Marqueurs de réponse aux thérapies ciblées et personnalisation thérapeutique dans les cancers colorectaux métastatiques

Le cancer colorectal est le troisieme cancer le plus repandu dans le monde avec plus d’un million de patients diagnostiques chaque annee, dont 50% auront une evolution metastatique de leur maladie. Les recentes etudes pour ameliorer les traitements du cancer colorectal metastatique (CCRm) ont permis le developpement d’anticorps monoclonaux, le cetuximab et le panitumumab, capables d’inhiber l’activation des recepteurs au facteur de croissance epidermique (EGFR) et les voies de signalisation en aval (RAS/RAF/MAPK et PI3K/AKT/mTOR), responsables de la croissance cellulaire, la proliferation, l’inhibition de l’apoptose, l’invasion et de l’evolution metastatique. Cependant, dans les etudes incluant des patients dont les tumeurs sont « RAS sauvage », c’est a dire exemptes de mutation des genes KRAS et NRAS, le taux de reponse aux therapies a base de cetuximab ou du panitumumab sont de l’ordre de 40 a 60% seulement, ce qui signifie qu’une grande partie des patients traites echappent au traitement par le biais d’autres mecanismes. La presence d’alterations d’autres genes comme PIK3CA, BRAF est responsable en partie des cas ou les patients ne presentent pas de reponse. De plus, la surexpression ou l’alteration de proteine comme PTEN, PI3K, AKT impliquees dans les voies de signalisation RAS/RAF/MAPK et PI3K/AKT/mTOR peuvent avoir un impact significatif sur la proliferation cellulaire ou l’apoptose. L’absence ou la surexpression des proteines sous leur forme active phosphorylee pourrait presenter un interet pour predire la reponse aux anti-EGFR chez les patients dont les tumeurs sont « RAS sauvage ». Dans ce travail, nous avons tout d’abord developpe des techniques pour le genotypage des genes RAS et PIK3CA a partir d’echantillons de tumeurs colorectales fixees au formol et incluses en paraffine, puis dans un second temps, nous avons valide ces methodes selon la norme ISO 15189, puis dans un dernier temps, nous avons etudie l’expression des phosphoproteines en aval des recepteurs a l’EGF ainsi que les statuts mutationnels des genes KRAS, NRAS, BRAF, PIK3CA a partir de 100 echantillons de tumeurs congelees issues de patients atteints d’un CCRm et traites par un anti-EGFR. Sur 100 echantillons de tumeurs, 60 ne presentaient pas de mutation des genes RAS. Parmi les patients dont les tumeurs ne presentaient pas de mutation des genes RAS, 45,0% presentaient une reponse tumorale partielle ou complete et 55,0% etaient en maladie stable ou evolutive lorsqu’ils etaient traites par un anti-EGFR. Les patients dont les tumeurs presentaient une mutation des genes RAS avaient une survie sans progression (PFS) significativement plus faible (HR=3.04 [1.91; 4.83];p<0.001) ainsi qu’une survie globale (OS) plus faible (HR=2.49 [1.56; 3.97];p<0.001). La PFS et la survie globale (OS) etaient significativement plus elevees chez les patients dont les tumeurs etaient « RAS sauvage ». L’expression de pAKT, pERK1/2 et pMEK1 etaient significativement plus faibles chez les patients dont les tumeurs etaient sauvages que chez les patients presentant des tumeurs RAS mutees (p=0,0246 ; p=0,004 ; p=0,0110 respectivement) et aucune difference significative d’expression entre les tumeurs RAS sauvage et RAS mutees n’a ete demontree pour pEGFR, pGSK3, pIGFR et pP90SRK. Chez les patients presentant des tumeurs RAS sauvage, le taux de reponse etait significativement superieur pour les tumeurs surexprimant pEGFR et pAKT au dessus des seuils calcules (p=0,0258 et p=0,0277 respectivement). Aucune difference significative n’a ete trouvee entre le taux de reponse et l’expression des autres phosphoproteines. Notre etude montre qu’associer la mesure de l’expression des phosphoproteines de signalisation en aval d’EGFR, a l’analyse du statut mutationnel des genes RAS, BRAF, PIK3CA pourrait presenter un interet dans la prediction de la reponse aux therapies anti-EGFR chez les patients atteints d’un cancer colorectal metastatique.