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Dieta de veado na Serra da Lousã: uma questão de sexo?

Palavras-chave: Veado,Dieta,Análise micro-histológica de excrementos,Segregação sexual,Hipótese da seletividade alimentar

O veado (Cervus elaphus L., 1758) é o maior ungulado atualmente existente na Península Ibérica. A sua densidade sofreu um aumento acentuado nas últimas décadas, pelo que o estudo da sua dieta é essencial para permitir a correta gestão das suas populações. O presente trabalho teve como objetivo o estudo da dieta do veado na Serra da Lousã, utilizando a técnica micro-histológica de análise de excrementos, e avaliando a sua relação com o sexo dos animais. Verificou-se que a dieta do veado é constituída maioritariamente por espécies arbustivas, seguindo-se as espécies herbáceas e, por fim, espécies arbóreas. Comprovou-se que o veado é uma espécie generalista, em que consome uma grande diversidade de espécies vegetais, e apresenta grande plasticidade alimentar utilizando os recursos disponíveis no meio. Machos e fêmeas apresentam uma seleção diferencial do alimento. De uma forma geral, os machos consomem mais espécies arbóreas e herbáceas dicotiledóneas, e as fêmeas mais espécies arbustivas e gramíneas. Fêmeas e a crias apresentam dietas semelhantes em termos de composição e diversidade. As preferências alimentares de machos e fêmeas evidenciadas neste estudo corroboram com a hipótese da seletividade alimentar descrita para explicar a segregação sexual, indicando que a dieta pode ser uma das causas deste fenómeno

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Estudo do efeito da estrutura do canto das Milheirinhas (Serinus serinus) na competição entre os machos

Palavras-chave: Canto,Serinus serinus,“Playbacks” interativos,Trilos,Agressividade

Nas aves, o canto é um dos meios mais eficaz mas também complexo de comunicação entre os indivíduos, tendo recebido uma vasto interesse científico nas últimas décadas. O canto das aves é um traço selecionado sexualmente, sendo um veículo de agressividade entre os machos. Segundo Searcy e Beecher (2009) são precisos três critérios para categorizar um sinal como agressivo: 1)Aumentar num contexto agressivo, 2) Provocar agressividade no emissor, 3) Provocar resposta no recetor. Esta tese pretende testar, através de “playbacks” interativos, se os trilos presentes nas canções dos machos de Milheirinha (Serinus serinus) funcionam como um veículo de agressividade entre os machos. A Milheirinha é um pequeno passeriforme com um canto facilmente reconhecível pelas suas características, como a elevada rapidez e frequência. O seu canto encontra-se dividido em duas sintaxes diferentes, o modo repetitivo e sequencial. O modo repetitivo consiste na repetição da mesma sílaba um número invariável de vezes -Trilos- e o modo sequencial consiste na apresentação de sílabas diferentes numa ordem bem determinada. Realizaram-se experiências em campo, com “playbacks” interativos em que se sobrepôs o canto dos machos com dois tipos de estímulos diferentes. Um estímulo com 8 trilos no início da canção e um estímulo sem trilos no início da canção. Num total de 40 indivíduos analisados, os nossos resultados mostraram que os indivíduos que foram sujeitos a canções com trilos aproximaram-se mais frequentemente da coluna, com uma menor latência e apresentaram uma posição de ameaça em 63,5% das situações. Também houve diferenças no comportamento de canto. Os indivíduos perante um “playback” com canções com trilos cantaram canções mais longas. Assim estes viii resultados cumprem o segundo e o terceiro critério de Searcy e Beecher. O segundo critério é cumprido porque os indivíduos mostraram um comportamento de ameaça, aproximaram-se da coluna mais frequentemente e apresentaram uma menor latência de aproximação. O terceiro critério é satisfeito porque os indivíduos responderam ao “playback” de canções com trilos com canções mais longas. Concluímos que os trilos presentes nas canções dos machos Serinus serinus são um sinal agressivo entre os machos, ficando demonstrado mais uma função de um traço do canto desta espécie.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Análise do padrão de metilação do carcinoma pavimento-celular da cavidade oral

