Quantification of infectious bursal disease viral proteins 2 and 3 in inactivated vaccines as an indicator of serological response and measure of potency

Viral protein 2 and viral protein 3 (VP2 and VP3) were quantified in a series of inactivated infectious bursal disease oil emulsion vaccines using enzyme-linked immunosorbent assay, and the dependence of the serological response on vaccine antigen content was studied. Large differences in antigen content, up to 50-fold, were found between vaccines. Neutralizing antibody titres at 3 to 6 weeks after vaccination varied from 3 log2 to 16 log2. None of the vaccines induced an antibody titre equal to that of the reference serum used as an indicator of sufficient potency in the European Pharmacopoeia. Neutralizing antibody titres after vaccination correlated highly with the VP2 content of the vaccines. A significant correlation was also found between the VP3 content and the antibody response. Our data illustrate that the antigen content of inactivated infectious bursal disease vaccines is a reliable indicator of the protective serological response after vaccination, and consequently could be used as a measure of vaccine potency. This holds true for both VP2, the antigen that induces neutralizing antibodies, as well as for VP3, which does not induce neutralizing antibodies. Résumé Quantification des protéines virales 2 et 3 du virus de la bursite infectieuse (IBD) dans les vaccins inactivés comme indicateur de la réponse sérologique et mesure de l'activité Dans les vaccins inactivés en émulsion huileuse de l'IBD, les protéines virales 2 et 3 (VP2 et VP3) ont été quantifiées en utilisant des tests ELISA et il a été étudié, la dépendance de la réponse sérologique envers le contenu en antigène. Des différences importantes des contenus en antigène, allant jusqu’à une dilution au 1/50è, ont été observées parmi les vaccins. Les titres en anticorps neutralisants, trois à six semaines après vaccination, ont varié de 3 log2 à 16 log2. Aucun des vaccins n'a induit un titre en anticorps égal à celui du sérum de référence utilisé comme un indicateur d'activité dans la Pharmacopée Européenne. Les titres des anticorps neutralisants, après vaccination, ont montré une corrélation très élevée avec le contenu des vaccins en VP2. Une corrélation significative a également été observée entre le contenu en VP3 et la réponse sérologique. Nos données illustrent que le contenu en antigène des vaccins inactivés de l'IBD est un indicateur fiable de la réponse sérologique protectrice après vaccination et en conséquence peut être utilisé pour la mesure de l'activité des vaccins. Ceci s'est révélé vrai pour VP2, l'antigène induisant les anticorps neutralisants et aussi pour VP3 qui n'induit pas d'anticorps neutralisants. Zusammenfassung Quantifizierung der viralen Proteine 2 und 3 des Virus der infektiösen Bursitis (IBD) in inaktivierten Vakzinen als Indikator für ihre Potenz zur Induktion einer serologischen Immunantwort In einer Reihe von inaktivierten IBD-Ölemulsionsvakzinen wurden die viralen Proteine 2 und 3 (VP2 und VP3) mittels ELISA quantifiziert und die Abhängigkeit der serologischen Antwort vom vakzinalen Antigengehalt wurde untersucht. Bei den Impfstoffen wurden große Unterschiede in den Antigengehalten (bis zu 50-fach) festgestellt. Die neutralisierenden Antikörpertiter variierten von 3 log2 bis zu 16 log2. Keine der Vakzinen induzierte einen Antikörpertiter in Höhe des Referenzserums, das gemäß der europäischen Pharmacopoe als Indikator für eine ausreichende Potenz verwendet wurde. Die neutralisierenden Antikörpertiter nach Vakzination korrelierten in hohem Maße mit dem VP2-Gehalt in den Vakzinen. Zwischen dem VP3-Gehalt und der Antikörperbildung wurde auch eine signifikante Korrelation festgestellt. Unsere Daten zeigen, dass der Antigengehalt in inaktivierten IBD-Impfstoffen ein verlässlicher Indikator für die Induktion einer schützenden serologischen Antwort nach Vakzination ist und dass er deshalb als ein Maß für die Potenz eines Impfstoffs benützt werden könnte. Dies gilt sowohl für VP2, das Antigen, das neutralisierende Antikörper provoziert, als auch für VP3, das keine neutralisierenden Antikörper induziert. Resumen Cuantificación de las proteínas víricas 2 y 3 del virus de bursitis infecciosa aviar en vacunas inactivadas como indicador de la respuesta serológica y medida de la potencia Las proteínas víricas 2 y 3 (VP2 y VP3) fueron cuantificadas en una serie de vacunas inactivadas de IBD emulsionadas con aceite, mediante técnicas de ELISA, y se estudió la relación entre la respuesta serológica y el contenido de antígeno vacunal. Se observaron grandes diferencias en cuanto al contenido de antígeno, hasta 50 veces, entre las vacunas. Los títulos de anticuerpos neutralizantes a las 3–6 semanas postvacunación variaron de 3 log2 a 16 log2. Ninguna de las vacunas indujo un título de anticuerpos similar a los de los sueros de referencia que se usan como indicadores de una potencia suficiente en la Farmacopea Europea. Los títulos de anticuerpos neutralizantes tras la vacunación mostraron una elevada correlación con el contenido de VP2 de las vacunas. También se observó una correlación significativa entre el contenido de VP3 y la respuesta de anticuerpos. Nuestros resultados muestran que el contenido de antígeno de las vacunas de IBD inactivadas es un indicador fiable de la respuesta serológica protectora tras la vacunación y por consiguiente podría usarse como medida de la potencia vacunal. Esto es cierto tanto para VP2, el antígeno inductor de anticuerpos neutralizantes, como para VP3, que no induce anticuerpos neutralizantes.