Soroprevalencia e epidemiologia molecular do herpesvirus humano 8 (HHV-8) em populações brasileiras

O Herpesvirus Humano 8 (HHV-8) foi identificado em 1994 por CHANG et al em biopsia de pele de pacientes com sarcoma de Kaposi associado a Sindrome da Imunodeficiencia Adquirida (SIDA). O HHV-8 e um oncovirus membro da familia Herpesviridae, sub-familia Gamaherpesvirinae e genero Rhadinovirus, o unico do genero a infectar humano. Possui ultraestrutura semelhante a de outros herpesvirus, apresentando regioes de DNA homologas a dois gama-herpesvirus: Epstein-Barr Virus (EBV) e o Herpes Virus Saimiri (HVS), ambos com potencial oncogenico. Estudos revelaram a associacao entre o HHV-8 e todas as formas de SK: classica, endemica, relacionadas a AIDS e associado a transplantes, alem de outras lesoes proliferativas das linhagens linfoides, relacionadas ou nao a AIDS, como o linfoma primario de serosas (PEL) ou linfoma de cavidades do corpo (BCBL) e a doenca de Castleman multicentrica (DCM). No presente estudo, com a utilizacao dos ensaios sorologicos de imunofluorescencia indireta foi possivel determinar que o HHV-8 e endemico em duas tribos indigenas (Tiriyo e Waiampi), localizadas na regiao Amazonica. Anticorpos anti-HHV-8 foram detectados em 56,8% dos indios (558/982), em todas as faixas etarias (0-81 anos) e em ambos os sexos. Nessas populacoes, a elevada prevalencia em criancas menores de 2 anos (44,4%) e criancas de 2-9 anos (35.0%) sugerem a existencia de vias de transmissao nao-sexual do HHV-8, atraves da transmissao vertical ou pelo contato com secrecoes contaminadas. A soroprevalencia do HHV-8 em doadores de sangue da cidade de Campinas foi baixa (2,8%), sendo todos os casos positivos pertencentes ao sexo masculino (9/319) e faixa etaria de 31 a 50 anos. Curiosamente, todos os casos de pacientes com SK acompanhados no Hospital de Clinicas da Unicamp tambem pertenceram ao sexo masculino, sendo detectados anticorpos anti-HHV-8 em todos os casos de SK avaliados. A genotipagem do HHV-8 atraves do sequenciamento de regioes hipervariaveis do genoma viral, como a ORF-K1, possibilitou a classificacao dos principais subtipos virais (A, B, C, D e E). Para realizar a genotipagem do HHV-8 nos padronizamos tecnicas moleculares para amplificacao dos fragmentos VR1 e VR2 da regiao hipervariavel ORF-K1 do HHV-8, possibilitando a construcao de arvores filogeneticas e a determinacao dos subtipos virais. Em pacientes com SK da cidade de Campinas foram detectados os subtipos A, B e C do HHV-8, com maior percentual do subtipo C. Em indios da regiao Amazonica foram detectados os subtipos A e E do HHV-8. Nosso estudo foi o primeiro a realizar genotipagem em amostras de individuos com sorologia positiva para o Virus da Imunodeficiencia Humana (HIV) da cidade de Salvador, sendo detectados os subtipos B e subtipo indeterminado do HHV-8. Com isso, foi possivel determinar que os subtipos A, B, C e E do HHV-8 estao presentes em populacoes brasileiras. Todas as sequencias nucleotidicas dos fragmentos VR1 e VR2 do HHV-8 obtidas no presente estudo serao depositadas no banco de dados NCBI/Nucleotide Sequence Database (GenBank) informando a comunidade cientifica mundial dados relevantes referentes as cepas do HHV-8 circulantes no Brasil. Em nosso estudo, a analise de amostras provenientes de doadores de sangue e pacientes com sarcoma de Kaposi da cidade de Campinas, pacientes HIV positivos de Salvador e de indios da regiao Amazonica resultou na obtencao de dados de soroprevalencia e de epidemiologia molecular do HHV-8 em populacoes brasileiras. O conhecimento de tecnicas sorologicas e moleculares aplicado no presente estudo podera ser utilizado pelos Laboratorios de Biologia Molecular da Unicamp e do LASP/CPqGM/Fiocruz, possibilitando a implantacao de tecnicas para o diagnostico e genotipagem do HHV-8 nos referidos centros Abstract