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Probióticos e extratos de plantas medicinais na infecção por Helicobacter pylori

Palavras-chave: Probióticos,Helicobacter pylori,Lactobacillus rhamnosus,Bifidobacterium breve,Agrimonia eupatoria

O Helicobacter pylori (H. pylori) é uma bactéria gram negativa e microaerofílica, que coloniza o epitélio gástrico humano. Estima-se que cerca de metade da população mundial se encontre infetada. As principais vias de transmissão são oral-oral e fecal-oral, e a sua prevalência aumenta com a idade e é maior nos países em desenvolvimento. A infeção por H. pylori pode progredir para vários estados patológicos, incluindo gastrite, úlcera péptica, e cancro gástrico. De acordo com o Relatório de Consenso de Maastricht III, a terapia convencional de erradicação de H. pylori, consiste numa terapia tripla que inclui a combinação de dois antibióticos e um inibidor da bomba de protões (PPI) ou sais de bismuto. Nos últimos anos tem-se assistido a um preocupante aumento da resistência deste microrganismo aos regimes terapêuticos, para além de que os antibióticos têm custos elevados e efeitos secundários indesejáveis. A tentativa de manter a eficácia dos regimes anti-H. pylori, e o objetivo de minimizar os seus efeitos secundários, conduziu à pesquisa de terapêuticas adjuvantes, nomeadamente o uso de probióticos e de plantas medicinais. Os probióticos são suplementos alimentares, constituídos por bactérias vivas, que podem produzir efeitos benéficos à saúde humana, podendo melhorar os sintomas da infeção por H. pylori, através de vários mecanismos. As plantas medicinais são utilizadas há muito tempo no tratamento de diversas doenças e uma grande variedade de extratos de plantas medicinais têm sido testados para avaliar o seu potencial efeito anti-H. pylori. O objetivo deste trabalho de investigação foi avaliar o efeito de probióticos e de extratos de plantas medicinais no crescimento de isolados clínicos de H. pylori. Foram utilizados neste estudo 21 isolados clínicos de H. pylori. As estirpes de probióticos testadas foram o Lactobacillus rhamnosus e o Bifidobacterium breve. Avaliou-se o efeito de culturas puras de probióticos e de extratos brutos preparados a partir dessas culturas, no crescimento de 18 isolados H. pylori. O efeito dos extratos de plantas medicinais, Fragaria vesca e Agrimonia eupatoria L., no crescimento de Helicobacter pylori foi estudado em 12 isolados de H. pylori diferentes. Verificou-se que ambos os extratos possuem atividade anti-H. pylori, avaliada através do método de difusão em disco e por ensaio de microdiluição, determinando as CMIs. O extrato Fv possui maior efeito inibitório sobre o H. pylori que o extrato AgC. Não se detectou atividade anti-H. pylori para os probióticos estudados.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde
Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas

Palavras-chave: Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico

As Análises Clínicas atualmente encaradas como método de diagnóstico auxiliar da medicina são, hoje em dia, fulcrais para a investigação de casos clínicos os quais são muitas vezes verdadeiros “enigmas”. No entanto, tal só se tem tornado possível devido à grande tecnologia existente hoje num laboratório de análises clínicas, facilitando assim todo o processo analítico bem como tornando-o mais rápido e eficiente. A qualidade tem de estar presente em todas as etapas do processo analítico, desde a Préanalítica, à Analítica e até Pós-analítica. Só desta forma é possível que o resultado final seja confiável. As Análises Clínicas, com o decorrer dos tempos, tornaram-se indispensáveis na rotina hospitalar como meio auxiliar de diagnóstico, bem como na monitorização da doença. O serviço de Patologia Clínica (SPC) dos Hospitais da Universidade de Coimbra – Centro Hospitalar e Universitário de Coimbra (HUC-CHUC) é um ótimo exemplo do que é a rotina laboratorial num Hospital central, participando no diagnóstico e monitorização clínica dos seus doentes/utentes de todas a especialidades aqui existentes. Este é um serviço onde está implementada alta tecnologia e onde a qualidade de serviço é palavra de ordem, sendo necessária a aplicação de modelos de qualidade. O SPC dos HUC-CHUC está dividido em alguns setores tais como Urgência, Bioquímica, Microbiologia, Imunoserologia, Hormonologia e Virologia, onde todos trabalham em equipa e em benefício de quem está por detrás da amostra biológica que lhes chega para estudar. Neste relatório serão aprofundadas duas das áreas deste serviço, Bioquímica e Imunoserologia, mais especificamente o campo da serologia, com o objetivo de dar a conhecer um pouco do que faz parte da rotina de uma laboratório como o do SPC.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde
Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas

