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O Hemisuccinato de Colesterol na Etiologia da Aterogénese

Palavras-chave: Colesterol,Lipoproteínas,Aterosclerose

O excesso de colesterol circulante no plasma sanguíneo, sob a forma de lipoproteínas (LDL), pode em certas regiões das artérias ser acumulado no interior da sua parede devido à força exercida pela pressão que é favorável à entrada por fenestrações na camada endotelial. Neste espaço inicia-­‐se a modificação química dessas mesmas partículas, o que desencadeia uma resposta inflamatória e posterior internalização por macrófagos provenientes do fluxo sanguíneo, depois de diferenciados. Deste processo resultam as conhecidas “´células-­‐espumosas” que estão na base dos processos de desenvolvimento da Aterosclerose. O estado patológico deste tipo de macrófagos (preenchidos de lípido), designado por lipidose, apresenta uma relação directa com LDL quimicamente modificadas por oxidação. Os oxoésteres de colesterol são dos produtos finais deste processo, sendo os hemiésteres seus derivados. Neste estudo, é avaliado o hemisuccinato de colesterol (CHS), no que diz respeito ao seu papel na etiologia da aterogénese. Para tal, incubamos macrófagos com concentrações sub-­‐tóxicas de LDL enriquecidas em CHS, durante 40 dias, e avaliamos de forma sistemática a internalização de CHS, toxicidade e alteração a nível morfológico, recorrendo a microscopia confocal. Nestas condições experimentais foi possível observar o desencadear de um fenótipo nunca antes verificado, em que os lisossomas assumem dimensões “gigantescas”. Experiências com uma sonda fluorescente, permitiram observar que a acidificação foi um processo preservado. Além disso, por ensaios de fagocitose foi possível verificar que os lisossomas mantiveram a sua capacidade fusogénica. Porém, 40 dias após tratamento, constatamos por imunofluorescência, a aquisição de efectores autofágicos, sugerindo alteração no organelo atípico, com características lisossomais, observado nos macrófagos. De realçar que a viabilidade celular não parece alterada em todo este processo. Dada a implicação dos lisossomas na formação de células-­‐espumosas lipidóticas, pensamos que os resultados obtidos podem ser importantes nos processos iniciais de formação do ateroma. A sua importância irá ser explorada num futuro próximo.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Novas formulações lipossomais vectorizadas para aplicação em terapia fotodinâmica

Palavras-chave: Cancro,Terapia fotodinâmica,Fotossensibilizador,Lipossomas,Vectorização

O cancro caracteriza-se como uma doença com elevada incidência e o seu índice de mortalidade continua a ser avassalador devido ao facto de, nalgumas neoplasias, não existir um tratamento eficaz. As modalidades terapêuticas convencionais como a cirurgia, quimioterapia e radioterapia têm em comum a falta de selectividade e o surgimento de efeitos secundários devido à elevada toxicidade para as células saudáveis. Quando comparada com os métodos terapêuticos convencionais, a terapia fotodinâmica destaca-se pela elevada selectividade (acumulação e retenção) do fotossensibilizador para as células tumorais que permite minimizar os danos nos tecidos saudáveis. A PDT é uma modalidade terapêutica que se baseia na combinação de três factores: uma molécula fotossensibilizadora (PS), um feixe de luz de comprimento de onda específico e a presença de oxigénio molecular. A encapsulação destes fotossensibilizadores em lipossomas “peguilados” e conjugados com ligandos de receptores sobreexpressos nas células tumorais permitem aumentar o índice terapêutico. Com este projecto, pretende-se desenvolver uma formulação lipossomal, encapsulando uma molécula fotossensibilizadora (bacterioclorina), com características físico-químicas adequadas a uma potencial administração intravenosa e vectorizada com transferrina, enquanto nova abordagem terapêutica para o cancro. Diferentes formulações lipossomais (compreendendo diversas composições lipídicas e rácios fármaco/lípido) foram desenvolvidas, mediante várias condições experimentais, e caracterizadas com o objectivo de obter uma formulação com elevados parâmetros de encapsulação e propriedades físico-químicas compatíveis com uma futura aplicação PDT. Estudos de associação celular em células de cancro do pulmão (A549), avaliados por espectroscopia de fluorescência, demonstraram que lipossomas encapsulando a bacterioclorina e vectorizados com transferrina, promoveram aproximadamente duas vezes mais internalização celular em comparação com lipossomas não vectorizados com transferrina (lipossomas controlo). Em estudos de associação celular adicionais, lipossomas vectorizados com transferrina e encapsulando outro fotossensibilizador hidrofóbico (p-THPP) não manifestaram diferença na internalização celular entre a formulação vectorizada com transferrina e a não vectorizada.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
A Construção da Toxicodependência como Doença através das Práticas

