Epidemiologia de la criptococosis en España. Caracterización de los aislados de cryptococcus neoformans

La criptococosis es una micosis profunda que puede afectar al ser humano y a diversos animales. Tiene un curso cronico o subagudo. El agente causal es una levadura capsulada llamada Cryptococcus neoformans. Este proceso puede presentarse en personas sanas, pero afecta sobre todo a sujetos inmunodeprimidos. La infeccion se inicia por la inhalacion de las levaduras y diseminacion por via hematogena al sistema nervioso central. El objetivo principal de este trabajo ha sido de disponer de datos para conocer la epidemiologia de la criptococosis en Espana. - Se han recopilado 184 cepas de 8 diferentes areas geograficas de Espana, 128 de origen clinico humano ( 95 % VIH + y ADVP), 13 de origen animal, y 43 de muestras ambientales. - Se han estudiado muestras de polvo domestico de 79 domicilios para comprobar si podian ser una fuente de infeccion. Seis muestras provenian de domicilios de pacientes con SIDA y criptococosis, 11 de pacientes VIH(+) sin criptococosis, y 62 de personas sanas. No se ha aislado C. neoformans en niguna muestra. El polvo domestico no parece ser un reservorio de importancia para la transmision de la criptococosis. - El estudio de las biovariedades mediante el crecimiento en medio de L-canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB) junto con la asimilacion de D-prolina y D-triptofano ha permitido demostrar por primera vez, la presencia en nuestro pais de la variedad gattii de C. neoformans. Esta variedad produjo 5 brotes epidemicos de criptococosis en cabras en la provincia de Caceres, con un alto porcentaje de animales afectados. Todas sufrian de sintomas respiratorios severos asociados a caquexia y sintomas neurologicos, y con un 100 % de mortalidad en los animales enfermos. Todas las cepas pertenecian al serotipo B. - Se obtuvieron sueros policlonales de los diferentes serotipos mediante inmunizacion de conejos. Se procedio por tecnica de aglutinacion al estudio del serotipado de todas las cepas. La distribucion de los serotipos no es homogenea, varia segun las regiones geograficas. El serotipo A es predominante, sin embargo hay una elevada tasa del serotipo D en las muestras clinicas y ambientales. - El estudio de las concentraciones inhibitorias minimas (CIM) mediante la tecnica de microdilucion ha mostrado que el nivel global de resistencias es muy bajo. No se ha hallado ninguna cepa con CIM>1 mg/ml para anfotericina B. Las cepas del serotipo A mostraron menor sensibilidad. La 5-fluorocitosina ha resultado el antifungico menos activo. El fluconazol ha mostrado menor actividad que el itraconazol. Tres cepas tenian CIM>64 mg/ml. El serotipo D mostro menor sensibilidad a los dos triazoles que el resto de los serotipos (P - El metodo colorimetrico Sensititre utilizado para el estudio de las sensibilidades de 42 cepas de C. neoformans fue util por su facil ejecucion y lectura de puntos de corte, sin embargo es un sistema que proporciona valores mas bajos de CIM que el metodo de referencia. - Se determinaron las CIM de un nuevo antifungico derivado de las sordarinas (GM 237354) en 190 cepas de C. neoformans. Se obtuvieron 5 cepas con valores de 2 mg/ml. La var. gattii es la que mostro menor sensibilidad. Se obtuvieron diferencias significativas entre los serotipos A y AD con respecto al serotipo B. - La aplicacion de la tecnica molecular del RAPD ha permitido demostrar que por lo menos coexisten 2 genotipos diferentes de la var. gattii aislada en cabras. Uno de los patrones parece ser el dominante, se ha hallado en todas los brotes epidemicos, mientras que el otro solo se detecto en una zona. Con la misma tecnica se ha podido discriminar entre diferentes aislamientos de un mismo paciente con criptococosis.