Caracterización "in vitro e in vivo" de una nueva línea celular (IPC-366) de cáncer inflamatorio mamario canino (IMC): comparación con el cáncer de mama inflamatorio humano

El cancer mamario inflamatorio es la neoplasia mamaria mas agresiva y de peor pronostico tanto en la mujer como en la perra. Es considerado un tipo especial de cancer mamario con caracteristicas geneticas, biologicas y clinicas diferentes con respecto al resto de los tumores mamarios. La perra ha sido descrita como un buen modelo animal para estudiar el cancer mamario inflamatorio de la especie humana. Para la investigacion en ambas especies, el numero de modelos de los que se dispone es limitado. Por ello, la presente Tesis Doctoral comprende la realizacion de cuatro investigaciones, todas ellas basadas en el establecimiento, caracterizacion y estudio de una nueva linea celular de cancer mamario inflamatorio canino: IPC-366, con el objetivo principal de constituir esta linea celular como un buen modelo para la investigacion del cancer mamario inflamatorio canino y humano. Tras nuestros estudios IPC-366 goza de patente en Espana: P201400512; y se encuentra en tramitacion para obtener la patente internacional: WO 2015/197884. Con el fin de caracterizar la linea celular, se evaluaron sus propiedades de crecimiento, citologicas y ultraestructurales, ademas de la capacidad tumorigenica y el potencial metastasico in vivo asi como la determinacion de su fenotipo inmunohistoquimico y su patron cromosomico. Ademas se comparo esta nueva linea celular canina con la linea celular de cancer inflamatorio humano SUM149 en terminos de capacidad de las celulas de crecer en condiciones adherentes y no adherentes, expresion del inmunofenotipo de celulas madre y su produccion de proteinas. Por otro lado, se evaluo la capacidad tumorogenica de IPC-366 y SUM149 en ratones macho y se comparo con la de ratones hembra, ademas de identificar las diferencias en la produccion de hormonas esteroides en los tumores originados en ambos sexos. Por ultimo se valido una tecnica de EIA amplificado para la deteccion de hormonas esteroides en medio de cultivo celular de IPC-366 y SUM149 y se evaluo su perfil de produccion de hormonas esteroides en condiciones in vitro. La linea celular IPC-366 es una linea celular de tipo basal, triple negativa, altamente maligna y de crecimiento rapido en ratones inmunodeprimidos. Esta formada por celulas grandes, redondeadas o poligonales caracterizadas por marcadas atipias, con nucleos grandes, de evidente malignidad, nucleolos prominentes y con la aparicion frecuente de celulas multinucleadas. En algunas de ellas se aprecian espacios vacios citoplasmaticos, cubiertos por la membrana citoplasmatica, con un gran hueco central, asemejandose a celulas endoteliales capilares, fenomeno que se ha descrito como mimetismo vascular. Ademas, IPC-366 y SUM149 presentan una morfologia similar en condiciones adherentes y no adherentes. Presentan un inmunofenotipo de expresion de marcadores de celulas madre similar con caracteristicas mesenquimatosas y una sobreexpresion de las proteinas E-cadherina y N-cadherina mayor en los cultivos adherentes que en los no adherentes. Por otro lado, los ratones de ambos sexos son capaces de reproducir tumores, presentando un crecimiento tumoral similar. Ambas lineas celulares producen metastasis a distancia en pulmones, presentando las hembras mayores tasas metastasicas que los machos. Se observo que los niveles hormonales intratumorales son cruciales en el desarrollo y progresion de estas neoplasias. Por ultimo IPC-366 y SUM149, en condiciones in vitro, son capaces de producir hormonas esteroides que pueden ser cuantificadas mediante la tecnica de EIA de amplificacion con alta sensibilidad, fiable y precisa validada en este estudio. Como conclusion, todos estos estudios han demostrado que IPC-366 es una herramienta util para el estudio comparativo del cancer mamario inflamatorio canino y humano ofreciendose la posibilidad futura de realizar ensayos de nuevas estrategias terapeuticas para esta enfermedad de tan dificil tratamiento.