Genes do metabolismo de Genotóxicos e mutações TP53 no cancro do pulmão

Palavras-chave: Polimorfismos genéticos,Oncogenética,Enzimas metabolizadoras de genotóxicos,Neoplasias do pulmão

A complexa interação entre o ambiente e os fatores genéticos desafia a compreensão da etiologia do cancro do pulmão. Tal como noutras neoplasias epiteliais, o cancro do pulmão resulta de uma série de lesões pré-neoplásicas progressivas, consequência da interacção entre as exposições ocupacionais ou ambientais e uma susceptibilidade individual que pode conferir uma fragilidade intrínseca ao indivíduo. O consumo do tabaco foi considerado como um factor de risco para o cancro do pulmão, embora apenas 20% dos fumadores desenvolvam esta doença. O fumo do tabaco contém diversos carcinogénios incluindo hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPA), N-nitrosaminas e aminas heterocíclicas que, após biotransformação, podem formar aductos de ADN e participarem na iniciação da carcinogénese.  Entre os genes envolvidos na biotransformação, foram estudados os genes CYP1A1 e CYP2D6,pertencentes à família do citocromo P450. As enzimas codificadas por estes genes atuam na biotransformação oxidativa de substratos, na fase I do metabolismo de xenobióticos. Da fase II do metabolismo foram estudas os genes que codificam a glutationa S-transferase (GSTs) envolvida na conjugação e a N-acetiltransferase (NAT2) envolvida na acetilação. As múltiplas alterações genéticas encontradas em tecidos de cancro do pulmão envolvem genes supressores tumorais, de que se salientam as mutações do gene TP53. O aumento de proteína mutada, avaliado por imunohistoquímica, foi usado como biomarcador para identificar a presença de mutações em TP53 e estabelecer associações com factores de risco.  O estudo teve a aprovação das Comissões de ética do Hospital e da Faculdade de Medicina, da Universidade de Coimbra. Utilizando as técnicas de PCR-RFLP, “real time” PCR e PCR multiplex, foram avaliadas três variantes alélicas de CYP450 (CYP1A1*2A, CYP1A1*2C e CYP2D6*4), bem como de NAT2 e GSTP1(Ile105Val), GSTT1 e GSTM1 (alelos nulos), em duas populações da Região Centro de Portugal, uma constituída por doentes com cancro do pulmão (n=200) e outra usada como população controlo (n=247).  A análise combinada de todos os alelos estudados por regressão logística, evidenciou associações estatisticamente significativas entre GSTT1 e o fenótipo acetilador lento, de NAT2, na subpopulação masculina e CYP2D6*4 e GSTP1(Ile105Val), na subpopulação feminina. Duas combinações, CYP1A1*2A(T/T)/CYP1A1*2C(A/A) e CYP1A1*2A(T/T)/ CYP1A1*2C(A/G) revelaram-se prevalentes entre populações. Foi encontrada uma associação significativa entre doentes com a combinação CYP1A1*2A(T/T)/CYP1A1*2C(A/A) e o estadio, quando em associação com os hábitos tabágicos. A combinação das três variantes alélicas dos CYPs apresentou prevalência para CYP1A1*2A(T/T)/CYP1A1*2C(A/A)/CYP2D6*4(G/G) e CYP1A1*2A(T/T)/ CYP1A1*2C(A/A)/CYP2D6*4(G/A). Estas revelaram associações estatisticamente significativas entre metastização, histologia e estadio.  As combinações GSTP1(A/G)/GSTT1(neg)/GSTM1(posit) e GSTP1(A/A)/GSTT1 (neg)/GSTM1 (posit) contribuem significativamente para o perfil “ser doente com cancro do pulmão”, quando em associação com sexo masculino e ser fumador. Uma análise individual de GSTP1 demonstrou a sua importância para a caracterização histológica, em indivíduos do sexo masculino fumadores, evidenciando uma prevalência para o adenocarcinoma.  Os acetiladores lentos, prevalentes na população de doentes, revelaram associações estatisticamente significativas para histologia do tumor e metastização. Por regressão logística, a contribuição do fenótipo de NAT2 para o perfil “ser ou não doente” revelou um aumento de susceptibilidade deste com o fenótipo “acetilador lento”, quando em associação com o sexo masculino, consumo de álcool e cessação tabágica, por um período inferior a um ano antes do diagnóstico. Esta suscetibilidade é aumentada quando, a este modelo, associamos primeiro a combinação dos três genótipos das glutationas e posteriormente a combinação dos três genótipos dos CYPs. Os três modelos conferem diferentes riscos para cada variável evidenciando diferentes interacções, responsáveis pela modulação da resposta do indivíduo à doença. A proteína TP53 mutada revelou uma associação estatisticamente significativa com a localização do tumor, no lobo superior dos pulmões, a qual foi reforçada por combinação com GSTP1(A/G). Este estudo revela a importância da caraterização da população em estudos para determinação de genótipos que possam contribuir para a variabilidade individual e suscetibilidade para uma determinada condição. Controlar variáveis que caracterizam o indivíduo e avaliar a contribuição dos polimorfismos genéticos e dos tipos de exposição ambiental e ocupacional parecem ser vias relevantes para o sucesso deste tipo de estudos.  Este estudo revela a importância do estudo da interacção entre genes. Avaliar genes individualmente seria descurar que cada ser humano é um “todo”. As múltiplas contribuições das partes e interacção determinam o estado de saúde ou o desenvolvimento de doença.

Área científica: Ciências Médicas e da Saúde