Acitretina e isotretinoína: estudos mitocondriais, celulares e de citogenotoxicidade. Ação combinada com antiestrogénios,  NBUVB ou PUVA

Palavras-chave: Acitretina,Isotretinoína,Antiestrogénios,Cancro,Citogenotoxicidade

A acitretina e a isotretinoína são retinoides frequentemente utilizados no tratamento de algumas doenças inflamatórias da pele, constituindo também uma estratégia promissora na quimioprevenção do cancro. A associação dos retinoides com os antiestrogénios tem vindo a ser estudada, de forma a minimizar os efeitos adversos e a aumentar a eficácia terapêutica. No entanto, os mecanismos de ação farmacológica e toxicológica destes retinoides individualmente ou em associação com os antiestrogénios permanecem por esclarecer, e pouco é conhecido acerca dos seus efeitos secundários em associações terapêuticas com a fototerapia com radiação UVB de banda estreita (NBUVB) ou com a fototerapia com radiação UVA e psoraleno (PUVA), usadas no tratamento de doenças inflamatórias da pele. O objetivo deste trabalho foi estudar os efeitos da acitretina e da isotretinoína individualmente ou em associação com os antiestrogénios tamoxifeno (TAM) e  4-hidroxitamoxifeno (OHTAM) em mitocôndrias de fígado de rato e em linhas celulares de melanoma e de cancro da mama. Foram também avaliados os efeitos citogenotóxicos in vitro da acitretina e da isotretinoína, bem como os efeitos da acitretina em associação com o TAM e com o OHTAM em culturas de sangue de voluntários saudáveis. Adicionalmente, foram estudados os efeitos citogenotóxicos in vivo e as alterações hematológicas e bioquímicas induzidas pela acitretina e isotretinoína em monoterapia ou em associação com a NBUVB ou com a PUVA, em doentes com psoríase vulgaris e com acne vulgaris. Os estudos em mitocôndrias demonstraram que a acitretina e a isotretinoína  (5 nmoles/mg proteína) diminuíram a produção de energia e aumentaram a sensibilidade das mitocôndrias hepáticas para a permeabilidade transitória mitocondrial (MPT) induzida por Ca2+, como consequência da interação destes retinoides com o transportador de nucleótidos de adenina (ANT). A diminuição do conteúdo de ANT sugere que os mecanismos de apoptose e de toxicidade hepática induzidos pela acitretina e pela isotretinoína ocorrem, possivelmente, através de disfunções mitocondriais, devido a interações com o ANT. Além disso, observámos que o TAM e o OHTAM (10 nmoles/mg proteína ou 5 μM) inibiram a MPT induzida pela acitretina e pela isotretinoína, o que contribui para diminuir a toxicidade induzida por estes retinoides, provavelmente por impedirem as mudanças conformacionais do ANT envolvidas na indução da MPT.  Estudos em linhas celulares de melanoma e de cancro da mama demonstraram que a acitretina (5 μM) e a isotretinoína (0,5 μM) em associação com o TAM ou com o OHTAM (5 e 7,5 μM) aumentaram sinergisticamente os efeitos antiproliferativos de cada composto individualmente. O efeito antiproliferativo destas associações, observado na linha celular de melanoma, não se deve a mecanismos de morte celular sendo uma consequência da paragem do ciclo celular na fase G0/G1. A associação da acitretina ou da isotretinoína com o OHTAM apresentou um maior efeito antiproliferativo do que a associação do TAM devido, provavelmente, à maior afinidade para os recetores de estrogénio (ERs).  Os estudos de genotoxicidade in vitro demonstraram que a acitretina e a isotretinoína (1,2 – 20 μM), bem como a acitretina em associação com os antiestrogénios não apresentaram efeitos genotóxicos.  Relativamente, aos estudos de genotoxicidade in vivo, verificou-se que as terapêuticas com acitretina (monoterapia ou em associação com a NBUVB) ou com isotretinoína (monoterapia) não induziram efeitos genotóxicos. No entanto, são necessários mais estudos para esclarecer o potencial genotóxico da terapêutica com acitretina + PUVA ou com isotretinoína + NBUVB.  Os estudos in vivo incluíram também a avaliação das alterações bioquímicas e hematológicas induzidas por estas terapêuticas em doentes com psoríase vulgaris e acne vulgaris. Verificámos que a acitretina (em monoterapia ou associada com PUVA) ou a isotretinoína (em monoterapia ou associada com NBUVB), após 12 semanas de tratamento não induziram toxicidade renal. No entanto, os doentes tratados com acitretina + NBUVB, após 12 semanas, apresentaram um aumento nos níveis de creatinina, sugerindo uma possível toxicidade renal. A terapêutica com acitretina (em monoterapia ou associada com NBUVB ou com PUVA), ou com isotretinoína (em monoterapia ou em associação com NBUVB), após  12 semanas, não induziram alterações no metabolismo da glucose. Contudo, verificou-se uma diminuição da sensibilidade à insulina, após um tratamento prolongado com acitretina (24 e 36 semanas) ou com isotretinoína (24 semanas). Verificámos que a terapêutica com acitretina (em monoterapia ou associada com NBUVB ou PUVA) ou com isotretinoína (em monoterapia ou em associação com NBUVB), após 12 semanas, não induziram toxicidade hepática. No entanto, uma terapêutica prolongada com acitretina (24 ou 36 semanas) ou com isotretinoína  (24 semanas), induziu toxicidade hepática e disfunção muscular.  Em conclusão, este estudo sugere que a acitretina ou a isotretinoína associadas com os antiestrogénios apresentam uma potencial aplicação na quimioprevenção do melanoma e do cancro da mama, sendo a associação com o OHTAM a que tem uma maior eficácia no tratamento do melanoma. A associação com os antiestrogénios pode fornecer uma poderosa estratégia para ultrapassar a toxicidade destes retinoides, sem efeitos genotóxicos. Por outro lado, os estudos em doentes sugerem que a acitretina e a isotretinoína individualmente ou em associação com NBUVB ou PUVA não induzem alterações significativas nos biomarcadores clínicos, exceto para a função hepática, muscular e para o metabolismo da glucose.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde