Investigación y desarrollo del Bioasepsia a base de ácido hipocloroso en los procesos de desinfección
Autor: Cevallos Guerrero, Rosa Elvira
Asesor: Pérez Romero, Germán Enrique (Thesis advisor)
Fecha: 2014
Programa: Bogotá - Medicina - Especialidad en Anestesiología y Reanimación
Facultad: Facultad de Medicina

Resumen: Resumen: En el presente trabajo se realiza la investigación y el desarrollo sobre el Bioasepsia; un nuevo desinfectante producido en la empresa SPANGEL Productos Biodegradables, con principio activo a base de ácido hipocloroso (HCLO).   Nuestro cuerpo produce su propio ácido hipocloroso, como un sistema de defensa contra bacterias, gérmenes y agentes patógenos. Debido a la gran cantidad de infecciones que causan los microorganismos, es importante encontrar un buen desinfectante que sea eficaz y de amplio espectro, por esto al Bioasepsia se le realiza un análisis microbiológico utilizando cepas comerciales de bacterias y hongos, también se practican pruebas de demanda bilógica de oxígeno (DBO) y demanda química de oxígeno (DQO), para determinar su Biodegradabilidad en el medioambiente.   Según las pruebas realizadas en el laboratorio de Ingeniería Sanitaria de la Universidad Nacional de Colombia, sede Medellín, al determinar la DBO por el método Respirométrico, se obtuvo que la cantidad de oxigeno consumida por los microorganismos es cero, debido a que no hay presencia de materia orgánica ya qué estos son inhibidos automáticamente por la alta acción bactericida que presenta el Bioasepsia, y el valor de la DQO fue un valor muy pequeño de 8,5 mg/Lo2.Con estos análisis se procedió a evaluar la Biodegradabilidad en base a la relación DBO/BQO, los resultados obtenidos mostraron que el Bioasepsia, tiene una Biodegradabilidad de 0%,lo que significa que el desinfectante no permite el crecimiento de los microorganismos pues los mata instantáneamente, sabiendo que el principio activo del Bioasepsia es el ácido hipocloroso, este por acción de la luz o reductores se descompone fácilmente para liberar oxígeno molecular ,resaltando así que el producto es amigable con el medio ambiente debido a que se descompone instantáneamente.  Se visitó la funeraria San Juan Bautista, ubicada en la ciudad de Medellín con el fin de evaluar y valorar el porcentaje de desinfección en las áreas más contaminadas como: el féretro o ataúd donde va el cuerpo, la parte trasera del carro fúnebre ó planchón que permite la entrada del cuerpo y su transporte, como también la mesa de preparación del cuerpo en el laboratorio de tanatopraxia, obteniéndose que después de la aplicación del desinfectante se alcanzó un grado de desinfección mayor al 90%.(ver anexo 9)   En el presente estudio, se determina la actividad bactericida del Bioasepsia sobre 4 cepas bacterianas patógenas de referencia internacional ATCC (American Type Culture Colletion): Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella Typhimurium, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes y de 4 cepas de hongos Trichoderma, Penicillum, Fusarum y dermatofito , bajo la aplicación de la NTC 5150,NTC 2455 que son las normativas técnicas Colombianas, para la evaluación de desinfectantes; los análisis se realizan en condiciones controladas de temperatura, concentración del Bioasepsia (500ppm) y tiempos de acción de 5,10 y 15 minutos, alcanzando un porcentaje de inhibición del 99.9%.

INVESTIGACIÓN Y DESARROLLO DEL BIOASEPSIA A BASE DE ACIDO
HIPOCLOROSO EN LOS PROCESOS DE DESINFECCIÓN.
POR:
ROSA ELVIRA CEVALLOS GUERRERO
ESTUDIANTE DE INGENIERÍA QUÍMICA
MODALIDAD: PRACTICANTE COMO TDG
ASESOR: JAVIER DE LA CRUZ MORALES
DIRECTORA DE LA PRÁCTICA: ING. ÁNGELA MARÍA URIBE
UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE MINAS
INGENIERIA QUIMICA
MEDELLÍN, FEBRERO DE 2014“A veces, el replanteamiento de un problema es más decisivo que el
hallazgo de la solución, que puede ser un puro asunto de habilidad
matemática o experimental. La capacidad de suscitar nuevas
cuestiones, nuevas posibilidades de mirar viejos problemas, requiere
una imaginación creativa y determina los avances científicos auténticos.”
Albert Einstein.AGRADECIMIENTOS
¨”Cuando llegas a la cima de la montaña caes de rodillas, alzas tus manos,
elevas tu vista al infinito del firmamento y das gracias a Dios que te inspiro
subir. Luego conscientemente, regresas con la mirada hasta el valle, para
apreciar lo mucho que tuviste que superar para llegar hasta la cumbre.”
(Rosado, 2006).
Agradezco a Dios por darme su fuerza y fortaleza cada momento y cada instante de mi
vida.
Agradezco a mi Tutor, El profesor Javier de la cruz, por todo su tiempo invertido, sus
consejos y su ayuda, las cuales han hecho posible esta tesis.
A la ingeniera química, Ángela María Uribe y la Gerente María Esperanza Cifuentes de
SPANGEL productos biodegradables, por abrirme las puertas de su empresa para realizar
mi trabajo de grado.
A mi familia por todo su apoyo incondicional, y que siempre han estado conmigo en todo
momento.
Finalmente agradezco a mis amigos y a todas aquellas personas que de forma directa e
indirecta me animaron para la culminación del presente trabajoTABLA DE CONTENIDO
RESUMEN ........................................................................................................................................ 8
ABSTRAC .............................................................................................................................................. 9
INTRODUCCION ................................................................................................................................. 10
1. MARCO TEÓRICO ....................................................................................................................... 11
1.1 ¿Qué es el ácido hipocloroso? .......................................................................................... 11
1.2 Historia del ácido hipocloroso ........................................................................................... 11
1.3 Producción fisiológica del ácido hipocloroso ................................................................... 12
1.4 Producción química ........................................................................................................... 13
1.4.1 Hidrólisis del gas cloro ................................................................................................... 13
1.4.2 Acidificación de hipoclorito ........................................................................................................ 13
1.4.3 Electrolisis de solución de sal ..................................................................................................... 13
1.5 Características del ácido hipocloroso ................................................................................ 14
1.5.1 Capacidad de desinfección en función del valor del ph ....................................................... 15
1.5.2 Influencia de la temperatura ................................................................................................ 16
1.6 Usos del Ácido Hipocloroso ............................................................................................... 17
1.7 Conceptos y definiciones ....................................................................................................... 17
1.7.1 Limpieza ............................................................................................................................... 17
1.7.2 Desinfección ......................................................................................................................... 17
1.8 ¿Cómo escoger un Desinfectante?.......................................................................................... 18
1.8.1 Propiedades de un buen desinfectante .............................................................................. 18
1.9 Riesgos de infección ................................................................................................................ 19
1.9.1 Crítica: .................................................................................................................................. 19
1.9.2 Semicrítica ............................................................................................................................ 19
1.9.3 No crítica: ............................................................................................................................. 19
1.10 Categorización de los Desinfectantes según la EPA .............................................................. 19
1.10.1 Desinfectante limitado: ................................................................................................................ 19
1.10.2 Desinfectante de Hospital: ................................................................................................. 20
1.11 Mecanismos de acción de los antisépticos y desinfectantes ................................................ 20
........................................................................................................................................................... 20
........................................................................................................................................................... 201.11.1 Resistencia Microbiana a los desinfectantes .................................................................... 21
1.11.2 Resistencia intrínseca de las bacterias Gram Positivas ...................................................... 21
1.11.3 Resistencia intrínseca de las bacterias Gram Negativas .................................................... 21
1.11.4 Resistencia intrínseca de hongos ....................................................................................... 21
1.12 Mecanismos de acción de los agentes desinfectantes ......................................................... 22
1.13 Tipos de desinfectantes......................................................................................................... 23
1.14 Revisión de normatividad ...................................................................................................... 27
1.14.1 Decreto 3075 de 1997 ........................................................................................................ 27
1.14.2 Decreto 2676 de 2000 ........................................................................................................ 27
1.14.3 NTC 2455-NTC 5150 ...................................................................................................................... 27
2. FORMULACIÓN DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIÓN ................................................................... 28
3. OBJETIVOS ..................................................................................................................................... 29
3.1 Objetivo general ...................................................................................................................... 29
3.2 Objetivos específicos ............................................................................................................... 29
4. MATERIALES Y MÉTODOS .......................................................................................................... 30
4.1 Proceso de Electroactivación Química por Electrolisis de Diafragma ..................................... 30
4.1.1 Condiciones de operación .................................................................................................... 31
4.1.2 Medidas de seguridad .......................................................................................................... 31
4.1.3 Puesta en marcha ................................................................................................................. 32
4.1.4 Proceso de encendido .......................................................................................................... 32
4.1.5 Mantenimiento del equipo .................................................................................................. 33
4.2 Características del Proceso Productivo .................................................................................. 33
4.2.1 Protocolo de Limpieza y Lavado de Manos .......................................................................... 33
4.2.2 Elementos de Bioseguridad ................................................................................................. 34
4.2.4 Medida de pH y Alcalinidad.................................................................................................. 34
4.3 MÉTODOS ................................................................................................................................ 35
4.3.1 Lugar de Estudio ................................................................................................................... 35
4.4 Cepas ...................................................................................................................................... 35
4.4.1 Determinación de la Viabilidad ............................................................................................ 35
4.4.2 Estándar Macfarlán .............................................................................................................. 35
4.4.3 Determinación de la DBO ..................................................................................................... 36
4.4.3.1 Método utilizado.5220C (Respirométrico) ........................................................................ 364.4.4 Determinación de la DQO .................................................................................................... 37
4.4.4.1 Método utilizado.5220C .................................................................................................... 37
5. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................................................................ 38
5.1 Análisis de la DBO obtenida. .................................................................................................. 38
5.2 Análisis de la Biodegradabilidad .............................................................................................. 39
5.3 Recuentos viables ................................................................................................................... 40
5.4 Estándar Macfarlán aplicado en cepas ATCC Bacterianas. .................................................... 40
5.5 Estándar Macfarlán aplicado en cepas de Hongos. ................................................................ 41
6. CONCLUSIONES ............................................................................................................................. 42
7. RECOMENDACIONES ................................................................................................................. 43
8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ................................................................................................... 44
9. ANEXOS ................................................................................................................................. 49
Bibliografía de bacterias y hongos .................................................................................................... 58INDICE DE FIGURAS
FIGURA 1.ESTRUCTURA DEL ACIDO HIPOCLOROSO. FUENTE [3] ............................................................................... 11
FIGURA 2.MECANISMO NATURAL DE DEFENSA. FUENTE [6] .................................................................................... 12
FIGURA 3.PARED CELULAR DE LOS MICROORGANISMOS. FUENTE [9] ........................................................................ 14
FIGURA 4. REACCIÓN DE HCLO AFECTADO POR EL PH. FUENTE [11] ....................................................................... 15
FIGURA 5.VARIACION DE LA CONCENTRACIÓN HCLO EN FUNCIÓN DEL PH. FUENTE [11] ................................................... 16
FIGURA 6. CURVA DBO VS TIEMPO ................................................................................................................. 38
FIGURA 7.CURVA DE BIODEGRADABILIDAD DE EL BIOASEPSIA VS TIEMPO ............................................ 39
FIGURA 8.SOLUCIÓN PATRÓN DE MACFARLÁN CON EL BIOASEPSIA Y EL BLANCO ...................................................... 41
FIGURA 9.TRICHODERMA7 ................................................................................................................................... 54
FIGURA 10.PENICILLUM8 .................................................................................................................................... 54
FIGURA 11.FUSARIUM9 ....................................................................................................................................... 54
FIGURA 12.ESCHERICHIA COLI.2 .......................................................................................................................... 55
FIGURA 13. SALMONELLA TYPHIMURIUM.3 ....................................................................................................... 55
FIGURA 14.STAPHYLOCOCCUS AUREUS4 ................................................................................................................ 56
FIGURA 15. PSEUDOMONA AEROGINOSA6 ............................................................................................................. 56
FIGURA 16.TIÑA CORPORIS ................................................................................................................................... 57
FIGURA 17.TIÑA CAPITIS, MICROSPÓRICA. .............................................................................................................. 57
FIGURA 18.TIÑA UNGUIS ...................................................................................................................................... 57
INDICE DE TABLAS
TABLA 1.PROPIEDADES DE UN DESINFECTANTE IDEAL. FUENTE [17] ....................................................................... 18
TABLA 2.NIVELES DE DESINFECCIÓN. FUENTE [18] ............................................................................................... 20
TABLA 3.MECANISMOS DE LA ACTIVIDAD DE LOS DESINFECTANTES CONTRA CÉLULAS MICROBIANAS .FUENTE [20] ...... 22
TABLA 4.CONCENTRACIONES A EMPLEAR SEGÚN EL ELEMENTO A DESINFECTAR. FUENTE [20] ................................... 23
TABLA 5.TIPOS DE DESINFECTANTES Y SU ACCIÓN. FUENTE [18] ............................................................................ 23
TABLA 6.ANALISIS DBO Y DQO PARA EL BIOASEPSIA .................................................................................. 38
TABLA 7.RECUENTOS VIABLES. FUENTE ANEXO 1. .................................................................................................. 40
TABLA 8.EVALUACIÓN DEL BIOASEPSIA SOBRE CEPAS BACTERIANAS. TOMADO DEL ANEXO 2 ..................................... 40
TABLA 9.EVALUACIÓN DEL BIOASEPSIA SOBRE CEPAS DE HONGOS. TOMADO DEL ANEXO 3. ....................................... 41RESUMEN
En el presente trabajo se realiza la investigación y el desarrollo sobre el Bioasepsia; un
nuevo desinfectante producido en la empresa SPANGEL Productos Biodegradables, con
principio activo a base de ácido hipocloroso (HCLO).
Nuestro cuerpo produce su propio ácido hipocloroso, como un sistema de defensa contra
bacterias, gérmenes y agentes patógenos. Debido a la gran cantidad de infecciones que
causan los microorganismos, es importante encontrar un buen desinfectante que sea
eficaz y de amplio espectro, por esto al Bioasepsia se le realiza un análisis microbiológico
utilizando cepas comerciales de bacterias y hongos, también se practican pruebas de
demanda bilógica de oxígeno (DBO) y demanda química de oxígeno (DQO), para
determinar su Biodegradabilidad en el medioambiente.
Según las pruebas realizadas en el laboratorio de Ingeniería Sanitaria de la Universidad
Nacional de Colombia, sede Medellín, al determinar la DBO por el método Respirométrico,
se obtuvo que la cantidad de oxigeno consumida por los microorganismos es cero, debido
a que no hay presencia de materia orgánica ya qué estos son inhibidos automáticamente
por la alta acción bactericida que presenta el Bioasepsia, y el valor de la DQO fue un
mg
valor muy pequeño de 8,5 .Con estos análisis se procedió a evaluar la
Lo
2
Biodegradabilidad en base a la relación DBO/BQO, los resultados obtenidos mostraron
que el Bioasepsia, tiene una Biodegradabilidad de 0%,lo que significa que el
desinfectante no permite el crecimiento de los microorganismos pues los mata
instantáneamente, sabiendo que el principio activo del Bioasepsia es el ácido
hipocloroso, este por acción de la luz o reductores se descompone fácilmente para liberar
oxígeno molecular ,resaltando así que el producto es amigable con el medio ambiente
debido a que se descompone instantáneamente.
Se visitó la funeraria San Juan Bautista, ubicada en la ciudad de Medellín con el fin de
evaluar y valorar el porcentaje de desinfección en las áreas más contaminadas como: el
féretro o ataúd donde va el cuerpo, la parte trasera del carro fúnebre o´ planchón que
permite la entrada del cuerpo y su transporte, como también la mesa de preparación del
cuerpo en el laboratorio de tanatopraxia, obteniéndose que después de la aplicación del
desinfectante se alcanzó un grado de desinfección mayor al 90%.(ver anexo 9)
En el presente estudio, se determina la actividad bactericida del Bioasepsia sobre 4 cepas
bacterianas patógenas de referencia internacional ATCC (American Type Culture
Colletion): Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella Typhimurium,
Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes y de 4 cepas de hongos Trichoderma,
Penicillum, Fusarum y dermatofito , bajo la aplicación de la NTC 5150,NTC 2455 que son
las normativas técnicas Colombianas, para la evaluación de desinfectantes; los análisis
se realizan en condiciones controladas de temperatura, concentración del Bioasepsia
(500ppm) y tiempos de acción de 5,10 y 15 minutos, alcanzando un porcentaje de
inhibición del 99.9%.ABSTRAC
In this paper makes research and development on Bioasepsia, a new disinfectant
produced in the company Spangel Biodegradable Products with the active ingredient
based on hypochlorous acid (HClO).
Our body produces its own hypochlorous acid as a defense system against bacteria,
germs and pathogens. Due to the large number of infections caused by microorganisms, it
is important to find a good disinfectant to be effective and wide spectrum. Microbiological
analysis is performed to Bioasepsia using commercial strains of bacteria and fungi, also it
practiced test of Biological oxygen demand (BOD) and chemical oxygen demand (COD),
to determine their biodegradability in the environment.
According to tests conducted in the laboratory of Sanitary Engineering of the National
University of Colombia, Medellin, to determine the BOD by the respirometric method, it
found that the amount of oxygen consumed by microorganisms is zero, because there is
no presence of organic matter and why these are automatically inhibited by high
bactericidal presenting Bioasepsia, and the value of DQO was a very small value of 8.5
mg/Lo , With this analysis used to evaluate the biodegradability based on the ratio BOD /
2
BQO, the results showed that Bioasepsia has a biodegradability of 0%, which means that
the disinfectant does not allow for growth of microorganisms are killed instantaneously,
knowing Bioasepsia the active ingredient hypochlorous acid is the acid, this by action of
light or reducing readily decomposes to liberate molecular oxygen so highlighting the
product is environmentally friendly because it is decomposed instantaneously.
The mortuary San Juan Bautista, located in the city of Medellin was visited in order to
evaluate and assess the percentage of disinfection in the most polluted areas as: the
casket or coffin where the body is, the back of the hearse or slab that allowed in the body
and transport, as well as the body prep table in the laboratory of embalming, obtained after
the application of disinfectant disinfection reached a level of over 90%. (see Annex 9)
the present study, it determine the bactericidal activity of 4 Bioasepsia pathogenic bacterial
strains international reference ATCC (American Type Culture colletion): Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus, Listeria
monocytogenes and 4 strains of Trichoderma, Penicillium, Fusarum and dermatophyte,
upon application of the NTC 5150, NTC 2455 are Colombian technical standards for the
evaluation of disinfectants, analyzes are performed in controlled conditions of temperature,
concentration of Bioasepsia (500ppm) and action time 5,10 and 15 minutes. Reaching a
percent inhibition of 99.9%.INTRODUCCION
El Bioasepsia, con principio activo de ácido hipocloroso (HCLO), es un ion no disociado
del cloro y es el principal responsable de la actividad bactericida de los demás derivados
del cloro. No es corrosivo, ni caustico siendo un potente desinfectante. [1]
Se produce electroquímicamente variando sus rangos de concentración de manera tal
que puedan ser satisfechas las necesidades de su aplicación. Puede generarse a partir de
sal común (NaCl), agua (con bajos contenidos de Ca y Mg) y electricidad, siendo este un
sistema confiable, seguro, eficaz y de fácil uso. Al realizar el proceso de hidrolización de
la solución salina, además del ácido hipocloroso se produce hidróxido de sodio (NAOH),
un insumo de importante aplicación en la industria cosmética. Los residuos resultantes de
su producción pueden desecharse sin precaución alguna ya que solo constan de una
salmuera que no representa riesgos de toxicidad o reactividad.
Se puede emplear en una gran variedad de campos como: La Medicina, que simplifica el
cierre de heridas y ulceras de piel y mucosa, estén o no infectadas, debido a que presenta
un excelente poder cicatrizante. La Odontología, indicado para el tratamiento de Gingivitis,
pericoronitis, periodontitis, como también en la desinfección del material instrumental,
equipos y superficies. En veterinaria y Zootecnia, en equinos, caninos, felinos, efectivo en
la desinfección del material quirúrgico, comederos, perreras, pisos, paredes. En
alimentos; en la manipulación, empaque, transporte, cumpliendo la normatividad
alimentaria (decreto 3075 de 1997).En agricultura, para el control de una amplia gama de
gérmenes que perjudican los cultivos y todos los procesos que impliquen manipulación de
alimentos, superficies o un contacto directo que implique riesgos bilógicos [2].
Una de las formas que tienen las industrias para minimizar el riesgo de contaminación
con microorganismos patógenos, es por medio de la aplicación de unas buenas prácticas
de limpieza y desinfección con un excelente desinfectante; este estudio tiene como
objeto evaluar el poder bactericida, fungicida, del Bioasepsia (500ppm Acido Hipocloroso)
a determinados rangos de temperatura y concentración. Además observar su efectividad y
grado de desinfección en funerarias, hospitales, veterinarias y en la industria alimentaria
de acuerdo a la normatividad vigente. Finalmente determinar el impacto que pueda
generar en el medio ambiente a través de los análisis de Biodegradabilidad.1. MARCO TEÓRICO
1.1 ¿Qué es el ácido hipocloroso?
El ácido hipocloroso es la denominación que se le otorga al ácido que resulta de la unión
del óxido ácido de cloro con H2O. Recibe tal nombre debido a que el cloro actúa con el
estado de oxidación +1, que es el menor de los cuatro que posee: +1, +3, +5 y +7. Su
fórmula química es la siguiente: HClO, su peso molecular 52.46g/mol. [3]
Figura 1.Estructura del ácido hipocloroso. Fuente [3]
Según la IUPAC (Internacional Unión of Pure and Applied Chemistry), el HCLO se
nombrar de tres formas: nomenclatura tradicional: acido hipocloroso, nomenclatura
sistemática: monoxoclorato (I) de hidrogeno, nomenclatura Stock: clorato (I) de
hidrogeno [4].
1.2 Historia del ácido hipocloroso
Los usos terapéuticos del HClO, inician en la Primera Guerra Mundial(1914-1918), cuando
el alarmante incremento de muertes por infecciones en los soldados, hicieron que se
emprendiera la búsqueda de un desinfectante que se aplicara directamente en las
heridas, que destruyera microorganismos y sus toxinas, sin dañar el tejido normal.
En 1915 el tamizaje de más de 200 compuestos con acción bactericida permitió a los
investigadores Alexis Carrel y Henry Dakin, obtener una solución de hipoclorito de sodio
tamponado (solución de Dakin), el cual generaba concentraciones ideales de HClO. La
técnica de Carrel‐Dakin como fue llamada, se convirtió en método para tratar las heridas
infectadas durante la Guerra. Desafortunadamente la baja estabilidad de la solución, el
dispendioso método de preparación y los grandes volúmenes requeridos, hicieron que el
método perdiera vigencia. [5]
Hacia los años 80 son retomadas las investigaciones sobre el ácido hipocloroso. En 1989
el científico británico Stephen J. Weiss, observó “in vitro” el poder bactericida del HClO
liberado por neutrófilos (glóbulos blancos que intervienen en la defensa del organismo
contra sustancias extrañas o agentes infecciosos).Los análisis cuantitativos demostraron
que al activar (0.6) neutrófilos, durante una incubación de dos horas se producenaproximadamente 2*10-7 mol de HClO, cantidad capaz de destruir 150 millones de
bacterias E coli. [5]
En Colombia en 1992, se obtuvo la molécula de HOCl, con una estabilidad superior a un
año, permitiendo el desarrollo e investigación profunda del compuesto, hasta lograr la
primera formulación farmacéutica en el mundo a base de HOCl, certificada con el registro
INVIMA número 2004M-0003037.Esta formulación está indicada como solución
antiséptica para el tratamiento y cuidado de heridas en patologías de miembros inferiores
como:úlceras venosas, arteriales, traumas venosos, pie diabético, el producto estabilizado
se llamó de NEUTRODERM, desarrollado por Laboratorios AQUILABS S.A. [5]
1.3 Producción fisiológica del ácido hipocloroso
El ácido hipocloroso (HCLO), hace parte de un nuevo grupo de sustancias microbicidas
conocidas como “moléculas antimicrobianas no antibióticas” que por su amplio espectro,
rápida acción y amplio margen de seguridad puede ser utilizado para controlar y prevenir
un amplio número de infecciones de piel y mucosas. Bilógicamente se clasifica dentro de
un grupo de pequeñas moléculas conocidas como especies reactivas del oxígeno (ROS)
sintetizadas por células del sistema inmune Neutrófilos y Macrófagos, (ver figura 2)
durante un proceso inmunológico conocido como “estallido respiratorio”, durante la
fagocitosis de antígenos en reacción con la enzima mieloperoxidaza, peróxido de
hidrogeno (H2O2) y un Ión de cloro. Funciona como una sustancia quimiotáctica
(fenómeno en el cual las bacterias y otras células de organismos dirigen sus movimientos
de acuerdo a la concentración de ciertas sustancias químicas) que permiten un excelente
control microbiano y activación del sistema de defensa que facilita la rápida e inocua
reparación de tejidos [6].
La mieloperoxidasa (glicoproteína muy abundante en estas células) es la enzima que
cataliza el paso del peróxido de hidrógeno a acido hipocloroso en presencia de cloruros.
El ácido hipocloroso es una molécula con alto poder oxidante y excelente acción biócida
frente a una amplia variedad de bacterias, virus, levaduras, hongos. [6]
Figura 2.Mecanismo natural de Defensa. Fuente [6]1.4 Producción química
El HCLO puede ser obtenido por diferentes métodos:
1.4.1 Hidrólisis del gas cloro
Cuando se añade cloro al agua en forma de Cl2 (cloro gaseoso), se producen dos
reacciones: la reacción de hidrólisis y la de ionización. La hidrólisis se puede definir de la
siguiente forma:
Cl  H O  HCLO  H Cl K=4.5*104 a 25°C rxn-1.
2 2
Cloro agua acido ion ion
Gaseoso hipocloroso hidrogeno cloruro
La constante de estabilidad (K) es considerable, debido a la magnitud de este coeficiente
es posible la disolución en agua de grandes cantidades de cloro. La ionización se puede
describir mediante la siguiente reacción:
HClO  H OCl Ki=2.9*108 a 25°C rxn-2.
Ácido ion ion
Hipocloroso hidrogeno hipoclorito
La constante de reacción de ionización (Ki) .La distribución relativa de estas dos especies
químicas HOCl y OCl es muy importante, puesto que la capacidad de destrucción de
organismos por parte del HOCl está entre 40 y 80 veces. [7]
1.4.2 Acidificación de hipoclorito

El hipoclorito se hace más y más ácido en presencia de iones hidrogeno H bajando su
pH, según la siguiente reacción:
OCl H  HOCl rxn-3.
ion ion ácido
Hipoclorito hidrogeno hipocloroso
1.4.3 Electrolisis de solución de sal
Los sistemas de electrolisis salina generan cloro a partir de la sal común disuelta en el
agua. Cuando hacemos circular una corriente eléctrica continua por una disolución salina,
sobré la superficie de los electrodos de la célula de electrolisis se producen las siguientes
reacciones químicas. [8] :POLO NEGATIVO (cátodo): 2H O2e  H  2OH rxn-4.
2 2
agua Hidrogeno Hidroxilo
POLO POSITIVO (ánodo): 2H O O 4H 4e rxn-5.
2 2
Oxigeno
NaCl Cl 2Na 2e rxn-6.
2
sal_comun
Una vez generados el cloro (Cl ) y el Hidróxido sódico (NaOH) sobre los electrodos,
2
estos se recombinan en el seno del agua para producir acido Hipocloroso (HCLO) según
la siguiente rxn final:
Cl OH  HCLO Cl rxn final-7.
2
Cloro ion Ácido cloro
Gaseoso hidroxilo hipocloroso
1.5 Características del ácido hipocloroso
Acido hipocloroso puede penetrar capas limosas, paredes celulares y capas protectoras
de microorganismos, provocando su muerte o haciendo que su actividad reproductiva se
vea inhibida. [9]
Figura 3.Pared celular de los microorganismos. Fuente [9]
La pared celular de los microorganismos patógenos está cargada negativamente. De esta
manera puede ser penetrada por el ácido hipocloroso que tiene una carga neutra, en lugar
de ser penetrada por el hipoclorito cargado negativamente (ver figura 3). [9]
La acción desinfectante del ácido hipocloroso se produce como consecuencia de la
inactivación de reacciones enzimáticas vitales para los microorganismos y también por
destrucción de la pared celular.Químicamente se produce la siguiente transformación:
Después de su acción desinfectante, el HCLO se transforma en ión cloruro (Cl) con
poder desinfectante nulo [10].
1.5.1 Capacidad de desinfección en función del valor del ph
La capacidad desinfectante del ácido hipocloroso es bastante mayor que la del ión
hipoclorito (aproximadamente unas 3.000 veces). Cuando el valor del pH varia, el
equilibrio se modifica y con ello la capacidad de desinfección del cloro.
Figura 4. Reacción de HCLO afectado por el pH. Fuente [11]
En la figura 4, se puede ver que Cuando el pH disminuye, aumenta la concentración de
H+; el equilibrio se desplaza hacia la izquierda y se forma más ácido hipocloroso. La
capacidad de desinfección aumenta.
Cuando el pH aumenta, disminuye la concentración de H+; el equilibrio se desplaza hacia
la derecha y se forma más ión hipoclorito. La capacidad de desinfección disminuye. [11]Figura 5.Variacion de la Concentración HCLO en función del pH. Fuente [11]
La figura 5, muestra que en un pH superior a 6,7 el porcentaje relativo de HOCl disminuye
significativamente y, en consecuencia, la eficiencia de desinfección es notablemente
reducida. A un valor de pH de 7.4, sólo 50% del cloro existe en la forma de HOCl.
Las soluciones de cloro con pH por arriba de 8 son relativamente inefectivas contra los
Microorganismos patógenos. Por debajo de pH 6, el cloro es más corrosivo para los
equipos y su actividad se pierde rápidamente. A un pH alrededor de 7 se mantendrá cerca
del 80 % del cloro en la forma disponible (ácido hipocloroso) con muy poco gas
formado (Figura 5).En el rango entre 7 y7.8 se producirá una proporción de ácido
hipocloroso suficiente para garantizar una buena desinfección . [11]
A valores de pH menores de 7.5 se favorece la generación de HCLO y a pH mayores
tiende a generar ión hipoclorito ( ClO ). La efectividad del hipoclorito es de 1%
comparada con la del ácido hipocloroso; de esta manera, a un pH=6.0 se necesitan
0.005ppm de cloro como HCLO para obtener la misma acción biócida que 0.5ppm de
cloro como de ClO a un pH=10 [1].
1.5.2 Influencia de la temperatura
La desinfección es más eficaz en temperaturas altas. El aumento de la temperatura
produce un aumento en la velocidad de las reacciones y la desinfección, sin embargo en
la desinfección temperaturas demasiado altas reduce la eficacia de esta, porque puede
provocar la volatilización del cloro. Como una regla general, una disminución de 10 grados
Celsius reduce la eficiencia de desinfección entre el 50-60%. [12]1.6 Usos del Ácido Hipocloroso
Es un antiséptico y regenerador de piel y mucosas, de uso humano y animal. Excelentes
resultados en úlceras varicosas, quemaduras, aftas orales, pie diabético entre otros. [13]
Como desinfectante bactericida, el ácido hipocloroso (HCLO) penetra fácilmente en las
células bacterianas a través de la membrana citoplasmática, actúa sobre proteínas y
ácidos nucleídos de los microorganismos; oxida grupos sulfhídrilos (-SH) y ataca grupos
aminos, índoles y al hidroxifenol de la tirosina. Se ha determinado la actividad bactericida
sobre cepas bacterianas patógenas de referencia internacional ATCC (American Type
Culture Collection): Escheria coli, Pseudomonas aeroginosa, Salmonella enteritidis,
Klebsiella Pneumoniae y Staphylococcus aureus, bajo condiciones controladas de tiempo,
concentración y temperatura; mediante la técnica de Kelsey Maurer y en presencia de una
concentración estandarizada de proteínas, obteniendo una efectividad de 99.9%. [1]
Su aplicación también se da en el campo de la odontología, donde se ha evaluado su
eficacia antimicrobiana sobre microorganismos con potencial patogénico en la cavidad
oral, logrando inhibición bacteriana a una concentración de 500 ppm durante 1 minuto
para S. sanguis. Mutans, E. fecalis, E. corrodens, C. rectus, F.nucleatum, E. cloacae, K.
oxytoca y K. pneumoniae. [14].
1.7 Conceptos y definiciones
1.7.1 Limpieza
Conjunto de operaciones que permiten eliminar la suciedad visible o microscópica de una
superficie. Una limpieza regular y periódica tiene además un efecto higienizante ya que
reduce la presencia de microorganismos patógenos, disminuyendo a su vez la necesidad
de desinfectar. Se entiende por suciedad las impurezas indeseables ya sea porque
facilitan el desarrollo de microorganismos patógenos, deterioran los materiales o afectan
la estética. [15]
1.7.2 Desinfección
Proceso físico o químico que extermina o destruye la mayoría de los microorganismos
patógenos y no patógenos pero rara vez elimina las esporas. Por esta razón a los objetos
que se van a desinfectar, se les debe evaluar previamente el nivel de desinfección que
requieren, para lograr destruir los microorganismos que contaminan los elementos. [15]1.8 ¿Cómo escoger un Desinfectante?
Las características que debe tener un buen desinfectante están determinadas dentro de lo
siguiente: debe tener una alta actividad germicida aún diluido, un espectro de acción
amplio que abarque las bacterias Gram positivas y Gram negativas, bacterias, acido-
alcohol-resistentes, virus y hongos, ser bactericida mejor que bacteriostático yaqué este
último no produce la muerte a una bacteria solo impide su reproducción, se debe buscar
también que todos los microorganismos se mueran gradualmente y en un tiempo corto no
más de 15 minutos, además que el desinfectante pueda permanecer almacenado por
varios meses, que sea compatible con otros productos que se usen antes o
simultáneamente como los jabones y clorógenos, no debe ser toxico en tejidos humanos,
debe conseguir una reducción logarítmica de los microorganismos patógenos y resulta de
mayor valor cuando sucede en el menor tiempo posible. [16]
1.8.1 Propiedades de un buen desinfectante
Los desinfectantes que se deben utilizar para limpieza y desinfección de superficies
deben cumplir las siguientes características:
Tabla 1.Propiedades de un desinfectante ideal. Fuente [17]
PROPIEDAD CARACTERISTICAS
Debe tener un amplio espectro
AMPLIO ESPECTRO
antimicrobiano.
RÁPIDA ACCIÓN Debe producir una rápida muerte.
Debe ser activo en presencia de materia
NO SER AFECTADO POR FACTORES orgánica (sangre, esputo, heces) y
DEL MEDIOAMBIENTE compatible con detergentes, jabones y
otros agentes químicos en uso.
No debe ser irritante para el usuario ni para
NO TÓXICO
el paciente.
No debe corroer metales ni deteriorar
COMPATIBLE CON LAS SUPERFICIES
plásticos, gomas, etc.
SIN OLOR Debe tener un olor suave o ser inoloro.
El costo se debe evaluar en relación con la
ECONÓMICO
dilución, el rendimiento y la seguridad.
ESTABLE En su concentración y dilución en uso.
LIMPIEZA Buenas propiedades de limpieza.
La complejidad en la preparación,
FÁCIL DE USAR concentraciones, diluciones y tiempo de
exposición del producto pueden crear
confusión en el usuario.
Muchos desinfectantes tienen acción
EFECTO RESIDUAL NO TÓXICO SOBRE
residual sobre las superficies, pero el
LAS SUPERFICIES
contacto de las mismas con humanospuede provocar irritación de piel, mucosas
u otros efectos no deseables.
Para lograr un descarte del producto no
SOLUBLE EN AGUA
tóxico o nocivo para el medioambiente.
1.9 Riesgos de infección
En el año 1961, Earle H. Spaulding ideó una clasificación para la desinfección y la
esterilización de los elementos y equipos usados con los pacientes en hospitales .La
teoría de Spaulding se fundamenta en dividir los elementos de cuidado del paciente en
tres categorías, basadas en el riesgo de infección que representan:
1.9.1 Crítica: Llamada así porque existe alto riesgo de infección, si el elemento se
contamina con algún Microorganismo, incluyendo las esporas. Los objetos de esta
categoría son los que entran en contacto con el torrente sanguíneo o con las cavidades
estériles. La mayoría de estos elementos debe esterilizarse.
1.9.2 Semicrítica: Comprende los objetos que entran en contacto con las mucosas
o con la piel no intacta y deben estar libres de todos los microorganismos, excepto de
un alto número de esporas bacterianas.
Las membranas mucosas intactas son resistentes a la infección por esporas
bacterianas, pero susceptibles frente a otros microorganismos, como el bacilo de la
tuberculosis y los virus. Los equipos de terapia respiratoria y de anestesia, los
endoscopios y el aro del diafragma, entre otros, entran en esta categoría.
Los elementos semicríticos deben recibir, por lo menos, una desinfección de alto nivel
con esterilizantes químicos entre cada uso.[17]
1.9.3 No crítica: Los elementos de esta categoría entran en contacto con la piel
sana, pero no con las membranas mucosas. La piel intacta es una barrera efectiva
para la mayoría de los microorganismos. En contraste con los elementos críticos y
semicríticos, gran parte de los no críticos que pueden volver a usarse deben limpiarse
con desinfectantes de bajo nivel o de nivel intermedio. Pueden contribuir a la
transmisión secundaria de infecciones, contaminando las manos del personal de salud
y el equipo médico. No obstante, hoy se considera un riesgo a tener en cuenta la
transmisión de agentes infecciosos entre pacientes por la vía no crítica. [17]
1.10 Categorización de los Desinfectantes según la EPA
Los desinfectantes son categorizados por la Agencia de Protección del Medioambiente
(Environmental Protection Agency -EPA- de los EEUU) de la siguiente manera:
1.10.1 Desinfectante limitado: Desinfectante general o de amplio espectro: efectivo
contra algunas bacterias Gram positivas (Staphylococcus aureus) y Gram negativas
(Salmonella C).1.10.2 Desinfectante de Hospital: efectivo contra bacterias Gram positivas y Gram
negativas, incluyendo la Pseudomonas aeruginosa. Algunos amonios cuaternarios y
fenoles entran en esta clasificación. Los desinfectantes se clasifican además por su nivel
de actividad a los microorganismos:
Se denominan desinfectantes de alto nivel (DAN) a aquellos que inactivan bacterias
vegetativas, hongos, virus, mycobacterias y en tiempos más prolongados esporas. Se
denominan desinfectantes de nivel intermedio (DNI) a aquellos que inactivan bacterias
vegetativas, hongos, virus y en tiempos y concentraciones elevadas mycobacterias. Por
último los desinfectantes de bajo nivel (DBN) son los que eliminan bacterias vegetativas,
algunos virus y algunos hongos. [18]
Tabla 2.Niveles de Desinfección. Fuente [18]
NIVEL DE
DESINFECTANTE
DESINFECCIÓN
Glutaraldehido 2%, peróxido de hidrógeno 6%, ácido
Alto
peracético
Intermedio-alto Compuestos clorados
Intermedio Alcohol, iodóforos
Intermedio-bajo Fenoles, clorhexidina
Bajo Amonios cuaternarios
1.11 Mecanismos de acción de los antisépticos y desinfectantes
Los mecanismos de acción de los antisépticos y desinfectantes son múltiples, pero en
todos subyace hasta cierto punto la secuencia de eventos que se muestran en el siguiente
esquema:
(1) (2)
(3)
Interacción con la Alteraciones de
Entrada al Daños bioquímicos
superficie del la viabilidad del
microorganismo interferencia
microorganismo microorganismo
metabólica
y/o lisis del microbio
En esta secuencia se muestra que el primer paso sería la interacción del agente con la
superficie del microorganismo (paso 1),con el propósito de penetrar al mismo para
alcanzar el blanco de acción (paso 2),causando daños bioquímicos diversos y/o
causando alteraciones metabólicas, cuyo resultado final sea la destrucción microbiana
(paso 3).Es de notar que la propia superficie microbiana puede causar daños suficientes
para alterar la viabilidad del microorganismo particular [19].1.11.1 Resistencia Microbiana a los desinfectantes
El desarrollo de resistencia microbiana a los antibióticos es un fenómeno ampliamente
descrito. El desarrollo de resistencia microbiana a los desinfectantes es menos probable,
ya que los desinfectantes son agentes biócidas más poderosos que los antibióticos y
aplican en mayores concentraciones contra las poblaciones de microorganismos más
bajas que, por lo general no están en crecimiento activo; es por ello que la presión
selectiva para el desarrollo de resistencia es menos profunda. [20]
1.11.2 Resistencia intrínseca de las bacterias Gram Positivas
La pared celular de estas bacterias, está compuesta esencialmente de peptidoglicano y
ácido teicoico, pero ninguno de estos parece ser una barrera efectiva para la entrada de
antisépticos y desinfectantes. Existen microorganismos que pueden crecer con un
aspecto mocoso y otros no lo hacen, pero estas últimas mueren mucho más rápido, por lo
que se podría decir que esta lama juega un papel importante al actuar como barrera física
a la penetración de los desinfectantes o como una capa suelta que interactúa o absorbe el
biócida. [21]
1.11.3 Resistencia intrínseca de las bacterias Gram Negativas
Las bacterias gran negativas son generalmente más resistentes a los desinfectantes y
antisépticos que las gran positivas. La membrana de las bacterias gran negativa actúa
como una barrera que limita la entrada de algunos agentes químicos que no están
relacionados con agentes antibacteriales. Muchos autores, han considerado que el
péptidoglicano puede ser una barrera potencial a la entrada de sustancias inhibitorias.
Debido a que el contenido de péptidoglinano es mucho más bajo que en las bacterias
gran positivas, las hace menos sensibles a muchos antisépticos y desinfectantes [21].
1.11.4 Resistencia intrínseca de hongos
Estos organismos tienen dos mecanismos de resistencia, el primero es una resistencia
intrínseca y el segundo una resistencia adquirida. En la resistencia intrínseca la célula
presenta una resistencia para reducir la entrada de un agente microbiano. También la
edad de los cultivos influencia la resistencia hacia la sensibilidad de los desinfectantes,
ya que la pared celular es mucho menos sensible en fase estacionaria que en fase
logarítmica. Los hongos son generalmente más resistentes que las levaduras y
considerablemente más resistentes que las bacterias no esporuladas. Las esporas de los
hongos son menos resistentes que las esporas bacterianas a los agentes biócidas. [21]1.12 Mecanismos de acción de los agentes desinfectantes
Los desinfectantes intervienen en algunas etapas de la vida microbiana. Los mecanismos
de acción desinfectante son complejos. La acción puede ejercerse principalmente sobre
una función comprometiéndose luego otra, algunas veces reversible y otras irreversibles.
Dentro de los principales mecanismos de acción de los desinfectantes se encuentran:
 Daño de la pared celular, llevando a los microorganismos a la lisis, que es la
destrucción de la célula a causa de la rotura de la membrana.
 Alteración de la permeabilidad de la membrana citoplasmática, impidiendo el
transporte selectivo de nutrientes al interior de la célula bacteriana.
 Alteración de la naturaleza coloidal del citoplasma, desnaturalizándola o
coagulándola.
 Inhibición de la acción enzimática.
 Formación de anti metabolitos.
 Inhibición de la síntesis de ácidos nucleídos. [20]
La tabla 3 lista los sitios y modos de acción de algunos desinfectantes representativitos.
Tabla 3.Mecanismos de la actividad de los desinfectantes contra células
microbianas .Fuente [20]
OBJETIVO DESINFECTANTE
Pared celular. Formaldehído, hipoclorito y mercuriales
Membrana citoplasmática, acción sobre Anilidas y hexaclorofeno
el potencial de la membrana.
Enzimas de membranas, acción sobre Hexaclorofeno
la cadena de transporte de electrones.
Acción sobre el ATP Clorhexidina y óxido de etileno
Acción sobre enzimas con Óxido de etileno, glutaraldehído,
grupos -SH peróxido de hidrogeno, hipoclorito, yodo
y mercuriales.
Acción sobre la permeabilidad general Alcoholes, clorhexidina y compuestos
de la membrana. de amonio cuaternario.
Ribosomas Peróxido de Hidrogeno y mercuriales
ácidos nucleicos Hipocloritos Hipocloritos
Grupo tiol Óxido de etileno, glutaraldehído,
peróxido de hidrogeno, hipoclorito
mercuriales.
Grupos amino Óxido de etileno, glutaraldehído,
hipoclorito.
Oxidación en general Óxido de etileno, glutaraldehído,
hipoclorito.En la tabla 4, se presentan las concentraciones recomendadas dependiendo del tipo de
elemento a desinfectar se utiliza una concentración diferente.
Tabla 4.Concentraciones a emplear según el elemento a desinfectar. Fuente [20]
PARTES POR MILLÓN
ELEMENTO A DESINFECTAR
(PPM)
Agua potable 0.2
Desinfección de manos 50
Desinfección de mesas e instrumental 200
de acero inoxidable
Desinfección de pisos, mesones en baldosín, ropa, 500
útiles de aseo y material plástico
Desinfección de material orgánico 5000
1.13 Tipos de desinfectantes
Los desinfectantes deben seleccionarse considerando los microorganismos que se desea
eliminar, el tipo de producto que se elabora y el material de las superficies que entran en
contacto con el producto. La selección depende también del tipo de agua disponible y el
método de limpieza empleado.
Tabla 5.Tipos de Desinfectantes y su Acción. Fuente [18]
COMPUEST
CLOR- FORMAL- GLUTARAL-
ALCOHOL OS
HEXIDINA DEHIDO DEHIDO
IODADOS
Glutaraldehid
Alcohol
Gluconato de Povidona o
Compuestos etílico Alcohol
clorhexidina iodada Glutaraldehid
isopropílico
o-fenolato
Concentració 2%-
60-90% 0.1-4% 7,5%-10% 1%-4%
n 7%(fenol)
Tiempo > ó = 10 min 2-20 min > ó = 10 min 24 horas > ó = 20 min
Espectro
x x
x xx
Bacterias x x Gram(+) x xx x xx
Gram(+) Gram (-)
Gram (-)
Hongos x xx X x x xx x xx
Virus x x - x x x xx x xx
Micobacteri
x xx - x x x xx x xx
as
Esporas - - -/ x X x xxNivel Intermedio-
Intermedio Intermedio Alto Alto
desinfección bajo
Alteración
Disrupción de Alteración de
membrana,
síntesis y ácidos
MecanismoD Des_ naturalización coagulación Alquilación
estructura de nucleicos y
e acción de proteínas de proteínas de proteínas
ác. Nucleico y de síntesis
y ác.
proteínas. proteica
Nucleicos
Antiséptico
de piel (4%)
y mucosas
Escaso uso
(0.1%), Desinfección
sanitario por
preparación de
Antiséptico en piel Antiséptico su alto nivel
de piel endoscopios,
intacta. Desinfecc en piel, de toxicidad.
(0.5%) equipos de
ión de material no mucosas, Preparación
Indicaciones y lavado terapia
crítico heridas, vacunas
quirúrgicos respiratoria,
(termómetros, lavado virales,
(0.02%) dializadores,
estetoscopios) quirúrgico. conservació
(alternativa equipos de
n piezas
al yodo). anestesia…
anatómicas.
Desinfectant
e de material
no crítico.
Se inactiva Se activa
frente a con solución
materia alcalina. Se
orgánica, inactiva
Uso en
Se inactiva frente a tensoactivos, La dilución frente a
esterilización
materia orgánica. aguas duras, aumenta la materia
Actividad y en
Escasa acción jabones, eficacia orgánica.
desinfección
residual cremas. germicida Solución
de alto nivel.
Mayor acció activada
n residual estable 14-
que el 28 días
alcohol según uso.
Irritación de
Olor piel y
Bajo grado
desagradabl mucosas,
de toxicidad
e. vías
aunque
Carcinogénicrespiratorias.
produce
Leve irritación o, irritación Límite de
daños si se
Irritación de piel no de piel de piel y exposición
Toxicidad instila en
intacta y mucosas. y mucosas, mucosas, 0,2 ppm. El
oído medio o
alergia. vías glutaraldeido
córnea (a
respiratorias. -fenolato
alta
Límite de presenta
concentració
exposición menor
n).
0,75 ppm/8h toxicidad y
corrosión
Precauciones Inflamable: evitar Aclarar bien No combinar Habitación Habitacióncontacto con la piel antes con ventilada. No ventilada.
fuentes de calor. de aplicar el soluciones utilizar agua Utilizar
Evitar uso en antiséptico. mercuriales. caliente en guantes,
plásticos y caucho. Evitar Evitar en la gafas,
Daña cabezal de productos pacientes con preparación pantallas
tonómetros. clorados en alteraciones de faciales,
el lavado de tiroideas soluciones. recipientes
tejido con tapa No
manchado utilizar agua
con caliente en la
clorhexidina preparación
(produce de
mancha). soluciones.
Diluir en Aclarar
agua con agua
destilada, no corriente o
en agua estéril.
corriente.
PERÓXIDO
ÁCIDO AMONIOS
COMPUESTOS DE
PERACÉTIC FENOLES CUATER-
CLORADOS HIDRÓGEN
O NARIOS
O
Ac.
Ortofenilfenol
COMPUESTOHipoclorito sódico Peracético A Cloruro de
bencil-
S (lejía) c. benzalconio
paraclorofenol
peroxiacético
según Según
CONCENT. 500-5000ppm 3%-25% 0,2%-1%
producto producto.
> ó = 3 según Según
TIEMPO > ó = 10 min > ó = 12 min
horas producto producto.
ESPECTRO
x xx
Streptoccus,
X
X staphylococcu
Bacterias x xx x xx Gram(+)
Gram (+) s,
Gram (-)
Escherichia
coli.
Hongos x xx x xx x x x x X
Virus
x xx x xx x x x x X
Micobacterias x xx x xx x x x x _
Esporas X X x x _ _
NIVEL Intermedio-
Intermedio-alto Alto Alto Bajo
DESINF. bajo
MEC. Inactivación de ác. Altera Des- Alteran InactivaciónACCIÓN nucleicos, membramnanaturalización proteínas y y des-
desnaturalización s lipídicas, proteínas, membranas naturalizaci
proteínas, inhibe ADN, alteración celulares. ón de
enzimática radicales pared celular, proteínas.
libres oxidación Baja
hidroxilos. enzimas actividad
frente a
Gram -.
Desinfecció
Al 3% como
n de bajo
antiséptico
nivel de
en heridas.
INDICACION superficies,
Del 6% al Desinfección
ES camas,
Suelos, camas, 25% como Desinfección de nivel
muebles.
lavabos, WC, desinfección de medio-bajo de
Neutraliza
superficies no de alto nivel endoscopios, superficies y
los malos
metálicas (tonómetros, dializadores. material no
olores.
lentes de crítico.
contacto,
equipos
terap. resp.)
Mayor
pH ácido. Pierde
actividad en
Se incativa Activo frente a actividad
pH ácido y
rápidamente tras materia Habitualment con aguas
alta
dilución y frente a orgánica y a e utilizados duras,
ACTIVIDAD temperatura
materia orgánica. baja soluciones jabón,
. Se inactiva
La cloramina es temperatura. detergentes. algodón o
por materia
más estable Inestable una residuos
orgánica,
vez diluido. iónicos.
aire, luz.
Irritación de
Baja
piel y
toxicidad. Irritante de
mucosas.
Mezclado con Propiedades piel y Escasa
Olor
formaldehido oxidantes. mucosas a toxicidad.
TOXICIDAD desagradable.
produce compuestA altas altas conc. No
Hiperbilirrubin
os carcinogénicos concent. irriCancerígeno corrosivo
e
ta piel y a conc>1%.
mia en
mucosas
lactantes.
Diluir en agua fría.
Daña
Muy corrosivo, Pueden Evitar su
caucho,
evitar mezcla con quedar uso junto a
plásticos y Daña caucho,
detergentes ácidos residuos en aguas
PRECAUCIO- metales. No plásticos,
y amoniacales. No los materiales duras,
NES inyectar en corrosión de
en superficies porosos, detergentes
cavidades metales.
metálicas. No causando aniónicos,
cerradas
mezclar con otros irritación algodón.
(libera O2)
desinfectantes
+++= Muy efectivo; ++ = Medianamente efectivo; + = Poco efectivo; - = No efectivo1.14 Revisión de normatividad
1.14.1 Decreto 3075 de 1997: por el cual se reglamenta parcialmente la ley 09 de
1979 y se dictan otras disposiciones. Capítulo I Edificación e instalaciones, Articulo
8.Capítulo III personal Manipulador de alimentos, artículo 15.Practicas Higiénicas y
Medidas de Protección, articulo 20.Prevencion de la contaminación cruzada. [22]
1.14.2 Decreto 2676 de 2000: por el cual se reglamenta la gestión integral de
residuos sólidos hospitalarios y similares. [23]
1.14.3 NTC 2455-NTC 5150: Evaluación de los Desinfectantes. [24]2. FORMULACIÓN DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIÓN
Debido a la presencia de microorganismos patógenos que contaminan los alimentos, las
aguas, las superficies, causando diversidad de enfermedades e infecciones en las
personas, se deben emplear programas de limpieza y desinfección a través de las Buenas
Prácticas de Manufactura (BPM) mediante el decreto 3075 de 1997 del Ministerio de
Salud. Es importante usar un desinfectante eficaz de amplio espectro, y una
concentración adecuada para reducir e inhibir la carga microbiana que representa un
riesgo para la salud humana.
