Fenótipos de asma e novos biomarcadores da doença numa população portuguesa

Palavras-chave: Asma,Fenótipos,Endótipos,Biomarcadores,Metabolómica

Introdução A asma é uma doença heterogénea, expressando-se por vários fenótipos, que novos métodos de análise, tipo cluster, têm tentado distinguir. Contudo, biomarcadores, nomeadamente identificadores de gravidade, são escassos. O conhecimento dos seus endótipos através de técnicas avançadas como a metabolómica pode ser útil, como já demonstrámos com a identificação de marcadores de exacerbação pelo estudo do perfil metabolómico urinário de asmáticos. No entanto, a translação de resultados da metabolómica para a clínica necessita validação. Objectivos 1. Caracterizar clinicamente uma população portuguesa de asmáticos, com enfoque nos doentes graves, com suporte em parâmetros funcionais respiratórios e laboratoriais imunoinflamatórios e nas suas correlações. 2. Identificar fenótipos celulares da expectoração e correlacioná-los com os parâmetros determinados. 3. Identificar factores preditores de ocorrência dos fenótipos clínicos. 4. Distinguir clusters de asmáticos. 5. Determinar a relevância da metabolómica na identificação de biomarcadores de gravidade e na distinção de clusters. 6. Correlacionar características clínicas de gravidade e dos clusters identificados com biomarcadores urinários de peroxidação lipídica. Métodos A amostra foi recrutada nos Serviços de Pneumologia e Alergologia dos Hospitais da Universidade de Coimbra, até se obterem cem doentes com asma. Dos procedimentos realizados destacam-se: a avaliação clínica, o estudo funcional respiratório e as colheitas de sangue, expectoração e urina para estudo analítico. O tratamento estatístico foi feito com o programa SPSS, versão 20.0 ®, usando métodos como a regressão logística. Os clusters foram identificados pelo método Ward. A análise metabolómica foi feita pela técnica de microextracção de fase sólida seguida de cromatografia gasosa bidimensional, a análise desses dados foi multivariada e as correlações estabelecidas usaram o método de regressão dos mínimos quadrados parciais. Em todos os testes foram considerados significativos valores inferiores a 0.05. Resultados e Conclusões Os resultados dos parâmetros avaliados foram amplamente coincidentes com os de outros estudos, tendo-se identificado como mais inovador, no grupo grave, a maior frequência de história de pneumonia e o carácter discriminativo do questionário de gravidade utilizado. Nas correlações estabelecidas destacaram-se: as negativas da função respiratória com o questionário de gravidade da asma e a do FeNO com os valores basais de FEV1 (nos graves); as positivas da eosinofilia periférica com a gravidade da doença, o seu início tardio e a pior qualidade de vida. Nos fenótipos da expectoração, o eosinofílico foi mais prevalente, observando-se correlação negativa entre a percentagem de neutrófilos e o FEV1 basal. Nos fenótipos clínicos estudados destacamos: Atópicos, têm idade de início de doença mais precoce, menor ocorrência de história de pneumonia e melhor qualidade de vida; Asmáticos com início após 12 anos, são mais obesos, menos atópicos, com pior controlo e qualidade de vida e maior gravidade da doença; Nos com hipersensibilidade a AINE’s é maior a prevalência de polipose nasal e pior a qualidade de vida; Os pré-obesos, apresentam menor controlo da doença, pior qualidade de vida e maior gravidade; Os obstrutivos persistentes têm menor controlo da doença e maior coexistência de outras doenças obstrutivas; Os graves, maior ocorrência de pneumonia e de outra doença obstrutiva, pior controlo da doença, de qualidade de vida, de função respiratória e maior uso de terapêutica e grau de eosinofilia periférica. Foram factores favoráveis à ocorrência dos fenótipos: Atópico − início precoce da doença, melhor controlo da doença, menor grau de terapêutica. Asma após 12 anos – género masculino, obstrução fixa da via aérea, maior percentagem de eosinófilos no sangue e da pontuação SOA. Hipersensibilidade a AINE’s – polipose nasal e maior gravidade da doença. Obstrução persistente da via aérea – género masculino, maior intensidade de terapêutica, pior função respiratória, maior gravidade da doença e inflamação neutrofílica da via aérea. Grave – eosinofilia no sangue periférico. Foram desfavoráveis para essa ocorrência: Atópico − história de pneumonia, presença de outra doença obstrutiva, doença grave. Asma com início após 12 anos − atopia. Obstrução persistente da via aérea – início da doença antes dos 12 anos.  Nos 5 clusters foi evidente a sobreposição de C1, C2 e C5 com outros estudos. C3 correspondeu a asmáticos intermitentes, cuja gravidade dependeu da ocorrência de exacerbações graves; C4, a um grupo com provável alteração de fenótipo inicial (eosinofílico) pela presença de obesidade. Algumas das características com significado na separação dos clusters (idade, excesso de peso, gravidade e eosinofilia periférica) foram relevantes por permitirem a adaptação dos resultados aos endótipos actualmente descritos na literatura. A análise metabolómica do perfil de peroxidação lipídica mostrou relevância, quer na separação dos doentes por gravidade, quer na distinção dos diferentes clusters, tendo sido identificado o grupo de metabolitos responsáveis pelas separações. Em relação à gravidade, a separação foi clara entre grupos, consoante a faixa etária. Em relação aos clusters, a distinção foi clara para os grupos C1, C3 e C5, passíveis de serem organizados pela extensão da peroxidação lipídica (C1>C3>C5). Demonstramos ainda que os níveis de peroxidação lipídica patentes nos perfis metabolómicos urinários destes doentes podem prever a função respiratória (FEV1), o tipo de inflamação Th2 (FeNO) e o grau de gravidade (SOA). Assim, endótipos obtidos pela metabolómica urinária mostraram que alguns clusters e características da asma podem ser associados com metabolitos específicos da peroxidação lipídica.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde