Búsqueda de candidatos proteicos para el desarrollo de vacunas frente a las infecciones por streptococcus suis en cerdos

RESUMEN DE LA TESIS DOCTORAL DE Da LIDIA GOMEZ GASCON El resumen de la tesis para la base de datos Teseo debe ser una presentacion de la tesis y tener la extension suficiente para que quede explicado el argumento de la tesis doctoral. El formato debe facilitar la lectura y comprension del texto a los usuarios que accedan a Teseo, debiendo diferenciarse las siguientes partes de la tesis: 1. Introduccion o motivacion de la tesis. Streptococcus suis es microorganismo de enorme repercusion economica para la industria porcina y una marcada importancia sanitaria, al ser considerado un agente zoonosico emergente. En base al polisacarido capsular, se reconoce la existencia de 35 serotipos, siendo los serotipos del 1 al 10, 14, 15, 16, 1/2 y 1/14 los que se asocian a la mayoria de los brotes clinicos en el cerdo y el hombre. El descubrimiento de una vacuna eficaz, elaborada con antigenos comunes y conservados entre serotipos se ha convertido en un objetivo prioritario mundial. Actualmente, la atencion se ha desplazado hacia las proteinas de superficie, especialmente aquellas ancladas a la pared celular, que pueden ser detectadas con tecnicas proteomicas. 2. Contenido de la investigacion. Hemos analizado mediante proteomica una coleccion de 39 cepas pertenecientes a 19 serotipos, utilizando la tecnica del shaving, basada en la digestion de celulas vivas con proteasas y el posterior analisis de los peptidos generados por LC/MS/MS. Esto nos ha permitido definir el pan-surfoma de este grupo de aislados, identificado un total de 113 proteinas (33 lipoproteinas; 17 proteinas de la pared celular; 9 proteinas secretadas, 28 proteinas de membrana con un dominio transmembrana y 26 proteinas multi-transmembrana). De todas las proteinas identificadas, tres proteinas de pared celular cell envelope proteinase (SSU0757), 5'-nucleotidase (SSU0860) y surface-anchored DNA nuclease o SsnA (SSU1760), podrian ser buenos candidatos vacunales, al estar presentes en mas del 70 por ciento de los serotipos y estar mas expuestas en la superficie. Seleccionamos la proteina ? Surface-anchored DNA nuclease? (SsnA) para valorar su potencial como candidato vacunal, mediante ensayos de proteccion in vivo de la proteina recombinante rSsnA. Realizamos un estudio preliminar para seleccionar un adyuvante eficaz para su uso en formulaciones vacunales frente a las infecciones por S. suis en el modelo murino, utilizando un protocolo basado en el estudio clinico y lesional, estudio microbiologico y respuesta inmune humoral de los animales infectados. Los tres adyuvantes utilizados (Hidroxido de Aluminio, aceite en agua e incompleto de Freund) mostraron un efecto protector frente a la muerte en las primeras 72 tras la infeccion, aunque el hidroxido de aluminio presento mejores resultados. Por ultimo, se evaluo la capacidad protectora una nueva vacuna Wellvac-suis, elaborada con la proteina rSsnA, con una combinacion de hidroxido de aluminio y QuilA como adyuvantes, en un ensayo experimental en cerdos. 3. Conclusion Nuestros resultados demuestran que la aplicacion de dos dosis de la vacuna Wellvac-suis (elaborada con la proteina rSsnA, con una combinacion de hidroxido de aluminio y QuilA como adyuvantes) a los animales, separada 14 dias, estimula una fuerte respuesta inmune especifica, aunque esta respuesta, tal como es evaluada en este ensayo, no es capaz de proteger a los animales frente a una infeccion por S. suis serotipo 2, probablemente debido a que los anticuerpos inducidos no tuvieron capacidad opsonizante.