Distinctions among mycoplasmalike organisms (MLOs) in Gladiolus, Ranunculus , Brassica >, and Hydrangea through detection with nonradioactive cloned DNA probes

Summary. Mycoplasmalike organisms (MLOs) were detected in naturally infected plants of Gladiolus , Ranunculus , Brassica, and Hydrangea by dot hybridizations using six different biotin-labeled cloned DNA probes. Nucleic acid extracted from diseased plants of Gladiolus and Ranunculus hybridized with all of the probes employed with the exception of probe pEYll, which contained a fragment of elm yellows MLO DNA. Nucleic acid from Brassica failed to hybridize with probe pEYll and probe pBB115, the latter containing a fragment of tomato big bud MLO DNA. Nucleic acid from diseased Hydrangea hybridized only with probes pBB24, CN40I, and pAY 18 which contained DNA fragments from tomato big bud, periwinkle little leaf, and the Maryland strain of North American aster yellows MLO, respectively. The results indicated similarities in nucleotide sequence homologies among the MLOs in the four genera of naturally diseased plants and between these MLOs and some MLOs from North America. The results also distinguished the MLOs in diseased Brassica and Hydrangea from one another and distinguished these MLOs from those in the diseased Gladiolus and Ranunculus examined. Nonradioactive probe detection of MLOs in naturally infected field-grown plants raises the possibility that such probes might facilitate the indexing of nursery crops and tissue cultured plants for the presence of these pathogens. Riassunto. Differenziazione di organismi del tipo dei micoplasmi che infettano Gladiolus, Ranunculus, Brassica ed Hydrangea attraverso l'uso di DNA ricombinante marcato in maniera non radioattiva. Organismi del tipo dei micoplasmi (Mycoplasmalike organisms: MLO) sono stati individuati in piante naturalmente infette di Gladiolus, Ranunculus, Brassica ed Hydrangea utilizzando il metodo della ibridazione molecolare con sei DNA ricombinanti specifici ("probes") marcati in maniera non radioattiva con biotina. Gli acidi nucleici estratti da piante infette di Gladiolus e Ranunculus hanno dato ibridazione positiva con tutti i ricombinanti saggiati ad eccezione di pEYll che contiene un frammento di DNA proveniente dall'MLO associato al giallume dell'olmo. L'acido nucleico estratto da Brassica non ha dato ibridazione con pEYll e pBB115, quest'ultimo ricombinante e stato ottenuto da un frammento di DNA dell'MLO associato al "tomato big bud". L'acido nucleico estratto da Hydrangea infetta ha mostrato ibridazione , solamente con pBB24, CN40I e pAY18 i quali contengono rispettivamente frammenti di DNA provenienti dagli MLO associati a "tomato big bud", "periwinkle little leaf ed all'isolato del Maryland del giallume dell'astro ("aster yellows") nord americano. I risultati ottenuti indicano la presenza di sequenze nucleotidiche omologhe negli MLO dei quattro generi di piante naturalmente infette, nonche fra questi MLO ed alcuni nord americani. Dai risultati ottenuti e inoltre possibile distinguere fra di loro gli MLO presenti in Brassica ed Hydrangea e differenziare inoltre questi da quelli presenti nei campioni di Gladiolus e Ranunculus infetti esaminati. Il successo dell'impiego di DNA ricombinante nonradiattivo nella indiviaduazione di piante naturalmente infette da MLO permette di prevedere l'uso di questa tecnica in futuro per saggiare lo stato sanitario relativamente a questi patogeni, di vivai e di piante ottenute tramite colture di tessuti.