Criopreservação do sêmen de búfalos (Bubalus bubalis) em diluidores contendo lipoproteínas de baixa densidade, em substituição a gema de ovo

O objetivo geral deste trabalho foi comparar o efeito de diferentes diluidores, constituidos por gema de ovo de galinha ou lipoproteinas de baixa densidade extraidos da gema de ovo, durante o processo de criopreservacao do semen de touros bufalos da raca Murrah, a fim de definir qual fornece maior efeito protetor as caracteristicas espermaticas. Esse trabalho foi dividido em tres fases: pre-experimento, Experimento 1 e Experimento 2. O objetivo do Pre-experimento foi comparar tres diluidores, sendo um comercial, que possuem a gema de ovo como componente comum. Nos Experimentos 1 e 2 comparou-se diferentes concentracoes de LDL na criopreservacao do semen bubalino quando adicionada aos diluidores escolhidos no pre-experimento. Ejaculados de seis bufalos Murrah foram divididos e diluidos de acordo com a fase do trabalho: Pre-experimento Diluidor comercial, Tes-Tris e Tris-acido citrico; Experimento 1 Diluidor comercial completo, Diluidor comercial + 2%LDL, Diluidor comercial + 4%LDL, Diluidor comercial + 8%LDL, Diluidor comercial + 14%LDL; Experimento 2- Tes-Tris, Tes-Tris + 2%LDL, Tes-Tris + 4%LDL, Tes-Tris + 8%LDL, Tes-Tris + 14%LDL. As amostras do experimentos 1 e 2 foram analisadas pelo CASA no pre-resfriamento. Em todas as fases as amostras descongeladas foram submetidas ao teste de termoresistencia, assistido pelo CASA, teste hiposmotico e teste de integridade de membranas por sondas fluorescentes (CFDA/Pi). As medias dos resultados obtidos nos tres testes foram comparadas pelo Teste de Tukey (P<0,05). No Pre-experimento as motilidades pos-descongelamento foram semelhantes 40,97%±14,21; 37,13%±10,12; 32,81%±11,78 respectivamente para diluidor comercial, Tes-Tris e Tris-acido citrico. A partir da leitura de 30 minutos os diluidores comercial e Tes-Tris mostraram superioridade quanto a motilidade, em relacao ao Tris-acido citrico. Os valores de VCL, VSL, VAP, LIN e BCF foram maiores para o diluidor comercial, e semelhantes para Tes-Tris e Tris-acido citrico. Nao houve diferenca entre tratamentos quanto a integridade de membranas. No Experimento 1 o diluidor comercial foi superior para motilidade, VCL, VSL, VAP, LIN e BCF nos periodos pre-diluicao, pos-descongelamento e durante todo o TTR. A concentracao de 2% de LDL teve pior efeito para preservar a integridade de membranas que o diluidor comercial completo. No Experimento 2 o Tes-Tris foi inferior a 2 e 4%LDL quanto a motilidade no pre-resfriamento. No pos-descongelamento, quanto a motilidade o Tes-Tris foi superior (56,53%±9,73) as diferentes concentracoes de LDL (47,16%±11,06; 45,64%±7,46; 45,71%± 6,56; 43,33%±5,97, para 2, 4, 8 e 14%LDL). Porem durante o TTR as motilidades foram semelhantes. O Tes-Tris controle foi inferior a todas as concentracoes de LDL para VCL, VSL, VAP, LIN e BCF, no pre-resfriamento, pos-descongelamento e durante todo o TTR. Nao houve diferenca entre tratamentos quanto a integridade de membranas. O diluidor comercial foi mais adequado para o congelamento de semen de bufalos. As concentracoes de 2, 4 e 8% de LDL, em diluidor base Tes-Tris, foram mais eficazes que o diluidor Tes-Tris com 20% de gema de ovo para o congelamento de semen de bufalos.