Caracterización de algunos parámetros bioquímicos de maduración de Gulupa en atmósteras modificadas
Autor: Castellanos Espinosa, Diego Alberto
Asesor: Hernández, María Soledad (Thesis advisor)
Fecha: 2010
Programa: Bogotá - Medicina - Especialidad en Anestesiología y Reanimación
Facultad: Facultad de Medicina

Resumen: Se realizó un ensayo de almacenamiento de Gulupa (Passiflora Edulis Sims) en empaques comerciales de plástico tipo Xtend® a tres temperaturas de refrigeración (4, 8 y 20 ºC) y con tres estados de madurez de la fruta. El criterio de selección de los frutos se realizó a partir del color de las cortezas. El experimento tuvo una duración de 4 semanas, que es el tiempo de vida comercial del producto en su transporte, distribución y venta en Europa. Se evaluó la evolución de los ácidos orgánicos incluido el ácido ascórbico durante la maduración del producto, teniendo como criterio el color de la corteza y perdida de humedad para encontrar la relación estado de madurez inicial en el almacenamiento, temperatura de almacenamiento y tiempo de almacenamiento más adecuada para la conservación optima de las cualidades del producto, hasta el consumidor final en ultramar. Se encontró que a pesar del empaque hubo una pérdida significativa de masa como humedad sobre todo en los frutos mantenidos a 20 ºC ±2°C. Además se observaron lesiones en la corteza y otros cambios indeseables como manchas para los frutos almacenados a 4 ºC por lo que hacia el día 25 de seguimiento se descartaron, lo que asocia esta temperatura con daños por frío para la Gulupa. El ácido ascórbico presentó variaciones considerables, mientras que los demás ácidos evaluados presentaron concentraciones y tendencias esperadas y previamente reportadas, para otras pasifloráceas. Las mejores cualidades sensoriales y nutricionales de la gulupa almacenada en las condiciones propuestas se mantuvieron en frutos de 50% de madurez en el momento de la cosecha y temperatura de almacenamiento de 8ºC. / Abstract. It was made a storage assay of purple passion fruit (Passiflora Edulis Sims) in plastic type Xtend® commercial packages for three refrigeration temperatures (4, 8 y 20 ºC) and three fruit maturity stages. Criteria for fruits selection was peel color. The experiment had duration of 4 weeks, which is the time of commercial life of the product in its transport, distribution and sale in Europe. The evolution of the organic acids included the ascorbic acid was evaluated during the maturation of the product, having as approach the peel color and loss of humidity to find the relationship of initial maturity in the storage, storage temperature and more appropriate time of storage for the good conservation of the qualities of the product, until the final consumer in overseas. It was found that in spite of the packing there were a significant loss of mass like humidity mainly in the fruits maintained to 20ºC ± 2°C. Lesions were also observed in the peel and other undesirable changes as stains for the fruits stored to 4 ºC by what toward the day 25 of pursuit were discarded and that makes associate this temperature with chilling injury in Purple Passion Fruit. The ascorbic acid presented considerable variations, while the other evaluated acids presented concentrations and prospective and previously reported tendencies, for other passion fruits. The best sensorial and nutritional qualities in the evaluated purple passion fruits stored under the proposed conditions, stayed in fruits of 50% of maturity in the harvest and storage temperature of 8ºC.

CARACTERIZACIÓN DE ALGUNOS PARAMETROS BIOQUÍMICOS DE MADURACIÓN
DE GULUPA EN ATMOSTERAS MODIFICADAS
DIEGO ALBERTO CASTELLANOS ESPINOSA
Trabajo final para optar al título de Especialista en Ciencia y Tecnología de Alimentos
Directora
Dr. MARIA SOLEDAD HERNÁNDEZ
Bióloga
UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
ESPECIALIZACIÓN EN CIENCÍA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS
BOGOTÁ D.C.
18 de Enero de 2010
1CARACTERIZACIÓN DE ALGUNOS PARAMETROS BIOQUÍMICOS DE MADURACIÓN
DE GULUPA EN ATMOSTERAS MODIFICADAS
DIEGO ALBERTO CASTELLANOS ESPINOSA
Trabajo final para optar al título de Especialista en Ciencia y Tecnología de Alimentos
Proyecto Programa Fortalecimiento a cadenas productivas
Efecto de las condiciones poscosecha sobre la fisiología, bioquímica, conservación y
análisis proteómico en frutos de Gulupa (Passiflora edulis Sims)
UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
ESPECIALIZACIÓN EN CIENCÍA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS
BOGOTÁ D.C.
18 de Enero de 2010
2AGRADECIMIENTOS
El autor desea agradecer especialmente a las siguientes entidades y personas:
Al Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos (ICTA) de la Universidad Nacional sede
Bogotá por facilitarnos las instalaciones de la Planta Piloto de Vegetales en donde se
prepararon los frutos para los ensayos y se extrajeron las pulpas para su posterior
análisis.
Al Instituto de Estudios Amazónicos (SINCHI) en donde se realizaron los análisis de color
y el cual nos facilito una guía inicial de los procedimientos de extracción y determinación
de Ácidos funcionales por Cromatografía Liquida.
A la empresa OCATI S.A. la cual facilito los frutos para el experimento.
Al Laboratorio de Fisiología Vegetal del Departamento de Biología de la Universidad
Nacional sede Bogotá y a la profesora Dr. Luz Marina Melgarejo, Directora del laboratorio
y Directora general del Proyecto Macro por facilitar el acceso y el uso de las instalaciones,
equipos y reactivos y materiales.
A la Ingeniera Química, Raquel Oriana Díaz por su colaboración y asesoría. Al Señor
Químico, Leonardo Moreno encargado de la coordinación del Proyecto Macro por su
dirección y colaboración, A la Señorita Sandra Crespo por su fundamental asesoría y
colaboración en la corrida de las muestras en el equipo de HPLC y a todo el personal de
los equipos de laboratorio del SINCHI, ICTA y del Laboratorio de Fisiología Vegetal.
A la Doctora María Soledad Hernández, directora y tutora de este trabajo, por su acertada
dirección y ayuda en los momentos adversos del desarrollo del proyecto.
3TEMARIO
Agradecimientos
Temario
1. Resumen
2. Objetivos
2.1. Objetivo General
2.2. Objetivos Específicos
3. Justificación
3.1. Proyecto Macro OCATI
4. Marco Teórico y Estado del Arte
4.1. Las frutas de la Pasión
4.1.1. Descripción General
4.1.2. Procedencia
4.1.3. Ecología
4.1.4. Reproducción
4.1.5. Crecimiento y Manejo
4.1.6. Beneficios
4.1.7. Cultivo y Producción
4.2. Estado del Arte
4.2.1. Algunos estudios realizados
4.2.2. Procesos fisiológicos
4.3. Planteamiento del Problema
5. Materiales y Métodos
5.1. Definiciones
5.2. Recolección y clasificación
5.3. Clasificación de acuerdo al color
5.4. tiempo de maduración
5.5. Determinación de pérdida de humedad
5.6. Determinación de ácidos por HPLC
5.7. Procedimiento de extracción
5.7.1. Extracción de la muestra del fruto
5.7.2. Extracción de la muestra para análisis por HPLC
5.8. Preparación de la fase móvil
5.8.1. Cálculos
5.8.2. Procedimiento
5.9. Especificaciones del equipo
5.10. Curvas de calibración para Ácidos
6. Resultados Obtenidos
6.1. Cambios de peso por perdida de humedad
6.2. Ácidos funcionales
7. Análisis de Resultados
8. Conclusiones
9. Referencias
9.1. Marco teórico y estado del arte
9.2. Metodología
Anexos
41
RESUMEN
Se realizo un ensayo de almacenamiento de Gulupa (Passiflora Edulis Sims) en
empaques comerciales de plástico tipo Xtend® a tres temperaturas de refrigeración (4, 8 y
20 ºC) y con tres estados de madurez de la fruta. El criterio de selección de los frutos se
realizó a partir del color de las cortezas; El experimento tuvo una duración de 4 semanas,
que es el tiempo de vida comercial del producto en su transporte, distribución y venta en
Europa. Se evaluó la evolución de los ácidos orgánicos incluido el ácido ascórbico durante
la maduración del producto, teniendo como criterio el color de la corteza y perdida de
humedad para encontrar la relación estado de madurez inicial en el almacenamiento,
temperatura de almacenamiento y tiempo de almacenamiento más adecuada para la
conservación optima de las cualidades del producto, hasta el consumidor final en
ultramar.
Se encontró que a pesar del empaque hubo una pérdida significativa de masa como
humedad sobre todo en los frutos mantenidos a 20 ºC ±2°C; Además se observaron
lesiones en la corteza y otros cambios indeseables como manchas para los frutos
almacenados a 4 ºC por lo que hacia el día 25 de seguimiento se descartaron, lo que
asocia esta temperatura con daños por frio para la Gulupa. El ácido ascórbico presentó
variaciones considerables, mientras que los demás ácidos evaluados presentaron
concentraciones y tendencias esperadas y previamente reportadas, para otras
pasifloráceas. Las mejores cualidades sensoriales y nutricionales de la gulupa
almacenada en las condiciones propuestas se mantuvieron en frutos de 50% de madurez
en el momento de la cosecha y temperatura de almacenamiento de 8 ºC.
52
OBJETIVOS
2.1. Objetivo general
Caracterizar variables bioquímicas y de calidad de Gulupa almacenada en régimen de
refrigeración.
2.2. Objetivos específicos
1. Caracterizar los cambios de ácidos orgánicos con carácter funcional y no funcional
durante la conservación de Gulupa para las condiciones evaluadas.
2. Seleccionar y recomendar a partir de la información de pérdida de masa y de
contenido de ácidos funcionales, la mejor condición de almacenamiento de la Gulupa de
acuerdo a su madurez inicial y a la temperatura de conservación.
63
JUSTIFICACIÓN
La producción de Gulupa (Pasiflora eludís Sims) se ha visto favorecida en los últimos
años por un interesante impulso del sector hortofrutícola del país que ha conseguido abrir
importantes mercados internacionales (fundamentalmente el mercado europeo y Japón) y
consolidar su posición en ellos. Así mismo se ha dado un incremento en el área de cultivo
de Gulupa en departamentos como Boyacá, Cundinamarca, Huila y Tolima. En la
búsqueda de que estos esfuerzos se vean recompensados adecuadamente se ha
buscado la manera de eliminar fallas que afectan de forma notable la cadena de
producción de la fruta (esto desde el cultivo hasta el transporte al mercado internacional)
con el fin de que haya un incremento real de la competitividad que justifique dichos
esfuerzos. Empresas del sector han querido unir esfuerzos a entidades de investigación y
academia como la Universidad Nacional para realizar un mejoramiento del proceso de lo
que se ha formulado una propuesta que está financiada por COLCIENCIAS para las
investigaciones pertinentes.
En cuanto al manejo de pos cosecha se han realizado esfuerzos que lleven a una
minimización de las pérdidas de producto mediante una implementación de mejoras a lo
largo de la cadena productiva. Métodos más efectivos de recolección, de tratamiento y de
conservación han mejorado de forma notable el proceso mediante la identificación de los
problemas más recurrentes y los factores más sensibles a tener en cuenta para obtener
un producto final de las mejores condiciones de calidad y en cantidades que sean
económicamente viables.
3.1. Proyecto macro OCATI
Empresas exportadoras como OCATI S.A. cabeza del sector también se interesan en
proyectos de este tipo porque en su labor exportadora se encuentran con problemas que
les producen bajas en la rentabilidad y sobrecostos. Ellos han indicado que la
comercialización de la Gulupa a nivel internacional se limita por la falta de tecnología
adecuada para prolongar adecuadamente la vida del producto que permita una cierta
flexibilidad a la hora del transporte del producto. En la actualidad la comercialización
exitosa se da por medio aéreo siendo este más de un 50 % más costoso que el medio
marítimo.
Para continuar con el proceso exitoso de comercialización del producto se requiere de
soluciones tecnológicamente apropiadas y económicamente viables. Por esta razón
OCATI S.A. se ha involucrado de lleno en este proyecto apoyándolo con recursos
económicos y de infraestructura.
Así en colaboración con la Universidad Nacional de Colombia con representantes como el
departamento de Biología de la Facultad de Ciencias y el Instituto de Ciencia y Tecnología
de Alimentos se ha conformado un grupo conjunto de investigación (Proyecto Macro) al
cual pertenece este proyecto.
74
MARCO TEÓRICO Y ESTADO DEL ARTE
4.1 Las frutas de la pasión
4.1.1. Descripción General
La fruta de la pasión es también conocida como parcha, granadilla, maracuyá, ceiba,
liliquea y linmangkon (Morton 1987). El prefijo Inglés "pasión" se deriva de la pasión de
Cristo propuesta por el estilo de cuadro enramado que aparece en algunas de las flores.
La fruta de la pasión es maderable, un producto de la vid que tiene una fruta deliciosa y se
produce en las formas púrpura y amarilla (Passiflora edulis f. edulis Sims y P. edulis f.
flavicarpa), conocidas como Gulupa y Maracuyá. Las plantas tienen unas raíces débiles,
de color marfil ampliándose en raíces laterales. El tallo es generalmente solitario, de
hasta 7 cm de diámetro basal, se extiende desde 5 hasta 10 metros o más en las copas
de los árboles, y la planta está cubierta por una delgada corteza escamosa, de color
marrón claro. Las ramas son de color amarillo-verde, volviéndose marrones, y se
mantienen en la vegetación por medio de zarcillos que surgen en las axilas de las hojas.
Las hojas son alternas, verde a amarillo-verde, de tres lóbulos (en las plantas maduras)
con bordes aserrados. Los pecíolos son de 3 a 6 cm de largo y las hojas son de 5 a 11
cm de largo por 4 a 10 cm de ancho. Flores solitarias surgen en las axilas de las hojas.
