BoLA class II polymorphism and immune response to Mycobacterium bovis antigens in vitro

Summary In a sample of 47 Holstein-Friesian calves, experimentally sensitized in vivo with a suspension of killed Mycobacterium bovis the BoLA class-II polymorphism was analysed at the DQA, DQB, and DRB loci to define its role in the specific immune response. Lymphocyte proliferation under PPD stimulation, phagocytosis of killed M. bovis cells, and the humoral response to PPD antigens, tested by ELISA, were performed in vitro 21 days after sensitization to evaluate the specific immune response. All the animals responded well to the immune test. The humoral response was only slightly affected by some alleles in the D subregions investigated. Lymphocyte proliferation was significantly, and positively, affected by DQA*5, DQB*5, and DRB*5B+5C of the linkage group DH*18A. In particular, the effect of DRB*5C alone was more than two times higher than the standard deviation. Phagocytosis was significantly and negatively affected by DQA*9B and DQB*9B of the linkage group DH*22B, and also by DQA*1A, DQB*1, and DRB*1A of the linkage group DH*24A. In these specific experimental conditions, the results demonstrate that the humoral response is only slightly under the control of some class-II alleles, while lymphocyte proliferation and phagocytosis are affected. The DRB locus shows a major effect on lymphocyte proliferation. Resume Le polymorphisme de BoLA classe II a ete analysee au DQA, DQB et DRB loci pour definir son role dans la reponse immune specifique relative a un groupe de 47 veaux Holstein Friesian sensibilises d'une facon experimentale in vivo avec une suspension de M. bovis mort. La proliferation de Lymphocites sous PPD stimulation aussi bien que la phagocitosis de cellules mortes de M. bovis et la reponse humoral aux antigens PPD avec le test ELISA a ete faite in vitro 21 jours apres la sensibilisation pour evaluer la reponse immune specifique. Tous les animaux ont bien repondu a tous les tests d'immunite. La reponse humoral a ete influencee leggermente par aucun allele des sous-regions D investiguees. La proliferation des Lymphocites a ete remarquablement et positivement influencee par les alleles DQA*5, DQB*5 et DRB*5B+5C du groupe de linkage DH*18A. En particuler l'effect du DRB*5C a ete deux fois plus grand que l'ecart-type. La phagocitosis a ete remarquablement et negativement influencee par DQA*9B et DQB*9B du groupe de linkage DH*22B aussi que par DQA*1A, DQB*1 et DRB*1A du groupe de linkage DH*24A. Les resultats demontrent que la reponse humoral est seulement en part sous le control de quelque allele de le classe II, d'autre part dans nos conditions experimentales specifiques la lymphoproliferation et la phagocitosys sont influencees. Le locus DRB demontre un effect important sur la lymphoproliferation liee a l'allele DRB*5C. Resumen El polimorfismo de clase BoLA II fue analisado en loci DQA, DQB et DRB para definir su efecto en la inmmunidad specifica relativa a un grupo de 47 novillos Holstein Friesian sensitizadas experimentalmente en vivo con una suspension de M. bovis matado. La proliferacion de Lympocites bajo stimulacion con PPD, asi como la phagocitosis de celulas muertas de M. bovis y la reaccion humoral a los antigenes PPD fue hecha con el test ELISA en vitro 21 dias despues de la sensitisacion para evaluar la reaccion immuno specifica. Todos los animales dieron buenos respuestas a todos los test de inmmunidad. La reaccion humoral a sido afectada un poco de las subregiones D investigadas. La proliferacion de los Lymphocitos fue notablemente y positivamente afectada por DQA*5, DQB*5 y DRB*5+5C del grupo de linkage DH*18A. En particular el efecto del DRB*5C a sido dos veces mas grande de la deviacion standard. La phagocitosis a sido notablemente y negativamente affectada por DQA*9B y DQB*9B del grupo de linkage DH*22B asi como por DQA*1A, DQB*1 y DRB*1A del grupo de linkage DH*24A. Los resultados demuestran que la reaccion humoral es solamente un poco afectada por algunos alleles de clase II, sin embargo con nuestras condiciones experimentales especificas, quedan afectadas la linfoproliferacion y la phagocitosys. El locus DRB demuestra un efecto importante sobre la limphoproliferacion debido a l'allele DRB*5C. Zusammenfassung BoLA Klasse II Polymorphisms und in vitro Immunreaktion auf M. bovis Antigene BoLA Klasse II Polymorphismus wurde an DQA, DQB und DRB Loci experimentell in vivo mit einer Suspension von M. bovis sensibilisierten 47 Holstein-Frisian Kalbern analysiert, um ihre Rolle bei der spezifischen Immunreaktion zu definieren. Um diese zu beurteilen, wurde Lymphozyten Proliferation nach PPD Stimulation, Phagozytose getoteter M. bovis Zellen und humorale Reaktion auf PPD Antigene durch ELISA in vitro 21 Tage nach Sensibilisierung beurteilt. Letztere zeigte nur geringfugige Beeinflussung durch Allele der Subregionen, aber Lymphozyten Proliferation wurde signifikant durch DQA*5, DQB*5 und DRB*5B+C der Kopplungsgruppe DH*18A beeinflust. Die Wirkung des Alleles DRB*5C war mehr als das Doppelte der Standardabweichung. Phagozytose wurde signifikant durch DQA*9B, and DQB*9B der Kopplungsgruppe DH*22B und auch durch DQA*1A, DQB*1 und DRB*1A der Kopplungsgruppe DH*24A gesenkt. Die Ergebnisse zeigen, das die humorale Reaktion weniger durch Allele Klasse II beeinflust wird, wohl aber Phagozytose und Lymphozyten Proliferation. Der DRB Locus zeigt eine erhebliche Wirkung auf Lymphozyten Proliferation.