Complement system is efficiently activated by human IgG1, IgG3 and IgM antibodies, weakly by IgG2 antibodies and it is not activated by IgG4 antibodies.
Sistem komplemen diaktifkan secara efisien oleh antibodi IgG1, IgG3, dan IgM manusia, secara lemah oleh antibodi IgG2, dan tidak diaktifkan oleh antibodi IgG4.
It is one mechanism of action by which therapeutic antibodies or antibody fragments can achieve an antitumor effect.
Sistem komplemen merupakan salah satu mekanisme kerja yang memungkinkan antibodi terapeutik atau fragmen antibodi mencapai efek antitumor.
Development of antitumor therapeutic antibodies involves in vitro analysis of their effector functions including ability to trigger CDC to kill target cells.
Pengembangan antibodi terapeutik antitumor melibatkan analisis in vitro fungsi efektornya, termasuk kemampuan memicu CDC untuk membunuh sel target.
Classical approach is to incubate antibodies with target cells and source of complement (serum).
Pendekatan klasik adalah menginkubasi antibodi dengan sel target dan sumber komplemen (serum).
Then cell death is determined with several approaches: Radioactive method: target cells are labeled with 51Cr before CDC assay, chromium is released during cell lysis and amount of radioactivity is measured.
Kemudian, kematian sel ditentukan dengan beberapa pendekatan: Metode radioaktif: sel target diberi label dengan 51Cr sebelum uji CDC, kromium dilepaskan selama lisis sel, dan jumlah radioaktivitas diukur.
Measuring of the metabolic activity of live cells (live cells staining): after incubation of target cells with antibodies and complement, plasma membrane-permeable dye is added (e.g. calcein-AM or resazurin).
Pengukuran aktivitas metabolik sel hidup (pewarnaan sel hidup): setelah inkubasi sel target dengan antibodi dan komplemen, pewarna permeabel membran plasma ditambahkan (misalnya kalsein-AM atau resazurin).
This product can’t be formed in metabolically inactive dead cells.
Produk ini tidak dapat terbentuk pada sel mati yang tidak aktif secara metabolik.
Measuring of the activity of released intracellular enzymes: dead cells release enzyme (e.g. LDH or GAPDH) and addition of its substrate leads to color change, that is usually quantified as change of absorbance or luminiscence.
Pengukuran aktivitas enzim intraseluler yang dilepaskan: sel mati melepaskan enzim (misalnya LDH atau GAPDH) dan penambahan substratnya menyebabkan perubahan warna, yang biasanya diukur sebagai perubahan absorbansi atau luminisens.
For instance propidium iodide binds to DNA of dead cells and fluorescent signal is measured by flow cytometry.
Misalnya, propidium iodida berikatan dengan DNA sel mati dan sinyal fluoresensi diukur dengan flow cytometry.
CDC assays are used to find a suitable donor for organ or bone marrow transplantation, namely donor with matching phenotype of histocompatibility system HLA.
Uji CDC digunakan untuk menemukan donor yang cocok untuk transplantasi organ atau sumsum tulang, yaitu donor dengan fenotipe sistem histokompatibilitas HLA yang cocok.
CDC form of HLA typing (other words serologic typing) uses batch of anti-HLA antibodies from characterised allogeneic antisera or monoclonal antibodies.
Bentuk pengetikan HLA CDC (dengan kata lain pengetikan serologis) menggunakan sejumlah antibodi anti-HLA dari antiserum alogenik atau antibodi monoklonal yang telah dikarakterisasi.
These antibodies are incubated one by one with patient‘s or donor‘s lymphocytes and source of complement.
Antibodi ini diinkubasi satu per satu dengan limfosit pasien atau donor dan sumber komplemen.
Amount of dead cells (and thus positive result) is measured by dead or live cells staining.
Jumlah sel mati (dan dengan demikian hasil positif) diukur dengan pewarnaan sel mati atau hidup.
Nowadays CDC typing is being replaced by molecular typing, which can identify nucleotide sequences of HLA molecules via PCR.
Saat ini, pengetikan CDC digantikan oleh pengetikan molekuler, yang dapat mengidentifikasi urutan nukleotida molekul HLA melalui PCR.
CDC assay is usually used for performing crossmatch test.
Uji CDC biasanya digunakan untuk melakukan uji crossmatch.
The basic version involves incubation of patient’s serum with donor’s lymphocytes and second incubation after adding rabbit complement.
Versi dasarnya melibatkan inkubasi serum pasien dengan limfosit donor dan inkubasi kedua setelah penambahan komplemen kelinci.
Presence of dead cell (positive test) means that donor isn‘t suitable for this particular patient.
Adanya sel mati (tes positif) berarti donor tidak cocok untuk pasien ini.
There are modifications available to increase test sensitivity including extension of minimal incubation time, adding antihuman globulin (AHG), removing unbound antibodies before adding complement, separation of T cell and B cell subset.
Terdapat modifikasi yang tersedia untuk meningkatkan sensitivitas tes, termasuk perpanjangan waktu inkubasi minimal, penambahan globulin antimanusia (AHG), penghilangan antibodi tak terikat sebelum penambahan komplemen, dan pemisahan subset sel T dan sel B. Selain uji silang CDC, tersedia uji silang flow-cytometric yang lebih sensitif dan bahkan dapat mendeteksi antibodi non-pengaktif komplemen.