Palavras-chave: Carcinoma pavimento-celular da cavidade oral (CPCCO),Mecanismos moleculares,Metilação de DNA,MS-MLPA

O carcinoma pavimento-celular da cavidade oral (CPCCO) representa um grupo de neoplasias, de origem epitelial, localizadas em diversos locais anatómicos da cavidade oral. As taxas de incidência e mortalidade associadas a esta neoplasia são elevadas, especialmente nos países desenvolvidos. O CPCCO representa a nível mundial a décima neoplasia mais comum nos homens, sendo mais frequente em indivíduos do género masculino do que feminino (2:1). Nas últimas décadas foram realizados progressos consideráveis na terapêutica para esta neoplasia, contudo estes não foram acompanhados pelo aumento da sobrevida a 5 anos. Uma das principais razões para este facto reside na realização do diagnóstico tardio. Deste modo é necessário a investigação genética para a deteção da doença em estadios iniciais de desenvolvimento, através do estudo de potenciais biomarcadores associados ao cancro oral. O objetivo principal deste trabalho consiste no estudo das alterações genéticas e epigenéticas de 30 amostras de CPCCO através da técnica de MS-MLPA. Simultaneamente foi pretendido validar o material parafinizado para estudos retrospetivos. A análise por MS-MLPA demonstrou alteração no número de cópias e no perfil de metilação de 37 genes supressores tumorais, sendo as alterações mais frequentes encontradas nos genes WT1, GSTP1, BRCA1, GATA5, CDKN2A, PYCARD, PAX5, MLH3, MSH6, CASR e TP53. Os resultados obtidos na comparação entre as amostras de tecido fresco e parafinizado foram de forma geral satisfatórios. Em conclusão, este trabalho permitiu verificar algumas alterações moleculares concordantes com as alterações referidas na literatura como associadas ao CPCCO, assim como associar alterações em determinadas regiões cromossómicas ou genes com o desenvolvimento tumoral. Desta forma, este estudo contribui para a abordagem de potenciais biomarcadores com potencial valor para o diagnóstico e prognóstico. Contudo novos estudos devem ser realizados com um n amostral superior, de forma a estabelecer uma correlação entre as características clinicopatológicas e o genótipo, determinar com maior precisão os genes associados ao desenvolvimento e progressão do cancro oral, assim como aumentar a concordância entre as amostras de tecido fresco e parafinizado.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
O efeito da berberina na resistência à insulina em ratos diabéticos

Palavras-chave: Diabetes mellitus tipo 2,AMPK,Resistência à insulina,Fígado,Músculo-esquelético,Berberina,Via da insulina

A diabetes mellitus tipo 2 é um distúrbio metabólico onde o metabolismo dos hidratos de carbono e lípidos se encontra alterado. Esta doença agrava-se com a idade, como consequência da alteração/degeneração dos processos metabólicos do organismo associados ao envelhecimento e, surge cada vez mais precocemente como resultado de alterações no estilo de vida da população. Os mecanismos/processos que levam ao aparecimento deste distúrbio não são completamente compreendidos mas têm sido demonstrado que a resistência à insulina e a obesidade são fatores que potenciam o aparecimento de diabetes tipo 2. As complicações vasculares são a principal causa de morbidade e morte em pacientes diabéticos pelo que se torna imperativo desenvolver terapias que atenuem a sua progressão. A berberina é um alcalóide natural existente nas raízes, caules e rizomas de diversas espécies de plantas. Tem sido utilizado desde a antiguidade na medicina tradicional chinesa e asiática para o tratamento de infeções bacterianas e parasíticas. O seu efeito benéfico na resistência à insulina e no abaixamento da hiperglicemia foi descoberto por acaso quando administrada em pacientes diabéticos com diarreia. Apesar dos inúmeros estudos efetuados os seus efeitos ainda não são completamente compreendidos. Este trabalho teve como objetivo estudar o potencial terapêutico da berberina na resistência à insulina em ratos diabéticos não obesos e ratos Wistar normais. Para o presente estudo foram avaliados 4 grupos experimentais, 2 grupos de ratos Wistar, um controlo e outro sujeito a tratamento com berberina (W+B) e 2 grupos GK, um controlo e outro sujeito a tratamento (GK+B). A berberina (100 mg/kg) foi administrada por via oral durante três meses. Foram analisados diferentes parâmetros metabólicos e as duas principais vias envolvidas na translocação dos transportadores GLUT4 no fígado e músculo-esquelético. Foi verificado que o tratamento com berberina melhorou o perfil glicémico mas não alterou o perfil lipídico. Neste estudo não houve ativação da via da AMPK nem da via da insulina nos tecidos estudados, o que sugere a possibilidade de outras vias moleculares estarem envolvidas no mecanismo de ação da berberina na diabetes tipo 2.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
A utilização de dois habitats de zonas húmidas pelo rouxinol-bravo Cettia cetti durante períodos de elevado dispêndio de energia

