Structure, Fonction et Evolution des Récepteurs Venus Kinase : rôles dans la reproduction du parasite Schistosoma mansoni

Les recepteurs Venus Kinase ou VKR forment un nouvelle famille de recepteurs tyrosine kinase decouverts au laboratoire. Ces recepteurs sont caracterises par une organisation atypique associant un domaine extracellulaire de type Venus Flytrap (VFT) similaire a ceux des recepteurs couples aux proteines G de classe C a un domaine Tyrosine Kinase (TK) intracellulaire similaire a celui du recepteur a l’insuline (IR). Cette famille est presente uniquement chez les invertebres dont notre modele d’etude, le parasite plathelminthe Schistosoma mansoni. Les travaux realisees a ce jour suggerent que ces proteines jouent un role dans le developpement des stades larvaires et la reproduction sexuee. Mon travail de these s’est interesse a l’etude de cette famille de recepteurs et comporte trois axes principaux. Le premier concerne la mise a jour phylogenetique de la famille des VKR. Une analyse approfondie des donnees genomiques recentes nous a permis d’etendre la presence des VKR a pres de 50 especes dans cinq phyla invertebres. La presence d’un VKR chez le cnidaire Nematostella vectensis suggere une emergence du recepteur avant l’apparition des bilateraliens. Des analyses phylogenetiques ont mis en evidence la monophylie de l’ensemble des recepteurs ainsi que des importants niveaux de conservation des motifs fonctionnels VFT et TK. Des analyses de modelisation du domaine de fixation au ligand suggerent que la majorite de ces recepteurs puissent etre activables par des acides amines de type L-Arginine. La decouverte de VKR chez Nematostella vectensis, Lottia gigantea ou Capitella teleta s’avere prometteuse dans la mesure ou ces modeles se pretent parfaitement a l’embryologie moleculaire, et pourraient etre utilises pour etudier la fonction des VKR dans l’embryogenese.La deuxieme partie de mon travail s’est interessee a la caracterisation fonctionnelle de SmVKR1 et SmVKR2, les deux VKR de Schistosoma mansoni. En utilisant le modele d’expression ovocyte de Xenope, nous avons pu dans un premier temps determiner que SmVKR1 et SmVKR2 sont activables par plusieurs et differents L-acides amines. L’identification de partenaires intracellulaires par un criblage en double hybride de levure nous a permis de determiner de nouveaux et inattendus partenaires d’interaction, suggerant des fonctions dans l’activation de voies TK conservees, mais egalement dans le remodelage du cytosquelette ou la synthese proteique. Si les deux recepteurs activent les voies Akt, S6K et Erk1/2, seul SmVKR1 est capable d’activer la voie JNK. Les profils d’expression ont ete determines par hybridation in situ et, si les deux genes s’expriment dans l’ovaire, la localisation des transcrits est clairement distincte avec une expression de SmVKR2 au sein des ovocytes immatures et de SmVKR1 dans les ovocytes matures. Enfin des experiences d’ARN interference sont venues confirmer un role de ces recepteurs au sein de l’ovogenese, la diminution d’expression entrainant des phenotypes deleteres sur la croissance et ovocytes et la ponte des oeufs. L’etude des voies de signalisation SmVKR1 a ete egalement ete entreprise au laboratoire, mettant en evidence l’importance de la proteine adaptatrice SmShb dans l’induction de la voie JNK par SmVKR1. L’ensemble de des resultats suggere que SmVKR1 aurait une fonction dans la migration des ovocytes et/ou dans la reprise de meiose par l’activation de la voie JNK, tandis que SmVKR2 aurait un role plus precoce, dans la croissance et/ou la proliferation des ovogonies. Enfin la derniere partie de mon travail de these visait a determiner si les VKR peuvent etre consideres comme des cibles therapeutiques interessantes en vue du developpement de nouvelles drogues anti parasitaires. [. ]