La medida de flores de 5 a 7 cm de diámetro con cinco sépalos verde-blanco y cinco
pétalos de color blanco rematado con una franja similar a la corona de rayos rectos
púrpura y blanco. Hay cinco estambres con anteras grandes y un estilo de tres brazos. El
fruto es globoso u ovoide, de color púrpura o amarillo y 4 a 7 cm de diámetro. Dentro de
una corteza gruesa marrón oscuro son muchas semillas de color negro envuelto en
pequeños sacos llenos de jugo de color amarillo o naranja muy aromáticos. Los frutos de
la fruta de Gulupa son más pequeños pero más aromáticos que los de la forma amarilla
(Acevedo-Rodríguez 1985, Liogier 1994, Morton 1987).
4.1.2. Procedencia
La Gulupa es nativa del sur de Brasil encontrándose pasando a través de Paraguay hasta
el norte de Argentina. La Maracuyá es probablemente nativa de la región amazónica de
Brasil (Morton 1987). La Maracuyá se cultiva hoy en día en los trópicos y subtrópicos, y
se ha naturalizado y extendido en muchas áreas, incluyendo Florida, Puerto Rico, Islas
Vírgenes de EE.UU., Hawai, Guam y Samoa Occidental (Acevedo-Rodríguez 1985,
Morton 1987, las islas del Pacífico Ecosistemas en Peligro 2002).
4.1.3. Ecología
La altitud y la latitud no parecen ser una limitación, solo que no sea a través de las
temperaturas asociadas con ellas. La gulupa crece mejor en un clima subtropical, y el
maracuyá amarillo prefiere un clima tropical con estaciones completas de días cálidos.
Sin embargo, incluso el maracuyá amarillo puede sobrevivir a temperaturas inferiores a - 5
° C (Sentelhas y 1996, otros). En general, la precipitación anual debe ser de al menos
900 mm. Las precipitaciones en las áreas nativas que cultivan la fruta va desde 1000
8hasta 2500 mm / año (Morton 1987). La especie es de raíces poco profundas, pero
resiste la sequía y defoliadores. La fruta tolera una gran variedad de suelos y crece mejor
en suelos bien drenados francoarenosos con pH de 6,5 a 7,5 (Morton 1987). Es
moderadamente intolerante a la sombra, requiere de árboles, arbustos, o cercas de
apoyo, y los beneficios de la sombra que estos aportan, pero no requiere la alteración del
suelo para la reproducción. Las plantas silvestres se encuentran en bosques talados,
amplias galerías, cercas, fincas abandonadas, y las porciones urbanas descuidadas. Las
plantas jóvenes son comidas por el ganado, por lo que la fruta casi nunca se encuentra en
aéreas de pastura. Un gran número de insectos, nematodos, hongos y virus pueden
atacar tanto la planta como los frutos (Morton 1987).
4.1.4. Reproducción
La Gulupa florece en primavera y principios del verano y otra vez durante un corto período
en el otoño y principios de invierno (Morton 1987). El Maracuyá amarillo florece en Puerto
Rico de abril a septiembre y da sus frutos de junio a octubre (Acevedo-Rodríguez, 1985).
En algunas zonas, las plantas dan frutos dos veces al año (Popenoe 1920). Las plantas
usualmente comienzan la floración y fructificación en su segundo año. Las flores de
maracuyá amarillo tienen partes masculinas y femeninas, pero son autoestériles. Se
basan principalmente en las abejas carpinteras (Xylocopa spp.) para la polinización.
Otros insectos y colibríes también visitan las flores. Las flores de Gulupa pueden tener
auto-polinización (Morton 1987). La maracuyá forma frutos con pesos de 45 a 120 g en
Puerto Rico. Existe una gran variación entre las plantas en la forma y el tamaño de los
frutos. Los frutos pequeños vienen totalmente desprovistos de las semillas, y los frutos de
gran tamaño pueden tener más de 200 semillas. Una colección de semillas de plantas
nativas en Puerto Rico tiene un promedio de 0,0251 + 0,0004 g / semilla o 40.000 semillas
/ kg. Estas frutas suelen propagarse por semillas, pero se puede iniciar de cortes, capas,
y de injertos (Morton 1987). Las semillas germinan mejor si se dejan fermentar durante
algunos días en la pulpa del fruto antes de limpiar y son ligeramente escarificadas por
corte o lijado (Morton, 1987). Un grupo de semillas en Puerto Rico fueron sembradas sin
tratamiento previo en la mezcla de siembra comercial y comenzó a germinar en 14 días y
concluyó la germinación en 24 días germinando cerca del 61 %. Las plantas son
cultivadas en camas o macetas y trasplantadas cuando llegan a unos 25 cm de altura.
Las semillas son esparcidas en la naturaleza por el hombre, los animales, especialmente
cerdos y aves, y por extensión del cultivo.
4.1.5. Crecimiento y manejo
Las plantas en suelo fértil extienden sus tallos cerca de tres metros por año. Cada año
durante la estación seca, las hojas caen y las ramas mueren dejando solamente el tronco
principal y algunas ramas para de ahí rehacer la copa luego del comienzo de la estación
de lluvias. Debido a que la fructificación tiene lugar en la madera joven, es posible realizar
la poda para mejorar la entrada de luz sin afectar el rendimiento de producción de frutos.
Las plantas viven de 3 a 8 años y no suelen rebrotar. Los puestos de venta se manejan
en los mismos cultivos, algo así como con las uvas. Se plantan en filas en espaldera 4,5
m de distancia y espacio de 4,5 m de separación dentro de las filas. Los huertos se
vuelven a sembrar cada 4 a 6 años (Bailey 1941). Alternativamente, los huertos pueden
ser elaborados a partir de árboles pequeños o de bambú (Heenkenda y
Punchikumarihami 1991). Las frutas caen al completar la maduración de la vid y se
recogen desde el suelo al menos dos veces por semana. Las raíces normalmente forman
micorrizas y las asociaciones de beneficiarse de la inoculación con cepas de hongos
9superiores (Cavalcante y otros 2001). Las plantas silvestres son por lo general dispersas
y hasta ahora no se han reportado intentos de manejarlas.
4.1.6. Beneficios
Con mucho, el mayor beneficio de la fruta de la pasión para la humanidad es su fruto y el
jugo delicioso hecho de él. Además de ser recogida por la población local en los bosques,
la fruta se cultiva en los viñedos en docenas de países. En todo el mundo se recolecta,
se almacena refrigerada y se envía luego a otros lugares para su consumo. La pulpa del
fruto contiene cerca de un 2,2 por ciento de proteínas, 0,7 por ciento de grasa, y el 21,2
por ciento de carbohidratos. Además, las semillas contienen 23 por ciento de aceite de
girasol o similar al de aceite de soja, y el residuo de la corteza se utiliza para la
alimentación del ganado (Morton 1987). Los frutos de los rodales nativos y naturalizados
proporcionar alimentos para numerosas especies de mamíferos y aves silvestres. Toda la
planta, especialmente las hojas, contiene alcaloides y un número de otros productos
químicos fitoactivos. Entre ellas se encuentra la passiflorine (pasiflorina), un conocido
sedante y tranquilizante (Morton 1987). Los extractos de las hojas se han utilizado
durante siglos como sedantes por los nativos del Brasil. Ellos preparan una bebida de la
flor para tratar el asma, la bronquitis y la tos ferina. La planta también se utiliza como un
diurético para tratar las infecciones urinarias (Rain-tree, 2002).
4.1.7. Cultivo y producción
El género pasiflora comprende más de 500 especies de lianas persistentes o
semipersistentes, casi todos nativos de las áreas tropicales de Suramérica, de Asia, de
Australia y de la Polinesia. Los principales países productores son Sinbawe, Australia,
Suráfrica, Brasil, Fiji, Hawai, Kenia, Perú y Sri Lanka.
(http://plantencyclo.free.fr/sp/nmauric_passiflora_edulis_gg.html) (Didier, 2001). Pyle
(1994) describe seis grupos de frutas de la pasión ubicando a la gulupa dentro del grupo
de la Passiflora. Históricamente, en la mayoría de los países la producción se ha iniciado
como un cultivo de traspatio y artesanal, para el consumo casero; después se ha vuelto
comercial para satisfacer la demanda interna. Ese proceso ha sido más o menos lento y
su desarrollo en cada país ha dependido de los apoyos gubernamentales y de los
compromisos con la agroindustria. Australia y Hawaii son los que más han fomentado y
apoyado la investigación, posteriormente Colombia y Brasil han hecho aportes relevantes.
En la ubicación geográfica de las principales regiones productoras han ocurrido
importantes cambios durante los últimos años. En 1970, siete países cubrían entre el 80 y
90% de la producción de passifloras que ingresaba al mercado mundial: Hawaii (EUA),
Islas Fiji, Australia, Kenia, Suráfrica, Nueva Guinea y Nueva Zelanda. A partir de los años
80 se traslada el centro de producción a América Latina, respondiendo a una creciente
demanda de jugo concentrado surgida en estos años en Europa, que no fue satisfecha
por los centros tradicionales de producción. En los años 90 es el continente
latinoamericano el que aporta el 90% de la producción mundial de pasifloras. Por otro
lado, algunos países productores entran en una verdadera crisis como las Islas Fiji, que
recientemente abandonaron este cultivo debido a que sufrió el ataque de virosis. Hasta
1950 antes que Fusarium se convirtiera en un problema fitosanitario serio, sólo el
maracuyá morado Passiflora edulis se comercializaba en Australia, pero fue sustituida por
el hibrido Passiflora edulis f. flavicarpa o maracuyá amarilla, la cual presenta resistencia a
Fusarium y algunos nematodos.
El principal productor de pasifloras a nivel mundial a partir de los años 80 ha sido Brasil.
10En este país se han dedicado a su cultivo 25,000-33,000 hectáreas durante los últimos
años, generando el 50% de la producción mundial (250,000-420,000t). Por sus
condiciones climáticas, en este país se puede cosechar prácticamente durante todo el
año. Su productividad oscila de 1.2 a 45 t/ha, el promedio es de 12 t/ha, sus costos, por lo
tanto, son muy variables, pero en explotaciones orientadas al mercado, en un ciclo de tres
años, oscilan entre 180-290 US$/t, con lo que se obtuvo en promedio una ganancia neta
de US$ 1,500 por hectárea, durante los últimos 5 años. De su producción anual, se
comercializa el 70% como fruta fresca. Su participación en el mercado mundial es de 10%
de las exportaciones. En 1995 la producción de Brasil no fue suficiente para satisfacer su
creciente demanda interna, hecho que se explica por el favorable desarrollo económico
del país, aunado a un creciente poder adquisitivo de la población y a la reducción cíclica
de la producción. Por esta razón, Brasil se convirtió en un importador neto de jugo de
maracuyá y de algunas pasifloráceas como la gulupa (Reboucas, 1996; Lima, 1981).
En Colombia el cultivo comercial de passifloras se inició en los años 60 y fue hasta los 80
que se lanzó al mercado internacional. La superficie dedicada varía entre 2,500 y 7,000
hectáreas y el 70% de la producción se exporta, dejando el 30% para el mercado interno.
El rendimiento medio alcanza las 20 t/ha, marcando la punta mundial, y su costo medio de
producción, en el ciclo de tres años, es de US$ 180/t. Colombia participa en el mercado
mundial de manera variable; en 1993 aportó del 60 al 70%, aunque en 1994 contribuyó
sólo el 7.3%. En este país el ICA promovió ampliamente el cultivo al tiempo que se dio un
fuerte soporte técnico y créditos accesibles a los productores por parte de la Caja de
Crédito Agrario y de la Federación Nacional de Cafeteros (Referencia 19, 2008).
Cuando la fruta se encuentra fisiológicamente en su máximo estado de crecimiento y
desarrollo, y todas sus partes, están formadas, maduras y aptas para su reproducción, es
el estado que se conoce como madurez fisiológica. La madurez de cosecha o comercial
es aquella etapa fisiológica en el desarrollo de la fruta en la cual se desprende del árbol y
puede llegar a desarrollar su madurez de consumo; esta última es aquel momento del
desarrollo fisiológico del fruto cuando todas las características sensoriales propias de
éste, como el sabor, el color, el aroma, la textura y la consistencia, son completas y
armónicas (Pinzón et al 2007). El estado de madurez del fruto es crítico para las
condiciones de almacenamiento y mantenimiento de la vida útil.
4.2. Estado del Arte
4.2.1. Algunos estudios realizados
La maracuyá amarilla (Passiflora edulis f. flavicarpa) ha sido más estudiada debido a su
mayor difusión: Es posible encontrar reportes de fisiología poscosecha y el efecto de
tratamientos como empaques, ceras, temperaturas (Aular et al., 2001; Gómez, 2000;
Gómez et al., 1999; Arjona et al., 1992; Quesada y Matta, 1992;). Además se ha
estudiado la actividad de enzimas como pectinmetilesterasa, poligalacturonasa y celulasa
(Aponte y Guadarrama, 2003; Menéndez et al. 2006); análisis de la hidrólisis enzimática
de compuestos responsables del aroma (Chassagne et al, 1999), tratamientos realizados
con etileno (Arjona y Matta, 1991). En otras Passifloraceas como la Badea (Passiflora
quadrangularis) se han realizado estudio de caracterización de aroma (Osorio et al.,2005).
