Conséquences de la dérégulation de MET sur le phénotype des cancers bronchiques non à petites cellules EGFR mutés devenus résistant aux inhibiteurs de tyrosine kinase d’EGFR

Introduction : Le traitement des cancers bronchiques non a petites cellules (CBNPC) EGFR mutes repose sur les inhibiteurs de tyrosine kinase (ITK) du recepteur de l’Epidermal Growth Factor (EGFR). Cependant tous les patients traites par ITK EGFR finissent par presenter une progression tumorale, du fait de mecanismes de resistance comme l’amplification du gene codant pour le recepteur tyrosine kinase MET. Il n’existe actuellement aucune donnee sur les modifications phenotypiques induites par l’activation de MET dans ce contexte. L’objectif de cette these est de determiner si l’amplification de MET, lors de la resistance aux ITK EGFR dans les CBNPC EGFR mutes, confere aux cellules tumorales un phenotype plus agressif et modifie l’histoire naturelle de la maladie.Methodes : Les capacites de proliferation, de croissance sans ancrage, de formation de spheroides, de resistance a l’anoikis et de migration ont ete etudiees in vitro dans la lignee HCC827, derivee d’un CBNPC EGFR mute, et dans sa lignee fille HCC827-GR6 (GR6) devenue resistante aux ITK EGFR via une amplification du gene MET. L’expression de la vimentine, de ZEB1, et de la E-cadherine a egalement ete etudiee dans les deux lignees cellulaires afin d’evaluer l’impact de l’amplification de MET sur la transition epithelio-mesenchymateuse (TEM). In vivo la croissance tumorale et le potentiel metastatique ont respectivement ete analyses dans des modeles murins de xenogreffe ectopique et d’injection intracardiaque. Enfin les donnees cliniques de patients issus de 15 centres avec un CBNPC EGFR mute metastatique, presentant une forte surexpression de MET en immunohistochimie (score 3+) ou une amplification de MET en FISH sur une re-biopsie realisee apres la progression sous ITK EGFR ont ete analysees retrospectivement. Resultats : In vitro, l’amplification de MET induisait une augmentation significative de la proliferation, de la croissance sans ancrage, de la formation de spheroides, de la resistance a l’anoikis et de la migration. En presence d’un inhibiteur de MET, le PHA-665752, ces differentes proprietes biologiques etaient reduites de facon significative dans les cellules GR6 porteuses de l’amplification de MET. Il etait egalement mis en evidence dans les cellules GR6 une augmentation de l’expression de la vimentine et de ZEB1. In vivo, l’amplification de MET augmentait significativement la croissance tumorale et le potentiel metastatique. Un traitement par crizotinib, ITK ciblant MET, diminuait de facon significative le potentiel metastatique des cellules porteuses de l’amplification de MET. Enfin les patients atteints d’un CBNPC EGFR mute, porteur d’une amplification de MET a la resistance a l’ITK EGFR, presentaient une duree jusqu’a apparition de nouvelles metastases plus courte apres progression sous ITK EGFR que les patients avec une forte surexpression de MET sans amplification genique. Conclusion L’amplification de MET dans un contexte de resistance aux ITK EGFR est associee a un phenotype tumoral plus agressif. Ces resultats plaident en faveur d’une utilisation precoce d’inhibiteurs de MET en association avec les ITK EGFR afin d’eviter l’emergence d’un clone tumoral resistant plus agressif.