The role of costimulatory pathways during the activation of human T cells

Die Arbeit beinhaltet 22 Abbildungen. Fur eine effiziente T-Zellaktivierung sind zwei Signale notwendig. Signal 1 entsteht bei der Interaktion zwischen dem MHC-Peptid Komplex und dem T-Zellrezeptorkomplex. Signal 2, auch als kostimulatorisches Signal bezeichnet, wird von akzessorischen Molekulen, welche auf antigenprasentierenden Zellen (APC) exprimiert sind, auf deren Rezeptoren, die sich auf T-Zellen befinden, ubertragen. Diese Signale spielen eine wichtige Rolle in der Regulation der T-Zellantwort. Uberdies stellen diese Signalwege, bei Erkrankungen die mit unerwunschter T-Zellantwort verbunden sind, hervorragende therapeutische Ziele dar. Eine Verstarkung von kostimulatorischen Signalen kann auch zu verbesserten Immunantworten gegen Tumore und Pathogene fuhren. In Tiermodellen aber auch in klinischen Studien wurde vielfach gezeigt, dass agonistische und antagonistische Antikorper oder Fusionsproteine hervorragende Werkzeuge zur Manipulation von kostimulatorischen oder koinhibitorischen Signalwegen darstellen. Bis heute ist eine Vielzahl verschiedener kostimulatorischer und koinhibitorischer Liganden beschrieben. Ein Uberblick daruber wird im ersten und zweiten Teil dieser Dissertation gegeben. Das Ziel dieser Arbeit war es, die Rolle von verschiedenen kostimulatorischen und koinhibitorischen Signalwegen in der Aktivierung humaner T-Zellen zu untersuchen. Dafur sollte ein experimentelles System entwickelt werden mit dem es moglich ist die Rolle einzelner kostimulatorischer Signalwege in der T-Zellaktivierung zu evaluieren. Aufgrund der Tatsache, dass APC eine Vielzahl von Oberflachenmolekulen exprimieren, ist es schwierig den Effekt einzelner Liganden auf die T-Zellaktivierung zu erfassen. Basierend auf einem von uns entwickelten experimentellen System (beschrieben in Teil drei dieser Arbeit) wurde die Funktion ausgewahlter Signalwege analysiert. Dieses System, die sogenannten T-Zellstimulatorzellen, basiert auf einer murinen Thymomzelllinie die ein single-chain anti-CD3 Fragment exprimiert und auf diese Weise Signal 1 in T-Zellen induziert. In diesem System kann jedes beliebige kostimulatorische oder koinhibitorische Molekul koexprimiert werden, das dann Signal 2 an die T-Zelle vermittelt. T-Zellstimulatorzellen sind ein ausgezeichnetes Werkzeug um verschiedene kostimulatorische Molekule miteinander zu vergleichen und die Funktion von Liganden, die eine Rolle bei kostimulatorischen Prozessen spielen, zu evaluieren. Weiters kann damit untersucht werden, welche Effekte immunmodulatorische Medikamente auf T-Zellaktivierung haben. Der vierte Teil der Arbeit analysiert die Funktion von B7-H3 in der humanen T-Zellaktivierung. In dieser Studie konnten wir in verschiedenen experimentellen Systemen und in verschiedenen T-Zellsubpopulationen zeigen, dass das von B7-H3 vermittelte Signal stark inhibitorisch auf die T-Zellproliferation und Zytokinproduktion wirkt. Weiters konnten wir TREML2 (triggering receptor expressed on myeloid cells like transcript 2), kurzlich als Rezeptor fur das murine B7-H3 beschrieben, als Rezeptor fur humanes und murines B7-H3 ausschliesen. In Teil funf dieser Arbeit wird der Einfluss einzelner kostimulatorischer Signale auf die Wirkung der immunsuppressiven Medikamente Azathioprine und Cyclosporin A behandelt. Wir konnten zeigen, dass die IC50 (mittlere inhibitorische Hemmkonzentration) Konzentration fur Cyclosporin A durch Signale uber CD28 deutlich erhoht wird, wahrend Signale uber CD2, 4-1BB, ICOS oder LFA-1 seine inhibitorische Wirkung nicht wesentlich beeintrachtigen. Im Gegensatz dazu wurde der inhibitorische Effekt von Azathioprine durch unterschiedliche kostimulatorische Signale nicht beeinflusst. Die Aktivierung von T-Zellen wird durch das komplexe Zusammenspiel verschiedenster kostimulatorischer und inhibitorischer Molekule reguliert. In dieser Arbeit wird ein ausfuhrlicher Uberblick uber die gegenwartig beschriebenen kostimulatorischen und koinhibitorischen Signalwege in der humanen T- Zellaktivierung geboten. Weiters entwickelten wir ein experimentelles System, mit dem man hervorragend den Beitrag einzelner Molekule zur T-Zellproliferation erfassen kann. Mit Hilfe dieses Systems und anderer methodischer Ansatze, wurde eine umfassende Evaluierung der Rolle von B7-H3 in der T-Zellaktivierung durchgefuhrt. Daruber hinaus konnten wir zeigen, dass kostimulatorische Signalwege die Wirkung von bestimmten immunsuppressiven Medikamenten stark herabsetzen, wahrend sie andere nicht beeinflussen. Diese Ergebnisse konnen moglicherweise Einfluss auf Behandlungsstrategien, beispielsweise Kombination von herkommlichen immunsuppremierenden Medikamenten mit CTLA-4 Fusionsproteinen, welche spezifisch den CD28 Signalweg targeten, haben.