Avaliação do potencial terapêutico do Acanthus mollis

Palavras-chave: Acanthaceae,Fitoterapia,Farmacognosia,Antioxidantes,Anti-inflamatórios

O Acanthus mollis é uma planta nativa da região mediterrânica pertencente a uma extensa família (Acanthaceae) que compreende 4300 espécies distribuídas principalmente em regiões tropicais (Rezanka, Rezanka e Sigler, 2009), sendo tradicionalmente usada externamente como cicatrizante de feridas e queimaduras, analgésico e anti-inflamatório, e internamente como diurético, anti-inflamatório e calmante das mucosas do trato digestivo e urinário. Os estudos sobre a composição fitoquímica são escassos, assim como a comprovação científica da eficácia em patologias referidas na medicina popular. Em face do exposto e considerando o atual interesse na procura de novos produtos de origem natural com atividade terapêutica e destituídos de toxicidade, este trabalho aborda a caracterização fitoquímica e a avaliação do potencial terapêutico do Acanthus mollis, com base no estudo das propriedades biológicas que suportem algumas das suas utilizações tradicionais. Através da combinação de diversos processos extrativos foram obtidos diferentes extratos naturais a partir de folhas de Acanthus mollis. Assim, após secagem das folhas, por liofilização, efectuou-se uma extração sequencial, com éter petróleo, clorofórmio, etanol, etanol a 50% e água. Adicionalmente, foram preparados dois extratos aquosos, infusão e decocção. Os extratos obtidos foram analisados recorrendo a técnicas de cromatografia em camada fina para pesquisa de flavonóides, saponinas, triterpenos, alcalóides, taninos e benzoxazinóides. Estes mesmos extratos foram posteriormente analisados por cromatografia líquida de alta resolução com deteção de fotodíodos, permitindo detetar a existência de ácidos fenólicos, flavonóides e benzoxazinóides, em quase todos os extratos. A pesquisa de compostos com atividade captadora do radical DPPH nos extratos foi realizada pela técnica bio-autográfica. Os extratos de éter petróleo e etanol exibiram a presença de compostos mais reativos ao DPPH, justificando a avaliação da sua atividade antioxidante. De entre estes, o extrato etanólico foi o que apresentou maior atividade anti-radicalar (IC50 20,50 ± 0,47 μg/mL; TEAC de 6,90 ± 0,90 μg/mL). O potencial anti-inflamatório foi determinado para os 3 extratos aquosos, assim como para o extrato alcoólico e hidroalcoólico, usando macrófagos RAW 264.7 estimulados com LPS. O infuso e o extrato etanólico exibiram maior capacidade inibitória do mediador inflamatório NO, sem evidenciar citotoxicidade nas concentrações eficazes. A maior atividade antioxidante e anti-inflamatória do extrato etanólico, evidenciada nos estudos preliminares, orientou este trabalho para uma posterior identificação de fitoconstituintes eventualmente responsáveis por essas bioatividades. Consequentemente, procedeu-se ao fracionamento deste extrato por recurso à cromatografia líquida “Flash”, em fase reversa. As frações obtidas foram monitorizadas por HPLC-PDA tendo sido selecionada uma fração contendo benzoxazinóides para a determinação da atividade antioxidante e anti-inflamatória. Esta fração evidenciou uma atividade antioxidante (IC50 de 163,02 ± 3,04 μg/mL; TEAC de 79,33 ± 0,99) inferior à do extrato etanólico, tendo no entanto exibido uma elevada atividade anti-inflamatória em macrófagos RAW 264.7 estimulados pelo LPS (IC50 de 32,32 μg/mL), sem citotoxicidade. Estes resultados sugerem que estes fitoconstituintes podem ser em parte responsáveis pela atividade anti-inflamatória que tradicionalmente se atribui a A. mollis. Neste estudo o Acanthus mollis revelou ser uma boa fonte de compostos bioativos com potencial antioxidante e anti-inflamatório para a indústria farmacêutica. Nesta perpectiva procurou-se aplicar um processo extrativo que fosse industrialmente mais viável, utilizando-se a extração com etanol a 95%, diretamente da planta seca. Este método demonstrou ser eficiente na extração dos derivados benzoxazinóides (glicósidos do DIBOA) e de fenilpropanóides (verbascósido e seus derivados), identificados por TLC, HPLC-PDA e HPLC-PDA-MSn. O extrato evidenciou uma boa atividade captadora do radical DPPH (IC50 40,00 ± 1,59 μg/mL; TEAC 23,54 ± 1,10) e do anião superóxido (IC50 de 29,42 ± 1,99 μg/mL) e baixa atividade captadora para o radical hidroxilo. O extrato apresentou também atividade anti-inflamatória em culturas de macrófagos RAW 264.7 estimuladas pelo LPS, com um IC50 deste extrato de 28,01 μg/mL, superior à atividade do extrato etanólico resultante da extração sequenciada (IC50 48,31 μg/mL), sem evidenciar citotoxicidade apreciável. Dos resultados obtidos infere-se que um extrato alcoólico de Acanthus mollis pode constituir uma importante fonte de fitoconstituintes bioativos, com importante potencial na prevenção e/ou tratamento de patologias associadas a processos oxidativos e inflamatórios.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde