Influence du chondroïtine sulfate (CS) sur l’activité et l’expression de plusieurs isoformes du cytochrome P450 et de la NADPH P450 réductase

Le CS fait partie de la famille des SYSADOA (SYmptomatic Slow Acting Drugs for OsteoArthritis) et est utilise par les patients avec de l’osteoarthrose de facon chronique pour ses proprietes anti-inflammatoires. Etant donne que ces patients recoivent d’autres medicaments, il etait interessant de documenter les effets du CS sur le cytochrome P450 et la NADPH-reductase (NADPH). Pour cette etude, deux modeles ont ete utilises: des lapins temoins (LT) et des lapins avec une reaction inflammatoire (LRI) afin de diminuer l’activite et l’expression du CYP. Six groupes contenant chacun cinq lapins ont ete utilises: un groupe sans CS et deux groupes qui ont pris oralement dans l’eau approximativement 20.5 mg/kg/jour de CS pendant 20 et 30 jours; les lapins des trois groupes restants ont pris du CS comme decrit plus haut, mais ont recu 5 ml sous-cutanees de terebenthine afin de produire une reaction inflammatoire aseptique (RIA) deux jours avant leur sacrifice, c’est-a-dire aux jours -2, 18 et 28. Les hepatocytes ont ete isoles pour evaluer l’activite et l’expression du CYP3A6, CYP1A2 et NADPH et aussi le ARNm de ces proteines. In vitro, nous avons etudie l’effet de differentes concentrations de CS-disaccharides sulfates, 4S, 6S, et 4,6S de CS, sur l’activite et l’expression du CYP1A2 et du CYP3A6. Pour documenter la presence de la reaction inflammatoire, nous avons mesure les mucoproteines, dans le serum des lapins avec une reaction inflammatoire. Aussi nous avons mesure la presence de l’oxide nitrique (NO) chez les hepatocytes de lapins controles et chez les hepatocytes des lapins avec une reaction inflammatoire. La translocation nucleaire du NF-κB a ete etudiee par fluorescence chez les hepatocytes. Par comparaison aux lapins temoins, l’administration du CS pendant 20 et 30 jours n’affecte pas l’activite du CYP3A6 et du CYP1A2. La RIA a augmente les mucoproteines a 95,1±5,7 vs 8,4±1,6 mg/dl dans les lapins temoins (p<0,05). La RIA a diminue l’activite du CYP3A6 de 62% et l’activite du CYP 1A2 de 54%. Le CS n’empeche pas la diminution du CYP1A2 produite par la RIA. Par ailleurs, le CS n’affecte pas l’activite ni l’expression de la NADPH. La translocation nucleaire de NF-κB a ete empeche par l’administration chronique de CS aux lapins avec RIA; en plus, la concentration de l’oxide nitrique n’a pas demontre une augmentation en presence de CS; par contre, CS n’empeche pas l’augmentation des seromucoides. Au contraire, CS affecte la diminution du CYP3A6 en fonction de temps et secondaire a la RIA. Dans ce group, CS a retabli le niveau des proteines du CYP3A6 observe dans le group de lapins temoins. Pourtant cette croissance ete independante de mRNA qui garde un niveau tres bas. Le plus remarcable a ete la maniere dont CS a augmente la proteine du CYP3A6, sans avoir retabli l’activite de cet isoforme. Finalement, in vitro, CS et ses trois disaccharides sulfates (4S, 6S et 4,6S) n’affectent ni l’activite ni l’expression de CYP1A2, CYP3A6 et de la NADPH. En conclusion, l’administration chronique de CS n’affecte pas l’activite ni l’expression du CYP1A2, ou la diminution du CYP1A2 produite par la reaction inflammatoire. Le CS n’affecte pas l’activite ni l’expression du NADPH. Cependant, CS empeche la diminution du CYP3A6 en fonction de temps et secondaire a la RIA.