INPI-France/Brevets-Francais-2024-Chunked huggingface dataset:
Description détaillée de modes de réalisation Un véhicule selon l’invention peut être destiné au transport de biens ou des personnes, à la surveillance ou toute autre application nécessitant un déplacement. Le véhicule comprend un châssis, une carrosserie et au moins un capteur extéroceptif. Un tel capteur fournit des informations sur l’environnement du véhicule à un ou des calculateurs intervenant dans la conduite autonome ou les aides à la conduite de ce véhicule. Ce capteur peut ainsi être utilisé pour déterminer la présence d’êtres vivants ou d’objets en proximité du véhicule afin, par exemple, de prévenir toute collision entre le véhicule et un tel objet ou être vivant. Dans d’autres modes de réalisation, le capteur peut servir à déterminer la position du véhicule, par exemple relativement à des lignes blanches ou par rapport à un trottoir. Dans d’autres modes de réalisation encore, le capteur peut permettre l’identification d’indications dans l’environnement, comme des panneaux de signalisation, des feux tricolores, des noms de rue et numéros. Le véhicule peut être adapté pour rouler sur une voie de circulation ou uniquement dans une zone restreinte. Il peut s’agir d’un véhicule utilisant un ou plusieurs capteurs pour assister le conducteur dans la perception d’obstacles, la prévention d’accident, la navigation ou tout autre aide à la conduite, voire d’un véhicule autonome, c’est-à-dire sans conducteur ou dont le conducteur délègue la conduite au véhicule. Dans d’autres modes de réalisation encore ce capteur peut être utilisé pour de la surveillance, comme celle d’infractions au code de la route, de relevé de plaques d’immatriculation pour le stationnement par exemple, de nettoyage des voiries.
- mesure de l’affaissement (« slump » ) du béton frais (ou essai d’affaissement au cône d’Abrams) : selon la norme NF EN 12350-2 ; cet essai consiste à réaliser les étapes suivantes:
le cône est rempli avec du béton frais en trois fois. À chaque fois, chaque couche est piquée par 25 coups à l'aide de la tige ;
le cône est arasé avec une tige ;
puis le cône est levé immédiatement, verticalement et doucement en le tournant un peu pour le démouler ; et
on mesure l’affaissement du béton frais en mesurant l’écart entre la hauteur du cône et la hauteur du tas de béton frais.
mesure de la masse volumique ρ (kg/m3) du béton frais : ρ (kg/m3) = masse (kg)/ volume (m 3 ) ;
mesure de la résistance à la flexion et à la compression du béton durci : réalisées selon la norme NF EN 196-1 « Méthodes d’essais des ciments – Partie 1 : Détermination des résistances. ». Cette mesure permet également de déterminer le rapport Rf/Rc du béton durci ;
mesure de la porosité du béton durci : réalisées selon la méthode SIA 162-1 Essai N°7 (éprouvette diamètre 7 cm, hauteur 14 cm) ;
mesure de de la perméabilité d’eau du béton durci : selon la Méthode SIA 262/1 Annexe A (éprouvette diamètre 7cm, hauteur 14cm).
EXEMPLE 1 : PREPARATION ET CARACTERISATION DES COQUILLES SELON LE PROCEDE DE L’INVENTION (ETAPE A)
Les produits coquilliers concassés sont triés et préparés selon l’étape A du procédé selon l’invention, comme suit :
Etape A0 : Collecte des coquillages et décomposition de la chaire organique des animaux
- Collecte de coquillage de mauvaise qualité avec corps animale soit mort soit partiellement décomposé soit issue de l’industrie de transformation agroalimentaire ;
- Décomposition naturelle par inertage (optionnelle) des coquillages par le stockage pendant 2 à 6 semaines à l’extérieur pour permettre une première dégradation des restes de matière organique présente dans ou sur les coquillages ;
- Décomposition accélérée par fermentation (optionnelle) pour décomposer la matière organique des coquillages durant laquelle les coquillages sont empilés à une hauteur de quelques mètres pour une durée de 2 à 6 semaines. Une aération forcée par ventilation continue d’air de bas en haut afin d’accélérer la décomposition est maintenue pendant le traitement.
- A l’exception de la st Jacques, les coquilles contenant le reste des tendons (ligament) de la coquille sont éliminées manuellement.
Le dispositif 1 comprend en outre une deuxième carte de circuit imprimé 37, souvent appelée carte fille, sur laquelle sont implantés des composants électroniques 371 mettant en œuvre les troisièmes algorithmes de contrôle destinés à piloter les capteurs ultrasons Ci,j ( ).
Le dispositif 1 comprend également des premiers moyens d’interfaçage 34 implantés sur la première carte de circuit imprimé 30. Les premiers moyens d’interfaçage 34 sont prévus pour interfacer les premiers composants électroniques 31, 32, 33 et les deuxièmes composants électroniques 38 pour un pilotage des deuxièmes algorithmes de contrôle par les premiers algorithmes de contrôle. Les premiers moyens d’interfaçage 34 sont également prévus pour interfacer les premiers composants électroniques 31, 32, 33 et les troisièmes composants électroniques 371 pour un pilotage des troisièmes algorithmes de contrôle par les premiers algorithmes de contrôle.
Selon un exemple de réalisation, les premiers moyens d’interfaçage 34 sont mis en œuvre par logiciels qui mettent en œuvre des protocoles de communication série filaire tels que SPI, UART (« Universal Asynchronous Receiver Transmitter » en anglais, « émetteur-récepteur asynchrone universel » en français) ou i 2 c (« Inter-Integrated Circuit » en anglais, « bus informatique » en français).
Selon un exemple de réalisation particulier et non limitatif, les premiers moyens d’interfaçage 34 sont prévus pour échanger des données de commande et des données provenant des capteurs ultrasons Ci,j entre les premiers et les deuxièmes composants électroniques ou entre les premiers et les troisièmes composants électroniques.
Le dispositif comprend de plus des deuxièmes moyens d’interfaçage 36 implantés sur la première carte de circuit imprimé 30 et prévus pour interfacer les deuxièmes composants électroniques 38 et les capteurs ultrasons Ci,j pour un contrôle des capteurs ultrasons Ci,j par les deuxièmes algorithmes de contrôle. Les deuxièmes moyens d’interfaçage 36 sont également prévus pour interfacer les troisièmes composants électroniques 371 et les capteurs ultrasons Ci,j pour un contrôle des capteurs ultrasons Ci,j par les troisièmes algorithmes de contrôle.
Selon un exemple de réalisation particulier et non limitatif, les deuxièmes moyens d’interfaçage 36 sont adaptés pour supporter des solutions de type « montage en guirlande » (« daisy chain » en anglais) qui proposent des connexions n voies de m fils.
Selon un exemple de réalisation particulier et non limitatif, les deuxièmes moyens d’interfaçage 36 sont prévus pour échanger des données de commande et des données provenant des capteurs ultrasons entre les deuxièmes composants électroniques 38 ou les troisièmes composants électroniques 371 et les capteurs ultrasons Ci,j via un faisceau de plusieurs fils.
Selon un exemple de réalisation particulier et non limitatif, le faisceau de fils comprend plusieurs voies et chaque voie comprend plusieurs fils, chaque voie étant dédiée à un sous-ensemble de capteurs Ci,j (l’indice j indiquant un capteur particulier d’une voie i).
Chaque voie permet de contrôler un ensemble de capteurs ultrasons montés en guirlande.
Selon un exemple de réalisation particulier et non limitatif, le faisceau comprend 2 voies de 3 fils chacune.
Selon un exemple de réalisation particulier et non limitatif, illustré à la , des faisceaux F3 et F4 de 2 voies 3 fils chacun sont mis en œuvre dans un véhicule. Un premier faisceau F3 qui correspond à une première voie de 3 fils est utilisé pour relier entre eux des capteurs ultrasons d’un premier ensemble de capteurs ultrasons C1,j (j=1 à 6) situés à l’avant du véhicule et un deuxième faisceau F4 qui correspond à une deuxième voie de 3 fils est utilisé pour relier entre eux les capteurs ultrasons d’un deuxième ensemble de capteurs ultrasons C2,j (j=1 à 6) situés à l’arrière du véhicule.
Selon un exemple de réalisation particulier et non limitatif, la première voie de 3 fils relie entre eux des capteurs ultrasons du premier ensemble de capteurs ultrasons via un premier séparateur et/ou la deuxième voie de 3 fils relie entre eux des capteurs ultrasons du deuxième ensemble de capteurs ultrasons via un deuxième séparateur.
Selon un exemple de réalisation particulier et non limitatif, illustré à la , un des 3 fils d’une voie est un fil d’alimentation (fil de ligne), un autre est un fil de masse (retour) et un autre est un fil de commande des capteurs ultrasons.
Sur la , les capteurs ultrasons du premier ensemble sont montés en guirlande (« daisy chain» en anglais) et les capteurs ultrasons du deuxième ensemble sont montés en guirlande (« daisy chain» en anglais).
L’utilisation d’un faisceau de 2 voies 3 fils est très avantageuse car ce faisceau peut aussi être utilisé pour contrôler à partir des 3 fils de chaque voie un ensemble de capteurs ultrasons connectés par un faisceau de 8 fils. Pour cela le fil de commande du faisceau de 3 fils est relié à l’entrée d’un séparateur (« splitter » en anglais) et les 6 sorties de ce séparateur sont reliées aux 6 fils de commande du faisceau de 8 fils. Les fils d’alimentation des deux faisceaux sont reliés entre eux et les fils de masse (retour) des deux faisceaux sont reliés entre eux.
Selon un exemple de réalisation particulier et non limitatif, 2 fils sur les 3 de la première et/ou de la deuxième voie sont utilisés, un desdits 2 fils utilisés de la première et/ou deuxième voie est un fil d’alimentation et de commande des capteurs ultrasons du premier et/ou deuxième ensemble de capteurs ultrasons et un autre desdits deux fils utilisés est un fil de masse, les capteurs ultrasons du premier ensemble de capteurs ultrasons étant montés en guirlande et/ou les capteurs ultrasons du deuxième ensemble de capteurs ultrasons étant montés en guirlande.
L’invention vise aussi un procédé pour transformer, et de préférence modifier génétiquement, une bactérie appartenant au genre Clostridium comprenant un plasmide pSOL à l’état sauvage, ainsi que la bactérie modifiée génétiquement susceptible d’être obtenue par ce procédé. Ledit procédé comprend une étape de transformation de la bactérie par introduction dans ladite bactérie d’un plasmide sélectionné parmi les plasmides pCas9acr de séquence SEQ ID NO : 23, pEC750C de séquence SEQ ID NO : 24, pGRNAind de séquence SEQ ID NO : 25, pGRNAcon de séquence SEQ ID NO : 26, pAN2 de séquence SEQ ID NO : 27 , pGRNA-hbd de séquence SEQ ID NO : 28, pGRNA-Δhbd de séquence SEQ ID NO : 29, pGRNA-pdc de séquence SEQ ID NO : 30, pGRNA-Δpdc de séquence SEQ ID NO : 31 et pGRNA-CΔhbd de séquence SEQ ID NO : 32. De préférence, ledit procédé comprend aussi une étape de délétion ou d’inactivation d’un gène rendant la présence du plasmide pSOL essentielle à la survie de ladite bactérie, ou implique autrement une bactérie recombinante du genre Clostridium comprenant déjà une modification chromosomique rendant la présence du plasmide pSOL essentielle à sa survie.
Les inventeurs décrivent également l’utilisation d’une bactérie appartenant au genre Clostridium se distinguant de la souche sauvage correspondante en ce qu’elle comprend une modification chromosomique rendant la présence du plasmide pSOL essentielle à sa survie, dans un procédé de modification génétique d’une bactérie du genre Clostridium , ou pour fabriquer une bactérie dérivée modifiée génétiquement.
Ils décrivent aussi l’utilisation d’une bactérie appartenant au genre Clostridium se distinguant de la souche sauvage correspondante en ce qu’elle comprend une modification chromosomique rendant la présence du plasmide pSOL essentielle à sa survie, ou d’une bactérie dont la modification chromosomique ayant rendu la présence du plasmide pSOL essentielle à la survie de ladite bactérie a été corrigée, pour produire une molécule biosourcée ou un mélange de molécules biosourcées, par exemple un solvant, un biocarburant ou un mélange de carburants, en particulier à l’échelle industrielle.
L’invention vise aussi un procédé de fermentation impliquant l’utilisation d’une bactérie génétiquement modifiée telle que décrite dans le présent texte, typiquement d’une bactérie appartenant au genre Clostridium se distinguant de la souche sauvage en ce qu’elle comprend une modification chromosomique rendant la présence du plasmide pSOL essentielle à sa survie, ou d’une bactérie dont la modification chromosomique ayant rendu la présence du plasmide pSOL essentielle à la survie de ladite bactérie a été corrigée.
Les inventeurs décrivent enfin des kits, en particulier un kit pour transformer et de préférence modifier génétiquement une bactérie appartenant au genre Clostridium , et un kit pour produire une molécule biosourcée, par exemple un solvant, un biocarburant ou tout produit intermédiaire (bio)chimique, à l’aide d’une bactérie appartenant au genre Clostridium , ledit kit comprenant i) une bactérie appartenant au genre Clostridium selon l’invention, en particulier une bactérie se distinguant de la souche sauvage en ce qu’elle comprend une modification chromosomique rendant la présence du plasmide pSOL essentielle à sa survie ou une bactérie dont la modification chromosomique ayant rendu la présence du plasmide pSOL essentielle à la survie de ladite bactérie a été corrigée, et ii) un milieu de conservation ou un milieu de culture de ladite bactérie, en particulier un milieu de culture adapté contenant un sucre ou un mélange de sucres, préférentiellement un hexose et/ou un pentose, encore plus préférentiellement du glucose, de l’arabinose et/ou du xylose.
DESCRIPTION DETAILLEE DE L’INVENTION Bien qu’utilisées en industrie depuis plus d’un siècle, les connaissances sur les bactéries appartenant au genre Clostridium , en particulier sur les bactéries solvantogènes, restent très limitées. Une contrainte majeure rencontrée par les industriels concerne l’impossibilité de modifier de manière simple la séquence du mégaplasmide pSOL à l’aide d’une technologie d’édition, en particulier à l’aide d’une technologie faisant intervenir une nucléase responsable d’une coupure double brins, telle que la nucléase Cas9. L’emploi d’une nickase (enzyme de type endonucléase responsable d’une coupure simple brin au niveau d’un site de restriction) est envisageable mais reste compliquée.
Malgré les difficultés, bien connues de l’homme du métier, rencontrées pour modifier génétiquement les bactéries appartenant au genre Clostridium , les inventeurs sont parvenus, pour la première fois dans le contexte de la présente invention, à obtenir une bactérie C. acetobutylicum dont la séquence du mégaplasmide pSOL peut être très avantageusement modifiée de manière simple et rapide, en particulier à l’aide d’une technologie d’édition génétique telle que la technologie CRISPR-Cas.
Les inventeurs sont en effet parvenus à réaliser des modifications génétiques précises au sein du mégaplasmide pSOL de la souche de C. acetobutylicum DSM 792. La bactérie Clostridium acetobutylicum étant considérée comme un représentant modèle des Clostridium solvantogènes, les données expérimentales divulguées dans le cadre de la présente description fournissent une preuve de concept à l’homme du métier.
Une telle stratégie de modification n’avait jusqu’à présent jamais été employée chez C. acetobutylicum . Les inventeurs révèlent ainsi pour la première fois que le mégaplasmide pSOL est indispensable dans une souche C. acetobutylicum dont le gène hbd a été inactivé (également identifiée dans le présent texte entant que souche « ∆hbd »).
La possibilité de modifier le mégaplasmide pSOL avec un outil d’édition génétique tel que l’outil CRISPR-Cas permet de bénéficier des points forts de cet outil et des outils similaires, i.e., de leur précision, de leur facilité d’utilisation, de leur rapidité, du fait qu’ils permettent de réaliser des modifications au nucléotide près, et du fait qu’ils ne nécessitent pas l’intégration d’un marqueur de résistance dans le génome du micro-organisme à modifier, et peuvent donc être utilisés pour introduire de manière séquentielle un nombre non limité de modifications.
Grâce à la présente invention, l’ensemble des éléments génétiques constituant en particulier le génome de C. acetobutylicum est désormais modifiable avec un outil d’édition de ce type. Une fois les différentes modifications désirées réalisées, la modification chromosomique ayant rendu la présence du plasmide pSOL essentielle à la survie bactérienne peut facilement être corrigée (par exemple le gène hbd délété peut être réintroduit) dans le génome à son locus d’origine, permettant ainsi d’obtenir un micro-organisme ne possédant plus que les modifications génétiques d’intérêt, par exemple des modifications permettant d’améliorer sa capacité à produire un biocarburant ou une molécule biosourcée, tel que par exemple un solvant ou un produit intermédiaire chimique, à partir d’une biomasse ou à partir d’une culture énergétique dédiée.
Dans le contexte de la présente invention, on entend par « molécule biosourcée » une molécule, de type alcool ou cétone, dont la spécificité est que la matière première utilisée pour sa production est obligatoirement issue de biomasse végétale, par exemple de biomasse lignocellulosique, et non pas issue de ressources d’origines fossiles telles que le pétrole, le charbon ou le gaz naturel.
La mise en œuvre de la présente invention peut, de manière plus générale, être envisagée pour modifier tout élément génétique non essentiel, tel que le plasmide pSOL, dès lors qu’une modification chromosomique préalable a permis de rendre ledit « élément génétique non essentiel » indispensable à la survie de la bactérie (dans au moins une condition de culture donnée de ladite bactérie).
La présente description vise ainsi en particulier l’utilisation d’un outil d’édition génétique, de préférence un outil CRISPR, faisant intervenir une (endo)nucléase capable de cibler le mégaplasmide pSOL pour modifier génétiquement ledit plasmide pSOL d’une bactérie appartenant au genre Clostridium , ladite bactérie se distinguant de la souche sauvage en ce qu’elle comprend une modification chromosomique rendant la présence du plasmide pSOL essentielle à sa survie.
Elle vise également les outils d’échange allélique pour transformer et modifier génétiquement une bactérie. Un outil d’échange allélique particulier est par exemple un outil ACE® comprenant un acide nucléique comprenant une séquence complémentaire d’une portion du plasmide pSOL utilisable en tant que matrice de recombinaison homologue, permettant, par un mécanisme de recombinaison homologue, de modifier la portion reconnue ou de remplacer la portion reconnue au sein de pSOL par une séquence d’intérêt.
ladite séquence SEQ ID NO : 583 étant représentée par la séquence :
YKTWS a N 10-100 S b YTWS c N 10-100 S d WKS e N 10-100 S f TTS g N 10-100 S h WYTKS i N 10-100 S j
et sa séquence miroir SEQ ID NO : 610 étant représentée par la séquence :
S j N 10-100 S i KTYWS h N 10-100 S g TTS f N 10-100 S e KWS d N 10-100 S c WTYS b N 10-100 S a WTKY,
dans lesquelles : Y représente les nucléotides C ou T ; K représente les nucléotides G ou T ; W représente les nucléotides A ou T ; S représente les nucléotides C ou G ; N représente les nucléotides A ou C ou G ou T ; et les motifs S a N 10-100 S b , S c N 10-100 S d , S e N 10-100 S f , S g N 10-100 S h , S i N 10-100 S j , S j N 10-100 S i , S h N 10-100 S g , S f N 10-100 S e , S d N 10-100 S c et S b N 10-100 S a représentent un motif tige-boucle comprenant de 10 à 100 nucléotides N où lorsque : S a = C alors S b = G ; S a = G alors S b = C ; S c = C alors S d = G ; S c = G alors S d = C ; S e = C alors S f = G ; S e = G alors S f = C ; S g = C alors S h = G ; S g = G alors S h = C ; S i = C alors S j = G ; et S i = G alors S j = C,
