Fas Ligand in Swamp Buffalo Oviduct during Follicular and Luteal Phases

บทคดยอ Fas ligand (FasL) และ Fas ซงเปนตวรบของ FasL อยในกลมของ tumor necrosis factor (TNF) โปรตนทงสองชนดมสวนเกยวของกบการทำงานของอวยวะทเรยกวา immune privileged organ เชน กระจกตา อณฑะ และรก โดยกระตนใหเกดภาวะการเสอมตายของเซลลหลายชนด การปรากฏของระบบ Fas-FasL อาจระบถงสภาวะ immune privilege ทเกดขนภายในทอนำไขกระบอปลก ซงเปนอวยวะทเซลลอสจรอดพนจากการทำลายของระบบภมคมกนในระบบสบพนธเพศเมย วตถประสงคในการศกษานตองการตรวจหาการปรากฏของโปรตน Fas และ FasL ดวยวธอมมนโนฮสโตเคม ตรวจหาการแสดงออกของ FasL mRNA ดวยวธ RT-PCR และตรวจระดบการเสอมตายของเซลลดวยวธ TUNEL ภายในทอนำไขกระบอปลกซงประกอบดวย รอยตอปกมดลกกบทอนำไข (Uterotubal junction, UTJ)อสธมส แอมพลลา และอนฟนดบลม ในระยะฟอลลคลาร (จำนวน 5 ตว) และลเทยลชวงกลาง (จำนวน 5 ตว) ผลการศกษาพบการปรากฏของโปรตน Fas กระจายอยทวไปตามแนวเยอบผวของทอนำไขกระบอปลกทกสวนและทกระยะของวงรอบการเปนสด ในทางตรงกนขามพบการปรากฏของโปรตน FasL อยางชดเจนภายในเซลลเยอบผวของรอยตอปกมดลกกบทอนำไขและอสธมสในระยะฟอลลคลารอยางมนยสำคญทางสถต (p<0.05) เมอเปรยบเทยบกบทอนำไขสวนอนๆ หรอเปรยบเทยบกบระยะลเทยลชวงกลาง ผลการศกษาดวยวธ RT-PCRพบการแสดงออกของ FasL mRNA ในเยอบของทอนำไขทกสวน แตระดบความเขมในการแสดงออกในสวนรอยตอปกมดลกกบทอนำไขและอสธมสระยะฟอลลคลารมความเขมกวาเมอเปรยบเทยบกบทอนำไขสวนเดยวกนระยะลเทยลชวงกลาง และทอนำไขสวนอนๆ อยางไรกด ผลการตรวจสอบการเสอมตายของเซลลโดยใชวธ TUNEL พบไดเพยงเลกนอยในทอนำไขทกสวนของกระบอปลกทงสองระยะของวงรอบการเปนสด ผลการศกษาดงกลาวระบวาการแสดงออกของ Fas และ FasL ในบรเวณรอยตอปกมดลกกบทอนำไขและอสธมสซงเปนบรเวณกกเกบเซลลอสจในระยะฟอลลคลาร เกยวของกบการทำหนาทของระบบ Fas-FasL ทสงผลใหมการรอดชวตของเซลลอสจ และสนบสนนสภาพของ immune privilege ทอาจเกดขนในทอนำไขกระบอปลก คำสำคญ: วงรอบการเปนสด Fas-FasL ทอนำไข บรเวณกกเกบเซลลอสจ กระบอปลก Abstract Fas ligand (FasL) and its receptor (Fas) are tumor necrosis factor (TNF) members which are involved in theimmune privileged organs, such as the cornea, testis and placenta, by triggering apoptosis in various cell types. Theappearance of a Fas-FasL system might specify the immune privileged status of the buffalo oviduct wherespermatozoa avoid eradication by female immune cells. The objective of this study was to scrutinize the FasL and Fasproteins by immunohistochemistry, FasL mRNA by RT-PCR and the apoptotic degrees by TUNEL analysis in theuterotubal junction (UTJ), isthmus, ampulla and infundibulum of swamp buffalo oviducts at follicular (n=5) and midluteal(n=5) phases. The Fas localization was scattered along the lining epithelium of all oviductal portions at bothestrous cycle stages, whereas the intensity of FasL immunostaining was more noticeable in the epithelial cells of UTJand isthmus at follicular phase and showed significant differences (p<0.05) compared to other segments and to themid-luteal phase. FasL mRNA expression was detected in the epithelial cells of all oviductal segments and the intenseof expression in UTJ and isthmus at follicular phase was greater than similar regions at mid-luteal phase and othersegments. However, the TUNEL-apoptotic cells were rarely detected in all oviductal segments of swamp buffalo atboth phases. The present results indicate that the appearance of Fas and FasL in the UTJ and isthmus which are thesite of sperm reservoir, at follicular phase can be involved in Fas-FasL system that mediate the survival ofspermatozoa and supports the immune privilege status in the swamp buffalo oviduct. Keywords: estrous cycle, Fas-FasL, oviduct, sperm reservoir, swamp buffalo