Charakterisierung und Therapie der experimentellen Cholangitis im Mausmodell

Die Pathogenese cholestatischer autoimmuner Lebererkrankungen, wie der PBC und der PSC sind weitgehend unklar, und es gibt zur Zeit keine spezifische Therapie fur diese Erkrankungen. Das Ziel der Arbeit war daher die Etablierung und Charakterisierung neuer Mausmodelle der portalen Leberentzundung und die Uberprufung der therapeutische Wirksamkeit eines adoptiven Transfers von regulatorischen T Zellen in diesen Modellen. Im Rahmen dieser Arbeit wurde als Mausmodell einer Antigen-spezifischen portalen Entzundung das transgene K14OVAp Mausmodell etabliert. Durch Transfer von OT1 CD8+ T Zellen ist es gelungen, in den K14OVAp Tieren eine portale Entzundung zu induzieren. Dabei zeigte sich, dass das Modell geschlechtsabhangige Unterschiede aufweist, welche der humanen Erkrankungsrate der PBC entsprechen und welche durch Sexualhormone beeinflussbar sind. So induzierte der OT1 CD8+ T Zelltransfer in den K14OVAp Weibchen eine Entzundung in der Leber mit peribiliaren und periportalen Infiltraten, und 50% der K14OVAp Weibchen wiesen AMA Antikorper auf. Bei den mannlichen K14OVAp Tieren hingegen pragte sich keines dieser Merkmale nach OT1 CD8+ T Zelltransfer aus. Die geschlechtsspezifischen Unterschiede beruhten dabei nicht auf einer veranderten Anzahl der regulatorischen Zellen. Vielmehr zeigten sich deutliche Unterschiede in den Effektorantworten der endogenen Leberzellen in den K14OVAp Empfangertieren. Anders als bei bisher beschriebenen Tiermodellen der PBC, zeigt das K14OVAp Modell somit deutliche geschlechtsspezifische Unterschiede in Suszeptibilitat und Auspragung der Immunpathologie, die denen der humanen Erkrankung entsprechen. Da das K14OVAp Modell zudem im adulten Tier induzierbar ist, erscheint es geeignet, als Modell der PBC zu dienen. Als weiterer Aspekt dieser Arbeit wurde der therapeutische Effekt adoptiv transferierter regulatorischer T Zellen (Treg) auf cholestatische Lebererkrankungen in verschiedenen Modellen mit unterschiedlichen Manifestationsformen untersucht. Hierfur wurden frisch isolierte Treg adoptiv in Mausmodelle primar Antigen-unspezifischer (MDR2-/- und DDC) und Antigen-spezifischer (K14OVAp) Entzundung transferiert. Die Versuche zeigten, dass der Treg Transfer weder in den Modellen der primar nicht autoimmun bedingten Leberentzundung, noch der antigenspezifischen portalen Entzundung zu einer verminderten Immunpathologie fuhrte. Da nTreg nur in geringer Zahl im peripheren Blut vorkommen, aber fur eine therapeutische Applikation eine ausreichende Menge von Zellen zur Verfugung stehen muss, wurde zudem die in vitro Konversion CD4+CD25-Foxp3- T Zellen zu stabilen CD4+CD25+Foxp3+ iTreg weiterentwickelt und optimiert. Hierbei zeigte sich, dass die TGFβ-abhangige Konversion durch Zugabe von Rapamycin und Retinsaure signifikant gesteigert werden konnte. Zudem wurden durch die Zugabe von Rapamycin iTreg generiert, welche wesentlich stabiler ihre Foxp3 Expression aufrecht erhalten konnten, als iTreg, welche alleine mit TGFβ generiert wurden. Es bleibt zu untersuchen, inwieweit die in vitro generierten iTreg auch in vivo nach Transfer eine stabile suppressive Funktionalitat bewahren, und somit fur eine Therapie entzundlicher Lebererkrankungen geeignet sind. Zusammenfassend konnte mit der Etablierung des K14OVAp ein induzierbares und geschlechtsabhangiges Mausmodell einer biliaren Cholangitis entwickelt werden, welches beeinflussbar durch Sexualhormone ist. Es ermoglicht, fruhe Prozesse in der Entstehung einer autoimmun bedingten portalen Entzundung zu analysieren und zu verstehen. Der Transfer von regulatorischen Zellen war in der bisherigen Form nicht geeignet, die Leberentzundung in verschiedenen Modellen zu hemmen. Hier bedarf es weiterer Analysen, um die therapeutische Effizienz des Transfers von Treg zu verbessern.