Descripción de tres nuevas especies del género "Tenacibaculum" causantes de tenacibaculosis, aspectos taxonómicos y patogenicidad: aspectos taxonómicos y patogenicidad

La tenacibaculosis es actualmente la primera causa de mortalidad en cultivos de rodaballo y lenguado en Galicia. Esta enfermedad esta causada por el patogeno Tenacibaculum maritimum, bacteria filamentosa perteneciente a la familia Flavobacteriaceae. En los ultimos anos han estado apareciendo una serie de bacterias filamentosas en rodaballos y lenguados enfermos de tenacibaculosis, que presuntamente no pertenecian a la especie T. maritimum. El presente trabajo ha consistido en la caracterizacion fisiologica, bioquimica, serologica y molecular de estos microorganismos en comparacion con una serie de cepas de referencia de las especies Tenacibaculum maritimum, Tenacibaculum ovolyticum y Tenacibaculum litoreum. En la primera fase del estudio se realizaron unas pruebas descritas como utiles en el seguimiento de la tenacibaculosis con el objetivo de establecer posibles diferencias entre las cepas en estudio y la especie T. maritimum. Los resultados obtenidos mostraron una serie de caracteristicas variables entre algunos de los aislados y esta especie. Los ensayos de patogenicidad revelaron que los cepas representativas de los aislados en estudio eran patogenos para rodaballo y lenguado. Con la finalidad de establecer la posicion taxonomica de las cepas en estudio se realizaron estudios genetico-moleculares (secuenciacion del gen que codifica el 16S rRNA, hibridacion DNA-DNA y determinacion del contenido en G+C mol%, analisis de los acidos grasos). Los analisis geneticos permitieron demostrar que las cepas en estudio constituyen tres nuevas especies dentro del genero Tenacibaculum para las cuales los nombres especificos de Tenacibaculum discolor, Tenacibaculum gallaicum y Tenacibaculum soleae. Ademas se ha demostrado que el analisis de acidos grasos es una herramienta util para la diferenciacion taxonomica de especies patogenas dentro del genero Tenacibaculum y para estudios epidemiologicos en la especie T. maritimum. Los estudios a nivel serologico mediante immunoblot empleando como antigenos proteinas y LPS presentes tanto en la membrana celular como en los productos extracelulares, mostraron que la especie T. maritimum y las nuevas especies descritas difieren en la composicion antigenica. Asimismo estos estudios han demostrado que existe heterogeneidad serologica en las especies T. discolor, T. gallaicum y T. soleae. El analisis mediante cromatografia y espectrometria de masas de las senales de quorum sensing demostro que la especie T. discolor produce una unica senal de comunicacion bacteriana identificada como N-butiril-DL-homoserin lactona (C4-HSL) tanto in vitro como in vivo. La presencia de C4-HSL en los tejido de rodaballos infectados experimentalmente sugiere que la produccion de dicha molecula podria tener un papel en la patogenesis de la tenacibaculosis. El estudio del efecto de esta molecula sobre la actividad respiratoria de macrofagos de rodaballo mediante citometria de flujo mostro que la C4-HSL no tiene efecto inmunomodulador y no actua por tanto como un factor de virulencia per se.