Palavras-chave: Cettia cetti,Habitat palustre,Habitat ripícola,Condição corporal,Disponibilidade alimentar

As zonas húmidas palustres constituem habitats com grande produtividade, garantem importantes serviços ecológicos e albergam comunidades de aves que incluem espécies com grande valor de conservação e que dependem fortemente destes habitats, nomeadamente para as aves insectívoras. Apesar de todos os benefícios que estes habitats apresentam, no passado sofreram um processo de drenagem com o objectivo de tornar estes locais viáveis para a actividade humana, levando ao aparecimento de habitats com características ripícolas. O principal objectivo deste trabalho foi avaliar a importância dos caniçais da região Centro de Portugal para as populações de Rouxinol-bravo Cettia cetti, assim como avaliar o uso dos dois habitats distintos e compreender a importância da alimentação nos períodos de maior dispêndio de energia numa ave insectívora residente. Foi avaliada a estrutura das populações de Rouxinol-bravo do habitat de caniçal e do habitat ripícola com base em dados de anilhagem científica de aves ao longo de 10 anos, bem como a produtividade desta espécie em cada habitat e a condição corporal das aves nos diferentes períodos do seu ciclo de vida. Foi também avaliada a dieta desta espécie através da análise de dejectos, bem como a disponibilidade de artrópodes nos dois habitats através de armadilhas de queda e tiras pegajosas. Foram ainda avaliadas as condições térmicas de abrigo através de registos de data loggers. As diferenças entre as populações de Rouxinol-bravo verificaram-se principalmente nos períodos de muda e Outono, dado que a população do habitat de caniçal sofreu um aumento evidente, apresentando também uma melhor condição corporal neste local. Isto pode dever-se ao facto de o habitat de caniçal oferecer melhores condições térmicas de abrigo e também ao facto de as presas mais selecionadas por esta espécie (Coleoptera e Araneae) apresentaram uma maior biomassa no habitat de caniçal no período de muda e Outono. Concluiu-se que ambos os habitats são necessários para a sobrevivência desta ave, nomeadamente o habitat ripícola para a época de reprodução e o habitat de caniçal para a época de muda e o Outono.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
O efeito antidepressivo do exercício físico em murganhos submetidos a uma dose neurotóxica de metanfetamina

Palavras-chave: Metanfetamina,Neurotoxicidade,Depressão,Exercício físico,Córtex,Dopamina,Murganho,Antidepressivo

