Role of the orphan nuclear receptor NR5A2 in ovarian function

Le récepteur nucléaire orphelin NR5A2, également connu sous le nom de liver receptor homolog 1 (LRH-1), est exprimé dans l’ovaire, spécifiquement au niveau des cellules de granulosa. L’activation et le développement des follicules ovariens sont caractérisés par la multiplication des cellules de granulosa, des follicules primordiaux et leur unique rang de cellules de prégranulosa, aux follicules préovulatoires avec de nombreuses couches de cellules de granulosa cuboïdales. NR5A2 est un acteur bien connu de la régulation de la prolifération cellulaire dans des organes comme l’intestin et des pathologies comme le cancer du sein. L’hypothèse explorée est que NR5A2 régule le développement folliculaire en agissant sur la prolifération des cellules de granulosa et la régulation de l’activation des follicules primordiaux de la réserve ovarienne. Pour étudier ce facteur de transcription, un modèle de souris transgéniques caractérisées par la déplétion conditionnelle de NR5A2 dans les cellules de granulosa de tous les follicules (génotype Nr5a2f/f; Amhr2Cre+) a été développé. Les souris femelles mutantes, désignées comme cKO (pour conditional knock-out) sont infertiles suite à l’absence d’ovulation. La première partie de l’étude a mis en évidence, et ce aussi bien in vivo qu’in vitro, une déplétion significative du nombre de cellules en phase S, phase du cycle cellulaire au cours de laquelle a lieu la réplication de l’ADN. Cette diminution du nombre de cellules en division s’accompagne d’une déplétion significative de l’expression de gènes essentiels pour la prolifération des cellules de granulosa, parmi lesquels les cyclines D et E. De plus, démonstration a été faite que la régulation de la multiplication cellulaire passait en partie par l’interaction de NR5A2 avec b-caténine et que l’impact négatif de la déplétion de NR5A2 sur la prolifération des cellules de granulosa ne pouvait être secouru par l’adjonction d’estrogènes, un puissant mitogène des cellules ovariennes. Pour ce qui est du mécanisme, il a été déterminé que la régulation négative de CDKN1A, un inhibiteur du cycle cellulaire, est interropue en cas de déplétion de NR5A2. Ce gène a de ce fait été identifié comme un des principaux médiateurs de l’abrogation de la prolifération des cellules de granulosa gonadotropine-dépendante observée dans les souris cKO. La seconde partie de l’étude s’intéresse à l’impact de la déplétion de NR5A2 sur la population de follicules primordiaux. Dans ce même modèle murin, la déplétion de NR5A2 engendre la multiplication des follicules primordiaux et coincide avec la surexpression de marqueurs liés à leur formation et à la survie cellulaire. Ces changements s’accompagnent également de la diminution de la quantité de transcrits codant pour des gènes favorisant l’activation folliculaire. Dans des souris de type sauvage, l’analyse de la localisation de NR5A2 par immunocytochimie a confirmé l’existence de deux sous-populations de follicules primordiaux, l’une exprimant NR5A2 dans les cellules de granulosa est considérée comme prête à s’activer, l’autre caractérisée par l’absence de ce même facteur de transcription est constituée de follicules primordiaux quiescents. Chez les souris cKO une augmentation significative dans l’abondance de la quantité de transcrits de gènes favorisant la quiescence a aussi été établie, ce qui plaide en faveur du concept des deux populations de follicules primordiaux. En conclusion, NR5A2 joue un rôle dans la formation des follicules primordiaux, leur survie et leur activation. Pris dans leur ensemble, ces résultats démontrent que le récepteur nucléaire orphelin NR5A2 est un des régulateurs clé des évènements pré et peri-ovulatoires en agissant en particulier sur l’activation des follicules primordiaux et la prolifération des cellules de granulosa.

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