Caracterização e quantificação por citometria de fluxo dos leucócitos presentes nos lavados vaginais de mulheres com vulvovaginites e flora vaginal normal

Introducao: As vulvovaginites (VV) sao consideradas como agravos importantes a saude da mulher, pois afetam suas vidas no âmbito sexual, afetivo, social, e psiquico. Muitos aspectos da fisiopatogenese destas afeccoes ainda precisam ser esclarecidos, entre eles os mecanismos imunes relacionados a instalacao e propagacao da infeccao. Objetivos: Identificar e quantificar por citometria de fluxo (CF) os leucocitos presentes no conteudo vaginal de mulheres com flora normal e VV. Avaliar a expressao do CD16 nos neutrofilos do conteudo vaginal destas mulheres. Materiais e Metodos: Estudo de corte transversal, no periodo de junho de 2009 a outubro de 2010. O estudo incluiu 152 mulheres no menacme diagnosticadas com: flora vaginal normal (n=51), vaginose bacteriana (VB) (n=34), candidiase vulvovaginal (CV) (n=43) e VB associada a CV (VB+CV) (n=14). As mulheres foram submetidas a exame especular para medida de pH vaginal, teste de Whiff, coleta de material para bacterioscopia e cultura para fungos. A VB foi detectada pelos criterios de Amsel e/ou escore de Nugent ? 7. A CV, pela presenca de hifas ou esporos no conteudo vaginal. VB+CV foi diagnosticada quando estas duas VV estavam presentes na mesma mulher segundo criterios ja descritos. Foram consideradas com flora vaginal normal, as mulheres que apresentaram flora do tipo 1 e ausencia de patogenos nos exames laboratoriais. Ao final do exame ginecologico, foi realizado um lavado da cavidade vaginal, o qual foi enviado ao laboratorio para processamento. Os leucocitos foram marcados com anticorpos monoclonais conjugados a fluoroforos (anti-CD3, anti-CD4, anti-CD8, anti-CD14, anti-CD15, anti-CD16, anti-CD19, anti-CD24 e anti-CD56) e analisados por CF. Resultados: Os granulocitos neutrofilos foram as celulas predominantes em todos os grupos estudados. A media da porcentagem de granulocitos neutrofilos foi significativamente maior (p<0,05) na CV comparado a flora normal e VB. A media da porcentagem de granulocitos neutrofilos foi significativamente menor (p<0,05) na VB comparado a flora normal e a CV. Macrofagos e linfocitos foram detectados em percentuais bem menores que os granulocitos neutrofilos. Houve significância estatistica (p<0,05) para os linfocitos TCD4 que apresentaram media da porcentagem maior na CV e VB em comparacao a flora normal. Considerando-se a intensidade da expressao do CD16 nos neutrofilos, houve maior expressao nas VV (VB, CV, VB+CV) quando comparado a flora normal (p<0,05). Entre as VV, esta ocorrencia foi maior na VB comparado a CV (p<0,05). Conclusoes: Os granulocitos neutrofilos foram as celulas predominantes nos lavados vaginais e suas quantidades foram decrescentes considerando-se CV, flora normal e VB. Estes dados sugerem que, como em outros tecidos, na vagina, os neutrofilos sao as principais celulas efetoras da resposta imune apresentando-se em maiores ou menores concentracoes conforme o estimulo imunologico causado pelo micro-organismo. A maior intensidade da expressao do CD16 nos neutrofilos das mulheres com VV indica um atraso na apoptose dos neutrofilos envolvidos nestas infeccoes, predominando na V