Planejamento, síntese e avaliação farmacológica de novos protótipos de fármacos vasorelaxantes

As doencas cardiovasculares sao a principal causa de morte no mundo, logo a busca de candidatos a prototipos de farmacos cardiotonicos que sejam mais efetivos, seguros e que apresentem menos efeitos colaterais quando comparados aos ja disponiveis na terapeutica, e de fundamental importância. Neste contexto, foram empregados em nosso planejamento os prototipos inibidores de fosfodiesterase 3, milrinona (13) e cilostazol (4), que mostram atividade inotropica e efeito vasodilatador. Os novos compostos heterociclos 5-(1-fenil-1H-pirazola-4-il)-2H-tetrazolas (20a-20o) foram originalmente desenhados atraves da estrategia de hibridacao molecular a partir destes prototipos. A rota sintetica eleita, composta por quatro etapas, para a obtencao dos compostos 5-(1- fenil-1H-pirazola-4-il)-2H-tetrazolas (20a-20o) resultou em rendimentos globais que variaram entre 16 e 73%. Inicialmente ocorreu uma reacao de condensacao entre as fenilhidrazinas 14a- 14o e 1,1,3,3 tetrametoxipropano, catalisada por acido cloridrico, com formacao dos intermediarios 1-fenil-1H-pirazolas (16a-16o). Na sequencia, os compostos 16a-16o foram submetidos a uma reacao de formilacao quimio e regioespecifica na posicao 4 do anel pirazola. Os intermediarios 1-fenil-1H-pirazola-4-carbaldeido (18a-18o) foram entao submetidos a uma reacao de condensacao com cloridrato de hidroxilamina que desidratou in sito na presenca de iodeto de potassio aos intermediarios 1-fenil-1H-pirazola-4-carbonitrilas (19a-19o). Ao final, os compostos 19a-19o, atraves de um processo de cicloadicao 1,3 bipolar, reagiram com azida de sodio formando os compostos desejados 20a-20o. A utilizacao das condicoes da reacao Duff para a formilacao de N-fenilpirazois (1-fenil- 1H-pirazol) (9a-o), se mostrou uma metodologia sintetica alternativa as condicoes classicas de Vilsmeier-Haack. Todos os compostos sintetizados tiveram suas estruturas quimicas elucidadas atraves das espectroscopias na regiao do infravermelho e ressonância magnetica nuclear de 1H, 13C, HSQC e HMBC. Os compostos 5-[1-(4-fluorfenil)-1H-pirazola-4-il]-2H-tetrazola (20c), 5-[1-(3- fluorfenil)-1H-pirazola-4-il]-2H-tetrazola (20d), 5-[1-(4-clorofenil)-1H-pirazola-4-il]-2Htetrazola (20e), 5-[1-(3-nitrofenil)-1H-pirazola-4-il]-2H-tetrazola (20f) e 5-[1-(3-clorofenil)-1H-pirazola-4-il]-2H-tetrazola (20g), foram avaliados quanto ao seu perfil de relaxamento do musculo liso vascular. A partir deste ensaio preliminar, o composto 5-[1-(3-fluorfenil)-1Hpirazola- 4-il]-2H-tetrazola (20d) foi selecionado para ser avaliado em modelos farmacologicos complementares, uma vez que apresentou melhor perfil de relaxamento dentre esta serie de compostos, a fim de investigar seu mecanismo de acao. Nestes ensaios, o composto 20d mostrou uma acao relaxante em arterias isoladas, potencializada pelo endotelio, com participacao das vias GCs/GMPc e AC/AMPc e onde os fluxos de K+ e Ca2+ atraves da membrana e a captacao de Ca2+ pelo reticulo sarcoplasmatico sao importantes. Face ao perfil farmacologico promissor do composto 5-[1-(3-fluorfenil)-1H-pirazola-4- il]-2H-tetrazola (20d), o mesmo foi submetido aos ensaios de seguranca pre-clinica no modelo in vitro de incorporacao do vermelho neutro com culturas de celulas 3T3 e a toxicidade oral aguda em modelo in vivo. Segundo o protocolo internacional Organization for Economic Cooperation and Development (OECD) 423 o composto 20d foi classificado na classe 4, que mostra que o composto foi bem tolerado na dose de 2000 mg/kg por via oral. Ao termino deste trabalho, podemos concluir que a estrategia de planejamento empregada no mesmo foi validada, uma vez que o composto 5-[1-(3-fluorfenil)-1H-pirazola- 4-il]-2H-tetrazola (20d) apresentou um perfil farmacologico vasodilatador com provaveis acoes cardioativas. A avaliacao farmacologica completa, incluindo experimentos com a enzima fosfodiesterase 3, de todos os compostos sintetizados neste trabalho servira de guia para se estabelecer a relacao estrutura atividade da serie, e por sua vez, conduzir as futuras modificacoes sobre as estruturas quimicas dos compostos visando a otimizacao da atividade cardiotonica.