Effets des sensibilisants sur la synthèse de la prostaglandine E2 : Mécanismes et intérêt dans la prédiction de l’allergie de contact

Les sensibilisants de contact sont des molecules reactives electrophiles qui ont la capacite de modifier des proteines de la peau pour former un antigene. Au dela de ce mecanisme d'haptenisation, le signal de danger induit par les sensibilisants conduisant a l'activation des cellules dendritiques (DC) est un element determinant dans l'induction de cellules T specifiques de l'haptene. Dans le contexte du 7ieme amendement a la directive cosmetique europeenne, la mise en place d'une batterie de tests in vitro permettant de predire le potentiel sensibilisant de molecules est indispensable pour l'industrie cosmetique. Tandis que la plupart des etudes in vitro etudient les signaux de danger induits par les sensibilisants dans des modeles homeostasiques, nous nous sommes interesses a l'effet des sensibilisants sur la mise en place d'une reponse inflammatoire. Lorsque la lignee U937 est differenciee avec du PMA et stimulee avec du LPS, les facteurs de transcription NF-κB et Nrf2 sont actives et l'acide arachidonique (AA) est metabolise au travers de la cascade cPLA2 / COX-2. L'ensemble de ces voies activees conduit a la production par les U937 d'un grand nombre de mediateurs inflammatoires (IL-1β, TNF-α, IL-6, IL-10, IL-8, PGE2, PGD2, TxB2). Dans ce modele, nous avons analyse l'effet de 6 sensibilisants de potentiels varies (DNCB, PPD, HQ, PG, CIN, EUG) et montre que de facon inattendue, tous les sensibilisants etudies diminuent significativement et de facon specifique la production de tous les prostanoides et en particulier de PGE2 induite par PMA/LPS. Nous avons de plus demontre que selon les sensibilisants, les cibles de cette inhibition au sein de la cascade metabolique de l'AA different, meme si elles se focalisent la plupart du temps (sauf pour le DNCB) sur l'enzyme COX-2 (inhibition de son expression et/ou de son activite). Pour le DNCB, le mecanisme d'inhibition semble plutot impliquer sa capacite a reagir fortement avec les groupements residus thiols, ce qui se traduit en particulier par la depletion du GSH intracellulaire et engendrerait l'inhibition des synthases dependantes du GSH pour leurs activites. En parallele de cette etude mecanistique, nous avons apprehende la problematique du point de vue statistique et verifie sur un set plus important et diversifie de molecules (160 molecules) que le parametre « inhibition de PGE2 » pouvait etre un bon test de prediction de l'HSRC. L'etude statistique a permis de determiner le modele predictif du test PGE2 et de mettre en evidence de bonnes performances (78%) par rapport aux predictions du LLNA. Au-dela, une certaine complementarite du test PGE2 avec d'autres tests in vitro (MUSST, Nrf2-HTS) a pu etre mise en evidence. En conclusion, au travers de cette etude, nous avons pu mettre en evidence de nouvelles proprietes biochimiques des sensibilisants. Meme si la signification biologique de la diminution de PGE2 par les sensibilisants de contact demeure complexe d'interpretation, ce parametre a permis le developpement d'un test qui predit avec de bonnes performances le caractere sensibilisant de molecules et dont la position au sein d'une batterie predictive d'evaluation de l'allergie de contact reste a etre precisee.