A metanfetamina (METH) é um psicoestimulante viciante, sendo atualmente a segunda substância ilícita mais consumida em todo o mundo, apenas ultrapassada pela canábis. Os psicoestimulantes interferem com a função dos transportadores das monoaminas dopamina (DA), serotonina (5-HT) e noradrenalina (NA). Deste modo, levam ao aumento dos níveis cerebrais de DA, 5-HT e NA, podendo condicionar neurotoxicidade e astrogliose. Durante a fase de privação, a METH partilha muitas semelhanças comportamentais com a depressão, em humanos. Vários estudos demonstraram o efeito antidepressivo do exercício físico. Estes sustentam que o exercício foi efetivo no melhoramento dos sintomas de depressão. Neste sentido, murganhos C57BL/6 foram submetidos a um programa de exercício físico (cinco dias de exercício por semana durante sete semanas) com início 24 h após a administração de uma dose única e elevada de metanfetamina (30 mg/kg, i.p.). Foram, então, avaliados a neurotoxicidade induzida pela METH, determinando a expressão de TH (tirosina hidroxilase – marcador da perda de neurónios dopaminérgicos), GFAP (proteína glial fibrilar ácida – marcador de astrócitos), BDNF (fator neurotrófico derivado do cérebro) e GDNF (fator neurotrófico derivado da linhagem de células gliais), por Western Blotting e o comportamento do tipo depressivo e ansioso numa fase tardia de privação de METH (49 dias) através dos testes tail suspension e elevated plus maze, respetivamente. Uma diminuição dos valores de TH corticais é sugestiva de que a METH produziu neurodegeneração dos terminais dopaminérgicos, constituindo um bom modelo para avaliar a neurotoxicidade cortical. Contudo, o exercício físico não promoveu regeneração dopaminérgica cortical. Curiosamente, a METH aumentou significativamente, o tempo de imobilização dos murganhos no teste tail suspension, aos 49 dias de privação, o qual foi reduzido pelo exercício. Estes resultados fornecem novas evidências de que uma dose única, mas tóxica de METH induz um comportamento depressivo duradouro em murganhos, associado a uma disrupção persistente da neurotransmissão dopaminérgica cortical. Os efeitos antidepressivos do exercício físico observados sugerem que este possa ser uma putativa estratégia antidepressiva

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Terapia Fotodinâmica: Uma Abordagem no Retinoblastoma

Palavras-chave: Terapia fotodinâmica,Retinoblastoma,Apoptose,ROS,p53

A terapia fotodinâmica apresenta-se como uma abordagem terapêutica emergente no tratamento de cancro, podendo induzir morte celular através de um mecanismo que envolva stresse oxidativo por ativação luminosa de moléculas fotossensibilizadoras. Esta dissertação permitiu avaliar a ação fotodinâmica dos fotossensibilizadores BBr2HPP, BBr2HPC, BBr2HPP-O(CH2)2OH e BBr2HPPGluc-OAC em retinoblastoma humano in vitro. Os estudos de captação não demonstraram diferenças de captação entre os diferentes fotossensibilizadores. Os estudos de proliferação celular demonstraram que os quatro fotossensibilizadores têm efeitos semelhantes, apresentando valores de IC50 dentro da mesma ordem de grandeza. Foi também verificado que o tratamento fotodinâmico induz um decréscimo do conteúdo proteico na linha celular de retinoblastoma, compatível com diminuição da viabilidade celular. A morte celular ocorre preferencialmente por apoptose, corroborada pelo surgimento de um pico pré-G1, na análise do ciclo celular e paragem na fase G2/M. Neste trabalho foi também possível verificar que o tratamento fotodinâmico com os quatro fotossensibilizadores estudados não induz danos significativos no DNA. Verificou-se que induz um aumento dos níveis intracelulares de peróxidos, sem alteração dos níveis do radical superóxido. Verificou-se existir uma tendência para que os quatro compostos estudados neste trabalho promovam a disrupção do potencial de membrana mitocondrial, após ativação luminosa. O tratamento fotodinâmico com os quatro fotossensibilizadores referidos não leva à ativação das defesas antioxidantes, nomeadamente da enzima superóxido dismutase e do glutatião reduzido. Este trabalho revela o potencial do tratamento fotodinâmico aplicado ao retinoblastoma. Os compostos fotossensibilizadores estudados são de grande interesse e a avaliação dos mesmos em modelos in vivo hetero e ortotópicos constitui perspetiva futura.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Estudo de polimorfismos associados ao aumento da expressão de Hemoglobina Fetal (HbF)

Palavras-chave: Hemoglobina Fetal (HbF),População Portuguesa,Polimorfismos,Persistência Hereditária de Hemoglobina Fetal (HPFH),β-talassemia,Drepanocitose,cluster β-globínico,BCL11A,HMIP,XmnI