Palavras-chave: Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico

Num laboratório de análises clínicas é possível, a partir de uma amostra clínica, obter valiosas informações que ajudam no diagnóstico, prognóstico, terapêutica, e prevenção da doença no paciente. As análises clínicas são um verdadeiro mundo, sendo hoje em dia possível realizar muitas análises diferentes, a partir de muitos tipos de amostra. O objetivo final é sempre ajudar o doente, e para isso é necessário compreender e conhecer os passos envolvidos na análise de uma amostra, bem como saber interpretar os respetivos resultados e participar ativamente no controlo de qualidade laboratorial. O Serviço de Patologia Clínica (SPC) do Instituto Português de Oncologia (IPO) de Coimbra não foge a esta rotina, e foi o local aonde tive a oportunidade de desenvolver e consolidar conhecimentos na área das análises clínicas. No presente relatório dou a conhecer os diversos setores do SPC – Hematologia, Microbiologia, Química Clínica e Endocrinologia/Imunologia – e aprofundo posteriormente as atividades nas quais tive a oportunidade de participar nos setores de Microbiologia e de Hematologia. Também é descrito o processo de controlo da qualidade nestes setores, salientando a sua importância na validação de resultados no SPC do IPO de Coimbra.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde
Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas

Palavras-chave: Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico

A citogenética emerge como uma área essencial para o estudo de anomalias cromossómicas em diagnóstico pré-natal, pós-natal e cancro. Dado o desenvolvimento tecnológico dos últimos anos, surgiram novas técnicas para o estudo do genoma, tornando mais abrangentes e sensíveis os estudos efetuados nos laboratórios de citogenética. Deste modo, além de um diagnóstico mais preciso, existe também a possibilidade de detetar novas alterações cromossómicas e estabelecer novas relações genótipo-fenótipo. Estas relações são cruciais, tanto no campo da investigação científica, permitindo a descoberta de novas síndromes, como para o doente e para os seus familiares de modo a estabelecer riscos de recorrência e determinar as suas opções reprodutivas. O principal objetivo deste trabalho é analisar alguns casos clínicos, através de diferentes tecnologias, de forma a estabelecer a relação genótipo-fenótipo e compreender as dificuldades inerentes a esse processo.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde
MDMA e seus metabolitos : efeito vascular e toxicidade

Palavras-chave: N-Metil-3,4-Metilenodioxianfetamina,Toxicidade,Serotonina,Artérias mamárias

A 3,4 – Metilenodioximetanfetamina (MDMA), comumente designada por ecstasy, é uma droga sintética, ilegal e de elevado potencial de abuso. O seu consumo está particularmente associado a ambientes nocturnos, festas e conceitos musicais específicos, como a música eletrónica ou a cultura dance, numa população essencialmente jovem, com o intuito de aumentar a energia, performance física e anímica, e portanto o prazer. A sensação de bem-estar, a felicidade, a euforia, a desinibição, a alteração da percepção sensorial são alguns dos efeitos psicológicos do ecstasy. No entanto, com o seu uso estão relacionados diversos mecanismos de toxicidade: eventos cardiovasculares, nomeadamente, aumento da pressão arterial, taquicardia, arritmia, vasoconstrição ou mesmo enfarte agudo do miocárdio ou morte súbita; a hipertermia, rabdomiólise e hepatotoxicidade; a neurotoxicidade, por acção da serotonina, a noradrenalina ou a dopamina; perturbações psicológicas são efeitos comuns que podem surgir a longo prazo, tais como alucinações, delírios, ataques de pânico, alterações comportamentais e cognitivas, depressão ou mesmo o suicídio. Uma particularidade do MDMA reside no facto de os seus produtos da metabolização hepática serem mais tóxicos do que a própria molécula. A sua metabolização envolve um primeiro passo de N-demetilação, originando a 3,4 – Metilenodioxianfetamina (MDA). A MDMA e este produto, por sua vez sofrem O-demetilação, formando-se respetivamente N-Metil-α-Metildopamina (N-Me-α-MeDA) e α-Metildopamina (α-MeDA). Estes dois produtos podem sofrer reação de oxidação, formando-se quinonas, que na presença de glutationa (GSH) dão origem a conjugados glutationil o 5-(GSH)-N-Me-α-MeDA e 5-(GSH)-α-MeDA, que já demonstraram toxicidade superior ao próprio MDMA. Assim, o objectivo deste estudo é avaliar contratilidade vascular ao MDMA e seus metabolitos a 37ºC, tendo como base o mecanismo fisiológico de contracção vascular à serotonina (5-HT). Para a realização deste estudo ex vivo seleccionámos a artéria mamária interna humana (AMIH), como modelo vascular, artéria amplamente utilizada, actualmente, como enxerto em cirurgia de bypass coronário. Os resultados mostraram haver resposta contráctil da AMIH tanto ao MDMA, como aos metabolitos α-MeDA e N-Me-α-MeDA. Estes dois metabolitos provocaram alteração da curva concentração-resposta (controlo), produzindo um desvio da curva da 5-HT para a direita, indicando tratar-se de agonismo parcial. Os metabolitos 5-(GSH)-N-Me-α-MeDA e IV 5-(GSH)-α-MeDA não provocaram contracção arterial, no entanto o comportamento de ambas sugere tratar-se de substâncias antagonistas.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde
Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas

Palavras-chave: Relatório,Técnicas e métodos de laboratório

O presente trabalho apresenta as atividades desenvolvidas no âmbito do estágio curricular, inserido no Mestrado em Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. O referido estágio realizou-se no Laboratório de Análises Clínicas do Centro de Saúde Militar de Coimbra, de Dezembro de 2014 a Maio de 2015, sob a orientação do Dr. Mário João Roque. Neste relatório serão apresentados os métodos usados na execução das análises, a sua importância clínica, a organização diária e o sistema de gestão de qualidade implementado no laboratório. Serão desenvolvidos de modo mais detalhado os sectores de hematologia e bioquímica

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde
Farmacogenómica/farmacogenética : realidades e perspectivas na prática clínica

Palavras-chave: Farmacogenética,Farmacogenómica,Varfarina

A saúde pública abrange várias preocupações actuais, entre elas, o uso racional do medicamento com a consequente optimização das terapêuticas. Esta optimização assenta em dois grandes focos: a segurança e a efectividade, sendo intervenções prioritárias a anulação de problemas relacionados com a segurança (reacções adversas) e a maximização de questões relacionadas com a efectividade. Neste contexto, a Farmacogenómica é hoje uma área em expansão e poderá deter as ferramentas necessárias que possibilitam a construção de respostas terapêuticas dirigidas ao perfil genético dos indivíduos, permitindo respeitar a variabilidade intra e inter-individual. Este trabalho tem como objectivos: avaliar a utilização da Farmacogenómica na prática clínica hospitalar em Portugal Continental; identificar as competências necessárias a desenvolver para aplicação de técnicas de Farmacogenómica - Médico/Farmacêutico; analisar quais as futuras áreas potenciais de aplicação da Farmacogenómica na prática clínica. Para dar resposta aos objectivos definidos foram realizados dois sub-estudos distintos. O sub-estudo 1, um estudo transversal descritivo, cuja informação foi recolhida junto de serviços hospitalares previamente definidos; e o sub-estudo 2, que se baseou numa técnica de consenso – Painel Delphi. No sub-estudo 1 obteve-se informação de 4 serviços do IPO de Lisboa, 1 serviço do IPO do Coimbra e 4 serviços do IPO do Porto, e nestes serviços maioritariamente a utilização da genética nas decisões terapêuticas, quando se verifica, não é numa perspectiva farmacogenómica, mas sim numa perspectiva de caracterização da doença ou do seu estadio. No sub-estudo 2, das instituições identificadas para a indicação dos peritos, as poucas respostas recepcionadas foram maioritariamente via telefone, (uma vez que foi feito um reforço telefónico para maior brevidade na resposta), foram todas negativas, argumentando que não havia peritos na área de estudo identificada. Da pesquisa e das informações recolhidas a farmacogenómica/farmacogenética parece ser um campo de investigação que apresenta ainda algumas fragilidades. Podem ser identificados nichos de potencial interesse na utilização da Farmacogenómica, nomeadamente nas áreas da genética, oncologia e doenças infecciosas, em que os fármacos manuseados são aqueles que se encaixam exactamente na utilidade da farmacogenómica/farmacogenética: fármacos com margem terapêutica estreita. Na perspectiva de concretizar o estado da arte da utilização da farmacogenómica/farmacogenética numa área clínica em particular optou-se por realizar uma revisão bibliográfica sobre esta matéria em doentes que fazem terapêutica com varfarina.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde
Estudo piloto para a avaliação da influência de diferentes veículos e formulações na biodisponibilidade da lamotrigina