Palavras-chave: Biomedicina,Práticas,Toxicodependência

As práticas que giram em torno de um objeto, atribuem significado a esse mesmo objeto, constroem-no. De acordo com esta ideia, foi definido o objetivo de compreender de que forma as práticas permitem construir a toxicodependência como um facto biomédico, nomeadamente uma doença. Para isso, foi efetuada recolha de dados numa unidade de desabituação de substâncias psicoativas, a unidade T, durante um semestre letivo, através da observação participante, realização de entrevistas semidiretivas aos técnicos e análise de documentação. A unidade T apresenta como objetivo a desabituação de substâncias psicoativas. Os profissionais da T constituem uma equipa multidisciplinar, porém fazem parte de um coletivo de pensamento que compreende a toxicodependência como uma doença, de acordo com o conhecimento biomédico. O programa terapêutico compreende a farmacoterapia, a psicoterapia e abordagens socioterapêuticas e ludicoterapêuticas. A farmacoterapia tem em conta a neurobiologia da adição e é o aspeto central do tratamento, reforçando a ideia do self neuroquímico. As outras abordagens têm em conta as vertentes psicológica e social e visam o reconhecimento da doença e a aquisição de estratégias para prevenir a recaída. Mantém-se a ideia de um self neuroquímico vulnerável à recaída. Porém, a toxicodependência pode ser múltipla, dada a variedade de práticas que sobre ela atuam. Para concluir, as práticas têm subjacente um discurso influenciado por determinados estilos de pensamento. O discurso da biomedicina determina intervenções específicas para se lidar com um objeto. Essas intervenções, por sua vez, dão significado ao objeto. Assim, a atenção centra-se nas práticas, avaliando se estas se adequam ao objeto com todos os seus aspetos. A toxicodependência surge como doença ao ser alvo de intervenções biomédicas. Porém, dada a complexidade deste fenómeno, a abordagem sobre o mesmo deve estender-se a todos os campos do saber.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Ensaios de biocontaminação por microfungos em vários tipos de polímeros

Palavras-chave: Biocidas,Biocontaminação,Microfungos,Micropartículas de sílica,Poliuretano

Actualmente a dependência de materiais poliméricos atingiu níveis em que é difícil não estar constantemente em contacto com eles. A indústria dos plásticos gera milhões em receitas e tende a crescer todos os anos. São diversos os materiais poliméricos produzidos, cada um com as suas características de interesse e adaptados a indústrias específicas. Nos últimos anos, os poliuretanos têm-se destacado pela superioridade apresentada em várias características e têm vindo a substituir muitos dos polímeros utilizados anteriormente. Os poliuretanos podem ser separados em dois grupos, os poliéster e os poliéter conforme o composto que foi utilizado na sua síntese. Os poliéster poliuretanos são susceptíveis a degradação por microrganismos enquanto que os poliéter apresentam resistência. Uma outra indústria com bastante impacto económico, é a dos revestimentos. Os custos associados com a corrosão e degradação de diversas superfícies representam 3% do produto interno bruto das nações mundiais. Os revestimentos são utilizados pela estética e como protecção. As tintas enquadram-se em ambas, podendo ser modificadas incorporando micropartículas de sílica como libertadores controlados de biocidas, aumentando o nível de protecção. Existem diversas espécies de microrganismos fúngicos capazes de degradar polímeros e cuja exposição constante pode potenciar graves problemas de saúde em humanos. É com o intuito de evitar situações destas que são publicadas normas de avaliação a que os produtos devem corresponder. Como tal realizaram-se ensaios de biocontaminação por microfungos em diversos produtos poliméricos novos para avaliar o seu nível de conformidade. Os resultados dos ensaios em poliéter poliuretano foram de encontro à bibliografia disponível mostrando-se resistentes aos ataque dos microfungos, enquanto que os ensaios com os revestimentos demonstraram a falta de eficácia de algumas formulações e o potencial de outras para a protecção contra a degradação fúngica.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Efeito de diferentes tipos de gestão em olivais nos microartrópodes de solo usando uma abordagem funcional

Palavras-chave: Microartrópodes do solo,Colêmbolos,Olivais

Os olivais são um importante sistema agrícola na região mediterrânea, com um papel sócio-cultural, paisagístico e económico elevado. Durante os últimos as grandes pressões humanas têm levado à intensificação de práticas de manejo como a aplicação de pesticidas e a lavoura do solo, causando a degradação dos recursos naturais e a perda da biodiversidade nestes sistemas agrícolas. Há cada vez mais evidências que demonstram o papel crucial da biodiversidade na provisão de serviços do ecossistema. A pesquisa em bioindicadores e, especialmente, em indicadores ecomorfológicos está a ser incentivada por diversas organizações internacionais, tais como a OCDE e a UE. Neste estudo foi usado um índice eco-morfológico, baseado na adaptação dos colêmbolos ao solo, que distingue diferentes morfotipos, para estudar o impacto do manejo do solo e da paisagem na estrutura e composição da comunidade de colêmbolos em olivais. Foram selecionados oito olivais com diferentes tipos de manejo do solo. De cada olival foram retiradas dezasseis amostras: oito na linha das árvores e oito na entrelinha. Contou-se o número de colêmbolos e fez-se a distribuição por diferentes morfotipos e calcularam-se diversos índices funcionais e de biodiversidade. Embora pouco significativo, as amostras retiradas da linha das oliveiras (debaixo das copas) influenciou positivamente os descritores funcionais e de biodiversidade, possivelmente devido ao maior sombreamento quando comparado com a entrelinha. A aplicação de herbicida e o corte superficial nas ervas daninhas não mostrou ter nenhum efeito na comunidade de colêmbolos. A lavoura do solo num olival teve um grande impacto negativo nos descritores funcionais e de biodiversidade. Além disso, de todos os tipos de variáveis de manejo, apenas a pastagem originou diferenças significativas entre olivais, enquanto que, dos parâmetros de solo, a principal causa das diferenças entre os olivais foi a capacidade de retenção de água. A análise de partição de variáveis atribui aos parâmetros de solo a maior percentagem de explicação, seguida pelas variáveis de manejo do olival e por último pelas variáveis de paisagem.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Mato, Lepra e Leprosaria. Cosmovisão, Doença e Cura entre os Felupes da Guiné-Bissau

Palavras-chave: Lepra,Doença Hansen,Felupes,Guiné Bisaau,Representações sociais,Itinerários terapêuticos

Esta dissertação pretende fazer a abordagem da lepra entre os felupes (diola) da Guiné-Bissau. Partindo do conhecimento da sua cosmovisão e concepções sobre a doença e a cura, vislumbra-se alcançar o universo das representações sobre o mal como doença e a análise dos itinerários terapêuticos empreendidos, entre a procura da cura no âmbito tradicional até ao encontro da cura na esfera da biomedicina. A construção desta dissertação, assentou na pesquisa etnográfica na aldeia de Suzana (a norte da Guiné-Bissau) e na leprosaria de Cumura em Bissau, sendo esta última complementada com pesquisa documental. Pretende-se dar conta da dimensão humana da lepra entre os felupes na demanda da cura, desde o ponto central da sua sociedade e cultura até um eixo periférico à sua racionalidade, a biomedicina, onde efectivamente alcança a cura da patologia. Ao longo dos percursos terapêuticos, há a procura do apaziguar do sofrimento, que se vai configurando entre um sofrimento social até ao sofrimento pelo sintoma, isto é, há uma oscilação entre o healing e o curing, tentando-se capitalizar o melhor de cada um dos sectores de cuidados. A leprosaria, emerge como legado da biopolítica de uma estratégia colonial de confinar a doença, assumindo depois, pela medicina missionária, um meio de caridade e um uso evangelizador.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
A metodologia de projecto na aprendizagem da biodiversidade e geodiversidade na praia da concha

Palavras-chave: Biodiversidade,Geodiversidade,Metodologia de projeto,Trabalho de campo,Trabalho cooperativo

