Autochthonous and invasive mosquitoes of Catalonia as vectors of zoonotic arboviruses

Las enfermedades transmitidas por mosquitos (ETM) son una creciente preocupacion para la salud publica mundial. El aumento de las actividades humanas a escala internacional y el calentamiento global han permitido la rapida difusion y establecimiento de las especies invasoras de mosquitos en nuevas areas geograficas. Ademas, la globalizacion facilita la introduccion de arbovirus exoticos en areas naive, donde el mosquito esta presente, incrementando la probabilidad de los brotes de ETM. Los brotes de ETM, especialmente aquellos causados por arbovirus como el virus del Dengue, el virus del Zika, el virus de la fiebre del valle del Rift (VFVR) o el virus de la fiebre del Nilo Occidental (VFNO), tienen graves consecuencias para la salud publica y/o veterinaria. Las perdidas economicas debidas a las ETM zoonoticas pueden comprometer severamente la economia del pais afectado. Este aspecto es particularmente relevante en los paises en desarrollo, donde enfermedades como la fiebre del valle del Rift pueden provocar la muerte de un numero extremadamente elevado de animales, tanto domesticos como salvajes. Por estos motivos, es necesario adquirir un profundo conocimiento de las especies de mosquito presentes en un pais y cuales de ellas pueden ser vectores de los distintos agentes patogenos, con el fin de realizar eficientes planes de vigilancia y controles entomologicos. La presente tesis esta dividida en tres partes y cada una de ellas esta subdividida en capitulos. La primera parte se compone de dos apartados: Chapter 1 General Introduction y Chapter 2 Objectives. El objetivo de esta primera parte es ofrecer una vision general sobre la importancia de las ETM, el rol de los vectores y el concepto de competencia vectorial. Ademas se proporciona una descripcion del VFNO y del VFVR. A continuacion, se exponen los objetivos de la tesis. Hasta ahora se desconoce la dinamica poblacional y la estructura genetica de la especie invasora Aedes albopictus en Espana. Ademas, no se ha realizado ningun estudio de competencia vectorial de poblaciones espanolas de Cx. pipiens y Ae. albopictus para arbovirus zoonoticos (VFNO y VFVR). El objetivo de esta tesis fue investigar estos dos puntos. La segunda parte esta formada por tres capitulos. Cada uno es un estudio original, cuyo objetivo es responder a las preguntas propuestas en el segundo capitulo. En el primer estudio (Chapter 3) se analizo la estructura genetica de Ae. albopictus en Espana usando distintas tecnicas de analisis genetico. En base a los resultados obtenidos se formularon dos hipotesis para explicar la introduccion y la difusion de esta especie en el pais. Ademas, se realizo un estudio sobre la dispersion global de Ae. albopictus. Los resultados confirman la importancia de las actividades humanas en la dispersion local y global de Ae. albopictus. El segundo y el tercer estudio (respectivamente, Chapter 4 y Chapter 5) se demostro que las especies Cx. pipiens y Ae. albopictus de Espana son vectores competentes para VFNO y VFVR. En ambos estudios se demostro tambien la importancia de usar temperaturas variables durante el periodo extrinseco de incubacion. Los resultados indican que la utilizacion de temperaturas variables permite estimar con mas precision la competencia vectorial. Ademas, se utilizaron distintos metodos para la deteccion de particulas virales en la saliva de los mosquitos infectados. La tercera parte incluye Chapter 6- General discussion y Chapter 7- Conclusions. En esta parte, se discutieron todos los resultados, se propusieron futuros estudios y se enumeraron las conclusiones. Al final de cada capitulo, se han enumerados todas las referencias usadas. Mosquito-borne diseases (MBDs) are an increasing global public health concern. The increase of international human activities and the global warming, have allowed the rapid spread and establishment of invasive mosquito species in new geographical areas. Moreover, the globalization also cause the introduction of exotic arboviruses in naive areas where the mosquito vector is present, enhancing MBDs outbreaks. The outbreaks of MBDs, especially those caused by arbovirus like Dengue virus, Zika virus (ZIKV), Rift Valley fever virus (RVFV) or West Nile virus (WNV), have severe consequences for public and/or veterinary health. The economic losses linked to the zoonotic MBDs can severely compromise the economy of the affected country. This is particularly relevant in the developing countries, where diseases such as Rift Valley fever can provoke the death of a huge number of domestic and wild animals. For these reasons a deep knowledge of which mosquito species are present in a country and which of them are competent vectors of different pathogen agents is needed in order to set up appropriate surveillance programs and entomological control strategies. The present thesis is divided in three parts and each one is further divided in chapters. The first part consists of two sections: Chapter 1- General Introduction and Chapter 2- Objectives. The aim of this first part is to give a general overview on the importance of MBDs, the role of the vectors and the concept of vector competence. The descriptions of WNV and RVFV are also provided. Afterwards, the objectives of the thesis are exposed. So far, the population dynamics and the genetic structure of invasive Aedes albopictus, the Asian tiger mosquito, were unknown in Spain. Moreover, no studies on the vector competence of Spanish populations of Culex pipiens and Ae. albopictus for zoonotic arboviruses (WNV and RVFV) have been performed until now. The aim of the present thesis is to clarify all these points. The second part is formed by three chapters. Each of them is an original study aimed to answer the objectives. In the first study (Chapter 3), the genetic structure of Ae. albopictus in Spain has been analyzed with the use of different genetic tools. Based on the results obtained, two different hypotheses have been postulated to explain the introduction and the spread of this species across the country. Moreover, a global analysis about the worldwide spread of Ae. albopictus has been performed. The results of both analyses confirmed the importance of human activities for the local and global dispersion of Ae. albopictus. The second and third studies (Chapter 4 and Chapter 5, respectively), demonstrated how Spanish Cx. pipiens and Ae. albopictus are competent vectors for WNV and RVFV. In both studies the importance of using variable cycling temperature during the extrinsic period of incubation have been verified. The results suggested that variable cycling temperature allows to estimate a more realistic vector competence. Moreover, different approaches have been used for the detection of viral particles in the saliva of infected mosquitoes. The third includes Chapter 6- General discussion and Chapter 7- Conclusions. In this part all the findings are discussed, further studies are proposed and the major conclusions are detailed. At the end of each chapter all the references used are listed.