男女問わず基本的にヒトが排尿をするときは、手を使うか体勢を変えるなどして周囲の肉や皮膚を引っ張り、尿道口が露出している状態のまま尿を射出する。これは、吹き出した尿が足や衣服にかかったり辺りに飛び散ることなくまっすぐ放出させたり、尿の出口が狭まり出るスピードが遅くなるのを防ぐなど、スムーズに排尿をするために行われる。
生殖器としての尿道口.
男性の場合.
性的に興奮し陰茎を勃起させた男性は、自身の手で性器を刺激することによって性的快感を発生させ、気持ち良いと感じる。やがて快感が高まると、男性は反射反応を抑えることが出来なくなる。すると尿道口から精液を放出し始め、絶頂的な快感（オーガズム）を覚える。つまりはオナニーを行い、射精を促しているのである。
上述のようなオナニーやセックス、あるいは睡眠中に起こる夢精によって射精をする際、尿道口は体外、または女性の膣に対して精液が放出される出口に相当する。
女性とのコンドームを使用しないセックスの中で起こる膣内射精の場合、男性の尿道口を最後に女性の膣内へ精液が送り出される。その中の精子が女性の卵子に受精することで、新たな生命が誕生する。逆に性欲を処理等が目的で行われるオナニーや膣外射精、またはコンドームを使用したセックスでは、パートナーの女性の膣へは入らないため、その場合は精子が体外に出た後に処分される（体外受精等のための精液採取は除く）。
男性が性的興奮を起こすと、尿道で尿道球腺液（カウパー液）が分泌される。これは陰茎を膣へ挿入する時の潤滑油としての役割や、精子への負担軽減の効果があると考えられている。陰茎が勃起することで、尿道内の圧力により尿道口から滴るように放出される。快感に耐え、射精を我慢している様子から「ガマン汁」とも呼ばれる。
陰茎を勃起させると、精液が膀胱へ逆流するのを防ぐために膀胱周辺の内尿道括約筋が収縮し、尿の出口が塞がれる。同時に精巣で作られた精子が精管、前立腺を通過する。陰嚢からの分泌物と混合して精液となったのちに、外尿道括約筋が収縮し外尿道括約筋だけが緩むことで精液が押し出され、尿道口から射精される（同時に性的快感の最高点であるオーガズムに至る）。
なお、まだ精通を迎えていない男児は、オーガズムに達しても射精しないドライオーガズムに至るため、尿道口の働きは存在しない。
女性の場合.