Niveles de interleuquina 17 en sangre periférica en pacientes con Esclerosis Sistémica. Primera descripción en población Colombiana
Autor: Casallas Osorio, José Alex
Asesor: Castellanos Lorduy, Héctor José (Thesis advisor)
Fecha: 2017
Programa: Bogotá - Medicina - Especialidad en Anestesiología y Reanimación
Facultad: Facultad de Medicina

Resumen: La esclerosis sistémica o esclerodermia es una enfermedad caracterizada por la disfunción y daño micro vascular, autoinmunidad y fibrosis. Se encuentra producción y depósito descontrolado de colágeno y otras proteínas en la matriz extracelular por parte de los fibroblastos que se encuentran en la piel, los pulmones, el corazón, el tracto gastrointestinal y muchos otros órganos. La acumulación progresiva del colágeno termina afectando la arquitectura y función del tejido. Aunque se acepta el papel de la disfunción inmune en la patogénesis de la esclerosis sistémica, las vías exactas que la causan no se han descubierto. En los últimos años varios investigadores han documentado un mayor número de células con inmunoexpresión de IL-17+ en sangre periférica, en lavado broncoalveolar y en la piel de pacientes con esclerodermia. Lo anterior sugiere que esta citoquina está involucrada en la vía de alteración de la fibrosis en piel y otros órganos, y puede representar una diana terapéutica inmune promisoria. En la actualidad ya existen terapias con diana en esta interleuquina. Conocer los hallazgos del perfil de expresión en nuestra población puede orientar a la realización de nuevas investigaciones no solo descriptivas sino de intervención. Objetivo: Es nuestro objetivo determinar los niveles de IL17 en sangre periférica, en un grupo de pacientes adultos con esclerosis sistémica y si se correlaciona con los siguientes resultados clínicos: mRSS (modified Rodnan skin score), puntuación de la condición de Raynaud, capacidad vital forzada, creatinina sérica, presión arterial, tipo de esclerodermia, tiempo de evolución, alteración de órganos internos y patrón de capilaroscopia. Metodología: Es un estudio observacional, transversal y descriptivo. La población objeto de estudio son pacientes con diagnóstico de esclerosis sistémica que asisten a consulta externa de reumatología del Hospital Simón Bolívar, atendidos por el grupo de reumatólogos de la Universidad Nacional dentro del convenio docente asistencial vigente. El tipo de muestreo es por conveniencia con el objetivo de recolectar a todos los pacientes que asisten con este diagnóstico y que acepten ingresar al estudio dentro el cronograma. Resultados esperados: Mediante el presente estudio se espera disponer de información local y en población colombiana de los niveles de IL-17 en pacientes con esclerosis sistémica y si existe correlación con resultados clínicos validados en SSc. Los resultados del estudio serán publicados como investigación original y producto en revista de la especialidad. Obtener los requisitos para trabajo de grado en la especialidad de reumatología. Aspectos éticos: El presente estudio cumple con los requisitos para la investigación en humanos según la resolución 8430 de 1993 del Ministerio de Salud. Según el artículo 11 se pueden identificar en la categoría de RIESGO MÍNIMO. Se adjunta copia del consentimiento informado.

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Niveles de interleuquina 17 en sangre
periférica en pacientes con
Esclerosis Sistémica. Primera
descripción en población Colombiana
José Alex Casallas Osorio
Universidad Nacional de Colombia
Facultad de Medicina, Departamento de Medicina Interna
Bogotá, Colombia
20172
Niveles de interleuquina 17 en sangre
periférica en pacientes con Esclerosis
Sistémica. Primera descripción en
población Colombiana
José Alex Casallas Osorio
Trabajo de investigación presentado como requisito parcial para optar al título de:
Especialista en Reumatología
Director:
Federico Rondón Herrera
Codirector:
Hector José Castellanos Lorduy
Línea de Investigación:
Línea de Investigación: Esclerosis sistémica - Reumatología
Grupo de Investigación:
BIOLOGÍA CELULAR Y AUTOINMUNIDAD. Código Colciencias: COL0157942
Universidad Nacional de Colombia
Facultad de Medicina, Departamento de Medicina Interna
Bogotá, Colombia
20173
RESUMEN
La esclerosis sistémica o esclerodermia es una enfermedad caracterizada por la disfunción
y daño micro vascular, autoinmunidad y fibrosis. Se encuentra producción y depósito
descontrolado de colágeno y otras proteínas en la matriz extracelular por parte de los
fibroblastos que se encuentran en la piel, los pulmones, el corazón, el tracto gastrointestinal
y muchos otros órganos. La acumulación progresiva del colágeno termina afectando la
arquitectura y función del tejido. Aunque se acepta el papel de la disfunción inmune en la
patogénesis de la esclerosis sistémica, las vías exactas que la causan no se han
descubierto. En los últimos años varios investigadores han documentado un mayor número
de células con inmunoexpresión de IL-17+ en sangre periférica, en lavado broncoalveolar y
en la piel de pacientes con esclerodermia. Lo anterior sugiere que esta citoquina está
involucrada en la vía de alteración de la fibrosis en piel y otros órganos, y puede representar
una diana terapéutica inmune promisoria. En la actualidad ya existen terapias con diana en
esta interleuquina. Conocer los hallazgos del perfil de expresión en nuestra población puede
orientar a la realización de nuevas investigaciones no solo descriptivas sino de intervención.
Objetivo:
Es nuestro objetivo determinar los niveles de IL17 en sangre periférica, en un grupo de
pacientes adultos con esclerosis sistémica y si se correlaciona con los siguientes resultados
clínicos: mRSS (modified Rodnan skin score), puntuación de la condición de Raynaud,
capacidad vital forzada, creatinina sérica, presión arterial, tipo de esclerodermia, tiempo de
evolución, alteración de órganos internos y patrón de capilaroscopia.
Metodología:
Es un estudio observacional, transversal y descriptivo. La población objeto de estudio son
pacientes con diagnóstico de esclerosis sistémica que asisten a consulta externa de
reumatología del Hospital Simón Bolívar, atendidos por el grupo de reumatólogos de la
Universidad Nacional dentro del convenio docente asistencial vigente. El tipo de muestreo
es por conveniencia con el objetivo de recolectar a todos los pacientes que asisten con este
diagnóstico y que acepten ingresar al estudio dentro el cronograma.
Resultados esperados:
Mediante el presente estudio se espera disponer de información local y en población
colombiana de los niveles de IL-17 en pacientes con esclerosis sistémica y si existe
correlación con resultados clínicos validados en SSc. Los resultados del estudio serán
publicados como investigación original y producto en revista de la especialidad. Obtener los
requisitos para trabajo de grado en la especialidad de reumatología.
Aspectos éticos:
El presente estudio cumple con los requisitos para la investigación en humanos según la
resolución 8430 de 1993 del Ministerio de Salud. Según el artículo 11 se pueden identificar
en la categoría de RIESGO MÍNIMO. Se adjunta copia del consentimiento informado.
PALABRAS CLAVE
Linfocito T, Interleuquina 17, Th17, esclerosis sistémica, Raynaud4
ABSTRACT
Systemic sclerosis or scleroderma, is characterized by microvascular dysfunction,
autoimmunity and fibrosis. There is uncontrolled production and deposition of collagen and
other proteins in the extracellular matrix by fibroblasts in the skin, lungs, heart,
gastrointestinal tract and other organs. The progressive accumulation of collagen ends up
affecting the architecture and function of the tissue. Although the role of immune dysfunction
in the pathogenesis of systemic sclerosis is accepted, the exact pathways that cause it have
not been discovered. In recent years several investigators have documented a larger
number of cells with IL-17 + immunoexpression in peripheral blood, bronchoalveolar lavage
and the skin of patients with scleroderma. This suggests that IL-17 is involved in
physiopathology and may represent a promising therapeutic target. Today, there are
targeted therapies for IL-17. Knowing the findings of this expression profile in our population
can guide the realization of new investigations in this field.
KEYWORDS
Lymphocyte T, Interleukin 17, Th17, systemic sclerosis, Raynaud.5
.
CONTENIDO
RESUMEN ............................................................................................................................ 3
Objetivo: ............................................................................................................................ 3
Metodología: ..................................................................................................................... 3
Resultados esperados: ..................................................................................................... 3
Aspectos éticos: ................................................................................................................ 3
PALABRAS CLAVE .............................................................................................................. 3
ABSTRACT ........................................................................................................................... 4
KEYWORDS ......................................................................................................................... 4
MARCO TEÓRICO ............................................................................................................... 6
Fibrosis: ............................................................................................................................. 6
Alteración vascular: ........................................................................................................... 6
Autoinmunidad: ................................................................................................................. 7
Linfocito T en la esclerosis sistémica: ........................................................................... 7
Interleuquina 17 no es lo mismo que Th17 ................................................................... 8
Interleuquina 17 en esclerosis sistémica .......................................................................... 8
Terapias disponibles sobre IL-17A: ................................................................................... 9
Criterios y resultados en esclerosis sistémica .................................................................. 9
OBJETIVO GENERAL ........................................................................................................ 11
JUSTIFICACIÓN y planteamiento de problema ................................................................ 12
APROXIMACIÓN METODOLÓGICA ................................................................................. 13
RESULTADOS ESPERADOS ............................................................................................ 16
ASPECTOS ÉTICOS .......................................................................................................... 17
CRONOGRAMA: ................................................................................................................ 18
PRESUPUESTO ................................................................................................................. 19
REFERENCIAS BILIOGRÁFICAS: ..................................................................................... 206
MARCO TEÓRICO
La esclerosis sistémica (SSc) es una enfermedad autoinmune compleja, heterogénea e
incurable. Se caracteriza principalmente por fibrosis de órganos, cambios vasculares y auto
inmunidad (Diagrama 1). Su presentación clínica es heterogénea pero suele manifestarse
con esclerodermia, fenómeno de Raynaud, fibrosis pulmonar, hipertensión pulmonar,
compromiso cardiaco, compromiso osteomuscular y gastrointestinal (1). Por consenso de
expertos y de acuerdo con las características clínicas (localización del engrosamiento de la
piel) y su historia natural, la SSc se ha dividido en afectación cutánea limitada (limited
cutaneous Systemic Sclerosis – lcSSc) y afectación cutánea difusa (diffuse cutaneous
Systemic Sclerosis - dcSSc) (2, 3). El compromiso pulmonar es actualmente la principal
causa de mortalidad en estos pacientes, secundario a falla respiratoria relacionada con
neumonía intersticial (35%) e hipertensión pulmonar (26%) (4).
Diagrama 1. Resumen de los eventos fisiopatológicos que presentan los pacientes con esclerosis
sistémica: autoinmunidad, alteraciones vasculares y fibrosis (modificado de (5)).
Fibrosis:
La fibrosis es el hallazgo patológico y clínico cardinal, dada por la producción y depósito
descontrolado de colágeno (principalmente colágeno tipo I y III) y otras proteínas en la
matriz extracelular por parte de los fibroblastos tisulares, y reducción en su degradación,
que luego de un tiempo termina en disfunción de los fibroblastos, células musculares lisas
y células del estroma. El tejido conectivo normal es reemplazado gradualmente por
abundante matriz extracelular, lo que lleva a la disfunción de los órganos afectados y
causando cambios patológicos. Los fibroblastos y las células musculares lisas vasculares
se pueden convertir en miofibroblastos que no solo pueden producir colágeno, sino factor
de crecimiento transformante b (TGF-b), factor de crecimiento del tejido conectivo (CTGF),
interleuquina 6 (IL-6), Endotelina 1 (ET-1), y otros quimio tácticos, que pueden promover la
proliferación celular y reducir la apoptosis (6, 7). En particular, se encuentran fibroblastos
con aumento en expresión de mARN procolágeno I y III en las zonas adyacentes a las
células infiltrantes mononucleares, lo que sugiere que las células inflamatorias, en particular
las células T, son responsables de la alteración funcional de los fibroblastos (8).