Este trabalho consistiu na implementação e avaliação da metodologia de projeto no estudo da Biodiversidade e Geodiversidade na Praia da Concha, Portugal Central, dando ênfase ao trabalho prático, através de uma aula de campo e de aulas laboratoriais. O trabalho foi realizado numa escola da Marinha Grande, com 11 alunos do 10º ano de escolaridade. Sendo a metodologia de projeto uma prática didática em que a aprendizagem é centrada no aluno e baseada em princípios construtivistas, os alunos trabalharam em grupo, definindo os objetivos a atingir, identificando as atividades a desenvolver e o produto final. A professora construiu materiais didáticos que foram utilizados pelos alunos nas atividades implementadas: ficha petrográfica; tabela de identificação de fósseis e icnofósseis; protocolo experimental para análise morfoscópica de grãos de areia; chave dicotómica para identificação de invertebrados; ficha de registo para identificação da flora litoral; e ficha de registo para identificação de aves. Os instrumentos construídos foram grelhas de observação e avaliação e fichas de avaliação intermédia, de autoavaliação intermédia, de avaliação final e de autoavaliação final. Os alunos elaboraram o guião da aula de campo, realizaram uma aula de campo e várias atividades laboratoriais, em aulas pós campo, com a orientação da professora. A partir dos dados obtidos construíram um roteiro da Praia da Concha, destacando a sua Biodiversidade, a sua Geodiversidade e a Ação Antrópica. A implementação da metodologia de projeto foi considerada, pela maioria dos alunos, como muito interessante e motivante para as aprendizagens e consolidação de conhecimentos, para a compreensão da importância do trabalho autónomo e para o desenvolvimento de atitudes de cooperação e interação. Dos objetivos propostos apenas aquele que incluía a interdisciplinaridade não foi totalmente conseguido, devendo a professora procurar novas formas de envolver as diferentes disciplinas em projetos futuros

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Efeito da perturbação ambiental e antrópica na variabilidade dos agrupamentos piscícolas em cursos intermitentes

Palavras-chave: Peixes,Portugal (Sul),Cursos de água

Os cursos de água do sul de Portugal apresentam grandes variações sazonais e inter-anuais nas condições ambientais, decorrentes da influência do clima Mediterrânico. Com o início do verão um grande número de cursos perdem a conectividade longitudinal ficando reduzidos a pegos onde o biota aquático fica confinado durante o estio. Muitos destes cursos de água apresentam-se degradados devido à pressão antrópica. Neste sentido, o objetivo deste estudo consistiu em avaliar o efeito da pressão antrópica sobre a persistência e estabilidade dos agrupamentos piscícolas entre a primavera e o verão, em 15 cursos de água intermitentes do sul de Portugal. Os cursos de água sujeitos a pressão antrópica apresentaram elevados constrangimentos ambientais para a fauna piscícola, particularmente durante o verão devido à elevada concentração de nutrientes e à produção fitoplanctónica. Os locais com moderada degradação foram aqueles que sofreram maior agravamento das condições ambientais e consequentemente maior instabilidade nos agrupamentos piscícolas. Os cursos de água em bom estado apresentaram grande heterogeneidade no mosaico de habitat, com elevada disponibilidade de habitats com corrente, água com reduzida turvação e elevado ensombramento, proveniente da galeria ripária. Nestes locais observou-se maior riqueza e abundância de espécies nativas em comparação com os troços degradados. Em oposição, as espécies exóticas apresentaram maior representatividade e dominância em locais degradados. Os locais em bom estado exibiram elevada estabilidade e persistência das comunidades piscícolas, sobretudo durante o verão, tendo-se verificado um aumento da instabilidade e perda de integridade dos agrupamentos com o incremento de pressão antrópica. No contexto atual das condições dos cursos intermitentes do sul de Portugal, a estabilidade e integridade das comunidades piscícolas depende dos efeitos diretos e indiretos da variabilidade natural destes sistemas, tanto à escala inter-anual como sazonal, juntamente com a pressão antrópica a que estão sujeitos. Estes resultados enfatizam a elevada vulnerabilidade destes cursos à degradação e reforçam a necessidade de integrar a escala temporal nos programas de conservação e reabilitação destes cursos.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Embriogénese somática e outros ensaios in vitro em duas espécies de loureiro (Laurus nobilis e Laurus azorica)

Palavras-chave: Auxina,Estudos histológicos,Gemas caulinares,In vitro,Tecido embriogénico

