Ermittlung der Bindespezifitäten für das canine MHC-Klasse-I-Allel DLA-88*03201 sowie vergleichende Betrachtung viraler und zellulärer Liganden von DLA-88*50101 und HLA-A*02:01

Fur die Behandlung von Krebserkrankungen existieren inzwischen, neben den konservativen Methoden, der chirurgischen Intervention, der Radio- und der Chemotherapie, auch eine Reihe alternativer Therapieansatze. Hierzu zahlt unter anderem die Immuntherapie mittels Peptidvakzinen, welche sich durch die Injektion von im Voraus bestimmten, tumorassoziierten und tumorspezifischen Peptiden auszeichnet. Infolgedessen kann eine spezifische T-Zell-Immunantwort gegen Tumorzellen ausgelost werden und der Korper wird somit in die Lage versetzt, entartete Zellen zu erkennen und selbst zu eliminieren. Eine wichtige Voraussetzung fur die Etablierung von Peptidvakzinen besteht in der Kenntnis der Bindungsanspruche, die ein MHC-Molekul, je nach MHC-Allel, an seine Peptidliganden stellt. Wahrend in der Humanimmunologie bereits eine Vielzahl an allelspezifischen Bindemotiven definiert werden konnte, ist in der Veterinarimmunologie noch relativ wenig daruber bekannt, wie Peptide auf caninen MHC-Molekulen verankert sind. In dieser Arbeit wurden daher humane C1R- und K562-Zellen mit dem caninen MHC-Klasse-I-Allel DLA-88*03201 transfiziert, die MHC-Molekule anschliesend mittels Immunaffinitaschromatographie selektiert und 289 DLA-assoziierte Liganden mittels massenspektrometrischer Analyse identifiziert. Daraus ergab sich die Moglichkeit, die Bindespezifitaten fur das canine MHC-Klasse-I-Allel DLA-88*03201 zu definieren, welche vermutlich durch die Aminosauren Arginin und Valin an Position 1 sowie die Aminosauren Phenylalanin und Leucin an Position 9 bestimmt werden. Daruber hinaus konnten C1R-DLA-88*50101-Zellen mit dem Influenza-A-Virus H1N1 Regens-burg/D6/2009 infiziert werden, wodurch nach durchgefuhrter Immunaffinitatschromatographie und massenspektrometrischer Analyse erstmalig 8 virale DLA-88*50101-Liganden identifiziert werden konnten. Durch den Vergleich zellularer und viraler HLA-A*02:01- und DLA-88*50101-Liganden konnte in dieser Arbeit dargelegt werden, konform mit bereits existierenden Forschungsergebnissen, dass bei der Auswahl der Peptide, die auf den MHC-Komplexen gebunden werden, in erster Linie wohl nicht die Selektivitat des Proteasomes und des TAP-Komplex entscheidend ist, sondern viel eher die Affinitat des Peptid bindenden Spalts fur spezifische Peptidsequenzen eine Rolle spielt. Daraus folgt die Annahme, dass sich die verwendeten humanen DLA-Transfektanten gut fur eine Bestimmung caniner Bindemotive eignen, obwohl deren Antigenprozessierungsmaschinerie von der im Naturzustand in Hundezellen exprimierten abwich. Jedoch wird den endgultigen Nachweis in Zukunft nur der Vergleich des Peptidrepertoires von humanen DLA-Hybridzellen mit dem Peptidrepertoire von caninen Zellen mit dem gleichen DLA-Allel ermoglichen. Das Wissen, das aus den neu identifizierten DLA-Bindungsspezifitaten und Influenzaepitopen resultiert, konnte in Zukunft dazu beitragen, die Immunantwort caniner Zellen sowie die T-Zell-Reaktionen beim Hund im Rahmen von Krebserkrankungen und verschiedener Infektionskrankheiten besser zu verstehen. Davon konnte wiederum nicht nur der Hund profitieren, sondern auch der Mensch, indem moglicherweise auch neue Erkenntnisse fur die Humanmedizin gewonnen werden.