Alteración vascular:
En la patogénesis del daño vascular, la inflamación crónica juega un papel en el
envejecimiento y daño de la célula endotelial, pero se sabe poco acerca de los eventos o
mecanismos que inician la lesión vascular, impiden su reparación y conducen a la pérdida
de la angiogénesis. La desregulación vascular se produce en la etapa más temprana de la7
enfermedad y existe a lo largo de la enfermedad. En las primeras etapas de la
esclerodermia, las células endoteliales se activan y las moléculas de adhesión expresadas
sobre la célula endotelial promueven la infiltración perivascular de células inflamatorias, que
en última instancia conduce a la disfunción endotelial y la apoptosis. Las primeras etapas
de la esclerosis sistémica se caracterizan por una respuesta angiogénica exagerada,
seguido más tarde por fibrosis. Las células endoteliales activadas liberan ET-1, un potente
vasoconstrictor que promueve la adhesión de leucocitos, la proliferación de células del
músculo liso vascular y activación de fibroblastos (9, 10). La reactividad vascular anormal
asociada con fibrosis estructural de los vasos sanguíneos, resulta en hipoxia, reducción del
flujo capilar, hiperplasia de la íntima y fibrosis de la membrana externa. Estas se
corresponden con las manifestaciones clínicas, tales como el fenómeno de Raynaud, las
úlceras digitales, la hipertensión pulmonar y la crisis renal hipertensiva (11, 12)
Autoinmunidad:
Casi todas las personas con esclerosis sistémica tienen anticuerpos circulantes detectables
contra proteínas nucleares, sin embargo, en la mayoría de los casos los anticuerpos
reconocidos no son directamente los causantes de la enfermedad (1). Hoy en día es más
aceptado que la patogénesis de la esclerosis sistémica puede ser descrita por la teoría de
una anormalidad autoinmune, que puede vincular la vasculopatía y la fibrosis. Se observan
anormalidades de la inmunidad innata y adaptativa en los pacientes con esclerosis
sistémica, y las células inmunes pueden desencadenar los cambios moleculares y
bioquímicos complejos que se producen en la vasculopatía y la fibrosis; sin embargo, los
detalles de los mecanismos subyacentes aún no se han descubierto. Múltiples estudios han
proporcionado evidencia directa de que la inmunidad está implicada en la patogénesis de
la esclerosis sistémica. Las alteraciones de la inmunidad celular se han tipificado por la
presencia de células T aberrantes en los tejidos, así como en la sangre periférica de los
pacientes con esclerosis sistémica (5, 13).
Linfocito T en la esclerosis sistémica:
La infiltración de células T CD4 + es significativamente mayor en la piel y en la sangre
periférica de pacientes con esclerosis sistémica. La infiltración de células T es más evidente
en la fase de edema que en la etapa de endurecimiento. Las células T activadas pueden
estimular a los fibroblastos adyacentes a través de contacto directo célula-célula o a través
de citoquinas y quimioquinas. Además, las células T autorreactivas pueden interactuar con
las células B para promover la producción de autoanticuerpos característicos. Los
anticuerpos antinucleares están presentes en aproximadamente el 95% de los pacientes
con esclerosis sistémica y por lo general muestran patrón moteado o nucleolar (anti-
topoisomerasa-I, anticuerpos anti-centrómero y anti-RNA polimerasa III). La identificación
de los diferentes tipos de anticuerpos es importante para el diagnóstico, la clasificación y el
pronóstico de esclerosis sistémica, pero no hay evidencia definitiva de que tales anticuerpos
puedan promover la fibrosis o el daño en los tejidos. Por lo mencionado, las anomalías en
las células T pueden contribuir a la iniciación y o promoción de proceso patológico, que
conduce a la vasculopatía o fibrosis en pacientes con esclerosis sistémica (5). En la tabla
1 se resumen los diferentes subgrupos de células T CD4+ y la expresión de sus citoquinas
más importantes en la patogénesis de la esclerosis sistémica.
Célula CD4+ Citoquina icónica Expresión
Th1 IFN-g Disminuida
Th2 IL-4, IL-5, IL-13 Incrementada8
Th17 IL-17A, IL-17F Incrementada
Treg TGF-b, IL-10 Disminuida
Th9 IL-9 Increased Incrementada
Th22 IL-22 Incrementada
Tfh IL-21 No claro
Tabla 1. Células T CD4+ y su icónica expresión en esclerosis sistémica (5)
Interleuquina 17 no es lo mismo que Th17
La interleuquina 17 (conocida también como IL-17 o IL-17A o CTLA-8) fue aislada, clonada
y secuenciada a partir de los hibridomas murinos [cytotoxic T lymphocyte antigen 8 (CTLA-
8)] entre 1993 y 1996 (14-16), pero empezó a ser el centro de atención con el
reconocimiento desde 2003 de una tercera población de células T CD4+, conocida como
Th17, distinta de las clásicas Th1 y Th2, que produce IL-17A como citoquina insigne y que
responde potentemente a IL-23 (17-19). Se aclara entonces que la IL-17 no solo es
producida por Th17 sino también por células T γδ, citotóxicos, NK, neutrófilos, mastocitos y
monocitos (15). Las células Th17 no solo producen IL-17A sino IL17F, IL-21 e IL-22 (17,
19). La interleucina-17 tiene un papel importante en la protección del huésped frente a
patógenos extracelulares (hongos). La IL-17A y su receptor (IL-17RA) son los miembros
fundadores de una nueva subfamilia de citoquinas/receptores, pro inflamación, con
características estructurales únicas que los distinguen de otras subclases de citoquinas.
Interleuquina 17 en esclerosis sistémica
A continuación se hace un resumen de las descripciones hechas respecto a IL-17A/IL17RA
en la autoinmunidad y en específico en esclerosis sistémica:
Diagrama 2. Interacción de las células T CD4+ con las células endoteliales y las células musculares
lisas vasculares en esclerosis sistémica. Representación esquemática de la influencia de las células
T CD4+ diferenciadas y sus citoquinas insignia sobre las células endoteliales y musculo liso y sus
propiedades pro-inflamatorias y pro-fibrosis.9
• Las células Th17 modulan la inflamación y la autoinmunidad (13, 20, 21).
• Los estrógenos regulan las células Th17 y participan en la patogénesis de las
enfermedades autoinmunes (20).
• Ha surgido un posible vínculos entre la Sjogren, AR, LES, la esclerosis sistémica y
las células Th17 (20, 22, 23).
• Las células madre mesenquimales regulan las células Th17 de una manera dosis y
tiempo dependiente en la enfermedad inflamatoria/autoinmune (20).
• En particular, las células Th17 han sido implicadas en la patogénesis de la esclerosis
sistémica (24-27).
• Se ha encontrado un incremento en células Th17 produciendo IL-17 en sangre
periférica, piel y tejido pulmonar en pacientes con esclerosis sistémica (5, 28-30).
• Los niveles de IL-17A se encuentran elevados tanto en la etapa temprana como
activa de la esclerosis sistémica (5, 24, 26, 31, 32).
• Se ha encontrado que las células T CD4+ activadas que muestran alta expresión de
IL-23R se incrementan en pacientes con esclerosis sistémica, y se relaciona con IL-
17 (5, 20, 33).
• También se ha informado que los niveles de IL-6, IL-23 e IL-1 alfa están elevados
en pacientes con esclerosis sistémica, lo que puede inducir la producción de IL-17
(5).
• La IL-21 se secreta principalmente por las células T CD4+ activadas y por células
NK, lo que pueden potenciar la respuesta inflamatorias mediada por células Th17,
mediante la inducción de la expresión del receptor IL-23 y la inhibición de las células
Treg (5).
• La IL-21 también puede regular las respuestas de células Th1/Th2 y la producción
de inmunoglobulinas (5).
• Los estudios también han demostrado que las moléculas de adhesión, tales como
L-selectina e ICAM-1, pueden regular la infiltración de Th2 y Th17 en la piel y los
pulmones, lo que conduce a la fibrosis (5).
• Datos de modelos de fibrosis en murinos indican que las células Th17 tiene un rol
importante en el proceso patogénico de inflamación y fibrosis en piel y pulmón. La
IL-17A aumentó la proliferación de los fibroblastos y colágeno tipo I en cultivos.
Sugieren los autores que las células Th17 pueden ser dianas terapéuticas en
esclerosis sistémica y puede proporcionar nuevos conocimientos sobre la patogenia
de la esclerosis sistémica (34, 35).
Terapias disponibles sobre IL-17A:
Respecto a la disponibilidad de terapias dirigidas a Th17 o el eje IL-23 IL-17, existen
terapias dirigidas como ustekinumab, briakinumab, guselkumab, tildrakizumab,
secukinumab, brodalumab, ixekizumab (21, 36, 37), sin embargo a la fecha no existen
estudios de ningún tipo que hayan valorado el uso de estas terapias en pacientes con
esclerosis sistémica.
Criterios y resultados en esclerosis sistémica
El grupo de trabajo Outcome Measures in Rheumatology (OMERACT) fue creado con el
objetivo de identificar, estandarizar y validar herramientas de medida, así como definiciones
clínicas importantes para ser incluidas en ensayos clínicos sobre enfermedades
reumatológicas. Su método de trabajo consiste en aplicar el denominado "filtro OMERACT",
basado en los conceptos de: verdad, discriminación y viabilidad (38, 39). Los criterios de
clasificación y sub clasificación se utilizan para distinguir entre pacientes con o sin un tipo10
específico de enfermedad (diferenciar subgrupos de pacientes dentro de un grupo de la
enfermedad lcSSc dcSSc). Los criterios del estado de la enfermedad pueden separarse en
criterios de daño y criterios de actividad. El daño refleja lesiones irreversibles inducidas por
la propia enfermedad o por tratamiento. La actividad implica la reversibilidad potencial de
las lesiones. Los criterios pronósticos, incluidos los criterios de gravedad, están destinados
a separar a los sujetos con un posible resultado bueno o favorable de aquellos con
resultados pobres. Por último, los criterios de resultado pretenden medir el impacto global
de una enfermedad. (40)
Actualmente los resultados validados en SSc son mRSS (modified Rodnan skin score),
puntuación de la condición de Raynaud, capacidad vital forzada, cateterismo derecho,
creatinina sérica, CPK y presión arterial (41).11
OBJETIVO GENERAL
Determinar los niveles de IL17 en sangre periférica, en un grupo de pacientes adultos con
esclerosis sistémica.
OBJETIVO ESPECIFICO
Determinar si los niveles de IL17 en sangre periférica de pacientes con esclerosis sistémica
se correlacionan con los siguientes resultados clínicos: mRSS (modified Rodnan skin
score), puntuación de la condición de Raynaud, capacidad vital forzada, creatinina sérica,
presión arterial, tipo de esclerodermia, tiempo de evolución, alteración de órganos internos
y patrón de capilaroscopia. Estos resultados clínicos son los validados en esclerosis
sistémica por OMERACT.12
JUSTIFICACIÓN Y PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
La autoinmunidad, la alteración vascular y la fibrosis son las características demostradas
más relevantes en la esclerosis sistémica. El objetivo terapéutico está precisamente dirigido
a ellas, sin que al momento se cuente con una terapia efectiva. Se encuentra producción y
depósito descontrolado de proteínas en la matriz extracelular por parte de los fibroblastos
que se encuentran en la piel, los pulmones, el corazón, el tracto gastrointestinal y muchos
otros órganos. La acumulación progresiva del colágeno termina afectando la arquitectura y
función del tejido. Aunque se acepta el papel de la disfunción inmune en la patogénesis de
la esclerosis sistémica, las vías exactas que la causan no se han descubierto.
Las vías exactas de cómo se producen estas alteraciones fisiopatológicas, son
desconocidas. La identificación en los últimos años de un mayor número de células con
inmunoexpresión de IL-17R en sangre periférica, en lavado broncoalveolar y en la piel de
pacientes con esclerodermia, entre otros hallazgos, sugiere que esta citoquina está
involucrada en la vía de alteración de la fibrosis en piel y pulmón (y posiblemente otros
órganos), y puede representar no solo un elemento pronóstico sino una diana terapéutica
inmune promisoria. Existen 2 estudios destacados que han determinado los niveles de IL-
17 en pacientes con esclerosis sistémica ambos hechos en Japón (Murata 2008 n=59 (32)
y Kurasawa 2000 n=24 (28)). No existen estudios locales ni regionales explorando IL-17 en
pacientes con esclerosis sistémica. Conocer los hallazgos del perfil de expresión en nuestra
población permitirá generar una línea de base con datos locales para esta patología, los
cuales permitirán la realización de nuevas investigaciones no solo descriptivas sino de
intervención en este campo para así apoyar las actividades de esta línea de investigación
o de investigación de Reumatología de la Universidad Nacional que está adscrita al
programa de Medicina Interna de la Facultad de Medicina13
APROXIMACIÓN METODOLÓGICA
Tipo de estudio: Es un estudio observacional, descriptivo de corte transversal.
Población objeto: La población objeto de estudio son pacientes con diagnóstico de
esclerosis sistémica que asisten a consulta externa de reumatología del Hospital Simón
Bolívar, atendidos por el grupo de reumatólogos de la Universidad Nacional dentro del
convenio docente asistencial vigente.
Pregunta de investigación
¿En los pacientes con esclerosis sistémica se encuentra elevación de los niveles de
interleuquna 17 y si estos se correlacionan con desenlaces clínicos validados en
OMERACT?
Criterios de selección
- Criterios de inclusión: Pacientes que cumplan criterios de clasificación para
esclerosis sistémica ACR/EULAR 2013 o que tengan diagnóstico clínico de
esclerosis sistémica con edad igual o mayor a 15 años.
- Criterios de Exclusión: Pacientes con otras enfermedades autoinmunes o
síndromes superpuestos, pacientes menores de 15 años, pacientes que no
acepten participar en el estudio.
Tamaño de muestra: Se incluirán todos los pacientes que asistan a consulta con este
diagnóstico y que acepten participar en el estudio. El tipo de muestreo es por conveniencia
Definición de Variables:
Nombre de la Definición Tipo Unidad de medida
variable
Edad Tiempo en años desde Cuantitativa Años cumplidos
el nacimiento hasta
toma de la muestra
Sexo Sexo del paciente Cualitativa Femenino o masculino
Diagnóstico Fenotipo de Cualitativa Limitada, difusa, sin
clasificación de la esclerodermia
enfermedad14
mRSS Engrosamiento piel Cuantitativa 0 a 51 puntos posibles
medido por escala
modificada de Rodnan
Hipertensión Diagnostico adicional Cualitativa Presente o ausente
pulmonar del paciente
Fibrosis Diagnostico adicional Cualitativa Sin fibrosis, fibrosis menor a
pulmonar del paciente 20% o fibrosis mayor al 20%
Creatinina Niveles séricos de Cuantitativa Valor en sangre periférica
creatinina en mg/dl
Patron Hallazgo en Cualitativa Normal, temprano, activo y
capilaroscopia capilaroscopia de tardio
pliegue ungueal.
Raynaud Presencia de Cualitativa Presente o ausente
fenómeno de Raynaud
TAS Presión arterial Cuantitativa En mmHg
sistólica
TAD Presión arterial Cuantitativa En mmHg
diastólica
Procedimientos y recolección de datos
Se recolectaran pacientes de manera consecutiva de una consulta de reumatología
institucional, y que cumplan los criterios de clasificación para esclerosis sistémica
ACR/EULAR 2013. Se registran de estos pacientes las siguientes variables: Edad, sexo,
duración de la enfermedad, compromiso de órganos internos, ANAs, Anti SCL-70, patron
capilaroscopia, Rodnan modificado, tipo de compromiso: sine esclerodermia- cutáneo
difuso- cutáneo limitado, tratamientos, niveles de IL-17. A todos los pacientes se les
realizará historia clínica detallada, examen físico y registros de TCAR tórax,
ecocardiograma, DLCO2. Dentro de la valoración habitual de los pacientes en el sistema
de salud se realizan la mayoría de estos estudios, luego no se incluye su costo de los
mismos. Los niveles de IL-17 no están disponibles en el laboratorio y el sistema de salud
por lo cual este kit deberá ser adquirido para el desarrollo del proyecto.. El kit que se
empleará para el procesamiento de muestras es de Thermo Scientific™ Pierce™Human
IL-17A ELISA, (Sensibilidad: 5 pg / mL, Rango de curva estándar: 31.25 pg / mL - 2000 pg
/ mL, tipos de muestras: suero, plasma, sobrenadante de cultivo celular, especificidad: este
ELISA es específico para la medición de la IL17A humana natural y recombinante, volumen
de la muestra: 50 μL, tiempo de incubación del ensayo total: 3,5 horas) el cual fue
seleccionado por Angela Patricia Rojas, M.Sc, Dr Sc, quien hace parte del grupo de
investigación.Teniendo en cuenta los hallazgo de laboratorio que se obtengan de un primer
procesamiento, es posible que sea necesario confirmar por partida doble las muestras, esto
también dependerá del volumen total de suero con el que se cuente,
La toma de las muestras será realizada por una bacterióloga entrenada y con experiencia
en la venopunción de estos pacientes, esto bajo el conocimiento que los pacientes con
esclerosis sistémica el engrosamiento cutáneo representa una dificultad en la visualización
y punción de las venas periféricas. A todos los pacientes se les debe hacer el
consentimiento informado (detalle en aspectos éticos).15
El procesamiento de la muestra y obtención de resultados será realizado por Angela Patricia
Rojas, M.Sc, Dr Sc profesional capacitada y con amplia experiencia en el procesamiento de estas
muestras y se realizará cumpliendo con todos los estándares y normatividad vigente para
las fases pre analíticas y analíticas. Las muestras serán conservadas en biobanco ubicado
en la Universidad Nacional de Colombia. Todas las muestra y la información que sea
recolectada a partir del desarrollo de las actividades del proyecto quedarán bajo la custodia
del investigador principal y el subinvestigador. Para la referencia de los niveles séricos de
IL-17 esperados se utilizaran los resultados de la cohorte sana histórica proporcionada por
el fabricante del Scientific™ Pierce™Human IL-17A ELISA que informa que en población
sana no se detectan nivels de IL-17A. El procesamiento de las muestras será realizado en
laboratorio a cargo del grupo de investigación: BIOLOGÍA CELULAR Y AUTOINMUNIDAD.