Un alto número de bacterias está presente en los alimentos como la carne, el pollo,
pescado, las frutas, vegetales, granos en la leche y derivados. En la piel, pelo y pezuñas
de los animales de carne roja así como en su tracto gastro-intestinal. Los
microorganismos de la piel incluyen especies de Staphylococcus, Micrococcus y
Pseudomonas, hongos y levaduras y especies aportadas por la materia fecal y el suelo.
Adicionalmente para estar presentes en la piel y en las vísceras, las bacterias pueden
prevenir de recursos del ambiente de procesos como pisos, paredes, superficies de
contacto, y de las manos de las mismas personas.
La empresa Spangel productos Biodegradables, dentro de su política de calidad y
mejoramiento continuo, pretende evaluar un desinfectante que actualmente está
establecido en los programas de limpieza y desinfección, este desinfectante es conocido
como Bioasepsia con principio activo a base de ácido hipocloroso.
Este estudio permitirá hacer una serie de análisis microbiológicos con cepas ATCC de
bacterias, hongos patógenos y así determinar cuál es el porcentaje de inhibición y su
amplio espectro antimicrobiano, Como también se practicaran pruebas de DBO y DQO,
para determinar la Biodegradabilidad del desinfectante en el medioambiente3. OBJETIVOS
3.1 Objetivo general
Desarrollo, Investigación y caracterización del Bioasepsia con principio activo de Acido
Hipocloroso, en los procesos de desinfección, y su amplio espectro de acción.
3.2 Objetivos específicos
 Evaluar la efectividad del Bioasepsia como desinfectante (a base de ácido
hipocloroso) a través de análisis microbiológicos, con cepas de hongos y
bacterias presentes en alimentos, utensilios, superficies, flora intestinal, la
piel entre otros.
 Determinar la Biodegradabilidad del desinfectante en base a la relación
DBO /DQO, para mirar el tiempo que tarda en descomponerse física y
5
químicamente en el ambiente.
 Mirar la amplia escala de aplicación del Bioasepsia en alimentos,
restaurantes, hoteles, funerarias, veterinarias, hospitales; como una
potente desinféctate e inhibidor de todo tipo de gérmenes presentes en
estos sitios.4. MATERIALES Y MÉTODOS
4.1 Proceso de Electroactivación Química por Electrolisis de
Diafragma
Como se ha mencionado anteriormente, el Bioasepsia es obtenido por vía electroquímica
al poner en contacto una disolución de agua salada con energía eléctrica, provocando de
este modo la hidrolización de la salmuera y con ello la formación del ácido hipocloroso y
la del agua alcalina (también conocida como sosa caustica).
El proceso de hidrolización del agua toma lugar en el equipo LMP-80-8, en el cual el
componente principal es un reactor electroquímico que comprende en su interior una serie
de elementos conectados hidráulicamente en serie y en paralelo, estos elementos están
organizados y cuentan con un flujo independiente a través del reactor electroquímico. El
equipo cuenta además con un convertidor de corriente en su interior.
La hidrolización de la solución acuosa ocurre por un proceso electroquímico denominado
“electrolisis de diafragma”. Dicho proceso ocurre, debido a que el reactor consta de 2
células activas energizadas, donde están las membranas y en las cuales ingresa la
solución del agua con sal; cada una de estas células cuenta con dos (2) recamaras con
corriente continua, una de ellas desempeña el papel de ánodo trabajando en el campo
positivo, mientras la otra trabaja en el campo negativo desempeñando el papel de cátodo.
Cada una de las células según el campo en el que trabaje, atrae los iones de la solución y
los hace migrar a través del diafragma el cual los separa de acuerdo a la naturaleza
iónica, es decir, los iones positivos son atraídos por el electrodo negativo donde reciben
electrones y se unen a otros átomos formando nuevas moléculas neutrales, mientras los
iones negativos son atraídos por el electrodo positivo, el cual provoca que estos liberen
sus electrones libres, generando una corriente eléctrica.El Equipo
1 Descarga de ácido hipocloroso
2 Descarga de agua alcalina
3 Suministro de solución salina
4 Suministro de agua
4.1.1 Condiciones de operación
El equipo debe almacenarse en un cuarto cuya temperatura del aire este entre 10 y 35°C,
y cuya humedad relativa se encuentre en valores no superiores al 80%, ya que estas
permiten garantizar que no ocurran daños futuros en el quipo ni proceso productivo.
4.1.2 Medidas de seguridad
Para prevenir la existencia de futuros problemas en el desempeño del equipo, debe
tenerse siempre en cuenta que:
5. No deben realizarse procedimientos de mantenimiento mientras este esté
conectado al fluido eléctrico.
6. El agua alimentada al proceso debe estar libre de impurezas o solidos disueltos.
7. El equipo no debe encenderse si el agua de alimentación está a una temperatura
superior a 35°C.
8. La temperatura del sitio o contenedor para almacenaje o transporte del equipo, no
debe ser inferior a 0°C.4.1.3 Puesta en marcha
Para que el proceso de producción sea exitoso, es necesario ubicar el LMP-80-8 en una
habitación ventilada, equipada con una toma de agua potable, red de alcantarillado y luz
eléctrica. Es de gran importancia, conectar el equipo a la toma de agua, garantizando que
la válvula de suministro de solución salina este cerrada, para que durante algunos
minutos previos a la producción se permita la libre circulación de esta con el propósito de
realizar un lavado al equipo que permita la eliminación de impurezas o residuos sólidos
remanentes en el interior de este. Debe garantizarse siempre que la manguera que
conecta el equipo con la solución salina este bien sumergida en el contenedor de esta.
Una vez finalizado el proceso de lavado, debe conectarse el equipo a la toma de corriente
eléctrica dejándolo listo para su uso.
4.1.4 Proceso de encendido
Inicialmente, mediante la apertura de la llave de presión de suministro de agua y la perilla
de control de salida del agua alcalina, debe realizarse el ajuste del funcionamiento
hidráulico de la planta, es decir, flujos volumétricos de descarga del agua electrolizada
(HOCl) y del agua alcalina (NaOH).
Una vez estén ajustados los volúmenes de descarga y basados en los lineamientos
planteados para el cumplimiento de los estándares calidad del producto, se procede al
encendido del generador y la regulación de la entrada de solución salina al sistema, ya
que dependiendo del flujo de este último, el medidor de amperaje del equipo se
estabilizará en un valor, que para el caso específico de nuestro proceso de producción se
encuentra entre 20 y 23 Ampere, puesto que en estos límites se garantiza que el producto
logre una concentración de 500 ppm de HOCl y un pH de 7.8, estos valores certifican su
efectiva actividad bactericida.
Estabilizados ya los estándares de operación del equipo, deben dirigirse las mangueras
de descarga de los productos del proceso hacia los recipientes de almacenamiento, hasta
alcanzar el nivel productivo requerido.
Habiendo finalizado el proceso productivo, el equipo debe desconectarse del suministro
eléctrico, y deben abrirse las perillas reguladoras de flujo para permitir la libre circulación
de agua por al menos 20 minutos.4.1.5 Mantenimiento del equipo
Habiendo alcanzado tiempos de operación entre 10 y 12 horas, la planta debe ser
sometida a un mantenimiento de rutina que consiste en el lavado interno del reactor con
una solución acida, con el fin de eliminar depósitos minerales en las membranas de los
electrodos. El procedimiento de lavado que debe seguirse es el siguiente:
1. Desconectar el equipo de la toma de electricidad.
2. Cerrar la perilla de entrada de la solución salina y abrir la de descarga del agua
alcalina.
3. Preparar una solución de ácido clorhídrico (HCl) al 10% en un volumen de
aproximadamente 1.5 Lts.
4. Cerrar la válvula para la conexión del agua de la llave en la parte superior de la
bomba de aire.
5. Conectar el contenedor de la dilución acida al sistema de bombeo del equipo a
través del adaptador en la entrada de agua.
6. Dirigir las mangueras del ácido y del agua alcalina hacia un recipiente vacío para
la recolección de los residuos.
7. Accionar varias veces la bomba de aire, de esta manera se hará que la solución
acida circule en el sistema interno del equipo y salga por las mangueras de
descarga hacia el recipiente recolector. Mientras se realiza este procedimiento,
debe tenerse cuidado de no ser salpicado por la solución de lavado.
8. Dejar la solución lavadora en el equipo durante un periodo de tiempo entre 15 y 20
minutos.
9. Finalizado el proceso de lavado, debe conectarse el equipo a la entrada de agua y
permitir la libre circulación de esta para el enjuagado del reactor y la eliminación
de depósitos o acumulaciones del ácido. [25]
4.2 Características del Proceso Productivo
Actualmente, la empresa se encuentra manejando niveles productivos de este insumo que
alzan volúmenes de 60 litros, aunque se han pensado en casos en los que la producción
sea tan alta que se requiera mantener la planta en constante operación y se pueda
satisfacer una demanda diaria de 360 lt considerando tiempos de parada para limpieza,
mantenimiento y arranque (estabilización).
4.2.1 Protocolo de Limpieza y Lavado de Manos
Antes de iniciar la producción de Bioasepsia se deben lavar las manos con jabón yodado
que es un excelente jabón bactericida siguiendo las reglas de asepsia:
0. Mojarse las manos
331. Aplicar suficiente jabón yodado para cubrir todas las superficies de las manos.
2. Frotar las palmas de las manos entre sí.
3. Frotar la palma de la mano derecha contra el dorso de la mano izquierda
entrelazados los dedos, y viceversa.
4. Frotarse las palmas de las manos entre sí, con los dedos entrelazados.
5. Frotar el dorso de los dedos de una mano contra la palma de una mano opuesta,
manteniendo unido los dedos.
6. Rodeando el pulgar izquierdo con la palma de la mano derecha, frotar con un
movimiento de rotación y viceversa.
7. Enjuague las manos.
8. Séquese con una toalla de un solo uso. [26]
El objetivo de un correcto lavado de manos es el de reducir el número de
microorganismos en las manos y el riesgo de contaminación cruzada, empleando
un máximo nivel de higiene.
4.2.2 Elementos de Bioseguridad
Para la producción del Bioasepsia se emplean elementos de protección o barreras de
precaución con el objeto de prevenir la exposición de la piel o una contaminación del
producto, bajando sus estándares de calidad; las barreras que se utilizan son:
Guantes: para la protección de las manos.
Mascarilla: protección de la boca, ayudan a evitar la diseminación de góticas respiratorias
por parte de las personas que las utilizan.
Bata o mandil: uso de protección corporal
Gorro: deben cubrir completamente el cabello de manera que no contaminen el producto.
Lentes: protección mucosa del ojo.
4.2.4 Medida de pH y Alcalinidad
Al comienzo de la producción del Bioasepsia se hace la medición de cloro con un test
(Chlorine Test Paper ), para mirar a que concentración de cloro sale el desinfectante
como también , se mide de forma precisa el pH con un potenciómetro, conocido como pH-
metro, se hacen 3 tomas, una al comienzo de la producción, otra en la mitad del proceso y
otra al finalizar el proceso para mirar si se presenta una variación. El valor de pH siempre
está en un rango de 7.8-8.
344.3 MÉTODOS
4.3.1 Lugar de Estudio
El estudio se realizó en 3 laboratorios:
Primer estudio: SIU (Sede de Investigación Universitaria) de la Universidad de Antioquia
en los laboratorios de grupo de investigación GDCON (grupo de diagnóstico y control de
la contaminación), que prestan servicios de extensión.
Segundo estudio: Laboratorio de Ingeniería Sanitaria de la Universidad Nacional.
Tercer estudio: Laboratorio de Aguas y Alimentos de la Universidad Nacional.
4.4 Cepas
Se utilizaron 4 cepas de bacterias ATCC: Escherichiacoli 8739, Pseudomonas
aeruginosa 9057, Salmonella Typhimurium 14028, Staphylococcus aureus 2592, y 4
cepas de hongos: Trichoderma, Penicillum, Fusarum, Dermatofito, bajo la aplicación de la
NTC 5150, NTC 2455 que son las normativas técnicas Colombianas empleadas para la
evaluación de desinfectantes.
Para la evaluación microbiológica de las cepas se emplearon 2 métodos; uno por
determinación de la viabilidad para conocer la UFC, y el otro por el Estándar de turbidez
Macfarlán con medio de cultivo BHI.
4.4.1 Determinación de la Viabilidad
Este procedimiento se utilizó para verificar la viabilidad de la cepa en estudio y además
para conocer cuántas UFC se pusieron a prueba frente al desinfectante. Sé prepararon 2
disoluciones con [50%v/v], [25%v/v] y [puro].utilizando el método de prueba: Dilución-
Neutralización, a temperatura de prueba de 1°C, temperatura de incubación de 1°C y
tiempos de contacto de 5 minutos, aplicando el método de referencia NTC 5150.