Palavras-chave: Anticonvulsivos,Biodisponibilidade

A epilepsia é uma patologia de enorme prevalência, conhecida desde os tempos remotos, cujas alternativas terapêuticas surgem de forma consistente apenas na década de 70 do século XX. Os denominados antiepilépticos clássicos incluem: a Carbamazepina (CBZ), a Fenitoína (PHE), o Fenobarbital (PB) e o Ácido Valpróico (VPA). Estes medicamentos de 1ª geração têm associados a si uma fraca tolerabilidade, na maioria das vezes motivada pela própria existência de interacções entre eles, como resultado da frequente associação farmacológica no controlo das crises epilépticas. A necessidade de melhorar a qualidade de vida de doentes que padecem desta doença originou que surgissem novos fármacos, entre os quais a Lamotrigina (LTG). A Lamotrigina é um antiepiléptico de nova geração que apresenta um vasto espectro de eficácia, nomeadamente na abordagem de crises parciais com ou sem generalização secundária, de crises tónico-clónicas primariamente generalizadas, de crises de ausência e de crises atónicas. Embora na prática clínica a Lamotrigina seja razoavelmente bem tolerada pelos doentes, a dificuldade que existe no estabelecimento de uma relação bem definida entre os níveis plasmáticos obtidos e a resposta farmacológica desencadeada faz com que, actualmente, seja ainda difícil determinar o valor clínico deste antiepiléptico. Partindo do princípio que a interpretação dos níveis plasmáticos da Lamotrigina reflectem as concentrações atingidas no local de acção (cérebro), não é surpreendente o facto da caracterização do perfil neurofarmacocinético da Lamotrigina estar na origem de um aprofundar do conhecimento existente quanto à forma como este fármaco actua a nível central. Por razões de ordem ética e logística, tal estudo só poderá ser realizado em animais de laboratório, sendo necessário para o efeito que, numa primeira fase, se proceda à selecção da formulação galénica a utilizar na execução do protocolo experimental. Uma vez seleccionada a via intraperitoneal, a Lamotrigina, pelas suas características lipofílicas, pode ser administrada sob a forma de diferentes formulações galénicas que, neste trabalho, se reportam a uma solução aquosa de isotionato de Lamotrigina, a uma solução lipofílica de Lamotrigina em propilenoglicol a 50% e a uma suspensão de Lamotrigina em metilcelulose a 0,25%. Deste modo, neste estudo piloto avalia-se o comportamento cinético das diferentes formulações, comparando os diferentes perfis plasmáticos versus cerebrais, tendo sido possível concluir que, pelas características demonstradas quanto à sua biodisponibilidade e reprodutibilidade, a solução aquosa corresponde à melhor opção para alcançar os objectivos pretendidos.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde
Síndroma de transfusão feto-fetal

Palavras-chave: Transfusão feto-fetal,Complicações da gravidez

A Síndrome de Transfusão Feto-Fetal é uma complicação grave das gestações gemelares monocoriónicas, estando na maioria dos casos associada a um prognóstico pouco favorável. A patologia surge como consequência de alterações no fluxo sanguíneo placentário, tendo as anastomoses vasculares placentárias inter-fetais um papel preponderante. Estas alterações levam a uma discrepância na volémia dos fetos e a um conjunto de manifestações daí decorrentes, podendo ir desde uma simples discrepância de crescimento até à morte in utero de um ou de ambos os fetos. O diagnóstico da Síndrome de Transfusão Feto-Fetal exige uma grande acuidade clínica, baseando-se principalmente em critérios ultrasonográficos. As modalidades terapêuticas mais aconselhadas são a coagulação laser de anastomoses e a amniodrenagem que, apesar de apresentarem ainda limitações importantes, podem contribuir fortemente na melhoria do prognóstico fetal. O presente trabalho tem como objectivo proceder à exposição de um caso clínico ilustrativo da Síndrome de Transfusão Feto-Fetal e efectuar uma revisão da literatura sobre esta patologia, de forma a permitir o enquadramento do caso no conhecimento actual, principalmente no que diz respeito à abordagem diagnóstica e terapêutica.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde
Alterações cognitivas e demência na doença de Parkinson

