Efeitos anti-hiperalgésico e anti-inflamatório da Kielmeyera rugosa Choisy (Clusiaceae) em roedores

Diversas plantas do genero Kielmeyera, familia Clusiaceae sao utilizadas pela populacao do Nordeste brasileiro na medicina tradicional para o tratamento de diversas doencas, incluindo disturbios dolorosos e inflamatorios. Um estudo recente demonstrou atividade antitumoral para a K. rugosa, no entanto, outras atividades farmacologicas nunca foram estudadas para esta especie vegetal, por exemplo seu possivel perfil analgesico e anti-inflamatorio. Dessa forma, o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito antihiperalgesico e anti-inflamatorio do extrato metanolico obtido do caule de K. rugosa (EMKR) em roedores. Foram utilizados camundongos Swiss machos (25-35 g), divididos em grupos e submetidos ao tratamento agudo com EMKR (100, 200 e 400 mg/kg; por via oral, v.o.), veiculo (solucao salina 0,9% + tween 80 0,2%; v.o.) ou droga padrao (i.p.). A hipernocicepcao foi avaliada nos tempos 0,5, 1, 2 e 3 h apos a administracao (i.pl.) de carragenina (CG; 300 μg/pata), Fator de necrose tumoral-α (TNF-α; 100 pg/pata), Prostaglandina E2 (PGE2; 100ƞg/pata) ou Dopamina (DA; 30 μg/pata), e foram avaliados utilizando-se o analgesimetro digital (Von Frey). Na avaliacao da atividade anti-inflamatoria foram utilizados dois protocolos, o primeiro de pleurisia induzida por CG (300 μg/cavidade), no qual apos 4 horas foram realizadas as contagens total e diferencial de leucocitos, bem como as dosagens dos niveis de TNF-α e IL-1β do lavado pleural. Em outro protocolo realizado para investigar a atividade anti-inflamatoria correspondeu ao edema de pata induzida por CG (1%/40μL); o volume da pata foi medido com auxilio do pletismometro nos tempos 0-6h apos a CG. A citotoxicidade do MEKR foi avaliada atraves do metodo colorimetrico do MTT. Para determinar o possivel envolvimento de areas do Sistema Nervoso Central (SNC), os animais foram tratados e, noventa minutos apos, foram anestesiados, perfundidos, os cerebros extraidos e cortados em criostato. As seccoes cerebrais foram submetidas ao protocolo de imunofluorescencia para proteina Fos. A coordenacao motora do animal foi avaliada atraves do teste do Rota Rod (7 rpm, 180 s). Os protocolos experimentais foram aprovados pelo comite de etica da UFS (CEPA/UFS: 102/11) Os resultados foram expressos como media ± erro padrao da media. As diferencas entre os grupos foram analisadas por meio do teste de variância ANOVA, uma via, seguido pelo teste de Tukey. O pre-tratamento com EMKR inibiu significativamente a hiperalgesia induzida pelos agentes algicos, CG, TNF-α, PGE2 e DA (p < 0,001). O EMKR tambem foi capaz de inibir o recrutamento leucocitario para a cavidade pleural (p < 0,01). Esta inibicao leucocitaria ocorreu devido a inibicao na migracao dos neutrofilos. Os niveis das citocinas, TNF-α (p < 0,01) e IL-1β (p < 0,001) tambem foram reduzidos quando os animais foram tratados com EMKR. Quanto ao edema, o EMKR diminuiu a formacao induzida pela CG (p < 0,001). No entanto, o MEKR nao apresentou efeito citotoxico ou alteracao da coordenacao motora dos animais. No teste de imunofluorescencia para proteina Fos, o tratamento com MEKR ativou significativamente o bulbo olfatorio (p < 0,01), cortex piriforme (p < 0,01) e a substância cinzenta periaquedutal (p < 0,001), areas do SNC. Os resultados sugerem que o MEKR possui atividade antihiperalgesica e anti-inflamatoria provavelmente por ativacao de areas do sistema nervoso central relacionadas com a modulacao da dor e por reduzir a producao de citocinas pro-inflamatorias, sem tracos de citotoxicidade.