ladite séquence SEQ ID NO : 584 étant représentée par la séquence :
TTTTS a N 10-100 S b TTTS c N 10-100 S d TTS e N 10-100 S f TTS g N 10-100 S h TTTTS i N 10-100 S j
et sa séquence miroir SEQ ID NO : 611 étant représentée par la séquence :
S j N 10-100 S i TTTTS h N 10-100 S g TTS f N 10-100 S e TTS d N 10-100 S c TTTS b N 10-100 S a TTTT,
et ladite séquence SEQ ID NO : 585 étant représentée par la séquence :
AAAAS a N 10-100 S b AAAS c N 10-100 S d AAS e N 10-100 S f AAS g N 10-100 S h AAAAS i N 10-100 S j
et sa séquence miroir SEQ ID NO : 612 étant représentée par la séquence :
S j N 10-100 S i AAAAS h N 10-100 S g AAS f N 10-100 S e AAS d N 10-100 S c AAAS b N 10-100 S a AAAA,
dans lesquelles : S représente les nucléotides C ou G ; N représente les nucléotides A ou C ou G ou T ; et les motifs S a N 10-100 S b , S c N 10-100 S d , S e N 10-100 S f , S g N 10-100 S h , S i N 10-100 S j , S j N 10-100 S i , S h N 10-100 S g , S f N 10-100 S e , S d N 10-100 S c et S b N 10-100 S a représentent un motif tige-boucle comprenant de 10 à 100 nucléotides N où lorsque : S a = C alors S b = G ; S a = G alors S b = C ; S c = C alors S d = G ; S c = G alors S d = C ; S e = C alors S f = G ; S e = G alors S f = C ; S g = C alors S h = G ; S g = G alors S h = C ; S i = C alors S j = G ; et S i = G alors S j = C.
A toutes fins utiles, il est précisé que la séquence SEQ ID NO : 583 correspond à la séquence consensus obtenue à partir des séquences SEQ ID NOs : 1, 63, 149, 187 et 249, sachant que : la base des tiges-boucles sont interchangeables sans affecter l’électroactivité de l’aptamère composite électroactif de l’invention ; et les motifs tige-boucle (ou structure en épingle à cheveux) peuvent comprendre de 10 à 100 nucléotides avec la condition qu’une fois replié une tige-boucle soit formée, i.e . qu’à partir de de séquences répétées inversées de bases complémentaires, un appariement se forme de sorte qu’apparaisse localement une structure en double hélice.
On connaît des dispositifs qui utilisent des sources de rayon ultraviolets logées dans des gaines formées de tubes de quartz, de façon à ce que les sources ne soient pas en contact direct avec le fluide à traiter.
L’utilisation de ces tubes de quartz est délicate car ils sont fragiles et peuvent facilement se briser lors d’opérations de maintenance par exemple. Ces opérations de maintenance sont rendues nécessaires, par exemple lorsque le tube s’encrasse, s’oxyde ou s’opacifie.
Le risque de bris du tube de quartz entraîne un risque de contamination du liquide traité par les éclats de ce tube brisé. Ces tubes sont très fragiles lors de toute manipulation, notamment lors du démontage et du nettoyage.
Par ailleurs, ces tubes ont tendance à subir un encrassement minéral occasionné par les minéraux contenus dans le fluide à traiter, tel que l’eau. Cet encrassement diminue la durée de transmission efficace du flux ultraviolet.
En outre, le quartz, considéré comme dénomination générique de tout matériau à base de silice d’origine minérale naturelle ou de synthèse, offre une peu de résistance chimique à certains éléments généralement contenus dans les produits de nettoyage, tels que ceux utilisés notamment dans l’industrie agroalimentaires et pharmaceutiques. Il s’agit par exemple des éléments alcalins forts de type soude. Le nettoyage des gaines est donc problématique, particulièrement dans les installations agroalimentaires visant à nettoyer en ligne (stations de NEttoyage en Place, ou stations NEP) des équipement de procédés industriels.