Expression, distribution et fonction du récepteur B1 des kinines dans la rétine lors du diabète et de la néovascularisation choroïdienne chez le rat

Les kinines sont d'importants médiateurs peptidiques impliqués dans la perméabilité vasculaire, le tonus vasomoteur et l'expression de cytokines pro-inflammatoires. De nombreuses études ont mis en évidence le rôle du récepteur B1 des kinines (RB1) dans l'inflammation systémique et celle de la rétine. L’inflammation joue un rôle prépondérant dans la rétinopathie diabétique et la dégénérescence maculaire liée à l’âge (DMLA), deux pathologies qui représentent les premières causes de cécité dans la population active et la population retraitée. L’objectif principal de cette thèse consiste à évaluer l’implication du RB1 dans ces deux pathologies oculaires. Les objectifs spécifiques sont définis comme suit : 1) étudier l'effet inflammatoire du RB1 et les altérations vasculaires conséquentes dans la rétine de modèles animaux de diabète et de néovascularisation choroïdienne ; 2) préciser la localisation cellulaire du RB1 dans ces rétines ; 3) évaluer la possibilité de traiter ces pathologies par un antagoniste du RB1 ; 4) étudier l’interaction possible entre le RB1 et le facteur de croissance de l’endothélium vasculaire (VEGF), connu pour son rôle clé dans la néovascularisation choroïdienne. Nos résultats confirment le rôle néfaste du RB1 dans les phases aiguës et avancées de la rétinopathie diabétique dans un modèle de diabète de type 1 induit par la streptozotocine (STZ) chez le rat. Le RB1 est fortement localisé sur les cellules endothéliales, la glie et les cellules ganglionnaires dans la rétine STZ. Les taux d'ARNm des récepteurs B1 et B2 des kinines, du VEGF et de son récepteur VEGF-R2 sont significativement élevés à 2 et 6 semaines dans la rétine STZ par rapport à la rétine contrôle. Les niveaux d'ARNm du RB1 demeurent augmentés à 6 mois. L’expression des récepteurs B1 (ARNm et immunodétection) et B2 (ARNm) est amplifiée par l’injection intravitréenne d’un agoniste du RB1 (R-838). En revanche, l’inhibition intravitréenne du RB1 (siRNA-RB1) inhibe l'expression génique des récepteurs des kinines, du VEGF et du VEGF-R2 dans la rétine STZ (Article 1). Les résultats du 2e article soulignent la contribution du RB1 dans une néovascularisation d’origine choroïdienne (CNV) dans un modèle de dégénérescence maculaire liée à l’âge chez le rat. Le RB1 est détecté par immunofluorescence sur les cellules endothéliales et gliales et il est co-localisé avec le VEGF-R2 sur les vaisseaux sanguins des rétines CNV. L’effet de l’application topique d’un antagoniste du RB1 (R-954) ou l’injection intravitréenne d’un anti-VEGF a été étudié sur la surexpression de plusieurs médiateurs inflammatoires impliqués dans la CNV. Ces deux traitements réduisent significativement la surexpression (ARNm) des récepteurs B1 et B2 des kinines, du TNF et de l’ICAM-1 dans la rétine CNV. L’anti-VEGF bloque aussi la surexpression de VEGF, VEGF-R2, HIF-1, MCP-1 et VCAM-1, tandis que le R-954 inhibe l'expression des médiateurs inflammatoires IL-1β et COX-2. Il est important de noter qu’un traitement topique avec le R-954 bloque l’hyperperméabilité vasculaire et l’infiltration leucocytaire dans les modèles de rétinopathie diabétique et de DMLA et diminue la taille de la CNV. Dans un 3e article, nous avons étudié les altérations morphologiques du lit vasculaire rétinien dans un modèle héréditaire de diabète de type 2, le rat Goto-Kakizaki (GK). Nous avons observé une accumulation de lipides dans la rétine et la choroïde associée à la surexpression du RB1 et du VEGF, à la production de macrophages et à la réactivité de la microglie. L’ensemble de ces études supporte un rôle délétère pour le RB1 dans la rétinopathie diabétique et la DMLA et pour lesquelles l’application topique d’un antagoniste de ce récepteur (R-954) peut s’avérer une nouvelle approche thérapeutique.

Keyphrases: Récepteur B1 des kinines, Rétinopathie diabétique, Dégénérescence maculaire liée à l’âge, VEGF, Microglie, Néovascularisation