Factors relacionats amb el manteniment de la inflamació i l'oclusió vascular. Implicacions en l'evolució dels pacients amb arteritis de cèl·lules gegants.

L'arteritis de cel·lules gegants (ACG) es una vasculitis sistemica de caracter granulomatos que afecta vasos de calibre mitja i gran. Per aprofundir en els mecanismes que intervenen en el desenvolupament de la hiperplasia intimal i la inflamacio en l'ACG, vam dissenyar un nou metode d'obtencio de cel·lules miointimals (HTAMC) a partir de biopsies d'arteries temporals dels pacients. Vam analitzar l'efecte de PDGF-AB, FGF-2, VEGF, EGF, TGFβ, CCL2, IL-6 i IL-1β sobre la proliferacio i migracio de les HTAMC. El PDGF va ser el principal agent mitogenic, seguit pel FGF-2. Respecte a la migracio, nomes el PDGF i l'EGF van demostrar una accio quimiotactica. Probablement el comportament d'aquestes cel·lules in vivo es el resultat d'un balanc de diferents estimuls, per tant, caldra plantejar-se el disseny de terapies dirigides i combinades.Donat que el PDGF va esser el factor que mes influencia el comportament de les HTAMC, vam estudiar els efectes de l'imatinib mesylate (Gleevec®), un inhibidor del receptor del PDGF. Vam demostrar que l'imatinib bloqueja les vies de senyalitzacio del PDGF, i consequentment, inhibeix la proliferacio i la migracio de les HTAMC estimulades amb PDGF. Tambe vam estudiar altres funcions del PDGF i vam observar que incrementa l'expressio dels col·lagens tipus I i III i tambe augmenta la produccio de fibronectina en les HTAMC. L'imatinib va inhibir l'estimulacio en la produccio d'aquestes proteines de matriu extracel·lular. D'altra banda, vam demostrar que el PDGF estimulava la secrecio de CCL2 i d'angiogenina en les HTAMC i que l'imatinib contrarestava tambe aquests efectes. Donat que no es disposa d'un model animal de la malaltia, el cultiu de seccions d'arteria temporal sobre Matrigel® es un metode que ens permet analitzar tota la complexitat d'aquest sistema, ja que conte tots els tipus cel·lulars de l'arteria mes l'infiltrat inflamatori. Als set dies, s'inicia el creixement de les HTAMC fins a formar un cultiu confluent. L'imatinib inhibeix el creixement de les HTAMC a partir de l'arteria. Aquests resultats in vitro i ex vivo son encoratjadors demostrant que l'imatinib podria ser terapeuticament util per contrarestar el proces inflamatori i el desenvolupament de la hiperplasia intimal que es produeix en les arteries en l'ACG, pero nomes un assaig clinic podria comprovar la utilitat de l'imatinib in vivo.En el segon estudi ens vam plantejar esbrinar quin es el paper de l'endotelina (ET) en l'ACG. Primerament, vam quantificar els nivells d'ET en el plasma dels pacients i van concloure que els pacients que patien fenomens isquemics tenien significativament mes ET circulant que els que no tenien aquestes complicacions. A les biopsies d'arteria temporal, els pacients van presentar nivells mes alts de totes les proteines del sistema (ET-1, ECE-1 i ambdos receptors A i B). Mentre que a nivell d'expressio d'ARNm, els pacients tenien nivells mes baixos de tots els components. Davant d'aquesta regulacio negativa de tot el sistema, ens vam plantejar l'existencia d'un mecanisme de retroalimentacio negativa degut a l'exces d'ET. Els experiments in vitro amb cel·lules endotelials i miointimals van demostrar que l'ET no regula negativament la seva propia expressio. En canvi, el PDGF i l'IL1β van regular negativament l'expressio de l'ARNm de l'ET en HTAMC.Als pacients tractats durant 8 dies de mitjana amb glucocorticoides, el tractament d'eleccio de l'ACG, va disminuir l'ECE-1 i ETAR pero no van disminuir els nivells d'ET-1, que es la molecula amb activitat funcional vasoconstrictora. Les nostres dades experimentals indiquen que el PDGF i l'endotelina poden estar implicats en la progressio de les lesions arterials dels pacients amb ACG i pensem que aquests resultats poden ser utils pel disseny d'assaigs clinics de terapies mes dirigides.