Ensaios de cultura in vitro e poliploidização de Lavandula multifida L. e Lavandula viridis L’Her L.

Palavras-chave: Colquicina,Citometria de fluxo,Óleos essenciais,Tetraplóides,Embriogénese somática

O género Lavandula é constituído por plantas aromático-medicinais com elevado interesse económico devido essencialmente à produção de óleos essenciais. A crescente procura de produtos naturais justifica o aumento da produção das respetivas plantas, recorrendo à cultura in vitro e prevenindo, assim, a colheita abusiva das espécies vegetais. Deste modo, a otimização de técnicas de micropropagação e o desenvolvimento de protocolos de melhoramento das espécies relevantes são fundamentais para a exploração do seu potencial. Como parte integrante de trabalhos em curso sobre a valorização das lavândulas portuguesas, pretende-se agora melhorar a produção de óleos essenciais de Lavandula multifida e Lavandula viridis, através da indução de poliploidia. Segmentos nodais de L. multifida e L. viridis obtidos de plântulas estabelecidas in vitro, foram sub-cultivados em meio MS (Murashige and Skoog, 1962), suplementado com colquicina 125 mg/L e 1% (v/v) de DMSO por 5 dias no escuro, a 24ºC. Após este tratamento, os meristemas axilares foram transferidos para meio MS suplementado com 0,2 mg/L de BAP e mantidos sob um fotoperíodo de 16h a 24ºC. O nível de ploidia das plântulas tratadas foi monitorizado por citometria de fluxo e confirmado por microscopia eletrónica de varrimento (SEM) e contagem do número de cloroplastos presentes nas células estomáticas da epiderme foliar. As plântulas com a ploidia desejada, mixoploidia ou tetraploidia, e plântulas controlo (não sujeitas ao tratamento com colquicina) foram transferidas para terra e aclimatadas. Por último, foram efetuados ensaios de embriogénese somática, com diferentes combinações de hormonas e concentrações, com o objetivo de induzir a formação de embriões somáticos a partir de explantes foliares de L. multifida. Em L. multifida obteve-se uma planta mixoplóide, sendo que a indução de tetraploidia ocorreu unicamente em L. viridis, obtendo-se 2 plantas tetraplóides e uma mixoplóide, que tiveram um bom desenvolvimento após a transferência para terra. Estes resultados foram comprovados por análises de citometria de fluxo, por observações em SEM onde se detetaram diferenças no tamanho dos tricomas glandulares peltados (em L. multifida) e nos tricomas glandulares peltados e tricomas glandulares capitados tipo II (em L. viridis) e por contagem do número de cloroplastos, onde se verificaram diferenças significativas entre o número de cloroplastos presentes em plantas diplóides, tetraplóides e mixoplóides Na indução de embriões somáticos, foi observada uma elevada percentagem de tecido caloso não embriogénico e a presença de estruturas globulares com potencial embriogénico, no meio MS suplementado com 2 mg/L 2,4-D + 0,5 mg/L cinetina. O presente trabalho fornece, pela primeira vez, avanços relevantes no melhoramento de L. multifida e L. viridis, sendo que ainda são necessários mais esforços para aumentar o número de plantas tetraplóides obtidas. Trabalhos futuros incidirão sobre a multiplicação dos tetraplóides obtidos e a comparação do rendimento e composição química dos óleos essenciais produzidos com os das plantas diplóides.

Área científica: Ciências Exactas e Naturais