Rôle de l'environnement inflammatoire dans l'immunogénicité du facteur VIII thérapeutique chez les patients hémophiles A

L’hemophilie A est une maladie hemorragique rare liee au chromosome X qui se traduit par un deficit en facteur VIII (FVIII) fonctionnel. Chez les patients atteints de la forme severe de l’hemophilie A, l’apparition d’hemorragies incontrolees augmente la morbidite et affecte leur qualite de vie. Le traitement de choix permettant de prevenir ou de traiter les saignements consiste en l’injection intraveineuse de FVIII therapeutique. Cependant, chez 5 a 30% des patients, une reponse immunitaire dirigee contre le FVIII se developpe. La reponse anti-FVIII est caracterisee par l’apparition d’anticorps qui inhibent l’activite pro-coagulante du FVIII. Ainsi l’apparition de ces anticorps, appeles « inhibiteurs » represente-t-elle la complication majeure du traitement des patients hemophiles A. Plusieurs facteurs de risque ont ete suggeres ou proposes comme affectant le developpement de la reponse anti-FVIII. Parmi eux, supporte par la theorie du « danger », la presence de mediateurs pro-inflammatoires generes par les episodes de saignement est consideree comme adjuvant dans la reponse immunitaire anti-FVIII. Cependant, les saignements induisent de nombreux mecanismes pro mais aussi anti-inflammatoires. Ainsi, l’activation de l’endothelium vasculaire induit-elle le recrutement et l’activation des cellules effectrices appartenant aux compartiments innes et adaptatifs du systeme immunitaire. Au cours de ma these, je me suis concentre sur le role des saignements dans le developpement de la reponse immunitaire dirigee contre le FVIII. Ainsi, ai-je decouvert une association entre la presence d’un polymorphisme dans un gene induit par les saignements et la presence d’inhibiteurs du FVIII dans une cohorte de patients hemophiles A severes. J’ai egalement etudie le developpement de la reponse immunitaire dirigee contre le FVIII therapeutique dans un modele murin qui mime les saignements locaux observes chez les patients hemophiles A severes. Finalement, j’ai caracterise l’effet des formes reactives de l’oxygene (FRO), qui sont generees au niveau du site de saignement, sur la structure, la fonction et l’immunogenicite du FVIII. Les resultats obtenus au cours de ma these demontrent que les saignements ne sont pas associes a un risque plus eleve de developper des inhibiteurs dans le modele murin largement utilise d’hemophilie A severe, contrairement a ce qui est communement admis. De plus, j’ai demontre une association entre un polymorphisme present dans le promoteur du gene HMOX1 et la survenue d’inhibiteurs dans une cohorte de patients atteints d’hemophilie A severe. En parallele, je decris pour la premiere fois une alteration du statut oxydatif chez les souris deficientes en FVIII et je demontre que le controle du statut oxydatif in vivo permet de moduler la reponse immunitaire anti-FVIII. Au contraire, l’exposition du FVIII aux FRO augmente son immunogenicite. De fait, mes resultats suggerent que, bien que les molecules pro-inflammatoires liberees suite aux saignements puissent affecter positivement la reponse immunitaire dirigee contre le FVIII, de puissants mediateurs anti-inflammatoires sont generes in vivo et amenuisent l’effet potentiellement adjuvant des saignements. Egalement, ces resultats soulignent la balance complexe entre les mediateurs pro- et anti-inflammatoires qui sont generes consecutivement aux saignements ainsi que leurs effets sur la reponse immunitaire dirigee contre le FVIII therapeutique.