Specific Associations Between Clinical Signs, Immune Cells, Disease Genetic Background and Burden in a Group of Patients with B-Cell Chronic Lymphocytic Leukemia

Abstract Traffic of tumor- and normal cells through the peripheral blood (PB) of patients with B-cell chronic lymphocytic leukemia (B-CLL) to the lymph nodes (LN) or spleen/ liver sites is governed by specific changes in surface and intracellular molecule expression. The study aims to investigate the potential association between different lymphocyte subsets, chemokine receptors or genetic alterations and specific clinical signs in a group of B-CLL patients. Forty-three patients were included in the study. The expression of CCR7, CXCR5, CXCR3, CCR4, CD3, CD4, CD8, CD27, CD28, CD45RA, CD25, CD127, CD38 was tested by multiparameter flow cytometry. Genetic alterations were determined by MLPA. We found increased frequency of CD38+ B-CLL cells directly correlated with the presence of LN>5cm. CXCR5 and CCR7 are homogenously expressed by monoclonal B-CLL cells. CCR4+ B-CLL cell frequency is found to be lower in the PB of patients presenting particular LN involvement. Heterogeneous and complex genetic alterations were found and only the presence of trisomy 12 associated with less frequent axillary LN involvement. We also report a significant increase in the frequency of total T cells and T cell subsets (effector- and central memory CD4+ T cells, regulatory T cells, follicular T helper cells, distinct functional CD8+ T cells) with the occurrence of specific clinical manifestations. Chemokine receptor expression on circulating CD4+ T cell subsets was augmented in connection to some specific LN locations. Consequently, clinical manifestations in B-CLL are linked to both, factors intrinsic to the monoclonal B cells, and external influences coming from the microenvironment. Rezumat Traficul limfocitelor maligne și normale prin sângele periferic (PB) către ganglioni, splina și ficat este guvernat de modificări specifice ale nivelelor de expresie de suprafață/ intracelulară a unor molecule. Studiul își propune să investigheze asocierea dintre diferite subseturi limfocitare, receptori pentru chemokine sau aberații genetice și anumite simptome clinice la pacienți cu LLC-B. Patruzeci și trei de pacienți au fost incluși în studiu. Prin citometrie în flux multiparametrică a fost testată expresia pentru CCR7, CXCR5, CXCR3, CCR4, CD3, CD4, CD8, CD27, CD28, CD45RA, CD25, CD127, CD38. Defectele genetice au fost determinate prin MLPA. Am observat o frecvență crescută a celulelor CD38+ clonale corelată cu infiltrarea ganglionilor>5cm. CXCR5 si CCR7 sunt omogen exprimați de celulele de LLC-B. Frecvența celulelor B CCR4+ este redusă la pacienții cu un anumit tip de infiltrare ganglionară. Am detectat aberații genetice heterogene și complexe și trisomia 12 este mai frecventă la pacienții ce nu prezintă ganglioni axilari. Deasemenea, frecvența limfocitelor T totale și a unor subseturi (memorie efector și centrală, T reglatorii, T helper foliculare, diferite subseturi funcționale CD8+) este crescută doar concomitent cu prezența anumitor manifestări clinice. Expresia receptorilor pentru chemokine la nivelul limfocitelor T CD4+ este crescută în conexiune cu anumite localizări ganglionare. În concluzie, manifestările clinice la pacienții cu LLC-B sunt în strânsă legatură atât cu factori intrinseci limfocitelor B clonale, cât și de influențe externe, furnizate de semnale provenite din micromediu.