Optimisation du contrôle microbiologique des milieux d'organoculture des greffons cornéens

But : Comparer l'efficacite et la rapidite de l'utilisation de flacons a hemoculture, avec les methodes microbiologiques conventionnelles, dans le controle de sterilite des milieux d'organoculture des greffons corneens. Materiels et methodes : Deux etudes complementaires ont ete realisees. Etude experimentale : des milieux d'organoculture standards ont ete volontairement contamines par 4 inocula croissants de 14 bacteries et 3 champignons. L'activite bactericide du milieu d'organoculture a ete evaluee apres 48 heures d'incubation a 31°C. Etude observationnelle : 357 echantillons de milieux d'organoculture ont ete recueillis dans notre banque de cornee sur une duree un an. Pour les 2 etudes, les milieux etaient inocules dans 3 flacons a hemoculture (aerobie, anaerobie, fungique) places dans un automate a detection automatique toutes les 10 minutes, et dans 3 bouillons microbiologiques conventionnels servant de controle. Les modifications de couleur du milieu d'organoculture et la croissance des microorganismes sur les bouillons conventionnels etaient notees quotidiennement. Pour les 3 techniques, les echantillons etaient observes experimentalement pendant 14 jours. La sensibilite et la rapidite de detection des contaminations etaient comparees entre les 3 methodes : flacons a hemoculture, methode conventionnelle et inspection visuelle de la couleur du milieu. Resultats : Etude experimentale : le milieu d'organoculture a eradique cinq bacteries : S. pneumoniae, B. catarrhalis, E. coli, P. acnes et H. influenzae. Pour les autres microorganismes (S. aureus methicilline-resistant, S. aureus methicilline-sensible, S. epidermidis, S. haemolyticus, P. aeruginosa, A. baumannii, B. subtilis, K. pneumoniae, E. faecalis, C albicans, C. kruzei, A. fumigatus), les flacons a hemoculture, la methode conventionnelle et l'inspection visuelle ont detecte la contamination dans respectivement 100, 76,5, et 70 % des cas. Le temps moyen de detection par les flacons a hemocultures etait de 15,1 heures (ecart type 13,8, extremes 2-52). En cas de detection conjointe par les flacons a hemoculture et la methode conventionnelle, les flacons a hemoculture etaient toujours plus rapides avec respectivement 95,5 versus 65,2 % de detection en 24 heures ou moins (p = 0,022). Etude observationnelle : le taux de contamination etait de 8 % (29/357). Le gain de sensibilite des flacons a hemoculture etait de 25 % par rapport a la methode conventionnelle. Cinq bacteries (3 Staph. coag. neg., 1 E. faecalis, 1 P. paucimobilis) ont ete detectees uniquement par les flacons a hemoculture. Les flacons a hemoculture etaient, la encore, toujours plus rapides avec respectivement 66,6 versus 26,6 % de detection en 24 heures ou moins (p = 0,028). Conclusions : Les flacons a hemoculture detectent plus efficacement et plus rapidement la contamination des milieux d'organoculture que les methodes microbiologiques conventionnelles. Ils permettent de reduire la periode de quarantaine des greffons corneens avec un niveau de securisation au moins aussi eleve. Leur usage devrait en consequence etre recommande dans les bonnes pratiques de conservation au sein des banques de cornees.