Papel de la colonización por clones de alto riesgo en la transmisión e infección por Enterococcus faecium

Enterococcus faecium ha emergido como una de las principales causas de infeccion nosocomial, principalmente por la diseminacion de una subpoblacion genetica adaptada al hospital con resistencia a antibioticos, incluyendo ampicilina, levofloxacino y vancomicina. El aumento del numero de bacteriemias nosocomiales por este microorganismo, principalmente en pacientes inmunodeprimidos, como los oncohematologicos, es preocupante y se ha asociado, entre otros factores, a la profilaxis con quinolonas. La colonizacion intestinal previa y el sobrecrecimiento de E. faecium son factores esenciales para su diseminacion e infeccion. El objetivo principal de esta tesis fue estudiar la dinamica de colonizacion y transmision nosocomial de E. faecium con resistencia a ampicilina y o vancomicina, e investigar las caracteristicas inherentes a este microorganismo que favorecen la colonizacion, la infeccion y su transmision. En el primer capitulo de esta Tesis describimos la colonizacion por E. faecium resistente a ampicilina en dos tercios de los pacientes oncohematologicos que recibieron profilaxis con levofloxacino, principalmente tras su suspension. La colonizacion por E. faecium resistente a ampicilina tras la profilaxis, se asocio significativamente con la fase de la quimioterapia, la mucositis y la duracion de la neutropenia. Se observo una diversidad clonal muy baja que disminuyo durante el ingreso y el predominio del clon persistente EfmRAST117B, con resistencia a levofloxacino, eritromicina y alto nivel de resistencia a estreptomicina, responsable de todos los episodios de bacteriemia detectados. Ademas, presento los factores Esp, Acm, produjo bacteriocinas frente a la practica totalidad de clones y metabolizo sustratos poco frecuentes como los polioles. Tambien se documento y caracterizo la emergencia de resistencia a linezolid en aislados de colonizacion. En los pacientes colonizados por E. faecium resistente a ampicilina se observo un incremento en las poblaciones de enterocos, principalmente E. faecium, con respecto al estado basal y en todos los pacientes se produjo ademas una reduccion de la carga bacteriana total tras la administracion de quimioterapia. La tecnica PhP demostro una buena concordancia con el PFGE para la tipificacion de E. faecium cuando se empleo un indice de similitud de 0,9. En el segundo capitulo se evaluaron la adhesion e invasion en aislados de E. faecium y S. gallolyticus de diferente origen a las celulas epiteliales intestinales y su capacidad de translocar a traves de las mismas. Ademas, se estudio su capacidad de formar biopeliculas sobre distintos soportes. Se observo que la capacidad de adhesion e invasion del epitelio intestinal fue baja para ambas especies, pero algo mayor los aislados de E. faecium. El unico aislado de S. gallolyticus de origen animal, Sg78, mostro una elevada capacidad de invasion. S. gallolyticus, formo biopeliculas sobre superficies con colageno significativamente mas que E. faecium. Por el contrario, los aislados de E. faecium demostraron una capacidad de translocacion intrinseca muy superior a S. gallolyticus, aunque con diferencias importantes intra-especie. Los aislados de bacteriemia y de colonizacion de pacientes oncohematologicos, Efm106ST18 y Efm121ST117, demostraron ser los mas eficientes translocando. En el tercer capitulo se describio la presencia de un brote oculto de enterococos resistentes a vancomcina en nuestro hospital y se demostro que en todos los aislados de muestras de colonizacion e infeccion, menos uno, la resistencia a vancomicina estaba codificada en el transposon Tn1546 y se debia a la presencia del genotipo vanA. Se detecto la presencia de un clon mayoritario EVRST17 y cuatro minoritarios, diseminado principalmente en los servicios de medicina interna y nefrologia. El estudio de la transmision dedo-dedo de dos cepas de E. faecium sensibles a vancomicina, E. faecium L50ST178 y E. faecium ST117 permitio establecer diferencias interindividuales importantes.