4.4.2 Estándar Macfarlán
Se utiliza este estándar de turbidez para saber el número de bacterias por mililitro o más
bien UFC, según la escala de Macfarlán que va desde 0.5 a 10.Este estándar se crea al
mezclar soluciones de cloruro de bario anhidro (Cl Ba ) al 1% con ácido sulfúrico
2
(So H ) al 1% en volúmenes específicos. Los estándares se comparan visualmente con
4 2
suspensiones bacterianas en caldos BHI (Brain Heart Infusion), este medio de infusión de
corazón de res y cerebro de ternera así como peptona provee la fuente de carbono,
nitrógeno, sulfuro y vitaminas para el cultivo de los microorganismos.
35Procedimiento:
1. se prepararon 5ml del medio de cultivo BHI y se mezclaron con las cepas de
microorganismos a analizar, y se encubaron a 24 h, a 37°C.
2. se preparó la solución patrón de Macfarlán con una solución de Cl Ba al 1% y
2
So H al 1% y se mezclaron las 2 soluciones con volúmenes de 0.2ml de Cl Ba
4 2 2
y 9.8ml de So H (escala 2 de Macfarlán).
4 2
3. Se mezcló la solución patrón con 3ml de H O+ el medio de cultivo BHI
2
4. Se preparó el desinfectante al 5%.
5. Se tomó una alícuota de 10ml de desinfectante y se mezclan con 0.5ml de las
cepas previamente cultivadas en caldo de BHI.
6. se empezó a contabilizar el tiempo a los 5 minutos, a los 10 minutos y las 15
minutos para mirar si se presenta o no turbidez.
Para comparar el grado de turbidez se preparó el blanco como control positivo,
para esto se adiciono 0.1ml células a analizar + el medio de cultivo BHI.
El estándar Macfarlán, se utilizó tanto para el análisis de cepas de bacterias como
también en los hongos según la norma NTC 2455.
4.4.3 Determinación de la DBO
La DBO (demanda bilógica de oxigeno) expresa la cantidad de oxígeno necesaria
5
para degradar la materia orgánica presente en el agua residual, por medio de los
microorganismos presentes en ella, durante 5 días. Por lo tanto, es un método que
mide la materia orgánica biodegradable y permite apreciar la carga orgánica
biodegradable del agua y su poder auto-depurador.
La DBO , se mide a una temperatura de 20 ºC, durante 5 días y en la oscuridad, se
5
tiende a poner estos 5 días, que corresponde a una degradación de la materia orgánica
biodegradable entre el 60 y el 70% .La oscuridad, se utiliza para evitar que la presencia
de algas microscópicas produzcan oxígeno adicional por la fotosíntesis y alteren el
resultado. [27]
4.4.3.1 Método utilizado.5220C (Respirométrico)
Para calcular la DBO en el desinfectante Bioasepsia, se utilizó el método
5
Respirométrico; para esto se llenaron unos frascos de color ámbar para evitar
interferencias de luz, de Capacidad de 500 ml, con un volumen conocido del
desinfectante y con una dilución en agua destilada de 1 a 4 (se tomaron 250ml de la
muestra y se aforó a un 1ilitro). A cada frasco se le añadió un núcleo de agitación y un
tapón con un reservorio para añadir el NaOH, el cual reaccionó con el CO producido en
2
la degradación de la materia orgánica.
36Este CO forma carbonatos de sodio evitando que se produzca un compensación del
2
volumen de oxigeno consumido por los microorganismos.
Luego los frascos se introdujeron dentro de la incubadora que estuvo a 20 °C durante
una hora, una vez se alcanzada esta temperatura, se taparon y se ajustaron a cero
escala. Se deja durante 5 días en la oscuridad y agitándose. Al finalizar la medida de la
DBO, se observó mediante lectores electrónicos que miden los mgO /l consumidos de
2
manera directa, según la cantidad de muestra añadida y la dilución que se realizó.
4.4.4 Determinación de la DQO
Desde el punto de vista ambiental la DQO, es una medida aproximada del contenido total
de materia orgánica presente en una muestra de agua. Esta materia orgánica en
condiciones naturales puede ser Biodegradada lentamente (esto es oxidada) a CO y
2
H O, mediante un proceso lento que puede tardar desde unos pocos días hasta unos
2
cuantos millones de años, dependiendo del tipo de materia orgánica presente y de las
condiciones de biodegradación.
En las pruebas de DQO se acelera artificialmente el proceso de biodegradación que
realizan los microorganismos, mediante un proceso de oxidación forzada utilizando
oxidantes químicos y métodos debidamente estandarizados, que tienen por objeto
garantizar la reproductibilidad y comparabilidad de las mediciones. [28]
4.4.4.1 Método utilizado.5220C
El procedimiento se basó en la oxidación de la materia orgánica presente en el
desinfectante Bioasepsia, utilizando dicromato (K2Cr2O7 ) potásico como oxidante en
presencia de ácido sulfúrico (H SO ) e iones de plata (Ag+) como catalizador. La
2 4
disolución acuosa se calentó bajo reflujo durante 2h a 150 °C. Luego se evaluó la
cantidad del dicromato sin reaccionar titulando con una disolución de hierro (II). La
demanda química de oxígeno se calculó a partir de la diferencia entre el dicromato
añadido inicialmente y el dicromato encontrado tras la oxidación.
375. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Tabla 6.ANALISIS DBO Y DQO PARA EL BIOASEPSIA
DIA BIOASEPSIA AL 99.9%
0 0
1 0
3 0
6 0
10 0
15 0
DQO 8,5
DBO Bioasepsia al 99.9%
1
0,9
) 0,8
2
o
0,7
L
/
g0,6
m
0,5
(
O
B0,4
D
0,3
0,2
0,1
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16
TIEMPO (DIAS)
Figura 6. CURVA DBO VS TIEMPO
5.1 Análisis de la DBO obtenida.
Según la tabla 6 y la figura 6, al determinar la DBO por el método Respirométrico;
arroja que la cantidad de oxigeno consumida por los microorganismos al primer
día es cero y al día 15 también marca una DBO de cero; debido a que la materia
orgánica, es eliminada automáticamente por la alta acción bactericida que tiene el
Bioasepsia; pues es un excelente oxidante, que por su carga neutra penetra
38fácilmente en la membrana citoplasmática, actuando sobre proteínas, y ácidos
nucleídos de los microorganismos inhibiendo totalmente su acción.
%MATERIA ORGANICA BIODEGRADADA
BIOASEPSIA AL 99.9%
1
0,9
0,8
0,7
O
Q
0,6
D
/ 0,5
O
B 0,4
D
% 0,3
0,2
0,1
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16
TIEMPO (DIAS)
Figura 7.CURVA DE BIODEGRADABILIDAD DE EL BIOASEPSIA VS TIEMPO
5.2 Análisis de la Biodegradabilidad
Se evaluó la Biodegradabilidad, en vase a la relación DBO/BQO, denominado índice de
Biodegradabilidad; los resultados obtenidos muestran que el Bioasepsia presenta una
Biodegradabilidad del 0%, esto significa que en el momento de actuar los
microorganismos sobre el desinfectante, los mata automáticamente y no permite su
crecimiento, por esto en la figura 7, se presenta un comportamiento lineal, que se
desplaza solamente en dirección de las abscisas (tiempo en días), y cero en el eje de las
ordenadas ( % DBO/BQO).
A través de los valores de la DBO y la DQO obtenidos, se comprueba la efectividad del
Bioasepsia como desinfectante de alto nivel, que inactiva la acción patogénica de los
microorganismos al momento en que entra en contacto con ellos y se mantiene constante
con el trascurrir del tiempo.
395.3 Recuentos viables (UFC/ml)
Se encontró que al analizar las cepas staphylococcus aureus ATCC 6538 y
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9057, bajo el método de prueba NTC 5150,realizado
en los laboratorios microbiológicos de la Universidad de Antioquia; el Bioasepsia tuvo una
efectividad del 99.99% a concentraciones de [50% v/v], [25%v/v] y [puro] a los 5 minutos
de acción; yaqué al comparar con el inoculo inicial de staphylococcus aureus 2.2*108
UFC/ml y pseudomonas aeruginosa 7.5*107 UFC/ml, en contacto con el desinfectante
se tuvo un recuento viable menor a 1.5*102 UFC/ml para las tres concentraciones
dadas.(ver tabla 7).
Tabla 7.Recuentos viables. Fuente anexo 1.
Microorganismo Tiempo Recuentos viables (UFC/ml) para el Bioasepsia
contacto [puro] [50% v/v] [25%v/v]
Staphylococus aureus 5 mín <1.5*102 <1.5*102 <1.5*102
(2.2*108UFC/ml ) UFC/ml UFC/ml UFC/ml
Pseudomonas aeruginosa 5 mín <1.5*102 <1.5*102 <1.5*102
( 7.5*107 UFC/ml ) UFC/ml UFC/ml UFC/ml
5.4 Estándar Macfarlán aplicado en cepas ATCC Bacterianas.
Se encontró que al analizar las cepas staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia
Coli ATCC 8739, Salmonella Typhimurium ATCC 14028, Pseudomonas aeruginosa,
bajo el método de prueba NTC 2455, realizado en los laboratorios de Aguas y Alimentos
de la Universidad Nacional; el Bioasepsia tuvo una efectividad del 99.9% a una
concentración de 500ppm a los 5minutos ,10min y 15minutos de acción; al comparar el
blanco con la solución patrón de Macfarlán (a escala 2) preparado con el inoculo de
cepas en cultivo de BHI, no hubo crecimiento y por lo tanto no se presentó turbidez. (Ver
tabla 8)
Tabla 8.Evaluación del Bioasepsia sobre cepas bacterianas. Tomado del anexo 2
Tiempo Escherichia Coli Salmonella Staphylococcus Pseudomona
de Typhimurium Aureus Aeroginosa
Contacto
5 mín. No hubo No hubo No hubo No hubo
crecimiento crecimiento crecimiento crecimiento
10 mín. No hubo No hubo No hubo No hubo
crecimiento crecimiento crecimiento crecimiento
15 mín. No hubo No hubo No hubo No hubo
crecimiento crecimiento crecimiento crecimiento
405.5 Estándar Macfarlán aplicado en cepas de Hongos.
Al analizar las cepas de Trichoderma, Penicillum,Fusarum y Dermatofito, bajo la norma
NTC 2455 realizado en los laboratorios de Aguas y Alimentos de la Universidad Nacional,
a una concentración de 500ppm de Bioasepsia, a los 5 minutos,10minutos y 15 minutos
de acción el desinfectante tuvo una efectividad del 99.99%; aplicando el patrón de
Macfarlán a la escala 2 equivalente a 600millones de microorganismos, no presento
turbidez yaqué logro eliminar las cepas fungicidas a las concentraciones y tiempo de
contacto preparados.(ver tabla 9 y figura 8 ).
Tabla 9.Evaluación del Bioasepsia sobre cepas de Hongos. Tomado del anexo 3.
Tiempo de Trichoderma Penicillium Fusarum Dermatofito
contacto
5 mín. Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento
(-) (-) (-) (-)
10 mín. Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento
(-) (-) (-) (-)
15 mín. Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento
(-) (-) (-) (-)
Figura 8.Solución patrón de Macfarlán con el Bioasepsia y el Blanco
En la figura 8 de la izquierda se tienen los tubos de en ensayo con la solucion patron de
Marfarlán (los tres primeros tubos) y el blanco (el tubo de menor volumen),pudiendose
obeservar la diferencia en el grado de turbidez , que es mucho mayor en el blanco
comparado con los tubos que contienen la solucion patron y el Bioasepsia que presentan
una solucion más trasparente.
Mientras que en la figura de la derecha ,se tienen las mismas soluciones en cajas petri y
se puede observar con mayor claridad, que la caja petri # 1 que contienen el blanco
presenta mayor grado de turbidez, comparada con la caja petri # 2 que contiene la
solucion patron con el desinfectante y no presenta turbidez.por lotanto se concluye que el
desifectante fue fecetivo en un 99.9%
416. CONCLUSIONES
 El Bioasepsia es un potente bactericida y biócida capaz de eliminar todas las
cepas de bacterias y de hongos probadas a concentraciones de 500 ppm y en
periodos de tiempo cortos pues a los 5 minutos de acción presento efectividad del
99.9%, conservando su efectividad a los 10 y 15 minutos.
 El Bioasepsia es capaz de eliminar a una concentración y tiempo determinados,
cepas bacterianas como el Staphylococcus aureus, este ocupa el segundo lugar
de causante de infecciones intrahospitalarias (ver anexo 7), siendo aislado de
pacientes con mayor frecuencia, además la mayoría de las cepas de S. aureus,
son resistentes a los microbicidas como la clorhexidina y los compuestos
derivados del amonio cuaternario y los biócidas utilizados en la prevención de
infecciones.
 La Pseudomona aeroginosa a una concentración y tiempo determinado logró ser
eliminada por el Bioasepsia, esta bacteria ocupa el séptimo lugar como causante
de infección nosocomial y presenta alta resistencia a diferentes tipos de
compuestos químicos como diacetato de clorhexidina, el para-cloro-meta-xilenol
,utilizados en jabones líquidos antibacterianos. La Pseudomona tiene la propiedad
de adherirse a las superficies formando biofilmes, generando problemas de
infección en unidades dentales e instrumentos de odontología que manejen fluidos
yaqué su principal reservorio es el ambiente húmedo (ver anexo 7).
 La salmonella Typimuruim también logro ser eliminada por el Bioasepsia a una
concentración y tiempo determinado, siendo esta bacteria causante se infecciones
como la gastroenteritis en los seres humanos, está presente en la carne de pollo,
sus huevos y sus derivados (ver anexo 7).
 La cantidad de infecciones nosocomiales, causadas por estos microorganismos,
se pueden prevenir a través un estricto control y cumplimiento de medidas como
el lavado de manos, la desinfección de superficies, en el área de trabajo, equipos,
a través de la aplicación de un excelente desinfectante con amplio espectro y
rápido tiempo de acción, como es el Bioasepsia.
 El Bioasepsia es uno de los pocos desinfectantes que se biodegrada al instante
sin generar ningún tipo de daño al medio ambiente, además no es toxico ni
inflamable y no representa ningún tipo de riesgo para la salud humana.
427. RECOMENDACIONES
 Para tener un mejor conocimiento, de cuál es el amplio espectro que maneja el
Biaosepsia, se recomienda practicar más análisis microbiológicos a otras cepas
de hongos bacterias, virus, protozoos causantes de gran cantidad de infecciones
y enfermedades en diversos campos de acción, ayudando así a mantener bajos
niveles de infección y previniendo enfermedades a causa de estos
microorganismos patógenos.
 Se recomienda a la hora de practicar los análisis microbiológicos variar las
concentraciones del desinfectante y analizar su efectividad en presencia de
albumina; es una proteína de la sangre que puede simular presencia de materia
orgánica en el desinfectante y alterar en gran proporción su rango de efectividad,
variando así su tiempo de acción y concentración.
 Siempre manejar buenas prácticas de higiene y bioseguridad en cualquier área ya
sea en hospitales, industrias alimentarias donde se presentan altos índices de
infecciones en la manipulación de alimentos, afectando directamente a todas las
personas que los consuman o estén en contacto con ellos.
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[ elika.Fundacion Vasca para la seguridad agroalimentaria, «Escherichia Coli,» 2013. [En línea].
3 Available: http://www.elika.net/datos/pdfs_agrupados/Documento84/3.Ecoli.pdf.
0
]
[ L. V. A. Jaime, «Salmonella aviar,» [En línea]. Available:
3 http://es.slideshare.net/ALEJANDRAJAIME/salmonella-en-aves.
1
]
[ Hospital Universitario Comandante Faustino Perez, «Staphylococcus Aureus,una causa frecuente
3 de infeccion nosocomial,» 2005 Cuba. [En línea]. Available:
2 http://www.revmatanzas.sld.cu/revista%20medica/ano%202005/vol5%202005/tema08.htm.
]
[ The Nemours Foun Dation, «Infecciones por estafilococos,» 1995-2013. [En línea]. Available:
3 http://kidshealth.org/teen/en_espanol/infecciones/staph_esp.html.
3
]
[ B. R. E. Contreras, «Una Bacteria temible y sorprendente:Pseudomona aeruginosa,» Peru
3 Febrero 2009. [En línea]. Available:
4 http://www.actualidadodontologica.com/0912/cient_01.shtml.
]
[ M. A. V. Arenas, «Trichoderma pers.Caracteristicas Generales y su potencial Biologico en la
3 Agricultura Sostenible,» [En línea]. Available: http://www.oriusbiotecnologia.com/escritos-
5 tecnicos/128-trichoderma-pers-caracteristicas-generales-y-su-potencial-biologico-en-la-
47] agricultura-sostenible.
[ L. Carrillo, «Los Hongos de los Alimentos y forraje.Penicillum,» [En línea]. Available:
3 http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/05htextopenicilios.pdf.
6
]
[ L. Carrillo, «Los Hongos de los Alimentos y forraje.Fusarium,» [En línea]. Available:
3 http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/06htextofusarios.pdf.
7
]
489. ANEXOS
ANEXO # 1. Análisis del Bioasepsia sobre cepas de bacterias ATCC, practicados en los
laboratorios de la Universidad de Antioquia.
49Anexo #2. Análisis del Bioasepsia sobre cepas de bacterias ATCC, practicados en los
laboratorios de Aguas y Alimentos de la Universidad Nacional.
50Anexo # 3. Análisis del Biaosepsia sobre cepas de Hongos, practicados en los
laboratorios de Aguas y Alimentos de la Universidad Nacional.
51Anexo # 4. Análisis del Biaosepsia sobre la cepa del Hongo Dermatofito, practicados en
los laboratorios de Aguas y Alimentos de la Universidad Nacional.
52Anexo # 5. Análisis de DBO, DQU y Biodegradabilidad del Biaosepsia practicado en los
laboratorios de Ingeniería Sanitaria de la Universidad Nacional.
53Anexo 6 .Hongos empleados en el análisis biócida del Bioasepsia. Fuente [7],[8]
El género Trichoderma está en el ambiente y especialmente
Figura 9.Trichoderma7 en suelos abundantes en materia orgánica o desechos
vegetales en descomposición y por su relación con ella está
clasificado en el grupo de hongos hipógeos, lignolícolas y
depredadores. Es aeróbico y pueden estar en los suelos con
pH neutro hasta ácido.
El género Trichoderma posee buenas cualidades para el
control de enfermedades en plantas causadas por patógenos
fúngicos (hongos) del suelo, principalmente de los géneros
Phytophthora, Rhizoctonia, Sclerotium, Pythium y Fusarium
yaqué activa el crecimiento radicular (raíces) de las plantas,
es capaz de colonizar y crecer en las raíces a medida que
estas se desarrollan y aumenta la resistencia del cultivo
frente al ataque de posibles patógenos7
Los penicillium son mohos comunes que desarrollan sobre los
Figura 10.Penicillum8 más diversos substratos: granos, paja, cueros, frutas, etc.
La importancia de estos mohos en la alimentación humana y
animal se debe a que, además de causar deterioro, producen
toxinas (Pitt & Leistner 1991).8
La fácil proliferación de los Penicillium en los alimentos es un
problema. Algunas especies producen toxinas y pueden hacer
el alimento no comestible o aún peligroso. Es una buena
práctica desechar los alimentos que demuestran el desarrollo
de cualquier moho. Por otra parte otras especies
de Penicillium son beneficiosas para los seres humanos. Los
quesos tales como el roquefort, brie, camembert, stilton, etc.
se crean a partir de su interacción con algunos Penicillium y
son absolutamente seguros de comer8 . La penicilina es
producida por el hongo Penicillium chrysogenum, un moho
ambiental.
Hongos ampliamente distribuido en el suelo y en asociación
con plantas. La mayoría de las especies son saprofitas(que se
Figura 11.Fusarium9 alimentan de materia orgánica muerta o en
descomposición) y son unos miembros relativamente
abundantes de la microbiota del suelo. Algunas especies
producen micotoxinas en los cereales que pueden afectar a la
salud de personas y animales, Las principales toxinas
producidas por estas especies
de Fusarium son fumonisinas y tricotecenos9.
Las especies de Fusarium se encuentran en los vegetales
antes de la cosecha. Como persisten en los productos
almacenados, en los silos.9
Fusarium spp. Es un hongo filamentoso aislado de plantas y
suelo. Se encuentra como microbiota normal en arroz, frijol,
soya y otros cultivos.
Fusarium graminearum normalmente afecta a la cebada.
54Anexo 7. Bacterias empleados en el análisis microbiológico del Bioasepsia. Fuente
[1],[2],[3],[4],[5],[6].
Figura 12.Escherichia Coli.2 Son bacterias que forma parte de la microbiota
del intestino (llamadas coliformes) del ser
humano y animales, siendo, la gran mayoría,
inocuas en ellos, pero las cepas productoras de
toxina Shiga o verotoxigénicas pueden provocar
cuadros gastrointestinales graves. Está y otras
bacterias son necesarias para el funcionamiento
correcto del proceso digestivo, además de
producir las vitaminas B y K. Es un bacilo que
reacciona negativamente a la tinción de
Gram (gramnegativo) 2,2 es anaerobio
facultativo 2,3 , móvil por flagelos peritricos
2,4 (que rodean su cuerpo), no forma esporas,
2
es capaz de fermentar la glucosa y la lactosa
.La bacteria E. coli verotoxigénica puede
llegar a los alimentos por varias vías:
 La fuente más frecuente es la carne de
________________
vacuno y los productos cárnicos de
2,2 Son bacterias que por la tinción de Gram,
vacuno (hamburguesas, carne picada)
se tiñen de un color rosado tenue.
que hayan sido poco cocinados, así
2,3
Se pueden adaptarse para crecer y
como la leche cruda sin pasteurizar y los
metabolizar tanto en presencia como en
productos elaborados con ella (queso,
ausencia de oxígeno.
nata, etc.
2,4 Estructura filamentosa que sirve para
 Las frutas y verduras lavadas o regadas
impulsar la célula bacteriana y que se
proyectan en todas las direcciones con agua contaminada también pueden
ser transmisoras de la bacteria.
Figura 13. Salmonella
Typhimurium.3 Su hábitat es el aparato gastrointestinal de los
animales y el hombre, nunca como microbiota
normal, se encuentra a menudo en reptiles
como las tortugas, en pollos y sus huevos que
se contaminan con las heces de las propias
aves al pasar por la cloaca. La salmonella se
encuentra en la cáscara, pero puede penetrar
en el interior si no se mantienen unas
condiciones de conservación adecuadas.1
La salmonella es un bacilo gramnegativo2,2
que pertenece a la familia Enterobacteriaceae,
aeróbicos y facultativamente anaeróbicos
fermentan la glucosa produciendo gas, utilizan
citrato como fuente de carbono. Esta bacteria
puede producir gastroenteritis en los seres
humanos, referida como una salmonelosis,
la inflamación del tracto Gastrointestinal.3
55El nombre de esta bacteria proviene de la
Figura 14.Staphylococcus aureus4 raíz griega , que se compone de staphylé, que
significa racimo y coccus, que significa grano,
baya o uva; y del latín aureus que significa
dorado. Este nombre significa racimo de uvas
dorado .Es un coco gram-positivo4,3, no móvil.
No forma esporas, puede encontrarse solo, en
pares, en cadenas cortas o en racimos. Es un
anaerobio facultativo, pero crece mejor en
condiciones aerobias. El microorganismo
produce catalasa, coagulasa y crece
rápidamente en agar sangre.4
El estafilococo aureus suele estar en la piel de
animales y personas, en las membranas
mucosas; garganta, fosas nasales, los genitales
---------------
y el ano. Sin embargo, cuando la piel se lastima
4,3Son bacterias que por la tinción de o sufre una punción, las bacterias
Gram, se tiñen de un color azul oscuro estafilocócicas pueden ingresar en la herida y
o violeta. provocar una infección.
El S. aureus también puede liberar El S. aureus provoca más frecuentemente
toxinas (sustancias tóxicas) que infecciones en la piel, como foliculitis,
pueden producir enfermedades tales forúnculos, impétigo y celulitis, que se limitan a
como intoxicación por alimentos o una pequeña área de la piel de una persona. 5
síndrome de shock tóxico.5
Figura 15. Pseudomona Aeroginosa6 son bacterias gram negativas 2,2 aeróbicas 6,1
posee un flagelo para su movimiento,
ampliamente distribuidas en la naturaleza
(suelo, agua, animales, plantas como la
menta) y sistemas de tratamiento de agua,
demostrando así su adaptación al medio
ambiente con baja concentración de
nutrientes y sobre un rango grande de
temperatura entre 4 y 42°C, puede
encontrarse en el tracto digestivo y su
principal reservorio es el ambiente húmedo
(caños, deshumedecedores ,fregaderos
,duchas, baños ), es capaz de permanecer
por tiempos prolongados en líquidos y
6,1 Las bacterias aeróbicas son superficies como antisépticos, alimentos
aquellas que crecen y viven en parenterales6,2, fluidos de diálisis,
presencia del oxígeno.
P. aeruginosa tiene una propiedad innata de
6,2 Alimentación parenteral es
unirse a superficies, formando biofilms
administrar por vía endovenosa los
durante el proceso de infección; coloniza las
líquidos y nutrientes necesarios para el
mangueras de unidades dentales que
paciente enfermo.
pueden ser contaminadas por el paciente o
impurezas del agua.6
56Anexo 8. Dermatofito, hongo empleado para el análisis del Bioasepsia. Fuente [10]
CARACTERÍSTICAS ENFERMEDADES
Las dermatofitosis o tiñas (Tinea) son micosis
figura 16.Tiña Corporis
superficiales causadas por un grupo de hongos
queratinofílicos estrechamente relacionados,
denominados dermatofitos. Estos afectan la capa
córnea de la piel, pelos y uñas.
Los dermatofitos se dividen en tres géneros que se
distinguen por las características morfológicas de sus
macroconidios:
1-Microsporum: Tienen macroconidios como forma de
esporas predominante, son voluminosos, de pared
rugosa, multicelular, y fusiformes, formándose sobre los
extremos de las hifas. Infectan habitualmente la piel y el
cabello, pero rara vez las uñas.
Figura 17.Tiña Capitis, microspórica.
2-Trichophyton: los microconidios que conforman sus
esporas son los más predominantes de ellos, aunque
también pueden tener macroconidios con forma de lápiz,
de pared lisa, con extremos romos. Infectan la piel, las
uñas y el cabello.
El Trychophyton rubrum, causa el pie de atleta; esta
infección avanza hacia la planta, provocando lesiones
escamosas y micro vesiculosas, con borde neto, son
pruriginosas y dolorosas y dolorosas y puede llegar a
comprometer toda la planta, dorso de piel y tobillo.
3-Epidermophyto: solo forman macro-conidios en
forma de mazo con una o 5 células, integrando colonias Figura 18.Tiña unguis
de color verdoso-amarillento, qué muta con rapidez,
formando color exagerado blanco estéril. Invaden la piel
y las uñas, pero nunca el cabello.
