HPLC versus UPLC : avaliação de aspetos críticos à transferência e validação de métodos analíticos

Palavras-chave: Cromatografia líquida,Cefuroxima

A cromatografia tornou-se no primeiro método de separação de espécies quimicamente muito semelhantes. Neste contexto, a aplicação da cromatografia líquida (HPLC) na indústria farmacêutica tem vindo a destacar-se pelas suas inúmeras vantagens. Não obstante, a rotina de um laboratório de controlo de qualidade requer análises complexas num curto intervalo de tempo. Desta forma, a transferência de método de quantificação de um produto de HPLC para UPLC tem vindo a destacar-se por esta técnica, UPLC, ser relativamente mais rápida e abranger um maior número de lotes para análise. Com o intuito de uma maior rentabilidade laboratorial, é necessário que os métodos sejam, então, transferidos em HPLC para UPLC. Posteriormente à transferência analítica, é necessário proceder a uma etapa de validação do método em questão. A validação do método analítico garante, através de estudos experimentais, que o mesmo tem a capacidade de desempenho consistente com a aplicação que requer. Desta forma, a validação de um método analítico é fundamental para implementar um sistema de controlo de qualidade em qualquer laboratório analítico. A validação de um método incluiu o estudo de diversos parâmetros definidos pela ICH e pela EP, nomeadamente a seletividade, linearidade, exatidão, precisão, ensaio de adequabilidade do sistema, robustez e estabilidade da amostra e do padrão. Deste modo, o presente trabalho teve como propósito a transferência de um método analítico de quantificação da Cefuroxima em HPLC para UPLC. Foram estudados quais os parâmetros que poderiam ser alterados para obter resoluções entre impurezas conforme os limites especificados. Após a obtenção das condições cromatográficas ideais em UPLC, procedeu-se à validação do método. Foram executados dois métodos analíticos em UPLC: um correspondente ao método de doseamento do princípio ativo e outro correspondente ao método de quantificação de compostos relacionados. Inicialmente avaliou-se se o equipamento utilizado estaria apto a gerar resultados com exatidão e precisão. Uma vez testado, confirmou-se que o sistema era capaz de fornecer dados de qualidade aceitáveis. VIII Os dois métodos demonstraram ser seletivos e específicos para a determinação da Cefuroxima e todos os seus compostos relacionados. Foi ainda demonstrado que, os dois métodos são capazes de gerar resultados linearmente proporcionais à concentração da substância presente na amostra com precisão e exatidão. Os limites de deteção e quantificação, no método de compostos relacionados, são adequados tendo em consideração o âmbito de utilização do mesmo. Assim, o método analítico apresentado demonstrou ser suficientemente sensível para a deteção e quantificação da Cefuroxima e de todas as impurezas a ela associadas. De realçar, também, que após a análise da estabilidade da amostra e do padrão, esta era garantida durante 24 horas e que, apesar de alterações que possam suceder nos parâmetros do método analítico de doseamento do princípio ativo, este é considerado como robusto.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde