Fungi in leaves, twigs and stem bark of Populus tremula from northern Spain

Summary Fungal species were recorded from Populus tremula leaves, twigs and bark (trunk) at eight sites in the northern region of Spain, with the aim of evaluating the effect of sampling site, sampling tissue and isolation method on the frequency and species distribution of the fungi recovered from necrotic and healthy tissues. Two different isolation methods were used: the first consisted of finding fruitbodies on plant tissues after incubating them in wet and warm conditions, and the second included growing mycelia from plant fragments plated on potato dextrose agar (PDA). A total of 48 fungal species were isolated from 960 plant fragments. Cytospora chrysosperma, previously reported to be a pathogen of poplar, was recovered very frequently and was recorded as much in healthy as in dead or dying tissues. Cladosporium maculicola, Elsinoe veneta, Alternaria alternata, Aureobasidium pullulans and Pollaccia radiosa were also frequently isolated. The isolation frequencies from necrotic and healthy plant tissues were significantly different between sites and isolation methods. The incubation in moist chambers revealed significantly more fungal isolates and a higher species richness (38 species) than isolations on PDA. However, 16% of the fungal species were exclusively recorded from cultures. Therefore, a combination of several isolation methods is recommended for surveys of fungal communities associated with trees. Resume Les especes fongiques des feuilles, rameaux et troncs (ecorce) de Populus tremula ont ete decrites dans huit sites du nord de l'Espagne, dans le but d’evaluer l‘effet du site et du tissu echantillonnes ainsi que de la methode d'isolement sur la frequence et la distribution des especes de champignons isoles a partir de tissus sains et necroses. Deux methodes d'isolement ont ete utilisees: la premiere a consistea rechercher des fructifications sur les tissus apres incubation en conditions chaudes et humides; pour la deuxieme, des fragments de plantes ont ete deposes sur milieu gelose (PDA). Un total de 48 especes fongiques a ete isolea partir des 960 echantillons de plantes recoltes. Cytospora chrysosperma, mentionne comme pathogene des peupliers, a ete isole tres frequemment, aussi bien a partir de tissus sains que necroses ou morts. Cladosporium maculicola, Elsinoe veneta, Alternaria alternata, Aureobasidium pullulans and Pollaccia radiosa ont eteegalement frequemment isoles. Les frequences d'isolement a partir de tissus necroses ou sains ont varie de facon significative selon les sites et la methode d'isolement. La methode par incubation en chambre humide a revele significativement plus d'isolats fongiques et une plus grande richesse specifique (38 especes) que les isolements sur PDA. Cependant, 16% des especes n'ont ete isolees que par culture. Il est donc recommande de combiner plusieurs methodes d'isolement pour la caracterisation des communautes fongiques associees aux arbres. Zusammenfassung An 8 Standorten in Nordspanien wurden Pilze aus Blattern, Zweigen und der Stammrinde von Populus tremula nachgewiesen, mit dem Ziel, den Einfluss des Standortes, des Pflanzengewebes und der Nachweismethode auf die Haufigkeit und das Artenspektrum dieser Organismen in nekrotischen und gesunden Geweben zu prufen. Der Pilznachweis erfolgte mit zwei Methoden: Identifizierung von Fruchtkorpern auf den Pflanzengeweben nach Inkubation unter feuchtwarmen Bedingungen und Isolierung von Reinkulturen aus den Pflanzenfragmenten auf Kartoffel-Dextrose-Agar (PDA). Insgesamt wurden 48 Pilzarten von 960 Proben isoliert. Cytospora chrysosperma, ein bekanntes Pathogen an Pappeln, wurde sehr haufig nachgewiesen und war in gesunden und in toten oder absterbenden Geweben etwa gleich oft vorhanden. Cladosporium maculicola, Elsinoe veneta, Alternaria alternata, Aureobasidiumpullulans und Pollaccia radiosa wurden ebenfalls haufig isoliert. Die Haufigkeiten der Pilze in nekrotischen und gesunden Pflanzengeweben unterschieden sich zwischen den Standorten und den Isolierungsmethoden signifikant. Die Inkubation in feuchten Kammern ergab signifikant mehr Pilzisolate und eine hohere Artenzahl (38Arten) als die Isolierungen auf PDA. Andererseits wurden 16 % der Pilzarten ausschliesslich durch Kulturen nachgewiesen. Bei der Erfassung der mit Baumen assoziierten Pilzgemeinschaften wird deshalb eine Kombination verschiedener Nachweismethoden empfohlen.