57Bibliografía de bacterias y hongos
[1] J. Egea, «Toxiinfecciones Bacterianas I:Salmonelosis,» [En línea]. Available:
http://www.uam.es/departamentos/medicina/farmacologia/especifica/ToxAlim/ToxAlim_L19
d.pdf.
[2] elika.Fundacion Vasca para la seguridad agroalimentaria, «Escherichia Coli,» 2013. [En línea].
Available: http://www.elika.net/datos/pdfs_agrupados/Documento84/3.Ecoli.pdf.
[3] L. V. A. Jaime, «Salmonella aviar,» [En línea]. Available:
http://es.slideshare.net/ALEJANDRAJAIME/salmonella-en-aves.
[4] Hospital Universitario Comandante Faustino Perez, «Staphylococcus Aureus,una causa
frecuente de infeccion nosocomial,» 2005 Cuba. [En línea]. Available:
http://www.revmatanzas.sld.cu/revista%20medica/ano%202005/vol5%202005/tema08.htm.
[5] The Nemours Foun Dation, «Infecciones por estafilococos,» 1995-2013. [En línea]. Available:
http://kidshealth.org/teen/en_espanol/infecciones/staph_esp.html.
[6] B. R. E. Contreras, «Una Bacteria temible y sorprendente:Pseudomona aeruginosa,» Peru
Febrero 2009. [En línea]. Available:
http://www.actualidadodontologica.com/0912/cient_01.shtml.
[7] M. A. V. Arenas, «Trichoderma pers.Caracteristicas Generales y su potencial Biologico en la
Agricultura Sostenible,» [En línea]. Available: http://www.oriusbiotecnologia.com/escritos-
tecnicos/128-trichoderma-pers-caracteristicas-generales-y-su-potencial-biologico-en-la-
agricultura-sostenible.
[8] L. Carrillo, «Los Hongos de los Alimentos y forraje.Penicillum,» [En línea]. Available:
http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/05htextopenicilios.pdf.
[9] L. Carrillo, «Los Hongos de los Alimentos y forraje.Fusarium,» [En línea]. Available:
http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/06htextofusarios.pdf.
[10 U. N. A. d. Mexico, «Dermatofitos,» 2011. [En línea]. Available:
] http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/micologia/dermatofitosis.html.
58Anexo 9. INFORME PRUEBAS DE DESINFECCIÓN
LUGAR: FUNERARIA SAN JUAN BAUTISTA
FECHA: martes 25 de septiembre de 2012
PRESENTADO POR: ING.PRACTICANTE ROSA CEVALLOS UNAL
EMPRESA: SPANGEL PRODUCTOS BIODEGRADABLES
INFORME: las pruebas se realizaron el día martes 25 de Septiembre en horas de la
mañana, con el fin de evaluar y valorar el porcentaje de desinfección, sobre las áreas de
más operación en la Funeraria como lo son: el féretro o ataúd donde va el cuerpo, la
parte trasera del carro fúnebre o planchón que permite la entrada del cuerpo y su
transporte, como también la mesa de preparación del cuerpo del laboratorio de
tanatopraxia. Para esto se utilizaron los siguientes elementos:
1. Elementos utilizados
a. LUMINOMETRO 3m como testador
b. BIOASEPSIA 99.9 %, utilizado para el proceso de desinfección, con principio activo
de de Acido Hipocloroso (HCLO), producido en la empresa SPANGEL PRODUCTOS
BIODEGRADABLES.
El ácido hipocloroso, es un ion no disociado del cloro y es el principal responsable de la
actividad bactericida de los demás derivados del cloro. No es corrosivo, ni caustico y es
conocido como un potente desinfectante
Se ha comprobado además, que el ácido hipocloroso permite matar los gérmenes y
mantener las superficies limpias, sin ser tóxico por ingestión vía oral, sin causar irritación
o sensibilización al contacto directo con la piel, sin causar irritación ocular o
mutagenicidad bacteriana, concluyendo así que no existen riesgos para la salud
asociados con su uso.
Para la toma de muestras se empleó un luminometro 3m,el cual monitorea la higiene a
través de un hisopo que mide el ATP(Adenosine TriPhosphate) de una muestra en 30 sg
se obtiene resultados numéricos expresados en unidades relativas de luz (URLs).
El ATP es la principal molécula que utilizan las células para capturar, transferir y
almacenar energía. La cantidad de ATP recuperado en el hisopo depende de la
contaminación microbiana y de la presencia de residuos orgánicos.
Los procedimientos llevados a cabo en los laboratorio de tantopraxia tienen el propósito
de retardar el proceso bilógico de descomposición y así facilitar los ritos religiosos.
59se pretende por otro lado embellecer el cuerpo y darle buena apariencia.
En este proceso se hace evidente 2 problemas de interés para la salud pública:
El primero tiene que ver con el cumplimiento de los requisitos de un manejo seguro de
residuos y el segundo, con el cumplimiento de la normas de bioseguridad ante el riesgo
biológico. La posibilidad de contaminación biológica y química en las actividades
desarrolladas en laboratorios de tanatopraxia es bastante alta; de la misma manera, el
riesgo de un accidente laboral aumenta a medida que se incumple las normas de
bioseguridad en este tipo de laboratorios.
En Colombia el Ministerio de Salud y el Ministerio del Medio Ambiente expidieron el
decreto 2676 del 2000, con la finalidad de reglamentar los residuos hospitalarios y
similares desde la generación hasta la disposición final de los mismos. Esta
reglamentación establece el obligatorio cumplimiento de todas las normas de manejo
seguro de residuos no solo en hospitales e instituciones de salud sino también en hornos
crematorios, morges, funerarias y laboratorios de tanatopraxia.
3. Toma de muestras y análisis de resultados
Se tomaron 3 áreas como muestra (féretro, planchón fúnebre y mesa de preparatorio y
limpieza del cadáver) para lograr comparar resultados de desinfección. La interpretación
de los resultados se realizó, comparando los valores suministrados por el luminómetro
antes y después de la aplicación del Bioasepsia, los resultados de la bioluminiscencia
fueron los siguientes:
Figura 1.toma de muestra féretro
Se hizo la toma de muestra con el hisopo, sobre el área contaminada de bacterias para
mirar cuanto es su grado de bioluminiscencia, y así comparar la zona infectada con la
zona desinfectada.
60Figura 2. Aplicación del producto
Se aplicó el desinfectante, por toda la zona contaminada para mirar su grado de
eficiencia, en este caso no se reportaron resultados, sino que se empezó con la segunda
muestra que es el carro fúnebre.
Figura 3.toma de muestra parte trasera del carro fúnebre
Se hisopa el área contaminada del planchón, y se registra su grado bioluminiscencia
Figura 4.Resultados antes de la desinfección
El luminómetro marco 2.383 URL sobre el área infectada
61Figura 5.toma de muestra área desinfectada
Se hisopa sobre el área desinfectada luego de la aplicación del Bioasepsia.
Figura 6.resutados después de la desinfección
Después de la aplicación del Bioasepsia, el porcentaje de contaminación por bacterias
logró bajar a 1.033URL, con porcentaje de desinfección del 56.65%, logrando desinfectar
más de la mitad de la concentración inicial.
Figura7.toma de muestra contaminada
Se hisopo la mesa del laboratorio de tanatopraxia contaminada, para mirar el grado de
bioluminiscencia.
62Figura 8.resultadosantes de la desinfección
El grado de infestación de la mesa presenta un porcentaje de 914 URL, que es muy alto
comparado con las otras muestras que se había tomado antes.
Figura 9.hisopasion de aérea desinfectada
Se hisopo la mesa donde se prepara el cadáver, después de la aplicación del
BIOASEPSIA para registrar el grado de luminiscencia.
63Figura 10.resultados después de la desinfección
El porcentaje de infestación se logró disminuir radicalmente, con la aplicación del
BIOASEPSIA de 9.14URL a 2.7 URL, que equivale a un porcentaje de 70,45% se puede
observar según los resultados que la desinfección del área que se tomó como muestra fue
muy efectiva pues se bajó el grado de infestación hasta más de la tercera parte
aproximadamente.
2.1 Análisis de costos
Tabla [1]. Bioasepsia al 99.99% de eficiencia, valor monetario $12.852 por litro
laboratorio de tanatopraxia féretro planchón fúnebre
Vol. disponible (ml) 1000 1000 1000
Vol. gastado (ml) 10 3 2
N° de procedimientos 5 5 5
costo diario ($) 642,6 192,78 128,52
costo mensual($) 19.278 5.783,4 3.855,6
costo total bioasepsia mensual ($) 28.917
Con base a datos reportados en literatura, se tomó que diariamente se hacen 5
procedimientos en una funeraria lo que equivale a 5 fallecidos/día; con este estimado se
calculó, los costos diarios y mensuales que representa, la desinfección con Bioasepsia de
las tres áreas tomadas en la prueba, como son: la mesa del laboratorio de tanatopraxia, el
féretro y el planchón fúnebre según se muestra en la tabla [1].
64Para la desinfección de la mesa de tanatopraxia, se gasta aproximadamente 10 ml, para
el féretro 3ml, para el planchón fúnebre 2 ml, que equivale a un costo total mensual de
28917$, que equivaldría a utilizar 2 litros y medio de Bioasepsia por mes para lograr
desinfectar estas áreas.
Tabla [2].Hipoclorito de sodio (NaOCl) a 5000 ppm, valor monetario $ 11.012 galón
NaOCl al
Material a desechar 13% Instrumental NaOCl al 6%
concentración utilizada de NaOCl (ml) 38 concentración utilizada de NaOCl (ml) 85
volumen de NaOCl disponible (ml) 99.473 volumen de NaOCl disponible (ml) 44.470.58
vol. gastado diariamente (ml) 331,57 vol. gastado diariamente (ml) 148.23
costo por galón ($)diluido en ppm 418.45 costo por galón ($) diluido 936,02
costo por litro ($) diluido en ppm 110.72 costo por litro ($) diluido 247.62
costo total por galón ($) concentrado 1.354.47
Las superficies contaminadas constituyen una de las formas de exposición de los riesgos
bilógicos, para áreas altamente contaminadas según las normas de bioseguridad en
entidades de salud y funerarias se recomienda utilizar una concentración de 5000 ppm
NAOCL; para la parte instrumental se debe diluir al 6% y para material a desechar al
13%.
En la tabla [2], se muestra los costos de desinfección utilizando dichas concentraciones,
que para el material a desinfectar tiene un costo por galón de $ 418.45 y para la parte
instrumental de $ 936.02, para tener un costo total de $1.354,47.
Comparando los costos de la tabla [1] con los de la tabla [2], económicamente es más
barato utilizar como desinfectante el NAOCL, pero su grado de desinfección es muy bajito
comparado con el HCLO que es 80 veces mayor, siendo un potente desinfectante que
penetra fácilmente en la célula bacteriana, actuando sobre proteínas y ácidos, nucleídos
de los microorganismos causantes de las infecciones inhibiendo totalmente su acción.
653. Conclusiones
 luego de hacer una rutina de limpieza, de cada uno de los elementos o equipos
que se utilizan, tanto en laboratorio de tanatopraxia, los vehículos utilizados para el
transporte de los cuerpos, como es el carro fúnebre, el ataúd, se debe aplicar en
cada área de trabajo un desinfectante que ayude a bajar de forma inmediata el
grado de infestación, y así el estado de limpieza sea óptimo.
 Si el porcentaje de infestación antes de aplicar el desinfectante es un poco alto a
pesar de que se le haga un previo proceso de limpieza, puede que se tenga un
falla en la manera como se está realizando, por lo tanto se debe proceder a
verificar la rutina completa de limpieza (temperaturas, concentraciones de
producto de limpieza, volumen y calidad de agua, etc.) o el funcionamiento del
sistema de lavado de la que se utilice para este fin máquina (instalación,
turbulencia, pendientes, etc.).
 El cumplimiento del decreto 2676 del 2000, debe ser obligatorio para todas las
funerarias, como también el cumplimiento de las normas de bioseguridad y
verificación de las medidas preventivas y de protección; debido a que los
trabajadores que desarrollan su actividad en los servicios funerarios pueden
presentar distintos riesgos: exposición a agentes físicos, químicos y bilógicos.
 Para el pretratamiento de residuos y desinfección en el laboratorio de tanatopraxia
una de las sustancias más utilizadas es el hipoclorito de sodio (NAOCL),que se
disocian en los iones Hipoclorito (OCL-) y sodio (NA++); la actividad germicida
del ion hipocloroso es muy reducida debido a que por su carga no puede penetrar
fácilmente en la célula a través de la membrana citoplasmática, en cambio el ácido
hipocloroso (HOCL) es neutro y penetra fácilmente en la célula, por esto la
eficiencia del HCLO es 80 veces mayor que la del OCL-. Por lo tanto se
recomienda utilizar como desinfectante el HCLO debido a su alto grado de
eficiencia.
 El método de desinfección menos costoso no siempre es el más conveniente.
Según el grado de infestación tan alto y los riesgos bilógicos a los que están
expuestos los trabajadores que laboran en clínicas hospitales, funerarias; es de
gran importancia emplear un método que garantice fiabilidad, continuidad y
eficacia, los cuales tienen prioridad sobre costos económicos y son bastante
moderados en comparación con el costo médico y social que ocasionan las
enfermedades transmitidas por los diferentes riesgos bilógicos que se pueden
presentar.
66