Identificação de mutações nos genes APC e MUTYH em famílias com polipose adenomatosa intestinal

Atualmente, pacientes com multiplos adenomas colorretais sao avaliados para mutacoes germinativas em dois genes, APC e MUTYH. Pacientes com mutacoes em APC apresentam Polipose Adenomatosa Familiar Classica ou Atenuada (FAP/AFAP), enquanto que pacientes portadores de mutacoes bialelicas em MUTYH apresentam Polipose Associada ao MUTYH (MAP). O espectro das mutacoes em APC e MUTYH, assim como as correlacoes genotipo-fenotipo nestas sindromes, apresentam importante impacto clinico e podem ser distintas em cada populacao, tornando necessaria a obtencao de dados geneticos e clinicos de diferentes populacoes. Alem disso, cerca de 10-15% dos pacientes com polipose nao apresentam mutacoes nesses genes, o que sugere a existencia de outros genes de predisposicao ainda desconhecidos. Assim, os objetivos deste estudo foram caracterizar mutacoes germinativas nos genes APC e MUTYH em pacientes Brasileiros com polipose, alem de identificar novos genes associados com a sindrome atraves de sequenciamento de exoma dos pacientes negativos. No total, 23 pacientes nao relacionados foram avaliados para mutacoes pontuais na regiao codificante dos genes APC e MUTYH atraves de sequenciamento capilar, e para rearranjos genomicos nos mesmos genes por meio de MLPA (Multiplex Ligation-Dependent Probe Amplification), arrays de hibridacao genomica comparativa (CGH-array), e PCR duplex quantitativo. Este ultimo metodo de avaliacao do numero de copias genomicas foi desenvolvido e validado no presente estudo. Foram identificados 21 pacientes mutados nesta coorte (91%) - 6 pacientes apresentaram mutacoes patogenicas em MUTYH, 14 apresentaram mutacoes patogenicas em APC e um paciente foi portador de uma nova variante missense de significado clinico desconhecido em APC (p.Val1789Leu); seis mutacoes foram descritas pela primeira vez neste trabalho. Em um destes pacientes identificamos a primeira grande delecao genomica descrita no gene MUTYH. Correlacoes genotipo-fenotipo dos dados. (AU) Patients with multiple colorectal adenomas are currently screened for germline mutations in two genes, APC and MUTYH. APC-mutated patients present classic or attenuated familial adenomatous polyposis (FAP/ AFAP), while patients carrying biallelic MUTYH mutations exhibit MUTYH-associated polyposis (MAP). The spectrum of APC and MUTYH mutations as well as the genotype-phenotype correlations in polyposis syndromes present clinical impact and can be population specific, making important to obtain genetic and clinical data from different populations. Furthermore, up to 10-15% of polyposis patients do not harbor mutations in these genes, suggesting that other yet unknown polyposis-predisposing genes could exist. Thus, the aim of this study was to characterize germline mutations in APC and MUTYH genes in Brazilian polyposis and to investigate novel susceptibility genes by exome sequencing of negative patients. At total, 23 unrelated polyposis patients were screened for APC/MUTYH point mutations through DNA capillary sequencing, and for APC and MUTYH genomic rearrangements through MLPA (multiplex ligation-dependent probe amplification), array-comparative genomic hybridization, and duplex quantitative PCR. This last gene dosage method was developed and validated in this study. We identified 21 mutated patients in this cohort (91%) – 6 patients carried MUTYH pathogenic mutations, 14 carried APC pathogenic mutations and one carried a novel APC missense variant of unknown clinical significance (p.Val1789Leu); six mutations were described for the first time in this series. One of these patients harbored the first large genomic deletion identified in MUTYH gene. (AU)