Patogenia de la forma respiratoria del sindrome reproductivo y respiratorio porcino: el papel modulador de las citoquinas en la respuesta inmune

El Sindrome Reproductivo y Respiratorio Porcino representa uno de las enfermedades mas importantes de la industria porcina. Este sindrome se caracteriza por inducir una neumonia interstiticial en cerdos de transicion y de engorde, asi como fallo reproductivo en cerdas gestantes. El PRRS esta causado por un virus ARN, conocido como virus del PRRS (VPRRS), perteneciente a la familia Arteriviridae, orden Nidovirales. Entre los principales aspectos que quedan por conocer de la enfermedad se encuentra la alteracion de la respuesta inmune y el papel que las citoquinas desempenan en la patogenia del PRRS. Asi, el objetivo general de esta tesis consistio en evaluar los cambios de la expresion serica y tisular de diferentes citoquinas y su relacion con la respuesta inmune desarrollada frente al VPRRS. Veintiocho cerdos, libres del VPRRS, fueron inoculados intramuscularmente con el aislado de campo 2982 del VPRRS. Otros cuatro cerdos, de identicas caracteristicas, fueron utilizados como control, sacrificandose al final del estudio. De estos animales se tomaron muestras de sangre y de diferentes organos a los 0, 3, 7, 10, 14, 17, 21 y 24 dias post-inoculacion (dpi) para la determinacion de las subpoblaciones de linfocitos y la expresion de proteinas de fase aguda (PFAs) y citoquinas. En nuestro estudio, el recuento de celulas CD21+ aumento tanto en celulas mononucleares de sangre periferica (CMSPs) como en el nodulo linfatico traqueobronquial entre los 17 y los 24 dpi, coincidiendo con un incremento del titulo de anticuerpos especificos. Asimismo se observo un aumento de las celulas T CD4-CD8high y CD4+CD8+. El recuento de celulas T CD4-CD8low estaba disminuido en todos los organos examinados, mientras que las celulas T CD4+CD8- disminuyeron unicamente en el bazo. La disminucion de la viremia se correlaciono con un aumento de las celulas T CD4-CD8high, y con una mayor expresion de la interleuquina-10 (IL-10) y de la interleuquina-12 p40 (IL-12 p40). Durante la fase temprana de la infeccion no se detecto una respuesta eficiente de interferon gamma (IFN? ) y la expresion de interferon alfa (IFN? ) fue tardia. Estos resultados sugieren que la IL-10 e IL-12 y las celulas T CD4-CD8high serian importantes mediadores en la respuesta inmune frente al VPRRS. La concentracion serica de haptoglobina (Hp) y pig-major acute protein (Pig-MAP) mostro un aumento moderado a los 10 dpi, mientras que los niveles de proteina C reactiva (PCR) y amiloide A serica (AAS) presentaron un incremento retardado y altamente variable. Las citoquinas proinflamatorias fueron detectadas en niveles bajos en suero, observandose solo un aumento moderado de la interleuquina-1 beta (IL-1s). Aunque el factor de necrosis tumoral alfa (TNF? ) se expreso en niveles bajos, se observo una correlacion positiva con la viremia, y con los niveles de IL-6 y Hp. Por todo, el TNF? podria desempenar un papel importante en la modulacion de la respuesta inmune frente al VPRRS. En el pulmon, la expresion tisular de citoquinas proinflamatorias estaba correlacionada con el grado de lesion histopatologica de lesion pulmonar y con la cinetica de los macrofagos, desarrollando estas citoquinas un papel importante en la patogenia de la neumonia intersticial observada en la enfermedad. Una correlacion significativa fue observada entre los niveles de expresion del virus y de la expresion de IL-10, y entre la expresion de IL-12 p40 y TNF? con respecto de IFN? , pero no entre IFN? e IFN? Nuestros resultados sugieren que el VPRRS modula la respuesta inmune a traves de la expresion de IL-10, lo cual podria inducir niveles mas bajos de otras citoquinas implicadas en la eliminacion del virus, como IFN? , IFN? , IL-12 p40 y TNF? Las citoquinas estudiadas fueron expresadas principalmente por macrofagos del septo del pulmon, de forma que estos estarian implicados fundamentalmente en la sintesis y liberacion de citoquinas, mientras que los MAPs representaron la celula diana involucrada en la replicacion del VPRRS.