Paper de la proteïna scavenger AIM en l’activació de macròfags i desenvolupament de cèl·lules escumoses

La proteina secretada Apoptosis inhibitor expressed by macrophages (AIM) es expressada per macrofags tissulars en condicions d? inflamacio. Es una glicoproteina que pertany a la familia dels Receptors Scavenger Rics en Cisteines (SRCR-SF). Mitjancant models murins in vitro i in vivo s? ha observat com l? expressio d? AIM depen de l? activacio de l? heterodimer LXR/RXR i diversos estudis han demostrat com la forma murina AIM (mAIM) evita l? apoptosi de macrofags i altres tipus cel? lulars. En aquest context, estudis amb models murins d? aterosclerosi, deficients en el LDLr, han suggerit que mAIM actua com a factor aterogenic. En aquest sentit s? ha demostrat que AIM juga un paper rellevant en el proces aterosclerotic muri incrementant l? apoptosi del macrofag, pero es desconeix la seva implicacio en l? aterosclerosi humana. A mes, resultats recents la descriuen com un possible marcador de serum de condicions d? inflamacio. La present tesi te com a objectiu principal aprofundir en el coneixement del paper de la proteina humana AIM en els processos moleculars implicats en l? aterosclerosi. En la tesi presentada s? observa com pacients afectats per PAD tenen menors nivells de hAIM en serum que pacients sans. Tot i que aquestes diferencies son estadisticament significatives, no son suficients per utilitzar els nivells de hAIM en serum com a biomarcador de la patologia, a no ser que es combini amb altres factors analitics. Aquests resultats es correlacionen amb els resultats obtinguts amb els macrofags cultivats in vitro, on la presencia de la proteina hAIM disminueix en el sobrenedat dels macrofags incubats amb d`OxLDL mentre que augmenta en els llisats cel? lulars, suggerint el possible segrest de hAIM pel macrofag en presencia d`OxLDL. Per contra, en serum de models murins d? aterosclerosi els nivells de mAIM son majors que en el ratolins control, la qual cosa suggereix diferencies en la regulacio de la forma murina d? AIM en serum respecte la seva homologa humana (hAIM). A mes s? observa que la regulacio del RNAm de hAIM augmenta amb l? activacio dels receptors nuclears LXR/RXR, al igual que la seva homologa murina, mAIM. Mitjancant estudis funcionals es mostra que hAIM mante les caracteristiques antiapoptotiques de mAIM en front de les LDL modificades. I per primer cop, es suggereix que hAIM augmenta la formacio dels macrofags escumosos, com s? observa per tincions amb Oil Red O o Nile Red O i dels resultats de colesterol total o esters de colesterol. Aquest augment no es degut a la disminucio del transport de colesterol cap a l? espai extracel? lular, ja que hAIM no modifica significativament l? eflux dels macrofags cap als acceptors lipidics plasmatics. De fet, mitjancant estudis de citometria s? observa que hAIM incrementa la captacio de les lipoproteines OxLDL i AcLDL marcades amb fluorescencia, resultats correlacionats amb l? augment de l? expressio dels principals Receptors Scavenger implicats en la captacio de LDL modificades (CD36 i SR-A1). En concordanca amb aquests resultats, mitjancant assajos d? ELISA es suggereix que hAIM s? uneix a OxLDL i a AcLDL, i a mes a mes, mitjancant estudis de microscopia de fluorescencia s? observa que hAIM augmenta la capacitat de les cel? lules HEK-293 transfectades amb CD36 en captar OxLDL i d? aquesta manera es suggereix que hAIM podria facilitar la captacio d? OxLDL via CD36. Per altra banda, durant els estudis de participacio de hAIM en l? adhesio del macrofag, s? observa que hAIM augmenta l? expressio de LFA-1 i la consequent adhesio a la molecula d? adhesio ICAM-1. Els resultats de la tesi doctoral presentada suggereixen que hAIM esta involucrada en la supervivencia del macrofag, la formacio del macrofag escumos i l? adhesio del macrofag, aixi doncs hAIM podria contribuir significativament en els mecanismes relacionats en l? evolucio de l? aterosclerosi.