Pharmacological targets mediating colonic smooth muscle relaxation

Els principals neurotransmissors excitatoris al colon son l’Acetilcolina i les taquiquinines, mentre que l’adenosina trifosfat (ATP) (o purina relacionada) i l’oxid nitric (NO) son els principals neurotransmissors inhibitoris que causen hiperpolaritzacio del muscul llis i la corresponent relaxacio. Recentment, el sulfur d’hidrogen (H2S) ha estat proposat com un mediador inhibitori. A mes, les vies relacionades amb la prostaglandina E2 (PGE2) han estat relacionades amb el control de la contractilitat gastrointestinal. El segu? ents mecanismes d’accio de diferents mediadors “espasmolitics” han estat investigats: activacio dels receptors acoblats a proteines G (GPCR) inhibitoris P2Y1 i EP2/EP4, inhibicio dels GPCR excitatoris muscarinic i taquiquinergic i blocatge dels canals de calci voltage depenents (VDCC) de tipus L i T. En el colon huma i de rata, la relaxacio no nitrergica fou inhibida per MRS2500 i apamina, suggerint que la purina endogena activa receptors P2Y1 i canals de potassi activats per calci de baixa conductancia. Diferents agonistes purinergics (ATP, ADP, ? NAD i ADP? ribosa) van ser capacos d’inhibir la contractilitat pero no van ser antagonitzats per MRS2500 ni apamina. En canvi, ? ,? meATP, analeg estable de l’ATP considerat un agonista P2X, va imitar perfectament el perfil farmacologic del neurotransmissor purinergic en ambdues especies. L’activacio dels receptors inhibitoris EP2/EP4 va produir relaxacio de la musculatura llisa circular del colon de ratoli. En ratolins wild type (WT), PGE2 i butaprost van causar relaxacio i hiperpolaritzacio del muscul llis. La combinacio dels antagonistes selectius dels receptors EP2 (PF? 04418948) i EP4 (L? 161,982) fou necessaria per blocar els efectes de la PGE2, suggerint activacio d’ambdos receptors. Els efectes inhibitoris de butaprost van ser totalment blocats per PF? 04418948. En ratolins knockout pel receptor EP2 no es va observar cap efecte despres de l’addicio exogena de butaprost mentre que els efectes de la PGE2 van ser completament antagonitzats per L? 161,982. En animals WT, els antagonistes dels receptors EP2 i EP4 van causar despolaritzacio del muscul llis aixi com un increment en l’activitat mecanica, suggerint una produccio constitutiva de prostaglandines activant ambdos receptors. En el colon huma, la combinacio dels inhibidors dels enzims de sintesi de H2S cistationina ? sintasa i la cistationina ? liasa van despolaritzar el muscul llis i van produir un increment de to. NaHS, un donador de H2S, va inhibir les contraccions de forma concentracio? depenent. Aquest efecte fou reduit per l’inhibidor de guanilat ciclasa ODQ i per l’inhibidor de la sintesi de NO L? NNA. NaHS va blocar de manera reversible les contraccions colinergiques i taquiquinergiques neuralment mediades aixi com l’increment d’activitat mecanica induida per carbachol i neurokinina A (NKA). El H2S podria ser un gasomediador endogen capac de regular la contractilitat de la musculatura llisa del colon huma i els seus efectes inhibitoris podrien ser deguts tant a una possible sinergia amb NO com a la interaccio amb les vies colinergiques i taquiquinergiques. Hem investigat tambe les propietats farmacologiques del farmac espasmolitic bromur d’otiloni (OB). Els increments de calci citoplasmatic i les contraccions mediades per canals de tipus L sensibles a nifedipina van ser inhibits per OB. En presencia de nifedipina, OB va inhibir les respostes muscariniques sensibles a atropina induides per carbacol i estimul electric de camp. A mes, OB va blocar els increments de calci citoplasmatic induits per NKA i CaCl2. Aquests resultats demostren que el OB inhibeix els VDCC de tipus L i T aixi com les respostes muscariniques i taquiquinergiques, efectes que actuant conjuntament expliquen les seves propietats farmacologiques. Els resultats presentats en aquest treball suggereixen que les vies inhibitories relacionades amb els GPCR P2Y1 i EP2/EP4 i H2S podrien ser considerades com potencials dianes farmacologiques pel tractament de l’espasticitat associada a desordres motors colonics.