Dequalinium : a new approach on leukaemia treatment?

Palavras-chave: Leucemia,Terapêutica

As neoplasias hematológicas são doenças que se originam a partir de alterações no normal processo de diferenciação hematopoiética e são cada vez mais comuns. As actuais terapias para o cancro tentam induzir morte celular mas a falta de especificidade para a célula tumoral limita a sua eficácia. A principal função mitocondrial é a fosforilação oxidativa, no entanto, este processo induz a síntese de espécies reactivas de oxigénio (ROS) que têm um papel importante na indução de proliferação e/ou morte celulares. Os catiões lipofílicos possuindo uma carga positiva deslocalizada (DLCs) penetram as barreiras hidrofóbicas das membranas citoplasmática e mitocondrial para se acumularem na mitocôndria em resposta ao seu potencial transmembranar negativo. O facto das células neoplásicas terem maior potencial de membrana citoplasmático e/ou mitocondrial em relação às células normais, pode permitir uma maior acumulação destes compostos nas células neoplásicas. O Dequalinium (DQA) é um DLC que interfere com a mitocôndria e, assim, o nosso objectivo é avaliar o potencial terapêutico do DQA em neoplasias hematológicas, nomeadamente em Leucemia Linfocítica Crónica (LLC), Leucemia Mielóide Crónica (LMC), Síndrome Mielodisplásico (SMD), Leucemia Promielocítica Aguda (LPA) e Linfoma Difuso de Grandes Células B (LDGCB). Para atingirmos este objectivo utilizámos cinco linhas celulares, incubámos as células EHEB (LLC), K562 (LMC), F36P (SMD), HL-60 (APL) e Farage (LDGCB), com diferentes concentrações de DQA quer em administração de dose única, quer por administração diária, em monoterapia e/ou em associação com a terapêutica anticancerígena convencional. Recorremos à citometria de fluxo para avaliar o potencial de membrana mitocondrial, os níveis de ROS (H2O2; O2 •-), da defesa antioxidante Glutationa Reduzida (GSH) e dos níveis de caspase 3, citocromo c, ciclina D1 e p53. Os nossos resultados mostram que o DQA induz diminuição da viabilidade celular por apoptose tardia/necrose num modo dependente de tempo, de dose e do tipo celular. As linhas celulares mais sensíveis parecem ser as K562, as Farage e as HL-60 (IC50 de 2,5 μM), seguidas pelas F36P (IC50 de 5 μM) e por fim as menos sensíveis EHEB (IC50 entre 5 e 7,5 μM). Os nossos resultados sugerem que a associação de DQA com FDN, Imatinib, Ara-C e ATRA, respectivamente nas EHEB, K562, F36P e HL-60, aumenta o efeito citotóxico observado para os mesmos compostos sozinhos. A adição diária parece ser a melhor estratégia terapêutica para as F36P e para as HL-60, visto que permite o uso de uma dose menor. Estes efeitos parecem ser mediados por indução de stress oxidativo, uma vez que observámos um aumento de ROS e uma diminuição dos níveis de GSH e do potencial de membrana mitocondrial. Esta perda do potencial mitocondrial e o aumento de caspase 3 e citocromo c indicam uma activação da via intrínseca da apoptose, que pode ser modulada pela proteína p53, cujos níveis estavam significativamente aumentados nas células EHEB, K562 e HL-60. Também observamos um aumento dos níveis de ciclina D1 nas células K562. Em resumo, os nossos resultados sugerem que o DQA pode ser utilizado como nova abordagem terapêutica em neoplasias hematológicas tanto em monoterapia como em associação com a terapêutica convencional.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde