Mecanismos patológicos e prevenção farmacológica da carcinogénese urotelial: estudo experimental

Palavras-chave: Cancro da Bexiga,Prevenção Farmacológica,Tumor do Urotélio

Introdução: O carcinoma da bexiga é um dos tumores mais prevalentes no Mundo Ocidental. A natureza recidivante das suas formas não músculo-invasivas, que constituem 75 a 80% de todos os tumores, associada à frequente progressão a formas invasivas e agressivas, tornam-no num dos cancros com mais elevados custos pessoais, sociais e financeiros.  Várias características fazem dele um tumor adequado para a adopção de estratégias de quimioprevenção mas, apesar dos resultados promissores de várias substâncias, nenhum estudo cientificamente sólido permite, de momento, recomendar o seu uso. Objectivos: Os objectivos principais desta dissertação foram: 1. Aprofundar o conhecimento fisiopatológico da carcinogénese vesical; 2. Avaliar a capacidade de quimioprevenção de alguns fármacos de uso corrente em diversas patologias relativamente frequentes através da utilização de um modelo experimental; 3. Caracterizar os putativos mecanismos de acção anticancerígena desses fármacos.  Materiais e Métodos: Foram utilizados ratos Wistar machos num modelo experimental de carcinogénese vesical, dividido em duas fases: 1. Administração do carcinogénio BBN 0,05% na água da bebida, entre as semanas um e oito, para indução tumoral; 2. Sem administração de BBN, entre as semanas nove e vinte, para manifestação das lesões tumorais.  Os fármacos e doses (mg/kg/dia) em estudo foram os seguintes: Imunomoduladores (Sirolimus 1 e 2; Ciclosporina 5); Inibidores da COX-2 (Celecoxib 1 e 10; AAS 25 e 250); Fármacos com “Acções Pleiotrópicas” (Atorvastatina 3 e 30; Ácidos gordos Ómega-3 600). Formaram-se vários grupos:  Controlo (C): sem administração de BBN ou fármacos; Carcinogénio (BBN): BBN entre as semanas um e oito, sem fármacos; Controlo do Fármaco: administração do fármaco na fase 1 ou fase 2, sem BBN; Prevenção Precoce: BBN e fármaco entre as semanas um e oito; Prevenção Tardia: BBN entre as semanas um e oito; fármaco entre as semanas nove e vinte. No final da 20.ª semana os animais foram sacrificados. Foi colhida a bexiga para estudo histopatológico, imunohistoquímico e de expressão génica. Foi colhido sangue para hemograma, alguns parâmetros bioquímicos, marcadores séricos e de equilíbrio oxidativo. Foram avaliados o bem-estar e a segurança animal. Resultados: No grupo Carcinogénio a incidência de neoplasias uroteliais foi de 68%, lesões maioritariamente papilares e exofíticas, de dimensões variáveis. A histopatologia mostrou hiperplasia urotelial em 100% das bexigas, displasia de alto grau em 96% e Cis em 52%. Dos carcinomas, quatro eram TPBPM, 11 de baixo grau e 10 de alto grau histológico. A marcação imunohistoquímica de p53, Ki67 e CD31 nas lesões pré-malignas ou malignas foi mais acentuada e extensa. A expressão génica de p53, Bcl-2, Hras, Cox-2 e VEGF foi superior à do grupo Controlo, ao contrário do gene Rb1. Também se verificou uma elevação de TGF-β, TNF-α e de marcadores inflamatórios.  A utilização de Sirolimus na primeira fase do estudo, na dose de 1 e de 2 mg/kg/dia, levou a um aumento da incidência tumoral para 75% e 80%, respectivamente. Ao invés, a administração de Sirolimus 2 mg/kg/dia a partir da 9.ª semana levou a um decréscimo para 37,5%, associada a redução do número e volume tumoral, das lesões pré-neoplásicas, diminuição de TGF-β e um perfil oxidativo mais favorável. Relativamente à Ciclosporina A, a incidência tumoral de 62,5% na sua utilização precoce e de 50% na mais tardia não diferiu de forma significativa da do grupo carcinogénio, apesar da redução do número e volume tumoral e de algumas lesões hiperplásicas, displásicas e papilares.  O Celecoxib na primeira fase do estudo, nas doses de 1 e 10 mg/kg/dia, levou a uma menor incidência (12,5%), número e volume tumoral. A utilização do fármaco na segunda fase não trouxe qualquer benefício. Quanto ao AAS, usado apenas na primeira fase, a dose de mais alta teve uma redução mais significativa na incidência de neoplasias (12,5 vs 37,5%) e também no número e volume tumoral. Houve ainda uma redução das lesões uroteliais hiperplásicas, pré-neoplásicas e da agressividade dos carcinomas, de TGF-β e dos marcadores inflamatórios. A Atorvastatina, usada nas primeiras oito semanas, reduziu a incidência de carcinomas para 12,5% na dose de 3 mg/kg/dia e para 25% na dose de 30 mg/kg/dia, bem como do número, do volume e da agressividade histológica. Apesar da diminuição da displasia de alto grau e do Cis com os Ácidos gordos Ómega 3 na primeira fase do modelo carcinogénico, tal não se traduziu numa menor incidência de carcinomas (62,5%) ou do número de tumores, mas apenas numa redução dos volumes. Houve com estes dois fármacos uma diminuição dos marcadores inflamatórios e um perfil oxidativo mais favorável. Nos grupos em que foi conseguida a quimioprevenção tumoral, as investigações complementares mostraram uma marcação imunohistoquímica para p53, Ki67, CD31 e Cox-2 (nos inibidores da Cox) mais localizada e ligeira e nos estudos de expressão génica houve uma menor expressão de proto-oncogenes e de genes anti-apoptose.  Conclusões: A incidência de carcinoma urotelial no nosso modelo foi de 68%. A carcinogénese vesical, que reproduz a verificada no humano, incluiu desregulação do ciclo e da proliferação celular, da imunovigilância tumoral, inibição da apoptose, aumento da angiogénese e uma acção pró-inflamatória. Os inibidores selectivos e não selectivos da Cox-2 e a Atorvastatina foram os fármacos que demonstraram maior eficácia. Com excepção do Sirolimus, a prevenção farmacológica do carcinoma da bexiga foi mais eficaz quando instituída precocemente. A prevenção neoplásica deveu-se à conjugação de múltiplos mecanismos de acção farmacológica, que permitiram o reequilíbrio das vias alteradas do processo carcinogénico.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde