INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Dans certains modes de réalisation, la protéine de fusion est une protéine de fusion comprenant, en plus d'au moins une variante de la protéine Stéfine A, une séquence d'albumine ou un fragment d'albumine. Dans d'autres modes de réalisation, l'agent AFFIMER® est conjugué à la séquence d'albumine ou à un fragment d'albumine par l’intermédiaire d’une liaison chimique autre qu'une incorporation dans la séquence polypeptidique incluant la variante de la protéine Stéfine A. Dans certains modes de réalisation, l'albumine, une variante de l'albumine ou un fragment d'albumine est de l’albumine sérique humaine (HSA), une variante de l’albumine sérique humaine ou un fragment d’albumine sérique humaine. Des protéines sériques d'albumine comparables à l'HSA se trouvent, par ex. chez les singes cynomolgus, les vaches, chiens, lapins et rats. Parmi les espèces non humaines, l'albumine sérique bovine (BSA, de l’anglais « bovine serum albumin ») est structurellement la plus similaire à l’HSA. Voir, par ex., Kosa et al., (2007) J Pharm Sci. 96(11):3117-24. La présente divulgation envisage l'utilisation d'albumine provenant d'espèces non humaines, dont, mais sans s'y limiter, une séquence d'albumine dérivée de l’albumine sérique cyno ou de l’albumine sérique bovine.
L’HSA mature, un polypeptide de 585 acides aminés (env. 67 kDa) ayant une demi-vie sérique d'environ 20 jours, est principalement responsable du maintien de la pression artérielle osmotique colloïdale, du pH sanguin, et du transport et de la distribution de nombreux ligands endogènes et exogènes. La protéine a trois domaines structurellement homologues (domaines I, II et III), est presque entièrement de conformation alpha-hélicoïdale et est hautement stabilisée par 17 ponts disulfure. Dans certains modes de réalisation, la protéine de fusion peut être une protéine de fusion d'albumine comprenant au moins une variante de la protéine Stéfine A et la séquence pour l'albumine sérique humaine mature (SEQ ID NO : 468) ou une variante ou un fragment de celle-ci qui maintient les propriétés PK et/ou de biodistribution de l'albumine mature dans la mesure souhaitée dans la protéine de fusion.
La séquence d'albumine peut être séparée de la séquence de la variante de la protéine Stéfine A ou d'autres séquences flanquantes dans la protéine de fusion par utilisation de séquences de lieurs comme décrit ci-dessus.
Sauf indication contraire, la référence ici à « l'albumine » ou à « l'albumine mature » est prévue pour se référer à l'HSA. Cependant, il est à noter que la HSA pleine longueur a un peptide signal de 18 acides aminés (MKWVTFISLLFLFSSAYS (SEQ ID NO : 483) suivi d'un prodomaine de 6 acides aminés (RGVFRR) (SEQ ID NO : 469) ; ce peptide de 24 résidus d'acides aminés peut être appelé préprodomaine. Les protéines de fusion AFFIMER®-HSA peuvent être exprimées et sécrétées en utilisant le préprodomaine HSA dans la séquence codante des protéines recombinantes. En variante, la protéine de fusion AFFIMER®-HSA peut être exprimée et sécrétée par inclusion d'autres séquences signal de sécrétion, telles que décrites ci-dessus.
Dans des modes de réalisation alternatifs, plutôt que fournis en tant que partie d'une protéine de fusion avec la variante de la protéine Stéfine A, le polypeptide d'albumine sérique peut être couplé de manière covalente au polypeptide contenant la variante de la protéine Stéfine A par l’intermédiaire d’une liaison autre qu'une liaison amide de squelette, tel que réticulé par l’intermédiaire d’une conjugaison chimique entre des chaînes latérales d'acides aminés sur chacun parmi le polypeptide d'albumine et le polypeptide contenant la variante de la protéine Stéfine A.
Dans certains modes de réalisation, un procédé de modification chimique qui peut être appliqué dans la génération de la variante de la protéine Stéfine A ou de la protéine de fusion sujet pour augmenter la demi-vie des protéines est la lipidation, qui implique la liaison covalente d'acides gras aux chaînes latérales peptidiques. Conçue à l'origine et développée en tant que procédé pour étendre la demi-vie de l'insuline, la lipidation partage le même mécanisme de base d’extension de la demi-vie que la PEGylation, à savoir l'augmentation du rayon hydrodynamique pour réduire la filtration rénale. Cependant, le groupement lipidique est lui-même relativement petit et l'effet est médié indirectement par la liaison non covalente du groupement lipidique à de l'albumine circulante. Une conséquence de la lipidation est qu'elle réduit la solubilité dans l'eau du peptide, mais l'ingénierie du lieur entre le peptide et l'acide gras peut moduler cela, par exemple en utilisant du glutamate ou des mini PEG au sein du lieur. L'ingénierie des lieurs et la variation du groupement lipidique peuvent affecter l'auto-agrégation, ce qui peut contribuer à augmenter la demi-vie en ralentissant la biodistribution, indépendamment de l'albumine. Voir, par exemple, Jonassen et al. (2012) Pharm Res. 29(8):2104-14.
Le terme « alcényle », tel qu'il est utilisé ici, fait référence à des groupements d'hydrocarbures insaturés, à chaîne droite ou ramifiés, contenant une double liaison. Sauf indication contraire, les groupes alcényles C 2 -C 24 (par ex. C 2 -C 22 , C 2 -C 20 , C 2 -C 18 , C 2 -C 16 , C 2 -C 14 , C 2 -C 12 , C 2 -C 10 , C 2 -C 8 , C 2 -C 6 ou C 2 -C 4 ) sont visés. Les groupes alcényles peuvent contenir plus d'une liaison insaturée. Les exemples incluent éthényle, 1-propényle, 2-propényle, 1-méthyléthényle, 1-butényle, 2-butényle, 3-butényle, 1-méthyl-1-propényle, 2-méthyl-1-propényle, 1-méthyl-2-propényle, 2-méthyl-2-propényle, 1-pentényle, 2-pentényle, 3-pentényle, 4-pentényle, 1-méthyl-1-butényle, 2-méthyl-1-butényle, 3-méthyl-1-butényle, 1-méthyl-2-butényle, 2-méthyl-2-butényle, 3-méthyl-2-butényle, 1-méthyl-3-butényle, 2-méthyl-3-butényle, 3-méthyl-3-butényle, 1,1-diméthyl-2-propényle, 1,2-diméthyl-1-propényle, 1,2-diméthyl-2-propényle, 1-éthyl-1-propényle, 1-éthyl-2-propényle, 1-hexényle, 2-hexényle, 3-hexényle, 4-hexényle, 5-hexényle, 1-méthyl-1-pentényle, 2-méthyl-1-pentényle, 3-méthyl-1-pentényle, 4-méthyl-1-pentényle, 1-méthyl-2-pentényle, 2-méthyl-2-pentényle, 3-méthyl-2-pentényle, 4-méthyl-2-pentényle, 1-méthyl-3-pentényle, 2-méthyl-3-pentényle, 3-méthyl-3-pentényle, 4-méthyl-3-pentényle, 1-méthyl-4-pentényle, 2-méthyl-4-pentényle, 3-méthyl-4-pentényle, 4-méthyl-4-pentényle, 1,1-diméthyl-2-butényle, 1,1-diméthyl-3-butényle, 1,2-diméthyl-1-butényle, 1,2-diméthyl-2-butényle, 1,2-diméthyl-3-butényle, 1,3-diméthyl-1-butényle, 1,3-diméthyl-2-butényle, 1,3-diméthyl-3-butényle, 2,2-diméthyl-3-butényle, 2,3-diméthyl-1-butényle, 2,3-diméthyl-2-butényle, 2,3-diméthyl-3-butényle, 3,3-diméthyl-1-butényle, 3,3-diméthyl-2-butényle, 1-éthyl-1-butényle, 1-éthyl-2-butényle, 1-éthyl-3-butényle, 2-éthyl-1-butényle, 2-éthyl-2-butényle, 2-éthyl-3-butényle, 1,1,2-triméthyl-2-propényle, 1-éthyl-1-méthyl-2-propényle, 1-éthyl-2-méthyl-1-propényle et 1-éthyl-2-méthyl-2-propényle. Le terme « vinyle » désigne un groupe ayant la structure –CH=CH 2 ; 1-propényle désigne un groupe ayant la structure –CH=CH-CH 3 ; et 2-propényle désigne un groupe ayant la structure –CH 2 -CH=CH 2 . Les structures asymétriques telles que (Z 1 Z 2 )C=C(Z 3 Z 4 ) sont censées inclure à la fois les isomères E et Z . Cela peut être présumé dans les formules structurelles ici présentes lorsqu'un alcène asymétrique est présent, ou peut être explicitement indiqué par le symbole de liaison C=C. Les substituts d'alcényle peuvent être non substitués ou substitués par un ou plusieurs groupements chimiques. Les exemples de substituts appropriés comprennent, par exemple alkyle, alcoxy, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, acyle, aldéhyde, amino, cyano, acide carboxylique, ester, éther, halogénure, hydroxyle, cétone, nitro, phosphonyle, silyle, sulfo-oxo, sulfonyle, sulfone, sulfoxyde ou thiol, comme décrit ci-dessous, à condition que les substituts soient stériquement compatibles et que les règles de liaison chimique et d'énergie de déformation soient respectées.
Tel qu'il est utilisé ici, le terme « alcynyle » représente des groupements d'hydrocarbures à chaîne droite ou ramifiés contenant une triple liaison. Sauf indication contraire, les groupes alkyles C 2 -C 24 (par ex. C 2 -C 24 , C 2 -C 20 , C 2 -C 18 , C 2 -C 16 , C 2 -C 14 , C 2 -C 12 , C 2 -C 10 , C 2 -C 8 , C 2 -C 6 , or C 2 -C 4 ) sont visés. Les groupes alkynyles peuvent contenir plus d'une liaison insaturée. Les exemples incluent les alcynyles C 2 -C 6 , tels que éthynyle, 1-propynyle, 2-propynyle (ou propargyle), 1-butynyle, 2-butynyle, 3-butynyle, 1-méthyl-2-propynyle, 1-pentynyle, 2-pentynyle, 3-pentynyle, 4-pentynyle, 3-méthyl-1-butynyl, 1-méthyl-2-butynyl, 1-méthyl-3-butynyl, 2-méthyl-3-butynyl, 1,1-diméthyl-2-propynyl, 1-éthyl-2-propynyl, 1-hexynyl, 2-hexynyl, 3-hexynyl, 4-hexynyl, 5-hexynyl, 3-méthyl-1-pentynyl, 4-méthyl-1-pentynyl, 1-méthyl-2-pentynyl, 4-méthyl-2-pentynyl, 1-méthyl-3-pentynyl, 2-méthyl-3-pentynyl, 1-méthyl-4-pentynyl, 2-méthyl-4-pentynyl, 3-méthyl-4-pentynyl, 1,1-diméthyl-2-butynyl, 1,1-diméthyl-3-butynyl, 1,2-diméthyl-3-butynyl, 2,2-diméthyl-3-butynyl, 3,3-diméthyl-1-butynyl, 1-éthyl-2-butynyl, 1-éthyl-3-butynyl, 2-éthyl-3-butynyl et 1-éthyl-1-méthyl-2-propynyl. Les substituts alkynyles peuvent être non substitués ou substitués par un ou plusieurs groupements chimiques. Les exemples de substituants appropriés comprennent par exemple alkyle, alcoxy, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, acyle, aldéhyde, amino, cyano, acide carboxylique, ester, éther, halogénure, hydroxyle, cétone, nitro, phosphonyle, silyle, sulfo-oxo, sulfonyle, sulfone, sulfoxyde ou thiol, comme décrit ci-dessous.
Tel qu'il est utilisé ici, le terme « aryle », ainsi que les termes dérivés tels que aryloxy, désigne des groupes comprenant un groupe carbocyclique aromatique monovalent de 3 à 50 atomes de carbone. Les groupes aryles peuvent comprendre un seul anneau ou plusieurs anneaux condensés. Dans certains exemples les groupes aryles comprennent les groupes aryles C 6 -C 10 . Les groupes aryles comprennent, sans s'y limiter, benzène, phényle, biphényle, naphtyle, tétrahydronaphtyle, phénylcyclopropyle, phénoxybenzène et indanyle. Le terme « aryle » comprend également « hétéroaryle », qui est défini comme un groupe contenant un groupe aromatique dont au moins un hétéroatome est incorporé dans l'anneau du groupe aromatique. Les exemples d'hétéroatomes comprennent, sans s'y limiter, azote, oxygène, soufre et phosphore. Le terme « non-hétéroaryle », qui est également inclus dans le terme « aryle », définit un groupe contenant un groupe aromatique qui ne contient pas d'hétéroatome. Les substituants aryles peuvent être non substitués ou substitués par un ou plusieurs groupements chimiques. Les exemples de substituants appropriés comprennent, par exemple, alkyle, alcoxy, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, acyle, aldéhyde, amino, cyano, acide carboxylique, ester, éther, halogénure, hydroxyle, cétone, nitro, phosphonyle, silyle, sulfo-oxo, sulfonyle, sulfone, sulfoxyde ou thiol, comme décrit ici. Le terme « biaryle » est un type spécifique de groupe aryle et est inclus dans la définition de l'aryle. Le terme « biaryle » fait référence à deux groupes aryles liés par une structure en anneau fusionné, comme dans le cas du naphtalène, ou attachés par une ou plusieurs liaisons carbone-carbone, comme dans le cas du biphényle.
Le terme « cycloalkyle », tel qu'il est utilisé ici, est un anneau non aromatique à base de carbone composé d'au moins trois atomes de carbone. Des exemples de groupes cycloalkyles comprennent, sans s'y limiter, cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle, cyclohexyle, etc. Le terme « hétérocycloalkyle » est un groupe cycloalkyle tel que défini ci-dessus où au moins un des atomes de carbone de l'anneau est substitué par un hétéroatome tel que, mais sans s'y limiter, azote, oxygène, soufre ou phosphore. Le groupe cycloalkyle et le groupe hétérocycloalkyle peuvent être substitués ou non. Le groupe cycloalkyle et le groupe hétérocycloalkyle peuvent être substitués par un ou plusieurs groupes, y compris, mais sans s'y limiter, alkyle, alcoxy, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, acyle, aldéhyde, amino, cyano, acide carboxylique, ester, éther, halogénure, hydroxyle, cétone, nitro, phosphonyle, silyle, sulfo-oxo, sulfonyle, sulfone, sulfoxyde ou thiol, tels que décrits ici.
Le terme « cycloalcényle », tel qu'il est utilisé ici, est un anneau non aromatique à base de carbone composé d'au moins trois atomes de carbone et contenant au moins une double liaison, c' est-à-dire C=C. Des exemples de groupes cycloalcényles comprennent, sans s'y limiter, cyclopropényle, cyclobutényle, cyclopentényle, cyclopentadiényle, cyclohexényle, cyclohexadiényle et ainsi de suite. Le terme « hétérocycloalkényle » est un type de groupe cycloalkényle tel que défini ci-dessus et est compris dans la signification du terme « cycloalkényle », où au moins un des atomes de carbone de l'anneau est substitué par un hétéroatome tel que, mais sans s'y limiter, azote, oxygène, soufre ou phosphore. Le groupe cycloalcényle et le groupe hétérocycloalcényle peuvent être substitués ou non. Le groupe cycloalcényle et le groupe hétérocycloalcényle peuvent être substitués par un ou plusieurs groupes, y compris, mais sans s'y limiter, alkyle, alcoxy, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, acyle, aldéhyde, amino, cyano, acide carboxylique, ester, éther, halogénure, hydroxyle, cétone, nitro, phosphonyle, silyle, sulfo-oxo, sulfonyle, sulfone, sulfoxyde ou thiol, comme décrit ici.
Le terme « groupe cyclique » est utilisé ici pour désigner soit les groupes aryles, soit les groupes non aryles (c' est-à-dire les groupes cycloalkyle, hétérocycloalkyle, cycloalkényle et hétérocycloalkényle), soit les deux. Les groupes cycliques ont un ou plusieurs systèmes d'anneaux (par ex. monocyclique, bicyclique, tricyclique, polycyclique, etc.) qui peuvent être substitués ou non substitués. Un groupe cyclique peut contenir un ou plusieurs groupes aryles, un ou plusieurs groupes non aryles, ou un ou plusieurs groupes aryles et un ou plusieurs groupes non aryles.
Le terme « acyle » utilisé ici est représenté par la formule –C(O)Z 1 où Z 1 peut être un groupe hydrogène, hydroxyle, alcoxy, alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, cycloalkyle, cycloalkényle, hétérocycloalkyle ou hétérocycloalkényle décrit ci-dessus. Tel qu'il est utilisé ici, le terme « acyle » peut être utilisé de manière interchangeable avec « carbonyle ». Dans la présente spécification, « C(O) » ou « CO » est une notation abrégée pour C=O.
Tel qu'il est utilisé ici, le terme « acétal » est représenté par la formule (Z 1 Z 2 )C(=OZ 3 )(=OZ 4 ), où Z 1 , Z 2 , Z 3 , et Z 4 peuvent être, indépendamment, un groupe hydrogène, halogène, hydroxyle, alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, cycloalkyle, cycloalcényle, hétérocycloalkyle ou hétérocycloalcényle décrit ci-dessus.
Tel qu'il est utilisé ici, le terme « alcool » est représenté par la formule Z 1 OH, où Z 1 peut être un groupe alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, cycloalkyle, cycloalcényle, hétérocycloalkyle ou hétérocycloalcényle décrit ci-dessus.
Tel qu'il est utilisé ici, le terme « alcoxy » est un groupe alkyle lié par une seule liaison éther terminale ; autrement dit, un groupe « alcoxy » peut être défini comme un groupe de la formule Z 1 -O-, où Z 1 est un alkyle non substitué ou substitué tel que défini ci-dessus. Sauf indication contraire, les groupes alcoxy dans lesquels Z 1 est un groupe alkyle C 1 -C 24 (par ex. C 1 -C 22 , C 1 -C 20 , C 1 -C 18 , C 1 -C 16 , C 1 -C 14 , C 1 -C 12 , C 1 -C 10 , C 1 -C 8 , C 1 -C 6 ou C 1 -C 4 ) sont visés. Les exemples incluent méthoxy, éthoxy, propoxy, 1-méthyl-éthoxy, butoxy, 1-méthyl-propoxy, 2-méthyl-propoxy, 1,1-diméthyl-éthoxy, pentoxy, 1-méthyl-butyloxy, 2-méthyl-butoxy, 3-méthyl-butoxy, 2,2-di-méthyl-propoxy, 1-éthyl-propoxy, hexoxy, 1,1-diméthyl-propoxy, 1,2-diméthyl-propoxy, 1-méthyl-pentoxy, 2-méthyl-pentoxy, 3-méthyl-pentoxy, 4-méthyl-pénoxy, 1,1-diméthyl-butoxy, 1,2-diméthyl-butoxy, 1,3-diméthyl-butoxy, 2,2-diméthyl-butoxy, 2,3-diméthyl-butoxy, 3,3-diméthyl-butoxy, 1-éthyl-butoxy, 2-éthylbutoxy, 1,1,2-triméthyl-propoxy, 1,2,2-triméthyl-propoxy, 1-éthyl-1-méthyl-propoxy, et 1-éthyl-2-méthyl-propoxy.
Tel qu'il est utilisé ici, le terme « aldéhyde » est représenté par la formule -C(O)H. Dans la présente spécification, « C(O) » est une notation abrégée pour C=O.
Tel qu'il est utilisé ici, le terme « amino » est représenté par la formule —NZ 1 Z 2 Z 3 , où Z 1 , Z 2 et Z 3 peuvent chacun être un groupe de substitution tel que décrit ici, tel que hydrogène, groupe alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, cycloalkyle, cycloalkényle, hétérocycloalkyle ou hétérocycloalkényle décrit ci-dessus.
Tels qu'ils sont utilisés ici, les termes « amide » ou « amido » sont représentés par la formule —C(O)NZ 1 Z 2 , où Z 1 et Z 2 peuvent chacun être un groupe de substitution tel que décrit ici, tel que hydrogène, groupe alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, cycloalkyle, cycloényle, hétérocycloalkyle ou hétérocycloalkényle décrit ci-dessus.
Tel qu'il est utilisé ici, le terme « anhydride » est représenté par la formule Z 1 C(O)OC(O)Z 2 où Z 1 et Z 2 , indépendamment, peuvent être un groupe alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, cycloalkyle, cycloalkényle, hétérocycloalkyle ou hétérocycloalkényle décrit ci-dessus.
Tel qu'il est utilisé ici, le terme « anhydride cyclique » est représenté par la formule :
où Z 1 peut être un groupe alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle, cycloalkyle, cycloalkényle, hétérocycloalkyle ou hétérocycloalkényle décrit ci-dessus.
Au moins un flotteur de ladite structure et/ou au moins une paroi pourvue d’un volet de ladite structure comporte(nt) un caisson élargi du côté du fond de ladite structure.
Au moins un des volets de ladite structure présente une forme générale concave, la concavité étant tournée vers l’intérieur de ladite structure.
D'autres caractéristiques de l'invention seront énoncées dans la description détaillée ci-après, faite en référence aux figures annexées, données à titre d'exemple, et qui représentent respectivement :
, une vue schématique de dessus d’un premier mode de réalisation d’un dispositif houlomoteur selon l’invention, dont la structure comprend deux parois ;
, une vue schématique de face d’une paroi du dispositif houlomoteur de la ;
, une vue schématique de dessus d'un deuxième mode réalisation d’un dispositif houlomoteur selon l’invention, comprenant trois parois disposées selon un triangle ;
, une vue schématique de dessus d’un troisième mode de réalisation d’un dispositif houlomoteur selon l’invention, comprenant neuf parois formant une structure générale en triangle ;
, une vue schématique de dessus d’un quatrième mode de réalisation d’un dispositif houlomoteur selon l’invention, comprenant quatre parois disposées selon un carré ;
, une vue schématique de dessus d'un cinquième mode de réalisation d’un dispositif houlomoteur selon l’invention, comprenant neuf parois formant une structure générale en hexagone qui supporte des éoliennes ;
, une vue schématique latérale selon la flèche VI du dispositif illustré à la ;
, une vue schématique de dessus en perspective d'un sixième mode de réalisation d’un dispositif houlomoteur selon l’invention, comprenant douze parois disposées selon un polygone ;
, une vue schématique du dispositif houlomoteur illustrant les moyens de conversion de l’énergie ;
, illustrent vues de côté différentes variantes de réalisation du volet ;
Dans certains modes de réalisation, un acide nucléique codant pour une variante de la protéine Stéfine A se liant spécifiquement au TNFR2 ou une protéine de fusion comprenant celle-ci peut être introduit dans une cellule hôte à l'aide d'un vecteur comprenant ceux-ci.
Tel qu'utilisé ici, un « vecteur » est un moyen pour exprimer un gène cible dans une cellule hôte, et des exemples du vecteur peuvent inclure, mais sans s'y limiter, des vecteurs viraux tels qu'un vecteur adénoviral, un vecteur rétroviral, un vecteur viral adéno-associé, et des vecteurs dérivés de virus tels que le virus de la vaccine (Puhlmann M. et al., Human Gene Therapy, 10:649-657 (1999); Ridgeway, 467-492 (1988); Baichwal et Sugden, In: Kucherlapati R., ed. Gene transfer. New York: Plenum Press, 117-148 (1986) et Coupar et al., Gene, 68:1-10(1988)), le lentivirus (Wang G. et al., J. Clin. Invest., 104(11):R55-62(1999)), le virus herpes simplex (Chamber R., et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA, 92:1411-1415 (1995)), le poxvirus (GCE, NJL, Krupa M., Esteban M., Curr. Gene Ther. 8(2):97-120 (2008)), le réovirus, le virus de la rougeole, le virus de la forêt de Semliki et le poliovirus, et les vecteurs non viraux tels que les vecteurs plasmidiques (Sambrook et al., 1989) et les minicercles (Yew et al. 2000 Mol. Ther. 1(3), 255-62).
Le vecteur peut typiquement inclure au moins un composant sélectionné parmi une séquence signal, une origine de réplication, au moins un gène marqueur de résistance aux antibiotiques, un élément amplificateur, un promoteur, et une séquence de terminaison de transcription, mais la présente invention n'est pas limitée à ceux-ci. L'acide nucléique codant pour la variante de la protéine Stéfine A de la présente invention ou la protéine de fusion comprenant celle-ci peut être lié opérationnellement à un promoteur et à une séquence de terminaison de transcription.
Tel qu'il est utilisé ici, le terme « lié opérationnellement » signifie une relation fonctionnelle entre une séquence de contrôle de l'expression de l'acide nucléique (par ex. un promoteur, une séquence signal ou un éventail de sites de liaison régulateurs transcriptionnels) et une séquence d'acide nucléique différente, la séquence de contrôle servant à contrôler la transcription et/ou la traduction de la séquence d'acide nucléique différente.
Lorsqu'une cellule procaryote est utilisée comme hôte, un promoteur fort capable de promouvoir la transcription (par ex. un promoteur tac, un promoteur lac, un promoteur lacUV5, un promoteur lpp, un promoteur pLλ, un promoteur pRλ, un promoteur rac5, un promoteur amp, un promoteur recA, un promoteur SP6, promoteur trp ou promoteur T7), un site de liaison au ribosome pour l'initiation de la traduction et une séquence de terminaison de transcription/traduction sont généralement inclus. De plus, par exemple, lorsqu'une cellule eucaryote est utilisée comme hôte, un promoteur dérivé du génome d'une cellule de mammifère (par ex. un promoteur de métallothionine, un promoteur de β-actine, un promoteur d'hémoglobine humaine ou un promoteur de créatine musculaire humaine) ou un promoteur dérivé d'un virus de mammifère (par ex. un promoteur tardif d'adénovirus, un promoteur 7,5k du virus de la vaccine, un promoteur SV40, un promoteur du cytomégalovirus (CMV), un promoteur tk de l’HSV, un promoteur du virus de la tumeur mammaire de la souris (MMTV, de l’anglais « mouse mammary tumor virus »), un promoteur LTR du VIH, un promoteur du virus Moloney, un promoteur du virus d'Epstein-Barr (EBV, de l’anglais « Epstein-Barr virus »), ou un promoteur du virus du sarcome de Rous (RSV, de l’anglais « Rous sarcoma virus »)) peut être utilisé, et une séquence de polyadénylation est généralement utilisée comme séquence de terminaison de la transcription
Dans certains modes de réalisation, le promoteur peut être un promoteur eucaryote, est de préférence sélectionné parmi un promoteur de cytomégalovirus (CMV), un promoteur PGK, un promoteur EF1α, un promoteur EFS, un promoteur CBh, un promoteur MSCV, un promoteur SFFV, et un promoteur UbC, et est le plus préférablement sélectionné parmi un promoteur CMV, un promoteur EF1α et un promoteur CBh, mais n'est pas limité à ceux-ci.
Dans certains modes de réalisation, le promoteur peut en outre comprendre une séquence amplificatrice, mais n'est pas limité à ceci.
Dans certains cas, le vecteur peut être fusionné avec une autre séquence afin de faciliter la purification de l'anticorps exprimé à partir de celle-ci. Des exemples de séquence fusionnée avec celui-ci incluent la glutathion S-transférase (Pharmacia, USA), la protéine de liaison au maltose (NEB, USA), la séquence FLAG (IBI, USA) et la séquence 6x His (hexa-histidine ; Qiagen, USA)).