Potencial genético e químico dos endófitos de Murraya paniculata L. (Jack).

A planta Murraya paniculata e de origem asiatica e em seu continente de origem foi isolado, das cascas das raizes, o alcaloide yuehchukeno que apresenta atividade anticoncepcional e hormonal. Em especimes brasileiros nenhum alcaloide foi detectado, o que inspirou novas pesquisas envolvendo o estudo dos microrganismos que interagem com esta, incluindo o presente trabalho. Assim, foram isolados 1.711 microrganismos endofiticos de quatro hospedeiras, no estado de Sao Paulo, verificando-se os indices de colonizacao sazonal, a frequencia e a especificidade dos grupos identificados por tecidos (micro-habitat). Dos isolados, 1.061 eram fungos filamentosos e 650 eram bacterias, com frequencias de 62% e 38% e indices de colonizacao de 33% e 20%, respectivamente. Os menores indices de colonizacao foram observados para as bacterias em todas as coletas, principalmente nas folhas que apresentaram a maior frequencia para os fungos. Os fungos endofiticos foram classificados em 20 grupos morfologicos, 15 identificados ao nivel de genero e cinco desconhecidos, sendo dois Micelia sterilia. Os generos identificados foram Fusarium, Colletotrichum e seus telemorfos Giberella e Glomerella rescpectivamente, Trichoderma, Phomopsis, Paecilomyces, Penicillium, Aspergillus, Epicoccum, Pestalotiopsis, Alternaria, Xylaria, Nigrospora e Guignardia e os nao identificados foram denominados como grupos A-E. Foi tambem detectada grande diversidade dentro dos generos mais frequentes, pela morfologia e por marcadores moleculares. Foi verificada maior diversidade de generos de fungos no inverno (17) que na primavera (9). A populacao de fungos endofiticos foi menor no verao (44,7%) em contraste com o outono (77,7%). De uma amostragem de 59 isolados e seis controles foram extraidos os DNAs genomicos e sequenciadas as regioes ITS-1. Para a linhagem indeterminada B (Fed) foi sequenciada a regiao 5,8s e a ITS-2. Foram identificadas 21 especies pela regiao ITS-1 e detectadas duas possiveis especies novas: uma de Trichoderma e o Fed cujos estudos morfologicos e quimiotaxonomicos apoiam esta hipotese. Os Trichoderma associados a M. paniculata foram isolados principalmente das cascas e apresentaram 9 especies, sendo uma indeterminada. Foi tambem avaliado o potencial para producao de substâncias bioativas de endofitos. Os grupos mais promissores para a producao de substâncias extracelulares foram os dos fungos Penicillium com acao bactericida e anti-protozoaria, Pestalotiopsis candicida e Trichoderma fungicida e bactericida. Fed com substâncias intracelulares de forte acao bactericida e de volateis fungicidas. Buscou-se ainda o isolamento dos principios ativos tendo sido isolados de Penicillium citrinum a citrinina e um alcaloide indeterminado, de Trichoderma koningii 13 substâncias, das quais quatro koningininas relacionadas as atividades biologicas detectadas. De Fed-3 foram identificadas 10 substâncias, sete fixas e tres volateis, incluindo um sesquiterpeno guaiano manosilado inedito e as substâncias 3-Hidroxi- 5-fenilmetil-(3S,5R)-b10-O-tetrahidrofuran-2-ona e cloroacetonitrila, isoladas pela primeira vez de fonte natural. A esta ultima e sugerida a acao fungicida dos volateis. Esta pesquisa foi oportuna ao revelar a diversidade de microrganismos associados a hospedeira, a alta variabilidade entre e dentre os generos, incluindo duas possiveis novas especies, e o potencial na producao de moleculas bioativas e ineditas. Espera-se ter contribuido para o conhecimento da biodiversidade dos microrganismos endofiticos e do potencial quimico e biotecnologicos que eles representam.