O loureiro (Laurus nobilis L.) é uma árvore ou arbusto da família Lauraceae. Encontra-se distribuído por toda a bacia do Mediterrânico onde as suas folhas são muito utilizadas na culinária. O loureiro-bravo (Laurus azorica (Seub.) Franco) é um arbusto ou árvore da mesma família cuja distribuição está limitada ao arquipélago dos Açores, sendo importante medidas de conservação da espécie, que já foi catalogada no livro vermelho das espécies ameaçadas. Ambas as espécies são dióicas e têm baixas taxas de germinação natural. A propagação por métodos convencionais também não ocorre com facilidade. Assim, estudos de embriogénese somática têm vindo a ser realizados, para implementar um protocolo de multiplicação in vitro destas espécies bem como para compreender melhor a embriogénese somática em lenhosas. A embriogénese somática é uma técnica de Biotecnologia Vegetal com grande potencial para propagação de plantas em larga escala. Neste trabalho tentou-se o estabelecimento das duas espécies quer a partir do material adulto, quer a partir de explantes jovens, tendo em vista o estabelecimento de um protocolo eficiente de micropropagação. Duas auxinas, 2,4-D e Picloram, em diferentes concentrações, foram testadas na indução de embriogénese somática. A análise histológica efectuada em diferentes fases da resposta embriogénica mostrou que a fraca germinação obtida em estudos anteriores, poderá dever-se às poucas reservas acumuladas pelos embriões somáticos, bem como à ausência de SAM em algumas secções de embriões somáticos. A resposta mais comum foi a formação de calos embriogénicos, tendo sido testados vários meios para promover o seu desenvolvimento em embriões somáticos. A verificação da capacidade embriogénica em tecidos embriogénicos obtidos há treze anos em L. nobilis foi outro dos estudos efectuados, tendo-se verificado uma perda do potencial deste tecido evoluir em embriões somáticos. Apesar de a obtenção de embriões somáticos não ter sido conseguida, a acção do inibidor fluoridona foi interessante pela desdiferenciação que provocou no tecido embriogénico, tendo análises citológicas comprovado que o tecido proveniente da acção da fluoridona apresentava células com características meristemáticas, ao invés de todos os outros que apresentavam células com algum grau de diferenciação. A embriogénese somática repetitiva é a obtenção de embriões somáticos secundários utilizando embriões somáticos primários como explante. A embriogénese secundária em L. azorica foi conseguida neste trabalho tendo sido utilizado o mesmo protocolo de L. nobilis já descrito na literatura.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Envolvimento de diferentes subpopulações de células T na resposta imune a infecção pelo virus da hepatite C

Palavras-chave: Vírus da hepatite C,Interferão-alfa peguilado e ribavirina,Resposta imune,Linfócitos T,Células NK

A infecção pelo vírus da hepatite C (VHC) é um problema global de saúde pública e uma potencial causa de morbilidade e mortalidade dos doentes. Desde da sua descoberta em 1989, o VHC tem sido reconhecido como uma das principais causas de doença hepática crónica no mundo. O VHC pode escapar às defesas do sistema imunitário, afectando negativamente a resposta imune celular, incluindo a proliferação e activação das células NK, linfócitos T helper (LTh) e linfócitos T citotóxicos (CTL). Esta fuga permite ao vírus estabelecer infecção crónica, e a partir desta altura o seu controlo requer tratamento. A associação do interferão-α peguilado (peg-IFN-α) com ribavirina é o tratamento aprovado, conduzindo à erradicação viral em 42-82% dos doentes infectados com o VHC. Dada a influência da resposta imune no controlo da infecção por VHC e na resposta ao tratamento, o objectivo principal deste trabalho foi caracterizar a resposta imune em doentes com infecção crónica por vírus da hepatite C, antes e ao longo do tratamento. Além disso, também se comparou as respostas imunes nos doentes respondedores à terapia e nos não respondedores, de modo a detectar um biomarcador preditivo da resposta à terapêutica. A resposta imune foi avaliada através de imunofenotipagem recorrendo à citometria de fluxo. Nos doentes com infecção crónica verificou-se alterações na frequência, fenótipo e função dos linfócitos T (LT) e células NK, comparativamente ao grupo controlo. A terapia induziu um aumento da actividade citotóxica e um aumento da produção de citocinas nos LT e nas células NK. Contudo como sabemos a terapia nem sempre é eficaz, sendo necessários mais estudos nesta área de modo a contribuir para o desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas e se possível encontrar um biomarcador preditivo de resposta ao tratamento.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais