Marcadores biológicos na esclerose múltipla: relevância no prognóstico e terapêutica

Palavras-chave: EM,BOC IgG e IgM,MMPs,TIMPs,CAMs,BHE,prognóstico,LCR,polimorfismo -1562 C/T,MS,IgG and IgM-OCB,BBB,prognosis,CSF,-1562 C/T polymorphism

Esclerose múltipla (EM) é uma doença multifatorial, inflamatória, desmielinizante e neurodegenerativa, com interrupção da transmissão nervosa no SNC. De etiologia pouco conhecida, uma reação autoimune direcionada contra antigénios da substância branca e auto-reatividade de células imunes através da BHE, mostraram ser cruciais na formação das lesões inflamatórias. O curso clínico da doença é altamente incerto, associando formas clínicas surto-remissão (SR) com formas progressivas. A heterogeneidade clínica e fisiopatológica torna o prognóstico da EM um desafio.   O objetivo deste estudo foi tentar identificar marcadores biológicos que funcionassem como indicadores de prognóstico da EM. Para tal selecionaram-se marcadores que se sabe terem um papel essencial na inflamação do SNC: MMPs e seus inibidores (TIMPs), moléculas de adesão celular (CAMs), produção intratecal de imunoglobulinas (Ig). Estudaram-se amostras emparelhadas de LCR e soro de doentes de EM e controlos neurológicos (CN: outras doenças inflamatórias-DI e não inflamatórias-DNI do SNC), onde se pesquisou a presença de bandas oligoclonais (BOC) IgG e IgM por focagem isoelétrica. Os níveis de MMP-2, MMP-9, TIMP-2, TIMP-1, sICAM-1, sVCAM-1 e sE-Seletina, foram determinados por ELISA. Recorrendo à metodologia PCR-RFLP, avaliou-se a presença do polimorfismo -1562 C/T do gene da MMP-9 em doentes de EM e controlos saudáveis (CS).   As BOC IgG pesquisaram-se em 183 doentes de EM e 76 CN, revelando um predomínio de IgG restritas ao LCR em 82,4%, nos doentes de EM e em 15,8% dos controlos. Quanto à progressão da incapacidade no curso da EM, avaliada pela escala de EDSS, revelou-se significativamente superior após o primeiro ano de EM nos doentes com BOC IgG positivas. Porém, esta tendência inverteu-se ao longo da doença, e numa avaliação superior a 10 anos de EM, os valores de EDSS tornaram-se significativamente superiores nos doentes sem BOC IgG, apresentando também valores superiores e significativos no último EDSS, uma maior probabilidade de atingirem um valor de EDSS≥4 após 10 anos de EM ou de alguma vez, durante o curso da EM, atingirem um EDSS≥6. Observaram-se também diferenças significativas em relação aos subtipos, com os doentes na forma primária progressiva a mostrarem uma percentagem menor de BOC IgG positivas, e às terapêuticas instituídas, com os doentes sem BOC IgG a registarem maior necessidade de recorrer a terapia de 2ª linha. Relativamente às BOC IgM (pesquisadas em 115 doentes de EM e 69 CN), apenas 16,5% nos doentes de EM revelaram a presença de BOC IgM restritas ao LCR, sem diferença significativa face aos controlos. Os doentes de EM com BOC IgM positivas evidenciaram, à data da PL, um EDSS significativamente superior e também uma maior probabilidade de atingirem alguma vez, ao longo da doença, um valor de EDSS≥6.   Os marcadores de disfunção da BHE foram avaliados num subgrupo de 51 doentes de EM, 21 DNI e 33 DI. Observou-se um aumento significativo nos níveis da MMP-2 sérica, da razão MMP-2/TIMP-2 no soro e LCR, da razão MMP-9/TIMP-1 no LCR e, ainda, uma redução significativa nos níveis do TIMP-2 sérico nos doentes de EM. Quanto às CAMs, observou-se um aumento significativo da sICAM-1 e sE-Seletina e uma redução da sVCAM-1 no LCR dos doentes de EM. Quanto à relação com a progressão da EM, o aumento da expressão da sVCAM-1 sérica revelou uma associação com níveis superiores de EDSS e formas progressivas da EM; enquanto um aumento da razão MMP-9/TIMP-1 sérica mostrou associar-se a menor incapacidade no curso da EM e ao fenótipo SR.  O estudo do polimorfismo -1562 C/T no gene da MMP-9 realizou-se em 169 doentes de EM e 186 CS, sem diferenças significativas na distribuição entre doentes e controlos. Contudo, nos doentes e não nos controlos, registou-se um aumento significativo da frequência do alelo T no sexo feminino. Não se observou nenhuma associação entre a presença do polimorfismo -1562 C/T e a progressão da EM. Os níveis séricos da MMP-9 eram significativamente superiores nos doentes, não sendo influenciados pela presença do alelo T, ao contrário do observado nos CS, onde o alelo T estava associado ao aumento dos níveis da MMP-9. Registou-se ainda uma redução significativa nos níveis séricos da MMP-9 nos doentes a realizar terapia com IFNβ.  Os nossos resultados sugerem que alguns dos marcadores possam ter utilidade clínica no seguimento dos doentes de EM. A síntese intratecal de IgG e IgM parece ter efeito preditivo no curso da EM, com a ausência de IgG no LCR a apontar para um pior prognóstico a longo prazo e a presença de IgM a sugerir um prognóstico menos favorável a curto prazo. Também níveis elevados de sVCAM-1 séricos parecem sugerir um fenótipo mais agressivo, enquanto o aumento da razão MMP-9/TIMP-1 aparece associado a menor incapacidade ao longo da EM e poderá ser um bom marcador de resposta à terapêutica nos doentes tratados com o IFNβ.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais