Le rôle de l'autophagie et de la sénescence dans la fibrose induit par la radiothérapie : implications cliniques en reconstruction mammaire prothétique

La fibrose péri-prothétique est la complication la plus fréquente de la reconstruction mammaire par implant et se manifeste cliniquement par une contracture capsulaire. Cette complication est d'autant plus fréquente et sévère chez les patientes ayant nécessité un traitement de radiothérapie. Les indications de la radiothérapie adjuvante post-mastectomie sont de plus en plus élargies qu'auparavant. Dans un contexte où un nombre croissant de patientes auront recours à la radiothérapie dans le plan de traitement oncologique, la plupart des guides de pratique suggère de retarder la reconstruction mammaire jusqu'après la radiothérapie afin de prévenir les complications fibrotiques à long-terme. Est-ce que la radiothérapie modifie les propriétés cellulaires de façon permanente affectant ainsi les résultats cliniques de la reconstruction mammaire prothétique ? Si oui, y a-t-il un avantage à retarder la reconstruction mammaire post radiothérapie ?  Notre modèle in vitro simulait deux approches de reconstruction mammaire par prothèse où la radiothérapie est nécessaire : l'irradiation de la reconstruction mammaire et la reconstruction mammaire prothétique retardée suite à la radiothérapie. Nous avons procédé à la culture cellulaire de fibroblastes pulmonaires Wi38 et des cellules endothéliales de cordon ombilical humain (HUVEC). Les fibroblastes irradiés simulaient les tissus sains retrouvés autour de l'implant. L'irradiation retardée de la reconstruction mammaire prothétique était simulée par des fibroblastes non-irradiés conditionnés dans un surnageant obtenu de cellules endothéliales irradiées. L'autophagie était induit par la culture cellulaire en milieu sans sérum. L'activation de la sénescence était déterminée grâce à des marqueurs protéiques connus tel que p16 par dosage Western Blot et le marquage histologique à la β-Galactosidase. La diminution du taux protéique de p62 était utilisée comme marqueur d'autophagie. Le Connective Tissue Growth Factor (CTGF), un activateur de la différentiation myofibroblastique, était dosé dans les lignées Wi38 et HUVEC. Le marqueur protéique de la différentiation myofibroblastique employé était l'αSMA. La Tubuline-A était utilisée comme contrôle positif des Western Blot.  L'irradiation a induit la fibrose par la différenciation des fibroblastes en myofibroblastes démontrée par une augmentation des taux du αSMA. Ceci constitue la base de la contraction cicatricielle observée dans la reconstruction mammaire par implant lorsque la radiothérapie est indiquée. L'irradiation des cellules endothéliales a induit la sénescence qui est un arrêt irréversible du cycle cellulaire ; de plus, la sécrétion de l'agent profibrotique CTGF a été observé. Les fibroblastes non-irradiés conditionnés avec un surnageant obtenu de cellules endothéliales irradiées ont démontré une différentiation myofibroblastique en plus de l'expression du phénotype fibrotique caractéristique de la contracture capsulaire. Nous n'avons pas observé d'activation autophagique en réponse à l'irradiation dans notre système.  Nos résultats démontrent que la radiothérapie cause un arrêt irréversible du cycle cellulaire. Ceci altère le microenvironnement cellulaire en faveur de la fibrose. Étant donné que ces changements sont permanents, retarder la reconstruction mammaire après la radiothérapie ne présente pas d'avantage dans la prévention de la contracture capsulaire.

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