Alterações eletromecânicas do miócito cardíaco na fase aguda da doença de Chagas em modelo murino: papel do óxido nítrico, intereferon-gama e ânion superóxido

A cardiopatia chasica, causada pelo Trypanosoma cruzi, possui multipla origem, sendo ainda desconhecida a genese do problema cardiaco decorrente dessa doenca. A fisiopatologia da doenca de Chagas pode ser dividida em duas fases, aguda e cronica. Na fase aguda ocorre uma grande expansao do numero de parasitos, com ativacao do sistema imune e inducao de uma intensa miocardite. Essas alteracoes podem induzir a arritmias complexas, e levar a morte. A despeito desses fatores, pouco se conhece sobre a genese dos problemas cardiacos durante a infeccao pelo Trypanosoma cruzi. Por esse motivo, decidimos estudar a fase aguda da doenca de Chagas em modelo murino, bem como avaliar a influencia da cepa no estabelecimento da cardiopatia. A curva de parasitemia dos animais infectados com a cepa colombiana apresentou um carater transitorio, sendo que com 81 dias pos-infeccao (dpi), ja nao foram mais detectados parasitos na circulacao. A producao de MCP-1, IFN-g e TNF-a seguiu um perfil similar ao da curva de parasitemia, sendo observada uma inflamacao cronica aos 170 dpi. A infeccao causou um aumento na duracao do completo QRS, bem como alternância de onda P e complexo QRS, com aumento da frequencia cardiaca. Tambem foi observado hipertrofia cardiaca aos 30 dpi. Ja aos 15 dpi, a ecocardiografia evidenciou uma reducao na funcionalidade do coracao. Adicionalmente a capacidade contratil do miocito foi atenuada tanto no ventriculo direito quanto no esquerdo (VD e VE), aos 15, 30 e 45 dpi. Os resultados eletrocardiograficos evidenciaram que existe um remodelamento da eletrofisiologia do miocito cardiaco. Por esse motivo caracterizamos diferentes componentes ionicos dos VE e VD. Tanto para o VD quanto para o VE com 15 dpi, observamos uma reducao na corrente de calcio do tipo L (ICa,L), porem sem alteracao no tempo necessario para repolarizacao do potencial de acao (PA) no VE. Considerando-se apenas o VE, a corrente de potassio transiente rapida (Ito) e o retificador de entrada (IK1) nao foram alterados. Contudo, tanto o VE quanto o VD apresentaram uma reducao na ICa,L e Ito aos 30 dpi, bem como um aumento no tempo necessario para repolarizacao do PA, seguido de um aumento, apenas no VE, da IK1. Alem disso, observamos que a producao basal de oxido nitrico em celulas do VE de animais aos 30 dpi encontra-se aumentada e a inibicao dessa producao resultou em um recobro da ICa,L. Adicionalmente, a inibicao de um passo upstream na via, a PI3Kinase, tambem recuperou parcialmente a ICa,L. Tambem estudamos a dinâmica intracelular de calcio do VE em animais aos 30 dpi. Observamos, contudo, que nao existe uma reducao na liberacao transiente de calcio, bem como em seu estoque intracelular do ion. A manutencao da liberacao de calcio foi observada mesmo com um aumento do tempo para o pico do transiente e da recaptura de calcio, alem de ter sido observado um desacoplamento entre o receptor de rianodina e o canal de calcio do tipo L. Alem disso, a frequencia e a amplitude das sparks de calcio nao foram alteradas, fato que indica que outros mecanismos estao envolvidos no controle do receptor de rianodina durante a infeccao. Uma via envolvida na reducao da capacidade contratil do VE e a do IFN-g. Quando avaliamos o encurtamento celular do miocito isolado do animal IFN-g-/- com 15 e 26-28 dpi, o VE apresentou funcao contratil similar a do controle. Entretanto, o VD do camundongo IFN-g-/- infectado apresentou uma atenuacao no encurtamento celular, maior do que a observada no animal controle infectado, indicando que o VD e o VE sao modulados por vias distintas. Os parâmetros avaliados nos animais infectados com a cepa Y apresentaram resultados bem distintos daqueles observados nos infectados com a cepa colombina. Quando avaliamos a funcionalidade do coracao, observamos uma reducao parcial e transitoria da funcao cardiaca, sem, contudo, ocorrencia de hipertrofia. Os animais infectados com a cepa Y apresentaram uma alteracao transitoria das propriedades eletricas dos miocitos isolados do ventriculo esquerdo, sendo que foi observada atenuacao nos 15 e 30 dpi, com recobro dos valores aos 45 dpi. Aos 15 dpi ocorreu um aumento do tempo para repolarizacao do PA, reducao da Ito e reducao da ICa,L. Essas alteracoes nao foram mais observadas com 45 dpi. Os mecanismos envolvidos na modulacao negativa dessas correntes aos 15 dpi envolvem a producao de superoxido produzida pela nicotinamida e adenina fosfato oxidase do tipo 2, ja que quando utilizamos o animal knockout para essa enzima nao observamos as alteracoes relatadas acima. Finalmente, observamos que uma reducao na atividade colinergica do coracao nao e capaz de gerar as alteracoes eletricas observadas em nosso estudo. Sendo assim, nossos resultados sugerem que o estabelecimento de uma fase cardiaca cronica manifesta ou nao na doenca de Chagas, ira depender da cepa, sendo que essa ira determinar uma miocardite cronica ou transitoria.