Biomarqueurs prédictifs de la réponse aux traitements par thérapies ciblées dans le cancer du sein

Le cancer du sein est le cancer le plus frequemment diagnostique chez la femme et constitue un veritable probleme de sante publique. Les progres de la biologie moleculaire ont permis la caracterisation des principales voies de signalisation et ont mis en evidence l'implication majeure de la signalisation cellulaire dans les processus de cancerogenese. Des cibles moleculaires ont ainsi ete identifiees et ont permis le developpement de therapeutiques dites ciblees, telles que les anticorps monoclonaux ou encore les inhibiteurs de kinase. Malgre ces avancees considerables qui ont permis l'amelioration de la prise en charge des patientes, on constate l'apparition de resistances aux traitements. Ce travail avait pour objectifs d'identifier de nouveaux biomarqueurs et de determiner leur signification clinique, leur interet theranostique ainsi que leur impact sur la reponse aux traitements. Dans un premier temps nous avons etudie les mutations activatrices du gene PIK3CA. Ces mutations sont retrouvees dans 25% des cancers du sein et sont impliquees dans la resistance au trastuzumab, aux anti-œstrogenes et aux inhibiteurs de mTOR. 149 echantillons de tumeurs de sein infiltrantes ont ete analyses par une technique de PCR-HRM (High Resolution Melting) et 118 echantillons par une technique de PCR-ARMS (Amplification Refractory Mutation System). Les resultats des 2 techniques etaient concordants (k=0,845 ; p<0,001) et une relation entre mutations du gene PIK3CA et grade SBR a ete mise en evidence, les tumeurs de grade SBR III etant moins frequemment mutees que les autres (p=0.025 en HRM et p=0.009 en ARMS). Dans un second temps, notre travail a consiste en l'exploration fonctionnelle des voies de signalisation PI3K/AKT/mTOR, RAS/RAF/MAPKinases et P38MAPKinase. Pour cela nous avons analyse le niveau d'expression des phosphoproteines p-AKT, p-GSK3s, p-S6 kinase, p-MEK1, p-ERK1/2, p-P90RSK, p-IGF1R ainsi que p-P38MAPK par immuno-analyse multiplexe. Cette partie a comporte 3 etudes. Une premiere etude retrospective sur 45 echantillons de tumeurs mammaires invasives congelees a mis en evidence des niveaux d'expression de P38 et de p-P38 plus eleves dans les tumeurs RE+. La deuxieme etude etait une etude prospective visant a determiner des biomarqueurs de reponse a l'association trastuzumab-everolimus chez des patientes presentant un cancer du sein precoce traitees en preoperatoire. Cette etude a revele une augmentation statistiquement significative du niveau d'expression de p-MEK1 (p=0.012), p-ERK1/2 (p=0.003) et p-P38MAPK (p<0.001) dans le bras de traitement associant l'everolimus au trastuzumab qui pourrait s'expliquer par la suppression par l'everolimus d’une boucle de retrocontrole negatif controlant l'activation de la voie RAS/RAF/MAPKinases. Dans le bras de traitement evaluant le trastuzumab seul, aucune variation du niveau d'expression des phosphoproteines n'a ete mise en evidence, y compris en aval du recepteur HER2, ce qui souleve l'hypothese d'un mecanisme d'action predominant immunologique du trastuzumab. La troisieme etude qui comparait l'impact du trastuzumab in vitro et en situation clinique confirme la difference des mecanismes d'action mis en jeu en fonction des conditions cellulaires et cliniques. Dans son ensemble, ce travail a mis en evidence que la determination du statut mutationnel du gene PIK3CA et du niveau d’expression des phosphoproteines pourrait etre utile a une meilleure caracterisation moleculaire des cancers du sein et a l’optimisation de la personnalisation des prescriptions de therapies ciblees