Porcine alveolar macrophages, isolation, morphological and functional characteristics.

Summary A pulmonary lavage procedure to obtain a high yield of viable porcine alveolar macrophages (PAMs) from the lungs of piglets is described. Such cells were adherent to a plastic surface, stained positively for non-specific esterase and ingested IgG coated sheep red blood cells and opsonized bacteria. In contrast to data which have been reported from experiments performed with alveolar macrophages (AMs) from other animal species, a single intravenous dose of heat-killed BCG given four days before broncholavage of AMs, caused only an increase in the number of washout cells but was inadequate to increase the ability of the cells to kill microorganisms. Nevertheless such cells behaved more like activated macrophages as shown by the ease with which they secreted PGE2 and fibroblast growth factor during cultivation in the presence of lipopolysaccharide and Zymosan. But PAMs from both BCG-treated and control piglets cultivated for 48 hr in RPMI 1640 containing 10% FCS became truly activated and hence showed enhanced microbicidal activity. Zusammenfassung Isolierung sowie morphologische und funktionelle Charakterisierung von Alveolarmakrophagen des Schweines Es wurde eine Methode zur Gewinnung von Alveolarmakrophagen durch Spulungen des bronchoalveolaren Systems von Ferkeln beschrieben. Die gewonnenen Zellen wiesen typische Eigenschaften von Makrophagen wie Oberflachenanhaftung, positive Reaktion auf unspezifische Esterase und Phagozytose von mit IgG opsonisierten Schafblutkorperchen und Bakterien auf. Vier Tage nach intravenoser Verabreichung von hitzeabgetoteten BCG-Keimen konnte eine betrachtliche Erhohung der zu gewinnenden Alveolarmakrophagen festgestellt werden. Diese Zellen wiesen zwar keine erhohte mikrobizide Aktivitat auf, sezernierten jedoch im Vergleich zu Zellen von unbehandelten Tieren vermehrt PGE2 und Fibroblastenwachstumsfaktor, wenn sie in vitro mit LPS und Zymosan stimuliert wurden. Erhohte mikrobizide Eigenschaften von Schweine-Alveolarmakrophagen konnten nach Kultivierung dieser Zellen in RPMI 1640 Medium mit einem Gehalt von 10% fotalem Kalberserum nach einem Zeitraum von 48 Stunden nachgewiesen werden. On decrit une methode pour obtenir des macrophages alveolaires par des lavages du systeme bronchoalveolaire chez des porcelets. Les cellules obtenues ont presente les caracteres typiques des macrophages tels que l'adherence superficielle, la reaction positive aux esterases non specifiques, la phagocytose des globules rouges de moutons opsonises aux IgG et des bacteries. Une augmentation marquee des macrophages alveolaires recoltes a ete constatee quatre jours apres une application intraveineuse de germes BCG tues a la chaleur. Ces cellules n'ont presente aucune activite microbicide augmentee, mais elles ont secrete plus de PGE2 et de facteur de croissance des fibroblastes que des cellules d'animaux non traites lorsqu'elles avaient ete stimulees in vitro avec LPS et Zymosan. Des proprietes microbicides augmentees des macrophages alveolaires porcins ont pu etre mises en evidence apres 48 heures en cultivant ces cellules dans un milieu RPMI 1640 avec un taux a 10% de serum de foetus de veau. Resume Isolement et caracterisation morphologique et fonctionnel des macrophages alveolaires du porc Resumen Aislamiento y caracteristicas morfologicas y funcionales de los macrofagos alveolares porcinos Se describe un procedimiento para obtener macrofagos alveolares porcinos (PAM) mediante lavados del sistema broncoalveolar de lechones. Las celulas obtenidas presentaban las propiedades tipicas de macrofagos, tales como adherencia a una superficie plastica, reaccion positiva a la esterasa inespecifica y fagocitosis de hematies y bacterias opsonizadas con IgG. Cuatro dias despues de la administracion intravenosa de germenes BCG, muertos por el calor, se pudo comprobar un aumento considerable de los macrofagos alveolares a obtener. Cierto es que estas celulas no mostraban una actividad microbicida aumentada, pero secretaban, en comparacion con celulas de animales que no habian sido tratados, cantidades mayores de PGE2 y factor de crecimiento de fibroblastos, cuando eran estimuladas in vitro con lipopolisacaridos y zymosan. Actividades microbicidas acrecentadas de los PAM se pudieron poner en evidencia tras el cultivo de estas celulas durante 48 horas en el medio RPMI 1640 con un contenido de 10% de suero sanguineo de feto de ternera (FCS).