Serotyping of toxoplasma gondii : contributions to the knowledge of parasite biodiversity

La toxoplasmose est une maladie causee par le parasite apicomplexe Toxoplasma gondii. La plupart des infections humaines sont asymptomatiques, cependant, de severes complications peuvent se developper a la suite d’une infection congenitale ou chez des patients immunodeprimes. Des foyers de toxoplasmose, dans lesquels des individus immunocompetents developpent des infections severes, ont ete decrits dans la litterature. L’isolement du parasite associe a ces manifestations cliniques de differentes regions geographiques a revele la grande diversite genetique de T. gondii. Les methodes utilisees pour la caracterisation genetique de ce parasite necessitent l’isolement prealable du parasite ou de son ADN. Cette condition reduit les etudes genetiques aux infections de sujets symptomatiques, dans lesquelles il est possible de recueillir des echantillons biologiques. D’autre part, l’isolement par bioessais sur souris peut favoriser certaines souches et ne pas permettre la detection d’infections mixtes. Le serotypage est une methode simple basee sur un essai immunoenzymatique (enzyme-linked immunosorbent assay – ELISA) qui utilise des peptides polymorphes derives d’antigenes de T. gondii. Les serums, seuls echantillons biologiques necessaires, peuvent etre obtenus de sujets presentant ou non des symptomes et eliminent les disparites associees au genotypage a partir de l’isolement du parasite. Le principal objectif de ce travail de these est d’etudier l’applicabilite au serotypage de nouveaux peptides polymorphes souches-specifiques. Le sequencage des genes codant pour trois antigenes (GRA6, GRA7, GRA8) de 52 souches archetypales et non-archetypales a montre que les peptides GRA6 et GRA7 presentent des polymorphismes capables de distinguer les trois lignees clonales et les souches non-archetypales. Le serotypage de souches connues de souris et d’humains infectes a montre que les infections dues a des souches appartenant aux lignees archetypales I, II et III peuvent etre serotypees avec les peptides GRA6II, GRA6I/III et GRA7III. Toutefois, les peptides specifiques de souches non-archetypales ont une faible specificite et sensitivite. Cette methode a egalement ete utilisee pour prevoir le serotype chez des patients atteints de toxoplasmose aigue ou chronique dues a des genotypes inconnus d’Europe, d’Afrique, et d’Amerique Latine. En Europe, le serotype II predomine, alors qu’en Afrique et en Amerique Latine, le serotype I/III est plus frequent. Le serotype II a cependant ete retrouve avec une frequence non negligeable en Uruguay, dans des zones ou l’influence sur la circulation des genotypes des relations avec l’Europe est possible. Aucune relation n’a ete etablie entre la distribution des serotypes et la pathologie. Les resultats du serotypage d’animaux domestiques naturellement infectes avec les peptides selectionnes, suggerent malgre quelques restrictions, que le serotypage est une methode prometteuse pour certaines souches. D’autres peptides de differents marqueurs doivent neanmoins etre etudies afin de distinguer les souches archetypales des non-archetypales. Le serotypage peut devenir un outil interessant dans des etudes epidemiologiques, dans la detection d’une reinfection avec une souche differente, mais egalement dans la detection d’infections par des souches non-archetypales de T. gondii chez des animaux destines a la consommation humaine.