Ação in vivo de l-leucina sobre sinalização celular e vias metabólicas durante o metabolismo protéico muscular em ratos portadores de tumos Walker 256 = L-leucine-rich diet modulates muscle cell signalling pathway of protein metabolism in Walker 256 tumour-bearing rats

O câncer e uma das principais causas de morte no mundo e o quadro de caquexia provocado por alguns tipos de tumor e um dos grandes responsaveis por isso. A caquexia instaurada em pacientes com câncer, sendo mais prevalente nos tumores gastrointestinal, pulmonar, pancreatico e mamario, e caracterizada, dentre outros processos, pela perda involuntaria de peso, devido a constante espoliacao sobre a massa magra corporal. Estudos que tenham como objetivo a manutencao da massa magra em organismos portadores de tumor caquetico sao importantes para contribuir com a reducao de obitos e preservar a qualidade de vida das pessoas com câncer. Nos ultimos anos, a leucina tem mostrado ser eficaz na manutencao da massa magra corporea atraves do estimulo de sintese proteica muscular e inibicao da degradacao de proteina, principalmente da massa magra corporea. Logo, entender como a presenca da leucina estimula a sintese proteica e atua de forma protetora em organismo no estado caquetico tem se mostrado uma necessidade crescente. Desse modo, a proposta deste trabalho foi avaliar, ao longo do tempo, os efeitos de dieta rica em leucina sobre a sinalizacao de sintese e degradacao proteica, envolvendo o complexo mTOR em musculos de ratos portadores do carcinossarcoma de Walker 256. Os animais foram distribuidos em grupos de acordo com a inoculacao tumoral e/ou esquema nutricional com dieta rica em leucina, sendo sacrificados em tres momentos diferentes do desenvolvimento tumoral (7o, 14o e 21o dias apos a implantacao do tumor). No musculo gastrocnemio foram analisadas as proteinas-chave da via mTOR, como RAG A GTPase, ERK/MAP4K3, PKB/Akt, mTOR, p70S6K1, Jnk, IRS-1, STAT3, e STAT6 e, tambem, foram avaliadas as proteinas de degradacao proteica pertencentes ao sistema ubiquitina-proteossomo (11S, 19S e 20S) e citocinas IL-4, IL-6, IL-10, TNFα e INFγ. Os resultados mostram que o desenvolvimento tumoral reduziu a ativacao de RAG-A, associada com queda de IRS-1, aumento da PKB/Akt e Erk/MAP4K3 no 21o dia e manutencao de p70S6K1; tambem houve aumento dos niveis de STAT-3 e STAT-6 em ratos portadores de tumor. Entretanto, a presenca de leucina na dieta modulou etapas chave da via mTOR pelo desencadeamento da ativacao aumentada de RAG-A e mTOR junto com a manutencao dos niveis de JNK, STAT-3 e STAT-6 no musculo durante o desenvolvimento do tumor de Walker no organismo caquetico. A analise da sinalizacao para degradacao proteica mostrou que o crescimento tumoral promoveu, simultaneamente, diminuicao de proteina muscular, acentuado aumento de citocinas pro-inflamatorias (TNFα, IL-6 e IFNγ) e aumento progressivo das subunidades proteossomicas (19S e 20S), sendo que a suplementacao com leucina atenuou essa ativacao. Os resultados obtidos apoiam o efeito benefico do uso de leucina e esclarece as vias metabolicas utilizadas por este aminoacido, contribuindo para melhor compreensao da acao in vivo desse aminoacido sobre a caquexia. Abstract