The role of neutrophils upon leishmania major infection

Les neutrophiles constituent la premiere ligne de defense contre un grand nombre de pathogenes. Apres infection avec Leishmania major, les neutrophiles migrent rapidement et massivement au site d'infection par le parasite. Les neutrophiles sont d'importants acteurs dans l'orchestration de la reponse anti-Leishmania, via la secretion de nombreuses cytokines, chimiokines et composes stockes dans leurs granules. De plus, les neutrophiles interagissent avec les cellules presentatrices d'antigenes, telles que les cellules dendritiques et en consequences contribuent au developpement de la reponse adaptative. A ce jour, l'impact des neutrophiles sur 1'activation des cellules dendritiques et les possibles consequences de l'interaction neutrophiles avec ces dernieres sur l'evolution de la maladie suite a l'infection avec L. major reste peu connu. Ainsi, nous avons dans un premier temps investigue l'influence des neutrophiles sur 1'activation des cellules dendritiques in vitro. Suite a cela, nous avons analyse le role des neutrophiles sur 1'activation des cellules dendritiques presentes au site d'infection et dans les ganglions drainants in vivo, apres inoculation intra-dermale de L. major dans le pavillon auriculaire de souris de souche C57BL/6 et BALB/c, ainsi que les consequences de la depletion des neutrophiles sur l'evolution de la maladie. Nous avons pu demontrer que les neutrophiles ont un impact negatif sur l'activation des cellules dendritiques exposees a L. major in vitro, via des mecanismes impliquant la secretion de Prostaglandines par les neutrophiles et la sequestration des parasites. La depletion des neutrophiles dans les souris BALB/c durant les premiers jours apres infection avec L. major dans le derme de l'oreille resulte en une augmentation de l'expression de marqueurs d'activation des cellules dendritiques presentes dans les ganglions drainants, mais pas au site d'infection. De plus, les souris BALB/c transitoirement depletees en neutrophiles developpent des lesions significativement plus petites, une reponse de type Th2 diminuee et une charge parasitaire plus faible au site d'infection que les souris non depletees. La depletion des neutrophiles dans les souris C57BL/6 n'a pas d'influence detectable sur l'activation des cellules dendritiques que ce soit au niveau des ganglions drainants ou au site d'infection. La progression de la lesion et la charge parasitaire ne sont pas affectees par la depletion des neutrophiles, malgre le developpement d'une reponse Th2 diminuee par rapport aux souris non depletees. En resume, dans les premieres heures apres infection, les neutrophiles ont un effet negatif sur l'activation des cellules dendritiques et sur la reponse anti-Leishmania dans les souris BALB/c tandis que leur role parait moins important dans les souris C57BL/6. Ces resultats peuvent avoir d'importantes implications en terme de developpement de nouveaux vaccins contre Leishmania. - Neutrophils constitute the first line of defense against a variety of pathogens. Following Leihmania major infection neutrophils migrate rapidly and massively to the site of parasite inoculation. They are important players in the orchestration of the anti-leishmania response through the release of a plethora of cytokines, chemokines and granular components. In addition, neutrophils interact with antigen-presenting cells such as dendritic cells (DCs) and thereby contribute to the development of the adaptive immune response. However, the impact of neutrophils on the activation of DCs and possible consequences on disease progression following L. major infection are poorly understood. Therefore, we first investigated the influence of neutrophils on DC activation in vitro. Next we analyzed the role of neutrophils on the activation of DCs present at the site of infection and in the draining lymph node (dLN) following inoculation of L. major in the ear pinna of C57BL/6 and BALB/c mice and analyzed the consequences of early neutrophil depletion on disease progression. We could demonstrate that neutrophils had a negative impact on the activation of DCs exposed to L. major in vitro through mechanisms involving neutrophil-derived prostaglandins and sequestration of parasites. In BALB/c mice, depletion of neutrophils during the first days of infection with L. major in the ear dermis increased the expression of activation markers on dLN DCs but not on DCs present at the site of infection. In addition, BALB/c mice transiently depleted of neutrophils developed significantly smaller lesions, a decreased Th2 immune response and harbored fewer parasites at the site of infection compared to non-depleted littermates. In C57BL/6, mice early depletion of neutrophils had no detectable impact on the activation of DCs both at the site of infection and in the dLN following L. major inoculation. Furthermore, depletion of neutrophils had no major effect on lesion evolution and parasite loads despite the development of a decreased Th2 immune response compared to non- depleted littermates. In summary, at the onset of infection, neutrophils are detrimental for DC activation and the anti-leishmania response in BALB/c mice while their role appears to be less important in C57BL/6 mice. These findings could have important implications for the design of new vaccination strategies.