Hemoglobinopatias devidas a mutações no gene β-globínico são responsáveis por doenças monogénicas muito comuns no mundo, nomeadamente drepanocitose e β-talassemia. A forma de hemoglobina presente em maiores concentrações no adulto (cerca de 95%) é a hemoglobina A (HbA; α2β2), estando presentes em menor percentagem a hemoglobina A2 (HBA2; α2δ2) (2-3,5%) e a hemoglobina fetal (HbF; α2γ2) (<2%). Durante o desenvolvimento fetal e primeiros meses de vida, a hemoglobina que predomina é a HbF. Em alguns doentes com hemoglobinopatias por mutações no gene β-globínico, nomeadamente na drepanocitose e β-talassemia, verifica-se um aumento dos níveis de HbF. A síntese aumentada de cadeias gama globínicas também persiste para além do nascimento em alguns adultos com parâmetros hematológicos normais, levando a que os níveis de HbF permaneçam elevados durante toda a vida; esta condição é conhecida como persistência hereditária de HbF (HPFH). O estudo da regulação dos níveis de HbF nos glóbulos vermelhos tem elevada importância clínica, na medida em que a persistência de HbF em doentes com drepanocitose e β-talassemia se traduz num benefício clínico importante, pois a sua presença compensa a redução de outras hemoglobinas funcionais. Através de estudos de associação, foram identificados três loci principais envolvidos na regulação da expressão dos genes gama: o gene BCL11A no cromossoma 2p16, a região intergénica HBS1L-MYB (HMIP) no cromossoma 6q23, e o SNP XmnI na região promotora do gene HBG2 no cromossoma 11p15.O presente estudo teve como objetivo avaliar a associação aos níveis de HbF de alguns polimorfismos previamente descritos nestes três loci em diferentes grupos populacionais de indivíduos de naturalidade Portuguesa normais e com HPFH e em doentes com β-talassemia. Também foi analisado um grupo de indivíduos de origem Africana com drepanocitose. A análise efetuada mostrou uma forte associação dos SNPs BCL11A (rs1188868 e rs766432) aos níveis de HbF (p=7,30x10-5 e p=0,002, respetivamente) no grupo populacional de indivíduos normais e com HPFH (n=60). No grupo com β-talassemia minor (n=42) foi encontrada uma forte associação do locus XmnI (p=2,267x10-6) aos níveis de HbF, bem como do SNP BCL11A rs766432 (p=0,001). Para os doentes com β-talassemia intermédia (n=18) e com drepanocitose (n=16) não foram obtidos valores significativos de associação aos níveis de HbF para qualquer um dos SNPs estudados.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
Artrópodes como vectores de dispersão de espécies fúngicas – caso de estudo no Arquivo da Universidade de Coimbra

Palavras-chave: Dispersão de fungos por vectores,Colecções históricas,Região ITS,Fungos entomopatogénicos;

Insectos e outros organismos do filo arthropoda são responsáveis pela dispersão de esporos de diferentes grupos de fungos, como por exemplo os ascomicetes, os basidiomicetes e os fungos imperfeitos. Os objectivos deste estudo foram avaliar o papel de artrópodes como dispersores de fungos e potenciais vectores de contaminação entre documentos do Arquivo da Universidade de Coimbra, estudar os efeitos da sazonalidade na diversidade de espécies fúngicas que estão associados aos invertebrados deste local e compreender a relação entre a diversidade de fungos e os diferentes taxa de artrópodes colhidos. Um trabalho anterior com obras deste Arquivo descreveu uma elevada diversidade de fungos colonizando diferentes documentos, feitos de diversos substratos tais como pergaminho, papel-vergé e pasta de papel. Cladosporium sp., Aspergillus sp. e Penicillium sp. foram as espécies identificadas como dominantes em documentos nos quais processos de biodegradação eram visíveis. Embora estas espécies sejam ubíquas, podendo facilmente dispersar através de mecanismos anemófilos, outro trabalho (dados não publicados) revelou uma baixa diversidade de fungos no ar do Arquivo, sugerindo que outras formas de dispersão complementares podem também ter relevância neste local. A presença de insectos e outros artrópodes que circulam livremente através do Arquivo, sugere que a dispersão zoocórica poderá desempenhar um papel importante na dispersão de espécies de fungos entre documentos distintos. A sequenciação total da região ITS, combinada com uma análise de características taxonómicas macroscópicas e microscópicas, forneceu dados sobre as espécies fúngicas associadas aos artrópodes e permitiu uma avaliação da diversidade de fungos no AUC. Os resultados mostram uma elevada diversidade associada aos artrópodes: de um total de mais de 152 isolados, 25 géneros e 59 espécies de fungos, foram identificados e mantidos em cultura. Os géneros predominantes foram Penicillium, Aspergillus e Cladosporium. Avaliar a relação entre a diversidade de fungos encontrada colonizando documentos, as espécies encontradas na análise do ar, e as espécies associadas a artrópodes, poderá fornecer uma melhor compreensão dos mecanismos de dispersão de fungos em arquivos, bibliotecas e afins. Convém realçar que esta informação é importante no desenvolvimento de estratégias seguras com a finalidade de prevenção de contaminação de documentos e sua consequente biodegradação.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais
O papel do metilglioxal nas adaptações metabólicas do tecido adiposo quando sujeito a uma redução parcial da irrigação