Aular et al. (2001) Encontraron que para el maracuyá la utilización de envolturas plásticas
no afecta las características fisicoquímicas de los frutos ni los cambios que se presentan
de manera normal durante la maduración; sin embargo bajo esas condiciones se
11incrementa la incidencia de pudriciones y si el tiempo de almacenamiento es muy largo se
presenta pérdida de masa fresca y disminución de los sólidos solubles totales y el acido
ascórbico. Gómez (2000) encuentra también que la utilización de empaque plástico con
diferentes espesores (0,001; 0,0015 y 0,002 pulgadas) y número de perforaciones (0, 6 y
12 de 0,5 mm de diámetro), ocasiona un retraso en la maduración de los frutos, lo cual
combinado con una temperatura entre 10 y 12°C, prolonga en un 50 % el tiempo de
conservación (30 días), disminuye las pérdidas de peso y estabiliza la composición
química del fruto.
Pocos son los estudios referenciados en gulupa, entre estos, Shiomi et al (1996) reportan
que el fruto púrpura o morado alcanza su máximo tamaño 20 días después de la antesis
de la flor. Además encuentra que la tasa de respiración del fruto (aun pegado a la planta)
decrece gradualmente pero sin mostrar un pico climatérico y la producción de etileno
incrementa claramente después de 70 días de la floración, después de lo cual se
mantiene constante. Después de retirar los frutos de la planta alrededor o cerca del día 40
(después de la floración) se observa un pico climatérico. El cambio en el color de verde a
púrpura fue visto entre los 70 y 80 días después de la floración y corresponde con el
comienzo de la actividad autocatalítica del etileno. Los resultados muestran que la gulupa
tiene una madurez fisiología alrededor de 60 días después de la salida de la flor y puede
ser cosechada 70 días después de la antesis. En otro estudio Shiomi et al (1996)
encuentran que durante maduración del fruto aumenta el contenido de glucosa y fructosa,
decrece el contenido de sacarosa. Los Ácidos cítrico y málico aumentan en las primeras
etapas de maduración y luego decrecen. La aplicación de etileno entre uno y cinco días
después de la cosecha estimula la producción de etileno; ellos indican que Pasiflora edulis
Sims, puede ser transportado en frio al lugar de venta y allí se puede inducir el cambio de
color (verde a morado) aplicando etileno. (Pachón et al, 2006) estudiando el efecto del
empaque, encerado y temperatura sobre las características fisicoquímicas y
organolépticas de la gulupa plantean el uso del papel plástico vinipel como una muy
buena alternativa de empacado de frutos, solo o en combinación con encerado incluso a
temperatura ambiente aunque por un tiempo menor. El peso fresco y la acidez titulable
tienden a decrecer con el tiempo aun con este empaque.
Debido a las diferentes condiciones ambientales en las que se desarrollan la gulupa y la
maracuyá amarilla, estas presentan diferencias en cuanto a la resistencia a las bajas
temperaturas. Las condiciones óptimas de almacenamiento de maracuyá amarillo están
entre 7ºC y 10ºC con una humedad relativa del 90 al 95%; este a su vez puede tener un
potencial de sobrevivencia (en almacenamiento) de dos semanas. La gulupa mientras
tanto es más resistente al enfriamiento y puede ser almacenada entre 5 y 8ºC, por un
tiempo entre tres y cinco semanas (Paull y Chen, 2008). La temperatura letal para el
maracuyá morado o gulupa se encontró entre -10ºC a -12ºC (Quesada y Matta, 1992).
Otras diferencias se observaron en el aroma, mientras que para ambas, gulupa
(maracuyá morada) y maracuyá (maracuyá amarillo) se encuentran concentraciones
importantes de alcoholes aromáticos, los fenólicos se consideran como característicos de
la morada (Chassagne et al., 1999). Pinzón et al (2007) reportan bajo condiciones de
Colombia los estados de madurez de gulupa. En Colombia, la gulupa (Passiflora edulis
Sims) se cultiva principalmente entre los 1.800 y 2.400 msnm con temperatura promedio
de 16 a 24°C y precipitaciones de 1.500 a 2.500 mm (Pachón et al., 2006). El color del
exterior del fruto (pericarpio) se caracteriza por ser verde durante su etapa juvenil para
luego cambiar a púrpura en su estado de madurez (Hurtado y Nieto, 1985). Actualmente
se encuentran cultivos a los 900 msnm (OCATI, comunicación personal). Actualmente en
Colombia, la gulupa ocupa el tercer renglón dentro de las frutas exportadas hacia el
12mercado europeo después del banano y la uchuva. Se cosecha directamente de la planta.
Dado los pocos estudios realizados en el país sobre el momento óptimo de cosecha
Pinzón et al (2007) determinaron los estados de madurez del fruto, así como algunas
características físicas y químicas. Determinaron seis estados de madurez de la gulupa
desde totalmente verde (estado 0) hasta sobremaduro (estado 6) para facilitar el
reconocimiento del momento óptimo de cosecha. De acuerdo a las características físicas
(peso, tamaño, densidad, firmeza, color), químicas (sólidos solubles totales [SST], acidez
total titulable [ATT], pH) y el índice de madurez para cada estado del fruto se determinó
que el momento óptimo de cosecha es el estado 3 el cual corresponde a un fruto 40-50%
verde y 40-50% púrpura; en este estado el fruto es más denso y alcanza su máximo en
peso fresco de fruto total y de la pulpa. En este estado el fruto contiene la mayor
concentración de SST (15,9ºBrix) y además comienza a aumentar el pH (desde 3,0 hasta
3,6 [en estado 6]), mientras disminuye la ATT (13%). Actualmente algunas empresas
exportadoras como OCATI empacan los frutos en el estado 3 (aunque en algunas
ocasiones empacan mezclado entre estado tres y cuatro) en empaques tipo Xtend; sin
embargo bajo las condiciones de almacenamiento, transporte y empaque los frutos se
maduran o sobremaduran o sufren daños y en muchos casos presentan problemas
fitosanitarios antes de llegar a su sitio destino perdiéndose calidad del fruto para el
consumo (OCATI, información personal).
4.2.2. Procesos fisiológicos
Las tasas de procesos fisiológicos en las frutas, incluyendo la respiración y la acción y
evolución del etileno, son reguladas por la temperatura, y son más bajos justo sobre el
punto de congelación del tejido. De esta forma las tasas de maduración de las frutas y el
ablandamiento de la pulpa y la progresión de senescencia dependen de la temperatura a
la cual se encuentra la fruta. Mientras que las tasas de pérdida de agua resultan de
diferencias de presión de vapor entre la fruta y su ambiente, las cuales son controladas
por la temperatura de la fruta, humedad relativa y velocidad del aire en la atmósfera
circundante. En general la máxima vida poscosecha se alcanza justo sobre el punto de
congelación, el cual puede ser menor a -1ºC para cultivos que presentan una alta
concentración de sólidos solubles totales (Vendrell, M, 1995). Los azúcares, proteínas y
otros componentes sufren importantes modificaciones, siendo de gran importancia porque
influyen en los cambios que se producen durante el almacenamiento, transporte y
comercialización de las frutas, afectando también en cierta medida su valor nutritivo.
Enzimas como la pectinmetilesterasa, poligalacturonasa (Aponte y Guadarrama, 2003;
Menéndez et al.,2006) determinados en maracuyá amarillo, por ejemplo, ejercen una
actividad diferencial en cada estado de maduración observándose su máxima actividad en
los estados maduros y sobremaduros.
4.3. Planteamiento del problema
Aunque el deseo de los productores y exportadores de la Gulupa es consolidar y ampliar
los mercados internacionales colonizados hasta el día de hoy diversos factores de la
poscosecha del producto han hecho que este deseo no pueda verse plenamente
materializado.
13Actualmente una cantidad bastante apreciable del producto exportado (se estima en un 15
%) es rechazada por los compradores por qué no cumple los criterios establecidos de
calidad; las fallas principales que se han visto son irregularidades en la coloración y daños
por efecto del cambio de la temperatura y de la humedad en el almacenamiento y
transporte además de daños por agentes fitopatógenos. Por supuesto estas pérdidas son
prohibitivas y es por esto que los productores y comercializadores requieren unificar
criterios que permitan realizar una aproximación conjunta a la solución pronta de estas
fallas y así fortalecer la cadena productiva de la gulupa de exportación.
De acuerdo a lo anterior se pensó en un proyecto de estudio del comportamiento
fisiológico y bioquímico de la Gulupa en condiciones de almacenamiento con variación en
los parámetros de temperatura, empaque y madurez del fruto.
Así el plan es trabajar con el fruto en tres estados de madurez: pintón (50% verde y 50%
púrpura), 75% de madurez y maduro (100% púrpura); Así mismo con tres temperaturas
controladas de almacenamiento: 4ºC±1 ºC, 8ºC±1 ºC (temperatura critica de
almacenamiento). Los frutos se empacan en bolsas tipo Xtend®.
Los ejemplares evaluados en las condiciones de refrigeración se comparan directamente
con los que se encuentran a temperatura de 20ºC±1 ºC sirviendo estos últimos como
testigo y observando los diferencias en los cambios propios en la maduración y la
senescencia del producto almacenado.
Pretende llegarse entonces a encontrar los parámetros de temperatura de
almacenamiento y de madurez inicial para este mismo más adecuados que permitan la
mejor conservación de la Gulupa de exportación.
145
MATERIALES Y METODOS
5.1. Definiciones
Unidad experimental: Unidad de medición constituida por dos bolsas cada una con cuatro
frutos utilizables para la extracción de las muestras de pulpa, para ocho frutos en total.
5.2. Recolección y clasificación
Se recolectaron frutos de Gulupa, provenientes de un solo sitio y sembrado bajo las
mismas condiciones, de tres estados de madurez clasificados de acuerdo al color de la
corteza: pintón (50% verde y 50% púrpura), 75% de madurez y maduro (100% púrpura),
caracterizándose dichos estados de madurez a través del uso de un colorímetro Hunterlab
que reporta unidades LCH (Luminosidad, Croma y Hue) de acuerdo al estado de
maduración del fruto. Los frutos recolectados se acondicionaron bajo los mismos
parámetros que se hace comercialmente y luego se han empacado en bolsas Xtend®
repartidos de a cuatro frutos por bolsa todos con el mismo grado de madurez y
almacenándose luego a temperaturas de 4ºC±1 ºC; 8ºC±1 ºC y 20ºC±1 ºC.
Las frutas fueron proporcionadas por la empresa OCATI S.A. las cuales provenían de una
misma cosecha y fueron cultivados en la misma fecha. Los frutos provienen de la finca
Beltrán, ubicada en la Vereda Agudelo del municipio Santa Sofía (Boyacá), a 2387 msnm
y una temperatura promedio de 16°C. Después de ser cosechados, fueron transportados
en frio (8-10°C) al punto de distribución en Cota (Cundinamarca). Posteriormente, se
aplicó el producto antimicótico y fueron secados con ventiladores. Se refrigeraron a 10°C
y fueron almacenados en canastas y transportados a la planta de Vegetales del Instituto
de Ciencia y Tecnología de Alimentos (ICTA) en la Universidad Nacional de Colombia,
sede Bogotá, lugar donde fueron clasificados y adecuados para la experimentación.
5.3. Clasificación de acuerdo a color
Los frutos se caracterizaron determinando su grado de maduración observando el color
de su corteza en dos rondas de medición. En un primer término se hizo una
preclasificación a simple vista clasificando los frutos cuyas diferencias de color eran más
evidentes; de experiencias previas se tenía conciencia de los estados de madurez de
acuerdo a la tabla de colores presentada por Pinzón, I., et al (2007), en la cual todo el
proceso de maduración es dividido en 7 etapas (de 0 a 6), siendo 0 el estado más
inmaduro con una coloración verde y 6 un estado sobremaduro de coloración púrpura
oscuro. De acuerdo a lo reportado por el mismo autor, el estado 0, son frutos 100 %
verdes, el estado 5 son frutos 100% púrpura. De esta forma se seleccionaron frutos en el
15estado 3 que corresponden a un 40- 50% verde y 40–50% púrpura; un segundo grupo
25% verde – 75% purpura; y un tercer grupo 100% purpura.
Seguido a esto se hizo una clasificación definitiva utilizando un colorímetro. En los frutos
de color uniforme en toda su superficie se realizo una única medición. Para los frutos
donde el color no era uniforme en toda su superficie sino que se evidenciaron manchas se
realizaron dos determinaciones de color.
Los frutos que estaban fuera de los intervalos de clasificación fueron descartados del
ensayo.
Imagen 1. Tabla gráfica de estados de madurez de la Gulupa. Pinzón, I., et al 2007.
5.4. Tiempo de medición
El ensayo cubrió un periodo de 4 semanas (entre septiembre y octubre del año 2009)
haciéndose la extracción de muestras dos veces por semana. Las muestras se evaluaron
a través de HPLC para determinar la presencia y el cambio de ácidos funcionales de
interés (Ácido ascórbico, ácido málico, ácido oxálico y ácido cítrico). A demás se tomaron
las muestras para el día cero a 20 ºC para los tres estados de madurez.
Cada día de extracción se tomaron tres unidades experimentales por estado de madurez,
por cada temperatura totalizando 27 unidades experimentales y 54 bolsas. Esto se
aprecia mejor en la tabla 3.
16Temperatura
Madurez 20 ⁰C
50% 1 unid.
75% 1 unid.
100% 1 unid.
subtotal 3 unid.
total 3 unid.
Tabla 1. Número de unidades experimentales examinadas el día cero.
Temperatura
Madurez 4 ⁰C 8 ⁰C 20 ⁰C
50% 3 unid. 3 unid. 3 unid.
75% 3 unid. 3 unid. 3 unid.
100% 3 unid. 3 unid. 3 unid.
subtotal 9 unid. 9 unid. 9 unid.
total 27 unid.
Tabla 2. Número de unidades experimentales examinadas diariamente entre el día 1 y el
día 8.
Así entonces se examinaran 27 unidades experimentales diariamente lo que es 54 bolsas.
En este punto hay que mencionar que algunos de los frutos alcanzaron su estado de
senescencia en la parte final del desarrollo de la experimentación y estaban en tan malas
condiciones que se descartaron para realizar cualquier determinación; es así que en el día
seis de experimentación se descartaron los frutos de todos los estados de madurez a
temperatura ambiente y en los días siete y ocho se descartaron también los frutos de
todos los estados de madurez almacenados a 4 ⁰C.
unidades analizadas
Temperatura Día 1 -5 Día 6 Día 7 Día 8
4 ⁰C 9 (x5 días) 9 ninguna ninguna
8 ⁰C 9 (x5 días) 9 9 9
20 ⁰C 9 (x5 días) ninguna ninguna ninguna
Total 27 (x5 días) 18 9 9
Tabla 3. Número de unidades experimentales examinadas efectivamente en los días de
experimentación desde el día uno en adelante.
Así, en total se tuvieron muestras de 174 unidades experimentales.
En la siguiente tabla se encuentra la equivalencia entre los días de experimentación (días
del 1 al 8) y los días de seguimiento transcurridos desde el inicio del experimento.
17Días
Día No
transcurridos
Día 0 0
Día 1 3
Día 2 10
Día 3 14
Día 4 17
Día 5 21
Día 6 25
Día 7 28
Día 8 31
Tabla 4. Días de experimentación y números de días de seguimiento transcurridos.
En la sección de discusión de resultados se explicaran de forma más detallada las
razones por las cuales se descartaron los frutos a las temperaturas referidas en los días
finales del experimento.
5.5. Determinación de pérdida de humedad
La perdida de humedad para cada una de las unidades experimentales en todos los días
de medición fue registrada haciendo la diferencia entre los pesos inicial y registrado en el
día de medición, siendo esta diferencia la masa perdida hasta dicho día.
5.6. Determinación de cambios en Ácidos por HPLC
La determinación y cuantificación del contenido de ácidos orgánicos (ácido cítrico, ácido
ascórbico, ácido oxálico y ácido málico) se hizo por cromatografía liquida de alta
eficiencia utilizando un equipo HPLC con detector UV-VIS (Hernández et al., 2007 y
Barrera et al, 2008) realizando la extracción de la muestra con una fase móvil de ácido
fosfórico 5 mM (Protocolo Laboratorio de Fisiología Vegetal, Departamento de Biología
Universidad Nacional, especificaciones técnicas de la columna).
Los tratamientos propuestos se distribuyeron en un diseño completamente aleatorizado
de una vía (DCA) con arreglo factorial 3*2 y tres temperaturas de almacenamiento.
Se realizó un análisis de componentes principales para determinar el grado de correlación
existente entre las variables de respuesta evaluados.
5.7. Procedimiento de extracción
5.7.1. Extracción de la muestra del fruto
En primer término se procede a destacar las unidades experimentales a evaluar. Se hace
la identificación de cada unidad de acuerdo al estado de madurez inicial y a la
temperatura de almacenamiento que junto con el peso inicial se han registrado con
antelación. Luego de esto cada bolsa es pesada y se procede a realizar el proceso de
extracción. Los frutos son seccionados en dos mitades. El contenido interior (endocarpio,
pulpa) es entonces retirado separándolo por completo de la corteza para ser después
separado en jugo y semillas con ayuda de un filtro o exprimidor; el jugo es entonces
18colectado y depositado en recipientes cerrados cubiertos con papel aluminio y guardados
en congelación a – 80⁰(Matta, Arjona, Garner y Silva, 2006).
Figura 1. Extracción de la muestra del fruto.
5.7.2. Extracción de la muestra para el análisis por HPLC
Todo el desarrollo del procedimiento se realiza en condiciones de mínima presencia de
luz. La muestra se retira del congelador y se procede a pesar en una balanza analítica
una cantidad cercana a 1,5 – 2,0 gramos en un tubo falcon de 15 ml; el tubo se recubre
con papel aluminio para evitar el contacto del material con la luz. Después se agregan 12
ml de Acido Orto fosfórico 5 mM y se procede a homogenizar en Vortex durante un tiempo
de 15 minutos. Luego de esto la muestra es centrifugada a 6000 rpm y 4ºC durante 30
minutos. El tiempo de separación de las dos fases y la velocidad puede variar
dependiendo de la muestra a analizar. Al finalizar la centrifugación se observa la clara
formación de dos fases bien definidas (una fase liquida translucida y un precipitado
naranja); si esto no ocurre se centrifuga por otros 20 minutos más.
Después de esto se retira con micropipeta el sobrenadante cuidando de no mezclar las
fases. Entonces se filtra cada muestra en un filtro pre-jeringa de PTFE de 0,45 µm ó 0.2
19µm y 13 mm de diámetro y el filtrado se introduce en los viales para ser llevados luego al
equipo de HPLC. Luego de esto se hace le análisis por HPLC de acuerdo al analito:
Para Acido ascórbico en una muestra individual (Iwase, I., 2000)
Se hace el análisis a una longitud de onda de = 240 nm.
Para los demás ácidos:
Para ácidos orgánicos, se hace el análisis a una longitud de onda de = 207 nm.
Se hace dos veces el análisis cada 100 muestras para calibrar el equipo (Comunicación
personal).
Figura 2. Procedimiento de extracción y análisis de muestras HPLC.
5.8. Preparación de la fase móvil
5.8.1. Cálculos
La fase móvil, en este caso Ácido Fosfórico 5 mM también se utiliza como solvente de
extracción.
20Para preparar 1 litro (1000 mL) de solución 5 mM de Ácido O. fosfórico:
(cid:3117),(cid:3123)(cid:3282)
(cid:3051) (cid:2869)(cid:2868)(cid:2868)(cid:2868)
(cid:1829) (cid:3404) (cid:3117)(cid:3288)(cid:3287) (1)
(cid:3009)(cid:3119)(cid:3017)(cid:3016)(cid:3120)
(cid:2877)(cid:2875),(cid:2877)(cid:2875)(cid:3034)/(cid:3040)(cid:3042)(cid:3039)
(cid:1829) (cid:3404) 17,35(cid:1839)
(cid:3009)(cid:3119)(cid:3017)(cid:3016)(cid:3120)
(cid:2868),(cid:2868)(cid:2868)(cid:2873)(cid:3014) (cid:3051) (cid:2869)(cid:2868)(cid:2868)(cid:2868)(cid:3040)(cid:3039)
(cid:1848) (cid:3404) (cid:3404) 0,286 (cid:1865)(cid:1864) (cid:3404)286(cid:1864) (2)
(cid:2869)
(cid:2869)(cid:2875),(cid:2871)(cid:2873)(cid:3014)
Fase de limpieza de la columna (Ácido sulfúrico 5mM).
Según las recomendaciones del equipo (ver anexo C) debe hacerse una corrida con la
fase de limpieza al finalizar cada ciclo de medición.
Para preparar 1 litro (1000 mL) de solución 5 mM de Ácido Sulfúrico:
Se dispone de A. Sulfúrico 96 % p/p.
(cid:3125)(cid:3122)(cid:3282) (cid:3117),(cid:3124)(cid:3120)(cid:3282)
(cid:3051) (cid:3051) (cid:2869)(cid:2868)(cid:2868)(cid:2868)
(cid:1829) (cid:3404) (cid:3117)(cid:3116)(cid:3116)(cid:3282) (cid:3117)(cid:3288)(cid:3287) (3)
(cid:3009)(cid:3118)(cid:3020)(cid:3016)(cid:3120)
(cid:2877)(cid:2876),(cid:2868)(cid:2876)(cid:3034)/(cid:3040)(cid:3042)(cid:3039)
(cid:1829) (cid:3404) 18(cid:1839)
(cid:3009)(cid:3118)(cid:3020)(cid:3016)(cid:3120)
(cid:2868),(cid:2868)(cid:2868)(cid:2873)(cid:3014) (cid:3051) (cid:2869)(cid:2868)(cid:2868)(cid:2868)(cid:3040)(cid:3039)
(cid:1848) (cid:3404) (cid:3404) 0,278 (cid:1865)(cid:1864) (cid:3404) 278(cid:1864) (4)
(cid:2869)
(cid:2869)(cid:2876)(cid:3014)
5.8.2. Procedimiento
a. Preparación de la fase móvil y de extracción, solución 5 mM de A. Fosfórico
Se toman 286 l de ácido fosfórico (17,35 M) con micropipeta y se llevan a 1000 mL con
agua tipo HPLC en un balón aforado previamente purgado con agua tipo HPLC.
Se pasa entonces esta solución a un frasco de vidrio de 1000 mL previamente purgado
(2-3 veces) con la solución preparada y se lleva luego a refrigeración (se marca con el
nombre, la concentración y la fecha de preparación.
b. Preparación de la fase de limpieza, solución 5 mM de
Se toman 278 l de H2SO4 al 96% y se llevan a 1000 mL con agua tipo HPLC en un
balón aforado previamente purgado con agua tipo HPLC.
Se pasa entonces esta solución a un frasco de vidrio de 1000 mL previamente purgado
(2-3 veces) con la solución preparada y se lleva luego a refrigeración (se marca con el
nombre, la concentración y la fecha de preparación).
215.9. Especificaciones del equipo
(Equipo HPLC Laboratorio de Fisiología Vegetal, Departamento de Biología Universidad
Nacional sede Bogotá)
Columna Rezex ROA-Organic Acid H+
Dimensiones 300 x 7.8 mm
Especificaciones:
Tamaño de partícula: 8um
Resina de forma iónica: Hidrógeno
Soporte: Copolímero de divinilbenceno-estireno sulfonatado
Presión Máxima: 600 psi
Temperatura máxima: 85ºC
pH: 1-3
Fase móvil: 5mM
CONDICIONES
Flujo 0.5 mL/min
Temperatura de horno 35ºC
Para Acido Ascórbico:
Tiempo de corrida: 30 minutos
Tiempo de retención: 20.96 min.
Longitud de Onda de Detección: 240 nm
Para otros Ácidos:
Tiempo de corrida 30 minutos
Tiempos de retención
Acido Oxálico: 13.73 min.
Acido Cítrico: 16.93 min.
Acido Málico: 19.95 min.
Longitud de Onda de Detección: 207 nm
Más información acerca de las especificaciones del equipo puede encontrarse en el
Anexo C.
5.10. Curvas de calibración para ácidos
El equipo de HPLC reporta al final de su operación un grafico en donde se tienen
representados las diferentes sustancias por simas, cada una ubicada sobre el tiempo de
retención de la sustancia en la columna (sobre el eje x) y con unas áreas determinadas; el
área de cada domo o sima, está directamente relacionada con la concentración de la
sustancia en cuestión en la muestra analizada y para saber la ecuación que relaciona
estas dos variables es necesario obtener una representación grafica (una curva de
calibración) que se construye a partir de concentraciones conocidas de la sustancia que
reportan unas áreas determinados. Generalmente la relación entre las variables
22concentración y área es una ecuación de la forma y = ax + b representada como una
recta. Para este caso lo es.
Para cada uno de los ácidos evaluados se generaron curvas de calibración haciendo
pasar varias muestras de concentración conocida encontrando la relación entre el área y
la concentración. A continuación se presentan estos resultados:
a. Ácido Ascórbico
ASCÓRBICO
Muestra CONCENTRACIÓN AREA
N5 75,3 2681432
N4 57,12 1875550
N3 38,51 1209693
N2 19,9 658024
N1 1,28 92406
N0 0,5 26579
INTERCEPTO -10183,0
PENDIENTE 34291,0
r2 0,99400
Tabla 5. Datos de calibración A. Ascórbico.
Gráfica 3. Concentración vs. Área de gráfico, A. Ascórbico.
23b. Ácido Cítrico
CÍTRICO
Muestra CONCENTRACIÓN AREA
N5 5330,507 12621636
N4 4072,643 8804043
N3 2817,862 6221994
N2 1563,081 3947192
N1 308,3 1567144
INTERCEPTO 57800,0
PENDIENTE 2148,1
r2 0,98779
Tabla 6. Datos de calibración A. Cítrico.
Gráfica 4. Concentración vs. Área de gráfico, A. Cítrico.
c. Ácido Málico
MÁLICO
Muestra CONCENTRACIÓN AREA
N5 1093,71 1472654
N4 840,47 1217870
N3 587,23 916819
N2 333,99 580255
N1 80,74 258138
N0 31,3 159865
INTERCEPTO 15441,0
PENDIENTE 1239,8
r2 0,996
Tabla 7. Datos de calibración A. Málico.
24Gráfica 5. Concentración vs. Área de gráfico, A. Málico.
d. Ácido Oxálico
OXÁLICO
Muestra CONCENTRACIÓN AREA
N5 106,46 2019870
N4 81,39 1503789
N3 56,33 1125815
N2 31,26 621770
N1 6,2 235922
N0 1,6 119979
NTERCENPTO 97064,0
PENDIENTE 17808,0
r2 0,99748
Tabla 8. Datos de calibración A. Oxálico.
25Gráfica 6. Concentración vs. Área de gráfico, A. Oxálico.
La concentración que se determina a través de estas graficas es la concentración de cada
acido en la fase de extracción; en este caso la fase de Ácido Fosfórico 5 mM. Esta
concentración en ppm es más específicamente para cada ácido:
(cid:1865)(cid:1859)
(cid:3427)Á(cid:1855)(cid:1861)(cid:1856)(cid:1867) (cid:3431) (cid:1527) Á(cid:3030)(cid:3036)(cid:3031)(cid:3042)(cid:3415)
(cid:3007)(cid:3028)(cid:3046)(cid:3032) (cid:3032)(cid:3051)(cid:3047)(cid:3045)(cid:3028)(cid:3030)(cid:3030)(cid:3036)ó(cid:3041) (cid:1864)
(cid:3007)(cid:3028)(cid:3046)(cid:3032) (cid:3032)(cid:3051)(cid:3047)(cid:3045)(cid:3028)(cid:3030)(cid:3030)(cid:3036)ó(cid:3041)
Sin embrago, para obtener la concentración de cada ácido en la muestra de fruta debe
tenerse en cuenta el volumen de fase de extracción utilizado y el peso de la muestra:
(cid:3034)
(cid:3427)Á(cid:1855)(cid:1861)(cid:1856)(cid:1867) (cid:3431)(cid:3404) (cid:3040)(cid:3034) Á(cid:3278)(cid:3284)(cid:3279)(cid:3290) (cid:1499)(cid:3051)(cid:3040)(cid:3013)(cid:3255)(cid:3276)(cid:3294)(cid:3280) (cid:3279)(cid:3280) (cid:3280)(cid:3299)(cid:3295)(cid:3293)(cid:3276)(cid:3278)(cid:3278)(cid:3284)(cid:3290)(cid:3289)(cid:1499)(cid:2869)(cid:2868)(cid:2868)(cid:2868) (cid:3415)(cid:3012)(cid:3034) (cid:1527) (cid:1865)(cid:1859) Á(cid:3030)(cid:3036)(cid:3031)(cid:3042)(cid:3415) (5)
(cid:3007)(cid:3045)(cid:3048)(cid:3047)(cid:3028) (cid:3039)(cid:3255)(cid:3276)(cid:3294)(cid:3280) (cid:3279)(cid:3280) (cid:3280)(cid:3299)(cid:3295)(cid:3293)(cid:3276)(cid:3278)(cid:3278)(cid:3284)ó(cid:3289) (cid:2869)(cid:2868)(cid:2868)(cid:2868)(cid:3040)(cid:3039)(cid:3415) (cid:3039) (cid:3051)(cid:3034)(cid:3255)(cid:3293)(cid:3296)(cid:3295)(cid:3276) (cid:1837)(cid:1859) (cid:3007)(cid:3045)(cid:3048)(cid:3047)(cid:3028)
En donde:
(cid:1876)(cid:1865)(cid:1864) : El volumen de fase de extracción utilizado en ml, en este caso 12 ml
(cid:3007)(cid:3028)(cid:3046)(cid:3032) (cid:3031)(cid:3032) (cid:3032)(cid:3051)(cid:3047)(cid:3045)(cid:3028)(cid:3030)(cid:3030)(cid:3036)ó(cid:3041)
de Ácido Fosfórico 5mM.
: La masa de la muestra de fruta utilizada en gramos.
Ejemplo:
Una de las muestras analizadas el día cero del experimento tenía las siguientes
características:
26Día de seguimiento 0
% de madurez inicial 50
Temperatura (⁰C) 20
Masa muestra (g) 1,9697
Área de gráfico 64727
Para obtener la concentración en la fase de extracción de Acido Ascórbico en esta
muestra se utiliza la ecuación que aparece en la gráfica 3, quedando:
(cid:3427)Á(cid:1855)(cid:1861)(cid:1856)(cid:1867) (cid:3431) (cid:1527)(cid:2874)(cid:2872)(cid:2875)(cid:2870)(cid:2875)(cid:2879)(cid:4666)(cid:2879)(cid:2869)(cid:2868)(cid:2869)(cid:2876)(cid:2871)(cid:4667) (cid:3404) 2,18(cid:1865)(cid:1859) Á(cid:3030)(cid:3036)(cid:3031)(cid:3042)(cid:3415) (6)
(cid:3007)(cid:3028)(cid:3046)(cid:3032) (cid:3032)(cid:3051)(cid:3047)(cid:3045)(cid:3028)(cid:3030)(cid:3030)(cid:3036)ó(cid:3041) (cid:2871)(cid:2872)(cid:2870)(cid:2877)(cid:2869) (cid:1864) (cid:3007)(cid:3028)(cid:3046)(cid:3032) (cid:3032)(cid:3051)(cid:3047)(cid:3045)(cid:3028)(cid:3030)(cid:3030)(cid:3036)ó(cid:3041)
Ahora bien, para conocer la concentración de A. Ascórbico en la muestra de fruta se hace
uso de la ecuación (1) así:
(cid:3034)
(cid:3427)Á(cid:1855)(cid:1861)(cid:1856)(cid:1867) (cid:3431) (cid:3404) 2,18 (cid:3040)(cid:3034) Á(cid:3278)(cid:3284)(cid:3279)(cid:3290) (cid:1499)(cid:2869)(cid:2870)(cid:3040)(cid:3013)(cid:3255)(cid:3276)(cid:3294)(cid:3280) (cid:3279)(cid:3280) (cid:3280)(cid:3299)(cid:3295)(cid:3293)(cid:3276)(cid:3278)(cid:3278)(cid:3284)(cid:3290)(cid:3289)(cid:1499) (cid:2869)(cid:2868)(cid:2868)(cid:2868) (cid:3415)(cid:3012)(cid:3034) (cid:3404) 13,3(cid:1865)(cid:1859) Á(cid:3030)(cid:3036)(cid:3031)(cid:3042)(cid:3415)
(cid:3007)(cid:3045)(cid:3048)(cid:3047)(cid:3028) (cid:3039)(cid:3255)(cid:3276)(cid:3294)(cid:3280) (cid:3279)(cid:3280) (cid:3280)(cid:3299)(cid:3295)(cid:3293)(cid:3276)(cid:3278)(cid:3278)(cid:3284)ó(cid:3289) (cid:2869)(cid:2868)(cid:2868)(cid:2868)(cid:3040)(cid:3039)(cid:3415) (cid:3039) (cid:2869),(cid:2877)(cid:2874)(cid:2877)(cid:2875)(cid:3034)(cid:3255)(cid:3293)(cid:3296)(cid:3295)(cid:3276) (cid:1837)(cid:1859) (cid:3007)(cid:3045)(cid:3048)(cid:3047)(cid:3028)
(7)
De esta forma se procedió para calcular las concentraciones de cada ácido en cada una
de las muestras analizadas.
276
RESULTADOS OBTENIDOS
6.1. Cambios de peso por pérdida de humedad
El empaque tipo Xtend permite cierta permeabilidad al vapor de agua lo que sumado a la
diferencia entre la presión parcial del agua en el medio ambiente PH2O y a la presión de
saturación del agua en el fruto Psat siendo mayor esta ultima permite la transferencia de
masa (en este caso de agua) por la difusión de esta a través del empaque plástico por la
diferencia de concentración existente entre el fruto y el ambiente que lo rodea.
La perdida de agua, va produciendo en la corteza del fruto una especie de “arrugamiento”
en donde el fruto pierde tamaño y su corteza se va arrugando; este fenómeno no
compromete en gran manera, al menos hasta que el fruto entra claramente en el estado
de senescencia, el contenido nutricional del fruto y para este caso especifico el contenido
de ácidos funcionales pero debido a que las características sensoriales del producto se
ven claramente afectadas y desmejoradas es de gran importancia considerarlo.
Las siguientes graficas muestran los cambios y perdidas de peso en el transcurso del
ensayo para los tres estados de maduración; los datos correspondientes a estas graficas
se encuentran en el anexo A.
Madurez de 50 %
14,0
% perdida de masa
4 ºC
12,0 8 ºC
20 ºC
10,0
8,0
6,0
4,0
2,0
0,0
0 10 14 17 21 25 28 31
DÍA SEGUIMIENTO
Gráfica 7. Porcentaje de pérdida de masa (humedad) para los frutos almacenados con un
estado de madurez inicial de 50 %
28Madurez de 75 %
Gráfica 8. Porcentaje de pérdida de masa (humedad) para los frutos almacenados con un
estado de madurez inicial de 75 %
Madurez de 100 %
Gráfica 9. Porcentaje de pérdida de masa (humedad) para los frutos almacenados con un
estado de madurez inicial de 100 %
29Las pérdidas de masa paras los frutos con porcentajes de madurez iníciales de 75 y 100
% y temperatura de conservación de 20 ºC, eran cercanas al 30 % hacia el día 21 (día 5
de medición) mientras las de los frutos con una madurez inicial de 50 % ya llegaban al 14
% hacia el mismo día; estas pérdidas de masa son económicamente insostenibles y por
esta razón no tenia caso continuar la experimentación con estos frutos por lo que se
descartaron. Se hablara más a fondo de esto en el Capitulo 7 de Análisis de Resultados.
Se descartaron igualmente hacia el día 25 (día 6 de medición) los frutos conservados a 4
ºC debido a que se comenzaron a notar daños en la corteza de los frutos ocasionados por
la baja temperatura de refrigeración (daños por frio) (Paull y Chen, 2008).
6.2. Ácidos Funcionales
A partir de los datos provenientes de todas las unidades experimentales analizadas se
generaron las tablas consolidadas que expresan las valores de concentración de cada
acido en las muestras en cada uno de los días de seguimiento, para cada temperatura y
cada estado de madurez inicial.
a. 50 % de madurez inicial
Día Temperatura Ascórbico Cítrico Málico Oxálico
% Maduración Día
Seguimiento (ºC) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg)
50 0 0 13,31 37549,55 7135,52 233,13
50 1 3 4 64,04 35558,74 4841,81 276,69
50 2 10 4 18,37 33925,21 3967,86 234,59
50 3 14 4 39,21 30193,36 3630,54 201,38
50 4 17 4 4,48 23050,20 3647,33 255,12
50 5 21 4 4,49 26839,73 3301,55 236,18
50 6 25 4 4,43 26389,48 2763,96 205,20
Día Temperatura Ascórbico Cítrico Málico Oxálico
% Maduración Día
Seguimiento (ºC) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg)
50 0 0 13,31 37549,55 7135,52 233,13
50 1 3 8 20,52 42367,33 4597,37 257,21
50 2 10 8 18,31 39556,42 4000,91 250,25
50 3 14 8 17,03 34623,92 4513,34 208,40
50 4 17 8 5,49 33051,89 4469,99 207,14
50 5 21 8 5,31 31989,51 4644,71 229,45
50 6 25 8 36,28 34121,78 4148,33 247,20
50 7 28 8 5,10 28768,29 4902,40 233,63
50 8 31 8 24,16 29265,29 3976,82 235,40
30Día Temperatura Ascórbico Cítrico Málico Oxálico
% Maduración Día
Seguimiento (ºC) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg)
50 0 0 13,31 37549,55 7135,52 233,13
50 1 3 20 53,25 29231,11 6923,04 201,30
50 2 10 20 32,89 24551,82 6246,94 180,36
50 3 14 20 28,18 16854,53 3187,96 143,47
50 4 17 20 4,90 14913,44 3413,07 127,16
50 5 21 20 5,88 5049,72 1758,12 128,97
Tabla 9. Concentraciones para frutos de 50 % de madurez inicial
Gráfica 10. Concentraciones de A. Ascórbico para frutos de 50 % de madurez inicial.
Gráfica 11. Concentraciones de A. Cítrico para frutos de 50 % de madurez inicial.
31Gráfica 12. Concentraciones de A. Málico para frutos de 50 % de madurez inicial.
Gráfica 13. Concentraciones de A. Oxálico para frutos de 50 % de madurez inicial.
b. 75 % de madurez inicial
Día Temperatura Ascórbico Cítrico Málico Oxálico
% Maduración Día
Seguimiento (ºC) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg)
75 0 0 8,79 33582,38 6733,69 280,41
75 1 3 4 61,44 34088,60 4595,82 234,47
75 2 10 4 13,07 34249,26 3757,93 215,44
75 3 14 4 13,45 32817,59 3285,49 241,90
75 4 17 4 10,75 33217,67 3544,69 222,81
75 5 21 4 4,93 28243,30 3409,04 241,18
75 6 25 4 39,95 30443,34 3596,30 245,08
32Día Temperatura Ascórbico Cítrico Málico Oxálico
% Maduración Día
Seguimiento (ºC) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg)
75 0 0 8,79 33582,38 6733,69 280,41
75 1 3 8 15,66 30805,66 6456,84 204,17
75 2 10 8 17,70 30565,97 6260,03 211,71
75 3 14 8 28,06 24036,60 4365,36 186,19
75 4 17 8 6,17 23208,46 5388,89 217,94
75 5 21 8 5,71 24048,29 5864,27 225,86
75 6 25 8 22,36 18397,88 5062,59 175,73
75 7 28 8 5,95 19839,16 5493,83 184,16
75 8 31 8 9,45 19239,96 5062,35 202,51
Día Temperatura Ascórbico Cítrico Málico Oxálico
% Maduración Día
Seguimiento (ºC) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg)
75 0 0 20 8,79 33582,38 6733,69 280,41
75 1 3 20 43,69 29680,73 4562,29 214,44
75 2 10 20 25,07 20216,70 5099,23 187,38
75 3 14 20 15,74 19439,12 3205,56 187,65
75 4 17 20 6,90 16846,70 3211,30 194,43
75 5 21 20 5,10 11407,89 2531,04 155,72
Tabla 10. Concentraciones para frutos de 75 % de madurez inicial
Gráfica 14. Concentraciones de A. Ascórbico para frutos de 75 % de madurez inicial.
33Gráfica 15. Concentraciones de A. Cítrico para frutos de 75 % de madurez inicial.
Gráfica 16. Concentraciones de A. Málico para frutos de 75 % de madurez inicial.
Gráfica 17. Concentraciones de A. Oxálico para frutos de 75 % de madurez inicial.
