Développement de la lignée germinale femelle humaine

La mise en place de la lignee germinale au cours du developpement constitue une des etapes fondamentales conditionnant la fertilite de l’individu adulte. Au cours des dernieres decennies, le nombre croissant de couples consultant pour une aide medicale a la procreation a fait emerger l’hypothese d’une alteration des fonctions de reproduction chez l’Homme qui pourrait trouver son origine dans la perturbation du developpement precoce. Dans l’ovaire fœtal, les cellules germinales s’orienteront vers la voie de l’ovogenese, caracterisee entre autres par l’entree en meiose de ces cellules. La majorite des donnees actuelles relatives a ces evenements sont issues du modele murin alors que le developpement de l’ovaire humain est significativement different de celui de la souris. Il est donc necessaire d’approfondir nos connaissances du developpement ovarien humain et d’identifier ses eventuelles perturbations. L’objectif de mon travail a ete de mettre au point un outil d’etude du developpement ovarien et d’identifier de nouvelles voies impliquees dans la regulation de l’entree en meiose des cellules germinales fœtales humaines et leurs perturbations eventuelles.Nous avons mis au point un nouveau modele de xenogreffe d’ovaires fœtaux humains du premier trimestre de gestation (au moment de l’apparition des premieres cellules meiotiques). Ce modele nous a permis d’observer un developpement de l’organe et une differenciation des cellules germinales similaires a ceux observes in vivo. Ce modele permettra des travaux a des âges auxquels le materiel d’etude est peu accessible. En couplant ce modele de xenogreffe a une strategie d’ARN-interference, il nous a ete possible d’inhiber l’expression d’un gene specifiquement exprime dans les cellules germinales ovariennes, DMRTA2, et de mettre en evidence un potentiel role de ce gene dans leur differenciation pre-meiotique. Nous avons observe une diminution du nombre de cellules ayant initie la meiose apres inhibition de l’expression de ce gene. Par ailleurs, nous avons egalement identifie la presence dans l’ovaire fœtal de nombreux marqueurs decrits comme testiculaires chez la souris (PLZF, DNMT3L, FGF9, NANOS2 ou CYP26B1). L’expression de ces marqueurs pourrait expliquer la presence de cellules mitotiques tardives dans l’ovaire fœtal humain que nous avons pu observer jusqu’a 30 semaines de gestation. En parallele de ces travaux, nous avons teste la sensibilite des cellules germinales a la dexamethasone, glucocorticoide pouvant etre administre au cours de la grossesse. Il a ete observe une augmentation de l’expression de PLZF, gene cible de l’activation des recepteurs aux glucocorticoides, pouvant expliquer la diminution du nombre de cellules germinales.En conclusion, ce travail de these a permis d’identifier un nouveau gene potentiellement regulateur de la transition mitose/meiose dans l’ovaire humain, et d’affiner nos connaissances sur le developpement de l’ovaire humain et l’entree en meiose des cellules germinales. Toutefois, de nombreuses questions restent posees ainsi de futures etudes devront clarifier si les cellules germinales mitotiques observees a des stades tardifs sont capables de se differencier en ovocytes competents.