Palavras-chave: Doença de Parkinson,Demência

Na Doença de Parkinson (DP), mesmo nos seus estádios iniciais, vários domínios cognitivos estão alterados, incluindo funções executivas, funções visuo-espaciais, memória e linguagem. O risco de um doente de Parkinson desenvolver demência é cerca de seis vezes superior ao da população em geral, e esse risco aumenta com a progressão da doença. Clinicamente, a demência na doença Parkinson (DDP) caracteriza-se por um declínio cognitivo lento e progressivo, dominado por um síndrome disexecutivo frequentemente acompanhado de alterações comportamentais, depressão, ansiedade e alucinações visuais. Os mecanismos fisiopatológicos subjacentes à DDP ainda não estão completamente esclarecidos. Pensa-se que o envolvimento das estruturas subcorticais e corticais por Corpos de Lewy, tranças neurofibrilares e placas senis típicas da Doença de Alzheimer (DA), bem como a degenerescência de diversos sistemas de neurotransmissores, incluindo o dopaminérgico e o colinérgico, estejam implicados no seu desenvolvimento. O tratamento das alterações cognitivas e da demência associada à DP continua a ser sintomático. Evidências recentes sugerem que os inibidores da acetilcolinesterase são fármacos de primeira linha, com relativa ausência de efeitos colaterais.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde
Desenvolvimento de uma vacina oral contra giarda lamblia

Palavras-chave: Giardia lamblia,infeção,nanopartículas,quitosano,intestino,IgA.

Giardia lamblia é o parasita mais comum em todo mundo, responsável por vários distúrbios intestinais, principalmente diarreia e síndrome de má absorção. A infeção por Giardia tem um impacto adverso sobre o crescimento infantil e desenvolvimento psicomotor. Dado ser uma infeção que afeta a população a nível mundial, a comunidade científica tem apostado no desenvolvimento de uma vacina que previna esta doença, de modo a diminuir a sua incidência e proteger a população. Desta forma, com este projeto pretendeu-se desenvolver uma vacina oral baseada na encapsulação de um antigénio deste parasita, β-giardina, em nanopartículas de quitosano revestidas por alginato de sódio de forma a torná-las resistentes à sua passagem pelo estômago e, assim, chegarem ao seu alvo intactas. A primeira parte do trabalho consistiu na preparação das nanopartículas e sua caracterização. Numa segunda fase, as nanopartículas carregadas com o antigénio foram administradas a murganhos fêmea e pesquisaram-se os níveis de anticorpos totais e específicos no soro, lavagens intestinais, lavagens vaginais e fezes. Os efeitos in vitro dos lavados intestinais e do soro na aderência e morfologia do parasita foram também avaliados. Neste trabalho obteve-se uma eficácia de encapsulamento do antigénio de β-giardina de 100 %. Através do método de ELISA verificou-se a presença de IgG específica anti-β-giardina no soro e aumento do seu título após reforços. Observou-se igualmente uma concentração de IgA total maior nos animais imunizados que no grupo controlo. Nos lavados intestinais detetaram-se concentrações elevadas de IgA total, no entanto não foi possível detectar IgG e IgA específicas anti-β-giardina. Relativamente aos estudos in vitro, os lavados intestinais inibiram a aderência do parasita em 7 %. A vacina desenvolvida, baseada em nanopartículas de quitosano revestidas com alginato e carregadas de antigénio β-giardina, induziu uma resposta imunológica adaptativa nos animais em estudo. Houve produção de anticorpos ao nível da mucosa intestinal e no soro, nomeadamente IgA e IgG. Os resultados obtidos nos testes de aderência indicam uma inibição da aderência do parasita potencialmente devido aos anticorpos presentes nos lavados intestinais

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde
Relatório de estágio: mestrado em análises clínicas

Palavras-chave: Técnicas e métodos de laboratório,Relatório

Este relatório tem como objetivo descrever as atividades desenvolvidas durante o estágio curricular do último ano do Mestrado em Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. O estágio incluiu a integração nos serviços de Hematologia Laboratorial, Imunologia, Química Clínica e Microbiologia do Centro Hospitalar do Porto, estando este relatório centrado nas áreas de Hematologia Laboratorial e Imunologia. É apresentada uma descrição detalhada destas duas valências, onde são referidos todos os parâmetros determinados e metodologias utilizadas, assim como a interpretação dos resultados laboratoriais e sua importância clínica.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde