An Exploratory, Single Center, Observer Masked, Active Control, Randomized Trial to Investigate the Effectiveness of Dialkylcarbomoyl Chloride Dressing (Cutimed Sorbact) in Modifying Bacterial Load in Venous Leg Ulcers (VLU)
Phase: NA
Conditions: Venous Leg Ulcer
Sponsor: University of Miami

- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

B S N L E V T O V/ P A S T A R 2 0 2 0 V 3 . 1
    1  
D e p art m e nt of D er m at ol o g y a n d C ut a n e o u s S ur g er y 
W o u n d H e al i n g a n d R e g e n er at i v e M e di ci n e R e s e ar c h Pr o gr a m 
S T U D Y P R O T O C O L 
A n e x pl or at or y, si n gl e c e nt er, o b s er v er m a s k e d, a cti v e c o ntr ol, r a n d o mi z e d tri al t o 
i n v e sti g at e t h e eff e cti v e n e s s of Di al k yl c ar b o m o yl  c hl ori d e dr e s si n g ( C uti m e d ®  
S or b a ct ®) i n m o dif yi n g b a ct eri al l o a d i n v e n o u s l e g ul c er s 
H a d ar L e v- T o v, M D, M A S 
Ir e n a P a st ar, P h D 
T ul a y K or u- S e n g ul, P h D, M H S 
V er si o n 3. 1 S e pt e m b er 1 7, 2 0 2 0
N C T 0 3 6 2 1 5 9 2   
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    2  
T A B L E O F C O N T E N T S:  
1. E x e c uti v e s u m m ar y
1. 1. T a bl e of a s s e s s m e nt
2. B a c k gr o u n d
3. St u d y d e si g n
3. 1  O v er vi e w
3. 2 St u d y o ut c o m e s
3. 2. 1 P ri m ar y o ut c o m e s 
   3. 2. 2 S e c o n d ar y o ut c o m e s  
4. St u d y p o p ul ati o n
4. 1 O v er vi e w
4. 2 Crit eri a f or i n cl u si o n
4. 3 Crit eri a f or e x cl u si o n
4. 4 D efi niti o n of st u d y c o m pl eti o n
4. 5 S u bj e ct wit h dr a w al
5. St u d y pr o c e d ur e s
5. 1 S u bj e ct i d e ntifi c ati o n
5. 2 R a n d o mi z ati o n a n d s e q u e n c e all o c ati o n
5. 3 Bli n di n g
5. 3. 1 Br e a ki n g of bli n di n g  
5. 4 I nf or m e d c o n s e nt  
5. 5 Eli gi bilit y  
5. 6 D e m o gr a p hi c s  
5. 6. 1 D e m o gr a p hi c d at a  
5. 7 Q u alit y of lif e a s s e s s m e nt  
- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

    3  
5. 8 M e di c al hi st or y  
5. 9 C o n c o mit a nt m e di c ati o n s  
5. 1 0 St u d y ul c er hi st or y  
5. 1 1 Vit al si g n s  
5. 1 2 P ai n a s s e s s m e nt  
5. 1 3 F o c u s e d p h y si c al e x a m  
5. 1 4 W o u n d ar e a m e a s ur e m e nt  
5. 1 5 Pr o d u ct a p pli c ati o n  
5. 1 5. 1 St a n d ar d c ar e  
5. 1 5. 2 Pri m ar y dr e s si n g  
5. 1 5. 3 S e c o n d ar y dr e s si n g  
5. 1 5. 4 Dr e s si n g st or a g e  
5. 1 6 Ti s s u e c oll e cti o n  
5. 1 7 S h ar p d e bri d e m e nt  
5. 1 8 C o m pr e s si o n  
5. 1 9 A d v er s e e v e nt s  
5. 1 9. 1 C oll e cti n g a d v er s e e v e nt s  
5. 1 9. 2 D efi niti o n of a n a d v er s e e v e nt  
5. 1 9. 3 D o c u m e nti n g a n d r e p orti n g a d v er s e e v e nt s  
5. 1 9. 4 A s s e s s m e nt of a d v er s e e v e nt c a u s alit y  
5. 2 0 Fitti n g f or st o c ki n g  
5. 2 1 I n str u cti o n s f or f oll o w u p c ar e  
5. 2 2  A n kl e br a c hi al i n d e x –  i n d e x ( A BI) 
6. St u d y c o n d u ct
6. 1 S c h e d ul e of a s s e s s m e nt s 
B S N L E V T O V/ P A S T A R 2 0 2 0 V 3 . 1
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St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

B S N L E V T O V/ P A S T A R 2 0 2 0 V 3. 1
    4  
6. 2 H a n dli n g of u n s c h e d ul e d vi sit s  
6. 3 H a n dli n g of mi s s e d vi sit s  
6. 4 St o p pi n g r ul e  
7. St ati sti c al m et h o d s
8. R e g ul at or y a n d et hi c al i s s u e s
8. 1 Pr ot o c ol i n stit uti o n al a p pr o v al  
8. 2 I nf or m e d c o n s e nt  
8. 3 D at a h a n dli n g, s af et y a n d q u alit y a s s ur a n c e 
8. 3. 1 S o ur c e d o c u m e nt ati o n  
8. 3. 2 D at a s af et y  
8. 3. 3 D at a q u alit y a s s ur a n c e  
8. 4 G o o d cli ni c al pr a cti c e  
8. 5 S t u d y d ur ati o n a n d pr e m at ur e t er mi n ati o n 
9 . A p p e n di c e s
9 . 1 A p p e n di x A –  M ol e c ul ar m i cr o bi ol o gi c al pr ot o c ol
9 . 2 A p p e n di x B –  A p pli c ati o n of C o m prif or e s y st e m
9 . 3 A p p e n di x C –  A n kl e br a c hi al i n d e x m e a s ur e m e nt
9. 4 A p p e n di x D –  It c h a s s e s s m e nt s
9. 5 A p p e n di x E –  I n si g ht w o u n d i m a gi n g s y st e m
9. 6 A p p e n di x F - A cti c o at 7 ® a p pli c ati o n i n str u cti o n s
9. 7 A p p e n di x G  - W o u n d -Q o L q u e sti o n n air e
9. 8 A p p e n di x H - E Q -5 D -5 L  i n str u m e nt
1 0 . R ef er e n c e s
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St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

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    5  
1. E X E C U TI V E S U M M A R Y :
S p o n s or:  B S N M e di c al I n c. 
Pri m ar y i n v e sti g at or s:  
H a d ar L e v -T o v, M D, M A S. A s si st a nt pr of e s s or of d er m at ol o g y, U ni v er sit y of Mi a mi, F L  
Ir e n a P a st ar, P h D. A s si st a nt pr of e s s or of d er m at ol o g y, U ni v er sit y of Mi a mi, F L  
T ul a y K or u -S e n g ul, P h D. A s s o ci at e Pr of e s s or of Bi o st ati sti c s, U ni v er sit y of Mi a mi, F L  
O bj e cti v e: T h e g o al of t h e st u d y i s t o i n v e sti g at e t h e eff e cti v e n e s s of C uti m e d ® 
S or b a ct ® ( St u d y D e vi c e) i n m odif yi n g b a ct eri al l o a d  i n v e n o u s l e g ul c ers  ( V L U). 
D e si g n:  T hi s i s a n e x pl or at or y st u d y i n a si n gl e c e nt er , o b s er v er m a s k e d , a cti v e c o ntr ol, 
r a n d o mi z e d tri al.  
O v er all, 4 5 s u bj e ct s wit h V L U w h o h a v e p er si st e nt w o u n d s a n d h a v e b e e n pr e vi o u sl y 
tr e at e d wit h silv er b a s e d t h er a p y will b e 1: 1 r a n d o mi z e d to r e c ei v e u p t o f o ur 
a p pli c ati o n s o v er u p t o f o ur w e e k s of St u d y D e vi c e or C o m p ar at or ( sil v er i m pr e g n at e d 
c o nt a ct l ay er dr e s si n g -  A cti c o at ®) wit h 2 w e e k s f oll o w u p p eri o d. 
O ut c o m e s : Pri m ar y o ut c o m e i s th e c h a n g e i n b a ct er i al l o a d c o m p ar e d t o b a s eli n e. 
S e c o n d ar y o ut c o m e s:  B a ct eri al sil v er r e si st a n c e b a s e d o n g e n etic a n d p h e n ot y pi c 
c h ar a ct eri z ati o n o v er ti m e ( s e e a p p e n di x A f or m ol e c ul ar mi cr o bi ol o g y pr ot o c ol), h e ali n g 
r at e, c o m pl et e h e ali n g at 6 w e e k s, p ai n, q u alit y of li f e ( Q O L) m e a s ur e m e nt s a n d 
a d v e r s e e v e nt s.   
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St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

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    6  
1. 1 T a bl e of a s s e s s m e nt s  a n d st u d y c al e n d ar : 
P h as e  
Scr e e ni n g  
Tr e at m e nt  
F oll o w 
u p  
W e e k  
-2
-1
0  
+ 1
+ 2
+ 3
+ 4
+ 6
Visit  
S 1  
S 2  
T 0 ( pr e 
r a n d o m) 
T 0( p ost 
r a n d o m) 
T 1  
T 2  
T 3  
T 4  
F 1  
Wi n d o w ( d a ys)  
± 2  
± 2  
± 2  
± 2  
± 2  
± 2  
± 2  
I nf or m e d c o ns e nt 
X  
Eli gi bilit y 
X  
X  
X  
D e m o gr a p hics  
X  
M e dic al hist or y  
X  
C o nc o mit a nt m e dic ati o n  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
St u d y ulc er hist or y  
X  
P h ysic al ex a m (f oc us e d)  
X  
X  
Vit al si g ns  
X  
X  
P ai n ( V A S)  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
W o u n d ar e a  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
Pr o d uct a p plic ati o n  
X  
X  
X  
X  
Tiss u e c oll ecti o n  
X  
X  
X  
Q OL  
X  
X  
X  
R a n d o miz ati o n  
X  
S h ar p d e bri d e m e nt  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
W o u n d p h ot o gr a p h y  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
C o m pr essi o n  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
A d v ers e e v e nts  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
X  
A BI  
X  
V e n o us D o p pl er 
X  
Fitti n g f or st oc ki n g  
X  
X  
T a bl e 1. T a bl e of a s s e s s m e nt s a n d st u d y c al e n d ar  
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2. B A C K G R O U N D
W o u n d s ar e t h e m o st c o m m o n a n d c o stl y s ki n di s e a s e. C hr o ni c w o u n d s ar e w o u n d s t h at 
f ail t o pr o gr e s s t hr o u g h t h e n or m al pr o c e s s of h e ali n g. Bri efl y, n or m al h e ali n g o c c ur s i n 
f o ur p h a s e s t h at o v erl a p si g nifi c a ntl y [1 ]. I m m e di at el y f oll o wi n g i nj ur y d a m a g e t o 
e n d ot h eli al c ell s e x p o s e s c oll a g e n a n d a cti v at e s pl at el et s t o f or m a pl u g t h u s i niti ati n g t h e 
h e m o st a si s p h a s e. C h e m ot a cti c si g n al s fr o m l e u k o c yt e s a n d pl at el et s attr a ct i m m u n e 
c ell s t o t h e w o u n d a n d a cti v at e fi br o bl a st s, s m o ot h m u s cl e  c ell a n d e n d ot h eli al c ell s.  
Mi n ut e s f oll o wi n g i nj ur y t h e fir st n e utr o p hil s arri v e t o t h e w o u n d sit e a n d h el p r e cr uit 
m a cr o p h a g e s a n d t o g et h er d e gr a d e a n d cl e ar d a m a g e d ti s s u e a n d b a ct eri a. C yt o ki n e s 
a n d gr o wt h f a ct or s s e cr et e d b y 
m a cr o p h a g e s i n t h e w o u n d r e s ult i n f or m ati o n of 
gr a n ul ati o n ti s s u e, fi br o bl a st r e cr uit m e nt a n d k er ati n o c yt e mi gr ati o n. Wit hi n t h e fir st 2 4 
h o ur s gr o wt h f a ct or s s e cr et e d i n t h e w o u n d r e s ult i n fi br o bl a st a cti v ati o n t h at b e gi n s br e a k 
d o w n of e arl y fi bri n 
m atri x b y 
m atri x 
m et all o pr ot ei n a s e s, a n d d e p o siti o n of n e w 
e xtr a c ell ul ar m atri x of c oll a g e n, el a sti n a n d ot h er e xtr a c ell ul ar pr ot ei n s a s si sti n g i n s c ar 
f or m ati o n a n d e pit h eli ali z ati o n.  I n t h e w e e k s a n d m o nt h s t h at f oll o w, fi br o bl a st s tr a n sf or m 
i nt o m y ofi br o bl a st s a n d a s si st i n s c ar c o ntr a cti on. T h e pr e d o mi n a n c e of c oll a g e n 3 i n t h e 
s c ar i s sl o wl y r e pl a c e d b y c oll a g e n 1 a n d a fi n al s c ar i s f or m e d e sti m at e d t o a c hi e v e a b o ut 
8 0 % of t h e t e n sil e str e n gt h of u n w o u n d e d s ki n. W h e n a w o u n d f ail s t o pr o gr e s s t hr o u g h 
t h e s e st a g e s of h e ali n g it i s c o n si d er e d a c hr o ni c w o u n d a n d v e n o u s l e g ul c er s ( V L U) 
r e pr e s e nt a s p e cifi c c a s e of c hr o ni c ul c er s o c c urri n g o n t h e l e g s. C hr o ni c v e n o u s 
i n s uffi ci e n c y a n d t h e r e s ulti n g v e n o u s h y p ert e n si o n ar e t y pi c all y a r e s ult of r efl u x or 
o utfl o w f ail ur e oft e n d u e t o o b str u cti o n. V al v ul ar d ef e ct s, i n eff e cti v e c alf m u s cl e p u m p 
f u n cti o n, d e e p v ei n t hr o m b o si s a n d it s c o m pli c ati o n s or art eri o v e n o u s s h u nti n g ar e t h e 
m ai n c a u s e s f or v e n o u s h y p ert e n si o n  [2 , 3 ]. T h e e x a ct p at h o p h y si ol o g y of V L U r e m ai n s 
u n cl e ar. C urr e nt h y p ot h e s e s i n cl u d e t h e fi bri n c uff h y p ot h e si s a n d it s e xt e n si o n s of “tr a p 
t h e or y” 
wit h or 
wit h o ut i nfl a m m at or y c ell a n d c yt o ki n e a n d/ or 
m et all o pr ot ei n a s e s 
d y sr e g ul ati o n i n cl u di n g i m p air e d r e-e pit h eli z ati o n h o w e v er, m or e r e s e ar c h i s n e e d e d t o 
b ett er cl arif y t h e e x a ct  m e c h a ni s m s i n v ol v e d [2 , 3 ].  
V e n o u s l e g ul c er s, t h e pr o bl e m : L e g ul c er s ar e v er y c o m m o n a n d aff e ct a b o ut 1 -2 % of 
t h e A m eri c a n p o p ul ati o n [2 ].  V e n o u s l e g ul c er s ( V L U) ar e w o u n d s t h at o c c ur i n t h e g ait er 
ar e a i n t h e s etti n g of c hr o ni c v e n o u s i n s uffi ci e n c y ( C VI). V L U a c c o u nt f or a b o ut 7 0 % of 
t h e all c hr o ni c l e g ul c er s a n d a b o ut 2 0 % of all l e g ul c er s ar e li k el y a r e s ult o n mix e d art eri al 
a n d v e n o u s di s e a s e . V L U si g nifi c a ntl y i m p a ct s p ati e nt s’ q u alit y of  lif e  [4 ] a n d p e o pl e  wit h 
V L U ar e oft e n c hr o ni c all y ill wit h si g nifi c a ntl y m or e c o m or bi d c o n diti o n s c o m p ar e d t o 
c o ntr ol s  [5 ]. V L U r e pr e s e nt a n i n cr e a si n gl y d e v a st ati n g e c o n o mi c al b ur d e n. F or e x a m pl e, 
t h e e sti m at e d c o st of tr e ati n g si n gl e n o n h e ali n g V L U i n 1 9 8 7 w a s $ 1 0, 0 0 0  a n d b y 2 0 1 4 
h a s  b all o o n e d t o $ 3 4, 0 0 0  [6 ]. T hi s i s al s o r efl e ct e d b y t h e 5 -f ol d i ncr e a s e i n t ot al c o st of 
V L U tr e at m e nt fr o m e sti m at e d $ 3 billi o n t o $ 1 5 billi o n  o v er a si mil ar p eri o d. T h e 
pr e v al e n c e of  V L U  i s diffi c ult t o a s s e s s y et r e c e nt e sti m at e s s u g g e st a si g nifi c a nt ri s e 
fr o m 0. 3% 2 0 y e ar s a g o   t o m or e  r e c e nt e sti m at e s of 0. 6 % i n a d ult s u n d er 6 5 y e ar s of 
a g e a n d 2. 2 % i n a d ult s o v er 6 5  . C o n si d eri n g t h e a gi n g of t h e p o p ul ati o n a c o n c er ni n g 
pi ct ur e e m er g e s:  m or e ul c er s o c c urri n g i n si c k er p ati e nt s w hi c h ar e e v er m or e e x p e n si v e  
t o tr e at. St a n d ar d c ar e f or V L U c e nt er s ar o u n d e d e m a r e d u cti o n vi a c o m pr e s si o n a n d/ or 
l e g el e v ati o n, m eti c ul o u s l o c al w o u n d c ar e, c o ntr ol of i nf e cti o n a n d p ai n a n d pr e v e nti o n 
of r e c urr e n c e   [7 ]. A d v a n c e d t h er a pi e s i n cl u d e hi g hl y a b s or b e nt dr e s si n g, m atri x b a s e d 
- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

B S N L E V T O V/ P A S T A R 2 0 2 0 V 3 . 1
    8  
d e vi c e s wit h a n d wit h o ut c ell s a n d n e g ati v e pr e s s ur e w o u n d t h er a p y a m o n g ot h er s. 
H o w e v er e v e n wit h b e st t h er a pi e s a v ail a bl e u p t o 5 0 % of V L U f ail t o h e al  [8 ].  
I nf e cti o n s pl a y a si g nifi c a nt r ol e i n t h e c hr o ni cit y of V L U. T h e hi g h w o u n d  b a ct eri al b ur d e n 
( > 1 05  or g a ni s m s p er gr a m of ti s s u e), e v e n wit h o ut t h e cl a s si c si g n s of i nf e cti o n, i s al s o 
d etri m e nt al t o h e ali n g   [9 , 1 0 ]. 
Sil v er r e si st a n c e : S il v er (A g ) c o at e d dr e s si n g s ar e i n cr e a si n gl y b ei n g u s e d f or c hr o ni c 
w o u n d s b a s e d o n b a ct eri ci d al pr o p erti e s of r el e a s e d A g , d e s pit e t h e l a c k of e vi d e n c e t o 
s u p p ort t h eir u s e [1 1 ]. C o n c er n s of wi d e s pr e a d A g  r esi st a n c e i n b a ct eri al i s ol at e s fr o m 
c hr o ni c w o u n d s h a v e b e e n r ai s e d d u e t o t h e i n cr e a s e d utili z ati o n of sil v er b a s e d w o u n d 
dr e s si n g s  [1 2 ] [1 3 ]. Sil v er r e si st a nt -str ai n s h a v e al s o b e e n i s ol at e d fr o m sil v er -tr e at e d 
p a ti e nt s at b ur n c e nt er s, w h er e t h e s e st ai n s h a v e s o m eti m e s c a u s e d o ut br e a k s [1 4 ]. 
F urt h er m or e o ur i n vi v o st u di e s utili zi n g p or ci n e w o u n d m o d el h a v e s h o w n t h at sil v er 
tr e at m e nt i n d u c e s e x pr e s si o n of vir ul e n c e g e n e s i m p ort a nt f or bi ofil m f or m ati o n i n cli ni c al 
i s ol at e s of m et hi cilli n r e si st a nt St a p h yl o c o c c u s a ur e u s  a n d A ci n et o b a ct er b a u m a n nii [1 5 ]. 
Alt h o u g h t h e m ol e c ul ar b a si s f or sil v er -r e si st a n c e h a s b e e n pr e vi o u sl y c h ar a ct eri z e d  [1 6 ] 
[1 4 ], t o d at e, e x pr e s si o n of sil v er r e si st a n c e g e n e s a s a r e s p o n s e t o t h er a p y h a s n ot b e e n 
a n al y z e d  i n cli ni c al s etti n g s.  
H er e w e pr o p o s e t o a n al y z e t h e pr e s e n c e of sil v er r e si st a n c e o n g e n ot y pi c a n d 
p h e n ot y pi c l e v el i n r e s p o n s e t o tr e at m e nt wit h St u d y D e vi c e ( C uti m e d ® S or b a ct ® ) a n d 
a cti v e c o ntr ol ( A cti c o at ® ). 
T h e pr o mi s e of D A C C  te c h n ol o g y. Di al k yl c ar b o m o yl  c hl ori d e ( D A C C) - c o at e d 
dr e s si n g s ar e a r e c e nt a d diti o n t o 
w o u n d c ar e ar m a m e nt ari u m. T hi s i n n o v ati v e 
a nti mi cr o bi al t e c h n ol o g y c a n b e i m b e d d e d i nt o v ari o u s dr e s si n g a n d w o u n d c ar e 
pr o d u ct s. K e y t o it s 
m e c h a ni s m of a cti o n, D A C C, a f att y a ci d d eri v ati v e i s h i g hl y 
h y dr o p h o bi c. 
O n t h e ot h er h a n d t h e 
mi cr o or g a ni s m s, c o m m o nl y r e s p o n si bl e f or 
c ol o ni zi n g c hr o ni c V L U, g e n er all y h a v e h y dr o p h o bi c e xtr a c ell ul ar s urf a c e s, a n d will 
t h er ef or e irr e v er si bl y a d h er e t o t h e D A C C b a s e d dr e s si n g s [1 7 ]. S u b s e q u e nt dr e s si n g 
c h a n g e s r e s ult i n t h e p h y si c al r e m o v al of l ar g e n u m b er s of b a ct eri a a n d a d e cr e a s e d  
mi cr o bi al l o a d.   Si n c e t h e m e c h a ni s m of a nti b a ct eri al a cti o n i s p h y si c al bi n di n g f oll o w e d 
b y r e m o v al, t h er e i s n o ri s k of b a ct eri a d e v el o pi n g r e si st a n c e [1 7 ]. D e v el o pi n g n o n -sil v er 
b a s e d w o u n d t h er a pi e s i s i m p ort a nt d u e t o r e p ort s of sil v er b a s e d t o xi cit y  [1 8 ]. 
A d diti o n all y, thi s m a y pr o v e i m p ort a nt a s e vi d e n c e e xi st s f or t h e o n s et of sil v er r e si st a n c e 
i n v ari o u s, cli ni c all y r el e v a nt mi cr o b e s [1 9 ]. T hi s m a y b e d u e t o p o s si bl e o v er u s e of sil v er-
b a s e d w o u n d c ar e  pr o d u ct s  a n d i s m e di at e d b y pl a s mi d a c q ui siti o n a n d ot h er g e n eti c 
m e c h a ni s m s hi g hli g hti n g t h e n e e d t o b ett er c h ar a ct eri z e t h e s e m e c h a ni s m s i n V L U  [1 8 ]. 
F urt h er m or e , sil v er a n d ot h er b a ct eri ci d al  a g e nt s r e s ult i n  b a ct eri al l y si s at t h e w o u n d b e d 
l e a di n g t o e n d ot o xi n r el e a s e t o t h e w o u n d b e d  a s w ell a s ot h er pr oi nfl a m m at or y m e di at or s 
t h at m a y dri v e t h e pr ol o n g e d i nfl a m m at or y st at e of V L U w hi c h h a s b e e n s u g g e st e d a s a 
m e c h a ni s m f or  t h e c hr o ni cit y of t h e s e w o u n d s [2 0 ]. D A C C b a s e d dr e s si n g r e s ult s in 
p h y si c al r e m o v al of w h ol e b a ct eri a a v oi di n g l y si s a n d t h e s u b s e q u e nt d el et eri o u s eff e ct s 
o n t h e w o u n d.  Pr e vi o u s pil ot st u di e s utili zi n g st a n d ar d mi cr o bi ol o g y c ult ur e b a s e d 
m et h o d s h a v e s h o w n effi c a c y of D A C C b a s e d dr e s si n g ( C uti m e d ® S or b a c t® ) i n r e d u ci n g 
b a ct eri al l o a d of V L U w h e n c o m p ar e d t o sil v er b a s e d w o u n d dr e s si n g [1 9 ].  H o w e v er , 
- 
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    9  
t h e s e d at a ar e li k el y u n d er e sti m ati n g t h e s c o p e of t h e pr o bl e m as o nl y 1 -2 % of b a ct eri al 
s p e ci e s c a n b e c ult ur e d  u si n g c ult ur e b a s e d m et h o d s.   
I n t hi s st u d y w e u s e a d v a n c e d m ol e c ul ar a n d mi cr o bi o m e m et h o d s t o c o nfir m D A C C  
effi ci e n c y i n p ati e nt s wit h V L U s t o h el p bri d g e t hi s g a p i n k n o wl e d g e. I n a d diti o n, t hi s 
e x pl or at or y st u d y  will a d d t o e xi sti n g k n o wl e d g e a b o ut sil v er r e si st a n c e i n V L U a n d 
e v al u at e t h e eff e ct s of D A C C tr e at m e nt o n V L U  pr e di s p o s e d t o b e c ol o ni z e d wit h sil v er -
r e si st a nt b a ct eri a. 
- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