Palavras-chave: Tecido adiposo,Microcirculação,Metilglioxal,Metabolismo

Introdução e objectivos: A disfunção do tecido adiposo resulta primariamente de uma acumulação lipídica incorrecta e hipoxia, que se pode reflectir numa inadequada adipogénese e angiogénese. A adaptação metabólica e angiogénica do tecido adiposo à hipoxia influencia a sua capacidade para lidar com lípidos e glicose circulantes, podendo assim afectar marcadores metabólicos a nível sistémico. O nosso grupo demonstrou recentemente que a glicação induzida por metilglioxal (MG) pode levar a uma diminuição da irrigação e alterações funcionais, normalmente observadas em modelos de desregulação metabólica. Baseado nestes resultados foi nosso objectivo avaliar o papel do MG nas adaptações metabólicas causadas por um decréscimo do fornecimento sanguíneo ao tecido adiposo epididimal, uma condição frequentemente observada em indivíduos obesos. Métodos: Um grupo de ratos Wistar com seis meses foi tratado diariamente com MG (WM, n=12), durante 8 semanas (75 mg/Kg/dia, diluído na água). Em seguida, ratos (W; WM: n=12) foram usados como controlos (n=4), e, os restantes (n=8) submetidos a laqueação de vasos sanguíneos no tecido adiposo epididimal esquerdo durante 1 e 48 horas (Wi 1h; WMi 1h;Wi 48h; WMi 48h: n=4/grupo). O tecido adiposo epididimal direito foi usado como controlo interno da experiência (Wc 1h; WMc 1h; Wc 48h; WMc 48h: n=4/grupo). 48 horas após a cirurgia e depois de um período de jejum de 6 horas, foram avaliados os níveis sanguíneos de glicose, lípidos e insulina. Resultados: Uma injecção i.v. de Evans Blue após o procedimento cirúrgico foi o método escolhido para quantificar o fornecimento sanguíneo ao tecido adiposo epididimal, estando a marcação significativamente diminuída 5 minutos depois, em comparação ao controlo interno. Com 1 hora de redução parcial da irrigação, os ratos sujeitos ao MG mostraram uma maior activação da ERK1/2, e da degradação de IκBα e menores níveis de Akt total e Perilipina A. Após 48 horas de redução da irrigação, os ratos mostraram aumentos significativos de glicose, insulina, ácidos gordos livres e triglicerídeos, bem como menores níveis de adiponectina. Também no tecido adiposo epididimal parcialmente isquémico dos ratos sujeitos à administração de MG, foram menores as expressões de IκBα, inibidor da via do NF-κB, de PPARγ e Perilipina A. Conclusões: Em conjunto, os nossos resultados sugerem que a acumulação de MG pode levar a uma diminuição da capacidade do tecido adiposo se adaptar à hipoxia, causando alterações metabólicas que se podem reflectir a nível sistémico.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais