulinares, segmentos foliares, pecíolos e raízes) e diferentes técnicas de micropropagação: proliferação de meristemas, organogénese e embriogénese somática. Para todos os taxa foi possível a regeneração por proliferação de meristemas e por embriogénese somática bem como a respetiva aclimatação de plantas. Para alguns dos taxa foi possível verificar que a cultura in vitro não induziu variabilidade ao nível do cariótipo. Para além dos ensaios de micropropagação, estabeleceu-se também um protocolo de indução floral in vitro em Daucus carota subsp. halophilus tendo-se otimizado as condições de indução de floração e caracterizado este processo de morfogénese quer em termos das condições de cultura quer do desenvolvimento floral por microscopia ótica e eletrónica de varrimento. Os resultados mostraram que o IAA e a BA são importantes na evocação floral. A análise do pólen mostrou que embora este fosse formado in vitro não foi possível conseguir a sua germinação quer em meio sintético quer em polinizações artificiais. Outro aspeto importante do trabalho centrou-se na caracterização dos óleos essenciais de alguns taxa de forma a conseguir a sua valorização e uma mais fácil aceitação em termos de conservação. Este tipo de análises foi realizado em Daucus carota subsp. halophilus, Distichoselinum tenuifolium, Seseli montanum subsp. peixotoanum e Eryngium duriaei, (duas subespécies: Eryngium duriaei subsp. duriaei e Eryngium duriaei subsp. juresianum) e ainda Thapsia minor. A composição química dos óleos foi determinada por cromatografia gás-líquido de alta resolução e cromatografia gás-líquido acoplada a espectrometria de massa. Para a maioria dos óleos foram conseguidas percentagens de identificação superiores a 90%. Os óleos foram obtidos de plantas em diferentes estágios de desenvolvimento, com o objetivo de identificar a fase de maior rendimento em óleo essencial ou que produz óleos de composição particular. Foi feita a avaliação da atividade antifúngica de óleos essenciais com vista à validação científica de usos populares e eventual avaliação do seu potencial industrial. Os óleos essenciais que apresentaram maior atividade antifúngica foram os de Daucus carota subsp. halophilus, ricos em elemicina, particularmente contra dermatófitos e Cryptococcus neoformans. Os óleos essenciais de Distichoselinum tenuifolium e de Thapsia minor também revelaram ter propriedades antifúngicas, sendo o mirceno e o acetato de geranilo, respetivamente, o constituinte químico maioritário do óleo. Os óleos essenciais mostraram ainda poder ser utilizados como importantes auxiliares de diagnóstico quimiotaxonómico na avaliação, certificação e clarificação taxonómica de dois taxa, Daucus e Eryngium, comprovando-se a asarona como marcador para Daucus carota subsp. maximus e α-neocalitropseno, o constituinte químico marcador exclusivo de Eryngium duriaei subsp. juresianum.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais