INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Le composé appelé pro-ligand au sens de l’invention désigne un ligand qui a été rendu temporairement inactif, par exemple par l’addition, au sein dudit ligand, d’un ou plusieurs groupements labiles. Dans la présente demande le pro-ligand pourra encore être appelé ligand inactivé. Le rôle d’un ligand étant d’être reconnu par son récepteur membranaire, un pro-ligand désigne ainsi un ligand qui n’est plus reconnu par son récepteur membranaire puisque le pro-ligand est rendu temporairement inactif. Les pro-ligands de l’invention sont des analogues du mannose 6-phosphate (M6P) ou des analogues du mannose (Man) rendus temporairement inactifs. Les analogues du mannose 6-phosphate (M6P) désignent des composés différents du M6P naturel mais qui présentent une reconnaissance élevée par le récepteur du mannose 6-phosphate cation indépendant (RM6P-CI). De même, les analogues du mannose désignent des composés différents du mannose naturel mais qui présentent une reconnaissance élevée par les récepteurs du mannose. Les analogues du M6P sont appelés « AMFA » (« Analogues synthétiques du Mannose 6-Phosphate Fonctionnalisés en position Anomère ) et les analogues du mannose sont appelés « Man ». Les pro-ligands obtenus après inactivation des analogues AMFA ou des analogues Man, sont appelés dans la présente demande « ProAMFA » ou « ProMan ». Les pro-ligands ProAMFA ne sont ainsi plus reconnus par le RM6P-CI et les pro-ligands ProMan ne sont plus reconnus par les récepteurs du mannose.
Le conjugué de l’invention comprend le pro-ligand d’une part et un produit d’intérêt d’autre part. Le conjugué de l’invention, de structure « Pro-ligand _ Produit d’intérêt », est en mesure de lier sélectivement une cible, par l’intermédiaire du produit d’intérêt apte à reconnaître ladite cible, ce qui permet d’obtenir un complexe présentant la structure « Pro-ligand _ Produit d’intérêt _ Cible ».
Les documents EP 2 448 600 B1 et EP 3 350 192 B1 décrivent des conjugués comprenant des analogues du M6P qui sont liés, par l’intermédiaire d’un bras espaceur, à un produit d’intérêt, comme par exemple une glycoprotéine. Les analogues du M6P présentent plusieurs avantages pour la fonctionnalisation de glycoprotéines, en particulier pour la fonctionnalisation d’enzymes lysosomales, notamment parce qu’ils sont de petite taille, sont peu immunogènes et peuvent être facilement liés avec l’enzyme lysosomale. Ces analogues du M6P sont de plus modulables, d’une part au niveau de la longueur et de la structure du bras espaceur et d’autre part au niveau du groupement réactif terminal du bras espaceur en fonction du type de liaison désirée avec le produit d’intérêt. Dans ces documents, les analogues du M6P sont plus particulièrement utilisés pour internaliser, via le RM6P-CI, des enzymes lysosomales dans les lysosomes de la cellule, afin que lesdites enzymes puissent jouer leur rôle physiologique. Les analogues du M6P sont également modulables au niveau du groupement phosphate en position 6 qui peut être remplacé par un groupement bio-isostère, à savoir un groupement qui remplit les mêmes fonctions biologiques que le groupement phosphate. Le groupement phosphate peut par exemple ainsi être remplacé par un groupement phosphonate, carboxylate, malonate.
Dans les documents EP 2 448 600 B1 et EP 3 350 192 B1, il n’est cependant pas envisagé de rendre temporairement inactifs les analogues du M6P, ce qui signifie que les conjugués, de structure « Analogues du M6P _ Produit d’intérêt », sont, une fois introduits dans un organisme, immédiatement reconnus par les récepteurs du mannose 6-phosphate cation indépendant (RM6P-CI) et donc fixés par ces derniers. Le RM6P-CI est un récepteur ubiquitaire qui est présent à la fois dans des vésicules intracellulaires et à la membrane de toutes les cellules ; il ne s’agit donc pas d’un récepteur spécifique d’un tissu ou d’un type de cellules particuliers. Cela signifie plus particulièrement que les conjugués, une fois dans l’organisme, n’auront pas forcément le temps nécessaire pour atteindre et lier une cible déterminée apte à être reconnue par le produit d’intérêt puisque l’analogue du M6P peut être rapidement reconnu par le RM6P-CI présent dans l’environnement immédiat. Le produit d’intérêt subira ainsi une baisse de sa libre circulation pour atteindre et fixer la cible biologique qu’il est en mesure de reconnaître. En d’autres termes cela signifie que les conjugués décrits dans ces documents pourraient réduire la détection de la cible prédéterminée.
Les Inventeurs ont maintenant mis au point de nouveaux conjugués qui sont spécifiques de cibles préalablement déterminées. Pour ce faire ils ont eu l’idée originale de mettre au point des pro-ligands qui sont des analogues du M6P ou des analogues du mannose et qui sont temporairement inactivés, puis de préparer des conjugués de structure « Pro-ligand _ Produit d’intérêt ». Ainsi, lorsque les conjugués de l’invention sont introduits dans un organisme, ils ne seront pas directement reconnus par le récepteur du ligand (RM6P-CI ou un des récepteurs du mannose) ce qui leur permettra de circuler librement afin d’atteindre plus efficacement une cible spécifiquement reconnue par le produit d’intérêt. Le produit d’intérêt se lie à la cible, ce qui engendre la formation d’un complexe « Pro-ligand _ Produit d’intérêt _ Cible ». Ce complexe est ensuite activé afin que le Pro-ligand devienne ligand. Le complexe activé ainsi obtenu, de structure « Ligand _ Produit d’intérêt _ Cible » sera alors reconnu par le récepteur du ligand et fixé par ce dernier.
Résumé Selon un premier aspect, la présente invention a pour objet un pro-ligand de formule générale (I) telle que décrite dans la description détaillée ci-après.
Selon un deuxième aspect, la présente invention a pour objet un conjugué de formule générale (II) telle que décrite dans la description détaillée ci-après, de structure « Pro-ligand _ Produit d’intérêt ».
Selon un troisième aspect, l’invention a pour objet le procédé de préparation des pro-ligands de formule (I) et des conjugués de formule (II).
Selon un autre aspect, l’invention a pour objet un complexe de structure « Pro-ligand _ Produit d’intérêt _ Cible biologique ».
Selon encore un autre aspect, la présente invention a pour objet un conjugué de formule (II) pour un ciblage spécifique d’une cible préalablement déterminée. A titre d’exemple d’une telle cible on pourra citer une cible non membranaire ou membranaire, choisie dans le groupe comprenant des protéines, notamment des récepteurs, des auto-anticorps, des glycoprotéines, des agrégats de protéines, des antigènes protéiques ou non protéiques, des activateurs ou inhibiteurs de protéines, des cellules, des virus, des bactéries, le tissu osseux, le collagène ou des agrégats de fibres. Le conjugué (II) et la cible sont liés l’un à l’autre par une liaison de type non covalente ou covalente.
Selon encore un autre aspect, l’invention a pour objet un conjugué de formule (II) pour une utilisation comme médicament dans le traitement des pathologies choisies dans le groupe comprenant les maladies neurodégénératives (comme par exemple la maladie d’Alzheimer), les cancers, les maladies auto-immunes, les maladies rares et génétiques (comme par exemple les maladies lysosomales), les maladies inflammatoires et les maladies infectieuses.
Fig. 1 illustre la séquence d’évènements se produisant lorsque le conjugué de l’invention, de structure « Pro-ligand _ Produit d’intérêt », est introduit dans un organisme dans le but de lier une cible non membranaire.
Fig. 2 illustre la séquence d’évènements se produisant lorsqu’un conjugué de l’invention, de structure « Pro-ligand _ Produit d’intérêt », est introduit dans un organisme dans le but de lier une cible membranaire.
Fig. 3 est une illustration de quatre modes de réalisation possibles pour la synthèse de conjugués de formule (II) obtenus par la réaction entre un pro-ligand de formule générale (I) avec un produit d’intérêt Y.
Fig. 4 illustre le schéma de synthèse détaillé du pro-ligand de formule générale (I) dénommé ProAMFA1.
Les codes de scénarios nucléaires usuellement utilisés dans la communauté internationale sont les codes de simulation dynamique, c’est-à-dire qu’ils modélisent des parcs nucléaires dont la composition peut évoluer au cours du temps. Ils calculent l’évolution des inventaires des éléments d’intérêt et des flux de matières valorisables à chaque instant dans chaque unité du cycle (installations d’extraction minière, de conversion, usines d’enrichissement et de fabrication, réacteur, piscine de refroidissement, usine de traitement (ou usine de retraitement) des combustibles usés, centres de stockage géologique des colis de déchets ultimes…), sous flux neutronique en réacteur ou hors flux (lors du refroidissement des combustibles usés par exemple). Les codes de scénarios dynamiques peuvent s’appuyer sur des modèles mathématiques permettant de déterminer la composition du combustible neuf et sa fraction en matières valorisables (modèle d’équivalence), et de calculer l’évolution de sa composition sous irradiation (modèle d’irradiation).
Le code COSI est largement utilisé pour l’étude de scénarios depuis plus de 30 ans. La dernière version 6 de ce code est notamment décrite dans le document [COSI6 : a tool for nuclear transition scenarios studies and applications to SFR deployment scenarios with minor actinides transmutation, Nucl Tech. 192, 91-110]. C’est le code de référence dans le domaine (le plus détaillé, le plus précis). Cependant, la simulation en dynamique de parcs nucléaires complets consomme beaucoup de ressources informatiques : à titre d’exemple, la simulation d’un scénario d’évolution du parc Français élaboré par plusieurs sociétés pour la stratégie nationale nécessite de mobiliser une vingtaine de processeurs sur une dizaine d’heures et l’occupation d’une centaine de Go de RAM.
Dans le domaine de la détermination des caractéristiques de parcs nucléaires à l’équilibre, la recherche de solutions est itérativement réalisée par essais/erreurs. C’est un procédé d’autant plus fastidieux que les cycles étudiés sont complexes. Il est arrivé qu’aucune solution parfaitement satisfaisante du point de vue de l’équilibre des flux de combustibles ne soit trouvée après plusieurs années d’étude, pour des systèmes comportant pourtant une infinité de solutions.
Le paramètre temps est la principale cause de cette limitation.
A chaque pas de temps, ou à chaque date significative à laquelle un événement intervient, le code de scénario réalise des calculs d’évolution de matière sous flux (irradiation) ou hors flux (décroissances radioactives), et/ou transfère des matières d’un poste du cycle à un autre. Au-delà de ces opérations, aucun code à notre connaissance ne cherche à équilibrer les flux de matières valorisables globalement, à l’échelle du cycle complet.
L’évolution en fonction du temps ajoute une dimension à tous les paramètres du problème, eux-mêmes pouvant être amenés à évoluer en fonction du temps, et nécessite des ajustements du paramétrage dans la mesure où on n’a pas connaissance a priori des caractéristiques du parc cible à l’équilibre (composition du parc nucléaire en réacteurs de chaque type, temps de refroidissement des combustibles usés et de recyclage des matières séparées, destinations de ces matières entre recyclage et déchets, et compositions des combustibles de recyclage). Par temps de refroidissement, on entend le temps de transit d’un combustible usé entre son déchargement d’un réacteur et son retraitement. A chaque paramétrage, les calculs doivent être relancés jusqu’à ce que le paramétrage en entrée permette de converger vers un résultat satisfaisant.
Afin de simplifier cette étape, des approches de recherche de parcs nucléaires à l’équilibre ont été développées.
L’approche la plus commune dans la littérature, l’« approche par tour » est divulguée dans le document [G. Youinou, and A. Vasile. "Plutonium multirecycling in standard PWRs loaded with evolutionary fuels." Nuclear science and engineering 151.1 (2005): 25-45]. Cette approche est principalement développée pour calculer la composition d’un combustible à l’équilibre d’une stratégie de multi-recyclage. Un « tour » désigne alors l’irradiation en réacteur du combustible « neuf » construit à partir des matières extraites du combustible usé lors de l’étape de recyclage durant le « tour » précédent et éventuellement, d’un apport extérieur en matière fissile à composition fixée. Les paramètres associés au cycle, tels que le temps de refroidissement du combustible usé et le temps de fabrication du combustible neuf sont définis en entrée du calcul. Cette approche ne s’appuie pas sur le développement d’un code dédié mais sur l’utilisation itérative d’un code de modélisation neutronique, souvent à l’échelle de l’assemblage. A l’origine, étant donné les capacités de calculs accessibles lors de l’implémentation de cette méthode, seulement un nombre restreint de « tours » (inférieur à 10) était modélisé. La convergence vers un état d’équilibre absolu n’était donc pas garantie. S’appuyant toujours sur l’utilisation itérative d’un code de modélisation neutronique, un estimateur de la convergence vers une solution d’équilibre du parc est calculé. Plusieurs dizaines de « tours » sont alors modélisées jusqu’à ce qu’une convergence acceptable soit atteinte, pour laquelle la variation de la composition du combustible neuf d’un tour à l’autre est alors considérée comme négligeable. Cela prend typiquement des dizaines de jours, en temps ingénieur comme machine. Cette méthode plus robuste n’est toujours pas implémentée dans un code de scénario à l’équilibre dédié, mais constitue plutôt une procédure manuelle itérative utilisant un code de modélisation neutronique à l’une de ses étapes.
Elle est difficilement généralisable, puisque dépendante du type de réacteur et combustible modélisés, et donc du code de modélisation neutronique sur lequel elle s’appuie.
Elle demande de développer une procédure de calcul spécifique à chaque cycle étudié. Cette approche par tours est lourde en ressources informatiques.
Elle demande beaucoup de calculs de neutronique à enchaîner séquentiellement.
En outre, cette approche est très lourde en ressource ingénieur car elle utilise un processus manuel non automatisé, réalisé au cas par cas. De plus, c’est une approche très experte qui demande une connaissance du cycle du combustible et une expérience approfondie en simulation neutronique.
Enfin, c’est une approche peu précise qui nécessite de réaliser un nombre de tours important pour converger vers une situation d’équilibre et des simulations basées sur des calculs neutroniques de référence, coûteux, et donc limitant le nombre de tours réalisés : cela entraîne généralement un résultat peu convergé et donc peu précis.
Plus récemment, une méthode de détermination des caractéristiques de parcs nucléaires à l’équilibre s’appuyant sur l’utilisation de codes de scénarios dynamiques a été conçue. Cette méthode repose sur un grand nombre de simulations de scénarios nucléaires (plusieurs milliers) pour lesquels on peut attribuer différentes valeurs aux paramètres d’entrée (composition du parc, temps de refroidissement et fabrication, etc.). L’analyse des résultats de ces simulations permet d’identifier les caractéristiques des parcs nucléaires (et donc les valeurs des paramètres d’entrée) satisfaisant les conditions d’équilibre des flux de matières. Cette approche nécessite de définir un horizon temporel auquel la simulation dynamique est stoppée et les caractéristiques du parc final enregistrées. Ce choix étant arbitraire, il n’est pas garanti que l’état d’équilibre observé à cette échéance soit absolu. Par ailleurs, des moyens de calculs conséquents sont nécessaires pour mettre en œuvre cette méthode. En effet, elle est très lourde en ressources informatiques car de nombreux calculs de scénario doivent être lancés pour paver l’espace des possibles. De plus, elle demande une connaissance approfondie en simulation neutronique. Enfin, il n’y a pas de certitude de trouver la solution du fait de la lenteur du processus, d’un grand nombre de paramètres dont les plages de variation définies a priori (lors de la définition de ce qui est communément appelé un « plan d’expériences » en simulation) peuvent se trouver en dehors de la solution recherchée et du caractère perturbateur de la dynamique sur la solution statique.
Il est ainsi nécessaire de développer un procédé de traitement de données à la fois rapide, fiable et précis, de façon à équilibrer les flux de matières nucléaires (noyaux lourds) afin qu’un parc donné (caractérisé par un cycle du combustible, des gestions combustibles en réacteur et les installations du cycle associées) puisse être exploité de manière pérenne. Par « de manière pérenne », on entend la possibilité d’exploiter un parc en régime permanent sans que les caractéristiques changent au cours du temps. Afin de remédier au moins en partie à ce besoin, le procédé de traitement de données qui fait l’objet de l’invention a été implémenté récemment dans une plateforme de simulation de parcs nucléaires en statique appelée SEPAR, qui permet de réaliser des calculs de parcs à l’équilibre. Cette plateforme repose sur une programmation orientée objet au moyen du langage C++, qui embarque des méthodes de méta-modélisation par réseaux de neurones et des algorithmes de résolution de systèmes d’équations non linéaires. La mise en données utilise le format standard XML. De façon préliminaire, une version simplifiée de la partie « mise en équations et résolution de calculs de parcs nucléaires à l’équilibre » a été testée avant le développement de la méthode globale. Les premiers calculs de parcs à l’équilibre ainsi réalisés au cas par cas se sont montrés prometteurs dans le document [G. Martin, Study of a mixed fleet of breeder SFR and EPR supplied with LEU and MOX fuels to balance the plutonium inventory, Proceedings of ICAPP, Paper 23859, 2018].
Ces calculs préliminaires ont motivé le développement de SEPAR qui intègre le procédé de traitement de données global et les résultats obtenus ont été divulgués dans le document [H. Barale, et al. "A new tool for the simulation of different nuclear fleets at equilibrium." EPJ Nuclear Sciences & Technologies 8 (2022): 1] et dans le document [H. Barale, et al. “An approach for evaluating actinide production in the equilibrium simulation code SEPAR.” Proceeding in GLOBAL 2022 International Conference on Nuclear Fuel Cycle (2022)].
Selon un mode de réalisation de l’invention, l’angle d’inclinaison entre les première et deuxième surfaces de guidage latérales d’une même paroi de guidage latérale est compris entre 10 et 25°, et par exemple entre 10 et 15°.
Selon un mode de réalisation de l’invention, chaque première surface de guidage latérale forme une première rampe de guidage latérale, et chaque deuxième surface de guidage latérale forme une deuxième rampe de guidage latérale.
Selon un mode de réalisation de l’invention, chacune des premières et deuxièmes surfaces de guidage latérales comporte un bord inférieur qui est sensiblement rectiligne, le bord inférieur de chaque première surface de guidage latérale étant incliné, par rapport à la direction transversale, selon un premier angle d’inclinaison et le bord inférieur de chaque deuxième surface de guidage latérale étant incliné, par rapport à la direction transversale, selon un deuxième angle d’inclinaison qui est supérieur au premier angle d’inclinaison. Par bord inférieur sensiblement rectiligne, on entend un bord inférieur formé par une ligne qui est comprise dans un cylindre fictif de diamètre inférieur à 1 mm, de préférence inférieur à 0,5 mm.
Selon un mode de réalisation de l’invention, le premier angle d’inclinaison est compris entre 1 et 30°, avantageusement entre 1 et 10°, de façon encore plus avantageuse entre 1 et 5°, et par exemple entre 1 et 3°. Une telle configuration des bords inférieurs des premières surfaces de guidage permet de réduire encore les risques de saturation de l’ouverture arrière.
Selon un mode de réalisation de l’invention, le deuxième angle d’inclinaison est compris entre 15 et 90°, avantageusement entre 15 et 30°, et par exemple d’environ 20°. Une telle configuration des bords inférieurs des deuxièmes surfaces de guidage permet de réduire encore les risques d’accumulation de déchets sur les parois de guidage latérales.
Concernant, l’étude sur le récepteur aux cannabinoïdes de type 1 (CB1R), les explants sont récupérés, fixés, déshydratés et inclus en paraffine. Des coupes sont ensuite réalisées, puis marquées avec un anticorps primaire anti-CB1R et un anticorps secondaire, et enfin, visualisées par microscope.
Les résultats de l’expression de PIEZO1, OXT et OXTR sont présentés dans le tableau 7 ci-après.
Expression (%) Capacité à augmenter l’expression (%) PIEZO1 Témoin 100 INVENTION 0,25% 135 +35 INVENTION 0,50% 187 +87 OXT Témoin 100 INVENTION 0,25% 141 +41 INVENTION 0,50% 275 +175 OXTR Témoin 100 INVENTION 0,25% 239 +139 INVENTION 0,50% 651 +551
Testé à 0,5% sur des kératinocytes humains, le principe actif selon l’invention augmente significativement l’expression de PIEZO1, de l’ocytocine et de son récepteur de respectivement 87%, 175% et 551%.
Les résultats de la synthèse d’ocytocine sont présentés dans le tableau 8, ci-après.
Synthèse d’ocytocine (pg/mL) Capacité à augmenter la synthèse d’ocytocine (%) Témoin 30 INVENTION 0,5% 41 +37 INVENTION 1,0% 49 +63
Testé à 1,0% sur des explants de peau humaine, le principe actif selon l’invention augmente significativement la synthèse d’ocytocine de 63%.
Les résultats de la synthèse de CB1R sont présentés dans le tableau 9, ci-après.
Synthèse de CB1R (UA) Capacité à augmenter la synthèse de CB1R (%) Témoin 24 INVENTION 0,5% 33 +38 INVENTION 1,0% 35 +46
Testé à 1,0% sur des explants de peau humaine, le principe actif selon l’invention augmente significativement la synthèse du récepteur aux cannabinoïdes de type 1 de 46%.
Testé sur kératinocytes et explants humains, le principe actif selon l’invention agit sur les voies ocytocine et endocannabinoïdes. Il permet ainsi de stimuler les médiateurs et récepteurs du bien-être.
Essai 3 b – Etude de la prolifération et de la différenciation épidermique
Au niveau de la peau, les effets du stress psychologique se traduisent par une perturbation du processus de prolifération et une altération de la fonction barrière. Il a été récemment démontré que l’activation de la voie des endocannabinoïdes, plus particulièrement le récepteur de type 1 (CB1R), ainsi que la voie de l’ocytocine stimulent la prolifération épidermique. De plus, la signalisation du CB1R est nécessaire à une différenciation optimale de l’épiderme et au maintien d’une fonction barrière intègre. Dans ce contexte, l’inventeur a évalué la capacité du principe actif selon l’invention à stimuler la prolifération des kératinocytes et la différenciation épidermique.
L’objectif de cette étude est d’évaluer la capacité du principe actif selon l’invention à stimuler la prolifération et la différenciation kératinocytaire.
Le rôle de protection de l’épiderme face à l’environnement extérieur est assuré par les kératinocytes qui vont d’une part proliférer et contribuer au renouvellement du tissu, et d’autre part se différencier et entrer dans différents stades de maturation pour générer une fonction barrière efficace.
La filaggrine est un élément essentiel à la fonction barrière épidermique car elle contribue à la rigidité du tissu ainsi qu’à son hydratation.
ETAT DE LA TECHNIQUE L’utilisation de clou dentaire est déjà largement connue pour permettre la fixation de membranes ayant pour objectif de maintenir et stabiliser un matériau de comblement destiné à la greffe osseuse en vue de la reconstruction d’os alvéolaire. Pour la mise en place d’un clou dentaire, le praticien utilise classiquement un porte-clou de forme allongée comprenant une extrémité coopérant avec le clou et à l’extrémité longitudinale opposée une poignée sur laquelle un marteau vient frapper pour introduire le clou dans le tissu.
Il est également connu que le porte clou comprend un système de transmission d’impact au clou pour éviter l’utilisation d’un marteau.