Selective EP2 agonism attenuates hdm-induced murine airway pathology and mast cell activity, and triggers intracellular inhibitory signaling in mast cells

L'asma al lergica es una malaltia respiratoria cronica amb una alta prevalenca en els paisos desenvolupats. Els tractaments actuals no aturen el proces al lergic subjacent ni aconsegueixen el control dels simptomes de la malaltia. El tractament mes eficac es l'us de corticoesteroids, que es basen en modificacions quimiques de potents hormones endogenes antiinflamatories. L'estudi de vies antiinflamatories endogenes es una estrategia experimental eficac per descobrir noves dianes terapeutiques potencials contra l'asma. Una d'aquestes vies endogenes es la de la ciclooxigenasa (COX). Prostaglandina (PG) PGE2, un producte de la COX, s'ha suggerit que exerceixen un efecte protector en els pulmons. En particular, els estudis experimentals en pacients amb asma van revelar que la PGE2 inhalada redueix la hiperreactivitat bronquial i la inflamacio. Aquest efecte de proteccio de la PGE2 tambe s'ha demostrat, directament i indirectament, en ratolins sensibilitzats amb OVA o HDM. Els mecanismes subjacents als efectes beneficiosos de la PGE2 en l'asma no es coneixen. Una de les caracteristiques mes constants de la PGE2 es la seva capacitat de modular l’activitat dels mastocits in vitro. Els nostres darrers estudis in vivo van mostrar que la PGE2 tambe inhibeix l’activitat dels mastocits en ratolins sensibilitzats a HDM i que aquest efecte modulador sobre els mastocits es paral lel a la sobreexpressio del receptor EP2. D’aquests resultats sorgeix la hipotesi que la PGE2 podria interactuar amb els receptors EP2 dels mastocits de la superficie bronquials i aixi exercir una accio protectora enfront la patologia impulsada pels al lergens en contactar amb les vies respiratories. El coneixement precis d’aquests mecanismes sens dubte ajudara a descobrir potencials molecules diana contra l'asma. L'objectiu general d'aquesta tesi es establir preclinicament la rellevanca del receptor EP2 mastocitari en l’efecte beneficios de la PGE2 en l'asma al lergica, i descobrir els mecanismes moleculars que resulten d’aquesta activacio selectiva del receptor. Per aconseguir aquest objectiu hem dut a terme diversos abordatges in vitro i in vivo. En primer lloc, determinar el patro d’expressio dels receptors EP de la PGE2 en diferents poblacions de mastocits humans i murins, i es va avaluar a partir de llavors (a) si aquestes diferencies en l’expressio relativa dels receptors de EP 1-4 influia en la capacitat de PGE2 per modular la degranulacio dels mastocits i la mobilitzacio del calci i (b) si els mastocits humans es van comportar de manera similar als murins en diferents escenaris d'expressio dels receptors EP. Els resultats van apuntar a EP2 com el principal contribuent a l’efecte inhibitori de la PGE2 sobre els mastocits murins i humans. Quan EP2 es va suggerir com a el receptor primari de proteccio, vam abordar la importancia de l’activacio selectiva d’EP2 (a) en la proteccio de la patologia de les vies respiratories induida per HDM en ratolins, i (b) la correlacio d’aquesta patologia amb la capacitat de l’agonista selectiu EP2 en prevenir l’activitat de mastocits in vivo. Hem demostrat que un agonista selectiu d’EP2 impedia el desenvolupament de l’AHR i la inflamacio, i que aquest efecte estava relacionat amb la capacitat d'aquesta accio de l’agonista selectiu per atenuar l’activitat dels mastocits de les vies respiratories. A continuacio, es van estudiar possibles mecanismes inhibitoris de senyalitzacio implicats en aquest efecte de bloqueig intervingut per EP2. Hem observat que l’agonisme d’EP2 inhibeix in vivo i in vitro, l'activitat dels mastocits. Hem descrit que la interaccio amb PGE2-EP2 inhibeix la degranulacio mastocitaria a traves de la supressio de la mobilitzacio de calci intervinguda per la inhibicio de la via Src-Fyn, i cAMP/PKA. Les nostres observacions ressalten que l’eix "la PGE2" - "l’EP2 mastocitari" - "les vies respiratories" es una via endogena que condueix a una proteccio natural contra la patologia de les vies respiratories induida pels aeroal lergens i ajuda a dilucidar els mecanismes precisos que descobreixen molecules diana objectiu de possibles nous tractaments antiasmatics.