Código Colciencias: COL0157942 avalado por la Universidad Nacional de Colombia.
Plan de análisis
Para describir las características sociodemográficas y cínicas de la muestra de participantes
se emplearán frecuencias absolutas y relativas cuando las variables sean cualitativas; en
el caso de variables cuantitativas se emplearán medidas de tendencia central y dispersión:
medias y desviaciones estándar o medianas y rangos intercuartílicos, dependiendo de la
distribución de los datos.16
RESULTADOS ESPERADOS
1. Disponer de información local y en población colombiana de los niveles de IL-17 en
pacientes con esclerosis sistémica y si existe correlación con resultados clínicos
validados en SSc.
2. Los resultados del estudio serán publicados como investigación original y producto
en revista de la especialidad.
3. Obtener los requisitos para trabajo de grado en la especialidad de reumatología.17
ASPECTOS ÉTICOS
En esta investigación prevalecerá para los pacientes el criterio de respeto a su dignidad y
la protección de sus derechos y su bienestar.
Se da cumplimiento a la RESOLUCION Nº 008430 DE 1993 (4 DE OCTUBRE DE 1993),
por la cual se establecen las normas científicas, técnicas y administrativas para la
investigación en salud. De acuerdo a artículo 11 esta investigación se considera:
“Investigación con riesgo mínimo: …extracción de sangre por punción venosa en adultos
en buen estado de salud, con frecuencia máxima de dos veces a la semana y volumen
máximo de 450 ml en dos meses”. Se aclara por petición de un revisor que esta es la cita
textual de la resolución pero al paciente máximo se le extraen 20 ml.
La participación de los individuos del estudio será completamente voluntaria, se solicitará
la firma del consentimiento informado donde se encuentra consignada entre otras, la
siguiente información:
Acá podría adicionar el manejo confidencia de la información, custodia de la base de datos
y de las muestras que se encuentren en el biobanco.18
CRONOGRAMA:
Fecha de inicio del Proyecto: 01 de Enero de 2017.
Fecha de terminación: 06 Julio de 2017.
Duración: 6 meses.
ACTIVIDAD Mes Duración
inicio (meses)
Recolección de pacientes y sus variables, firma de 1 5
consentimiento informado. Toma de muestra sangre
periférica.
Revisión de la base de datos y organización de la misma 5 5
Análisis Estadístico 6 1
Análisis de resultados 6 1
Redacción y propuesta de artículo de divulgación. 6 119
PRESUPUESTO
Nuevo y
Rubro Descripción del Rubro Costos ajustado (27-
Ener-2017
kits x380 pruebas para IL-17A, Insumos
para toma de muestras tubos para
química sanguínea, sistemas de
recolección, crioviales de 1.5ml, puntas
Materiales y desechables para micropipeta de todos
$ 15.000.000 $ 15.000.000
suministros los volúmenes, bastidores para
almacenamiento de muestras en el
biobanco,Base datos formato web con
seguridad óptima, mantenimiento del
biobanco
Para traducción de artículo científico,
Impresos y
producto del estudio, a someter a $ 1.000.000 $ 0
Publicaciones
publicación en revista internacional
Compra de
Lavador de placas de ELISA $ 1.200.000 $ 1.200.000
equipo
Bacterióloga para toma de
muestras y procesamiento de los
kits (pruebas), auxiliar para
ingreso de información a la base
Remuneración
por Servicios de datos, estadístico para análisis $ 7.800.000 $ 8.800.000
Técnicos de datos.
Persona con experiencia en la
Traducción de artículo científico
Total $ 25.000.000 $ 25.000.00020
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