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    1 0  
3. S T U D Y D E SI G N
3. 1 O v er vi e w:  
T hi s i s a n e x pl or at or y,  si n gl e c e nt er, o b s er v er m a s k e d , a cti v e c o ntr ol, 1: 1 r a n d o mi z e d 
cli ni c al tri al. T h e g o al i s t o c o m p ar e t h e eff e cti v e n e s s of St u d y D e vi c e ( C uti m e d ®  
S or b a ct ®  w o u n d c o nt a ct l a y er ) t o a n  a cti v e c o ntr ol ( sil v er c o nt a ct l a y er  A cti c o at ® ) ).  B ot h 
d e vi c e s ar e alr e a d y a p pr o v e d a n d i n di c at e d f or tr e at m e nt of w o u n d s. St a n d ar d c ar e 
s el e ct e d f or u s e i n t hi s tri al i n cl u d e s s h ar p d e bri d e m e nt a n d c o m pr e s si o n wit h J o b st 
C o m prif or e ®  4 l a y er c o m p r e s si o n s y st e m.  
T h e st u d y c o n si st s of t hr e e p h a s e s: t w o w e e k s s cr e e ni n g p h a s e  ( p h a s e-1) , u p t o f o ur 
w e e k s tr e at m e nt p h a s e  ( p h a s e-2),  a n d t w o w e e k s f oll o w u p p h a s e  ( p h a s e-3) .  
I n t h e s cr e e ni n g p h a s e i. e. p h a s e-1 , t h e I n v e sti g at or s will c h o o s e St u d y Ul c er, m a k e 
b a s eli n e m e a s ur e m e nt s a n d a s s e s s m e nt s a n d v erif y i n cl u si o n a n d e x cl u si o n crit eri a ar e 
m et. St a n d ar d c ar e will b e a p pli e d wit h o ut u s e of St u d y D e vi c e or a cti v e c o ntr ol.  
T h e tr e at m e nt p h a s e i. e. p h a s e-2 m a y l a st u p t o f o ur w e e k s  (if h e ali n g di d n ot o c c ur pri or) 
a n d i n cl u d e s a p pli c ati o n of st u d y dr e s si n g s a s w ell a s a p pli c ati o n of st a n d ar d c ar e a n d 
m e a s ur e m e nt s of pri m ar y a n d s e c o n d ar y o ut c o m e s. T hi s will b e a c hi e v e d b y ti s s u e 
c oll e cti o n pr o c e d ur e s c o n d u ct e d at vi sit s T 0 , T2 , a n d T 3 . Dr. P a st ar a n d h er r e s e ar c h 
t e a m will c o n d u ct t h e m ol e c ul ar mi cr o bi ol o g y a n d st a n d ar d mi cr o bi ol o g y a s s e s s m e nt s of 
t h e s p e ci m e n s c oll e ct e d i n t hi s st u d y. G e n e e x pr e s si o n ( b y q P C R) a n d st a n d ar d 
mi cr o bi ol o g y will b e utili z e d t o c h ar a ct eri z e t h e m e c h a ni s m s t hr o u g h w hi c h C uti m e d ®   
S or b a ct ® c h a n g e s t h e b a ct eri al l o a d a n d pr o m ot e s h e ali n g of c hr o ni c v e n o u s l e g ul c er s. 
U n d er st a n di n g t h e m e c h a ni s m t hr o u g h w hi c h C uti m e d ® S or b a ct ® sti m ul at e s h e ali n g i n 
p ati e nt s m a y pr o m ot e, i m pr o v e a n d e x p a n d it s cli ni c al u s e.  
I n t h e t w o w e e k s f oll o w u p  p h a s e i. e. p h a s e-3 s u bj e ct s will r et ur n f or o n e  vi sit a n d 
s e c o n d ar y o ut c o m e s will b e a s s e s s e d a n d st a n d ar d c ar e pr o vi d e d.  T h e s u bj e ct s will t h e n 
b e di s c h ar g e d fr o m t h e st u d y a n d r et ur n t o t h eir w o u n d c ar e pr o vi d er f or f urt h er 
m a n a g e m e nt a s i n di c at e d.  
3. 2  St u d y o ut c o m e s:  
3. 2. 1 Pri m ar y o ut c o m e s  
Pri m ar y o ut c o m e s  will b e t h e c h a n g e i n b a ct eri al l o a d c o m p ar e d t o b a s eli n e. ( s e e 
a p p e n di x A –  m ol e c ul ar mi cr o bi ol o g y pr ot o c ol f or d et ail s o n q u a ntifi c ati o n ). Dr. P a st ar’ s  
l a b or at or y at U M Mill er S c h o ol of M e di ci n e, D e p art m e nt of D er m at ol o g y a n d C ut a n e o u s 
S ur g er y will b e t h e c o or di n ati n g c e nt er r e s p o n si bl e f or ti s s u e s a m pl e r e c ei pt a n d 
- 
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    1 1  
pr o c e s si n g. B a ct eri al l o a d i n C F U/ g a m o n g tr e at m e nt a n d c o ntr ol ar m s will b e c al c u l at e d 
for e a c h w o u n d at vi sit s  T 0 , T 2 a n d T 3. T h e tr aj e ct ori e s of b a ct eri al l o a d f or e a c h s u bj e ct s 
a n d a v er a g e c h a n g e i n b a ct eri al l o a d b et w e e n gr o u p s will b e c o m p ar e d.  
3. 2. 2 S e c o n d ar y o ut c o m e s  
S e c o n d ar y o ut c o m e s will i n cl u d e: 
Mi cr o bi ol o gi c al o ut c o m e s: b a ct eri al sil v er r e si st a n c e  c h ar a ct eri z ati o n  o n m ol e c ul ar a n d 
p h e n ot y pi c l e v el o v er ti m e ( s e e a p p e n di x A f or  m ol e c ul ar mi cr o bi ol o g y  pr ot o c ol).  
Cli ni c al w o u n d o ut c o m e s: h e ali n g r at e  a n d p er c e nt r e d u cti o n  i n ar e a o v er 6 w e e k s will b e 
c al c ul at e d b y m e a s uri n g w o u n d ar e a at e a c h vi sit a n d di vi di n g t h e ar e a c h a n g e b y 6  t o 
c al c ul at e a v er a g e w o u n d h e ali n g r at e i n c m 2 / w e e k a n d t h e a v er a g e p er c e nt r e d u cti o n  f or 
e a c h st u d y ar m.  
C o m pl et e h e ali n g at 6  w e e k s  –  t h e pr o p orti o n of s u bj e ct s i n e a c h st u d y ar m i n w hi c h t h e 
st u d y ul c er a c hi e v e d c o m pl et e h e ali n g at vi sit F 1 . 
P ai n  r el at e d o ut c o m e s: p ai n a s s e s s m e nt s will b e c oll e ct e d at e v er y vi sit u si n g vi s u al 
a n al o g s c al e ( V A S) a n d ti m e fr o m vi sit T0  t o cli ni c all y m e a ni n gf ul d e cr e a s e i n p ai n (i. e. 
3 3 % r e d u cti o n fr o m b a s eli n e)  [2 1 ] will b e c al c ul at e d. A d diti o n all y, ti m e t o fir st i n di c ati o n 
of n o p ai n will b e c al c ul at e d (i. e. V A S < 5 m m)  
Q u alit y of lif e m e a s ur e m e nt s: t h e E Q-5 D -5 L  [2 2 ] a n d t h e W o u n d Q u alit y of Lif e ( W Q o L)  
[2 3 , 2 4 ] i n str u m e nts  will b e u s e d a n d a s s e s s m e nt s t a k e pl a c e a t vi sit s T 0, T 4 a n d F 1. 
S af et y o ut c o m e s: a d v er s e e v e nt s will b e r e c or d e d at e v er y vi sit a n d t y p e a n d fr e q u e n c y 
l o g g e d a n d c o m p ar e d b et w e e n ar m s.  
- 
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    1 2  
4. St u d y p o p ul ati o n
4. 1 O v er vi e w  
S u bj e ct s f or t h e st u d y will b e r e cr uit e d fr o m t h e U ni v er sit y of 
Mi a mi ( U M) p ati e nt 
p o p ul ati o n a s w ell a s ot h er p ati e nt s r ef err e d t o U M f or t h e st u d y. T h e r e cr uit m e nt g o al f or 
t hi s pil ot st u d y i s 3 0 s u bj e ct s. C o n si d eri n g u p t o 1 5 % dr o p o ut r at e, t h e st u d y will e nr oll 
u p t o 3 5 s u bj e ct s  wit h t h e g o al of h a vi n g 1 5 s u bj e ct s i n e a c h ar m c o m pl et e t h e st u d y.   
4. 2 Crit eri a f or i n cl u si o n  
Crit eri a f or i n cl u si o n i n t h e st u d y : 
1.
A d ult s, 1 8 y e ar s ol d a n d ol d er (i. e. a g e ≥ 1 8 y e ar s).
2.
V e n o u s l e g ul c er ( V L U) i s pr e s e nt o n t h e l e g. V L U s h all b e f ull t hi c k n e s s b ut wit h o ut e x p o s ur e of
d e e p er ti s s u e s ( m u s cl e b o n e or t e n d o n).
3.
If m or e 
t h a n o n e ul c er i s pr e s e nt, t h e l ar g e st ul c er m e eti n g 
crit eri a s h all b e d e si g n at e d t h e
st u d y ul c er.
4.
If m or e t h a n o n e ul c er o n t h e st u d y ul c er li m b, st u d y ul c er s h all b e at l e a st o n e c e nti m et er
fr o m ot h er ul c er s.
5.
C o nfir m e d v e n o u s i n s uffi ci e n c y, a s d o c u m e nt e d u p t o 3 0 d a y s pri or t o e nr oll m e nt ( B a s eli n e D a y
0), b y eit h er: a) D u pl e x ultr a s o n o gr a p h y, or b) Pri n ci p al I n v e sti g at or ( PI) cli ni c al a s s e s s m e nt t o
i n cl u d e cli ni c al si g n s a n d s y m pt o m s of v e n o u s ul c er ati o n s ( e. g., h y p er pi g m e nt ati o n of s urr o u n di n g
s ki n, v ari c o siti e s, a n d/ or li p o d er m at o s cl er o si s).
6.
A n kl e- Br a c hi al Pr e s s ur e I n d e x ( A BI) e x a m wit h v al u e of  ≥0. 8 0 i n t h e aff e ct e d li m b
7.
V L U h a s b e e n tr e at e d wit h sil v er b a s e d t h er a p y f or at l e a st 2 w e e k s wit hi n t h e pr e vi o u s 6
m o nt h s.
8.
V L U pr e s e nt f or at l e a st o n e m o nt h pri or t o s cr e e ni n g vi sit 1.
9.
V L U at l e a st 1 c m i n si z e b ut n ot l ar g er t h a n 1 0 0 c m 2 .
1 0. Aft er d e bri d e m e nt, st u d y ul c er d e m o n str at e s a cl e a n w o u n d b e d.
1 1.  If s u bj e ct i s a f e m al e of c hil d b e ari n g p ot e nti al, s u bj e ct m u st u s e at l e a st o n e m et h o d of 
c o ntr a c e pti o n a c c e pt a bl e b y PI s u c h a s birt h c o ntr ol pill s, I U D, c o n d o m s, or s e x u al a b sti n e n c e. At
vi sit 1 uri n e pr e g n a n c y t e st m u st b e n e g ati v e.
1 2. S u bj e ct i s a bl e t o c o m pr e h e n d all st u d y r el at e d pr o c e d ur e s a n d a d h er e t o st u d y s c h e d ul e.
1 3. S u bj e ct i s a bl e t o pr o vi d e writt e n i nf or m e d c o n s e nt.
4. 3 Crit eri a f or e x cl u si o n  
Crit eri a f or e x cl u si o n  fr o m t h e st u d y: 
1.
B a s e d o n i n v e sti g at or m e di c al j u d g m e nt, ul c er i s c a u s e d b y a n y eti ol o g y e x cl u si v e
of v e n o u s i n s uffi ci e n c y.
2.
St u d y U l c er s urf a c e ar e a ( p o st-d e bri d e m e nt) h a s i n cr e a s e d  or d e cr e a s e d b y m or e
t h a n 3 0 % i n t h e p eri o d b et w e e n s cr e e ni n g vi sit 1 a n d tr e at m e nt vi sit 1.
- 
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B S N L E V T O V/ P A S T A R 2 0 2 0 V 3 . 1
    1 3  
3.
St u d y Ul c er e x hi bit s cli ni c al si g n s a n d s y m pt o m s of i nf e cti o n i n t h e p eri o d b et w e e n
s cr e e ni n g vi sit 1 a n d tr e at m e nt vi sit 1 r e q uir i n g or al a nti b a ct eri al t h er a p y.
4.
S u bj e ct h a s k n o w n all er g y t o a n y of t h e m at eri al s u s e d i n t h e st u d y.
5.
S u bj e ct  i s u n a bl e t o t ol er at e m ulti -l a y er c o m pr e s si o n t h er a p y.
6.
B a s e d o n i n v e sti g at or m e di c al j u d g m e nt,  t h e St u d y Ul c er  i s s u s pi ci o u s f or c a n c er
( e. g. b a s al c ell c ar ci n o m a or s q u a m o u s c ell c ar ci n o m a).
7.
I n t h e 
m o nt h pri or t o s cr e e ni n g vi sit 1 s u bj e ct w a s tr e at e d wit h s y st e mi c
i m m u n o s u p pr e s si v e 
m e di c ati o n s f or 
m or e t h a n 2 w e e k s ( e. g. c h e m ot h er a p y,
c orti c o st er oi d s), a n d/ or it i s a nti ci p at e d s u bj e ct wi ll r e q uir e s u c h m e di c ati o n s d uri n g
st u d y p eri o d.
8.
I n t h e m o nt h pri or t o s cr e e ni n g vi sit 1 s u bj e ct w a s e nr oll e d i n a n y ot h er r e s e ar c h
pr ot o c ol f or tr e at m e nt of St u d y Ul c er .
9.
T h e S u bj e ct h a s b e e n di a g n o s e d wit h m ali g n a nt di s e a s e n ot i n r e mi s si o n o v er t h e
5 y e a r s i m m e di at el y pr e c e di n g s cr e e ni n g vi sit 1. ( E x c e pt: c er vi c al c ar ci n o m a i n
sit u, c ut a n e o u s s q u a m o u s c ell c ar ci n o m a , c ut a n e o u s b a s al c ell c ar ci n o m a t h at
h a v e b e e n tr e at e d a n d h a v e n o  e vi d e n c e of r e c urr e n c e or m et a st a s e s ).
1 0.  St u d y ul c er ar e a h a s b e e n tr e at e d w it h r a di ati o n t h er a p y at a n y ti m e.
1 1.  I n t h e o pi ni o n of PI t h e s u bj e ct h a s a m e di c al c o n diti o n s u c h a s a ut oi m m u n e, r e n al,
h e p ati c or h e m at ol o gi c di s e a s e t h at m a k e s t h e s u bj e ct a n i n a p pr o pri at e c a n di d at e
f or p arti ci p ati o n i n st u d y.
1 2.  I n t h e m o nt h pr e c e di n g s cr e e ni n g vi sit 1 St u d y  Ul c er h a s b e e n tr e at e d wit h
a d v a n c e d ti s s u e e n gi n e er e d d e vi c e s 
m atri x b a s e d d e vi c e s ( e. g., A pli gr af™,
D er m a gr aft ™, O a si s ™).
1 3.  S u bj e ct i s di a g n o s e d wit h N e w Y or k H e art A s s o ci ati o n Cl a s s III a n d I V c o n g e sti v e
h e art .
1 4.  F ail ur e:  Cl a s s III:  S y m pt o m s wit h m o d er at e e x erti o n  or, Cl a s s I V: S y m pt o m s at
r e st.
1 5.  S u bj e ct i s di a g n o s e d wit h di a b et e s m ellit u s t h at i s p o orl y c o ntr oll e d a n d s h all b e
d efi n e d a s h e m o gl o bi n A 1 C > 1 0 %.
1 6.  St u d y  Ul c er i s c o m pl et el y or m or e t h a n 5 0 % of t h e St u d y Ul c er i s l o c at e d o n th e
f o ot (i. e. b el o w t h e m all e ol u s).
1 7.  S u bj e ct i s a f e m al e of c hil d b e ari n g p ot e nti al, a n d r ef u si n g t o u s e at l e a st o n e
m et h o d of c o ntr a c e pti o n a c c e pt a bl e b y PI s u c h a s birt h c o ntr ol pill s, I U D, c o n d o m s,
or s e x u al a b sti n e n c e.
1 8.  P o siti v e pr e g n a n c y t e st i n s cr e e ni n g vi sit 1 i n a f e m al e of c hil d b e ari n g p ot e nti al or
a cti v e pr e g n a n c y or br e a st -f e e di n g.
1 9.  I n t h e o pi ni o n of t h e PI t h e s u bj e ct i s u n a bl e t o u n d er st a n d or c o m pl y wit h st u d y
r el at e d pr ot o c ol i n cl u di n g b ut n ot li mit e d t o pr o vi di n g i nf or m e d c o n s e nt.
4. 4 D efi niti o n of st u d y c o m pl eti o n  
- 
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    1 4  
A s u bj e ct will b e c o n si d er e d a s c o m pl et e d t h e st u d y if:  
1. S u bj e ct h e al e d d uri n g t h e tr e at m e nt or f oll o w u p p h a s e a n d c o m pl et e d all vi sit s
i n t h e f oll o w u p p h a s e.
2. S u bj e ct di d n ot h e al a n d c o m pl et e d all vi sit s i n t h e tr e at m e nt a n d f oll o w u p
p h a s e.
3. S u bj e ct h e al e d a n d t h e n w o u n d r e c urr e d a n d c o m pl et e d t h e f oll o w u p p h a s e.
4. 5 S u bj e ct wit h dr a w al  
A s u bj e ct r a n d o mi z e d i nt o a tr e at m e nt ar m t h at h a s n ot c o m p let e d t h e st u d y a s d efi n e d 
b y s e cti o n 4. 4 will b e c o n si d er e d i n c o m pl et e.  
A n y s u bj e ct i s fr e e t o wit h dr a w fr o m t h e st u d y wit h o ut e x pl a n ati o n a n d wit h o ut f ut ur e 
c o n s e q u e n c e o n f ut ur e c ar e. I n v e sti g at or will m a k e e v er y eff ort t o o bt ai n r e a s o n f or 
wit h dr a w al o f s u bj e ct e s p e ci all y eli citi n g a n y a d v er s e e v e nt. 
T h e PI m a y s u s p e n d or t er mi n at e a s u bj e ct fr o m t h e tri al if d e e m e d m e di c all y n e c e s s ar y.  
T h e r e a s o n s f or s u s p e n si o n or t er mi n ati o n will b e r e c or d e d i n t h e p ati e nt’ s st u d y 
d o c u m e nt s.  
- 
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    1 5  
5. St u d y pr o c e d ur e s
5. 1 S u bj e ct i d e ntifi c ati o n:  
Aft er si g ni n g i nf or m e d c o n s e nt t h e s u bj e ct will a s si g n e d a s u bj e ct I D n u m b er b e gi n ni n g 
wit h B S N 2 0 1 8 0 0 1, B S N 2 0 1 8 0 0 2 a n d s o o n. All st u d y r el at e d m at eri al s ( e. g. s o ur c e 
d o c u m e nt s, i n v e sti g ati o n al d e vi c e et c.) will b e l a b el e d wit h t h e s u bj e ct I D a pri ori.  
5. 2 R a n d o mi z ati o n a n d s e q u e n c e all o c ati o n : 
A r a n d o m s e q u e n c e of n u m b er s fr o m 1 -1 6 will b e g e n er at e d i n t w o c ol u m n s ( A = 
C uti m e d ® S or b a ct ®  a n d B = A cti c o at ® ) i n E x c el ( Mi cr o s oft, R e d m o n d, W A). 8 e n v el o p e s 
wit h a c ar d l a b el e d C uti m e d ® S or b a ct ®  a n d 8 wit h a c ar d l a b el e d A cti c o at ®  will b e 
cr e at e d, s e al e d a n d a s si g n e d t h e r a n d o m n u m b er s a pri ori b ef or e r a n d o mi z ati o n of t h e 
fir st s u bj e ct B S N 2 0 1 8 0 0 1  b y t w o p e o pl e w h o ar e n ot p art of t h e r e s e ar c h t e a m . E n v el o p e s 
will b e pl a c e d i n s e c ur e l o c at i o n i n n u m b er or d er. T hi s pr o c e d ur e will g e n er at e a r a n d o m 
s e q u e n c e of 1 6 s u bj e ct s a n d 8 s u bj e ct s i n e a c h ar m. T hi s pr o c e d ur e will b e r e p e at e d f or 
a n ot h er bl o c k of s u bj e ct s 1 7 -3 0, a n d 3 1 -3 6. T h e bl o c k of 3 1 -3 6 will o nl y b e u s e d if t h e 
t ot al r a n d o mi z ati o n d o e s n ot r e a c h t o n = 3 0. O n c e a s u bj e ct i s r a n d o mi z e d, t h e 
i n v e sti g at or will o p e n t h e n e xt e n v el o p e i n t h e s e q u e n c e a n d writ e t h e s u bj e ct n u m b er o n 
t h e c ar d a n d i n cl u d e it a s p art of t h e r e c or d i n t h e s o ur c e d o c u m e nt s. T hi s will b e t h e 
tr e at m e nt a s si g n m e nt f or t h e r e st of t h e st u d y .  
5. 3 Bli n di n g:  
D u e t o t h e n at ur e of t h e st u d y a n d pr o d u ct s , i n v e sti g at or bli n di n g i s u nr e ali sti c a n d s u bj e ct 
bli n di n g i s u nli k el y. R e s e ar c h st aff will a v oi d n a mi n g t h e dr e s si n g or s u g g e sti n g t h e 
a s si g n m e nt t o t h e s u bj e ct s. H o w e v er , a n i n d e p e n d e nt m o nit or wit h e x p eri e n c e i n tr e ati n g 
w o u n d s will b e bli n d e d t o t h e tr e at m e nt a s si g n m e nt a n d will c o nfir m h e ali n g o ut c o m e s 
b a s e d o n i m a g e s. Dr . P a st ar a n d l a b or at or y p er s o n n el will b e bli n d e d t o t h e tr e at m e nt 
a s si g n m e n t s a s w ell. U n bli n di n g will o c c ur w h e n t h e st u d y i s offi ci all y cl o s e d f or st ati sti c al 
a n al y si s at htt p s:// cli ni c altri al s. g o v/ . 
5. 3. 1 B r e a ki n g of bli n di n g 
T h e PI , Dr. L ev -T o v,  i s n ot bli n d e d i n t hi s st u d y. Dr . P a st ar a n d h er l a b or at or y t e a m will 
b e  bli n d e d t o t h e i nt er v e nti o n. It i s n ot li k el y t h at a n e e d f or u n bli n di n g of t h e l a b or at or y 
t e a m will b e n e e d e d h o w e v er i n s u c h e xtr e m e cir c u m st a n c e ( e. g. u n u s u al a n d s e v er e 
i nf e cti o n i n w hi c h d et ail e d k n o wl e d g e of b a ct eri al s p e ci e s i n t h e w o u n d m a y e x p e dit e 
a d mi ni str ati o n of lif e s a vi n g a nti bi oti c t h er a p y) at hi s di s cr eti o n t h e PI m a y d e ci d e t o br e a k 
bli n di n g. T hi s will b e d o c u m e nt e d a n d c o n si d er e d i n t h e d at a a n al y si s.  
5. 4 I nf or m e d c o n s e nt 
- 
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O n vi sit S 1 e a c h s u bj e ct will b e gi v e n a n i nf or m e d c o n s e nt f or m (I C F) a n d a m pl e ti m e t o 
r e vi e w t h e i nf or m ati o n. All q u e sti o n s will b e a n s w er e d b y st u d y st aff. A s d et ail e d i n s e cti o n 
8. 2  n o st u d y pr o c e d ur e s h o ul d c o m m e n c e pri or t o I C F si g n at ur e  a n d s u bj e ct e x pr e s si o n 
of cl e ar  u n d er st a n d i n g of st u d y pr o c e d ur e s.  
5. 5 Eli gi bilit y 
Pri or t o r a n d o mi z ati o n t h e PI a n d st u d y st aff will e n s ur e s u bj e ct m et all i n cl u si o n a n d 
e x cl u si o n crit eri a. If all crit eri a ar e m et, s u bj e ct will b e d e e m e d eli gi bl e f or p arti ci p ati o n 
a n d pr o c e e d t o r a n d o mi z ati o n.  
5. 6 D e m o gr a p hi c s  
B a si c d e m o gr a p hi c d at a o n e a c h s u bj e ct will b e c oll e ct e d at t h e S 1 vi sit.  
5. 6. 1 D e m o gr a p hi c  d at a  
T h e f oll o wi n g d e m o gr a p hi c d at a t o b e c oll e ct e d:  
a.
N a m e
b.
D at e of birt h
c.
C o nt a ct i nf or m ati o n ( a d dr e s s, e m ail a d dr e s s, t el e p h o n e n u m b er s)
d.
G e n d er
e.
R a c e
f.
Et h ni cit y
g.
Hi st or y a n d c urr e nt t o b a c c o pr o d u ct s u s e ( p a c k y e ar s)
h.
H ei g ht (i n m et er s)
i.
B o d y w ei g ht (i n kil o gr a m s)
5. 7 Q u alit y of lif e a s s e s s m e nt s   
T h e E Q -5 D -5 L a n d t h e W Q o L i n str u m e nts  will b e u s e d a n d a s s e s s m e nt s t a k e pl a c e at 
vi sit s T 1, F 1 a n d F 2. T h e E Q -5 D -5 L c o n si st s of 2 p a g e s –  t h e E Q-5 D -5 L d e s cri pti v e 
s y st e m ( p a g e 2) a n d t h e E Q Vi s u al A n al o g u e s c al e ( E Q V A S) ( p a g e 3). T h e d e s cri pti v e 
s y st e m i s c o m pri s e d 5 di m e n si o n s: m o bilit y, s e lf-c ar e, u s u al a cti viti e s, p ai n/ di s c o mf ort, 
a n xi et y/ d e pr e s si o n. E a c h di m e n si o n h a s 5 l e v el s: n o pr o bl e m s, sli g ht pr o bl e m s, m o d er at e 
pr o bl e m s, s e v er e pr o bl e m s, a n d e xtr e m e pr o bl e m s. T h e s u bj e ct s will b e a s k e d t o i n di c at e 
hi s/ h er h e alt h st at e b y c h e c ki n g i n t h e b o x a g ai n st t h e m o st a p pr o pri at e st at e m e nt i n e a c h 
of t h e 5 di m e n si o n s. T h e E Q V A S r e c or d s t h e r e s p o n d e nt’ s s elf -r at e d h e alt h o n a 2 0 c m 
v erti c al, vi s u al a n al o g u e s c al e wit h e n d p oi nt s l a b ell e d ‘t h e b e st h e alt h y o u c a n i m a gi n e’ 
a n d ‘t h e w or st h e alt h y o u  c a n i m a gi n e’. T hi s i nf or m ati o n c a n b e u s e d a s a q u a ntit ati v e 
- 
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m e a s ur e of h e alt h a s j u d g e d b y t h e i n di vi d u al r e s p o n d e nt s. T h e i n str u m e nt s a n d d et ail e d 
i n str u cti o n s ar e pr e s e nt e d i n a p p e n di x  9. 8 . 
T h e W Q o L i n str u m e nt w a s d e v el o p e d s p e cifi c all y t o a d dr e s s h e al t h r el at e d q u alit y of lif e 
o ut c o m e s i n p e o pl e wit h w o u n d s  [2 4 ]. T h e W Q o L i s a s h ort q u e sti o n n air e m e a s uri n g 
h e alt h -r el at e d q u alit y of lif e ( H R Q o L) i n c hr o ni c w o u n d s a n d i s  c o m p o s e d of s e v e nt e e n 
it e m s attri b ut e d t o t hr e e s u b s c al e s o n e v er y d a y lif e, b o d y, a n d p s y c h e. 
5. 8  M e di c al hi st or y  
D uri n g t h e S 1 vi sit p erti n e nt m e di c al hi st or y d at a will b e c oll e ct e d fr o m t h e s u bj e ct s: 
a.
Li st of a cti v e m e di c al c o n diti o n s
b.
Li st ot h er n o n -a cti v e (r e s ol v e d) m e di c al c o n diti o n s
c.
F or e a c h di a g n o si s t h e di a g n o si s n a m e, d at e of di a g n o si s a n d st at u s (i. e. a cti v e /
n o n -a cti v e) s h o ul d b e li st e d .
d.
N e w di a g n o s e s ari si n g d uri n g st u d y j u d g e d b y PI a s n o n a d v er s e e v e nt s will b e
r e c or d e d i n t h e 
m e di c al hi st or y s e cti o n. M e di c al hi st ori e s  it e m s s h o ul d b e
c at e g ori z e d a s f oll o w s :
i.
C ar di o v a s c ul ar
ii.
D er m at ol o gi c
iii.
E n d o cri n e
i v.
G a str oi nt e sti n al
v.
G e nit o uri n ar y
vi.
H e m at ol o gi c
vii.
H e p ati c
viii.
I m m u n ol o gi c
i x.
L y m p h ati c
x.
N e ur ol o gi c al
xi.
Ot h er
xii.
P s y c hi atri c
xiii.
R e n al
xi v.
R e s pir at or y
5. 9  C o n c o mit a nt m e di c ati o n s  
All c o n c o mit a nt m e di c ati o n s h o ul d b e r e c or d e d a n d v er b al l y c o nfir m e d wit h t h e s u bj e ct 
d uri n g  vi sit S 1. A n y c h a n g e i n m e di c ati o n (i. e. a d diti o n or di s c o nti n u ati o n of a m e di c ati o n 
a n d a n y c h a n g e i n d o s e or fr e q u e n c y) s h o ul d b e r e c or d e d d uri n g all st u d y vi sit s. S p e cifi c 
att e nti o n s h o ul d b e gi v e n t o p ai n m e di c ati o n s a n d t h e f oll o wi n g d at a s h o ul d b e r e c or d e d: 
p ai n m e di c ati o n s pr e s cri b e d s p e cifi c all y f or w o u n d p ai n v er s u s p ai n m e di c ati o n s writt e n 
f or n o n-ul c er r el at e d p ai n. F or e a c h p ai n m e di c ati o n s s p e cifi c d o s e s h o ul d b e li st e d i n 
vi sit S 1. F or P R N p ai n m e di c ati o n s t h e s p e cifi c n u m b er of pill s t a k e n w e e kl y s h o ul d b e 
e sti m at e d wit h t h e s u bj e ct i n e v er y vi sit.  
5. 1 0  St u d y ul c er hi st or y 
- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

1
S p e cifi c  hi st or y of St u d y Ul c er s h o ul d b e d o c u m e nt e d a n d t h e f oll o wi n g d at a r e c or d e d: 
a.
St u d y ul c er d ur ati o n. T hi s will b e d efi n e d a s ti m e l a p s e d si n c e t h e l a st ti m e t h e s ki n
at t h e ul c er sit e w a s c o m pl et el y e pit h eli ali z e d wit h o ut dr ai n a g e or a s c a b.
b.
St u d y ul c er l o c ati o n: Ri g ht v er s u s l eft l e g a n d s p e cifi c l o c ati o n o n t h e l e g: pr o xi m al
c alf O R di st al g ait er ar e a, m all e ol u s A N D a nt eri or, p o st eri or, l at er al O R m e di al.
c.
N o n st u d y ul c er n u m b er a n d l o c ati o n s a s a b o v e a s w ell a s s h ort e st di st a n c e fr o m
St u d y Ul c er w h e n o n t h e s a m e li m b.
d.
C urr e nt St u d y Ul c er tr e at m e nt i n cl u di n g cl e a ni n g m et h o d s, pri m ar y a n d s e c o n d ar y
dr e s si n g a n d c o m pr e s si o n t h er a p y.
e.
St u d y ul c er tr e at m e nt s i n t h e 3 0 d a y s b ef or e vi sit S 1 (r e c or d a s a b o v e)
f.
A n y ot h er pr e vi o u s St u d y Ul c er tr e at m e nt s .
g.
A g e at fir st V L U e v er .
h.
T ot al n u m b er of V L U e v er .
i.
Hi st or y of V L U r e c urr e n c e d efi n e d a s o p e ni n g of t h e s ki n wit h vi si bl e ul c er,
dr ai n a g e or s c a b i n a l o c ati o n of a w o u n d t h at w a s pr e vi o u sl y 1 0 0 % e pit h eli ali z e d
wit h o ut dr ai n a g e or s c a b.
j.
Hi st or y of d e e p v ei n t hr o m b o si s .
k.
S p e cifi c hi st or y of li p o d er m at o s cl er o si s, l e g d er m atiti s, it c h, e d e m a, v ari c o siti e s ,
e d e m a et c.
l.
S p e cifi c hi st or y of a n y s ur gi c al tr e at m e nt f or v e n o u s  r efl u x s u c h a s s cl er ot h er a p y,
v ei n stri p pi n g, v ei n a bl ati o n et c. o n a n y li m b.
5. 1 1  Vit al si g n s 
At e v er y st u d y vi sit t h e f oll o wi n g vit al si g n will b e a s s e s s e d: t e m p er at ur e (i n C el si u s), 
bl o o d pr e s s ur e ( m m H g), h e art r at e  ( b e at s p er mi n ut e), r e s pir at or y r at e ( br e at h s p er 
mi n ut e), w ei g ht ( kil o gr a m s), p ai n ( V A S s e e a s s e s s m e nt s e p ar at el y), p eri -w o u n d it c h 
(N u m eri c R ati n g S c al e  (N R S ), s e e a p p e n di x D ), o v er all b o d y it c h (N R S , s e e a p p e n di x D).  
5. 1 2  P ai n a s s e s s m e nt 
P ai n i s a st at e d o ut c o m e i n t hi s s t u d y. T h e i nt e n sit y of p ai n at t h e st u d y ul c er i s t o b e 
a s s e s s e d at e v er y vi sit u si n g V A S. T h e Vi s u al A n al o g S c al e i s a v ali d at e d p ai n 
a s s e s s m e nt t o ol. [2 5 ] It i s criti c al t h at p ai n a s s e s s m e nt b e c o n d u ct e d pri or t o r e m o v al of 
a n y dr e s si n g or c o m pr e s si o n s y st e m a n d pri or t o a n y p h y si c al m a ni p ul ati o n of t h e li m b. 
P ai n a s s e s s m e nt s ar e c o n d u ct e d i n all p h a s e s of t h e st u d y a s d et ail e d i n t h e s c h e d ul e of 
a s s e s s m e nt s.  
T h e V A S s c al e i s 1 0 0 m m i n l e n gt h a n d o nl y o ri gi n al c o pi e s pl a c e d i n t h e s u bj e ct s’ s o ur c e 
d o c s a pri ori ar e t o b e u s e d. P h ot o c o p y of t h e s c al e m a y j e o p ar di z e m e a s ur e m e nt s a n d 
l at er d at a a n al y s e s a n d t h er ef or e o nl y t h e ori gi n al s s h o ul d b e u s e d. T h e s c al e m ar k s t h e 
w or d s “ n o p ai n” b y t h e l eft e n d of t h e h ori z o nt al b ar a n d “ T h e w or st p ai n I c a n i m a gi n e” 
b y t h e ri g ht e n d of t h e b ar. At e a c h a s s e s s m e nt t h e s u bj e ct i s a s k e d t o m ar k t h e l e v el of 
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c urr e nt p ai n b y m ar ki n g a n ot c h al o n g t h e b ar. T h e di st a n c e fr o m t h e l eft e n d of t h e b ar 
t o t h e n ot c h i s m e a s ur e d a n d r e c or d e d at e a c h a s s e s s m e nt.  
F or a n al y si s a n d i nt er pr et ati o n t h e f oll o wi n g c at e g ori e s will b e u s e d:  
0  - < 5  m m - n o p ai n  
5  - < 4 5  m m - mil d p ai n  
4 5  - < 7 5  m m - m o d er at e p ai n  
7 5 -1 0 0 m m - s e v er e p ai n
5. 1 3  F o c u s e d p h y si c al e x a m  
T h e e x a m will b e p erf or m e d at vi sit s d et ail e d i n t h e t a bl e of a s s e s s m e nt s  i. e. t h e st u d y 
c al e n d ar . F o c u s e d e x a m of t h e s u bj e ct’ s l o w er e xtr e miti e s will b e p erf or m e d b a s e d o n 
t h e s y st e m s d e s cri b e d i n t a bl e 2.  
S y st e m  
A s s e s s m e nt  
V a s c ul ar  
P ul s e s (f e m or a l, p o plit e al, d or s ali s p e di s, ti bi ali s 
p o st eri or), s ki n t e m p er at ur e, c a pill ar y r efill  
N e ur ol o gi c al 
S e n s or y m o n ofil a m e nt t e sti n g  
C ut a n e o u s 
Pr e s e n c e of h y p er pi g m e nt ati o n, e d e m a, atr o p h ie 
bl a n c h e, v ari c o siti e s, s c ar s, d er m atiti s  
T a bl e 2. F o c u s e d p h y si c al e x a m  
5. 1 4  W o u n d ar e a m e a s ur e m e nt 
W o u n d ar e a will b e m e a s ur e d  at e a c h vi sit a s d et ail e d i n t h e t a bl e of a s s e s s m e nt s. T h e 
ar e a i s m e a s ur e d i n c e nti m et er s s q u ar e d. T h e ar e a i s m e a s ur e d  u si n g a r ul er a n d 
m e a s uri n g t h e l e n gt h of t h e l o n g e st w o u n d a xi s p o s si bl e a n d m ult i pl yi n g b y t h e l e n gt h of 
t h e p er p e n di c ul ar a xi s. 
A d diti o n all y, t h e w o u n d will al s o b e m e a s ur e d u si n g t h e I n Si g ht ™ s y st e m ( e K ar e I n c.)[2 6 ]. 
D et ail e d o p er ati o n i n str u cti o n s  ar e f o u n d i n a p p e n di x E.  
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FI G U R E 1.  W o u n d ar e a m e a s ur e m e nt  
5. 1 5  Pr o d u ct a p pli c ati o n 
5. 1 5 . 1 St a n d ar d c ar e:  
D uri n g t h e s cr e e ni n g p h a s e a n d f oll o w u p p h a s e St u d y D e vi c e a n d C o m p ar at or ar e n ot 
a p pli e d. I n st e a d, o nl y t h e s e c o n d ar y dr e s si n g i s u s e d a n d a p pli e d dir e ctl y t o t h e w o u n d 
b e d. Dr e s si n g d e ci si o n c h art i s s h o w n i n t a bl e 3.  
5. 1 5 .2  Pri m ar y dr e s si n g: 
D r e s si n gs  ar e a p pli e d at all vi sit s a s i n di c at e d b y t h e t a bl e of  a s s e s s m e nt s. St u d y 
dr e s si n g i s  a p pli e d p er r a n d o mi z ati o n. Aft er w o u n d cl e a n si n g, e x a m, d e bri d e m e nt , 
m e a s ur e m e nt  a n d p h ot o gr a p h y , wo u n d dr e s si n g i s a p pli e d t o t h e w o u n d. Dr e s si n g s h o ul d 
c o v er t h e e ntir e w o u n d a n d o v erl a p u p t o 1 c m b e y o n d w o u n d e d g e s. Dr e s si n g s h o ul d b e 
i n c o nt a ct wit h w o u n d b e d.  
5. 1 5 .3  S e c o n d ar y dr e s si n g: 
T h e pri m ar y dr e s si n g  i s s e c ur e d i n pl a c e b y a s e c o n d ar y dr e s si n g. C h oi c e of s e c o n d ar y 
dr e s si n g will b e b a s e d o n e x u d at e l e v el a s d et ail e d i n t a bl e 3.  
S e c o n d ar y dr e s si n g d e ci si o n c h art:  [2 7 ] 
Cl a s sifi c ati o n  D e s cri pti o n 
P er pr ot o c ol 
dr e s si n g  
Dr y  
W o u n d b e d i s dr y; t h er e i s n o vi si bl e m oi st ur e 
a n d t h e pri m ar y dr e s si n g i s u n m ar k e d; 
dr e s si n g m a y b e a d h er e nt t o w o u n d.  
C uti m e d H y dr o B  
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M oi st  
S m all a m o u nt s of fl ui d ar e vi si bl e w h e n t h e 
dr e s si n g i s r e m o v e d; t h e pri m ar y dr e s si n g 
m a y b e li g htl y m ar k e d.  
C uti m e d Silt e c B  
W et  
S m all a m o u nt s of fl ui d ar e vi si bl e w h e n t h e 
dr e s si n g i s r e m o v e d; t h e pri m ar y dr e s si n g i s 
e xt e n si v el y m ar k e d, b ut stri k et hr o u g h i s n ot 
o c c urri n g;  
S at ur at e d  
Pri m ar y dr e s si n g i s w et a n d stri k et hr o u g h i s 
o c c urri n g; p eri w o u n d s ki n m a y b e m a c er at e d  
C uti m e d S or bi o n  
L e a ki n g  
Dr e s si n g s ar e s at ur at e d a n d e x u d at e i s 
e s c a pi n g fr o m pri m ar y a n d s e c o n d ar y 
dr e s si n g s o nt o cl ot h e s or b e y o n d;  
T a bl e 3. S e c o n d ar y dr e s si n g d e ci si o n c h art  
S e c o n d ar y d r e s si n g i s s e c ur e d i n pl a c e b y t h e fir st l a y er of t h e c o m pr e s si o n s y st e m. 
5. 1 5 .4  Dr e s si n g st or a g e:  
All st u d y dr e s si n g will b e  st or e d s af el y i n a l o c k e d s p a c e. Pr o d u ct s will b e st or e d pr o p erl y 
a n d a c c or di n g t h e m a n uf a ct ur e’ s st or a g e i n str u cti o n s.  
5. 1 6  Ti s s u e c oll e cti o n 
Ti s s u e c oll e cti o n will b e c o n d u ct e d at vi sit s T 0, T 2 a n d T 3  a s p er a p p e n di x A. All c oll e cti o n 
c o nt ai n er s ar e pr e -l a b el e d wit h t h e s u bj e ct I D. Aft er c oll e cti o n, t h e d at e i s writt e n o n t h e 
c o nt ai n er l a b el.  
5. 1 7  S h ar p d e bri d e m e nt 
Ul c er d e bri d e m e nt i s c o n si d er e d st a n d ar d c ar e . D e bri d e m e nt s h o ul d b e c o n d u ct e d a s 
d et ail e d i n t h e t a bl e of  a s s e s s m e nt s. D e bri d e m e nt all o w s pr o p er w o u n d m e a s ur e m e nt 
a n d a s s e s s m e nt. Ti s s u e wit h e s c h ar, sl o u g h or ot h er d e vit ali z e d ti s s u e will b e r e m o v e d 
a n d d e bri d e m e nt m at eri al c oll e ct e d p er a p p e n di x A.  S h ar p d e bri d e m e nt will b e c o n d u ct e d 
i n t hi s st u d y u si n g a c ur ett e, s c al p el or ot h er s h ar p d e vi c e d e e m e d a p pr o pri at e b y t h e 
I n v e sti g at or.  
C ar ef ul s h ar p d e bri d e m e nt i s t o b e p erf or m e d a s f oll o w s: 
1. St u d y ul c er a n d t h e s urr o u n di n g s ki n ar e cl e a n s e d wit h s ali n e.
2. All n o n -vi a bl e ti s s u e i s r e m o v e d fr o m t h e st u d y ul c er b e d a n d e d g e s u si n g cl e a n
t e c h ni q u e a n d a v oi di n g e x c e s s d e bri d e m e nt.
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3. Dir e ct pr e s s ur e i s a p pli e d t o t h e w o u n d t o a c hi e v e h e m o st a si s. C a ut er y i s t o b e
a v oi d e d a s m u c h a s p o s si bl e a n d o nl y u s e d if pr e s s ur e m et h o d s f ail e d t o a c hi e v e
h e m o st a si s.
5. 1 8  C o m pr e s si o n 
F o ur -l a y er c o m pr e s si o n will b e st a n d ar d c ar e f or all s u bj e ct s. T h e C o m prif or e®  s y st e m 
will b e u s e d a s d e s cri b e d i n A p p e n di x B . 
5. 1 9  A d v er s e e v e nt s 
5. 1 9 . 1 C oll e cti n g A d v er s e E v e nt s 
St u d y st aff a n d PI ar e r e s p o n si bl e f or s oli citi n g, r e c or di n g a n d r e p orti n g a n y a d v er s e 
e v e nt d uri n g t h e st u d y p eri o d. I n a d diti o n t o u n s oli cit e d r e p ort s b y s u bj e ct s, t h e PI a n d 
st u d y st aff will o p e n e v er y vi sit b y a s ki n g f or a n y c h a n g e i n h e alt h or a n y ot h er c o m pl ai nt 
si n c e t h e l a st vi sit.  
5. 1 9 . 2 D efi niti o n of a n a d v er s e e v e nt 
I n t hi s st u d y a n a d v er s e e v e nt ( A E) will b e d efi n e d b a s e d o n F D A C F R Titl e 2 1: “ A d v er s e 
e v e nt m e a n s a n y u nt o w ar d m e di c al o c c urr e n c e a s s o ci at e d wit h t h e u s e of a dr u g i n 
h u m a n s, w h et h er or n ot c o n si d er e d dr u g r el at e d” [2 8 ]. T h er ef or e a n A E i s c o n si d er e d a s 
a n y u n pl a n n e d m e di c al o c c urr e n c e t h at aff e c t s s u bj e ct’ s h e alt h a n d/ or w ell-b ei n g. T h e 
a d v er s e e v e nt n e e d n ot b e dir e ctl y r el at e d t o t h e st u d y d e vi c e or pr o c e d ur e.  A s s u c h, a n 
a d v er s e e v e nt m a y i n cl u d e a n y u ni nt e n d e d o ut c o m e s u c h a s a s y m pt o m or a n e w 
di a g n o si s or w or s e ni n g or i m pr o v e m e nt of e xi sti n g m e di c al c o n diti o n.  
S eri o u s a d v er s e e v e nt (S A E ) i s d efi n e d a c c or di n g t o FD A C F R titl e 2 1:  “ S eri o u s a d v er s e 
e v e nt or s eri o u s s u s p e ct e d a d v er s e r e a cti o n. A n a d v er s e e v e nt or s u s p e ct e d a d v er s e 
r e a cti o n i s c o n si d er e d " s eri o u s" if, i n t h e vi e w of eit h er t h e i n v e sti g at or or s p o n s or, it 
r e s ult s i n a n y of t h e f oll o wi n g o ut c o m e s: D e at h, a lif e-t hr e at e ni n g a d v er s e e v e nt, i n p ati e nt 
h o s pit ali z ati o n or pr ol o n g ati o n of e xi sti n g h o s pit ali z ati o n, a p er si st e nt or si g nifi c a nt 
i n c a p a cit y or s u b st a nti al di sr u pti o n of t h e a bilit y t o c o n d u ct n or m al lif e f u n cti o n s, or a 
c o n g e nit al a n o m al y/ birt h d ef e ct. I m p ort a nt m e di c al e v e nt s t h at m a y n ot r e s ult i n d e at h, 
b e lif e -t hr e at e ni n g, or r e q uir e h o s pit ali z ati o n m a y b e c o n si d er e d s eri o u s w h e n, b a s e d 
u p o n a p pr o pri at e m e di c al j u d g m e nt, t h e y m a y j e o p ar di z e t h e p ati e nt or s u bj e ct a n d m a y 
r e q uir e m e di c al or s ur gi c al i nt er v e nti o n t o pr e v e nt o n e of t h e o ut c o m e s li st e d i n t hi s 
d efi niti o n. E x a m pl e s of s u c h m e di c al e v e nt s i n cl u d e all er gi c br o n c h o s p a s m r e q uiri n g 
i nt e n si v e tr e at m e nt i n a n e m er g e n c y r o o m or at h o m e, bl o o d d y s cr a si a s or c o n v ul si o n s 
t h at d o n ot r e s ult i n i n p ati e nt h o s pit ali z ati o n, or t h e d e v el o p m e nt of dr u g d e p e n d e n c y or 
dr u g a b u s e”.  
A  S A E i s t h er ef or e a n A E t h at:  
1. R e s ult s i n d e at h .
2. I s lif e-t hr e at e ni n g at t h e ti m e of t h e A E.
3. R e s ult s i n a n i n p ati e nt h o s pit ali z ati o n or pr ol o n g ati o n of e xi sti n g h o s pit ali z ati o n .
4. R e s ult s i n a p er si st e nt or si g nifi c a nt i n c a p a cit y or s u b st a nti al di sr u pti o n of t h e
a bilit y t o c o n d u ct n or m al lif e f u n cti o n s.
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5. I s a c o n g e nit al a n o m al y/ birt h d ef e ct.
6. M a y r e q uir e m e di c al or s ur gi c al i nt er v e nti o n t o pr e v e nt o n e of t h e o ut c o m e s
li st e d a b o v e.
5. 1 9 . 3 D o c u m e nti n g  a n d r e p orti n g a d v er s e e v e nt s  
All a d v er s e e v e nt s n e e d t o b e r e c or d e d a n d r e p ort e d t o t h e l o c al I R B a n d t h e s p o n s or i n 
a ti m el y m a n n er a n d i n a c c or d a n c e t o l o c al r e g ul ati o n s.  
5. 1 9 . 4 A s s e s s m e nt of a d v a n c e e v e nt  c a u s alit y 
F or e a c h A E t h e PI i s r e s p o n si bl e f or a s s e s si n g t h e r el ati o n s hi p b et w e e n st u d y pr o c e d ur e 
i n cl u di n g a p pli c ati o n of st u d y d e vi c e a n d t h e A E i n or d er t o d et er mi n e c a u s alit y.  T h e 
r el ati o n s hi p of A E t o st u d y a cti viti es will b e r e c or d e d i n t h e A E l o g. T h e PI will u s e t h e 
f oll o wi n g t er m s t o d e s cri b e r el ati o n s hi p of A E t o st u d y a cti viti e s: 
Pr o b a bl e:  t h e A E a p p e ar s t o f oll o w a t e m p or al s e q u e n c e f oll o wi n g st u d y r el at e d a cti viti e s, 
or h a s a d o s e r el ati o n s hi p wit h st u d y a ct i viti e s (i. e. w or s e w h e n a cti vit y i n cr e a s e d a n d 
vi s a v er s a) a n d c a n n ot b e attri b ut e d t o ot h er c a u s e s s u c h a s p a st m e di c al hi st or y.  
P o s si bl e: t h e A E a p p e ar s t o f oll o w a t e m p or al s e q u e n c e f oll o wi n g st u d y r el at e d a cti viti e s, 
or h a s a d o s e r el ati o n s hi p wit h s t u d y a cti viti e s (i. e. w or s e w h e n a cti vit y i n cr e a s e d a n d 
vi s a v er s a) b ut c o ul d b e attri b ut e d t o ot h er c a u s e s s u c h a s p a st m e di c al hi st or y a n d ot h er 
t h er a pi e s. 
U nli k el y: t h e A E d o e s n ot a p p e ar s t o f oll o w a t e m p or al s e q u e n c e f oll o wi n g st u d y r el at e d 
a cti viti e s, a n d d o e s n ot d e m o n str at e a d o s e r el ati o n s hi p wit h st u d y a cti viti e s (i. e. w or s e 
w h e n a cti vit y i n cr e a s e d a n d vi s a v er s a) a n d c o ul d r e a s o n a bl y b e attri b ut e d t o ot h er 
c a u s e s s u c h a s p a st m e di c al hi st or y a n d ot h er t h er a pi e s.  
C a n n ot a s s e s s: t h e PI c a n n ot m a k e d et er mi n ati o n of c a u s alit y at t hi s ti m e d u e t o 
i n s uffi ci e nt i nf or m ati o n a n d/ or c o ntr a di ct or y or u nr eli a bl e i nf or m ati o n. T h e PI 
will 
fr e q u e ntl y r e-e v al u at e t h e A E i n or d er t o cl a s sif y it i nt o o n e of t h e cl a s s e s a b o v e.  
5. 2 0  Fitti n g f or st o c ki n g  
O n c e h e al e d, s u bj e ct s will b e fitt e d wit h c o m pr e s si o n st o c ki n g ( J o b s S oftfit) a s p er t h e 
m a n uf a ct ur er’ s i n str u cti o n s.  
5. 2 1  I n str u cti o n s f or f oll o w u p c ar e 
O n c e s u bj e ct s ar e i d e ntifi e d a s h e al e d, t h e y will m o v e i nt o t h e f oll o w u p p h a s e. S u bj e ct s 
w h o c o m pl et e d t h e tr e at m e nt p h a s e (r e g ar dl e s s of h e ali n g st at u s) will b e m o v e d t o t h e 
f oll o w u p st a g e a s w ell. W hil e i n t h e f oll o w u p p h a s e, s u bj e ct s will b e r et ur n e d t o t h e c ar e 
pr o vi d er w h o r ef err e d t h e m t o t h e st u d y a n d f oll o w u p c ar e will  c o n si st of a p pr o pri at e 
c o m pr e s si o n t h er a p y, w o u n d c ar e (if n e e d e d) a n d ot h er m e di c all y i n di c at e d tr e at m e nt s 
a s d et er mi n e d b y t h e PI.  
- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

2
5. 2 2  A n kl e - br a c hi al –  i n d e x ( A BI) 
A BI s h o ul d b e c al c ul at e d f or all s u bj e ct s d uri n g vi sit S 1. T h e pr ot o c ol f or m e a s uri n g a n d 
c al c ul ati n g A B I i s d et ail e d i n a p p e n di x C. T h e r e s ult of t h e t e st s h o ul d b e d o c u m e nt e d i n 
t h e C R F.  
6. St u d y c o n d u ct
6. 1 S c h e d ul e of a s s e s s m e nt s  
A s s e s s m e nt s will b e c o n d u ct e d a s d e s cri b e d i n t h e pr ot o c ol a c c or di n g t o t h e s c h e d ul e 
pr e s e nt e d i n T a bl e  1.   
6. 2 H a n dli n g u n s c h e d ul e d vi sit s  
At a n y p oi nt d uri n g t h e st u d y s u bj e ct s m a y pr e s e nt f or a n u n s c h e d ul e d vi sit or m a y r e q uir e 
a n u n s c h e d ul e d vi sit at t h e di s cr eti o n of t h e  PI. C o m m o n r e a s o n s f or u n s c h e d ul e d vi sit s 
m a y i n cl u d e ( b ut ar e n ot li mit e d t o): a dj u st m e nt or r e a p pli c ati o n of c o m pr e s si o n s y st e m, 
dr e s si n g o v er w h el m e d wit h e x u d at e, a d v er s e e v e nt.  
I n t h e e v e nt of a n u n s c h e d ul e d vi sit, t h e d et ail s of t h e vi sit will b e r e cor d e d i n t h e s o ur c e 
d o c u m e nt s a n d a d v er s e e v e nt s l o g g e d a s n e e d e d.  
6. 3 H a n dli n g mi s s e d vi sit s  
It i s pr ef err e d t h at s u bj e ct s ar e s e e n at r e g ul ar i nt er v al s. H o w e v er, t hi s m a y n ot b e 
p o s si bl e at ti m e s. If a s u bj e ct n e e d s  t o mi s s a vi sit, e v er y eff ort s h o ul d b e m a d e t o 
r e s c h e d ul e a s cl o s e a s p o s si bl e t o t h e ori gi n al d at e a n d t h e n r e s u m e f oll o wi n g vi sit s at 
t h e ori gi n al i nt er v al s. F or e x a m pl e, if a s u bj e ct r e g ul arl y vi sit s o n W e d n e s d a y s a n d will 
mi s s a vi sit a n d a m a k e u p vi sit i s s c h e d ul e d f or t h at Fri d a y, t h e n e xt vi sit s h o ul d r et ur n t o 
t h e ori gi n al i nt er v al s a nd  b e s c h e d ul e d f or t h e n e xt W e d n e s d a y.  
6. 4 St o p pi n g r ul e: 
T h e PI m a y d e ci d e t o st o p t h e tri al d u e t o s af et y c o n c er n s at a n y ti m e d uri n g t h e tri al. T h e 
PI m a y c o n s u lt t h e l o c al I n stit uti o n al R e vi e w B o ar d (I R B) a n d/ or S p o n s or f or s af et y r el at e d 
d e ci si o n s.  
7 St ati sti c al m et h o d s  
T hi s st u d y i s a si n gl e c e nt er r a n d o mi z e d l o n git u di n al pil ot st u d y t o i n v e sti g at e t h e eff e cti v e n e s s 
of C uti m e d ® S or b a ct ® ( St u d y D e vi c e) c o m p ar e d  t o C o m p ar at or ( sil v er i m pr e g n at e d 
c o nt a ct l a y er dr e s si n g -  A cti c o at ® ) i n m o dif yi n g b a ct eri al l o a d i n v e n o u s l e g ul c er s ( V L U). 
Effi c a c y will b e m e a s ur e d a s t h e  diff er e n c e i n c h a n g e i n b a ct eri al l o a d c o m p ar e d t o 
b a s eli n e  b et w e e n t w o st u d y ar m s i. e. St u d y D e vi c e v s. C o m p ar at or. T hi s st u d y will al s o 
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c o m p ar e b a ct eri al sil v er r e si st a n c e b a s e d o n g e n eti c a n d p h e n ot y pi c c h ar a ct eri z ati o n  
o v er ti m e , h e ali n g r at e, c o m pl et e h e ali n g at 6 w e e k s, p ai n, q u alit y of lif e ( Q O L) 
m e a s ur e m e nt s a n d a d v er s e e v e nt s  a s s e c o n d ar y e n d p oi nt s .  
W e e x p e ct t o st u d y n = 3 0 s u bj e ct s f or b ot h t h e pri m ar y a n d s e c o n d ar y e n d p oi nt s. T h e n u m b er of 
s u bj e ct s e sti m at e d f or t h e st u d y ( n = 3 0) i s n ot b a s e d o n h y p ot h e si s dri v e n st ati sti c al p o w er 
c al c ul ati o n.  R at h er, a s a pil ot st u d y, a g o al f or t hi s i n v e sti g ati o n i s t o g e n er at e eff e ct e sti m at e s 
t h at will a s si st i n d et er mi ni n g a n a p pr o pri at e s a m pl e si z e f or f ut ur e st u di e s.    
Pri or t o p erf or mi n g st ati sti c al a n al y s e s o n q u a ntit ati v e st u d y d at a, t h e d at a will b e c h e c k e d, 
s cr e e n e d a n d v erifi e d t o e n s ur e t h e i nt e grit y of t h e d at a b a s e. D at a s cr e e ni n g will f o c u s o n s e v er al 
a s p e ct s. W e will d et er mi n e t h e a m o u nt, t h e p att er n, a n d r a n d o m n e s s of mi s si n g d at a. W e will 
d efi n e o utli er s a s o b s er v ati o n s t h at a p p e ar t o b e v er y hi g h or v er y l o w, a n d d e ci d e h o w t o pr o c e e d 
b a s e d o n t h e pr e s u m e d c a u s e. 
W e will i d e ntif y i n c o n si st e n ci e s wit hi n a si n gl e v ari a bl e a n d 
b et w e e n v ari a bl e s. I niti all y, 
w e 
will p erf or m a n e x pl a n at or y d at a a n al y si s; vi s u all y vi a 
gr a p hi c s/ pl ot s a n d n u m eri c all y b y d e s cri pti v e st ati sti c s wit h  m e a n, st a n d ar d d e vi ati o n f or 
m e a s ur e m e nt s t a k e n o n a c o nti n u o u s s c al e, a n d fr e q u e n ci e s a n d p er c e nt a g e s, v ari o u s t y p e s of 
cr o s s -t a b ul ati o n s f or m e a s ur e m e nt s t a k e n o n a c at e g ori c al s c al e. C orr e s p o n di n g c o nfi d e n c e 
i nt er v al s ( CI) f or m e a n s a n d pr o p orti o n s will b e c al c ul at e d. T o h a v e a b ett er u n d er st a n di n g of t h e 
r el ati o n s hi p s a m o n g diff er e nt st u d y m e a s ur e m e nt s, p ar a m etri c or n o n-p ar a m etri c c orr el ati o n 
c o effi ci e nt s, bi v ari at e/ m ulti di m e n si o n al cr o s s -t a b ul ati o n s will b e c o n str u ct e d. All t h e d e s cri pti v e 
st ati sti c s  will b e r e p ort e d f or all s u bj e ct s a n d b y st u d y ar m.  
T h e pri m ar y e n d p oi nt of t h e st u d y, t h e b a ct eri al l o a d i n C F U/ g, will b e c al c ul at e d f or e a c h w o u n d 
at vi sit s T 0, T 2 a n d T 3 a m o n g St u d y D e vi c e a n d C o m p ar at or ar m s. T h e diff er e n c e i n m e a n s of 
t h e b a ct eri al l o a d fr o m T 3 t o T 0 will b e c al c ul at e d a n d c o m p ar e d b et w e e n st u d y ar m s wit h 
St u d e nt’ s t -t e st. T o b e a bl e t o st u d y t h e tr aj e ct ori e s of t h e b a ct eri al l o a d o v er ti m e, o v er all a n d b y 
st u d y ar m s, t h e ti m e s eri e s pl ot s will b e d e pi ct e d a n d r e p e at e d m e a s ur e s r e gr e s si o n a n al y si s will 
b e p erf or m e d w h er e ti m e a n d st u d y ar m a s t h e m ai n eff e ct s. T y p e s of v ari a n c e -c o v ari a n c e m atri x 
will b e d et er mi n e d b y st a n d ar d st ati sti c al pr o c e d ur e s. W e pl a n t o e x p a n d t h e r e gr e s si o n m o d el 
a n d i n cl u d e ot h er s u bj e ct c h ar a ct eri sti c s f or a d diti o n al c o v ari at e a dj u st m e nt. A dj u st e d r e gr e s si o n 
c o effi ci e nt s a n d c orr e s p o n di n g 9 5 % c o nfi d e n c e i nt er v al ( 9 5 % CI) will b e r e p ort e d f or t h e st u d y ar m 
a s t h e m ai n eff e ct i n t h e r e gr e s si o n m o d el s . 
T h e s e c o n d ar y e n d p oi nt s s u c h a s mi cr o bi ol o gi c al o ut c o m e s, cl i ni c al w o u n d o ut c o m e s, pai n  
r el at e d o ut c o m e s, q u alit y of lif e m e a s ur e m e nt s, a n d saf et y o ut c o m e s  will b e a n al y z e d wit h si mil ar 
st ati sti c al m et h o d s  a s t h e pri m ar y e n d p oi nt.   
D u e t o t h e n at ur e of a pil ot st u d y wit h li mit e d s a m pl e si z e, r e gr e s si o n m o d el s mi g ht h a v e 
c o n v er g e n c e pr o bl e m i. e. r e gr e s si o n e sti m at e s a n d c orr e s p o n di n g 9 5 % CI mi g ht n ot b e e sti m a bl e. 
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T h er ef or e, w e mi g ht e x pl or e diff er e nt r e gr e s si o n m o d el s a s a s e c o n d ar y s o ur c e of m o d eli n g 
a p pr o a c h. R e gr e s si o n m o d el a s s u m pti o n s will b e c h e c k e d  a n d m o d el di a g n o sti c s will b e d o n e 
b a s e d o n t h e a p pr o pri at e st ati sti c al t o ol s. Tr a n sf or m ati o n s of t h e d at a i n or d er t o m e et st ati sti c al 
a s s u m pti o n s will b e u n d ert a k e n w h e n i n di c at e d. T y p e -1 err or will b e s et t o 5 % ( al p h a = 0. 0 5) a n d 
will b e a dj u st e d f or m ul ti pl e c o m p ari s o n s. St a n d ar d m o d el di a g n o sti c t o ol s will b e u s e d. All of t h e 
st ati sti c al a n al y s e s will b e c arri e d o ut u si n g S A S ( S A S I n stit ut e I n c., C ar y, N C) or R ( R F o u n d ati o n 
f or St ati sti c al C o m p uti n g, Vi e n n a, A u stri a. htt p:// w w w. R -pr oj e ct. or g/ ).  
8 R e g ul at or y a n d et hi c al i s s u e s  
8. 1 pr ot o c ol i n stit uti o n al a p pr o v al  
T h e PI will s u b mit t h e pr ot o c ol a n d all r el at e d m at eri al s ( e. g. I C F) f or a p pr o v al b y t h e l o c al 
I n stit uti o n al R e vi e w B o ar d (I R B) b ef or e a n y st u d y r el ate d a cti vit y c o m m e n c e s. All l o c al 
a n d F e d er al r e g ul at or y r ul e s will b e f oll o w e d a n d a d e di c at e d r e g ul at or y m o nit or will b e 
a s si g n e d t o t h e pr ot o c ol.  
8. 2 i nf or m e d c o n s e nt  
D uri n g vi sit S 1 a n d b ef or e a n y st u d y a cti viti e s ar e i niti at e d, e a c h s u bj e ct will b e pr o vi d e d 
wit h d et ail e d i nf or m ati o n a b o ut t h e st u d y a n d a m pl e ti m e t o r e vi e w I C F i n or d er t o o bt ai n 
a n i nf or m e d c o n s e nt. T h e s u bj e ct ( or  l e g all y a ut h ori z e d r e pr e s e nt ati v e) will t h e n b e gi v e n 
t h e o p p ort u nit y t o a s k a n y q u e sti o n s a b o ut t h e st u d y a n d all q u e sti o n s will b e a n s w er e d. 
T h e s u bj e ct ( or l e g all y a ut h ori z e d r e pr e s e nt ati v e) will t h e si g n a n d d at e t h e I C F a c c or di n g 
t o t h e r e g ul at or y a n d l e g al r e q uir e m ent s. I C F will  b e s i g n e d, d at e d a n d r et ai n e d b y t h e PI  
a s p art of t h e st u d y r e c or d s. N o st u d y r el at e d a cti viti e s or pr o c e d ur e s will t a k e pl a c e 
b ef or e v ali d c o n s e nt i s o bt ai n e d  i n a n et hi c al m a n n er a n d wit h o ut.   
I n t h e c a s e of a pr ot o c ol a m e n d m e nt , t h e I C F will b e r e vi s e d t o  r efl e ct s ai d c h a n g e s a s 
r e q uir e d b y I R B. O n c e r e vi s e d, t h e I C F will b e si g n e d b y all n e w s u bj e ct s e nr oll e d fr o m 
t h at d at e f or w ar d a s w ell a s f or all s u bj e ct s still i n t h e st u d y (i. e. i n t h e s cr e e ni n g, tr e at m e nt 
or f oll o w u p p h a s e ) w h e n t h e y ar e n e xt s c h e d ul e d t o a p p e ar f or a st u d y vi sit.  
8. 3 D at a h a n dli n g, s af et y a n d q u alit y a s s ur a n c e  
T h e PI a n d st u d y st aff will b e r e s p o n si bl e f or a c c ur at e a n d c o m pl et e d at a c oll e cti o n. 
T h e PI a n d t h e st u d y st aff will  e n s ur e t h at e a c h s u bj e ct’ s a n o n y mit y will b e m ai nt ai n e d 
a n d e a c h s u bj e ct’ s i d e ntit y will b e pr ot e ct e d fr o m u n a ut h ori z e d p arti e s. T h e i n v e sti g at or 
will m ai nt ai n all d o c u m e nt s r el at e d t o t hi s st u d y i n stri ct c o nfi d e n c e.  
- 
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8. 3. 1 S o ur c e  d o c u m e nt ati o n  
T h e PI a n d st u d y st aff will cr e at e c a s e r e p ort f or m s ( C R F) t o r e c or d all st u d y pr o c e d ur e s 
a n d o ut c o m e s. C R F will b e k e pt i n bi n d er s d e di c at e d t o e a c h s u bj e ct u p o n e nr oll m e nt. PI 
a n d st u d y st aff will k e e p all s u bj e ct -s p e cifi c m at eri al s i n t h e s u bj e ct bi n d er. All g e n er al 
st u d y r el at e d d o c u m e nt ati o n s u c h a s st u d y pr ot o c ol, I R B c o m m u ni c ati o n s, A E l o g et c. will 
b e k e pt i n t h e st u d y bi n d er . 
8. 3. 2 D at a s af et y  
All c oll e ct e d d at a will b e fil e d i n st u d y a n d s u bj e ct bi n d er s. All bi n d er s ar e k e pt i n t h e st u d y 
c o or di n at or’ s offi c e w hi c h i s l o c k e d. T h e offi c e i s l o c at e d i n a b uil di n g wit h 2 4 h o ur s 
s e c urit y. El e ctr o ni c d at a i s n ot e x p e ct e d t o b e c oll e ct e d dir e ctl y d uri n g t h e st u d y e x c e pt 
w o u n d i m a gi n g . W o u n d i m a gi n g will b e c oll e ct e d i n a d e -i d e ntifi e d m a n n er a n d st or e d  o n 
a s e c ur e s er v er m ai nt ai n e d b y a v e n d or t h at i s b o u n d b y U S pr i v a c y r e g ul ati o n s (S e e 
A p p e n di x E ). D at a a n al y si s will b e c o n d u ct e d i n a d e -i d e ntifi e d m a n n er t o e n s ur e s u bj e ct’ s 
c o nfi d e nti alit y . N o n e of t h e p u bli c ati o n s or pr e s e nt ati o n s d uri n g a n d aft er st u d y e n d  will 
u s e a n y of t h e s u bj e ct’ s p er s o n al i d e ntifi er i n cl u d i n g i m a g e s. If r el e v a nt, o nl y n o n-
i d e ntifi a bl e i m a g e s of w o u n d s tr e at e d i n t h e st u d y will b e u s e d i n f ut ur e p u bli c ati o n s a n d/ or 
pr e s e nt ati o n s r el at e d t o t hi s st u d y.  
8. 3. 3 D at a q u alit y a s s ur a n c e  
T h e PI a n d st u d y st aff will e nt er all d at a i n t h e C R F i n a n a c c ur at e a n d c o m pl et e m a n n er. 
R e g ul at or y p er s o n n el d e si g n at e d a n d a ut h ori z e d b y t h e PI, S p o n s or a n d I R B will 
p eri o di c all y r e vi e w all st u d y m at eri al s f or c o m pl et e n e s s a n d a c c ur a c y. T h e y will pr o d u c e 
a li st of q u eri e s t o t h e PI a n d st u d y st aff i n or d er t o r e s ol v e a c c or di n g t h e l o c al St a n di n g 
O p er ati n g Pr o c e d ur e s.  
8. 4 G o o d cli ni c al pr a cti c e 
T h e PI, st u d y st aff a n d t h e S p o n s or ar e c o m mitt e d t o e n s ur e t h at all st u d y pr o c e d ur e s 
i n cl u d e d i n t h e pr ot o c ol ar e c arri e d o ut t o t h e G o o d Cli ni c al Pr a cti c e g ui d eli n e s s et o ut b y 
t h e I nt er n ati o n al C o nf er e n c e o n H ar m o ni z ati o n. A d diti o n all y t h e PI, st u d y st aff a n d 
S p o n s or ar e c o m mitt e d t o a bi d e b y all l e g al r e q uir e m e nt s s et b y l o c al a g e n ci e s.   
8. 5 St u d y d ur ati o n a n d p r e m at ur e t er mi n ati o n 
8. 5. 1  E a c h s u bj e ct i s e nr oll e d i n t h e st u d y f or ei g ht w e e k s. It i s a nti ci p at e d t h at t h e st u d y 
will b e c o m pl et e (i. e. l a st s u bj e ct c o m pl et e d all ei g ht w e e k s) wit hi n o n e y e ar of fir st s u bj e ct 
r e cr uit m e nt.  
- 
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8. 5. 2  It i s t h e i nt e nti o n of all p arti e s t o c arr y o ut t h e st u d y t o c o m pl eti o n. H o w e v er, if t h e 
PI, S p o n s or, I R B or a n y ot h er r e g ul at or y a ut h orit y ar e m a d e a w ar e of a n y cir c u m st a n c e s 
t h at s u g g e st st u d y s u bj e ct s ar e at ri s k if t h e st u d y c o nti n u e s, t h e PI or S p o n s or, m a y 
d e ci d e o n e arl y t er mi n ati o n of t h e st u d y. E arl y t er mi n ati o n d e ci si o n will b e t a k e n i n 
c o n s ult ati o n b et w e e n b ot h PI a n d S p o n s or.  
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St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

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9 A p p e n di c e s:  
9. 1 A p p e n di x A  - M ol e c ul ar Mi cr o bi ol o g y Pr ot o c ol (Dr. P a st ar’ s L a b or at or y ) 
P U R P O S E  
T h e p ur p o s e of t hi s pr o t o c ol i s t o d e s cri b e t h e m et h o d s t h at will b e u s e d t o e v al u at e 
m o dif yi n g b a ct eri al l o a d a n d s il v er r e si st a n c e i n s a m pl e s fr o m v e n o u s l e g ul c er s ( V L U) 
s u bj e ct s  w h o h a v e u n d er g o n e st a n d ar d of c ar e tr e at m e nt wit h St u d y D e vi c e ( C uti m e d ® 
S or b a ct ®) a n d st a n d ar d  of c ar e tr e at m e nt  wit h a cti v e c o ntr ol ( A cti c o at ® ) o v er a 4-w e e k 
p eri o d. G e n e ti c a n al y s e s ( b y q P C R) a n d st a n d ar d 
mi cr o bi ol o g y will b e utili z e d t o 
c h ar a ct eri z e t h e m e c h a ni s m s t hr o u g h w hi c h C uti m e d ® S or b a ct ® m o difi e s b a ct eri al l o a d 
a n d pr o m ot e s h e ali n g of c h r o ni c V L U . U n d er st a n di n g t h e m e c h a ni s m t hr o u g h w hi c h 
C uti m e d ®  S or b a ct ® sti m ul at e s h e ali n g i n p ati e nt s m a y pr o m ot e, i m pr o v e a n d e x p a n d it s 
cli ni c al u s e.  
I N T R O D U C TI O N 
T h e g o al of t h e st u d y will b e t o i n v e sti g at e t h e eff e ct a n d m e c h a ni s m of a cti o n of 
C uti m e d ® S or b a ct ®  o n b a ct eri al p o p ul ati o n s a n d t h eir sil v er r e si st a n c e i n V L U. C uti m e d ® 
S or b a ct ®  pr o d u ct s ar e B S N’ s pr o pri et ar y t e c h n ol o g y dr e s si n g d e vi c e f or tr e ati n g V L U.  
B a c k gr o u n d a n d R ati o n al e:  O ur pr e vi o u s i n vi v o st u di e s utili zi n g p or ci n e w o u n d m o d el 
h a v e s h o w n t h at sil v er tr e at m e nt i n d u c e s e x pr e s si o n of vir ul e n c e g e n e s i m p ort a nt f or 
bi ofil m f or m ati o n i n cli ni c al i s ol at e s of m et hi cilli n r e si st a nt St a p h yl o c o c c u s a ur e u s  a n d 
A ci n et o b a ct er b a u m a n ni  [1 5 ]. F urt h er m or e i n ci d e n c e of sil v er r e si st a n c e i s a n e m er gi n g 
pr o bl e m i n tr e at m e nt of c hr o ni c w o u n d p at h o g e n s , [1 2 ]. 
D e si g n : T h e st u d y i s m ulti c o m p o n e nt i n v ol vi n g a cli ni c al st u d y g ui d e d b y  Dr . H a d ar L e v -
T o v a n d m ol e c ul ar l a b or at or y c o m p o n e nt b y  Dr . Ir e n a P a st ar.  
T h e cli ni c al st u d y will e nr oll 3 0 p ati e nt s wit h V L U w h o h a v e b e e n e x p o s e d t o  sil v er b a s e d 
t h er a p y. F oll o wi n g a 2-w e e k r u n -i n p h a s e, 1 5 s u bj e ct s  will  b e r e c ei vi n g C u ti m e d ® 
S or b a ct ®, w hil e ot h er 1 5 s u bj e ct s  will r e c ei v e c o m m o n w o u n d c ar e pr o d u ct  c o nt ai ni n g 
sil v er,  A cti c o at ®  i n a d diti o n t o st a n d ar d of c ar e ( S O C). T h e tr e at m e nt p h a s e will l a st 4 
w e e k s  f oll o w e d b y a f oll o w u p vi sit 2 w e e k s l at er. T h e st a n d ar d c ar e i n v ol v es w e e kl y vi sit s 
i n w hi c h w o u n d s will b e cl e a n e d a n d d e bri d e d. D e bri d e m e nt ti s s u e fr o m t h e w o u n d s will 
b e c oll e ct e d f or m ol e c ul ar mi cr o bi ol o gi c al i n v e sti g ati o n.  
L o c ati o n : S u bj e ct s will b e pr o vi d e d st a n d ar d c ar e at t h e U M d er m at ol o g y cli ni c al tri al s 
u nit. T h e cli ni c al t e a m l e d b y Dr. H a d ar L e v -T o v i s p ur s ui n g U M I R B a p pr o v al. Dr. Ir e n a 
P a st ar  a n d h er t e a m will c o n d u ct t h e m ol e c ul ar mi cr o bi ol o g y a n d st a n d ar d mi cr o bi ol o g y 
a s s e s s m e nt s of t h e s p e ci m e n s c oll e ct e d i n t hi s e x pl or at or y p ati e nt o ut c o m e st u d y.  
R A TI O N A L E  
T hi s r e s e ar c h pr ot o c ol will pr o vi d e i nf or m ati o n t h at m a y f urt h er t h e u n d er st a n di n g of 
C uti m e d ®  S or b a ct ® tr e at m e nt i n a c c el er ati n g w o u n d h e ali n g vi a c h a n g e s i n mi cr o bi al 
l o a d a n d pr e v e nti o n of sil v er r e si st a n c e. T h e b a ct eri al l o a d i s i n cr e a s e d i n n o n -h e ali n g 
- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

3
V L U s a n d pr o m oti n g  a n o n -h e ali n g w o u n d p h e n ot y p e.  W e will al s o e v al u at e e x pr e s si o n 
of s p e cifi c s et of sil v er r e si st a n c e g e n e s w h o s e e x pr e s si o n 
m a y b e sti m ul at e d b y 
pr ol o n g e d A g -b a s e d t h er a p y . [1 4 ]  
Ti s s u e C oll e cti o n Pr o c e d ur e  
D e bri d e m e nt t i s s u e s a m pl e s  will b e t a k e n fr o m t h e e d g e of t h e w o u n d a n d will b e t a k e n 
at t h e i niti al vi sit a n d 2 a d diti o n al  p oi nt s d uri n g t h e tri al. T h e ti s s u e will b e tr a n s p ort e d i n 
a  st eril e c o nt ai n er o n i c e t o Dr. P a st ar’ s l a b i m m e di at el y aft er c oll e cti o n . O n e h alf of t h e 
ti s s ue will dir e ctl y st or e d i nt o -8 0˚ C fr e e z er f or D N A i s ol ati o n; t h e s e c o n d h alf will b e 
pr e s er v e d i n 8 0 % gl y c er ol f or c ol o n y i s ol ati o n u si n g st a n d ar d mi cr o bi ol o g y a n d a n al y z e s 
of sil v er r e si st a n c e o n p h e n ot y pi c l e v el. T h e i niti al ti s s u e r e m o v e d will b e c o n si d er e d t h e 
b a s eli n e a n d will b e n ot e d a s T 0 . 
Ti m e P oi nt D efi niti o n s  
T 0  –  Pr e -R a n d o mi z ati o n  
T 2 –  T w o w e e k s p o st -i niti al a p pli c ati o n S O C + C uti m e d ® S or b a ct ® or S O C + A cti c o at ®  
T 3 –  T hr e e w e e k s p o st -i niti al a p pli c ati o n S O C + C uti m e d ® S or b a ct ® or S O C + A cti c o at ®  
D N A I s ol ati o n a n d q P C R  
Hi g h b a ct eri al b ur d e n ( > 1 0 5  or g a ni s m s p er gr a m of ti s s u e), e v e n wit h o ut t h e cl a s si c si g n s 
of i nf e cti o n, i s d etri m e nt al t o h e ali n g [1 , 1 0 , 2 9 ].  B a ct eri a ar e r o uti n el y i s ol at e d fr o m V L U s 
b y c ult uri n g m et h o d s. H o w e v er, st a n d ar d mi cr o bi ol o g y t e c h ni q u e s pr e s e nt b arri er s t o 
a c c ur at e mi cr ofl or a q u a ntifi c ati o n b e c a u s e m a n y of t h e c hr o ni c w o u n d b a ct eri a ar e 
r e c al citr a nt t o gr o wt h i n a c ult ur e a n d ar e t h er ef or e diffi c ult t o i d e ntif y i n t hi s m a n n er  [3 0 ]; 
[3 1 ]; [1 ]. T h e a v ail a bilit y of m ol e c ul ar P C R b a s e d m et h o d s h a s pr o vi d e d r e s e ar c h er s wit h 
t h e c a p a bilit y t o e x a mi n e t h e b a ct eri al c o m p o siti o n of h u m a n ti s s u e s a m pl e s i n 
u n pr e c e d e n t e d d et ail. T hi s a p pr o a c h w o ul d b e utili z e d t o f urt h er o ur u n d er st a n di n g of 
m e c h a ni s m of a cti o n C uti m e d ®  S or b a ct ® o n b a ct eri al p o p ul ati o n s i n V L U.   
V L U d e bri d e d ti s s u e will b e c oll e ct e d fr o m p ati e nt s  at t h e i niti al cli ni c vi sit ( T 0 ) a n d at 
r o uti n e f oll o w-u p vi sit s ( T 2 a n d T 3 ). C oll e ct e d ti s s u e will b e m e a s ur e d a n d i m m e di at el y 
aft er pr e s er v e d at -8 0˚ C. D N A will b e e xtr a ct e d fr o m all s a m pl e s u si n g a s ol v e nt a n d 
gri n di n g D N A e xtr a cti o n pr ot o c ol ( B a ct eri al/ F u n g al D N A i s ol ati o n kit -Z y m o  R e s e ar c h). 
D N A q u alit y a n d q u a ntit y c o ntr ol will b e a s s e s s e d b y R e al -Ti m e P C R ( q P C R) a n d Q u a nt -
It Pi c o Gr e e n a s s a y ( Lif e T e c h n ol o gi e s), r e s p e cti v el y. All of t h e m et h o d s r e q uir e d f or D N A 
i s ol ati o n a n d a n al y si s ar e w ell e st a bli s h e d i n Dr. P a st ar’ s l a b or at or y  [3 2 ];  [3 3 ]; [3 4 ]. 
Q u a ntifi c ati o n of all b a ct eri al s p e ci e s i n w o u n d s a m pl e s will b e p erf or m e d b a s e d o n P C R 
a m plifi c ati o n of 1 6 S r R N A g e n e. T h e 1 6 S r R N A g e n e (r D N A) i s a D N A s e g m e nt i n all 
b a ct eri a a n d ar c h a e a t h at c o d e s f or a str u ct ur al R N A c o m p o n e nt of t h e s m all ri b o s o m al 
s u b u nit. T h e 1 6 S r D N A i s c o m m o nl y u s e d t o q u a ntif y b a ct eri a fr o m h u m a n w o u n d 
s a m pl e s. W e will e m pl o y 1 6 S r D N A m ulti pl e h y p er v ari a bl e r e gi o n t o a c c o m pli s h mi cr o bi al 
q u a ntifi c ati o n i n V L U. S p e cifi c all y, t h e 1 6 S r D N A V 1 -V 3 v ari a bl e r e gi o n s will b e P C R 
- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

3
a m plifi e d t o e nri c h t h e s a m pl e s u si n g t h e d e g e n er at e f or w ar d 2 7 F. 1 a n d n o n -d e g e n er at e 
r e v er s e 5 1 8 R pri m er s t h at c o n si st of s e q u e n c e s fl a n ki n g t h e c o n s er v e d h y p er v ari a bl e 
r e gi o n. S e p ar at e P C R r e a cti o n s will b e pr e p ar e d f or e a c h s a m pl e, i n cl u di n g p o siti v e P C R 
c o ntr ol, a n d n o  t e m pl at e c o ntr ol. R e al-ti m e P C R will b e p erf or m e d a n d d at a will b e 
a n al y z e d u si n g st a n d ar d pr o c e d ur e s e st a bli s h e d i n Dr . P a st ar’ s l a b or at or y. St a n d ar d 
gr a p h s will al w a y s b e pr e p ar e d fr o m d at a a c c u m ul at e d at t h e s a m e ti m e a s t h e t e st 
s a m pl e s t o a ct a s i nt e r n al c o ntr ol s. All q P C R r e a cti o n s will b e d o n e i n tri pli c at e u si n g t h e 
C F X 9 6 r e al -ti m e P C R s y st e m ( Bi o-R a d) a n d t h e P erf e C T a S Y B R Gr e e n S u p er Mi x 
( Q u a nt a Bi o S ci e n c e s). T h e r el ati v e C F U s will b e c al c ul at e d b a s e d o n t h e st a n d ar d c ur v e. 
A s s a y r e s ult s will b e e x pr e s s e d a s t hr e s h ol d c y cl e n u m b er ( Ct) of t h e 1 6 S r R N A g e n e 
c o pi e s p er s a m pl e a n d ti s s u e m a s s ( m g). St a n d ar d c ur v e will b e u s e d t o d et er mi n e 
r el ati v e C F U s b a s e d o n Ct. R el ati v e C F U s f or ti s s u e at t w o-w e e k s p o st i niti al tr e at m e nt 
a p pli c ati o n ( T 2 ), a n d  t hr ee w e e k s  p o st tr e at m e nt a p pli c ati o n ( T 3,  if t h e p er c e nt a g e ar e a 
r e d u cti o n di d n ot r e a c h 7 5 %). T hi s q P C R b a s e d a p pr o a c h all o w s d et e cti o n of b a ct eri a 
w hi c h ar e diffi c ult t o c ulti v at e a n d t h at w o ul d i n all pr a cti c alit y r e m ai n u n d et e ct e d or 
u n d er e sti m at e d b y st a n d ar d c ult ur e mi cr o bi ol o g y m et h o d s.  
D N A st a n d ar d s f or d et er mi ni n g b a ct eri al n u m b er b y q P C R 
E s c h eri c hi a c oli  D N A i s g e n er all y u s e d a s t h e st a n d ar d f or d et er mi ni n g b a ct eri al n u m b er 
b y q P C R. H o w e v er, t o mi ni m iz e  t h e eff e ct of v ari ati o n s i n r D N A c o p y n u m ber o n t h e 
c al c ul ati o n of b a ct eri al n u m b er, D N A st a n d ar d s will b e al s o pr e p ar e d fr o m t w o c o m m o n 
V L U i s ol at e s, St a p h yl o c o c c u s a ur e u s  a n d P s e u d o m o n a s a er u gi n o s a . 
D et e cti o n of g e n e s f or r e si st a n c e t o sil v er 
R e si st a n c e t o sil v er c o m p o u n d s a s d et er mi n e d b y b a ct eri al pl a s mi d s a n d g e n e s h a s b e e n 
d efi n e d b y m ol e c ul ar g e n eti c s. Pl a s mi d p M G 1 0 1 i s a 1 8 0 -k b sil v er r e si st a n c e pl a s mi d 
t h at al s o c o nf er s r e si st a n c e t o s e v er al a nti bi oti c s. T h e p o s si bilit y of t h e h ori z o nt al tr a n sf er 
a n d t h e i n cr e a si n g u s e of sil v er f or w o u n d dr e s si n g h a s r ai s e d c o n c er n s t h at b a ct eri al 
r e si st a n c e t o sil v er mi g ht pr olif er at e i n a m a n n er a n al o g o u s t o t h at s e e n f or a nti bi oti c s 
a n d t h er e b y c o m pr o mi s e it s cli ni c al utilit y. T h e sil o p er o n c o m pri s e s  ni n e O R F s, s e v e n of 
w hi c h ar e a p p ar e ntl y str u ct ur al g e n e s ( sil E, sil C, sil F, sil B, sil A, O R F 1 0 5 a n d sil P) a n d 
t w o of w hi c h ( sil R a n d sil S) e n c o d e a p ut ati v e t w o-c o m p o n e nt r e g ul at or y cir c uit. T o d at e, 
o nl y t h e f u n cti o n of Sil E, Sil P a n d Sil S h a s b e e n d et er mi n e d. Sil E, f u n cti o n s a s a 
p eri pl a s mi c sil v er -bi n di n g pr ot ei n b y r e stri cti n g t h e a c c u m ul ati o n of sil v er i n t h e c ell 
t hr o u g h a c o m bi n ati o n of sil v er s e q u e str ati o n i n t h e p eri pl a s m. Sil P i s r e s p o n si bl e f or 
a cti v e effl u x a s a n  A T P a s e tr a n s p ort er, a n d Sil S e n c o d e s a r e g ul at or y cir c uit. F or 
d et e cti o n of t h e s e t hr e e sil v er r e si st a n c e g e n e s, a P C R m et h o d will b e u s e d. D N A i s ol at e d 
fr o m all ti s s u e s a m pl e s c oll e ct e d at all ti m e p oi nt s will b e s cr e e n e d f or t h e sil E g e n e sil P 
a n d sil S g e n e s. T hi s P C R b a s e a p pr o a c h al l o w s f or d et e cti o n of sil v er r e si st a n c e e v e n i n 
b a ct eri a t h at m a y n ot b e gr o w n u si n g st a n d ar d mi cr o bi ol o g y a p pr o a c h. D et e cti o n of g e n e s 
e n c o di n g f or sil v er r e si st a n c e will b e p erf or m e d i n b at c h e s fr o m D N A i s ol at e d fr o m 2 
s a m pl e s a n d m or e. E. c oli  str ai n A T C C 2 5 9 2 2 ( wit h t h e c o m pl et e sil g e n e c a s s ett e) will 
b e i n cl u d e d a s a p o siti v e c o ntr ol. T h e a g ar o s e g el el e ctr o p h or e si s of P C R pr o d u ct s f or 
sil S, sil E, a n d sil P g e n e s will b e e m pl o y e d t o c o nfir m t h e e x p e ct e d si z e of t h e a m pli c o n s. 
- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

3
T h e P C R pr o d u ct s will b e c o nfir m e d b y s e q u e n ci n g a n d t h e s e q u e n c e will b e a n al y z e d 
f or h o m ol o g y wit h t h e sil g e n e s fr o m p M G 1 0 1 ( N CI B A c c e s si o n n u m b er A G 0 6 7 9 5 4) a n d 
E. cl o a c a e  A g 7 0 3 ( N CI B 6 7 9 1 5 9).
S u s c e pti bilit y d et er mi n ati o n s a n d s el e cti o n/ p h e n ot y pi c c h ar a ct eri z ati o n of sil v er -
re si st a nt str ai n s  
O n c e w e d et er mi n e s a m pl e s p o siti v e f or t h e sil v er r e si st a n c e g e n e s w e will f urt h er 
i n v e sti g at e 
w h et h er t h e b a ct eri a p o s s e s si n g A g-r e si st a nt g e n e s e x pr e s s t hi s tr ait 
p h e n ot y pi c all y. B a ct eri a will b e i s ol at e d fr o m t h e pr e s er v e d gl y c er ol st o c k s u si n g st a n d ar d 
mi cr o bi ol o gi c al m et h o d s ( c ult uri n g o n s el e cti v e m e di a). Ti s s u e s a m pl e s will b e e v al u at e d 
f or t h e b a ct eri al gr o wt h u si n g mi cr o bi ol o g y m et h o d s. C ult ur e c o n diti o n will i n cl u d e b ot h 
a n a er o bi c a n d a er o bi c gr o wt h t o e n h a n c e t h e l e v el of b a ct er i al d et e cti o n. T o r e c o v er 
b a ct eri a s eri al dil uti o n s fr o m pr e s er v e d st o c k s will b e m a d e fr o m all ti s s u e s a m pl e s. T h e 
e xt e nt of mi cr o bi ol o gi c al c ol o ni z ati o n will a s s e s s e d u si n g t h e S pir al Pl at er S y st e m. All 
pl at e s will b e i n c u b at e d b ot h a er o bi c all y a n d a n a er o bi c all y at 3 7 ˚C, aft er w hi c h t h e 
n u m b er of vi a bl e c ol o ni e s will b e c o u nt e d. Aft er t h e i n c u b ati o n p eri o d, c ol o ni e s o n t h e 
pl at e s will b e e n u m er at e d a n d t h e C F U/ m L c al c ul at e d. Si mil ar m et h o d s h a v e b e e n u s e d 
i n o ur l a b or at ori e s t o e v al u at e t h e a nti mi cr o bi al effi c a c y of v ari o u s t o pi c al a g e nt s  [3 3 , 3 4 ]. 
All i s ol at e s will b e t e st e d f or gr o wt h o n L B a g ar s u p pl e m e nt e d wit h 2 5 0 μ M A g + u si n g 
p at c h m et h o d. F urt h er A g r e si st a nt p h e n ot y p e will b e c o nfir m e d f or i n di vi d u al i s ol at e s 
u si n g mi ni m al i n hi bit or y c o n c e ntr ati o n ( MI C) m et h o d.  
MI C t e st t o d et er mi n e s u s c e pti bilit y t o sil v er nitr at e  
T h e MI C of sil v er nitr at e will  b e d et er mi n e d f or all i s ol at e s c a p a bl e f or gr o wi n g o n L B a g ar 
s u p pl e m e nt e d wit h 2 5 0 μ M A g +. B a ct eri a will b e s u s p e n d e d i n I s o -S e n sit e st br ot h ( O x oi d 
Lt d., U S A). Aft er a n o v er ni g ht i n c u b ati o n at 3 7° C, 1 0 μl of t h e b a ct eri al s u s p e n si o n will 
b e i n o c ul at e d i n t o a s eri e s of t u b e s wit h i n cr e a si n g c o n c e ntr ati o n s of sil v er nitr at e ( 4 t o 
5 1 2 m g/lit er) i n t h e s a m e br ot h. T h e fi n al b a ct eri al c o n c e ntr ati o n will b e 1 0 5  C F U/ ml. Aft er 
2 4 h of i n c u b ati o n, t h e MI C will b e r e c or d e d a s t h e l o w e st c o n c e ntr ati o n yi el di n g n o vi si bl e 
gr o wt h. A sil v er nitr at e 
MI C of > 5 1 2 
m g/lit er will cl a s sif y t h e b a ct eri u m a s sil v er 
r e si st a nt. E. c oli  str ai n A T C C 2 5 9 2 2 will b e u s e d a s a c o ntr ol. I s ol at e s c o nfir m e d f or sil v er 
r e si st a n c e will b e pr e s er v e d a n d f urt h er i d e ntifi c ati o n of b a ct eri a o n a  s p e ci e s s p e cifi c 
l e v el will b e pr o p o s e d t o s p o n s or. 
D at a  A n al y s e s  a n d  R e p orti n g  
q P C R D at a will b e a n al y z e d u si n g t h e s oft w ar e Pri s m ( Gr a p h p a d, L a J oll a, C A, U S A). 
R a w d at a f or q P C R will b e pr o vi d e d t o s p o n s or i n t xt f or m at. All r e s ult s i n cl u di n g 
mi cr o bi o l o g y a n al y s e s, sil v er r e si st a n c e a n d q u a ntifi c ati o n of b a ct eri al l o a d will b e 
pr e s e nt e d i n t h e fi n al st u d y r e p ort i n cl u di n g a n al y si s of d at a. P C R r e s ult s will b e 
e x pr e s s e d a s t hr e s h ol d c y cl e n u m b er ( Ct) of t h e 1 6 S r R N A or sil v er r e si st a n c e g e n e 
c o pi e s p er s a m pl e  a n d c orr e s p o n di n g C F U/ g ti s s u e ; t h e m e a n a n d st a n d ar d d e vi ati o n will 
b e c al c ul at e d f or e a c h ti m e p oi nt. T h e l o n git u di n al c h a n g e s i n b a ct eri al l o a d a s 
- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

3
d et er mi n e d b a s e d o n q P C R d at a a n al y s e s g e n e will b e e x a mi n e d i n di vi d u all y f or e a c h 
ti s s u e. Aft er c ou nti n g t h e c ol o ni e s f or t h e MI C a n al y s e s, t h e d at a will b e t a b ul at e d a n d 
t h e L o g of c ol o n y f or mi n g u nit s/g  ( L o g C F U/g ) d et er mi n e d. Dr. P a st ar will pr o vi d e fi n al 
r e s ult s t o i n cl u d e r a w d at a. 
- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

3
9. 2 A p p e n di x B  –  A p pli c ati o n of C o m prif or e s y st e m  
C o m prif or e  c o m pr e s si o n s y st e m a p pli c ati o n i n str u cti o n s:  
- 
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3
9. 3 A p p e n di x C  –  A n kl e br a c hi al i n d e x m e a s ur e m e nt  
T e c h ni q u e: 
1. C h e c k t h at all n e e d e d e q ui p m e nt i s a v ail a bl e a n d f u n cti o ni n g pr o p erl y.
2. E x pl ai n t o t h e s u bj e ct w h at y o u ar e a b o ut t o d o a n d i nf or m t h e m t h er e m a y b e sli g ht
di s c o mf ort a s t h e c uff i nfl at e s.
3. Pl a c e t h e s u bj e ct i n a s u pi n e p o siti o n. E n s ur e t h e ar m s a n d l e g s at t h e s a m e
l e v el a s t h e h e art.
4. H ol d t h e s u bj e ct i n t hi s p o siti o n f or 1 0 mi n ut e s b ef or e m e a s ur e m e nt.
5. A p pl y a p pr o pri at e si z e bl o o d pr e s s ur e c uff t o t h e ar m s a n d a n kl e s a n d o bt ai n s y st oli c
pr e s s ur e.
N ot e: c uff si z e s h o ul d b e at l e a st 2 0 % gr e at er t h a n t h e li m b di a m et er
N ot e: a p pl y t h e a n kl e c uff t o t h e l e g wit h t h e st u d y ul c er, a b o v e t h e m all e ol u s l e a vi n g
e n o u g h r o o m t o a c c e s s t h e ti b i ali s p o st eri or art er y.
6. O bt ai n s y st oli c pr e s s ur e o n t h e l e g wit h t h e st u d y ul c er fr o m t h e ti bi ali s p o st eri or a n d
t h e d or s ali s p e di s art eri e s.
7. C al c ul at e t h e A BI u si n g t h e hi g h er s y st oli c pr e s s ur e of t h e ar m s a n d a n kl e u si n g t h e
f oll o wi n g f or m ul a:
A BI  = hi g h er br a c hi al pr e s s ur e / hi g h er a n kl e pr e s s ur e  
- 
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9. 4 A p p e n di x  D –  it c h a s s e s s m e nt s 
It c h N u m eri c R ati n g S c al e :[3 5 ] 
Pl e a s e cir cl e t h e n u m b er t h at b e st d e s cri b e s t h e l e v el of it c h ar o u n d y o u 
w o u n d i n t h e l a st 2 4 h o ur s:  
Pl e a s e cir cl e t h e n u m b er t h at b e st d e s cri b e s t h e l e v el of it c h o v er y o ur 
w h ol e b o d y i n t h e l a st 2 4 h o ur s:  
- 
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9. 5 A p p e n di x E –  I n si g ht w o u n d i m a gi n g s y st e m
- 
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- 
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9. 6 A p p e n di x F –  A cti c o at ®  a p pli c ati o n i n str u cti o n s * 
A p pli c ati o n:  
F oll o w st a n d ar d pr ot o c ol t o cl e a n s e w o u n d; d o n ot u s e oil -b a s e d cl e a n si n g a g e nt s.  
F or h e a vil y e x u d ati v e w o u n d s:  
R e m o v e t h e A C TI C O A T dr e s si n g fr o m t h e p a c k a g e a n d c ut t o si z e.  
A p pl y t h e dr y A C TI C O A T dr e s si n g t o t h e w o u n d, eit h er si d e d o w n, a s t h e e x u d at e will 
b e s uffi ci e nt t o a cti v at e t h e dr e s si n g.  
C o v er t h e A C TI C O A T  dr e s si n g wit h a n a b s or b e nt s e c o n d ar y dr e s si n g.  
C o m pl et e t h e dr e s si n g wit h a p pr o pri at e g a u z e wr a p pi n g s if n e c e s s ar y.  
F or all ot h er w o u n d s:  
R e m o v e t h e A C TI C O A T dr e s si n g fr o m p a c k a g e a n d c ut t o s h a p e.  
M oi st e n t h e dr e s si n g wit h st eril e w at er ( d o n ot u s e s ali n e).  
All o w t h e dr e s si n g t o dr ai n o n a n a b s or b e nt s urf a c e i n a st eril e fi el d f or at l e a st 2 
mi n ut e s.  
A p pl y t h e A C TI C O A T  dr e s si n g t o t h e w o u n d s urf a c e, eit h er si d e d o w n.  
C o v er t h e dr e s si n g wit h a m oi st a b s or b e nt s e c o n d ar y dr e s si n g w hi c h m a y b e pr e p ar e d 
b y s at ur ati n g g a u z e wit h st eril e w at er a n d wri n gi n g o ut t h e e x c e s s w at er.  
C o m pl et e t h e dr e s si n g wit h a p pr o pri at e g a u z e wr a p pi n g s if n e c e s s ar y.  
If t h e dr e s si n g dri e s a n d a d h er e s t o t h e w o u n d, m oi st e n or s o a k t h e dr e s si n g pri or t o 
r e m o v al. 
A v oi d f or c ef ul r e m o v al of t h e dr e s si n g a n d di sr u pti o n of t h e h e ali n g w o u n d.  
* S o ur c e: htt p:// w w w. s mit h -n e p h e w. c o m/ pr of e s si o n al/ pr o d u ct s/ a d v a n c e d -w o u n d -
m a n a g e m e nt/ a cti c o at/ a cti c o at/
- 
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9. 7 A p p e n di x G  
W o u n d -Q oL  q u esti o n n air e  o n  q u alit y  of  lif e wit h  c hr o nic w o u n ds  
Wit h  t h e f oll o wi n g q u esti o ns, w e  ai m  t o fi n d o ut  h o w y o ur c hr o nic 
w o u n d(s)  aff ect(s)  y o ur q u ality of lif e. 
Pl e as e  tic k o n e b o x  p er  li n e! 
I n t h e l ast s e v e n d a ys …  
n ot  at  all  
a  littl e 
m o d er at el y  
q uit e  a l ot 
v er y  m uc h  
1  
… m y  w o u n d  h urt  
O  
O  
O  
O  
O  
2  
… m y  w o u n d  h a d  a b a d  s m ell 
O  
O  
O  
O  
O  
3  
…t h er e  w as a  dist ur bi n g  disc h ar g e fr o m t h e w o u n d  
O  
O  
O  
O  
O  
4  
…t h e  w o u n d  h as aff ect e d  m y  sl e e p 
O  
O  
O  
O  
O  
5  
…t h e  tr e at m e nt of t h e  w o u n d  h as b e e n  a b ur d e n t o m e  
O  
O  
O  
O  
O  
6  
…t h e  w o u n d  h as m a d e  m e u n h a p py  
O  
O  
O  
O  
O  
7  
…I  h a v e f elt  fr ustr at e d b ec a us e t h e w o u n d  is t a ki n g s o l o n g t o h e al  
O  
O  
O  
O  
O  
8  
…I  h a v e w orri e d  a b o ut  m y w o u n d  
O  
O  
O  
O  
O  
9  
…I  h a v e b e e n  afr ai d  of t h e w o u n d g etti n g  w ors e or of n e w  
w o u n ds  a p p e ari n g  
O  
O  
O  
O  
O  
1 0  …I  h a v e b e e n  afr ai d  of k n oc ki n g t h e w o u n d  
O  
O  
O  
O  
O  
1 1  …I  h a v e h a d  tr o u bl e m ovi n g a b o ut  b ec a us e of  t h e w o u n d 
O  
O  
O  
O  
O  
1 2  …cli m bi n g  st airs h as b e e n diffic ult  b ec a us e of t h e w o u n d 
O  
O  
O  
O  
O  
1 3  …I  h a v e h a d  tr o u bl e wit h  d a y -t o-d a y activiti es b ec a us e  of t h e 
w o u n d  
O  
O  
O  
O  
O  
1 4  …t h e  w o u n d  h as li mit e d  m y l eis ur e acti viti es  
O  
O  
O  
O  
O  
1 5  …t h e  w o u n d  h as f orc e d  m e t o  li mit m y  activiti es wit h  ot h ers  
O  
O  
O  
O  
O  
1 6  …I  h a v e f elt  d e p e n d e nt  o n  h el p  fr o m ot h ers  b ec a us e  of t h e 
w o u n d  
O  
O  
O  
O  
O  
1 7  …t h e  w o u n d  h as b e e n  a  fi n a nci al b ur d e n t o m e  
O  
O  
O  
O  
O  
" W o u n d-Q oL"  q u esti o n n air e  o n  H e alt h -r el at e d Q u alit y of  Lif e i n C hr o nic W o u n ds ● A u g usti n  et  al.  2 0 1 4;  
Bl o m e  et  al.  2 0 1 4  
- 
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9. 8 A p p e n di x H - E Q -5 D -5 L  i n str u m e nt 
- 
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U K ( E n gli s h) ©  2 0 0 9  E ur o Q ol  Gr o u p E Q -5 D ™ i s a  tr a d e m ar k  of  t h e E ur o Q ol  Gr o u p  
- 
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1 0 R E F E R E N C E S  
[ 1] L. E. Li n dl e y, O. St oj a di n o vic, I. P ast ar, M. T o mic -C a nic, Bi ol o g y a n d Bi o m ar k ers f or W o u n d H e ali n g,
Pl astic a n d r ec o nstr ucti v e s ur g er y 1 3 8( 3 S u p pl) ( 2 0 1 6) 1 8 S -2 8 S.
[ 2] A. Al a vi, R. G. Si b b al d, T.J. P hilli ps, O. F. Mill er, D.J. M ar g olis, W. M arst o n, K. W o o, M. R o m a n elli, R. S.
Kirs n er, W h at's n e w: M a n a g e m e nt of v e n o us l e g ulc ers: A p pr o ac h t o v e n o us l e g ulc ers, J o ur n al of t h e
A m eric a n Ac a d e m y of D er m at ol o g y 7 4( 4) ( 2 0 1 6) 6 2 7 -4 0; q uiz 6 4 1 -2.
[ 3] I. P ast ar, A. A. K h a n, O. St oj a di n o vic, E. A. L e br u n, M. C. M e di n a, H. Br em, R. S. Kirs n er, J.J. Ji m e n ez, C.
L esli e, M. T o mic-C a nic, I n d ucti o n of s p ecific micr o R N As i n hi bits c ut a n e o us w o u n d h e ali n g, T h e J o ur n al of
bi ol o gic al c h e mistr y 2 8 7( 3 5) ( 2 0 1 2) 2 9 3 2 4 -3 5.
[ 4] J. Gr e e n, R. J est er, R. Mc Ki nl e y, A. P o ol er, T h e i m p act of c hr o nic v e n o us l e g ulc ers: a s yst e m atic
r e vi e w, J o ur n al of w o u n d c ar e 2 3( 1 2) ( 2 0 1 4) 6 0 1-1 2.
[ 5] J. B. Ric e, U. D es ai, A. K. C u m mi n gs, H. G. Bir n b a u m, M. S k or nic ki, N. P ars o ns, B ur d e n of v e n o us l e g
ulc ers i n t h e U nit e d St at es, J o ur n al of m e dic al ec o n o mics 1 7( 5) ( 2 0 1 4)  3 4 7 -5 6.
[ 6] H. M a, T. F. O' D o n n ell, Jr., N. A. R os e n, M. D. I afr ati, T h e r e al c ost of tr e ati n g v e n o us ulc ers i n a
c o nt e m p or ar y v asc ul ar pr actic e, J o ur n al of v asc ul ar s ur g er y. V e n o us a n d l y m p h atic dis or d ers 2( 4) ( 2 0 1 4)
3 5 5 -6 1.
[ 7] A. Vi v as, H. L e v-T o v, R. S. K irs n er, V e n o us L e g Ulc ers, A n n als of i nt er n al m e dici n e 1 6 5( 3) ( 2 0 1 6) I T C 1 7-
I T C 3 2.
[ 8] A.J. Si n g er, A. T assi o p o ul os, R. S. Kirs n er, E v al u ati o n a n d M a n a g e m e nt of L o w er-Extr e mit y Ulc ers, T h e
N e w E n gl a n d j o ur n al of m e dici n e 3 7 7( 1 6) ( 2 0 1 7) 1 5 5 9 -1 5 6 7.
[ 9] M. C. R obs o n, D.L. St e e d, M. G. Fr a nz, W o u n d h e ali n g: bi ol o gic f e at ur es a n d a p pr o ac h es t o m axi miz e
h e ali n g tr aj ect ori es, C urr e nt pr o bl e ms i n s ur g er y 3 8( 2) ( 2 0 0 1) 7 2 -1 4 0.
[ 1 0] S. H a m d a n, I. P ast ar, S. Dr a k ulic h, E. Di kici, M. T o mic-C a nic, S. D e o, S. D a u n ert, N a n ot ec h n ol o g y -
Dri v e n T h er a p e utic I nt er v e nti o ns i n W o u n d H e ali n g: P ot e nti al Us es a n d A p plic ati o ns, A C S c e ntr al sci e nc e
3( 3) ( 2 0 1 7) 1 6 3 -1 7 5.
[ 1 1] S. O' M e ar a, D. Al-K ur di, Y. Ol o g u n, L. G. O vi n gt o n, M. M art y n -St J a m es, R. Ric h ar ds o n, A nti bi otics
a n d a ntis e ptics f or v e n o us l e g ulc ers, T h e C oc hr a n e d at a b as e of s yst e m atic r e vi e ws ( 1) ( 2 0 1 4)
C D 0 0 3 5 5 7.
[ 1 2] S. S utt erli n, E. T a n o, A. B er gst e n, A. B. T all b er g, A. M el h us, Eff ects of sil v er-b as e d w o u n d dr essi n gs
o n t h e b act eri al fl or a i n c hr o nic l e g ulc ers a n d its s usc e pti bili t y i n vitr o t o sil v er, Act a d er m at o-
v e n er e ol o gic a 9 2( 1) ( 2 0 1 2) 3 4 -9.
[ 1 3] P.J. N. R. A. C. Z. S. Fi nl e y, E vi d e nc e of E m er g e nt Sil v er-R esist a nc e i n Cli nic al B act eri a:  A M aj or
I m plic ati o n f or W o u n d C ar e a n d t h e Us e of Sil v er  Dr essi n gs, S A W C, L as V e g as, 2 0 1 4.
[ 1 4] J. P. Pir n a y, D. D e V os, C. C oc h ez, F. Bil oc q, J. Pirs o n, M. Str u el e ns, L. D ui nsl a e g er, P. C or n elis, M. Zizi,
A. V a n d er k el e n, M ol ec ul ar e pi d e mi ol o g y of Ps e u d o m o n as a er u gi n os a c ol o niz ati o n i n a b ur n u nit:
p ersist e nc e of a m ulti dr u g -r esist a nt cl o n e a n d a sil ver s ulf a di azi n e -r esist a nt cl o n e, J o ur n al of cli nic al
micr o bi ol o g y 4 1( 3) ( 2 0 0 3) 1 1 9 2 -2 0 2.
[ 1 5] I. P ast ar, ; Gil, J.; V al d es, J.; S olis, M.;  St as k o, N.; D a vis, S. C., N e w T o pic al F or m ul ati o n of Nitric Oxi d e
E n h a nc es A nti micr o bi al Effic ac y a n d D ecr e as es Vir ul e nc e F act or Ex pr essi o n, S A W C, S a n A nt o ni o, 2 0 1 5.
[ 1 6] S. Sil v er, B act eri al sil v er r esist a nc e: m ol ec ul ar bi ol o g y a n d us es a n d mis us es of sil v er c o m p o u n ds,
F E M S micr o bi ol o g y r e vi e ws 2 7( 2 -3) ( 2 0 0 3) 3 4 1 -5 3.
[ 1 7] J. P. T ott y, N. B u a, G. E. S mit h, A. E. H ar w o o d, D. C arr a dic e, T. W all ac e, I. C. C h ett er, Di al k ylc ar b a m o yl
c hl ori d e ( D A C C)-c o at e d dr essi n gs i n t h e m a n a g e m e nt a n d pr e v e nti o n of w o u n d i nf ecti o n: a s yst e m atic
r e vi e w, J o ur n al of w o u n d c ar e 2 6( 3) ( 2 0 1 7) 1 0 7-1 1 4.
[ 1 8] K. Mij n e n d o nc kx, N. L e ys, J. M a hill o n, S. Silv er, R. V a n H o u dt, A nti micr o bi al sil v er: us es, t oxicit y a n d
p ot e nti al f or r esist a nc e, Bi o m et als : a n i nt er n ati o n al j o ur n al o n t h e r ol e of m et al i o ns i n bi ol o g y,
bi oc h e mistr y, a n d m e dici n e 2 6( 4) ( 2 0 1 3) 6 0 9 -2 1.
- 
St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0

4
[ 1 9] G. M osti, A. M a gli ar o, V. M att ali a n o, P. Pic er ni, N. A n g el otti, C o m p ar ati v e st u d y of t w o
a nti micr o bi al dr essi n gs i n i nf ect e d l e g ulc ers: a pil ot st u d y, J o ur n al of w o u n d c ar e 2 4( 3) ( 2 0 1 5) 1 2 1 -2;
1 2 4 -7.
[ 2 0] Y. C. Li u, D.J. M ar g olis, R. R. Iss er off, D o es i nfl a m m ati o n h a v e a r ol e i n t h e p at h o g e n esis of v e n o us
ulc ers ? A critic al r e vi e w of t h e e vi d e nc e, T h e J o ur n al of i n v esti g ati v e d er m at ol o g y 1 3 1( 4) ( 2 0 1 1) 8 1 8 -2 7.
[ 2 1] M. P. J e ns e n, C. C h e n, A. M. Br u g g er, I nt er pr et ati o n of vis u al a n al o g sc al e r ati n gs a n d c h a n g e sc or es:
a r e a n al ysis of t w o cli nic al tri als of p ost o p er ati v e p ai n, J P ai n 4( 7) ( 2 0 0 3) 4 0 7 -1 4.
[ 2 2] M. F. J a nss e n, G.J. B o ns el, N. L u o, Is E Q-5 D -5L B ett er T h a n E Q -5 D -3L ? A H e a d -t o-H e a d C o m p aris o n
of D escri pti v e S yst e ms a n d V al u e S ets fr o m S e v e n C o u ntri es, P h ar m ac o ec o n o mics  ( 2 0 1 8).
[ 2 3] M. A u g usti n, E. C o n d e M o nt er o, N. Z a n d er, K. B a a d e, K. H er b er g er, E. S. D e b us, H. Di e n er, T.
N e u b ert, C. Bl o m e, V ali dity a n d f e asi bilit y of t h e w o u n d -Q oL q u esti o n n air e o n h e alt h -r el at e d q u alit y of
lif e i n c hr o nic w o u n ds, W o u n d R e p air R e g e n 2 5( 5) ( 2 0 1 7) 8 5 2-8 5 7.
[ 2 4] C. Bl o m e, K. B a a d e, E. S. D e b us, P. Pric e, M. A u g usti n, T h e " W o u n d-Q oL": a s h ort q u esti o n n air e
m e as uri n g q u alit y of lif e i n p ati e nts wit h c hr o nic w o u n ds b as e d o n t hr e e est a blis h e d dis e as e -s p ecific
i nstr u m e nts, W o u n d R e p air R e g e n 2 2( 4) ( 2 0 1 4) 5 0 4-1 4.
[ 2 5] J. Sc ott, E. C. H us kiss o n, Gr a p hic r e pr es e nt ati o n of p ai n, P ai n 2( 2) ( 1 9 7 6) 1 7 5-8 4.
[ 2 6] E.L. A n g h el, A. K u m ar, T. E. Bi g h a m, K. M. M as elli, J. S. St ei n b er g, K. K. Ev a ns, P.J. Ki m, C. E. Atti n g er,
T h e R eli a bilit y of a N o v el M o bil e 3 -di m e nsi o n al W o u n d M e as ur e m e nt D e vic e, W o u n ds 2 8( 1 1) ( 2 0 1 6)
3 7 9 -3 8 6.
[ 2 7]
W. U. o. W. H. S. ( W U W H S), Pri nci pl es of b est pr actic e: W o u n d ex u d at e a n d t h e r ol e of dr essi n gs. A
c o ns e ns us d oc u m e nt. , L o n d o n: M E P Lt d  ( 2 0 0 7).
[ 2 8] C F R - C o d e of F e d er al R e g ul ati o ns Titl e 2 1.
htt ps:// w w w. acc ess d at a.f d a. g o v/scri pts/c dr h/cf d ocs/cfcfr/cfrs e arc h.cf m ?fr = 3 1 2. 3 2 . 2 0 1 8).
[ 2 9] J. C. L a ntis, 2 n d, W. A. M arst o n, A. F ar b er, R. S. Kirs n er, Y. Z h a n g, T. D. L e e, D.I. C ar gill, H.B. Sl a d e, T h e
i nfl u e nc e of p ati e nt a n d w o u n d v ari a bl es o n h e ali n g of v e n o us l e g ulc ers i n a r a n d o miz e d c o ntr oll e d tri al
of gr o wt h -arr est e d all o g e n eic k er ati n oc yt es a n d fi br o bl asts, J o ur n al of v asc ul ar s ur g er y 5 8( 2) ( 2 0 1 3)
4 3 3 -9.
[ 3 0] R. D. W olc ott, J. D. H a ns o n, E.J. R e es, L. D. K o e ni g, C. D. P hilli ps, R. A. W olc ott, S. B. C ox, J. S. W hit e,
A n al ysis of t h e c hr o nic w o u n d micr o bi ot a of 2, 9 6 3 p ati e nts b y 1 6 S r D N A p yr os e q u e nci n g, W o u n d r e p air
a n d r e g e n er ati o n : offici al p u blic ati o n of t h e W o u n d H e ali n g S oci et y [ a n d ] t h e E ur o p e a n Tiss u e R e p air
S oci et y 2 4( 1) ( 2 0 1 6) 1 6 3 -7 4.
[ 3 1] C. E. D a vi es, K. E. Hill, M.J. Wils o n, P. St e p h e ns, C. M. Hill, K. G. H ar di n g, D. W. T h o m as, Us e of 1 6 S
ri b os o m al D N A P C R a n d d e n at uri n g gr a di e nt g el el ectr o p h or esis f or a n al ysis of t h e micr ofl or as of h e ali n g
a n d n o n h e ali n g c hr o nic v e n o us l e g ulc ers, J o ur n al of cli nic al micr o bi ol o g y 4 2( 8) ( 2 0 0 4) 3 5 4 9 -5 7.
[ 3 2] H. A. R a mir ez, I. P ast ar, I. J ozic, O. St oj a di n o vic, R. C. St o n e, N. Oj e h, J. Gil, S. C. D a vis, R. S. Kirs n er, M.
T o mic -C a nic, St a p h yl oc occ us A ur e u s Tri g g ers I n d ucti o n of MI R-1 5 B -5 P t o Di mi nis h D N A R e p air a n d D e -
R e g ul at e i nfl a m m at or y R es p o ns e i n Di a b etic F o ot Ulc ers, T h e J o ur n al of i n v esti g ati v e d er m at ol o g y
( 2 0 1 7).
[ 3 3] N. Bi o n d a, R. M. Fl e e m a n, C. d e l a F u e nt e-N u n ez, M. C. R o dri g u ez, F. R eff u v eill e, L. N. S h a w, I. P ast ar,
S. C. D a vis, R. E. W. H a nc oc k, P. C u dic, I d e ntific ati o n of n o v el c yclic li p o p e pti d es fr o m a p ositi o n al sc a n ni n g
c o m bi n at ori al li br ar y wit h e n h a nc e d a nti b act eri al a n d a nti bi ofil m acti viti es, E ur o p e a n j o ur n al of
m e dici n al c h e mistr y 1 0 8 ( 2 0 1 6) 3 5 4 -3 6 3.
[ 3 4] N. Bi o n d a, I. P ast ar, S. C. D a vis, P. C u dic, I n vitr o a n d i n vi v o acti viti es of n o v el c yclic li p o p e pti d es
a g ai nst st a p h yl oc occ al bi ofil ms, Pr ot ei n a n d p e pti d e l ett ers 2 1( 4) ( 2 0 1 4) 3 5 2 -6.
[ 3 5] A. B. Ki m b all, A. N. N a e g eli, E. E ds o n-H er e di a, C . Y. Li n, C. G aic h, E. Ni k ai, K. W yr wic h, G. Y osi p o vitc h,
Ps yc h o m etric pr o p erti es of t h e Itc h N u m eric R ati n g Sc al e i n p ati e nts wit h m o d er at e -t o-s e v er e pl a q u e
ps ori asis, Br J D er m at ol 1 7 5( 1) ( 2 0 1 6) 1 5 7 -6 2.
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St u d y #: 2 0 1 8 0 4 6 8        Eff e cti v e D at e: 9/ 1 7/ 2 0 2 0