34c. 100 % de madurez inicial
Día Temperatura Ascórbico Cítrico Málico Oxálico
% Maduración Día
Seguimiento (ºC) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg)
100 0 0 36,77 20172,35 5602,19 161,34
100 1 3 4 61,96 29113,54 6419,73 215,64
100 2 10 4 29,72 29332,07 5782,27 211,52
100 3 14 4 20,77 27571,63 3610,92 199,33
100 4 17 4 6,11 28047,68 5008,47 217,05
100 5 21 4 4,68 24268,00 4452,56 214,86
100 6 25 4 16,42 23814,62 4167,18 215,50
Día Temperatura Ascórbico Cítrico Málico Oxálico
% Maduración Día
Seguimiento (ºC) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg)
100 0 0 36,77 20172,35 5602,19 161,34
100 1 3 8 24,49 25372,23 7509,82 232,58
100 2 10 8 12,78 23851,91 5582,77 209,27
100 3 14 8 10,66 23897,88 5626,36 191,63
100 4 17 8 9,34 23466,54 5901,60 212,25
100 5 21 8 5,94 24111,26 5956,26 223,23
100 6 25 8 29,04 19191,02 4817,82 194,28
100 7 28 8 2,07 15555,41 5035,27 178,50
100 8 31 8 25,45 21190,60 4142,39 182,33
Día Temperatura Ascórbico Cítrico Málico Oxálico
% Maduración Día
Seguimiento (ºC) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg) (mg/Kg)
100 0 0 36,77 20172,35 5602,19 161,34
100 1 3 20 57,90 22630,75 6726,23 179,42
100 2 10 20 32,29 20725,77 5535,77 200,40
100 3 14 20 30,71 14185,72 2246,78 130,69
100 4 17 20 2,75 8495,38 1740,53 137,19
100 5 21 20 2,58 7998,48 2019,63 134,07
Tabla 11. Concentraciones para frutos de 100 % de madurez inicial.
35Gráfica 18. Concentraciones de A. Ascórbico para frutos de 100 % de madurez inicial.
Gráfica 19. Concentraciones de A. Cítrico para frutos de 100 % de madurez inicial.
Gráfica 20. Concentraciones de A. Málico para frutos de 100 % de madurez inicial.
36Gráfica 21. Concentraciones de A. Oxálico para frutos de 100 % de madurez inicial.
Las observaciones y análisis de las gráficas y tablas anteriores se hacen en el siguiente
capítulo.
377
ANÁLISIS DE RESULTADOS
Peso y humedad
Como ya se ha explicado de alguna forma en el capítulo de resultados, debido a la gran
pérdida de masa (incluso del 30 %) como agua evaporada que permeo el empaque de
experimentación, se descartaron los frutos almacenados a 20 º C (Temperatura Ambiente)
para el día 6 (transcurridos 25 días). Teniendo en cuenta la diferencia existente entre la
humedad relativa (H) del ambiente, y la actividad de agua (aw) del fruto favorable a esta
última, existe gradiente de concentración de agua que permite a esta por un fenómeno de
transferencia de masa conocido como difusión salir al exterior (yendo del punto de mayor
concentración al de menor concentración y en este caso hacia el ambiente); en exterior
del fruto, el aire en movimiento va arrastrando el agua que sale del fruto lo que permite
que el gradiente de concentración se mantenga, fenómeno conocido como convección.
Todo lo anterior, depende de la temperatura en que se encuentra el fruto, la humedad
relativa y flujo y velocidad del aire que se generan en el exterior (Diaz-Perez, J., et. al.,
2000). Entre mayor sea el gradiente, se va a generar una pérdida mayor de agua en el
tiempo lo cual se puede ver por una reducción en el peso total (Pachón, L., et. al., 2006).
Las razones de esto son las siguientes: si bien el contenido nutricional puede no verse
mayormente afectado la gran pérdida de agua no es nada rentable para el productor y el
comercializador; El contenido de agua en estas frutas es de 80 % aproximadamente
(Pinzón et al, 2007) viéndose reducido a cerca del 57 % en el caso de los frutos que se
encontraban a 20 ºC con una pérdida del 30 % del peso del fruto. La temperatura de 20
ºC por supuesto no es la adecuada para el almacenamiento de los frutos; además, el
arrugamiento de la corteza hace el producto menos atractivo al consumidor. También a
partir del día 7 (transcurridos 28 días de seguimiento) se descartaron los frutos
almacenados a 4 ºC porque se comenzaron a evidenciar daños en la corteza en forma de
manchas oscuras y otras alteraciones, lo que concuerda con Pruthi, (1963) que indica que
hay daños por frio significativos por debajo de 6,5 ºC; estos daños provocan que aquellos
productos pierdan parte de su precio por su desmejoramiento sensorial. Debe tenerse en
cuenta que este proyecto tiene como principal finalidad el encontrar la temperatura y el
estado de madurez inicial optimo para el almacenamiento de Gulupa que permita el
menor cambio en todas sus propiedades durante el mayor tiempo posible mas que
simplemente ver un cambio de ácidos a través del tiempo en determinadas condiciones.
Concentración de Ácidos
La concentración de todos los ácidos decrece muy rápidamente en los frutos que fueron
almacenados a 20 ºC, temperatura ambiente local; a esta temperatura las reacciones
internas en el fruto no se detienen, produciéndose la descomposición de los ácidos de
interés en el fruto (Shiomi et al. 1996). Independientemente del estado de madurez inicial,
el decrecimiento de la concentración de ácidos es muy alto por lo que como ya era de
suponerse el almacenamiento a la temperatura ambiente sea completamente inadecuado
(además de las enormes pérdidas de humedad señaladas antes. Con respecto a las
diferencias en la concentración de ácidos entre los tres estados de madurez evaluados, a
nivel general y como ya ha sido estudiado (Guzmán y Segura, 1989) (Shiomi, 1996) a
38nivel general el contenido de los ácidos es menor cuando el estado de madurez es mayor;
esta tendencia tiene su excepción en el caso del acido ascórbico donde la concentración
de este aparece mayor en el caso del estado de madurez del 100 % con respecto a los
otros dos en el día de inicio del experimento.
Ácido Ascórbico
El comportamiento del ácido ascórbico fue moderadamente errático. Es posible atribuir la
disminución de su contenido en las muestras analizadas, como el resultado del efecto del
tratamiento o eventualmente considerar que algunos niveles se vieron afectos por la
termosensibilidad de los extractos, En todos los casos el contenido de A. Ascórbico se
elevó por encima de 60 mg/Kg hacia el día 3 para luego decrecer en el resto del tiempo
de la evaluación; esto, para la condición de 4° C especialmente. Esta respuesta indica un
aumento de la actividad metabólica en los frutos, durante el período de poscosecha. En
las otras dos condiciones también se presentó un aumento en todos los estados de
madurez. En general a º8 C, el contenido de ácido disminuyo más rápidamente para
hacerse no detectable hacia el día 21; No se descarta, que en la condición de 4 o C la
respuesta del contenido de ácido ascórbico, también pueda verse influido por el efecto de
un posible daño por frío (Pruthi, 1963), teniendo en cuenta el carácter tropical de la
gulupa.
Ácido Cítrico
Para el A. Cítrico, la concentración de este es superior para el estado de madurez inicial
de 50, luego de 75 y la más baja de 10 %. A 4 ºC la concentración de ácido decrece
levemente con el tiempo terminando ligeramente por debajo de los valores iníciales para
los estados de madurez de 50 y 75 % en el día de seguimiento 25 ultimo para esta
temperatura; en cuanto a las muestras de madurez inicial de 100 % se presenta un
aumento pero luego el mismo comportamiento que en los otros dos casos. A 20 ºC se
presenta el decrecimiento ya enunciado y como esta es una tendencia general para todos
los ácidos no se hablara más de esta temperatura.
A 8 ºC para 50 y 100 % de madurez inicial se ve un aumento de la concentración y luego
un decrecimiento leve pero sostenido (más regular en el caso de 50 %); para 75 % de
madurez inicial, hay un decrecimiento un poco mayor. La concentración de A. Cítrico se
mantiene menor que a 8ºC que ha 4 ºC excepto para 50 % de madurez inicial que deja los
valores más altos al final del experimento (cerca de 30000 mg/Kg).
Para este acido en particular, esta temperatura (8ºC) y este estado de madurez inicial (50
%) parecen ser los que ofrecen mejores resultados. Seguiría el estado de madurez de 75
% a la misma temperatura de almacenamiento con resultados menos satisfactorios
aunque sustancialmente mejores que los de 100 % de madurez inicial a 8 ºC.
No hay que decir que el contenido de Ácido Cítrico en la Gulupa es verdaderamente
significativo en comparación con los otros ácidos (entre 30 y 50 veces más que la
concentración de A. Ascórbico por ejemplo).
Ácido Málico
Para el Ácido Málico se presentan algunos comportamientos vistos en los otros dos
ácidos. La concentración a 4 ºC permanece inferior a la concentración a 8 ºC e incluso en
algunos de los días iníciales de seguimiento para una madurez inicial de 50 y 75 %
39inferior a la concentración a 20 ºC; puede inferirse como una temperatura de
almacenamiento tan baja puede llegara a favorecer la descomposición del A. Málico.
En general a 8 ºC de temperatura de almacenamiento puede verse un leve descenso en
la concentración de ácido un poco mayor para 50 % de madurez inicial que termina con
valores de 5000, 4000 y 3000 mg/Kg de A. Málico para los estados de madurez inicial de
75, 50 y 100 % respectivamente. En este caso, para el A. Málico, la temperatura de
almacenamiento de 8 ºC y el estado de madurez inicial de 75 % parecen ser los más
satisfactorios por dos razones: tiene la menor perdida de concentración de acido y termina
con el mayor contenido de e.ste; El estado de madurez de 50 % le seguiría y el de 100 %
es poco recomendable.
Ácido Oxálico
Para este ácido, como para el A. Cítrico se observa un aumento en la concentración hacia
el día tres de seguimiento, seguido de un leve descenso en el resto del experimento en
los estados de madurez inicial de 50 y 100 %; este comportamiento se da a las tres
temperaturas de almacenamiento. Las concentraciones de A. Oxálico para las
temperaturas de 4 y 8 ºC permanecen muy cercanas a lo largo del experimento (esto
claro, hasta el día 25 de seguimiento cuando se descartan los frutos almacenados a 4 ºC)
siendo ligeramente superior la concentración a 4 ºC para 50 % de madurez inicial y
ligeramente superior a 8 ºC para 75 y 100 % de madurez inicial. A pesar de las
fluctuaciones que se observan en medio de la grafica, a 8 ºC y 50 % de madurez inicial se
termina con la concentración más elevada (más de 230 mg/kg) con una pérdida
prácticamente nula. Como en casos anteriores los resultados a 75 % de madurez inicial y
8 ºC son algo menos satisfactorios y para 100 % de madurez inicial más pobres aun.
Variables recomendables
De lo consultado en la literatura se sabe que la Gulupa puede ser almacenada por un
tiempo de alrededor de 30 días a una temperatura cercana a 8 ºC (Paull y Chen, 2008),
variables que son las más recomendables. Esta combinación tiempo temperatura puede
verse confirmada en este trabajo al ver los resultados de pérdida de humedad y descenso
en la concentración de los cuatro ácidos analizados.
Ahora el análisis lleva hacia establecer el porcentaje de madurez inicial en el fruto en el
momento de ser almacenado
De los análisis hechos para el A. Cítrico y el A. Oxálico se encuentra que la mayor
concentración y el menor decrecimiento de esta para cada acido se tienen para una
madurez inicial de 50 %; En el caso del A. Ascórbico también se tiene la concentración
más alta para este estado de madurez inicial (teniendo en cuenta lo señalado para este
ácido) y en el caso del A. Málico aunque el estado de madurez inicial de 75 % ofrece un
resultado más satisfactorio , 50 % de madurez inicial esta cerca también.
De lo anterior podemos ver que un estado de madurez inicial de 50 % en los frutos
combinado a una temperatura de almacenamiento de 8 ºC conserva el contenido de
ácidos más satisfactoriamente.
Lo anterior debe unirse a la determinación de otras variables que den una panorama más
amplio en cuanto a la conservación de otros sustancias claves nutricionalmente y
sensorialmente también; sin embargo, para los alcances de este trabajo se ha encontrado
una combinación, estado de madurez inicial – temperatura de almacenamiento – tiempo
que permiten la mejor conservación de los ácidos preponderantes en la Gulupa.
40Futuros ensayos
Este proyecto como se menciono al inicio este englobado en uno mucho mayor que
pretende un completo estudio de todas las variables implicadas e implicables en el
almacenamiento de la Gulupa para ser exportada. Al pensar en cuáles son las variables
que deben estudiarse en el futuro, la primera debería ser la pérdida de masa en forma de
agua; aun a 8 ºC esta es bastante significativa y debería pensarse en un medio de
disminuirla a niveles más aceptables. La modificación en la permeabilidad del empaque
Xtend disminuyendo la capacidad del agua de pasar a través de este (el coeficiente de
difusión) es una primera medida, lo cual en la actualidad ya se está estudiando en este
grupo de trabajo. Establecer una atmosfera modificada con una concentración de vapor
de agua igual a la actividad de agua aw en el fruto es una segunda medida que debe
examinarse en profundidad para no incurrir en problemas microbiológicos que afecten el
fruto (este tema ya está siendo abordado en muchas partes y es posible encontrar
bastante literatura al respecto).
418
CONCLUSIONES
1. El contenido de ácido cítrico es el de mayor abundancia en la Gulupa, mientras el
contenido de ácido ascórbico es el menos de los ácidos presentes de la fruta y el
que experimenta mayor degradación por su sensibilidad a las condiciones
ambientales.
2. La combinación de la temperatura de almacenamiento de 8 ºC y el estado de
madurez inicial de 50 % son las que permiten la mejor conservación de los ácidos
estudiados en los frutos de gulupa analizados, siendo el tiempo de conservación
de 31 días.
3. Un estado de madurez inicial de 75 % además de una temperatura de
almacenamiento de 8 ºC aun permite una conservación de los ácidos estudiados
aceptable, mientras que un estado de madurez inicial de 100 % no es
recomendable, ya que la duración de la fruta es muy corta.
429
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45ANEXOS
46A
TABLAS DE CAMBIO DE PESO
A.1. Madurez de 50%
Día
% Maduración Día Temperatura (ºC) ∆ masa (g) % peso perdido
Seguimiento
50 0 0 0,16 0,1
50 2 10 4 2,07 1,25
50 3 14 4 1,37 0,83
50 4 17 4 2,03 1,23
50 5 21 4 2,15 1,30
50 6 25 4 1,96 1,19
Día
% Maduración Día Temperatura (ºC) ∆ masa (g) % peso perdido
Seguimiento
50 0 0 0,16 0,10
50 2 10 8 4,11 2,49
50 3 14 8 4,62 2,80
50 4 17 8 4,45 2,70
50 5 21 8 2,15 1,30
50 6 25 8 7,25 4,39
50 7 28 8 8,68 5,26
50 8 31 8 4,13 2,50
Día
% Maduración Día Temperatura (ºC) ∆ masa (g) % peso perdido
Seguimiento
50 0 0 0,16 0,10
50 2 10 20 12,68 7,68
50 3 14 20 19,10 11,58
50 4 17 20 21,23 12,87
50 5 21 20 16,96 10,28
47A.2. Madurez de 75%
Día
% Maduración Día Temperatura (ºC) ∆ masa (g)
Seguimiento
75 0 0 0,11
75 2 10 4 1,82
75 3 14 4 2,72
75 4 17 4 4,02
75 5 21 4 3,03
75 6 25 4 5,17
Día
% Maduración Día Temperatura (ºC) ∆ masa (g)
Seguimiento
75 0 0 0,11
75 2 10 8 3,90
75 3 14 8 4,62
75 4 17 8 5,19
75 5 21 8 8,83
75 6 25 8 11,11
75 7 28 8 9,54
75 8 31 8 10,09
Día
% Maduración Día Temperatura (ºC) ∆ masa (g)
Seguimiento
75 0 0 0,11
75 2 10 20 12,17
75 3 14 20 21,90
75 4 17 20 19,15
75 5 21 20 27,81
48A.3. Madurez de 100%
Día
% Maduración Día Temperatura (ºC) ∆ masa (g)
Seguimiento
100 0 0 0,14
100 2 10 4 2,43
100 3 14 4 3,11
100 4 17 4 2,86
100 5 21 4 3,77
100 6 25 4 4,18
Día
% Maduración Día Temperatura (ºC) ∆ masa (g)
Seguimiento
100 0 0 0,14
100 2 10 8 4,77
100 3 14 8 6,58
100 4 17 8 6,32
100 5 21 8 6,68
100 6 25 8 8,99
100 7 28 8 10,01
100 8 31 8 10,39
Día
% Maduración Día Temperatura (ºC) ∆ masa (g)
Seguimiento
100 0 0 0,14
100 2 10 20 13,15
100 3 14 20 17,68
100 4 17 20 21,48
100 5 21 20 27,40
49B
TABLA DE RESULTADOS PARA CADA UNIDAD EXPERIMENTAL
Se analizaron 174 unidades experimentales en 9 días de medición contando el día cero;
cada unidad está identificada por un código, explicado de la siguiente forma:
Diagrama de código de identificación.
En este caso el código informa que se trata de la unidad 3, extraída el día 2 (10 días de
seguimiento del experimento), estado de madurez inicial de 75 % y temperatura de
almacenamiento de 8 ºC.
50ascórbico 20,9 19,8
MUESTRA Tr cítrico Tr 16,8 min málico Tr oxálico Tr 13,6 min
(240 nm) min min
Conc. Conc. Conc. Conc. Conc. Conc. Conc.
Número peso (g) Código Área Área Área Área Conc. (mg/Kg)
(mg/L) (mg/Kg) (mg/L) (mg/Kg) (mg/L) (mg/Kg) (mg/L)
1 1,9697 10050201 64727 2,18 13,31 13297546 6370,67 38812,04 1467590 1059,15 6452,65 778523 38,27 233,13
2 1,9056 10075201 37662 1,40 8,79 11513403 5473,65 34468,80 1341217 957,22 6027,85 890036 44,53 280,40
3 1,9549 10100201 195210 5,99 36,77 7117005 3263,24 20031,12 1146976 800,56 4914,15 565115 26,28 161,33
4 1,6079 11050201 271693 8,22 61,35 9034538 4227,33 31549,19 1265411 896,08 6687,58 620758 29,41 219,47
5 1,5243 11050202 320083 9,63 75,82 9162362 4291,60 33785,44 1261688 893,08 7030,72 543576 25,07 197,39
6 1,682 11050203 98312 3,16 22,57 7024728 3216,84 22950,12 942040 635,26 4532,21 563920 26,22 187,03
7 1,9092 11050081 202453 6,20 38,97 7174536 3292,16 20692,41 695710 436,59 2744,10 521711 23,85 149,88
8 1,7175 11050082 0,30 2,07 13083546 6263,08 43759,50 1035105 710,33 4962,98 1026201 52,17 364,54
9 11050083
10 1,7104 11050041 540632 16,06 112,70 ‐2210,23 ‐873,77 ‐38,24
11 1,6318 11050042 249715 7,58 55,74 11081187 5256,34 38654,28 911031 610,25 4487,71 741128 36,17 265,96
12 1,5736 11050043 315133 9,49 72,34 9460554 4441,52 33870,26 726201 461,18 3516,87 768240 37,69 287,41
13 1,7406 11075201 507220 15,09 104,02 9305811 4363,72 30084,24 1437956 1035,25 7137,17 650986 31,10 214,44
14 1,6222 11075202 29094 1,15 8,47 ‐315,03 ‐2330,40 1202825 845,60 6255,22 508447 23,10 170,88
15 1,6557 11075203 363195 10,89 78,92 354794 ‐136,65 ‐990,39 364455 169,41 1227,84 284248 10,51 76,18
16 1,9021 11075081 65560 2,21 13,93 7308687 3359,61 21195,17 1268503 898,57 5668,94 586070 27,46 173,24
17 1,4161 11075082 26663 1,07 9,11 9095522 4257,99 36082,12 868231 575,73 4878,75 601002 28,30 239,80
18 1,5087 11075083 64803 2,19 17,39 9636993 4530,23 36032,85 1132447 788,84 6274,31 543633 25,08 199,45
19 1,9323 11075041 304573 9,18 57,00 13254910 6349,24 39430,13 1029697 705,96 4384,19 867389 43,26 268,63
20 1,6154 11075042 249254 7,57 56,20 9578836 4500,99 33435,61 723667 459,13 3410,68 568836 26,49 196,79
21 1,5418 11075043 303155 9,14 71,12 8665414 4041,74 31457,32 726527 461,44 3591,45 641578 30,58 237,98
22 1,5325 11100201 213234 6,52 51,02 4333553 1863,78 14594,04 814999 532,80 4172,00 367823 15,20 119,05
23 1,5986 11100202 313800 9,45 70,92 8213348 3814,45 28633,45 1366594 977,69 7339,10 636299 30,28 227,30
24 2,1002 11100203 300474 9,06 51,76 9007996 4213,98 24077,62 1523224 1104,02 6308,09 695190 33,59 191,91
25 1,4447 11100081 144989 4,53 37,59 6120061 2762,00 22941,76 1190470 835,64 6940,98 694196 33,53 278,52
5126 1,6402 11100082 43227 1,56 11,40 7379917 3395,42 24841,53 1171867 820,63 6003,89 577514 26,98 197,38
27 1,5106 11100083 31798 1,22 9,73 7558234 3485,08 27684,98 1238057 874,02 6943,08 697324 33,71 267,76
28 1,8067 11100041 324459 9,76 64,82 6943177 3175,84 21093,75 1137788 793,15 5268,03 592744 27,83 184,87
29 1,5742 11100042 255723 7,75 59,11 9146975 4283,86 32655,52 1150131 803,10 6121,97 657129 31,45 239,74
30 1,5675 11100043 424029 12,66 96,94 9541004 4481,97 34311,72 1030939 706,97 5412,18 614193 29,04 222,30
31 1,6797 12050201 15364 0,74 5,32 6865743 3136,91 22410,49 1084171 749,90 5357,39 600367 28,26 201,91
32 1,4397 12050202 128612 4,05 33,74 7038779 3223,91 26871,49 967884 656,11 5468,71 479319 21,46 178,91
33 1,9167 12050203 165284 5,12 32,04 8267037 3841,45 24050,38 1239227 874,96 5477,92 552909 25,60 160,26
34 1,4108 12050081 157448 4,89 41,58 5508115 2454,32 20876,02 365256 170,06 1446,47 310832 12,00 102,10
35 1,4939 12050082 3677 0,40 3,25 2198090 790,12 6346,76 176188 17,56 141,08 185490 4,97 39,89
36 1,7927 12050083 41507 1,51 10,09 7959015 3686,58 24677,28 521389 295,99 1981,28 485493 21,81 146,00
37 1,6751 12050041 10876 0,61 4,40 7696011 3554,35 25462,47 584365 346,78 2484,25 607495 28,66 205,33
38 1,6315 12050042 28354 1,12 8,27 10536972 4982,72 36648,87 668401 414,56 3049,17 654873 31,32 230,39
39 1,4047 12050043 63560 2,15 18,37 10222021 4824,37 41213,37 703778 443,09 3785,23 655816 31,38 268,04
40 1,4228 12075201 19052 0,85 7,19 4776998 2086,73 17599,67 1017993 696,52 5874,54 533964 24,53 206,92
41 1,4091 12075202 135339 4,24 36,14 4829472 2113,12 17995,46 746071 477,20 4063,91 498045 22,52 191,75
42 1,6198 12075203 54587 1,89 13,99 6786041 3096,84 22942,36 882356 587,13 4349,62 489960 22,06 163,45
43 1,8009 12075081 76584 2,53 16,86 9544305 4483,63 29875,92 1186897 832,75 5548,92 651133 31,11 207,32
44 1,5972 12075082 perdido perdido perdido perdido
45 1,9319 12075083 92209 2,99 18,55 11022337 5226,75 32465,96 1257831 889,97 5528,03 716599 34,79 216,09
46 1,5428 12075041 perdido perdido perdido perdido
47 1,5302 12075042 8150 0,53 4,19 3498767 1444,07 11324,55 196529 33,97 266,39 242628 8,17 64,10
48 1,952 12075043 62701 2,13 13,07 12025367 5731,05 35231,87 773344 499,20 3068,86 721143 35,04 215,44
49 1,8156 12100201 65002 2,19 14,49 5717568 2559,63 16917,59 1026720 703,56 4650,12 675354 32,47 214,63
50 1,453 12100202 123896 3,91 32,29 6070793 2737,23 22606,13 932405 627,49 5182,32 648484 30,96 255,73
51 1,7019 12100203 17993 0,82 5,79 6652093 3029,49 21360,76 913690 612,40 4317,99 603190 28,42 200,39
52 1,6457 12100081 49940 1,75 12,78 6031690 2717,57 19815,75 852150 562,76 4103,52 414027 17,80 129,78
53 1,7695 12100082 12951 0,67 4,58 972770 174,06 1180,37 132049 ‐18,04 ‐122,32 62175 ‐1,96 ‐13,29
5254 2,0622 12100083 20705 0,90 5,24 10181990 4804,24 27956,02 1345981 961,06 5592,46 737506 35,96 209,27
55 1,4039 12100041 11128 0,62 5,31 6498514 2952,27 25234,91 869885 577,07 4932,55 584037 27,35 233,74
56 12100042
57 1,424 12100043 110739 3,53 29,72 8478876 3947,95 33269,28 850232 561,22 4729,35 497111 22,46 189,30
58 1,3269 13050201 49110 1,73 15,64 4756283 2076,32 18777,48 442680 232,50 2102,68 420672 18,17 164,34
59 1,6772 13050202 92912 3,01 21,51 3354155 1371,36 9811,79 280804 101,94 729,37 280679 10,31 73,77
60 1,4969 13050203 192553 5,91 47,40 5364307 2382,02 19095,63 519566 294,52 2361,01 524246 23,99 192,30
61 1,1992 13050081 29009 1,14 11,44 8789876 4104,32 41070,57 640834 392,33 3925,87 451928 19,93 199,40
62 1,6449 13050082 48982 1,73 12,59 9651841 4537,70 33103,74 782489 506,58 3695,62 634290 30,17 220,08
63 1,8449 13050083 132476 4,16 27,06 10167474 4796,94 31201,32 1092102 756,30 4919,27 660288 31,63 205,71
64 1,6742 13050041 312753 9,42 67,50 11677479 5556,14 39824,20 686310 429,00 3074,93 626734 29,74 213,18
65 1,5379 13050042 204857 6,27 48,93 10215511 4821,10 37618,28 581776 344,69 2689,58 549158 25,39 198,09
66 1,6714 13050043 177070 5,46 39,21 9091519 4255,98 30556,26 611063 368,31 2644,35 575392 26,86 192,84
67 1,8021 13075201 106967 3,42 22,75 5190799 2294,78 15280,73 647692 397,86 2649,29 547536 25,30 168,44
68 1,7956 13075202 34608 1,31 8,73 6940874 3174,68 21216,41 673322 418,53 2797,03 615903 29,13 194,71
69 1,669 13075203 206106 6,31 45,35 6329384 2867,24 20615,26 476705 259,95 1869,00 591928 27,79 199,80
70 1,7641 13075081 172838 5,34 36,31 7488184 3449,86 23467,09 821059 537,69 3657,52 428849 18,63 126,73
71 1,8725 13075082 226449 6,90 44,22 8284697 3850,33 24674,99 849426 560,57 3592,41 446398 19,62 125,71
72 1,7181 13075083 7716 0,52 3,65 1888357 634,39 4430,88 203951 39,96 279,07 133393 2,04 14,25
73 1,4796 13075041 25779 1,05 8,51 8749921 4084,23 33124,33 517703 293,01 2376,43 628211 29,83 241,90
74 1,7074 13075042 79580 2,62 18,40 7517156 3464,42 24348,77 489667 270,40 1900,44 494433 22,31 156,83
75 1,5731 13075043 215919 6,59 50,30 8132903 3774,01 28789,07 502399 280,67 2141,02 475969 21,28 162,30
76 1,7551 13100201 164882 5,11 34,91 5380961 2390,39 16343,64 539288 310,42 2122,43 538581 24,79 169,51
77 1,5341 13100202 6349 0,48 3,77 1429440 403,66 3157,49 122198 ‐25,98 ‐203,24 144358 2,66 20,77
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80 13100082
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5382 1,7474 13100041 206221 6,31 43,34 8211286 3813,42 26188,05 978777 664,89 4566,06 584445 27,37 187,95
83 1,6124 13100042 18227 0,83 6,17 4290250 1842,01 13708,82 521936 296,43 2206,11 334430 13,33 99,20
84 1,4135 13100043 41559 1,51 12,81 7415170 3413,15 28976,14 818233 535,41 4545,37 539039 24,82 210,70
85 1,5595 14050201 11674 0,64 4,90 4221102 1807,24 13906,32 565381 331,47 2550,57 491691 22,16 170,51
86 1,5303 14050202 0,30 2,33 10596103 5012,45 39305,61 904617 605,08 4744,80 793657 39,12 306,73
87 14050203
88 1,8352 14050081 0,30 1,94 5186333 2292,54 14990,45 660218 407,96 2667,56 494295 22,31 145,85
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90 1,5539 14050083 0,30 2,29 5997228 2700,24 20852,60 730269 464,46 3586,79 676089 32,51 251,09
91 1,6501 14050041 10925 0,62 4,48 8826228 4122,60 29980,70 637270 389,45 2832,20 625547 29,68 215,81
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93 1,8566 14050043 0,30 1,92 5839958 2621,17 16941,72 783745 507,59 3280,78 874540 43,66 282,18
94 1,7945 14075201 12413 0,66 4,41 4877970 2137,50 14293,68 509132 286,10 1913,18 509782 23,18 154,98
95 1,7942 14075202 15447 0,75 5,00 5838684 2620,53 17526,65 678362 422,59 2826,40 664751 31,88 213,20
96 1,7463 14075203 46123 1,64 11,28 5539557 2470,13 16973,94 628015 381,99 2624,88 654473 31,30 215,09
97 1,39 14075081 24259 1,00 8,67 8814659 4116,78 35540,54 502255 280,55 2422,05 506616 23,00 198,54
98 1,4709 14075082 0,30 2,42 11475174 5454,43 44498,68 1156034 807,86 6590,76 726337 35,34 288,28
99 1,6928 14075083 7537 0,52 3,66 7090576 3249,95 23038,39 937476 631,58 4477,20 516593 23,56 167,00
100 1,5848 14075041 0,30 2,25 8721932 4070,16 30818,96 595856 356,05 2695,97 608727 28,73 217,55
101 1,4412 14075042 9219 0,57 4,71 8699359 4058,81 33795,24 667459 413,80 3445,46 544526 25,13 209,21
102 1,6958 14075043 71183 2,37 16,79 10869675 5149,99 36442,94 737366 470,18 3327,16 705209 34,15 241,65
103 1,7235 14100201 0,30 2,07 206530 ‐211,19 ‐1470,45 27562 ‐102,31 ‐712,35 679150 32,69 227,58
104 1,9143 14100202 0,30 1,86 ‐315,03 ‐124,54 ‐5,45
105 1,6629 14100203 2883 0,38 2,75 7500862 3456,23 24941,23 900873 602,06 4344,66 551059 25,49 183,97
106 1,6684 14100081 43010 1,55 11,16 6351055 2878,13 20701,04 840624 553,47 3980,82 568844 26,49 190,54
107 1,732 14100082 27012 1,08 7,52 7263455 3336,87 23119,18 1185301 831,47 5760,74 652943 31,21 216,27
108 1,7331 14100083 0,30 2,06 8151074 3783,14 26194,52 1157951 809,41 5604,35 688411 33,21 229,92
109 1,7462 14100041 0,30 2,04 8230796 3823,23 26273,46 905711 605,96 4164,22 629524 29,90 205,47
54110 1,7323 14100042 30448 1,18 8,21 9344878 4383,36 30364,45 925106 621,61 4305,99 684809 33,00 228,62
111 1,4547 14100043 6470 0,49 4,01 8785965 4102,35 33840,81 1342585 958,33 7905,34 666208 31,96 263,64
112 1,9577 15050201 0,30 1,82 2716437 1050,73 6440,61 491523 271,90 1666,64 650843 31,10 190,61
113 1,8029 15050202 0,30 1,98 ‐315,03 ‐124,54 ‐5,45
114 2,0242 15050203 23819 0,99 5,88 2798155 1091,82 6472,59 626272 380,58 2256,18 686733 33,11 196,30
115 1,7087 15050081 14085 0,71 4,97 10169980 4798,20 33697,22 810774 529,39 3717,85 699953 33,85 237,75
116 1,7478 15050082 16716 0,78 5,39 8550163 3983,80 27351,85 794569 516,32 3544,94 598896 28,18 193,47
117 1,483 15050083 13494 0,69 5,59 9552388 4487,69 36313,09 799117 519,99 4207,60 662930 31,78 257,12
118 1,9193 15050041 7765 0,52 3,27 10276999 4852,01 30336,12 652035 401,36 2509,41 778874 38,29 239,37
119 1,9893 15050042 0,30 1,79 10540418 4984,45 30067,57 610946 368,22 2221,20 841750 41,82 252,25
120 1,8033 15050043 12965 0,68 4,49 8721849 4070,12 27084,45 722906 458,52 3051,21 677529 32,60 216,90
121 1,6503 15075201 14786 0,73 5,29 3118189 1252,72 9109,06 395579 194,51 1414,39 484385 21,75 158,15
122 1,747 15075202 0,30 2,04 3531689 1460,62 10032,89 532129 304,65 2092,61 429504 18,67 128,23
123 1,9482 15075203 17117 0,80 4,90 4506338 1950,65 12015,11 518896 293,98 1810,75 619744 29,35 180,78
124 1,8954 15075081 20398 0,89 5,65 8006637 3710,52 23491,76 1163860 814,17 5154,63 988011 50,03 316,74
125 1,799 15075082 20504 0,89 5,97 7893910 3653,85 24372,52 1186002 832,03 5549,97 715699 34,74 231,72
126 1,8423 15075083 18911 0,85 5,53 8099468 3757,20 24472,87 1296727 921,34 6001,23 698521 33,77 219,99
127 1,8949 15075041 14582 0,72 4,57 9698739 4561,27 28885,58 727490 462,22 2927,13 888762 44,46 281,53
128 2,0115 15075042 11601 0,64 3,79 10559151 4993,87 29791,92 723745 459,20 2739,43 822868 40,76 243,14
129 1,8048 15075043 22969 0,97 6,43 8827181 4123,07 27414,06 608805 366,49 2436,78 629695 29,91 198,86
130 1,8807 15100201 0,30 1,89 2950807 1168,57 7456,16 430038 222,31 1418,45 432490 18,84 120,18
131 1,9392 15100202 88026 2,86 17,72 2636725 1010,65 6254,05 519135 294,17 1820,35 596596 28,05 173,58
132 1,9098 15100203 3890 0,41 2,58 2783558 1084,48 6814,19 391459 191,19 1201,33 404443 17,26 108,45
133 1,8768 15100081 30817 1,20 7,64 8350449 3883,38 24829,83 1051674 723,69 4627,17 715782 34,74 222,14
134 1,8738 15100082 28472 1,13 7,22 9495370 4459,02 28556,04 1436595 1034,15 6622,80 812196 40,16 257,17
135 2,0086 15100083 6823 0,50 2,96 7074441 3241,84 19367,74 1091334 755,68 4514,65 664510 31,86 190,37
136 1,842 15100041 11579 0,63 4,13 7789166 3601,18 23460,48 848775 560,04 3648,48 684463 32,98 214,88
137 1,872 15100042 18756 0,84 5,41 8792445 4105,61 26318,01 858069 567,54 3638,06 709701 34,40 220,52
55138 1,8816 15100043 13960 0,70 4,49 7902870 3658,35 23331,33 914075 612,71 3907,58 681101 32,80 209,16
139 1,7643 16050081 484234 14,42 98,07 10753923 5091,80 34632,18 679735 423,70 2881,83 740788 36,15 245,86
140 1,6776 16050082 163723 5,07 36,28 10910751 5170,65 36986,03 706570 445,34 3185,59 742018 36,22 259,06
141 1,8042 16050083 190702 5,86 38,96 10508539 4968,42 33045,72 912713 611,61 4067,91 730773 35,58 236,68
142 1,4438 16050041 104671 3,35 27,84 9687882 4555,82 37865,21 526930 300,46 2497,21 672519 32,31 268,57
143 1,473 16050042 8457 0,54 4,43 7120601 3265,05 26599,14 394778 193,87 1579,37 478798 21,44 174,63
144 1,6536 16050043 103728 3,32 24,11 7752112 3582,55 25998,22 420451 214,57 1557,14 520080 23,75 172,38
145 1,7454 16075081 146370 4,57 31,39 4697959 2047,00 14073,53 913115 611,93 4207,18 445404 19,56 134,48
146 1,502 16075082 85803 2,80 22,36 4558660 1976,96 15794,61 767091 494,16 3948,00 443158 19,43 155,27
147 1,5311 16075083 150893 4,70 36,81 5554745 2477,77 19419,51 864381 572,63 4487,97 542818 25,03 196,18
148 16075041
149 1,7518 16075042 189781 5,83 39,95 9474559 4448,56 30473,08 600285 359,62 2463,43 734191 35,78 245,07
150 1,5196 16075043 205333 6,28 49,63 8451744 3934,31 31068,55 637394 389,55 3076,21 681776 32,83 259,28
151 1,5348 16100081 164247 5,09 39,77 5302070 2350,73 18379,43 815351 533,08 4167,96 565183 26,29 205,52
152 1,7357 16100082 133837 4,20 29,04 5903300 2653,01 18341,97 967011 655,40 4531,23 543567 25,07 173,34
153 2,1135 16100083 250751 7,61 43,20 7500243 3455,92 19621,98 911395 610,55 3466,56 736758 35,92 203,95
154 1,6414 16100041 141615 4,43 32,36 7007989 3208,43 23456,27 731236 465,24 3401,29 611334 28,88 211,12
155 1,5966 16100042 193363 5,94 44,61 8429064 3922,91 29484,48 738797 471,34 3542,56 664363 31,86 239,43
156 1,5946 16100043 64658 2,18 16,42 6901435 3154,85 23741,53 657291 405,60 3052,29 560743 26,04 195,94
157 1,3536 17050081 13433 0,69 6,11 ‐315,03 ‐2792,83 756339 485,49 4303,96 516273 23,54 208,69
158 1,815 17050082 27076 1,09 7,18 9208126 4314,61 28526,32 813837 531,86 3516,44 730729 35,58 235,26
159 1,7793 17050083 0,30 2,00 9413473 4417,85 29794,97 962579 651,83 4396,09 775523 38,10 256,94
160 1,8708 17075081 0,30 1,90 7155805 3282,74 21056,73 1294444 919,50 5897,99 570063 26,56 170,37
161 1,6373 17075082 23047 0,97 7,10 5464015 2432,15 17825,57 851427 562,18 4120,30 552649 25,58 187,50
162 1,9115 17075083 16060 0,77 4,80 6859210 3133,62 19672,24 987664 672,06 4219,07 649056 31,00 194,59
163 1,8 17100081 0,30 1,98 5103242 2250,76 15005,08 1156041 807,87 5385,78 681551 32,82 218,81
164 1,656 17100082 0,30 2,15 4638710 2017,21 14617,44 689201 431,34 3125,62 436699 19,07 138,20
165 17100083
56166 1,6837 18050081 236788 7,20 51,33 9241835 4331,55 30871,68 717259 453,97 3235,49 764500 37,48 267,12
167 1,5233 18050082 94969 3,07 24,16 7779780 3596,47 28331,64 646980 397,28 3129,65 585498 27,43 216,06
168 1,7538 18050083 209327 6,40 43,80 9164110 4292,47 29370,34 719139 455,48 3116,54 677498 32,59 223,01
169 1,5921 18075081 30867 1,20 9,02 5803742 2602,96 19619,06 911083 610,30 4599,93 588420 27,59 207,96
170 1,4798 18075082 77151 2,55 20,65 5261159 2330,16 18895,74 708361 446,79 3623,11 565875 26,33 213,48
171 1,7162 18075083 38240 1,41 9,87 5561800 2481,32 17349,83 939309 633,06 4426,49 571003 26,61 186,09
172 1,6501 18100081 180143 5,55 40,36 6199663 2802,02 20377,08 590175 351,47 2555,96 473686 21,15 153,80
173 1,5349 18100082 101454 3,26 25,45 5644857 2523,07 19725,65 681289 424,95 3322,34 512950 23,35 182,58
174 1,746 18100083 192276 5,90 40,58 7072866 3241,04 22275,22 891706 594,67 4087,06 642767 30,64 210,61
57C
ESPECIFICACIONES DEL EQUIPO
5859